WO2022243319A1 - Device and method for decellularising and/or purifying tissue - Google Patents

Device and method for decellularising and/or purifying tissue Download PDF

Info

Publication number
WO2022243319A1
WO2022243319A1 PCT/EP2022/063324 EP2022063324W WO2022243319A1 WO 2022243319 A1 WO2022243319 A1 WO 2022243319A1 EP 2022063324 W EP2022063324 W EP 2022063324W WO 2022243319 A1 WO2022243319 A1 WO 2022243319A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
tissue
container
liquid
rinsing liquid
holder
Prior art date
Application number
PCT/EP2022/063324
Other languages
German (de)
French (fr)
Inventor
Robert Mau
Rainer Bader
Hermann Seitz
Christoph DROBEK
Anika Jonitz-Heincke
Mathias Lorenz
Daniela SCHWERDT
Original Assignee
Universität Rostock
Hochschule Wismar
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Universität Rostock, Hochschule Wismar filed Critical Universität Rostock
Publication of WO2022243319A1 publication Critical patent/WO2022243319A1/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B17/00—Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets
    • A61B17/32—Surgical cutting instruments
    • A61B17/320068—Surgical cutting instruments using mechanical vibrations, e.g. ultrasonic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B17/00—Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets
    • A61B17/32—Surgical cutting instruments
    • A61B17/3203—Fluid jet cutting instruments
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
    • A61F2/02—Prostheses implantable into the body
    • A61F2/30—Joints
    • A61F2/46—Special tools or methods for implanting or extracting artificial joints, accessories, bone grafts or substitutes, or particular adaptations therefor
    • A61F2/4644—Preparation of bone graft, bone plugs or bone dowels, e.g. grinding or milling bone material
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
    • A61L2/0005—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor for pharmaceuticals, biologicals or living parts
    • A61L2/0011—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor for pharmaceuticals, biologicals or living parts using physical methods
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
    • A61L2/0005—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor for pharmaceuticals, biologicals or living parts
    • A61L2/0082—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor for pharmaceuticals, biologicals or living parts using chemical substances
    • A61L2/0088—Liquid substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/3683—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/3683—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment
    • A61L27/3691—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment characterised by physical conditions of the treatment, e.g. applying a compressive force to the composition, pressure cycles, ultrasonic/sonication or microwave treatment, lyophilisation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B17/00—Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets
    • A61B2017/00969—Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets used for transplantation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B17/00—Surgical instruments, devices or methods, e.g. tourniquets
    • A61B17/32—Surgical cutting instruments
    • A61B17/322—Skin grafting apparatus
    • A61B2017/3225—Skin grafting apparatus with processing of harvested tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
    • A61F2/02—Prostheses implantable into the body
    • A61F2/30—Joints
    • A61F2/46—Special tools or methods for implanting or extracting artificial joints, accessories, bone grafts or substitutes, or particular adaptations therefor
    • A61F2/4644—Preparation of bone graft, bone plugs or bone dowels, e.g. grinding or milling bone material
    • A61F2002/4646—Devices for cleaning bone graft
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2202/00—Aspects relating to methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects
    • A61L2202/10—Apparatus features
    • A61L2202/12—Apparatus for isolating biocidal substances from the environment
    • A61L2202/122—Chambers for sterilisation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2202/00—Aspects relating to methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects
    • A61L2202/10—Apparatus features
    • A61L2202/14—Means for controlling sterilisation processes, data processing, presentation and storage means, e.g. sensors, controllers, programs

