WO2022102687A1 - がん治療剤 - Google Patents
がん治療剤 Download PDFInfo
- Publication number
- WO2022102687A1 WO2022102687A1 PCT/JP2021/041444 JP2021041444W WO2022102687A1 WO 2022102687 A1 WO2022102687 A1 WO 2022102687A1 JP 2021041444 W JP2021041444 W JP 2021041444W WO 2022102687 A1 WO2022102687 A1 WO 2022102687A1
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- cancer
- lat1
- tumor
- therapeutic agent
- inhibitor
- Prior art date
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 130
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 60
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 42
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 title claims abstract description 34
- 108091006232 SLC7A5 Proteins 0.000 claims abstract description 124
- 102100038204 Large neutral amino acids transporter small subunit 1 Human genes 0.000 claims abstract description 121
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 37
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 20
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 claims abstract description 19
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 claims abstract description 9
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 230000010189 intracellular transport Effects 0.000 claims abstract description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 19
- 230000005747 tumor angiogenesis Effects 0.000 claims description 15
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 claims description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 12
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 11
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 11
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 11
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 11
- -1 5-amino-2-phenylbenzoxazole-7-yl Chemical group 0.000 claims description 9
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 claims description 9
- 229940076838 Immune checkpoint inhibitor Drugs 0.000 claims description 8
- 102000037984 Inhibitory immune checkpoint proteins Human genes 0.000 claims description 8
- 108091008026 Inhibitory immune checkpoint proteins Proteins 0.000 claims description 8
- 239000012274 immune-checkpoint protein inhibitor Substances 0.000 claims description 8
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 8
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 8
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 5
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 5
- VEEGZPWAAPPXRB-BJMVGYQFSA-N (3e)-3-(1h-imidazol-5-ylmethylidene)-1h-indol-2-one Chemical compound O=C1NC2=CC=CC=C2\C1=C/C1=CN=CN1 VEEGZPWAAPPXRB-BJMVGYQFSA-N 0.000 claims description 4
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 4
- 229940121369 angiogenesis inhibitor Drugs 0.000 claims description 4
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 4
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 208000020790 biliary tract neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 claims description 3
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 208000003200 Adenoma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 claims description 2
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000007913 Pituitary Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010062129 Tongue neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 201000009036 biliary tract cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000006134 tongue cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 claims description 2
- 230000009702 cancer cell proliferation Effects 0.000 claims 1
- 208000010916 pituitary tumor Diseases 0.000 claims 1
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 43
- 101150019103 NAT2 gene Proteins 0.000 abstract description 11
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 10
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 7
- XNRZJPQTMQZBCE-SFHVURJKSA-N (2s)-2-amino-3-[4-[(5-amino-2-phenyl-1,3-benzoxazol-7-yl)methoxy]-3,5-dichlorophenyl]propanoic acid Chemical compound ClC1=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC(Cl)=C1OCC1=CC(N)=CC2=C1OC(C=1C=CC=CC=1)=N2 XNRZJPQTMQZBCE-SFHVURJKSA-N 0.000 description 65
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 33
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 24
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 24
- 102100038110 Arylamine N-acetyltransferase 2 Human genes 0.000 description 23
- 101000884399 Homo sapiens Arylamine N-acetyltransferase 2 Proteins 0.000 description 23
- 101000713305 Homo sapiens Sodium-coupled neutral amino acid transporter 1 Proteins 0.000 description 23
- 102000008135 Mechanistic Target of Rapamycin Complex 1 Human genes 0.000 description 22
- 108010035196 Mechanistic Target of Rapamycin Complex 1 Proteins 0.000 description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 21
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 20
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 18
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 18
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 17
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 16
- 102000009524 Vascular Endothelial Growth Factor A Human genes 0.000 description 15
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 13
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 12
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 12
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 11
- 101150044140 Slc7a5 gene Proteins 0.000 description 10
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 10
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 10
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 9
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 9
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 9
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 9
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 9
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 9
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 9
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 8
- 201000008129 pancreatic ductal adenocarcinoma Diseases 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 8
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 8
- 102100033177 Vascular endothelial growth factor receptor 2 Human genes 0.000 description 7
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 7
- 238000003197 gene knockdown Methods 0.000 description 7
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 7
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical class O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 7
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 7
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 7
- 101000851007 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor receptor 2 Proteins 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 230000006870 function Effects 0.000 description 6
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 6
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 5
- 101100182247 Caenorhabditis elegans lat-1 gene Proteins 0.000 description 5
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 5
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 5
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 5
- 101100462087 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) LAT1 gene Proteins 0.000 description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 5
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 5
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001450 Alpha-Cyclodextrin Polymers 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 101000605018 Mus musculus Large neutral amino acids transporter small subunit 1 Proteins 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 229940043377 alpha-cyclodextrin Drugs 0.000 description 4
- 238000011122 anti-angiogenic therapy Methods 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 239000012830 cancer therapeutic Substances 0.000 description 4
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 4
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 4
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 4
- MPUVBVXDFRDIPT-UHFFFAOYSA-N 2-Amino-2-norbornanecarboxylic acid Chemical compound C1CC2C(N)(C(O)=O)CC1C2 MPUVBVXDFRDIPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NZAQRZWBQUIBSF-UHFFFAOYSA-N 4-(4-sulfobutoxy)butane-1-sulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCCCOCCCCS(O)(=O)=O NZAQRZWBQUIBSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 3
- 108091008794 FGF receptors Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerol Natural products OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 3
- 108020004566 Transfer RNA Proteins 0.000 description 3
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 3
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 3
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 3
- 239000002771 cell marker Substances 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 3
- 210000003989 endothelium vascular Anatomy 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 229940080345 gamma-cyclodextrin Drugs 0.000 description 3
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 3
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 3
- 210000004923 pancreatic tissue Anatomy 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 3
- 108091008598 receptor tyrosine kinases Proteins 0.000 description 3
- 102000027426 receptor tyrosine kinases Human genes 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 229940097346 sulfobutylether-beta-cyclodextrin Drugs 0.000 description 3
- 210000003606 umbilical vein Anatomy 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010051219 Cre recombinase Proteins 0.000 description 2
- 101100072149 Drosophila melanogaster eIF2alpha gene Proteins 0.000 description 2
- 239000001116 FEMA 4028 Substances 0.000 description 2
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 2
- 102000052922 Large Neutral Amino Acid-Transporter 1 Human genes 0.000 description 2
- 101150018665 MAPK3 gene Proteins 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- 101710135898 Myc proto-oncogene protein Proteins 0.000 description 2
- 102100038895 Myc proto-oncogene protein Human genes 0.000 description 2
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 2
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 2
- 101710150448 Transcriptional regulator Myc Proteins 0.000 description 2
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 230000000397 acetylating effect Effects 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 208000037844 advanced solid tumor Diseases 0.000 description 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002399 angioplasty Methods 0.000 description 2
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 229960004853 betadex Drugs 0.000 description 2
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 2
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 2
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 102000052178 fibroblast growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 238000012224 gene deletion Methods 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 2
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 2
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000031146 intracellular signal transduction Effects 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 230000013011 mating Effects 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 2
- 230000036963 noncompetitive effect Effects 0.000 description 2
- 229960005489 paracetamol Drugs 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000002974 pharmacogenomic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009038 pharmacological inhibition Effects 0.000 description 2
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 2
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 2
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 2
- 229960002633 ramucirumab Drugs 0.000 description 2
- 102200094927 rs1799931 Human genes 0.000 description 2
- 102200094889 rs1801280 Human genes 0.000 description 2
- 208000037560 slow acetylation Diseases 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 2
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 2
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 2
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012929 tonicity agent Substances 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 2
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- ZZYZBZJDTUKBBE-FQEVSTJZSA-N (2S)-3-[4-[(5-acetamido-2-phenyl-1,3-benzoxazol-7-yl)methoxy]-3,5-dichlorophenyl]-2-aminopropanoic acid Chemical compound CC(=O)Nc1cc(COc2c(Cl)cc(C[C@H](N)C(O)=O)cc2Cl)c2oc(nc2c1)-c1ccccc1 ZZYZBZJDTUKBBE-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZDCMKVLEYCGQX-UDPGNSCCSA-N 2-(diethylamino)ethyl 4-aminobenzoate;(2s,5r,6r)-3,3-dimethyl-7-oxo-6-[(2-phenylacetyl)amino]-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid;hydrate Chemical compound O.CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1.N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 KZDCMKVLEYCGQX-UDPGNSCCSA-N 0.000 description 1
- 102100033400 4F2 cell-surface antigen heavy chain Human genes 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 208000010507 Adenocarcinoma of Lung Diseases 0.000 description 1
- 206010052747 Adenocarcinoma pancreas Diseases 0.000 description 1
- 102100022014 Angiopoietin-1 receptor Human genes 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011746 C57BL/6J (JAX™ mouse strain) Methods 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000037051 Chromosomal Instability Diseases 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 101150033008 EIF2AK4 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010014513 Embolism arterial Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000009024 Epidermal Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 241001198387 Escherichia coli BL21(DE3) Species 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010046276 FLP recombinase Proteins 0.000 description 1
- 108010003471 Fetal Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004641 Fetal Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000044168 Fibroblast Growth Factor Receptor Human genes 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 208000012671 Gastrointestinal haemorrhages Diseases 0.000 description 1
- 206010018001 Gastrointestinal perforation Diseases 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 101000753291 Homo sapiens Angiopoietin-1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000605020 Homo sapiens Large neutral amino acids transporter small subunit 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001059454 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase MARK2 Proteins 0.000 description 1
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 1
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 229940122873 L-type amino acid transporter 1 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000012098 Lipofectamine RNAiMAX Substances 0.000 description 1
- 206010061309 Neoplasm progression Diseases 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 208000034038 Pathologic Neovascularization Diseases 0.000 description 1
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 101710098940 Pro-epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 101150020518 RHEB gene Proteins 0.000 description 1
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 102000046951 Ras Homolog Enriched in Brain Human genes 0.000 description 1
- 108700019578 Ras Homolog Enriched in Brain Proteins 0.000 description 1
- 108010034782 Ribosomal Protein S6 Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000009738 Ribosomal Protein S6 Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010000605 Ribosomal Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000002278 Ribosomal Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000003861 Ribosomal protein S6 Human genes 0.000 description 1
- 108090000221 Ribosomal protein S6 Proteins 0.000 description 1
- 108091006313 SLC3A2 Proteins 0.000 description 1
- 229940124639 Selective inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 102100028904 Serine/threonine-protein kinase MARK2 Human genes 0.000 description 1
- 241001522306 Serinus serinus Species 0.000 description 1
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 1
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- 208000003721 Triple Negative Breast Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 229940091171 VEGFR-2 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102100033178 Vascular endothelial growth factor receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- JVFGXECLSQXABC-UHFFFAOYSA-N ac1l3obq Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(COCC(C)O)OC2OC(C(C2O)O)C(COCC(C)O)OC2OC(C(C2O)O)C(COCC(C)O)OC2OC(C(C2O)O)C(COCC(C)O)OC2OC(C(C2O)O)C(COCC(C)O)OC2OC(C(O)C2O)C(COCC(O)C)OC2OC(C(C2O)O)C(COCC(C)O)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2COCC(C)O JVFGXECLSQXABC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 108010081667 aflibercept Proteins 0.000 description 1
- 229960002833 aflibercept Drugs 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000102 alkali metal hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000008046 alkali metal hydrides Chemical class 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N alpha-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N 0.000 description 1
- 239000002870 angiogenesis inducing agent Substances 0.000 description 1
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 238000011394 anticancer treatment Methods 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000709 aorta Anatomy 0.000 description 1
- 238000011717 athymic nude mouse Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 description 1
- 235000011175 beta-cyclodextrine Nutrition 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 description 1
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 1
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N camptothecin Chemical class C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 229960001777 castor oil Drugs 0.000 description 1
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 230000007322 compensatory function Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000018514 detection of nutrient Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000010339 dilation Effects 0.000 description 1
- GTXJHJOCVPTNTP-MLJFYOOPSA-N dimethyl-α-cyclodextrin Chemical compound COC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1OC)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](COC)[C@H]([C@@H]([C@H]3OC)O)O[C@H]3O[C@H](COC)[C@H]([C@@H]([C@H]3OC)O)O[C@H]3O[C@H](COC)[C@H]([C@@H]([C@H]3OC)O)O3)[C@H](O)[C@H]2OC)COC)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](OC)[C@@H]3O[C@@H]1COC GTXJHJOCVPTNTP-MLJFYOOPSA-N 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000008151 electrolyte solution Substances 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 229940125829 fibroblast growth factor receptor inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000004503 fine granule Substances 0.000 description 1
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 1
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- GDSRMADSINPKSL-HSEONFRVSA-N gamma-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO GDSRMADSINPKSL-HSEONFRVSA-N 0.000 description 1
- 208000030304 gastrointestinal bleeding Diseases 0.000 description 1
- 238000003209 gene knockout Methods 0.000 description 1
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 1
- 238000003205 genotyping method Methods 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 229960005150 glycerol Drugs 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 102000057630 human SLC7A5 Human genes 0.000 description 1
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000003463 hyperproliferative effect Effects 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 230000007365 immunoregulation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- BJHIKXHVCXFQLS-OTWZMJIISA-N keto-L-sorbose Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)CO BJHIKXHVCXFQLS-OTWZMJIISA-N 0.000 description 1
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 208000037819 metastatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000011575 metastatic malignant neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 201000011519 neuroendocrine tumor Diseases 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 description 1
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000005868 ontogenesis Effects 0.000 description 1
- 229940127084 other anti-cancer agent Drugs 0.000 description 1
- 201000002094 pancreatic adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000003076 paracrine Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- NTTOTNSKUYCDAV-UHFFFAOYSA-N potassium hydride Chemical compound [KH] NTTOTNSKUYCDAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000105 potassium hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001023 pro-angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 108700015048 receptor decoy activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 102220197630 rs1041983 Human genes 0.000 description 1
- 102200094879 rs1801279 Human genes 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000003584 silencer Effects 0.000 description 1
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 1
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000011255 standard chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N trappsol cyclo Chemical compound CC(O)COC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)COCC(O)C)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1COCC(C)O ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N 0.000 description 1
- 208000022679 triple-negative breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005751 tumor progression Effects 0.000 description 1
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000004917 tyrosine kinase inhibitor derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 210000005167 vascular cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006444 vascular growth Effects 0.000 description 1
- 239000002525 vasculotropin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 1
- 239000012130 whole-cell lysate Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/42—Oxazoles
- A61K31/423—Oxazoles condensed with carbocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Definitions
- the present invention relates to a cancer therapeutic agent using an L-type amino acid transporter 1 (LAT1) inhibitor.
- LAT1 L-type amino acid transporter 1
- Therapeutic intervention for tumor angiogenesis is one of the rational strategies for anticancer treatment.
- Various agents have been developed to target angiogenesis signaling pathways in endothelial cells, including neutralizing antibodies and decoy receptors for angiogenesis-promoting factors, as well as antibodies and inhibitors against receptor tyrosine kinase (RTK). rice field.
- RTK receptor tyrosine kinase
- Bevacizumab and ramucirumab are known as anticancer agents due to the effect of inhibiting angiogenesis (VEGF inhibition). Since these VEGF inhibitors also inhibit angiogenesis in normal tissues, side effects of the circulatory system such as gastrointestinal bleeding, gastrointestinal perforation, and arterial thromboembolism occur. That is, it clearly shows that inhibition of specific angiogenesis-promoting signaling pathways themselves in endothelial cells is not sufficient to control aberrant angiogenesis activity in tumors.
- Tumor angiogenesis is considered a rational anticancer target.
- efficacy and indications of anti-angiogenic therapy in clinical practice are relatively limited. Therefore, it is still required to clarify the distinctive features of the tumor endothelium that are important for pathological angiogenesis.
- LAT1 forms a heterodimer complex with its coprotein 4F2hc and preferentially transports most essential amino acids [3, 4].
- LAT1 is known to be upregulated in a wide range of primary tumors and metastatic lesions of tissue / organ origin in more than 20 [5-7]. Furthermore, the correlation between LAT1 expression and poor prognosis was triple-negative breast cancer [8], hyperproliferative ER-positive subtype breast cancer [9], bladder cancer [10], lung adenocarcinoma [11], and lung. It has been shown in a variety of tumors, including neuroendocrine tumors [12], pancreatic adenocarcinomas [13, 14], and biliary tract cancers [15]. Therefore, LAT1 in cancer cells is recognized as a new molecular target for antitumor therapy. Several LAT1 selective inhibitors have been synthesized, including JPH203, which showed significant antitumor effects in preclinical animal models [16-18].
- An object of the present invention is to provide a highly effective therapeutic agent for cancer without side effects.
- the purpose is to define the function of blood vessels and endothelial markers, and to establish a synergistic effect between intratumoral vascular control and tumor immunoregulation.
- the present invention is an immune checkpoint inhibitor by suppressing the intracellular transport of amino acids mediated by LAT1 expressed in abnormal intratumoral vascular endothelial cells, including an L-type amino acid transporter 1 inhibitor (LAT1 inhibitor).
