RU2699289C2 - НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ, КОДИРУЮЩИЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ СИАЛИРОВАННОГО АНТИГЕНА ЛЬЮИСАа ЧЕЛОВЕКА - Google Patents
НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ, КОДИРУЮЩИЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ СИАЛИРОВАННОГО АНТИГЕНА ЛЬЮИСАа ЧЕЛОВЕКА Download PDFInfo
- Publication number
- RU2699289C2 RU2699289C2 RU2016111015A RU2016111015A RU2699289C2 RU 2699289 C2 RU2699289 C2 RU 2699289C2 RU 2016111015 A RU2016111015 A RU 2016111015A RU 2016111015 A RU2016111015 A RU 2016111015A RU 2699289 C2 RU2699289 C2 RU 2699289C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibody
- seq
- residues
- functional fragment
- sle
- Prior art date
Links
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 title claims description 59
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 title claims description 28
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 title description 12
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 title description 12
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 216
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 126
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 116
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims abstract description 62
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims abstract description 62
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims abstract description 62
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 58
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 58
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 58
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 45
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 44
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 37
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 30
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 17
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 65
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 49
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 48
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 45
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 24
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 22
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 20
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 20
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 claims description 17
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 claims description 17
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 17
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 16
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 14
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 13
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims description 13
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims description 13
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 claims description 12
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 claims description 12
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 claims description 10
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 9
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 8
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 8
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 8
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 claims description 8
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 7
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 7
- 206010052747 Adenocarcinoma pancreas Diseases 0.000 claims description 6
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 claims description 6
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 claims description 6
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 201000002094 pancreatic adenocarcinoma Diseases 0.000 claims description 6
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 claims description 5
- MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-methoxy-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-3-methoxy-5-methyl-4-[methyl-[(2s)-3-methyl-2-[[(2s)-3-methyl-2-(methylamino)butanoyl]amino]butanoyl]amino]heptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N 0.000 claims description 4
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 4
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 108010059074 monomethylauristatin F Proteins 0.000 claims description 4
- 206010055114 Colon cancer metastatic Diseases 0.000 claims description 3
- 206010052360 Colorectal adenocarcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 108010044540 auristatin Proteins 0.000 claims description 3
- 201000006587 bladder adenocarcinoma Diseases 0.000 claims description 3
- 239000000941 radioactive substance Substances 0.000 claims description 3
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- CJIJXIFQYOPWTF-UHFFFAOYSA-N 7-hydroxycoumarin Natural products O1C(=O)C=CC2=CC(O)=CC=C21 CJIJXIFQYOPWTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- XPDXVDYUQZHFPV-UHFFFAOYSA-N Dansyl Chloride Chemical compound C1=CC=C2C(N(C)C)=CC=CC2=C1S(Cl)(=O)=O XPDXVDYUQZHFPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 claims description 2
- 108010008739 auristatin PHE Proteins 0.000 claims description 2
- CFDVGUXRLQWLJX-QGTNPELVSA-N beta-D-Galp-(1->3)-[alpha-L-Fucp-(1->4)]-D-GlcpNAc Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](NC(C)=O)C(O)O[C@@H]1CO CFDVGUXRLQWLJX-QGTNPELVSA-N 0.000 claims description 2
- MJQUEDHRCUIRLF-TVIXENOKSA-N bryostatin 1 Chemical compound C([C@@H]1CC(/[C@@H]([C@@](C(C)(C)/C=C/2)(O)O1)OC(=O)/C=C/C=C/CCC)=C\C(=O)OC)[C@H]([C@@H](C)O)OC(=O)C[C@H](O)C[C@@H](O1)C[C@H](OC(C)=O)C(C)(C)[C@]1(O)C[C@@H]1C\C(=C\C(=O)OC)C[C@H]\2O1 MJQUEDHRCUIRLF-TVIXENOKSA-N 0.000 claims description 2
- 229960005539 bryostatin 1 Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 claims description 2
- 208000037819 metastatic cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000011575 metastatic malignant neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- ZTLGJPIZUOVDMT-UHFFFAOYSA-N n,n-dichlorotriazin-4-amine Chemical compound ClN(Cl)C1=CC=NN=N1 ZTLGJPIZUOVDMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ORHBXUUXSCNDEV-UHFFFAOYSA-N umbelliferone Chemical compound C1=CC(=O)OC2=CC(O)=CC=C21 ORHBXUUXSCNDEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HFTAFOQKODTIJY-UHFFFAOYSA-N umbelliferone Natural products Cc1cc2C=CC(=O)Oc2cc1OCC=CC(C)(C)O HFTAFOQKODTIJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 claims 2
- 108010093470 monomethyl auristatin E Proteins 0.000 claims 2
- 208000036764 Adenocarcinoma of the esophagus Diseases 0.000 claims 1
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 208000028653 esophageal adenocarcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 201000006585 gastric adenocarcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 210000001635 urinary tract Anatomy 0.000 claims 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 abstract description 67
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 25
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 16
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 164
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 55
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 43
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 40
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 description 38
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 35
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 33
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 32
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 32
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 32
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 31
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 31
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 30
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 28
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 27
- 101000737793 Homo sapiens Cerebellar degeneration-related antigen 1 Proteins 0.000 description 26
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 26
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 26
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 25
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 24
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 24
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 23
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 22
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 21
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 21
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 20
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 20
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 20
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 20
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 19
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 19
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 19
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 description 19
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 18
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 18
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 17
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 16
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 16
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 16
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 15
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 15
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 15
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 15
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 15
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 15
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 15
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 13
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 13
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 13
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 13
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 12
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 12
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 12
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 12
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 12
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 12
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 12
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 11
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 11
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 11
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 11
- -1 sLe a Chemical class 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 10
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 10
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 10
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 10
- 238000011161 development Methods 0.000 description 10
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 10
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 10
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 10
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 10
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 9
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 9
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 9
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 9
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 9
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 8
- ANHVRCNNGJMJNG-BZSNNMDCSA-N Tyr-Tyr-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O ANHVRCNNGJMJNG-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 8
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 8
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- 150000004044 tetrasaccharides Chemical class 0.000 description 8
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 7
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 7
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 7
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Natural products NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 7
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 7
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 7
- VNYMOTCMNHJGTG-JBDRJPRFSA-N Ala-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VNYMOTCMNHJGTG-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 6
- MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N Asn-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 6
- MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N Asp-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O MNQMTYSEKZHIDF-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 6
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IEWBEPKLKUXQBU-VOAKCMCISA-N Leu-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O IEWBEPKLKUXQBU-VOAKCMCISA-N 0.000 description 6
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 6
- YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N Ser-Gly-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O YMTLKLXDFCSCNX-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 6
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 6
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 6
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 6
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 6
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 6
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 6
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 6
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 6
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 6
- JSHWXQIZOCVWIA-ZKWXMUAHSA-N Asp-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O JSHWXQIZOCVWIA-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 5
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- OTQSTOXRUBVWAP-NRPADANISA-N Gln-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OTQSTOXRUBVWAP-NRPADANISA-N 0.000 description 5
- PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N Gly-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)NCC(O)=O PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 5
- WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N Gly-Phe-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)CN)O WNZOCXUOGVYYBJ-CDMKHQONSA-N 0.000 description 5
- ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N Gly-Thr-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ZZWUYQXMIFTIIY-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 5
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 5
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 5
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N Leu-Gln-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O AXZGZMGRBDQTEY-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 5
- KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 5
- LCNASHSOFMRYFO-WDCWCFNPSA-N Leu-Thr-Gln Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O LCNASHSOFMRYFO-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 5
- GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N Lys-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 5
- QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QEDMOZUJTGEIBF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 5
- QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 5
- WLJPJRGQRNCIQS-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O WLJPJRGQRNCIQS-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 5
- SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N Trp-Gly-Gln Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 SVGAWGVHFIYAEE-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 5
- MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N Trp-Val-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 MBLJBGZWLHTJBH-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 5
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 5
- 108010081404 acein-2 Proteins 0.000 description 5
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 5
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 5
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 5
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 5
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 5
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 5
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 5
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 5
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 4
- KQFRUSHJPKXBMB-BHDSKKPTSA-N Ala-Ala-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)C)C(O)=O)=CNC2=C1 KQFRUSHJPKXBMB-BHDSKKPTSA-N 0.000 description 4
- RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N Ala-Ser-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N Arg-Ala-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N VKKYFICVTYKFIO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N Arg-Phe-Ser Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 4
- ATABBWFGOHKROJ-GUBZILKMSA-N Arg-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ATABBWFGOHKROJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- QLSRIZIDQXDQHK-RCWTZXSCSA-N Arg-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QLSRIZIDQXDQHK-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 4
- RCENDENBBJFJHZ-ACZMJKKPSA-N Asn-Asn-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O RCENDENBBJFJHZ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 4
- YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N C16 ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N 0.000 description 4
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N Gln-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N OYTPNWYZORARHL-XHNCKOQMSA-N 0.000 description 4
- ZFBBMCKQSNJZSN-AUTRQRHGSA-N Gln-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O ZFBBMCKQSNJZSN-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 4
- WZZSKAJIHTUUSG-ACZMJKKPSA-N Glu-Ala-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WZZSKAJIHTUUSG-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 4
- MIWJDJAMMKHUAR-ZVZYQTTQSA-N Glu-Trp-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N MIWJDJAMMKHUAR-ZVZYQTTQSA-N 0.000 description 4
- NSTUFLGQJCOCDL-UWVGGRQHSA-N Gly-Leu-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N NSTUFLGQJCOCDL-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 4
- NNCSJUBVFBDDLC-YUMQZZPRSA-N Gly-Leu-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NNCSJUBVFBDDLC-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- FFJQHWKSGAWSTJ-BFHQHQDPSA-N Gly-Thr-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O FFJQHWKSGAWSTJ-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 4
- YGHSQRJSHKYUJY-SCZZXKLOSA-N Gly-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN YGHSQRJSHKYUJY-SCZZXKLOSA-N 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 4
- FBGXMKUWQFPHFB-JBDRJPRFSA-N Ile-Ser-Cys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N FBGXMKUWQFPHFB-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 4
- HQLSBZFLOUHQJK-STECZYCISA-N Ile-Tyr-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N HQLSBZFLOUHQJK-STECZYCISA-N 0.000 description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- LVTJJOJKDCVZGP-QWRGUYRKSA-N Leu-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O LVTJJOJKDCVZGP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 4
- RNAGAJXCSPDPRK-KKUMJFAQSA-N Met-Glu-Phe Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 RNAGAJXCSPDPRK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 4
- CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N N-acetylsphinganine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@H](CO)NC(C)=O CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N 0.000 description 4
- FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N Phe-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FGWUALWGCZJQDJ-URLPEUOOSA-N 0.000 description 4
- DMKWYMWNEKIPFC-IUCAKERBSA-N Pro-Gly-Arg Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O DMKWYMWNEKIPFC-IUCAKERBSA-N 0.000 description 4
- FDMKYQQYJKYCLV-GUBZILKMSA-N Pro-Pro-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 FDMKYQQYJKYCLV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- 241000508269 Psidium Species 0.000 description 4
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 4
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 4
- 108010084592 Saporins Proteins 0.000 description 4
- YQHZVYJAGWMHES-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YQHZVYJAGWMHES-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 4
- HJEBZBMOTCQYDN-ACZMJKKPSA-N Ser-Glu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O HJEBZBMOTCQYDN-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 4
- SFTZWNJFZYOLBD-ZDLURKLDSA-N Ser-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO SFTZWNJFZYOLBD-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 4
- WLQRIHCMPFHGKP-PMVMPFDFSA-N Trp-Leu-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 WLQRIHCMPFHGKP-PMVMPFDFSA-N 0.000 description 4
- PKZIWSHDJYIPRH-JBACZVJFSA-N Trp-Tyr-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PKZIWSHDJYIPRH-JBACZVJFSA-N 0.000 description 4
- LTFLDDDGWOVIHY-NAKRPEOUSA-N Val-Ala-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)N LTFLDDDGWOVIHY-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 4
- LMSBRIVOCYOKMU-NRPADANISA-N Val-Gln-Cys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N LMSBRIVOCYOKMU-NRPADANISA-N 0.000 description 4
- HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N Val-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HTONZBWRYUKUKC-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 4
- 108010008685 alanyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 4
- 108010069020 alanyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 4
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 4
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- SFZBBUSDVJSDGR-XWFYHZIMSA-N beta-D-Galp-(1->4)-[alpha-L-Fucp-(1->3)]-beta-D-GlcpNAc-(1->3)-beta-D-Galp Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O[C@@H](O[C@H]2[C@H]([C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]2O)O)[C@@H]1NC(C)=O SFZBBUSDVJSDGR-XWFYHZIMSA-N 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 description 4
- ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(CO)C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 4
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 4
- 230000033581 fucosylation Effects 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 4
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 4
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 4
- VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N newbouldiamide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)C(O)C(CO)NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 4
- 201000008129 pancreatic ductal adenocarcinoma Diseases 0.000 description 4
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 4
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 4
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 4
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- 241000201370 Autographa californica nucleopolyhedrovirus Species 0.000 description 3
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZBKUIQNCRIYVGH-SDDRHHMPSA-N Gln-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N ZBKUIQNCRIYVGH-SDDRHHMPSA-N 0.000 description 3
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 description 3
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 3
- IALQAMYQJBZNSK-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Asn Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O IALQAMYQJBZNSK-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- JQFILXICXLDTRR-FBCQKBJTSA-N Gly-Thr-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCC(O)=O JQFILXICXLDTRR-FBCQKBJTSA-N 0.000 description 3
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 3
- QNILDNVBIARMRK-XVYDVKMFSA-N His-Cys-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N QNILDNVBIARMRK-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- SXTAYKAGBXMACB-DPVSGNNYSA-N L-methionine sulfoximine Chemical compound CS(=N)(=O)CC[C@H](N)C(O)=O SXTAYKAGBXMACB-DPVSGNNYSA-N 0.000 description 3
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 3
- QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N Leu-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N Leu-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 3
- AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- GAELMDJMQDUDLJ-BQBZGAKWSA-N Met-Ala-Gly Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O GAELMDJMQDUDLJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WWPAHTZOWURIMR-ULQDDVLXSA-N Phe-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 WWPAHTZOWURIMR-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 3
- JMVQDLDPDBXAAX-YUMQZZPRSA-N Pro-Gly-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 JMVQDLDPDBXAAX-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- JWOBLHJRDADHLN-KKUMJFAQSA-N Ser-Leu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O JWOBLHJRDADHLN-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- STIAINRLUUKYKM-WFBYXXMGSA-N Ser-Trp-Ala Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO)=CNC2=C1 STIAINRLUUKYKM-WFBYXXMGSA-N 0.000 description 3
- YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N Thr-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N 0.000 description 3
- DXPURPNJDFCKKO-RHYQMDGZSA-N Thr-Lys-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)C(O)=O DXPURPNJDFCKKO-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 3
- NVJCMGGZHOJNBU-UFYCRDLUSA-N Tyr-Val-Phe Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N NVJCMGGZHOJNBU-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 3
- PZTZYZUTCPZWJH-FXQIFTODSA-N Val-Ser-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PZTZYZUTCPZWJH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- 108010044940 alanylglutamine Proteins 0.000 description 3
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 3
- MXKCYTKUIDTFLY-ZNNSSXPHSA-N alpha-L-Fucp-(1->2)-beta-D-Galp-(1->4)-[alpha-L-Fucp-(1->3)]-beta-D-GlcpNAc-(1->3)-D-Galp Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](NC(C)=O)[C@H](O[C@H]3[C@H]([C@@H](CO)OC(O)[C@@H]3O)O)O[C@@H]2CO)O[C@H]2[C@H]([C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O2)O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MXKCYTKUIDTFLY-ZNNSSXPHSA-N 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 3
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 3
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 3
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 208000021045 exocrine pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000005396 glutamine synthetase Human genes 0.000 description 3
- 108020002326 glutamine synthetase Proteins 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 3
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 3
- 238000001325 log-rank test Methods 0.000 description 3
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 3
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 3
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 3
- 208000011645 metastatic carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 3
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 3
- 238000009206 nuclear medicine Methods 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 3
- 230000009450 sialylation Effects 0.000 description 3
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- QMOQBVOBWVNSNO-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-[[2-[(2-azaniumylacetyl)amino]acetyl]amino]acetyl]amino]acetate Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O QMOQBVOBWVNSNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YXHLJMWYDTXDHS-IRFLANFNSA-N 7-aminoactinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=C(N)C=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 YXHLJMWYDTXDHS-IRFLANFNSA-N 0.000 description 2
- 108700012813 7-aminoactinomycin D Proteins 0.000 description 2
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LDLSENBXQNDTPB-DCAQKATOSA-N Ala-Lys-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N LDLSENBXQNDTPB-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- MAEQBGQTDWDSJQ-LSJOCFKGSA-N Ala-Met-His Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N MAEQBGQTDWDSJQ-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 2
- MAZZQZWCCYJQGZ-GUBZILKMSA-N Ala-Pro-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O MAZZQZWCCYJQGZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OTZMRMHZCMZOJZ-SRVKXCTJSA-N Arg-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OTZMRMHZCMZOJZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- SLKLLQWZQHXYSV-CIUDSAMLSA-N Asn-Ala-Lys Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O SLKLLQWZQHXYSV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- UGXYFDQFLVCDFC-CIUDSAMLSA-N Asn-Ser-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O UGXYFDQFLVCDFC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- QSFHZPQUAAQHAQ-CIUDSAMLSA-N Asp-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O QSFHZPQUAAQHAQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 206010004992 Bladder adenocarcinoma stage unspecified Diseases 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010010099 Combined immunodeficiency Diseases 0.000 description 2
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 2
- SZQCDCKIGWQAQN-FXQIFTODSA-N Cys-Arg-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SZQCDCKIGWQAQN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- 101710112752 Cytotoxin Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 108010080865 Factor XII Proteins 0.000 description 2
- 102000000429 Factor XII Human genes 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JXFLPKSDLDEOQK-JHEQGTHGSA-N Gln-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O JXFLPKSDLDEOQK-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 2
- FQCILXROGNOZON-YUMQZZPRSA-N Gln-Pro-Gly Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O FQCILXROGNOZON-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- AVZHGSCDKIQZPQ-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(O)=O AVZHGSCDKIQZPQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N Glu-Val-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YQPFCZVKMUVZIN-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- CCQOOWAONKGYKQ-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)CN CCQOOWAONKGYKQ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- PDAWDNVHMUKWJR-ZETCQYMHSA-N Gly-Gly-His Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 PDAWDNVHMUKWJR-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N Gly-Leu-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MIIVFRCYJABHTQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 2
- RVGMVLVBDRQVKB-UWVGGRQHSA-N Gly-Met-His Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)CN RVGMVLVBDRQVKB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- YOBGUCWZPXJHTN-BQBZGAKWSA-N Gly-Ser-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N YOBGUCWZPXJHTN-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- POJJAZJHBGXEGM-YUMQZZPRSA-N Gly-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN POJJAZJHBGXEGM-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- ZLCLYFGMKFCDCN-XPUUQOCRSA-N Gly-Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN)C(O)=O ZLCLYFGMKFCDCN-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 2
- KSOBNUBCYHGUKH-UWVGGRQHSA-N Gly-Val-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CN KSOBNUBCYHGUKH-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 2
- HVLSXIKZNLPZJJ-TXZCQADKSA-N HA peptide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 HVLSXIKZNLPZJJ-TXZCQADKSA-N 0.000 description 2
- 108010000487 High-Molecular-Weight Kininogen Proteins 0.000 description 2
- 108010093488 His-His-His-His-His-His Proteins 0.000 description 2
- AQTWDZDISVGCAC-CFMVVWHZSA-N Ile-Asp-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N AQTWDZDISVGCAC-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 2
- UAQSZXGJGLHMNV-XEGUGMAKSA-N Ile-Gly-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N UAQSZXGJGLHMNV-XEGUGMAKSA-N 0.000 description 2
- PXKACEXYLPBMAD-JBDRJPRFSA-N Ile-Ser-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PXKACEXYLPBMAD-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 2
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 2
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 2
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 2
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 2
- 102100035792 Kininogen-1 Human genes 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- HXWALXSAVBLTPK-NUTKFTJISA-N Leu-Ala-Trp Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N HXWALXSAVBLTPK-NUTKFTJISA-N 0.000 description 2
- GPICTNQYKHHHTH-GUBZILKMSA-N Leu-Gln-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GPICTNQYKHHHTH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N Leu-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 2
- FAELBUXXFQLUAX-AJNGGQMLSA-N Leu-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C FAELBUXXFQLUAX-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 2
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- WYBVBIHNJWOLCJ-UHFFFAOYSA-N N-L-arginyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCCN=C(N)N WYBVBIHNJWOLCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 2
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012879 PET imaging Methods 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- BPCLGWHVPVTTFM-QWRGUYRKSA-N Phe-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O BPCLGWHVPVTTFM-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- CVAUVSOFHJKCHN-BZSNNMDCSA-N Phe-Tyr-Cys Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CVAUVSOFHJKCHN-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- GAMLAXHLYGLQBJ-UFYCRDLUSA-N Phe-Val-Tyr Chemical compound N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)O)CC1=CC=C(C=C1)O)C(C)C)CC1=CC=CC=C1 GAMLAXHLYGLQBJ-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Natural products OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 101710182846 Polyhedrin Proteins 0.000 description 2
- VXCHGLYSIOOZIS-GUBZILKMSA-N Pro-Ala-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 VXCHGLYSIOOZIS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- INXAPZFIOVGHSV-CIUDSAMLSA-N Pro-Asn-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 INXAPZFIOVGHSV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 2
- VGNYHOBZJKWRGI-CIUDSAMLSA-N Ser-Asn-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO VGNYHOBZJKWRGI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- BNFVPSRLHHPQKS-WHFBIAKZSA-N Ser-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O BNFVPSRLHHPQKS-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ADJDNJCSPNFFPI-FXQIFTODSA-N Ser-Pro-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CO ADJDNJCSPNFFPI-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- JCLAFVNDBJMLBC-JBDRJPRFSA-N Ser-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JCLAFVNDBJMLBC-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 2
- AXKJPUBALUNJEO-UBHSHLNASA-N Ser-Trp-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AXKJPUBALUNJEO-UBHSHLNASA-N 0.000 description 2
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 241000723873 Tobacco mosaic virus Species 0.000 description 2
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 2
- QUIXRGCMQOXUSV-SZMVWBNQSA-N Trp-Pro-Pro Chemical compound O=C([C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)N)N1CCC[C@H]1C(O)=O QUIXRGCMQOXUSV-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PZXUIGWOEWWFQM-SRVKXCTJSA-N Tyr-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O PZXUIGWOEWWFQM-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- JWHOIHCOHMZSAR-QWRGUYRKSA-N Tyr-Asp-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 JWHOIHCOHMZSAR-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N Tyr-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- MWUYSCVVPVITMW-IGNZVWTISA-N Tyr-Tyr-Ala Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 MWUYSCVVPVITMW-IGNZVWTISA-N 0.000 description 2
- YKBUNNNRNZZUID-UFYCRDLUSA-N Tyr-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O YKBUNNNRNZZUID-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XCTHZFGSVQBHBW-IUCAKERBSA-N Val-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])C(C)C XCTHZFGSVQBHBW-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- GBIUHAYJGWVNLN-UHFFFAOYSA-N Val-Ser-Pro Natural products CC(C)C(N)C(=O)NC(CO)C(=O)N1CCCC1C(O)=O GBIUHAYJGWVNLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N Val-Tyr-Tyr Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N OWFGFHQMSBTKLX-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N Zirconium Chemical compound [Zr] QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010045350 alanyl-tyrosyl-alanine Proteins 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 2
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 2
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 2
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010060035 arginylproline Proteins 0.000 description 2
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- MDKCFLQDBWCQCV-UHFFFAOYSA-N benzyl isothiocyanate Chemical compound S=C=NCC1=CC=CC=C1 MDKCFLQDBWCQCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 2
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 230000007541 cellular toxicity Effects 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 2
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 230000006957 competitive inhibition Effects 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 2
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 2
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 2
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000013213 extrapolation Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 2
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 2
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 2
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 2
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 2
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010001064 glycyl-glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010048994 glycyl-tyrosyl-alanine Proteins 0.000 description 2
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 2
- YLMAHDNUQAMNNX-UHFFFAOYSA-N imatinib methanesulfonate Chemical compound CS(O)(=O)=O.C1CN(C)CCN1CC1=CC=C(C(=O)NC=2C=C(NC=3N=C(C=CN=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)C=C1 YLMAHDNUQAMNNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 2
- APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N indium atom Chemical compound [In] APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 2
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 2
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 2
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 2
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 2
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 2
- AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N pentan-3-ol Chemical compound CCC(O)CC AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 238000012636 positron electron tomography Methods 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 108010087846 prolyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 108010079317 prolyl-tyrosine Proteins 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N propranolol Chemical compound C1=CC=C2C(OCC(O)CNC(C)C)=CC=CC2=C1 AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 2
- 208000002491 severe combined immunodeficiency Diseases 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 2
- 229910052713 technetium Inorganic materials 0.000 description 2
- GKLVYJBZJHMRIY-UHFFFAOYSA-N technetium atom Chemical compound [Tc] GKLVYJBZJHMRIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 2
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000303 topotecan Drugs 0.000 description 2
- UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N topotecan Chemical compound C1=C(O)C(CN(C)C)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 UCFGDBYHRUNTLO-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 2
- 108010044292 tryptophyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- 230000036326 tumor accumulation Effects 0.000 description 2
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 2
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YNAKLZFMOFNLRE-UHFFFAOYSA-N uce-6 Chemical compound O=C1C2=CC(O)=C(C)C(O)=C2C(=O)C2=C1C=C1C=C(O)C=C(CC(=O)CC(O)C)C1=C2O YNAKLZFMOFNLRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- 108010036320 valylleucine Proteins 0.000 description 2
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- 229910052726 zirconium Inorganic materials 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N (+)-catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 description 1
- DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N (2R)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2R,3S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[2-[[2-[[2-[(2-amino-1-hydroxyethylidene)amino]-3-carboxy-1-hydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1,5-dihydroxy-5-iminopentylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]hexanoic acid Chemical compound C[C@@H]([C@@H](C(=N[C@@H](CS)C(=N[C@@H](C)C(=N[C@@H](CO)C(=NCC(=N[C@@H](CCC(=N)O)C(=NC(CS)C(=N[C@H]([C@H](C)O)C(=N[C@H](CS)C(=N[C@H](CO)C(=NCC(=N[C@H](CS)C(=NCC(=N[C@H](CCCCN)C(=O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)N=C([C@H](CS)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](C)N=C(CN=C([C@H](CO)N=C([C@H](CS)N=C(CN=C(C(CS)N=C(C(CC(=O)O)N=C(CN)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N 0.000 description 1
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 1
- ICLYJLBTOGPLMC-KVVVOXFISA-N (z)-octadec-9-enoate;tris(2-hydroxyethyl)azanium Chemical compound OCCN(CCO)CCO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ICLYJLBTOGPLMC-KVVVOXFISA-N 0.000 description 1
- NKIJBSVPDYIEAT-UHFFFAOYSA-N 1,4,7,10-tetrazacyclododec-10-ene Chemical compound C1CNCCN=CCNCCN1 NKIJBSVPDYIEAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AOYNUTHNTBLRMT-SLPGGIOYSA-N 2-deoxy-2-fluoro-aldehydo-D-glucose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](F)C=O AOYNUTHNTBLRMT-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- BZTDTCNHAFUJOG-UHFFFAOYSA-N 6-carboxyfluorescein Chemical compound C12=CC=C(O)C=C2OC2=CC(O)=CC=C2C11OC(=O)C2=CC=C(C(=O)O)C=C21 BZTDTCNHAFUJOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZIIFPSPUDAGJM-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-2-n,2-n-diethylpyrimidine-2,4-diamine Chemical compound CCN(CC)C1=NC(N)=CC(Cl)=N1 XZIIFPSPUDAGJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJHBVJOVLFPMQE-QFIPXVFZSA-N 7-Ethyl-10-Hydroxy-Camptothecin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CC)=C(CN3C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=C33)=O)C3=NC2=C1 FJHBVJOVLFPMQE-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 1
- FUXVKZWTXQUGMW-FQEVSTJZSA-N 9-Aminocamptothecin Chemical compound C1=CC(N)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 FUXVKZWTXQUGMW-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- 101150094949 APRT gene Proteins 0.000 description 1
- 108010066676 Abrin Proteins 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000012440 Acetylcholinesterase Human genes 0.000 description 1
- 108010022752 Acetylcholinesterase Proteins 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010024223 Adenine phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100029457 Adenine phosphoribosyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 208000036832 Adenocarcinoma of ovary Diseases 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- ZGCSNRKSJLVANE-UHFFFAOYSA-N Aglycone-Rebeccamycin Natural products N1C2=C3NC4=C(Cl)C=CC=C4C3=C(C(=O)NC3=O)C3=C2C2=C1C(Cl)=CC=C2 ZGCSNRKSJLVANE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WRDANSJTFOHBPI-FXQIFTODSA-N Ala-Arg-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N WRDANSJTFOHBPI-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- HOVPGJUNRLMIOZ-CIUDSAMLSA-N Ala-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C)N HOVPGJUNRLMIOZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- WNHNMKOFKCHKKD-BFHQHQDPSA-N Ala-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O WNHNMKOFKCHKKD-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 1
- ZDILXFDENZVOTL-BPNCWPANSA-N Ala-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZDILXFDENZVOTL-BPNCWPANSA-N 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 102000012936 Angiostatins Human genes 0.000 description 1
- 108010079709 Angiostatins Proteins 0.000 description 1
- 101001084702 Arabidopsis thaliana Histone H2B.10 Proteins 0.000 description 1
- QQJSJIBESHAJPM-IHRRRGAJSA-N Arg-Cys-Tyr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 QQJSJIBESHAJPM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- ZEAYJGRKRUBDOB-GARJFASQSA-N Arg-Gln-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O ZEAYJGRKRUBDOB-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- UBCPNBUIQNMDNH-NAKRPEOUSA-N Arg-Ile-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O UBCPNBUIQNMDNH-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- NVUIWHJLPSZZQC-CYDGBPFRSA-N Arg-Ile-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O NVUIWHJLPSZZQC-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 1
- COXMUHNBYCVVRG-DCAQKATOSA-N Arg-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O COXMUHNBYCVVRG-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- KMFPQTITXUKJOV-DCAQKATOSA-N Arg-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KMFPQTITXUKJOV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- PFOYSEIHFVKHNF-FXQIFTODSA-N Asn-Ala-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O PFOYSEIHFVKHNF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- HPBNLFLSSQDFQW-WHFBIAKZSA-N Asn-Ser-Gly Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O HPBNLFLSSQDFQW-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- JBDLMLZNDRLDIX-HJGDQZAQSA-N Asn-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O JBDLMLZNDRLDIX-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- QTKYFZCMSQLYHI-UBHSHLNASA-N Asn-Trp-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O QTKYFZCMSQLYHI-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- MRQQMVZUHXUPEV-IHRRRGAJSA-N Asp-Arg-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O MRQQMVZUHXUPEV-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- QXHVOUSPVAWEMX-ZLUOBGJFSA-N Asp-Asp-Ser Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QXHVOUSPVAWEMX-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- VZNOVQKGJQJOCS-SRVKXCTJSA-N Asp-Asp-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O VZNOVQKGJQJOCS-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- RRKCPMGSRIDLNC-AVGNSLFASA-N Asp-Glu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O RRKCPMGSRIDLNC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- GBSUGIXJAAKZOW-GMOBBJLQSA-N Asp-Ile-Arg Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O GBSUGIXJAAKZOW-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 1
- WMLFFCRUSPNENW-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WMLFFCRUSPNENW-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- KGHLGJAXYSVNJP-WHFBIAKZSA-N Asp-Ser-Gly Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O KGHLGJAXYSVNJP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ZUNMTUPRQMWMHX-LSJOCFKGSA-N Asp-Val-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ZUNMTUPRQMWMHX-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- 206010003497 Asphyxia Diseases 0.000 description 1
- OLCWFLWEHWLBTO-HSZRJFAPSA-N BMS-214662 Chemical compound C=1C=CSC=1S(=O)(=O)N([C@@H](C1)CC=2C=CC=CC=2)CC2=CC(C#N)=CC=C2N1CC1=CN=CN1 OLCWFLWEHWLBTO-HSZRJFAPSA-N 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N Camptothecin Natural products CCC1(O)C(=O)OCC2=C1C=C3C4Nc5ccccc5C=C4CN3C2=O KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 1
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 1
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 1
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- PTOAARAWEBMLNO-KVQBGUIXSA-N Cladribine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(Cl)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 PTOAARAWEBMLNO-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 1
- 102100031162 Collagen alpha-1(XVIII) chain Human genes 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCJNIJAWIRPPBB-CIUDSAMLSA-N Cys-Ala-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N DCJNIJAWIRPPBB-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- BPHKULHWEIUDOB-FXQIFTODSA-N Cys-Gln-Gln Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O BPHKULHWEIUDOB-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- YUZPQIQWXLRFBW-ACZMJKKPSA-N Cys-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O YUZPQIQWXLRFBW-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- VRJZMZGGAKVSIQ-SRVKXCTJSA-N Cys-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VRJZMZGGAKVSIQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 101150074155 DHFR gene Proteins 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 229940123323 DNA repair enzyme inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 1
- WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N Daunomycin Natural products CCC1(O)CC(OC2CC(N)C(O)C(C)O2)c3cc4C(=O)c5c(OC)cccc5C(=O)c4c(O)c3C1 WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 208000002699 Digestive System Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 238000001061 Dunnett's test Methods 0.000 description 1