Definitions

  • the invention relates to an apparatus and a method for decellularizing and/or cleaning tissue.
  • the invention can be assigned to the field of biomedical engineering.
  • the tissue prior to the implantation of allografts and xenografts, the tissue is pretreated by extensive chemical sterilization and cleaning methods.
  • aggressive media such as aqueous solutions with detergents, peroxides, organic solvents, acids and alcohols or beta and gamma rays is established (Putzer et al., 2014; Hiemer et al., 2016).
  • this pre-treatment - which is necessary according to the current state of the art - can be detrimental to the integrity and mechanical properties of the allograft of any type.
  • cartilage tissue can be dehydrated or its protein structures denatured (Benders et al., 2013; Hiemer et al., 2016), the biomechanical properties of bone tissue can be negatively affected (Haimi et al., 2008), and lead to ligament replacement in allografts even moderate doses of radiological irradiation or chemical treatment to damage (Lansdown et al., 2017).
  • Mechanical methods such as ultrasound, water jet or shear flow enable a gentle decellularization of a wide variety of tissues without resorting to aggressive chemical media. Cleaning with mechanical methods, especially in combination with prior treatment of the allografts with high pressure (HHD treatment), can lead to rapid, inexpensive and, above all, effective tissue devitalization.
  • HHD treatment high pressure
  • a device that enables a uniform, reproducible allograft or xenograft treatment in automated processes in a rinsing chamber based on the mechanical methods mentioned above and can thus provide biomechanically and biologically optimized replacement tissue is currently not known.
  • the publication EP 0988069 B1 discloses a method for the treatment of fixed biological tissue, which method is intended to inhibit the calcification of the biological tissue after its implantation in a mammalian body.
  • the method includes contacting the biological tissue with a treatment solution, causing relative movement between the tissue and the solution, and heating the solution.
  • An additional treatment of the tissue with ultrasound is not disclosed.
  • the publication DE 19508279 C1 discloses a device which has a built-in UV lamp and a vessel for the blood or tissue extract to be illuminated in a housing, the blood and tissue extract being placed in the radiation range of the lamp and driven by a rotary drive can be rotated in the radiation range. An additional treatment of the tissue with ultrasound is not disclosed. Presentation of the invention
  • a further object is to provide a device by means of which tissue materials of different types can be decellularized and cleaned in an automated process.
  • the device for for:
  • Decellularizing and/or cleaning tissue has the following components: a liquid-tight container, at least one ultrasound source for emitting an ultrasound signal, at least one liquid jet generator for providing a jet of rinsing liquid, at least one tissue holder for holding the tissue.
  • the tissue holder is placed in the container.
  • the at least one ultrasonic source is arranged such that the ultrasonic signal is transmitted onto the tissue in the tissue holder, and the at least one liquid jet generator is arranged such that the jet of irrigation liquid is directed onto the tissue in the tissue holder.
  • the device has a housing in which the liquid-tight container and/or the at least one ultrasound source and/or the at least one liquid jet generator is/are arranged.
  • the tissue holder is movably arranged in the liquid-tight container.
  • the tissue holder is movably arranged in the container that the tissue holder is driven by the impingement of the liquid jet on the tissue holder and/or on the tissue.
  • the tissue holder is movably mounted in the container in such a way that it can be driven by a drive device.
  • the drive device can be a motor unit, for example, which is arranged outside the container or waterproof inside the container.
  • the drive device can also be the ultrasound source or, as already described, the liquid jet itself, which is generated, for example, with a pump and/or with a nozzle.
  • the movement of the tissue or the tissue support can be, for example, a rotational movement, a translational movement or a combination thereof.
  • the tissue holder is configured in a tissue-specific manner for receiving a type of tissue.
  • the types of tissue which are preferably of human and animal origin, can be soft tissue or flart tissue, for example.
  • the tissue materials can be used as tissue samples in their original form as taken. However, the tissue can also be in the form of granules or other shapes.
  • the tissue holder for tissue-specific tissue recording can have, for example, a frame and/or a grid and/or a clamp holder and/or a screw holder. Other equivalent attachment and/or flapping options for the tissue/tissue samples are conceivable.
  • the liquid-tight container of the device has a drain.
  • the device has a pipe and pump system which is designed in such a way that the to supply at least one liquid jet generator for providing the jet of washing liquid with washing liquid and/or to remove the washing liquid from the liquid-tight container by means of the drain.
  • the pipe and pump system preferably has a reservoir in which the flushing liquid is arranged.
  • the pipe and pumping system has at least one pump which supplies the liquid jet generator with the flushing liquid at the pressure of the hole.
  • the device according to the invention has a filter system which is designed in such a way that the rinsing liquid is subjected to sterile filtration.
  • the filter system is arranged, for example, in the pipe and pump system.
  • the filter system preferably has a vacuum filter and/or a vacuum pump.
  • the device also has a control unit which is designed in such a way to control the ultrasound source and/or the pump system and/or the liquid jet generator and/or the drive device of the tissue holder.
  • the at least one ultrasound source has at least one sonotrode, by means of which the ultrasound signals from the ultrasound source are transmitted to the container and/or the rinsing liquid and/or the tissue.
  • the container is preferably designed as a disposable plastic product.
  • water and/or isotonic saline and/or a buffer solution such as phosphate buffered saline and/or Ringer's solution and/or a cell culture medium.
  • a buffer solution such as phosphate buffered saline and/or Ringer's solution and/or a cell culture medium.
  • Other media that can be used as rinsing liquid are conceivable.
  • the object is also achieved by means of a method for
  • Decellularizing and/or cleaning tissue having the following method steps: a. Inserting and fixing the tissue in a liquid-tight container and b. introducing rinsing liquid into the container (3) and carrying out an ultrasonic treatment of the tissue (2) and/or c. Application of rinsing liquid to the tissue (2) for treating the tissue with pressure and/or shear flow forces and/or d. introducing irrigation fluid into the container (3) and rotating the tissue (2) to subject the tissue (2) to shear flow forces.
  • rinsing liquid is applied to the tissue in method step c) by means of a jet of liquid.
  • a jet of liquid is provided by means of a liquid jet generator, which is connected to a reservoir with rinsing liquid and/or to a rinsing liquid circuit.
  • the movement of the tissue in method step d) preferably takes place by means of a rotatably and/or drivably mounted tissue holder.
  • the movement of the tissue can be a rotational movement and/or a translational movement.
  • the tissue or the tissue holder is moved by means of the jet of rinsing liquid impinging on the tissue and/or on the movably mounted tissue holder and/or by a drive device.
  • the drive device can be the ultrasonic source, for example, with the movement being achieved by the ultrasonic signals generated.
  • the drive device can also be a motor unit.
  • the motor unit may be a motor with a shaft, the tissue mount being arranged on the shaft of the motor unit. It is possible that a motor unit is used, which generates a translatory movement of the tissue holder and/or the tissue.
  • the method according to various embodiments can have the following method step: setting a power of the ultrasound source and/or setting pump parameters for generating the jet of rinsing liquid and/or setting an application duration of the method and/or setting drive parameters.
  • treatment programs can be created, for example, by means of the control unit and/or by means of a software program or the like. Parameters for controlling the ultrasound source and/or for controlling the pump system and/or for setting a time factor can be stored in these.
  • the treatment programs are adapted to the type and size of the tissue.
  • sterile filtration of the rinsing liquid takes place in a further method step. This can, for example, after a leak and / or pumping out of the container and / or before reinserting into the container and / or before applying the rinsing liquid again to the tissue.
  • the rinsing liquid is preferably pumped out via a drain in the container.
  • allografts/tissue pretreated by high pressure can be decellularized and cleaned in an automated process by means of mechanical cleaning processes (ultrasound, liquid jet and/or shear flow).
  • the rinsing process can be carried out according to a defined protocol/program, depending on the tissue, by means of simultaneous or sequential application of the cleaning processes.
  • the immune reaction in the recipient of the tissue to be transplanted can be reduced by flushing the allografts or xenografts.
  • the rinsing device should be easier to handle as an apparatus/device than the previously used industrial processes for which chemically aggressive media have to be handled.
  • FIG. 1 shows a schematic structure of a device according to the invention
  • FIG. 1 shows a device 1 according to the invention for decellularizing and/or cleaning tissue 2 .
  • the device 1 according to various embodiment variants has a container 3 which is designed to be liquid-tight.
  • the device 1 has at least one ultrasound source 4 for emitting a Ultrasonic signal 41, and at least one liquid jet generator 5 for providing a jet of rinsing liquid 51.
  • the liquid jet generator 5 can be designed, for example, as a cannula or nozzle.
  • the device 1 has at least one tissue holder 6 for receiving the tissue 2 , the tissue holder 6 being arranged in the container 3 .
  • the at least one ultrasound source 4 is arranged in such a way that the ultrasound signal 41 or the ultrasound waves are sent to the tissue 2 in the tissue holder 6 .
  • the at least one liquid jet generator 5 is arranged in such a way that the liquid jet 51 is directed onto the tissue 2 in the tissue holder 6 .
  • the device 1 has a
  • Tissue holder 6 is movably arranged in the container 3, whereby a rotational movement and/or a translational movement of the tissue 2 is achieved.
  • a movement of the tissue holder 6 with the tissue 2 can be achieved by the impingement of the liquid jet 51 on the tissue holder 6 and/or on the tissue 2 .
  • the tissue holder 6 can have a drive device.
  • a drive device can, for example, have a motor unit which generates a rotational movement and/or a translational movement of the tissue holder 6 .
  • the drive device can also be the ultrasound source and/or the liquid jet generator.
  • the tissue holder 6 is preferably configured in a tissue-specific manner for receiving a type of tissue; for example, the tissue holder can have a frame for tissue-specific tissue recording. In Soft tissue, for example fascial tissue, can be clamped in this frame.
  • Soft tissue for example fascial tissue
  • a further alternative embodiment of a tissue holder 6 is the use of a grid and/or basket, in or on which the tissue 2 is accommodated in the form of granules. Further alternative types of flapping for the tissue holder 6 are conceivable.
  • the container 3 has an outlet 9 . Liquid, in particular the rinsing liquid, can be drained and/or sucked out of the container 3 via this outlet 9 .
  • the device preferably according to various aspects
  • a pipe and/or pump system 8 is configured in such a way that the at least one cannula 5 is supplied with rinsing liquid to provide the rinsing liquid jet 51 and/or the rinsing liquid is removed from the container 3, for example by means of the outlet 9.
  • the device 1 has a control unit 10 which is designed in such a way that it controls the at least one ultrasound source 4 and/or the pump system 8 and/or the at least one cannula 5 .
  • the ultrasound source has at least one sonotrode.
  • the container 3 is designed in such a way that by attaching one or more ultrasonic actuators to the container 3, the latter itself functions as an ultrasonic bath.
  • the container 3 is preferably designed as a disposable plastic product.
  • the device according to the invention has a filter system (not shown here) which is such is designed to carry out a sterile filtration of the rinsing liquid.
  • the filter system is preferably in the pipe - and pump system 8 arranged.
  • the filter system preferably has a vacuum filter and/or a vacuum pump.
  • the rinsing liquid preferably contains water and/or isotonic
  • Saline and/or a buffer solution and/or a Ringer's solution and/or cell culture medium are included in the Saline and/or a buffer solution and/or a Ringer's solution and/or cell culture medium.
  • the method according to the invention for decellularizing and/or cleaning tissue 2 is carried out as follows: a. inserting and fixing the tissue 2 in the liquid-tight container 3 and b. introducing rinsing liquid into the container 3 and carrying out an ultrasonic treatment of the tissue 2 and/or c. Application of rinsing liquid to the tissue 2 for treatment of the tissue with pressure and/or shear flow forces and/or d. Introducing irrigation fluid into the container 3 and rotating the tissue 2 to subject the tissue 2 to shear flow forces.
  • the application of rinsing liquid to the tissue 2 in method step c) preferably takes place by means of a liquid jet 51 which is provided by a liquid jet generator 5 .
  • the jet of liquid 51 is directed onto the tissue 2 by means of pressure and/or braid pressure.
  • the tissue 2 is preferably moved by means of a tissue holder 6 that is rotatably and/or drivably mounted.
  • the movement of the tissue 2 is a rotational movement and/or a translational movement.
  • the movement is achieved, for example, by applying the rinsing liquid to the tissue 2 and/or the tissue holder 6 .
  • the Movement can also be achieved by the ultrasonic waves 41 of the ultrasonic source 4 and/or by a drive unit, which has a motor, for example.
  • the movement of the tissue 2 or the tissue holder 6 causes the rinsing liquid to be applied to the tissue 2 from all sides.
  • a movement which is achieved by means of the rapid movement which is achieved, for example, with the drive unit, in combination with an applied liquid jet (e.g. without pressure or high pressure) can also achieve an application of shearing forces to the tissue, similar to a liquid jet which is applied with pressure or high pressure applied to the fabric.
  • the rinsing liquid can be pumped out of the container 3 via an outlet 9 in a further method step.
  • a sterile filtration of the rinsing liquid is conceivable in a further process step. The sterile filtration can take place after the rinsing liquid has run out and/or been pumped out of the container 3 and/or before the rinsing liquid is reintroduced into the container 3 and/or before the rinsing liquid is applied to the tissue 2 again.
  • a device according to claim 1 or a device as shown in Figure 1 can be used.
  • the user of the device can make various settings to carry out the method, for example settings for the power of the ultrasound source and/or settings for the pump parameters for generating the jet of rinsing liquid and/or settings for the duration of use.
  • These settings can be tissue-specific.
  • Treatment programs/treatment protocols can also be created for this purpose. For example, for different tissue types, different Treatment protocols are created that the user can set when using a specific type of tissue.
  • Ultrasonic treatment and treatment with rinsing liquid can be applied simultaneously or sequentially.
  • tissue 2 Decellularization and/or cleaning of tissue 2, as is also shown by way of example in FIG. 1, from a liquid-tight container 3 in which tissue 2 is decellularized.
  • the container 3 is compactly accommodated in a housing 7 together with one or more ultrasound sources 4 and one or more cannulas 5, for example four cannulas 5.
  • the container 3 is preferably designed as a sphere with two half-shells (as shown in FIG. 1). However, other shapes of the container 3 are conceivable.
  • the container 3 has at least one outlet 9 through which the rinsing liquid with cell debris can be removed.
  • tissue-specific designed tissue holder 6 in the container 3 for fixing the tissue 2 to be cleaned.
  • the tissue holder 6 can be movably mounted in the container 3 so that the commercial sample 2 - stimulated by the ultrasound 41 or the spray jet/shear flow 51 - can rotate and an even washing result is achieved.
  • the ultrasonic actuator 4 is controlled via external control units 10 and the cannulas 5 for the jet of rinsing liquid or the shear flow 51 are supplied with rinsing medium by means of external pumps 8 (e.g. syringe or hose pumps) and the rinsing liquid with cell residues is sucked out again.
  • the flushing system is controlled via a PC or a controller with user interface 10.
  • transplant tissue 2 is introduced into the opened container 3 and fixed in a tissue holder 6 .
  • the tissue holder 6 is preferably specifically adapted to the respective type of tissue 2 .
  • soft tissue such as fascial tissue
  • the container 3 is then closed, for example by means of a screw connection.
  • the container 3 together with the ultrasound source 4 and liquid jet generators 5 is preferably fixed in a housing 7 .
  • the tissue 2 For the application with ultrasound 41, the tissue 2 must be immersed in a liquid rinsing medium (preferably isotonic saline solution, buffer solution such as PBS, Ringer's solution) so that the cavitation generated by the ultrasound 41 can produce its erosive effect. Cells are detached from the tissue 2 as a result of the erosion.
  • a liquid rinsing medium preferably isotonic saline solution, buffer solution such as PBS, Ringer's solution
  • the ultrasound application is preferably implemented via an ultrasound source 4 with a sonotrode.
  • the container 3 itself can function as an ultrasonic bath by attaching one or more ultrasonic actuators.
  • a further possibility is to position the container 3 in a separate ultrasonic tank with liquid, with the ultrasonic excitation being transmitted from the tank via the liquid to the container 3 and thus also to the rinsing liquid inside the container 3 .
  • the liquid jet 51 one or more liquid jet generators 5 are guided into the container 3, through which the liquid rinsing medium is jetted onto the tissue 2 at high pressure in a pump and/or pipe system 8, thereby detaching cells from the tissue.
  • the pump and pipe system 8 preferably has a reservoir and at least one pump.
  • the intensity of the treatment (power of the ultrasound source 4, pump parameters for generating the liquid jet 51) and the duration of use can be set, for example, using a user interface 10 and depending on the type of tissue 2 (hard or soft tissue) and other properties of the allograft 2 (e.g. its mass or shape) can be adjusted.
  • Treatment protocols can be programmed with one or more mechanical treatment types. If different types of mechanical cleaning are selected, they can be cleaned simultaneously (e.g. ultrasonic treatment and at the same time rinsing with a liquid jet 51) or sequentially (eg first breaking down the tissue matrix by means of ultrasound 41 and then rinsing out the cell residues by means of a spray jet 51). The rinsing liquid with the cell remains is pumped out via the outlet 9 as required or continuously.
  • the tissue 2 can be removed directly from the container 3 or from the holder 6 .
  • the container 3 is opened again and the tissue holder 6 with the tissue 2 is removed. Since the rinsing device 1 comes into contact with human or animal cell material during operation and can only be cleaned with great effort, the container 3 and/or the spray jet generator 5 is preferably designed as a disposable plastic product, while the ultrasound source 4 and the control periphery 10 are simple are easy to clean and can be used permanently.

Abstract

The invention relates to a device and a method for decellularising and/or purifying tissue. The aim of the invention is to eliminate the existing disadvantages according to the prior art and to decellularise and purify allografts and xenografts in an automated process. Another aim is to provide a device by means of which tissue materials of different types can be decellularised and purified in an automated process. According to the invention, the claimed device comprises an ultrasonic source (4) and a liquid jet generator (5).