- LAT1 inhibitor L-type amino acid transporter 1 inhibitor
- a therapeutic agent for cancer which increases the response and suppresses the growth and / or metastasis of cancer cells.
- the present invention also provides a tumor angiogenesis inhibitor, including a LAT1 inhibitor.
- the LAT1 inhibitor of the present invention also acts as a drug for increasing the efficacy of the immune checkpoint inhibitor.
- LAT1 / CD34 coexists in new blood vessels at the tumor site in human pancreatic cancer tissue, but LAT1 mRNA is stimulated by VEGF-A, FGF-2, and VEGF-A / FGF-2 in vascular endothelial cells (HUVEC).
- LAT1 inhibitor especially JPH203, which will be described later, suppresses angiogenesis by aortic ring assay and plug assay with Matrigel, and in MIA PaCa-2 transplanted mice, tumor growth and intratumoral angiogenesis are caused by JPH203. It was strongly suppressed.
- the analysis of the suppression mechanism of the angiogenesis-inducing signal by JPH203 in HUVEC revealed the following.
- the amino acid signal mediated by LAT1 monitors the amino acid supply and allows the angiogenesis-inducing signal to pass through mTORC1 via the angiogenesis growth factor receptor (“gatting” control).
- JPH203 suppresses amino acid uptake via LAT1 and suppresses mTORC1 activation, acts more predominantly than mTORC1 activation by angiogenesis-promoting factors, and blocks even if stimulation from angiogenesis growth factors enters mTORC1. It turns out that it will end up.
- a LAT1 inhibitor represented by JPH203 inhibits LAT1 expressed in HUVEC and inhibits HUVEC angiogenesis.
- the characteristics of normal blood vessels include the following. -Blood flow is stasis and flows smoothly without coagulation.-CD34 is expressed on endothelial cells, but LAT1 is not.
- the characteristics of the blood vessel-like structures that are abundant in the tumor include the following.
- ⁇ LAT1 is expressed and abnormalities such as tortuosity, dilation, obstruction, intravascular angiogenesis, excessive vascular branching, and sprouting are observed.
- ⁇ Suppression of delivery of anticancer drugs, hypoxia, chromosomal instability, gene mutation invitation, etc. are observed.
- ⁇ The lining of endothelial cells by pericite is reduced, the binding between endothelial cells is reduced, and the structure of perforated blood vessel walls is markedly changed.
- the present invention uses LAT1 as a drug that selectively acts on the blood vessels of cancer cells by utilizing the difference in vascular structure between normal tissues and tumors, that is, focusing on the presence or absence of LAT1 expression. It is related to a therapeutic agent for cancer that has been present.
- the therapeutic agent for cancer of the present invention contains a LAT1 inhibitor as an active ingredient.
- LAT1 inhibitor used in the present invention both non-competitive inhibitors and competitive inhibitors can be used.
- non-competitive inhibitor examples include those described in WO2014 / 112646.
- Examples of the competitive inhibitor include those described in WO2008 / 081537, and in particular, O- (5-amino-2-phenylbenzoxazole-7-yl) methyl-3,5-dichloro-L-tyrosine (hereinafter referred to as “tyrosine”). , "JPH203”) is preferable.
- the cancers targeted by the cancer therapeutic agent of the present invention include colon cancer, rectal cancer, non-small cell lung cancer, ovarian cancer, cervical cancer, breast cancer, lung cancer, pancreatic cancer, and biliary tract cancer.
- lung cancer and pancreatic cancer are recommended.
- the therapeutic agent for cancer of the present invention inhibits L-type amino acid transporter 1 (LAT1), but LAT1 is rarely present in normal cells (although it is found in bone marrow, blood-brain barrier, placenta, etc.). It is an order of magnitude lower than the expression level of cancer tissue, and no impairment of normal function was observed in the clinical study of JPH203), and it is expressed in tumor-related vascular endothelial cells of cancer. Does not affect normal cells in patients treated with.
- the inhibitory effect of JPH203 is unique to LAT1 inhibition and clearly distinguishes the mechanism of action of LAT1 inhibitors from the mechanism of action of existing anti-angiogenic agents.
- the therapeutic agent for cancer of the present invention makes it possible to construct an environment in which an immune checkpoint inhibitor that promotes the recovery of tumor immunity can respond, and as a drug for increasing the efficacy of the immune checkpoint inhibitor. Also works.
- the LAT1 inhibitor represented by JPH203 was found in the blood and in the blood as compared with the blood JPH203 concentration among the subjects to whom the same dose was administered per body surface area, based on the results of pharmacokinetic parameter analysis obtained in clinical trials. It has been found that there are large individual differences in the concentration of N-acetylated substances in urine, and that there is a relationship between the difference in acetylation rate in the gene polymorphism of NAT2 and the safety and efficacy of JPH203. It has been found by the present inventor (PCT / JP2020 / 032828).
- Non-Rapid type NAT2 gene is an intermediate type among the three phenotypes of the NAT2 gene having a fast acetylation rate (Rapid), an intermediate type (Intermediate), and a slow type (Slow). (Intermediate), and slow type (Slow) phenotypes.
- the combination of mutant haplotype heterozygotes has been identified as a slow acetylation type (Slow) (Pharmacogenomics, Vol. 13, pp. 31-41, 2012).
- the "NAT2 * 4" allele means a haplotype without SNP.
- the Rapid type includes "NAT2 * 11, NAT2 * 12, NAT2 * 13" that do not cause amino acid mutations, in addition to "NAT2 * 4". Patients with it are also classified as Rapid type.
- the phenotype of the NAT2 acetylating factor inferred by the two SNPs is determined by the analysis of the two SNPs: rs1041983 (282C> T) and rs1801280 (341T> C).
- the NAT2 acetylating factor phenotype inferred by the three SNPs is determined by analysis of the three SNPs: rs17929929 (481C> T), rs179939 (590G> A) and rs1799931 (857G> A).
- the four SNP-estimated NAT2 acetylator phenotypes are determined by analysis of the four SNPs: rs1801279 (191G> A), rs1801280 (341T> C), rs17999930 (590G> A), and rs1799931 (857G> A).
- JPH203 which is a LAT1 inhibitor
- NAT2 acetylated by NAT2
- its inhibitory activity on cancer cells decreases.
- the patient predominantly has a NAT2 genotype that is less susceptible to acetylation, i.e., in the NAT2 gene of a patient such as cancer, an intermediate type and a slow type of acetylation rate (Intermediate).
- the acetylation rate of JPH203 is slowed down, so that acetylation is difficult and the activity of JPH203 continues for a long time.
- the analysis of NAT2 gene polymorphism can be performed by a conventionally known method. For example, it can be performed by extracting DNA from the blood of a subject, processing the DNA by the microarray method, then reading the genotype and performing a test, and then performing data analysis.
- the therapeutic agent for cancer of the present invention can be administered to a subject suffering from cancer by the following administration regimen in combination with the measurement of NAT2 gene polymorphism.
- the subject having the Non-Rapid (Slow and / or Intermediate) type NAT2 gene is identified and selected; (2) The pharmaceutical composition is administered to the subject identified as having the Non-Rapid (Slow and / or Intermediate) type NAT2 gene.
- the therapeutic agent for cancer of the present invention can be used in combination with a NAT2 inhibitor for the treatment of diseases such as cancer.
- NAT2 inhibitors include acetaminophen.
- JPH203 is rapidly N-acetylated by NAT2 in the liver cytosol to become Nac-JPH203, but it is known that Nac-JPH203 has lower selectivity and activity for LAT1 than JPH203.
- the combined use with a NAT2 inhibitor suppresses the acetylation of JPH203 and maintains the effect of JPH203.
- the therapeutic agent for cancer of the present invention is used as a pharmaceutical composition.
- the pharmaceutical composition comprises a LAT1 inhibitor or a pharmacologically acceptable salt thereof as an active ingredient.
- pharmaceutical additives may be included if necessary.
- the pharmaceutical composition of the present invention can be orally administered in the form of a solid preparation such as a tablet, a granule, a fine granule, a powder, a capsule, or a liquid, a jelly, a syrup, or the like.
- the physical drug may be administered parenterally in the form of an injection (intravascular, subcutaneous, intratumoral, etc.), a nasal agent, a suppository, an inhalant, a transdermal agent, or the like.
- the therapeutic agent for cancer of the present invention is preferably in the form of an injection or an oral preparation such as the solid preparation.
- the pharmaceutical composition of the present invention is used as a therapeutic agent for cancer, it is preferably formulated as an injection.
- injections include those containing a pH adjuster and cyclodextrins in the active ingredient of the present invention.
- injections include intravenous, subcutaneous, intradermal, intramuscular injections, and intravenous drip infusions.
- Examples of the pH adjuster that can be blended in the injection of the present invention include alkali metal hydroxides such as sodium carbonate, potassium carbonate, sodium hydroxide and potassium hydroxide, sodium hydride and potassium hydride.
- alkali metal hydroxides such as sodium carbonate, potassium carbonate, sodium hydroxide and potassium hydroxide, sodium hydride and potassium hydride.
- Examples thereof include alkali metal hydrides, alkali metals or alkali earth metal carbonates, and sodium hydroxide and sodium carbonate are particularly preferable, and sodium hydroxide is more preferable.
- the injection can be appropriately adjusted to an appropriate pH by using a pH adjusting agent.
- the pH of the injection according to this embodiment is preferably 3 to 6, more preferably 3 to 5, further preferably 3 to 4.5, and 3.5 to 4.5. It is particularly preferable to have.
- unmodified cyclodextrin examples include ⁇ -cyclodextrin, ⁇ -cyclodextrin, ⁇ -cyclodextrin and the like.
- modified cyclodextrin for example, dimethyl- ⁇ -cyclodextrin, dimethyl- ⁇ -cyclodextrin, dimethyl- ⁇ -cyclodextrin, hydroxypropyl- ⁇ -cyclodextrin, hydroxypropyl- ⁇ -cyclodextrin, hydroxypropyl- ⁇ - Cyclodextrin, sulfobutyl ether- ⁇ -cyclodextrin, sulfobutyl ether- ⁇ -cyclodextrin, sulfobutyl ether- ⁇ -cyclodextrin, maltosyl- ⁇ -cyclodextrin and the like can be mentioned.
- Cyclodextrins may be used alone or in any combination of two or more. Cyclodextrins are hydroxypropyl- ⁇ from the viewpoint of reducing the number of insoluble fine particles formed even when dissolved in a non-strongly acidic aqueous solution and improving the resolubility of the lyophilized preparation in a non-strongly acidic aqueous solution. -Cyclodextrin or sulfobutyl ether- ⁇ -cyclodextrin is preferable, and sulfobutyl ether- ⁇ -cyclodextrin is more preferable.
- the sulfobutyl ether cyclodextrin has the structure shown in the following formula 1, and the inside of the cyclic structure is highly hydrophobic. Therefore, it forms a complex with O- (5-amino-2-phenylbenzoxazole-7-yl) methyl-3,5-dichloro-L-tyrosine, which is also highly hydrophobic, by hydrophobic interaction.
- the reference to "sulfobutyl ether cyclodextrin complex" in the present specification refers to the above-mentioned hydrophobic interaction.
- JPH203 when used as a LAT1 inhibitor, it may be used in an injection as its sulfobutyl ether / cyclodextrin complex (hereinafter referred to as “JPH203-SBECD”).
- a buffering agent a suspending agent, a solubilizing agent, a stabilizer, an tonicity agent, a preservative and the like may be added to the injection according to the present invention, if necessary.
- buffer examples include borate buffer, phosphate buffer, citric acid buffer, acetate buffer, Tris buffer and the like.
- suspending agent examples include methyl cellulose, polysorbate 80, hydroxyethyl cellulose, gum arabic, tragant powder, sodium carboxymethyl cellulose, polyoxyethylene sorbitan monolaurate, poloxamer, hydroxypropylmethyl cellulose (HPMC), sodium alginate and the like. Can be mentioned.
- solubilizing agent examples include polyoxyethylene hydrogenated castor oil, polysorbate 80, nicotinic acid amide, polyoxyethylene sorbitan monolaurate, macrogol, glycerin fatty acid ester, lipoaminoacid, polyethylene glycol and the like.
- examples of the stabilizer include sodium sulfite and sodium metasulfite
- examples of the tonicity agent include glycerin and sodium chloride
- preservatives include methyl paraoxybenzoate, ethyl paraoxybenzoate, and sorbin. Examples include acid.
- the pH of the lyophilized preparation when dissolved in water is preferably 3 to 6, more preferably 3 to 5, further preferably 3 to 4.5, and 3.5 to 4 It is particularly preferable to be .5.
- the freeze-dried preparation can be produced by a conventionally known method for producing a freeze-dried preparation. For example, after freezing at a temperature of ⁇ 25 ° C. or lower, the temperature rises until the temperature reaches room temperature while maintaining the vacuum degree at about 20 Pa or lower. Examples thereof include a method of drying while warming.
- the injection according to the present invention may be a lyophilized preparation. Such a lyophilized preparation can be used as a time-dissolving injection by dissolving it in, for example, distilled water for injection, an infusion solution, one of the electrolytic solutions, or two or more kinds of solvents thereof at the time of use.
- Dosing regimens The medication regimens to which the therapeutic agents of the present invention are applied are patient type, race, age, weight, gender and medical condition; severity of condition to be treated; route of administration; and patient's liver. And it is selected according to various factors including renal function. Physicians can easily determine and prescribe the effective amount of drug needed to prevent, prevent or stop the progression of the condition.
- the dose of the active ingredient of the pharmaceutical composition may be appropriately selected according to the degree of symptoms, age, sex, body weight, sensitivity difference, administration time, administration interval, etc. of the patient.
- 1 mg / m 2 to 60 mg / m 2 (body surface area) is exemplified once, preferably 12.5 mg / m 2 to 60 mg / m 2 , 12.5 mg. / M 2 to 25 mg / m 2 or 10 mg / m 2 to 40 mg / m 2 (body surface area) is exemplified, and 25 mg / m 2 is particularly recommended.
- the dose may be reduced to 12.5 mg / m 2 or the like depending on the symptoms.
- the pharmaceutical composition is administered with a certain period of drug holiday following continuous administration for a certain period as one cycle.
- the pharmaceutical composition is administered with a total of 14 days of 9 days of drug holiday following 5 consecutive days of continuous administration as one cycle.
- -A certain amount of the pharmaceutical composition is continuously administered intravenously over a certain period of time.
- -100 mL of pharmaceutical composition is administered intravenously over 90 minutes.
- the cancer therapeutic agent of the present invention can be used in combination with other anticancer agents.
- an anticancer agent conventionally known ones can be used, for example, an alkylating agent, a metabolic antagonist, an antibiotic, a plant-derived anticancer agent, a platinum coordination compound, a camptothecin derivative, and a tyrosine kinase inhibitor. , Serins leonine kinase, phospholipid kinase, interferon, hormone preparations, immune checkpoint inhibitors, protein post-translation modification inhibitors and other antitumor agents.
- the therapeutic agent for cancer of the present invention also acts as a drug for increasing the efficacy of the immune checkpoint inhibitor, it is recommended to use it in combination with the immune checkpoint inhibitor.
- cancer therapeutic agent of the present invention may be used in combination with a NAT2 inhibitor such as acetaminophen, an antiangiogenic agent, for example, bemasizumab, ramucirumab, aflibercept and the like.
- a NAT2 inhibitor such as acetaminophen
- an antiangiogenic agent for example, bemasizumab, ramucirumab, aflibercept and the like.
- the GST fusion recombinant protein of antibody-producing mouse LAT1 N-terminal 53 amino acids was expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) and purified by glutathione Sepharose 4B (GE Healthcare) affinity column chromatography.
- Chickens (White Leghorn) were immunized with purified recombinant protein by intramuscular injection (initial injection with 200 ⁇ g mixed with Freund's complete adjuvant, 100 ⁇ g mixed with incomplete Freund and 4 additional injections at 2-week intervals).
- antisera are collected and passed through a GST-bound Affi-Gel 10 column (Bio-Rad) for absorption of anti-GST antibody, followed by purification by antigen-bound Affi-Gel 10 column chromatography.
- anti-mLAT1 (C) was obtained.
- Human umbilical vein endothelial cells Human umbilical vein endothelial cells (HUVEC, Corning) are 37 ° C. in EGM-2 medium (Lonza) containing 2% FBS and growth factors (VEGF-A, FGF-2, EGF, IGF-1). It was cultured in 5% CO 2 /95% air. Experiments were performed using cells with less than 9 passages.
- RNAi HUVEC Gene knockdown by RNAi HUVEC was seeded on a 6 cm dish coated with collagen (0.7-1.0 ⁇ 10 4 cells / dish). The next day, LAT1 # 1 (s15653), # 2 (s15654), # 3 (s15655), or negative control # 2 (Ambion) Silencer Select siRNA was transfected using Lipofectamine RNAiMAX (Invitrogen). Cells were used in the experiment 2 days after transfection.
- HUVEC was seeded on collagen-coated 96-well plates (1.0 ⁇ 10 3 cells / well) in EGM-2 medium.
- BCH 2-Aminobicyclo [2.2.1] heptane-2-carboxylic acid
- JPH203 was added the next day (day 0).
