WO2026014458A1 - エレクトロポレーション方法、有用物質の製造方法及びエレクトロポレーション装置 - Google Patents

Abstract

懸濁液への電界の印加を適正に実施できるエレクトロポレーション方法、有用物質の製造方法及びエレクトロポレーション装置を提供する。電極対の間を生体由来物と生体活性物質とを含有する懸濁液と、シース液とを、シース液で懸濁液を挟むようにして主流路に連続的に送液し、電極対によって懸濁液に電界を印加することで、生体由来物に生体活性物質を導入する、エレクトロポレーション方法であって、電極対の間において懸濁液及びシース液の流れが安定した後に、懸濁液に電界を印加する印加工程を有する、エレクトロポレーション方法である。

Description

エレクトロポレーション方法、有用物質の製造方法及びエレクトロポレーション装置

　本発明は、シース液で、生体由来物と生体活性物質とを含有する懸濁液を挟むようにして、電極対の間に連続的に送液するエレクトロポレーション方法、有用物質の製造方法及びエレクトロポレーション装置に関し、特に、電極対の間において懸濁液及びシース液の流れが安定した後に、懸濁液に電界を印加するエレクトロポレーション方法、有用物質の製造方法及びエレクトロポレーション装置に関する。

　電気穿孔法は、電気パルスにより細胞膜に孔をあけることにより細胞内に物質を導入する手法であり、エレクトロポレーションとも呼ばれる。例えば、細胞懸濁液に電極対によって電界を印加することで細胞膜に微小な孔を開け、ＤＮＡ（Deoxyribonucleic acid）を細胞内部に導入することで、細胞の形質転換を行うことが可能である。
　なお、以下、エレクトロポレーションのことを、ＥＰと略すことがある。

　電気穿孔法を用いて、細胞、細胞誘導体、細胞小器官、細胞内顆粒及び小胞等の生体由来物に、ＤＮＡ、ＲＮＡ（Ribonucleic acid）及びタンパク質等の生体活性物質を導入するＥＰとして、バッチ式が広く用いられている。
　バッチ式においては、例えば、内面に電極対が設置された容器に、生体由来物及び生体活性物質を含む懸濁液が収容され、電極対によって電界が印加される。これにより生体由来物の表面を覆う膜に微小な孔が開き、膜の透過性が高くなる。また、ここで、生体活性物質が拡散や電気泳動により透過性が高まった膜を通過することで、生体活性物質が生体由来物へ導入される。

　一方、例えば、特許文献１及び２に示されるように、電極対が設置された流路中に、生体由来物及び生体活性物質を含む懸濁液を流通させるフロー式のエレクトロポレーションも開発されている。

特開２００７－７４３０号公報 米国特許第１１２２５６３８号明細書

　特許文献１及び２では、懸濁液にＥＰを実施する際に、対向する２つの電極に、所定の電界強度となるように電気パルスが加えられる。懸濁液を送液しながらＥＰを実施するフロー式のエレクトロポレーションでは、懸濁液の流れが安定な状態ではないと導入効率が低下する場合があり、生産性が低い。
　本発明の目的は、生産性が高いフロー式のＥＰを行うことができるＥＰ方法、有用物質の製造方法及びＥＰ装置を提供することにある。

　以下の構成により、上述の目的を達成することができる。
　発明［１］は、電極対の間を生体由来物と生体活性物質とを含有する懸濁液と、シース液とを、シース液で懸濁液を挟むようにして主流路に連続的に送液し、電極対によって懸濁液に電界を印加することで、生体由来物に生体活性物質を導入する、ＥＰ方法であって、電極対の間において懸濁液及びシース液の流れが安定した後に、懸濁液に電界を印加する印加工程を有する、ＥＰ方法である。
　発明［２］は、懸濁液を挟むようにシース液を主流路に送液する際に、懸濁液の供給に第１チューブが用いられ、シース液の供給に第２チューブが用いられ、第１チューブにおいて懸濁液の先頭の待機位置が予め定められ、第２チューブにおいてシース液の先頭の待機位置が予め定められており、懸濁液及びシース液の全ての先頭が、待機位置に到達した後に、懸濁液及びシース液の送液を開始する、発明［１］に記載のＥＰ方法である。

　発明［３］は、印加工程の前に、電極対の間において懸濁液及びシース液の流れの安定を判定する判定工程を有し、判定工程は、電極対の間における懸濁液及びシース液の流れの電気抵抗を測定して、電気抵抗に基づいて、流れの安定を判定するか、又は、判定工程は、第１チューブの懸濁液の流量及び第２チューブのシース液の流量の安定性を検出して流れの安定を判定する、発明［１］又は［２］に記載のＥＰ方法である。
　発明［４］は、判定工程は、電極対の主流路における上流側又は下流側において、電極対の間における懸濁液及びシース液の流れの電気抵抗を測定して、電気抵抗に基づいて、流れの安定を判定する、発明［３］に記載のＥＰ方法である。

　発明［５］は、懸濁液及びシース液を送液するタイミングは、懸濁液とシース液とで同時である、発明［１］～［４］のいずれか１つに記載のＥＰ方法である。
　発明［６］は、懸濁液及びシース液を送液するタイミングは、懸濁液よりもシース液の方が先である、発明［１］～［４］のいずれか１つに記載のＥＰ方法である。

　発明［７］は、電極対の間を生体由来物と生体活性物質とを含有する懸濁液と、シース液とを、シース液で懸濁液を挟むようにして主流路に連続的に送液し、電極対によって懸濁液に電界を印加することで、生体由来物に生体活性物質を導入する、ＥＰ方法であって、懸濁液を挟むようにシース液を主流路に送液する際に、懸濁液の供給に第１チューブが用いられ、シース液の供給に第２チューブが用いられ、第１チューブにおいて懸濁液の先頭の待機位置が予め定められ、第２チューブにおいてシース液の先頭の待機位置が予め定められており、懸濁液及びシース液の全ての先頭が、待機位置に到達したことを検知した後に、懸濁液及びシース液の送液を開始し、懸濁液及びシース液の送液後、電極対の間において懸濁液及びシース液の流れが安定した後に、懸濁液に電界を印加する、ＥＰ方法である。
　発明［８］は、印加工程では、懸濁液及びシース液の送液を開始後、予め設定した時間経過後に、懸濁液に電界を印加する、発明［１］～［７］のいずれか１つに記載のＥＰ方法である。
　発明［９］は、第１チューブにおける懸濁液の先頭の位置は、超音波センサで検知される、発明［７］に記載のＥＰ方法である。
　発明［１０］は、発明［１］～［９］のいずれか１つに記載のＥＰ方法を含む、有用物質の製造方法である。

　発明［１１］は、生体由来物と生体活性物質とを含有する懸濁液を連続的に送液して電界を印加することで、生体由来物に生体活性物質を導入する、ＥＰ装置であって、主流路と、対向して配置された電極を備え、主流路を流れる懸濁液に電界を印加する電極対と、主流路に懸濁液を供給する懸濁液供給口と、主流路内の懸濁液供給口の下流側に設けられ、主流路にシース液を供給するシース液供給口と、懸濁液及びシース液を送液するポンプと、電極対の間において懸濁液及びシース液の流れが安定した後に、懸濁液に電界を印加する電源部とを有する、ＥＰ装置である。
　発明［１２］は、シース液供給口と連通され、主流路において懸濁液にシース流を合流させるシース液流路と、懸濁液供給口に接続され、懸濁液を主流路に供給するための第１チューブと、シース液供給口に接続され、シース液を主流路内に供給するための第２チューブとを有し、第１チューブにおいて懸濁液の先頭の待機位置が予め定められ、第２チューブにおいてシース液の先頭の待機位置が予め定められており、ポンプにより、懸濁液及びシース液の全ての先頭が、待機位置に到達した後に、懸濁液及びシース液の送液を開始させる制御部を更に有する、発明［１１］に記載のＥＰ装置である。
　発明［１３］は、電極対の間において懸濁液及びシース液の流れの安定を判定する判定部を有し、判定部は、電極対の間における懸濁液及びシース液の流れの電気抵抗を測定して、電気抵抗に基づいて、流れの安定を判定するか、又は、判定部は、第１チューブの懸濁液の流量及び第２チューブのシース液の流量の安定性を検出して流れの安定を判定する、発明［１２］に記載のＥＰ装置である。
　発明［１４］は、電極対の主流路における上流側又は下流側に設けられた補助電極を有し、判定部は、補助電極を用いて懸濁液及びシース液の流れの厚み方向の電気抵抗を測定して、電気抵抗に基づいて、流れの安定を判定する、発明［１３］に記載のＥＰ装置である。

　発明［１５］は、第１チューブにおける懸濁液の先頭の位置、及び第２チューブにおけるシース液の先頭の位置を検知するセンサを有し、制御部は、センサにより検知された、第１チューブにおける懸濁液の先頭の位置、及び第２チューブにおけるシース液の先頭の位置に基づいて、ポンプによる懸濁液及びシース液の送液を制御する、発明［１２］～［１４］のいずれか１つに記載のＥＰ装置である。

　発明［１６］は、生体由来物と生体活性物質とを含有する懸濁液を連続的に送液して電界を印加することで、生体由来物に生体活性物質を導入する、ＥＰ装置であって、主流路と、対向して配置された電極を備え、主流路を流れる懸濁液に電界を印加する電極対と、懸濁液に電界を印加する電源部と、主流路に懸濁液を供給する懸濁液供給口と、主流路内の懸濁液供給口の下流側に設けられ、主流路にシース液を供給するシース液供給口と、懸濁液及びシース液を送液するポンプと、懸濁液供給口に接続され、懸濁液を主流路に供給するための第１チューブと、シース液供給口に接続され、シース液を主流路内に供給するための第２チューブと、第１チューブにおける懸濁液の先頭の位置、及び第２チューブにおけるシース液の先頭の位置を検知するセンサと、ポンプによる懸濁液及びシース液の送液を制御する制御部とを有し、第１チューブにおいて懸濁液の先頭の待機位置が予め定められ、第２チューブにおいてシース液の先頭の待機位置が予め定められており、制御部は、センサにより懸濁液及びシース液の全ての先頭が、待機位置に到達したことが検知された後に、ポンプにより懸濁液及びシース液の送液を開始させ、懸濁液及びシース液の送液後、電極対の間において懸濁液及びシース液の流れが安定した後に、電源部により懸濁液に電界を印加する、ＥＰ装置である。
　発明［１７］は、制御部は、ポンプにより懸濁液及びシース液の送液を開始し、予め設定した時間経過後に、電源部により懸濁液に電界を印加する、発明［１２］～［１６］のいずれか１つに記載のＥＰ装置である。
　発明［１８］は、第１チューブにおける懸濁液の先頭の位置を検知するセンサは、超音波センサである、発明［１５］又は［１６］に記載のＥＰ装置である。

　本発明によれば、生産性が高いフロー式のエレクトロポレーションを行うことができるエレクトロポレーション方法、有用物質の製造方法及びエレクトロポレーション装置を提供できる。

本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置を有するエレクトロポレーションシステムの一例を示す模式図である。 本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置の流路デバイスの第１の例を示す模式的断面図である。 本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置の第１の例の流路デバイスの作用を説明するための模式的断面図である。 本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置の第１の例の流路デバイスの電極対の間における懸濁液及びシース液の流れの安定を示す模式的断面図である。 本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置の第１の例の流路デバイスの電極対の間における懸濁液及びシース液の流れの不安定の一例を示す模式的断面図である。 本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置の第１の例の流路デバイスの電極対の間における懸濁液及びシース液の流れの不安定の他の例を示す模式的断面図である。 本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置の第１の例の流路デバイスの電極対の間における懸濁液及びシース液の流れの安定を説明するグラフである。 本発明の実施形態のエレクトロポレーション方法の第１の例を示すフローチャートである。 本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置の流路デバイスの第２の例を示す模式的断面図である。

　以下に、添付の図面に示す好適実施形態に基づいて、本発明のエレクトロポレーション方法、有用物質の製造方法及びエレクトロポレーション装置を詳細に説明する。
　なお、以下に説明する図は、本発明を説明するための例示的なものであり、本発明を説明するために簡略化等をしており、以下に示す図に本発明が限定されるものではない。
　以下において数値範囲を示す「～」とは両側に記載された数値を含む。例えば、εが数値ε_α～数値ε_βとは、εの範囲は数値ε_αと数値ε_βを含む範囲であり、数学記号で示せばε_α≦ε≦ε_βである。
　また、特定の角度、平行及び直交並びに鉛直等について、特に記載がなければ、該当する技術分野で一般的に許容される誤差範囲を含む。更に、長さ、幅、及び厚さ等に関し、特に記載がなければ、該当する技術分野で一般的に許容される誤差範囲を含む。また、温度、流量、電気伝導度、導電率及び体積分率等に関し、特に記載がなければ、該当する技術分野で一般的に許容される誤差範囲を含む。

（エレクトロポレーション装置の第１の例）
　図１は本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置（ＥＰ装置）を有するエレクトロポレーションシステムの一例を示す模式図である。図２は本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置の流路デバイスの第１の例を示す模式的断面図である。図３は本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置の第１の例の流路デバイスの作用を説明するための模式的断面図である。図２は図１のＡ－Ａ線による模式的断面図である。
　図１及び図２に示すＥＰ装置１０は、対向して配置された電極を備える電極対３４の間を生体由来物と生体活性物質とを含有する懸濁液Ｑ（図３参照）と、シース液ｓ（図３参照）とを、シース液ｓで懸濁液Ｑを挟むようにして主流路３０に連続的に送液し、電極対３４によって懸濁液Ｑに電界を印加することで、生体由来物に生体活性物質を導入するエレクトロポレーションを実施する装置である。
　エレクトロポレーション装置１０は、図３に示すように懸濁液Ｑとシース液ｓを用いるフロー式のＥＰ装置であり、シース液ｓで懸濁液Ｑを挟むようにして電極対３４の間に連続的に送液してＥＰを実施する。
　電極対３４の間に、懸濁液Ｑ及びシース液ｓを、シース液ｓで懸濁液Ｑを挟んで連続的に送液してＥＰを実施することを連続エレクトロポレーションともいう。シース液ｓで懸濁液Ｑを挟むようにして送液しており、２つのシース液ｓの流れ、すなわち、２つのシース液流を有する。シース液流、懸濁液流及びシース液流の３層の積層流れとなる。

　ＥＰ装置１０は、図１、２に示すように流路デバイス１１と、流路デバイス１１に懸濁液Ｑを供給するポンプ１２ａ、１２ｂと、ＥＰを実施する電源部１４と、制御部１６と、判定部１８とを有する。更に、流路デバイス１１にシース液ｓを供給するポンプ２０ａ、２０ｂと、シース液ｓを貯留するタンク２２とを有する。
　また、ＥＰ装置１０のポンプ１２ａは、例えば、懸濁液の供給部である培養装置２４に、配管１５により接続されている。混合器２５と培養装置２４との間にポンプ１２ａが設けられている。培養装置２４は、ＥＰ装置１０を構成するものではない。
　また、生体活性物質を貯留するタンク２３及び混合器２５もＥＰ装置１０を構成するものではない。懸濁液の供給部としては、図１では培養装置２４を示しているが、培養装置２４から取り出された懸濁液を貯留するタンクでもよい。
　また、流路デバイス１１は、流路デバイス１１から外部に排出された懸濁液Ｑ及びシース液ｓ等の液体を貯留する廃棄槽２６及び容器２７と第３チューブ２８により接続されている。第３チューブ２８にバルブ２９が設けられている。第３チューブ２８は、流路デバイス１１から外部に排出された懸濁液Ｑ及びシース液ｓ等の液体の流路を構成する。バルブ２９は送液先を廃棄槽２６又は容器２７に切り替える。流路デバイス１１から外部に排出された液体は、第３チューブ２８を通過し、バルブ２９により廃棄槽２６又は容器２７に送液される。
　なお、廃棄槽２６、容器２７及びバルブ２９は、ＥＰ装置１０を構成するものではない。
　ＥＰ装置１０に、培養装置２４、後述のタンク２３及び混合器２５、並びに廃棄槽２６、容器２７及びバルブ２９を含めてエレクトロポレーションシステム４０ともいう。