Description

Vorrichtung und Verfahren zum Dezellularisieren und/oder Reinigen von Gewebe Device and method for decellularizing and/or cleaning tissue
Beschreibung description
[0001] Die Erfindung betrifft eine Vorrichtung und ein Verfahren zum Dezellularisieren und/oder Reinigen von Gewebe. The invention relates to an apparatus and a method for decellularizing and/or cleaning tissue.
[0002] Die Erfindung ist dem Gebiet der Biomedizintechnik zuzuordnen. The invention can be assigned to the field of biomedical engineering.
[0003] Nach aktuellem Stand der Technik ist vor einer Implantation von Allo- und Xenografts eine Vorbehandlung des Gewebes durch umfangreiche chemisch geprägte Sterilisierungs- und Reinigungsmethoden üblich. Etabliert ist die Verwendung aggressiver Medien wie wässriger Lösungen mit Detergenzien, Peroxide, organische Lösungsmittel, Säuren und Alkohole oder Beta- und Gamma-Strahlen (Putzer et al., 2014; Hiemer et al., 2016). Diese - nach derzeitigem Stand der Technik notwendige - Vorbehandlung kann jedoch abträglich für die Integrität und mechanischen Eigenschaften des Allografts eines jeden Typs sein. Beispielsweise können Knorpelgewebe dehydriert oder deren Proteinstrukturen denaturiert werden (Benders et al., 2013; Hiemer et al., 2016), Knochengewebe kann in seinen biomechanischen Eigenschaften negativ beeinflusst werden (Haimi et al., 2008), und bei Allografts für einen Bandersatz führen bereits moderate Dosen radiologischer Bestrahlung oder chemischer Behandlung zur Schädigung (Lansdown et al., 2017). Mechanische Methoden wie Ultraschall, Wasserstrahl oder Scherströmung ermöglichen eine schonende Dezellularisierung unterschiedlichster Gewebe gänzlich ohne Rückgriff auf aggressive chemische Medien. Die Reinigung mit mechanischen Methoden kann insbesondere in Kombination mit einer vorherigen Behandlung der Allografts mit Hochdruck (HHD-Behandlung) zu einer schnellen, kostengünstigen und vor allem effektiven Gewebe-Devitalisierung führen. Für einen Nachbehandlungsansatz zur Dezellularisierung basierend auf einer Behandlung mit Ultraschall, gibt es bereits publizierte wissenschaftliche Untersuchungen (wie z.B. in Drobek et al., 2020). [0004] Die bisher industriell verwendeten chemischen Prozesse zurAccording to the current state of the art, prior to the implantation of allografts and xenografts, the tissue is pretreated by extensive chemical sterilization and cleaning methods. The use of aggressive media such as aqueous solutions with detergents, peroxides, organic solvents, acids and alcohols or beta and gamma rays is established (Putzer et al., 2014; Hiemer et al., 2016). However, this pre-treatment - which is necessary according to the current state of the art - can be detrimental to the integrity and mechanical properties of the allograft of any type. For example, cartilage tissue can be dehydrated or its protein structures denatured (Benders et al., 2013; Hiemer et al., 2016), the biomechanical properties of bone tissue can be negatively affected (Haimi et al., 2008), and lead to ligament replacement in allografts even moderate doses of radiological irradiation or chemical treatment to damage (Lansdown et al., 2017). Mechanical methods such as ultrasound, water jet or shear flow enable a gentle decellularization of a wide variety of tissues without resorting to aggressive chemical media. Cleaning with mechanical methods, especially in combination with prior treatment of the allografts with high pressure (HHD treatment), can lead to rapid, inexpensive and, above all, effective tissue devitalization. There are already published scientific studies (e.g. in Drobek et al., 2020) for a post-treatment approach to decellularization based on treatment with ultrasound. The chemical processes used industrially to date
Dezellularisierung sind nicht schonend für das Gewebe und die eingesetzten chemischen Substanzen kritisch in der Handhabung und Entsorgung. Die vorgestellten Versuchsaufbauten zu mechanischen Methoden wie Ultraschall stellen auf der anderen Seite bisher keine integrierten Systeme dar, die automatisierte und gut reproduzierbare Behandlungsmöglichkeiten bereitstellen und einfach handhabbar sind. Zudem ist in den bisher beschriebenen Aufbauten eine gleichzeitige oder sequenzielle Aufreinigung der Gewebe mit verschiedenen mechanischen Verfahren (z.B. Aufschließen der Gewebematrix mittels Ultraschall und anschließendes Ausspülen der Zellreste mittels Sprühstrahl) nicht möglich. Decellularization is not gentle on the tissue and the chemical substances used are critical in handling and disposal. On the other hand, the experimental setups presented for mechanical methods such as ultrasound do not yet represent integrated systems that provide automated and easily reproducible treatment options and are easy to handle. In addition, in the setups described so far, it is not possible to simultaneously or sequentially clean the tissue using various mechanical methods (e.g. disrupting the tissue matrix using ultrasound and then rinsing out the cell residue using a spray jet).
[0005] Eine Vorrichtung, die basierend auf den oben genannten mechanischen Verfahren eine einheitliche, reproduzierbare Allo- bzw. Xenograftbehandlung in automatisierten Abläufen in einer Spülkammer ermöglicht und damit biomechanisch und biologisch optimierte Ersatzgewebe bereitstellen kann, ist aktuell nicht bekannt. [0005] A device that enables a uniform, reproducible allograft or xenograft treatment in automated processes in a rinsing chamber based on the mechanical methods mentioned above and can thus provide biomechanically and biologically optimized replacement tissue is currently not known.
[0006] Die Druckschrift EP 0988069 B1 offenbart ein Verfahren zur Behandlung von fixiertem biologischem Gewebe, wobei das Verfahren die Verkalkung des biologischen Gewebes nach dessen Implantation in einen Säugetierkörper hemmen soll. Das Verfahren umfasst das Inkontaktbringen des biologischen Gewebes mit einer Behandlungslösung, das Herbeiführen einer Relativbewegung zwischen Gewebe und Lösung und das Erhitzen der Lösung. Eine zusätzliche Behandlung des Gewebes mit Ultraschall ist nicht offenbart. The publication EP 0988069 B1 discloses a method for the treatment of fixed biological tissue, which method is intended to inhibit the calcification of the biological tissue after its implantation in a mammalian body. The method includes contacting the biological tissue with a treatment solution, causing relative movement between the tissue and the solution, and heating the solution. An additional treatment of the tissue with ultrasound is not disclosed.
[0007] Die Druckschrift DE 19508279 C1 offenbart ein Gerät , welches in einem Gehäuse eine eingebaute UV-Lampe und ein Gefäß für den zu beleuchtenden Blut- oder Gewebeextrakt aufweist, wobei das Blut- und Gewebeextrakt in den Strahlungsbereich der Lampe gestellt und durch einen Drehantrieb im Strahlungsbereich gedreht werden kann. Eine zusätzliche Behandlung des Gewebes mit Ultraschall ist nicht offenbart. Darstellung der Erfindung The publication DE 19508279 C1 discloses a device which has a built-in UV lamp and a vessel for the blood or tissue extract to be illuminated in a housing, the blood and tissue extract being placed in the radiation range of the lamp and driven by a rotary drive can be rotated in the radiation range. An additional treatment of the tissue with ultrasound is not disclosed. Presentation of the invention
[0008] Es ist daher Aufgabe der Erfindung, die bestehenden Nachteile gemäß des Standes der Technik zu beseitigen und Allo- bzw. Xenografts in einem automatisierten Prozess zu dezellularisieren und zu reinigen. Es ist ferner Aufgabe, eine Vorrichtung bereitzustellen, mittels welcher Gewebematerialien verschiedener Arten in einem automatisierten Prozess dezellularisiert und gereinigt werden können. It is therefore an object of the invention to eliminate the existing disadvantages of the prior art and to decellularize and clean allografts or xenografts in an automated process. A further object is to provide a device by means of which tissue materials of different types can be decellularized and cleaned in an automated process.
[0009] Die Lösung dieser Aufgabe erfolgt durch die in den Ansprüchen aufgeführten Merkmale. [0009] This object is achieved by the features listed in the claims.
[0010] Gemäß verschiedenen Ausführungsformen weist die Vorrichtung zumAccording to various embodiments, the device for
Dezellularisieren und/oder Reinigen von Gewebe folgende Komponenten auf: einen flüssigkeitsdichten Behälter, zumindest eine Ultraschallquelle zur Aussendung eines Ultraschallsignals, zumindest einen Flüssigkeitsstrahlerzeuger zum Bereitstellen eines Spülflüssigkeitsstrahls, zumindest eine Gewebehalterung zur Aufnahme des Gewebes. Die Gewebehalterung ist in dem Behälter angeordnet. Die zumindest eine Ultraschallquelle ist derart angeordnet, dass das Ultraschallsignal auf das Gewebe in der Gewebehalterung gesendet wird, und der zumindest einen Flüssigkeitsstrahlerzeuger ist derart angeordnet, dass der Spülflüssigkeitsstrahl auf das Gewebe in der Gewebehalterung gerichtet ist. Decellularizing and/or cleaning tissue has the following components: a liquid-tight container, at least one ultrasound source for emitting an ultrasound signal, at least one liquid jet generator for providing a jet of rinsing liquid, at least one tissue holder for holding the tissue. The tissue holder is placed in the container. The at least one ultrasonic source is arranged such that the ultrasonic signal is transmitted onto the tissue in the tissue holder, and the at least one liquid jet generator is arranged such that the jet of irrigation liquid is directed onto the tissue in the tissue holder.
[0011] Ferner weist die Vorrichtung ein Gehäuse auf, in welchem der flüssigkeitsdichte Behälter und/oder die zumindest eine Ultraschallquelle und/oder der zumindest eine Flüssigkeitsstrahlerzeuger angeordnet ist/sind. Furthermore, the device has a housing in which the liquid-tight container and/or the at least one ultrasound source and/or the at least one liquid jet generator is/are arranged.
[0012] Gemäß verschiedenen Ausgestaltungen ist die Gewebehalterung beweglich in dem flüssigkeitsdichten Behälter angeordnet. Bevorzugt ist die Gewebehalterung derart im Behälter beweglich angeordnet, dass durch das Auftreffen des Flüssigkeitsstrahls auf die Gewebehalterung und/oder auf das Gewebe, die Gewebehalterung angetrieben wird. According to various configurations, the tissue holder is movably arranged in the liquid-tight container. Preferably, the tissue holder is movably arranged in the container that the tissue holder is driven by the impingement of the liquid jet on the tissue holder and/or on the tissue.