- LAT1 knockdown cells were seeded 48 hours after siRNA transfection (day 0). Cell proliferation was measured every 24 hours for 3 days with the CCK-8 kit (Dojindo).
- Human pancreatic cancer MIA PaCa-2 cells (JCRB0070, JCRB) and lung cancer H520 cells (HTB-182, ATCC) have 10% FBS (Gibco) and 100 units / mL penicillin-100 ⁇ g. It was grown in DMEM (SIGMA-Aldrich) supplemented with / mL streptomycin (Nakalitesk). Prior to inoculation, cells were suspended in filtered PBS and mixed with growth factor reduced matrigel in a 1: 1 volume ratio to a final concentration of 2.5 ⁇ 107 cells / mL.
- the tumor was resected and immunofluorescent analysis for CD34 was performed. From the obtained immunofluorescent images, a binary image was generated by manual thresholding and used to quantify vascular density with the ImageJ software "Analyze Particles" plug-in. Images were taken from at least 5 randomly selected microscopic fields of view in each section and 10 sections were analyzed for each tumor (50-100 images per tumor). The average number of blood vessels per mm 2 tissue area of each tumor was used for statistical analysis.
- An orthotopic allogeneic tumor model was constructed by subcutaneously inoculating B16-F10 mouse melanoma cells (CRL-6475, ATCC) into Lat1 fl / fl / Tek-Cre or control Lat1 fl / fl mice.
- the B16-F10 cell suspension in PBS was mixed with a growth factor-reduced matrigel in a 1: 1 volume ratio to a final concentration of 2.5 ⁇ 106 cells / mL.
- the cell suspension was subcutaneously injected into the lower abdomen of 6-8 week old mice (0.5 x 106 cells, 0.2 mL / animal). Tumor volume was calculated daily as described above.
- Lat1 fl mice carrying the floated Lat1 gene for conditional knockout are available from Unitech Co., Ltd. Generated by.
- the targeting construct was designed to excise exon 3 of the Lat1 gene.
- the 1.2 kb genomic region containing exon 3 was replaced with the corresponding genomic sequence sandwiched between pairs of loxP sequences.
- a neomycin resistance gene cassette sandwiched between pairs of FRT sequences was also inserted downstream of exon 3. Long arms and short arms (5.4 kb and 2.3 kb, respectively) were added for homologous recombination. All genomic sequences were amplified from BAC clone RP23-46D12.
- Diphtheria toxin A fragment (DTA) under the thymidine kinase promoter was used for negative selection.
- the targeting construct was electroporated into mouse Bruce-4ES cells derived from C57BL / 6J. After selection with 200 ⁇ g / ml G418, successful target ES clones were screened by PCR. Homologous recombination was further confirmed by Southern blot analysis using two external probes (5'and 3'probes for SpeI digested genomic DNA) and an internal probe (Neo probe for EcoRV digested genomic DNA). Next, positive ES clones were injected into Balb / c blastocysts to obtain chimeric mice.
- Reproductive line transmission was established by mating chimeric mice with C57BL / 6J mice, and the resulting heterozygous founder mice were further mated with CAG-FLP mice expressing Flp-recombinase under the control of the CAG promoter.
- the neomycin resistance gene cassette on the FRT site side was resected. After confirming the removal of the neomycin resistance gene cassette by PCR, the resulting Lat1 fl mice were maintained on a C57BL / 6J genetic background.
- Lat1 fl mice were mated with the following transgenic mice.
- CAG-rtTA3 mice expressing reverse tetracycline-controlled transactivator 3 (rtTA3) under the control of the CAG promoter (B6N.FVB (Cg) -Tg (CAG-rtTA3) 4288Slowe / J) [19], and the tetracycline responsive promoter.
- TetO-Cre mice expressing Cre recombinase under the control of B6.Cg-Tg (tetO-cre) 1Jaw / J) [20] were obtained from Jackson Laboratory.
- Tek-Cre mice expressing the Cre recombinase gene under the endothelial cell-specific Tek promoter / enhancer (B6. Cg-Tg (Tek-cre) 1Ywa) [21] were purchased from the RIKEN BioResource Center. To avoid non-cell-specific deletion of the frozen Lat1 allele in the female germline of the Tek promoter [22], Tek-Cre-positive female mice were not used for mating. Genotyping PCR was performed using genomic DNA extracted from the tail chip by KOD One PCR Master Mix (TOYOBO). CAG-rtTA3, TetO-Cre, and Tek-Cre transgenes were analyzed by the protocol provided by those resources.
- TOYOBO KOD One PCR Master Mix
- the wild-type allele and the floated allele of the Lat1 gene are It was distinguished by the primers of Fw (5'-TATAGAGAGAGACTTGGGATGAAGC-3') and Rv (5'-CAGCACACTGATTGTGACAAAGG-3').
- the flapped and knockout alleles of the Lat1 gene are Fw (5'-GTTCCAGTCTGGCATCTTAAGTAG-3'), It was distinguished by the primer of Rv (5'-CCCTGTGCTCAGACAGAAAATGAGA-3').
- RNA from HUVEC and mouse aorta was extracted using Isogen II (Nippon Gene) and Agencourt RNAdvance Tissue Kit (Beckman Coulter), respectively. Quantitative real-time PCR was performed as previously reported [23].
- Example 1 Expression of LAT1 in intratumoral blood vessels of human pancreatic cancer tissue The expression of LAT1 in intratumoral blood vessels of human pancreatic cancer tissue was examined. Increased expression of LAT1 has been reported in cancers of various tissue origins, including pancreatic ductal adenocarcinoma (PDA) [13, 14]. Consistent with this, high expression of LAT1 was detected in cancer cells of PDA tissue by immunohistochemistry (Fig. 1, left figure). Interestingly, there was significant expression of LAT1 in interstitial vascular endothelial cells positive for the endothelial cell marker CD34. In contrast, endothelial cells of normal pancreatic tissue were largely negative for LAT1 staining.
- PDA pancreatic ductal adenocarcinoma
- FIG 1 Left Immunohistochemistry of LAT1 and CD34 in pancreatic ductal adenocarcinoma (PDA) and normal pancreas. Representative images of CU1372-35-35006 (PDA) and CU2009 / 02 X-40 (normal pancreas) are shown. Arrows and arrowheads indicate tumor cells and endothelial cells, respectively. Black square; enlarged image.
- Figure 1 right Endothelial LAT1 expression in tissue microarrays containing PDA and normal pancreas. Tissue spots are classified as high, low / medium, and negative, depending on the LAT1 staining intensity of the endothelial cells. The data displayed is the percentage for each group.
- LAT1 in tumor-related blood vessels was further investigated in a human cancer cell xenograft tumor model of athymic nude mice.
- Mouse LAT1-specific antibodies were generated to detect mouse LAT1 in blood vessels surrounded by cancer cells highly expressing human LAT1.
- mouse LAT1 was detected in CD34-positive endothelial cells of pancreatic cancer MIA PaCa-2 cell tumor.
- no clear LAT1 staining was detected in blood vessels of normal tissue except for cerebral capillaries for which LAT1 expression was previously reported [26,27]. Therefore, expression of LAT1 in the endothelial cells of tumor-related vessels was reproduced in xenograft tumor models of different tissue origin.
- Example 2 Suppression of intratumor-generated blood vessels by administration of JPH203 Genetic and pharmacological inhibition of endothelial LAT1 suppresses angiogenesis and tumor growth It has been demonstrated that the LAT1 inhibitor JPH203 suppresses the growth of heterologous transplanted tumors. [16, 28-31].
- the effect of JPH203 on tumor angioplasty was measured (Fig. 2, left).
- Intratumoral vessel density decreased to about 45% of placebo-treated controls in JPH203-treated tumors (Fig. 2, right), suggesting that the reduction in tumor angiogenesis contributes to the antitumor effect of JPH203.
- Example 3 Suppressive effect of JPH203 on tumor growth in vascular endothelium-specific LAT1 knockout mice
- endothelial LAT1 suppresses tumor angiogenesis and, as a result, suppresses tumor growth. ..
- FIG. 3 shows the intratumoral blood vessels visualized by intravenously injected FITC-dextran.
- the lower right figure of FIG. 3 is a quantification of the blood vessel area of a tumor section.
- Example 4 Effect of LAT1 gene deletion and LAT1 inhibition on proliferation of vascular endothelial cells Expression of LAT1 protein in HUVEC was confirmed by Western blotting (Fig. 4-1 upper left). Knockdown (KD) of LAT1 by siRNA that reduced the amount of LAT1 protein to 15-25% of the control suppressed the growth of HUVEC (Fig. 4-1 upper right). Similarly, LAT1 inhibition by JPH203 or BCH suppressed HUVEC proliferation in a concentration-dependent manner (Fig. 4-1 below). These results indicate that LAT1 plays an important role in endothelial cell proliferation.
- Amino acid is an essential signal transduction molecule that activates the serine / threonine kinase complex mTORC1 (Mechanistic Target of rapamycin Complex 1), and supports cell growth and proliferation by integrating the signal transduction of nutrients and growth factors [32]. ].
- mTORC1 Mechanism Target of rapamycin Complex 1
- the most well-characterized downstream effectors of mTORC1 include the ribosomal protein S6 kinase p70S6K, which is a translation initiation regulator. Accumulation of non-aminoacylated tRNAs under amino acid deficiency also activates other signaling pathways known as the general amino acid control (GAAC) pathway [33, 34].
- GAC general amino acid control
- Non-aminoacylated tRNA causes global downregulation of translation by activating Gcn2 kinase in the GAAC pathway, inducing phosphorylation of eIF2 ⁇ , and inhibiting the recruitment of initiator methionyl tRNA to the ribosome.
- LAT1 inhibition by JPH203 and LAT1 KD in HUVEC significantly reduced the phosphorylation of p70S6K and its substrate ribosomal protein S6.
- Phosphorylation of eIF2 ⁇ is also increased, indicating activation of the GAAC pathway by amino acid deficiency.
- LAT1-mediated amino acid transport in HUVEC is an essential prerequisite for activating translation initiation. Inhibition of endothelial LAT1 can down-regulate translation globally by suppressing mTORC1 activity and activating the GAAC pathway.
- Example 5 Suppressive effect of JPH203 on activation of intracellular signal transduction pathway by vascular endothelial growth factor VEGF-A secreted from cancer cells
- VEGF-A vascular endothelial growth factor
- VEGF-A / VEGFR2 major downstream factors of VEGF-A / VEGFR2, including Erk1 / 2, Akt, p38, Src, FAK, p70S6K, and S6 ribosomal protein, also have similar transients in phosphorylation, except for PLC ⁇ , which shows a relatively delayed response. Showed the passage of time. JPH203 did not affect the phosphorylation of VEGFR2 and downstream factors, except for p70S6K and S6. Phosphorylation of p70S6K and S6 was significantly suppressed by JPH203 20 minutes after stimulation, revealing that VEGF-A-induced activation of mTORC1 is highly dependent on LAT1.
- Akt [32] at Thr 308, located upstream of mTORC1 was largely unaffected by JPH203. Therefore, reduced mTORC1 activity is mediated by the Ragulator-Rag complex, which recruits mTORC1 to the surface of the lithosome independently of the RTK-PI3K-Akt axis and promotes interaction with the kinase activator Rheb. Most likely due to the decrease in [32].
- FIG. 5 HUVEC starved of serum and growth factors was stimulated with VEGF-A (10 ng / mL) in the presence or absence of JPH203 (50 ⁇ M).
- VEGF-A / VEGFR2 Downstream of VEGF-A / VEGFR2, which plays a major role in angiogenesis, major effector molecules such as Erk1 / 2, Akt, p38, Src, FAK, p70S6K, and PLC ⁇ are responsible for proliferation / survival / permeability of vascular endothelial cells. / Controls migration, etc.
- mTORC1 suppressed by JPH203 is involved in the regulation of these cellular functions downstream of Akt.
- the potent antiproliferative effect supported by global downregulation of translation is that endothelial LAT1 inhibition not only blocks the supply of amino acids as a building block for protein synthesis, but also interferes with amino acid signaling that controls the initiation of translation. It can also be achieved by doing.
- Such a strong inhibitory effect on translation is unique to LAT1 inhibitors and clearly distinguishes the mechanism of action of LAT1 inhibitors from the mechanism of action of existing anti-angiogenic agents.
- Endogenous and acquired tolerance to anti-angiogenic therapies often limits the interests of patients [1, 2].
- Multiple redundant and compensatory angiogenesis-promoting signaling pathways present in endothelial cells are thought to play an important role in resistance.
- a promising strategy for overcoming tolerance is to target multiple signaling pathways at the same time.
- the combination of FGFR inhibitor and bevacizumab in a mouse tumor model almost completely suppressed tumor growth [37].
- resistance to VEGFR2 inhibitors was suppressed by soluble decoy FGF receptors [38].
- LAT1 is involved in VEGF-A-dependent activation of mTORC1 which plays an important role in cell processes related to angiogenesis such as migration and lumen formation in vitro as well as in vitro angiogenesis. Demonstrated to be essential [39-42].
- This result suggests that the role of LAT1 in the activation of mTORC1 is mediated by the Ragulator-Rag complex independent of the RTK-PI3K-Akt axis.
- Amino acid signaling via LAT1 behaves as a "gate control" signal, allowing angiogenesis-promoting VEGF-A signaling to flow downstream via mTORC1 (FIG. 6).
- angiogenesis-promoting RTKs Similar to VEGFR signaling, multiple other angiogenesis-promoting RTKs, including FGFR and TIE-2, share the PI3K-Akt axis that activates mTORC1 [43]. Therefore, therapeutic inhibition of LAT1 by JPH203 may simultaneously interfere not only with VEGF-A / VEGFR2 signaling, but also with other angiogenesis-promoting signaling pathways in mTORC1 at the cost of angiogenesis-promoting growth factor signaling. It provides the possibility of avoiding the resistance resulting from function.
- LAT1 is well known as a "tumor cell type transporter" that is very widely upregulated to support the growth and proliferation of tumor cells, but the examples here are of tumor cells and stromal endothelium. It presents new insights into the dual function of LAT1 in tumor progression in both.
- a unique dual mechanism of action of the LAT1 inhibitor JPH203 as an antitumor agent ie, the established direct antiproliferative effect on tumor cells and the endothelial LAT1 through inhibition of LAT1 in tumor cells. The angiogenic effect of inhibition is emphasized.
- LAT1 inhibitors when combined with other anti-angiogenic agents, suppresses the compensatory paracrine secretion of pro-angiogenic factors from tumor cells through down-regulation of protein synthesis in tumor cells. Is Rukoto. Therefore, combination therapy with LAT1 inhibitors and anti-angiogenic agents has a low risk of developing resistance and may exhibit beneficial synergistic antitumor effects.
- LAT1 is a direct target gene for carcinogenic c-Myc [47, 48].
- LAT1 is one of the cancer fetal proteins
- HUVEC human umbilical vein endothelial cell
- the signal transduction system in the regulation and maintenance of cell function has properties similar to those in cancer cells, which is why it is applied to the study of cancer cells.
- Example 6 Since the above findings from cells and model animals are clinically recognized, the results are shown as examples.
- Table 2 shows new lesions (other than the first cancer) found in the Phase 1 clinical trial [51] of JPH203 in patients with various advanced solid tumors who were refractory or intolerant to standard chemotherapy. Metastatic lesions to organs) are summarized.
- JPH203 which is an inhibitor of LAT1
- NAT2 a metabolite called N-acetylJPH203
- Table 2 shows the number of new lesions and new lesions in all 16 patients enrolled in the Phase I study, divided into Rapid type (8 cases) and Non-rapid type (8 cases), which metabolize rapidly in NAT2.
- the lesions are listed separately for the onset site.
- the Rapid type of NAT2 showed new lesions in 7 of 8 cases, and the Non-rapid type showed new lesions in 4 of 8 cases.
- the number of new lesions in the lung occupied by the vascular network was 5 out of 7 in Rapid and 1 in 4 in Non-rapid. It is important as an example of the present specification to clarify the association of JPH203 to tumor angiogenesis.
- JPH203 has an anticancer effect on tumor angiogenesis.
- LAT1 is upregulated in the tumor endothelium and plays a basic role in tumor angiogenesis.
- a crosstalk between LAT1-mediated amino acid signaling and growth factor-dependent angiogenesis signaling has been revealed, and the nutrient-sensing hub kinase mTORC1 controls angiogenesis.
- LAT1 targeted therapies may provide an ideal option, especially for enhancing cancer treatment with current anti-angiogenic therapies.
- FIG. 7 shows a summary of the pharmacological effects of JPH203 on tumor tissues.
- the following effects can be expected.
- -The environment inside the tumor (abnormality of normal blood vessels and maintenance of hypoxia) that is favorable for the tumor is destroyed by JPH203, and normal blood vessels are cultivated.
- ⁇ It can prevent the metastasis of cancer cells and the growth of cancer cells into normal tissues rich in blood flow.
- -Promote anti-cancer effects that confine the cancer to a certain localized state and enable local delivery of anti-cancer drugs.
- the therapeutic agent for cancer of the present invention can provide a therapeutic agent having no side effects and high effect, particularly having little effect on normal cells.