　流路デバイス１１は、図１及び図２に示すように主流路３０を有する。主流路３０は直線状の流路である。また、主流路３０は、延在方向Ｄ_Ｌと直交方向における断面の形状が、例えば、内角が全て９０°の四角形である。主流路３０の上述の断面の形状は、内角が全て９０°の四角形に限定されるものではない。
　図２に示すように主流路３０の一方の端３０ａに、懸濁液Ｑを主流路３０に供給するための流入口３１が、例えば、流路デバイス１１の表面１１ａに設けられている。主流路３０の他方の端３０ｂに、懸濁液Ｑ及びシース液ｓ等の液体を外部に排出するための排出口３２が、例えば、流路デバイス１１の裏面１１ｂに設けられている。主流路３０において、流入口３１側が上流側であり、排出口３２側が下流側である。
　さらに、図２に示すように、主流路３０の一方の端３０ａに、シース液ｓを主流路３０に供給するための第１流入口３１ａが、例えば、流路デバイス１１の表面１１ａに設けられている。シース液ｓを主流路３０に供給するための第２流入口３１ｂが、例えば、流路デバイス１１の裏面１１ｂに設けられている。例えば、第１流入口３１ａと第２流入口３１ｂとは延在方向Ｄ_Ｌにおける位置が同じである。

　流入口３１に第１チューブ１３が接続されている。流入口３１に接続された第１チューブ１３及び配管１５を介して、流入口３１にポンプ１２ａが接続されている。第１チューブ１３は、懸濁液Ｑを挟むようにシース液ｓを主流路３０に送液する際に、懸濁液Ｑの供給に用いられるものである。
　第１チューブ１３及びポンプ１２ａの構成は、特に限定されるものではなく、懸濁液Ｑの粘度、懸濁液Ｑの送液量等により、当該技術分野において公知なもの等を適宜利用可能である。第１チューブ１３は、例えば、シリコンチューブのような可撓性を有するものでもよい。

　第１流入口３１ａに第２チューブ２１ａが接続されている。第１流入口３１ａに接続された第２チューブ２１ａを介して、第１流入口３１ａにポンプ２０ａが接続されている。ポンプ２０ａに配管２１ｃを介してタンク２２が接続されている。
　第２流入口３１ｂに第２チューブ２１ｂが接続されている。第２流入口３１ｂに接続された第２チューブ２１ｂを介して、第２流入口３１ｂにポンプ２０ｂが接続されている。ポンプ２０ｂに配管２１ｄを介してタンク２２が接続されている。
　シース液ｓを供給する第１流入口３１ａと第２流入口３１ｂがあるため、第２チューブ２１ａ、２１ｂが２つある。２つの第２チューブ２１ａ、２１ｂは、それぞれ懸濁液Ｑを挟むようにシース液ｓを主流路３０に送液する際に、シース液ｓの供給に用いられるものである。
　第２チューブ２１ａ、２１ｂ及びポンプ２０ａ、３３ｂの構成は、特に限定されるものではなく、シース液ｓの粘度、シース液ｓの送液量等により、当該技術分野において公知なもの等を適宜利用可能である。第２チューブ２１ａ、２１ｂは、例えば、シリコンチューブのような可撓性を有するものでもよい。

　ポンプ２０ａとポンプ２０ｂを設ける構成としたが、これに限定されるものではなく、第１流入口３１ａ及び第２流入口３１ｂに対して、ポンプを１つ設ける構成でもよい。すなわち、シース液ｓを１つのポンプで流路デバイス１１に供給するようにしてもよい。
　タンク２２は、シース液ｓを貯留するものである。タンク２２はシース液ｓを貯留することができれば、その構成は、特に限定されるものではない。
　上述のように流入口３１を流路デバイス１１の表面１１ａに設け、排出口３２を流路デバイス１１の裏面１１ｂに設ける構成としたが、これに限定されるものではない。例えば、流入口３１及び排出口３２を、いずれか一方を流路デバイス１１の表面１１ａに設け、他方を裏面１１ｂに設ける構成としてもよい。

　図２に示す流路デバイス１１は、水平面Ｈｐに対して、例えば、直線状の主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌが直交するように配置されており、主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌは鉛直方向ｚと平行である。主流路３０の幅方向は、鉛直方向ｚと直交する方向ｘと平行な方向であり、主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌと直交する方向でもある。
　上述の水平面Ｈｐに対して、例えば、直線状の主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌが直交するとは、水平面Ｈｐに対する主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌの角度が９０°であるが、９０°に対して±１０°許容する。
　このため、水平面Ｈｐに対する主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌの角度が９０°の場合、主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌは鉛直方向ｚと平行であるが、主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌは鉛直方向ｚに対して、±１０°の傾きを許容する。
　主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌが、主流路３０内を懸濁液Ｑが流れる方向Ｄｆである。エレクトロポレーション装置１０において、電極対の間における懸濁液Ｑの送液方向Ｄｄは、鉛直方向の下方から上方に向かう方向である。主流路３０内を懸濁液Ｑが、鉛直方向の下方から上方に向かう方向に流れる。
　懸濁液Ｑは、流入口３１から供給されて、主流路３０を図２に示す方向Ｄｆに沿って流れて排出口３２から排出される。
　シース液ｓは、第１流入口３１ａと第２流入口３１ｂから供給されて、主流路３０を図２に示す方向Ｄｆに沿って流れて排出口３２から排出される。
　図１及び図２に示す方向Ｄｆは、主流路３０の上流から下流に向かう方向でもある。

　培養装置２４は、生体由来物と培地を含む培養液（図示せず）を得るものである。培養装置２４は、例えば、細胞培養により、培地を含む培養液を得る。

　混合器２５にタンク２３が接続されている。混合器２５とタンク２３との間にポンプ１２ｂが設けられている。
　タンク２３に生体活性物質が、例えば、液体に分散した状態で貯留されている。タンク２３は生体活性物質を貯留することができれば、その構成は、特に限定されるものではない。
　混合器２５は、培養液と生体活性物質とを混合するものである。培養液と生体活性物質とが混合されたものを懸濁液Ｑといい、懸濁液Ｑは培地を含む。
　ポンプ１２ａを用いて培養装置２４内の培養液を吸引し、ポンプ１２ｂを用いてタンク２３内の生体活性物質を吸引することにより、培養液の培地をエレクトロポレーション（ＥＰ）用バッファーと交換することなく、混合器２５で培養装置２４の培養液と、タンク２３の生体活性物質とが混合され、懸濁液Ｑとなる。
　混合器２５は、培養液と生体活性物質とを混合することができれば、その構成は、特に限定されるものではなく、公知のものを利用可能である。
　懸濁液Ｑがポンプ１２ａ、１２ｂにより、第１チューブ１３及び流入口３１を通り、主流路３０に供給される。このように培養液の培地を交換せずに、培地を含む懸濁液Ｑが主流路３０に供給される。懸濁液Ｑは、電極対３４の間を鉛直方向の下方から上方に向かう方向に送液される。

　なお、培養装置２４は必ずしも必要ではない。培養装置２４に換えて、例えば、懸濁液Ｑが貯留されたタンク（図示せず）としてもよい。この場合、タンクがポンプ１２ａに接続される。
　上述のポンプ１２ａ、１２ｂは、培養装置２４等の懸濁液の供給部から懸濁液を送液するポンプである。このようなポンプ１２ａ、１２ｂは特に限定されるものではなく、公知のものを適宜利用可能であるが、シリンジポンプ等が挙げられる。

　排出口３２に第３チューブ２８が接続されている。第３チューブ２８は、例えば、シリコンチューブのような可撓性を有するものでもよい。
　廃棄槽２６は、流路デバイス１１から外部に排出された懸濁液Ｑ及びシース液ｓ等の液体のうち、後培養に適さないもの等を貯留する。
　容器２７は、流路デバイス１１から外部に排出された懸濁液Ｑ及びシース液ｓ等の液体のうち、後培養に利用するものを貯留する。
　廃棄槽２６及び容器２７は、いずれも流路デバイス１１から外部に排出された懸濁液Ｑ及びシース液ｓ等の液体を貯留することができれば、その構成は、特に限定されるものではない。
　廃棄槽２６には、例えば、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液開始から電界印加迄に、排出口３２から排出された懸濁液Ｑ及びシース液ｓが送液されて貯留される。
　容器２７には、例えば、懸濁液Ｑへの電界印加後、予め設定された時間経過後、エレクトロポレーションされた懸濁液Ｑが送液されて貯留される。
　バルブ２９は、送液先を廃棄槽２６又は容器２７に切り替えることができれば、その構成は特に限定されるものではなく、公知のバルブを適宜利用可能である。また、バルブ２９は制御部１６により制御可能なものでもよく、この場合、制御部１６により送液先が廃棄槽２６又は容器２７に切り替えられる。

　主流路３０において、図３に示すように懸濁液流とシース液流とが合流する合流部５９の下流側に、電極対３４が設けられている。電極対３４は、対向して配置された電極を備え、主流路３０を流れる懸濁液Ｑに電界を印加する。
　懸濁液Ｑに電界を印加する電極対３４は、対向して配置された第１電極３５と、第２電極３６とを有する。第１電極３５は電極面３５ａを有し、電極面３５ａは平面である。第２電極３６は電極面３６ａを有し、電極面３６ａは平面である。第１電極３５の電極面３５ａと、第２電極３６の電極面３６ａとは対向し、かつ平行に配置されている。
　第１電極３５の電極面３５ａと、第２電極３６の電極面３６ａとは、それぞれ主流路３０の内面３０ｃに面して配置されている。第１電極３５の電極面３５ａと、第２電極３６の電極面３６ａとは、それぞれ主流路３０の内面３０ｃを構成しており、例えば、エレクトロポレーションを実施する際に、主流路３０に懸濁液Ｑとシース液ｓとが供給されると、シース液ｓと接する。
　電極対３４を構成する第１電極３５の電極面３５ａと、第２電極３６の電極面３６ａとの対向している間の空間３７が、電極対３４の間である。

　電極対３４の第１電極３５と第２電極３６とは、図２に示すように電源部１４に電気的に接続されている。電源部１４により電極対３４に電圧が印加される。すなわち、電源部１４により、対向する第１電極３５と第２電極３６とに電圧が印加される。
　電源部１４は、例えば、電極対３４に、パルス電圧を印加し、パルス幅及びパルス周期を調整できるものであれば、その構成は、特に限定されるものではない。電源部１４には、例えば、パルス電源が用いられる。
　また、判定部１８は、電極対３４の間において懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの安定を判定する。判定部１８は、流れが安定した情報を含む判定信号を制御部１６に出力し、制御部１６は判定信号を受信する。制御部１６は、受信した判定信号に基づいて、電源部１４により懸濁液Ｑに電界を印加する等の各部を制御する。電極対３４の間における懸濁液及びシース液の流れの安定の判定について後に説明する。

　例えば、第１チューブ１３の流入口３１の近傍にセンサ３８が設けられている。また、例えば、第２チューブ２１ａの第１流入口３１ａの近傍にセンサ３９ａが設けられており、第２チューブ２１ｂの第２流入口３１ｂの近傍にセンサ３９ｂが設けられている。
　流入口３１の近傍とは、流入口３１から１０ｃｍ以内の範囲であり、好ましくは５ｃｍ以内の範囲である。
　第１流入口３１ａの近傍とは、第１流入口３１ａから１０ｃｍ以内の範囲であり、好ましくは５ｃｍ以内の範囲である。
　第２流入口３１ｂの近傍とは、第２流入口３１ｂから１０ｃｍ以内の範囲であり、好ましくは５ｃｍ以内の範囲である。

　懸濁液Ｑの先頭の位置とは、第１チューブ１３において懸濁液Ｑの流路デバイス１１に最も近い位置の液面のことである。
　シース液ｓの先頭の位置とは、第２チューブ２１ａにおいてシース液ｓの流路デバイス１１に最も近い位置の液面のことであり、第２チューブ２１ｂにおいてシース液ｓの流路デバイス１１に最も近い位置の液面のことである。
　センサ３８は第１チューブ１３における懸濁液Ｑの先頭の位置を検知するものである。センサ３８は、例えば、超音波センサが用いられる。
　超音波センサでは、超音波は気体よりも液体及び固体中を伝搬しやすい性質があるため、生体由来物を用いる場合には誤検知されることが少ない。また、上述のように超音波は気体よりも液体及び固体中を伝搬しやすい性質があるため、懸濁液Ｑの生体由来物の濃度が高い場合であっても、検知精度の低下が抑制される。このようなことから、懸濁液Ｑを検知に用いるセンサ３８は、超音波センサであることが好ましい。
　センサ３９ａ、３９ｂは、第２チューブ２１ａ、２１ｂにおけるシース液ｓの先頭の位置を検知するものである。センサ３９ａ、３９ｂは、第２チューブ２１ａ、２１ｂにおけるシース液ｓの先頭の位置を検知できれば、その構成は、特に限定されるものではない。
　また、センサ３８は、第１チューブ１３において懸濁液Ｑの先頭を検知した場合、制御部１６に検知信号を送信することが好ましい。センサ３９ａ、３９ｂは、第２チューブ２１ａ、２１ｂにおいてシース液ｓの先頭を検知した場合、制御部１６に検知信号を送信することが好ましい。制御部１６は、上述のセンサ３８、センサ３９ａ及びセンサ３９ｂからの検知信号を受信する。

　エレクトロポレーション装置１０では、第１チューブ１３において懸濁液Ｑの先頭の待機位置が予め定められており、第２チューブ２１ａ、２１ｂおいてシース液ｓの先頭の待機位置が予め定められている。このため、センサ３８を、第１チューブ１３における懸濁液Ｑの先頭の予め定められた待機位置に配置することが好ましい。上述の第１チューブ１３の待機位置は、例えば、第１チューブ１３の流入口３１の近傍である。
　また、センサ３９ａ、３９ｂを、第２チューブ２１ａ、２１ｂおけるシース液ｓの先頭の予め定められた待機位置に配置することが好ましい。上述の第２チューブ２１ａの待機位置は、例えば、第２チューブ２１ａの第１流入口３１ａの近傍である。上述の第２チューブ２１ｂの待機位置は、例えば、第２チューブ２１ｂの第２流入口３１ｂの近傍である。