- 108010024212 E-Selectin Proteins 0.000 description 1
- 102100023471 E-selectin Human genes 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 108010079505 Endostatins Proteins 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 1
- 102100029095 Exportin-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100029091 Exportin-2 Human genes 0.000 description 1
- 101710147878 Exportin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010014172 Factor V Proteins 0.000 description 1
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 1
- 229940124226 Farnesyltransferase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical group CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000724791 Filamentous phage Species 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GYHNNYVSQQEPJS-UHFFFAOYSA-N Gallium Chemical compound [Ga] GYHNNYVSQQEPJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010017993 Gastrointestinal neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WLRYGVYQFXRJDA-DCAQKATOSA-N Gln-Pro-Pro Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 WLRYGVYQFXRJDA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- VYOILACOFPPNQH-UMNHJUIQSA-N Gln-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N VYOILACOFPPNQH-UMNHJUIQSA-N 0.000 description 1
- MXOODARRORARSU-ACZMJKKPSA-N Glu-Ala-Ser Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N MXOODARRORARSU-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- KBKGRMNVKPSQIF-XDTLVQLUSA-N Glu-Ala-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KBKGRMNVKPSQIF-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 1
- INGJLBQKTRJLFO-UKJIMTQDSA-N Glu-Ile-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O INGJLBQKTRJLFO-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 1
- JDUKCSSHWNIQQZ-IHRRRGAJSA-N Glu-Phe-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O JDUKCSSHWNIQQZ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- LJPIRKICOISLKN-WHFBIAKZSA-N Gly-Ala-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LJPIRKICOISLKN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- QGZSAHIZRQHCEQ-QWRGUYRKSA-N Gly-Asp-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 QGZSAHIZRQHCEQ-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- BYYNJRSNDARRBX-YFKPBYRVSA-N Gly-Gln-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O BYYNJRSNDARRBX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- IDOGEHIWMJMAHT-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Cys Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O IDOGEHIWMJMAHT-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N Gly-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN UQJNXZSSGQIPIQ-FBCQKBJTSA-N 0.000 description 1
- SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N Gly-Ser-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- NVTPVQLIZCOJFK-FOHZUACHSA-N Gly-Thr-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NVTPVQLIZCOJFK-FOHZUACHSA-N 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010026389 Gramicidin Proteins 0.000 description 1
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- JIUYRPFQJJRSJB-QWRGUYRKSA-N His-His-Gly Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)NCC(O)=O)C1=CN=CN1 JIUYRPFQJJRSJB-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- ZNTSGDNUITWTRA-WDSOQIARSA-N His-Trp-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O ZNTSGDNUITWTRA-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- 101100321817 Human parvovirus B19 (strain HV) 7.5K gene Proteins 0.000 description 1
- 108010091358 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100029098 Hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase Human genes 0.000 description 1
- HERITAGIPLEJMT-GVARAGBVSA-N Ile-Ala-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 HERITAGIPLEJMT-GVARAGBVSA-N 0.000 description 1
- HLYBGMZJVDHJEO-CYDGBPFRSA-N Ile-Arg-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N HLYBGMZJVDHJEO-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 1
- QTUSJASXLGLJSR-OSUNSFLBSA-N Ile-Arg-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N QTUSJASXLGLJSR-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- QYOGJYIRKACXEP-SLBDDTMCSA-N Ile-Asn-Trp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)N QYOGJYIRKACXEP-SLBDDTMCSA-N 0.000 description 1
- LBRCLQMZAHRTLV-ZKWXMUAHSA-N Ile-Gly-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LBRCLQMZAHRTLV-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- UWBDLNOCIDGPQE-GUBZILKMSA-N Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN UWBDLNOCIDGPQE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N Ile-Lys-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 description 1
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 108020005350 Initiator Codon Proteins 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 1
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 description 1
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010065637 Interleukin-23 Proteins 0.000 description 1
- 102000013264 Interleukin-23 Human genes 0.000 description 1
- 102100039897 Interleukin-5 Human genes 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102100021592 Interleukin-7 Human genes 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 102000000585 Interleukin-9 Human genes 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical group C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N L-leucine-L-tyrosine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000005517 L01XE01 - Imatinib Substances 0.000 description 1
- KSZCCRIGNVSHFH-UWVGGRQHSA-N Leu-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O KSZCCRIGNVSHFH-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- SVBJIZVVYJYGLA-DCAQKATOSA-N Leu-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O SVBJIZVVYJYGLA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N Leu-Val-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012097 Lipofectamine 2000 Substances 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- OIQSIMFSVLLWBX-VOAKCMCISA-N Lys-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OIQSIMFSVLLWBX-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- SVSQSPICRKBMSZ-SRVKXCTJSA-N Lys-Pro-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O SVSQSPICRKBMSZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- PDIDTSZKKFEDMB-UWVGGRQHSA-N Lys-Pro-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O PDIDTSZKKFEDMB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- QLFAPXUXEBAWEK-NHCYSSNCSA-N Lys-Val-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O QLFAPXUXEBAWEK-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 229930126263 Maytansine Natural products 0.000 description 1
- CAODKDAPYGUMLK-FXQIFTODSA-N Met-Asn-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CAODKDAPYGUMLK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- SPSSJSICDYYTQN-HJGDQZAQSA-N Met-Thr-Gln Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O SPSSJSICDYYTQN-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- 102000003792 Metallothionein Human genes 0.000 description 1
- 108090000157 Metallothionein Proteins 0.000 description 1
- 206010027457 Metastases to liver Diseases 0.000 description 1
- VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N Mitobronitol Chemical compound BrC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CBr VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 1
- ZOKXTWBITQBERF-AKLPVKDBSA-N Molybdenum Mo-99 Chemical compound [99Mo] ZOKXTWBITQBERF-AKLPVKDBSA-N 0.000 description 1
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000012478 N-glycan fucosylation Effects 0.000 description 1
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 108010002311 N-glycylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- QAADZYUXQLUXFX-UHFFFAOYSA-N N-phenylmethylthioformamide Natural products S=CNCC1=CC=CC=C1 QAADZYUXQLUXFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 1
- 238000011794 NU/NU nude mouse Methods 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000015336 Nerve Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108020004711 Nucleic Acid Probes Proteins 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 206010061328 Ovarian epithelial cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 208000008900 Pancreatic Ductal Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- UHRNIXJAGGLKHP-DLOVCJGASA-N Phe-Ala-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UHRNIXJAGGLKHP-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- MGBRZXXGQBAULP-DRZSPHRISA-N Phe-Glu-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 MGBRZXXGQBAULP-DRZSPHRISA-N 0.000 description 1
- UAMFZRNCIFFMLE-FHWLQOOXSA-N Phe-Glu-Tyr Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)O)N UAMFZRNCIFFMLE-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 1
- GXDPQJUBLBZKDY-IAVJCBSLSA-N Phe-Ile-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O GXDPQJUBLBZKDY-IAVJCBSLSA-N 0.000 description 1
- GLJZDMZJHFXJQG-BZSNNMDCSA-N Phe-Ser-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O GLJZDMZJHFXJQG-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- IAOZOFPONWDXNT-IXOXFDKPSA-N Phe-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O IAOZOFPONWDXNT-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 1
- KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N Phe-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- KIQUCMUULDXTAZ-HJOGWXRNSA-N Phe-Tyr-Tyr Chemical compound N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(O)=O KIQUCMUULDXTAZ-HJOGWXRNSA-N 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- UIMCLYYSUCIUJM-UWVGGRQHSA-N Pro-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 UIMCLYYSUCIUJM-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- RMODQFBNDDENCP-IHRRRGAJSA-N Pro-Lys-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O RMODQFBNDDENCP-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 1
- 101000762949 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) Exotoxin A Proteins 0.000 description 1
- QEHOIJJIZXRMAN-UHFFFAOYSA-N Rebeccamycin Natural products OC1C(O)C(OC)C(CO)OC1N1C2=C3NC4=C(Cl)C=CC=C4C3=C3C(=O)NC(=O)C3=C2C2=CC=CC(Cl)=C21 QEHOIJJIZXRMAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 1
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- FMDHKPRACUXATF-ACZMJKKPSA-N Ser-Gln-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FMDHKPRACUXATF-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- AEGUWTFAQQWVLC-BQBZGAKWSA-N Ser-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O AEGUWTFAQQWVLC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- IXCHOHLPHNGFTJ-YUMQZZPRSA-N Ser-Gly-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)N IXCHOHLPHNGFTJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- JFWDJFULOLKQFY-QWRGUYRKSA-N Ser-Gly-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O JFWDJFULOLKQFY-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- XXXAXOWMBOKTRN-XPUUQOCRSA-N Ser-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XXXAXOWMBOKTRN-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- IOVBCLGAJJXOHK-SRVKXCTJSA-N Ser-His-His Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 IOVBCLGAJJXOHK-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- ZKBKUWQVDWWSRI-BZSNNMDCSA-N Ser-Phe-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZKBKUWQVDWWSRI-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- RHAPJNVNWDBFQI-BQBZGAKWSA-N Ser-Pro-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O RHAPJNVNWDBFQI-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N Ser-Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SRSPTFBENMJHMR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- VGQVAVQWKJLIRM-FXQIFTODSA-N Ser-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O VGQVAVQWKJLIRM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- RXUOAOOZIWABBW-XGEHTFHBSA-N Ser-Thr-Arg Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N RXUOAOOZIWABBW-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 102220497176 Small vasohibin-binding protein_T47D_mutation Human genes 0.000 description 1
- 102100038803 Somatotropin Human genes 0.000 description 1
- 241000256251 Spodoptera frugiperda Species 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N Streptozotocin Natural products O=NN(C)C(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 description 1
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CAGTXGDOIFXLPC-KZVJFYERSA-N Thr-Arg-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)CCCN=C(N)N CAGTXGDOIFXLPC-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- KRPKYGOFYUNIGM-XVSYOHENSA-N Thr-Asp-Phe Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N)O KRPKYGOFYUNIGM-XVSYOHENSA-N 0.000 description 1
- XPNSAQMEAVSQRD-FBCQKBJTSA-N Thr-Gly-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XPNSAQMEAVSQRD-FBCQKBJTSA-N 0.000 description 1
- IMULJHHGAUZZFE-MBLNEYKQSA-N Thr-Gly-Ile Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O IMULJHHGAUZZFE-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 1
- VRUFCJZQDACGLH-UVOCVTCTSA-N Thr-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VRUFCJZQDACGLH-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- IJVNLNRVDUTWDD-MEYUZBJRSA-N Thr-Leu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O IJVNLNRVDUTWDD-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- SPVHQURZJCUDQC-VOAKCMCISA-N Thr-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O SPVHQURZJCUDQC-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N Thr-Phe-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=CC=C1 BIBYEFRASCNLAA-CDMKHQONSA-N 0.000 description 1
- MXDOAJQRJBMGMO-FJXKBIBVSA-N Thr-Pro-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O MXDOAJQRJBMGMO-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- BKVICMPZWRNWOC-RHYQMDGZSA-N Thr-Val-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O BKVICMPZWRNWOC-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 1
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 1
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 1
- 102000003978 Tissue Plasminogen Activator Human genes 0.000 description 1
- 108090000373 Tissue Plasminogen Activator Proteins 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 102100031988 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 6 Human genes 0.000 description 1
- 108050002568 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 6 Proteins 0.000 description 1
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 1
- CDRYEAWHKJSGAF-BPNCWPANSA-N Tyr-Ala-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O CDRYEAWHKJSGAF-BPNCWPANSA-N 0.000 description 1
- QOIKZODVIPOPDD-AVGNSLFASA-N Tyr-Cys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QOIKZODVIPOPDD-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- CNLKDWSAORJEMW-KWQFWETISA-N Tyr-Gly-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CNLKDWSAORJEMW-KWQFWETISA-N 0.000 description 1
- NKUGCYDFQKFVOJ-JYJNAYRXSA-N Tyr-Leu-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 NKUGCYDFQKFVOJ-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- LUMQYLVYUIRHHU-YJRXYDGGSA-N Tyr-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LUMQYLVYUIRHHU-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 1
- LDKDSFQSEUOCOO-RPTUDFQQSA-N Tyr-Thr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O LDKDSFQSEUOCOO-RPTUDFQQSA-N 0.000 description 1
- NUQZCPSZHGIYTA-HKUYNNGSSA-N Tyr-Trp-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N NUQZCPSZHGIYTA-HKUYNNGSSA-N 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- YODDULVCGFQRFZ-ZKWXMUAHSA-N Val-Asp-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YODDULVCGFQRFZ-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- SBJCTAZFSZXWSR-AVGNSLFASA-N Val-Met-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N SBJCTAZFSZXWSR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- CKTMJBPRVQWPHU-JSGCOSHPSA-N Val-Phe-Gly Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(=O)O)N CKTMJBPRVQWPHU-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- GBIUHAYJGWVNLN-AEJSXWLSSA-N Val-Ser-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N GBIUHAYJGWVNLN-AEJSXWLSSA-N 0.000 description 1
- CEKSLIVSNNGOKH-KZVJFYERSA-N Val-Thr-Ala Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O CEKSLIVSNNGOKH-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003448 Vitamin K Natural products 0.000 description 1
- FHNFHKCVQCLJFQ-NJFSPNSNSA-N Xenon-133 Chemical compound [133Xe] FHNFHKCVQCLJFQ-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 229940022698 acetylcholinesterase Drugs 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 1
- 230000002730 additional effect Effects 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 239000002487 adenosine deaminase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000011256 aggressive treatment Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- DUKURNFHYQXCJG-JEOLMMCMSA-N alpha-L-Fucp-(1->4)-[beta-D-Galp-(1->3)]-beta-D-GlcpNAc-(1->3)-beta-D-Galp-(1->4)-D-Glcp Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](NC(C)=O)[C@H](O[C@@H]2[C@H]([C@H](O[C@@H]3[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]3O)CO)O[C@H](CO)[C@@H]2O)O)O[C@@H]1CO DUKURNFHYQXCJG-JEOLMMCMSA-N 0.000 description 1
- XBSNXOHQOTUENA-KRAHZTDDSA-N alpha-Neu5Ac-(2->3)-beta-D-Gal-(1->3)-[alpha-L-Fuc-(1->4)]-D-GlcNAc Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@]3(O[C@H]([C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C3)[C@H](O)[C@H](O)CO)C(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](NC(C)=O)C(O)O[C@@H]1CO XBSNXOHQOTUENA-KRAHZTDDSA-N 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229940126575 aminoglycoside Drugs 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 1
- 229940094957 androgens and estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 108010089975 arginyl-glycyl-aspartyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- FZCSTZYAHCUGEM-UHFFFAOYSA-N aspergillomarasmine B Natural products OC(=O)CNC(C(O)=O)CNC(C(O)=O)CC(O)=O FZCSTZYAHCUGEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 238000001815 biotherapy Methods 0.000 description 1
- 150000001615 biotins Chemical class 0.000 description 1
- HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H bis[(2-oxo-1,3,2$l^{5},4$l^{2}-dioxaphosphaplumbetan-2-yl)oxy]lead Chemical compound [Pb+2].[Pb+2].[Pb+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- RSIHSRDYCUFFLA-DYKIIFRCSA-N boldenone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 RSIHSRDYCUFFLA-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N butyl alcohol Substances CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N calcein am Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O)=C(OC(C)=O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(=O)C)C(OC(C)=O)=C1 BQRGNLJZBFXNCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940127093 camptothecin Drugs 0.000 description 1
- VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N camptothecin Chemical compound C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 description 1
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 230000007248 cellular mechanism Effects 0.000 description 1
- 229960005395 cetuximab Drugs 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- IOMXCGDXEUDZAK-UHFFFAOYSA-N chembl1511179 Chemical compound OC1=CC=C2C=CC=CC2=C1N=NC1=NC=CS1 IOMXCGDXEUDZAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NDAYQJDHGXTBJL-MWWSRJDJSA-N chembl557217 Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC=O)C(C)C)CC(C)C)C(=O)NCCO)=CNC2=C1 NDAYQJDHGXTBJL-MWWSRJDJSA-N 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 229950001002 cianidanol Drugs 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000000599 controlled substance Substances 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 210000000448 cultured tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 1
- RSIHSRDYCUFFLA-UHFFFAOYSA-N dehydrotestosterone Natural products O=C1C=CC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)O)C4C3CCC2=C1 RSIHSRDYCUFFLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007324 demetalation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- CFCUWKMKBJTWLW-UHFFFAOYSA-N deoliosyl-3C-alpha-L-digitoxosyl-MTM Natural products CC=1C(O)=C2C(O)=C3C(=O)C(OC4OC(C)C(O)C(OC5OC(C)C(O)C(OC6OC(C)C(O)C(C)(O)C6)C5)C4)C(C(OC)C(=O)C(O)C(C)O)CC3=CC2=CC=1OC(OC(C)C1O)CC1OC1CC(O)C(O)C(C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 1
- 208000024558 digestive system cancer Diseases 0.000 description 1
- 108010009297 diglycyl-histidine Proteins 0.000 description 1
- FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N dipeptide phenylalanyl-tyrosine Natural products C=1C=C(O)C=CC=1CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N dl-camptothecin Natural products C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)C5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003534 dna topoisomerase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 230000003670 easy-to-clean Effects 0.000 description 1
- 230000000235 effect on cancer Effects 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009144 enzymatic modification Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- ZVYVPGLRVWUPMP-FYSMJZIKSA-N exatecan Chemical compound C1C[C@H](N)C2=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC3=CC(F)=C(C)C1=C32 ZVYVPGLRVWUPMP-FYSMJZIKSA-N 0.000 description 1
- 229950009429 exatecan Drugs 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 108700002148 exportin 1 Proteins 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 108010073651 fibrinmonomer Proteins 0.000 description 1
- GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N fludarabine phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(F)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N 0.000 description 1
- 229960005304 fludarabine phosphate Drugs 0.000 description 1
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000005021 gait Effects 0.000 description 1
- 229910052733 gallium Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011243 gastrointestinal stromal tumor Diseases 0.000 description 1
- 201000010231 gastrointestinal system cancer Diseases 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- 238000012252 genetic analysis Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 108010084264 glycyl-glycyl-cysteine Proteins 0.000 description 1
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 210000004013 groin Anatomy 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 description 1
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003685 imatinib mesylate Drugs 0.000 description 1
- 150000002466 imines Chemical group 0.000 description 1
- 230000008004 immune attack Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 229940076144 interleukin-10 Drugs 0.000 description 1
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 description 1
- 229940124829 interleukin-23 Drugs 0.000 description 1
- 229940100602 interleukin-5 Drugs 0.000 description 1
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 1
- 229940100994 interleukin-7 Drugs 0.000 description 1
- 229940118526 interleukin-9 Drugs 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 201000010985 invasive ductal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 description 1
- UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N irinotecan Chemical compound C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- QRWUHWVLCGLLOK-UHFFFAOYSA-N ist 622 Chemical compound C=1C2=C(C=3C4=5)OC(=O)C4=C(C)C=CC=5OC(=O)C=3C(OC(=O)CCOCC)=C2C=CC=1OC1OC(C)C2OC(C=3C=CC=CC=3)OC2C1OC1OC(C)C(O)C(OC)C1O QRWUHWVLCGLLOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 210000000867 larynx Anatomy 0.000 description 1
- 239000010985 leather Substances 0.000 description 1
- 108010044311 leucyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010012058 leucyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000007762 localization of cell Effects 0.000 description 1
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 208000037841 lung tumor Diseases 0.000 description 1
- RVFGKBWWUQOIOU-NDEPHWFRSA-N lurtotecan Chemical compound O=C([C@]1(O)CC)OCC(C(N2CC3=4)=O)=C1C=C2C3=NC1=CC=2OCCOC=2C=C1C=4CN1CCN(C)CC1 RVFGKBWWUQOIOU-NDEPHWFRSA-N 0.000 description 1
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N maytansine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@](OC(=O)N1)([C@H]([C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(C)=O)CC(=O)N1C)C)[H])\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 description 1
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical compound ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- TWXDDNPPQUTEOV-FVGYRXGTSA-N methamphetamine hydrochloride Chemical compound Cl.CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 TWXDDNPPQUTEOV-FVGYRXGTSA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N micophenolic acid Natural products OC1=C(CC=C(C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N mithramycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N 0.000 description 1
- 229960005485 mitobronitol Drugs 0.000 description 1
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 238000009126 molecular therapy Methods 0.000 description 1
- ZDZOTLJHXYCWBA-BSEPLHNVSA-N molport-006-823-826 Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-BSEPLHNVSA-N 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229960000951 mycophenolic acid Drugs 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N mycophenolic acid Chemical compound OC1=C(C\C=C(/C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N 0.000 description 1
- MPXAYYWSDIKNTP-UHFFFAOYSA-N n-(2-aminophenyl)acetamide Chemical compound CC(=O)NC1=CC=CC=C1N MPXAYYWSDIKNTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CUJNYTNSAIPXSV-UHFFFAOYSA-N n-(2-methyl-7h-purin-6-yl)quinolin-6-amine Chemical compound N1=CC=CC2=CC(NC=3N=C(N=C4NC=NC4=3)C)=CC=C21 CUJNYTNSAIPXSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBAYEVATSBINBX-UHFFFAOYSA-N n-[5-[acetyl(hydroxy)amino]pentyl]-n'-hydroxy-n'-[5-[[4-[hydroxy-[5-[(4-isothiocyanatophenyl)carbamothioylamino]pentyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]pentyl]butanediamide Chemical compound CC(=O)N(O)CCCCCNC(=O)CCC(=O)N(O)CCCCCNC(=O)CCC(=O)N(O)CCCCCNC(=S)NC1=CC=C(N=C=S)C=C1 HBAYEVATSBINBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000031942 natural killer cell mediated cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 1
- 108010087904 neutravidin Proteins 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 1
- 239000002853 nucleic acid probe Substances 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 208000013371 ovarian adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000006588 ovary adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N p-hydroxybenzoic acid methyl ester Natural products COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006179 pH buffering agent Substances 0.000 description 1
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000003182 parenteral nutrition solution Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 239000008024 pharmaceutical diluent Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010070409 phenylalanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 1
- SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N phylloquinone Natural products CC(C)CCCCC(C)CCC(C)CCCC(=CCC1=C(C)C(=O)c2ccccc2C1=O)C SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- INAAIJLSXJJHOZ-UHFFFAOYSA-N pibenzimol Chemical compound C1CN(C)CCN1C1=CC=C(N=C(N2)C=3C=C4NC(=NC4=CC=3)C=3C=CC(O)=CC=3)C2=C1 INAAIJLSXJJHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- HRGDZIGMBDGFTC-UHFFFAOYSA-N platinum(2+) Chemical compound [Pt+2] HRGDZIGMBDGFTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003171 plicamycin Drugs 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 239000000583 progesterone congener Substances 0.000 description 1
- 108010029020 prolylglycine Proteins 0.000 description 1
- 229960003712 propranolol Drugs 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 239000003528 protein farnesyltransferase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 1
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 229960005567 rebeccamycin Drugs 0.000 description 1
- INSACQSBHKIWNS-QZQSLCQPSA-N rebeccamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=C3N=C4[C](Cl)C=CC=C4C3=C3C(=O)NC(=O)C3=C2C2=CC=CC(Cl)=C21 INSACQSBHKIWNS-QZQSLCQPSA-N 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 108020004418 ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 1
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 1
- VHXNKPBCCMUMSW-FQEVSTJZSA-N rubitecan Chemical compound C1=CC([N+]([O-])=O)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VHXNKPBCCMUMSW-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- 229950009213 rubitecan Drugs 0.000 description 1
- 235000002020 sage Nutrition 0.000 description 1
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical class O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 1
- 125000005630 sialyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000001599 sigmoid colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 101150101156 slc51a gene Proteins 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- JJGWLCLUQNFDIS-GTSONSFRSA-M sodium;1-[6-[5-[(3as,4s,6ar)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]hexanoyloxy]-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].O=C1C(S(=O)(=O)[O-])CC(=O)N1OC(=O)CCCCCNC(=O)CCCC[C@H]1[C@H]2NC(=O)N[C@H]2CS1 JJGWLCLUQNFDIS-GTSONSFRSA-M 0.000 description 1
- DCQXTYAFFMSNNH-UHFFFAOYSA-M sodium;2-[bis(2-hydroxyethyl)amino]ethanol;acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O.OCCN(CCO)CCO DCQXTYAFFMSNNH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940035044 sorbitan monolaurate Drugs 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 230000010473 stable expression Effects 0.000 description 1
- 238000007447 staining method Methods 0.000 description 1
- SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M stearalkonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N taxane Chemical class C([C@]1(C)CCC[C@@H](C)[C@H]1C1)C[C@H]2[C@H](C)CC[C@@H]1C2(C)C DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N 0.000 description 1
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 1
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 1
- 238000012956 testing procedure Methods 0.000 description 1
- 229960002372 tetracaine Drugs 0.000 description 1
- GKCBAIGFKIBETG-UHFFFAOYSA-N tetracaine Chemical compound CCCCNC1=CC=C(C(=O)OCCN(C)C)C=C1 GKCBAIGFKIBETG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052716 thallium Inorganic materials 0.000 description 1
- BKVIYDNLLOSFOA-UHFFFAOYSA-N thallium Chemical compound [Tl] BKVIYDNLLOSFOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 description 1
- 229960000187 tissue plasminogen activator Drugs 0.000 description 1
- 229940044693 topoisomerase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 229940117013 triethanolamine oleate Drugs 0.000 description 1
- 239000000439 tumor marker Substances 0.000 description 1
- 230000005760 tumorsuppression Effects 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019168 vitamin K Nutrition 0.000 description 1
- 239000011712 vitamin K Substances 0.000 description 1
- 150000003721 vitamin K derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 229940046010 vitamin k Drugs 0.000 description 1
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 108010027345 wheylin-1 peptide Proteins 0.000 description 1
- VWQVUPCCIRVNHF-UHFFFAOYSA-N yttrium atom Chemical compound [Y] VWQVUPCCIRVNHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1027—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against receptors, cell-surface antigens or cell-surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1045—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1045—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants
- A61K51/1057—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against animal or human tumor cells or tumor cell determinants the tumor cell being from liver or pancreas
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
- A61K51/1093—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody conjugates with carriers being antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
- C07K16/3076—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells against structure-related tumour-associated moieties
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57438—Specifically defined cancers of liver, pancreas or kidney
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/577—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor involving monoclonal antibodies binding reaction mechanisms characterised by the use of monoclonal antibodies; monoclonal antibodies per se are classified with their corresponding antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
- A61K2039/6031—Proteins
- A61K2039/6081—Albumin; Keyhole limpet haemocyanin [KLH]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/626—Diabody or triabody
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
- C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
- C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/77—Internalization into the cell
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биохимии. Описана группа изобретений, включающая в себя выделенное антитело или его функциональный фрагмент, которое связывается с сиалированным антигеном Льюисаa, выделенный полинуклеотид, кодирующий тяжелую цепь вышеуказанного антитела или его функционального фрагмента, выделенный полинуклеотид, кодирующий легкую цепь вышеуказанного антитела или его функционального фрагмента, конъюгат, который связывается с сиалированным антигеном Льюисаа, содержащий вышеуказанное антитело или его функциональный фрагмент, фармацевтическую композицию для лечения заболевания, способ лечения или профилактики заболевания, где указанным заболеванием является злокачественное или опухолевое образование с клетками, экспрессирующими сиалированный антиген Льюисаа, и способ обнаружения опухоли у пациента, включающий введение вышеуказанного конъюгата. Изобретение расширяет арсенал средств для связывания с сиалированным антигеном Льюисаа. 7 н. и 16 з.п. ф-лы, 25 ил., 12 табл., 4 пр.
Description
По настоящей заявке испрашивается преимущество приоритета предварительной заявки США с серийным номером 61/870137, поданной 26 августа 2013 г., полное содержание которой включено в данное описание в качестве ссылки.
Это изобретение сделано при поддержке правительства с номером гранта CA-128362, присужденного Национальным институтом рака, NIH. Правительство имеет определенные права на данное изобретение.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОМУ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение в целом относится к антителам, направленным против сиалированного антигена Льюисаа (sLea), и более конкретно к полинуклеотидам, кодирующим антитела против sLea, и соответствующим кодируемым антителам или их фрагментам.
Пассивное введение антител, направленных против опухолевых антигенов, может уничтожать опухолевые клетки и ранние метастазы в процессе развития рака. Это лечение может также иметь значительное влияние на рецидивы рака. Антитела, направленные против специфических опухолевых углеводов, могут быть полезными кандидатами при таком лечении рака. Например, многие моноклональные антитела, направленность которых ограничена опухолью, вырабатываемые в результате иммунизации мышей раковыми клетками человека, как показано, направлены против углеводных антигенов, экспрессируемых на клеточной поверхности в виде гликолипидов или гликопротеинов. Углевод sLea, как показано, экспрессируется в опухолях желудочно-кишечного тракта. Экспрессия sLea, как также обнаружено, вносит вклад в метастатический потенциал и коррелирует с повышенным метастатическим потенциалом при развитии рака толстой кишки человека и аденокарциномы поджелудочной железы. Тем не менее, химия углеводов является довольно сложной, и клиническая разработка антител, которые распознают такие специфические опухолевые углеводы, развивается медленно.
Карцинома поджелудочной железы является одной из самых агрессивных аденокарцином и часто связана с плохим прогнозом. Карцинома поджелудочной железы рассматривается как четвертая ведущая причина смертности от рака. Несмотря на успехи в скрининге различных карцином, надежность обнаружения злокачественных поражений, возникающих в поджелудочной железе, остается на низком уровне. Позитронно-эмиссионная томография с использованием фтордезоксиглюкозы (FDG-PET) требуется для выявления и определения стадии рака поджелудочной железы. Тем не менее, FDG-PET не чувствительна к дифференциальной диагностике панкреатита и злокачественных новообразований, и проблематичным остается определение стадии при небольших первичных поражениях (<7 мм) и печеночных метастазах (<1 см). Один диагностический метод скрининга, используемый для мониторинга статуса протоковой аденокарциномы поджелудочной железы (PDAC) у больных, включает обнаружение повышенных уровней циркулирующего антигена sLea в сыворотке крови. Циркулирующий антиген sLea>37 Ед/мл у больных указывает на рецидив рака. Однако развитие альтернативных диагностических подходов, которые используют такие специфические опухолевые углеводы, происходит медленно.
Таким образом, существует необходимость в идентификации и выработке антител, которые специфически распознают специфические опухолевые углеводы, такие как sLea, для лечения рецидивирующих форм рака и для обнаружения злокачественных поражений и метастазов. Настоящее изобретение удовлетворяет эту потребность и обеспечивает связанные с этим преимущества.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В соответствии с настоящим изобретением в настоящем документе предлагаются композиции для получения антител или их функциональных фрагментов, которые связываются с sLea. Композиции включают выделенный полинуклеотид, кодирующий антитело или его функциональный фрагмент, где антитело включает вариабельный домен тяжелой цепи (VH), который имеет аминокислотную последовательность, представленную в настоящем документе. Выделенный полинуклеотид по изобретению может также включать последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в данном описании, где последовательность нуклеиновой кислоты кодирует домен VH антитела или его функционального фрагмента.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения выделенный полинуклеотид может кодировать антитело или его функциональный фрагмент, где антитело включает вариабельный домен легкой цепи (VL), который имеет аминокислотную последовательность, представленную в настоящем документе. Выделенный полинуклеотид по изобретению может также включать последовательность нуклеиновой кислоты, представленную в данном описании, где последовательность нуклеиновой кислоты кодирует домен VL антитела или его функционального фрагмента.
Композиции по настоящему изобретению также включают выделенное антитело или его функциональный фрагмент, где антитело связывается с sLea. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к выделенному антителу или его функциональному фрагменту, который связывается с sLea, где антитело или его функциональный фрагмент включает домен VH, имеющий аминокислотную последовательность, представленную в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к выделенному антителу или его функциональному фрагменту, который связывается с sLea, где антитело или его функциональный фрагмент включает домен VL, имеющий аминокислотную последовательность, представленную в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к выделенному антителу или его функциональному фрагменту, который связывается с sLea, где антитело или его функциональный фрагмент включает как домен VH, так и домен VL, где домен VH и домен VL соответственно включают аминокислотную последовательность соответствующих доменов VH и VL изолятов клонов, представленных в настоящем описании.
В некоторых вариантах осуществления в настоящем изобретении предлагается конъюгат, включающий антитело или его функциональный фрагмент, предлагаемые в данном документе, конъюгированные или соединенные рекомбинантным способом с диагностическим агентом, детектируемым агентом или терапевтическим агентом. В некоторых аспектах настоящего изобретения целью является конъюгат по настоящему изобретению, включающий детектируемый агент, который может быть использован в способе обнаружения и/или диагностики образования опухоли. Такие способы могут включать введение эффективного количества конъюгата нуждающемуся в этом индивидууму.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, включающим одно или более антитело или его функциональный фрагмент по изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. В некоторых аспектах настоящее изобретение относится также к способу лечения или профилактики заболевания у нуждающегося в этом индивидуума путем введения терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по настоящему изобретению. В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к введению второго терапевтического агента одновременно или последовательно с антителом или его функциональным фрагментом по изобретению.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На фиг. 1 показана нуклеотидная последовательность и кодируемая аминокислотная последовательность вариабельного домена тяжелой (VH) цепи клона 5B1 и лидирующая последовательность, которая может быть использована для рекомбинантной экспрессии. В верхней части фигуры показано выравнивание между нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 1 и аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 2. Идентифицированы также три области, определяющие комплементарность (CDR1, CDR2 и CDR3).
На фиг. 2 показана нуклеотидная последовательность и кодируемая аминокислотная последовательность вариабельного домена легкой (VL) цепи клона 5B1 и лидирующая последовательность, которая может быть использована для рекомбинантной экспрессии. В верхней части фигуры показано выравнивание между нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 3 и аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 4. Идентифицированы также три области, определяющие комплементарность (CDR1, CDR2 и CDR3).
На фиг. 3 показана нуклеотидная последовательность и кодируемая аминокислотная последовательность вариабельного домена тяжелой (VH) цепи клона 9H3 и лидирующая последовательность, которая может быть использована для рекомбинантной экспрессии. В верхней части фигуры показано выравнивание между нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 5 и аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6. Идентифицированы также три области, определяющие комплементарность (CDR1, CDR2 и CDR3).
На фиг. 4 показана нуклеотидная последовательность и кодируемая аминокислотная последовательность вариабельного домена легкой (VL) цепи клона 9H3 и лидирующая последовательность, которая может быть использована для рекомбинантной экспрессии. В верхней части фигуры показано выравнивание между нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 7 и аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 8. Идентифицированы также три области, определяющие комплементарность (CDR1, CDR2 и CDR3).
На фиг. 5 показана нуклеотидная последовательность и кодируемая аминокислотная последовательность вариабельного домена тяжелой (VH) цепи клона 5H11 и лидирующая последовательность, которая может быть использована для рекомбинантной экспрессии. В верхней части фигуры показано выравнивание между нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 9 и аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 10. Идентифицированы также три области, определяющие комплементарность (CDR1, CDR2 и CDR3).
На фиг. 6 показана нуклеотидная последовательность и кодируемая аминокислотная последовательность вариабельного домена легкой (VL) цепи клона 5H11 и лидирующая последовательность, которая может быть использована для рекомбинантной экспрессии. В верхней части фигуры показано выравнивание между нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 11 и аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 12. Идентифицированы также три области, определяющие комплементарность (CDR1, CDR2 и CDR3).
На фиг. 7 показана нуклеотидная последовательность и кодируемая аминокислотная последовательность вариабельного домена тяжелой (VH) цепи клона 7E3 и лидирующая последовательность, которая может быть использована для рекомбинантной экспрессии. В верхней части фигуры показано выравнивание между нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 13 и аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 14. Идентифицированы также три области, определяющие комплементарность (CDR1, CDR2 и CDR3).
На фиг. 8 показана нуклеотидная последовательность и кодируемая аминокислотная последовательность вариабельного домена легкой (VL) цепи клона 7E3 и лидирующая последовательность, которая может быть использована для рекомбинантной экспрессии. В верхней части фигуры показано выравнивание между нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 15 и аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 16. Идентифицированы также три области, определяющие комплементарность (CDR1, CDR2 и CDR3).
На фиг. 9 показана нуклеотидная последовательность и кодируемая аминокислотная последовательность диатела, обозначаемого как 5B1CysDb, имеющего CDR1, CDR2 и CDR2 как вариабельного домена тяжелой (VH) цепи, так и вариабельного домена легкой (VL) цепи клона 5B1. В верхней части фигуры показано выравнивание между нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 17 и аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 18. Идентифицированы три области, определяющие комплементарность (CDR1, CDR2 и CDR3), обоих доменов VH и VL, обозначенные жирным шрифтом и подчеркиванием текста. Последовательность линкера и полигистидиновой метки (Poly His-Tag) с добавленными аминокислотами также обозначена курсивом и подчеркиванием текста.
На фиг. 10 показана нуклеотидная последовательность и кодируемая аминокислотная последовательность диатела, обозначаемого как 7E3CysDb, имеющего CDR1, CDR2 и CDR2 как вариабельного домена тяжелой (VH) цепи, так и вариабельного домена легкой (VL) цепи клона 7E3. В верхней части фигуры показано выравнивание между нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 19 и аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 20. Идентифицированы три области, определяющие комплементарность (CDR1, CDR2 и CDR3), обоих доменов VH и VL, обозначенные жирным шрифтом и подчеркиванием текста. Последовательность линкера и полигистидиновой метки (Poly His-Tag) с добавленными аминокислотами также обозначена курсивом и подчеркиванием текста.
На фиг. 11, панели A-E, показано связывание антител человека против sLea с опухолевыми клетками, проанализированное с помощью проточной цитометрии. На панели A показаны клетки DMS-79, окрашенные рекомбинантными (r) антителами 5B1, 9H3, 5H11 и 7Е3. На панелях B-F, соответственно, показаны клетки HT29, BXPC3, SW626, SK-MEL28 и Colo205-Luc, окрашенные 1-2 мкг/мл r5Bl или r7E3 плюс IgG- или IgM-специфичными вторичными антителами, как описано в примере I.
На фиг. 12, панели А и В, показана активность CDC антител r5Bl и r7E3 по сравнению с мышиными 121SLE (IgM) в присутствии комплемента человека (Hu C') при измерении относительно клеток DMS-79. Контрольные антитела изотипа человека, Hu IgG и Hu IgM , показали цитотоксичность <4%. Дозозависимый ответ антител r5Bl IgG , r7E3 IgM и 121SLE mIgM показан на панели А. Рассчитанная ЕС50 (мкг/мл) для антител r5Bl (IgG), r7E3 (IgM) и 121SLE (mIgM) показана на панели B.
На фиг. 13, панели A-C, показана зависимая от антител опосредуемая клетками цитотоксичность (ADCC) антител r5Bl. На панели А показана опосредуемая r5Bl ADCC РВМС человека против клеток DMS-79. РВМС тестировали в отношениях E:T от 100:1 до 12,5:1 с опухолевыми клетками DMS-79 в присутствии или в отсутствие 2 мкг/мл r5Bl. На панели B показана опосредуемая r5Bl ADCC первичных NK-клеток человека против клеток DMS-79. NK-клетки тестировали при более низких отношениях E:T от 5:1 до 0,6:1 с опухолевыми клетками DMS-79 в присутствии или в отсутствие 2 мкг/мл r5Bl. На панели С показана ADCC антитела r5Bl при различных концентрациях PBMCs от 2-доноров при отношении E:T=1:100 против опухолевых клеток DMS-79 в присутствии указанных концентраций r5Bl.
На фиг. 14 показана интернализация sLea в клетки BxPC3. Опухолевые клетки BxPC3 поджелудочной железы выращивали в присутствии антител r5Bl (против sLea) или rlB7 (против GD2), связанных с Hum-ZAP, конъюгированным с сапорином IgG против антигенов человека. Через 3 дня измеряли жизнеспособность клеток методом с использованием бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия (МТТ), и значения образцов нормализовывали на значения необработанных культур.
На фиг. 15 показана активность антитела r5Bl в модели ксенотрансплантата с использованием клеток Colo205-luc. Мыши с тяжелым сочетанным иммунодефицитом (SCID) (5 на группу) получали 0,5 миллиона клеток Colo205-luc путем инъекции в хвостовую вену на день 0. Мыши получали 100 мкг r5Bl путем внутрибрюшинной инъекции в дни 1, 7, 14 и 21 (эксперимент 1, Exp1) или в дни 1, 4, 7, 10, 14 и 21 (эксперимент 2, Exp2) в суммарной дозе 600 мкг. Контрольные (Ctrl) животные получали ложные инъекции PBS.
На фиг. 16 показано влияние r5Bl на опухоли Colo205-luc у мышей SCID. Мыши получали 100 мкг , 300 мкг или 1 мг антитела r5Bl на одну инъекцию, как описано в примере I. Контрольные животные получали ложные инъекции PBS.
