JP2006292470A - 点着用支持体 - Google Patents

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Abstract

【課題】
セルロースアセテート膜による銀染色高感度微量蛋白定量法において正確な測定結果を得るためには、一定量の試料を一定面積に偏り・歪みなく点着する必要がある。従来使われてきたマイクロピペットやキャピラリーガラス管を支持体に接触させる点着方法は、取扱いが煩雑で熟練を要した。
【解決手段】
本発明は、あらかじめ検体吸収部分以外に検体がしみこまない加工を施すことにより、一定量の検体をたらすだけで正円状に吸収する、点着用支持体を提供する。
【選択図】図１

Description

本発明は、試料を添加しやすい点着用支持体に関する技術分野に属する。
従来より、微量の蛋白質を高感度にかつ簡便に多数の検体を定量する方法として、セルロースアセテート膜による銀染色高感度微量蛋白定量法が用いられている（特許文献１）。これは、乾燥状態にある高分子多孔質膜上に一定量の尿、脳髄液等の検体を多数点着し、微量蛋白質を固定化した上で銀を特異的に結合させて可視状態にし、濃度を測定する方法である。濃度計を用いて正確な測定結果を得るためには、一定量の試料を一定面積に偏り・歪みなく点着する必要があることがわかっている（非特許文献１、ｐ１０４〜１０５参照）。
点着はマイクロピペットやキャピラリーガラス管の端を検体に浸して吸引し、そのまま切り口を垂直に支持体に接触させ、支持体に吸収させることで実施されている。
一定量の試料を一定面積に偏り・歪みなく点着する、すなわち点着後の像をムラのない常に同じ大きさの正円とするには、正確に３マイクロリットルをはかりとり、マイクロピペットやキャピラリーガラス管に吸引された検体がすべて支持体に吸収されるまでの間マイクロピペットやキャピラリーガラス管の端を一定の力で垂直に接触させつづければよい。また、支持体に傷がつくとこの部分の濃度が変化するため、傷をつけないよう接触する力を加減しなければならない。
特開平２００２−２３６１２７号公報 橋本寿美子「セルロースアセテート膜電気泳動法」、臨床検査第２６巻１号ｐ９９〜１０７、医学書院、１９８２年
点着を多数回繰り返すこと、とくに折れやすいキャピラリーガラス管を手に持ち点着を行うことは、非常に煩雑であった。
また、点着後の像をムラのない常に同じ大きさの正円とすること、および支持体を傷つけないよう力を加減することは、熟練が必要だった。
本発明は、あらかじめ検体吸収部分以外に検体がしみこまない加工を施すことにより、一定量の検体を正円状に吸収する点着用支持体を提供する。
加工は、フィルム用シーラーのシール部分幅約５ミリメートルを内径７ミリメートルの円状に形成し、セルロースアセテート膜に接触させ、検体を吸収させようとする部分の周囲に検体がしみこまない円環を描くことによる。また、内径７ミリメートル、外径は任意の円筒を垂直に回転させながらセルロースアセテート膜に押し当てるのでもよい。さらに、検体を吸収する正円部分を除いたすべての部分に水のしみこまない加工を施してもよい。
加工により描かれた検体がしみこまない円環の内部の任意の場所に一定量の検体をたらすだけで、点着後の像をムラのない常に同じ大きさの正円とすることができ、簡単確実に点着できるようになった。また、ピペットやキャピラリーガラス管を支持体に接触させる必要がなくなったため、接触部分のみ濃度が高くなるムラを防ぐことができた。
内径７ミリメートル、外径は任意の円筒を垂直に回転させながらセルロースアセテート膜に押し当て、検体を吸収させようとする部分の周囲に検体がしみこまない円環を描いた場合の点着用支持体を図１に示した。
乾燥状態のセルロースアセテート膜に内径７ミリメートル、外径は任意の円筒を垂直に回転させながら押し当て、点着用支持体を作製した。マイクロピペットで３マイクロリットルを正確にはかりとり、ピペットの端を支持体に接触させずに検体吸収部にたらした。検体をたらした場所が検体吸収部の円の中心部分あるいは中心からずれた部分であるのにかかわらず、検体は同じ大きさの正円となって広がり、吸収された。
銀染色高感度微量蛋白定量法が手軽に行えるようになり、その後の蛋白分画による病態解析がより簡便に実施でき、腎疾患の診断治療および研究に寄与する。
点着用支持体の平面図である。
符号の説明
１ 支持体
２ 加工によって描かれた検体がしみこまない円環
３ 検体吸収部

Claims (3)

  1. 乾燥状態にある高分子多孔質膜上に一定量の検体を多数点着し、固定化した上で可視状態にし、濃度を測定する方法において、あらかじめ検体吸収部分以外に検体がしみこまない加工を施すことにより、一定量の検体をたらすだけで正円状に吸収する、点着用支持体。
  2. 加工方法が、熱または圧力による請求項１記載の支持体。
  3. 点着する検体が、尿、脳髄液など生体成分である請求項１記載の支持体。
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