　ＥＰ装置１０の制御部１６は、ポンプ１２と電源部１４と、判定部１８と、ポンプ２０ａ、２０ｂと、センサ３８、３９ａ、３９ｂとに接続されている。制御部１６によりポンプ１２ａ、１２ｂ及びポンプ２０ａ、２０ｂの動作が制御され、懸濁液Ｑとシース液ｓの送液の開始のタイミングと、懸濁液Ｑとシース液ｓの送液の停止のタイミングが制御される。
　また、制御部１６により、電源部１４が電極対３４に印加する電圧の大きさ、パルス幅及びパルス周期が調整される。また、制御部１６は、ポンプ１２ａ、１２ｂ及びポンプ２０ａ、２０ｂの動作のタイミング、すなわち、懸濁液Ｑとシース液ｓの送液のタイミングと、電源部１４の電極対３４への電圧の印加のタイミングを調整する。
　制御部１６は、判定部１８による電極対３４の間における懸濁液及びシース液の流れの安定の判定に基づいて、ポンプ１２ａ、１２ｂ及びポンプ２０ａ、２０ｂの動作のタイミング、すなわち、懸濁液Ｑとシース液ｓの送液のタイミングと、電源部１４の電極対３４への電圧の印加のタイミングを調整することもできる。
　また、制御部１６及び判定部１８は、時間を計測する機能を有し、例えば、時間を計測するクロック（図示せず）を有する。制御部１６は、クロックにより、ポンプ１２ａ、１２ｂ、２０ａ、２０ｂの動作のタイミングを調整でき、決まった時間差で、ポンプ１２ａ、１２ｂ、２０ａ、２０ｂを動作させることができる。これにより、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液のタイミングを制御できる。
　また、判定部１８は、クロックにより、電極対の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した状態を判定できる。

　なお、制御部１６及び判定部１８は、例えば、プログラムが実行されることで機能するコンピュータによって構成されてもよいし、専用回路で構成された専用装置であってもよい。制御部１６及び判定部１８は、流路デバイス１１とは別に、例えば、クラウド上に設けられた仮想的な構成とすることもでき、例えば、クラウド上で実行されるようにサーバーで構成してもよい。
　制御部１６及び判定部１８を上述のように仮想的な構成とする場合、制御部１６はポンプ１２ａ、１２ｂ及びポンプ２０ａ、２０ｂ並びに電源部１４と、インターネット又はＬＡＮ（local area network）等を介して接続される。
　上述のコンピュータ、専用装置及びサーバーは、例えば、プロセッサを有する。プロセッサは、１又は複数のハードウェアによって構成してもよく、ハードウェアの種類は限定されない。例えば、プロセッサは、ＣＰＵ（Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　Ｕｎｉｔ）、ＭＰＵ（Ｍｉｃｒｏ　Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　Ｕｎｉｔ）、ＦＰＧＡ（Ｆｉｅｌｄ　Ｐｒｏｇｒａｍｍａｂｌｅ　Ｇａｔｅ　Ａｒｒａｙ）等のプログラマブルロジックデバイス、ＡＳＩＣ（Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　Ｓｐｅｃｉｆｉｃ　Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ　Ｃｉｒｃｕｉｔ）等の特定の処理を実行させるための専用回路、ＧＰＵ（Ｇｒａｐｈｉｃ　Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　Ｕｎｉｔ）、又はＮＰＵ（ Ｎｅｕｒａｌ　Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ　Ｕｎｉｔ）等のハードウェアによって構成され得る。また、プロセッサは、本実施形態における各種の処理を実行する各部（Ｕｎｉｔ）、又は各手段（Ｍｅａｎｓ)を有している。また、ハードウェアの種類は、異なる種類のハードウェアを組み合わせたものであってもよい。複数のハードウェアが、あるプロセッサの１または複数の処理を実行するように構成される場合、当該複数のハードウェアは互いに物理的に離れた装置内に存在していてもよく、同じ装置内に存在していてもよい。また、いずれの実施形態においても、プロセッサによる各処理の順序は上記した順序に限定されるものではなく、適宜変更してもよい。なおハードウェアは半導体素子等の回路素子を組み合わせた電気回路（ｃｉｒｃｕｉｔｒｙ）等により構成される。

　ＥＰ装置１０において、流路デバイス１１は、例えば、図２に示すように、第１基板５２と、第２基板５４と、第１導入部５６と、第２導入部５８と、第１基板５２及び第２基板５４の間に設けられる流路基板５５とを有して構成される。第１導入部５６、第１基板５２、流路基板５５、第２基板５４、及び第２導入部５８の順で積層されている。
　第１基板５２に第１電極３５が、第２基板５４に第２電極３６が、それぞれ組み込まれ、電極対３４を構成する。上述のように第１電極３５の電極面３５ａと、第２電極３６の電極面３６ａとは、それぞれ主流路３０の内面３０ｃを構成している。
　上述のように、流路デバイス１１は、懸濁液Ｑを供給する流入口３１、主流路３０、フロー式のＥＰを行った処理済懸濁液を排出する排出口３２、シース液ｓを流入する第１流入口３１ａ及び第２流入口３１ｂを有する。主流路３０は、第１基板５２と第２基板５４との間に略直線状に形成される。

　第１導入部５６、第１基板５２、流路基板５５、第２基板５４及び第２導入部５８の積層方向Ｄｓに延在する貫通孔５６ｂが、第１導入部５６に設けられている。また、第１基板５２に、第１導入部５６の貫通孔５６ｂと連通し、積層方向Ｄｓに延在する貫通孔５２ｂが設けられている。貫通孔５２ｂは主流路３０の最上流部と連通する。第１導入部５６の貫通孔５６ｂの第１基板５２の反対側の開口が流入口３１である。
　流入口３１は、第１導入部５６の貫通孔５６ｂ及び第１基板５２の貫通孔５２ｂにより主流路３０の最上流部と連通する。
　主流路３０（流路基板５５）の内面３０ｃに、電極対３４における電極の対向方向、すなわち、第１電極３５と第２電極３６との対向方向に突出した凸部５５ａ及び凸部５５ｂが、最上流部から下流に向かって設けられている。
　なお、積層方向Ｄｓは、鉛直方向ｚと直交する方向ｙと平行な方向である。また、電極対３４における電極の対向方向は、鉛直方向ｚと直交する方向ｙと平行な方向である。

　また、第１基板５２に、主流路３０と連通する貫通孔５２ａが設けられている。第２基板５４に、主流路３０と連通する貫通孔５４ａが設けられている。貫通孔５２ａ及び貫通孔５４ａは、主流路３０に対して傾斜して設けられている。
　第１導入部５６に、第１基板５２の貫通孔５２ａと連通する貫通孔５６ａが設けられている。
　また、第２導入部５８に、第２基板５４の貫通孔５４ａと連通する貫通孔５８ａが設けられている。貫通孔５６ａは、第１流入口３１ａと第１基板５２の貫通孔５２ａと連通するものであり、第１流入口３１ａから積層方向Ｄｓに延びており、第１基板５２との境界で主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌに屈曲している。このような形状の貫通孔５６ａを便宜的に略Ｌ字状の貫通孔５６ａという。
　貫通孔５８ａは、第２流入口３１ｂと第２基板５４の貫通孔５４ａと連通するものであり、第２流入口３１ｂから積層方向Ｄｓに延びており、第２基板５４との境界で主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌに屈曲している。このような形状の貫通孔５８ａを便宜的に略Ｌ字状の貫通孔５８ａという。
　第１導入部５６の貫通孔５６ａ及び第１基板５２の貫通孔５２ａと、第２導入部５８の貫通孔５８ａ及び第２基板５４の貫通孔５４ａとは、鉛直方向ｚに延在する主流路３０に対して対称に配置されている。

　第１流入口３１ａは、第１導入部５６に設けられた略Ｌ字状の貫通孔５６ａを経て、第１基板５２に設けられた貫通孔５２ａを経て主流路３０と連通する。ここで、貫通孔５２ａは、主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌに対して、下流方向に向かって傾斜しており、主流路３０の凸部５５ａの直下流に開口する。

　なお、貫通孔５６ａ（シース液流路の一部）は、シース液流の幅方向の流速が均一になるように、例えば、略Ｌ字状の流路が曲がった位置から下流に向けて、流路を幅方向に広げてもよい。この点に関しては後述する貫通孔５８ａも同様である。
　また、貫通孔５６ａは第１導入部５６及び第１基板５２に跨って設けられていてもよい。
　他方、第２流入口３１ｂは、第２導入部５８に設けられた略Ｌ字状の貫通孔５８ａを経て、第２基板５４に設けられた貫通孔５４ａを経て主流路３０と連通する。ここで、貫通孔５４ａは、主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌに対して、下流方向に向かって傾斜しており、主流路３０の凸部５５ｂの直下流に開口する。なお、貫通孔５８ａは、第２導入部５８及び第２基板５４に跨って設けられていてもよい。凸部５５ａ及び凸部５５ｂの下流側端部５５ｃが、流路デバイス１１において、主流路３０に懸濁液Ｑを供給する懸濁液供給口５５ｄとなる。この下流側端部５５ｃ、すなわち、懸濁液供給口５５ｄに貫通孔５２ｂ、貫通孔５６ｂ及び流入口３１を経て第１チューブ１３が接続されている。
　また、貫通孔５２ａの主流路３０への開口部、及び貫通孔５４ａの主流路３０への開口部が、流路デバイス１１における主流路３０へのシース液ｓのシース液供給口５２ｃ、５４ｃとなる。なお、懸濁液Ｑの懸濁液供給口とシース液ｓのシース液供給口５２ｃ、５４ｃとの幅は、ほぼ同一であることが好ましい。
　また、流路デバイス１１において、下流側端部５５ｃが懸濁液流とシース液流とが合流する合流部５９となる。

　主流路３０に電極対３４の電極に接触するシース液流を形成するシース液供給口５２ｃが主流路３０内の懸濁液供給口５５ｄの下流側に設けられている。
　貫通孔５２ａと貫通孔５６ａとにより、主流路３０において合流部５９で懸濁液Ｑにシース液流を合流させるシース液流路６４が形成される。シース液流路６４に第２チューブ２１ａが接続されている。第２チューブ２１ａは第１流入口３１ａ、貫通孔５６ａ及び貫通孔５２ａを経てシース液供給口５２ｃに接続されている。
　主流路３０に電極対３４の電極に接触するシース液流を形成するシース液供給口５４ｃが主流路３０内の懸濁液供給口５５ｄの下流側に設けられている。
　貫通孔５４ａと貫通孔５８ａとにより、主流路３０において合流部５９で懸濁液Ｑにシース液流を合流させるシース液流路６５が形成される。シース液流路６５に第２チューブ２１ｂが接続されている。第２チューブ２１ｂは第２流入口３１ｂ、貫通孔５８ａ及び貫通孔５４ａを経てシース液供給口５４ｃに接続されている。
　シース液流路６４、６５は、主流路３０における液体の流れ方向に対して、下流方向に向かって傾斜するように設けられ、懸濁液Ｑの供給口の下流であって電極対３４の上流にシース液ｓが流入するように開口する。主流路３０の上流側であって、懸濁液Ｑのみが流れる領域を懸濁液流路ということがあり、懸濁液流路の下流側であり、凸部５５ａ及び凸部５５ｂに挟まれた領域が規制領域となる。シース液流路６４、６５は、シース液のみが流れる。
　シース液流路６４、６５は、下流に向けて流路が幅方向に広がる領域を有することが好ましい。この結果、主流路３０の幅が広くても、下流での流速分布が均一になり、懸濁液Ｑに対して均一にＥＰできる。このとき、懸濁液流路にも下流に向けて流路が幅方向に広がる領域を有することが好ましく、懸濁液流路でも流速分布が均一になる。

　なお、流路デバイス１１において、流路基板５５は、公知の各種の方法で形成すればよい。また、複数枚の流路板を用いて、流路基板５５を形成してもよい。一例として、凸部５５ａに対応する部分（非開口部）を有し、主流路３０に対応する開口を有する流路板、主流路３０全域に対応する開口を有する流路板、及び、凸部５５ｂに対応する部分（非開口部）を有し、主流路３０に対応する開口を有する流路板の、３枚の流路板を用いて流路基板５５を形成してもよい。

　流路デバイス１１において、懸濁液Ｑは、第１チューブ１３から流入口３１に供給され、最上流部から主流路３０に流入して、主流路３０から排出口３２に至る。
　シース液ｓは、第２チューブ２１ａから第１流入口３１ａに供給され、第２チューブ２１ｂから第２流入口３１ｂに供給される。
　第１流入口３１ａに流入されたシース液ｓは、第１導入部５６に設けられた貫通孔５６ａ及び第１基板５２に設けられた貫通孔５２ａを経て、すなわち、シース液流路６４を経て主流路３０に供給され、主流路３０から排出口３２に至る。また、第２流入口３１ｂに流入されたシース液ｓは、第２導入部５８に設けられた貫通孔５８ａ及び第２基板５４に設けられた貫通孔５４ａを経て、すなわち、シース液流路６５を経て主流路３０に供給され、主流路３０から排出口３２に至る。

　ここで、上述のように、主流路３０内（流路基板５５）には、電極対３４における第１電極３５と第２電極３６との対向方向に突出して、最上流部から下流に向かって、凸部５５ａ及び凸部５５ｂが設けられている。凸部５５ａ及び凸部５５ｂを有する領域では、懸濁液Ｑの厚さＤｍは凸部５５ａと凸部５５ｂとの間隔ｄである。
　また、上述のように、貫通孔５２ａは、主流路３０における液体の流れ方向に対して、下流方向に向かって傾斜するように設けられ、主流路３０の凸部５５ａ（凸部５５ａと凸部５５ｂとで挟まれた懸濁液流路の領域を規制領域ということがある）の直下流に開口する。上述のように、凸部５５ａ及び凸部５５ｂで挟まれた領域が規制領域である。他方、貫通孔５４ａは、主流路３０における液体の流れ方向に対して、下流方向に向かって傾斜するように設けられ、主流路３０の凸部５５ｂの直下流に開口する。
　なお、図２に示す態様では、シース液流路が貫通孔５６ａ（５８ａ）及び貫通孔５２ａ（５４ａ）から構成されているが、シース流路としては貫通孔５２ａ（５４ａ）のみがあればよく、流路構成はデバイス構成に応じて適宜設計される。
　貫通孔５６ａ及び貫通孔５２ａで構成されているシース液流路６４は、シース液流路６４としては貫通孔５２ａのみがあればよく、シース液流路の構成は、流路デバイスの構成に応じて適宜決定される。

　また、貫通孔５４ａと貫通孔５８ａで構成されているシース液流路６５は、シース液流路６５としては貫通孔５４ａのみがあればよく、シース液流路の構成は、流路デバイスの構成に応じて適宜決定される。
　従って、電極対３４の上流では、図３に概念的に示すように、懸濁液Ｑによる懸濁液流の対向方向の両側に、シース液ｓからなるシース液流を形成して、シース液流／懸濁液流／シース液流の３層の積層流が形成され、電極対３４の間には３層の積層流が流入する。
　ＥＰ装置１０では、懸濁液Ｑとシース液ｓとが、シース液流／懸濁液流／シース液流の積層流を形成した状態で電極対３４の間、すなわち、上述の空間３７に連続的に送液されて、第１電極３５及び第２電極３６によって、３層の積層流の状態で懸濁液Ｑに、例えば、パルス電界を印加することにより、上述のようにシース液流を用いたフロー式のＥＰによる処理を行うことができる。この場合、懸濁液流の厚さは規制領域の厚さと略等しくなり、少なくとも電極対３４の間、かつ電極対３４の上流端部で懸濁液流の厚さＤｍが１～１０ｍｍに維持される。
　なお、図３では、図２に示す第１チューブ１３、第２チューブ２１ａ、２１ｂ、ポンプ１２ａ、１２ｂ、２０ａ、２０ｂ、タンク２２、培養装置２４及びタンク２３、電源部１４、制御部１６、判定部１８及び混合器２５の図示を省略している。図３では、センサ３８、３９ａ、３９ｂの図示も省略している。