[0013] Gemäß verschiedener Ausführungsbeispiele ist die Gewebehalterung derart im Behälter beweglich gelagert, dass diese mittels einer Antriebsvorrichtung antreibbar ist. Die Antriebsvorrichtung kann beispielsweise eine Motoreinheit sein, welche außerhalb des Behälters oder wasserfest innerhalb des Behälters angeordnet ist. Die Antriebsvorrichtung kann jedoch auch die Ultraschallquelle oder, wie bereits beschrieben, der Flüssigkeitsstrahl selbst, welcher beispielsweise mit einer Pumpe und/oder mit einer Düse erzeugt wird, sein. Die Bewegung des Gewebes bzw. der Gewebehalterung kann beispielsweise eine Rotationsbewegung, eine Translationsbewegung odereine Kombination davon sein. According to various exemplary embodiments, the tissue holder is movably mounted in the container in such a way that it can be driven by a drive device. The drive device can be a motor unit, for example, which is arranged outside the container or waterproof inside the container. However, the drive device can also be the ultrasound source or, as already described, the liquid jet itself, which is generated, for example, with a pump and/or with a nozzle. The movement of the tissue or the tissue support can be, for example, a rotational movement, a translational movement or a combination thereof.
[0014] Gemäß verschiedenen Ausgestaltungen ist die Gewebehalterung gewebespezifisch zur Aufnahme einer Gewebeart ausgestaltet. Die Gewebearten, welche bevorzugt humanen und tierischen Ursprungs sind, können hierbei beispielsweise Weichgewebe oder Flartgewebe sein. Die Gewebematerialien können als Gewebeproben in ihrer ursprünglichen Form, wie sie entnommen wurden, verwendet werden. Das Gewebe kann jedoch auch in Form von Granulat oder in anderen Formen vorliegen. [0014] According to various configurations, the tissue holder is configured in a tissue-specific manner for receiving a type of tissue. The types of tissue, which are preferably of human and animal origin, can be soft tissue or flart tissue, for example. The tissue materials can be used as tissue samples in their original form as taken. However, the tissue can also be in the form of granules or other shapes.
[0015] Die Gewebehalterung zur gewebespezifischen Gewebeaufnahme kann beispielsweise einen Rahmen und/oder ein Gitter und/oder eine Klemmhalterung und/oder eine Schraubhalterung aufweisen. Weitere äquivalente Befestigungs- und/oder Flalterungsmöglichkeiten für das Gewebe/die Gewebeproben sind denkbar. The tissue holder for tissue-specific tissue recording can have, for example, a frame and/or a grid and/or a clamp holder and/or a screw holder. Other equivalent attachment and/or flapping options for the tissue/tissue samples are conceivable.
[0016] Ferner weist der flüssigkeitsdichte Behälter der Vorrichtung gemäß verschiedenen Ausführungsformen einen Ablauf auf. Furthermore, according to various embodiments, the liquid-tight container of the device has a drain.
[0017] Ferner weist die Vorrichtung gemäß verschiedener Ausführungsformen ein Rohr- und Pumpsystem auf, welches derart ausgestaltet ist, den zumindest einen Flüssigkeitsstrahlerzeuger zur Bereitstellung des Spülflüssigkeitsstrahls mit Spülflüssigkeit zu versorgen und/oder die Spülflüssigkeit aus dem flüssigkeitsdichten Behälter mittels des Ablaufs zu entfernen. Bevorzugt weist das Rohr- und Pumpsystem ein Reservoir auf, in welchem die Spülflüssigkeit angeordnet ist. Weiterhin weist das Rohr und Pumpsystem zumindest eine Pumpe auf, welche den Flüssigkeitsstrahlerzeuger mit der Spülflüssigkeit mit Flochdruck versorgt. Furthermore, according to various embodiments, the device has a pipe and pump system which is designed in such a way that the to supply at least one liquid jet generator for providing the jet of washing liquid with washing liquid and/or to remove the washing liquid from the liquid-tight container by means of the drain. The pipe and pump system preferably has a reservoir in which the flushing liquid is arranged. Furthermore, the pipe and pumping system has at least one pump which supplies the liquid jet generator with the flushing liquid at the pressure of the hole.
[0018] Gemäß verschiedener Ausführungsformen weist die erfindungsgemäße Vorrichtung ein Filtersystem auf, welches derart ausgestaltet ist, eine Sterilfiltration der Spülflüssigkeit vorzunehmen. Das Filtersystem ist beispielsweise im Rohr - und Pumpsystem angeordnet. Bevorzugt weist das Filtersystem einen Vakuumfilter und/oder eine Vakuumpumpe auf. According to various embodiments, the device according to the invention has a filter system which is designed in such a way that the rinsing liquid is subjected to sterile filtration. The filter system is arranged, for example, in the pipe and pump system. The filter system preferably has a vacuum filter and/or a vacuum pump.
[0019] Gemäß verschiedener Ausführungsformen weist die Vorrichtung ferner eine Steuerungseinheit auf, welche derart ausgestaltet ist, die Ultraschallquelle und/oder das Pumpsystem und/oder den Flüssigkeitsstrahlerzeuger und/oder die Antriebsvorrichtung der Gewebehalterung anzusteuern. [0019] According to various embodiments, the device also has a control unit which is designed in such a way to control the ultrasound source and/or the pump system and/or the liquid jet generator and/or the drive device of the tissue holder.
[0020] Gemäß verschiedener Ausgestaltungen weist die zumindest eine Ultraschallquelle zumindest eine Sonotrode auf, mittels welcher die Ultraschallsignale der Ultraschallquelle auf den Behälter und/oder die Spülflüssigkeit und/oder das Gewebe übertragen werden. According to various configurations, the at least one ultrasound source has at least one sonotrode, by means of which the ultrasound signals from the ultrasound source are transmitted to the container and/or the rinsing liquid and/or the tissue.
[0021] Ferner ist der Behälter der Vorrichtung gemäß verschiedenerFurthermore, the container of the device according to various
Ausführungsformen derart ausgestaltet, dass durch Anbringung einer oder mehrerer Ultraschallquellen am Behälter der Behälter selbst als Ultraschall-Bad fungiert und/oder dass durch Einbringung des Behälters in ein Ultraschallbecken sowie durch Anbringung einer oder mehrerer Ultraschallquellen an dem Ultraschallbecken der Behälter als Ultraschallbecken fungiert. [0022] Gemäß verschiedener Ausführungsformen ist der Behälter vorzugsweise als Kunststoff-Einweg-Produkt ausgeführt. Embodiments designed in such a way that by attaching one or more ultrasonic sources to the container, the container itself acts as an ultrasonic bath and/or that by placing the container in an ultrasonic tank and by attaching one or more ultrasonic sources to the ultrasonic tank, the container acts as an ultrasonic tank. According to various embodiments, the container is preferably designed as a disposable plastic product.
[0023] Gemäß verschiedener Ausführungsformen weist die SpülflüssigkeitAccording to various embodiments, the rinsing liquid
Wasser und/oder isotonische Kochsalzlösung und/oder eine Pufferlösung, wie beispielsweise phosphatgepufferte Kochsalzlösung, und/oder Ringerlösung und/odereine Zellkulturmedium auf. Weitere Medien, welche als Spülflüssigkeit verwendet werden können, sind denkbar. water and/or isotonic saline and/or a buffer solution such as phosphate buffered saline and/or Ringer's solution and/or a cell culture medium. Other media that can be used as rinsing liquid are conceivable.
[0024] Die Aufgabe wird auch gelöst mittels eines Verfahrens zumThe object is also achieved by means of a method for
Dezellularisieren und/oder Reinigen von Gewebe, wobei das Verfahren folgende Verfahrensschritte aufweist: a. Einführen und Fixieren des Gewebes in einem flüssigkeitsdichten Behälter und b. Einführen von Spülflüssigkeit in den Behälter (3) und Durchführen einer Ultraschallbehandlung des Gewebes (2) und/oder c. Aufbringen von Spülflüssigkeit auf das Gewebe (2) für eine Behandlung des Gewebes mit Druck- und/oder Scherströmungskräften und/oder d. Einführen von Spülflüssigkeit in den Behälter (3) und Drehen des Gewebes (2) für eine Behandlung des Gewebes (2) mit Scherströmungskräften. Decellularizing and/or cleaning tissue, the method having the following method steps: a. Inserting and fixing the tissue in a liquid-tight container and b. introducing rinsing liquid into the container (3) and carrying out an ultrasonic treatment of the tissue (2) and/or c. Application of rinsing liquid to the tissue (2) for treating the tissue with pressure and/or shear flow forces and/or d. introducing irrigation fluid into the container (3) and rotating the tissue (2) to subject the tissue (2) to shear flow forces.
[0025] Gemäß verschiedener Ausführungsformen erfolgt das Aufbringen von Spülflüssigkeit auf das Gewebe im Verfahrensschritt c) mittels eines Flüssigkeitsstrahls. Ein solcher Flüssigkeitsstrahl wird mittels eines Flüssigkeitsstrahlerzeugers bereitgestellt, welcher mit einem Reservoir mit Spülflüssigkeit und/oder mit einem Spülflüssigkeitskreislauf verbunden ist. According to various embodiments, rinsing liquid is applied to the tissue in method step c) by means of a jet of liquid. Such a liquid jet is provided by means of a liquid jet generator, which is connected to a reservoir with rinsing liquid and/or to a rinsing liquid circuit.
[0026] Die Bewegung des Gewebes im Verfahrensschritt d) erfolgt bevorzugt mittels einer drehbar und/oder antreibbar gelagerten Gewebehalterung. Die Bewegung des Gewebes kann eine Rotationsbewegung und/oder eine Translationsbewegung sein. [0026] The movement of the tissue in method step d) preferably takes place by means of a rotatably and/or drivably mounted tissue holder. The movement of the tissue can be a rotational movement and/or a translational movement.
[0027] Die Bewegung der Gewebes bzw. der Gewebehalterung erfolgt mittels des Auftreffens des Spülflüssigkeitsstrahls auf das Gewebe und/oder auf die beweglich gelagerte Gewebehalterung und/oder durch eine Antriebsvorrichtung. Die Antriebsvorrichtung kann beispielsweise die Ultraschallquelle sein, wobei die Bewegung durch die erzeugten Ultraschallsignale erreicht wird. Die Antriebsvorrichtung kann jedoch auch eine Motoreinheit sein. Wobei die Motoreinheit ein Motor mit einer Welle sein kann, wobei die Gewebehalterung an der Welle der Motoreinheit angeordnet ist. Es ist möglich, dass eine Motoreinheit verwendet wird, welche eine translatorische Bewegung der Gewebehalterung und/oder des Gewebes erzeugt. [0027] The tissue or the tissue holder is moved by means of the jet of rinsing liquid impinging on the tissue and/or on the movably mounted tissue holder and/or by a drive device. The drive device can be the ultrasonic source, for example, with the movement being achieved by the ultrasonic signals generated. However, the drive device can also be a motor unit. Wherein the motor unit may be a motor with a shaft, the tissue mount being arranged on the shaft of the motor unit. It is possible that a motor unit is used, which generates a translatory movement of the tissue holder and/or the tissue.
