WO2022173282A1 - 제한적 폐 절제술을 위한 폐 병변 국소화 다중영상조영제 조성물 - Google Patents

제한적 폐 절제술을 위한 폐 병변 국소화 다중영상조영제 조성물 Download PDF

Info

Publication number
WO2022173282A1
WO2022173282A1 PCT/KR2022/095025 KR2022095025W WO2022173282A1 WO 2022173282 A1 WO2022173282 A1 WO 2022173282A1 KR 2022095025 W KR2022095025 W KR 2022095025W WO 2022173282 A1 WO2022173282 A1 WO 2022173282A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
alexa fluor
dextran polymer
contrast agent
group
agent composition
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/KR2022/095025
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
김현구
챈위화
노지윤
최병현
박지호
백우진
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Korea Advanced Institute of Science and Technology KAIST
Korea University Research and Business Foundation
Original Assignee
Korea Advanced Institute of Science and Technology KAIST
Korea University Research and Business Foundation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from KR1020220016515A external-priority patent/KR102834509B1/ko
Application filed by Korea Advanced Institute of Science and Technology KAIST, Korea University Research and Business Foundation filed Critical Korea Advanced Institute of Science and Technology KAIST
Priority to US18/276,311 priority Critical patent/US20240238454A1/en
Publication of WO2022173282A1 publication Critical patent/WO2022173282A1/ko
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/0002—General or multifunctional contrast agents, e.g. chelated agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
    • A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
    • A61K49/0032—Methine dyes, e.g. cyanine dyes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
    • A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
    • A61K49/0032—Methine dyes, e.g. cyanine dyes
    • A61K49/0034—Indocyanine green, i.e. ICG, cardiogreen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0063—Preparation for luminescence or biological staining characterised by a special physical or galenical form, e.g. emulsions, microspheres
    • A61K49/0069—Preparation for luminescence or biological staining characterised by a special physical or galenical form, e.g. emulsions, microspheres the agent being in a particular physical galenical form
    • A61K49/0073—Preparation for luminescence or biological staining characterised by a special physical or galenical form, e.g. emulsions, microspheres the agent being in a particular physical galenical form semi-solid, gel, hydrogel, ointment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0063—Preparation for luminescence or biological staining characterised by a special physical or galenical form, e.g. emulsions, microspheres
    • A61K49/0069—Preparation for luminescence or biological staining characterised by a special physical or galenical form, e.g. emulsions, microspheres the agent being in a particular physical galenical form
    • A61K49/0076—Preparation for luminescence or biological staining characterised by a special physical or galenical form, e.g. emulsions, microspheres the agent being in a particular physical galenical form dispersion, suspension, e.g. particles in a liquid, colloid, emulsion
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/04—X-ray contrast preparations
    • A61K49/0433—X-ray contrast preparations containing an organic halogenated X-ray contrast-enhancing agent
    • A61K49/0438—Organic X-ray contrast-enhancing agent comprising an iodinated group or an iodine atom, e.g. iopamidol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/04—X-ray contrast preparations
    • A61K49/0433—X-ray contrast preparations containing an organic halogenated X-ray contrast-enhancing agent
    • A61K49/0447—Physical forms of mixtures of two different X-ray contrast-enhancing agents, containing at least one X-ray contrast-enhancing agent which is a halogenated organic compound
    • A61K49/0457—Semi-solid forms, ointments, gels, hydrogels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2123/00—Preparations for testing in vivo
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels

Definitions

  • the present invention relates to a lung lesion localized multi-imaging agent composition for restrictive lung resection and a method for preparing the same.
  • the most common cancers in Koreans are stomach cancer, colorectal cancer, lung cancer, thyroid cancer, and liver cancer. Based on the national cancer incidence statistics, the risk of cancer is increasing, with the lifetime risk of developing cancer at 1 in 3 men and 1 in 4 women. In particular, in the case of lung cancer, the number of lung cancer patients is expected to increase in view of the increase in smokers, especially among adolescents and women, along with worsening air pollution caused by industrialization. In the United States, lung cancer is the most common cause of cancer-related deaths in both men and women.
  • SCLC small cell lung cancer
  • NSCLC non-small cell lung cancer
  • SCLC small cell lung cancer
  • SLC small cell lung cancer
  • NSCLC non-small cell lung cancer
  • adenocarcinoma adenocarcinoma
  • squamous cell carcinoma large-cell carcinoma.
  • Adenocarcinoma mainly occurs in the peripheral region of the lungs, occurs well in women or non-smokers, and is often metastasized even though it is small in size, and its incidence is increasing recently.
  • squamous cell carcinoma is mainly found in the center of the lung, mainly grows into the lumen of the bronchus and shows symptoms that block the bronchus, is common in men, and is known to be closely related to smoking.
  • Large cell carcinoma mainly occurs near the surface of the lung (periphery of the lung), and about half of it occurs in the large bronchi, accounting for 4 to 10% of all lung cancers, and the cell size is generally large, some of which rapidly proliferate and It is known that the prognosis is poor compared to other non-small cell lung cancers because of the tendency to metastasize.
  • Common treatments for lung cancer include palliative care, surgery, chemotherapy and radiation therapy.
  • lung cancer If lung cancer is diagnosed at an early stage, it can be recovered through drug treatment and radiation therapy, but if the condition is aggravated to a certain level, surgical resection is essential, and drug treatment and radiation therapy are combined.
  • the early diagnosis rate of lung cancer is not high at about 20%. Therefore, most lung cancer patients undergo lung resection, and the lungs function smoothly due to their structural characteristics. it is advantageous to
  • near-infrared fluorescence imaging technology is attracting attention as a non-invasive disease diagnosis and monitoring technology.
  • the 700-900 nm region which is the near-infrared region, has low background autofluorescence, low light scattering, and is capable of imaging deep tissues, making it an ideal living body. video can be performed.
  • fluorescent dyes for fluorescence imaging indocyanine green (ICG) is a near-infrared fluorescent dye approved for clinical use.
  • a fluorescent contrast medium through an intravenous injection requires a high concentration of at least 5 mg/kg of a fluorescent contrast medium to be injected for cancer detection, and is uniformly applied to various carcinomas such as colorectal cancer, breast cancer, skin cancer, and lung cancer, but in the case of lung cancer, the There is a problem that the search rate is very low. Specifically, it has been reported that in lung cancer, the cancer screening rate is only 10% because the cancer tissue is mainly located at a depth of 1 cm or more from the lung surface.
  • Non-patent prior art related to the present invention includes Onda N, Kimura M, Yoshida T, Shibutani M. Preferential tumor cellular uptake and retention of indocyanine green for in vivo tumor imaging. Int J Cancer. 2016 Aug 1;139(3):673-82. there is
  • An object of the present invention is to provide a multi-imaging contrast agent composition in which a water-soluble fluorescent dye and a fat-soluble contrast material are loaded at the same time, thereby having an excellent lung lesion labeling effect.
  • Another object of the present invention is to provide a method for preparing the composition.
  • Another object of the present invention is to provide a hydrogel on which the fluorescent dye and the contrast material are mounted.
  • the present invention includes a hydrogel formed by crosslinking a first dextran polymer and a second dextran polymer, wherein the first dextran polymer has a hydroxyl group substituted with a vinyl sulfone group,
  • the 2-dextran polymer provides a hydrogel in which a hydroxyl group is substituted with a thiol group and a vinyl sulfone group.
  • 10 to 30 mol% of a hydroxyl group may be substituted with a vinyl sulfone group
  • 10 to 30 mol% of a hydroxyl group is substituted with a thiol group and a vinyl sulfone group it may have been
  • the present invention also provides a multi-image contrast agent composition
  • a multi-image contrast agent composition comprising a hydrogel formed by crosslinking a first dextran polymer and a second dextran polymer, wherein the hydrogel is loaded with a fluorescent dye and a contrast material.
  • the first dextran polymer may have a hydroxyl group substituted with a vinyl sulfone group
  • the second dextran polymer may have a hydroxyl group substituted with a thiol group and a vinyl sulfone group.
  • the first dextran polymer 10 to 30 mol% of the hydroxyl group is substituted with a vinyl sulfone group
  • the second dextran polymer is 10 to 30 mol% of the hydroxyl group may be substituted with a thiol group and a vinyl sulfone group.
  • the fluorescent dye may be a cyanine-based fluorescent dye.
  • the fluorescent dye is indocyanine green (ICG), Alexa Fluor 647 (Alexa Fluor 647), Alexa Fluor 660 (Alexa Fluor 660), Alexa Fluor 680 (Alexa Fluor 680) , Alexa Fluor 700, Alexa Fluor 780, cy3.5, cy5, cy5.5, cy7, Cypate, ITCC, NIR820, NIR2, IRDye78, IRDye80, IRDye82, IRDye680 , IRDye700, IRDye800, DiD, DiR, Cresyl Violet, Nile Blue, Oxazine 750 and Rhodamine 800, Texas Red and mixtures thereof. It may be one or more selected from the group consisting of.
  • the contrast material may be iodized oil.
  • the contrast material may be included in less than 30% by volume based on the hydrogel.
  • the contrast material When the contrast material is 30% by volume or more, it becomes an unstable emulsion (FIG. 8), and the phase is separated, which may be unsuitable for administration into the body.
  • the fluorescent dye may be included in a concentration of 0.005 mg/mL to 0.02 mg/mL. When the concentration is out of the range, there may be a problem in that the fluorescence intensity decreases.
  • the composition may be for labeling a lung lesion.
  • the hydrogel may be formed by mixing the first dextran polymer and the second dextran polymer and then gelling within 20 to 250 seconds. If it is out of the above time, a problem of clinical application may occur, preferably within 20 seconds to 250 seconds, more preferably within 20 seconds to 180 seconds, most preferably within 30 seconds to 40 seconds. When used in a clinical setting, it can be usefully used because rapid gelation is possible.
  • the present invention is a first dextran polymer in which a hydroxyl group is substituted with a vinylsulfone group; Preparing a first composition comprising a contrast material and a fluorescent dye (S1);
  • a second dextran polymer in which a hydroxyl group is substituted with a thiol group and a vinyl sulfone group;
  • Preparing a second composition comprising a contrast material and a fluorescent dye (S3);
  • It provides a method for preparing a multi-imaging contrast agent composition, comprising the step (S5) of mixing the first composition and the second composition after the sonication has been completed to form a gel (S5).
  • the present invention solves the problem that the conventional fluorescent contrast agent used in the dark screening method had a low screening rate for lung cancer.
  • the hydrogel gels at a fast rate so it is easy to use in clinical practice, and has the effect of being maintained in the lesion site of lung cancer for a long time.
  • FIG. 1 shows a schematic diagram of a hydrogel loaded with ICG and iodized oil on a dextran-based hydrogel.
  • Figure 2a shows a method for synthesizing a precursor by substituting dextran and a method for synthesizing a hydrogel.
  • Figure 2b shows a method of loading ICG and iodized oil on the hydrogel.
  • FIG. 3 shows a nuclear magnetic resonance analysis spectrum of a dextran polymer substituted with a vinyl sulfone group.
  • Figure 4 shows the nuclear magnetic resonance analysis spectrum of the dextran polymer substituted with a vinyl sulfone group and a thiol group.
  • FIG 11 shows a dual syringe used when the contrast agent of the present invention is applied.
  • Figure 12a shows the process of confirming the multi-image contrast agent in the in vivo (in-vivo) dog model.
  • Figure 12b shows a photograph visible to the naked eye according to the concentration of iodized oil.
  • Figure 12d shows the degree of colocalization when the concentration of iodized oil is 10% and 20%.
  • FIG. 13a shows the process of confirming a multi-imaging contrast agent in an in-vivo rabbit lung cancer model.
  • 13B shows that the contrast agent labels the lesion site in the rabbit lung cancer model.
  • 13C shows that the CT scan results show that the contrast material and ICG are maintained at the lesion site for 24 hours and more.
  • 13D is an ex-vivo image obtained by photographing fluorescence of a contrast agent.
  • ICG indocyanine green
  • the ICG is an FDA-approved material, and it is known as a contrast agent that has no radiation exposure and can easily identify the location of a lung lesion using a fluorescence imaging surgical device during surgery using a thoracoscopic procedure.
  • the location of lung lesions can be easily identified in real time through near-infrared fluorescence thoracoscopy during surgery.