　上述のように第１流入口３１ａから供給されたシース液ｓは、下流方向に向かって傾斜するように主流路３０の凸部５５ａの直下流に流入する。他方、第２流入口３１ｂから供給されたシース液ｓは、下流方向に向かって傾斜するように主流路３０の凸部５５ｂの直下流に流入する。
　また、シース液ｓの流入部の上流では、主流路３０に凸部５５ａ及び凸部５５ｂが形成されており、シース液ｓの流入位置よりも下流に比して、主流路３０の対向方向の厚さが薄くなっている。また、この領域における主流路３０の対向方向の厚さ、すなわち、懸濁液流の厚さＤｍは、凸部５５ａ及び凸部５５ｂの間隔で決定する。

　このように凸部５５ａ及び凸部５５ｂはシース液流を形成し、かつ懸濁液流の厚さＤｍを規制する機能を有する。流路デバイス１１では、主流路３０における凸部５５ａ及び凸部５５ｂが形成された領域が、シース液流との合流前の懸濁液流の厚さを規制する規制領域となる。シース液流との合流前の懸濁液流の厚さを規制する規制領域を懸濁液流路ということがある。
　従って、流路デバイス１１においては、凸部５５ａと凸部５５ｂとの間隔ｄを１～１０ｍｍとすることにより、規制領域を流れる懸濁液流の厚さＤｍを１～１０ｍｍとする。
　これにより、流路デバイス１１においては、上述のフロー式のＥＰにおけるシース液流／懸濁液流／シース液流の３層の積層流れにおいて、懸濁液流の厚さＤｍ（図３参照）を１～１０ｍｍに制御できる。なお、懸濁液流路は、その一部が規制領域となっていればよく、下流側の一部が規制領域となり間隔ｄが１～１０ｍｍになっていればよい。
　この規制領域における懸濁液流の厚さＤｍ、すなわち、間隔ｄ（図２参照）は、１～８ｍｍが好ましく、２～５ｍｍがより好ましく、２～３ｍｍが更に好ましい。規制領域の厚さの下限は、２ｍｍが好ましく、３ｍｍがより好ましい。間隔ｄ（懸濁液流の厚さＤｍ）は、２～１０ｍｍでもよく、３～１０ｍｍでもよい。
　また、凸部５５ａ及び凸部５５ｂの厚さの合計、すなわち、電極の対向方向の高さの合計を、凸部５５ａと凸部５５ｂとの間隔ｄ以下とすることにより、シース液流の厚さの合計を、懸濁液流の厚さ以下として、フロー式のＥＰを行った後の懸濁液の希釈率を２倍以下にできる。

　また、シース液ｓによるシース液流の厚さｄｓ（図３参照）に制限はないが、懸濁液流との合流時におけるシース液流の厚さは、０．１ｍｍ以上が好ましく、０．２ｍｍ以上がより好ましく、０．３ｍｍ以上が更に好ましく、０．５ｍｍ以上が特に好ましい。２つのシース液の厚さの合計を、懸濁液流の厚さＤｍ以下とすることにより、シース液流の厚さの合計を、懸濁液流の厚さＤｍ以下として、フロー式のＥＰを行った後の懸濁液の希釈率を２倍以下にできる。このため、２つのシース液流の厚さｄｓ（図３参照）の合計を、懸濁液流の厚さＤｍ以下とすることが好ましい。すなわち、懸濁液流との合流時におけるシース液流の厚さの合計は、規制領域における懸濁液流の厚さの１倍以下であることが好ましい。
　懸濁液流の厚さＤｍは、上述のように凸部５５ａと凸部５５ｂとの間隔ｄ（図２参照）によって決定される。凸部５５ａと凸部５５ｂは、懸濁液流の厚さＤｍの規制部材として機能する。このため、凸部５５ａと凸部５５ｂの対向方向の厚さを変えることにより、懸濁液流の厚さＤｍを調整できる。この場合、シース液流の厚さｄｓ（図３参照）も調整される。

　このような流路デバイス１１において、懸濁液流とシース液流とを合流させる際における懸濁液流とシース液流とが成す角度、すなわち、主流路３０と、貫通孔５２ａ及び貫通孔５４ａとが成す角度には、制限はないが、小さい方が好ましい。
　具体的には、主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌと、貫通孔５２ａの延在方向及び貫通孔５４ａの延在方向とが成す角度は、９０°以下が好ましく、６０°以下がより好ましく、４５°以下が更に好ましく、３０°以下が更に一層好ましい。
　また、懸濁液流とシース液流とを合流させる際における両者は流速差が小さいことが好ましい。具体的には、懸濁液流とシース液流とを合流させる際におけるシース液流の流速は、懸濁液流の流速の±１０％以下であることが好ましく、±５％以下であることがより好ましく、±３％以下であることが更に好ましく、±０％、すなわち、懸濁液流とシース液流とが等速であることが最も好ましい。

　図２の流路デバイス１１において、第１導入部５６と第１基板５２との間、第１基板５２と流路基板５５との間、流路基板５５と第２基板５４との間、第２基板５４と第２導入部５８との間には、懸濁液Ｑの液漏れ防止用のシール部材（図示せず）としてＯリングがあることが好ましい。

　ＥＰ装置１０では、ポンプ１２ａ、ポンプ１２ｂ、ポンプ２０ａ、ポンプ２０ｂは、電極対３４の間、すなわち、上述の空間３７において、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液方向Ｄｄが鉛直方向ｚの下方から上方に向かう方向にとなるように、懸濁液Ｑ及びシース液ｓを送液する。電源部１４を用いて懸濁液Ｑに電界を印加してＥＰを実施し、対向する第１電極３５と第２電極３６との間に気泡が発生した場合、発生した気泡は、懸濁液Ｑ及びシース液ｓに比して比重が小さいため、鉛直方向ｚに懸濁液Ｑ及びシース液ｓよりも移動しやすい。このため、電極対３４の間に発生した気泡は、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液により電極対３４の間に滞留することなく、鉛直方向ｚに移動することで電極対３４の間から除去され、気泡による懸濁液Ｑへの電界の印加の阻害を抑制できる。これにより、ＥＰ装置１０では、懸濁液Ｑへの電界の印加を適正に実施でき、その結果、導入効率及び生体活性物質の利用効率を適正なものにできる。

　ＥＰ装置１０では、図３に示すように、懸濁液流と共に、懸濁液流と第１電極３５及び第２電極３６との間に、懸濁液とは異なるシース液ｓからなるシース液流を形成して、フロー式のＥＰを行う。
　シース液ｓを用いることにより、懸濁液Ｑにおける生体由来物の濃度が高い場合でも、主流路３０の壁面近傍に生体由来物の流れが滞留することを防止して、高効率のフロー式のＥＰを行うことができる。
　本発明者等の検討によれば、懸濁液Ｑにおける生体由来物の濃度が高いがシース液ｓがない場合、主流路３０の壁面の極近傍で生体由来物の流れが滞留してしまう。生体由来物の流れが滞留する滞留層では、生体由来物が流動している領域に比して生体由来物が密着しているため、電気抵抗が高い。そのため、この滞留層によって電極対３４が印加する電界を大量に消費してしまう。その結果、本来、電界を印加すべきである流動部に印加する電界が低くなって十分な電界を印加できず、ＥＰの導入効率が低下してしまう。
　また、シース液ｓがない場合、生体由来物が電極付近で滞留層として滞留するため、生体由来物は、繰り返し電界を印加される。その結果、電極の近傍で生体由来物が焦げ付き、焦げ付いた生体由来物が電極の表面に付着してしまう。このような異物が電極表面に付着すると、電極が印加する電界を遮蔽してしまうので、ＥＰの導入効率が低下してしまう。このことから、シース液ｓがあることが好ましい。

　さらに、本発明者等は、検討の結果、このようなシース液ｓを用いるフロー式のＥＰにおいて、電極対を構成する電極の対向方向における懸濁液流の厚さＤｍを厚くすることにより、高効率のフロー式のＥＰが行えることも見出した。
　具体的には、フロー式のＥＰにおいて、電極対を構成する電極の対向方向における懸濁液流の厚さＤｍを、１～１０ｍｍとすることで、高効率のフロー式のＥＰを行うことができる。なお、電極対の間の一部で懸濁液流の厚さＤｍが１～１０ｍｍとなっていればよく、電極対の間かつ電極上流端部で懸濁液流の厚さＤｍが１～１０ｍｍとなっていればよい。
　ＥＰ方法は、このように懸濁液流の厚さＤｍを厚くしてフロー式のＥＰを行うことにより、より高効率のフロー式のＥＰを行うことを可能にしている。具体的には、スループット、導入効率、及び生体活性物質の利用効率が高い、より高効率のフロー式のＥＰを行うことができる。なお、スループットとは、単位時間当たりの細胞処理量である。

　また、ＥＰ方法は、懸濁液流の厚さＤｍを厚くしてフロー式のＥＰを行うことにより、処理量を増大させつつ、高濃度の懸濁液に対して、効率的に大量のフロー式のＥＰを行うことができ、高い生産性を達成することができる。
　ここで、従来のフロー式のＥＰでは、懸濁液流の厚さを、できるだけ薄くして処理を行っている。
　例えば、特許文献２では、好ましい態様として、懸濁液流の厚さ、すなわち、シース液流間の間隔を５０～１００μｍとして、フロー式のＥＰを行うことを例示している。特許文献２では、これにより、電極対の間を通過する生体由来物（細胞）が電極の対向方向に重ならないように流路内を流す単層流とすることができる、としている。
　従来のフロー式のＥＰでは、このように懸濁液流の厚さを薄くすることにより、電極対の間における生体由来物の流れを均一にし、かつ、生体由来物に印加する電界を均一にすることで、効率の高い処理を可能にしていると考えられる。

　しかしながら、本発明者等は、検討の結果、逆に懸濁液流の厚さを大幅に厚くすることで、より効率が良いフロー式のＥＰを行えることを見出した。
　フロー式のＥＰでは、懸濁液に含まれる生体由来物及び生体活性物質の拡散によって、シース液流と懸濁液流との界面に、生体由来物及び生体活性物質が拡散された拡散領域が形成される。
　特許文献２のように、懸濁液流の厚さを５０～１００μｍとした場合、懸濁液流の厚さに対して拡散領域が厚くなる。その結果、フロー式のＥＰに与える生体由来物及び生体活性物質の拡散の影響が大きく、導入効率及び生体活性物質の利用効率が落ちてしまう。
　一方、懸濁液流の厚さを５００μｍ程度にすると、懸濁液流の厚さに対する拡散領域の厚さは小さくなり、拡散の影響は少なくなるが、懸濁液流における電界の均一性が悪くなってしまう。その結果、特許文献２のように、懸濁液流の厚さを５０～１００μｍとした場合よりも、導入効率及び生体活性物質の利用効率が落ちてしまう。

　これに対して、懸濁液流の厚さＤｍを大幅に厚く１ｍｍ以上とすることにより、生体由来物等の拡散による影響を抑制できる。
　すなわち、拡散領域は拡散によって形成されるので、拡散領域の厚さは懸濁液流の厚さＤｍには影響されない。そのため、懸濁液流の厚さＤｍを１ｍｍ以上とすることにより、拡散領域の厚さに対して拡散の影響がない均一な懸濁液Ｑの厚さを十分に厚くして、多くの懸濁液Ｑを処理することが可能になる。
　加えて、懸濁液流の厚さＤｍを１ｍｍ以上とすることにより、電界均一性も良好にできる。すなわち、ＥＰにおいて、生体由来物に印加される電界の強さは、電極対の間方向に存在する生体由来物の数によって変動する。例えば、特許文献２のように、懸濁液流の厚さが５０μｍ程度と十分に狭い場合には、電極対の間方向で生体由来物が重なる確率は低く、各生体由来物に印加される電界は、ほぼ一定で電界均一性は良好である。これに対して、懸濁液流の厚さが５００μｍ程度である場合には、電極対の間方向に存在する生体由来物の数は流れ方向の位置によって異るため、各生体由来物に印加される電界に差が生じてしまい、電界均一性が悪くなる。これに対して、懸濁液流の厚さＤｍを１ｍｍ以上と十分に厚くすることにより、流れ方向の位置における電極対の間方向に存在する生体由来物の数を均一化することができ、その結果、各生体由来物に印加される電界を、ほぼ一定にでき、電界均一性を良好にできる。
　その結果、ＥＰ方法によれば、懸濁液流を薄くした従来のフロー式のＥＰに比して高効率のフロー式のＥＰを行うことが可能になる。

＜電極対の間における懸濁液及びシース液の流れの安定＞
　ＥＰ装置１０及び後述のＥＰ方法では、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液後、電極対の間において懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した後に、電源部１４により懸濁液Ｑに電界を印加する。以下、電極対の間における懸濁液及びシース液の流れの安定について説明する。
　ここで、図４は本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置の第１の例の流路デバイスの電極対の間における懸濁液及びシース液の流れの安定を示す模式的断面図である。図５は本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置の第１の例の流路デバイスの電極対の間における懸濁液及びシース液の流れの不安定の一例を示す模式的断面図である。図６は本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置の第１の例の流路デバイスの電極対の間における懸濁液及びシース液の流れの不安定の他の例を示す模式的断面図である。
　なお、図４～６において、図１及び図２に示すＥＰ装置１０と同一構成物には同一符号を付して、その詳細な説明は省略する。

　電極対３４の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した状態とは、シース流でない場合に流路の壁面近傍で生体由来物の流れが滞留する滞留層が生じずに、懸濁液流が円滑に流れる状態をいう。好ましくは、懸濁液流の流速分布がほぼ均一な状態をいう。さらに好ましくは、図４に示すように懸濁液流の厚さＤｍと、２つのシース液流の厚さｄｓとが予め設定された範囲にあり、懸濁液流とシース液流との界面Ｂｓが波打つことなく平面である。
　ＥＰ装置１０では、電極対３４の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した状態で、ＥＰを実施する。これにより、懸濁液Ｑへの電界の印加を適正に実施でき、その結果、導入効率及び生体活性物質の利用効率が高くなり、懸濁液Ｑの廃棄も少なくなり、生産性が高いＥＰを実施できる。
　図５に示すように電極対３４の間において、予め設定された範囲に対して２つのシース液流の厚さｄｓが厚く、懸濁液流の厚さＤｍが薄い場合、懸濁液流とシース液流との界面Ｂｓが波打つことなく平面であっても、電極対の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した状態ではない。電極対３４の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが図５に示す状態の場合、シース液流が厚く、懸濁液Ｑへの電界の印加を適正に実施できず、その結果、導入効率及び生体活性物質の利用効率が低くなり、生産性が低い。
　また、図６に示すように電極対３４の間において、懸濁液流とシース液流との界面Ｂｓが、主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌに沿って第１電極３５と第２電極３６との対向方向に、例えば、波打つように変動する場合、電極対３４の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した状態ではない。上述の界面Ｂｓの波打つような変動は、懸濁液Ｑ又はシース液ｓの送液の際の圧力変動、いわゆる脈動により生じる。図６に示すように懸濁液流とシース液流との界面Ｂｓが波打つように変動する場合、電極対３４の間においてシース液流の厚みが不均一であり、懸濁液Ｑへの電界の印加を適正に実施できず、その結果、導入効率及び生体活性物質の利用効率が低くなり、生産性が低い。
　こられのことから図５及び図６に示すような電極対３４の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが不安定の状態を避けて、ＥＰを実施する必要がある。