[0028] Ferner kann das Verfahren gemäß verschiedener Ausführungsformen den folgenden Verfahrensschritt aufweisen: Einstellen einer Leistung der Ultraschallquelle und/oder Einstellen von Pumpenparametern für die Erzeugung des Spülflüssigkeitsstrahls und/oder Einstellen einer Anwendungsdauer des Verfahrens und/oder Einstellen von Antriebsparametern. [0028] Furthermore, the method according to various embodiments can have the following method step: setting a power of the ultrasound source and/or setting pump parameters for generating the jet of rinsing liquid and/or setting an application duration of the method and/or setting drive parameters.
[0029] Gemäß verschiedener Ausführungsformen können beispielsweise mittels der Steuerungseinheit und/oder mittels eines Softwareprogramms o.ä. Behandlungsprogramme erstellt werden. In diesen können Parameter zur Ansteuerung der Ultraschallquelle und/oder zur Ansteuerung des Pumpsystems und/oder zur Einstellung eines Zeitfaktors hinterlegt sein. Die Behandlungsprogramme sind nach Art und Größe des Gewebes angepasst. According to various embodiments, treatment programs can be created, for example, by means of the control unit and/or by means of a software program or the like. Parameters for controlling the ultrasound source and/or for controlling the pump system and/or for setting a time factor can be stored in these. The treatment programs are adapted to the type and size of the tissue.
[0030] Gemäß verschiedener Ausführungsformen erfolgt in einem weiteren Verfahrensschritt eine Sterilfiltration der Spülflüssigkeit. Diese kann beispielsweise nach einem Auslaufen und/oder Abpumpen aus dem Behälter und/oder vor einem erneuten Einführen in den Behälter und/oder vor einem erneuten Aufbringen der Spülflüssigkeit auf das Gewebe erfolgen. According to various embodiments, sterile filtration of the rinsing liquid takes place in a further method step. This can, for example, after a leak and / or pumping out of the container and / or before reinserting into the container and / or before applying the rinsing liquid again to the tissue.
[0031] Ferner wird die Spülflüssigkeit bevorzugt über einen Ablauf im Behälter abgepumpt. [0031]Furthermore, the rinsing liquid is preferably pumped out via a drain in the container.
[0032] Mit Hilfe der erfindungsgemäßen Vorrichtung können durch Hochdruck vorbehandelte Allografts/Gewebe mittels mechanischer Reinigungsverfahren (Ultraschall, Flüssigkeitsstrahl und/oder Scherströmung) in einem automatisierten Prozess dezellularisiert und gereinigt werden. Der Spülvorgang kann nach einem definierten Protokoll/Programm gewebeabhängig mittels gleichzeitiger oder sequenzieller Anwendung der Reinigungsverfahren durchgeführt werden. Durch die Spülung der Allo- bzw. Xenografts kann die Immunreaktion beim Empfänger des zu transplantierenden Gewebes reduziert werden. With the aid of the device according to the invention, allografts/tissue pretreated by high pressure can be decellularized and cleaned in an automated process by means of mechanical cleaning processes (ultrasound, liquid jet and/or shear flow). The rinsing process can be carried out according to a defined protocol/program, depending on the tissue, by means of simultaneous or sequential application of the cleaning processes. The immune reaction in the recipient of the tissue to be transplanted can be reduced by flushing the allografts or xenografts.
[0033] Neu ist der Ansatz einer kompakten, integrierten, automatisierten und einfach handhabbaren Spülvorrichtung für die Dezellularisierung von Allo- bzw. Xenograft-Geweben basierend auf mechanischen Reinigungsmethoden wie Ultraschall, Flüssigkeitsstrahl und Scherströmung möglichst unter Verzicht von chemisch aggressive Medien. Statt einer chemischen Behandlung der Allograft-Gewebe zur Aufbereitung basiert die Spülvorrichtung auf mechanischen Methoden wie Ultraschall und Flüssigkeitsstrahl. Das Gewebe selbst soll durch die mechanischen Methoden weniger angegriffen werden, sodass trotz einer erfolgreichen Dezellularisierung die strukturelle Integrität des Gewebes und somit dessen mechanische Eigenschaften weitestgehend erhalten bleiben, also es seine Formstabilität und Belastbarkeit behält. What is new is the approach of a compact, integrated, automated and easy-to-use rinsing device for the decellularization of allograft or xenograft tissue based on mechanical cleaning methods such as ultrasound, liquid jet and shear flow, if possible without chemically aggressive media. Instead of chemical treatment of the allograft tissue for preparation, the rinsing device is based on mechanical methods such as ultrasound and liquid jets. The tissue itself should be less affected by the mechanical methods, so that despite successful decellularization, the structural integrity of the tissue and thus its mechanical properties are largely retained, i.e. it retains its dimensional stability and resilience.
[0034] Die Spülvorrichtung soll als Apparatur/Gerät einfacher zu handhaben sein als die bisher verwendeten industriellen Prozesse, für die chemisch aggressive Medien gehandhabt werden müssen. Ausführung der Erfindung The rinsing device should be easier to handle as an apparatus/device than the previously used industrial processes for which chemically aggressive media have to be handled. implementation of the invention
[0035] Die Erfindung wird anhand eines Ausführungsbeispiels näher erläutert. Hierzu zeigt The invention is explained in more detail using an exemplary embodiment. For this shows
Figur 1 einen schematischen Aufbau einer erfindungsgemäßen Vorrichtung FIG. 1 shows a schematic structure of a device according to the invention
[0036] In der Beschreibung wird auf die beigefügten Zeichnungen Bezug genommen, in denen zur Veranschaulichung spezifische Ausführungsformen gezeigt sind, in denen die erfindungsgemäße Anordnung ausgeübt werden kann. In dieser Hinsicht wird eine Richtungsterminologie wie etwa „oben“, „unten“ usw. mit Bezug auf die Orientierung der beschriebenen Zeichnungen verwendet. Die Richtungsterminologie dient der Veranschaulichung und ist auf keinerlei Weise einschränkend. In the description, reference is made to the accompanying drawings, in which is shown by way of illustration specific embodiments in which the assembly of the invention may be practiced. In this regard, directional terminology such as "up," "down," etc. is used with reference to the orientation of the described drawings. The directional terminology is used for purposes of illustration and is in no way limiting.
[0037] Es versteht sich, dass andere Ausführungsformen benutzt und strukturelle oder logische Änderungen vorgenommen werden können, ohne von dem Schutzumfang der vorliegenden Erfindung abzuweichen. Es versteht sich, dass die Merkmale der hierin beschriebenen verschiedenen beispielhaften Ausführungsformen miteinander kombiniert werden können, sofern spezifisch nicht anders angegeben. Die folgende ausführliche Beschreibung ist deshalb nicht in einschränkendem Sinne aufzufassen, und der Schutzumfang der vorliegenden Erfindung wird durch die angefügten Ansprüche definiert. It is understood that other embodiments may be utilized and structural or logical changes may be made without departing from the scope of the present invention. It is understood that the features of the various exemplary embodiments described herein can be combined with one another unless specifically stated otherwise. The following detailed description is, therefore, not to be taken in a limiting sense, and the scope of the present invention is defined by the appended claims.
[0038] In den Figuren werden identische oder ähnliche Elemente mit identischen Bezugszeichen versehen, soweit dies zweckmäßig ist. In the figures, identical or similar elements are provided with identical reference symbols, insofar as this is appropriate.
[0039] In Figur 1 ist eine erfindungsgemäße Vorrichtung 1 zum Dezellularisieren und/oder Reinigen von Gewebe 2 dargestellt. Wie in Figur 1 dargestellt, weist die Vorrichtung 1 gemäß verschiedenen Ausführungsvarianten einen Behälter 3 auf, welcher flüssigkeitsdicht ausgestaltet ist. Ferner weist die Vorrichtung 1 zumindest eine Ultraschallquelle 4 zur Aussendung eines Ultraschallsignals 41 auf, sowie zumindest einen Flüssigkeitsstrahlerzeuger 5 zum Bereitstellen eines Spülflüssigkeitsstrahls 51. Der Flüssigkeitsstrahlerzeuger 5 kann beispielsweise als Kanüle oder Düse ausgestaltet sein. Die Vorrichtung 1 weist zumindest eine Gewebehalterung 6 zur Aufnahme des Gewebes 2 auf, wobei die Gewebehalterung 6 in dem Behälter 3 angeordnet ist. Die zumindest eine Ultraschallquelle 4 ist derart angeordnet ist, dass das Ultraschallsignal 41 bzw. die Ultraschallwellen auf das Gewebe 2 in der Gewebehalterung 6 gesendet wird. Der zumindest eine Flüssigkeitsstrahlerzeuger 5 ist derart angeordnet ist, dass der Flüssigkeitsstrahl 51 auf das Gewebe 2 in der Gewebehalterung 6 gerichtet ist. FIG. 1 shows a device 1 according to the invention for decellularizing and/or cleaning tissue 2 . As shown in FIG. 1, the device 1 according to various embodiment variants has a container 3 which is designed to be liquid-tight. Furthermore, the device 1 has at least one ultrasound source 4 for emitting a Ultrasonic signal 41, and at least one liquid jet generator 5 for providing a jet of rinsing liquid 51. The liquid jet generator 5 can be designed, for example, as a cannula or nozzle. The device 1 has at least one tissue holder 6 for receiving the tissue 2 , the tissue holder 6 being arranged in the container 3 . The at least one ultrasound source 4 is arranged in such a way that the ultrasound signal 41 or the ultrasound waves are sent to the tissue 2 in the tissue holder 6 . The at least one liquid jet generator 5 is arranged in such a way that the liquid jet 51 is directed onto the tissue 2 in the tissue holder 6 .
[0040] Gemäß verschiedenen Ausführungsformen weist die Vorrichtung 1 einAccording to various embodiments, the device 1 has a
Gehäuse 7 auf, in welchem der flüssigkeitsdichte Behälter 3 und/oder die zumindest eine Ultraschallquelle 4 und/oder der zumindest eine Flüssigkeitsstrahlerzeuger 5 angeordnet ist/sind. Housing 7, in which the liquid-tight container 3 and/or the at least one ultrasound source 4 and/or the at least one liquid jet generator 5 is/are arranged.
[0041] Ferner ist gemäß verschiedenen Ausführungsformen die[0041] Further, according to various embodiments, the