  • ICG a water-soluble substance
  • iodized oil which is an X-ray contrast agent mainly used in clinical practice, is a lipophilic material, so it has a limitation in that it is not easy to mount on water-soluble ICG and hydrogel.
  • a hydrogel is a material that can contain a large amount of water after a water-soluble polymer forms a three-dimensional structure through a chemical covalent bond. Due to these characteristics, hydrogel has been applied and used in the fields of tissue engineering, regenerative medicine, diagnostic medicine, and drug delivery for many years. In particular, “injectable” hydrogels made by modifying the physicochemical properties of organic chemical functional groups or polymers are considered clinically important.
  • the present invention provides a multi-image contrast agent composition
  • a multi-image contrast agent composition comprising a hydrogel formed by crosslinking a first dextran polymer and a second dextran polymer, wherein the hydrogel is loaded with a fluorescent dye and a contrast material.
  • the first dextran polymer has a hydroxyl group substituted with a vinyl sulfone group
  • the second dextran polymer has a hydroxyl group substituted with a vinyl sulfone group and a thiol group.
  • 10 to 30 mol% of the hydroxyl groups are substituted with a vinyl sulfone group
  • the second dextran polymer has 10 to 30 mol% of the hydroxyl groups substituted with a vinyl sulfone group and a thiol group do it with
  • a thiol group and a hydroxyl group of the first dextran polymer and the second dextran polymer may be cross-linked to form a hydrogel.
  • the hydroxyl group is substituted with a vinyl sulfone group and a thiol group
  • a thiol group specifically means that a thiol group is added to the double bond carbon portion of the vinyl sulfone group after the vinyl sulfone group is substituted with the hydroxyl group.
  • a preferred example thereof is shown in Chemical Formula 1 below.
  • the fluorescent dye of the present invention is a water-soluble dye, and may be a cyanine-based fluorescent dye.
  • the fluorescent dye is indocyanine green (ICG), Alexa Fluor 647 (Alexa Fluor 647), Alexa Fluor 660 (Alexa Fluor 660), Alexa Fluor 680 (Alexa Fluor 680), Alexa Fluor 700 (Alexa Fluor 700) , Alexa Fluor 780, cy3.5, cy5, cy5.5, cy7, Cypate, ITCC, NIR820, NIR2, IRDye78, IRDye80, IRDye82, IRDye680, IRDye700, IRDye800, DiD, DiR, Cresyl Violet (Cresyl Violet), Nile Blue (Nile Blue), oxazine 750 (Oxazine 750) and rhodamine 800 (Rhodamine 800), Texas Red (Texas Red) and may be at least one selected from
  • composition of the present invention contains ICG, a water-soluble dye that can perform CT imaging in more detail, and iodized oil as a fat-soluble contrast material, which is an X-ray contrast agent, so that the location of deep lung lesions can be easily identified. It has the advantage of being able to keep it for a long time.
  • the contrast material may be included in less than 30% by volume based on the hydrogel. Preferably, it may be included in an amount of 0.01 or more and less than 30% by volume.
  • the phase may be in the form of an unstable emulsion in which it is difficult to use.
  • the fluorescent dye is included in the hydrogel at a concentration of 0.005 mg/mL to 0.02 mg/mL, and the best intensity value is confirmed in the concentration range.
  • the present invention also provides a first dextran polymer in which a hydroxyl group is substituted with a vinylsulfone group; Preparing a first composition comprising a contrast material and a fluorescent dye (S1);
  • a second dextran polymer in which a hydroxyl group is substituted with a thiol group and a vinyl sulfone group;
  • Preparing a second composition comprising a contrast material and a fluorescent dye (S3);
  • It provides a method for preparing a multi-imaging contrast agent composition, comprising the step (S5) of mixing the first composition and the second composition after the sonication has been completed to form a gel (S5).
  • step S5 of the present invention can be gelled within 20 seconds to 250 seconds, preferably from 20 seconds to 180 seconds, more preferably from 30 seconds to 40 seconds. can be used
  • the contrast medium composition of the present invention may further include a known contrast material and a fluorescent dye in addition to the above-described contrast material and fluorescent dye as an active ingredient, and used in combination with other known diagnostic methods for obtaining specific information on a lesion of a lung disease can be
  • the fluorescent contrast agent of the present invention when it is a near-infra-red fluorescent dye, it exhibits fluorescence properties in a near-infrared wavelength region. Therefore, the composition of the present invention can acquire an image through a near-infrared fluorescence imaging (NIR imaging) method known to those skilled in the art, but is not limited thereto, for example, using a near-infrared optical imaging system (NIR optical imaging system). and shoot a video.
  • the near-infrared fluorescence spectrum may be measured using a fluorescence spectrophotometer.
  • a vinyl sulfone group of the following formula 2 (precursor 1) and It was transformed into a polymer having a thiol group (precursor 2) of Formula 3 below.
  • divinylsulfone (MW: 118.16 g/mol) of 1.25 times the number of moles of hydroxyl groups contained in the dextran polymer is added in 0.1M NaOH ( ⁇ pH 11 or higher) and then the desired vinyl sulfone is added.
  • the synthesis was carried out by varying the reaction time according to the degree of Pon group substitution. When the chemical reaction was terminated according to the reaction time, 6M HCl was added to drop the pH to 7 or less.
  • the dextran polymer substituted with the vinyl sulfone group was dialyzed with water for about 3 days (3.5 kDa molecular weight cut-off dialysis membrane) to remove chemicals not consumed during the reaction.
  • a first dextran polymer in a solid form substituted with a vinyl sulfone group was obtained through freeze-drying. Whether the vinyl sulfone group was well substituted was confirmed through nuclear magnetic resonance ( 1 H NMR) analysis.
  • Figure 3 shows 1 H NMR spectra of dextran polymers substituted with vinyl sulfone groups of 10 mol%, 20 mol%, and 30 mol%, respectively.
  • the first dextran polymer substituted with 10 mol%, 20 mol%, and 30 mol% of a vinyl sulfone group was mixed with 1M phosphate buffer saline. ) was used to adjust the pH to 7.4.
  • Dithiothreitol MW: 154.253 g/mol was added 5 times or more compared to the number of moles of substituted vinyl sulfone groups, and the reaction was carried out for about 40 minutes so that thiol groups could be added to all vinyl sulfone groups.
  • the prepared lyophilized first dextran polymer and the second dextran polymer were each dissolved in PBS, and then ICG and iodized oil were added thereto, respectively. Thereafter, sonication was performed for 5 minutes each for emulsion of fat-soluble iodized oil.
  • the same volume of the first dextran polymer solution and the second dextran polymer solution obtained after sonication were mixed to enable gelation.
  • the mixing conditions were pH 7.4 (living pH), and the gel formation was completed after about 30 to 40 seconds by mixing at room temperature (FIG. 2b).
  • the gelation time according to the concentration of the polymer and the degree of functional group substitution was confirmed and shown in FIG. 5 .
  • the concentration of the polymer was expressed as w/v % with respect to PBS, and the functional group substitution degree (DM) was 10, 20, and 30 mol%, respectively.
  • the hydrogel having a functional group substitution degree of 20 mol% of the first dextran polymer and the second dextran polymer showed a clinically optimized gelation time of about 30 seconds. confirmed to have
  • the physical properties of the hydrogel according to the content of iodized oil were confirmed.
  • the iodized oil was tested at 0, 10, 20, and 30% (v/v), respectively, based on the total volume of the gel, and when it exceeds 30% (v/v), it becomes an uneven emulsion. was confirmed ( FIGS. 6 and 8 ).
  • an iodized oil concentration of 20% (v/v) was set as an optimized concentration. It was confirmed that when 20% (v/v) of iodized oil was contained, the gelation time was maintained for about 30 seconds without change ( FIG. 7 ).
  • the hydrogel containing 0.01 mg/ml of ICG and 20% of iodized oil will have the most effective fluorescence performance.
  • the release time of ICG and iodized oil was measured in PBS (Phosphate Buffered Saline) at 37° C. for 24 hours. Confirmed.
  • the hydrogel containing 10% iodized oil was almost invisible during C-arm imaging, and the gel containing 20% iodized oil was showed an ICG signal and a CT signal capable of discriminating the lesion site while being well maintained at the lesion site (FIG. 12d).
  • FIG. 13a the effect of the multi-image contrast gel in the rabbit lung cancer model was confirmed.
  • FIG. 13b the rabbit lung cancer lesion site is well labeled, and it was confirmed that iodized oil and ICG were well maintained at the lung cancer lesion site for 24 hours ( FIG. 13c ).
  • the ex vivo images are shown in FIG. 13D .
  • the present invention relates to a multi-image contrast agent composition and a manufacturing method capable of localizing a lung lesion site in applying a medical technique such as lung resection, and more specifically, a fluorescent dye and a contrast material are mounted on a dextran-based hydrogel. It has excellent lung lesion labeling ability and maintenance ability in the body. Therefore, the multi-imaging contrast agent composition of the present invention and its manufacturing method can be variously applied for the purpose of labeling a lesion site, such as in internal resection.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

