CN1663568A - 一种新的有效防治病毒性感染的复方制剂 - Google Patents

Abstract

本发明的内容是提出一种复方制剂，这种复方制剂是由更昔洛韦和甘草甜素组成，制剂形式可以是口服制剂、注射制剂、外用制剂。这种复方制剂临床上可以用于各种病毒性感染引发的疾病，还可以用于炎症治疗、增强免疫功能等。该复方制剂的含有治疗有效剂量的各种活性成分，其中更昔洛韦和甘草甜素的各个用量比值相应地变化。优选地，更昔洛韦其可药用盐与甘草甜素可药用盐的重量比值范围为1∶20－20∶1，优选1∶5－5∶1。

Description

一种新的有效防治病毒性感染的复方制剂

由病毒感染而引起的多种疾病严重地危害人类健康和生命，据不完全统计，约60％流行传染病是由病毒感染引起的，其中发病率高、危害大的主要为病毒性肝炎、艾滋病及由疱疹病毒引起的各种疾病。目前临床上用于治疗病毒感染的药物主要有膦甲酸钠、阿昔洛韦、更昔络韦等。临床研究结果显示，与膦甲酸钠、阿昔洛韦相比，更昔洛韦具有疗效高、耐药性好、抗病毒谱宽等优点。

更昔洛韦(Ganciclovir，更昔洛韦钠Ganciclovir Sodium，9-(1，3-二羟基-2-丙氧甲基)-鸟嘌呤单钠盐，分子式：C₉H₁₂N₅NaO₄，分子量：277.22)，是由美国Syntex公司研制开发的环核苷类抗病毒药，体内和体外试验证明更昔洛韦具有抗疱疹病毒、巨细胞病毒及嗜肝病毒的活性(Faulds D and Heal RC，Drugs，39：597)。于1988年首次在英国上市，1989年7月在美国上市，其后在世界大多数国家获得批准上市应用于临床。更昔洛韦、更昔洛韦钠现有口服制剂、注射制剂、眼科制剂等。

更昔洛韦在治疗巨细胞病毒感染疾病上有明显优势，但单独使用其抗病毒活性并没有充分发挥出来，在临床实践中，常以更昔洛韦配合其他药物使用以充分发挥其优势，比如更昔洛韦联合苦参碱用于婴儿巨细胞病毒性肝炎(盛凯，等，新乡医学院学报，2002，19：224)，更昔洛韦联合利巴韦林治疗儿童病毒性脑炎(张心，中国基层医药，2002，9：887)，更昔洛韦联合大剂量丙种球蛋白治疗巨细胞病毒感染(吴祥元，等，中华医院感染学杂志，2002，12：389)。

甘草甜素(甘草酸，Glycyrrhizic acid)是天然药物甘草的活性成分，常以钠盐、铵盐形式存在。甘草在很多国家被作为民间药，传统中医药认为其具有补脾益气、清热解毒、润肺止咳、缓急止痛、调和诸药等功效。现在临床上甘草甜素常用于乙型肝炎治疗，急性及慢性病毒性感染，亦可用于抗艾滋病、抗癌治疗。目前甘草酸盐还有甘草酸单铵盐、甘草酸二铵盐、甘草酸单钾盐、甘草酸二钾盐、甘草酸三钾盐、甘草酸二钠盐、甘草酸三钠盐，以及甘草酸锌、甘草次酸、甘草甜味素等。

对于甘草甜素的研究发现其有较好的抗病毒效果，如其对单纯疱疹病毒-I(梁再赋，等，1992)、带状疱疹病毒(Baba，etal，1987)、巨细胞病毒(Edward，1992)、HIV病毒(Ito，etal 1987，Stein，et al，1987，Kawaiski，et al，1987，Fieds，et al，1988，Edward，1992)，以及冠状病毒(Cinatl，et al，2003)，均有良好的抗病毒效果。在临床应用上，甘草甜素及其复方制剂主要被用于肝炎治疗上。临床实践中，国内还有报道，采用甘草甜素和阿维A合用(赵广，等，1999)、或和雷公藤红霉素合用(杨雪源，等，2000)治疗银屑病，法莫替丁、桂利嗪和甘草甜素合用治疗慢性荨麻疹(叶晗，2002)，拉米夫啶联合甘草甜素治疗慢性乙型肝炎(张瑞林，2003)，胶股蓝和甘草甜素合用治疗脂肪性肝炎(葛繁梅，等，2002)。对于甘草酸类衍生物的研究也获得了比较理想的效果，其中甘草次酸的酰胺类衍生物效果较好，并且没有类固醇样的副作用，11-脱氧甘草萜醇及其酯化物已进入临床研究。

