MX2012009964A - Sales cristalinas de un potente inhibidor del hcv. - Google Patents

Abstract

Esta invención se refiere a nuevas formas salinas de tris (hidroximetil) amino-metano, colina y N-metil-D-glucamina del siguiente Compuesto (1) y a métodos para la preparación de las mismas, a sus composiciones farmacéuticas, y a su uso en el tratamiento de la infección por el virus de la Hepatitis C (HCV): (ver fórmula (1).

Description

SALES CRISTALINAS DE UN POTENTE INHIBIDOR DEL HCV CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a nuevas sales cristalinas del Compuesto (1) como se describen en esta memoria, a métodos para su preparación, a composiciones farmacéuticas de las mismas, y a su uso en el tratamiento de la infección por el virus de la Hepatitis C (HCV).

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN El siguiente Compuesto (1): (1) se conoce como un potente y selectivo inhibidor de la serina proteasa NS3 del HCV. El Compuesto (1) se encuentra dentro del campo de la serie de péptidos acíclicos de los inhibidores del HCV descritos en las patentes de Estados Unidos 6.323.180, 7.514.557 y 7.585.845. El Compuesto (1) se describe específicamente como el Compuesto N° 1055 en la patente de Estados Unidos 7.585.845, y como el Compuesto N° 1008 en la patente de Estados Unidos 7.514.557. El Compuesto (1) se puede preparar según los procedimientos generales encontrados en las referencias citadas anteriormente, que se incorporan a esta memoria como referencia.

El Compuesto (1) puede ser conocido también por la siguiente descripción alternativa de su estructura química, que es equivalente a la estructura descrita antes: Cuando se sintetiza según los procedimientos generales expuestos en las referencias anteriormente citadas, el Compuesto (1) se prepara como un sólido amorfo que es una forma que generalmente es menos adecuada para el procesamiento farmacéutico a escala real. Por lo tanto, existe la necesidad de producir el Compuesto (1) en una forma cristalina que proporcione formulaciones que satisfagan requerimientos y especificaciones farmacéuticos precisos. Además, el procedimiento por el que se produce el Compuesto (1), es necesario que sea uno que esté dispuesto para la producción a gran escala. Además, se desea que el producto esté en una forma que sea fácilmente filtrable y de fácil secado. Finalmente, es deseable económicamente que el producto sea estable durante extensos periodos de tiempo sin necesidad de condiciones especiales de almacenamiento.

La solicitud de patente de Estados Unidos, número de serie 12/559.927, presentada el 15 de septiembre de 2009, describe la forma cristalina Tipo A del Compuesto (I) y una forma de sal sódica cristalina del Compuesto (I) con propiedades farmacéuticas más favorables en comparación con el compuesto amorfo. Sin embargo, la sal sódica cristalina es un hidrato variable que puede crear dificultades en la producción, p.ej. problemas en la caracterización, fabricación (p.ej. dificultad de secado) y manipulación de una formulación consistente. Para la producción y formulación farmacéutica a gran escala serían preferibles las sales con propiedades superiores en comparación con la forma cristalina Tipo A del Compuesto (I) y con la sal sódica cristalina, p.ej. una forma cristalina no solvatada.

LA INVENCIÓN Se ha encontrado ahora de forma sorprendente e inesperada, por primera vez, que el Compuesto (1) se puede preparar en la forma cristalina de tris (hidroximetil) aminometano (trometamina) y también en la forma de su sal cristalina de colina, y su sal cristalina de N-metil-D-glucamina. Así, la presente invención proporciona el Compuesto (1) en nuevas formas de sales cristalinas, que en una realización es la nueva sal cristalina de trometamina y realizaciones adicionales incluyen la sal cristalina de colina y la sal cristalina de N-metil-D-glucamina. Estas nuevas formas cristalinas resuelven las dificultades del proceso farmacéutico inherentes al uso de una forma amorfa y, también, en particular, las sales de trometamina y de colina tienen otras propiedades que las hacen particularmente ventajosas en comparación con la forma cristalina Tipo A y con la forma de sal sódica en el proceso de formulación farmacéutica como será descrito en detalle más adelante.

Estas nuevas formas cristalinas del Compuesto (1) se pueden caracterizar y distinguir una de otra utilizando diferentes técnicas, incluyendo difractometría de rayos X en polvo (XRPD) y NMR en estado sólido (ssNMR).

En una realización, la presente invención se refiere al Compuesto (1) en forma de sal cristalina de trometamina identificada aquí como "TH".

Otra realización se refiere a la sal cristalina de colina del Compuesto (1), identificada aquí como "HEA".

Otra realización se refiere a la sal cristalina de N-met¡l-D-glucamina del Compuesto (1), identificada aquí como "MU".

Realizaciones adicionales incluyen cada una de las sales TH, HEA y MU como se caracterizan por XRPD o por ssNMR o por ambos XRPD y ssNMR.

Otra realización más se refiere a una composición farmacéutica que comprende TH, HEA o MU o sus mezclas, y al menos un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

Otra realización más se refiere a un método para tratar la infección por HCV en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de TH, HEA o MU, o sus mezclas.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La FIG. 1 es un modelo de difracción de rayos X en polvo característico para TH cristalina.

La FIG. 2 es un espectro 13C NMR en estado sólido característico para TH cristalina.

La FIG. 3 es un modelo de difracción de rayos X en polvo característico para HEA cristalina.

La FIG. 4 es un espectro 13C NMR en estado sólido característico para HEA cristalina.

La FIG. 5 es un modelo de difracción de rayos X en polvo característico para MU cristalina.

La FIG. 6 es un espectro 13C NMR en estado sólido característico para MU cristalina.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Definiciones Los términos que no se definen de forma específica en la presente memoria tendrán el significado que les den los expertos en la técnica a la luz de la descripción y el contexto. Tal como se utilizan en toda la presente solicitud, no obstante, a menos que se especifique lo contrario, los siguientes términos tienen el significado que se indica: El término "TH" significa la sal cristalina de trometamina del Compuesto (1).