본 발명은 다중영상조영제 조성물과 이의 제조방법에 관한 것으로, 상기 조성물은 제1덱스트란 고분자 및 제2덱스트란 고분자가 가교되어 형성된 하이드로젤을 포함하고, 상기 하이드로젤은 형광염료 및 조영물질이 탑재된 것을 특징으로 한다. 상기 조성물은 지용성의 조영물질과 수용성의 형광염료를 동시에 탑재한 덱스트란 기반 하이드로젤을 포함하는 것으로, 폐 병변의 정확한 국소화가 가능한 장점이 있다.

Description

제한적 폐 절제술을 위한 폐 병변 국소화 다중영상조영제 조성물
본 발명은 제한적 폐 절제술을 위한 폐 병변 국소화 다중영상조영제 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
우리나라 사람들에게 가장 많이 발생하는 암은 위암, 대장암, 폐암, 갑상선암, 간암이다. 국가 암 발생 통계를기초로 살펴보면 평생 암에 걸릴 확률이 남성은 3명 중 1명, 여성은 4명 중 1명으로 분석되는 등 암 발생에 대한 위험이 높아지고 있다. 특히 폐암의 경우, 산업화에 따른 대기오염의 악화와 함께 흡연자의 증가, 특히 청소년과 여성들의 흡연 증가 추세로 볼 때 폐암 환자의 수는 증가할 것으로 예상된다. 미국의 경우도 암 관련 사망가운데 남녀 모두에게 폐암은 가장 흔한 원인이다.
주요 형태의 폐암은 소세포 폐암(SCLC) 및 비소세포 폐암(NSCLC)이다. 소세포 폐암(SCLC)은 신속히 성장하는 유형의 폐암이다. 이는 비소세포 폐암보다 훨씬 더 빨리 퍼진다. 소세포 암종(연맥 세포 암), 혼합 소세포/대세포 암종 및 복합 소세포 암종의 3가지 상이한 유형의 소세포 폐암이 존재한다. 대부분의 소세포 폐암은 연맥 세포유형이다. 비소세포 폐암(NSCLC)은 가장 흔한 유형의 폐암이다. 선암, 편평상피세포암(squamous cell carcinoma) 및 대세포암(large-cell carcinoma)의 3가지 형태의 NSCLC가 존재한다. 선암은 폐 말초 부위에서주로 발생하고, 여성 또는 비흡연자에게서도 잘 발생하며, 크기가 작아도 전이가 되어 있는 경우가 많고, 최근 이의 발생 빈도가 증가하는 추세에 있다. 다음으로, 편평상피세포암은 주로 폐 중심부에서 발견되고, 주로 기관지 내강으로 자라 기관지를 막는 증상을 나타내며, 남성에게 흔하고, 흡연과 밀접하게 관련된 것으로 알려져 있다. 대세포암은 폐 표면 근처(폐 말초)에서 주로 발생하고, 절반가량은 큰 기관지에서 발생하며, 전체 폐암의 4 내지 10% 정도를 차지하고, 세포 크기가 대체적으로 크며, 그 중 일부는 빠르게 증식 및 전이되는 경향이 있어 다른 비소세포 폐암에 비해 예후가 나쁜 것으로 알려져 있다. 폐암에 대한 통상의 치료는 완화 처치, 수술, 화학 요법 및 방사선요법을 포함한다.
폐암이 조기에 진단될 경우에는 약물치료 및 방사선 치료 등을 통해 회복될 수 있으나, 일정 수준으로 병증이 악화된 경우에는 수술적 절제가 필수적이고 약물치료 및 방사선 치료를 병행하게 된다. 그런데 폐암의 조기 진단율은 약 20%로 높지 아니하다. 이에, 폐암 환자의 대부분은 폐 절제술을 시행하게 되는데 폐는 그 구조적 특성에 의해 원활하게 기능하는 특징을 가지고 있어 폐 절제술 시행 시 병변의 위치 및 크기를 정확하게 파악하여 종양과 적정한 거리를 절단하되 최소 절제하는 것이 유리하다.
한편, 영상화 기술 중 근적외선 형광 영상기술은 비침습성 질병 진단과 모니터링 기술로서 주목받고 있는데, 근적외선 영역인 700~900nm 영역이 백그라운드 자가 형광이 낮고 광산란이 적으며 깊은 조직까지 영상이 가능한 장점이 있어 이상적인 생체 영상을 수행할 수 있다. 형광 영상을 위한 형광 염료 중 인도시아닌 그린(indocyanine green, ICG)은 임상을 통해 사용이 승인된 근적외선 형광 염료로서 주로 간 혈관 및 심장 염색에 사용되고 있으며 다양한 진단 및 영상기술에 응용되고 있다.
1999년 ICG를 수술 전 정맥 주입하면 수술 중 근적외선 형광 영상 하에서 간암의 경계면 탐색이 가능함이 알려진 이래로, 최근 실제 임상에서 사용 가능한 패시브 타겟팅(passive targeting) 형광조영제를 이용한 암 탐색법이 활발하게 이용되고 있다.
그러나, 정맥 주사를 통한 형광조영제의 주입은 암 탐색을 위하여 최소 5mg/kg의 고농도 형광조영제가 주입되어야 하며, 대장암, 유방암, 피부암, 폐암 등 여러 암종에서 일률적으로 적용되고 있지만, 폐암의 경우 그 탐색율이 매우 낮은 문제가 있다. 구체적으로, 폐암은 암 조직이 폐 표면으로부터 1 ㎝ 이상의 깊이에 주로 위치하고 있어 암 탐색율이 10% 밖에 되지 않음을 보고되었다.
본 발명과 관련한 비특허 선행기술로는 Onda N, Kimura M, Yoshida T, Shibutani M. Preferential tumor cellular uptake and retention of indocyanine green for in vivo tumor imaging. Int J Cancer. 2016 Aug 1;139(3):673-82. 가 있다.
본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 수용성의 형광염료와 지용성의 조영물질이 동시에 탑재되어, 우수한 폐 병변 표지 효과를 갖는 다중영상조영제 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 조성물의 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 형광염료와 조영물이 탑재되는 하이드로젤을 제공하는 것이다.
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당해 기술분야의 통상의 기술자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기 과제를 해결하기 위하여 본 발명은 제1덱스트란 고분자 및 제2덱스트란 고분자가 가교되어 형성된 하이드로젤을 포함하고, 상기 제1덱스트란 고분자는 하이드록실기가 비닐설폰기로 치환된 것이고, 상기 제2덱스트란 고분자는 하이드록실기가 티올기 및 비닐설폰기로 치환된 하이드로젤을 제공한다.
상기 제1덱스트란 고분자는 하이드록실기의 10 내지 30 몰%가 비닐설폰기로 치환될 수 있고, 상기 제2덱스트란 고분자는, 하이드록실기의 10 내지 30 몰%가 티올기 및 비닐설폰기로 치환된 것일 수 있다.
또한 본 발명은 제1덱스트란 고분자 및 제2덱스트란 고분자가 가교되어 형성된 하이드로젤을 포함하고, 상기 하이드로젤은 형광염료 및 조영물질이 탑재된 것인, 다중영상조영제 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 구현예로서, 상기 제1덱스트란 고분자는 하이드록실기가 비닐설폰기로 치환된 것이고, 제2덱스트란 고분자는 하이드록실기가 티올기 및 비닐설폰기로 치환된 것일 수 있다.
본 발명의 다른 구현예로서, 상기 제1덱스트란 고분자는, 하이드록실기의 10 내지 30 몰%가 비닐설폰기로 치환된 것이고, 상기 제2덱스트란 고분자는, 하이드록실기의 10 내지 30 몰%가 티올기 및 비닐설폰기로 치환된 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 형광염료는 시아닌 계열의 형광염료인 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 형광염료는 인도시아닌 그린(Indocyanine green: ICG), 알렉사 플루오르 647(Alexa Fluor 647), 알렉사 플루오르 660(Alexa Fluor 660), 알렉사 플루오르 680(Alexa Fluor 680), 알렉사 플루오르 700(Alexa Fluor 700), 알렉사 플루오르 780(Alexa Fluor 780), cy3.5, cy5, cy5.5, cy7, 사이페이트(Cypate), ITCC, NIR820, NIR2, IRDye78, IRDye80, IRDye82, IRDye680, IRDye700, IRDye800, DiD, DiR, 크레실 바이올렛(Cresyl Violet), 나일 블루(Nile Blue), 옥사진 750(Oxazine 750) 및 로다민800(Rhodamine800), 텍사스 레드(Texas Red) 및 이들의 혼합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 조영물질은 아이오다이즈드 오일인 것일 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 조영물질은 하이드로젤에 대하여 30 부피% 미만으로 포함되는 것일 수 있다. 상기 조영물질이 30 부피% 이상인 경우에는 불안정한 에멀전 형태가 되며(도 8), 상(phase)이 분리되어 체내에 투여하기 부적합할 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 형광염료는 0.005 mg/mL 내지 0.02 mg/mL의 농도로 포함되는 것일 수 있다. 상기 농도 범위를 벗어나는 경우에는 형광 세기가 감소하는 문제점이 발생할 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 조성물은 폐 병변의 표지용인 것일 수 있다.
본 발명의 또다른 구현예로서, 상기 하이드로젤은, 제1덱스트란 고분자 및 제2덱스트란 고분자가 혼합된 후 20초 내지 250초 내에 젤화되어 형성된 것일 수 있다. 상기 시간을 벗어나는 경우, 임상 적용이 어려운 문제점이 발생할 수 있으며, 바람직하게는 20초 내지 250초 내에, 더욱 바람직하게는 20초 내지 180초, 가장 바람직하게는 30초 내지 40초 내에 젤화될 수 있어 임상에서 사용 시 빠른 젤화가 가능한 바 유용하게 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 하이드록실기가 비닐설폰기로 치환된 제1덱스트란 고분자; 조영물질 및 형광염료를 포함하는 제1조성을 준비하는 단계(S1);
상기 제1조성에 음파처리하는 단계(S2);
하이드록실기가 티올기 및 비닐설폰기로 치환된 제2덱스트란 고분자; 조영물질 및 형광염료를 포함하는 제2조성을 준비하는 단계(S3);
상기 제2조성에 음파처리하는 단계(S4); 및
음파처리가 완료된 제1조성 및 제2조성을 혼합하여 젤화하는 단계(S5)를 포함하는, 다중영상조영제 조성물의 제조방법을 제공한다.
본 발명은 암탐색법에서 사용되었던 종래 형광조영제의 폐암의 탐색률이 낮았던 문제를 해결한 것으로, 본 발명의 다중영상조영제는 지용성 조영물질 및 수용성 형광염료를 동시에 탑재하는 하이드로젤을 포함한다. 상기 하이드로젤은 빠른 속도로 젤화되어 임상에서 사용이 용이하고, 폐암의 병변 부위에 장시간 유지되는 효과가 있다.