- the number of blood vessels in the cancer tissue of the untreated (control) group of the vascular endothelial cell marker CD34 was significantly reduced by the treatment with JPH203. It is a figure which shows the tumor growth inhibitory effect in the vascular endothelium-specific LAT1 knockout mouse. The growth of LAT1 gene-expressing tumors transplanted into mice was significantly suppressed by knockdown (disruption) of the LAT1 gene. It is a figure which shows the effect of LAT1 gene deletion and LAT1 inhibition on the proliferation of tumor vascular endothelial cells. The proliferation of tumor vascular endothelial cells was significantly suppressed by each treatment. The effects of LAT1 KD and JPH203 on the mTORC1- and GAAC pathways are shown.
- JPH203 shows the suppression of JPH203 of the intracellular signal transduction pathway by the vascular endothelial growth factor VEGF-A secreted from a cancer cell. It is a figure which shows the suppression of the angioplasty induction signal by JPH203.
- Amino acid signals mediated by LAT1 monitor amino acid supply and allow vascular growth factor to pass through mTORC1 (“gating” control).
- JPH203 suppresses the intracellular transport of amino acids via LAT1 and acts more favorably on mTORC1 activation than stimulation of vascular endothelial growth factor, and blocks stimulation from vascular endothelial growth factor even if it enters mTORC1.
- JPH203 suppresses LAT1 specifically expressed in cancer cells
- the present invention is derived from the discovery that LAT1 is also expressed in abnormal intratumoral vascular endothelial cells.
- the anticancer effect of JPH203 by inhibiting the function of LAT1 molecule present in two different sites of tumor tissue acts to suppress both cancer growth and metastasis.
- the changes in tumor volume when JPH203 and anti-PD-1 antibody are administered to mice having a tumor individually or in combination are shown.
- the amino acid transporter SLC7A5 confers a poor prognosis in the highly proliferative breast cancer subtypes and is a key therapeutic target in luminal B tumours.
- Breast Cancer Res. 2018; 20:21. 10.
- L-type amino acid transporter 1 (LAT1) predicts poor prognosis in pancreatic ductal adenocarcinomas. J Clin Pathol. 2012; 65: 1019-23. 15. Kaira K, Sunose Y, Ohshima Y, Ishioka NS, Arakawa K, Ogawa T, et al. Clinical significance of L-type amino acid transporter 1 expression as a prognostic marker and potential of new targeting therapy in biliary tract cancer. BMC Cancer. 2013; 13: 482. 16.
- Tie2-Cre transgenic mice A new model for endothelial cell-lineage analysis in vivo. Dev Biol. 2001; 230: 230-42. 22. De Lange WJ, Halabi CM, Beyer AM, Sigmund CD. Germ line activation of the Tie2 and SMMHC promoters causes noncell-specific deletion of floxed alleles. Physiol Genomics. 2008; 35: 1-4. 23.
- the LAT1 inhibitor JPH203 reduces growth of thyroid carcinoma in a fully immunocompetent mouse model.
- Rapamycin inhibits primary and metastatic tumor growth by antiangiogenesis: Involvement of vascular endothelial growth factor. Nat Med. 2002; 8: 128-35. 41. Sun S, Chen S, Liu F, Wu H, McHugh J, Bergin IL, et al. Constitutive activation of mTORC1 in endothelial cells leads to the development and progression of lymphangiosarcoma through VEGF autocrine signaling. Cancer Cell. 2015; 28: 758-72. 42.
- c-Myc is crucial for the expression of LAT1 in MIA Paca-2 human pancreatic cancer cells.
- Oncol Rep. 2012; 28: 862-6. 48. Yue M, Jiang J, Gao P, Liu H, Qing G. Oncogenic MYC activates a feedforward regulatory loop promoting essential amino acid metabolism and tumorigenesis. Cell Rep. 2017; 21: 3819-32. 49. Testini C, Smith RO, Jin Y, Martinsson P, Sun Y, Hedlund M, et al. Myc-dependent endothelial proliferation is controlled by phosphotyrosine 1212 in VEGF receptor-2. EMBO Rep. 2019; 20: e47845. 50.
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
対象のがん疾患の治療に使用するための、L型アミノ酸トランスポーター1(LAT1)阻害剤を含む、腫瘍内異常血管内皮細胞に発現するLAT1を介したアミノ酸の細胞内輸送を抑えることにより、がん細胞の増殖及び/または転移を抑制することを特徴とする、がんの治療剤である。該治療剤は、好ましくはNon-Rapid(Slow及び/またはIntermediate)型のNAT2遺伝子を有する前記対象に投与される。
Description
本発明は、L型アミノ酸トランスポーター1(LAT1)阻害剤を用いるがん治療剤に関する。
腫瘍血管新生への治療的介入は、抗がん治療の合理的な戦略の1つである。内皮細胞における血管新生シグナル伝達経路を標的とするために、血管新生促進因子に対する中和抗体およびデコイ受容体、ならびに受容体チロシンキナーゼ(RTK)に対する抗体および阻害剤を含む様々な薬剤が開発されてきた。しかしながら、臨床診療におけるそれらの有効性と適応症は比較的限定されている[1、2]。血管新生促進成長因子シグナル伝達とそれらの代償機能の冗長性は、抗血管新生療法に対する不十分な応答性と耐性を説明するメカニズムの1つである[1、2]。
血管新生阻害(VEGF阻害)効果による抗がん剤として、ベバシズマブ、ラムシルマブが知られている。これらVEGF阻害剤は、正常組織の血管新生をも阻害するため、それに伴う消化管出血、消化管穿孔、あるいは動脈血栓塞栓等の循環器系の副作用が発生している。即ち、内皮細胞における特定の血管新生促進シグナル伝達経路自体の阻害が、腫瘍における異常な血管新生活性を制御するのに十分ではないことを明確に示している。
腫瘍の血管新生は、合理的な抗がん標的と見なされている。しかしながら、臨床診療における抗血管新生療法の有効性と適応症は比較的限られている。したがって、病理学的血管新生に重要な腫瘍内皮の明確な特徴を明らかにすることが依然として求められている。
LAT1は、その補助タンパク質4F2hcとヘテロ二量体複合体を形成し、ほとんどの必須アミノ酸を優先的に輸送する[3、4]。LAT1は、20を超える組織/臓器起源の広範囲の原発腫瘍および転移性病変で発現上昇することが知られている[5-7]。さらに、LAT1の発現と予後不良との相関関係は、トリプルネガティブ乳がん[8]、高増殖性ER陽性サブタイプの乳がん[9]、膀胱がん[10]、肺腺がん[11]、肺神経内分泌腫瘍[12]、膵管腺がん[13、14]、および胆道がん[15]など、さまざまな腫瘍で示されている。したがって、がん細胞におけるLAT1は、抗腫瘍療法の新たな分子標的として認識されている。前臨床動物モデルで顕著な抗腫瘍効果を示したJPH203を含むいくつかのLAT1選択的阻害剤が合成されている[16-18]。
一方、血管細胞に目を移すと、正常組織における血管では、血流がうっ滞、凝固せずにスムーズに流れる。外来抗原によって活性化した樹状細胞のような抗原提示細胞は、リンパ節に移動され、それにより免疫細胞の活性化を促す。そして、血管内皮細胞マーカーCD34は発現しているが、LAT1は発現していない。
本発明は、副作用がなく効果の高いがんの治療剤を提供することを目的とする。特に、正常細胞への影響が少ないがんの治療剤を提供することを目的とする。本発明はまた、副作用がなく効果の高いがんの治療方法を提供することを目的とする。
さらには、血管の機能と内皮マーカーからの定義づけと腫瘍内血管制御と腫瘍免疫制御の相乗作用の構築を目的とする。
すなわち本発明は、L型アミノ酸トランスポーター1阻害剤(LAT1阻害剤)を含む、腫瘍内異常血管内皮細胞に発現するLAT1を介したアミノ酸の細胞内輸送を抑えることにより、免疫チェックポイント阻害薬の奏効性を上昇させ、がん細胞の増殖及び/または転移を抑制する、がんの治療剤を提供する。
また本発明は、LAT1阻害剤を含む、腫瘍血管新生抑制剤を提供する。
更に、本発明のLAT1阻害剤は、免疫チェックポイント阻害薬の奏効性を上昇させるための薬剤としても作用する。
本発明により、副作用がなく効果の高い、特に、正常細胞への影響が少ないがんの治療剤を提供することが可能となる。
即ち、ヒト膵がん組織内腫瘍部位の新生血管にはLAT1/CD34が共存するが、血管内皮細胞(HUVEC)でのVEGF-A、FGF―2、VEGF-A/FGF-2刺激によりLAT1 mRNAは増大し、LAT1阻害剤、特に、後述するJPH203は、大動脈リングアッセイ、マトリゲルでのプラグアッセイで血管新生を抑制し、またMIA PaCa-2移植マウスでは腫瘍増大と腫瘍内血管新生等がJPH203により強く抑制された。実施例で示すように、HUVECにおけるJPH203による血管新生誘導シグナルの抑制機序の解析で以下が明らかにされた。即ち、LAT1を介するアミノ酸シグナルは、アミノ酸供給量をモニターして、血管新生成長因子受容体を介する血管新生誘導シグナルのmTORC1通過を許可する(“gating”制御)。JPH203は、LAT1を介するアミノ酸取り込みを抑制してmTORC1活性化を抑え、血管新生促進因子によるmTORC1活性化より優位に作用し、血管新生成長因子からの刺激がmTORC1に入っても、そこで遮断してしまうことが判明している。
即ち、JPH203を代表とするLAT1阻害剤は、HUVECに発現するLAT1を阻害し、HUVECの血管新生を阻害する。
正常な血管の特徴としては、以下のものが挙げられる。
・血流がうっ滞、凝固せずにスムーズに流れる
・CD34が内皮細胞に発現しており、LAT1は発現していない。
・血流がうっ滞、凝固せずにスムーズに流れる
・CD34が内皮細胞に発現しており、LAT1は発現していない。
一方で、腫瘍内に豊富に存在する血管様構造物の特徴としては、以下のものが挙げられる。
・LAT1が発現し、蛇行、拡張、閉塞、血管内血管形成、過剰な血管分岐、発芽などの異常が認められる
・抗がん剤の送達の抑制、低酸素、染色体の不安定性、遺伝子変異の招来等がみられる
・ペリサイトによる内皮細胞の裏打ちが低下し、内皮細胞同士の結合低下、血管壁の穴あき構造変化等が顕著になる。
・LAT1が発現し、蛇行、拡張、閉塞、血管内血管形成、過剰な血管分岐、発芽などの異常が認められる
・抗がん剤の送達の抑制、低酸素、染色体の不安定性、遺伝子変異の招来等がみられる
・ペリサイトによる内皮細胞の裏打ちが低下し、内皮細胞同士の結合低下、血管壁の穴あき構造変化等が顕著になる。
そこで、本発明は、正常組織及び腫瘍内における血管構造の差異を利用して、即ち、LAT1の発現の有無に焦点をあて、がん細胞の血管に選択的に作用する薬剤としてのLAT1を用いたがんの治療剤に関するものである。
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明のがんの治療剤は、LAT1阻害剤を有効成分とする。
本発明で用いるLAT1阻害剤としては、非競合阻害剤及び競合阻害剤のいずれも使用可能である。
非競合阻害剤としては、例えばWO2014/112646号に記載のものが例示される。
競合阻害剤としては、WO2008/081537号に記載のものが例示され、特に、O-(5-アミノ-2-フェニルベンズオキサゾール-7-イル)メチル-3,5-ジクロロ-L-チロシン(以下、「JPH203」ということがある)が好ましい。
本発明のがんの治療剤が対象とするがんとしては、結腸がん、直腸がん、非小細胞肺がん、卵巣がん、子宮頸がん、乳がん、肺がん、膵臓がん、胆道がん、食道がん、大腸がん、前立腺がん、膀胱がん、脳腫瘍、胃がん、肝臓がん、皮膚がん、絨毛がん、腎がん、頭頚部がん、舌がん、骨髄腫、胸腺腫、中皮腫、下垂体腫瘍、転移性がん、及び浸潤がんよりなる群から選択される。
なかでも、肺がん、膵がんが推奨される。
本発明のがんの治療剤は、L型アミノ酸トランスポーター1(LAT1)を阻害するものであるが、LAT1は正常細胞には殆ど存在せず(骨髄、血液脳関門、胎盤等に認められるもののがん組織の発現量に比べて桁違いに低く、JPH203の臨床試験では正常機能の障害は認めていない)、がんの腫瘍関連血管内皮細胞で発現するため、本発明のがんの治療剤が投与された患者では、正常細胞に作用を起こすことはない。JPH203の阻害効果はLAT1阻害に特有であり、LAT1阻害剤の作用機序と既存の抗血管新生剤の作用機序を明確に区別する。
更に、本発明のがんの治療剤は、腫瘍免疫の復活を促す免疫チェックポイント阻害薬が奏効できる環境を構築することが可能となり、免疫チェックポイント阻害薬の奏効性を上昇させるための薬剤としても作用する。
一方、JPH203を代表とするLAT1阻害剤は、臨床試験で得られた薬物動態パラメーター解析結果から、体表面積当たりで同じ投与量を投与した被験者間において、血液中JPH203濃度に比べて、血中並びに尿中のNアセチル化体濃度の個人差が大きいことが見出されており、NAT2の遺伝子多型におけるアセチル化速度の相違と、JPH203の安全性及び薬効との間に関連があることが、本発明者により見出されている(PCT/JP2020/032828号)。
即ち、本発明で用いるLAT1阻害剤は、Non-Rapid(Slow及び/またはIntermediate)型のNAT2遺伝子を有する(即ち、NAT2によるアセチル化の遅いタイプの)がん等の患者に投与された場合、高い効果を奏することが可能となる。ここで、「Non-Rapid型のNAT2遺伝子」とは、NAT2遺伝子のアセチル化速度の速いタイプ(Rapid)、中間タイプ(Intermediate)、および遅いタイプ(Slow)の三つの表現型のうち、中間タイプ(Intermediate)、および遅いタイプ(Slow)の表現型を意味する。
NAT2の遺伝子多型を代表する7つのSNP(481C>T,282C>T,857G>A,803A>G,341T>C,590G>A,191G>A)について、2-SNP、3-SNP、4-SNPの組み合わせ(表1)でNAT2のアセチル化の表現型(Phenotype)が解析され、SNPなし(標準)ハプロタイプであるNAT2*4のホモ接合体で構成されるものが、アセチル化の速いタイプ(Rapid)とされ、いずれか一つのハプロタイプが変異したヘテロ接合体が、アセチル化速度が中間のタイプ(Intermediate)とされ、そして、すべてが変異ハプロタイプのホモ接合体か二つ又はそれ以上の変異ハプロタイプのヘテロ接合体の組み合わせが、アセチル化の遅いタイプ(Slow)とされている(Pharmacogenomics,13巻:31-41ページ,2012年)。ここで、「NAT2*4」アレルは、SNPなしハプロタイプを意味する。また、Pharmacogenomics,13巻:31-41ページ,2012年によれば、Rapidタイプは、「NAT2*4」以外にも、アミノ酸変異を起こさない「NAT2*11,NAT2*12,NAT2*13」を有する患者もRapidタイプに分類されている。