El término "HEA" significa la sal cristalina de colina del Compuesto (1).

El término "MU" significa la sal cristalina de N-metil-D-glucamina del Compuesto (1).

El término "aproximadamente" significa dentro del 5 %, y más preferiblemente dentro del 1 % de un valor o intervalo dado. Por ejemplo, "aproximadamente 3.7 %" significa de 3.5 a 3.9 %, preferiblemente de 3.66 a 3.74 %. Cuando el término "aproximadamente" se asocia con un intervalo de valores, por ejemplo, "aproximadamente de X % a Y %", con el término "aproximadamente" se pretende modificar tanto el valor inferior (X) como el valor superior (Y) del intervalo indicado. Por ejemplo, "aproximadamente de 20 % a 40 %" es equivalente a "de aproximadamente 20 % a aproximadamente 40 %".

La expresión "farmacéuticamente aceptable" con respecto a una sustancia, tal como se usa en la presente memoria, significa que la sustancia es, dentro del ámbito de un criterio médico razonable, adecuada para uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales inferiores sin toxicidad, irritación, respuesta alérgica y similares indebidas, en proporción con una relación de beneficio/riesgo razonable, y eficaz para el uso deseado cuando la sustancia se utiliza en una composición farmacéutica.

El término "tratar" con respecto al tratamiento de un estado de enfermedad en un paciente incluye (i) inhibir o aliviar el estado de enfermedad en un paciente, p. ej., interrumpiendo o demorando su desarrollo; o (ii) aliviar el estado de enfermedad en un paciente, es decir, causar la regresión o la curación del estado de enfermedad. En el caso de HCV, el tratamiento incluye reducir el nivel de carga del virus HCV en un paciente.

TH cristalina El Compuesto (1) se ha aislado como un polimorfo de sal cristalina de trometamina denominada en esta memoria como "TH" y se ha caracterizado utilizando difractometría de rayos X en polvo (XRPD), calorimetría diferencial de barrido (DSC), y NMR en estado sólido (ssNMR).

En general, la TH presenta un modelo característico de difracción de rayos X en polvo ("XRPD") con los picos de intensidad más alta expresados en grados 2T (± 0.2 grados 2T) a 5.9, 9.8, 10.0, 16.4, 16.7, 20.3, 20.9 y 22.6.

El modelo XRPD de TH se muestra en la FIG. 1. Las posiciones de los picos característicos y las intensidades relativas para el modelo XRPD de la FIG. 1 se muestran en la Tabla 1 que sigue (incluyendo tanto los picos de intensidad más alta como los de intensidad más baja).

Tabla 1 Para los cristales de TH, la calorimetría diferencial de barrido (DSC) presenta una fusión/descomposición endotérmica con una temperatura de comienzo a 201 °C. El análisis termogravimétrico (TGA) muestra una pérdida de peso de 0.15 % hasta 165 °C. Estos datos indican que la TH es una forma sólida cristalina no solvatada. Los cristales de TH presentaron aproximadamente < 4 % de ganancia de humedad con 85 % de humedad relativa (RH) a 25 °C mediante sorción dinámica de vapor (DVS) lo que indica propiedades no higroscópicas o ligeramente higroscópicas en las condiciones utilizadas en el análisis.

En una realización general, la presente invención se refiere a la sal cristalina de trometamina del Compuesto (1), denominada aquí como "TH".

Otra realización más específica se refiere a la TH cristalina que tiene al menos las siguientes características: un modelo de difracción de rayos X en polvo que comprende un pico a 5.9 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se mide utilizando radiación CuKa.

Otra realización se refiere a la TH cristalina que tiene un modelo de XRPD que comprende un pico a 5.9 grados 2T (± 0.2 grados 2T) como se ha descrito antes y que comprende además picos a 10.0 y 20.9 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se miden utilizando radiación CuKa.

Otra realización se refiere a la TH cristalina que tiene un modelo de XRPD que comprende un pico a 5.9 grados 2T (± 0.2 grados 2T) como se ha descrito antes y que comprende además picos a 10.0, 16.7, 20.3 y 20.9 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se miden utilizando radiación CuKa.

Otra realización se refiere a la TH cristalina que tiene un modelo de XRPD que comprende un pico a 5.9 grados 2T (± 0.2 grados 2T) como se ha descrito antes y que comprende además picos a 9.8, 10.0, 16.4, 16.7, 20.3, 20.9 y 22.6 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se miden utilizando radiación CuKa.

Otra realización se refiere a la TH cristalina que presenta un modelo de XRPD que es sustancialmente el mismo que se muestra en la FIG. 1.

La TH presenta un modelo de NMR en estado sólido (ssNMR) que tiene desplazamientos químicos de 13C (incluyendo tanto los picos de intensidad más alta como los de intensidad más baja) como los indicados en la Tabla 2 que sigue.

Tabla 2 Desplazamiento Desplazamiento químico (ppm) químico (ppm) 178.3 78.4 176.0 75.5 173.9 62.1 173.1 59.6 160.2 59.0 158.9 54.2 158.0 53.6 156.4 42.4 155.4 37.5 150.2 36.7 147.9 34.6 138.1 33.9 Todos los desplazamientos químicos registrados y reivindicados aquí son exactos dentro de ± 0.2 ppm a menos que se indique otra cosa.

Un espectro 13C ssNMR representativo de TH se muestra en la FIG. 2.

Una realización general se refiere a una sal cristalina de trometamina del Compuesto (1) que tiene un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 178.3, 138.1 y 27.1 ppm (± 0.2 ppm). Estos picos de desplazamientos químicos se consideran suficientes para caracterizar la sal TH del Compuesto (1) y distinguirla de otras formas cristalinas.