На фиг. 17 показана флуоресцентная визуализация пяти мышей на группу для мышей, получавших r5Bl, имеющих опухоли Colo205-luc, в день 0 и через 5 недель. Схема получения препаратов мышами представлена на фиг. 16 и описана в примере I.
На фиг. 18, панели А и В, показана противоопухолевая активность в терапевтической модели подкожного ксенотрансплантата с использованием клеток DMS-79. На панели А показано подавление или регрессия опухоли у мышей, получавших 5B1 (только 5B1 или 5B1+cRGD ), по сравнению с получением IgG человека (только IgG или IgG+RGD ) и с контролем с введением PBS . Стрелки указывают на дни введения антитела или PBS. На панели В показаны репрезентативные изображения обработанных мышей. Стрелки указывают на отсутствие какой-либо видимой опухоли.
На фиг. 19, панели A-F, показано связывание 5B1 с различными типами опухолей. Панель А представляет собой поджелудочную железу, протоковую аденокарциному, стадию III опухоли. Панель B представляет собой сигмовидную кишку, карциному стадии IIIB опухоли. Панель С представляет собой легкое, аденокарциному, стадию IB опухоли. Панель D представляет собой мочевой пузырь, мукозную аденокарциному, стадию IV опухоли. Панель Е представляет собой яичник, метастатическую карциному опухоли толстой кишки. Панель F представляет собой лимфатический узел, метастатическую карциному, стадию IIIA опухоли.
На фиг. 20 показаны серийные изображения проекции максимальной интенсивности (MIP) PET, полученные через 2-120 час после внутривенного введения антитела 5Bl, радиоактивно меченного 89Zr (89Zr-5Bl), самкам мышей SCID с подкожно имплантированными опухолями поджелудочной железы BxPC3. Изображение PET-MIP демонстрирует высокий захват опухолью с клиренсом неспецифически связанной метки уже через 24 часа после инъекции (h p.i.)
На фиг. 21 приведены результаты биологического распределения, которые согласуются с данными PET фиг. 20, с наблюдаемым захватом опухолью 84,73±2,28% ID/г. Из-за малой массы опухоли гистограмма захвата опухолью, выраженная в % ID, в зависимости от времени, изображена на гистограмме во вставке. % ID опухоли показывает значительный захват опухолью 89Zr-5Bl во всех временных точках, и, по меньшей мере, семикратное превышение неспецифического захвата 89Zr-IgG. Конкурентное ингибирование немеченым 5B1 (200 мкг) показывает уменьшение аккумуляции в опухоли.
На фиг. 22, панели A-C, показаны изображения PET-MIP мышей, несущих DMS79 (панель А) и ксенотрансплантатов Colo205-luc (панель B). Указана визуализация PET-MIP очертаний опухоли (T), сердца (H) и печени (L) с помощью 89Zr-5Bl. В модели ксенотрансплантатов Colo205-luc колоректального рака продемонстрирована аккумуляция 89Zr-5Bl, достигающая максимума через 24 час, с последующим снижением, в то время как выявлен рост неспецифического связывания в печени (панель С).
На фиг. 23 показано зависимое от дозы ингибирование и регрессия роста опухоли в модели ксенотрансплантата мелкоклеточной легочной карциномы DMS-79, при лечении последовательным совместным введением антитела 5B1 и таксола (паклитаксела). Большие стрелки на оси Х указывают на лечение 5B1. Совместное введение антитела 5B1 и таксола существенно ограничивало рост опухоли и приводило к регрессии опухоли по сравнению с контрольным IgG человека (HuIgG) или антителом 5B1 и таксолом, вводимыми по отдельности. Показаны значимые отличия от контроля с помощью 2-факторного дисперсионного анализа ANOVA с р<0,01 (**) и р<0,001 (***). N=5.
На фиг. 24 показано ингибирование роста опухоли в модели ксенотрансплантата карциномы поджелудочной железы BxPC3 при лечении последовательным совместным введением антитела 5B1 и таксола (паклитаксела). Большие стрелки на оси Х указывают на лечение таксолом плюс 5B1, в то время как маленькие стрелки указывают на лечение только 5B1. Совместное введение антитела 5B1 и таксола существенно ограничивало рост опухоли по сравнению с контролями (PBS - Ctrl; IgG человека - HuIgG) или антителом 5B1 и таксолом, вводимыми по отдельности.
На фиг. 25, панели А и В, показаны репрезентативные изображения мышей, которым ортотопически трансплантировали ксенотрансплантаты опухолей поджелудочной железы BxPC3-luc. Панель A: совместная регистрация с помощью FDG-PET и компьютерной томографии (КТ) (слева) планарных секций FDG-PET с изображением только (справа) минимально обнаруживаемой метки в опухоли с высоким захватом в тканях с высоким метаболизмом (т.е. в сердце, Н, и мочевом пузыре, В). Панель B: PET изображение той же мыши, выявляемое с помощью радиоактивно меченного 89Zr антитела 5Bl (89Zr-5Bl), регистрируемое совместно с КТ, показало детекцию исключительно опухоли в случае ксенотрансплантатов опухоли BxPC3-luc.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Углеводы, экспрессируемые на поверхности опухолевых клеток, могут представлять собой мишень для пассивной иммунотерапии. Композиции, представленные в настоящем описании, основаны, по меньшей мере, частично, на идентификации и характеристике антител человека, которые вырабатываются лимфоцитами крови индивидуумов, иммунизированных вакциной, представляющей собой конъюгат сиалированного антигена Льюисаа и гемоцианина фиссуреллии (sLea-KLH). Идентифицированы, по меньшей мере, четыре антитела с высоким сродством к sLea (5B1, 9H3, 5H11 и 7E3). Два из этих антител экспрессировали в виде рекомбинантных антител (r5Bl и r7E3) и дополнительно характеризовали в моделях in vitro и in vivo. Оба антитела при анализе характеризовались сильной, зависимой от комплемента цитотоксичностью (CDC), и антитело 5B1 также было высокоактивным в зависимой от антител цитотоксичности. Эффективность антител in vivo тестировали в двух моделях ксенотрансплантатов с использованием либо опухолевых клеток Colo205, либо опухолевых клеток DMS-79, пересаживаемых мышам с тяжелым сочетанным иммунодефицитом (SCID). Междисциплинарная актуальность осуществления изобретения, предлагаемого в настоящем документе, рассматривается в 2 аспектах: во-первых, подход, предлагаемый в настоящем описании, показывает, что ответ в виде антител, вызванный вакциной sLea-KLH, пригоден в качестве вакцины как таковой. Во-вторых, самые мощные антитела, которые вырабатываются при клиническом испытании, могут быть сохранены и, в конечном счете, использованы в качестве терапевтических агентов или для создания терапевтических агентов для таргетной терапии рака у населения. Высокое сродство антител, представленных в настоящем описании, и их высокие эффекторные функции поддерживают этот междисциплинарный потенциал.
Используемый в данном описании термин «антитело» предназначен для обозначения полипептидного продукта В-клеток в пределах иммуноглобулинового класса полипептидов, который способен связываться с конкретной антигенной молекулой, и состоит из двух идентичных пар полипептидных цепей, где каждая пара имеет одну тяжелую цепь (приблизительно 50-70 кДа) и одну легкую цепь (приблизительно 25 кДа), и каждый аминоконцевой участок каждой цепи включает вариабельную область от приблизительно 100 до приблизительно 130 или более аминокислот и каждый карбоксиконцевой участок каждой цепи включает константную область (смотри Borrebaeck (ed.) (1995) Antibody Engineering, Second Edition, Oxford University Press.; Kuby (1997) Immunology, Third Edition, W.H. Freeman and Company, New York). В контексте настоящего изобретения конкретная антигенная молекула, которая может связаться с антителом по настоящему изобретению, включает таргетный углевод sLea.
Термин «от человека» при использовании в отношении антитела или его функционального фрагмента обозначает антитело или его функциональный фрагмент, которые имеют вариабельную область от человека и/или константную область от человека или их часть, соответствующую последовательностям иммуноглобулинов зародышевой линии человека. Такие последовательности иммуноглобулинов зародышевой линии человека описаны Kabat et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242. Антитело человека в контексте настоящего изобретения может включать антитело, которое связывается с sLea и кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, которая представляет собой существующий в природе соматический вариант последовательности нуклеиновой кислоты иммуноглобулина зародышевой линии человека. Иллюстративные способы получения антител человека приведены в примере I, но может быть использован любой способ, хорошо известный специалистам в данной области техники.
Термин «моноклональное антитело» обозначает антитело, которое является продуктом одного клона клеток или гибридомы или популяции клеток, происходящих от одной клетки. Моноклональные антитела также предназначены для обозначения антитела, продуцируемого рекомбинантными методами из генов тяжелых и легких цепей, кодирующих иммуноглобулин, с получением одного варианта молекулы иммуноглобулина. Аминокислотные последовательности антител в пределах препарата моноклонального антитела по существу однородны, и связывающая активность антител в таком препарате демонстрирует, по существу, одну и ту же антигенсвязывающую активность. В противоположность этому поликлональные антитела получают из различных В-клеток в популяции, они представляют собой сочетание молекул иммуноглобулинов, которые связывают специфический антиген. Каждый иммуноглобулин поликлональных антител может связываться с отличным эпитопом того же самого антигена. Способы получения как моноклональных антител, так и поликлональных антител хорошо известны в данной области техники (Harlow and Lane., Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press (1989) and Borrebaeck (ed.), Antibody Engineering: A Practical Guide, W.H. Freeman and Co., Publishers, New York, pp. 103-120 (1991)).
Используемый в данном описании термин «функциональный фрагмент» при применении в отношении антитела предназначен для обозначения части антитела, включая полипептиды тяжелой или легкой цепи, которые сохраняют некоторую или всю связывающую активность антитела, из которого этот фрагмент произошел. Такие функциональные фрагменты могут включать, например, Fd, Fv, Fab, F(аb'), F(аb)2, F(аb')2, одноцепочечный Fv (scFv), диатело, триатело, тетратело и минитело. Другие функциональные фрагменты могут включать, например, полипептиды тяжелой или легкой цепи, полипептиды вариабельной области или полипептиды CDR, или их части, до тех пор, пока такие функциональные фрагменты сохраняют связывающую активность. Такие связывающие фрагменты антител могут быть найдены как описанные, например, в Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, New York (1989); Myers (ed.), Molec. Biology and Biotechnology: A Comprehensive Desk Reference, New York: VCH Publisher, Inc.; Huston et al., Cell Biophysics, 22:189-224 (1993); Plückthun and Skerra, Meth. Enzymol., 178:497-515 (1989) и в Day, E.D., Advanced Immunochemistry, Second Ed., Wiley-Liss, Inc., New York, NY (1990).
Термин «тяжелая цепь» при использовании в отношении антитела относится к полипептидной цепи приблизительно 50-70 кДа, в которой аминоконцевой участок включает вариабельную область от приблизительно 120 до 130 или более аминокислот и карбоксиконцевой участок, который включает константную область. Константная область может представлять собой один из пяти различных типов, обозначаемых как альфа (α), дельта (δ), эпсилон (ε), гамма (γ) и мю (μ), на основании аминокислотной последовательности константной области тяжелой цепи. Различные тяжелые цепи отличаются по размеру: α, δ и γ содержат приблизительно 450 аминокислот, а μ и ε содержат приблизительно 550 аминокислот. В сочетании с легкой цепью эти различные типы тяжелых цепей приводят к пяти хорошо известным классам антител, IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, соответственно, включая четыре подкласса IgG, а именно: IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4. Тяжелая цепь может представлять собой тяжелую цепь от человека.
Термин «легкая цепь» при использовании в отношении антитела относится к полипептидной цепи приблизительно 25 кДа, в которой аминоконцевой участок включает вариабельную область от приблизительно 100 до приблизительно 110 или более аминокислот и карбоксиконцевой участок включает константную область. Приблизительная длина легкой цепи составляет от 211 до 217 аминокислот. Существует два различных типа, называемых каппа (κ) или лямбда (λ), на основе аминокислотной последовательности константных доменов. Аминокислотные последовательности легкой цепи хорошо известны в данной области техники. Легкая цепь может представлять собой легкую цепь от человека.
Термин «вариабельный домен» или «вариабельная область» относится к части легких или тяжелых цепей антитела, которая, как правило, расположена на аминоконце легкой или тяжелой цепи и имеет длину от приблизительно 120 до 130 аминокислот в тяжелой цепи и приблизительно от 100 до 110 аминокислот в легкой цепи, и используется для связывания и специфичности каждого конкретного антитела в отношении его конкретного антигена. Вариабельные домены в значительной степени различаются по последовательности между различными антителами. Вариабельность последовательности сконцентрирована в CDR, в то время как менее вариабельные участки в вариабельной области называются каркасными областями (FR). CDRs легкой и тяжелой цепей ответственны в первую очередь за взаимодействие антитела с антигеном. Нумерация положений аминокислот, используемая в данном документе, находится в соответствии с индексом EU, как у Kabat et al. (1991) Sequences of proteins of immunological interest. (U.S. Department of Health and Human Services, Washington, D.C.) 5th ed. Вариабельная область может представлять собой вариабельную область от человека.
CDR относится к одной из трех гипервариабельных областей (H1, H2 или H3) в пределах некаркасной области β-складок VH каркаса иммуноглобулина (Ig или антитела) или к одной из трех гипервариабельных областей (L1, L2 или L3) в пределах некаркасной области β-складок VL каркаса антитела. Соответственно, CDRs представляют собой последовательности вариабельных областей, рассеянные в пределах последовательностей каркасных областей. Области CDR хорошо известны специалистам в данной области техники и были определены, например, Kabat как области наибольшей гипервариабельности в пределах вариабельных (V) доменов антител (Kabat et al., J. Biol. Chem. 252:6609-6616 (1977); Kabat, Adv. Prot. Chem. 32:1-75 (1978)). Последовательности области CDR также были идентифицированы структурно по Chothia как те остатки, которые не являются частью консервативного каркаса β-складок, и, таким образом, способны адаптироваться к различным конформациям (Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). Оба варианта терминологии хорошо известны специалистам в данной области техники. Положения CDRs в пределах канонического вариабельного домена антитела определены путем сравнения многочисленных структур (Al-Lazikani et al., J. Mol. Biol. 273:927-948 (1997); Morea et al., Methods 20:267-279 (2000)). Поскольку количество остатков в пределах гипервариабельной области варьируется в различных антителах, дополнительные остатки по отношению к каноническим положениям обычно нумеруются как a, b, c и так далее после номера остатка в канонической схеме нумерации вариабельных доменов (Al-Lazikani et al., (1997) выше). Такая номенклатура также хорошо известна специалистам в данной области техники.
Например, обозначения CDRs, определяемые в соответствии либо с Kabat (гипервариабельные), либо с Chothia (структурные), приведены в представленной ниже таблице 1.
Таблица 1
Обозначения CDR |
|||
Kabat1 | Chothia2 | Локализация петли | |
VH CDR1 | 31-35 | 26-32 | связывание B и C цепей |
VH CDR2 | 50-65 | 53-55 | связывание C' и C'' цепей |
VH CDR3 | 95-102 | 96-101 | связывание F и G цепей |
VL CDR1 | 24-34 | 26-32 | связывание B и C цепей |
VL CDR2 | 50-56 | 50-52 | связывание C' и C'' цепей |
VL CDR3 | 89-97 | 91-96 | связывание F и G цепей |
1Нумерация остатков по номенклатуре Kabat et al., выше 2Нумерация остатков по номенклатуре Chothia et al., выше |
Одна или более CDR также может быть включена в молекулу либо ковалентно, либо нековалентно, чтобы сделать ее иммуноадгезином. Иммуноадгезин может включать CDR(s) в качестве части более крупной полипептидной цепи, может ковалентно связывать CDR(s) с другой полипептидной цепью или может включать CDR(s) нековалентно. CDRs позволяют иммуноадгезину связываться с определенным антигеном, представляющим интерес.
Используемый в данном описании термин «выделенный» при применении по отношению к антителу, функциональному фрагменту антитела или полинуклеотиду предназначен для обозначения того, что референсная молекула свободна, по меньшей мере, от одного компонента, встречаемого с ней в природе. Термин включает антитело, функциональный фрагмент антитела или полинуклеотид, которые отделяются от некоторых или всех других компонентов, встречаемых с ними в естественном окружении. Компоненты природной среды для антитела включают, например, эритроциты, лейкоциты, тромбоциты, плазму, белки, нуклеиновые кислоты, соли и питательные вещества. Компоненты природной среды для функционального фрагмента антитела или полинуклеотида включают, например, липидные мембраны, клеточные органеллы, белки, нуклеиновые кислоты, соли и питательные вещества. Антитело, функциональный фрагмент антитела или полинуклеотид по изобретению также могут быть свободны или практически по существу свободны от всех этих компонентов или любого другого компонента клеток, из которых они выделены или получены рекомбинантным способом.
Используемый в данном описании термин «изотип» относится к классу антител, который кодируется генами константных областей тяжелых цепей. Тяжелые цепи данного антитела или функционального фрагмента определяют класс этого антитела или функционального фрагмента: IgM, IgG, IgA, IgD или IgE. Каждый класс может иметь либо κ, либо λ легкие цепи. Термин «подкласс» относится к минорным различиям в аминокислотных последовательностях тяжелых цепей, которые определяют деление на подклассы. У человека существует два подкласса IgA (подклассы IgA1 и IgA2) и четыре подкласса IgG (подклассы IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4). Такие классы и подклассы хорошо известны специалистам в данной области техники.
Термины «связывается» или «связывание», используемые в данном описании, относятся к взаимодействию между молекулами с образованием комплекса. Взаимодействие может быть, например, нековалентным взаимодействием, включающим водородные связи, ионные связи, гидрофобные взаимодействия и/или взаимодействия Ван-дер-Ваальса. Комплекс может также включать связывание двух или более молекул, удерживаемых вместе с помощью ковалентных или нековалентных связей, взаимодействий или сил. Связывание антитела или его функционального фрагмента может быть определено с помощью, например, твердофазного иммуноферментного анализа, метода, представленного в примере I, или любого другого из ряда методов, которые хорошо известны специалистам в данной области техники.
Сила суммарных нековалентных взаимодействий между одним антигенсвязывающим сайтом на антителе или его функциональном фрагменте и одним эпитопом молекулы-мишени, такой как sLea, представляет собой сродство антитела или его функционального фрагмента к этому эпитопу. Отношение ассоциации антитела или его функционального фрагмента c одновалентным антигеном (k1) к их диссоциации (k-1) (k1/k-1) представляет собой константу ассоциации К, которая является мерой сродства. Величина К варьируется для различных комплексов антитела или его функционального фрагмента с антигеном и зависит как от k1, так и от и k-1. Константа ассоциации К для антитела или его функционального фрагмента по изобретению может быть определена с использованием любого из методов, предлагаемых в данном документе, или с помощью любого другого метода, хорошо известного специалистам в этой области техники.
Сродство к одному сайту связывания не всегда отражает истинную силу взаимодействия между антителом или его функциональным фрагментом и антигеном. Когда сложные антигены, содержащие множественные, повторяющиеся антигенные детерминанты, такие как поливалентный sLea, вступают в контакт с антителами, содержащими множественные сайты связывания, взаимодействие антитела или его функционального фрагмента с антигеном на одном сайте увеличивает вероятность взаимодействия на втором сайте. Прочность таких множественных взаимодействий между поливалентным антителом и антигеном называется авидностью. Авидность антитела или его функционального фрагмента может быть лучшим показателем его связывающей способности, чем сродство его отдельных участков связывания. Например, высокая авидность может компенсировать низкую аффинность, как иногда обнаруживается для пентамерных антител IgM, которые могут иметь более низкое сродство, чем IgG, но высокая авидность IgM, происходящая в результате их мультивалентности, позволяет им эффективно связывать антиген.
Специфичность антитела или его функционального фрагмента относится к способности отдельного антитела или его функционального фрагмента к взаимодействию только с одним антигеном. Антитело или его функциональный фрагмент можно рассматривать как специфические, когда они могут отличать различия в первичной, вторичной или третичной структуре антигена или изомерных форм антигена.
Термин «полинуклеотид» относится к полимерной форме нуклеотидов любой длины, или дезоксирибонуклеотидов, или рибонуклеотидов, или их аналогов. Последовательность полинуклеотида состоит из четырех нуклеотидных оснований: аденина (А); цитозина (С); гуанина (G); тимина (Т); и урацила (U) вместо тимина, когда полинуклеотид представляет собой РНК. Таким образом, термины «нуклеотидная последовательность» или «последовательность нуклеиновой кислоты» представляют собой буквенное представление полинуклеотида. Полинуклеотид может включать ген или фрагмент гена (например, зонд, праймер, EST или тег SAGE), экзоны, интроны, матричную РНК (мРНК), транспортную РНК, рибосомную РНК, рибозимы, кДНК, рекомбинантные полинуклеотиды, разветвленные полинуклеотиды, плазмиды, векторы, выделенную ДНК любой последовательности, выделенную РНК любой последовательности, зонды нуклеиновых кислот и праймеры. Полинуклеотид также относится как к двухцепочечным, так и к одноцепочечным молекулам. Если не указано или не требуется иное, любой вариант осуществления настоящего изобретения, в котором предлагается полинуклеотид, охватывает как двухцепочечную форму, так и каждую из двух комплементарных одноцепочечных форм, известных или предсказанных как составляющие двухцепочечную форму. Понятно, что выделенные полинуклеотиды и нуклеиновые кислоты, описанные в настоящем документе, направлены на не встречающиеся в природе полинуклеотиды и нуклеиновые кислоты. Не встречающиеся в природе полинуклеотиды и нуклеиновые кислоты могут включать, но не ограничиваются этим, кДНК и химически синтезированные молекулы.
Термин «кодировать» или его грамматические эквиваленты при использовании в отношении полинуклеотидов относится к полинуклеотиду в его нативном состоянии или к полинуклеотиду, который может быть транскрибирован с получением мРНК, которая затем транслируется в полипептид и/или его фрагмент, при использовании методов, хорошо известных специалистам в этой области техники. Антисмысловая цепь комплементарна такому полинуклеотиду, и кодирующая последовательность может быть выведена из нее.
Выражение «терапевтический агент» относится к любому агенту, который может использоваться для лечения, управления или облегчения заболевания, связанного с экспрессией sLea, и/или симптома, связанного с ним. В некоторых вариантах осуществления терапевтический агент относится к антителу или его функциональному фрагменту по изобретению. В других вариантах осуществления терапевтический агент относится к агенту, отличному от антитела или его функционального фрагмента по изобретению. Терапевтический агент может представлять собой агент, который хорошо известен как пригодный для лечения, управления или облегчения заболевания, связанного с экспрессией sLea, и/или симптома, связанного с ним, или применялся, или в настоящее время применяется для этих целей.
Выражение «диагностический агент» относится к веществу, вводимому индивидууму с целью диагностики заболевания. Такие вещества могут быть использованы для выявления, точного определения и/или определения локализации процесса, вызывающего заболевание. В некоторых вариантах осуществления диагностический агент включает вещество, конъюгируемое с антителом или с его функциональным фрагментом согласно изобретению, которое при введении индивидууму или при контакте с образцом от индивидуума помогает в диагностике рака или образования опухоли.
Выражение «детектируемый агент» относится к веществу, которое может быть использовано для установления наличия или присутствия желаемой молекулы, такой как антитело или его функциональный фрагмент согласно изобретению, в образце или у индивидуума. Детектируемый агент может представлять собой вещество, которое можно визуализировать, или вещество, которое можно определить и/или измерить другим способом (например, путем количественной оценки).
«Эффективное количество» обозначает количество, достаточное для индукции благоприятных или желаемых результатов. Эффективное количество можно вводить в один или несколько приемов, употреблений или дозировок. Такая доставка зависит от числа переменных, включая период времени, в течение которого должна использоваться индивидуальная единица лекарственной формы, биодоступность агента, путь введения и т.п.
Выражение «терапевтически эффективное количество», используемое в данном описании, относится к количеству терапевтического агента (например, антитела или его функционального фрагмента, предлагаемого в настоящем описании, или любого другого терапевтического агента, предлагаемого в настоящем описании), которое является достаточным для уменьшения и/или ослабления тяжести и/или продолжительности данного заболевания и/или симптома, связанного с ним. Терапевтически эффективное количество терапевтического агента может быть количеством, необходимым для уменьшения или облегчения распространения или прогрессирования данного заболевания, снижения или уменьшения рецидива, развития или возникновения данного заболевания, и/или для улучшения или усиления профилактического или терапевтического действия другого лечения (например, лечения, отличного от введения антитела или его функционального фрагмента, представленного в настоящем описании).
Соединение «сиалированный антиген Льюисаа» (sLea), также известное как сиалил-sLea, сиалил-Льюиса A, сиалированный антиген Льюиса a и СА 19.9, представляет собой тетрасахарид с молекулярной формулой C31H52N2O23 и молярной массой 820,74 г/моль. Структура sLea может включать Neu5Aca2-3Galβ1-3(Fucαl-4)GlcNAcβ и Neu5Gcα2-3Galβ1-3(Fucαl-4) GlcNAcβ. sLea широко экспрессируется на опухолях желудочно-кишечного тракта и используется в качестве опухолевого маркера при раке поджелудочной железы и толстой кишки. sLea также представляет собой известный лиганд для E-селектина, также известного как молекула эндотелиальной адгезии лейкоцитов (ELAM).
В некоторых вариантах осуществления в настоящем изобретении предлагается выделенный полинуклеотид, кодирующий тяжелую или легкую цепь антитела, или его функциональный фрагмент, где антитело или его функциональный фрагмент получены с использованием тяжелой или легкой цепи антитела, связывающейся с sLea. Соответственно, в некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, кодирующему антитело или его функциональный фрагмент, где антитело включает домен VH, который имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из остатков 20-142 SEQ ID NO: 2, остатков 20-142 SEQ ID NO: 6, остатков 20-142 SEQ ID NO: 10, и остатков 20-145 SEQ ID NO: 14. Выделенный полинуклеотид по изобретению также может включать последовательность нуклеиновой кислоты из остатков 58-426 последовательности SEQ ID NO: 1, остатков 58-426 SEQ ID NO: 5, остатков 58-426 SEQ ID NO: 9 или остатков 58-435 из SEQ ID NO: 13, где последовательность нуклеиновой кислоты кодирует домен VH антитела или его функционального фрагмента.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения выделенный полинуклеотид может кодировать антитело или его функциональный фрагмент, где антитело включает домен VL, который имеет аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из остатков 20-130 SEQ ID NO: 4, остатков 20-129 SEQ ID NO: 8, остатков 20-130 SEQ ID NO: 12 и остатков 23-130 SEQ ID NO: 16. Выделенный полинуклеотид по изобретению может также включать последовательность нуклеиновой кислоты из остатков 58-390 SEQ ID NO: 3, остатков 58-387 SEQ ID NO: 7, остатков 58-390 SEQ ID NO: 11 или остатков 67-390 SEQ ID NO: 15, где последовательность нуклеиновой кислоты кодирует домен VL антитела или его функционального фрагмента.
В другом варианте осуществления в настоящем изобретении предлагается выделенный полинуклеотид, кодирующий тяжелую или легкую цепь антитела или его функциональный фрагмент, где тяжелая или легкая цепь антитела или его функциональный фрагмент, кодируемые полинуклеотидом по изобретению, имеют одну или более областей, определяющих комплементарность (CDRs), изображенных на фиг. 1-8 или приведенных в таблице 2. Антитело или его функциональный фрагмент, которые включают одну или более CDRs, могут специфически связываться с sLea, как описано в настоящем документе. Специфическое связывание с sLea может включать специфичность, аффинность и/или авидность, как представлено в примере I, для любого из антител, представленных в настоящем описании. В другом аспекте антитело или его функциональный фрагмент, кодируемые полинуклеотидами по изобретению, могут включать активность, связанную с зависимой от комплемента цитотоксичностью (CDC), и/или активность, связанную с зависимой от антител клеточно-опосредуемой цитотоксичностью (ADCC) любого из изолятов клонов 5B1, 9H3, 5H11 или 7Е3, описанных в настоящем документе. Методы оценки специфичности, аффинности и/или авидности антитела или его функционального фрагмента хорошо известны в данной области техники, и иллюстративные методы приведены в данном описании.
Таблица 2
CDRs изолятов клонов |
||||||
Остатки нуклеиновой кислоты (SEQ ID NO:) |
Аминокислотные остатки (SEQ ID NO:) |
|||||
Вариабельный домен | CDR1 | CDR2 | CDR3 | CDR1 | CDR2 | CDR3 |
5B1 VH | 133-156 (NO: 1) |
208-231 (NO: 1) |
346-393 (NO: 1) |
55-62 (NO: 2) |
70-77 (NO: 2) |
116-131 (NO: 2) |
5B1 VL | 133-156 (NO: 3) |
208-216 (NO: 3) |
325-360 (NO: 3) |
45-52 (NO: 4) |
70-72 (NO: 4) |
109-120 (NO: 4) |
9H3 VH | 133-156 (NO: 5) |
208-231 (NO: 5) |
346-393 (NO: 5) |
45-52 (NO: 6) |
70-77 (NO: 6) |
116-131 (NO: 6) |
9H3 VL | 133-156 (NO: 7) |
208-216 (NO: 7) |
325-357 (NO: 7) |
45-52 (NO: 8) |
70-72 (NO: 8) |
109-119 (NO: 8) |
5H11 VH | 133-156 (NO: 9) |
208-231 (NO: 9) |
346-393 (NO: 9) |
45-52 (NO: 10) |
70-77 (NO: 10) |
116-131 (NO: 10) |
5H11 VL | 134-156 (NO: 11) |
208-216 (NO: 11) |
325-360 (NO: 11) |
45-52 (NO: 12) |
70-72 (NO: 12) |
109-120 (NO: 12) |
7E3 VH | 133-156 (NO: 13) |
208-231 (NO: 13) |
346-402 (NO: 13) |
45-52 (NO: 13) |
70-77 (NO: 13) |
116-134 (NO: 14) |
7E3 VK | 145-162 (NO: 15) |
214-222 (NO: 15) |
331-360 (NO: 15) |
49-53 (NO: 16) |
72-74 (NO: 16) |
111-120 (NO: 16) |
В некоторых вариантах осуществления антитело или его функциональный фрагмент по изобретению включает менее шести CDRs. В некоторых вариантах осуществления антитело или его функциональный фрагмент включает одну, две, три, четыре или пять CDRs, выбранных из группы, состоящей из VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2 и/или VL CDR3. В конкретных вариантах осуществления антитело или его функциональный фрагмент включает одну, две, три, четыре или пять CDRs, выбранных из группы, состоящей из VH CDR1, VH CDR2, VH CDR3, VL CDR1, VL CDR2 и/или VL CDR3 изолятов клонов 5B1, 9H3, 5H11 или 7Е3, описанных в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления в настоящем изобретении предлагается выделенный полинуклеотид, который кодирует антитело или его функциональный фрагмент, где антитело или его функциональный фрагмент включает вариабельный домен тяжелой (VH) цепи, имеющий аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3, изолятов клонов 5B1, 9H3, 5H11 или 7Е3. Такие домены VH могут включать аминокислотные остатки 55-62, 70-77 и 116-131 SEQ ID NO: 2 или, альтернативно, аминокислотные остатки 45-52, 70-77 и 116-131 SEQ ID NO: 6, или, альтернативно, аминокислотные остатки 45-52, 70-77 и 116-131 SEQ ID NO: 10, или, альтернативно, аминокислотные остатки 45-52, 70-77 и 116-134 SEQ ID NO: 14. В другом аспекте нуклеотидная последовательность, кодирующая CDR1, CDR2 и CDR3 домена VH, может соответственно включать нуклеотидную последовательность остатков 133-156, 208-231 и 346-393 SEQ ID NO: 1, или, альтернативно, нуклеотидную последовательность остатков 133-156, 208-231 и 346-393 SEQ ID NO: 5, или, альтернативно, нуклеотидную последовательность остатков 133-156, 208-231 и 346-393 SEQ ID NO: 9, или, альтернативно, нуклеотидную последовательность остатков 133-156, 208-231, 346-402 SEQ ID NO: 13.
В другом варианте осуществления в настоящем изобретении предлагается выделенный полинуклеотид, кодирующий антитело или его функциональный фрагмент, где антитело включает вариабельный домен легкой (VL) цепи, имеющий аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 изолятов клонов 5B1, 9H3, 5H11 или 7Е3. Такой домен VL может включать аминокислотные остатки 45-52, 70-72 и 109-120 SEQ ID NO: 4, или, альтернативно, аминокислотные остатки 45-52, 70-72 и 109-119 SEQ ID NO: 8, или, альтернативно, аминокислотные остатки 45-52, 70-72 и 109-120 SEQ ID NO: 12, или, альтернативно, аминокислотные остатки 49-53, 72-74 и 111-120 SEQ ID NO: 16. В другом аспекте нуклеотидная последовательность, кодирующая CDR1, CDR2 и CDR3 домена VH, может соответственно включать нуклеотидную последовательность остатков 133-156, 208-216 и 325-360 SEQ ID NO: 3, или, альтернативно, нуклеотидную последовательность остатков 133-156, 208-216 и 325-357 SEQ ID NO: 7, или, альтернативно, нуклеотидную последовательность остатков 134-156, 208-216 и 325-360 SEQ ID NO: 11, или, альтернативно, нуклеотидную последовательность остатков 145-162, 214-222 и 331-360 SEQ ID NO: 15.
В другом варианте осуществления в настоящем изобретении предлагается вариант полинуклеотидов, представленных в настоящем описании. Вариант при использовании в отношении полинуклеотида включает полинуклеотид, имеющий один или более модифицированных нуклеотидов, таких как, но не ограничиваясь этим, метилированный нуклеотид или нуклеотидный аналог. Кроме того, вариант полинуклеотида может включать полинуклеотид, который прерывается ненуклеотидными компонентами. Модификации полинуклеотида могут быть сделаны до или после сборки полинуклеотида с использованием способов, хорошо известных специалистам в данной области техники. Например, полинуклеотид может быть модифицирован после полимеризации путем конъюгации с меченым компонентом с использованием либо ферментативных, либо химических методов (например, как описано Gottfried and Weinhold, 2011, Biochem. Soc. Trans., 39(2):523-628; Paredes et al., 2011, Methods, 54(2):251-259).
Полинуклеотиды могут быть получены, и нуклеотидная последовательность полинуклеотидов определена любым способом, хорошо известным в данной области техники. Так как аминокислотные последовательности вариабельных доменов тяжелой и легкой цепи 5B1, 9H3, 5H11 и 7Е3 известны (смотри, например, SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14 и 16), нуклеотидные последовательности, кодирующие антитела и модифицированные варианты этих антител, могут быть определены с использованием способов, хорошо известных в данной области техники, т.е. кодоны нуклеотидов, известные как кодирующие конкретные аминокислоты, составляют таким образом, чтобы создать нуклеиновую кислоту, которая кодирует антитело. Такой полинуклеотид, кодирующий антитело, может быть составлен из химически синтезированных олигонуклеотидов (например, как описано Kutmeier et al., 1994, BioTechniques 17:242), что вкратце включает синтез перекрывающихся олигонуклеотидов, содержащих части последовательности, кодирующей антитело, его фрагменты или варианты, отжиг и лигирование этих олигонуклеотидов, а затем амплификацию лигированных олигонуклеотидов с помощью ПЦР.
Полинуклеотид, кодирующий антитело или его функциональный фрагмент по изобретению, может быть получен с использованием последовательности нуклеиновой кислоты вариабельных доменов тяжелой и/или легкой цепи изолятов 5B1, 9H3, 5Н11 или 7Е3 (например, SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13 и 15). Нуклеиновая кислота, кодирующая антитело или его функциональный фрагмент, может быть химически синтезирована или получена из подходящего источника (например, кДНК, выделенной из клеток, экспрессирующих антитело или его функциональный фрагмент, таких как клетки гибридомы, выбранные как экспрессирующие антитело или его функциональный фрагмент) с помощью ПЦР-амплификации с использованием синтетических праймеров, гибридизуемых с 3'- и 5'-концами последовательности, или с помощью клонирования с использованием олигонуклеотидного зонда, специфичного для конкретной последовательности нуклеиновой кислоты. Амплифицированные нуклеиновые кислоты, полученные с помощью ПЦР, могут быть затем клонированы в реплицируемые клонирующие векторы, с использованием любого способа, хорошо известного в данной области техники.
В некоторых вариантах осуществления в настоящем изобретении предлагается выделенное антитело или его функциональный фрагмент, где антитело связывается с sLea. Соответственно, в некоторых аспектах настоящее изобретение относится к выделенному антителу или его функциональному фрагменту, которые связываются с sLea, где антитело или его функциональный фрагмент включает домен VH, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из остатков 20-142 SEQ ID NO: 2, остатков 20-142 SEQ ID NO: 6, остатков 20-142 SEQ ID NO: 10 и остатков 20-145 SEQ ID NO: 14.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к выделенному антителу или его функциональному фрагменту, которые связываются с sLea, где антитело или его функциональный фрагмент включает домен VL, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из остатков 20-130 SEQ ID NO: 4, остатков 20-129 SEQ ID NO: 8, остатков 20-130 SEQ ID NO: 12 и остатков 23-130 SEQ ID NO: 16.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к выделенному антителу или его функциональному фрагменту, которые связываются с sLea, где антитело или его функциональный фрагмент включает как домен VH, так и домен VL, где домен VH и домен VL соответственно включают аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из остатков 20-142 SEQ ID NO: 2 и остатков 20-130 SEQ ID NO: 4; остатков 20-142 SEQ ID NO: 6 и остатков 20-129 SEQ ID NO: 8; остатков 20-142 SEQ ID NO: 10 и остатков 20-130 SEQ ID NO: 12; и остатков 20-145 SEQ ID NO: 14 и остатков 23-130 SEQ ID NO: 16.