具体的には、2つのSNPが推測するNAT2アセチル化因子の表現型は、2つのSNPの分析:rs1041983(282C>T)およびrs1801280(341T>C)によって決定される。3つのSNPが推測するNAT2アセチル化因子表現型は、3つのSNPの分析:rs1799929(481C>T)、rs1799930(590G>A)およびrs1799931(857G>A)によって決定される。4つのSNP推定NAT2アセチレーター表現型は、4つのSNPの分析:rs1801279(191G>A)、rs1801280(341T>C)、rs1799930(590G>A)、およびrs1799931(857G>A)によって決定される。
例えば、LAT1阻害剤であるJPH203がNAT2によりアセチル化されると、そのがん細胞に対する阻害活性が低下する。しかし患者が、アセチル化を受けにくいNAT2遺伝子表現型を優占的に有している場合、即ち、がん等の患者のNAT2遺伝子において、アセチル化速度の中間タイプ(Intermediate)、および遅いタイプ(Slow)の表現型を有する場合(Non-Rapid型のNAT2遺伝子)は、JPH203のアセチル化速度が遅くなるため、アセチル化されにくくなり、JPH203の活性が長く続くことになる。
尚、NAT2遺伝子多型の分析は、従来公知の方法で行うことが可能である。例えば、被験者の血液からDNAを抽出し、マイクロアレイ法によりDNAを処理し、次いで遺伝子型を読み込んで検査を行い、続いてデータ解析を行うことにより行うことが可能である。
したがって、本発明のがんの治療剤は、NAT2遺伝子多型の測定と組み合わせて、以下の投与レジメでがんに罹患した対象に投与することができる。
(1) Non-Rapid(Slow及び/またはIntermediate)型のNAT2遺伝子を有する前記対象を同定して選択し;
(2) Non-Rapid(Slow及び/またはIntermediate)型のNAT2遺伝子を有すると同定された当該対象に当該医薬組成物を投与する。
(2) Non-Rapid(Slow及び/またはIntermediate)型のNAT2遺伝子を有すると同定された当該対象に当該医薬組成物を投与する。
更に、本発明のがんの治療剤は、NAT2阻害剤と併用して、疾患、例えばがんの治療に用いることができる。NAT2阻害剤としては、例えば、アセトアミノフェンが例示される。
例えば、JPH203は肝サイトゾルでNAT2により速やかにN-アセチル化を受け、Nac-JPH203となるが、Nac-JPH203はJPH203に比べて、LAT1への選択性及び活性が低下することがわかっており、NAT2阻害剤との併用により、JPH203のアセチル化を抑え、JPH203の効果の維持をはかるものである。
医薬組成物
本発明のがんの治療剤は、医薬組成物として用いられる。医薬組成物は、有効成分としてLAT1阻害剤又はその薬理学的に許容される塩を含む。また、必要に応じて医薬品添加物を含んでもよい。本発明の医薬組成物は、錠剤、顆粒剤、細粒剤、粉剤、カプセル剤などの固形製剤または液剤、ゼリー剤、シロップ剤などの形態で、経口投与することができ、あるいは、該医薬組成物薬は、注射剤(血管内、皮下、腫瘍内等)、経鼻剤、坐剤、吸入剤、経皮剤などの形態で、非経口的に投与してもよい。
本発明のがんの治療剤は、医薬組成物として用いられる。医薬組成物は、有効成分としてLAT1阻害剤又はその薬理学的に許容される塩を含む。また、必要に応じて医薬品添加物を含んでもよい。本発明の医薬組成物は、錠剤、顆粒剤、細粒剤、粉剤、カプセル剤などの固形製剤または液剤、ゼリー剤、シロップ剤などの形態で、経口投与することができ、あるいは、該医薬組成物薬は、注射剤(血管内、皮下、腫瘍内等)、経鼻剤、坐剤、吸入剤、経皮剤などの形態で、非経口的に投与してもよい。
本発明のがんの治療剤は、好ましくは、注射剤または前記固形製剤のような経口剤の形態である。
特に、本発明の医薬組成物は、がんの治療剤として用いられることから、好ましくは注射剤として製剤化される。そのような注射剤としては、本発明の有効成分にpH調整剤、およびシクロデキストリン類を含むものが例示される。
具体的な注射剤としては、例えば、静脈、皮下、皮内、筋肉内注射剤、点滴静注剤が挙げられる。
本発明の注射剤に配合することができるpH調整剤としては、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムのようなアルカリ金属水酸化物、水素化ナトリウム、水素化カリウムのようなアルカリ金属水素化物、アルカリ金属又はアルカリ土類金属の炭酸塩等が挙げられ、特に、水酸化ナトリウム、および炭酸ナトリウムが好ましく、水酸化ナトリウムがより好ましい。
前記注射剤は、pH調整剤を用いて適当なpHに適宜調整されうる。本実施形態に係る注射剤のpHは、3~6であることが好ましく、3~5であることがより好ましく、3~4.5であることがさらに好ましく、3.5~4.5であることが特に好ましい。
本発明の注射剤に配合することができるシクロデキストリン類としては、例えば、未修飾シクロデキストリン、修飾シクロデキストリンが挙げられる。未修飾シクロデキストリンとして、例えば、α-シクロデキストリン、β-シクロデキストリン、γ-シクロデキストリン等が挙げられる。また修飾シクロデキストリンとして、例えば、ジメチル-α-シクロデキストリン、ジメチル-β-シクロデキストリン、ジメチル-γ-シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル-α-シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル-γ-シクロデキストリン、スルホブチルエーテル-α-シクロデキストリン、スルホブチルエーテル-β-シクロデキストリン、スルホブチルエーテル-γ-シクロデキストリン、マルトシル-α-シクロデキストリン等が挙げられる。
シクロデキストリン類は、1種単独で使用してもよく、また2種以上を任意に組み合わせて使用してもよい。シクロデキストリン類は、強酸性ではない水溶液に溶解した場合でも形成される不溶性微粒子数を低減できるという観点及び凍結乾燥製剤の強酸性でない水溶液に対する再溶解性を改善するという観点から、ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン、又は、スルホブチルエーテル-β-シクロデキストリンが好ましく、スルホブチルエーテル-β-シクロデキストリンがより好ましい。
ここで、スルホブチルエーテル・シクロデキストリンは下記式1に示した構造であり、環状構造の内側は疎水性が高い。そのため、同じく疎水性の高いO-(5-アミノ-2-フェニルベンズオキサゾール-7-イル)メチル-3,5-ジクロロ-L-チロシンと、疎水性相互作用により複合体を構成する。本明細書中における「スルホブチルエーテル・シクロデキストリン複合体」との言及は、上記した疎水性相互作用によるものを指す。
特に、LAT1阻害剤としてJPH203を用いる場合は、そのスルホブチルエーテル・シクロデキストリン複合体(以下、「JPH203-SBECD」という)として注射剤中に使用してもよい。
本発明に係る注射剤には、更に、必要により緩衝剤、懸濁化剤、溶解補助剤、安定化剤、等張化剤、保存剤等を添加してもよい。
緩衝剤としては、例えば、ホウ酸緩衝剤、リン酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、トリス緩衝剤等が挙げられる。
懸濁化剤としては、例えば、メチルセルロース、ポリソルベート80、ヒドロキシエチルセルロース、アラビアゴム、トラガント末、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポロキサマー(Poloxamer)、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)、アルギン酸ナトリウムなどが挙げられる。
溶解補助剤としては、例えば、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリソルベート80、ニコチン酸アミド、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、マクロゴール、グリセリン脂肪酸エステル、リポアミノ酸(Lipoaminoacid)、ポリエチレングリコールなどが挙げられる。
安定化剤としては、亜硫酸ナトリウム、メタ亜硫酸ナトリウムなどが挙げられ、等張化剤としては、グリセリン、塩化ナトリウムなどが挙げられ、そして保存剤としては、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、ソルビン酸などが挙げられる。
凍結乾燥製剤を水に溶解した時のpHとしては、3~6であることが好ましく、3~5であることがより好ましく、3~4.5であることがさらに好ましく、3.5~4.5であることが特に好ましい。
前記凍結乾燥製剤は、従来公知の凍結乾燥製剤の製造方法により作製することができ、例えば、-25℃以下の温度で凍結後、真空度を約20Pa以下に保ちながら、室温に到達するまで昇温させつつ乾燥させる方法等が挙げられる。
本発明に係る注射剤は、凍結乾燥製剤であってもよい。このような凍結乾燥製剤は、用時に、例えば、注射用蒸留水、輸液、電解液の1種、またはこれら2種以上の溶媒に溶解して用時溶解型注射剤として使用することができる。
本発明に係る注射剤は、凍結乾燥製剤であってもよい。このような凍結乾燥製剤は、用時に、例えば、注射用蒸留水、輸液、電解液の1種、またはこれら2種以上の溶媒に溶解して用時溶解型注射剤として使用することができる。
投薬レジメ
本発明のがんの治療剤が適用される投薬レジメは、患者のタイプ、人種、年齢、体重、性別および医学的状態;処置すべき状態の重症度;投与経路;ならびに患者の肝および腎機能をはじめとする様々な要因に従って選択される。医師は、その症状の進行を予防、阻止または停止させるために必要な薬物の有効量を容易に決定し、処方することができる。
本発明のがんの治療剤が適用される投薬レジメは、患者のタイプ、人種、年齢、体重、性別および医学的状態;処置すべき状態の重症度;投与経路;ならびに患者の肝および腎機能をはじめとする様々な要因に従って選択される。医師は、その症状の進行を予防、阻止または停止させるために必要な薬物の有効量を容易に決定し、処方することができる。
本発明のがんの治療剤において医薬組成物は、有効成分の投与量は、症状の程度、患者の年齢、性別、体重、感受性差、投与時期、投与間隔等に応じて適宜選択することができ、有効性および安全性の観点からは、1回、1mg/m2~60mg/m2(体表面積)が例示され、好ましくは、12.5mg/m2~60mg/m2、12.5mg/m2~25mg/m2、又は10mg/m2~40mg/m2(体表面積)が例示され、特に25mg/m2が推奨される。また、症状に応じて、12.5mg/m2等に減量してもよい。
本発明のがんの治療剤の投与レジメの例としては、例えば、
-医薬組成物が、一定期間連続投与に続く一定期間の休薬を1サイクルとして投与される、
-医薬組成物が、5日間の連続投与に続く9日間の休薬の計14日を1サイクルとして投与される、
-一定量の医薬組成物が、一定時間かけて静脈内持続投与される、
-医薬組成物100mLが、90分かけて静脈内持続投与される、
-患者に対して1~60mg/m2で投与される、
-患者に対して12.5~60mg/m2で投与される、
-患者に対して12.5~25mg/m2で投与される、
-患者に対して25mg/m2で投与される、
等が挙げられ、必要に応じてこれらを組み合わせて適用可能である。
-医薬組成物が、一定期間連続投与に続く一定期間の休薬を1サイクルとして投与される、
-医薬組成物が、5日間の連続投与に続く9日間の休薬の計14日を1サイクルとして投与される、
-一定量の医薬組成物が、一定時間かけて静脈内持続投与される、
-医薬組成物100mLが、90分かけて静脈内持続投与される、
-患者に対して1~60mg/m2で投与される、
-患者に対して12.5~60mg/m2で投与される、
-患者に対して12.5~25mg/m2で投与される、
-患者に対して25mg/m2で投与される、
等が挙げられ、必要に応じてこれらを組み合わせて適用可能である。
他の薬剤との併用
本発明のがん治療剤は、他の抗がん剤と併用することが可能である。そのような抗がん剤としては、従来公知のものが使用でき、例えば、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗生物質、植物由来抗がん剤、白金配位化合物、カンプトテシン誘導体、チロシンキナーゼ阻害剤、セリンスレオニンキナーゼ、リン脂質キナーゼ、インターフェロン、ホルモン製剤、免疫チェックポイント阻害剤、タンパク質翻訳後修飾阻害剤及びその他抗腫瘍剤が挙げられる。
本発明のがん治療剤は、他の抗がん剤と併用することが可能である。そのような抗がん剤としては、従来公知のものが使用でき、例えば、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗生物質、植物由来抗がん剤、白金配位化合物、カンプトテシン誘導体、チロシンキナーゼ阻害剤、セリンスレオニンキナーゼ、リン脂質キナーゼ、インターフェロン、ホルモン製剤、免疫チェックポイント阻害剤、タンパク質翻訳後修飾阻害剤及びその他抗腫瘍剤が挙げられる。
特に、本発明のがんの治療剤は、免疫チェックポイント阻害薬の奏効性を上昇させるための薬剤としても作用するので、免疫チェックポイント阻害剤との併用が推奨される。
さらには、本発明のがん治療剤は、アセトアミノフェンのようなNAT2阻害剤、抗血管新生剤、例えば、ベマシズマブ、ラムシルマブ、アフリベルセプト等と併用してもよい。
以下に具体的な実施形態を挙げて本発明を説明するが、本発明はその実施形態に限定されるものではなく、それらにおける様々な変更及び改変が当業者によって、添付の特許請求の範囲に規定される本発明の範囲または趣旨から逸脱することなく実行され得ることが理解される。
抗体産生
マウスLAT1 N末端53アミノ酸のGST融合組換えタンパク質を大腸菌BL21(DE3)で発現させ、グルタチオンセファロース4B(GE Healthcare)アフィニティーカラムクロマトグラフィーで精製した。ニワトリ(ホワイトレグホン)を精製組換えタンパク質で筋肉注射により免疫(フロイントの完全アジュバントに200μgを混合して初回注射、不完全フロイントに100μgを混合して2週間間隔で4回の追加注射)した。最終注射の1週間後、抗血清を収集し、抗GST抗体の吸収のためにGST結合Affi-Gel 10カラム(Bio-Rad)に通し、次に抗原結合Affi-Gel 10カラムクロマトグラフィーによる精製に供して抗mLAT1(C)を得た。
マウスLAT1 N末端53アミノ酸のGST融合組換えタンパク質を大腸菌BL21(DE3)で発現させ、グルタチオンセファロース4B(GE Healthcare)アフィニティーカラムクロマトグラフィーで精製した。ニワトリ(ホワイトレグホン)を精製組換えタンパク質で筋肉注射により免疫(フロイントの完全アジュバントに200μgを混合して初回注射、不完全フロイントに100μgを混合して2週間間隔で4回の追加注射)した。最終注射の1週間後、抗血清を収集し、抗GST抗体の吸収のためにGST結合Affi-Gel 10カラム(Bio-Rad)に通し、次に抗原結合Affi-Gel 10カラムクロマトグラフィーによる精製に供して抗mLAT1(C)を得た。
ヒト臍帯静脈内皮細胞
ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC、Corning)は、2%FBSおよび成長因子(VEGF-A、FGF-2、EGF、IGF-1)を含むEGM-2培地(Lonza)で37℃、5%CO2/95%空気で培養した。継代数が9未満の細胞を使用して実験を行った。
ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC、Corning)は、2%FBSおよび成長因子(VEGF-A、FGF-2、EGF、IGF-1)を含むEGM-2培地(Lonza)で37℃、5%CO2/95%空気で培養した。継代数が9未満の細胞を使用して実験を行った。
RNAiによる遺伝子ノックダウン
HUVECは、コラーゲンでコーティングされた6cmディッシュに播種された(0.7~1.0×104細胞/ディッシュ)。翌日、LAT1#1(s15653)、#2(s15654)、#3(s15655)、またはネガティブコントロール#2(Ambion)のSilencer Select siRNAを、Lipofectamine RNAiMAX(Invitrogen)を使用してトランスフェクションした。トランスフェクションの2日後に細胞を実験に使用した。
HUVECは、コラーゲンでコーティングされた6cmディッシュに播種された(0.7~1.0×104細胞/ディッシュ)。翌日、LAT1#1(s15653)、#2(s15654)、#3(s15655)、またはネガティブコントロール#2(Ambion)のSilencer Select siRNAを、Lipofectamine RNAiMAX(Invitrogen)を使用してトランスフェクションした。トランスフェクションの2日後に細胞を実験に使用した。
細胞増殖アッセイ
HUVECは、EGM-2培地中のコラーゲンコーティングされた96ウェルプレート(1.0×103細胞/ウェル)に播種された。2-アミノビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボン酸(BCH)またはJPH203が翌日(0日目)に追加された。LAT1ノックダウンの場合、siRNAトランスフェクション(0日目)の48時間後に細胞を播種した。細胞増殖はCCK-8キット(同仁堂)により24時間毎に3日間測定された。
HUVECは、EGM-2培地中のコラーゲンコーティングされた96ウェルプレート(1.0×103細胞/ウェル)に播種された。2-アミノビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-カルボン酸(BCH)またはJPH203が翌日(0日目)に追加された。LAT1ノックダウンの場合、siRNAトランスフェクション(0日目)の48時間後に細胞を播種した。細胞増殖はCCK-8キット(同仁堂)により24時間毎に3日間測定された。
動物腫瘍モデルの構築と血管の定量化