Otra realización se refiere a una sal cristalina de trometamina del Compuesto (1) que tiene un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 178.3, 173.9, 173.1 , 150.2, 147.9, 138.1 y 27.1 (todos ± 0.2 ppm).

Otra realización se refiere a una sal cristalina de trometamina del Compuesto (1) que tiene un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 178.3, 176.0, 173.9, 173.1 , 150.2, 147.9, 138.1 , 36.7, 27.1, 22.8 y 18.6 ppm (todos ± 0.2 ppm).

Otra realización se refiere a una sal cristalina de trometamina del Compuesto (1) que presenta un espectro 13C ssNMR que es sustancialmente el mismo que el mostrado en la FIG. xxx Otra realización se refiere a una sal cristalina de trometamina del Compuesto (1) que tiene tanto un modelo de XRPD como un espectro 13C ssNMR de acuerdo con alguna combinación de las realizaciones XRPD y 13C ssNMR mencionadas antes. Por ejemplo, una sal cristalina de trometamina que tiene un modelo de difracción de rayos X en polvo que comprende un pico a 5.9 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se mide utilizando radiación CuKa y un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 178.3, 138.1 y 27.1 ppm (± 0.2 ppm).

La presente invención proporciona un procedimiento para la preparación de TH que comprende la cristalización de TH en las condiciones descritas a continuación. Las condiciones precisas en las que se forma TH se pueden determinar empíricamente y solamente es posible dar métodos que se han encontrado como adecuados en la práctica.

Se ha encontrado que la TH se puede preparar por un procedimiento que comprende las siguientes etapas, cuyo procedimiento es también una realización de la presente invención: (i) Combinar el Compuesto (1) con 1 equivalente de tris (hidroximetil) aminometano en un disolvente adecuado, (ii) Calentar la mezcla a aproximadamente 50 °C y agitar durante aproximadamente 3-5 horas, (iii) Enfriar la suspensión a aproximadamente 20 °C, (iv) Filtrar la suspensión y enjuagar el sólido resultante con un disolvente adecuado, (v) Secar el sólido a aproximadamente 70 °C a vacío.

Disolventes adecuados incluyen acetona y acetonitrilo. El disolvente preferido es acetona. Los cristales resultantes de TH se pueden recuperar por cualquier método convencional conocido en la técnica.

En las etapas finales (iv) y (v), los sólidos resultantes obtenidos en la etapa (iii) se pueden recoger y secar a alta temperatura utilizando técnicas convencionales de recogida y de secado a alta temperatura, por ejemplo, filtración y estufa a vacío.

En una realización preferida, el Compuesto (1) y 1 equivalente de tris(hidroximet¡l)aminometano se combinan en acetona en una proporción de 10 mL de acetona por gramo de Compuesto (1) en la etapa (i), se calientan a aproximadamente 50 °C y se agitan durante 4 horas en la etapa (ii) y se enjuagan con acetona en la etapa (iv).

En otra realización, en la etapa (iii) se agita la suspensión mientras se enfría durante aproximadamente 4-12 horas.

En otra realización, se añaden semillas de TH, obtenidas de una preparación previa, durante la etapa (ii).

En otra realización, se seca el sólido durante aproximadamente 4 a 12 horas en la etapa (v).

Naturalmente, las etapas del procedimiento se pueden facilitar por técnicas de agitación convencional, p.ej., movimiento, y otras técnicas convencionales como se podrá entender para facilitar el procedimiento.

HEA cristalina El Compuesto (1) se ha aislado como un polimorfo de sal cristalina de colina denominada en esta memoria como "HEA". En general, la HEA presenta un modelo característico de difracción de rayos X en polvo ("XRPD") con los picos de intensidad más alta expresados en grados 2T (± 0.2 grados 2T) a 7.5, 14.2, 14.9, 17.5, 21.8, 22.1 , 22.7 y 24.3.

El modelo de XRPD de HEA se muestra en la FIG. 3. Las posiciones de los picos característicos y las intensidades relativas para el modelo XRPD de la FIG. 3 se muestran en la Tabla 3 que sigue (incluyendo tanto los picos de intensidad más alta como los de intensidad más baja).

Tabla 3 Para los cristales de HEA, la calorimetría diferencial de barrido (DSC) presenta una fusión/descomposición endotérmica con una temperatura de comienzo a 264 °C. El análisis termogravimétrico (TGA) muestra una pérdida de peso de 0.045 % hasta 230 °C. Estos datos indican que la HEA es una forma sólida cristalina no solvatada. Los cristales de HEA presentaron aproximadamente < 2.5 % de ganancia de humedad con 85 % de RH a 25 °C mediante sorción dinámica de vapor (DVS) lo que indica propiedades no higroscópicas en las condiciones utilizadas en el análisis.

En una realización general, la presente invención se refiere a la sal cristalina de colina del Compuesto (1), denominada aquí como HEA.

Otra realización más específica se refiere a la HEA cristalina que tiene al menos las siguientes características: un modelo de difracción de rayos X en polvo que comprende un pico a 7.5 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se mide utilizando radiación CuKa.

Otra realización se refiere a la HEA cristalina que tiene un modelo de XRPD que comprende un pico a 7.5 grados 2T (± 0.2 grados 2T) como se ha descrito antes y que comprende además picos a 14.9 y 17.5 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se mide utilizando radiación CuKa.

Otra realización se refiere a la HEA cristalina que tiene un modelo de XRPD que comprende un pico a 7.5 grados 2T (± 0.2 grados 2T) como se ha descrito antes y que comprende además picos a 14.9, 17.5, 22.1 y 24.3 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se miden utilizando radiación CuKa.