Gewebehalterung 6 beweglich in dem Behälter 3 angeordnet, wodurch eine Rotationsbewegung und/odereine Translationsbewegung des Gewebes 2 erreicht wird. Durch das Auftreffen des Flüssigkeitsstrahls 51 auf die Gewebehalterung 6 und/oder auf das Gewebe 2 kann eine Bewegung der Gewebehaltung 6 mit dem Gewebe 2 erreicht werden. Alternativ kann die Gewebehalterung 6 eine Antriebsvorrichtung aufweisen. Eine Antriebsvorrichtung kann beispielsweise eine Motoreinheit aufweisen, welche eine Rotationsbewegung und/odereine Translationsbewegung der Gewebehalterung 6 erzeugt. Die Antriebsvorrichtung kann auch die Ultraschallquelle und/oder der Flüssigkeitsstrahlerzeuger sein. Tissue holder 6 is movably arranged in the container 3, whereby a rotational movement and/or a translational movement of the tissue 2 is achieved. A movement of the tissue holder 6 with the tissue 2 can be achieved by the impingement of the liquid jet 51 on the tissue holder 6 and/or on the tissue 2 . Alternatively, the tissue holder 6 can have a drive device. A drive device can, for example, have a motor unit which generates a rotational movement and/or a translational movement of the tissue holder 6 . The drive device can also be the ultrasound source and/or the liquid jet generator.
[0042] Die Gewebehalterung 6 ist bevorzugt gewebespezifisch zur Aufnahme einer Gewebeart ausgestaltet, beispielsweise kann die Gewebehalterung zur gewebespezifischen Gewebeaufnahme einen Rahmen aufweisen. In diesen Rahmen kann Weichgewebe, beispielsweise Fasziengewebe, eingespannt werden. Eine andere Alternative ist eine Gewebehalterung 6 mit einem Spann- und/oder Schraubverschluss zur Fixation von Flartgewebe, beispielsweise Knochengewebe. Eine weitere alternative Ausgestaltung einer Gewebehalterung 6 ist die Verwendung eines Gitters und/oder Korbes, in bzw. auf welchem das Gewebe 2 in Form von Granulat aufgenommen wird. Weitere Alternativen von Flalterungsarten für die Gewebehalterung 6 sind denkbar. The tissue holder 6 is preferably configured in a tissue-specific manner for receiving a type of tissue; for example, the tissue holder can have a frame for tissue-specific tissue recording. In Soft tissue, for example fascial tissue, can be clamped in this frame. Another alternative is a tissue holder 6 with a clamp and/or screw fastener for fixing flart tissue, for example bone tissue. A further alternative embodiment of a tissue holder 6 is the use of a grid and/or basket, in or on which the tissue 2 is accommodated in the form of granules. Further alternative types of flapping for the tissue holder 6 are conceivable.
[0043] Gemäß verschiedener Ausführungsformen weist der Behälter 3 einen Ablauf 9 auf. Über diesen Ablauf 9 kann Flüssigkeit, insbesondere die Spülflüssigkeit, aus dem Behälter 3 abgelassen und/oder abgesaugt werden. According to various embodiments, the container 3 has an outlet 9 . Liquid, in particular the rinsing liquid, can be drained and/or sucked out of the container 3 via this outlet 9 .
[0044] Ferner weist die Vorrichtung bevorzugt gemäß verschiedenerFurthermore, the device preferably according to various
Ausgestaltungsformen ein Rohr- und/oder Pumpsystem 8 auf, welches derart ausgestaltet ist, die zumindest eine Kanüle 5 zur Bereitstellung des Spülflüssigkeitsstrahls 51 mit Spülflüssigkeit zu versorgen und/oder die Spülflüssigkeit aus dem Behälter 3, beispielsweise mittels des Ablaufs 9, zu entfernen. A pipe and/or pump system 8 is configured in such a way that the at least one cannula 5 is supplied with rinsing liquid to provide the rinsing liquid jet 51 and/or the rinsing liquid is removed from the container 3, for example by means of the outlet 9.
[0045] Gemäß verschiedener Ausführungsformen weist die Vorrichtung 1 eine Steuerungseinheit 10 auf, welche derart ausgestaltet ist, die zumindest eine Ultraschallquelle 4 und/oder das Pumpsystem 8 und/oder die zumindest eine Kanüle 5 anzusteuern. According to various embodiments, the device 1 has a control unit 10 which is designed in such a way that it controls the at least one ultrasound source 4 and/or the pump system 8 and/or the at least one cannula 5 .
[0046] Die Ultraschallquelle weist gemäß verschiedener Ausgestaltungen zumindest eine Sonotrode auf. [0046] According to various configurations, the ultrasound source has at least one sonotrode.
[0047] Gemäß verschiedener Ausgestaltungen ist der Behälter 3 derart ausgestaltet, dass durch Anbringung eines oder mehrerer Ultraschallaktoren am Behälter 3 dieser selbst als Ultraschall-Bad fungiert. According to various configurations, the container 3 is designed in such a way that by attaching one or more ultrasonic actuators to the container 3, the latter itself functions as an ultrasonic bath.
[0048] Bevorzugt ist der Behälter 3 als Kunststoff-Einweg-Produkt ausgeführt. The container 3 is preferably designed as a disposable plastic product.
[0049] Gemäß verschiedener Ausführungsformen weist die erfindungsgemäße Vorrichtung ein Filtersystem (hier nicht dargestellt) auf, welches derart ausgestaltet ist, eine Sterilfiltration der Spülflüssigkeit vorzunehmen. Das Filtersystem ist bevorzugt im Rohr - und Pumpsystem 8 angeordnet. Weiterhin bevorzugt weist das Filtersystem einen Vakuumfilter und/oder eine Vakuumpumpe auf. According to various embodiments, the device according to the invention has a filter system (not shown here) which is such is designed to carry out a sterile filtration of the rinsing liquid. The filter system is preferably in the pipe - and pump system 8 arranged. Furthermore, the filter system preferably has a vacuum filter and/or a vacuum pump.
[0050] Bevorzugt weist die Spülflüssigkeit Wasser und/oder isotonischeThe rinsing liquid preferably contains water and/or isotonic
Kochsalzlösung und/oder eine Pufferlösung und/oder eine Ringerlösung und/oder Zellkulturmedium auf. Saline and/or a buffer solution and/or a Ringer's solution and/or cell culture medium.
[0051] Das erfindungsgemäße Verfahren zum Dezellularisieren und/oder Reinigen von Gewebe 2 wird wie folgt ausgeführt a. Einführen und Fixieren des Gewebes 2 in dem flüssigkeitsdichten Behälter 3 und b. Einführen von Spülflüssigkeit in den Behälter 3 und Durchführen einer Ultraschallbehandlung des Gewebes 2 und/oder c. Aufbringen von Spülflüssigkeit auf das Gewebe 2 für eine Behandlung des Gewebes mit Druck- und/oder Scherströmungskräften und/oder d. Einführen von Spülflüssigkeit in den Behälter 3 und Drehen des Gewebes 2 für eine Behandlung des Gewebes 2 mit Scherströmungskräften. The method according to the invention for decellularizing and/or cleaning tissue 2 is carried out as follows: a. inserting and fixing the tissue 2 in the liquid-tight container 3 and b. introducing rinsing liquid into the container 3 and carrying out an ultrasonic treatment of the tissue 2 and/or c. Application of rinsing liquid to the tissue 2 for treatment of the tissue with pressure and/or shear flow forces and/or d. Introducing irrigation fluid into the container 3 and rotating the tissue 2 to subject the tissue 2 to shear flow forces.
[0052] Das Aufbringen von Spülflüssigkeit auf das Gewebe 2 im Verfahrensschritt c) erfolgt bevorzugt mittels eines Flüssigkeitsstrahls 51, welcher mittels eines Flüssigkeitsstrahlerzeugers 5 bereitgestellt wird. Der Flüssigkeitsstrahl 51 wird hierbei mittels Druck und/oder Flochdruck auf das Gewebe 2 gerichtet. The application of rinsing liquid to the tissue 2 in method step c) preferably takes place by means of a liquid jet 51 which is provided by a liquid jet generator 5 . The jet of liquid 51 is directed onto the tissue 2 by means of pressure and/or braid pressure.
[0053] Bevorzugt wird das Gewebe 2 mittels einer drehbar und/oder antreibbar gelagerten Gewebehalterung 6 bewegt. Die Bewegung des Gewebes 2 ist eine Rotationsbewegung und/odereine Translationsbewegung. Die Bewegung wird beispielsweise durch die Aufbringung der Spülflüssigkeit auf das Gewebe 2 und/oder die Gewebehalterung 6 erreicht. Die Bewegung kann auch durch die Ultraschallwellen 41 der Ultraschallquelle 4 erreicht werden und/oder durch eine Antriebseinheit, welche beispielsweise einen Motor aufweist. Die Bewegung des Gewebes 2 bzw. der Gewebehalterung 6 bewirkt, dass die Spülflüssigkeit von allen Seiten auf das Gewebe 2 aufgebracht wird. Eine Bewegung welche mittels der schnellen Bewegung, welche beispielsweise mit der Antriebseinheit erreicht wird, in Kombination mit einem aufgebrachten Flüssigkeitsstrahl (beispielsweise ohne Druck oder Hochdruck) kann auch eine Aufbringung von Scherkräften auf das Gewebe erreichen, ähnlich wie eine Flüssigkeitsstrahl, welcher mit Druck oder Hochdruck auf das Gewebe aufgebracht wird. The tissue 2 is preferably moved by means of a tissue holder 6 that is rotatably and/or drivably mounted. The movement of the tissue 2 is a rotational movement and/or a translational movement. The movement is achieved, for example, by applying the rinsing liquid to the tissue 2 and/or the tissue holder 6 . the Movement can also be achieved by the ultrasonic waves 41 of the ultrasonic source 4 and/or by a drive unit, which has a motor, for example. The movement of the tissue 2 or the tissue holder 6 causes the rinsing liquid to be applied to the tissue 2 from all sides. A movement which is achieved by means of the rapid movement which is achieved, for example, with the drive unit, in combination with an applied liquid jet (e.g. without pressure or high pressure) can also achieve an application of shearing forces to the tissue, similar to a liquid jet which is applied with pressure or high pressure applied to the fabric.
[0054] Gemäß verschiedener Ausführungsvarianten kann die Spülflüssigkeit in einem weiteren Verfahrensschritt über einen Ablauf 9 aus dem Behälter 3 abgepumpt werden. Ferner ist eine Sterilfiltration der Spülflüssigkeit in einem weiteren Verfahrensschritt denkbar. Die Sterilfiltration kann nach einem Auslaufen und/oder Abpumpen der Spülflüssigkeit aus dem Behälter 3 und/oder vor einem erneuten Einführen der Spülflüssigkeit in den Behälter 3 und/oder vor einem erneuten Aufbringen der Spülflüssigkeit auf das Gewebe 2 erfolgen. According to various embodiment variants, the rinsing liquid can be pumped out of the container 3 via an outlet 9 in a further method step. Furthermore, a sterile filtration of the rinsing liquid is conceivable in a further process step. The sterile filtration can take place after the rinsing liquid has run out and/or been pumped out of the container 3 and/or before the rinsing liquid is reintroduced into the container 3 and/or before the rinsing liquid is applied to the tissue 2 again.
[0055] Für die Durchführung des Verfahrens kann beispielsweise eineFor the implementation of the method, for example, a
Vorrichtung gemäß Anspruch 1 oder eine Vorrichtung, wie sie in Abbildung 1 dargestellt ist, verwendet werden. A device according to claim 1 or a device as shown in Figure 1 can be used.