　また、図４、図５及び図６では、電極対３４の間において、シース液の厚さｄｓと、懸濁液Ｑの厚さＤｍとが異なっていることから、電極対３４の間の電気抵抗が異なる。電極対３４の間の電気抵抗は、シース液の厚さｄｓと、懸濁液Ｑの厚さＤｍとに応じた値を示し、シース液流／懸濁液流／シース液流の３層の積層流の厚み方向の電気抵抗を反映する。このことを利用して、電極対３４の間の電気抵抗を、後述の測定部１９（図１、２等参照）で測定して、電極対３４の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの電気抵抗を得て、この流れの電気抵抗に基づいて、判定部１８が流れの安定を判定し、判定信号を制御部１６に出力する。
　例えば、電気抵抗として、インピーダンスを測定して、このインピーダンスに基づいて、電極対３４の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定しているか否かを判定できる。
　このため、例えば、図４に示すように懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した状態における電極対３４の間の電気抵抗又はインピーダンスを予め測定し、流れが安定であることを示す電極対３４の間の電気抵抗又はインピーダンスの範囲を予め設定しておき、判定部１８に記憶する。電極対３４の間の電気抵抗又はインピーダンスの測定値が予め設定された範囲内にある場合、判定部１８は、流れが安定していると判定し、判定信号を制御部１６に出力する。

　図７は本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置の第１の例の流路デバイスの電極対の間における懸濁液及びシース液の流れの安定を説明するグラフである。
　図７のグラフでは縦軸を流量とし、横軸を時間としている。図７において、符号７０の線は、２つのシース液のうち、一方のシース液ｓの流量変化を示す。符号７１の線は、懸濁液Ｑの流量変化を示す。符号７２の線は、２つのシース液のうち、他方のシース液ｓの流量変化を示す。
　例えば、図７に示すように、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液を開始後、所定の時間経過すると、懸濁液Ｑの流量及びシース液ｓの流量が、それぞれ設定された流量となり、かつ流量が安定する。この場合、電極対の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した状態になる。経過時間による流量の安定を利用して、電極対の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した状態を時間制御により得ることができる。
　図７では、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液の開始時刻をｔ_０とし、電極対の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した状態になった時刻をｔｓとするとき、開始時刻ｔ_０から時刻ｔｓまでの時間により、電極対の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの安定を制御する。
　本発明では高濃度の懸濁液Ｑを使用するため、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れを安定させるためには、開始時刻ｔ_０から時刻ｔｓまでの時間は、５秒以上が好ましく、１０秒以上がより好ましく、１５秒以上が更に好ましい。
　懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した状態になるまでの時間が長いと、すなわち、開始時刻ｔ_０から時刻ｔｓまでの時間が長いと、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの廃棄が増える。このため、開始時刻ｔ_０から時刻ｔｓまでの時間の上限としては、６０秒である。
　また、開始時刻ｔ_０から時刻ｔｓまでの時間は、短すぎると懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した状態にならず、長すぎると懸濁液Ｑ及びシース液ｓの廃棄が増える。そのため、開始時刻ｔ_０から時刻ｔｓまでの時間は５～６０秒が好ましく、１０～４５秒がより好ましく、１５～３０秒が更に好ましい。

　図７に示すように、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液が安定した後、すなわち、時刻ｔｓの後、時刻ｔ_１から、電極対による懸濁液Ｑへの電界の印加を開始し、フロー式のＥＰを実施する。時刻ｔ_１の後、時刻ｔ_２から、容器２７（図１参照）に送液する。
　なお、開始時刻ｔ_０から時刻ｔ_２まで、懸濁液Ｑ及びシース液ｓを廃棄槽２６（図１参照）に送液する。廃棄槽２６（図１参照）と容器２７（図１参照）の送液の切り替えは、バルブ２９により実施される。
　時刻ｔｓから、予め設定された時間を経過した時刻ｔ_３で、電極対による懸濁液Ｑへの電界の印加を停止する。また、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液も停止する。
　図７では時刻ｔｓから時刻ｔ_３までが、電極対の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した状態に該当する。

　ＥＰ装置１０では、第１チューブ１３において懸濁液Ｑの先頭の待機位置が予め定められており、第２チューブ２１ａ、２１ｂおいてシース液ｓの先頭の待機位置が予め定められている。制御部１６は、ポンプ１２ａ、１２ｂ、２０ａ、２０ｂにより、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの全ての先頭が、待機位置に到達した後に、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液を開始させる。
　センサ３８を、第１チューブ１３における懸濁液Ｑの先頭の待機位置に配置することにより、懸濁液Ｑの先頭の待機位置を検知できる。第１チューブ１３において懸濁液Ｑの先頭が、センサ３８により検知された場合、センサ３８から制御部１６に検知信号が送信され、制御部１６は検知信号を受信する。
　センサ３９ａ、３９ｂを、第２チューブ２１ａ、２１ｂおけるシース液ｓの先頭の待機位置に配置することにより、シース液ｓの先頭の待機位置を検知できる。第２チューブ２１ａ、２１ｂにおいてシース液ｓの先頭がセンサ３９ａ、３９ｂにより検知された場合、センサ３９ａ、３９ｂから制御部１６に検知信号が送信され、制御部１６は検知信号を受信する。このように、センサ３８からの検知信号と、センサ３９ａ、３９ｂからの検知信号とにより、制御部１６では、ポンプ１２ａ、１２ｂによる懸濁液Ｑの送液と、ポンプ２０ａ、２０ｂによるシース液ｓの送液とを制御できる。
　例えば、制御部１６では、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの全ての先頭が、待機位置に到達した場合、ポンプ１２ａ、１２ｂ、２０ａ、２０ｂを停止して懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液を停止する。この状態で、次に、ポンプ１２ａ、１２ｂ、２０ａ、２０ｂによる懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液を開始する。制御部１６は、電極対の間において懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した後に、電源部１４により懸濁液Ｑに電界を印加させる。

　懸濁液Ｑ及びシース液ｓを送液するタイミングは、懸濁液Ｑとシース液ｓとで同時であってもよく、懸濁液Ｑよりもシース液ｓの方が先であってもよい。
　懸濁液Ｑ及びシース液ｓを送液するタイミングが同時とは、懸濁液Ｑを送液するポンプ１２ａ、１２ｂと、シース液ｓを送液するポンプ２０ａ、２０ｂとの駆動タイミングが同じであることである。すなわち、図７に示す開始時刻ｔ_０でポンプ１２ａ、１２ｂと、ポンプ２０ａ、２０ｂとを駆動して、懸濁液Ｑとシース液ｓとを送液することである。
　懸濁液Ｑ及びシース液ｓを送液するタイミングが、懸濁液Ｑよりもシース液ｓの方が先とは、シース液ｓを送液するポンプ２０ａ、２０ｂの駆動タイミングが、懸濁液Ｑを送液するポンプ１２ａ、１２ｂの駆動タイミングよりも先であることである。すなわち、図７に示す開始時刻ｔ_０でポンプ２０ａ、２０ｂを駆動してシース液ｓを送液した後、ポンプ１２を駆動して懸濁液Ｑを送液することである。
　なお、送液するタイミングが懸濁液Ｑよりもシース液ｓの方が先とは、第１電極３５の電極面３５ａと、第２電極３６の電極面３６ａとの間の流路をシース液ｓが満たすことである。
　懸濁液Ｑよりもシース液ｓを先に送液した場合、シース液ｓにより第１電極３５の電極面３５ａと、第２電極３６の電極面３６ａとが覆われるため、第１電極３５の電極面３５ａと、第２電極３６の電極面３６ａとに懸濁液Ｑが接触することが抑制される。このため、第１電極３５の電極面３５ａと第２電極３６の電極面３６ａとが汚れることが防止される。

　判定部１８は、電極対の間において懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの安定を判定するものである。
　判定部１８は、例えば、電極対３４の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの電気抵抗を測定して、電気抵抗に基づいて、流れの安定を判定する。この場合、判定部１８に、測定部１９（図１、２等参照）を設ける。上述の流れの安定の判定に電気抵抗を用いる場合、測定部１９は、電極対３４の第１電極３５と、配線１９ａにより電気的に接続され、第２電極３６と、配線１９ｂにより電気的に接続される。測定部１９は、電極対３４の間の電気抵抗を測定して、電極対３４の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの電気抵抗を測定する。測定部１９は、上述の電極対３４の間の電気抵抗を測定できれば、その構成は、特に限定されるものではない。
　また、判定部１８に測定部１９がある場合、電源部１４及び判定部１８の動作時に、互いに影響を与えないように、電源部１４と判定部１８とを電気的に絶縁状態にできる構成にする。例えば、電源部１４及び判定部１８に、それぞれ開閉器等の遮断器（図示せず）が設けられている。遮断器により、電源部１４と、電極対３４とを導通状態又は電気的に絶縁状態にできる。また、遮断器により、判定部１８と、電極対３４とを導通状態又は電気的に絶縁状態にできる。
　電源部１４と電極対３４とが導通状態のときには、遮断器により、判定部１８と電極対３４とを電気的に絶縁状態にして、電源部１４と判定部１８とを電気的に絶縁状態にする。一方、判定部１８と電極対３４とが導通状態のときには、遮断器により、電源部１４と電極対３４とを電気的に絶縁状態にして、電源部１４と判定部１８とを電気的に絶縁状態にする。
　これにより、電源部１４の動作時に判定部１８に電圧が印加されない。また、判定部１８の測定部１９による電気抵抗の測定時に、電源部１４を含めた電気抵抗を測定することがない。
　なお、上述の流れの安定の判定に電気抵抗を用いない場合、判定部１８に測定部１９を設ける必要がない。
　判定部１８を用いて、電極対３４の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの電気抵抗として、例えば、インピーダンスを測定する。図４に示す状態の電気抵抗が予め測定されており、流れが安定であることを示す電気抵抗の範囲が予め設定されており、判定部１８に記憶されている。判定部１８は、測定部１９を用いて測定された、電極対３４の間における電気抵抗が予め設定された範囲内にある場合、流れが安定していると判定する。この場合、判定部１８は判定信号を制御部１６に出力する。

　また、判定部１８は、第１チューブ１３の懸濁液Ｑの流量及び第２チューブ２１ａ、２１ｂのシース液ｓの流量の安定性を検出して、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの安定を判定することもできる。この場合、第１チューブ１３のポンプ１２ａの下流側、かつ流入口３１迄の領域に流量計（図示せず）を設ける。また、第２チューブ２１ａのポンプ２０ａの下流側、かつ第１流入口３１ａ迄の領域に流量計（図示せず）を設ける。また、第２チューブ２１ｂのポンプ２０ｂの下流側、かつ第２流入口３１ｂ迄の領域に流量計（図示せず）を設ける。
　各流量計による流量のデータを判定部１８に出力させる。判定部１８が、各流量計により計測された流量の変動より流れの安定を判定する。判定部１８では、例えば、設定流量と、計測された流量とを比較し、例えば、図７に示すように、設定流量に達した後、設定流量が予め設定した時間維持された場合に、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定していると判定する。このようにして、第１チューブ１３の懸濁液Ｑの流量及び第２チューブ２１ａ、２１ｂのシース液ｓの流量の安定性を検出して、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの安定を判定できる。なお、上述の予め設定した時間は、判定部１８に記憶されている。

　流量の安定性の判定において、懸濁液Ｑの流量を設定流量と比較するが、シース液流は２つある。例えば、２つのシース液流の流量を、それぞれ設定流量と比較して、２つとも設定流量に達した後、設定流量が予め設定した時間維持された場合に、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定していると判定する。
　流量計は、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流量を測定できれば、特に限定されるものではない。流量計には、例えば、超音波式、コリオリ式、又は熱ＭＥＭＳ（Micro Electro Mechanical Systems）式のものが用いられる。

　さらには、判定部１８は、上述の時間制御により、電極対の間において懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの安定を判定してもよい。この場合、懸濁液Ｑを送液するポンプ１２ａと、シース液ｓを送液するポンプ２０ａ、２０ｂとの駆動開始時刻（開始時刻ｔ_０）から時間を、例えば、判定部１８で計測する。懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液を開始後、予め設定した時間経過した場合、判定部１８は、流れが安定していると判定し、判定信号を制御部１６に出力する。制御部１６は、受信した判定信号に基づいて、電源部１４により懸濁液Ｑに電界を印加する等の各部を制御する。

（エレクトロポレーション方法の第１の例）
　エレクトロポレーション方法（ＥＰ方法）の第１の例は、電極対３４の間、すなわち、上述の空間３７に生体由来物と生体活性物質とを含有する懸濁液Ｑと、シース液ｓとを、シース液ｓで懸濁液Ｑを挟むようにして主流路３０に連続的に送液して、電極対３４によって懸濁液Ｑに電界を印加することで、生体由来物に生体活性物質を導入する方法である。ＥＰ方法の第１の例には、例えば、図１及び図２に示すＥＰ装置１０が用いられる。
　ＥＰ方法の第１の例では、ＥＰ装置１０のポンプ１２ａにより培養装置２４内の培養液を吸引し、ポンプ１２ｂによりタンク２３内の生体活性物質を吸引して、培養液の培地をＥＰ用バッファーに交換することなく、混合器２５で培養装置２４の培養液と、タンク２３の生体活性物質とが混合された懸濁液Ｑとなる。ポンプ１２ａにより懸濁液Ｑを第１チューブ１３及び流入口３１を通して主流路３０に供給する。また、ポンプ２０ａによりタンク２２内のシース液ｓを、第２チューブ２１ａ、第１流入口３１ａ、第１導入部５６に設けられた貫通孔５６ａ及び第１基板５２に設けられた貫通孔５２ａを通して主流路３０に供給する。また、ポンプ２０ｂによりタンク２２内のシース液ｓを、第２チューブ２１ｂ、第２流入口３１ｂ、第２導入部５８に設けられた貫通孔５８ａ及び第２基板５４に設けられた貫通孔５４ａを通して主流路３０に供給する。これにより、電極対３４の間でシース液流／懸濁液流／シース液流の３層の積層流が形成され、電極対３４の間を鉛直方向の下方から上方に向かう方向に懸濁液Ｑ及びシース液ｓを連続的に送液する。このとき、電源部１４により電極対３４に、例えば、パルス電圧を印加してＥＰを実施する。

　ＥＰ方法の第１の例では、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液方向Ｄｄが鉛直方向ｚの下方から上方に向かう方向である。電源部１４を用いて懸濁液Ｑに電界を印加してＥＰを実施し、対向する第１電極３５と第２電極３６との間に気泡が発生した場合、発生した気泡は、懸濁液Ｑに比して比重が小さいため、鉛直方向ｚに懸濁液Ｑよりも移動しやすい。このため、電極対３４の間に発生した気泡は、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液により電極対３４の間に滞留することなく、鉛直方向ｚに移動することで電極対３４の間から除去され、気泡による懸濁液Ｑへの電界の印加の阻害を抑制できる。これにより、ＥＰ方法の第１の例では、懸濁液Ｑへの電界の印加を適正に実施でき、その結果、導入効率及び生体活性物質の利用効率を適正なものにできる。
　また、懸濁液Ｑの組成が、懸濁液Ｑに電界を印加した際に気泡が発生しやすいものである場合にも、上述のように電極対３４の間で気泡が発生した場合、発生した気泡は、懸濁液Ｑに比して比重が小さいため、鉛直方向ｚに懸濁液Ｑよりも移動しやすく、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液により電極対３４の間に滞留することなく、鉛直方向ｚに移動することで電極対３４の間から除去され、気泡による懸濁液Ｑへの電界の印加の阻害を抑制できる。これにより、ＥＰ方法の第１の例では、懸濁液Ｑへの電界の印加を適正に実施でき、その結果、導入効率及び生体活性物質の利用効率を適正なものにできる。