Otra realización se refiere a la HEA cristalina que tiene un modelo de XRPD que comprende un pico a 7.5 grados 2T (± 0.2 grados 2T) como se ha descrito antes y que comprende además picos a 14.2, 14.9, 17.5, 21.8, 22.1 , 22.7 y 24.3 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se miden utilizando radiación CuKa.

Otra realización se refiere a la HEA cristalina que presenta un modelo de XRPD que es sustancialmente el mismo que se muestra en la FIG. 3.

La HEA presenta un modelo de NMR en estado sólido (ssNMR) que tiene desplazamientos químicos de 13C (incluyendo tanto los picos de intensidad más alta como los de intensidad más baja) como se indica en la Tabla 4 que sigue.

Tabla 4 Desplazamiento Desplazamiento químico (ppm) químico (ppm) 175.1 98.3 172.6 80.0 172.2 78.8 170.2 75.5 169.8 68.2 159.8 61.7 158.6 57.2 157.4 56.2 154.9 54.6 150.3 47.9 149.5 35.7 147.8 35.1 147.1 34.5 137.6 33.8 Todos los desplazamientos químicos registrados y reivindicados aquí son exactos dentro de ± 0.2 ppm a menos que se indique otra cosa.

Un espectro 13C ssNMR representativo de HEA cristalina se muestra en la FIG. 4.

Una realización general se refiere a una sal cristalina de colina del Compuesto (1) que tiene un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 175.1 , 137.6 y 27.2 ppm (± 0.2 ppm).

Estos picos de desplazamientos químicos se consideran suficientes para caracterizar la sal HEA del Compuesto (1) y distinguirla de otras formas cristalinas.

Otra realización se refiere a una sal cristalina de colina del Compuesto (1) que tiene un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 175.1 , 172.6, 172.2, 147.8, 147.1 , 137.6 y 27.2 (todos ± 0.2 ppm).

Otra realización se refiere a una sal cristalina de colina del Compuesto (1) que tiene un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 175.1 , 172.6, 172.2, 170.2, 154.9, 149.5, 147.8, 147.1 , 137.6, 27.2 y 15.7 ppm (todos ± 0.2 ppm).

Otra realización se refiere a la sal cristalina de colina del Compuesto (1) que presenta un espectro 3C ssNMR que es sustancialmente el mismo que el mostrado en la FIG. 4 Otra realización se refiere a la sal cristalina de colina del Compuesto (1) que tiene tanto el modelo de XRPD como el espectro 13C ssNMR de acuerdo con alguna combinación de las realizaciones mencionadas antes. Por ejemplo, una sal cristalina de colina que tiene un modelo de difracción de rayos X en polvo que comprende un pico a 7.5 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se mide utilizando radiación CuKa y un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 175.1 , 137.6 y 27.2 ppm (± 0.2 PPm).

La presente invención proporciona un procedimiento para la preparación de HEA que comprende la cristalización de HEA en las condiciones descritas a continuación. Las condiciones precisas en las que se forma HEA se pueden determinar empíricamente y solamente es posible dar métodos que se han encontrado como adecuados en la práctica.

Se ha encontrado que la HEA se puede preparar por un procedimiento que comprende las siguientes etapas, cuyo procedimiento es también una realización de la presente invención: (i) Combinar el Compuesto (1) con un disolvente adecuado y calentar a aproximadamente 60 °C, (ii) Añadir aproximadamente 1.1 equivalentes de la solución stock de hidróxido de colina en un disolvente adecuado, (iii) Enfriar a aproximadamente 5 °C, (iv) Filtrar la suspensión resultante y enjuagar el sólido con un disolvente adecuado, (v) Secar el sólido a aproximadamente 70 °C a vacío.

Disolventes preferidos incluyen acetona y acetonitrilo. El disolvente más preferido es acetonitrilo. Las soluciones stock adecuadas de hidróxido de colina incluyen soluciones en metanol o soluciones acuosas, opcionalmente diluidas con acetonitrilo. La solución stock preferida es una solución al 45 % en peso en metanol diluida con acetonitrilo. Los cristales resultantes de HEA se pueden recuperar por cualquier método convencional conocido en la técnica.

En las etapas finales (iv) y (v), los sólidos resultantes obtenidos en la etapa (iv) se pueden recoger y secar a alta temperatura utilizando técnicas convencionales de recogida y de secado a alta temperatura, por ejemplo, filtración y estufa a vacío.

En una realización preferida, el Compuesto (1) se combina con acetonitrilo en una proporción de 10 mL de acetonitrilo por gramo de Compuesto (1) en la etapa (i) y la solución stock de hidróxido de colina utilizada en la etapa (ii) se prepara diluyendo una solución al 45 % en peso de hidróxido de colina en metanol con acetonitrilo hasta 5 veces el volumen original.

En otra realización, se añaden semillas de HEA obtenidas de una preparación previa durante la etapa (ii) después de haber añadido el hidróxido de colina.

En otra realización, en la etapa (iii), se lleva a cabo un enfriamiento durante aproximadamente 4 horas mientras se agita.

En otra realización, se seca el sólido durante aproximadamente 4 a 12 horas en la etapa (v).

Naturalmente, las etapas del procedimiento se pueden facilitar por técnicas de agitación convencional, p.ej., movimiento, y otras técnicas convencionales como se podrá entender para facilitar el procedimiento.

MU cristalina El Compuesto (1) se ha aislado como un polimorfo de la sal cristalina de N-metil-D-glucamina denominada en esta memoria como "MU". En general, la MU presenta un modelo característico de difracción de rayos X en polvo ("XRPD") con los picos de intensidad más alta expresados en grados 2T (± 0.2 grados 20) a 2.5, 4.4, 5.1 , 11.7, 15.5, 15.9 y 20.9.

El modelo de XRPD de MU se muestra en la FIG. 5. Las posiciones de los picos característicos y las intensidades relativas para el modelo XRPD de la FIG. 5 se muestran en la Tabla 5 que sigue (incluyendo tanto los picos de intensidad más alta como los de intensidad más baja).