본 발명의 효과는 이상에서 언급된 것들에 한정되지 않으며, 언급되지 아니한 다른 효과들은 아래의 기재로부터 통상의 기술자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
도 1은 덱스트란 기반 하이드로젤에 ICG 및 아이오다이즈드 오일이 탑재된 하이드로젤의 모식도를 나타낸 것이다.
도 2a는 덱스트란을 치환하여 전구체를 합성하는 방법 및 하이드로젤 합성 방법을 나타낸 것이다.
도 2b는 ICG 와 아이오다이즈드 오일을 하이드로젤에 탑재하는 방법을 나타낸 것이다.
도 3은 비닐설폰기로 치환된 덱스트란 고분자의 핵자기공명분석 스펙트럼을 나타낸 것이다.
도 4는 비닐설폰기 및 티올기로 치환된 덱스트란 고분자의 핵자기공명분석 스펙트럼을 나타낸 것이다.
도 5는 젤 농도 및 작용기 치환 정도에 따른 젤화 되는 시간을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 10%와 20%의 아이오다이즈드 오일이 함유된 젤의 생체 내(in-vivo) 촬영 결과를 나타낸 것이다.
도 7은 각각 다른양의 아이오다이즈드 오일이 포함된 하이드로젤의 젤화 되는 시간을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 8은 각기 다른 양의 아이오다이즈드 오일이 함유된 하이드로젤의 안정성을 CT 시그널로 나타낸 것이다.
도 9는 ICG 농도에 따른 형광 세기를 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 10은 ICG 및 아이오다이즈드 오일의 방출시간을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 11은 본 발명의 조영제의 적용시 사용하는 듀얼 시린지를 나타낸 것이다.
도 12a는 생체 내(In-vivo) 개 모델에서 다중영상조영제를 확인하는 과정을 나타낸 것이다.
도 12b는 아이오다이즈드 오일의 농도에 따라 육안으로 보이는 사진을 나타낸 것이다.
도 12c는 아이오다이즈드 오일의 농도에 따라 측정되는 형광을 나타낸 것이다.
도 12d는 아이오다이즈드 오일의 농도가 10% 및 20%일 때의 공국소화도를 나타낸 것이다.
도 13a는 생체 내(In-vivo) 토끼 폐암 모델에서 다중영상조영제를 확인하는 과정을 나타낸 것이다.
도 13b는 토끼 폐암 모델의 병변부위를 조영제가 표지하는 것을 나타낸 것이다.
도 13c는 CT촬영 결과 24시간 및 그 이상 동안 조영물질 및 ICG가 병변부위에서 유지되고 있음을 나타낸 것이다.
도 13d는 조영제의 형광을 촬영한 체외(Ex-vivo) 이미지이다.
CT (computed tomography) 스크리닝의 증가에 따른 초기 폐 결절 환자의 증가로 제한적 폐 절제술의 필요성이 증가됨에 따라, 수술 전 병변 위치를 확인하여 표지하는 폐 병변 국소화 (localization)의 중요성도 증가되었다. 따라서 수술 전 CT 유도 하에 방사선 조영제(radiocontrast)인 아이오다이즈드 오일이나 후크와이어(hookwire) 등을 이용한 폐 병변의 위치를 미리 표지하는 국소화 연구들이 활발히 진행되고 있지만 현재 사용되고 있는 폐 병변 국소화 방법들은 통증, 기흉과 같은 합병증을 유발, 기기사용의 번거로움, 폐 절제면 탐색의 어려움 등의 어려움을 겪고 있다.
이와 같은 어려움을 줄이고자, 최근 ICG(indocyanine green)의 형광성질을 이용한 형광 영상 유도 하 폐 병변의 국소화를 진행한 연구들이 진행되고 있다. 상기 ICG는 FDA 승인 물질로서, 방사선 피폭이 없으며 흉강경을 이용한 수술 중 형광 영상 수술 장비를 이용하여 폐 병변의 위치를 쉽게 확인할 수 있는 조영제로 알려졌다. ICG를 이용하여 폐 결절을 국소화 할 경우, 수술 중 근적외선 형광 흉강경을 통해 실시간으로 폐 병변의 위치를 쉽게 파악할 수 있다.
그러나 수용성 물질인 ICG를 폐 병변 국소화에서 단독 사용 시 주변 폐 조직으로 쉽게 퍼져 폐 병변의 정확한 위치 파악과 폐 절제면 확인이 어렵고, 1 ㎝ 이상 깊이에 주입될 경우 ICG의 낮은 침투성(penetration) 때문에 수술 중 폐 병변의 위치 확인이 어렵다는 단점이 있다.
반면, 임상에 주로 사용되는 X-선 조영제(X-ray contrast agent)인 아이오다이즈드 오일은 지용성(lipophilic) 물질이라, 수용성인 ICG 및 하이드로젤에 탑재가 용이하지 않다는 한계점을 내포하고 있다.
그러므로 기존에 폐 병변 국소화에 사용되는 물질들의 한계를 극복할 수 있으며 ICG와 아이오다이즈드 오일을 동시에 탑재할 수 있는 형태의 조영제를 개발하기 위해 예의 연구한 결과, 하이드로젤 형태에 주목하였다.
하이드로젤(hydrogel)이란, 수용성 고분자가 화학적 공유결합을 통해 3차원 구조를 형성한 후 많은 양의 물을 포함할 수 있는 물질이다. 이와 같은 특성 때문에 다년간 조직공학 (tissue engineering), 재생의료(regenerative medicine), 진단의학(diagnostics) 및 약물전달(drug delivery) 분야에서 하이드로젤이 응용, 사용되고 있다. 특히 유기화학적 작용기 혹은 고분자의 물리화학적 특성을 변형하여 만든 “주사가능 (injectable)“한 하이드로젤은 임상적으로 중요하게 고려되고 있다.
따라서, 본 발명은, 제1덱스트란 고분자 및 제2덱스트란 고분자가 가교되어 형성된 하이드로젤을 포함하고, 상기 하이드로젤은 형광염료 및 조영물질이 탑재된 것인, 다중영상조영제 조성물을 제공한다.
본 발명에서 상기 제1덱스트란 고분자는 하이드록실기가 비닐설폰기로 치환된 것이고, 제2덱스트란 고분자는 하이드록실기가 비닐설폰기 및 티올기로 치환된 것이다. 상기 제1덱스트란고분자는 하이드록실기 중 10 내지 30 몰%가 비닐설폰기로 치환되고, 상기 제2덱스트란고분자는 하이드록실기 중 10 내지 30 몰%가 비닐설폰기 및 티올기로 치환딘 것을 특징으로 한다. 상기 제1덱스트란 고분자와 제2덱스트란 고분자의 티올기 및 하이드록실기가 가교(crosslinking)되어, 하이드로젤이 형성될 수 있다. 즉, 상기 하이드로젤의 하이드록실기 중 10 내지 30 몰%가 치환된 형태인 것일 수 있다. 본 명세서에서 “하이드록실기가 비닐설폰기 및 티올기로 치환”되었다는 것은 구체적으로 하이드록실기에 비닐설폰기가 치환된 후, 상기 비닐설폰기의 이중결합탄소 부위에 티올기가 첨가반응한 것을 의미한다. 그 바람직한 예시를 하기 화학식 1에 나타내었다.
Figure PCTKR2022095025-appb-img-000001
본 발명의 형광염료는 수용성 염료로서, 시아닌계열의 형광염료일 수 있다. 상기 형광염료는 인도시아닌 그린(Indocyanine green: ICG), 알렉사 플루오르 647(Alexa Fluor 647), 알렉사 플루오르 660(Alexa Fluor 660), 알렉사 플루오르 680(Alexa Fluor 680), 알렉사 플루오르 700(Alexa Fluor 700), 알렉사 플루오르 780(Alexa Fluor 780), cy3.5, cy5, cy5.5, cy7, 사이페이트(Cypate), ITCC, NIR820, NIR2, IRDye78, IRDye80, IRDye82, IRDye680, IRDye700, IRDye800, DiD, DiR, 크레실 바이올렛(Cresyl Violet), 나일 블루(Nile Blue), 옥사진 750(Oxazine 750) 및 로다민800(Rhodamine800), 텍사스 레드(Texas Red) 및 이들의 혼합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다. 본 발명의 조영물질은 지용성의 조영물질로서, 바람직하게는 아이오다이즈드 오일일 수 있다.
본 발명의 조성물은 보다 상세하게 CT 촬영이 가능한 수용성 염료인 ICG와 X-ray 조영제인 지용성의 조영물질로 아이오다이즈드 오일을 포함하여, 깊은 위치에 있는 폐 병변의 위치를 쉽게 파악할 수 있으며, 장시간 유지가 가능한 장점이 있다.
상기 조영물질은 하이드로젤에 대하여 30 부피% 미만으로 포함되는 것일 수 있다. 바람직하게는 0.01 이상 30부피% 미만으로 포함될 수 있다. 상기 조영물질이 30 부피% 이상인 경우 상(phase)이 분리된 불안정한 에멀젼 형태가 되어 사용이 어려운 문제점이 발생할 수 있다.
상기 형광염료는 0.005 mg/mL 내지 0.02 mg/mL의 농도로 하이드로젤에 포함되는 것으로, 상기 농도 범위에서 최상의 세기(intensity) 값이 확인된다.
본 발명은 또한, 하이드록실기가 비닐설폰기로 치환된 제1덱스트란 고분자; 조영물질 및 형광염료를 포함하는 제1조성을 준비하는 단계(S1);
상기 제1조성에 음파처리하는 단계(S2);
하이드록실기가 티올기 및 비닐설폰기로 치환된 제2덱스트란 고분자; 조영물질 및 형광염료를 포함하는 제2조성을 준비하는 단계(S3);
상기 제2조성에 음파처리하는 단계(S4); 및
음파처리가 완료된 제1조성 및 제2조성을 혼합하여 젤화하는 단계(S5)를 포함하는, 다중영상조영제 조성물의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 S5단계의 젤화는, 20초 내지 250초 내에, 바람직하게는 20초 내지 180초, 더욱 바람직하게는 30초 내지 40초 내에 젤화될 수 있어 임상에서 사용 시 빠른 젤화가 가능한 바 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 조영제 조성물은 유효성분으로서 상술한 조영물질과 형광염료 이외에 공지된 조영물질 및 형광염료를 추가로 포함할 수 있고, 폐 질환의 병변에 대한 구체적인 정보 획득을 위한 공지된 다른 진단방법과 병용될 수 있다.
한편, 본 발명의 형광 조영제가 근적외선 형광 다이(near infra-red fluorescent dye)인 경우, 근적외선 파장영역에서 형광 특성을 나타낸다. 따라서 본 발명의 조성물은 당해 분야의 기술자에게 공지된 근적외선 형광 영상(NIR imaging)방법을 통해 이미지를 획득할 수 있으며, 이에 제한되지 않으나 예를 들어 근적외선 광학영상 측정장치(NIR optical imaging system)를 이용하여 영상을 촬영하고. 형광 분광계(Fluorescence Spectrophotometer)를 이용하여 근적외선 형광 스펙트럼을 측정할 수도 있다.