　ＥＰ方法では、例えば、ＥＰを実施する前に、細胞培養により、生体由来物と培地を含む培養液を得る培養工程と、培養液と生体活性物質とを混合して懸濁液とする混合工程とを有してもよい。通常、ＥＰを実施する前には、培養液から生体由来物（例えば、細胞）を取り出して、ＥＰ用バッファーに懸濁させて懸濁液を得る。この培地をＥＰ用バッファーに交換することを、単に培地交換又はバッファー交換という。
　ＥＰ方法の第１の例では、培養工程で得られた、培養液の培地をＥＰ用バッファーに交換せずに、すなわち、ＥＰ用バッファーを添加せずに、生体活性物質と混合して、懸濁液を電極対３４の間に連続的に送液する。
　ＥＰ方法の第１の例では、培養液の培地をＥＰ用バッファーに交換しないことから、通常ＥＰされる懸濁液よりも培地を多く含み、電気伝導度が高い。そのため、電界を印加すると気泡が大量に発生する。このような懸濁液に対しても、懸濁液は電極対の間を鉛直方向の下方から上方に向かって移動しながらＥＰされるため、電極対の間に発生した気泡は、鉛直方向に移動することで電極対の間から除去され、気泡による懸濁液への電界の印加の阻害を抑制できる。
　培養工程は、上述のように培養装置２４で実施される。混合工程は、上述のようにポンプ１２ａ、１２ｂを用いて培養装置２４の培養液と、タンク２３の生体活性物質とを吸引することにより混合器２５で実施される。

　以下、ＥＰ方法の第１の例について、より具体的に説明する。
　図８は本発明の実施形態のエレクトロポレーション方法の第１の例を示すフローチャートである。
　上述のように第１チューブ１３において懸濁液Ｑの先頭の待機位置が予め定められ、第２チューブ２１ａ、２１ｂにおいて、それぞれシース液ｓの先頭の待機位置が予め定められている。
　まず、懸濁液Ｑの先頭の待機位置に配置されたセンサ３８（図１及び図２参照）により、第１チューブ１３における懸濁液Ｑの先頭の待機位置の検知を開始する。シース液ｓの先頭の待機位置に配置されたセンサ３９ａ、３９ｂ（図１及び図２参照）により、第２チューブ２１ａ、２１ｂにおけるシース液ｓの先頭の待機位置の検知を開始する。
　ポンプ１２ａ、１２ｂにより、懸濁液Ｑを第１チューブ１３に送液する。また、ポンプ２０ａによりタンク２２内のシース液ｓを第２チューブ２１ａに送液する。ポンプ２０ｂによりタンク２２内のシース液ｓを第２チューブ２１ｂに送液する（ステップＳ１０）。
　このとき、上述のように、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの先頭の待機位置の検知はセンサ３８（図１及び図２参照）、及びセンサ３９ａ、３９ｂ（図１及び図２参照）により開始されている。

　次に、懸濁液Ｑの先頭及びシース液ｓの先頭が、待機位置に到達したか否かを判定する（ステップＳ１２）。ステップＳ１２では、懸濁液Ｑの先頭の待機位置に配置されたセンサ３８（図１及び図２参照）、及びシース液ｓの先頭の待機位置に配置されたセンサ３９ａ、３９ｂ（図１及び図２参照）から検知信号を制御部１６で受信した場合、制御部１６が懸濁液Ｑの先頭及びシース液ｓの先頭が、待機位置に到達したと判定する。
　ステップＳ１２において、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの全ての先頭が、待機位置に到達したと判定された場合、一旦、ポンプ１２ａ、１２ｂ、２０ａ、２０ｂの駆動を停止し、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液を停止する。その後、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの全ての先頭が、待機位置にある状態で、ポンプ１２ａ、１２ｂ、２０ａ、２０ｂの駆動を開始して、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液を開始する（ステップＳ１４）。

　一方、制御部１６が上述の検知信号を受信していない場合、制御部１６が懸濁液Ｑの先頭及びシース液ｓの先頭は待機位置に到達していないと判定する。この場合、懸濁液Ｑの先頭及びシース液ｓの送液を継続する（ステップＳ２６）。再度、懸濁液Ｑの先頭及びシース液ｓの先頭が、待機位置に到達したか否かを判定する（ステップＳ１２）。制御部１６により懸濁液Ｑ及びシース液ｓの全ての先頭が待機位置に到達したと判定されるまで、ステップＳ１２及びステップＳ２６を繰り返す。

　ステップＳ１４で懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液を再開した後、電極対３４の間において懸濁液及びシース液の流れの安定を判定する（ステップＳ１６）。ステップＳ１６が判定工程である。
　ステップＳ１６（判定工程）では、上述のように、例えば、判定部１８の測定部１９により電極対３４の間における懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの電気抵抗を測定して、電極対３４の間の電気抵抗に基づいて、流れの安定を判定する。例えば、上述のように流れが安定であることを示す電極対３４の間の電気抵抗の範囲が予め設定されており、測定された電極対３４の間の電気抵抗が予め設定された範囲内にある場合、判定部１８により、流れが安定していると判定され、判定部１８は判定信号を制御部１６に出力する。
　また、ステップＳ１６（判定工程）では、流量の安定性を検出して、上述の流れの安定を判定できる。この場合、上述のように判定部１８では、例えば、設定流量と、計測された流量とを比較し、例えば、図７に示すように、設定流量に達した後、設定流量が予め設定した時間維持された場合に、流れが安定していると判定し、判定信号を制御部１６に出力する。判定工程は後述の印加工程の前に実施される。
　また、ステップＳ１６では、上述の時間制御により、電極対３４の間において懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの安定を判定することもできる。
　ステップＳ１６では、上述のいずれかの方法により、上述の流れの安定を判定すればよい。

　ステップＳ１６において、流れが安定していると判定された場合、制御部１６が電源部１４により懸濁液Ｑに電界を印加させる（ステップＳ１８）。ステップＳ１８により、ＥＰが実施される。ステップＳ１８が印加工程である。連続的なＥＰであるため、電界は連続的に継続して、所定の期間印加される。
　なお、ステップＳ１６で流れの安定の判定に電気抵抗を用いた場合、ステップＳ１６では、上述のように遮断器により、判定部１８と電極対３４とを導通状態にし、電源部１４と電極対３４とを電気的に絶縁状態にして電源部１４と判定部１８とを電気的に絶縁状態にした後に、測定部１９により、電極対３４の間における電気抵抗を測定する。
　ステップＳ１６で流れの安定の判定に電気抵抗を用いた場合、ステップＳ１８では、上述のように遮断器により、電源部１４と電極対３４とを導通状態にし、判定部１８と電極対３４とを電気的に絶縁状態にして電源部１４と判定部１８とを電気的に絶縁状態にした後に、電源部１４により懸濁液Ｑに電界を印加する。

　一方、ステップＳ１６において、流れが安定していると判定されない場合、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液を継続する（ステップＳ２８）。再度、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定しているか否かを判定する（ステップＳ１６）。懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定している判定されるまで、ステップＳ１６及びステップＳ２８を繰り返す。

　次に、ステップＳ１８（印加工程）の電界の印加から所定の時間経過後、排出先を変更する（ステップＳ２０）。ステップＳ２０において、ステップＳ１８の電界の印加からの経過時間を、例えば、制御部１６で計測する。
　ここで、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液開始（ステップＳ１０）から電界印加（ステップＳ１８）迄は、排出口３２から排出された懸濁液Ｑ及びシース液ｓを廃棄槽２６（図１参照）に送液している。電界印加（ステップＳ１８）後、予め設定された時間経過後、例えば、図７に示す時刻ｔ_２から、バルブ２９（図１参照）により送液先を切り替えて、排出口３２から排出された懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液先を容器２７（図１参照）に変更する。

　ステップＳ１６で流れが安定したと判定された後、予め設定された時間が経過したか否かを判定する（ステップＳ２２）。上述のステップＳ１６の流れが安定したと判定されてからの経過時間は、例えば、制御部１６で計測し、予め設定された時間が経過したか否かを制御部１６が判定する。
　ステップＳ２２において、ステップＳ１６の流れが安定したと判定されてからの経過時間が、予め設定された時間を経過したと判定された場合、制御部１６により、電源部１４を制御して懸濁液Ｑへの電界の印加を停止し、更には、ポンプ１２ａ、１２ｂ及びポンプ２０ａ、２０ｂを停止して懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液を停止する（ステップＳ２４）。
　一方、ステップＳ２２において、ステップＳ１６の流れが安定したと判定されてからの経過時間が、予め設定された時間を経過していないと判定された場合、ステップＳ１６の流れが安定したと判定されてからの経過時間が、予め設定された時間を経過したと判定される迄、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液及び電界の印加が継続される。ステップＳ２２において、予め設定された時間を経過したと判定された場合、制御部１６により、電源部１４を制御して懸濁液Ｑへの電界の印加を停止し、更には、ポンプ１２ａ、１２ｂ及びポンプ２０ａ、２０ｂを停止して懸濁液Ｑ及びシース液ｓの送液を停止する（ステップＳ２４）。

（エレクトロポレーション装置の第２の例）
　図９は本発明の実施形態のエレクトロポレーション装置（ＥＰ装置）の流路デバイスの第２の例を示す模式的断面図である。
　なお、図９において、図１及び図２に示すＥＰ装置１０と同一構成物には同一符号を付して、その詳細な説明は省略する。
　図９に示すＥＰ装置１０ａは、図１及び図２に示すＥＰ装置１０に比して、補助電極６０を有し、補助電極６０が判定部１８の測定部１９に電気的に接続されている点が異なり、それ以外の構成は、図１及び図２に示すＥＰ装置１０と同様の構成である。
　ＥＰ装置１０ａは、補助電極６０が電極対３４の主流路３０の下流側に設けられている。補助電極６０は、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの厚み方向の電気抵抗の測定に用いられる。判定部１８が補助電極６０を用いて懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの厚み方向の電気抵抗を測定する。補助電極６０を用いて測定する厚み方向の電気抵抗には、インピーダンスが含まれる。

　補助電極６０は、対向して配置された第１電極６１と、第２電極６２とを有する。第１電極６１は電極面６１ａを有し、電極面６１ａは平面である。第２電極６２は電極面６２ａを有し、電極面６２ａは平面である。第１電極６１の電極面６１ａと、第２電極６２の電極面６２ａとは対向し、かつ平行に配置されている。補助電極６０は、第１電極６１と第２電極６２とを有する対電極である。
　補助電極６０を用いて懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの厚み方向の電気抵抗は、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの補助電極６０を構成する第１電極６１と第２電極６２の間の電気抵抗である。
　第１電極６１の電極面６１ａと、第２電極３６の電極面３６ａとは、それぞれ主流路３０の内面３０ｃに面して配置されている。第１電極６１の電極面６１ａと、第２電極６２の電極面６１ａとは、それぞれ主流路３０の内面３０ｃを構成しており、例えば、ＥＰを実施する際に、主流路３０に懸濁液Ｑとシース液ｓとが供給されると、シース液ｓと接する。
　第１電極６１は、配線１９ａにより測定部１９と電気的に接続されている。第２電極６２は、配線１９ｂにより測定部１９と電気的に接続されている。

　ＥＰ装置１０ａでは、判定部１８の測定部１９と補助電極６０を用いて、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの厚み方向の電気抵抗として、例えば、インピーダンスを測定する。補助電極６０の場合でも、図４に示すように懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定した状態の厚み方向の電気抵抗又はインピーダンスが予め測定されており、流れが安定であることを示す厚み方向の電気抵抗又はインピーダンスの範囲を予め設定する。予め設定された厚み方向の電気抵抗又はインピーダンスの範囲は、判定部１８に記憶されている。
　判定部１８は、補助電極６０を用いて測定された厚み方向の電気抵抗又はインピーダンスの測定値が予め設定された範囲内にある場合、流れが安定していると判定する。判定部１８の判定結果を示す情報を制御部１６に出力する。制御部１６は、受信した判定結果に基づいて電源部１４により懸濁液Ｑに電界を印加する等の各部を制御する。
　補助電極６０を電極対３４の主流路３０の下流側に設けることにより、電極対３４の下流側にある補助電極６０で、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定していれば、補助電極６０の上流側の電極対３４の間でも懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定しているとしている。

　ＥＰ装置１０ａは、補助電極６０を電極対３４の主流路３０の下流側に設ける構成としたが、これに限定されるものではなく、例えば、補助電極６０を電極対３４の主流路３０の上流側に設けてもよい。より具体的には、補助電極６０を、主流路３０において合流部５９と電極対３４との間に相当する領域に設けてもよい。
　補助電極６０を電極対３４の主流路３０の上流側に設けた場合、補助電極６０で、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定していれば、補助電極６０の下流側の電極対３４の間でも懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れが安定しているとしている。
　ＥＰ装置１０ａは、上述のＥＰ装置１０と同様の効果を得ることができる。ＥＰ装置１０ａでも、懸濁液Ｑへの電界の印加を適正に実施でき、その結果、導入効率及び生体活性物質の利用効率が高くなり、懸濁液Ｑの廃棄も少なくなり、生産性が高いＥＰを実施できる。

（エレクトロポレーション方法の第２の例）
　エレクトロポレーション方法（ＥＰ方法）の第２の例には、例えば、図９に示すＥＰ装置１０ａが用いられる。
　ＥＰ方法の第２の例は、ＥＰ方法の第１の例に比して、電極対３４の間において懸濁液及びシース液の流れの安定を判定する判定工程（ステップＳ１６）が、電極対３４の間における電気抵抗ではなく、補助電極６０を用いて測定した、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの厚み方向の電気抵抗である点が異なる。それ以外の工程は、ＥＰ方法の第１の例と同様の工程であるため、その詳細な説明は省略する。

　ステップＳ１６において、例えば、補助電極６０を用いて、判定部１８の測定部１９により懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの厚み方向の電気抵抗を測定して、補助電極６０を用いた厚み方向の電気抵抗に基づいて、流れの安定を判定する。例えば、上述のように流れが安定であることを示す懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの厚み方向の電気抵抗の範囲が予め設定されており、測定された、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの厚み方向の電気抵抗が予め設定された範囲内にある場合、判定部１８は、流れが安定していると判定する。
　なお、例えば、補助電極６０を電極対３４の主流路３０の上流側に設けた場合、ステップＳ１６（判定工程）では、電極対３４の流路における上流側において、補助電極６０により懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの厚み方向の電気抵抗を測定して、判定部１８が厚み方向の電気抵抗に基づいて、懸濁液Ｑ及びシース液ｓの流れの安定を判定する。判定部１８は、判定結果を示す情報を制御部１６に出力する。
　ＥＰ方法の第２の例は、ＥＰ方法の第１の例と同様の効果を得ることができる。