ヒト膵臓がんMIA PaCa-2細胞(JCRB0070、JCRB)と肺がんH520細胞(HTB-182、ATCC)は、10%FBS(Gibco)と100units/mLペニシリン-100μg/mLストレプトマイシン(ナカライテスク)を補充したDMEM(SIGMA-Aldrich)で成長させた。接種前に、細胞をろ過したPBSに懸濁し、1:1の体積比で成長因子低減マトリゲルと混合して、最終濃度を2.5×107細胞/mLにした。細胞懸濁液を6週齢のBALB/c-nu/nu雌マウスの下腹部に皮下注射した(5.0×106細胞、0.2mL/動物)。示されている場合、腫瘍のサイズをキャリパーで測定し、式:腫瘍体積(mm3)=(長さ×幅2)/2を使用して体積を計算した。長さと幅は、それぞれ腫瘍の最長と最短の寸法である。7日後、腫瘍の体積が100~250mm3に達したときに、マウスを2つのグループに分け(各グループでn=5)、生理食塩水中のJPH203-SBECD(25mg/kg/日、iv)または同等の量のプラセボ対照のいずれかを毎日投与した。連続注射の14日後、腫瘍を切除し、CD34に対する免疫蛍光分析を行った。取得した免疫蛍光画像から、手動しきい値処理によりバイナリ画像が生成され、ImageJソフトウェアの「Analyze Particles」プラグインによる血管密度の定量化に使用された。画像は、各セクションで少なくとも5つのランダムに選択された顕微鏡観察視野から取得され、各腫瘍について10のセクションが分析された(腫瘍あたり50~100枚の画像)。各腫瘍のmm2組織面積あたりの平均血管数を統計分析に使用した。
ヒト膵臓がんMIA PaCa-2細胞(JCRB0070、JCRB)と肺がんH520細胞(HTB-182、ATCC)は、10%FBS(Gibco)と100units/mLペニシリン-100μg/mLストレプトマイシン(ナカライテスク)を補充したDMEM(SIGMA-Aldrich)で成長させた。接種前に、細胞をろ過したPBSに懸濁し、1:1の体積比で成長因子低減マトリゲルと混合して、最終濃度を2.5×107細胞/mLにした。細胞懸濁液を6週齢のBALB/c-nu/nu雌マウスの下腹部に皮下注射した(5.0×106細胞、0.2mL/動物)。示されている場合、腫瘍のサイズをキャリパーで測定し、式:腫瘍体積(mm3)=(長さ×幅2)/2を使用して体積を計算した。長さと幅は、それぞれ腫瘍の最長と最短の寸法である。7日後、腫瘍の体積が100~250mm3に達したときに、マウスを2つのグループに分け(各グループでn=5)、生理食塩水中のJPH203-SBECD(25mg/kg/日、iv)または同等の量のプラセボ対照のいずれかを毎日投与した。連続注射の14日後、腫瘍を切除し、CD34に対する免疫蛍光分析を行った。取得した免疫蛍光画像から、手動しきい値処理によりバイナリ画像が生成され、ImageJソフトウェアの「Analyze Particles」プラグインによる血管密度の定量化に使用された。画像は、各セクションで少なくとも5つのランダムに選択された顕微鏡観察視野から取得され、各腫瘍について10のセクションが分析された(腫瘍あたり50~100枚の画像)。各腫瘍のmm2組織面積あたりの平均血管数を統計分析に使用した。
同所性同系腫瘍モデルは、B16-F10マウスメラノーマ細胞(CRL-6475、ATCC)をLat1fl/fl/Tek-Creまたは対照Lat1fl/flマウスに皮下接種することによって構築された。PBS中のB16-F10細胞懸濁液を1:1の体積比で成長因子低減マトリゲルと混合し、最終濃度を2.5×106細胞/mLにした。細胞懸濁液を6~8週齢のマウスの下腹部に皮下注射した(0.5×106細胞、0.2mL/動物)。上記のように腫瘍体積を毎日計算した。移植の10日後、パラフィン切片を使用して血管形成の定量化のために腫瘍を収集した。腫瘍内血管を可視化するために、腫瘍を採取する35分前に、100μLのFITC-デキストラン(2,000,000MW、Invitrogen)溶液(生理食塩水中5mg/mL)を静脈注射した。血管面積を定量化するために、切片全体を分析した。取得したFITC-dextranの蛍光画像から、手動しきい値処理によりバイナリ画像が生成され、ImageJソフトウェアの「Analyze Particles」プラグインによる血管面積の定量化に使用された。各腫瘍について8つの切片を分析して、平均血管面積(μm2/mm2組織面積)を計算し、統計分析に使用した。実験は、各グループ(Lat1fl/fl/Tek-Creマウスと対照Lat1fl/flマウス)に対してn=4で実行された。
トランスジェニックマウス
条件付きノックアウト用のfloxed Lat1遺伝子を保持するLat1flマウスは、Unitech Co.によって生成された。ターゲティングコンストラクトは、Lat1遺伝子のエクソン3を切り出すように設計された。エクソン3を含む1.2kbのゲノム領域は、loxP配列のペアで挟みこんだ対応するゲノム配列に置き換えられた。FRT配列のペアで挟み込んだネオマイシン耐性遺伝子カセットもエクソン3の下流に挿入された。相同組換えのために、ロングアームとショートアーム(それぞれ5.4kbと2.3kb)が追加された。すべてのゲノム配列はBACクローンRP23-46D12から増幅された。チミジンキナーゼプロモーター下のジフテリア毒素Aフラグメント(DTA)をネガティブセレクションに使用した。ターゲティング構築物を、C57BL/6Jに由来するマウスブルース-4ES細胞にエレクトロポレーションした。200μg/mlのG418で選択した後、ターゲットに成功したESクローンをPCRでスクリーニングした。相同組換えは、2つの外部プローブ(SpeI消化されたゲノムDNAに対する5’および3’プローブ)と内部プローブ(EcoRV消化されたゲノムDNAに対するNeoプローブ)を使用したサザンブロット分析によってさらに確認された。次に、陽性ESクローンをBalb/c胚盤胞に注入して、キメラマウスを得た。生殖系列伝達は、キメラマウスをC57BL/6Jマウスと交配することによって確立され、得られたヘテロ接合ファウンダーマウスは、CAGプロモーターの制御下でFlp-リコンビナーゼを発現するCAG-FLPマウスとさらに交配され、FRTサイト側のネオマイシン耐性遺伝子カセットを切除した。PCRによるネオマイシン耐性遺伝子カセットの除去を確認した後、得られたLat1flマウスはC57BL/6J遺伝的背景で維持された。
条件付きノックアウト用のfloxed Lat1遺伝子を保持するLat1flマウスは、Unitech Co.によって生成された。ターゲティングコンストラクトは、Lat1遺伝子のエクソン3を切り出すように設計された。エクソン3を含む1.2kbのゲノム領域は、loxP配列のペアで挟みこんだ対応するゲノム配列に置き換えられた。FRT配列のペアで挟み込んだネオマイシン耐性遺伝子カセットもエクソン3の下流に挿入された。相同組換えのために、ロングアームとショートアーム(それぞれ5.4kbと2.3kb)が追加された。すべてのゲノム配列はBACクローンRP23-46D12から増幅された。チミジンキナーゼプロモーター下のジフテリア毒素Aフラグメント(DTA)をネガティブセレクションに使用した。ターゲティング構築物を、C57BL/6Jに由来するマウスブルース-4ES細胞にエレクトロポレーションした。200μg/mlのG418で選択した後、ターゲットに成功したESクローンをPCRでスクリーニングした。相同組換えは、2つの外部プローブ(SpeI消化されたゲノムDNAに対する5’および3’プローブ)と内部プローブ(EcoRV消化されたゲノムDNAに対するNeoプローブ)を使用したサザンブロット分析によってさらに確認された。次に、陽性ESクローンをBalb/c胚盤胞に注入して、キメラマウスを得た。生殖系列伝達は、キメラマウスをC57BL/6Jマウスと交配することによって確立され、得られたヘテロ接合ファウンダーマウスは、CAGプロモーターの制御下でFlp-リコンビナーゼを発現するCAG-FLPマウスとさらに交配され、FRTサイト側のネオマイシン耐性遺伝子カセットを切除した。PCRによるネオマイシン耐性遺伝子カセットの除去を確認した後、得られたLat1flマウスはC57BL/6J遺伝的背景で維持された。
Lat1遺伝子の条件付きノックアウトでは、Lat1flマウスを以下のトランスジェニックマウスと交配した。CAGプロモーター(B6N.FVB(Cg)-Tg(CAG-rtTA3)4288Slowe/J)[19]の制御下でリバーステトラサイクリン制御トランスアクチベーター3(rtTA3)を発現するCAG-rtTA3マウス、およびテトラサイクリン応答性プロモーターの制御下でCreリコンビナーゼを発現するTetO-Creマウス(B6.Cg-Tg(tetO-cre)1Jaw/J)[20]は、Jackson Laboratoryから入手した。内皮細胞特異的Tekプロモーター/エンハンサー(B6.Cg-Tg(Tek-cre)1Ywa)[21]の下でCreリコンビナーゼ遺伝子を発現するTek-Creマウスは、理化学研究所バイオリソースセンターから購入した。Tekプロモーターの雌性生殖細胞系列におけるfloxed Lat1対立遺伝子の非細胞特異的削除を回避するために[22]、Tek-Cre陽性の雌マウスは交配に使用されなかった。ジェノタイピングPCRは、KOD One PCR Master Mix(TOYOBO)により、テールチップから抽出されたゲノムDNAを使用して行われた。CAG-rtTA3、TetO-Cre、およびTek-Creトランスジーンは、それらのリソースによって提供されるプロトコルによって分析された。Lat1遺伝子の野生型対立遺伝子とfloxed対立遺伝子は、
Fw(5’-TATAGAGAGAGACTTGGGATGAAGC-3’)、Rv(5’-CAGCACACTGATTGTGACAAAGG-3’)のプライマーによって区別された。Lat1遺伝子のfloxed対立遺伝子とノックアウト対立遺伝子は、
Fw(5’-GTTTCCAGTCTGGCATCTTTAAGTAG-3’)、
Rv(5’-CCCTGTGCTCAGACAGAAATGAGA-3’)のプライマーによって区別された。
Fw(5’-TATAGAGAGAGACTTGGGATGAAGC-3’)、Rv(5’-CAGCACACTGATTGTGACAAAGG-3’)のプライマーによって区別された。Lat1遺伝子のfloxed対立遺伝子とノックアウト対立遺伝子は、
Fw(5’-GTTTCCAGTCTGGCATCTTTAAGTAG-3’)、
Rv(5’-CCCTGTGCTCAGACAGAAATGAGA-3’)のプライマーによって区別された。
免疫染色
組織切片の免疫組織化学および免疫蛍光法は、以前に記載されたように実施した[23]。
組織切片の免疫組織化学および免疫蛍光法は、以前に記載されたように実施した[23]。
リアルタイムPCR
HUVECおよびマウス大動脈由来のトータルRNAは、それぞれIsogen II(Nippon Gene)およびAgencourt RNAdvance Tissue Kit(Beckman Coulter)を使用して抽出した。定量的リアルタイムPCRは、以前報告の通りに実施した[23]。
HUVECおよびマウス大動脈由来のトータルRNAは、それぞれIsogen II(Nippon Gene)およびAgencourt RNAdvance Tissue Kit(Beckman Coulter)を使用して抽出した。定量的リアルタイムPCRは、以前報告の通りに実施した[23]。
ウエスタンブロッティング
HUVECの全細胞溶解物は以前の報告の通りに調製した[24]。粗膜画分を以前のように調製し[25]、1%NP-40を用いて氷上で30分間可溶化した。Laemmliバッファーと混合した後、SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動とウエスタンブロット分析を行った[24]。抗体処理されたPVDFメンブレンは、ECLプライムウエスタンブロッティング検出システムで化学発光させ、Amersham Imager 680(GE Healthcare)によって画像化された。
HUVECの全細胞溶解物は以前の報告の通りに調製した[24]。粗膜画分を以前のように調製し[25]、1%NP-40を用いて氷上で30分間可溶化した。Laemmliバッファーと混合した後、SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動とウエスタンブロット分析を行った[24]。抗体処理されたPVDFメンブレンは、ECLプライムウエスタンブロッティング検出システムで化学発光させ、Amersham Imager 680(GE Healthcare)によって画像化された。
実施例1:ヒト膵がん組織の腫瘍内血管におけるLAT1の発現
ヒト膵がん組織の腫瘍内血管におけるLAT1の発現を調べた。LAT1の発現上昇は、膵管腺がん(PDA)を含むさまざまな組織起源のがんで報告されている[13、14]。これと一致して、LAT1の高発現は、免疫組織化学においてPDA組織のがん細胞で検出された(図1左図)。興味深いことに、内皮細胞マーカーCD34が陽性である間質の血管内皮細胞におけるLAT1の有意な発現を認めた。対照的に、正常な膵臓組織の内皮細胞は、LAT1染色に対してほとんど陰性であった。この観察は、組織マイクロアレイ上の多数のサンプルで確認された(図1右図)。正常な膵臓組織のごく一部(25.0%)のみが内皮細胞で陽性のLAT1染色を示した。分析された20の組織スポットのうち、4つは低から中程度を示し、1つは強い染色を示した。対照的に、PDA組織の大部分(81.4%)は、内皮細胞でLAT1発現を示した。分析された75の組織スポットのうち、26は低から中程度を示し、35は強い染色を示した。
ヒト膵がん組織の腫瘍内血管におけるLAT1の発現を調べた。LAT1の発現上昇は、膵管腺がん(PDA)を含むさまざまな組織起源のがんで報告されている[13、14]。これと一致して、LAT1の高発現は、免疫組織化学においてPDA組織のがん細胞で検出された(図1左図)。興味深いことに、内皮細胞マーカーCD34が陽性である間質の血管内皮細胞におけるLAT1の有意な発現を認めた。対照的に、正常な膵臓組織の内皮細胞は、LAT1染色に対してほとんど陰性であった。この観察は、組織マイクロアレイ上の多数のサンプルで確認された(図1右図)。正常な膵臓組織のごく一部(25.0%)のみが内皮細胞で陽性のLAT1染色を示した。分析された20の組織スポットのうち、4つは低から中程度を示し、1つは強い染色を示した。対照的に、PDA組織の大部分(81.4%)は、内皮細胞でLAT1発現を示した。分析された75の組織スポットのうち、26は低から中程度を示し、35は強い染色を示した。
図1左図:膵管腺がん(PDA)および正常膵臓におけるLAT1およびCD34の免疫組織化学。CU1372-35-35006(PDA)およびCU2009/02 X-40(通常の膵臓)の代表的な画像が示されている。矢印と矢頭は、それぞれ腫瘍細胞と内皮細胞を示す。黒い四角;拡大画像である。
図1右図:PDAおよび正常な膵臓を含む組織マイクロアレイにおける内皮LAT1発現。組織スポットは、内皮細胞のLAT1染色強度に応じて、高、低/中、および陰性に分類される。表示されているデータは、各グループのパーセンテージである。
図1右図:PDAおよび正常な膵臓を含む組織マイクロアレイにおける内皮LAT1発現。組織スポットは、内皮細胞のLAT1染色強度に応じて、高、低/中、および陰性に分類される。表示されているデータは、各グループのパーセンテージである。
腫瘍関連血管におけるLAT1の発現は、無胸腺ヌードマウスのヒトがん細胞異種移植腫瘍モデルでさらに調べた。ヒトLAT1を高発現しているがん細胞に囲まれた血管でマウスLAT1を検出するために、マウスLAT1特異的抗体を生成した。得られた抗体を用いて、膵臓がんMIA PaCa-2細胞腫瘍のCD34陽性内皮細胞でマウスLAT1が検出された。対照的に、LAT1の発現が以前に報告されている脳毛細血管を除く正常組織の血管では、明確なLAT1染色は検出されなかった[26、27]。したがって、腫瘍関連血管の内皮細胞におけるLAT1の発現は、異なる組織起源の異種移植腫瘍モデルで再現された。
実施例2:JPH203投与による腫瘍内造成血管の抑制
内皮LAT1の遺伝的および薬理学的阻害は血管新生および腫瘍増殖を抑制する
LAT1阻害剤JPH203が異種移植腫瘍の増殖を抑制することが証明されている[16、28-31]。本実施例ではJPH203の静脈内投与により、MIA PaCa-2異種移植腫瘍の増殖が劇的に抑制されることを再確認した上で、JPH203の腫瘍血管形成への作用を測定した(図2左)。腫瘍内血管密度はJPH203処理腫瘍ではプラセボ処理対照の約45%に減少し(図2右)、これにより、腫瘍血管新生の減少がJPH203の抗腫瘍効果に寄与していると推測できる。
内皮LAT1の遺伝的および薬理学的阻害は血管新生および腫瘍増殖を抑制する
LAT1阻害剤JPH203が異種移植腫瘍の増殖を抑制することが証明されている[16、28-31]。本実施例ではJPH203の静脈内投与により、MIA PaCa-2異種移植腫瘍の増殖が劇的に抑制されることを再確認した上で、JPH203の腫瘍血管形成への作用を測定した(図2左)。腫瘍内血管密度はJPH203処理腫瘍ではプラセボ処理対照の約45%に減少し(図2右)、これにより、腫瘍血管新生の減少がJPH203の抗腫瘍効果に寄与していると推測できる。
実施例3:血管内皮特異的LAT1ノックアウトマウスにおける腫瘍増大に及ぼすJPH203の抑制効果
次に、内皮LAT1の枯渇が腫瘍の血管新生を抑制し、その結果、腫瘍の成長を抑制するかどうかを調べた。B16-F10マウスメラノーマ細胞の同所性同系腫瘍モデルでは、LAT1の発現が腫瘍関連内皮細胞と腫瘍細胞で確認された(図3上中央図:n=4)。腫瘍がLat1fl/fl/Tek-Creマウスで作成された場合、成長は対照マウスと比較して大幅に抑制された(図3)。腫瘍内血管密度の分析により、Lat1fl/fl/Tek-Creマウスでは腫瘍の血管面積が対照マウスの約50%に減少したことが明らかになった(図3上中央図)。これらの結果は、腫瘍関連内皮細胞のLAT1が腫瘍血管新生に重要な役割を果たしていること、およびその機能または発現の抑制が抗腫瘍効果の発揮に寄与していることを示している。図3下左図は、静脈内注射されたFITC-デキストランによって視覚化された腫瘍内血管を示す。図3下右図は、腫瘍切片の血管面積を定量化したものである。
次に、内皮LAT1の枯渇が腫瘍の血管新生を抑制し、その結果、腫瘍の成長を抑制するかどうかを調べた。B16-F10マウスメラノーマ細胞の同所性同系腫瘍モデルでは、LAT1の発現が腫瘍関連内皮細胞と腫瘍細胞で確認された(図3上中央図:n=4)。腫瘍がLat1fl/fl/Tek-Creマウスで作成された場合、成長は対照マウスと比較して大幅に抑制された(図3)。腫瘍内血管密度の分析により、Lat1fl/fl/Tek-Creマウスでは腫瘍の血管面積が対照マウスの約50%に減少したことが明らかになった(図3上中央図)。これらの結果は、腫瘍関連内皮細胞のLAT1が腫瘍血管新生に重要な役割を果たしていること、およびその機能または発現の抑制が抗腫瘍効果の発揮に寄与していることを示している。図3下左図は、静脈内注射されたFITC-デキストランによって視覚化された腫瘍内血管を示す。図3下右図は、腫瘍切片の血管面積を定量化したものである。