已经上市的药品有，1980年日本首次采用甘草酸单铵盐和甘氨酸、半胱氨酸的复方制剂治疗慢性肝炎，国内采用甘草甜素、左旋氨基酸混合制剂、甘草酸二胺盐等用于肝炎的治疗均取得了很好的效果。

为发挥更昔洛韦、甘草甜素两个抗病毒药物的优势，减少单独使用每一个药物时出现的副作用，我们采用更昔洛韦配合甘草甜素联合用药，经过多次体内体外试验、不同配比筛方试验，我们发现：更昔洛韦配合甘草甜素联合使用后，比单独使用其中一种药物具有更强的抗病毒活性、更大抗病毒谱、较低的副作用，为此我们开发了更昔洛韦甘草甜素复方制剂。

●发明内容

本发明的内容是提出一种复方制剂，这种复方制剂是由更昔洛韦和甘草甜素组成，制剂形式可以是口服制剂、注射制剂、外用制剂。

因此，本发明涉及含有活性成分更昔洛韦，任选地以其一种可药用盐形式的，如更昔洛韦钠，或其前药缬更昔洛韦(valganciclovir)，和甘草甜素，任选地以其一种可药用盐形式的，如甘草甜素作为活性成分，或其前药能够在体内代谢后以甘草酸形式作为活性成分的，与一种或多种可药用盐联合的药物组合物。

以及，用已知的方法通过更昔洛韦与相应的酸、碱进行反应得到更昔洛韦的可药用盐。和，用已知的方法通过甘草甜素与相应的酸、碱进行反应得到甘草甜素的可药用盐。

该组合物更特别地适于各种病毒性感染引发的疾病，还可以用于炎症治疗、增强免疫功能等。

本发明组合物含有治疗有效剂量的各种活性成分。因此，更昔洛韦和甘草甜素的各个用量比值相应地变化。优选地，更昔洛韦其可药用盐与甘草甜素可药用盐的重量比值范围为1∶20-20∶1，优选1∶5-5∶1。

本发明组合物优选口服给药、注射给药、眼科给药、阴道给药、皮肤给药以及直肠给药。

当口服给药时，本发明组合物的制剂形式可以是明胶胶囊、植物胶囊、颗粒剂、分散片、泡腾片、包衣片、药囊、糖衣片、锭剂、栓剂、粉剂、口服液、饮用小瓶或溶液、微粒或上述各种剂型的缓释剂型、分散剂型。

当注射给药时，本发明组合物是用于慢速静脉输注或肌肉注射的包装在管形瓶、玻璃瓶或瓶中的注射溶液、干粉、或冻干粉和悬浮液形式。

将活性物质与各种类型赋形剂或载体如填充剂、崩解(或破碎)剂、粘合剂、染料、矫味剂等等进行混合，然后将混合物成形，由此制备成口服给药剂型。

染料可以是药用的任何染料。

矫味剂包括各种屏味剂、脂性物质(包括卵磷脂、表面活性剂)、亲水性药物包埋剂材料(如聚丙烯酸树脂类药用涂膜剂、改性淀粉类碳水化合物、环糊精类葡萄糖低聚物等等)以及离子交换树脂、蛋白质、沸石、鞣酸、柠檬酸、酒石酸各种有机酸和其它药用辅料，以及可可粉、薄荷、冰片、甜味剂和肉柱粉。

粘合剂的实例是聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、乙基纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素、藻酸、卡波姆(carbomer)、糊精、淀粉、藻酸钠、聚甲基丙烯酸酯、麦芽糖糊精、液体葡萄糖、硅酸铝侯和瓜尔胶。