Tabla 5 23.1 I 15,5 Para los cristales de MU, la calorimetría diferencial de barrido (DSC) presenta dos sucesos endotérmicos anchos, uno de 20 °C a 69 °C y el otro de 155 °C a 187 °C. El análisis termogravimétrico (TGA) muestra una pérdida de peso del 3.13 % asociada con el primer suceso endotérmico (20 °C a 69 °C) que indica que la MU es una forma hemipentahidrato.

En una realización general, la presente invención se refiere a la sal cristalina de N-metil-D-glucamina del Compuesto (1), denominada aquí como "MU".

Otra realización más específica se refiere a la MU cristalina que tiene al menos las siguientes características: un modelo de difracción de rayos X en polvo que comprende un pico a 4.4 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se mide utilizando radiación CuKa.

Otra realización se refiere a la MU cristalina que tiene un modelo de XRPD que comprende un pico a 4.4 grados 2T (± 0.2 grados 2T) como se ha descrito antes y que comprende además picos a 2.5 y 5.1 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se mide utilizando radiación CuKa.

Otra realización se refiere a la MU cristalina que tiene un modelo de XRPD que comprende un pico a 4.4 grados 2T (± 0.2 grados 2T) como se ha descrito antes y que comprende además picos a 2.5, 5.1, 11.7 y 15.9 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se miden utilizando radiación CuKa.

Otra realización se refiere a la MU cristalina que tiene un modelo de XRPD que comprende un pico a 4.4 grados 2T (± 0.2 grados 2T) como se ha descrito antes y que comprende además picos a 2.5, 5.1, 11.7 15.5, 15.9 y 20.9 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se miden utilizando radiación CuKa.

Otra realización se refiere a la MU cristalina que presenta un modelo de XRPD que es sustancialmente el mismo que se muestra en la FIG. 5.

La MU presenta un modelo de NMR en estado sólido (ssNMR) que tiene desplazamientos químicos de 13C (incluyendo tanto los picos de intensidad más alta como los de intensidad más baja) como los indicados en la Tabla 6 que sigue.

Tabla 6 Desplazamiento Desplazamiento químico (ppm) químico (ppm) 178.4 70.4 175.6 67.7 173.9 67.2 173.5 59.7 173.4 59.2 172.7 58.6 172.3 58.2 159.8 53.5 158.0 51.7 156.7 42.1 156.4 41.7 156.0 41.6 154.2 38.6 151.2 37.5 Todos los desplazamientos químicos registrados y reivindicados aquí son exactos dentro de ± 0.2 ppm a menos que se indique otra cosa.

Un espectro 13C ssNMR representativo de MU se muestra en la FIG. 6.

Una realización general se refiere a una sal cristalina de N-metil-D-glucamina del Compuesto (1) que tiene un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 178.4, 138.0 y 27.0 ppm (± 0.2 ppm). Estos picos de desplazamientos químicos se consideran suficientes para caracterizar la sal MU del Compuesto (1) y distinguirla de otras formas cristalinas.

Otra realización se refiere a una sal cristalina de N-metil-D-glucamina del Compuesto (1) que tiene un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 178.4, 175.6, 159.8, 154.2, 151.2, 138.0 y 27.0 ppm (todos ± 0.2 ppm).

Otra realización se refiere a una sal cristalina de N-metil-D-glucamina del Compuesto (1) que tiene un espectro 3C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 178.4, 175.6, 173.4, 172.3, 159.8, 154.2, 151.2, 138.0, 27.0, 24.7 y 20.8 ppm (todos ± 0.2 ppm).

Otra realización se refiere a la sal cristalina de N-metil-D-glucamina del Compuesto (1) que presenta un espectro 13C ssNMR que es sustancialmente el mismo que el mostrado en la FIG. xxx Otra realización se refiere a una sal cristalina de N-metil-D-glucamina del Compuesto (1) que tiene tanto el modelo de XRPD como el espectro 13C ssNMR de acuerdo con alguna combinación de las realizaciones mencionadas antes. Por ejemplo, una sal cristalina de N-metil-D-glucamina que tiene un modelo de difracción de rayos X en polvo que comprende un pico a 4.4 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se mide utilizando radiación CuKa y un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 178.4, 138.0 y 27.0 ppm (± 0.2 ppm).

La presente invención proporciona un procedimiento para la preparación de MU que comprende la cristalización de MU en las condiciones descritas a continuación. Las condiciones precisas en las que se forma MU se pueden determinar empíricamente y solamente es posible dar métodos que se han encontrado como adecuados en la práctica.

Se ha encontrado que la MU se puede preparar por un procedimiento que comprende las siguientes etapas, cuyo procedimiento es también una realización de la presente invención: (i) Combinar el Compuesto (1) con 1 equivalente de N-metil-D-glucamina en un disolvente adecuado, (ii) Calentar la mezcla a aproximadamente 50 °C, (iii) Cargar un disolvente adecuado para reducir la solubilidad de MU durante 4 horas, (iv) Enfriar la suspensión a aproximadamente 20 °C durante 3 horas, (v) Filtrar la suspensión y enjuagar el sólido resultante con un disolvente o mezcla de disolventes adecuados, (vi) Secar el sólido a aproximadamente 30 °C a vacío.

Disolventes adecuados incluyen acetato de metilo (MeOAc)/H20 o alcohol isopropílico (IPA)/H20. El disolvente preferido es la mezcla MeOAc/H20.

Los cristales resultantes de MU se pueden recuperar por cualquier método convencional conocido en la técnica.