[0056] Der Nutzer der Vorrichtung kann zur Durchführung des Verfahrens verschiedene Einstellungen vornehmen, beispielsweise Einstellungen zur Leistung der Ultraschallquelle und/oder Einstellungen zu den Pumpenparametern für die Erzeugung des Spülflüssigkeitsstrahls und/oder Einstellungen zur Dauer der Anwendung. Diese Einstellungen können gewebespezifisch erfolgen. Hierfür können auch Behandlungsprogrammen/Behandlungsprotokolle erstellt werden. Beispielsweise können für verschiedene Gewebearten verschiedene Behandlungsprotokolle erstellt werden, die der Nutzer bei Verwendung einer spezifischen Gewebeart einstellen kann. The user of the device can make various settings to carry out the method, for example settings for the power of the ultrasound source and/or settings for the pump parameters for generating the jet of rinsing liquid and/or settings for the duration of use. These settings can be tissue-specific. Treatment programs/treatment protocols can also be created for this purpose. For example, for different tissue types, different Treatment protocols are created that the user can set when using a specific type of tissue.
[0057] Ultraschallbehandlung und Behandlung mit Spülflüssigkeit können gleichzeitig oder sequentiell angewendet werden. Ultrasonic treatment and treatment with rinsing liquid can be applied simultaneously or sequentially.
[0058] Gemäß einer Ausführungsform besteht die Vorrichtung 1 zumAccording to one embodiment, the device 1 for
Dezellularisieren und/oder Reinigen von Gewebe 2, wie sie auch beispielhaft in Figur 1 dargestellt ist, aus einem flüssigkeitsdichten Behälter 3, in dem ein Gewebe 2 dezellularisiert wird. Der Behälter 3 ist zusammen mit einer oder mehreren Ultraschallquellen 4, und einer oder mehreren Kanülen 5, beispielsweise vier Kanülen 5, kompakt in einem Gehäuse 7 untergebracht. Der Behälter 3 ist bevorzugt als Kugel mit zwei Halbschalen (wie in Figur 1 dargestellt) ausgestaltet. Andere Formen des Behälters 3 sind jedoch denkbar. Der Behälter 3 besitzt mind. einen Ablauf 9, über den die Spülflüssigkeit mit Zellresten abgeführt werden kann. Zudem befindet sich in dem Behälter 3 eine gewebespezifisch gestaltete Gewebehalterung 6 für die Fixierung des zu reinigenden Gewebes 2. Die Gewebehalterung 6 kann beweglich in dem Behälter 3 gelagert sein, damit die Gewerbeprobe 2 - angeregt durch den Ultraschall 41 oder den Sprühstrahl/die Scherströmung 51 - rotieren kann und ein gleichmäßiges Spülergebnis erreicht wird. Über externe Steuerungseinheiten 10 wird der Ultraschallaktor 4 angesteuert und mittels externer Pumpen 8 (z.B. Spritzen- oder Schlauchpumpen) werden die Kanülen 5 für den Spülflüssigkeitsstrahl bzw. die Scherströmung 51 mit Spülmedium versorgt sowie die Spülflüssigkeit mit Zellresten wieder abgesaugt. Über einen PC oder einen Controller mit User Interface 10 wird das Spülsystem gesteuert. Decellularization and/or cleaning of tissue 2, as is also shown by way of example in FIG. 1, from a liquid-tight container 3 in which tissue 2 is decellularized. The container 3 is compactly accommodated in a housing 7 together with one or more ultrasound sources 4 and one or more cannulas 5, for example four cannulas 5. The container 3 is preferably designed as a sphere with two half-shells (as shown in FIG. 1). However, other shapes of the container 3 are conceivable. The container 3 has at least one outlet 9 through which the rinsing liquid with cell debris can be removed. In addition, there is a tissue-specific designed tissue holder 6 in the container 3 for fixing the tissue 2 to be cleaned. The tissue holder 6 can be movably mounted in the container 3 so that the commercial sample 2 - stimulated by the ultrasound 41 or the spray jet/shear flow 51 - can rotate and an even washing result is achieved. The ultrasonic actuator 4 is controlled via external control units 10 and the cannulas 5 for the jet of rinsing liquid or the shear flow 51 are supplied with rinsing medium by means of external pumps 8 (e.g. syringe or hose pumps) and the rinsing liquid with cell residues is sucked out again. The flushing system is controlled via a PC or a controller with user interface 10.
[0059] Gemäß einer Ausführungsform des beanspruchten Verfahrens zum Dezellularisieren und/oder Reinigen von Gewebe 2 wird Transplantationsgewebe 2 in den geöffneten Behälter 3 eingeführt und in einer Gewebehalterung 6 fixiert. Die Gewebehalterung 6 ist bevorzugt spezifisch an die jeweilige Gewebeart 2 angepasst. Während beispielsweise Knochenstücke (und andere Hartgewebe) in eine Halterung 6 eingelegt werden können, muss Weichgewebe, wie beispielsweise Fasziengewebe, in einen Rahmen eingespannt werden, damit eine große Oberfläche dezellularisiert werden kann. Der Behälter 3 wird anschließend z.B. mittels Verschraubung verschlossen. Der Behälter 3 samt Ultraschallquelle 4 und Flüssigkeitsstrahlerzeugern 5 ist bevorzugt in einem Gehäuse 7 fixiert. Für die Anwendung mit Ultraschall 41 muss das Gewebe 2 in einem flüssigen Spülmedium (bevorzugt isotonische Kochsalzlösung, Pufferlösung wie PBS, Ringer-Lösung) eingetaucht sein, damit die durch den Ultraschall 41 erzeugte Kavitation ihre erodierende Wirkung erzeugen kann. Durch die Erosion werden Zellen aus dem Gewebe 2 herausgelöst. According to one embodiment of the claimed method for decellularizing and/or cleaning tissue 2 , transplant tissue 2 is introduced into the opened container 3 and fixed in a tissue holder 6 . The tissue holder 6 is preferably specifically adapted to the respective type of tissue 2 . For example, while pieces of bone (and other hard tissue) are placed in a Holder 6 can be inserted, soft tissue, such as fascial tissue, must be clamped in a frame so that a large surface can be decellularized. The container 3 is then closed, for example by means of a screw connection. The container 3 together with the ultrasound source 4 and liquid jet generators 5 is preferably fixed in a housing 7 . For the application with ultrasound 41, the tissue 2 must be immersed in a liquid rinsing medium (preferably isotonic saline solution, buffer solution such as PBS, Ringer's solution) so that the cavitation generated by the ultrasound 41 can produce its erosive effect. Cells are detached from the tissue 2 as a result of the erosion.
[0060] Die Ultraschall-Anwendung wird bevorzugt über eine Ultraschallquelle 4 mit Sonotrode realisiert. Alternativ kann der Behälter 3 durch Anbringung eines oder mehrerer Ultraschallaktoren selbst als Ultraschall-Bad fungieren. Eine weitere Möglichkeit besteht darin, den Behälter 3 in einem separaten Ultraschallbecken mit Flüssigkeit zu positionieren, wobei die Ultraschallanregung vom Becken über die Flüssigkeit auf den Behälter 3 und damit auch in die Spülflüssigkeit im Innern des Behälters 3 übertragen wird. Für die Anwendung des Flüssigkeitsstrahls 51 werden eine oder mehrere Flüssigkeitsstrahlerzeuger 5 in den Behälter 3 geführt, durch die das flüssige Spülmedium in einem Pump- und/oder Rohrsystem 8 mit hohem Druck auf das Gewebe 2 gestrahlt wird und dabei Zellen aus dem Gewebe herauslöst. Das Pump- und Rohrsystem 8 weist bevorzugt ein Reservoir und zumindest eine Pumpe auf. Die Intensität der Behandlung (Leistung der Ultraschallquelle 4, Pumpenparameter für die Erzeugung des Flüssigkeitsstrahls 51) sowie die Anwendungsdauer kann bspw. mittels eines User-Interface 10 eingestellt werden und je nach Gewebeart 2 (Hart- bzw. Weichgewebe) sowie weiteren Eigenschaften des Allografts 2 (beispielsweise seiner Masse oder Form) angepasst werden. Es lassen sich Behandlungsprotokolle mit einer oder mehreren mechanischen Behandlungsarten programmieren. Bei Wahl verschiedener mechanischer Reinigungsarten lassen sich diese gleichzeitig (z.B. Ultraschallbehandlung und gleichzeitig Spülung mit Flüssigkeitsstrahl 51) oder sequentiell (z.B. erst Aufschließen der Gewebematrix mittels Ultraschall 41 und anschließendes Ausspülen der Zellreste mittels Sprühstrahl 51) anwenden. Die Spülflüssigkeit mit den Zellresten wird bei Bedarf bzw. kontinuierlich über den Ablauf 9 abgepumpt. The ultrasound application is preferably implemented via an ultrasound source 4 with a sonotrode. Alternatively, the container 3 itself can function as an ultrasonic bath by attaching one or more ultrasonic actuators. A further possibility is to position the container 3 in a separate ultrasonic tank with liquid, with the ultrasonic excitation being transmitted from the tank via the liquid to the container 3 and thus also to the rinsing liquid inside the container 3 . For the application of the liquid jet 51, one or more liquid jet generators 5 are guided into the container 3, through which the liquid rinsing medium is jetted onto the tissue 2 at high pressure in a pump and/or pipe system 8, thereby detaching cells from the tissue. The pump and pipe system 8 preferably has a reservoir and at least one pump. The intensity of the treatment (power of the ultrasound source 4, pump parameters for generating the liquid jet 51) and the duration of use can be set, for example, using a user interface 10 and depending on the type of tissue 2 (hard or soft tissue) and other properties of the allograft 2 (e.g. its mass or shape) can be adjusted. Treatment protocols can be programmed with one or more mechanical treatment types. If different types of mechanical cleaning are selected, they can be cleaned simultaneously (e.g. ultrasonic treatment and at the same time rinsing with a liquid jet 51) or sequentially (eg first breaking down the tissue matrix by means of ultrasound 41 and then rinsing out the cell residues by means of a spray jet 51). The rinsing liquid with the cell remains is pumped out via the outlet 9 as required or continuously.
[0061] Nach der Behandlung kann das Gewebe 2 direkt aus dem Behälter 3 bzw. aus der Halterung 6 entnommen werden. Dafür wird der Behälter 3 wieder geöffnet und die Gewebehalterung 6 mit dem Gewebe 2 entnommen. Da die Spülvorrichtung 1 im Betrieb in Kontakt mit humanem oder tierischem Zellmaterial kommt und nur sehr aufwändig gereinigt werden kann, ist der Behälter 3 und/oder der Sprühstrahlerzeuger 5 bevorzugt als Kunststoff- Einweg-Produkt ausgeführt, während die Ultraschallquelle 4 sowie die Steuerungsperipherie 10 einfach zu reinigen sind und dauerhaft verwendet werden können. After the treatment, the tissue 2 can be removed directly from the container 3 or from the holder 6 . For this purpose, the container 3 is opened again and the tissue holder 6 with the tissue 2 is removed. Since the rinsing device 1 comes into contact with human or animal cell material during operation and can only be cleaned with great effort, the container 3 and/or the spray jet generator 5 is preferably designed as a disposable plastic product, while the ultrasound source 4 and the control periphery 10 are simple are easy to clean and can be used permanently.
Bezugszeichen Reference sign
1 Vorrichtung 1 device
2 Gewebe/Allograft/Xenograft 2 tissue/allograft/xenograft
3 Behälter 3 containers
4 Ultraschallquelle 4 ultrasound source
41 Ultraschallsignal/Ultraschall 41 ultrasonic signal/ultrasonic
5 Flüssigkeitsstrahlerzeuger/Düse/Kanüle5 liquid jet generator/nozzle/cannula
51 Flüssigkeitsstrahl 51 liquid jet
6 Gewebehalterung 6 tissue holder
7 Gehäuse 7 housing
8 Rohr- und/oder Pumpsystem 8 pipe and/or pump system
9 Ablauf 9 expiration
10 Steuerungseinheit/User Interface 10 control unit/user interface