崩解剂的实例是藻酸、羧甲基纤维素、胶态二氧化硅、交联羧甲基纤维素钠、聚乙烯聚吡咯烷酮、瓜尔胶、硅酸镁铝、甲基纤维素、微晶纤维素、纤维素粉、预胶凝的淀粉、藻酸钠或羟乙酸淀粉钠。

填充剂是纤维素、乳糖、磷酸氢钙和微晶纤维素。

使用惯常的方法，在一种或多种润滑剂存在的情况下，将颗粒压制可以获得片剂。适宜的润滑剂是硬脂酸钙、硬脂酸单甘油酯、粽桐酰硬脂酸甘油酯、氢化的蓖麻油、氢化的植物油、轻矿物油、硬脂酸镁、聚乙二醇、苯甲酸钠、十二烷基硫酸钠、延胡索酸十八烷基钠、硬脂酸、滑石粉和硬脂酸锌。

然后可以使用聚合物的溶液或悬浮液如羟丙基甲基纤维素或乙基纤维素，将这些片剂进行包衣。

如使用湿法制粒过程，用活性成分与一种或多种赋型剂如粘合剂、粉碎剂(或崩解剂)和填充剂的混合物为起始物料，制备压片所用的颗粒。

为了得到硬胶囊，任选地在润滑剂如硬脂酸镁、硬脂酸、滑石粉或硬脂酸锌存在的情况下，将活性成分与适宜填充剂(例如乳糖)的混合物填充入空的胶囊中，胶囊可以是明胶胶囊、植物胶囊。

将活性成分溶解在适宜溶剂(如聚乙二醇)中，接着装入软胶囊而制得软明胶胶囊。

用常规方法，将活性成分与缓冲液、稳定剂、防腐剂、增溶剂、张度剂和悬浮剂进行混合，得到注射制剂。根据已知的技术，随后将这些混合成分的灭菌，然后包装成静脉注射、肌肉注射的形式。

用常规方法，将活性成分与缓冲液、稳定剂、防腐剂、增溶剂、张度剂和悬浮剂进行混合，得到眼科制剂。根据已知的技术，随后将这些混合成分的灭菌，然后包装。

用常规方法，将活性成分与缓冲液、稳定剂、防腐剂、增溶剂、张度剂和悬浮剂进行混合，得到阴道给药制剂。根据已知的技术，随后将这些混合成分的灭菌，然后包装。

用常规方法，将活性成分与缓冲液、稳定剂、防腐剂、增溶剂、张度剂和悬浮剂进行混合，得到直肠制剂。根据已知的技术，随后将这些混合成分的灭菌，然后包装。

用常规方法，将活性成分与缓冲液、稳定剂、防腐剂、增溶剂、张度剂和悬浮剂进行混合，得到外用制剂。根据已知的技术，随后将这些混合成分的灭菌，然后包装外用制剂，外用制剂的形式包括软膏、外用凝胶、喷雾剂、贴剂、贴膏、栓剂、药用纱布、洗手液、洗手乳膏、喷剂、面膜、消毒水等剂型

缓冲液可以使用基于有机磷酸盐的缓冲液。悬浮剂的实例，包括甲基纤维素、羟乙基纤维素、阿拉伯胶和羧甲基纤维素钠。增溶剂的实例，包括用聚氧乙烯、吐温80、姻酰胺或Macrogol固化的蓖麻油。稳定剂可以是亚琉酸钠和焦亚硫酸钠等。防腐剂可以是对一羟苯甲酸钠、抗坏血酸、甲酚和氯甲酚。

为了制备口服溶液或悬浮液，将活性成分与分散剂、润湿剂、悬浮剂(如聚乙烯吡咯烷酮)、防腐剂(如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯)、矫味剂或染料一起溶解到适宜载体中。

为了制备微胶囊，活性成分与适宜稀释剂、适宜稳定剂、促进活性成分缓释的物质或形成中芯的任何其它类型添加剂联合，然后用适宜聚合物(例如树脂)将芯包衣。然后，将得到的微胶囊任选地制威适宜剂量单位。