En una realización preferida, se combinan el Compuesto (1) y 1 equivalente de N-metil-D-glucamina en MeOAc/H20 (9.2 % en peso) en una proporción de 4.68 g de MeOAc/H20 por gramo de Compuesto (1) en la etapa (i), se calientan a aproximadamente 50 °C y se añaden 7.13 g de MeOAc por gramo de Compuesto (1) a lo largo de 4 horas en la etapa (iii) y se enjuaga con la mezcla MeOAc/H20 (1.75 g de MeOAc+0.035 g de H20 por gramo de Compuesto (1)) en la etapa (v).

En otra realización, se añaden semillas de MU, obtenidas de una preparación previa, durante la etapa (iii).

Naturalmente, las etapas del procedimiento se pueden facilitar por técnicas de agitación convencional, p.ej., movimiento, y otras técnicas convencionales como se podrá entender para facilitar el procedimiento.

Características de la sal Se ha encontrado inesperadamente que la forma de sal de trometamina TH y de sal de colina HEA tienen propiedades únicas que las hacen particularmente ventajosas en el proceso de formulación farmacéutica. En particular, TH y HEA tienen ciertas propiedades que harían más fácil la caracterización, procesado y manipulación durante la fabricación.

En primer lugar, se ha encontrado inesperadamente que la TH existe en una forma cristalina no soivatada y no higroscópica o ligeramente higroscópica (a temperatura ambiente hasta 85 % de RH). Se ha encontrado también que la HEA existe en una forma cristalina no soivatada y no higroscópica (a temperatura ambiente hasta 85 % de RH). Estas propiedades no son predecibles. Por ejemplo, se encontró que la sal sódica (NA) existe como un hidrato variable que puede crear dificultades en la caracterización, fabricación (p.ej. dificultad de secado) y manipulación de una formulación consistente.

Además, se encontró inesperadamente que la TH tenía una velocidad de disolución por encima de 10 veces mayor a pH 6.8 que la sal sódica o la HEA como se muestra en la Tabla 7. La HEA fue comparable a la sal sódica. El aumento de la disolución puede ser ventajoso para la absorción y la biodisponibilidad.

Tabla 7 Los métodos utilizados para generar estos resultados se describen más abajo en la sección Métodos de Caracterización.

Los resultados anteriores obtenidos con las diferentes sales cristalinas del Compuesto (1) son inesperados porque generalmente no es posible predecir tales diferencias en las propiedades higroscópicas, forma solvatada o solubilidad entre las diferentes formas salinas de un compuesto, y en particular para el Compuesto (1), incluso después de que dichas formas hayan sido preparadas satisfactoriamente.

Composiciones farmacéuticas y métodos Las formas del Compuesto (1) mencionadas antes, incluyendo las formas salinas TH, HEA y MU, son útiles como agentes anti-HCV como consecuencia de la actividad inhibitoria demostrada del Compuesto (1) frente a la serina proteasa NS3 del HCV. Estas formas son útiles, por lo tanto, en el tratamiento de la infección por HCV en un mamífero y se pueden utilizar para la preparación de una composición farmacéutica para tratar una infección por HCV o para aliviar uno o más de sus síntomas en un paciente. Las cantidades de dosificación apropiadas y los regímenes para un paciente particular se pueden determinar por los métodos conocidos en la técnica y por referencia a la descripción en las patentes de Estados Unidos 6.323.180 y 7.585.845. Generalmente, se administra una cantidad terapéuticamente eficaz para el tratamiento de la infección por HCV en el mamífero. En una realización, se administran aproximadamente de 50 mg a 1000 mg, más preferiblemente de aproximadamente 120 mg a aproximadamente 480 mg, por humano adulto al día, en dosis simples o múltiples.

Los regímenes óptimos específicos de dosis y tratamiento para cualquier paciente particular dependerán, por supuesto, de una variedad de factores, incluyendo la edad, el peso corporal, el estado de salud general, el sexo, la dieta, el tiempo de administración, el índice de excreción, la combinación de fármacos, la gravedad y el curso de la infección, la disposición del paciente a la infección y el criterio del médico que lo esté tratando. En general, el compuesto se administra más convenientemente con un nivel de concentración que en general producirá resultados antivíricamente eficaces sin causar ningún efecto colateral perjudicial o nocivo.

Las formas cristalinas TH, HEA y MU del Compuesto (1) a un nivel de dosificación seleccionado se administran típicamente al paciente mediante una composición farmacéutica. Véanse, p.ej., las descripciones de las patentes de Estados Unidos 6.323.180 y 7.585.845 para los diferentes tipos de composiciones que se pueden emplear en la presente invención. La composición farmacéutica se puede administrar oralmente, parenteralmente o mediante un depósito implantado. El término parenteral, tal como se usa en la presente memoria, incluye técnicas de inyección o perfusión subcutáneas, intracutáneas, intravenosas, intramusculares, intraarticulares, intrasinoviales, intraesternales, intratecales e intralesionales. Se prefiere la administración oral o la administración por inyección.

Las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden contener cualquier portador, diluyente, adyuvante, excipiente o vehículo convencional no tóxico farmacéuticamente aceptable. En algunos casos, el pH de la formulación se puede ajusfar con ácidos, bases o tampones farmacéuticamente aceptables para aumentar la estabilidad del compuesto formulado o su forma de administración.

Las composiciones farmacéuticas pueden estar en la forma de una preparación inyectable estéril, por ejemplo, como una suspensión acuosa u oleaginosa inyectable estéril. Esta suspensión se puede formular según métodos conocidos en la técnica, utilizando agentes de dispersión o humectación adecuados (tales como, por ejemplo, Tween 80) y agentes de suspensión.

Las composiciones farmacéuticas pueden estar también en la forma de una composición farmacéutica oral que comprenda la sal TH, HEA o MU del Compuesto (1), o sus mezclas, y al menos un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable. Las composiciones farmacéuticas orales se pueden administrar oralmente en cualquier forma farmacéutica oralmente aceptable, incluyendo, aunque sin limitarse a ellos, comprimidos, cápsulas (p. ej., cápsulas de gelatina duras o blandas), incluyendo cápsulas rellenas de líquido, y suspensiones y soluciones acuosas. En el caso de comprimidos para uso oral, los vehículos que se utilizan comúnmente incluyen lactosa y almidón de maíz.