В некоторых вариантах осуществления для того, чтобы связать sLea, антитело или его функциональный фрагмент по изобретению имеет одну или более CDRs, изображенных на фиг. 1-8 или приведенных в таблице 2. Антитело или его функциональный фрагмент, которые включают одну или более CDRs, в частности CDR3, могут специфически связываться с sLea, как описано в настоящем документе. Специфическое связывание с sLea может включать специфичность и сродство, как это представлено в примере I, для любого из антител, предлагаемых в настоящем описании. В некоторых аспектах антитело или его функциональный фрагмент по настоящему изобретению может включать активность CDC и/или активностью ADCC любого из изолятов клонов 5B1, 9H3, 5H11 или 7Е3, описанных в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к выделенному антителу или его функциональному фрагменту, где антитело включает домен цепи VH, имеющий аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 изолята клонов 5B1, 9H3, 5H11 или 7E3. Такие домены VH могут включать аминокислотные остатки 55-62, 70-77 и 116-131 SEQ ID NO: 2 или, альтернативно, аминокислотные остатки 45-52, 70-77 и 116-131 SEQ ID NO: 6, или, альтернативно, аминокислотные остатки 45-52, 70-77 и 116-131 SEQ ID NO: 10, или, альтернативно, аминокислотные остатки 45-52, 70-77 и 116-134 SEQ ID NO: 14.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к выделенному антителу или его функциональному фрагменту, где антитело включает домен цепи VL, имеющий аминокислотную последовательность CDR1, CDR2 и CDR3 изолята клонов 5B1, 9H3, 5H11 или 7E3. Такой домен VL может включать аминокислотные остатки 45-52, 70-72 и 109-120 SEQ ID NO: 4, или, альтернативно, аминокислотные остатки 45-52, 70-72 и 109-119 SEQ ID NO: 8, или, альтернативно, аминокислотные остатки 45-52, 70-72 и 109-120 SEQ ID NO: 12, или, альтернативно, аминокислотные остатки 49-53, 72-74 и 111-120 SEQ ID NO: 16.
В некоторых аспектах изобретения выделенное антитело или его функциональный фрагмент представляет собой моноклональное антитело. В некоторых аспектах изобретения выделенное антитело или его функциональный фрагмент, предлагаемые в настоящем описании, представляют собой изотип IgG или IgM. В еще одном аспекте настоящего изобретения антитело или его функциональный фрагмент представляет собой антитело подкласса IgG1.
В некоторых вариантах осуществления функциональный фрагмент антитела согласно изобретению может представлять собой, но не ограничивается этим, Fab, Fab', F(аb')2, Fabc, scFv, диатело, триатело, минитело или однодоменное антитело (sdAB). В некоторых аспектах в настоящем изобретении предлагается диатело, которое включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18 или 20. Такие диатела по настоящему изобретению в некоторых аспектах могут кодироваться полинуклеотидом, имеющим последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 17 или 19. Что касается антител и их функциональных фрагментов, различных форм, изменений и модификаций, они хорошо известны в данной области техники. Специфичные для sLea фрагменты антитела по настоящему изобретению могут включать любую из таких различных форм, изменений и модификаций антитела. Примеры таких различных форм и терминов, в том виде как они известны в данной области техники, приведены ниже.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу получения антитела или его функционального фрагмента по изобретению. Способ по настоящему изобретению может включать введение полинуклеотида по изобретению в клетку-хозяина, культивирование клетки-хозяина в условиях и в течение периода времени, достаточного для продукции кодируемой тяжелой и/или легкой цепи антитела или его функционального фрагмента по изобретению, и очистку тяжелой и/или легкой цепи антитела или его функционального фрагмента.
Рекомбинантная экспрессия антитела или его функционального фрагмента по изобретению, которые связываются с антигеном sLea, может включать конструирование экспрессионного вектора, содержащего полинуклеотид, который кодирует тяжелую и/или легкую цепь антитела или его функционального фрагмента по изобретению. После того, как полинуклеотид, кодирующий антитело или его функциональный фрагмент (предпочтительно, но не обязательно, содержащий вариабельный домен тяжелой и/или легкой цепи) по настоящему изобретению, получен, может быть получен вектор для продукции антитела или его функционального фрагмента методом рекомбинантной ДНК с использованием методов, хорошо известных в данной области техники. Способы получения белка путем экспрессии полинуклеотида, содержащего нуклеотидную последовательность, кодирующую антитело или его функциональный фрагмент, описаны в данном документе.
Методы, которые хорошо известны специалистам в данной области техники, могут быть использованы для конструирования экспрессионных векторов, содержащих кодирующие последовательности антитела или его функциональных фрагментов и подходящие сигналы, контролирующие транскрипцию и трансляцию. Эти методы включают, например, методы рекомбинантных ДНК in vitro, методы синтеза и генетической рекомбинации in vivo. В изобретении, таким образом, предлагаются реплицируемые векторы, включающие нуклеотидную последовательность, кодирующую антитело или его функциональный фрагмент по изобретению, функционально связанную с промотором. Такие векторы могут включать нуклеотидную последовательность, кодирующую константную область молекулы антитела (смотри, например, международные публикации Nos. WO 86/05807 и WO 89/01036; и патент США No. 5122464), и вариабельный домен антитела может быть клонирован в такой вектор для экспрессии всей тяжелой, всей легкой цепи, или как всей тяжелой, так и всей легкой цепей.
Экспрессионный вектор может быть введен в клетку-хозяина с помощью обычных методов, и трансфецированные клетки затем культивируют обычными методами для получения антитела или его функционального фрагмента по настоящему изобретению. Таким образом, изобретение включает клетки-хозяева, содержащие полинуклеотид, кодирующий антитело или его функциональный фрагмент по изобретению, функционально связанный с гетерологичным промотором. В некоторых вариантах осуществления для экспрессии двухцепочечных антител, векторы, кодирующие как тяжелую, так и легкую цепи, могут совместно экспрессироваться в клетке-хозяине для экспрессии всей молекулы иммуноглобулина, как подробно описано ниже.
Разнообразные экспрессирующиеся в хозяине векторные системы могут быть использованы для экспрессии антитела или его функциональных фрагментов по изобретению (смотри, например, патент США No. 5807715). Такие экспрессирующиеся в хозяине системы представляют собой носители, с помощью которых кодирующие последовательности, представляющие интерес, могут быть получены и затем очищены, но также представляют собой клетки, которые могут при трансформации или трансфекции подходящими кодирующими нуклеотидными последовательностями экспрессировать молекулу антитела согласно изобретению in situ. Они включают, но не ограничиваются этим, микроорганизмы, такие как бактерии (например, E. coli и B. subtilis), трансформированные рекомбинантной ДНК бактериофага, экспрессионные векторы с плазмидной ДНК или космидной ДНК, содержащие кодирующие последовательности антитела; дрожжи (например, Saccharomyces Pichia), трансформированные рекомбинантными экспрессионными векторами дрожжей, содержащими кодирующие последовательности антитела; системы клеток насекомых, инфицированных рекомбинантными вирусными (например, бакуловирусными) экспрессионными векторами, содержащими кодирующие последовательности антитела; системы растительных клеток, инфицированных рекомбинантными вирусными (например, вирусом мозаики цветной капусты, CaMV; вирусом табачной мозаики, ВТМ) экспрессионными векторами или трансформированные рекомбинантными плазмидными экспрессионными векторами (например, плазмидой Ti), содержащие кодирующие последовательности антитела; или системы клеток млекопитающих (например, клеток COS, CHO, BHK, 293, NS0 и 3Т3), несущих рекомбинантные экспрессионные конструкции, содержащие промоторы, происходящие из генома клеток млекопитающих (например, промотор металлотионеина) или из вирусов млекопитающих (например, поздний промотор аденовируса, промотор вируса коровьей оспы 7.5K). В некоторых аспектах для экспрессии рекомбинантного антитела или его функционального фрагмента, особенно для экспрессии полного рекомбинантного антитела, используются бактериальные клетки, такие как Escherichia coli, или эукариотные клетки. Например, клетки млекопитающих, такие как клетки яичника китайского хомячка (СНО), в сочетании с вектором, таким как главный промоторный элемент промежуточного раннего гена цитомегаловируса человека, являются эффективной системой экспрессии антител (Foecking et al., 1986, Gene 45:101; и Cockett et al., 1990, Bio/Technology 8:2). В некоторых вариантах осуществления антитела или их фрагменты по изобретению получают в клетках СНО. В одном варианте осуществления экспрессия нуклеотидных последовательностей, кодирующих антитела или их функциональные фрагменты по изобретению, которые связываются с sLea, регулируется конститутивным промотором, индуцируемым промотором или тканеспецифическим промотором.
В бактериальных системах ряд экспрессионных векторов может быть преимущественно выбран в зависимости от предполагаемого использования молекулы антитела, предназначенной для экспрессии. Например, когда планируется продукция большого количества такого антитела для создания фармацевтических композиций молекулы антитела, могут быть желательны векторы, которые управляют высокими уровнями экспрессии гибридных белковых продуктов, которые легко очищать. Такие векторы включают, но не ограничиваются этим, экспрессионный вектор pUR278 E. coli (Ruther et al., 1983, EMBO 12:1791), в котором кодирующая последовательность антитела может быть лигирована индивидуально в вектор в рамке с кодирующей областью lac Z таким образом, что образуется гибридный белок; векторы pIN (Inouye & Inouye, 1985, Nucleic Acids Res. 13:3101-3109; Van Heeke & Schuster, 1989, J. Biol. Chem. 24:5503-5509); и тому подобное. Векторы pGEX также могут быть использованы для экспрессии чужеродных полипептидов в виде гибридных белков с глутатион-S-трансферазой (GST). В целом такие гибридные белки являются растворимыми и могут быть легко очищены от лизированных клеток путем адсорбции и связывания с матриксом глутатион-агарозных шариков с последующим элюированием в присутствии свободного глутатиона. Векторы pGEX созданы для включения тромбина или сайтов расщепления протеазой фактора Xa таким образом, чтобы клонированный продукт гена-мишени мог высвобождаться от части GST.
В системе насекомых вирус ядерного полиэдроза Autographa californica (AcNPV) используют в качестве вектора для экспрессии чужеродных генов. Вирус растет в клетках Spodoptera frugiperda. Кодирующая последовательность антитела или его функционального фрагмента может быть клонирована индивидуально в несущественных областях (например, гена полиэдрина) вируса и помещена под контроль промотора AcNPV (например, промотора полиэдрина).
В клетках-хозяевах млекопитающих может быть использован ряд экспрессионных систем на основе вирусов. В тех случаях, когда в качестве экспрессионного вектора используют аденовирус, кодирующую последовательность представляющего интерес антитела можно лигировать с аденовирусным комплексом, контролирующим транскрипцию/трансляцию, например, поздним промотором и трехраздельной лидирующей последовательностью. Этот гибридный ген затем можно вставить в геном аденовируса путем рекомбинации in vitro или in vivo. Вставка в несущественную область вирусного генома (например, в область E1 или Е3) должна привести к получению рекомбинантного вируса, который является жизнеспособным и способен экспрессировать молекулу антитела в инфицированных хозяевах (например, смотри Logan & Shenk, 1984, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 8 1:355-359). Специфические сигналы инициации также могут быть использованы для эффективной трансляции вставленных кодирующих последовательностей антител. Эти сигналы включают инициирующий кодон ATG и смежные последовательности. Кроме того, инициирующий кодон должен совпадать по фазе с рамкой считывания желаемой кодирующей последовательности для обеспечения трансляции всей вставки. Эти экзогенные сигналы контроля трансляции и кодоны инициации могут иметь различное происхождение, как природное, так и синтетическое. Эффективность экспрессии может быть повышена за счет включения соответствующих элементов повышения транскрипции, терминации транскрипции и т.п. (смотри, например, Bittner et al., 1987, Methods in Enzymol. 153:51-544).
Кроме того, может быть выбран штамм клеток-хозяев, который модулирует экспрессию вставленных последовательностей или модифицирует и осуществляет процессинг генного продукта конкретным желаемым способом. Такие модификации (например, гликозилирование) и процессинг (например, расщепление) белковых продуктов могут быть важны для функционирования антитела или его функционального фрагмента. Различные клетки-хозяева имеют характерные и специфические механизмы посттрансляционного процессинга и модификации белков и генных продуктов. Подходящие клеточные линии или системы хозяев могут быть выбраны для обеспечения корректной модификации и процессинга экспрессируемого чужеродного белка. С этой целью могут быть использованы эукариотные клетки-хозяева, которые обладают клеточным механизмом для правильного процессинга первичного транскрипта, гликозилирования и фосфорилирования генного продукта. Такие клетки-хозяева млекопитающих включают, но не ограничиваются этим, клетки CHO, VERY, ВНК, HeLa, COS, MDCK, 293, 3Т3, W138, BT483, HS578T, HTB2, BT2O и T47D, NS0 (клеточная линия миеломы мыши, которая эндогенно не продуцирует какие-либо цепи иммуноглобулинов), CRL7030 и клетки HsS78Bst.
Для длительной продукции с высоким выходом рекомбинантных белков предпочтительной является стабильная экспрессия. Например, могут быть сконструированы клеточные линии, которые стабильно экспрессируют антитело или его функциональный фрагмент по изобретению. Вместо использования экспрессионных векторов, которые содержат вирусные сайты инициации репликации, клетки-хозяева могут быть трансформированы ДНК под контролем соответствующих контролирующих экспрессию элементов (например, промотора, энхансера, последовательностей, терминаторов транскрипции, сайтов полиаденилирования и т.д.), а также маркера селекции. После введения чужеродной ДНК сконструированным клеткам можно давать расти в течение 1-2 дней в обогащенной среде, а затем пересевать на селективную среду. Маркер селекции в рекомбинантной плазмиде придает устойчивость к отбору и позволяет клеткам стабильно интегрировать плазмиду в свои хромосомы и расти с образованием фокусов, которые, в свою очередь, могут быть клонированы и размножены в клеточные линии. Этот метод с успехом может быть использован для конструирования клеточных линий, которые экспрессируют молекулу антитела.
Может быть использован ряд систем селекции, включая, но, не ограничиваясь этим, гены тимидинкиназы вируса простого герпеса (Wigler et al., 1977, Cell 11:223), гипоксантингуанинфосфорибозилтрансферазы (Szybalska & Szybalski, 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 48:202) и аденинфосфорибозилтрансферазы (Lowy et al., 1980, Cell 22:8-17), которые могут быть использованы в tk-, hgprt- или Aprt-клетках, соответственно. Кроме того, может быть использована устойчивость к антиметаболитам в качестве основы селекции по следующим генам: dhfr, который придает устойчивость к метотрексату (Wigler et al., 1980, Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 77(6):3567-70; O'Hare et al., 1981, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:1527); глутаминсинтетазе (GS), которая представляет собой фермент, ответственный за биосинтез глутамина с использованием глутамата и аммиака (Bebbington et al., 1992, Biotechnology 10:169); gpt, который придает устойчивость к микофеноловой кислоте (Mulligan & Berg, 1981, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:2072); neo, который придает устойчивость к аминогликозиду G-418 (Wu and Wu, 1991, Biotherapy 3:87-95; Tolstoshev, 1993, Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 32:573-596; Mulligan, 1993, Science 260:926-932; и Morgan and Anderson, 1993, Ann. Rev. Biochem. 62:191-217; May, 1993, TIB TECH 11(5):155-215); и hygro, который придает устойчивость к гигромицину (Santerre et al., 1984, Gene 30:147). Методы, хорошо известные в области технологии рекомбинантной ДНК, могут обычно применяться для выбора желаемого рекомбинантного клона, и такие методы описаны, например, в Ausubel et al. (eds.), Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, NY (1993); Kriegler, Gene Transfer and Expression, A Laboratory Manual, Stockton Press, NY (1990); и в главах 12 и 13, Dracopoli et al. (eds.), Current Protocols in Human Genetics, John Wiley & Sons, NY (1994); Colberre-Garapin et al., 1981, J. Mol. Biol. 150:1, которые включены в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
Уровни экспрессии молекулы антитела могут быть увеличены с помощью амплифицирующего вектора (для обзора смотри Bebbington and Hentschel, The use of vectors based on gene amplification for the expression of cloned genes in mammalian cells in DNA cloning, Vol. 3 (Academic Press, New York, 1987)). Когда маркер в векторной системе экспрессии антитела или его функционального фрагмента является амплифицируемым, увеличение уровня ингибитора, присутствующего в культуре клетки-хозяина, будет увеличивать количество копий маркерного гена. Поскольку амплифицируемая область связана с геном антитела, продукция антитела также будет увеличиваться (Crouse et al., 1983, Mol. Cell. Biol. 3:257).
Клетка-хозяин может быть котрансфецирована двумя экспрессионными векторами по изобретению, первым вектором, кодирующим полипептид, происходящий от тяжелой цепи, и вторым вектором, кодирующим полипептид, происходящий от легкой цепи. Эти два вектора могут содержать идентичные маркеры селекции, которые создают возможность равной экспрессии полипептидов тяжелой и легкой цепей. Альтернативно, может быть использован один вектор, который кодирует и способен экспрессировать полипептиды как тяжелой, так и легкой цепей. В таких ситуациях легкая цепь может быть помещена перед тяжелой цепью, чтобы избежать избыточной токсичности свободной тяжелой цепи (Proudfoot, 1986, Nature 322:52; и Kohler, 1980, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:2197-2199). Кодирующие последовательности тяжелой и легкой цепей могут включать кДНК или геномную ДНК.
Кроме того, полинуклеотиды, кодирующие тяжелую и/или легкую цепь антитела или его функционального фрагмента по изобретению, могут быть подвергнуты оптимизации кодонов с использованием методов, хорошо известных в данной области техники, для достижения оптимизированной экспрессии антитела или его функционального фрагмента по изобретению в желаемой клетке-хозяине. Например, в одном из способов оптимизации кодонов нативный кодон заменяют наиболее часто встречающимся кодоном из эталонного набора генов, где создается высокая скорость трансляции кодонов для каждой аминокислоты. Дополнительные иллюстративные способы создания кодон-оптимизированных полинуклеотидов для экспрессии желаемого белка, которые могут быть применены к тяжелой и/или легкой цепи антитела или его функционального фрагмента по изобретению, описаны в статьях Kanaya et al., Gene, 238:143-155 (1999), Wang et al., Mol. Biol. Evol., 18(5):792-800 (2001), патенте США 5795737, публикации США 2008/0076161 и WO 2008/000632.
После того, как молекула антитела по настоящему изобретению получена путем рекомбинантной экспрессии, она может быть очищена любым способом, известным в данной области техники для очистки молекулы иммуноглобулина, например, с помощью хроматографии (например, ионообменной, аффинной, особенно с аффинностью для специфического антигена после протеина А, и с помощью колоночной хроматографии с разделением по размеру), с помощью центрифугирования, дифференциальной растворимости или с помощью любого другого стандартного метода очистки белков. Кроме того, для облегчения очистки антитела или их функциональные фрагменты по настоящему изобретению могут быть соединены с гетерологичными полипептидными последовательностями, представленными в настоящем описании, или очищены иным способом, известным в данной области техники. Например, антитело или его функциональный фрагмент по изобретению может быть очищен с помощью рекомбинантного добавления среди прочего полигистидиновой метки (His-тега), FLAG-тега, тега гемагглютинина (HA-тега) или Myc-тега, которые являются коммерчески доступными, и использования методов очистки, хорошо известных специалистам в данной области техники.
Фрагмент Fab относится к одновалентному фрагменту, состоящему из доменов VL, VH, CL и CH1; F(аb')2-фрагмент представляет собой двухвалентный фрагмент, включающий два Fab-фрагмента, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; фрагмент Fd состоит из доменов VH и CH1; фрагмент Fv состоит из доменов VL и VH одного плеча антитела; и фрагмент dAb (Ward et al., Nature 341:544-546, (1989)), состоит из домена VH.
Антитело может иметь один или несколько сайтов связывания. Если есть более чем один сайт связывания, связывающие сайты могут быть идентичны друг другу или могут отличаться. Например, природный иммуноглобулин имеет два идентичных сайта связывания, одноцепочечное антитело или Fab-фрагмент имеет один сайт связывания, в то время как «биспецифическое» или «бифункциональное» антитело имеет два различных сайта связывания.
Одноцепочечное антитело (scFv), относится к антителу, в котором области VL и VH соединены через линкер (например, синтетическую последовательность аминокислотных остатков) с образованием непрерывной полипептидной цепи, где линкер является достаточно длинным для возможности обратной укладки белковой цепи относительно себя с образованием одновалентного сайта связывания антигена (смотри, например, Bird et al., Science 242:423-26 (1988) и Huston et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-83 (1988)). Диатела относятся к двухвалентным антителам, включающим две полипептидные цепи, где каждая полипептидная цепь включает домены VH и VL, соединенные с помощью линкера, который является слишком коротким для того, чтобы позволить образовывать пары между двумя доменами на одной и той же цепи, что позволяет каждому домену образовывать пару с комплементарным доменом на другой полипептидной цепи (см, например, Holliger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-48 (1993), и Poljak et al., Structure 2:1121-23 (1994)). Если две полипептидные цепи диатела идентичны, то диатело в результате образования их пар будет иметь два идентичных антигенсвязывающих участка. Полипептидные цепи, имеющие различные последовательности, могут быть использованы для получения диатела с двумя различными антигенсвязывающими сайтами. Сходно триатела и тетратела представляют собой антитела, включающие три и четыре полипептидные цепи, соответственно, и образующие три и четыре антигенсвязывающих сайта, соответственно, которые могут быть одинаковыми или разными.
Настоящее изобретение также относится к антителу или его функциональному фрагменту, происходящим от 5B1, 9H3, 5H11 и/или 7E3, где антитело или его функциональный фрагмент связывается с sLea. Стандартные методы, хорошо известные специалистам в этой области техники, могут быть использованы для введения мутаций в нуклеотидную последовательность, кодирующую антитело или его функциональный фрагмент по изобретению, включая, например, сайт-направленный мутагенез и ПЦР-опосредованный мутагенез, что приводит к аминокислотным заменам. В некоторых аспектах производное включает менее 25 аминокислотных замен, менее 20 аминокислотных замен, менее 15 аминокислотных замен, менее 10 аминокислотных замен, менее 5 аминокислотных замен, менее 4 аминокислотных замен, менее 3 аминокислотных замен или менее 2 аминокислотных замен относительно исходной молекулы.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к антителу или его функциональному фрагменту, имеющим модифицированные формы природных аминокислот, консервативные замены, не встречающиеся в природе аминокислоты, аминокислотные аналоги и миметики, пока это антитело или его функциональный фрагмент сохраняет функциональную активность как определено в настоящем описании. В одном варианте осуществления производное имеет консервативные аминокислотные замены, которые сделаны в одном или более предсказанных аминокислотных остатках, не являющихся незаменимыми. Консервативная аминокислотная замена представляет собой замену, в которой аминокислотный остаток заменен на аминокислотный остаток, имеющий боковую цепь со сходным зарядом. Семейства аминокислотных остатков, имеющих боковые цепи со сходными зарядами, были определены в данной области техники. Эти семейства включают аминокислоты с основными боковыми цепями (например, лизин, аргинин, гистидин), кислыми боковыми цепями (например, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота), незаряженными полярными боковыми цепями (например, глицин, аспарагин, глутамин, серин, треонин, тирозин, цистеин), неполярными боковыми цепями (например, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-разветвленными боковыми цепями (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин). Альтернативно, мутации могут быть введены случайным образом вдоль всей или части кодирующей последовательности, например, путем насыщающего мутагенеза, и полученные мутанты могут быть подвергнуты скринингу на биологическую активность с целью идентификации мутантов, которые сохраняют активность. После мутагенеза кодируемое антитело или его функциональный фрагмент может быть экспрессирован, и может быть определена активность антитела или его функционального фрагмента.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к антителу или его функциональному фрагменту, имеющим модифицированный фукозилированием, галактозилированием и/или сиалированием фрагмент Fc, содержащийся в антителе или его функциональном фрагменте по изобретению. Такие модификации фрагмента Fc могут влиять на активность, опосредуемую рецептором Fc, как описано Peipp et al., Blood, 112(6):2390-2399 (2008). Например, терапевтические антитела со сконструированным гликозилированием, лишенные коровых остатков фукозы в N-гликанах Fc, обнаруживают сильную ADCC при более низких концентрациях с гораздо более высокой эффективностью по сравнению с фукозилированными аналогами. Shields et al., J. Biol. Chem., 277(30):26733-40 (2002); Okazaki et al., J Mol Biol., 336:1239-1249 (2004); Natsume et al., J. Immunol. Methods., 306:93-103 (2005). Способы модификации фукозилирования, галактозилирования и/или сиалирования антитела или его функционального фрагмента хорошо известны в данной области техники. Например, подходы к дефукозилированию могут быть сгруппированы в три метода (1) переход от пути N-гликозилирования клеток немлекопитающих к «гуманизированному» пути отсутствия фукозилирования; (2) инактивация пути фукозилирования N-гликанов в клетках млекопитающих и (3) химический синтез in vitro нефукозилированного N-гликопротеида или ферментативная модификация N-гликанов до нефукозилированных форм, как это описано Yamane-Ohnuki et al., MAbs., 1(3):230-236 (2009). Понятно, что любой из этих способов или любой другой способ, который хорошо известен в данной области техники, может быть использован для получения антитела или его функционального фрагмента с модифицированным фукозилированием, галактозилированием и/или сиалированием.
Антитела или их функциональные фрагменты по изобретению, которые связываются с sLea, могут быть получены любым способом, известным в данной области техники для синтеза антител, в частности, путем химического синтеза или с помощью методов рекомбинантной экспрессии. В практике настоящего изобретения используются, если не указано иное, обычные методы молекулярной биологии, микробиологии, генетического анализа, рекомбинантной ДНК, органической химии, биохимии, ПЦР, синтеза и модификации олигонуклеотидов, гибридизации нуклеиновых кислот и подобные методы в пределах данной области техники. Эти методы описаны в ссылках, приведенных в данном документе, и полностью описаны в литературе. Смотри, например, руководства Maniatis et al. (1982) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Sambrook et al. (1989), Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Sambrook et al. (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons (1987 и ежегодные обновленные издания); Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons (1987 и ежегодные обновленные издания) Gait (ed.) (1984) Oligonucleotide Synthesis: A Practical Approach, IRL Press; Eckstein (ed.) (1991) Oligonucleotides and Analogues: A Practical Approach, IRL Press; Birren et al. (eds.) (1999) Genome Analysis: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Borrebaeck (ed.) (1995) Antibody Engineering, Second Edition, Oxford University Press; Lo (ed.) (2006) Antibody Engineering: Methods and Protocols (Methods in Molecular Biology); Vol. 248, Humana Press, Inc; каждое из которых включено в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
Моноклональные антитела могут быть получены с использованием широкого спектра методов, известных в данной области техники, включая использование гибридомы и рекомбинантных технологий, или их сочетания. Например, моноклональные антитела могут быть получены с использованием гибридомных методов, включая методы, известные в данной области техники и описанные, например, в руководствах Harlow et al., Antibodies: A Laboratory Manual, (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2nd ed. 1988); Hammerling et al., in: Monoclonal Antibodies and T-Cell Hybridomas 563 681 (Elsevier, N.Y., 1981), каждое из которых включено в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме. Моноклональное антитело не ограничивается антителами, полученными с помощью гибридомного метода. Другие иллюстративные способы получения моноклональных антител известны в данной области техники. Дополнительные иллюстративные способы получения моноклональных антител приведены в настоящем документе в примере I.
Функциональные фрагменты антител, которые связываются с sLea, могут быть получены любым способом, хорошо известным специалистам в данной области техники. Например, Fab и F(аb')2-фрагменты по изобретению могут быть получены путем протеолитического расщепления молекул иммуноглобулина с использованием ферментов, таких как папаин (для получения Fab-фрагментов) или пепсин (для получения F(аb')2-фрагментов). F(аb')2-фрагменты содержат вариабельную область, константную область легкой цепи и домен CH1 тяжелой цепи.
Функциональные фрагменты антител по изобретению также могут быть получены с использованием различных способов фагового дисплея, известных в данной области техники. Например, в методах фагового дисплея функциональные домены антител, такие как вариабельные области тяжелой и/или легкой цепи, имеющие одну, две, три, четыре, пять или шесть CDRs, предлагаемые в настоящем описании, экспонируются на поверхности фаговых частиц, которые несут кодирующие их полинуклеотидные последовательности. ДНК, кодирующую домены VH и VL, подвергают рекомбинации вместе с линкером scFv с помощью ПЦР и клонируют в фагемидный вектор. Вектор электропорируют в E. coli, и E. coli инфицируют хелперным фагом. Фаги, используемые в этих методах, обычно представляют собой нитчатые фаги, включая fd и M13, и домены VH и VL обычно рекомбинантно соединяют либо с геном III, либо с геном VIII фага. Фаг, экспрессирующий антигенсвязывающий домен, который связывается с конкретным антигеном, таким как sLea, может быть выбран или идентифицирован с помощью антигена, например, с использованием меченого антигена или антигена, связанного или захваченного твердой поверхностью или шариком. Примеры способов фагового дисплея, которые могут быть использованы для получения функциональных фрагментов антитела по настоящему изобретению, включают способы, которые раскрыты в Brinkman et al., 1995, J. Immunol. Methods 182:41-50; Ames et al., 1995, J. Immunol. Methods 184:177-186; Kettleborough et al., 1994, Eur. J. Immunol. 24:952-958; Persic et al., 1997, Gene 187:9-18; Burton et al., 1994, Advances in Immunology 57:191-280; заявке РСТ PCT/GB91/01134; международных публикациях Nos. WO 90/02809, WO 91/10737, WO 92/01047, WO 92/18619, WO 93/1 1236, WO 95/15982, WO 95/20401 и W097/13844; и патентах США Nos. 5698426, 5223409, 5403484, 5580717, 5427908, 5750753, 5821047, 5571698, 5427908, 5516637, 5780225, 5658727, 5733743 и 5969108, каждый из которых включен в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
Как описано в приведенных выше ссылках, после фаговой селекции кодирующие области антитела из фага могут быть выделены и использованы для создания полных антител, включая антитела человека, или любого другого желаемого антигенсвязывающего фрагмента, и экспрессированы в любом желаемом хозяине, включая клетки млекопитающих, клетки насекомых, клетки растений, дрожжи и бактерии, например, как описано в настоящем описании.
Могут также применяться методы рекомбинантного получения Fab, Fab' и F(аb')2-фрагментов с использованием способов, известных в данной области техники, таких как раскрытые в публикации РСТ WO 92/22324; Mullinax et al., 1992, BioTechniques 12(6):864-869; Sawai et al., 1995, AJRI 34:26-34; and Better et al., 1988, Science 240:1041-1043, каждая из которых включена в качестве ссылки в полном объеме.
Для создания полных антител ПЦР-праймеры, включающие нуклеотидные последовательности VH или VL, сайт рестрикции, а также фланкирующие последовательности для защиты сайта рестрикции, могут быть использованы для амплификации последовательностей VH или VL в клонах scFv. При использовании методов клонирования, хорошо известных специалистам в данной области техники, ПЦР-амплифицированные домены VH могут быть клонированы в векторы, экспрессирующие константную область VH, например, константную область гамма 1 человека, и ПЦР-амплифицированные домены VL могут быть клонированы в векторы, экспрессирующие константную область VL, например, константные области каппа или лямбда человека. Домены VH и VL могут быть также клонированы в один вектор, экспрессирующий необходимые константные области. Векторы трансформации тяжелой цепи и векторы трансформации легкой цепи затем котрансфецируют в клеточные линии, чтобы создать стабильные или транзиторные клеточные линии, которые экспрессируют полноразмерные антитела, например, IgG, с использованием методов, хорошо известных специалистам в данной области техники.
В некоторых вариантах осуществления антитело или его функциональный фрагмент по изобретению конъюгируют (с помощью ковалентной или нековалентной конъюгации) или рекомбинантным способом соединяют с одним или более диагностическим агентом, детектируемым агентом или терапевтическим агентом или любой другой желаемой молекулой. Конъюгированное или соединенное рекомбинантно антитело или его функциональный фрагмент могут быть полезны для мониторинга или диагностики начала, развития, прогрессии и/или тяжести заболевания, связанного с экспрессией sLea, такого как развитие рака или опухоли, в качестве части клинической процедуры тестирования, такой как определение эффективности конкретного вида терапии.
Обнаружение и диагностика может быть выполнена, например, путем связывания антитела или его функционального фрагмента по изобретению с детектируемыми веществами, включая, но, не ограничиваясь этим, радиоактивные вещества, такие как, но, не ограничиваясь этим, цирконий (89Zr), йод (131I, 125I, 124I, 123I и 121I), углерод (14C, 11C), сера (35S), тритий (3H), индий (115In, 113In, 112In и 111In), технеций (99Tc), таллий (201Ti), галлий (68Ga, 67Ga), палладий (103Pd), молибден (99Mo), ксенон (133Xe), фтор (18F), 15O, 13N, 64Cu, 94mТс, 153Sm, 177Lu, 159Gd, 149Pm, 140La, 175Yb, 166Хо, 86Y, 90Y, 47Sc, 186Re, 188Re, 142Pr, 105Rh, 97Ru, 68Ge, 57Co, 65Zn, 85Sr, 32P, 153Gd, 169Yb, 51Cr, 54Mn, 75Se, 113Sn и 117Sn; и излучающие позитроны металлы при использовании различных вариантов позитронно-эмиссионной томографии, различные ферменты, такие как, но, не ограничиваясь этим, пероксидаза хрена, щелочная фосфатаза, бета-галактозидаза или ацетилхолинэстераза; простетические группы, такие как, но, не ограничиваясь этим, стрептавидин/биотин и авидин/биотин; флуоресцентные вещества, такие как, но, не ограничиваясь этим, умбеллиферон, флуоресцеин, флуоресцеина изотиоцианат, родамин, флуоресцеина дихлортриазиниламин, дансилхлорид или фикоэритрин; люминесцентные вещества, такие как, но, не ограничиваясь этим, люминол; биолюминесцентные вещества, такие как, но, не ограничиваясь этим, люцифераза, люциферин и экворин, и нерадиоактивные ионы парамагнитных металлов.
Настоящее изобретение дополнительно охватывает терапевтическое применение антитела или его функционального фрагмента по изобретению, конъюгированного (с помощью ковалентного или нековалентного конъюгирования) или соединенного рекомбинантным способом, с одним или более терапевтическим агентом. В этом контексте, например, антитело может быть конъюгировано или рекомбинантным способом соединено с терапевтическим агентом, таким как цитотоксин, например, цитостатический или цитотоксический агент, или с ионом радиоактивного металла, например, с альфа-излучателем. Цитотоксин или цитотоксический агент включает любой агент, который является вредным для клеток. Терапевтический агент может представлять собой химиотерапевтический агент, такой как, но не ограничиваясь этим, антрациклин (например, доксорубицин и даунорубицин (ранее дауномицин)); таксан (например, паклитаксел (таксол) и доцетаксел (таксотер), антиметаболит (например, метотрексат, 6-меркаптопурин, 6-тиогуанин, цитарабин, 5-фторурацил и декарбазин), или алкилирующий агент (например, мехлорэтамин, тиоэпа-хлорамбуцил, мелфалан, кармустин (BCNU), ломустин (CCNU), циклофосфамид, бусульфан, дибромоманнит, стрептозотоцин, митомицин С, цисдихлордиамин платины (II), (DDP) и цисплатин); антибиотик (например, актиномицин D, блеомицин, митрамицин, и антрамицин (AMC)); молекулу ауристатин (например, ауристатин РНЕ, бриостатин 1, соластатин 10, монометилауристатин E (ММАЕ) и монометилауристатин F (MMAF)); гормон (например, глюкокортикоиды, прогестины, андрогены и эстрогены), нуклеозидный аналог (например, гемцитабин), ингибитор фермента репарации ДНК (например, этопозид и топотекан), ингибитор киназы (например, соединение ST1571, также известное как гливек или иматиниба мезилат); цитотоксический агент (например, майтансин, паклитаксел, цитохалазин B, грамицидин D, бромид этидия, эметин, митомицин, этопозид, тенопозид, винкристин, винбластин, колхицин, доксорубицин, даунорубицин, дигидроксиантрациндион, митоксантрон, митрамицин, 1-дегидротестостерон, глюкокортикоиды, прокаин, тетракаин, лидокаин, пропранолол, пуромицин и их аналоги или гомологи, и те соединения, которые описаны в патентах США Nos. 6245759, 6399633, 6383790, 6335156, 6271242, 6242196, 6218410, 6218372, 6057300, 6034053, 5985877, 5958769, 5925376, 5922844, 5911995, 5872223, 5863904, 5840745, 5728868, 5648239, 5587459); ингибитор фарнезилтрансферазы (например, R115777, BMS-214662 и ингибиторы, которые раскрыты, например, в патентах США Nos: 6458935, 6451812, 6440974, 6436960, 6432959, 6420387, 6414145, 6410541, 6410539, 6403581, 6399615, 6387905, 6372747, 6369034, 6362188, 6342765, 6342487, 6300501, 6268363, 6265422, 6248756, 6239140, 6232338, 6228865, 6228856, 6225322, 6218406, 6211193, 6187786, 6169096, 6159984, 6143766, 6133303, 6127366, 6124465, 6124295, 6103723, 6093737, 6090948, 6080870, 6077853, 6071935, 6066738, 6063930, 6054466, 6051582, 6051574 и 6040305); ингибитор топоизомеразы (например, камптотецин, иринотекан, SN-38, топотекан, 9-аминокамптотецин, GG-211 (GI 147211), DX-8951f, IST-622, рубитекан, пиразолакридин, XR-5000, саинтопин, UCE6, UCE1022, TAN-1518A, 1518B TAN, KT6006, KT6528, ED-110, NB-506, ED-110, NB-506, фагаронин, коралин, бета-лапакон и ребеккамицин); агент, связывающийся с малой бороздкой ДНК (например, краситель Hoescht 33342 и краситель Hoechst 33258); ингибиторы аденозиндезаминазы (например, флударабина фосфат и 2-хлордезоксиаденозин); или их фармацевтически приемлемые соли, сольваты, клатраты, или их пролекарства. Терапевтический агент может представлять собой иммунотерапевтический агент, такой как, но, не ограничиваясь этим, цетуксимаб, бевацизумаб, герцептин, ритуксимаб).