本发明的目的还有，任选地以其一种可药用盐形式的更昔络韦，和甘草甜素可药用盐联合，在制备治疗病毒性感染疾病的药物中的应用。

根据本发明，术语“药物联合”或者指上面定义的药物组合物，其中两种活性成分是同一个组合物中的基本组分，或者指含有两个独立组合物成分的药盒，第一个组合物中含有更昔络韦、或其前体或代谢产物等任一形式的活性成分、或其可药用盐作为唯一的活性成分，第二个组合物中含有甘草甜素、或其前体或代谢产物等任一形式的活性成分、或其可药用盐作为唯一的活性成分。当药物联合呈药盒形式时，构成药盒的两种组合物的给药尽管是单独进行的，但是为了联合治疗，是同时进行的。

根据本发明的一个优选实施方案，  更昔络韦或其盐的用量和甘草甜素的重量比例是1∶20-20∶1，优选1∶5-5∶1。

当更昔络韦和甘草甜素或其盐混合后在同一单位剂量中时，单位剂量优选的含有10-10000mg的更昔络韦。其中口服制剂的单位剂量犹选含有50-1000mg更昔络韦，注射制剂的单位剂量优选的含有10-500mg更昔络韦，眼科制剂和外用制剂的单位剂量优选的含有100-10000mg更昔络韦。制剂的给药剂量自然地取决于给药模式、治疗适应症和患者的年龄及体质体重。

参照下面的实施例来描述本发明组合物的应用和请求保护的用途的优点。使用体外病毒培养方法证明更昔络韦和甘草甜素复方比单独的更昔络韦、甘草甜素具有更强的抗病毒活性。采用体内小鼠动物模型证明更昔络韦和甘草甜素具有协同作用。

实例一、更昔络韦甘草甜素复方体外抗乙肝病毒活性

采用HBV DNA转染的Hep G₂ 2.2.15细胞株，正常细胞培养方法，按如下给药方式分组：空白对照组(标准细胞培养液中不含有任何药物)、阳性对照组(标准细胞培养液中并含有20mg/ml更昔络韦)，试验组A(标准细胞培养液中含有20mg/ml更昔络韦+10mg/ml甘草甜素)，试验组B(标准细胞培养液中含有20mg/ml更昔络韦+20mg/ml甘草甜素)，试验组C(标准细胞培养液中含有20mg/ml更昔络韦+40mg/ml甘草甜素)。按如上给药方式，细胞培养条件下连续给与10天，收集细胞上清液和细胞标本后分别做如下检验：1、HBsAg定量分析，采用ELISA试剂盒检测；2、HBV DNA定量检查，应用分支链(bDNA)定量分析试剂盒检测。

试验结果如下：

1、对细胞培养液中HBsAg的抑制作用：

1】、没有任何药物的空白对照组中，细胞上清液中HbsAg随着培养时间的延长持续稳定的增长，到8天为2.68μg/ml。2】、阳性对照组(细胞培养液中含有20mg/ml更昔络韦)中细胞上清液中HbsAg从给药后的第二天开始，随着培养时间的延长持续稳定的减少，到第8天后相对稳定在一个水平，其第8天时细胞上清液中HbsAg为1.43μg/ml。3】、试验组A(细胞培养液中含有20mg/ml更昔络韦+10mg/ml甘草甜素)中细胞上清液中HbsAg从给药后的第二天开始，随着培养时间的延长持续稳定的减少，到第8天后相对稳定在一个水平，其第8天时细胞上清液中HbsAg为1.40μg/ml。4】、试验组B(细胞培养液中含有20mg/ml更昔络韦+20mg/ml甘草甜素)中细胞上清液中HbsAg从给药后的第二天开始，随着培养时间的延长持续稳定的减少，其第8天时细胞上清液中HbsAg为1.31μg/ml。5】、试验组C(细胞培养液中含有20mg/ml更昔络韦+40mg/ml甘草甜素)中细胞上清液中HbsAg从给药后的第二天开始，随着培养时间的延长持续稳定的减少，其第8天时细胞上清液中HbsAg为1.12μg/ml。