Claims

Ansprüche Expectations
1. Vorrichtung (1) zum Dezellularisieren und/oder Reinigen von Gewebe (2), Vorrichtung (1) aufweisend ein flüssigkeitsdichter Behälter (3), zumindest eine Ultraschallquelle (4) zur Aussendung eines1. Device (1) for decellularizing and / or cleaning of tissue (2), device (1) comprising a liquid-tight container (3), at least one ultrasound source (4) for emitting a
Ultraschallsignals (41), zumindest einen Flüssigkeitsstrahlerzeuger (5) zum Bereitstellen eines Spülflüssigkeitsstrahls (51), zumindest eine Gewebehalterung (6) zur Aufnahme des Gewebes (2), wobei die Gewebehalterung (6) in dem Behälter (3) angeordnet ist und wobei die zumindest eine Ultraschallquelle (4) derart angeordnet ist, dass das Ultraschallsignal (41) auf das Gewebe (2) in der Gewebehalterung (6) gesendet wird, und wobei der zumindest eine Flüssigkeitsstrahlerzeuger (5) derart angeordnet ist, dass der Spülflüssigkeitsstrahl (51) auf das Gewebe (2) in der Gewebehalterung (6) gerichtet ist. ultrasonic signal (41), at least one liquid jet generator (5) for providing a jet of rinsing liquid (51), at least one tissue holder (6) for receiving the tissue (2), the tissue holder (6) being arranged in the container (3) and the at least one ultrasound source (4) is arranged in such a way that the ultrasound signal (41) is sent to the tissue (2) in the tissue holder (6), and wherein the at least one liquid jet generator (5) is arranged in such a way that the rinsing liquid jet (51) is directed towards the tissue (2) in the tissue holder (6).
2. Vorrichtung (1) gemäß Anspruch 1 , ferner aufweisend ein Gehäuse (7), in welchem der flüssigkeitsdichte Behälter (3) und/oder die zumindest eine Ultraschallquelle (4) und/oder der zumindest eine Flüssigkeitsstrahlerzeuger (5) angeordnet sind. 2. Device (1) according to claim 1, further comprising a housing (7) in which the liquid-tight container (3) and/or the at least one ultrasound source (4) and/or the at least one liquid jet generator (5) are arranged.
3. Vorrichtung (1) gemäß Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass die Gewebehalterung (6) beweglich in dem Behälter (3) angeordnet ist. 3. Device (1) according to claim 1 or 2, characterized in that the tissue holder (6) is movably arranged in the container (3).
4. Vorrichtung gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass die Gewebehalterung (6) eine Antriebsvorrichtung aufweist. 4. Device according to one of the preceding claims, characterized in that the tissue holder (6) has a drive device.
5. Vorrichtung (1 ) gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass die Gewebehalterung (6) gewebespezifisch zur Aufnahme einer Gewebeart ausgestaltet ist. 5. Device (1) according to any one of the preceding claims, characterized in that the tissue holder (6) is configured tissue-specifically for receiving a tissue type.
6. Vorrichtung (1) gemäß Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass die Gewebehalterung (6) zur gewebespezifischen Gewebeaufnahme einen Rahmen und/oder ein Gitter und/oder eine Klemmhalterung und/oder eine Schraubhalterung aufweist. 6. Device (1) according to claim 4, characterized in that the tissue holder (6) for tissue-specific tissue recording has a frame and/or a grid and/or a clamp holder and/or a screw holder.
7. Vorrichtung gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Behälter (3) einen Ablauf (9) aufweist. 7. Device according to one of the preceding claims, characterized in that the container (3) has an outlet (9).
8. Vorrichtung (1) gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, ferner aufweisend ein Rohr- und Pumpsystem (8), welches derart ausgestaltet ist, den zumindest einen Flüssigkeitsstrahlerzeuger (5) zur Bereitstellung des Spülflüssigkeitsstrahls (51) mit Spülflüssigkeit zu versorgen und/oder die Spülflüssigkeit aus dem Behälter (3) mittels des Ablaufs (9) zu entfernen.8. The device (1) according to any one of the preceding claims, further comprising a pipe and pump system (8) which is designed in such a way that the at least one liquid jet generator (5) is supplied with rinsing liquid to provide the rinsing liquid jet (51) and/or the To remove rinsing liquid from the container (3) by means of the drain (9).
9. Vorrichtung (1) gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, ferner aufweisend ein Filtersystem, welches derart ausgestaltet ist, eine Sterilfiltration der Spülflüssigkeit vorzunehmen. 9. Device (1) according to any one of the preceding claims, further comprising a filter system which is designed in such a way that sterile filtration of the rinsing liquid is carried out.
10. Vorrichtung (1) gemäß Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, dass das Filtersystem im Rohr - und Pumpsystem (8) angeordnet ist. 10. Device (1) according to claim 8, characterized in that the filter system in the pipe - and pump system (8) is arranged.
11. Vorrichtung (1) gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass das Filtersystem einen Vakuumfilter und/oder eine Vakuumpumpe aufweist.11. Device (1) according to one of the preceding claims, characterized in that the filter system has a vacuum filter and/or a vacuum pump.
12. Vorrichtung (1) gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, ferner aufweisend eine Steuerungseinheit (10), welche derart ausgestaltet ist, die zumindest eine Ultraschallquelle (4) und/oder das Pumpsystem (8) und/oder den zumindest einen Flüssigkeitsstrahlerzeuger (5) anzusteuern. 12. Device (1) according to one of the preceding claims, further comprising a control unit (10) which is designed in such a way that the at least one ultrasound source (4) and/or the pump system (8) and/or the at least one liquid jet generator (5) head for.
13. Vorrichtung gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass die zumindest eine Ultraschallquelle (4) zumindest eine Sonotrode aufweist. 13. Device according to one of the preceding claims, characterized in that the at least one ultrasound source (4) has at least one sonotrode.
14. Vorrichtung gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Behälter (3) derart ausgestaltet ist, dass durch Anbringung einer oder mehrerer Ultraschallquellen am Behälter (3), der Behälter (3) selbst als Ultraschall-Bad fungiert, und/oder dass durch Anbringung eines oder mehrerer Ultraschallquellen an einem Ultraschallbecken, in welchem der Behälter angeordnet ist, der Behälter (3) selbst als Ultraschall-Bad fungiert. 14. Device according to one of the preceding claims, characterized in that the container (3) is designed such that by attaching one or more ultrasound sources to the container (3), the container (3) itself acts as an ultrasonic bath, and / or that by attaching one or more ultrasonic sources to an ultrasonic tank in which the container is arranged, the container (3) itself acts as an ultrasonic bath.
15. Vorrichtung gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass der Behälter (3) als Kunststoff-Einweg-Produkt ausgeführt ist. 15. Device according to one of the preceding claims, characterized in that the container (3) is designed as a disposable plastic product.
16. Vorrichtung gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass die Spülflüssigkeit Wasser und/oder isotonische Kochsalzlösung und/oder eine Pufferlösung und/odereine Ringerlösung und/oder Zellkulturmedium ist. 16. Device according to one of the preceding claims, characterized in that the rinsing liquid is water and/or isotonic saline solution and/or a buffer solution and/or a Ringer solution and/or cell culture medium.
17. Verfahren zum Dezellularisieren und/oder Reinigen von Gewebe (2),17. Methods for decellularizing and/or purifying tissue (2),
Verfahren aufweisend folgende Verfahrensschritte: a. Einführen und Fixieren des Gewebes (2) in einem flüssigkeitsdichten Behälter (3) und b. Einführen von Spülflüssigkeit in den Behälter (3) und Durchführen einer Ultraschallbehandlung des Gewebes (2) und/oder c. Aufbringen von Spülflüssigkeit auf das Gewebe (2) für eine Behandlung des Gewebes mit Druck- und/oder Scherströmungskräften und/oder d. Einführen von Spülflüssigkeit in den Behälter (3) und Bewegen des Gewebes (2) für eine Behandlung des Gewebes (2) mit Scherströmungskräften. Method having the following method steps: a. Inserting and fixing the tissue (2) in a liquid-tight container (3) and b. introducing rinsing liquid into the container (3) and carrying out an ultrasonic treatment of the tissue (2) and/or c. Application of rinsing liquid to the tissue (2) for treating the tissue with pressure and/or shear flow forces and/or i.e. introducing irrigation fluid into the container (3) and agitating the tissue (2) to subject the tissue (2) to shear flow forces.
18. Verfahren gemäß Anspruch 17, dadurch gekennzeichnet, dass das Aufbringen von Spülflüssigkeit auf das Gewebe (2) im Verfahrensschritt c) mittels eines Flüssigkeitsstrahls (41) erfolgt, welcher mittels eines Flüssigkeitsstrahlerzeugers (5) bereitgestellt wird. 18. The method according to claim 17, characterized in that the application of rinsing liquid to the tissue (2) in method step c) takes place by means of a liquid jet (41), which is provided by a liquid jet generator (5).
19. Verfahren gemäß Anspruch 17 oder 18, dadurch gekennzeichnet, dass das Gewebe (2) im Verfahrensschritt b), c) und/oder d) mittels einer drehbar und/oder antreibbar gelagerten Gewebehalterung bewegt wird. 19. The method according to claim 17 or 18, characterized in that the fabric (2) is moved in method step b), c) and/or d) by means of a rotatably and/or drivably mounted fabric holder.
20. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 17 bis 19, dadurch gekennzeichnet, dass die Bewegung des Gewebes (2) eine Rotationsbewegung und/oder eine Translationsbewegung ist. 20. The method according to any one of claims 17 to 19, characterized in that the movement of the tissue (2) is a rotational movement and/or a translational movement.
21. Verfahren gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche 17-20, ferner aufweisend folgenden Verfahrensschritt 21. The method according to any one of the preceding claims 17-20, further comprising the following method step
Einstellen einer Leistung einer Ultraschallquelle 4 und/oder Einstellen von Pumpenparametern für die Erzeugung des Spülflüssigkeitsstrahls 51 und/oder Einstellen einer Anwendungsdauer und/oder Einstellen von Antriebsparametern. Setting an output of an ultrasound source 4 and/or setting pump parameters for generating the jet of rinsing liquid 51 and/or setting an application duration and/or setting drive parameters.
22. Verfahren einem der vorhergehenden Ansprüche 17 - 21 , ferner aufweisend folgenden Verfahrensschritt: 22. The method according to any one of the preceding claims 17 - 21, further comprising the following method step:
Erstellen von Behandlungsprogrammen. Creation of treatment programs.
23. Verfahren gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche 17-22, ferner aufweisend folgenden Verfahrensschritt: 23. The method according to any one of the preceding claims 17-22, further comprising the following method step:
Sterilfiltration der Spülflüssigkeit nach einem Auslaufen und/oder Abpumpen aus dem Behälter (3) und/oder Sterilfiltration der Spülflüssigkeit vor einem erneuten Einführen in den Behälter (3) und/oder vor einem erneuten Aufbringen der Spülflüssigkeit auf das Gewebe (2). Sterile filtration of the rinsing liquid after it has run out and/or been pumped out of the container (3) and/or sterile filtration of the rinsing liquid before it is reintroduced into the container (3) and/or before the rinsing liquid is applied to the tissue (2) again.
24. Verfahren gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche 17-23, dadurch gekennzeichnet, dass die Spülflüssigkeit über einen Ablauf (9) im Behälter (3) abgepumpt wird. 24. The method according to any one of the preceding claims 17-23, characterized in that the rinsing liquid is pumped out via an outlet (9) in the container (3).
PCT/EP2022/063324 2021-05-19 2022-05-17 Device and method for decellularising and/or purifying tissue WO2022243319A1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102021112930.3 2021-05-19
DE102021112930.3A DE102021112930A1 (en) 2021-05-19 2021-05-19 Apparatus and method for decellularizing and/or purifying tissue Description

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2022243319A1 true WO2022243319A1 (en) 2022-11-24

Family

ID=82019176

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/EP2022/063324 WO2022243319A1 (en) 2021-05-19 2022-05-17 Device and method for decellularising and/or purifying tissue

Country Status (2)

Country Link
DE (1) DE102021112930A1 (en)
WO (1) WO2022243319A1 (en)

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5513662A (en) * 1991-12-31 1996-05-07 Osteotech, Inc. Preparation of bone for transplantation
DE19508279C1 (en) 1995-03-08 1996-05-09 Hans Mueller UV illuminating device for blood and/or tissue extracts
US6024735A (en) * 1996-03-20 2000-02-15 Lifenet Research Foundation Process and composition for cleaning soft tissue grafts optionally attached to bone and soft tissue and bone grafts produced thereby
EP0988069B1 (en) 1997-06-13 2002-11-27 Edwards Lifesciences Corporation Treating biological tissue to mitigate calcification
WO2005112627A1 (en) * 2004-04-20 2005-12-01 Regeneration Technologies, Inc. Process and apparatus for treating implants
US20070160493A1 (en) * 2006-01-10 2007-07-12 Allosource Apparatus and Methods For Treating Allograft Products
US20170232145A1 (en) * 2012-09-04 2017-08-17 University Of Leeds Composite Bone Implants
US20180071079A1 (en) * 2011-12-09 2018-03-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods of treating a musculoskeletal tissue interface injury using decellularized composite tissue bioscaffolds

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5513662A (en) * 1991-12-31 1996-05-07 Osteotech, Inc. Preparation of bone for transplantation
DE19508279C1 (en) 1995-03-08 1996-05-09 Hans Mueller UV illuminating device for blood and/or tissue extracts
US6024735A (en) * 1996-03-20 2000-02-15 Lifenet Research Foundation Process and composition for cleaning soft tissue grafts optionally attached to bone and soft tissue and bone grafts produced thereby
EP0988069B1 (en) 1997-06-13 2002-11-27 Edwards Lifesciences Corporation Treating biological tissue to mitigate calcification
WO2005112627A1 (en) * 2004-04-20 2005-12-01 Regeneration Technologies, Inc. Process and apparatus for treating implants
US20070160493A1 (en) * 2006-01-10 2007-07-12 Allosource Apparatus and Methods For Treating Allograft Products
US20180071079A1 (en) * 2011-12-09 2018-03-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods of treating a musculoskeletal tissue interface injury using decellularized composite tissue bioscaffolds
US20170232145A1 (en) * 2012-09-04 2017-08-17 University Of Leeds Composite Bone Implants

Also Published As

Publication number Publication date
DE102021112930A1 (en) 2022-11-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2546687C2 (en)
DE69819883T2 (en) FLOW SYSTEM UNDER PRESSURE AND METHOD FOR TREATING A LIQUID-PERMEABLE WORKPIECE LIKE BONE
DE69629252T2 (en) Device and method for sterilizing medical instruments
DE102008006501B4 (en) Combined ultrasonic air backwashing process for the chemical-free in-situ cleaning of submerged membranes during backwashing during operation
EP2054088B1 (en) Device for the treatment of containers
DE69630293T2 (en) METHOD AND DEVICE FOR CLEANING HOLLOW BODIES
DE2854490C2 (en) Bone substitute material with improved biological stability based on collagen
DE2950893A1 (en) METHOD AND DEVICE FOR CLEANING OBJECTS LIKE SURGICAL DEVICES AND THE LIKE
DE102015201092B4 (en) Device and system for ultrasonic treatment of open wounds
WO2005051157A1 (en) Dishwasher with a water preparation system
WO2022243319A1 (en) Device and method for decellularising and/or purifying tissue
EP2168606A1 (en) Method and device for treating medical instruments
DE212011100070U1 (en) Device for the hygienic treatment of medical instruments, in particular those in a dental practice
DE3106789A1 (en) METHOD FOR STERILIZING ADHESIVE GLASSES AND DEVICE FOR CARRYING OUT THE METHOD
WO2011142407A1 (en) Decellularization method and artificial tissue for implantation into the human body
DE102017118238A1 (en) Wet cleaning device and method for operating a wet cleaning device
DE102008052001A1 (en) Process for water treatment
WO2007131249A2 (en) Device for cleaning bones or bone pieces
DE2854534C3 (en) Tooth pulp filling material
DE102010007168A1 (en) Bioreactor for the multiplication of microorganisms
DE10162931B4 (en) Apparatus and method for separating inhomogeneous biological tissue
DE102007014213B4 (en) Device for cleaning, disinfecting and lubricating English-language medical instruments
DE60025441T2 (en) Cleaning device for dental equipment
DE3711086C2 (en) Device for crushing body stones or body deposits
EP2030699A1 (en) Method for washing smaller objects

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 22729565

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE