CN102993210A - 一种吡啶并噻吩的新化合物 - Google Patents

Abstract

一种吡啶并噻吩类新化合物(式I所示)及其盐，实验证明可以用于治疗和预防脑缺血性疾病、改善睡眠。当R₂为H时，可以与无机酸如磷酸、硝酸、硫酸等、有机酸如甲酸、乙酸、丙酸、乙二酸、丙二酸、甘氨酸、缬氨酸、马来酸、富马酸、琥珀酸等生成酯，并进一步与酸或碱基成盐，同样具有治疗和预防缺血性心脑血管疾病和改善睡眠的作用。

Description

一种吡啶并噻吩的新化合物

技术领域：

本发明属于化合物的医药领域，涉及一种吡啶并噻吩的新化合物及其盐，并公开其其制备方法和用途。

背景技术：即为广义的脑梗塞，是指突然发生的脑组织局部供血动脉血流灌注减少或血流完全中断，停止供血、供氧、供糖等，使该局部脑组织崩解破坏。缺血性脑卒中的主要原因为：①动脉粥样硬化所致血栓栓塞；②心脏来源的栓子所致脑栓塞；③各种原因引起的血管炎、血管损伤以及外伤等。缺血性脑卒中一般在夜间睡眠中发病，常为次晨起床时发现肢体无力或偏瘫，多无意识障碍，血压可正常或偏高，可有动脉硬化史。缺血性脑卒中占脑卒中病人总数的60％～70％，主要包括脑血栓形成和脑栓塞。前者由于脑动脉系统中的粥样硬化和血栓形成使动脉管腔狭窄或闭塞导致脑组织局部动脉血流灌注减少或中止所引起的局部脑组织坏死。缺血性脑卒中的治疗药物：第一类是血管扩张药(如潘生丁等)。过去认为只要药物能使脑血管扩张，便可以使血液从堵塞的血管中多流些过去。却发现扩张血管药非但做不到这一点，还会使病变部位的血液反流到健康的脑组织里去(此称为脑内盗血综合征)，所以已不主张用此类药。第二类是改善微循环、扩充血容量的药物(如低分子右旋糖酐等)。目前此类药用得较多，但是有心脏病的病人应慎用，否则可能会引起心力衰竭。第三类是溶解血栓的药物(如尿激酶等)。应用此类药如果能达到溶解栓子的目的是最为理想的，可是全身静脉用药时往往需要大剂量，有时会造成出血的危险性。现在多向病人推荐使用介入治疗，就是通过导管把药物直接注入梗死的部位来溶解栓子，但采取此治疗方法的前后都要做一次脑血管造影，这本身就又有一定的危险性，何况介入治疗要求病人在得病后6小时内进行，有时往往已错过时机。第四类是抗凝治疗(如肝素等)。这类药物能防止血液凝固，但使用时要每天查凝血酶原时间和活动度，条件较差的医院无法进行。此外抗凝治疗也有出血的危险性。第五类是使用钙离子拮抗剂(如尼莫地平等)。这类药物可以防止钙离子从细胞外流入细胞内，起到轻微扩张脑血管，保护脑细胞，增加脑细胞利用氧和葡萄糖等作用。第六类是防止血小板凝聚的药(如阿司匹林等)。血小板的凝聚往往是脑血栓形成的开端，如果能有效地阻断血小板的凝聚，也许能防止血桂进一步形成。目前这类药物在世界上应用得十分广泛，但与其说是作为治疗药物还不如说是作为预防药物更为恰当，因为脑卒中的急性期使用这类药物效果并不理想。

发明内容：

本发明的目的是提供一种用于缺血性脑卒中的吡啶并噻吩的新化合物，及其制备方法和用途。

为了实现上述目的，本发明采用了如下的技术方案：

通过动物试验证明，安慰剂组没有减小大鼠脑缺血梗塞体积的作用，不能改善脑缺血的症状，也不具备改善睡眠的作用，本发明中化合物则具有很好的改善脑缺血症状的作用，并且能够改善动物的睡眠状态。

由于式I化合物为不溶于水的物质，因此我们使之与酸成酯，所述的酸是指药学上可接受的无机酸或有机酸，无机酸是指硝酸、硫酸或磷酸，所述有机酸除酸根外至少还含有氨基、羟基或羧基中的一种基团、至少含有一个。成酯后的盐可以溶于水，能够制备注射液或冻干粉针的剂型。

有机酸可以是氨基酸类，具体可以是指甘氨酸、丙氨酸、赖氨酸、精氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、焦谷氨酸、色氨酸或缬氨酸。

其中优选与甘氨酸成的酯。

有机酸也可以是二元羧酸，具体可以是指樟脑酸、苹果酸、柠檬酸、马来酸、琥珀酸、草酸、戊二酸、乙二酸或丙二酸。

其中优选与琥珀酸生成的酯。

有机酸还可以是指双羟萘酸、羟基萘酸、龙胆酸、水杨酸、羟基乙酸、扁桃酸、乳酸、4-乙酰胺基苯甲酸或烟酸。

式I所示的化合物与无机酸成酯，其中优选磷酸。

以上的酯进一步成盐，则可以制备成溶于水的化合物，可以解决水溶性的问题，用于制备注射剂型。

本发明还提供了式I所示的化合物二元酸酯的盐，是指和钾、钠、镁、或有机胺成的盐，有机胺根可以是氨丁三醇、二乙醇胺、三乙醇胺、甘氨酸、赖氨酸或精氨酸。

式I所示的化合物与磷酸生成的酯，也可以与生理上可接受的碱继续成盐，以解决水溶性，是指钠、钾、镁或有机胺盐，有机胺包括赖氨酸、甘氨酸、精氨酸、氨丁三醇、二乙醇胺或三乙醇胺。

式I所示的化合物与磷酸生成的酯优选成二钠盐。

本发明还提供了用于治疗缺血性脑卒中的药物组合物，其特征是含有治疗有效量的通式(1)化合物或其盐和药学上可接受的载体。可以是口服制剂或注射制剂。

具体实施例：

实施例1：各化合物的制备：

由于本文所述化合物有很强的连贯性，为了详细、准确、方便地描述各化合物制备方法，将其以1个实施例来表达，下述的合成路线各化合物下方表明化合物的序号，为更加简明的阐述，在下面的制备方法中以序号代替：

上述路线图中R为不同基团时得到不同的化合物11a、11b、11c、11b和11e。

(1)、化合物2的合成：

将154克化合物1和220克三乙胺溶于500mL的THF中，在冰浴下滴加142克二氯亚砜，30分钟内滴加完毕，继续反应30分钟，然后把反应液移至室温反应一小时，再回流一小时，自然冷却至室温，在搅拌下分批加入100克盐酸二甲胺，室温反应2小时。停止反应，过滤，向滤液加入200mL水，分层，取上层有机层，水层用100mL二氯甲烷萃取，合并有机相，减压蒸馏除去溶剂得到160克化合物2，产率为88％。MS(m/z)：182.1。

(2)、化合物3的合成：

将90.5克化合物2加入到200mL的四氯化碳中，90克NBS溶于100mL的四氯化碳中，在室温下滴加到反应液中，30分钟内滴加完毕，缓慢升温到80℃，保温反应12小时。停止反应，冷却反应液到室温，过滤，滤饼用四氯化碳洗涤(100mL×3)，合并滤液，减压蒸馏除去溶剂得到102克化合物3，产率为78％。MS(m/z)：261.2。

(3)、化合物8的合成：

127克化合物7与300mL37％甲醛水溶液混合，加入30mL盐酸溶液，加热至70-80℃，反应2小时，将反应液倒入碎冰中，加入饱和碳酸钠溶液调节PH值为7-8，用二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷后用水洗涤3次，干燥，减压蒸馏除去溶剂得到103克化合物8，产率为74％。MS(m/z)：140.2。

(4)、化合物9的合成：

取97.3克化合物8和80克的三乙胺溶于200mL的THF中，向反应液中分批加入168克boc酸酐，反应5小时，停止反应，将反应液倒入冰水中，加入稀盐酸溶液调节PH值为6-7，用二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷后用水洗涤，干燥，减压蒸馏除去溶剂后得到96克油状物，将此油状物复溶于200mL的THF中，在-78℃下搅拌30分钟，然后滴加336.0mL2.5N的正丁基锂正己烷溶液，1小时内滴加完毕，然后滴加86克硼酸三甲酯溶液(溶于100mLTHF)，反应1小时，自然升温到室温，继续反应1小时，然后向反应液滴加100mL30％双氧水，搅拌2小时，将反应液倒入冰水中，分层，水相用二氯甲烷萃取，合并有机相，减压蒸馏除去溶剂得到油状物，将此油状物溶于200mLTHF中，加入96.0克三氟乙酸，在60℃下反应3小时，减压蒸馏除去溶剂，然后用饱和碳酸氢钠溶液调节PH值为7-8，二氯甲烷萃取，干燥，减压蒸馏除去二氯甲烷后得到78.7克化合物9，产率为72％。MS(m/z)：156.2。

(5)、化合物10的合成：

取50克化合物9、84克化合物3和33克碳酸氢钠加入到300mL乙腈中，在80℃下反应6小时，冷却反应液到室温，过滤，滤饼用乙腈洗涤(50mL×3)，合并滤液，减压蒸馏除去溶剂，剩余物用乙酸乙酯/石油醚重结晶，得到71.4克化合物10，产率为67％。HNMR(400Hz，CDCl3)：7.08-7.05(m，1H)，7.03-7.01(m，1H)，6.94-6.91(m，1H)，6.86-6.83(m，1H)，5.82(s，1H)，4.86(s，1H)，3.63(s，2H)，2.93(s，6H)，2.71(t，J＝6.0Hz，2H)，2.62(t，J＝6.0Hz，2H)；MS(m/z)：335.1。

(6)、化合物11a的合成：

20mL吡啶在冰浴下搅拌30分钟，缓慢滴加9.18克三氯氧磷，反应一小时，10.02克化合物10溶于50mLTHF中，缓慢滴加到反应液中，反应30分钟，将反应移至室温，继续搅拌2小时，向反应液中加入100mL水，用10％盐酸溶液调节反应液PH值为4-5，这时有沉淀生成，继续搅拌30分钟，过滤，滤饼用水洗涤至中性，用乙醇/水重结晶后得到11.2克化合物11a，产率为90％。HNMR(400Hz，CDCl₃)：7.08-7.05(m，1H)，7.03-7.01(m，1H)，6.94-6.91(m，1H)，6.86-6.83(m，1H)，5.82(s，1H)，4.86(s，1H)，3.63(s，2H)，2.93(s，6H)，2.71(t，J＝6.0Hz，2H)，2.62(t，J＝6.0Hz，2H)；MS(m/z)：415.1。

(7)、化合物11b的合成：

将10.02克化合物10和4.6克三乙胺溶于100mL的THF中，室温下加入4.6克乙酸酐，反应3小时，将反应液倒入100mL水中，用10％盐酸溶液调节PH值为7-8，分出有机层，水相用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合并有机相，减压蒸馏除去溶剂，乙酸乙酯/石油醚重结晶后得到9.7克化合物11b，产率为86％。HNMR(400Hz，CDCl₃)：7.08-7.05(m，1H)，7.03-7.01(m，1H)，6.94-6.91(m，1H)，6.86-6.83(m，1H)，5.82(s，1H)，4.86(s，1H)，3.63(s，2H)，2.93(s，6H)，2.71(t，J＝6.0Hz，2H)，2.62(t，J＝6.0Hz，2H)，2.06(s，3H)；MS(m/z)：377.1。

(8)、化合物11c的合成：

将10.02克化合物10和7.6克三乙胺溶于100mL的THF中，室温下加入5.5克缬氨酰氯盐酸盐，反应2小时，将反应液倒入100mL水中，用10％盐酸溶液调节PH值为7-8，分出有机层，水相用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合并有机相，减压蒸馏除去溶剂，乙酸乙酯/石油醚重结晶后得到10.4克化合物11c，产率为80％。HNMR(400Hz，CDCl₃)：7.08-7.05(m，1H)，7.03-7.01(m，1H)，6.94-6.91(m，1H)，6.86-6.83(m，1H)，5.82(s，1H)，4.86(s，1H)，3.63(s，2H)，3.43(m，1H)，2.93(s，6H)，2.75(m，1H)，2.71(t，J＝6.0Hz，2H)，2.62(t，J＝6.0Hz，2H)，1.03(s，6H)；MS(m/z)：434.2。

(9)、化合物11d的合成：

将10.02克化合物10和7.6克三乙胺溶于100mL的THF中，室温下加入4.0克甘氨酰氯盐酸盐，反应2小时，将反应液倒入100mL水中，用10％盐酸溶液调节PH值为7-8，分出有机层，水相用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合并有机相，减压蒸馏除去溶剂，乙酸乙酯/石油醚重结晶后得到9.7克化合物11d，产率为83％。HNMR(400Hz，CDCl₃)：7.08-7.05(m，1H)，7.03-7.01(m，1H)，6.94-6.91(m，1H)，6.86-6.83(m，1H)，5.82(s，1H)，4.86(s，1H)，3.63(s，2H)，3.58(s，2H)，2.93(s，6H)，2.71(t，J＝6.0Hz，2H)，2.62(t，J＝6.0Hz，2H)；MS(m/z)：392.2。