실시예에서 사용한 용어는 단지 설명을 목적으로 사용된 것으로, 한정하려는 의도로 해석되어서는 안 된다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 명세서에서, "포함하다" 또는 "가지다" 등의 용어는 명세서 상에 기재된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이지, 하나 또는 그 이상의 다른 특징들이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 실시예가 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥 상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
또한, 첨부 도면을 참조하여 설명함에 있어, 도면 부호에 관계없이 동일한 구성 요소는 동일한 참조부호를 부여하고 이에 대한 중복되는 설명은 생략하기로 한다. 실시예를 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 실시예의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.
이하에서, 첨부된 도면을 참조하여 실시예들을 상세하게 설명한다. 그러나, 실시예들에는 다양한 변경이 가해질 수 있어서 특허출원의 권리 범위가 이러한 실시예들에 의해 제한되거나 한정되는 것은 아니다. 실시예들에 대한 모든 변경, 균등물 내지 대체물이 권리 범위에 포함되는 것으로 이해되어야 한다.
실시예 1. 하이드로젤의 제조방법
본 실시예에서는, 도 2a에 나타낸 것과 같이 하이드로젤의 합성을 위해 덱스트란 고분자의 하이드록실(hydroxyl) 작용기를 클릭화학기법(click chemistry)을 활용하여 하기 화학식 2의 비닐설폰기(전구체 1) 및 하기 화학식 3의 티올기(전구체 2)를 갖고 있는 고분자로 변형시켰다.
Figure PCTKR2022095025-appb-img-000002
Figure PCTKR2022095025-appb-img-000003
보다 상세하게는, 덱스트란 고분자에 포함된 하이드록실기의 몰수 대비 1.25배의 다이비닐설폰(divinylsulfone, MW: 118.16 g/mol)을 0.1M NaOH (~pH 11 이상)에서 넣어준 후 원하는 비닐설폰기 치환 정도에 따라 반응시간을 달리하여 합성을 진행하였다. 상기 화학반응을 반응 시간에 따라 종료할때는 6M HCl을 넣어주어 pH를 7 이하로 떨어뜨려 주는 것으로 하였다. 이렇게 비닐설폰기로 치환된 덱스트란 고분자를 3일 정도 물로 투석(dialysis)시켜 주어 (3.5kDa molecular weight cut-off dialysis membrane) 반응시 소모되지 않은 화학물들을 제거해 주었다. 투석 후 동결건조를 통해 비닐설폰기로 치환된 고체형태의 제1 덱스트란 고분자를 획득하였다. 비닐설폰기로 치환이 잘 되었는지의 여부는 핵자기공명(1H NMR) 분석을 통해 확인하였다.
도 3에 각각 10몰%, 20몰%, 그리고 30몰%의 비닐설폰기로 치환된 덱스트란 고분자의 1H NMR 스펙트럼을 나타내었다. 여기서 치환 정도는　δ = 6.9 와 at δ= 2에 해당하는 피크(peak)의 곡선아래면적(area under curve)를 적분 후 비교하여 확인하였다.
비닐설폰기 및 티올기로 치환된 제2 덱스트란 고분자를 합성하기 위해, 상기 10몰%, 20몰%, 그리고 30몰%의 비닐설폰기로 치환된 제1 덱스트란 고분자를 1M 포스페이트 버퍼(phosphate buffer saline)를 이용하여 pH 7.4로 맞추어 주었다. 치환된 비닐설폰기의 몰수 대비 5배 이상의 다이티오트레이톨(dithiothreitol, MW: 154.253 g/mol)을 첨가해 주어 약 40분간 반응을 진행하여 모든 비닐설폰기에 티올기가 첨가될 수 있도록 하였다. 40분 뒤 1M HCl을 첨가해 주어 pH를 약산성의 조건으로 만든 뒤 3일간의 투석(dialysis)을 통해 반응시 소모되지 않은 다이티오트레이톨을 제거해 주었다. 투석 후 티올기와 비닐설폰기로 치환된 제2 덱스트란 고분자를 동결건조하였다. 성공적인 티올기 치환 여부는 핵자기공명(1H NMR)을 활용하여 δ = 6.9 피크가 사라지는지 여부를 통해 확인하였다 (도 4).
그 다음, 제조된 동결건조 상태의 제1 덱스트란 고분자 및 제2 덱스트란 고분자를 각각 PBS에 녹인 후, 각각 ICG 및 아이오다이즈드 오일을 첨가하였다. 이후 지용성인 아이오다이즈드 오일의 에멀젼(emulsion)화를 위해 음파처리(sonication)를 각각 5분 동안 진행하였다. 음파처리 이후 얻어진 동일한 부피의 제1 덱스트란 고분자 용액과 제2 덱스트란 고분자 용액을 혼합하여 젤화될 수 있도록 하였다. 혼합조건은 pH 7.4 (생체 pH), 상온 (room temperature)에서 혼합하여 약 30 내지 40초 후에 젤 형성이 완료되었다 (도 2b).
실시예 2. 젤농도 및 작용기 치환 정도의 최적화
상기 방법에서 젤화되는 시간을 최적화하기 위하여, 고분자의 농도 및 작용기 치환 정도에 따른 젤화 시간을 확인하여 도 5에 나타내었다. 고분자의 농도는 PBS에 대하여 w/v %로 나타내었고, 작용기 치환정도(DM)는 각각 10, 20 및 30 몰%이다.
실험결과 10%(w/v)의 고분자 농도에서, 제1 덱스트란 고분자 및 제2 덱스트란 고분자의 작용기 치환 정도가 20몰%인 하이드로젤이 약 30초 정도의 임상적으로 최적화된 젤화시간을 갖는 것으로 확인되었다.
실시예 3. 아이오다이즈드 오일 함유량에 따른 하이드로젤의 최적화
아이오다이즈드 오일의 함유량에 따른 하이드로젤의 물성을 확인하였다. 아이오다이즈드 오일은 젤의 총 부피를 기준으로 각각 0, 10, 20 및 30%(v/v)로 실험하였으며, 30%(v/v) 이상이 되면 고르지 못한 에멀젼(emulsion)이 되는 것이 확인되었다 (도 6 및 도 8). 또한 20%(v/v) 미만일때는 생체 내 실험결과상 젤의 부피에 따라 CT 시그널 확인이 되지 않는 것을 확인하였다 (도 6). 따라서 20%(v/v)의 아이오다이즈드 오일 농도를 최적화된 농도로 설정하였다. 20%(v/v)의 아이오다이즈드 오일 함유 시 젤화되는 시간이 변화없이 약 30초정도로 유지되는 것을 확인하였다(도 7).
실시예 4. ICG 농도의 최적화
또한 ICG 농도 설정을 위해, Hironobu Wada 등의 'Minimally Invasive Electro-Magnetic Navigational Bronchoscopy-Integrated Near-Infrared-Guided Sentinel Lymph Node Mapping in the Porcine Lung (PLoS ONE 10(5): e0126945. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0126945)' 논문을 참고하는 동시에 직접 최적화 실험을 진행하였다. 이때, ICG 농도가 약 0.005 mg/ml ~ 0.02 mg/ml 일 때 최상의 세기(intensity)값을 보이는 것을 확인하였다 (도 9).
실시예 5. ICG 및 아이오다이즈드 오일의 농도에 따른 하이드로젤의 형광성능 확인
상기 결과들로부터, 0.01mg/ml의 ICG 및 20%의 아이오다이즈드 오일을 포함하는 하이드로젤에 가장 효과적인 형광 성능이 있을 것임을 예상할 수 있다. 이에 0.01mg/ml의 ICG 및 20%의 아이오다이즈드 오일을 탑재한 하이드로젤 제형을 합성 후, ICG 및 아이오다이즈드 오일의 방출시간을 24시간동안 37 ℃의 PBS(Phosphate Buffered Saline)에서 확인하였다.
그 결과, ICG 및 아이오다이즈드 오일이 24시간동안 성공적으로 하이드로젤에 탑재가 된 결과를 확보하였다 (도 10).
실시예 6. 다중영상조영젤의 생체 내(in-vivo) 효과 확인
상기에서 최적화된 제형의 다중영상조영젤의 효능을 생체 내(in-vivo) 실험(개 및 토끼 폐암 모델)을 통해서도 확인하였다. 폐에 주입 후, ICG 및 아이오다이즈드 오일을 함유하고 있는 제1 덱스트란 고분자 용액과 제2 덱스트란 고분자 용액이 만나 하이드로젤 형성이 될 수 있도록 하기 위하여 듀얼 시린지(dual syringe)를 제작, 이를 in-vivo실험에 활용하였다(도 11).
구체적으로, 0.01mg/ml의 ICG를 포함하며, 0%, 10% 또는 20%의 아이오다이즈드 오일을 탑재한 하이드로젤을 이용하여 in vivo 실험을 수행하였다. 개를 활용한 in-vivo실험을 수행하였으며(도 12a), 아이오다이즈드 오일 농도에 따른 사진촬영 및 형광비교를 각각 도 12b 및 도 12c에 나타내었다. 실험결과 대조군(하이드로젤 없이 아이오다이즈드 오일 및 ICG로만 에멀젼(emulsion)을 만든 제형) 대비 다중영상조영젤 사용 시 아이오다이즈드 오일 및 ICG가 주입된 폐 조직에서 잘 유지되고 있는 것을 확인하였다 (도 12b 및 도 12c). 더불어 시험관 내(in-vitro) 실험의 결과와 마찬가지로 10%의 아이오다이즈드 오일을 함유하고 있는 하이드로젤은 C-arm 촬영 시 거의 보이지 않았고, 20%의 아이오다이즈드 오일을 함유하고 있는 젤은 ICG 시그널과 병변 부위에 잘 유지됨과 동시에 병변 부위를 식별할 수 있는 CT 시그널을 보였다 (도 12d).
개를 활용한 추가적인 in-vivo 최적화 단계를 거쳐 토끼 폐암 모델에서의 다중영상조영젤의 효과를 확인하였다(도 13a). 실험결과 토끼 폐암 병변 부위를 잘 표지하고 있음을 도 13b에서 확인할 수 있으며, 24시간 동안 아이오다이즈드 오일 및 ICG가 폐암 병변 부위에서 잘 유지되고 있음을 확인하였다 (도 13c). 생체외 이미지는 도 13d에 나타내었다.
이상과 같이 실시예들이 비록 한정된 도면에 의해 설명되었으나, 해당 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기를 기초로 다양한 기술적 수정 및 변형을 적용할 수 있다. 예를 들어, 설명된 기술들이 설명된 방법과 다른 순서로 수행되거나, 및/또는 설명된 시스템, 구조, 장치, 회로 등의 구성요소들이 설명된 방법과 다른 형태로 결합 또는 조합되거나, 다른 구성요소 또는 균등물에 의하여 대치되거나 치환되더라도 적절한 결과가 달성될 수 있다.
그러므로, 다른 구현들, 다른 실시예들 및 특허청구범위와 균등한 것들도 후술하는 청구범위의 범위에 속한다.
본 발명은 폐 절제술 등의 의료술기를 적용함에 있어서 폐 병변부위를 국소화 할 수 있는 다중영상 조영제 조성물 및 제조방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 형광염료와 조영물질이 덱스트란 기반의 하이드로젤에 탑재되어 우수한 폐 병변 표지능력과 체내 유지능력을 가진다. 따라서 본 발명의 다중영상조영제 조성물 및 그 제조방법은 체내 절제술 등에서 병변부위를 표지하는 목적으로 다양하게 응용될 수 있다.