　上述のＥＰ装置及びＥＰ方法は、いずれも目的のタンパク質又はウイルス等の有用物質の製造に用いることができる。すなわち、有用物質の製造方法は、上述のＥＰ方法を含む。
　以下、ＥＰ装置の各部について説明する。

〔電極対の間の距離Ｄ〕
　電極対３４の間の距離Ｄ（図２、９参照）は、第１電極３５の電極面３５ａと第２電極３６の電極面３６ａとの対向方向における距離であり、１～１０ｍｍであることが好ましい。電極対の間の距離Ｄの下限値は、２ｍｍがより好ましく、３ｍｍが更に好ましい。電極対の間の距離Ｄの上限値は、６ｍｍがより好ましく、５ｍｍが更に好ましい。
　電極対の間の距離Ｄが大きくなり過ぎると、必要以上の電界が発生し、発熱、電極端部への電界集中が生じ、沸騰又は放電が発生して、生存率又は導入効率が低下する場合がある。発熱を防ぐ点からは、電極対の間の距離Ｄは、１～６ｍｍであることが好ましい。
　また、電極対の間の距離Ｄは１～３ｍｍであると、発熱及び放電の発生が抑制され、発熱又は放電による細胞等の生体由来物の生存率又は導入効率の低下も抑制されることから、更に好ましい。
　なお、電極対の間の距離Ｄは、流路基板５５の厚さに相当する。電極対の間の距離Ｄを、電極間ギャップ、又はギャップともいう。
　上述電極対の間の距離Ｄは、該当する部分の長さを、ノギス又はマイクロメーターを用いて測定できる。

＜電極対＞
　電極対３４を構成する第１電極３５及び第２電極３６は、例えば、金属材料又は炭素材料で構成される。具体的には、国際公開第２０２３／１５７６７３号に記載の電極と同様の構成が採用できる。

（厚さ）
　第１電極３５の厚さ及び第２電極３６の厚さは特に制限されないが、０．５～１０ｍｍであることが好ましく、１～５ｍｍであることがより好ましい。
　上述の第１電極３５の厚さ及び第２電極３６の厚さは、いずれも該当する部分の厚さを、ノギス又はマイクロメーターを用いて測定できる。

＜補助電極＞
　補助電極６０を構成する第１電極６１及び第２電極６２は、電極対３４を構成する第１電極３５及び第２電極３６と同様の構成であり、例えば、上述の金属材料で構成される。
　第１電極６１の厚さ及び第２電極６２の厚さについても、特に制限されないが、第１電極３５及び第２電極３６と同様に０．５～１０ｍｍであることが好ましく、１～５ｍｍであることがより好ましい。
　上述の第１電極６１の厚さ及び第２電極６２の厚さは、いずれも該当する部分の厚さを、ノギス又はマイクロメーターを用いて測定できる。
　電極対の間の距離Ｄについても、特に制限されないが、第１電極３５及び第２電極３６と同様であり、１～１０ｍｍであることが好ましく、２～５ｍｍであることがより好ましく、２～３ｍｍが更に好ましい。
　補助電極６０は、主流路３０の延在方向Ｄ_Ｌにおける長さが電極対３４よりも短いことが好ましく、２～１０ｍｍであることがより好ましい。

＜流路デバイスの構成＞
　図２の流路デバイス１１の第１導入部５６と第１基板５２と流路基板５５と第２基板５４と第２導入部５８とを構成する材料は、特に限定されるものではない。
　これらを構成する材料は、例えば、懸濁液、又は懸濁液及びシース液に対して十分な耐性を有し、かつ、必要な剛性を確保できるものであれば、各種の材料が利用可能である。

＜懸濁液＞
　エレクトロポレーション（ＥＰ）の対象となる懸濁液は、生体由来物と生体活性物質とを含有する。また、懸濁液は、培地がＥＰ用バッファーに交換されたものではなく、ＥＰ用バッファーが添加されたものではない。
　懸濁液は、電気伝導度が２ｍＳ／ｃｍ以上であることが好ましく、３ｍＳ／ｃｍ以上であることがより好ましく、４ｍＳ／ｃｍ以上であることが更に好ましい。通常、懸濁液は、ＥＰ前に、培養液の培地をＥＰ用バッファーに交換されて、懸濁液中の培地はＥＰ用バッファーに置き換わり、懸濁液の電気伝導度は小さくなり、電界印加に伴う気泡の発生は少ない。上記の電気伝導度の懸濁液は、通常はＥＰに使用できないが本発明の方法では使用できる。
　電気伝導度（ｍＳ／ｃｍ）は、電気伝導率計を用い、温度２５℃の懸濁液を測定した値である。電気伝導度（ｍＳ／ｃｍ）は、導電率と同義であり、導電率は電気伝導度と単位も同じである。
　電気伝導度を調整する方法としては、例えば、懸濁液に含まれる生体由来物の体積分率を調整する方法、及び培地の種類を変える方法が挙げられる。

　通常、ＥＰ対象の懸濁液の培地（生体由来物以外の液体成分）は、培養液の培地をＥＰ用バッファーに交換するため、ポロキサマー含有量が０．１ｇ／Ｌ未満である。また塩化ナトリウムの濃度は０．０１ｇ／Ｌ未満である。
　他方、本発明では、培養液の培地をＥＰ用バッファーに交換しないため、培地のポロキサマー含有量が０．１ｇ／Ｌ以上である。ポロキサマー含有量は１ｇ／Ｌ以上でもよく、３ｇ／Ｌ以上でもよく、５ｇ／Ｌ以上でもよい。本発明では、ポロキサマー含有量が多くても、気泡による懸濁液Ｑへの電界の印加の阻害を抑制できる。
　ＥＰ対象の懸濁液の培地は、塩化ナトリウムを含有し、塩化ナトリウムの含有量が０．００１ｇ／Ｌ以上であり、より好ましくは０．０１ｇ／Ｌ以上であり、０．１ｇ／Ｌ以上であり、１ｇ／Ｌ以上である。
　上記含有量は、懸濁液を３００Ｇで１５分間遠心分離し、遠心上清液を採取し、高速液体クロマトグラフィーにて測定することで求めることができる。
　懸濁液の流量は、１ｍＬ／分以上であることが好ましく、２ｍＬ／分以上であることがより好ましく、３ｍＬ／分以上であることが更に好ましい。懸濁液の流量の上限は１０００ｍＬ／分であることが好ましい。
　懸濁液の流量を１ｍＬ／分以上とすることにより、ＥＰの処理量を多くできる点で好ましい。
　上記流量は、送液流路中に各種流量センサ（超音波式、コリオリ式、熱ＭＥＭＳ式）を設置して測定することができる。あるいは、上記流量は、回収容器の重量変化と送液時間から算出してもよい。

（生体由来物）
　生体由来物は特に制限されないが、具体例としては、細胞、細胞小器官、細胞内顆粒及び小胞等、並びに菌等が挙げられる。なかでも、本発明の効果等がより優れる理由から、細胞であることが好ましく、動物細胞であることがより好ましく、哺乳類細胞であることが更に好ましく、ヒト又はチャイニーズハムスター由来細胞であることが最も好ましい。細胞の具体例としては、ヒトＴ細胞、ＨＥＫ（Ｈｕｍａｎ　Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ　Ｋｉｄｎｙ）２９３、Ａ５４９、ＳＦ９、ＥＢ６６、Ｄａｕｄｉ、Ｈｅｌａ、Ｖｅｒｏ、ＭＤＣＫ、ＢＨＫ（Ｂａｂｙ　Ｈａｍｓｔｅｒ　Ｋｉｄｎｅｙ）、ＣＨＯ（Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｈａｍｓｔｅｒ　Ｏｖａｒｙ）、ＮＳ０、ＳＰ２／０、ハイブリドーマ等が挙げられる。医薬品製造の点では、ＨＥＫ２９３又はＣＨＯでの遺伝子導入が最も使われる。

（生体活性物質）
　生体活性物質は、核酸（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ）及びタンパク質等の、生体由来物に導入されることにより、生体由来物に何らかの作用をもたらす物質である。核酸としては、例えば、プラスミド、線形ＤＮＡ、ｍＲＮＡ（messenger ＲＮＡ）があり、プラスミドが特に好ましい。
　懸濁液における生体活性物質の濃度は、１～１０００μｇ／ｍＬが好ましく、２．５～５００μｇ／ｍＬがより好ましく、１０～２００μｇ／ｍＬが更に好ましい。
　懸濁液中の培地に対する、懸濁液中の生体活性物質の濃度は、１０～５００μｇ／ｍＬが好ましい。
　懸濁液における生体由来物あたりの生体活性物質濃度は、２０ｐｇ／個以下が好ましく、５ｐｇ／個以下がより好ましく、１ｐｇ／個以下が更に好ましく、０．５ｐｇ／個以下が特に好ましい。懸濁液における生体由来物あたりの生体活性物質濃度が低いほど、生体由来物あたりの生体活性物質の使用量を低減できるため、コストを低減することができる。

　懸濁液Ｑにおける生体由来物の濃度には制限はないが、懸濁液Ｑは生体由来物の体積分率が２０％以上であることが好ましい。
　ＥＰにおいては、懸濁液Ｑにおける生体由来物の濃度を高くすることで、同量の低濃度の懸濁液を導入した場合に比して生体由来物の処理量を多くできる。例えば、濃度が２倍であれば、２倍の処理を行うことが可能になり、ＥＰのスループット及び生体由来物の利用効率を向上することができる。
　加えて、ＥＰでは、上述のように電気泳動によって生体由来物の中に生体活性物質が入る。そのため生体由来物の濃度を高くしても、それに応じて生体活性物質の量を増やす必要が無いので、生体活性物質の利用効率も向上できる。

　懸濁液Ｑは生体由来物の体積分率が２０％以上であることにより、上述した効果を好適に得て、効率の良い処理を行うことができる。
　また、懸濁液Ｑの濃度が高過ぎると、細胞懸濁液の粘度が急激に増加し、流路が詰まってしまう可能性が生じる。しかしながら、懸濁液Ｑは生体由来物の体積分率を７０％以下とすることにより、懸濁液Ｑの濃度が高過ぎることに起因する流路の詰まりを好適に防止できる。
　懸濁液Ｑにおける生体由来物の体積分率は、３０％以上がより好ましく、４０％以上がより好ましく、５０％以上が更に好ましい。懸濁液Ｑの生体由来物の体積分率の上限は、６５％がより好ましく、６０％が更に好ましい。
　上記懸濁液Ｑにおける生体由来物の体積分率は、生体由来物の平均直径及び濃度（単位体積あたりの個数）を画像解析（例えば、Ｖｉ－ＣＥＬＬ　ＸＲ（ベックマン・コールター）等）により測定し、体積分率（＝４÷３×（平均直径÷２）³×π×濃度×１００（％））を算出することができる。なお、体積分率は、生体由来物が球であるとして算出している。より具体的には、例えば、懸濁液Ｑにおける生体由来物の平均直径が２０μｍ、濃度が４０×１０^６個／ｍＬ（ミリリットル）である場合、懸濁液Ｑにおける生体由来物の体積分率は１７％と算出できる。

　培地としては、通常の動物細胞の培養で使用されている液状培地を用いることができる。培地としては、ＰＢＳ（リン酸緩衝食塩水）をベースとしたＨＥＫ２９３等の細胞の培養に最適化した培地が各社から販売されている。培地は、アミノ酸、塩、糖（グルコース等）類、ビタミン、ホルモン、増殖因子、脂質、微量元素等を含むが、特に限定されない。培地のｐＨ（水素イオン指数）は６～８であり、好ましくは６．８～７．６であり、より好ましくは７．２～７．６である。
　培地には、更に消泡剤を添加してもよい。消泡剤としては、シリコーン系が好ましく、ジメチコンが特に好ましい。消泡剤としては、ポリジメチルシロキサンを含むものが好ましく、より好ましくはポリジメチルシロキサンに微粉末シリカを含むもの（シメチコン）である。培養液量に対するシメチコンの添加速度は特に限定されないが、好ましくは５ｍｇ／ｈｒ／Ｌ以下であり、より好ましくは２ｍｇ／ｈｒ／Ｌ以下である。
　培地には、ポリオキシプロピレンとポリオキシエチレンのブロック共重合体を添加してもよい。ポリオキシプロピレンとポリオキシエチレンの共重合体としては、ポロキサマーが好ましく、より好ましくは、ポロキサマー－１８８である。

　本発明においては、電極対の間の一部で懸濁液流の厚さＤｍが１～１０ｍｍとなっていればよく、電極対の間かつ電極上流端部で懸濁液流の厚さＤｍが１～１０ｍｍとなっていればよい。
　上述電極対の間における懸濁液流の少なくとも一部の厚さは、細胞濃度が８０％以上の懸濁液流を特定し、特定した懸濁液流の厚さを測定する。

＜シース液＞
　シース液流に使用されるシース液は、懸濁液以外の液体であれば、各種の液体が利用可能である。中でも、シース液としては、懸濁液に用いられる培地が好ましく例示される。この培地は、細胞等の生体由来物の増殖に用いた培地であることが好ましい。
　上述のようにシース液流は２つある。２つのシース液流は、それぞれのシース液の流量が、０．１ｍＬ／分以上であることが好ましい。シース液の流量の上限は、懸濁液の流量以下であることが好ましい。
　シース液の流量を０．１ｍＬ／分以上とすることにより、懸濁液が電極に接触することを好適に防止できる点で好ましい。また、シース液の流量を、懸濁液の流量以下とすることにより、シース液の量を抑制できる、懸濁液の希釈を抑制できる等の点で好ましい。

　ポンプは、懸濁液を１ｍＬ／分以上の流量で送液することが好ましく、２ｍＬ／分以上の流量で送液することがより好ましく、３ｍＬ／分以上の流量で送液することが更に好ましい。ポンプによる懸濁液の流量の上限は１０ｍＬ／分であることが好ましい。
　ポンプは、２つのシース液流のうち、それぞれのシース液流を形成するシース液を０．１ｍＬ／分以上の流量で送液することが好ましい。２つのシース液流のうち、それぞれのシース液流を形成するシース液のポンプによる流量の上限は、懸濁液の流量以下であることが好ましい。

　ここで、ＥＰでは、電界が印加されると、その時点で、生体由来物の膜（又は殻）に孔が開き、電気泳動によって生体由来物内に生体活性物質が入る。
　生体由来物の膜に形成された孔は、継時と共に徐々に閉じるが、孔が閉じる前に、例えば、懸濁液の希釈等の操作により生体由来物の外部の液成分（浸透圧、イオン濃度等）が急変すると、孔を介したイオン及び媒質の移動等により、生体由来物内における成分比率の急変、並びに、変形及び膨張等のダメージを受けてしまう。
　その結果、例えば、細胞への物質導入の場合には生体由来物の生存率が低下して、ＥＰにおける導入効率及び生体活性物質の利用効率が低くなってしまう可能性がある。
　シース液流の厚さｄｓが懸濁液流の厚さＤｍよりも大きく、懸濁液Ｑの希釈率が高いと、例えば、細胞への物質導入の場合であれば、生体由来物の生存率が低下し（ダメージを受け）、ＥＰ効率が低くなる場合がある。発明者らが検討した結果、例えば、細胞懸濁液を培地シース液流で希釈する場合、希釈率が２倍以上で、細胞生存率の顕著な低下が見られる場合が多く確認された。
　このため、上述のように、懸濁液流との合流時におけるシース液流の厚さの合計を、規制領域における懸濁液流の厚さ以下、すなわち、懸濁液Ｑの希釈率を２倍以下とすることにより、生体由来物に大量のシース液ｓが混入することに起因する不都合、例えば、細胞への物質導入であれば生体由来物の生存率低下を抑制して、効率の良い処理を行うことが可能になる。