2、对细胞外HBV DNA的抑制作用

1】、没有任何药物的空白对照组中，细胞上清液中HBV DNA随着培养时间的延长呈持续稳定的增长，到8天为782.5μg/ml。2】、阳性对照组(细胞培养液中含有20mg/ml更昔络韦)中细胞上清液中HBV DNA从给药后的第二天开始，随着培养时间的延长持续稳定的减少，到第8天后相对稳定在一个水平，其第8天时细胞上清液中HBV DNA为436.2μg/ml。3】、试验组A(细胞培养液中含有20mg/ml更昔络韦+10mg/ml甘草甜素)中细胞上清液中HBV DNA从给药后的第二天开始，随着培养时间的延长持续稳定的减少，到第8天后相对稳定在一个水平，其第8天时细胞上清液中HBV DNA为447.8μg/ml。4】、试验组B(细胞培养液中含有20mg/ml更昔络韦+20mg/ml甘草甜素)中细胞上清液中HBV DNA从给药后的第二天开始，随着培养时间的延长持续稳定的减少，其第8天时细胞上清液中HBV DNA为440.1μg/ml。5】、试验组C(细胞培养液中含有20mg/ml更昔络韦+40mg/ml甘草甜素)中细胞上清液中HBV DNA从给药后的第二天开始，随着培养时间的延长持续稳定的减少，其第8天时细胞上清液中HBV DNA为412.2μg/ml。

实例二、更昔络韦甘草甜素复方体内抗病毒活性

采用BALB/c小鼠注射甲基强的松后接种病毒建立巨细胞病毒感染动物模型。按如下给药方式分组：空白对照组(未感染病毒也无任何药物)，模型对照组(标准病毒感染模型组，不给以任何药物)、试验组A(标准病毒感染模型组，并给予60mg/kg/d更昔络韦)，试验组B(标准病毒感染模型组，并给予60mg/kg/d甘草甜素)，试验组C(标准病毒感染模型组，并给予60mg/kg/d更昔络韦+30mg/kg/d甘草甜素)。按如上给药方式，每组10只小鼠，在病毒感染2天后给药，连续14天，每天记录小鼠体重、观察其体毛、食欲、活动变化并记录。完成试验的第14天将小鼠全部处死，眼眶取血，采用AU100自动生化分析仪测定ALT生化指标。

试验结果如下：1】、模型对照组小鼠出现体重不增，毛稀松、生长迟缓、食欲差、活动少等表现。试验组A、B、C各组小鼠一般情况良好，未发现上述异常情况。2】、各组测定血液ALT结果如下表。结果表明更昔络韦和甘草甜素单独使用能够明显降低病毒感染后引起的ALT升高，两者合用后效果更加明显。

表：更昔洛韦和甘草甜素对小鼠的保护作用

分组	剂量	ALT(/U/L)
			空白组		37.9±14.1
模型组		100.5±36.8
			试验组A	60mg/kg/d更昔络韦	68.2±17.6
试验组B	60mg/kg/d甘草甜素	78.9±18.9
			1试验组C	60mg/kg/d更昔络韦+30mg/kg/d甘草甜素	53.2±25.8

Claims (6)

1、药物组合物，含有作为活性成分的更昔络韦，任选地以其一种可药用盐形式，和甘草甜素任选地以其一种可药用盐形式，与一种或多种可药用的赋形剂。

2、根据权利要求1所述药物组合物，用于预防和治疗各种病毒性感染引发的疾病，以及用于炎症治疗、增强免疫功能等。

3、根据权利要求1、2中任一项所述的药物组合物，其特征在于更昔络韦或其可以药用的盐，与甘草甜素或其可以药用的盐的重量比为1∶20-20∶1，优选1∶5-5∶1。

4、根据前述任一项权利要求所述的药物组合物，其特征在于更昔络韦和甘草甜素是各种形式的可药用盐。

5、根据前述任一项权利要求所述的组合物，适宜于口服给药、注射给药、眼用给药、直肠给药、阴道给药和其他形式的外用给药。

6、根据前述任一项权利要求所述的应用，其特征在于药物联合是含有更昔络韦和甘草甜素或其一种可药用盐形式的单位剂量形式，其单位剂量含有10-10000mg的更昔络韦的药物组合。