Claims (19)

  1. 제1덱스트란 고분자 및 제2덱스트란 고분자가 가교되어 형성된 하이드로젤을 포함하고,
    상기 하이드로젤은 형광염료 및 조영물질이 탑재된 것인, 다중영상조영제 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 제1덱스트란 고분자는 하이드록실기가 비닐설폰기로 치환된 것이고, 제2덱스트란 고분자는 하이드록실기가 티올기 및 비닐설폰기로 치환된 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물.
  3. 제2항에 있어서,
    상기 제1덱스트란 고분자는, 하이드록실기의 10 내지 30 몰%가 비닐설폰기로 치환된 것이고, 상기 제2덱스트란 고분자는, 하이드록실기의 10 내지 30 몰%가 티올기 및 비닐설폰기로 치환된 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 형광염료는 시아닌계열의 형광염료인 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 형광염료는 인도시아닌 그린(Indocyanine green: ICG), 알렉사 플루오르 647(Alexa Fluor 647), 알렉사 플루오르 660(Alexa Fluor 660), 알렉사 플루오르 680(Alexa Fluor 680), 알렉사 플루오르 700(Alexa Fluor 700), 알렉사 플루오르 780(Alexa Fluor 780), cy3.5, cy5, cy5.5, cy7, 사이페이트(Cypate), ITCC, NIR820, NIR2, IRDye78, IRDye80, IRDye82, IRDye680, IRDye700, IRDye800, DiD, DiR, 크레실 바이올렛(Cresyl Violet), 나일 블루(Nile Blue), 옥사진 750(Oxazine 750) 및 로다민800(Rhodamine800), 텍사스 레드(Texas Red) 및 이들의 혼합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 조영물질은 아이오다이즈드 오일인 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 조영물질은 하이드로젤에 대하여 30 부피% 미만으로 포함되는 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 형광염료는 0.005 mg/mL 내지 0.02 mg/mL의 농도로 포함되는 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물.
  9. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 폐 병변의 표지용인 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물.
  10. 제1항에 있어서,
    상기 하이드로젤은, 제1덱스트란 고분자 및 제2덱스트란 고분자가 혼합된 후 20초 내지 250초 내에 젤화되어 형성된 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물.
  11. 하이드록실기가 비닐설폰기로 치환된 제1덱스트란 고분자; 형광염료 및 조영물질을 포함하는 제1조성을 준비하는 단계(S1);
    상기 제1조성에 음파처리하는 단계(S2);
    하이드록실기가 티올기 및 비닐설폰기로 치환된 제2덱스트란 고분자; 형광염료 및 조영물질을 포함하는 제2조성을 준비하는 단계(S3);
    상기 제2조성에 음파처리하는 단계(S4); 및
    음파처리가 완료된 제1조성 및 제2조성을 혼합하여 젤화하는 단계(S5)를 포함하는, 다중영상조영제 조성물의 제조방법.
  12. 제11항에 있어서,
    상기 제1덱스트란 고분자는, 하이드록실기의 10 내지 30 몰%가 비닐설폰기로 치환된 것이고, 상기 제2덱스트란 고분자는, 하이드록실기의 10 내지 30 몰%가 티올기 및 비닐설폰기로 치환된 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물의 제조방법.
  13. 제11항에 있어서,
    상기 형광염료는 시아닌계열의 형광염료인 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물의 제조방법.
  14. 제13항에 있어서,
    상기 형광염료는 인도시아닌 그린(Indocyanine green: ICG), 알렉사 플루오르 647(Alexa Fluor 647), 알렉사 플루오르 660(Alexa Fluor 660), 알렉사 플루오르 680(Alexa Fluor 680), 알렉사 플루오르 700(Alexa Fluor 700), 알렉사 플루오르 780(Alexa Fluor 780), cy3.5, cy5, cy5.5, cy7, 사이페이트(Cypate), ITCC, NIR820, NIR2, IRDye78, IRDye80, IRDye82, IRDye680, IRDye700, IRDye800, DiD, DiR, 크레실 바이올렛(Cresyl Violet), 나일 블루(Nile Blue), 옥사진 750(Oxazine 750) 및 로다민800(Rhodamine800), 텍사스 레드(Texas Red) 및 이들의 혼합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물의 제조방법.
  15. 제11항에 있어서,
    상기 조영물질은 아이오다이즈드 오일인 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물의 제조방법.
  16. 제11항에 있어서,
    상기 조영물질은 하이드로젤에 대하여 30 부피% 미만으로 포함되는 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물의 제조방법.
  17. 제11항에 있어서,
    상기 형광염료는 0.005 mg/mL 내지 0.02 mg/mL의 농도로 포함되는 것을 특징으로 하는, 다중영상조영제 조성물의 제조방법.
  18. 제11항에 있어서,
    상기 S5 단계의 젤화는, 20초 내지 250초 내에 이루어지는 것인, 다중영상조영제 조성물의 제조방법.
  19. 하이드록실기가 비닐설폰기로 치환된 제1덱스트란 고분자; 및 하이드록실기가 티올기 및 비닐설폰기로 치환된 제2덱스트란 고분자가 가교되어 형성된 하이드로젤로,
    상기 제1덱스트란 고분자는 하이드록실기의 10 내지 30 몰%가 비닐설폰기로 치환된 것이고, 상기 제2덱스트란 고분자는, 하이드록실기의 10 내지 30 몰%가 티올기 및 비닐설폰기로 치환된 것인 하이드로젤.
PCT/KR2022/095025 2021-02-09 2022-02-09 제한적 폐 절제술을 위한 폐 병변 국소화 다중영상조영제 조성물 Ceased WO2022173282A1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US18/276,311 US20240238454A1 (en) 2021-02-09 2022-02-09 Lung lesion localization multi-imaging contrast agent composition for restrictive lung resection