Кроме того, антитело или его функциональный фрагмент согласно изобретению могут быть конъюгированы с терапевтическим агентом, таким как ион радиоактивного металла, такой как альфа-излучатель, такой как 213Bi или макроциклические хелаторы, пригодные для конъюгации ионов радиоактивного металла, включая, но не ограничиваясь этим, 131В, 131LU, 131Y, 131Ho, 131Sm; или макроциклический хелатор, такой как 1,4,7,10- тетраазациклододекан-N,N',N',N'''-тетрауксусная кислота (DOTA), которая может быть присоединена к антителу или его функциональному фрагменту через линкерную молекулу. Такие линкерные молекулы, как правило, известны в данной области техники и описаны в Denardo et al., 1998, Clin Cancer Res. 4(10):2483-90; Peterson et al., 1999, Bioconjug. Chem. 10(4):553-7; и Zimmerman et al., 1999, Nucl. Med. Biol. 26(8):943-50.
Кроме того, антитело или его функциональный фрагмент по изобретению могут быть конъюгированы (с помощью ковалентного или нековалентного конъюгирования) или соединены рекомбинантным способом с терапевтическим агентом, который модифицирует данный биологический ответ. Таким образом, терапевтические агенты не следует рассматривать как ограничивающиеся классическими химическими терапевтическими агентами. Например, терапевтический агент может представлять собой белок, пептид или полипептид, обладающий желаемой биологической активностью. Такие белки могут включать, например, токсин (например, абрин, рицин A, экзотоксин Pseudomonas, холерный токсин и дифтерийный токсин); такой белок, как фактор некроза опухоли, γ-интерферон, α-интерферон, фактор роста нервов, тромбоцитарный фактор роста, тканевый активатор плазминогена, апоптотический агент (например, TNF-γ, AIM I, AIM II, Fas-лиганд и VEGF), антиангиогенный агент (например, ангиостатин, эндостатин и компонент пути свертывания, такой как тканевый фактор); модификатор биологической реакции (например, цитокин, такой как гамма-интерферон, интерлейкин-1, интерлейкин-2, интерлейкин-5, интерлейкин-6, интерлейкин-7, интерлейкин-9, интерлейкин-10, интерлейкин-12, интерлейкин-15, интерлейкин-23, гранулоцит-макрофаг-колониестимулирующий фактор и гранулоцит-колониестимулирующий фактор); фактор роста (например, гормон роста) или коагуляторный агент (например, кальций, витамин К, тканевые факторы, такие как, но не ограничиваясь этим, фактор Хагемана (фактор XII), высокомолекулярный кининоген (HMWK), прекалликреин (PK), фактор II коагуляции белков (протромбин), фактор V, XIIa, VIII, XIIIa, XI, XIa, IX, IXa, X, фосфолипид и мономер фибрина).
Настоящее изобретение охватывает антитела или их функциональные фрагменты по изобретению, рекомбинантно соединенные или химически конъюгированные (с помощью ковалентной или нековалентной конъюгации) с гетерологичным белком или полипептидом, для создания гибридных белков. В некоторых аспектах такой полипептид может составлять приблизительно 10, приблизительно 20, приблизительно 30, приблизительно 40, приблизительно 50, приблизительно 60, приблизительно 70, приблизительно 80, приблизительно 90 или приблизительно 100 аминокислот в длину. В некоторых аспектах в настоящем изобретении предлагаются гибридные белки, имеющие функциональный фрагмент антитела по изобретению (например, Fab-фрагмент, Fd-фрагмент, Fv-фрагмент, F(аb)2-фрагмент, домен VH, CDR VH, домен VL или CDR VL) и гетерологичный белок или полипептид. В одном варианте осуществления гетерологичный белок или полипептид, с которым соединено антитело или его функциональный фрагмент, служит для направленной доставки антитела или функционального фрагмента к клеткам конкретного типа, таким как клетки, которые экспрессируют sLea.
Конъюгированный или гибридный белок по настоящему изобретению включает любое антитело или его функциональный фрагмент по изобретению, предлагаемый в настоящем описании, конъюгированный (с помощью ковалентной или нековалентной конъюгации) или соединенный рекомбинантным способом с диагностическим агентом, детектируемым агентом или терапевтическим агентом. В одном из вариантов осуществления конъюгированный или гибридный белок по настоящему изобретению включает антитело 5B1, 9H3, 5H11 или 7Е3 и диагностический агент, детектируемый агент или терапевтический агент. В другом варианте осуществления конъюгированный или гибридный белок по настоящему изобретению включает функциональный фрагмент антител 5В1, 9H3, 5H11 или 7Е3 и диагностический агент, детектируемый агент или терапевтический агент. В другом варианте осуществления конъюгированный или гибридный белок по настоящему изобретению включает домен VH, имеющий аминокислотную последовательность любого из доменов VH, представленную остатками 20-142 SEQ ID NO: 2, остатками 20-142 SEQ ID NO: 6, остатками 20-142 SEQ ID NO: 10 или остатками 20-145 SEQ ID NO: 14, и/или домен VL, имеющий аминокислотную последовательность любого из доменов VL, представленную остатками 20-130 SEQ ID NO: 4, остатками 20-129 SEQ ID NO: 8, остатками 20-130 SEQ ID NO: 12 или остатками 23-130 SEQ ID NO: 16, и диагностический агент, детектируемый агент или терапевтический агент. В другом варианте осуществления конъюгированный или гибридный белок по настоящему изобретению включает одну или более CDRs VH, имеющих аминокислотную последовательность любой из CDRs VH, представленных в SEQ ID NO: 2, 6, 10 или 14, и диагностический агент, детектируемый агент или терапевтический агент. В другом варианте осуществления конъюгированный или гибридный белок включает одну или более CDRs VL, имеющих аминокислотную последовательность любой из CDRs VL, представленных в SEQ ID NO: 4, 8, 12 или 16, а также диагностический агент, детектируемый агент или терапевтический агент. В другом варианте осуществления конъюгированный или гибридный белок по настоящему изобретению включает, по меньшей мере, один домен VH и, по меньшей мере, один домен VL, представленные остатками 20-142 SEQ ID NO: 2 и остатками 20-130 SEQ ID NO: 4; остатками 20-142 SEQ ID NO: 6 и остатками 20-129 SEQ ID NO: 8; остатками 20-142 SEQ ID NO: 10 и остатками 20-130 SEQ ID NO: 12; или остатками 20-145 SEQ ID NO: 14 и остатками 23-130 SEQ ID NO: 16, соответственно, и диагностический агент, детектируемый агент или терапевтический агент.
Способы соединения или конъюгации диагностических агентов, детектируемых агентов или терапевтических агентов (включая полипептиды) с антителами хорошо известны, смотри, например Arnon et al., «Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy», in Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy, Reisfeld et al. (eds.), pp. 243-56 (Alan R. Liss, Inc. 1985); Hellstrom et al., «Antibodies For Drug Delivery», in Controlled Drug Delivery (2nd Ed.), Robinson et al. (eds.), pp. 623-53 (Marcel Dekker, Inc. 1987); Thorpe, «Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review», in Monoclonal Antibodies 84: Biological And Clinical Applications, Pinchera et al. (eds.), pp. 475-506 (1985); «Analysis, Results, And Future Prospective Of The Therapeutic Use Of Radiolabeled Antibody In Cancer Therapy», in Monoclonal Antibodies For Cancer Detection And Therapy, Baldwin et al. (eds.), pp. 303-16 (Academic Press 1985), Thorpe et al., 1982, Immunol. Rev. 62:119-58; патенты США Nos. 5336603, 5622929, 5359046, 5349053, 5447851, 5723125, 5783181, 5908626, 5844095, 5112946, 7981695, 8039273, 8142784; публикации США 2009/0202536, 2010/0034837, 2011/0137017, 2011/0280891, 2012/0003247; EP 307434; EP 367166; EP 394827; публикации РСТ WO 91/06570, WO 96/04388, WO 96/22024, WO 97/34631 и WO 99/04813; Ashkenazi et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88: 10535-10539, 1991; Traunecker et al., Nature, 331:84-86, 1988; Zheng et al., J. Immunol., 154:5590-5600, 1995; Vil et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:11337-11341, 1992; и Senter, Current Opinion in Chemical Biology, 13:235-244 (2009), которые включены в данное описание в качестве ссылки в полном объеме.
В другом аспекте диагностический агент, детектируемый агент или терапевтический агент может быть присоединен к шарнирной области восстановленного компонента антитела путем образования дисульфидных связей. Альтернативно, такие агенты могут быть присоединены к компоненту антител с использованием гетеробифункционального кросс-линкера, такого как N-сукцинил-3-(2-пиридилдитио)пропионат (SPDP). Yu et al., Int. J. Cancer 56: 244 (1994). Общие методы такой конъюгации хорошо известны в данной области техники. Смотри, например, Wong, CHEMISTRY OF PROTEIN CONJUGATION AND CROSS-LINKING (CRC Press 1991); Upeslacis et al., «Modification of Antibodies by Chemical Methods,» in MONOCLONAL ANTIBODIES: PRINCIPLES AND APPLICATIONS, Birch et al. (eds.), pages 187-230 (Wiley-Liss, Inc. 1995); Price, «Production and Characterization of Synthetic Peptide-Derived Antibodies,» in MONOCLONAL ANTIBODIES: PRODUCTION, ENGINEERING AND CLINICAL APPLICATION, Ritter et al. (eds.), pages 60-84 (Cambridge University Press 1995).
Альтернативно диагностический агент, детектируемый агент или терапевтический агент может быть конъюгирован через углеводную часть в Fc-области антитела. Способы конъюгации пептидов с компонентами антител через углеводную часть антитела хорошо известны специалистам в данной области техники. Смотри, например, Shih et al., Int. J. Cancer. 41:832-839 (1988); Shih et al., Int. J. Cancer. 46:1101-1106 (1990); и Shih et al., патент США No. 5057313, все они включены в качестве ссылки в полном объеме. Общий способ включает взаимодействие компонента антитела, имеющего окисленную часть углевода, с полимером-носителем, который имеет, по меньшей мере, одну свободную аминогруппу и который нагружен множеством молекул пептида. Эта реакция приводит к первоначальному образованию связи основания Шиффа (имина), которая может быть стабилизирована путем восстановления до вторичного амина с образованием конечного конъюгата.
Однако, если Fc-область отсутствует, например, если желателен функциональный фрагмент антитела, как представлено в настоящем описании, все еще возможно присоединить диагностический агент, детектируемый агент или терапевтический агент. Углеводная часть может быть введена в вариабельную область легкой цепи полноразмерного антитела или фрагмента антитела. Смотри, например, Leung et al., J. Immunol., 154: 5919 (1995); патенты США Nos. 5443953 и 6254868, все они включены в качестве ссылки в полном объеме. Сконструированная углеводная часть используется для присоединения диагностического агента, детектируемого агента или терапевтического агента.
Терапевтический агент, конъюгированный или соединенный рекомбинантным способом с функциональным фрагментом антитела согласно изобретению, который связывается с sLea, может быть выбран для достижения желаемого профилактического или терапевтического эффекта(ов). Понятно, что при решении того, какой терапевтический агент конъюгировать или соединять рекомбинантным способом с антителом или его функциональным фрагментом согласно изобретению, в пределах уровня квалификации врача или другого медицинского персонала находится рассмотрение следующего: характера заболевания, тяжести заболевания и состояния индивидуума.
Конъюгат или гибридное антитело или его функциональный фрагмент по изобретению, которые помечены детектируемой меткой, как это предлагается в настоящем документе, и которые связываются с sLea, могут быть использованы в диагностических целях для обнаружения, диагностики или мониторинга заболевания, где клетки, которые вызывают заболевание или связаны с ним, экспрессируют sLea. Например, как представлено в настоящем документе, экспрессируют sLea, как показано, такие раковые клетки и опухоли, как, но, не ограничиваясь этим, опухоли желудочно-кишечного тракта, рак молочной железы, рак яичников, рак толстой кишки, колоректальная аденокарцинома, рак поджелудочной железы, аденокарцинома поджелудочной железы, немелкоклеточный рак легкого, аденокарцинома мочевого пузыря, метастатический рак толстой кишки, колоректальный рак, перстневидноклеточный рак яичников и метастатический рак. Соответственно, настоящее изобретение относится к способам обнаружения злокачественной опухоли или образования опухоли у индивидуума, путем введения эффективного количества конъюгата или гибридного антитела или его функционального фрагмента по изобретению нуждающемуся в этом индивидууму. В некоторых аспектах способ обнаружения может дополнительно включать определение экспрессии sLea на клетках или в образце ткани индивидуума с использованием одного или более конъюгатов или гибридных антител или их функциональных фрагментов согласно изобретению, которые связываются с sLea; и сравнение уровня sLea с контрольным уровнем, например, уровнями в образцах нормальной ткани (например, от индивидуума, не страдающего заболеванием, или от того же индивидуума до начала заболевания), в результате чего повышение определяемого уровня sLea по сравнению с контрольным уровнем sLea свидетельствует о наличии заболевания. Такие диагностические методы могут позволить работникам здравоохранения использовать профилактические меры или агрессивное лечение раньше, чем возможно в противном случае, тем самым предотвращая развитие или дальнейшее прогрессирование заболевания.
Антитело или его функциональный фрагмент по данному изобретению также могут быть использованы для анализа уровней антигена sLea в биологическом образце с использованием классических иммуногистологических методов, как предлагается в настоящем документе, или как хорошо известно специалистам в данной области техники (смотри, например, Jalkanen et al., 1985, J. Cell. Biol. 101:976-985; and Jalkanen et al., 1987, J. Cell. Biol. 105:3087-3096). Другие методы на основе антител, используемые для определения sLea, включают иммунологические методы, такие как твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA) и радиоиммуноанализ (RIA). Подходящие метки для анализа антител известны в данной области техники и включают ферментные метки, такие как глюкозооксидаза; радиоизотопы, такие как йод (125I, 121I), углерод (14С), сера (35S), тритий (3Н), индий (121В) и технеций (99Тс); люминесцентные метки, такие как люминол; и флуоресцентные метки, такие как флуоресцеин и родамин, и биотин.
В одном аспекте настоящее изобретение относится к обнаружению и диагностике заболеваний у человека. В одном варианте осуществления диагностика включает: a) введение (например, парентерально, подкожно или внутрибрюшинно) индивидууму эффективного количества конъюгата или гибридного белка по настоящему изобретению, которые связываются с sLea; b) ожидание в течение временного интервала, следующего за введением, для предоставления возможности конъюгату или гибридному белку предпочтительно сконцентрироваться в тех местах индивидуума, где экспрессируется sLea (и, в некоторых аспектах, для того, чтобы несвязанный конъюгат или гибридный белок вымывались до уровня фона); с) определение уровня фона; и d) определение конъюгата или гибридного белка у индивидуума таким образом, что определение конъюгата или гибридного белка выше уровня фона указывает на то, что индивидуум страдает заболеванием. Уровень фона может быть определен различными методами, включая сравнение определяемого количества конъюгата или гибридного белка со стандартным значением, определенным ранее для конкретной системы.
Понятно, что размер индивидуума и используемая система визуализации будут определять величину фрагмента изображения, необходимого для получения диагностических изображений, и это может быть легко определено специалистом в данной области техники. Например, в случае радиоактивного изотопа, конъюгированного с антителом или его функциональным фрагментом по изобретению, для индивидуума, являющегося человеком, количество вводимой радиоактивности обычно находится в пределах от приблизительно 18,5×1010 до 74×1010 мБк 99Тс. Конъюгат должен затем аккумулироваться в месте локализации клеток, которые экспрессируют sLea. Визуализация опухолей in vivo описана в S.W. Burchiel et al., «Immunopharmacokinetics of Radiolabeled Antibodies and Their Fragments.» (Chapter 13 in Tumor Imaging: The Radiochemical Detection of Cancer, S.W. Burchiel and B.A. Rhodes, eds., Masson Publishing Inc. (1982).
В зависимости от нескольких переменных, включая используемый тип детектируемого агента и способ введения, интервал времени после введения для представления возможности конъюгату преимущественно концентрироваться в сайтах индивидуума и для представления возможности несвязанному конъюгату вымыться до фонового уровня составляет от 6 до 48 часов или от 6 до 24 часов или от 6 до 12 часов. В другом варианте осуществления интервал времени после введения составляет от 5 до 20 дней или от 5 до 10 дней. В одном варианте осуществления мониторинг заболевания осуществляется путем повторения метода диагностики, как представлено в данном документе, например, через один месяц после первоначального диагноза, через шесть месяцев после первоначального диагноза, через один год после первоначального диагноза или дольше.
Присутствие конъюгата или гибридного белка может быть обнаружено у индивидуума с использованием способов, известных в данной области техники для сканирования in vivo. Эти способы зависят от типа используемого детектируемого агента. Опытный специалист сможет определить соответствующий способ для обнаружения конкретного детектируемого агента. Способы и устройства, которые могут быть использованы в диагностических способах по изобретению, включают, но не ограничиваются этим, компьютерную томографию (КТ), сканирование всего тела, например, с помощью позитронно-эмиссионной томографии (PET), магнитно-резонансную томографию (МРТ) и эхографию. В одном варианте осуществления антитело или его функциональный фрагмент согласно изобретению конъюгируют с радиоактивным изотопом и детектируют у индивидуума с использованием чувствительного к излучению хирургического инструмента. В другом варианте осуществления антитело или его функциональный фрагмент согласно изобретению конъюгируют с флуоресцентным соединением и детектируют у индивидуума с помощью реагирующего на флуоресценцию сканирующего прибора. В другом варианте осуществления антитело или его функциональный фрагмент согласно изобретению конъюгируют с позитронно-активным металлом, таким как цирконий (99Zr), или с любым другим позитронно-активным металлом, представленным в настоящем описании или хорошо известным в данной области техники как детектируемый с помощью позитронно-эмиссионной томографии, и детектируют у индивидуума с использованием позитронно-эмиссионной томографии. В еще одном варианте осуществления антитело или его функциональный фрагмент согласно изобретению конъюгируют с парамагнитной меткой и детектируют у индивидуума с использованием магнитно-резонансной томографии (МРТ).
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей антитело или его функциональный фрагмент по изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтически приемлемый носитель, который может быть использован в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, включает любой из стандартных фармацевтических носителей, известных в данной области техники, такой как забуференный фосфатом физиологический раствор, вода и эмульсии, такие как эмульсия масла и воды, а также различные типы смачивающих агентов. Эти фармацевтические композиции могут быть получены в жидких единицах лекарственной формы или в любых других единицах лекарственной формы, которые достаточны для доставки антитела или его функционального фрагмента по изобретению к целевой области нуждающегося в лечении индивидуума. Например, фармацевтические композиции могут быть получены любым способом, подходящим для выбранного пути введения, например, внутрисосудистого, внутримышечного, подкожного, внутрибрюшинного и т.д. Другие необязательные компоненты, например, стабилизаторы фармацевтической степени чистоты, буферы, консерванты, наполнители и тому подобное могут быть легко выбраны специалистом в данной области техники. Получение фармацевтической композиции, имеющей должные рН, изотоничность, стабильность и тому подобное, находится в пределах уровня компетентности в данной области техники.
Фармацевтические композиции, содержащие одно или более антител или их функциональных фрагментов по изобретению, предлагаемые в настоящем описании, могут быть получены для хранения путем смешивания антитела, имеющего требуемую степень чистоты, с необязательными физиологически приемлемыми носителями, наполнителями или стабилизаторами (Remington's Pharmaceutical Sciences (1990) Mack Publishing Co., Easton, PA) в виде лиофилизированных композиций или водных растворов. Приемлемые носители, наполнители или стабилизаторы являются нетоксичными для реципиентов в используемых дозах и концентрациях и включают буферы, такие как фосфатный, цитратный, и другие органические кислоты; антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту и метионин; консерванты (такие как хлорид октадецилдиметилбензиламмония; хлорид гексаметония; хлорид бензалкония, хлорид бензетония; фенол, бутиловый или бензиловый спирт; алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен; катехин; резорцин; циклогексанол; 3-пентанол и м-крезол); полипептиды низкой молекулярной массы (приблизительно менее 10 остатков); белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу или декстрины; хелатирующие агенты, такие как ЭДТА; сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбит; солеобразующие противоионы, такие как натрий; комплексы с металлами (например, Zn-белковые комплексы); и/или неионные поверхностно-активные вещества, такие как твин™, Pluronics™ или полиэтиленгликоль (ПЭГ).
Таким образом, в некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения или профилактики заболевания у нуждающегося в этом индивидуума. Способы по настоящему изобретению могут включать введение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, представленной в данном описании, индивидууму. Например, фармацевтическая композиция может включать одно или более антитело или его функциональный фрагмент, представленные в данном документе. Заболевания, которые можно лечить или предотвращать с использованием способов по изобретению, включают рак, образование опухолей и/или метастазирование. В частности, способы по настоящему изобретению могут быть использованы для лечения рака или образования опухолей, где раковые клетки или опухоли экспрессируют углевод sLea. Неограничивающие примеры видов рака или опухолей, которые можно лечить или предотвращать с использованием способов по изобретению, включают опухоли желудочно-кишечного тракта, например, рак толстой кишки, колоректальную аденокарциному, метастатический рак толстой кишки, колоректальный рак, рак поджелудочной железы или аденокарциному поджелудочной железы; мелкоклеточный рак легкого; аденокарциному мочевого пузыря; перстневидноклеточный рак яичников; рак яичников, метастатическую карциному; и аденокарциному желудка, пищевода, гортани, мочеполового тракта или молочной железы.
Соответственно, в некоторых аспектах настоящее изобретение относится к способу лечения рака или профилактики метастазов опухоли у нуждающегося в этом индивидуума путем введения терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей антитело или его функциональный фрагмент, где антитело или его функциональный фрагмент связывается с sLea и включает домен VH, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из остатков 20-142 SEQ ID NO: 2, остатков 20-142 SEQ ID NO: 6, остатков 20-142 SEQ ID NO: 10 и остатков 20-145 SEQ ID NO: 14. В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения рака или профилактики метастазов опухоли у нуждающегося в этом индивидуума путем введения терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей антитело или его функциональный фрагмент, где антитело или его функциональный фрагмент связывается с sLea и включает домен VL, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из остатков 20-130 SEQ ID NO: 4, остатков 20-129 SEQ ID NO: 8, остатков 20-130 SEQ ID NO: 12 и остатков 23-130 SEQ ID NO: 16. В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения рака или профилактики метастазов опухоли у нуждающегося в этом индивидуума путем введения терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей антитело или его функциональный фрагмент, где антитело или его функциональный фрагмент связывается с sLea и включает как домен VH, так и домен VL, где домен VH и домен VL соответственно включают аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из остатков 20-142 SEQ ID NO: 2 и остатков 20-130 SEQ ID NO: 4; остатков 20-142 SEQ ID NO: 6 и остатков 20-129 SEQ ID NO: 8; остатков 20-142 SEQ ID NO: 10 и остатков 20-130 SEQ ID NO: 12; и остатков 20-145 SEQ ID NO: 14 и остатков 23-130 SEQ ID NO: 16.
Составы, такие как описанные в настоящем документе, могут также содержать более одного активного соединения, если необходимо для конкретного заболевания, подлежащего лечению. В некоторых вариантах осуществления составы включают антитело или его функциональный фрагмент по изобретению и один или более активных соединений с дополнительной активностью, которые не оказывают отрицательного влияния друг на друга. Такие молекулы могут подходящим образом присутствовать в сочетании и в количествах, которые эффективны для предназначенной цели. Например, антитело или его функциональный фрагмент по изобретению могут быть объединены с одним или более другими терапевтическими агентами. Такие сочетанные терапевтические агенты можно вводить индивидууму одновременно или последовательно.
Таким образом, в некоторых аспектах изобретение относится к способу лечения или профилактики заболевания путем введения терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, представленной в данном документе, нуждающемуся в этом индивидууму, где фармацевтическая композиция включает антитело или его функциональный фрагмент по изобретению и второй терапевтический агент. Подходящий второй терапевтический агент может быть легко определен обычным специалистом в данной области техники, как описано в настоящем документе. Как указано в настоящем описании в примере IV, в некоторых аспектах настоящего изобретения второй терапевтический агент может представлять собой таксол.
Фармацевтические композиции, предлагаемые в данном документе, содержат терапевтически эффективные количества одного или более антител по изобретению, предлагаемых в настоящем описании, и необязательно один или более дополнительных терапевтических агентов в фармацевтически приемлемом носителе. Такие фармацевтические композиции пригодны для профилактики, лечения, управления или облегчения заболевания, такого как рак или образование опухоли, или одного или более из его симптомов.
Фармацевтические композиции могут содержать одно или более антител или его функциональных фрагментов по данному изобретению. В одном варианте осуществления антитела или их функциональные фрагменты составляют в виде подходящих фармацевтических препаратов, таких как стерильные растворы или суспензии для парентерального введения. В одном варианте осуществления антитела или их функциональные фрагменты, представленные в настоящем описании, составляют в виде фармацевтических композиций с использованием методов и процедур, хорошо известных в данной области техники (смотри, например, Ansel (1985) Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 4th Ed., p. 126).
Антитело или его функциональный фрагмент по изобретению могут быть включены в фармацевтическую композицию в терапевтически эффективном количестве, достаточном для проявления терапевтически полезного эффекта в отсутствии нежелательных побочных эффектов у подвергаемого лечению индивидуума. Терапевтически эффективную концентрацию можно определить эмпирически путем тестирования соединений в системах in vitro и in vivo с использованием стандартных способов и последующей экстраполяции на основе этого доз для человека. Концентрация антитела или его функционального фрагмента в фармацевтической композиции будет зависеть, например, от физико-химических характеристик антитела или его функционального фрагмента, схемы дозирования и количества вводимого препарата, а также от других факторов, хорошо известных специалистам в данной области техники.
В одном варианте осуществления терапевтически эффективная доза обеспечивает концентрацию в сыворотке антитела или его функционального фрагмента от приблизительно 0,1 нг/мл до приблизительно 50-100 мкг/мл. Фармацевтические композиции в другом варианте осуществления обеспечивают дозу от приблизительно 0,001 мг до приблизительно 500 мг антитела на кг массы тела в день. Фармацевтические единицы лекарственных форм могут быть получены для обеспечения от приблизительно 0,01 мг, 0,1 мг или 1 мг до приблизительно 30 мг, 100 мг или 500 мг, и в одном варианте осуществления от приблизительно 10 мг до приблизительно 500 мг антитела или его функционального фрагмента и/или сочетания с другими дополнительными существенными ингредиентами в виде стандартной единицы лекарственной формы.
Антитело или его функциональный фрагмент по изобретению можно вводить однократно, или доза может быть разделена на несколько меньших доз, подлежащих введению через интервалы времени. Понятно, что точная дозировка и продолжительность лечения зависит от заболевания, подлежащего лечению, и может быть определена эмпирически с использованием известных протоколов тестирования или с помощью экстраполяции из данных испытаний in vivo или in vitro. Следует отметить, что концентрации и величины доз также могут варьироваться в зависимости от тяжести состояния, подлежащего облегчению. Следует также понимать, что для любого конкретного индивидуума конкретные режимы дозирования могут быть скорректированы с течением времени в соответствии с индивидуальной потребностью и профессиональной оценкой лица, назначающего или наблюдающего за введением композиций, и что диапазоны концентраций изложены в настоящем описании только в качестве примера и не предназначены для ограничения объема или применения заявленных композиций.
При смешивании или добавлении антитела или его функционального фрагмента по изобретению полученная в результате смесь может представлять собой раствор, суспензию или тому подобное. Форма полученной смеси зависит от ряда факторов, включая предполагаемый способ введения и растворимость соединения в выбранном носителе или наполнителе. Эффективная концентрация представляет собой концентрацию, достаточную для ослабления симптомов заболевания, расстройства или состояния, подлежащего лечению, и может быть определена эмпирически.
Фармацевтические композиции предлагаются для введения человеку и животным в единицах дозированных лекарственных форм, таких как стерильные парентеральные растворы или суспензии, содержащие подходящие количества соединений или их фармацевтически приемлемых производных. Антитело или его функциональный фрагмент в одном варианте осуществления могут быть составлены и введены в виде единицы лекарственной формы или множественных единиц лекарственной формы. Единица лекарственной формы относится к физически дискретным единицам, подходящим для людей или животных и упакованным по отдельности, как известно в данной области техники. Каждая единица лекарственной формы содержит предварительно определенное количество антитела или его функционального фрагмента по изобретению, достаточное для получения желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с требуемым фармацевтическим носителем, наполнителем или разбавителем. Примеры единиц лекарственных форм включают ампулы и шприцы. Единицы лекарственной формы можно вводить в виде долей или их кратных величин. Множественные единицы лекарственной формы представляют собой множество идентичных единиц лекарственной формы, упакованных в один контейнер для введения в виде отдельных единиц лекарственной формы. Примеры множественных единиц лекарственной формы включают флаконы или бутыли пинт или галлонов. Следовательно, множественная единица лекарственной формы представляет собой множество единиц лекарственной формы, которые не отделены в упаковке.
В одном варианте осуществления одно или более антител или их функциональных фрагментов по изобретению находятся в жидкой фармацевтической композиции. Вводимые жидкие фармацевтические композиции, например, могут быть получены путем растворения, диспергирования или смешивания иным способом антитела или его функционального фрагмента, предлагаемых в настоящем описании, и необязательных фармацевтических адъювантов в носителе, таком как, например, вода, физиологический раствор, водный раствор декстрозы, глицерин, гликоли, этанол и тому подобное, чтобы в результате получился раствор. При желании фармацевтическая композиция, предназначенная для введения, может также содержать незначительные количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как смачивающие агенты, эмульгаторы, солюбилизирующие агенты, буферные рН агенты и тому подобное, например, ацетат, цитрат натрия, производные циклодекстрина, сорбитанмонолаурат, триэтаноламин ацетат натрия, олеат триэтаноламина и другие подобные агенты. Современные способы получения таких лекарственных форм известны или будут очевидны для специалистов в данной области техники; например, смотри Remington's Pharmaceutical Sciences (1990) Mack Publishing Co., Easton, PA.
Способы введения фармацевтической композиции по настоящему изобретению хорошо известны в данной области техники. Понятно, что подходящий способ введения фармацевтической композиции может быть легко определен квалифицированным врачом. Типичные пути введения включают внутривенное введение, внутримышечное введение, внутрикожное введение или подкожное введение. Кроме того, следует понимать, что состав фармацевтической композиции можно легко скорректировать для адаптации к пути введения. Изобретение также предусматривает, что после введения фармацевтической композиции по настоящему изобретению, отставленные, последовательные и/или повторные дозы одной или более фармацевтических композиций могут быть введены индивидууму, как представлено в настоящем описании.
Способы по настоящему изобретению для лечения заболевания предназначены для включения (1) предотвращения заболевания, т.е. индукции предотвращения развития клинических симптомов заболевания у индивидуума, который может быть предрасположен к заболеванию, но еще не испытывает или не проявляет симптомов заболевания; (2) ингибирования заболевания, т.е. прекращения или ослабления развития заболевания или его клинических симптомов; или (3) ослабления заболевания, т.е. стимуляции регрессии заболевания или его клинических симптомов. Способы профилактики заболевания по настоящему изобретению предназначены для включения предупреждения клинической симптоматики, указывающей на рак или образование опухоли. Такое предупреждение включает, например, поддержание нормальных физиологических показателей у индивидуума. Таким образом, предотвращение может включать профилактическое лечение индивидуума для защиты его от появления метастазов опухоли.
Терапевтически эффективное количество фармацевтической композиции, используемое в способах по настоящему изобретению, будет изменяться в зависимости от используемой фармацевтической композиции, заболевания и его тяжести и возраста, веса и т.д. индивидуума, подлежащего лечению, все это находится в пределах компетенции лечащего врача. Индивидуум, которого можно лечить с помощью способов по изобретению, включает позвоночное животное, предпочтительно млекопитающее, более предпочтительно человека.
Понятно, что модификации, которые не оказывают существенного влияния на действие различных вариантов осуществления настоящего изобретения, также предлагаются в рамках определения настоящего изобретения, представленного в настоящем описании. Соответственно, следующие примеры предназначены для иллюстрации, но не ограничивают настоящее изобретение.
ПРИМЕР I
Моноклональные антитела человека против sLe
a
SLE обладают сильной противоопухолевой активностью
Углеводный антиген sLea широко экспрессируется на эпителиальных опухолях желудочно-кишечного тракта, молочной железы, поджелудочной железы и на клетках мелкоклеточного рака легких. Так как гиперэкспрессия sLea, как представляется, является ключевым событием в инвазии и метастазировании многих опухолей и приводит к восприимчивости к опосредованному антителами лизису, sLea представляет собой привлекательную мишень для молекулярной терапии опухолей. Соответственно, как описано в настоящем документе, были получены и охарактеризованы полностью человеческие моноклональные антитела (mAb) из лимфоцитов крови индивидуумов, иммунизированных вакциной sLea-KLH. Несколько mAbs было отобрано на основе ELISA и FACS, включая два моноклональных антитела с высоким сродством к sLea (5B1 и 7E3, связывающая аффинность 0,14 и 0,04 нмоль/л, соответственно) и дополнительно охарактеризовано. Оба антитела были специфичными для Neu5Acα2-3Galβ1-3(Fucα1-4) GlcNAcβ и Neu5Gcα2-3Galβ1-3(Fucα1-4)GlcNAcβ при определении матричным анализом гликанов. Зависимая от комплемента цитотоксичность против клеток DMS-79 была выше (ЕС50 0,1 мкг/мл по сравнению с 1,7 мкг/мл) у r7E3 (IgM), чем у r5Bl (IgG1). Кроме того, антитела r5Bl показали высокий уровень активности в отношении зависимой от антител опосредуемой клетками цитотоксичности на клетках DMS-79 с NK-клетками человека или мононуклеарными клетками периферической крови. Для оценки эффективности in vivo антитела были протестированы в модели ксенотрансплантата опухолевых клеток Colo205 или опухолевых клеток DMS-79, трансплантированных мышам с тяжелым комбинированным иммунодефицитом (SCID). В модели ксенотрансплантата Colo205 лечение в течение первых 21 дней четырьмя дозами r5Bl (100 мкг на дозу) удваивало медиану времени выживаемости до 207 дней, и три из пяти животных выживали в течение получения шести доз. В модели ксенотрансплантата DSM-79 рост выявленных опухолей DSM-79 подавлялся или регрессировал у животных, которых лечили антителом r5Bl. На основе потенциала sLea в качестве мишени для иммунной атаки и сродства, специфичности и эффекторных функций 5Bl и 7Е3 они имеют клиническое применение при лечении рака.
Материалы, клетки и антитела
Клеточные линии DMS-79 (Pettengill et al., Cancer, 45:906-18 (1980)), SW626, EL4, HT29, BxPC3, SK-MEL28 и P3× 63Ag8.653 приобретали у американской коллекции типовых культур (АТСС), клетки Colo205-Luc (Bioware ultra) получали от Caliper Life Sciences. Контрольные мышиные mAb 121SLE (IgM) приобретали у GeneTex. Тетрасахарид sLea (Cat # S2279) приобретали у Sigma-Aldrich. Конъюгат sLea-HSA (сывороточный альбумин человека) (Cat # 07-011), одновалентный биотинилированный sLea (sLea-sp-биотин; Cat # 02-044), поливалентный биотинилированный sLea-PAA (Cat # 01-044), меченный биотином Lea-PAA (Cat # 01-035), и sLex-PAA-биотин (Cat # 01-045) приобретали у GlycoTech. В поливалентной презентации тетрасахарид включается в матрицу полиакриламида (PAA), таким образом создавая 30-кДа поливалентный полимер с приблизительно каждой пятой амидной группой полимерной цепи N-замещенного биотина в соотношении 4:1 и приблизительно 20% содержанием углеводов. Другие гликоконъюгаты HSA или BSA, используемые в данном исследовании, получали собственноручно с использованием sLea-пентенилгликозида, как описано. Ragupathi et al., Cancer Immunol Immunother, 58:1397-405 (2009). GD3, фукозил-GM1, GM2 и GM3 приобретали у Matreya и GD2 приобретали у Advanced ImmunoChemical.