(10)、化合物11e的合成：

将10.02克化合物10溶于100mL的THF中，在冰浴下搅拌30分钟，分批少量加入1.8氢化钠(含量60％)，反应液在氮气保护下继续搅拌30分钟，3.6克丁二酸酐溶于30mL的THF中，缓慢滴加到上述反应液中，反应30分钟后在室温下继续反应2小时，向反应液缓慢滴加入50mL乙醚，过滤，滤饼用THF洗涤3次，然后用乙醇重结晶后得到12.1克化合物11e，产率为88％。HNMR(400Hz，CD₃OD)：7.08-7.05(m，1H)，7.03-7.01(m，1H)，6.94-6.91(m，1H)，6.86-6.83(m，1H)，5.82(s，1H)，4.86(s，1H)，3.63(s，2H)，2.93(s，6H)，2.71(t，J＝6.0Hz，2H)，2.62(t，J＝6.0Hz，2H)，2.55(t，J＝6.4Hz，2H)，2.51(t，J＝6.4Hz，2H)；MS(m/z)：456.1。

同理可得到R₁为-Cl、R₂为不同有机酸、无机酸时各化合物。实施例2：对局部脑缺血大鼠脑梗塞体积的影响

(1)实验材料和方法

Wistar大鼠，体重250-280g。手术前后单独饲养，室温保持23-25℃，自有进食和进水。按照longa等的方法制备tMCAO模型。大鼠用10％水合氯醛麻醉(350mg/kg，i.p.)，体温维持在37±0.5℃，仰卧位固定于手术台上。沿颈正中线切开皮肤，仔细分离右侧颈总动脉(CCA)，颈外动脉(ECA)，颈内动脉(ICA)。将ECA结扎剪断，拉直与ICA成一直线。在ECA上剪一小口，将一根长4.0cm，直径0.26mm的圆头硅化尼龙绳(用0.1％多聚赖氨酸包被)由此开口插入ICA约1.85-2.00cm，指大鼠大脑前动脉起始处，阻断大脑中动脉的血流供应。缺血2小时后小心抽出尼龙线，结扎ECA开口并缝合手术切口，动物放回笼中再灌24小时。

(2)实验分组及给药

大鼠随机分12组：模型对照组，注射用水(100ml/kg)，实施例1中的化合物10给药组(25、50、100mg/kg)，实施例中的化合物11a给药组(25、50、100mg/kg)，化合物11b给药组(25、50、100mg/kg)共12组。MCA阻断造成缺血后10分钟时口服给药。

(3)脑梗塞体积的测定

大鼠再灌注损伤24小时后，即刻断头取脑，去除嗅束、小脑和低位脑干，将其冠状切成6片(第一至第五片2mm/片，第六片4mm)，迅速置于5ml含有1.5ml4％TTC及0.1ml1MK₂HPO₄的溶液中染色(37℃，避光)20-30分钟，其间每隔5分钟翻动一次。经TTC染色后，正常组织深染呈红色，梗死组织呈白色。将每组脑片排列整齐，拍照保存。求算每片的梗死面积，并最终叠加换算成梗塞体积。梗塞体积以所占大脑半球的百分率来表示，以消除脑水肿的影响。

脑梗塞体积(％)＝(手术对侧半球体积-手术侧半球未梗塞部分的体积)/手术对侧半球的体积*100％

(4)实验结果

缺血2小时再灌注24小时后，溶剂对照组的脑梗死体积为33.8％。假手术组没有任何脑梗塞出现。其他组脑梗死体积结果如表1所示：

表1：灌胃给药对局部缺血大鼠脑梗塞体积的影响

与溶剂对照组比，化合物10、11a、11b口服给药均可以显著缩小脑梗塞体积。

实施例13：化合物10、化合物11a及11b对大鼠睡眠作用的影响：

(1)改善睡眠作用试验

动物来源：昆明种小白鼠，18-22克，雄性，由广东实验动物中心所提供的清洁级动物。实验动物饲养室温度22±2℃，相对湿度50-70％，动物饲养料，由广东实验动物中心提供。