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR10-2021-0018457 2021-02-09
KR20210018457 2021-02-09
KR1020220016515A KR102834509B1 (ko) 2021-02-09 2022-02-08 제한적 폐 절제술을 위한 폐 병변 국소화 다중영상조영제 조성물
KR10-2022-0016515 2022-02-08

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2022173282A1 true WO2022173282A1 (ko) 2022-08-18

Family

ID=82838048

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2022/095025 Ceased WO2022173282A1 (ko) 2021-02-09 2022-02-09 제한적 폐 절제술을 위한 폐 병변 국소화 다중영상조영제 조성물

Country Status (2)

Country Link
US (1) US20240238454A1 (ko)
WO (1) WO2022173282A1 (ko)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003103631A1 (en) * 2002-06-06 2003-12-18 Micro Therapeutics, Inc. Novel high viscosity embolizing compositions comprising prepolymers
KR20080019507A (ko) * 2006-08-28 2008-03-04 한국과학기술연구원 근적외선 형광체가 결합된 양친성 고분자의 나노 입자를포함하는 암 진단용 조영제
KR20130095522A (ko) * 2012-02-20 2013-08-28 한국생명공학연구원 인도시아닌그린이 봉입된 히알루론산 나노하이드로젤 및 그의 제조방법
KR20200027895A (ko) * 2018-09-05 2020-03-13 고려대학교 산학협력단 형광조영제를 유효성분으로 포함하는 폐 종양 병변 표지를 위한 흡입 투여용 약학적 조성물

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003103631A1 (en) * 2002-06-06 2003-12-18 Micro Therapeutics, Inc. Novel high viscosity embolizing compositions comprising prepolymers
KR20080019507A (ko) * 2006-08-28 2008-03-04 한국과학기술연구원 근적외선 형광체가 결합된 양친성 고분자의 나노 입자를포함하는 암 진단용 조영제
KR20130095522A (ko) * 2012-02-20 2013-08-28 한국생명공학연구원 인도시아닌그린이 봉입된 히알루론산 나노하이드로젤 및 그의 제조방법
KR20200027895A (ko) * 2018-09-05 2020-03-13 고려대학교 산학협력단 형광조영제를 유효성분으로 포함하는 폐 종양 병변 표지를 위한 흡입 투여용 약학적 조성물

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NOBUHIKO ONDA; MASAYUKI KIMURA; TOSHINORI YOSHIDA; MAKOTO SHIBUTANI: "Preferential tumor cellular uptake and retention of indocyanine green for in vivo tumor imaging", INTERNATIONAL JOURNAL OF CANCER, JOHN WILEY & SONS, INC., US, vol. 139, no. 3, 4 April 2016 (2016-04-04), US , pages 673 - 682, XP071289532, ISSN: 0020-7136, DOI: 10.1002/ijc.30102 *

Also Published As

Publication number Publication date
US20240238454A1 (en) 2024-07-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Deng et al. Application of nanotechnology in the early diagnosis and comprehensive treatment of gastrointestinal cancer
Zhao et al. A transistor-like pH nanoprobe for tumour detection and image-guided surgery
Shi et al. PET/NIR-II fluorescence imaging and image-guided surgery of glioblastoma using a folate receptor α-targeted dual-modal nanoprobe
Ullah et al. Fluorescence imaging-guided surgery: current status and future directions
US20110171136A1 (en) Optical imaging probes
JP2012520856A (ja) 光学イメージング剤
EP4015518A1 (en) Active-targeting near-infrared fluorescent molecule for targeting folate receptor and preparation method therefor
CN117800951A (zh) 一种近红外荧光探针及其制备方法与应用
Wang et al. Near-infrared fluorescence imaging-guided lymphatic mapping in thoracic esophageal cancer surgery
CN114790215A (zh) 基于喹喔啉的d-a-d近红外二区荧光分子及其制备方法和应用
WO2020197021A1 (ko) 염증성 비정상 조직 또는 종양 조직의 선택적 염색이 가능한 나노 진단 제제의 제조 방법
Oh et al. Thoracoscopic color and fluorescence imaging system for sentinel lymph node mapping in porcine lung using indocyanine green-neomannosyl human serum albumin: intraoperative image-guided sentinel nodes navigation
KR102465024B1 (ko) 형광조영제를 유효성분으로 포함하는 폐 종양 병변 표지를 위한 흡입 투여용 약학적 조성물
Ma et al. High-precision detection and navigation surgery of colorectal cancer micrometastases
WO2016186429A1 (ko) 인도시아닌 그린-리포좀 복합체를 포함하는 암 치료용 조성물
CN103430014B (zh) 用于检测前哨淋巴结的含有聚γ-谷氨酸和光学成像染料复合物的光学成像探针
Wang et al. Based on Eudragit® encapsulated ionic polymer IR775@ nido-carborane strategy: release, bioactivity and tumor cell imaging studies in simulated gastrointestinal environment
US20140213899A1 (en) Ester Imaging Agents
Lin et al. Fibroblast activation protein peptide-targeted NIR-I/II fluorescence imaging for stable and functional detection of hepatocellular carcinoma
KR102834509B1 (ko) 제한적 폐 절제술을 위한 폐 병변 국소화 다중영상조영제 조성물
Guo et al. Targeting tumour surface collage with hydrogel probe: a new strategy to enhance intraoperative imaging sensitivity and stability of bladder cancer
Huang et al. Biomarker-responsive nanoprobe with aggregation-induced emission for locating and guiding resection of deep-seated tumors via optoacoustic and NIR fluorescence imaging
Kennedy et al. A pH-activatable nanoprobe labels diverse histologic subtypes of human lung cancer during resection
US20240238454A1 (en) Lung lesion localization multi-imaging contrast agent composition for restrictive lung resection
CN1238042A (zh) 免疫组织化学染色用组合物

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 22753042

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 22753042

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1