実施例4:血管内皮細胞の増殖におけるLAT1遺伝子欠失、LAT1阻害の効果
HUVECにおけるLAT1タンパク質の発現は、ウエスタンブロッティングによって確認された(図4-1左上)。LAT1タンパク質量をコントロールの15~25%に減少させたsiRNAによるLAT1のノックダウン(KD)は、HUVECの増殖を抑制した(図4-1右上)。同様に、JPH203またはBCHによるLAT1阻害は、濃度依存的にHUVECの増殖を抑制した(図4-1下図)。これらの結果は、LAT1が内皮細胞の増殖に重要な役割を果たすことを示している。
HUVECにおけるLAT1タンパク質の発現は、ウエスタンブロッティングによって確認された(図4-1左上)。LAT1タンパク質量をコントロールの15~25%に減少させたsiRNAによるLAT1のノックダウン(KD)は、HUVECの増殖を抑制した(図4-1右上)。同様に、JPH203またはBCHによるLAT1阻害は、濃度依存的にHUVECの増殖を抑制した(図4-1下図)。これらの結果は、LAT1が内皮細胞の増殖に重要な役割を果たすことを示している。
アミノ酸はセリン/スレオニンキナーゼ複合体mTORC1(Mechanistic Target of rapamycin Complex 1)を活性化する必須のシグナル伝達分子であり、栄養素と増殖因子のシグナル伝達を統合して細胞の成長と増殖をサポートする[32]。mTORC1の最もよく特徴付けられた下流エフェクターには、翻訳開始のレギュレーターであるリボソームタンパク質S6キナーゼp70S6Kが含まれる。アミノ酸欠乏下での非アミノアシル化tRNAの蓄積は、一般的なアミノ酸制御(GAAC)経路として知られている他のシグナル伝達経路も活性化する[33、34]。非アミノアシル化tRNAは、GAAC経路のGcn2キナーゼを活性化し、eIF2αのリン酸化を誘導し、イニシエーターメチオニルtRNAのリボソームへの動員を阻害することにより、翻訳のグローバルなダウンレギュレーションを引き起こす。図4-2に示すように、HUVECにおけるJPH203によるLAT1阻害およびLAT1 KDは、p70S6Kおよびその基質リボソームタンパク質S6のリン酸化を著しく低下させた。eIF2αのリン酸化も増加し、アミノ酸欠乏によるGAAC経路の活性化を示している。まとめると、これらの結果は、HUVECにおけるLAT1を介したアミノ酸輸送が、翻訳開始を活性化するための不可欠な前提条件であることを示している。内皮LAT1の阻害は、mTORC1活性を抑制し、GAAC経路を活性化することにより、翻訳をグローバルにダウンレギュレートできる。
実施例5:がん細胞から分泌される血管内皮増殖因子VEGF-Aによる細胞内シグナル伝達経路の活性化に対するJPH203の抑制効果
図5左図に示すように、VEGF-Aによる飢餓状態のHUVECの刺激は、20分でVEGFR2リン酸化の一時的な増加をもたらした。リン酸化は、より長いインキュベーション時間(>1時間)で減少したが、刺激前よりも高いレベルで維持された。Erk1/2、Akt、p38、Src、FAK、p70S6K、およびS6リボソームタンパク質を含むVEGF-A/VEGFR2の主要な下流因子も、比較的遅延した応答を示すPLCγを除いて、リン酸化において同様の一時的な時間経過を示した。JPH203は、p70S6KとS6を除いて、VEGFR2のリン酸化と下流因子に影響を与えなかった。p70S6KとS6のリン酸化は、刺激後20分でJPH203によって大幅に抑制され、mTORC1のVEGF-A誘発活性化がLAT1に大きく依存していることが明らかになった。特に注目すべきは、mTORC1の上流に位置するThr308でのAktのリン酸化[32]が、JPH203の影響を殆ど受けなかったことである。したがって、mTORC1活性の低下は、RTK-PI3K-Akt軸とは無関係にmTORC1をリソソーム表面に動員し、キナーゼ活性化因子Rhebとの相互作用を促進するRagulator-Rag複合体によって媒介されるアミノ酸シグナル伝達の減少が原因である可能性が最も高い[32]。
図5左図に示すように、VEGF-Aによる飢餓状態のHUVECの刺激は、20分でVEGFR2リン酸化の一時的な増加をもたらした。リン酸化は、より長いインキュベーション時間(>1時間)で減少したが、刺激前よりも高いレベルで維持された。Erk1/2、Akt、p38、Src、FAK、p70S6K、およびS6リボソームタンパク質を含むVEGF-A/VEGFR2の主要な下流因子も、比較的遅延した応答を示すPLCγを除いて、リン酸化において同様の一時的な時間経過を示した。JPH203は、p70S6KとS6を除いて、VEGFR2のリン酸化と下流因子に影響を与えなかった。p70S6KとS6のリン酸化は、刺激後20分でJPH203によって大幅に抑制され、mTORC1のVEGF-A誘発活性化がLAT1に大きく依存していることが明らかになった。特に注目すべきは、mTORC1の上流に位置するThr308でのAktのリン酸化[32]が、JPH203の影響を殆ど受けなかったことである。したがって、mTORC1活性の低下は、RTK-PI3K-Akt軸とは無関係にmTORC1をリソソーム表面に動員し、キナーゼ活性化因子Rhebとの相互作用を促進するRagulator-Rag複合体によって媒介されるアミノ酸シグナル伝達の減少が原因である可能性が最も高い[32]。
図5の左図:血清および成長因子の飢餓状態におかれたHUVECは、JPH203(50μM)の存在下または非存在下でVEGF-A(10ng/mL)で刺激された。
血管新生において主要な役割を果たすVEGF-A/VEGFR2の下流では、Erk1/2、Akt、p38、Src、FAK、p70S6K、PLCγなどの主要なエフェクター分子が、血管内皮細胞の増殖/生存/透過性/遊走などを制御している。既に上に述べたようにJPH203により抑制されたmTORC1は、Aktの下流でこれらの細胞機能の制御に関与している。
考察
この研究では、腫瘍血管内皮細胞で発現するアミノ酸トランスポーターLAT1が腫瘍血管新生の新しい重要な分子であることを明らかにした。ラット膀胱がんモデル[35]とヒト神経膠腫組織[36]に関するこれまでの限られた研究を拡張し、腫瘍血管内皮細胞の一般的な特徴としてLAT1発現上昇を確立した。内皮LAT1と腫瘍血管新生の機能的関連性は、LAT1の遺伝子ノックアウトおよび薬理学的阻害により、in vivoモデルで実証された(図2及び3)。翻訳のグローバルなダウンレギュレーションによってサポートされる強力な抗増殖効果は、内皮LAT1阻害により、タンパク質合成のビルディングブロックとしてのアミノ酸の供給をブロックするだけでなく、翻訳の開始を制御するアミノ酸シグナル伝達を妨害することによっても達成できる。このような翻訳に対する強力な阻害効果はLAT1阻害剤に特有であり、LAT1阻害剤の作用機序と既存の抗血管新生剤の作用機序を明確に区別するものである。
この研究では、腫瘍血管内皮細胞で発現するアミノ酸トランスポーターLAT1が腫瘍血管新生の新しい重要な分子であることを明らかにした。ラット膀胱がんモデル[35]とヒト神経膠腫組織[36]に関するこれまでの限られた研究を拡張し、腫瘍血管内皮細胞の一般的な特徴としてLAT1発現上昇を確立した。内皮LAT1と腫瘍血管新生の機能的関連性は、LAT1の遺伝子ノックアウトおよび薬理学的阻害により、in vivoモデルで実証された(図2及び3)。翻訳のグローバルなダウンレギュレーションによってサポートされる強力な抗増殖効果は、内皮LAT1阻害により、タンパク質合成のビルディングブロックとしてのアミノ酸の供給をブロックするだけでなく、翻訳の開始を制御するアミノ酸シグナル伝達を妨害することによっても達成できる。このような翻訳に対する強力な阻害効果はLAT1阻害剤に特有であり、LAT1阻害剤の作用機序と既存の抗血管新生剤の作用機序を明確に区別するものである。
抗血管新生療法に対する内因性および獲得性の耐性は、患者の利益を制限することがよくある[1、2]。内皮細胞に存在する複数の冗長で代償性の血管新生促進シグナル伝達経路は、耐性において重要な役割を果たすと考えられている。耐性を克服するための有望な戦略は、複数のシグナル伝達経路を同時に標的とすることである。実際に、マウス腫瘍モデルにおけるFGFR阻害剤とベバシズマブの組み合わせは、腫瘍増殖をほぼ完全に抑制した[37]。膵島マウス腫瘍では、VEGFR2阻害剤に対する耐性は、可溶性デコイFGF受容体によって抑制された[38]。本研究では、in vivoでの血管新生と同様に、in vitroでの遊走や管腔形成などの血管新生に関連する細胞プロセスで重要な役割を果たすmTORC1のVEGF-A依存性活性化にLAT1が不可欠であることを実証した[39-42]。この結果は、mTORC1の活性化におけるLAT1の役割が、RTK-PI3K-Akt軸とは独立したRagulator-Rag複合体によって媒介されることを示唆している。LAT1を介したアミノ酸シグナル伝達は、「ゲート制御」シグナルとして振る舞い、血管新生促進性VEGF-Aシグナル伝達がmTORC1を介してその下流に流れることを可能にする(図6)。VEGFRシグナル伝達と同様に、FGFRおよびTIE-2を含む他の複数の血管新生促進RTKは、mTORC1を活性化するPI3K-Akt軸を共有する[43]。したがって、JPH203によるLAT1の治療的阻害は、VEGF-A/VEGFR2シグナル伝達だけでなく、mTORC1における他の血管新生促進シグナル伝達経路にも同時に干渉する可能性があり、血管新生促進成長因子シグナリングの代償機能から生じる耐性を回避する可能性を提供する。
LAT1は腫瘍細胞の成長と増殖をサポートするために非常に広くアップレギュレートされる「腫瘍細胞型トランスポーター」としてよく知られているが、ここでの実施例は、腫瘍細胞と間質内皮の両方における腫瘍進行におけるLAT1の二重機能への新しい洞察を示している。この点で、抗腫瘍剤としてのLAT1阻害剤JPH203のユニークな二重作用機序、すなわち、腫瘍細胞におけるLAT1の阻害を介した腫瘍細胞への確立された直接的な抗増殖効果および内皮LAT1の阻害による血管新生効果が強調される。魅力的な推測は、他の抗血管新生剤と組み合わせた場合、LAT1阻害剤の投与により、腫瘍細胞におけるタンパク質合成のダウンレギュレーションを通じて、腫瘍細胞からの血管新生促進因子の代償性パラクリン分泌が抑制されることである。したがって、LAT1阻害剤と抗血管新生剤の併用療法は、耐性を発現するリスクが低く、有益な相乗的な抗腫瘍効果を示す可能性がある。
いくつかの証拠により、腫瘍血管内皮細胞は、特徴的なタンパク質の発現において正常組織の血管内皮細胞とは異なることが示されている[44-46]。ここでの実施例は、LAT1発現の増加もこのような腫瘍内皮特異的特性の一部であることを示している。腫瘍組織だけでなく、in vitro HUVEC培養や、VEGF-AおよびFGF-2が培地に補充されたex/in vivo血管新生アッセイにおける内皮細胞でも、内皮LAT1発現を検出した。これらの血管新生促進因子は、HUVECにおけるLAT1の発現を誘導した。LAT1が発がん性c-Mycの直接的な標的遺伝子であることが以前に報告されている[47、48]。個体発生では、内皮細胞におけるc-Mycの発現はVEGFR2[49]とFGFR[50]によって調節されている。詳細を解明するためにさらなる研究が待たれるが、VEGF-AおよびFGF-2が豊富な腫瘍微小環境は、腫瘍血管内皮におけるLAT1の発現上昇を部分的に説明している可能性がある。LAT1はがん胎児タンパク質の一つで、HUVEC(ヒト臍帯静脈内皮細胞)はLAT1遺伝子/タンパクが残存している健常細胞と考えられる。細胞機能の調節維持におけるシグナル伝達系はがん細胞でのシグナル伝達と類似した性質があることががん細胞の研究に応用される所以である。
実施例6
以上の細胞やモデル動物からの知見が臨床でも認められるので、その結果を実施例として示す。表2に標準的化学療法が不応あるいは不耐となった種々の進行性固形がん患者を対象としたJPH203の第1相臨床試験[51]で認められた新病変(初発のがん以外の臓器への転移病変)をまとめた。上述したように、LAT1の阻害剤のJPH203はNAT2で代謝されてN-アセチルJPH203という代謝物になるとLAT1の阻害活性が低下して抗がん効果が減弱される。表2には第I相試験に組み入れられた全16例を、NAT2での代謝が早いRapidタイプ(8症例)とNon-rapidタイプ(8症例)に分けて、新病変の発症症例数と新病変発症部位に分けて記載した。NAT2のRapidタイプでは8例中7例に新病変を認め、Non-rapidタイプでは8例中4例に新病変を認めた。特に、血管網で占められている肺への新病変はRapidでは7例中5例、Non-rapidでは4例中1例であった。腫瘍血管新生へのJPH203の関連性を明らかにする本明細書の実施例として重要である。即ち、進行性固形がん患者の肺での新病変発現は、Rapidの5例に比してNon-rapidでは1例と明らかな差異が認められた。
・JPH203の作用(NAT2のNon-rapid>Rapid顕著な例)としては転移抑制作用がある(7vs4)
・肺転移はJPH203により5倍強く抑制される(5vs1)
・JPH203の腫瘍血管新生抑制作用の関与が大きい。
以上の細胞やモデル動物からの知見が臨床でも認められるので、その結果を実施例として示す。表2に標準的化学療法が不応あるいは不耐となった種々の進行性固形がん患者を対象としたJPH203の第1相臨床試験[51]で認められた新病変(初発のがん以外の臓器への転移病変)をまとめた。上述したように、LAT1の阻害剤のJPH203はNAT2で代謝されてN-アセチルJPH203という代謝物になるとLAT1の阻害活性が低下して抗がん効果が減弱される。表2には第I相試験に組み入れられた全16例を、NAT2での代謝が早いRapidタイプ(8症例)とNon-rapidタイプ(8症例)に分けて、新病変の発症症例数と新病変発症部位に分けて記載した。NAT2のRapidタイプでは8例中7例に新病変を認め、Non-rapidタイプでは8例中4例に新病変を認めた。特に、血管網で占められている肺への新病変はRapidでは7例中5例、Non-rapidでは4例中1例であった。腫瘍血管新生へのJPH203の関連性を明らかにする本明細書の実施例として重要である。即ち、進行性固形がん患者の肺での新病変発現は、Rapidの5例に比してNon-rapidでは1例と明らかな差異が認められた。
・肺転移はJPH203により5倍強く抑制される(5vs1)
・JPH203の腫瘍血管新生抑制作用の関与が大きい。
肺はその大半が血管網で形成され、血流の豊富な臓器である。全身で発症したがん種の終末期には多くのがん細胞が血行性に肺に集積し新病変(転移巣)を形成する。国際的な治験の評価にはRECISTの基準が採択されて、新病変が認められると治験はPD(進行がん)と判断されて(初発のがんの大きさの増大変化には切り離して)中止される。表2の新病変無しの計5例が治験続行となった。表2のRapidタイプの新病変無の1例は腫瘍の増大が明らかで、中断された。一方、Non-rapidタイプの新病変無の全4例は治験が続行された。
RapidタイプではJPH203の奏効無(無効)と判定されたが、Non-rapidタイプでは肺の新病変を示した1例以外はJPH203の奏功性の評価が行われた。換言すれば、JPH203の奏功性を予測できる一つの可能性は肺転移の抑制である可能性が高いと考えられた。以上より、JPH203は腫瘍血管新生の阻害効果は一つの抗がん作用であると結論された。
要約すると、アミノ酸トランスポーターLAT1が腫瘍内皮で発現上昇し、腫瘍血管新生に基本的な役割を果たすことを示している。LAT1を介したアミノ酸シグナル伝達と成長因子依存性血管新生シグナル伝達の間のクロストークが明らかになり、栄養素感知ハブキナーゼmTORC1が血管新生を制御している。LAT1標的療法は、特に現在の抗血管新生療法によるがん治療を強化するための理想的なオプションを提供する可能性がある。図7には、腫瘍組織に及ぼすJPH203の薬理作用の要約を示す。
本発明により、以下の効果が期待できる。
・腫瘍に好都合な腫瘍内環境(正常血管の異常化と低酸素の維持)をJPH203により破壊し、正常血管の育成を図る。
・血流に富んだ正常組織内へのがん細胞の転移とがん細胞の増殖を阻止できる。
・がんを一定の限局した状態に閉じ込め、局所的な抗がん剤の送達を可能にする抗がん効果を促進させる。
・腫瘍に好都合な腫瘍内環境(正常血管の異常化と低酸素の維持)をJPH203により破壊し、正常血管の育成を図る。
・血流に富んだ正常組織内へのがん細胞の転移とがん細胞の増殖を阻止できる。
・がんを一定の限局した状態に閉じ込め、局所的な抗がん剤の送達を可能にする抗がん効果を促進させる。
参考例:抗PD-1抗体又は抗PD-L1抗体とJPH203等との組合せ
抗PD-1抗体又は抗PD-L1抗体とJPH203等との組合せが、これら薬剤をそれぞれ単独で投与する場合と比べて顕著な抗がん効果を奏することを示す実験データを図8に示す。この図は、腫瘍を有するマウス(個体数:4)に、JPH203を一日に一回12.5mg/kg投与した場合、抗PD-1抗体を一週間に一回6.25mg/kg投与した場合、及びこれらを組み合わせた場合(すなわち、JPH203を一日に一回12.5mg/kg投与し、かつ、抗PD-1抗体を一週間に一回6.25mg/kg投与した場合)の腫瘍体積の変化を示す。図に示されるように、JPH203の投与と抗PD-1抗体の投与とを組み合わせた場合、それぞれを単独で投与した場合と比べて、腫瘍体積が顕著に減少する。
抗PD-1抗体又は抗PD-L1抗体とJPH203等との組合せが、これら薬剤をそれぞれ単独で投与する場合と比べて顕著な抗がん効果を奏することを示す実験データを図8に示す。この図は、腫瘍を有するマウス(個体数:4)に、JPH203を一日に一回12.5mg/kg投与した場合、抗PD-1抗体を一週間に一回6.25mg/kg投与した場合、及びこれらを組み合わせた場合(すなわち、JPH203を一日に一回12.5mg/kg投与し、かつ、抗PD-1抗体を一週間に一回6.25mg/kg投与した場合)の腫瘍体積の変化を示す。図に示されるように、JPH203の投与と抗PD-1抗体の投与とを組み合わせた場合、それぞれを単独で投与した場合と比べて、腫瘍体積が顕著に減少する。
本発明のがんの治療剤により、副作用がなく効果の高い、特に、正常細胞への影響が少ない治療剤を提供できる。
参考文献
1. Lugano R, Ramachandran M, Dimberg A. Tumor angiogenesis: causes, consequences,
756 challenges and opportunities. Cellular and Molecular Life Sciences. 2020; 77: 1745-70.