Создание гибридом, продуцирующих mAb против sLe
a
Образцы крови получали от 3 больных в текущем испытании вакцины конъюгированного sLea-KLH у больных раком молочной железы, инициированном в MSKCC по утвержденному MSKCC и FDA IRB протоколу и IND. Образцы крови отбирали от 2 больных после 3 или 4 вакцинации, которые показали титры антител против sLea 1/160 и 1/320, соответственно. Эти сыворотки (и мышиное mAb 19,9) хорошо реагируют с sLea-позитивными клеточными линиями в анализах FACS и опосредуют сильную CDC. Ragupathi et al., Cancer Immunol Immunother, 58:1397-405 (2009). Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) выделяли из приблизительно от 80 до 90 мл крови путем градиентного центрифугирования на Histopaque-1077 (Sigma-Aldrich).
PBMCs культивировали в среде RPMI-1640, дополненной L-глутамином, заменимыми аминокислотами, пируватом натрия, витамином, пенициллин/стрептомицином, 10% FBS (Omega Scientific), 10 г/мл IL-21 (Biosource) и 1 мкг/мл mAb против CD40 (супернатанта гибридомы G28-5; АТСС). Клетки сливали с помощью электропорации с клетками миеломы P3×63Ag8.653.
ELISA sLe
a
Для ELISA sLea планшеты покрывали либо конъюгатом 1 мкг/мл sLea-HSA, одновалентным биотинилированным sLea, либо поливалентным биотинилированным sLea-PAA, захватываемыми на планшетах с покрытием Neutr-Avidin. Непокрытые лунки (PBS) и лунки, покрытые HSA, использовали в качестве контролей. Связанные антитела первоначально детектировали козьими антителами против IgA+G+M человека, меченными пероксидазой хрена (HRP) (Jackson ImmunoResearch), и положительные лунки затем зондировали с помощью IgG-Fc- или IgM-специфических вторичных антител для определения изотипов.
Анализ специфичности углеводов
Перекрестную реактивность против близкородственных антигенов Lea и sLex оценивали с помощью поверхностного плазмонного резонанса (SPR) и подтверждали с помощью ELISA с использованием меченного биотином Lea-PAA и биотин-sLex-РАА. Связывание с ганглиозидами GD2, GD3, фукозил-GM1, GM2 и GM3 тестировали с помощью ELISA. Конкурентный ELISA использовали для оценки специфичности mAbs против нескольких других родственных углеводных частей. Вкратце, планшеты покрывали 2 мкг/мл конъюгата sLea-HSA с последующим блокированием 3% BSA в PBS. Затем 30 мкл различных углеводных остатков (40 мкг/мл в PBS, полученных из 1 мг/мл маточного раствора), либо неконъюгированных, либо конъюгированных с HSA или BSA, смешивали отдельно с 30 мкл тестируемого антитела и инкубировали при комнатной температуре в планшете с образцами. Через 30 минут 50 мкл смеси переносили в аналитический планшет с покрытием и инкубировали в течение 1 часа с последующей инкубацией с козьими антителами против IgA+G+М человека, меченными HRP, промывкой и колориметрическим определением связанного антитела с использованием спектрофлуориметра VersaMax (все стадии осуществляли при комнатной температуре). Тестируемые углеводные фрагменты включали globo H, антиген Льюиса Y, антиген Льюиса X, сиалил-Thomson-Nouveaux (STN), кластерный sTn, Thomson Friedenreich (TF), муцин Tighe Leb /Ley, муцин подчелюстной железы свиньи (PSM) и тетрасахарид sLea и конъюгат sLea-HSA. Для определения высокой специфичности антител осуществляли матричный анализ гликанов группой Consortium for Functional Glycomics Core H. Антитела 5B1 и 7E3 тестировали в концентрации 10 мкг/мл с использованием версии 4.1 печатной матрицы, состоящей из 465 гликанов в 6 повторах.
Клонирование кДНК иммуноглобулинов и экспрессия рекомбинантных антител
кДНК вариабельной области тяжелой и легкой цепи mAb человека получали путем ОТ-ПЦР из отдельной гибридомной клеточной линии и субклонировали в экспрессионный вектор тяжелой цепи IgG1 или IgM или легкой цепи IgK или IgL, как описано ранее. Sawada-Hirai et al., J. Immune Based Ther. Vaccines, 2:5 (2004). Экспрессионный вектор тяжелой цепи или легкой цепи Ig дважды расщепляли Not I и Sal I, и затем оба фрагмента лигировали с образованием экспрессионного вектора двойного гена. Клетки СНО в 6-луночных планшетах трансфецировали экспрессионным вектором двойного гена с использованием липофектамина 2000 (Invitrogen). Через 24 часа трансфецированные клетки переносили в 10-см чашку с селективной средой [DMEM, дополненной 10% диализованной FBS (Invitrogen), 50 ммоль/л L-метионинсульфоксимином (MSX), добавкой GS (Sigma-Aldrich) и пенициллин/стрептомицином (Omega Scientific)]. Через две недели устойчивых к MSX трансфектантов выделяли и наращивали. Клоны с высокой продукцией антител против sLea отбирали путем измерения уровней антител в супернатантах с помощью теста ELISA, специфичного для sLea, и их наращивали для крупномасштабной продукции mAb.
Очистка mAb человека
Антитела очищали с использованием пропускания через систему Akta Explorer (GE Healthcare) с программным обеспечением Unicorn 5.0. Вкратце стабильные клоны 5B1 или 7E3 выращивали в бессывороточной культуральной среде в биореакторе Wave, и собранный супернатант осветляли путем центрифугирования и фильтрации и хранили в замороженном виде до использования. Антитела IgG человека очищали на колонках с протеином А соответствующих размеров с использованием 10 ммоль/л PBS и 150 ммоль/л NaCl подвижного буфера. Антитела IgM человека очищали на колонке гидроксиапатита, и IgM элюировали с градиентом от 500 ммоль/л фосфата. Концентрации антител определяли при ОП280 с использованием E1% 1,4 и 1,18 для IgG и IgM, соответственно, для расчета концентрации. Чистоту каждого препарата оценивали с помощью анализа SDS-PAGE (1-5 мкг на полосу) в восстанавливающих условиях, и чистота составляла более 90% в пересчете на сумму тяжелых и легких цепей.
Проточная цитометрия
sLea-положительные или sLea-отрицательные линии опухолевых клеток (0,5×106 клеток на режим) промывали в PBS/2% FBS (PBSF). Затем добавляли тестируемые или контрольные mAb человека (1-2 мкг/мл в полной среде), и инкубировали на льду в течение 30 минут. Gilewski et al., Clin Cancer Res, 6:1693-701 (2000); Gilewski et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 98:3270-5 (2001). После промывки в PBSF клетки инкубировали с Alexa-488 против IgM-Fcγ человека или против IgMμ человека (Invitrogen) в течение 30 минут на льду. Клетки дважды промывали в PBSF и анализировали с помощью проточной цитометрии с использованием Guava Personal Cell Analysis-96 (PCA-96) System (Millipore). Клетки Colo205-Luc инкубировали с 2 мкг/мл первичного антитела с последующим окрашиванием вторичными антителами от SouthernBiotech, и анализировали на приборе Becton Dickinson FACS Advantage IV с использованием программного обеспечения FlowJo 7.2.4.
Определение аффинности
Константы сродства определяли с использованием принципа SPR с Biacore 3000 (GE Healthcare). Меченный биотином одновалентный sLea (Cat # 02-044) или поливалентный sLea-PAA-биотин (Cat # 01-044) соединяли с отдельными проточными ячейками чипа SPA биосенсора в соответствии с инструкциями изготовителя. Проточную ячейку блокировали HSA, и использовали культуральную среду, содержащую свободный биотин, в качестве эталонной ячейки. Кинетические параметры связывания определяли для нескольких известных концентраций антитела, разведенного в HBS-EP буфере (10 ммоль/л HEPES, рН 7,4, 150 ммоль/л NaCl, 3,4 ммоль/л ЭДТА, 0,005% поверхностно-активного вещества Р20), с использованием проточной ячейки, покрытой sLea-PAA-биотином. Программное обеспечение для подгонки кривой, предоставленное Biacore instrument, использовали для получения оценок скоростей ассоциации и диссоциации, из которых рассчитывали сродство.
Анализ CDC
sLea-положительные или sLea-отрицательные линии опухолевых клеток использовали для 90-минутного теста на цитотоксичность (Guava PCA-96 Cell-Toxicity kit; Millipore; Cat # 4500-0200) с использованием комплемента человека (Quidel; Cat # Al13) и очищенных mAbs человека в различных разведениях (0,1-25 мкг/мл) или mAbs положительного контроля, как описано ранее (Ragupathi et al. Clin Cancer Res 2003, 9:5214; Ragupathi et al. Int J Cancer 2000, 85:659; Dickler et al. Cancer Res 1999, 5:2773). Вкратце 2,5×106 клеток-мишеней окрашивали сукцинимиловым эфиром карбоксифлуоресцеиндиацетата (CSFE) с получением зеленых/желтых флуоресцентных клеток-мишеней. Окрашенные клетки (1×105/50 мкл образца) инкубировали в течение 40 минут с 100 мкл антител на льду. Затем 50 мкл комплемента человека разводили 1:2 в полной среде (RPMI-1640, 10% FCS) или добавляли только среду к трем параллельным образцам и инкубировали в течение 90 минут при 37°С. Таким образом, конечное разведение комплемента в тесте составляло 1:8. Клетки, которые погибали во время этого периода инкубации, метили путем добавления не проницаемого для мембраны красителя 7-амино-актиномицина D (7-AAD), и образцы анализировали с помощью двойной цветовой иммунофлуоресценции, используя программный модуль Guava CellToxicity. Контрольные образцы, которые инкубировали с NP40, использовали для определения максимальной гибели, и образцы только с комплементом служили в качестве показателя фонового уровня. Процент погибших клеток определяли с помощью соответствующего гейтинга и вычисляли по следующей формуле: % погибших=[(%выборки - %комплемента в покое)/(%NP40-%комплемента в покое)]×100.
Анализ зависимой от антител клеточно-опосредованной цитотоксичности
Эффекторные клетки РВМС выделяли с помощью центрифугирования в градиенте плотности Ficoll-Hypaque из образцов крови, полученных по протоколу, одобренному MSKCC IRB. Клетки-мишени 5×106 клеток/мл инкубировали в полной среде роста с 15 мкл раствора 0,1% кальцеин-АМ (Sigma-Aldrich) в течение 30 минут при температуре 37°С в присутствии 5% СO2. Клетки дважды промывали 15 мл PBS-0,02% ЭДТА и ресуспендировали в 1 мл полной среды роста. Пятьдесят микролитров (10000 клеток) меченых клеток-мишеней высевали в 96-луночный планшет в присутствии или в отсутствие антител в концентрациях, описанных на фиг. 13, и инкубировали с 50 мкл свежевыделенных мононуклеарных клеток периферической крови (эффекторные клетки, при отношении R/T 100:1) соответственно. После 2 часовой инкубации планшет центрифугировали при 300×g в течение 10 минут, и 75 мкл супернатанта переносили в новый 96-луночный планшет с плоским дном. Флуоресценцию в надосадочной жидкости измеряли при 485 нм возбуждения и 535 нм излучения в Fluoroskan Ascent (Thermo Scientific). Спонтанное высвобождение из клеток-мишеней определяли в среде RPMI-1640 с 30% FBS без эффекторных клеток, и максимальное высвобождение из клеток-мишеней определяли в среде RPMI-1640 с 30% FBS и 6% тритоном Х-100 без эффекторных клеток. Процент цитотоксичности рассчитывали как [(уровень флуоресценции в образце - спонтанное высвобождение)/(максимальная флуоресценция - спонтанное высвобождение)] х 100.
Анализ интернализации mAb
Интернализацию антитела 5B1 оценивали путем измерения цитотоксической активности r5Bl и комплекса вторичного конъюгата Hum-Zap (Advanced Targeting Systems) против клеток BxPC3, экспрессирующих sLea, которые высевали в 96-луночный планшет (2000 клеток/90 мкл/лунка) и инкубировали в течение ночи в двух параллельных пробах. Различные концентрации антитела 5B1 инкубировали с вторичными конъюгатами Hum-Zap при RT в соответствии с инструкцией изготовителя. Затем к клеткам добавляли 10 мкл/лунка r5Bl и комплекса Hum-Zap и инкубировали в течение 3-х дней. Двадцать пять микролитров раствора тиазолила синего тетразолия бромида (Sigma-Aldrich) (5 мг/мл в PBS) добавляли в каждую лунку и инкубировали при 37°С. После инкубации в течение 2 часов добавляли 100 мкл/лунка раствора для солюбилизации (20% SDS/50% N,N-диметилформамид) в каждую лунку и инкубировали в течение еще 16 часов при 37°C. ОП измеряли при 570/690 нм, и полученные величины с одной средой использовали для вычитания фона планшета. Восемь параллельных культур без антитела использовали для нормализации величин образцов (образец/среднее необработанных × 100).
Модель трансплантации ксенотрансплантата
Самок мышей СВ17 SCID (5-8 недель) приобретали у Taconic. Для модели ксенотрансплантата Colo205 клетки Colo205-luc (0,5×106) в 0,1 мл полной среды роста вводили через хвостовую вену на день 0 с помощью инсулинового шприца BD с иглой 28G (Becton Dickinson & Co). Для первого исследования сто микрограммов mAb 5B1 вводили внутрибрюшинно в дни 1, 7, 14 и 21 (эксперимент 1) или в дни 1, 4, 7, 10, 14 и 21 (эксперимент 2). Для второго исследования 100 мкг, 300 мкг или 1 мг mAb 5B1 вводили внутрибрюшинно на 4-й день после инъекции опухолевых клеток, а затем два раза в неделю в течение первых двух недель и один раз в неделю в течение следующих 7 недель. У мышей отслеживали развитие опухоли. Для модели ксенотрансплантата DMS-79, клетки DMS-79 (1×106) вводили подкожно самкам мышей СВ17 SCID, и начинали лечение мышей на 19 день после того, как длина опухоли достигала 5 мм (~20 мм2). Животные затем получали IgG человека или антитела 5B1, вводимые путем внутрибрюшинной инъекции 200 мкг на дозу, плюс cRGD путем внутривенной инъекции для увеличения проницаемости сосудов первоначально 80 мкг, затем 5 дней в неделю 40 мкг на дозу до 37 дня.
Все процедуры осуществляли в соответствии с протоколом, утвержденным онкологическим центром института по уходу за животными и комитетом по их использованию Memorial Sloan Kettering. Кривые выживаемости Каплана-Мейера получали с использованием GraphPad Prism 5.1 (GraphPad Software) и анализировали с помощью лог-рангового критерия Mantel-Haenszel.
Результаты
Идентификация моноклональных антител человека с помощью ELISA и создание рекомбинантных антител
Образцы крови от 3 вакцинированных больных использовали для достижения создания гибридом, и выявили много положительных лунок в тестах ELISA, специфичных для антигена (таблица 3). Обширный скрининг использовали для устранения антител, которые проявляли незначительное или неспецифическое связывание. Восемь гибридомных клеток, экспрессирующих антитело человека (1 IgM и 7 IgG), с сильной реактивностью против sLea первоначально выбрали, нарастили и субклонировали для дальнейшей характеристики. Два антитела (9H1 и 9H3) показали сильное связывание с конъюгатами sLea-HSA, но не с планшетами, покрытыми sLea-PAA. Три антитела (5B1, 5H11 и 7Е3) показали сильное связывание с одновалентным и поливалентным sLea и конъюгатами sLea-HSA при измерении с помощью анализов ELISA (таблица 4).
Таблица 3
Связывание кандидатных супернатантов гибридом, содержащих моноклональные антитела IgG или IgM, с конъюгатом sLe a -ацетилфенилендиамин(APD)-сывороточный альбумин человека (HSA) (sLe a -HuSA). |
||||
ОП (490 нм)* | ||||
Супернатант | Изотип | HuSA | sLea-HuSA | PBS |
EF41-5B1 | G | 0,000 | 2,240 | 0,020 |
EF41-5H11 | G | 0,020 | 2,180 | -0,010 |
EF41-6F7 | G | 0,010 | 0,480 | -0,010 |
EF41-9H1 | G | 0,010 | 0,730 | -0,020 |
EF41-9H3 | G | 0,010 | 1,100 | -0,020 |
EF41-9A10 | G | 0,010 | 2,140 | -0,010 |
EF41-10C1 | G | 0,000 | 0,040 | -0,020 |
EF40-3C4 | G | 0,000 | 0,500 | 0,000 |
EF40-10H3 | G | 0,000 | 0,130 | 0,000 |
EF41-7E3 | M | -0,020 | 2,130 | 0,010 |
EF41-9A7 | M | 2,700 | 2,540 | 2,610 |
EF40-5B7 | M | 0,070 | 0,070 | 0,080 |
* Контрольный изотип вычитается. HuSa представляет собой контроль сывороточного альбумина человека. PBS представляет собой контроль физиологического раствора, забуференного фосфатом. |
Таблица 4
Связывание выбранных антител против sLe a , представленных в виде одновалентных (моно-)sLe a , поливалентных (поли)sLe a или в форме sLe a -HSA. |
|||||
ОП (490 нм) | |||||
Супернатант | PBS | NAV | NAV+ моно-sLea | NAV+ поли-sLea | SLeA-HSA* |
EF41-5B1(G) | 0,050 | 0,050 | 0,900 | 2,280 | 1,740 |
EF41-5H11(G) | 0,040 | 0,050 | 1,280 | 2,130 | 1,900 |
EF41-6F7(G) | 0,050 | 0,050 | 0,050 | 0,080 | 0,100 |
EF41-9H1(G) | 0,050 | 0,050 | 0,050 | 0,060 | 0,300 |
EF41-9H3 (G) | 0,050 | 0,050 | 0,050 | 0,050 | 0,750 |
EF41-9A10 (G) | 0,040 | 0,040 | 0,170 | 0,870 | 1,330 |
EF40-3C4 (G) | 0,040 | 0,050 | 0,040 | 0,050 | 0,070 |
EF41-7E3 (M) | 0,050 | 0,050 | 0,970 | 0,920 | 1,310 |
HuSa представляет собой контроль сывороточного альбумина человека. PBS представляет собой контроль физиологического раствора, забуференного фосфатом. NAV представляет собой контроль нейтрального авидина.
Вариабельные области тяжелой и легкой цепи от 4 выбранных антител выделяли с помощью ОТ-ПЦР и клонировали в экспрессионные векторы изобретателей полноразмерных IgG1 или IgM. Молекулярный анализ последовательности с использованием IMGT/V-Quest (Brochet et al., Nucleic Acids Res., 36:W503-8 (2008)) показал, что 3 выбранных антитела IgG 5B1 (IgG/λ), 9H3 (IgG/λ), и 5H11 (IgG/λ) происходят от одного и того же семейства VH и все используют легкие цепи лямбда. Эти антитела IgG1 показали различные последовательности CDR с 16, 5 или 3 мутациями, отклоняющимися от зародышевой линии, соответственно (фиг 1-6; таблица 5). Антитело IgM (7Е3) использует легкую цепь каппа и имеет 6 мутаций тяжелой цепи (фиг 7-8; таблица 5). Повышенные мутации в 5B1 свидетельствуют о созревании аффинности. Рекомбинантные антитела продуцировали в клеточных линиях CHO в системе волнового биореактора и очищали с использованием протеина A или хроматографии на гидроксиапатите для IgG и IgM, соответственно. Очищенные рекомбинантные антитела сохраняли свойства исходных антител, происходящих из гибридомы, в отношении связывания в ELISA и специфичности.
Таблица 5
Классификация кДНК выбранных антител человека против sLe a , полученных от вакцинированных доноров крови |
|||||||||
Антитело | VH | VL | |||||||
ID клона | VH | Мут. от зародышевой линии | DH (RF) | JH | Длина CDR | VL | Мут. от зародышевой линии | JL | Длина CDR |
5B1 | 3-9*01 | 16 | 6-25*01 (1) | 4*02 | 8, 8, 16 | L1-47*01 | 4 | JL1*01 | 8, 3, 12 |
9H3 | 3-9*01 | 5 | 2-8*01 (2) | 4*02 | 8, 8, 16 | L1-47*01 | 2 | JL2*01 | 8, 3, 11 |
5H11 | 3-9*01 | 3 | 6-25*01(1) | 4*02 | 8, 8, 16 | L1-47*01 | 1 | JL1*01 | 8, 3, 12 |
7E3 | 3-30*03 | 6 | 2-15*01 (2) | 4*02 | 8, 8, 19 | K3-15*01 | 3 | JK2*01 | 6, 3, 10 |
Анализ связывания опухолевых клеток
Связывание на клеточной поверхности имеет решающее значение для цитотоксической активности и, следовательно, тестировалось в последующем. Проточная цитометрия показала сильное связывание рекомбинантных антител 5В1, 9H3, 5H11 и 7E3 с клетками DMS-79, с суспензией клеточной линии мелкоклеточного рака легких (фиг. 11А). Связывание r5Bl и r7E3 также было подтверждено на клетках НТ29 рака толстой кишки (фиг. 11B), клетках BxPC3 рака поджелудочной железы (фиг. 11C), клетках SW626 рака яичников (фиг. 11D) и клетках Colo205-luc рака толстой кишки (фиг. 11F). Эти антитела не смогли связаться с sLea-негативными (SLE121-негативными) клетками СК-MEL28 меланомы (фиг. 11E) или клетками EL4 лимфомы мыши (данные не показаны).
Измерения аффинности
Относительное сродство/авидность связывания с sLea зондировали с помощью SPR с использованием биосенсорного чипа, покрытого стрептавидином, для захвата биотинилированного sLea-PPA. Как показано в таблице 6, r5Bl и r7E3 быстро связываются с sLea-PPA и показывают значительно более медленную скорость диссоциации по сравнению с 121SLE, коммерчески доступным мышиным антителом IgM против sLea, которое использовали для сравнения. Сродство 5B1 измеряли при 0,14 нмоль/л, и кажущаяся аффинность/авидность 7E3 была приблизительно в 4 раза выше (таблица 6). Определение сродства 9H3 было затруднено, так как антитела 9H3 (нативные и рекомбинантные) не способны связываться с биосенсорным чипом, покрытым sLea-PAA.
Таблица 6
Определение кинетических параметров связывания антител против sLe a с помощью SPR |
||||||
mAb | Сродство, нмоль/л | Kd, моль/л |
Ka, 1/моль/л |
Ассоциация ka, 1/моль/л∙сек) | Диссоциация kd, 1/сек |
Изотип |
r5B1 | 0,14 | 1,4×10-10 | 7,0×109 | 1,1×106 | 1,6×10-4 | IgG1/λ |
r7E3 | 0,04 | 3,6×10-11 | 2,8×1010 | 8,8×105 | 3,2×10-5 | IgM/κ |
121SLE | 0,35 | 3,5×10-10 | 2,8×109 | 2,7×106 | 9,4×10-4 | m-IgM |
Анализ специфичности
Предварительные анализы для исследования углеводной специфичности показали, что 5B1, 9H3 и 7E3 не связывались с близко родственными антигенами sLeX, Lea или LeY, или ганглиозидами GD2, GD3, фукозил-GM1, GM2 и GM3 при измерении с помощью ELISA или SPR. Дополнительный анализ связывания 7E3, 5B1 и 121SLE с sLea-PAA-биотином или с sLea-sp-биотином, захваченным авидиновым чипом Biacore, показал, что все три антитела связываются с поливалентной формой sLea, в то время как 7E3 и 5B1, как показано, связываются с одновалентной формой. Связывание 5B1 с sLea-PAA ингибировалось также тетрасахаридом sLea дозозависимым образом при анализе Biacore с сериями концентраций (данные не показаны). Эти результаты согласуются с предыдущими наблюдениями, что сыворотки с высокими тирами антител против sLea, как обнаружено с помощью ELISA, являются специфичными для sLea, то есть не взаимодействуют с ганглиозидами GM2, GD2, GD3, фукозил-GM1 или с нейтральными гликолипидами Globo H и Ley. Ragupathi et al., Cancer Immunol Immunother 58:1397-405 (2009). В конкурентном анализе с 9 различными родственными углеводными компонентами в различных представлениях (например, в виде церамида или конъюгатов с BSA или HSA), только тетрасахарид sLea и конъюгат sLea-HSA были способны ингибировать связывание с конъюгатом sLea-HSA (таблица 7).
Таблица 7
Связывание со sLeA-PAA-HSA в присутствии различных родственных гликоконъюгатов. |
||||||||
r5B1 | r9H3 | r7E3 | ||||||
Антигены | Эксп. 1 | Эксп. 2 | Эксп. 1 | Эксп. 2 | Эксп. 1 | Эксп. 2 | ||
Сиалил-Tn-HSA | 1,866 | 1,981 | 1,882 | 1,970 | 2,218 | 2,259 | ||
GloboH-церамид | 1,866 | 1,852 | 1,906 | 1,821 | 2,098 | 2,201 | ||
sTn(c)-HSA (прямой) | 1,896 | 1,864 | 1,947 | 1,883 | 2,131 | 2,136 | ||
sTn-M2-HSA (моно) | 1,937 | 1,857 | 1,843 | 1,826 | 2,040 | 2,066 | ||
LeX-gal-cer | 1,893 | 1,863 | 1,791 | 1,810 | 2,173 | 2,175 | ||
dPSM | 1,897 | 1,890 | 1,757 | 1,700 | 2,218 | 2,110 | ||
Tn-моноалллил-M2-HSA | 1,837 | 1,905 | 2,041 | 1,991 | 2,083 | 2,107 | ||
Муцин Tighe Leb/LeY | 1,808 | 1,837 | 1,951 | 1,964 | 2,106 | 2,065 | ||
LeX-PAA | 1,830 | 1,873 | 2,053 | 2,036 | 2,099 | 2,108 | ||
LeY-церамид | 1,824 | 1,821 | 1,940 | 1,980 | 2,143 | 2,085 | ||
Церамид антигена Льюиса Y | 1,833 | 1,844 | 1,941 | 1,874 | 2,090 | 2,111 | ||
Tn(c)-HSA | 1,881 | 1,711 | 1,893 | 1,917 | 2,146 | 2,030 | ||
T-серин-BSA | 1,809 | 1,830 | 2,128 | 2,089 | 2,137 | 2,039 | ||
TF(c)HSA | 1,874 | 1,909 | 2,031 | 2,032 | 2,119 | 2,094 | ||
Tn LY-BSA | 1,901 | 1,863 | 1,944 | 1,959 | 2,084 | 2,118 | ||
NPrGBMP-HSA | 1,892 | 1,797 | 1,944 | 1,964 | 2,090 | 2,111 | ||
sLeA - HSA | 1,329 | 1,298 | 1,373 | 1,266 | 1,542 | 1,621 | ||
Тетрасахарид sLeA | 0,371 | 0,312 | 0,797 | 0,814 | 2,114 | 2,041 | ||
Нет | 1,809 | 1,809 | 1,993 | 1,993 | 2,096 | 2,096 | ||
Бленк | 0,101 | 0,093 | 0,093 | 0,092 | 0,108 | 0,100 |
Для изучения углеводной специфичности более подробно антитела 5B1 и 7E3 также тестировали с помощью матричного анализа гликанов, проведенного группой Consortium for Functional Glycomics Core H. Оба антитела тестировали в концентрации 10 мкг/мл на печатных матрицах, состоящих из 465 гликанов в 6 повторах. Результаты подтвердили высокую специфичность обоих антител с селективным узнаванием тетрасахарида sLea, Neu5Acα2-3Galβ1-3(Fucαl-4)GlcNAcβ и Neu5Gcα2-3Galβ1-3(Fucα1-4)GlcNAcβ и фактическое отсутствие связывания близкородственных антигенов, которые присутствовали в матрице, включая sLex, Lea, Lex и Ley. Результаты суммированы в таблице 8, в которой показано 5 лучших структур 465 гликанов, которые узнавались соответствующими антителами.
Таблица 8
Анализ специфичности углеводов путем скрининга матрицы гликанов. A. 5B1 |
|||||
Номер карты | Общее название | Структура гликана | Среднее | Ст. Откл. | %CV |
237 | sLea | Neu5Acα2-3Galβ1-3(Fucα1-4)GlcNAcβ-Sp8 | 38,851 | 2,797 | 7 |
278 | sLea | Neu5Gcα2-3Galβ1-3(Fucα1-4)GlcNAcβ-Sp0 | 32,714 | 2,624 | 8 |
329 | sLeaLea | Neu5Acα2-3Galβ1-3(Fucα1-4)GlcNAcβ1-3Galβ1-3(Fucα1-4)GlcNAcβ-Sp0 | 6,477 | 399 | 9 |
238 | sLeaLex | Neu5Acα2-3Galβ1-3(Fucα1-4)GlcNAcβ1-3Galβ1-4(Fucα1-3)GlcNAcβ-Sp0 | 1,344 | 131 | 10 |
349 | Galβ1-4GlcNAcβ1-2Manα1-3(Manα1-6)Manβ1-4GlcNAcβ1-4GlcNAcβ-Sp12 | 129 | 62 | 48 |
B. 7E3 | |||||
Номер карты | Общее название | Структура гликана | Среднее | Ст. Откл. | %CV |
237 | sLea | Neu5Acα2-3Galβ1-3(Fucα1-4)GlcNAcβ-Sp8 | 40,920 | 4,676 | 11 |
329 | sLeaLea | Neu5Acα2-3Galβ1-3(Fucα1-4)GlcNAcβ1-3Galβ1-3(Fucα1-4)GlcNAcβ-Sp0 | 40,210 | 2,095 | 5 |
238 | sLeaLex | Neu5Acα2-3Galβ1-3(Fucα1-4)GlcNAcβ1-3Galβ1-4(Fucα1-3)GlcNAcβ-Sp0 | 39,848 | 3,621 | 9 |
278 | sLea | Neu5Gcα2-3Galβ1-3(Fucα1-4)GlcNAcβ-Sp0 | 36,707 | 2,733 | 7 |
349 | Galβ1-4GlcNAcβ1-2Manα1-3(Manα1-6)Manβ1-4GlcNAcβ1-4GlcNAcβ-Sp12 | 692 | 52 | 8 |
Активность CDC
Для оценки функциональной активности 5B1 и 7E3 изобретатели тестировали цитотоксическую активность на клетках DMS-79 в присутствии сыворотки крови человека в качестве источника комплемента. Оба антитела показали в некоторых анализах близкую к 100% киллерную активность при 10 мкг/мл, в то время как контрольное антитело с отличной специфичностью (1B7, mAb против IgG1 GD2) не оказывало влияния при тех же концентрациях (данные не показаны). Активность CDC зависит от концентрации, и 7Е3 было значительно более активно по сравнению с 5B1 в этом анализе (фиг. 12), что ожидалось, так как антитела IgM, как известно, более эффективны в опосредуемой комплементом цитотоксичности. ЕС50 (50% цитотоксичность) составляла 1,7 мкг/мл для 5B1 и 0,1 мкг/мл для 7E3, что переводится в молях в приблизительно в 85 раз более высокую эффективность для 7E3 (фиг. 12).
Активность ADCC
В то время как 7Е3 является значительно более эффективным в анализе CDC, IgG антитела, как известно, обладают активностью в отношении зависимой от антител клеточно-опосредованной цитотоксичности (ADCC), которая считается важной для уничтожения опухолей in vivo. Высокие уровни цитотоксичности были измерены при использовании антитела 5B1 в отношении РВМС человека и клетками-мишенями DMS-79 при различных соотношениях Е:Т (фиг. 13А). Сходные уровни цитотоксичности наблюдались при более низких соотношениях Е:Т в отношении первичных NK-клеток (фиг. 13В). Эксперимент по дозозависимости с РВМС от 2 доноров при измерении при соотношении Е/Т 100:1 показал аналогичную эффективность, и цитотоксичность более 85% была достигнута при концентрациях 5B1 0,5 мкг/мл или более (фиг 13C). Цитотоксичность, опосредуемая 5B1, требует рецепторов FcyRIII, так как она может быть заблокирована антителами 3G8 против CD16. Высокие уровни цитотоксичности также были измерены с использованием антитела 5B1 с РВМС человека против клеток Colo205-luc при соотношении E:Т 100:1. ADCC-активность, достигаемая при 1 мкг/мл антител 5B1, превосходила активность, наблюдавшуюся с антителами против GM2, фукозил-GM1, Globo H или полисиаловой кислоты. Как и следовало ожидать, 7Е3 и мышиный 121SLE (оба IgM) были неактивны в этом анализе.
Анализ интернализации 5B1
Конъюгаты антитела, направленного на антиген «близкородственный» антигену Льюиса Y, как показано ранее, быстро интернализуются и очень эффективны в моделях на животных. Hellstrom et al., Cancer Res 50:2183-90 (1990); Trail et al., Science 261:212-5 (1993). Для проверки интернализации sLea изобретатели инкубировали клеточную линию BxPC3 поджелудочной железы с 5B1 и затем добавляли Hum-Zap против IgG человека, конъюгированный с сапорином, белком инактивации рибосом. Kohls et al., Biotechniques 28:162-5 (2000). Клетки, которые интернализуют содержащий сапорин комплекс, гибнут, в то время как неинтернализованный сапорин покидает клетки без повреждения. Как показано на фиг. 14, клетки BxPC3 эффективно уничтожались в присутствии возрастающих доз 5B1, в то время как присутствие сходного по изотипу антитела IgG1, направленного против GD2, который не экспрессируется на этих клетках, не уничтожает клетки.
Активность в животной модели ксенотрансплантата для метастазирования
Для того чтобы оценить активность 5B1 in vivo антитела тестировали в двух моделях ксенотрансплантата с использованием либо опухолевых клеток Colo205-luc, либо опухолевых клеток DMS-79 у мышей SCID. Для модели ксенотрансплантата с использованием опухолевых клеток Colo205-luc пяти мышам на группу вводили 0,5×106 клеток в хвостовую вену на день 0, и успешность введения клеток подтверждали путем получения изображения животных с помощью системы визуализации in vivo IVIS 200 (Caliper Life Sciences). Через день животные получали антитела 5B1, вводимые внутрибрюшинно, или пустую инъекцию PBS. В эксперименте 1 100 мкг 5B1 давали на 1, 7, 14 и 21 день (400 мкг общая доза), и в эксперименте 2 животные получали 100 мкг 5B1 на 1, 4, 7, 10, 14 и 21 день (600 мкг общая доза). Средняя медиана выживаемости животных без лечения составила 102 дня в 2-х экспериментах, и все животные без лечения умерли в течение 155 дней (фиг. 15). Лечение животных значительно повышало выживаемость: медиана выживаемости удваивалась к 207 дню в группе, которая получала 4 дозы 5B1, и 2 из 5 животных дожили до окончания эксперимента после 301 дня (лог-ранговый критерий, P=0,0499; HR=3,46). Доля выживших дополнительно увеличивалась до 3-х из 5 мышей при введении 6 доз (лог-ранговый критерий, P=0,0064; HR =6,375). Второй эксперимент был прекращен через 308 дней, и у выживших животных не возможно было выявить опухоли Colo205-luc при самой высокой чувствительности системы визуализации (данные не показаны).
Во втором исследовании мыши, которым аналогичным образом вводили опухолевые клетки Colo205-luc, как описано выше, получали увеличивающиеся дозы антител 5B1 или 7Е3 (100 мкг, 300 мкг или 1 мг). Все животные получали первоначально внутрибрюшинно антитела 5B1 или 7E3 или пустую инъекцию PBS (контроль) на 4-й день после инъекции опухолевых клеток, а затем два раза в неделю в течение первых двух недель, и один раз в неделю в течение последующих 7 недель. Отсроченное лечение различными дозами 5B1 показало зависимую от дозы защиту до полного излечения у мышей SCID с трансплантированными опухолевыми клетками Colo205-luc (фиг. 16 и 17). Лечение антителами 7Е3 не показало более высокую степень защиты, несмотря на повышенное кажущееся сродство (данные не показаны).
В модели ксенотрансплантата с использованием клеток DMS-79 пяти мышам на группу вводили подкожно 1×106 клеток на день 0, и начинали лечение на 19-й день после того, как длина опухоли достигала 5 мм (~20 мм2). Животные затем получали IgG человека или антитела 5B1 путем внутрибрюшинной инъекции 200 мкг на дозу, плюс cRGD путем внутривенной инъекции первоначально 80 мкг, затем 5 дней в неделю 40 мкг на дозу до 37 дня. Рост выявленных опухолей DMS-79 подавлялся или регрессировал у животных, получавших 5B1 или сочетание 5B1 плюс cRGD (фиг. 18А и 18В). Лечение животных 5B1 в день трансплантации клеток DMS-79 в модели подкожной трансплантации полностью предотвращало рост опухоли (данные не показаны).