　この効果を、より好適に得られる点で、懸濁液流との合流時におけるシース液流の厚さの合計は、上述のように規制領域における懸濁液流の厚さの１倍以下であることが好ましく、０．８倍以下がより好ましく、０．５倍以下が更に好ましい。すなわち、電極対の下流における懸濁液Ｑの希釈率が、上述のように２倍以下であることが好ましく、１．８倍以下であることがより好ましく、１．５倍以下であることが更に好ましい。

＜エレクトロポレーションの電圧＞
　エレクトロポレーションの電圧は、電極対の間の懸濁液に印加される電界が、所望の電界強度になるように、懸濁液流の厚さ、懸濁液流の電気伝導度（導電率）、シース液流の厚さ、及びシース液流の電気伝導度（導電率）等をふまえて、懸濁液に印加される電界が、所望の電界強度となるように設定する。
　なお、ＥＰにおける導入効率及び生体活性物質の利用効率の低下を引き起こす可能性が有るので、電極の電気抵抗は懸濁液及びシース液の抵抗よりも十分に低いことが好ましい。
　懸濁液に印加する電界の最適値は、生体由来物の種類及びサイズ等によって変わるが、通常、１００～２０００Ｖ／ｃｍ程度である。
　電圧はパルス電圧であることが好ましい。また、電極反応（電気分解によるガスの発生、電極劣化等）を均一化するためにバイポーラパルス（プラスとマイナスを交互）としてもよい。

＜パルス幅＞
　パルス幅の最適値は、生体由来物の種類等によって変わるが、通常０．１～１００ｍｓ（ミリ秒）、好ましくは１～１０ｍｓ程度である。

＜パルス周期（パルス間隔）＞
　パルス周期は、生体由来物が電極（電極長Ｌ（図２、９参照））を通過する時間に同期させる（整数倍にする）ことが好ましい。例えば、生体由来物が電極（電極長Ｌ）を通過する間に、平均して１～５回、好ましくは１回のパルス電圧を印加する。
　なお、生体由来物が電極（電極長Ｌ）を通過する時間は、流量と流路断面積とによって決まる。流路の断面の形状が、全ての内角が９０°の四角形の場合、流路断面積は、（電極幅Ｗ）×（電極対の間の距離Ｄ）である。なお、電極幅Ｗは図１に示し、電極対の間の距離Ｄは図２、９に示している。

　本明細書には、国際出願番号ＰＣＴ／ＪＰ２０２４／０１２３９３の（１）細胞の前培養、（２）細胞濃度の調整（濃縮等）、（３）核酸の添加及び混合、（４）エレクトロポレーション（遺伝子導入）、（５）ウイルス産生のための培養（本培養）、並びに（６）ウイルスの回収及び精製の内容が援用され、これらは参照によって本明細書に組み込まれる。

＜有用物質の製造方法＞
　上述のように有用物質の製造方法は、本発明のＥＰ方法を含む。
　有用物質の製造方法において、好ましくは、生体由来物は細胞であり、生体活性物質は核酸である。本発明のＥＰ方法によって、細胞に核酸を導入し、核酸が導入された細胞を培養することにより、細胞に有用物質を生産させる。

　有用物質の種類は特に限定されないが、好ましくはタンパク質又はウイルスである。
　有用物質としては、例えば、組み換えポリペプチド鎖、組み換え分泌ポリペプチド鎖、抗原結合タンパク質、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、マウス抗体、バイスペシフィック抗体、Ｆｃ融合タンパク質、断片化免疫イムノグロブリン、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、及び非エンベロープウイルスが挙げられる。
　非エンベロープウイルスは、より具体的には、アデノ随伴ウイルス、アデノウィルス、レンチウイルス、バキュロウイルス、及びレトロウイルス等が挙げられる。非エンベロープウイルスは、当技術分野で公知であり、国際公開第２０１５／００５４３０号に記載されており、これらは参照によって本明細書に組み込まれる。

　有用物質は、好ましくはヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、マウス抗体、及びアデノ随伴ウイルスである。
　有用物質の製造方法は、回収及び精製工程を有してもよい。

　本発明のエレクトロポレーション方法、有用物質の製造方法及びエレクトロポレーション装置は、遺伝子治療薬の製造等に好適に利用可能である。
　本発明は、基本的に以上のように構成されるものである。以上、本発明のエレクトロポレーション方法、有用物質の製造方法及びエレクトロポレーション装置について詳細に説明したが、本発明は上述の実施形態に限定されず、本発明の主旨を逸脱しない範囲において、種々の改良又は変更をしてもよいのはもちろんである。

　１０、１０ａ　ＥＰ装置
　１１　　流路デバイス
　１１ａ　表面
　１１ｂ　裏面
　１２ａ、１２ｂ、２０ａ、２０ｂ　ポンプ
　１３　第１チューブ
　１４　電源部
　１５　配管
　１６　制御部
　１８　判定部
　２１ａ、２１ｂ　第２チューブ
　２２、２３　タンク
　２４　培養装置
　２５　混合器
　２６　廃棄槽
　２７　容器
　２８　第３チューブ
　２９　バルブ
　３０　主流路
　３０ａ、３０ｂ　端
　３０ｃ　内面
　３１　流入口
　３１ａ　第１流入口
　３１ｂ　第２流入口
　３２　排出口
　３４　電極対
　３５、６１　第１電極
　３５ａ、３６ａ、６１ａ、６２ａ　電極面
　３６、６２　第２電極
　３７　空間
　３８、３９ａ、３９ｂ　センサ
　４０　エレクトロポレーションシステム
　５２　第１基板
　５２ａ、５２ｂ、５４ａ、５６ａ、５６ｂ、５８ａ　貫通孔
　５２ｃ、５４ｃ　シース液供給口
　５４　第２基板
　５５　流路基板
　５５ａ、５５ｂ　凸部
　５５ｃ　下流側端部
　５５ｄ　懸濁液供給口
　５６　第１導入部
　５８　第２導入部
　５９　合流部
　６０　補助電極
　６４、６５　シース液流路
　７０、７２　シース液の流量変化を示す線
　７１　懸濁液の流量変化を示す線
　Ｂｓ　界面
　Ｄ　距離
　Ｄｄ　送液方向
　Ｄｆ　方向
　Ｄ_Ｌ　延在方向
　Ｄｍ、ｄｓ　厚さ
　Ｄｓ　積層方向
　Ｈｐ　水平面
　Ｌ　電極長
　Ｑ　懸濁液
　Ｗ　電極幅
　ｓ　シース液
　ｘ、ｙ　方向
　ｚ　鉛直方向

Claims (18)

1. 　電極対の間を生体由来物と生体活性物質とを含有する懸濁液と、シース液とを、前記シース液で前記懸濁液を挟むようにして主流路に連続的に送液し、前記電極対によって前記懸濁液に電界を印加することで、生体由来物に生体活性物質を導入する、エレクトロポレーション方法であって、
   　前記電極対の間において前記懸濁液及び前記シース液の流れが安定した後に、前記懸濁液に電界を印加する印加工程を有する、エレクトロポレーション方法。
2. 　前記懸濁液を挟むように前記シース液を前記主流路に送液する際に、前記懸濁液の供給に第１チューブが用いられ、前記シース液の供給に第２チューブが用いられ、
   　前記第１チューブにおいて前記懸濁液の先頭の待機位置が予め定められ、前記第２チューブにおいて前記シース液の先頭の待機位置が予め定められており、
   　前記懸濁液及び前記シース液の全ての先頭が、前記待機位置に到達した後に、前記懸濁液及び前記シース液の送液を開始する、請求項１に記載のエレクトロポレーション方法。
3. 　前記印加工程の前に、前記電極対の間において前記懸濁液及び前記シース液の前記流れの安定を判定する判定工程を有し、
   　前記判定工程は、前記電極対の間における前記懸濁液及び前記シース液の前記流れの電気抵抗を測定して、前記電気抵抗に基づいて、前記流れの安定を判定するか、又は、
   　前記判定工程は、前記第１チューブの前記懸濁液の流量及び前記第２チューブの前記シース液の流量の安定性を検出して前記流れの安定を判定する、請求項１又は２に記載のエレクトロポレーション方法。
4. 　前記判定工程は、前記電極対の前記主流路における上流側又は下流側において、前記電極対の間における前記懸濁液及び前記シース液の前記流れの前記電気抵抗を測定して、前記電気抵抗に基づいて、前記流れの安定を判定する、請求項３に記載のエレクトロポレーション方法。
5. 　前記懸濁液及び前記シース液を送液するタイミングは、前記懸濁液と前記シース液とで同時である、請求項１又は２に記載のエレクトロポレーション方法。
6. 　前記懸濁液及び前記シース液を送液するタイミングは、前記懸濁液よりも前記シース液の方が先である、請求項１又は２に記載のエレクトロポレーション方法。
7. 　電極対の間を生体由来物と生体活性物質とを含有する懸濁液と、シース液とを、前記シース液で前記懸濁液を挟むようにして主流路に連続的に送液し、前記電極対によって前記懸濁液に電界を印加することで、生体由来物に生体活性物質を導入する、エレクトロポレーション方法であって、
   　前記懸濁液を挟むように前記シース液を前記主流路に送液する際に、前記懸濁液の供給に第１チューブが用いられ、前記シース液の供給に第２チューブが用いられ、
   　前記第１チューブにおいて前記懸濁液の先頭の待機位置が予め定められ、前記第２チューブにおいて前記シース液の先頭の待機位置が予め定められており、
   　前記懸濁液及び前記シース液の全ての先頭が、前記待機位置に到達したことを検知した後に、前記懸濁液及び前記シース液の送液を開始し、
   　前記懸濁液及び前記シース液の前記送液後、前記電極対の間において前記懸濁液及び前記シース液の流れが安定した後に、前記懸濁液に電界を印加する、エレクトロポレーション方法。
8. 　前記印加工程では、前記懸濁液及び前記シース液の送液を開始後、予め設定した時間経過後に、前記懸濁液に前記電界を印加する、請求項１又は７に記載のエレクトロポレーション方法。
9. 　前記第１チューブにおける前記懸濁液の前記先頭の前記位置は、超音波センサで検知される、請求項７に記載のエレクトロポレーション方法。
10. 　請求項１～９のいずれか１項に記載のエレクトロポレーション方法を含む、有用物質の製造方法。
11. 　生体由来物と生体活性物質とを含有する懸濁液を連続的に送液して電界を印加することで、生体由来物に生体活性物質を導入する、エレクトロポレーション装置であって、
    　主流路と、
    　対向して配置された電極を備え、前記主流路を流れる前記懸濁液に前記電界を印加する電極対と、
    　前記主流路に前記懸濁液を供給する懸濁液供給口と、
    　前記主流路内の前記懸濁液供給口の下流側に設けられ、前記主流路にシース液を供給するシース液供給口と、
    　前記懸濁液及び前記シース液を送液するポンプと、
    　前記電極対の間において前記懸濁液及び前記シース液の流れが安定した後に、前記懸濁液に電界を印加する電源部とを有する、エレクトロポレーション装置。
12. 　前記シース液供給口と連通され、前記主流路において前記懸濁液に前記シース流を合流させるシース液流路と、
    　前記懸濁液供給口に接続され、前記懸濁液を前記主流路に供給するための第１チューブと、前記シース液供給口に接続され、前記シース液を前記主流路内に供給するための第２チューブとを有し、
    　前記第１チューブにおいて前記懸濁液の先頭の待機位置が予め定められ、前記第２チューブにおいて前記シース液の先頭の待機位置が予め定められており、
    　前記ポンプにより、前記懸濁液及び前記シース液の全ての先頭が、前記待機位置に到達した後に、前記懸濁液及び前記シース液の送液を開始させる制御部を更に有する、請求項１１に記載のエレクトロポレーション装置。
13. 　前記電極対の間において前記懸濁液及び前記シース液の前記流れの安定を判定する判定部を有し、
    　前記判定部は、前記電極対の間における前記懸濁液及び前記シース液の前記流れの電気抵抗を測定して、前記電気抵抗に基づいて、前記流れの安定を判定するか、又は、
    　前記判定部は、前記第１チューブの前記懸濁液の流量及び前記第２チューブの前記シース液の流量の安定性を検出して前記流れの安定を判定する、請求項１２に記載のエレクトロポレーション装置。
14. 　前記電極対の前記主流路における上流側又は下流側に設けられた補助電極を有し、
    　前記判定部は、前記補助電極を用いて前記懸濁液及び前記シース液の前記流れの厚み方向の前記電気抵抗を測定して、前記電気抵抗に基づいて、前記流れの安定を判定する、請求項１３に記載のエレクトロポレーション装置。
15. 　前記第１チューブにおける前記懸濁液の先頭の位置、及び前記第２チューブにおける前記シース液の先頭の位置を検知するセンサを有し、
    　前記制御部は、前記センサにより検知された、前記第１チューブにおける前記懸濁液の前記先頭の位置、及び前記第２チューブにおける前記シース液の前記先頭の位置に基づいて、前記ポンプによる前記懸濁液及び前記シース液の送液を制御する、請求項１２に記載のエレクトロポレーション装置。
16. 　生体由来物と生体活性物質とを含有する懸濁液を連続的に送液して電界を印加することで、生体由来物に生体活性物質を導入する、エレクトロポレーション装置であって、
    　主流路と、
    　対向して配置された電極を備え、前記主流路を流れる前記懸濁液に前記電界を印加する電極対と、
    　前記懸濁液に前記電界を印加する電源部と、
    　前記主流路に前記懸濁液を供給する懸濁液供給口と、
    　前記主流路内の前記懸濁液供給口の下流側に設けられ、前記主流路に前記シース液を供給するシース液供給口と、
    　前記懸濁液及び前記シース液を送液するポンプと、
    　前記懸濁液供給口に接続され、前記懸濁液を前記主流路に供給するための第１チューブと、
    　前記シース液供給口に接続され、前記シース液を前記主流路内に供給するための第２チューブと、
    　前記第１チューブにおける前記懸濁液の先頭の位置、及び前記第２チューブにおける前記シース液の先頭の位置を検知するセンサと、
    　前記ポンプによる前記懸濁液及び前記シース液の送液を制御する制御部とを有し、
    　前記第１チューブにおいて前記懸濁液の先頭の待機位置が予め定められ、前記第２チューブにおいて前記シース液の先頭の待機位置が予め定められており、
    　前記制御部は、前記センサにより前記懸濁液及び前記シース液の全ての先頭が、前記待機位置に到達したことが検知された後に、前記ポンプにより前記懸濁液及び前記シース液の前記送液を開始させ、
    　前記懸濁液及び前記シース液の前記送液後、前記電極対の間において前記懸濁液及び前記シース液の流れが安定した後に、前記電源部により前記懸濁液に前記電界を印加する、エレクトロポレーション装置。
17. 　前記制御部は、前記ポンプにより前記懸濁液及び前記シース液の送液を開始し、予め設定した時間経過後に、前記電源部により前記懸濁液に前記電界を印加する、請求項１２又は１５に記載のエレクトロポレーション装置。
18. 　前記第１チューブにおける前記懸濁液の前記先頭の前記位置を検知する前記センサは、超音波センサである、請求項１５又は１６に記載のエレクトロポレーション装置。