También se añaden típicamente agentes lubricantes, tales como estearato de magnesio. Para la administración oral en forma de cápsulas, los diluyentes útiles incluyen lactosa y almidón de maíz seco. Los ejemplos de cápsulas de gelatina blandas que se pueden usar incluyen los descritos en el documento EP 649651 B1 y en la Patente de Estados Unidos 5.985.321. Cuando las suspensiones acuosas se administran por vía oral, el ingrediente activo se combina con agentes emulsionantes y de suspensión. Si se desea, se pueden añadir ciertos agentes edulcorantes y/o saporíferos y/o colorantes.

Otros vehículos o portadores adecuados para las formulaciones y composiciones mencionadas antes, se pueden encontrar en los textos farmacéuticos estándar, p. ej., en "Remington's Pharmaceutical Sciences", 19th ed., Mack Publishing Company, Easton, Penn., 1995.

Ciertamente, cuando se formula la sal cristalina TH, HEA o MU en un vehículo líquido, por ejemplo, como una solución o suspensión líquida para la administración oral o por inyección, incluyendo, por ejemplo, en cápsulas rellenas de líquido, la sal pierde su naturaleza cristalina. Sin embargo, la composición farmacéutica líquida final contiene la nueva sal TH, HEA o MU del Compuesto (1) y se considera, por lo tanto, una realización separada incluida en la presente invención.

Métodos de caracterización 1. Difracción de rayos X en polvo Los análisis de difracción de rayos X en polvo se realizaron en un difractómetro de rayos X en polvo AXS de Bruker Modelo D8 Discover, disponible en Bruker AXS, Inc. of Madison, Wl, utilizando radiación CuKa. Los barridos de etapa se realizaron de 22 a 35° 2-zeta, a 0.05° por etapa, 4 segundos por etapa. Se usó cuarzo estándar de referencia para comprobar la alineación del instrumento. Se prepararon las muestras para análisis rellenando un soporte de sílice de línea de fondo cero. 2. Análisis DSC Para el análisis DSC se utilizó Q1000 de TA instrumente. Se pesaron aproximadamente 5 mg de muestra en un porta muestras de aluminio hermético, abierto. Se utilizó el modo convencional en rampa de 20 °C a 300 °C con una velocidad de calentamiento de 10°C/min. Se purgó la cubeta DSC con nitrógeno a 50 mUmin durante la operación. 3. Análisis TGA Para el análisis TGA se utilizó Q500 de TA instruments. Se pusieron aproximadamente 10 mg de muestra en un porta muestras de TGA de platino, tarado. Se hizo un barrido de la muestra de 25 °C a 300 °C con una velocidad de calentamiento de 10°C/min. El horno TGA se purgó con nitrógeno a 60 mL/min mientras que la balanza se purgó con nitrógeno a 40 ml_/min. 4. Sorción dinámica de vapor Se realizaron los análisis de sorción dinámica de agua utilizando los sistemas de medida de superficie DVS o DVS-HT, o instrumentos VTI SGA-100. Los tamaños de las muestras variaron de 4 mg a 13 mg. Se realizaron tres ciclos de sorción/desorción de agua a 25 °C con cambio de la humedad relativa a incrementos de 5 - 10 % de 5 % a 95 %. Los criterios para la etapa fueron cambio de peso inferior o igual a 0.002 % o tiempo máximo de 3 horas. 5. NMR en estado sólido Los datos de la NMR en estado sólido (SSNMR) se adquirieron en un espectrómetro NMR Bruker Avance III (Bruker Biospin, Inc., Billerica, MA) a 9.4T (1H=400.46 MHz, 13C=100.70 MHz). Se empaquetaron las muestras en rotores de zirconio de 4 mm de O.D. con puntas de dirección Kel-F®. Se utilizó una sonda Bruker modelo 4BL CP BB WVT para adquisición de datos y un giro de la muestra de aproximadamente el ángulo mágico (54.74°). La adquisición del espectro de la muestra utilizó una velocidad de giro de 12 kHz. Se utilizó una secuencia estándar de pulsos de polarización cruzada con un pulso en rampa que satisface la condición de Hartman-Hahn sobre el canal de protones a temperatura ambiente y presión ambiente. La secuencia de pulsos utilizó un pulso de contacto de 5 milisegundos y un retraso de reciclado de 2 segundos. Se empleó también el desacoplamiento modulado de dos fases de pulso (tppm) en la secuencia de pulsos. No se utilizó ningún ensanchamiento de la línea exponencial antes de la transformación de Fourier de la caída libre de la inducción. Los desplazamientos químicos se identificaron utilizando el estándar secundario de adamantano, con la resonancia campo arriba estando fijada a 29.5 ppm. El ángulo mágico se fijó utilizando la señal de 79Br procedente de KBr en polvo a una velocidad de giro de 5 kHz. 6. Estudios de disolución Se evaluaron las velocidades de disolución intrínsecas utilizando un analizador de disolución Van Kel VK7000 y un baño de disolución de 400 mL con una velocidad de rotación de 100 rpm a 37 °C. Se prepararon las muestras utilizando aproximadamente 50 mg de API (ingrediente activo) en una matriz de Wood de 6 mm de diámetro con una fuerza de compresión de 3 kN y 15 segundos de tiempo de tiempo de permanencia mediante prensa de Carver. Se realizó el ensayo en 400 mL de pH 6.8 (fosfato de sodio 20 mM). Se recogieron las muestras a los 2, 5, 10, 15, 20, 25, y 30 minutos, y las muestras recogidas no se filtraron o se filtraron utilizando un filtro de PDVF de 0.2 pm. Se determinaron las concentraciones del fármaco por HPLC utilizando el método ¡socrático con detección de fluorescencia.