Приведенные выше данные демонстрируют значительную способность вызывать подавление или регрессию выявленных опухолей и обеспечивать преимущество в выживаемости при использовании лечения антителом 5B1.
ПРИМЕР II
Иммуно-PET обнаружение и диагностика рака поджелудочной железы и других sLe
a
-позитивных аденокарцином при использовании радиоактивно меченного моноклонального антитела 5B1
Аденокарциномы являются ведущей причиной смерти от рака. Обнаружение рака поджелудочной железы остается особенно трудным с диагнозом, часто сделанным на поздней стадии. Подходы к более раннему выявлению первичного и метастатического рака поджелудочной железы могут иметь значительный клинический выход. В клинической практике повышенные уровни антигена sLea контролируются для выявления предполагаемого неидентифицированного злокачественного новообразования у больных раком поджелудочной железы. Как описано в настоящем документе, исследовался потенциал нового зонда immunoPET визуализации, направленного на sLea, в доклинических моделях рака поджелудочной железы и других sLea-позитивных аденокарциномах. Положительное окрашивание моноклональным антителом 5B1 человека против sLea выявлено в аденокарциномах человека, известных как sLea-позитивные, но не в sLea-негативных злокачественных опухолях или большинстве нормальных тканей. 89Zr-радиоактивно меченное 5B1 (89Zr-5Bl) продемонстрировало высокую степень метки (>80%) и выходы очистки (>95%). Визуализация с помощью 89Zr-5Bl была исследована при подкожных, ортотопических и метастатических ксенотрансплантатах рака поджелудочной железы самкам мышей SCID. Полученные изображения PET и исследования биораспределения продемонстрировали исключительную специфичность и локализацию 89Zr-5Bl в sLea-гиперэкспрессирующих ксенотрансплантатах BxPC3 с минимальным неспецифическим связыванием со здоровыми тканями. Дальнейший анализ в моделях подкожных ксенотрансплантатов рака толстой кишки и немелкоклеточного рака легкого привел также к отличному очерчиванию опухоли 89Zr-5Bl. Соответственно, эти результаты показывают, что 89Zr-5Bl может быть использован в качестве молекулярного зонда для раннего обнаружения экспрессирующих sLea злокачественных новообразований в клинике.
Клеточные линии и культура ткани
Все манипуляции с культурами ткани выполняли, следуя приемам стерилизации. Клетки DMS79 мелкоклеточного рака легких и клетки BxPC3 рака поджелудочной железы получали от американской коллекции типовых культур (АТСС, Manassas, VA). Клетки Colo205-luc колоректального рака (Bioware Ultra) приобретали у Caliper Life Sciences (CLS, Hopkinton, MA). Все клетки выращивали в соответствии с рекомендациями АТСС и CLS при 37°С с 5% СO2 в увлажненной атмосфере.
Оценка уровней экспрессии sLe
a
с помощью FACS
Проточную цитометрию указанных культивируемых линий раковых клеток проводили, как описано в настоящем документе в примере I. Вкратце, клонированные клеточные суспензии 1×106 культивируемых опухолевых клеток на пробирку отмывали в PBS с 3% фетальной бычьей сывороткой (FBS). Затем добавляли моноклональные антитела человека r5Bl (IgG против sLea) 20 мкг/мл на пробирку, и инкубировали на льду в течение 30 мин. После промывки в PBS с 3% FBS добавляли 20 мкл разбавленного 1:25 козьего антитела против IgG человека, меченного изотиоцианатом флуоресцеина (FITC, Southern Biotechnology, Birmingham, AL), и смесь инкубировали в течение еще 30 минут на льду. После окончательной промывки позитивную популяцию и медиану интенсивности флуоресценции окрашенных клеток дифференцировали с помощью сканирования FACS (Becton & Dickinson, San Jose, CA). Клетки, окрашенные только козьим антителом против IgG, меченным изотиоцианатом флуоресцеина, использовали для настройки FACScan, приводившей в результате к 1% как к фону для сравнения процента позитивных клеток, окрашенных первичным mAb.
Получение антител, меченных
89
Zr
Рекомбинантные антитела 5B1 получали и очищали, как описано в настоящем документе. Антитела 5B1 и неспецифические IgG человека функционализировали п-изотиоцианатобензил-дезферриоксамином (DFO-Bz-NCS, Macrocyclics, Inc., Dallas, TX) в отношении 1:4 mAb:DFO-BZ-NCS. Например, к 300 мкл 5B1 (1,23 мг в PBS, рН~9), добавляли объем 7,2 мкл DFO-BZ-NCS (4,25 мМ в ДМСО). Реакционную смесь инкубировали при 37°С в течение 1-1,5 час. Функционализированные антитела очищали либо с помощью обессоливающей колонки PD10 (GE Healthcare), либо с помощью 10 кДа центробежного фильтра (Amicon).
Zr-89 получали с помощью бомбардировки протонным пучком фольги иттрия и выделяли с высокой степенью чистоты в виде оксалата Zr-89 в MSKCC в соответствии с ранее разработанным методом. Holland et al., Nuclear Medicine and Biology 36:729-39 (2009). Мечение антител происходило с помощью методов, описанных Holland et al., Journal of Nuclear Medicine official publication, Society of Nuclear Medicine 51:1293-300 (2010). В общем, оксалат Zr-89 нейтрализовали до рН 7,0-7,2 с помощью 1 М Na2CO3. Затем добавляли DFO-антитела. Реакционную смесь инкубировали при комнатной температуре в течение 1-2 часов. Последующую очистку проводили с использованием любой обессоливающей колонки PD10 с 0,9% физиологическим раствором.
Эксперименты in vitro
89Zr-5Bl исследовали на стабильность in vitro в 0,9% физиологическом растворе и в 1% бычьем сывороточном альбумине в течение 5 дней при температуре 37°C. Изменения радиохимической чистоты контролировали при t=0-5 дней с помощью излучающей iTLC с 50 мМ DTPA в качестве подвижной фазы. Тесты на иммунореактивность in vitro проводили в соответствии с протоколом, описанным Lindmo et al., Journal of Immunological Methods 72:77-89 (1984), для демонстрации целостности антител, меченных радиоактивным Zr-89.
Животные модели
Все исследования на животных были проведены в соответствии с руководящими принципами, установленными комитетом по уходу и использованию животных института. У самок мышей CB17SC-F SCID (Jackson Laboratories, 6-8 недель, 20-22 г) или голых бестимусных (nu/nu) мышей индуцировали развитие опухолей на задних лапах. Все клеточные линии инокулировали подкожно в 200 мкл 1:1 среда:раствор матригеля (BD Biosciences), и выращивали до максимального объема опухоли 250 мм3 перед использованием.
Исследования биораспределения
Исследования биораспределения проводили на нескольких когортах мышей-носителей отдельных ксенотрансплантатов Colo205-luc колоректального рака, BxPC3 рака поджелудочной железы и DMS79 мелкоклеточного рака легких (n=3-5). Zr-89 mAbs (370-740×109 мкБк, 1-2 мкг) в 100 мкл 0,9% физиологического раствора вводили внутривенно в латеральную вену. Дополнительное немеченое mAb (10-50 мкг) вводили совместно с меченым. Исследование блокирования с помощью 250 мкг избытка немеченого mAb проводили с целью изучения специфичности антитела против sLea в когорте мышей. После каждой временной точки (t= 24, 48, 120 час после введения) мышей усыпляли асфиксией СO2. Кровь собирали немедленно посредством пункции сердца, наряду с этим собирали опухоли вместе с выбранными органами. Измеряли сырую массу каждой ткани, и радиоактивность, связанную с каждым органом, подсчитывали с помощью гамма-счетчика Wizard2 2480 (Perkin Elmer). Процент захвата метки, выраженный как % вводимой дозы на грамм (%ID/г), рассчитывали как активность, связанную с тканью, на массу органа, на фактически вводимую дозу с коррекцией на распад к времени подсчета.
Иммуно-PET для мелких животных
Эксперименты по визуализации выполняли с помощью microPET Focus 120 или сканера R4 (Concorde Microsystems). Мышам (n=3-5) вводили антитела, меченные Zr-89 (7400-11100 мкБк, 15-25 мкг), в 100-200 мкл составов 0,9% физиологического раствора путем инъекций в латеральную хвостовую вену. Полученные PET-изображения всего тела мышей записывали через 24-96 час после инъекций при анестезии 1,5-2,0% изофлураном (Baxter Healthcare) в кислороде. Изображения анализировали с помощью программного обеспечения ASIPro VM™ (Concorde) Microsystems. Получали изображения областей, представляющих интерес (ROI), и представляли в зависимости от времени.
Иммуногистохимия
Биотинилированные 5B1 получали путем инкубации с 20× молярным избытком сульфо-NHS-LC-биотина (Thermo Scientific/Pierce Cat # 21327) в течение 30 минут при комнатной температуре. Свободный биотин удаляли с помощью обессоливающих спин-колонок Zebra™ (Thermo Scientific/Pierce, Cat # 89889) в соответствии с инструкциями изготовителя. Проводили замену буфера антител на PBS, содержащий 0,01% азид натрия в концентрации 1,1 мг/мл. Связывание на клетках DMS79 подтверждали FACS, и оно было сравнимо с родительским антителом 5B1.
Предварительные условия иммуногистохимического окрашивания определяли с использованием клеток Colo205 в качестве положительного контроля и клеток SK-MEL28 в качестве отрицательного контроля. Получали клеточную массу, фиксировали формалином и заключали в парафин. Срезы инкубировали с биотинилированными 5B1, разведенными в 10% (об/об) нормальной сыворотке человека в PBS (Jackson ImmunoResearch Labs; cat# 009-000-121). Окрашивание проводили с помощью автоматизированной системы Ventana (Discovery XT platform-Ventana Medical Systems, Inc, Tucson, AZ) стандартным стрептавидин-биотин-иммунопероксидазным методом и с помощью DAB-системы детектирования в качестве метода окрашивания. Открытие антигена проводили с использованием нагревания и кондиционирующего раствора Ventana's CC1. Мышиное моноклональное антитело CA 19,9 (клон 116-NS-19-9) от Signet (Covance) давало сопоставимые результаты в пилотном исследовании. Клетки Colo205 имели интенсивную положительную окраску биотинилированными 5B1 при использовании в концентрации 10 мкг/мл, в то время как клетки SKMEL28 были негативными по окраске. Тканевые микроматрицы Histo-Array™ приобретали у Imgenex (San Diego, CA). Использовали следующие срезы, содержащие центральную массу биопсии опухолей, а также центральную массу некоторых нормальных тканей: IMH-327 (наиболее распространенные виды рака, 59 образцов), IMH-359 (колоректальная: рак-метастаз-нормальная ткань; 59 образцов) и IMH-324 (метастатический рак яичника). Центральные массы опухолевой ткани поджелудочной железы присутствовали в IMH-327.
Концентрации sLe
a
в сыворотке in vivo
У мышей, несущих ксенотрансплантаты Colo205, BxPC3 и DMS79, брали кровь для анализа антигена sLea. Группа мышей, не имеющих опухолей, служила в качестве контроля. Уровни sLea в сыворотке мышей измеряли с использованием набора ST AIA-PACK CA19.9 (Cat # 025271, TOSOH Bioscience Inc, South San Francisco, CA). Принцип анализа основан на двухслойном количественном иммуноферментном анализе. Анализ проводили, как описано в инструкции изготовителя. Оптическую плотность иммуноаналитических планшетов измеряли на автоматическом иммуноаналитическом анализаторе TOSOH AIA2000 (Tosoh Bioscience, Inc., San Francisco, CA).
Статистический анализ
Значения данных выражали как среднее ± стандартное отклонение, если не указано иное. Статистический анализ проводили с использованием программного обеспечения GraphPad Prism версии 5.03 с использованием однофакторного ANOVA с последующим критерием Dunnett. Значения р<0,05 рассматривались как статистически значимые.
Результаты
Специфичность связывания 5B1 проверяли путем окрашивания выбранных микрочипов злокачественных и нормальных тканей. Реактивность 5B1 была ограничена злокачественными опухолями и случайными нормальными тканями, ранее известными как гиперэкспрессирующие sLea (Фиг. 19; таблица 9). В большинстве нормальные ткани были полностью негативными (таблица 9). В противоположность этому, сильное положительное окрашивание было обнаружено в 21/34 аденокарциномах толстой кишки (62%), 33/57 метастазах аденокарциномы в яичники (58%) и 7/9 протокового рака поджелудочной железы (66%) на различных стадиях (таблица 10). Как показано на фиг. 19, типичная реактивность представляла собой диффузное окрашивание цитоплазмы с некоторыми опухолевыми клетками, четко демонстрирующими окрашивание клеточной мембраны. Кроме того, некоторые варианты перстневидноклеточного рака яичников и некоторые виды рака легких и молочной железы также оказались сильно положительными. В противоположность этому, только 4/43 образцов рака простаты и 0/51 случаев GIST были позитивными (данные не показаны).
Таблица 9
Обзор связывания 5B1 с нормальными тканями |
|
Нормальная ткань | Окраска |
Мозг | Негативная |
Молочная железа | Позитивная |
Толстая кишка | Позитивная |
Почка | Негативная |
Печень | Негативная |
Легкое | Негативная |
Лимфатический узел | Негативная |
Мышца | Негативная |
Поджелудочная железа | Позитивная |
Плацента | Негативная |
Кожа | Негативная |
Селезенка | Негативная |
Желудок | Негативная |
Таблица 10
Окрашивание 5B1 протоковых аденокарцином поджелудочной железы |
||||
ИГХ 5B1 | Стадия | Возраст | Пол | Гистология |
Нег. | II | 71 | М | Умеренно дифференцированная |
Поз.++ | III | 68 | М | Умеренно дифференцированная |
Нег. | III | 64 | Ж | Умеренно дифференцированная |
Поз.++ | III | 46 | М | Умеренно дифференцированная |
Поз.++ | III | 54 | М | Умеренно дифференцированная |
Поз.++ | III | 40 | М | Умеренно дифференцированная |
Поз.+/- | IVA | 66 | М | Умеренно дифференцированная |
Поз.++ | IVA | 45 | М | Умеренно дифференцированная |
Плохая ткань | IVA | 64 | Ж | Умеренно дифференцированная |
Поз.++ | IVA | 69 | М | Плохо дифференцированная |
Высокая специфичность иммуноокрашивания 5B1 раковых тканей, экспрессирующих sLea, послужила основанием для использования этого mAb в качестве PET-зонда. Создавали модификацию 5B1 бензилизотиоцианатным аналогом дезфероксамина (DFO-BZ-NCS) в соотношении 4:1 (хелат:mAb) с последующей очисткой с помощью центробежной фильтрации с использованием физиологического раствора в качестве промывочного буфера. Легко достижимое введение радиоактивной метки Zr-89 проходило при комнатной температуре после доведения рН до 7,0-7,2. Более узкий диапазон рН, близкий к нейтральному, необходим для достижения оптимального >80% выхода при введении радиоактивной метки. Свободный, несвязанный Zr-89 удаляли с помощью обессоливающей колонки PD10. Концентрирование продукта осуществляли с использованием центробежной фильтрации (MWCO: 10 кДа). Установлена относительно высокая удельная активность 447,7×109±40,7×109 мБк/мг. Перед использованием обеспечивали радиохимическую чистоту более чем на 95%. Анализы иммунореактивности показали сохранение активности sLea (72,4±1,1%, n=3). Стабильность в бычьем сывороточном альбумине при 37°С поддерживалась на уровне >95% в течение 5 дней (данные не показаны). В физиологическом растворе деметаллирование наблюдалось уже через 24 час (>85% в целом) с приблизительно >75% связанного радиоактивного металла через 120 час при 37°С.
Исследования PET-визуализации мелких животных и биораспределения проводили с использованием самок мышей SCID с подкожно имплантированными ксенотрансплантатами BxPC3 рака поджелудочной железы на левой задней ноге. Полученные PET-изображения подтвердили с помощью 89Zr-5Bl существенное ограничение sLea, связанное с опухолью. Из проекций максимальной интенсивности (MIP) на фиг. 20 ксенотрансплантаты BxPC3 (n=3) показали чрезвычайную аккумуляцию радиоактивной метки, вводимой внутривенно. Области, представляющие интерес (ROI), обрисовывающие опухоль в изображениях PET, показали захват 5,0±0,4% ID/г (2 час), 16,2±2,5% ID/г (24 час), 23,8±4,7% ID/г (48 час), 36,8±6,1% ID/г (96 час) и 49,5±7,7% ID/г (120 час). Связывающая активность пула крови и нормальных тканей очевидно исчезала через 24 час после введения. Результаты экспериментов по биораспределению согласуются с данными PET. Наблюдался высокий уровень локализации в опухоли 89Zr-5Bl через 24 час (84,7±12,3% ID/г, n=4); повышенный захват наблюдался далее через 120 час после введения (114,1±23,1% ID/г, n=4) (фиг. 21). Захват опухолью превышает 100% из-за малой массы (62,4±0,03 мг). % ID через 24 час после инъекции, как установлено, был в десять раз выше, чем у неспецифически связывающего IgG в сходных временных точках (фиг. 21, вставка). Конкурентное ингибирование с помощью 250 мкг немеченого 5B1 через 24 час после инъекции блокировало аккумуляцию метки, указывая на специфичность захвата. Наблюдалось минимальное связывание 89Zr-5Bl с нормальной поджелудочной железой и остальными собранными нормальными тканями, что обеспечивает высокий контраст между опухолью и тканями во всех временных точках.
Следуя приведенным выше результатам, 89Zr-5Bl анализировали в ортотопической модели опухоли поджелудочной железы BxPC3. Ортотопические модели являются клинически значимыми и предоставляют клинически приемлемое тестирование эффективности зонда PET. После инокуляции в поджелудочную железу рост опухоли контролировали еженедельно с помощью биолюминесцентного оптического изображения. Эксперименты по PET-визуализации проводили после того, как опухоли становились пальпируемыми. Сравнение свойств очерчивающего опухоли зонда было сделано между FDG-PET и 89Zr-5Bl (фиг. 25). Компьютерная томография (КТ) в сочетании с PET обеспечивала улучшенную визуализацию анатомической области, представляющей интерес.
Для оценки 89Zr-5Bl в качестве зонда PET для других аденокарцином, экспрессирующих sLea, 89Zr-5Bl анализировали в моделях рака легких и толстой кишки. Эксперименты на мелких животных проводили с использованием клеток DMS79 мелкоклеточного рака легких и клеток Colo205-luc рака толстой кишки, вводимых подкожно в правую заднюю лапу самок мышей SCID. PET-изображения MIP получали через 24-120 час после внутривенного введения 7400-11100 мкБк (16-25 мкг). Гетерогенный захват опухолью DMS79 продемонстрирован при 38,15±2,12% ID/г уже через 24 час после введения с прекрасным сигналом относительно фона (фиг. 22A). Повышение аккумуляции метки в опухоли происходило через 48 час после введения (44,60±6,47% ID/г) с сохранением через 120 час после введения (41,97±12,23% ID/г). Неспецифически связанное 89Zr-5Bl быстро вымывалось из нормальных тканей с от минимального захвата до отсутствия фонового захвата через 48 час после введения. Кроме того, очерчивание опухоли наблюдалось у ксенотрансплантатов Colo205-luc, как показано на фиг. 22B через 24-120 час после введения. ROIs продемонстрировали накопление в опухоли с 10,5±0,76, 23,5±2,7, 24,8±4,0, 18,4±4,7, 16,5±2,3% ID/г через 2, 24, 48, 96 и 120 час, соответственно. Наблюдаемое повышение аккумуляции в печени происходило с течением времени с последующим снижением захвата опухолью, как показано для области, представляющей интерес, из изображений PET (фиг. 22C). Данные, полученные из исследований по биораспределению, хорошо коррелируют с наблюдаемыми результатами PET (данные не показаны). Уровень sLea в сыворотке мышей количественно оценивали по мере прогрессии опухолей. Осуществляли получение крови у мышей SCID, несущих ксенотрансплантаты Colo205, DMS79 и BxPC3, в качестве контроля служила группа, не несущая опухоли. Величины sLea были на высоком уровне у мышей, нагруженных Colo205, по сравнению с мышами с имплантацией BxPC3 поджелудочной железы и DSM79 (таблица 11).
Таблица 11
Величины sLe a у мышей, несущих ксенотрансплантаты опухолей прямой кишки (Colo205), поджелудочной железы (BxPC3) и мелкоклеточного рака легкого (DMS79), по сравнению с контролем. |
|||
Тип опухоли | # животного | Объем опухоли, мм3 | sLea, Ед/мл |
Colo205-luc | M1 | 269,5 | 3227 |
M2 | 257,3 | 2957 | |
M3 | 281,3 | 1318 | |
BxPC3 | M1 | 232,38 | N.D. |
M2 | 320,00 | N.D. | |
M3 | 220,50 | N.D. | |
DMS79 | M1 | 288,0 | N.D. |
M2 | 245,0 | N.D. | |
M3 | 232,4 | N.D. | |
Контроль | M1 | - | 3 |
M2 | - | 3 | |
M3 | - | 3 | |
N.D.= не определяли. |
Эти результаты показывают, что антитело против Slea (89Zr-5B1) является специфическим для обнаружения и диагностики аденокарциномы поджелудочной железы и других sLea-позитивных аденокарцином. 89Zr-5Bl получали с прекрасным выходом и чистотой наряду с высокой удельной активностью и удерживаемой иммунореактивностью. Оценка 89Zr-5Bl в подкожных, ортотопических и метастатических моделях опухолей поджелудочной железы давала отличное разграничение опухоли и диагностику. Доклиническая оценка этой радиоактивной метки у мелких животных-опухоленосителей, несущих опухоль толстой кишки и мелкоклеточную опухоль легкого, продемонстрировала универсальную пригодность этой метки для злокачественных опухолей, экспрессирующих sLea.
ПРИМЕР III
Диатела против sLe
a
, связывающиеся с различными клеточными линиями рака
Получено два диатела с использованием доменов VH и VL изолятов клонов 5B1 и 7E3, описанных в настоящем документе, обозначенных 5BlCysDb и 7E3CysDb, соответственно (фиг. 9 и 10). Оба диатела содержали пять областей аминокислотных линкеров между доменами VL и VH. Полигистидиновую метку на C-конце, которую использовали для очистки и детекции, также включали в оба диатела.
Связывание 5BlCysDb и 7E3CysDb с тремя линиями раковых клеток: (1) клетками DMS-79, суспензионной клеточной линии мелкоклеточного рака легкого; (2) клетками Capan-2, клетками аденокарциномы поджелудочной железы; и (3) клетками BxPC3, клетками рака поджелудочной железы, анализировали путем инкубации 0,25 миллиона клеток в 0,2 мл с 10 мкг/мл 5BlCysDb или 7E3CysDb, соответственно. Сочетания клеток и диатела инкубировали в течение 40 минут на льду в PBS/2% FBS.
После промывки клетки инкубировали в течение 40 мин с 0,2 мл ALEXA-488-меченным антителом против His, разведенным 1:1000 (Life Technology, Cat # A21215). После второй промывки клетки анализировали на проточном цитометре Guava. Как 5BlCysDb, так и 7E3CysDb продемонстрировали значительное связывание с DMS-79, Capan-2 и клетками BxPC3 (таблица 12).
Таблица 12
Связывание 5BlCysDb и 7E3CysDb с клеточными линиями |
|||||
5B1CysDb | 7E3CysDb | ||||
Клеточная линия | Процент (+) | MFI | Процент(+) | MFI | |
DMS-79 | 98,1 | 113,0 | 93,8 | 124,6 | |
Capan-2 | 63,8 | 98,5 | 65,9 | 235,3 | |
BxPC3 | 51,3 | 39,9 | 50,2 | 49,7 | |
MFI - средняя интенсивность флуоресценции |
ПРИМЕР IV
Введение 5B1 и таксола ингибирует рост опухоли
Противоопухолевую активность вводимых совместно антитела против sLea (5B1) и химиотерапевтического агента таксола (паклитаксела) оценивали в моделях ксенотрансплантатов рака поджелудочной железы и мелкоклеточного рака легких. Как описано в настоящем документе выше, 1 миллион клеток BxPC3 (клеток опухоли поджелудочной железы) или 5 миллионов клеток DMS-79 (клеток мелкоклеточного рака легких) вводили в задний пах 6-недельным самкам мышей СВ17 SCID (день 0, N=5), опухолям DMS79 давали расти в течение 21 дня, до тех пор, пока средний размер опухоли составил 193±64 мм3. IgG человека или 5B1 (0,5 или 1 мг) вводили в./б. дважды в неделю (начиная на 21-й день), и таксол (0,2 мг/доза) вводили в./в. на 23, 30, 37 и 44 дни. В модели ксенотрансплантата DMS-79 совместное введение антитела 5B1 и таксола значительно ограничивало рост опухоли и приводило к регрессии опухоли по сравнению с контрольным IgG человека или с индивидуальным введением антитела 5B1 и таксола (фиг. 23).
В модели ксенотрансплантата BxPC3 опухоли росли в течение 14 дней, после чего они достигали в среднем 126±30 мм3. Таксол вводили внутривенно на 14, 21, 28 и 34 дни (еженедельно) и 5B1 давали дважды в неделю, начиная с 14-го дня. Совместное введение антитела 5B1 и таксола значительно ограничивало рост опухоли по сравнению с контролями или с индивидуальным введением антитела 5B1 и таксола (фиг. 24). Эти результаты демонстрируют синергичный эффект антитела против sLea и химиотерапевтического агента в предотвращении роста опухоли и/или уменьшении размера опухолей рака поджелудочной железы и мелкоклеточного рака легкого.
В данной заявке даны ссылки на различные публикации. Раскрытия этих публикаций тем самым включены в данную заявку в полном объеме в качестве ссылки для того, чтобы более полно описать состояние техники, к которой относится данное изобретение. Несмотря на то, что изобретение описано со ссылками на примеры, представленные выше, следует понимать, что различные модификации могут быть сделаны без отхода от сущности настоящего изобретения.
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> MabVax Therapeutics, Inc.
<120> Нуклеиновые кислоты, кодирующие антитела против сиалированного антигена
Льюисаа человека
<130> 12967-033-228
<140> TBA
<141> 2014-08-26
<150> US 61/870,137
<151> 2013-08-26
<160> 20
<170> Патент версии 3.5
<210> 1
<211> 426
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VH клона 5B1
<400> 1
atggagtttg ggctgagctg gctttttctt gtggctattt taaaaggcgt acagtgccag 60
gtgcagctgg tggagtctgg gggaggctcg gtgcagcctg gcaggtccct gagactctcc 120
tgtgaagcct ctggattcac ctttgaggcc tatgccatgc actgggtccg gcaacctcca 180
gggaagggcc tggagtgggt ctcaagtatt aattggaata gtggtcgcat agcctatgcg 240
gactctgtga agggccgatt caccatctcc agagacaacg ccaggaattc cctgtatctg 300
caaatgaaca gtctgagact tgaggacacg gccttctatt actgtgcaaa agatatacgg 360
aggtttagta ccgggggggc ggagtttgag tactggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 420
tcctca 426
<210> 2
<211> 142
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VH клона 5B1
<400> 2
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln
20 25 30
Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Glu Ala Tyr Ala Met His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Val Ser Ser Ile Asn Trp Asn Ser Gly Arg Ile Ala Tyr Ala
65 70 75 80
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn
85 90 95
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Leu Glu Asp Thr Ala Phe
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Ile Arg Arg Phe Ser Thr Gly Gly Ala Glu
115 120 125
Phe Glu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 3
<211> 390
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VL клона 5B1
<400> 3
atggccggct tccctctcct cctcaccctc ctcactcact gtgcagggtc ttgggcccag 60
tctgtgctga ctcagccgcc ctcagcgtct gggacccccg ggcagagggt caccatctct 120
tgttctggaa gcagctccaa catcggaagt aattttgtat actggtacca gcagctccca 180
ggaacggccc ccaaactcct catatatagg aataatcagc ggccctcagg ggtccctgac 240
cgattctctg gctccaggtc tggcacctca gcctccctgg ccatcagtgg actccggtcc 300
gaggatgagg ctgattatta ctgtgcagca tgggatgaca gcctgggagg ccattatgtc 360
ttcggaactg ggaccaaggt caccgtcctt 390
<210> 4
<211> 130
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VL клона 5B1
<400> 4
Met Ala Gly Phe Pro Leu Leu Leu Thr Leu Leu Thr His Cys Ala Gly
1 5 10 15
Ser Trp Ala Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr
20 25 30
Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile
35 40 45
Gly Ser Asn Phe Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Arg Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser
85 90 95
Gly Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp
100 105 110
Asp Ser Leu Gly Gly His Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr
115 120 125
Val Leu
130
<210> 5
<211> 426
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VH клона 9H3
<400> 5
atggagtttg ggctgagctg gctttttctt gtggctattt taaaaggcgt acagtgcgaa 60
gtgcagctgt tggagtctgg gggaggcttg gtacagcctg gcaggtccct gagactctcc 120
tgtgcggcct ctggatttac ctttgatgat tatgtcatgc actgggtccg gcaagctcca 180
gggaagggcc tggagtgggt ctcaagtatt agttggaata gtggtagcat aggctatgcg 240
gactctgtga agggccgatt catcatctcc agagacaacg ccaagaactc cctgtatctg 300
caaatgaaca gtctgagagc tgaggacacg gccttgtatt actgtgcaaa agatcgtcgt 360
attaggggtg actcggggtt cgagggtgac tactggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 420
tcctca 426
<210> 6
<211> 142
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VH клона 9H3
<400> 6
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
20 25 30
Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Asp Asp Tyr Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Val Ser Ser Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala
65 70 75 80
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
85 90 95
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Arg Arg Ile Arg Gly Asp Ser Gly Phe Glu
115 120 125
Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 7
<211> 387
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VL клона 9H3
<400> 7
atggccggct tccctctcct cctcaccctc ctcactcact gtgcagggtc ttgggcccag 60
tctgtgttga cgcagccgcc ctcagcgtct gggacccccg ggcagagggt caccatctct 120
tgttctggaa gcagctccaa catcggaagt aattatgtat actggtacca gcagctccca 180
ggaacggccc ccaaactcct catctatagg aataatcagc ggccctcagg ggtccctgac 240
cgattctctg gctccaagtc tggcacctca gcctccctgg ccatcagtgg gctccggtcc 300
gaggatgagg ctgattatta ctgtgcagca tgggatgcca gcctgagtgg tgtggtattc 360
ggcggaggga ccaagctgac cgtccta 387
<210> 8
<211> 129
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VL клона 9H3
<400> 8
Met Ala Gly Phe Pro Leu Leu Leu Thr Leu Leu Thr His Cys Ala Gly
1 5 10 15
Ser Trp Ala Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr
20 25 30
Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile
35 40 45
Gly Ser Asn Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser
85 90 95
Gly Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp
100 105 110
Ala Ser Leu Ser Gly Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val
115 120 125
Leu
<210> 9
<211> 426
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VH клона 5H11
<400> 9
atggagtttg ggctgagctg gctttttctt gtggctattt taaaaggcgt acagtgccag 60
gtgcagctgt tggagtctgg gggaggcttg gtacagcctg gcaggtccct gagactctcc 120
tgtgcagcct ctggattcac ctttgatgaa tatgccatgc actgggtccg gcaagctcca 180
gggaagggcc tggagtgggt ctcaagtgtt agttggaata gtggtagcat aggctatgcg 240
gactctgtga agggccgatt caccatctcc agagacaacg ccaagaactc cctgtatcta 300
caaatgaaca gtctgagagc tgaggacacg gccttgtatt actgtgcaaa agatatacgg 360
acctatagca ccgggggggc ggagtttgcc tcctggggcc agggaaccct ggtcaccgcc 420
tcctca 426
<210> 10
<211> 142
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VH клона 5H11
<400> 10
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
20 25 30
Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Asp Glu Tyr Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Val Ser Ser Val Ser Trp Asn Ser Gly Ser Ile Gly Tyr Ala
65 70 75 80
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
85 90 95
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Ile Arg Thr Tyr Ser Thr Gly Gly Ala Glu
115 120 125
Phe Ala Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Ala Ser Ser
130 135 140
<210> 11
<211> 390
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VL клона 5H11
<400> 11
atggccggct tccctctcct cctcaccctc ctcactcact gtgcagggtc ttgggcccag 60
tctgtgttga cgcagccgcc ctcagcgtct gggacccccg ggcagagggt caccatctct 120
tgttctggaa gcagctccaa catcggaagt aattatgtat actggtacca gcaggtccca 180
ggaacggccc ccaaactcct catctatagg aataatcagc ggccctcagg ggtccctgac 240
cgattctctg gctccaagtc tggcacctca gcctccctgg ccatcagtgg gctccggtcc 300
gaggatgagg ctgattatta ctgtgcagca tgggatgaca gcctgagtgg ccattatgtc 360
ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta 390
<210> 12
<211> 130
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VL клона 5H11
<400> 12
Met Ala Gly Phe Pro Leu Leu Leu Thr Leu Leu Thr His Cys Ala Gly
1 5 10 15
Ser Trp Ala Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr
20 25 30
Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile
35 40 45
Gly Ser Asn Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Val Pro Gly Thr Ala Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser
85 90 95
Gly Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp
100 105 110
Asp Ser Leu Ser Gly His Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr
115 120 125
Val Leu
130
<210> 13
<211> 435
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VH клона 7E3
<400> 13
atggagtttg ggctgagctg gctttttctt gtggctattt taaaaggcgt acagtgccaa 60
gtgcagctgt tggagtctgg gggaggcgtg gtccagcctg ggaggtccct gagactctcc 120
tgtgcagcct ctggattcac cttcagtttc tatggcatgc actgggtccg ccaggctcca 180
ggcaaggggc tggagtgggt ggcagctata tcatatgatg gaagtaataa atactatgca 240
gactccgtga agggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtatctg 300
caaatgaaca gcctgagagc tgaggacacg gctgtgtatt actgtgcgaa aaggcccaac 360
caattttatt gtagtgatgg tagatgctac tccattgact actggggcca gggaaccctg 420
gtcaccgtct cctca 435
<210> 14
<211> 145
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VH клона 7E3
<400> 14
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln
20 25 30
Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Phe Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Val Ala Ala Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala
65 70 75 80
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
85 90 95
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Lys Arg Pro Asn Gln Phe Tyr Cys Ser Asp Gly Arg
115 120 125
Cys Tyr Ser Ile Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
130 135 140
Ser
145
<210> 15
<211> 390
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VL клона 7E3
<400> 15
atggacatga gggtccccgc tcagctcctg gggctcctgc tactctggct ccgaggtgcc 60
cggtgtgaaa ttgtaatgac gcagtctcca gccaccctgt ctgtgtctcc aggggagaga 120
gccaccctct cctgcagggc cagtcagagt gttagcagca acttagcctg gtaccagcag 180
aaacctggcc aggctcccag gctcctcatc tatggtgcat ccaccagggc cactggtatc 240
ccagccaggt tcagtggcag tgggtctggg acagacttca ctctcaccat cagcagcctg 300
cagtctgtag attctgcagt ttattactgt cagcagtata ataactggcc tccgtacact 360
tttggccagg ggaccaagct ggagatcaaa 390
<210> 16
<211> 130
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Домен цепи VL клона 7E3
<400> 16
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp
1 5 10 15
Leu Arg Gly Ala Arg Cys Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr
20 25 30
Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser
35 40 45
Gln Ser Val Ser Ser Asn Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
50 55 60
Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile
65 70 75 80
Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
85 90 95
Ile Ser Ser Leu Gln Ser Val Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
100 105 110
Tyr Asn Asn Trp Pro Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu
115 120 125
Ile Lys
130
<210> 17
<211> 750
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность диатела 5B1CysDb
<400> 17
cagtctgtgc tgacgcagcc gccctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60
tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaattttg tatactggta ccagcagctc 120
ccaggaacgg cccccaaact cctcatatat aggaataatc agcggccctc aggggtccct 180
gaccgattct ctggctccag gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tggactccgg 240
tccgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctggg aggccattat 300
gtcttcggaa ctgggaccaa ggtcaccgtc ctttctggtg gtggtggtca ggtgcagctg 360
gtggagtctg ggggaggctc ggtgcagcct ggcaggtccc tgagactctc ctgtgaagcc 420
tctggattca cctttgaggc ctatgccatg cactgggtcc ggcaacctcc agggaagggc 480
ctggagtggg tctcaagtat taattggaat agtggtcgca tagcctatgc ggactctgtg 540
aagggccgat tcaccatctc cagagacaac gccaggaatt ccctgtatct gcaaatgaac 600
agtctgagac ttgaggacac ggccttctat tactgtgcaa aagatatacg gaggtttagt 660
accggggggg cggagtttga gtactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctcaggt 720
tctcaccatc accatcacca tggcggttgc 750
<210> 18
<211> 250
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность диатела 5B1CysDb
<400> 18
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Phe Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Arg Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu
85 90 95
Gly Gly His Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Ser
100 105 110
Gly Gly Gly Gly Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val
115 120 125
Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Phe Thr
130 135 140
Phe Glu Ala Tyr Ala Met His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly
145 150 155 160
Leu Glu Trp Val Ser Ser Ile Asn Trp Asn Ser Gly Arg Ile Ala Tyr
165 170 175
Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg
180 185 190
Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Leu Glu Asp Thr Ala
195 200 205
Phe Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Ile Arg Arg Phe Ser Thr Gly Gly Ala
210 215 220
Glu Phe Glu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly
225 230 235 240
Ser His His His His His His Gly Gly Cys
245 250
<210> 19
<211> 750
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность диатела 7E3CysDb
<400> 19
gatgttgtgc tgacgcagtc tccagccacc ctgtctgtgt ctccagggga gagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcaacttag cctggtacca gcagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatggt gcatccacca gggccactgg tatcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240
gaagattctg cagtttatta ctgtcagcag tataataact ggcctccgta cacttttggc 300
caggggacca aggtggatat caaatctggt ggtggtggtg aagtgcagct ggtggagtct 360
gggggaggcg tggtccagcc tgggaggtcc ctgagactct cctgtgcagc ctctggattc 420
accttcagtt tctatggcat gcactgggtc cgccaggctc caggcaaggg gctggagtgg 480
gtggcagcta tatcatatga tggaagtaat aaatactatg cagactccgt gaagggccga 540
ttcaccatct ccagagacaa ttccaagaac acgctgtatc tgcaaatgaa cagcctgaga 600
gctgaggaca cggctgtgta ttactgtgcg aaaaggccca accaatttta ttgtagtgat 660
ggtagatgct actccattga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctcaggt 720
tctcaccatc accatcacca tggcggttgc 750
<210> 20
<211> 249
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность диатела 7E3CysDb
<400> 20
Asp Val Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr
35 40 45
Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu
65 70 75 80
Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Trp Pro Pro Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys Ser Gly Gly Gly Gly
100 105 110
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
115 120 125
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Phe Tyr
130 135 140
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
145 150 155 160
Ala Ala Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
165 170 175
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
180 185 190
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
195 200 205
Ala Lys Arg Pro Asn Gln Phe Tyr Cys Ser Asp Gly Arg Cys Tyr Ser
210 215 220
Ile Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser
225 230 235 240
His His His His His His Gly Gly Cys
245
Claims (29)
1. Выделенный полинуклеотид, кодирующий тяжелую цепь антитела или его функционального фрагмента, для получения антитела или его функционального фрагмента, которое связывается с сиалированным антигеном Льюисаа,
где указанная тяжелая цепь антитела или его функционального фрагмента содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из остатков 20-142 SEQ ID NO: 2, остатков 20-142 SEQ ID NO: 6, остатков 20-142 SEQ ID NO: 10 и остатков 20-145 SEQ ID NO: 14.