本实验设化合物10、11a、11b三组，分别为25mg/kg，另设蒸馏水对照组。

样品处理：各取样品25mg分别加蒸馏水至20ml，使成均匀悬液，供试。

给样途径：灌胃

实验方法：

(2)戊巴比妥钠阈上剂量催眠试验：

选用体重18-22g雄性小鼠40只，随机分为四组，每组10只，连续给样30天，于第30天样品灌胃15分钟后，给各组动物50mg/kg.b.w的戊巴比妥钠腹腔注射，注射量为0.2ml/20g.b.w，以小鼠翻正反射消失达1分钟以上作为入睡判断标准，观察给戊巴比妥钠60分钟内各组动物的入睡时间和睡眠时间。

结果：

样品对动物体重的影响

由上表可见，样品各剂量组动物体重与对照组相比，均无显著性差异。

阈上剂量的戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间的影响

*P＜0.05与对照组相比(经方差分析)

由上表可见，化合物10、11a、11b、11c组样品动物在阈上剂量戊巴比妥钠诱导下的入睡时间和睡眠时间与对照组相比，有显著性差异。

(3)戊巴比妥钠阈下剂量催眠试验：

选用体重18-22g雄性小鼠40只，随机分为四组，每组10只，连续给样28天，于第28天样品灌胃15分钟后，给各组动物30mg/kg.b.w的戊巴比妥钠腹腔注射，注射量为0.2ml/20g.b.w，以小鼠翻正反射消失达1分钟以上作为入睡判断标准观察给戊巴比妥钠25分钟内各组动物发生睡眠的动物数。

结果：

阈下剂量的戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠发生率的影响

*P＜0.05与对照组相比(经卡方检验)

由上表可见，化合物8组和DL组在阈下剂量戊巴比妥钠诱导下的入睡动物和睡眠发生率与对照组相比，均有显著性差。

总结：经口给予小鼠样品30天后，化合物10、11a、11b具有改善睡眠作用。

Claims (8)

1.一种具有预防和治疗脑血管缺血性疾病的化合物，如下所示： 

R₁＝F、Cl；R₂＝H 。

2.如权利要求1所述的化合物与酸反应所得的酯，酸选自药学上可接受的无机酸或有机酸，其中无机酸选自硝酸、硫酸或磷酸；有机酸选自甘氨酸、乙酸、缬氨酸、甲酸、丙酸、丁酸、丁二酸、富马酸、苯磺酸、甲磺酸、苯甲酸、苯乙酸、丙氨酸、赖氨酸、精氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、焦谷氨酸、色氨酸或缬氨酸、樟脑酸、苹果酸、柠檬酸、马来酸、琥珀酸、草酸、戊二酸、乙二酸、乳酸或丙二酸；双羟萘酸、羟基萘酸、龙胆酸、水杨酸、羟基乙酸、扁桃酸、乳酸、4-乙酰胺基苯甲酸或烟酸。 

3.根据权利要求2所述的酯，其中：R₁＝F、Cl，R₂＝ 

。

4.根据权利要求1-3所述化合物，与硫酸、磷酸、磺酸、盐酸等无机酸，与甘氨酸、丙氨酸、赖氨酸、精氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、焦谷氨酸、色氨酸或缬氨酸、樟脑酸、苹果酸、柠檬酸、马来酸、琥珀酸、草酸、戊二酸、乙二酸、乳酸或丙二酸；双羟萘酸、羟基萘酸、龙胆酸、水杨酸、羟基乙酸、扁桃酸、乳酸、4-乙酰胺基苯甲酸或烟酸等有机酸反应得到的盐。 

5.式I化合物与二元酸反应得到的酯再与钠、钾、镁、氨丁三醇、二乙醇胺、 三乙醇胺、甘氨酸、赖氨酸或精氨酸反应，得到的盐。 

6.式I化合物与磷酸、琥珀酸、富马酸、丙二酸、丁二酸、草酸反应得到的酯再与钠、钾、镁、赖氨酸、甘氨酸、精氨酸、氨丁三醇、二乙醇胺或三乙醇胺、二乙胺、三乙胺反应，得到的盐。 

7.权利要求1-6所述化合物在制备治疗脑缺血性疾病药物中的应用。 

8.权利要求1-6所述化合物在制备改善睡眠药物中的应用。