Con el fin de que la presente invención se entienda más completamente, se exponen los siguientes ejemplos. Estos ejemplos tienen el objetivo de ilustrar las realizaciones de esta invención y de ninguna manera se deben considerar limitantes del alcance de la invención. El material de partida utilizado en los ejemplos, Compuesto (1), se puede preparar por los métodos descritos en las patentes de Estados Unidos 6.323.180, 7.514.557 y 7.585.845. EJEMPLOS Ejemplo 1 : Preparación de la sal de trometamina del Compuesto (1) Se combinan el Compuesto (1) (5 g) y tris (hidroximetil) aminometano (0.696 g) en 50 mL de acetona. Se agita la mezcla y se calienta a 50 °C y se agita a esa temperatura durante 4 horas. La suspensión resultante se enfría lentamente a 20 °C mientras se agita. La mezcla enfriada se agita durante un total de 12 horas. La mezcla resultante se filtra a vacío y el sólido resultante se enjuaga con acetona (2 x 10 mL). Se seca el sólido a 70 °C a vacío durante 12 horas para obtener la sal de trometamina del Compuesto (1) (TH).

El modelo de XRPD de TH se muestra en la Figura 1 y el espectro 13C ssNMR de TH se muestra en la Figura 2.

Ejemplo 2: Preparación de la sal de colina del Compuesto (1) El Compuesto (1) (5g) se combina y se agita con 50 mL de acetonitrilo y se calienta a 60 °C. Se añaden lentamente a lo largo de un período de 6 horas mientras se agita a 60 °C, 4.52 mL de una solución stock de hidróxido de colina, previamente preparada diluyendo 5 mL de solución de hidróxido de colina al 45 % en peso, en MeOH con acetonitrilo hasta un volumen total de 25 mL. Se agita la mezcla y se enfría lentamente a 5 °C durante un período de 4 horas. Se filtra entonces la suspensión y el sólido resultante se lava con acetonitrilo (2 x 10 mL). Se seca entonces el sólido a 70 °C a vacío durante 12 horas para obtener la sal de colina del Compuesto (1) (HEA).

El modelo de XRPD de HEA se muestra en la Figura 3 y el espectro 13C ssNMR de HEA se muestra en la Figura 4.

Ejemplo 3: Preparación de la sal de N-metil-D-glucamina del Compuesto (1) Se combinan el Compuesto (1) (20 g) y N-metil-D-glucamina (4.49 g) con 8.63 g de H20 y 85 g de acetato de metilo (MeOAc). Se agita la mezcla y se calienta a 50 °C. Se cargan 142.5 g de MeOAc sobre la mezcla a lo largo de > 4 horas (se prefiere pero no se requiere la adición de semillas antes de la adición de MeOAc). La suspensión resultante se enfría a 20 °C durante > 3 horas mientras se agita. La mezcla resultante se filtra y el sólido resultante se enjuaga con una mezcla de MeOAc/H2O (35.15 g de MeOAc + 0.717 g de H2O). El sólido se seca a= 30 °C a vacío durante= 12 horas para obtener la sal de N-metil-D-glucamina del Compuesto (1) (MU).

El modelo de XRPD de MU se muestra en la Figura 5 y el espectro 13C ssNMR de MU se muestra en la Figura 6.

Claims (13)

REIVINDICACIONES

1.- Una sal cristalina de trometamina del compuesto de la siguiente fórmula (1): (1).

2. - La sal cristalina según la reivindicación 1 , que tiene un modelo de difracción de rayos X en polvo que comprende un pico a 5.9 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se mide utilizando radiación CuKa.

3. - La sal cristalina según la reivindicación 1 , que tiene un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 178.3, 138.1 y 27.1 ppm (+ 0.2 ppm).

4. - La sal cristalina según la reivindicación 1 , que tiene un modelo de difracción de rayos X en polvo que comprende un pico a 5.9 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se mide utilizando radiación CuKa y un espectro 3C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 178.3, 138.1 y 27.1 ppm (± 0.2 ppm).

5. - Una sal cristalina de colina del compuesto de la siguiente fórmula (1):

6. - La sal cristalina según la reivindicación 5, que tiene un modelo de difracción de rayos X en polvo que comprende un pico a 7.5 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se mide utilizando radiación CuKa.

7. - La sal cristalina según la reivindicación 5, que tiene un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 175.1 , 137.6 y 27.2 ppm (± 0.2 ppm).

8. - La sal cristalina según la reivindicación 5, que tiene un modelo de difracción de rayos X en polvo que comprende un pico a 7.5 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se mide utilizando radiación CuKa y un espectro 3C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 175.1 , 137.6 y 27.2 ppm (± 0.2 ppm).

9. - Una sal cristalina de N-metil-D-glucamina del compuesto de la siguiente fórmula (1): (1)·

10. - La sal cristalina según la reivindicación 9, que tiene un modelo de difracción de rayos X en polvo que comprende un pico a 4.4 grados 2T (± 0.2 grados 2T) cuando se mide utilizando radiación CuKa.

11. - La sal cristalina según la reivindicación 9, que tiene un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 178.4, 138.0 y 27.0 ppm (± 0.2 ppm).

12. - La sal cristalina según la reivindicación 9, que tiene un modelo de difracción de rayos X en polvo que comprende un pico a 4.4 grados 20 (+ 0.2 grados 2T) cuando se mide utilizando radiación CuKa y un espectro 13C NMR en estado sólido que comprende picos en desplazamientos químicos de 178.4, 138.0 y 27.0 ppm (± 0.2 ppm).

13. - Una composición farmacéutica que comprende una sal según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, y al menos un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.