2. Выделенный полинуклеотид по п. 1, где аминокислотная последовательность указанного домена VH кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из остатков 58-426 SEQ ID NO: 1, остатков 58-426 SEQ ID NO: 5, остатков 58-426 SEQ ID NO: 9 и остатков 58-435 SEQ ID NO: 13.
3. Выделенный полинуклеотид, кодирующий легкую цепь антитела или его функционального фрагмента, для получения антитела или его функционального фрагмента, которое связывается с сиалированным антигеном Льюисаа,
где указанная легкая цепь антитела или его функционального фрагмента содержит вариабельный домен легкой цепи (VL) с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из остатков 20-130 SEQ ID NO: 4, остатков 20-129 SEQ ID NO: 8, остатков 20-130 SEQ ID NO: 12 и остатков 23-130 SEQ ID NO: 16.
4. Выделенный полинуклеотид по п. 3, где аминокислотная последовательность указанного домена VL кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из остатков 58-390 SEQ ID NO: 3, остатков 58-387 SEQ ID NO: 7, остатков 58-390 SEQ ID NO: 11 и остатков 67-390 SEQ ID NO: 15.
5. Выделенное антитело или его функциональный фрагмент, которое(ый) связывается с сиалированным антигеном Льюисаa,
где указанное антитело или его функциональный фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) и вариабельный домен легкой цепи (VL),
где указанный домен VH и указанный домен VL, соответственно, включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из остатков 20-142 SEQ ID NO: 2 и остатков 20-130 SEQ ID NO: 4; остатков 20-142 SEQ ID NO: 6 и остатков 20-129 SEQ ID NO: 8; остатков 20-142 SEQ ID NO: 10 и остатков 20-130 SEQ ID NO: 12; и остатков 20-145 SEQ ID NO: 14 и остатков 23-130 SEQ ID NO: 16.
6. Выделенное антитело или его функциональный фрагмент по п. 5, где указанное антитело представляет собой антитело человека.
7. Выделенное антитело или его функциональный фрагмент по п. 5, где указанный функциональный фрагмент антитела выбран из группы, состоящей из Fab, Fab', F(аb')2, scFv, диатела, триатела и минитела.
8. Антитело или его функциональный фрагмент по п. 7, где указанный функциональный фрагмент антитела представляет собой диатело.
9. Антитело или его функциональный фрагмент по п. 8, где указанное диатело содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18 или 20.
10. Выделенное антитело или его функциональный фрагмент по п. 5, где указанное антитело представляет собой моноклональное антитело.
11. Выделенное антитело или его функциональный фрагмент по п. 5, где указанное антитело имеет изотип IgG или IgM.
12. Выделенное антитело или его функциональный фрагмент по п.11, где указанное антитело IgG представляет собой подкласс IgG1.
13. Конъюгат, который связывается с сиалированным антигеном Льюисаа, содержащий выделенное антитело или его функциональный фрагмент по п. 7, конъюгированное или рекомбинантным образом соединенное с диагностическим агентом, детектируемым агентом или терапевтическим средством.
14. Конъюгат по п. 13, где указанный детектируемый агент представляет собой радиоактивное вещество или флуоресцентное вещество.
15. Конъюгат по п. 14, где радиоактивное вещество представляет собой 89Zr, 131I, 125I, 124I, 123I и 121I, 14C и 11C, 35S, 3H, 115In, 113In, 112In и 111In, 99Tc, 201Ti, 68Ga и 67Ga, 103Pd, 99Mo, 133Xe, 18F, 15O, 13N, 64Cu, 94mTc, 153Sm, 177Lu, 159Gd, 149Pm, 140La, 175Yb, 166Ho, 86Y, 90Y, 47Sc, 186Re, 188Re, 142Pr, 105Rh, 97Ru, 68Ge, 57Co, 65Zn, 85Sr, 32P, 153Gd, 169Yb, 51Cr, 54Mn, 75Se, 113Sn и 117Sn, или
где флуоресцентное вещество выбрано из группы, состоящей из умбеллиферона, флуоресцеина, флуоресцеина изотиоцианата, родамина, флуоресцеина дихлортриазиниламина, дансилхлорида или фикоэритрина.
16. Конъюгат по п. 15, где терапевтическое средство представляет собой радиоактивный металл или молекулу ауристатина.
17. Конъюгат по п. 16, где указанный терапевтический металл представляет собой альфа-излучатель или указанная молекула ауристатина выбрана из группы, состоящей из ауристатина РНЕ, бриостатина 1, соластатина 10, монометилауристатина E (ММАЕ) и монометилауристатина F (MMAF).
18. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, где указанным заболеванием является злокачественное или опухолевое образование с клетками, экспрессирующими сиалированный антиген Льюисаа, содержащая эффективное количество антитела или его функционального фрагмента по п. 5 и фармацевтически приемлемый носитель.
19. Способ лечения или профилактики заболевания, где указанным заболеванием является злокачественное или опухолевое образование с клетками, экспрессирующими сиалированный антиген Льюисаа, включающий
введение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п. 18 пациенту.
20. Способ по п. 19, где указанное злокачественное или опухолевое образование выбрано из группы, состоящей из опухоли желудочно-кишечного тракта, рака толстой кишки, колоректальной аденокарциномы, метастатического рака толстой кишки, колоректального рака, рака поджелудочной железы, аденокарциномы поджелудочной железы, рака протоков поджелудочной железы, мелкоклеточного рака легких, аденокарциномы мочевого пузыря, перстневидноклеточного рака яичников, рака яичников, метастатического рака, аденокарциномы желудка, аденокарциномы пищевода, аденокарциномы горла, аденокарциномы мочеполового тракта и аденокарциномы молочной железы.
21. Способ по п. 19, где указанный способ дополнительно включает одновременное или последовательное введение второго терапевтического средства.
22. Способ по п. 21, где указанный второй терапевтический агент представляет собой химиотерапевтический агент или иммунотерапевтический агент.
23. Способ обнаружения опухоли у пациента, включающий введение эффективного количества конъюгата по любому из пп. 13-18 пациенту.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201361870137P | 2013-08-26 | 2013-08-26 | |
US61/870,137 | 2013-08-26 | ||
PCT/US2014/052631 WO2015053871A2 (en) | 2013-08-26 | 2014-08-26 | NUCLEIC ACIDS ENCODING HUMAN ANTIBODIES TO SIALYL-LEWISa |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2019125161A Division RU2791967C2 (ru) | 2013-08-26 | 2014-08-26 | НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ, КОДИРУЮЩИЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ СИАЛИРОВАННОГО АНТИГЕНА ЛЬЮИСАа ЧЕЛОВЕКА |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2016111015A RU2016111015A (ru) | 2017-10-03 |
RU2016111015A3 RU2016111015A3 (ru) | 2018-03-30 |
RU2699289C2 true RU2699289C2 (ru) | 2019-09-04 |
Family
ID=52480556
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016111015A RU2699289C2 (ru) | 2013-08-26 | 2014-08-26 | НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ, КОДИРУЮЩИЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ СИАЛИРОВАННОГО АНТИГЕНА ЛЬЮИСАа ЧЕЛОВЕКА |
Country Status (22)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US9475874B2 (ru) |
EP (2) | EP3041507B1 (ru) |
JP (6) | JP6626445B2 (ru) |
KR (4) | KR102553717B1 (ru) |
CN (2) | CN105764526B (ru) |
AU (3) | AU2014332442B2 (ru) |
CA (2) | CA3090644C (ru) |
CY (1) | CY1124435T1 (ru) |
DK (1) | DK3041507T3 (ru) |
ES (1) | ES2880709T3 (ru) |
HK (1) | HK1226295A1 (ru) |
HR (1) | HRP20211129T1 (ru) |
HU (1) | HUE056325T2 (ru) |
IL (2) | IL244297B (ru) |
LT (1) | LT3041507T (ru) |
PL (1) | PL3041507T3 (ru) |
PT (1) | PT3041507T (ru) |
RS (1) | RS62189B1 (ru) |
RU (1) | RU2699289C2 (ru) |
SI (1) | SI3041507T1 (ru) |
WO (1) | WO2015053871A2 (ru) |
ZA (1) | ZA201601354B (ru) |
Families Citing this family (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB201515094D0 (en) * | 2015-08-25 | 2015-10-07 | Univ Nottingham | Sialyl-di-lewis a as expressed on glycoproteins but not glycolipids as a functional cancer target and antibodies thereto |
SG11201810801QA (en) * | 2016-07-14 | 2019-01-30 | Bioarctic Ab | Brain delivery protein |
MX2019005558A (es) | 2016-11-18 | 2019-08-12 | Astellas Pharma Inc | Fragmento fab de anticuerpo anti-muc1 de humano novedoso. |
MX2019006448A (es) | 2016-12-01 | 2020-02-05 | Regeneron Pharma | Anticuerpos anti-pd-l1 radiomarcados para imagenes de inmuno-pet. |
KR20240058959A (ko) | 2017-02-10 | 2024-05-07 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 면역-pet 이미지화를 위한 방사선 라벨링된 항-lag3 항체 |
CN111093701A (zh) * | 2017-06-15 | 2020-05-01 | 财团法人生物技术开发中心 | 含有抗globo h抗体的抗体药物偶联物及其用途 |
TWI795415B (zh) * | 2017-07-07 | 2023-03-11 | 日商安斯泰來製藥股份有限公司 | 新穎的抗人類CEACAM5抗體Fab片段 |
BR112020001360A2 (pt) | 2017-07-24 | 2020-08-11 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | anticorpo monoclonal isolado ou fragmento de ligação a antígeno deste que se liga a cd8, composição farmacêutica, molécula de ácido nucleico, vetor de expressão, célula hospedeira, conjugado de anticorpo, métodos para gerar imagens de um tecido que expressa cd8, para tratar um sujeito tendo um tumor sólido, para prever uma resposta positiva a uma terapia antitumoral, para monitorar uma resposta de um tumor em um sujeito a uma terapia antitumoral, para prever ou monitorar a eficácia da terapia antitumoral e para monitorar a presença de células t em um tumor ao longo do tempo, e, composto. |
PT110526B (pt) | 2018-01-26 | 2021-02-04 | Univ Nova De Lisboa | Anticorpo, fragmento funcional ou sonda do mesmo contra antigénios tumorais |
KR102115236B1 (ko) * | 2018-01-29 | 2020-05-27 | (주)에스엠티바이오 | 췌장 또는 담관계암 치료를 위한 키메라 항원 수용체 |
CN113056286A (zh) * | 2018-09-10 | 2021-06-29 | 冷泉港实验室 | 用于治疗胰腺炎的方法 |
JP2022513372A (ja) * | 2018-10-19 | 2022-02-07 | メモリアル スローン ケタリング キャンサー センター | シアリルルイスaを標的とするキメラ抗原受容体およびその使用 |
EP4065605A4 (en) * | 2019-11-26 | 2023-07-12 | Ramot at Tel-Aviv University Ltd. | ANTIBODIES AGAINST CARBOHYDRATE ANTIGENS |
CN114605550B (zh) * | 2020-12-08 | 2023-09-22 | 东莞市朋志生物科技有限公司 | 抗ca19-9的抗体、其应用和检测ca19-9的试剂盒 |
EP4277932A1 (en) * | 2021-01-12 | 2023-11-22 | Yeda Research and Development Co. Ltd | Antibodies to cancer glycosylation and uses thereof |
JP2024511189A (ja) | 2021-03-26 | 2024-03-12 | ビオンテック・ソシエタス・エウロパエア | がんの処置における抗ca19-9抗体およびfolfirinoxを用いた組合せ療法。 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110311517A1 (en) * | 2009-02-10 | 2011-12-22 | Shenogen Pharma Group, Ltd. | Antibodies and methods for treating estrogen receptor-associated diseases |
US20130209481A1 (en) * | 2010-07-22 | 2013-08-15 | The Regents Of The University Of California | Anti-Tumor Antigen Antibodies and Methods of Use |
Family Cites Families (117)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA128362A (en) | 1910-07-25 | 1910-09-27 | Victor Herbert Gregory | Furnace for drawing glass |
US5807715A (en) | 1984-08-27 | 1998-09-15 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin |
EP0216846B2 (en) | 1985-04-01 | 1995-04-26 | Celltech Limited | Transformed myeloma cell-line and a process for the expression of a gene coding for a eukaryotic polypeptide employing same |
GB8601597D0 (en) | 1986-01-23 | 1986-02-26 | Wilson R H | Nucleotide sequences |
US5057313A (en) | 1986-02-25 | 1991-10-15 | The Center For Molecular Medicine And Immunology | Diagnostic and therapeutic antibody conjugates |
JP3101690B2 (ja) | 1987-03-18 | 2000-10-23 | エス・ビィ・2・インコーポレイテッド | 変性抗体の、または変性抗体に関する改良 |
GB8717430D0 (en) | 1987-07-23 | 1987-08-26 | Celltech Ltd | Recombinant dna product |
US5336603A (en) | 1987-10-02 | 1994-08-09 | Genentech, Inc. | CD4 adheson variants |
JP3771253B2 (ja) | 1988-09-02 | 2006-04-26 | ダイアックス コープ. | 新規な結合タンパク質の生成と選択 |
US5223409A (en) | 1988-09-02 | 1993-06-29 | Protein Engineering Corp. | Directed evolution of novel binding proteins |
KR900005995A (ko) | 1988-10-31 | 1990-05-07 | 우메모또 요시마사 | 변형 인터류킨-2 및 그의 제조방법 |
EP0394827A1 (en) | 1989-04-26 | 1990-10-31 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Chimaeric CD4-immunoglobulin polypeptides |
US5112946A (en) | 1989-07-06 | 1992-05-12 | Repligen Corporation | Modified pf4 compositions and methods of use |
WO1991006570A1 (en) | 1989-10-25 | 1991-05-16 | The University Of Melbourne | HYBRID Fc RECEPTOR MOLECULES |
US5780225A (en) | 1990-01-12 | 1998-07-14 | Stratagene | Method for generating libaries of antibody genes comprising amplification of diverse antibody DNAs and methods for using these libraries for the production of diverse antigen combining molecules |
AU7247191A (en) | 1990-01-11 | 1991-08-05 | Molecular Affinities Corporation | Production of antibodies using gene libraries |
US5427908A (en) | 1990-05-01 | 1995-06-27 | Affymax Technologies N.V. | Recombinant library screening methods |
US5349053A (en) | 1990-06-01 | 1994-09-20 | Protein Design Labs, Inc. | Chimeric ligand/immunoglobulin molecules and their uses |
GB9015198D0 (en) | 1990-07-10 | 1990-08-29 | Brien Caroline J O | Binding substance |
US5698426A (en) | 1990-09-28 | 1997-12-16 | Ixsys, Incorporated | Surface expression libraries of heteromeric receptors |
DK0564531T3 (da) | 1990-12-03 | 1998-09-28 | Genentech Inc | Berigelsesfremgangsmåde for variantproteiner med ændrede bindingsegenskaber |
WO1992010591A1 (en) | 1990-12-14 | 1992-06-25 | Cell Genesys, Inc. | Chimeric chains for receptor-associated signal transduction pathways |
CA2108147C (en) | 1991-04-10 | 2009-01-06 | Angray Kang | Heterodimeric receptor libraries using phagemids |
CA2110799A1 (en) | 1991-06-14 | 1992-12-23 | Arnold H. Horwitz | Microbially-produced antibody fragments and their conjugates |
US5844095A (en) | 1991-06-27 | 1998-12-01 | Bristol-Myers Squibb Company | CTLA4 Ig fusion proteins |
US5885793A (en) | 1991-12-02 | 1999-03-23 | Medical Research Council | Production of anti-self antibodies from antibody segment repertoires and displayed on phage |
US5622929A (en) | 1992-01-23 | 1997-04-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Thioether conjugates |
US6271242B1 (en) | 1992-02-10 | 2001-08-07 | Bristol-Myers Squibb Co. | Method for treating cancer using a tyrosine protein kinase inhibitor |
US5733743A (en) | 1992-03-24 | 1998-03-31 | Cambridge Antibody Technology Limited | Methods for producing members of specific binding pairs |
US5447851B1 (en) | 1992-04-02 | 1999-07-06 | Univ Texas System Board Of | Dna encoding a chimeric polypeptide comprising the extracellular domain of tnf receptor fused to igg vectors and host cells |
JPH0630786A (ja) * | 1992-07-14 | 1994-02-08 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | バイスペシフィック抗体 |
AU691820B2 (en) | 1993-07-15 | 1998-05-28 | Cancer Research Campaign Technology Limited | Prodrugs of protein tyrosine kinase inhibitors |
US5443953A (en) | 1993-12-08 | 1995-08-22 | Immunomedics, Inc. | Preparation and use of immunoconjugates |
EP0733070A1 (en) | 1993-12-08 | 1996-09-25 | Genzyme Corporation | Process for generating specific antibodies |
US5925376C1 (en) | 1994-01-10 | 2001-03-20 | Madalene C Y Heng | Method for treating psoriasis using selected phosphorylase kinase inhibitor and additional compounds |
DK1231268T3 (da) | 1994-01-31 | 2005-11-21 | Univ Boston | Polyklonale antistofbiblioteker |
US5516637A (en) | 1994-06-10 | 1996-05-14 | Dade International Inc. | Method involving display of protein binding pairs on the surface of bacterial pili and bacteriophage |
CN1117155C (zh) | 1994-07-29 | 2003-08-06 | 史密丝克莱恩比彻姆有限公司 | 新型化合物 |
GB9415379D0 (en) | 1994-07-29 | 1994-09-21 | Smithkline Beecham Plc | Novel compounds |
US5587459A (en) | 1994-08-19 | 1996-12-24 | Regents Of The University Of Minnesota | Immunoconjugates comprising tyrosine kinase inhibitors |
US5911995A (en) | 1994-08-19 | 1999-06-15 | Regents Of The University Of Minnesota | EGF-genistein conjugates for the treatment of cancer |
US5795737A (en) | 1994-09-19 | 1998-08-18 | The General Hospital Corporation | High level expression of proteins |
US6030613A (en) | 1995-01-17 | 2000-02-29 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Receptor specific transepithelial transport of therapeutics |
ATE331438T1 (de) | 1995-01-17 | 2006-07-15 | Brigham & Womens Hospital | Rezeptorspezifischer transepithelealer transport von immunogenen |
GB9501567D0 (en) | 1995-01-26 | 1995-03-15 | Pharmacia Spa | Hydrosoluble 3-arylidene-2-oxindole derivatives as tyrosine kinase inhibitors |
GB9515975D0 (en) | 1995-08-04 | 1995-10-04 | Zeneca Ltd | Chemical compounds |
US5863904A (en) | 1995-09-26 | 1999-01-26 | The University Of Michigan | Methods for treating cancers and restenosis with P21 |
GB9601081D0 (en) | 1995-10-06 | 1996-03-20 | Cambridge Antibody Tech | Specific binding members for human transforming growth factor beta;materials and methods |
US6127366A (en) | 1995-11-22 | 2000-10-03 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl-protein transferase |
ES2175137T3 (es) | 1995-12-08 | 2002-11-16 | Janssen Pharmaceutica Nv | Derivados de (imidazol-5-il)metil-2-quinolinona como inhibidores de laproteina farnesil-transferasa. |
US5723125A (en) | 1995-12-28 | 1998-03-03 | Tanox Biosystems, Inc. | Hybrid with interferon-alpha and an immunoglobulin Fc linked through a non-immunogenic peptide |
US5958769A (en) | 1996-01-18 | 1999-09-28 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Compositions and methods for mediating cell cycle progression |
JP2978435B2 (ja) | 1996-01-24 | 1999-11-15 | チッソ株式会社 | アクリロキシプロピルシランの製造方法 |
WO1997027852A1 (en) | 1996-01-30 | 1997-08-07 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl-protein transferase |
EP1011669A4 (en) | 1996-01-30 | 2001-09-12 | Merck & Co Inc | FARNESYL PROTEIN TRANSFERASE INHIBITORS |
DE69731289D1 (de) | 1996-03-18 | 2004-11-25 | Univ Texas | Immunglobulinähnliche domäne mit erhöhten halbwertszeiten |
CA2249320C (en) | 1996-03-20 | 2008-12-23 | Immunomedics, Inc. | Glycosylated humanized b-cell specific antibodies |
US6063930A (en) | 1996-04-03 | 2000-05-16 | Merck & Co., Inc. | Substituted imidazole compounds useful as farnesyl-protein transferase inhibitors |
US5883105A (en) | 1996-04-03 | 1999-03-16 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl-protein transferase |
US6080870A (en) | 1996-04-03 | 2000-06-27 | Merck & Co., Inc. | Biaryl substituted imidazole compounds useful as farnesyl-protein transferase inhibitors |
US5891889A (en) | 1996-04-03 | 1999-04-06 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl-protein transferase |
US6300501B1 (en) | 1996-05-22 | 2001-10-09 | Warner-Lambert Company | Histidine-(N-benzyl glycinamide) inhibitors of protein farnesyl transferase |
US5648239A (en) | 1996-06-21 | 1997-07-15 | Incyte Pharmaceuticals, Inc. | Human camp-dependent protein kinase inhibitor homolog |
BR9709974A (pt) | 1996-06-27 | 1999-08-10 | Pfizer | Derivados de 2-(2-oxo-etidileno)-imidazolidin-4-ona e seu uso como inibidores da transferase da proteina de farnesila |
ATE359822T1 (de) | 1996-08-12 | 2007-05-15 | Mitsubishi Pharma Corp | Medikamente enthaltend rho-kinase inhibitoren |
US6030982A (en) | 1996-09-13 | 2000-02-29 | Schering Corporationm | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
US5945429A (en) | 1996-09-13 | 1999-08-31 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
US6040305A (en) | 1996-09-13 | 2000-03-21 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
US6093737A (en) | 1996-12-30 | 2000-07-25 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl-protein transferase |
US6013662A (en) | 1996-12-30 | 2000-01-11 | Rhone-Poulenc Rorer S.A. | Farnesyl transferase inhibitors, their preparation, the pharmaceutical compositions which contain them and their use in the preparation of medicaments |
US5939439A (en) | 1996-12-30 | 1999-08-17 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl-protein transferase |
JP2001509156A (ja) | 1997-01-29 | 2001-07-10 | ゼネカ・リミテッド | ファルネシルプロテイントランスフェラーゼの阻害剤 |
ZA981080B (en) | 1997-02-11 | 1998-08-12 | Warner Lambert Co | Bicyclic inhibitors of protein farnesyl transferase |
US6180415B1 (en) | 1997-02-20 | 2001-01-30 | The Regents Of The University Of California | Plasmon resonant particles, methods and apparatus |
WO1998039027A2 (en) | 1997-03-05 | 1998-09-11 | John Wayne Cancer Institute | Sialyl lewis antigens as targets for immunotherapy |
TW591030B (en) | 1997-03-10 | 2004-06-11 | Janssen Pharmaceutica Nv | Farnesyl transferase inhibiting 1,8-annelated quinolinone derivatives substituted with N- or C-linked imidazoles |
US6239140B1 (en) | 1997-06-17 | 2001-05-29 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
US6159984A (en) | 1997-06-17 | 2000-12-12 | Schering Corporation | Farnesyl protein transferase inhibitors |
US6051582A (en) | 1997-06-17 | 2000-04-18 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
US6211193B1 (en) | 1997-06-17 | 2001-04-03 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
US6228865B1 (en) | 1997-06-17 | 2001-05-08 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
US6225322B1 (en) | 1997-06-17 | 2001-05-01 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
ATE208210T1 (de) | 1997-08-15 | 2001-11-15 | Cephalon Inc | Kombination von proteintyrosin-kinaseinhibitoren und chemischer kastration zur behandlung von prostatakrebs |
US6103723A (en) | 1997-10-17 | 2000-08-15 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl-protein transferase |
AU9453098A (en) | 1997-10-22 | 1999-05-10 | Zeneca Limited | Imidazole derivatives and their use as farnesyl protein transferase inhibit ors |
JP2001520222A (ja) | 1997-10-22 | 2001-10-30 | ゼネカ・リミテッド | イミダゾール誘導体およびファルネシルタンパク質トランスフェラーゼインヒビターとしてのそれらの使用 |
US6124465A (en) | 1997-11-25 | 2000-09-26 | Rhone-Poulenc S.A. | Farnesyl transferase inhibitors, their preparation, the pharmaceutical compositions which contain them and their use in the preparation of medicaments |
WO1999028315A1 (en) | 1997-11-28 | 1999-06-10 | Lg Chemical Ltd. | Imidazole derivatives having an inhibitory activity for farnesyl transferase and process for preparation thereof |
US6054466A (en) | 1997-12-04 | 2000-04-25 | Merck & Co., Inc. | Inhibitors of farnesyl-protein transferase |
US6242196B1 (en) | 1997-12-11 | 2001-06-05 | Dana-Farber Cancer Institute | Methods and pharmaceutical compositions for inhibiting tumor cell growth |
US6335156B1 (en) | 1997-12-18 | 2002-01-01 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | 14-3-3σ arrests the cell cycle |
AU745855B2 (en) | 1998-02-02 | 2002-04-11 | Lg Chemical Ltd. | Farnesyl transferase inhibitors having a piperidine structure and process for preparation thereof |
JP2002513031A (ja) | 1998-04-27 | 2002-05-08 | ワーナー−ランバート・カンパニー | ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤としての機能化されたアルキルおよびアルケニル側鎖を有するグリシンアミド誘導体 |
DE69912790T2 (de) | 1998-07-06 | 2004-09-23 | Janssen Pharmaceutica N.V. | Farnesyl protein transferase inhibitoren zur behandlung von arthropathien |
US6034053A (en) | 1998-07-13 | 2000-03-07 | Wayne Hughes Institute | EGF-isoflavone conjugates for the prevention of restenosis |
US6787638B1 (en) * | 1998-12-02 | 2004-09-07 | Applied Molecular Evolution, Inc. | Tumor specific human monoclonal antibodies and methods of use |
US6362188B1 (en) | 1998-12-18 | 2002-03-26 | Schering Corporation | Farnesyl protein transferase inhibitors |
US6372747B1 (en) | 1998-12-18 | 2002-04-16 | Schering Corporation | Farnesyl protein transferase inhibitors |
FR2787327B1 (fr) | 1998-12-21 | 2003-01-17 | Aventis Pharma Sa | Compositions contenant des inhibiteurs de farnesyle transferase |
US6432959B1 (en) | 1998-12-23 | 2002-08-13 | Schering Corporation | Inhibitors of farnesyl-protein transferase |
EP1140938B1 (en) | 1999-01-11 | 2003-08-27 | Princeton University | High affinity inhibitors for target validation and uses thereof |
US6399633B1 (en) | 1999-02-01 | 2002-06-04 | Aventis Pharmaceuticals Inc. | Use of 4-H-1-benzopryan-4-one derivatives as inhibitors of smooth muscle cell proliferation |
US6245759B1 (en) | 1999-03-11 | 2001-06-12 | Merck & Co., Inc. | Tyrosine kinase inhibitors |
US6143766A (en) | 1999-04-16 | 2000-11-07 | Warner-Lambert Company | Benzopyranone and quinolone inhibitors of ras farnesyl transferase |
US6458935B1 (en) | 1999-06-23 | 2002-10-01 | Merck & Co., Inc. | Radiolabeled farnesyl-protein transferase inhibitors |
US6403581B1 (en) | 2000-01-19 | 2002-06-11 | American Cyanamid Company | Method of inhibition of farnesyl-protein transferase using substituted benz (cd) indol-2-imine and-amine derivatives |
CA2480504A1 (en) | 2002-04-01 | 2003-10-16 | Evelina Angov | Method of designing synthetic nucleic acid sequences for optimal protein expression in a host cell |
EP3120861B1 (en) | 2003-11-06 | 2018-08-15 | Seattle Genetics, Inc. | Intermediate for conjugate preparation comprising auristatin derivatives and a linker |
CN102973947A (zh) | 2004-06-01 | 2013-03-20 | 健泰科生物技术公司 | 抗体-药物偶联物和方法 |
CA2580141C (en) | 2004-09-23 | 2013-12-10 | Genentech, Inc. | Cysteine engineered antibodies and conjugates |
ES2908458T3 (es) | 2005-07-18 | 2022-04-29 | Seagen Inc | Conjugados de fármaco-enlazador de beta-glucurónido |
CA2657975A1 (en) | 2006-06-29 | 2008-01-03 | Dsm Ip Assets B.V. | A method for achieving improved polypeptide expression |
WO2008007648A1 (fr) | 2006-07-10 | 2008-01-17 | Institute For Antibodies Co., Ltd. | Procédé de classification d'antigène, procédé d'identification d'antigène, procédé d'obtention d' un ensemble d'antigènes ou d'anticorps, procédés de construction d'un panel d'anticorps, anticorps et ens |
EP2185188B1 (en) | 2007-08-22 | 2014-08-06 | Medarex, L.L.C. | Site-specific attachment of drugs or other agents to engineered antibodies with c-terminal extensions |
JP5766947B2 (ja) * | 2007-09-07 | 2015-08-19 | チルドレンズ ホスピタル メディカル センター | 臨床サンプルにおける分泌性のルイス抗原およびシアル化抗原のレベルの疾患リスクの予測指標としての使用 |
WO2010009124A2 (en) | 2008-07-15 | 2010-01-21 | Genentech, Inc. | Anthracycline derivative conjugates, process for their preparation and their use as antitumor compounds |
US8192738B2 (en) * | 2008-09-19 | 2012-06-05 | Medimmune, Llc | Targeted antibodies directed to DLL4 |
-
2014
- 2014-08-26 RS RS20210929A patent/RS62189B1/sr unknown
- 2014-08-26 WO PCT/US2014/052631 patent/WO2015053871A2/en active Application Filing
- 2014-08-26 KR KR1020227004406A patent/KR102553717B1/ko active IP Right Grant
- 2014-08-26 DK DK14852746.8T patent/DK3041507T3/da active
- 2014-08-26 CA CA3090644A patent/CA3090644C/en active Active
- 2014-08-26 SI SI201431854T patent/SI3041507T1/sl unknown
- 2014-08-26 LT LTEPPCT/US2014/052631T patent/LT3041507T/lt unknown
- 2014-08-26 KR KR1020217019368A patent/KR102362630B1/ko active IP Right Grant
- 2014-08-26 CN CN201480057851.8A patent/CN105764526B/zh active Active
- 2014-08-26 KR KR1020167007644A patent/KR20160054501A/ko active Application Filing
- 2014-08-26 PT PT148527468T patent/PT3041507T/pt unknown
- 2014-08-26 ES ES14852746T patent/ES2880709T3/es active Active
- 2014-08-26 US US14/468,827 patent/US9475874B2/en active Active
- 2014-08-26 RU RU2016111015A patent/RU2699289C2/ru active
- 2014-08-26 CN CN202011316903.2A patent/CN112695039A/zh active Pending
- 2014-08-26 PL PL14852746T patent/PL3041507T3/pl unknown
- 2014-08-26 KR KR1020207019821A patent/KR102313341B1/ko active IP Right Grant
- 2014-08-26 AU AU2014332442A patent/AU2014332442B2/en active Active
- 2014-08-26 JP JP2016539019A patent/JP6626445B2/ja active Active
- 2014-08-26 EP EP14852746.8A patent/EP3041507B1/en active Active
- 2014-08-26 EP EP21181759.8A patent/EP3906945A3/en active Pending
- 2014-08-26 CA CA2922478A patent/CA2922478C/en active Active
- 2014-08-26 HU HUE14852746A patent/HUE056325T2/hu unknown
-
2016
- 2016-02-25 IL IL244297A patent/IL244297B/en active IP Right Grant
- 2016-02-26 ZA ZA2016/01354A patent/ZA201601354B/en unknown
- 2016-09-23 US US15/275,174 patent/US20170015756A1/en not_active Abandoned
- 2016-12-16 HK HK16114384A patent/HK1226295A1/zh unknown
-
2018
- 2018-12-27 JP JP2018244315A patent/JP7161397B2/ja active Active
-
2020
- 2020-02-11 US US16/788,251 patent/US20200247900A1/en not_active Abandoned
- 2020-02-20 AU AU2020201225A patent/AU2020201225B2/en active Active
- 2020-08-19 IL IL276819A patent/IL276819A/en unknown
-
2021
- 2021-06-22 JP JP2021103311A patent/JP2021151263A/ja active Pending
- 2021-07-14 HR HRP20211129TT patent/HRP20211129T1/hr unknown
- 2021-07-21 CY CY20211100653T patent/CY1124435T1/el unknown
-
2022
- 2022-07-26 AU AU2022209226A patent/AU2022209226A1/en active Pending
- 2022-12-28 JP JP2022211698A patent/JP7299405B2/ja active Active
-
2023
- 2023-04-14 US US18/134,844 patent/US20230365707A1/en active Pending
- 2023-09-25 JP JP2023160194A patent/JP2023165831A/ja active Pending
-
2024
- 2024-02-20 JP JP2024023605A patent/JP2024050966A/ja active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110311517A1 (en) * | 2009-02-10 | 2011-12-22 | Shenogen Pharma Group, Ltd. | Antibodies and methods for treating estrogen receptor-associated diseases |
US20130209481A1 (en) * | 2010-07-22 | 2013-08-15 | The Regents Of The University Of California | Anti-Tumor Antigen Antibodies and Methods of Use |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
РЫБАЛЬСКИЙ Н.Г., СЕРОВА М. А., ИГНАТЬЕВА Г.А., СТАРЧЕУС А.П. "Моноклональные антитела и гибридомы", Москва: ВАСХНИЛ, 1989, стр.23-44. * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2020201225B2 (en) | Nucleic acids encoding human antibodies to Sialyl-Lewisa | |
AU2014332442A1 (en) | Nucleic acids encoding human antibodies to Sialyl-Lewis | |
US11760809B2 (en) | Human monoclonal antibodies to ganglioside GD2 | |
RU2791967C2 (ru) | НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ, КОДИРУЮЩИЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ СИАЛИРОВАННОГО АНТИГЕНА ЛЬЮИСАа ЧЕЛОВЕКА | |
NZ717428B2 (en) | NUCLEIC ACIDS ENCODING HUMAN ANTIBODIES TO SIALYL-LEWISa | |
BR122020012421B1 (pt) | Polinucleotídeos isolados, anticorpo isolado ou fragmento funcional do mesmo que se liga a sialil-lewisa, usos dos mesmos, conjugado e composições | |
BR112016004133B1 (pt) | Polinucleotídeos isolados, anticorpo isolado ou fragmento funcional do mesmo que se liga a sialillewisa, usos dos mesmos, conjugado e composição farmacêutica |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
HZ9A | Changing address for correspondence with an applicant |