2. van Beijnum JR, Nowak-Sliwinska P, Huijbers EJM, Thijssen VL, Griffioen AW. The great escape; the hallmarks of resistance to antiangiogenic therapy. Pharmacological Reviews. 2015; 67: 441-61.
3. Kanai Y, Segawa H, Miyamoto KI, Uchino H, Takeda E, Endou H. Expression cloning and characterization of a transporter for large neutral amino acids activated by the heavy chain of 4F2 antigen (CD98). J Biol Chem. 1998; 273: 23629-32.
4. Yanagida O, Kanai Y, Chairoungdua A, Kim DK, Segawa H, Nii T, et al. Human L-type amino acid transporter 1 (LAT1): Characterization of function and expression in tumor cell lines. Biochim Biophys Acta - Biomembr. 2001; 1514: 291-302.
5. Fuchs BC, Bode BP. Amino acid transporters ASCT2 and LAT1 in cancer: Partners in crime? Seminars in Cancer Biology. 2005; 15: 254-66.
6. Wang Q, Holst J. L-type amino acid transport and cancer: Targeting the mTORC1 pathway to inhibit neoplasia. American Journal of Cancer Research. 2015; 5: 1281-94.
7. Hayashi K, Anzai N. Novel therapeutic approaches targeting L-type amino acid transporters for cancer treatment. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2017; 9: 21-9.
8. Furuya M, Horiguchi J, Nakajima H, Kanai Y, Oyama T. Correlation of L-type amino acid transporter 1 and CD98 expression with triple negative breast cancer prognosis. Cancer Sci. 2012; 103: 382-9.
9. El Ansari R, Craze ML, Miligy I, Diez-Rodriguez M, Nolan CC, Ellis IO, et al. The amino acid transporter SLC7A5 confers a poor prognosis in the highly proliferative breast cancer subtypes and is a key therapeutic target in luminal B tumours. Breast Cancer Res. 2018; 20:21.
10. Maimaiti M, Sakamoto S, Yamada Y, Sugiura M, Rii J, Takeuchi N, et al. Expression of L type amino acid transporter 1 as a molecular target for prognostic and therapeutic indicators in bladder carcinoma. Sci Rep. 2020; 10: 1292.
11. Kaira K, Oriuchi N, Imai H, Shimizu K, Yanagitani N, Sunaga N, et al. Prognostic
significance of L-type amino acid transporter 1 expression in resectable stage I-III nonsmall cell lung cancer. Br J Cancer. 2008; 98: 742-8.
12. Kaira K, Oriuchi N, Imai H, Shimizu K, Yanagitani N, Sunaga N, et al. Expression of L type amino acid transporter 1 (LAT1) in neuroendocrine tumors of the lung. Pathol Res Pract. 2008; 204: 553-61.
13. Kaira K, Sunose Y, Arakawa K, Ogawa T, Sunaga N, Shimizu K, et al. Prognostic significance of L-type amino-acid transporter 1 expression in surgically resected pancreatic cancer. Br J Cancer. 2012; 107: 632-8.
14. Yanagisawa N, Ichinoe M, Mikami T, Nakada N, Hana K, Koizumi W, et al. High expression of L-type amino acid transporter 1 (LAT1) predicts poor prognosis in pancreatic ductal adenocarcinomas. J Clin Pathol. 2012; 65: 1019-23.
15. Kaira K, Sunose Y, Ohshima Y, Ishioka NS, Arakawa K, Ogawa T, et al. Clinical significance of L-type amino acid transporter 1 expression as a prognostic marker and potential of new targeting therapy in biliary tract cancer. BMC Cancer. 2013; 13: 482.
16. Oda K, Hosoda N, Endo H, Saito K, Tsujihara K, Yamamura M, et al. L-Type amino acid transporter 1 inhibitors inhibit tumor cell growth. Cancer Sci. 2010; 101: 173-9.
17. Kongpracha P, Nagamori S, Wiriyasermkul 814 P, Tanaka Y, Kaneda K, Okuda S, et al. Structure-activity relationship of a novel series of inhibitors for cancer type transporter L-type amino acid transporter 1 (LAT1). J Pharmacol Sci. 2017; 133: 96-102.
18. Napolitano L, Scalise M, Koyioni M, Koutentis P, Catto M, Eberini I, et al. Potent inhibitors of human LAT1 (SLC7A5) transporter based on dithiazole and dithiazine compounds for development of anticancer drugs. Biochem Pharmacol. 2017; 143: 39-52.
19. Premsrirut PK, Dow LE, Kim SY, Camiolo M, Malone CD, Miething C, et al. A rapid and scalable system for studying gene function in mice using conditional RNA interference. Cell. 2011; 145: 145-58.
20. Perl AKT, Wert SE, Nagy A, Lobe CG, Whitsett JA. Early restriction of peripheral and proximal cell lineages during formation of the lung. Proc Natl Acad Sci U S A. 2002; 99: 10482-7.
21. Kisanuki YY, Hammer RE, Miyazaki J ichi, Williams SC, Richardson JA, Yanagisawa M. Tie2-Cre transgenic mice: A new model for endothelial cell-lineage analysis in vivo. Dev Biol. 2001; 230: 230-42.
22. De Lange WJ, Halabi CM, Beyer AM, Sigmund CD. Germ line activation of the Tie2 and SMMHC promoters causes noncell-specific deletion of floxed alleles. Physiol Genomics. 2008; 35: 1-4.
23. Ohgaki R, Ohmori T, Hara S, Nakagomi S, Kanai-Azuma M, Kaneda-Nakashima K, et al. Essential roles of L-type amino acid transporter 1 in syncytiotrophoblast development by presenting fusogenic 4F2hc. Mol Cell Biol. 2017; 37: e00427-16.
24. Nagamori S, Wiriyasermkul P, Okuda S, Kojima N, Hari Y, Kiyonaka S, et al. Structure activity relations of leucine derivatives reveal critical moieties for cellular uptake and activation of mTORC1-mediated signaling. Amino Acids. 2016; 48: 1045-58.
25. Ohgaki R, Wei L, Yamada K, Hara T, Kuriyama C, Okuda S, et al. Interaction of the sodium/glucose cotransporter (SGLT) 2 inhibitor canagliflozin with SGLT1 and SGLT2: Inhibition kinetics, sidedness of action, and transporter-associated incorporation accounting for its pharmacodynamic and pharmacokinetic featuress. J Pharmacol Exp Ther. 2016; 358: 94-102.
26. Kageyama T, Nakamura M, Matsuo A, Yamasaki Y, Takakura Y, Hashida M, et al. The 4F2hc/LAT1 complex transports L-DOPA across the blood-brain barrier. Brain Res.
873 2000; 879: 115-21.
27. Tarlungeanu DC, Deliu E, Dotter CP, Kara M, Janiesch PC 874 , Scalise M, et al. Impaired amino acid transport at the blood brain barrier is a cause of autism spectrum disorder. Cell. 2016; 167: 1481-1494.e18.
28. Saito Y, Li L, Coyaud E, Luna A, Sander C, Raught B, et al. LLGL2 rescues nutrient stress by promoting leucine uptake in ER+ breast cancer. Nature. 2019; 569: 275-9.
29. Hafliger P, Graff J, Rubin M, Stooss A, Dettmer MS, Altmann KH, et al. The LAT1 inhibitor JPH203 reduces growth of thyroid carcinoma in a fully immunocompetent mouse model. J Exp Clin Cancer Res. 2018; 37:234.
30. Enomoto K, Sato F, Tamagawa S, Gunduz M, Onoda N, Uchino S, et al. A novel the rapeutic approach for anaplastic thyroid cancer through inhibition of LAT1. Sci Rep. 2019; 9: 14616.
31. Yothaisong S, Dokduang H, Anzai N, Hayashi K, 828 Namwat N, Yongvanit P, et al. Inhibition of L-type amino acid transporter 1 activity as a new therapeutic target for cholangiocarcinoma treatment. Tumor Biol. 2017; 39: 1010428317694545.
32. Liu GY, Sabatini DM. mTOR at the nexus of nutrition, growth, ageing and disease. Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2020; 21: 183-203.
33. Baird TD, Wek RC. Eukaryotic initiation factor 2 phosphorylation and translational control in metabolism. Adv Nutr. 2012; 3: 307-21.
34. Kilberg MS, Shan J, Su N. ATF4-dependent transcription mediates signaling of amino acid limitation. Trends in Endocrinology and Metabolism. 2009; 20: 436-43.
35. Kume E, Mutou T, Kansaku N, Takahashi H, Wempe MF, Ikegami M, et al. Ultrastructural immunohistochemical study of L-type amino acid transporter 1-4F2 heavy chain in tumor microvasculatures of n-butyl-n-(4-hydroxybutyl) nitrosamine (BBN) induced rat bladder carcinoma. Microscopy. 2017; 66: 198-203.
36. Haining Z, Kawai N, Miyake K, Okada M, Okubo S, Zhang X, et al. Relation of LAT1/4F2hc expression with pathological grade, proliferation and angiogenesis in human gliomas. BMC Clin Pathol. 2012;12:4.
37. Gyanchandani R, Ortega Alves M V., Myers JN, Kim S. A proangiogenic signature is revealed in FGF-mediated bevacizumab-resistant head and neck squamous cell carcinoma. Mol Cancer Res. 2013.
38. Casanovas O, Hicklin DJ, Bergers G, Hanahan D. Drug resistance by evasion of
antiangiogenic targeting of VEGF signaling in late-stage pancreatic islet tumors. Cancer Cell. 2005; 8: 299-309.
39. Del Bufalo D, Ciuffreda L, Trisciuoglio D, Desideri M, Cognetti F, Zupi G, et al. Antiangiogenic potential of the mammalian target of rapamycin inhibitor temsirolimus. Cancer Res. 2006; 66: 5549-54.
40. Guba M, Von Breitenbuch P, Steinbauer M, Koehl G, Flegel S, Hornung M, et al.
Rapamycin inhibits primary and metastatic tumor growth by antiangiogenesis: Involvement of vascular endothelial growth factor. Nat Med. 2002; 8: 128-35.
41. Sun S, Chen S, Liu F, Wu H, McHugh J, Bergin IL, et al. Constitutive activation of mTORC1 in endothelial cells leads to the development and progression of lymphangiosarcoma through VEGF autocrine signaling. Cancer Cell. 2015; 28: 758-72.
42. Ding Y, Shan L, Nai W, Lin X, Zhou L, Dong X, et al. DEPTOR deficiency-mediated mTORc1 hyperactivation in vascular endothelial cells promotes angiogenesis. Cell Physiol Biochem. 2018; 46: 520-31.
43. Simons M, Gordon E, Claesson-Welsh L. Mechanisms and regulation of endothelial VEGF receptor signalling. Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2016; 17: 611-25.
44. Seaman S, Stevens J, Yang MY, Logsdon D, Graff-Cherry C, St. Croix B. Genes that distinguish physiological and pathological angiogenesis. Cancer Cell. 2007; 11: 539-54.
45. Fonsato V, Buttiglieri S, Deregibus MC, Puntorieri V, Bussolati B, Camussi G. Expression of Pax2 in human renal tumor-derived endothelial cells sustains apoptosis resistance and angiogenesis. Am J Pathol. 2006;168:706-13.
46. Akiyama K, Ohga N, Hida Y, Kawamoto T, Sadamoto Y, Ishikawa S, et al. Tumor endothelial cells acquire drug resistance by MDR1 up-regulation via VEGF signaling in tumor microenvironment. Am J Pathol. 2012;180:1283-93.
47. Hayashi K, Jutabha P, Endou H, Anzai N. c-Myc is crucial for the expression of LAT1 in MIA Paca-2 human pancreatic cancer cells. Oncol Rep. 2012;28:862-6.
48. Yue M, Jiang J, Gao P, Liu H, Qing G. Oncogenic MYC activates a feedforward regulatory loop promoting essential amino acid metabolism and tumorigenesis. Cell Rep. 2017;21:3819-32.
49. Testini C, Smith RO, Jin Y, Martinsson P, Sun Y, Hedlund M, et al. Myc-dependent endothelial proliferation is controlled by phosphotyrosine 1212 in VEGF receptor-2. EMBO Rep. 2019;20:e47845.
50. Yu P, Wilhelm K, Dubrac A, Tung JK, Alves TC, Fang JS, et al. FGF-dependent metabolic control of vascular development. Nature. 2017;545:224-41.
51. Okano N, Naruge D, Kawai K, Kobayashi T, Nagashima F, Endou H, et al. First-in-human phase I study of JPH203, an L-type amino acid transporter 1 inhibitor, in patients with advanced solid tumors. Invest New Drugs. 2020. https://doi.org/10.1007/s10637-020-00924-3
1. Lugano R, Ramachandran M, Dimberg A. Tumor angiogenesis: causes, consequences,
756 challenges and opportunities. Cellular and Molecular Life Sciences. 2020; 77: 1745-70.
2. van Beijnum JR, Nowak-Sliwinska P, Huijbers EJM, Thijssen VL, Griffioen AW. The great escape; the hallmarks of resistance to antiangiogenic therapy. Pharmacological Reviews. 2015; 67: 441-61.
3. Kanai Y, Segawa H, Miyamoto KI, Uchino H, Takeda E, Endou H. Expression cloning and characterization of a transporter for large neutral amino acids activated by the heavy chain of 4F2 antigen (CD98). J Biol Chem. 1998; 273: 23629-32.
4. Yanagida O, Kanai Y, Chairoungdua A, Kim DK, Segawa H, Nii T, et al. Human L-type amino acid transporter 1 (LAT1): Characterization of function and expression in tumor cell lines. Biochim Biophys Acta - Biomembr. 2001; 1514: 291-302.
5. Fuchs BC, Bode BP. Amino acid transporters ASCT2 and LAT1 in cancer: Partners in crime? Seminars in Cancer Biology. 2005; 15: 254-66.
6. Wang Q, Holst J. L-type amino acid transport and cancer: Targeting the mTORC1 pathway to inhibit neoplasia. American Journal of Cancer Research. 2015; 5: 1281-94.
7. Hayashi K, Anzai N. Novel therapeutic approaches targeting L-type amino acid transporters for cancer treatment. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2017; 9: 21-9.
8. Furuya M, Horiguchi J, Nakajima H, Kanai Y, Oyama T. Correlation of L-type amino acid transporter 1 and CD98 expression with triple negative breast cancer prognosis. Cancer Sci. 2012; 103: 382-9.
9. El Ansari R, Craze ML, Miligy I, Diez-Rodriguez M, Nolan CC, Ellis IO, et al. The amino acid transporter SLC7A5 confers a poor prognosis in the highly proliferative breast cancer subtypes and is a key therapeutic target in luminal B tumours. Breast Cancer Res. 2018; 20:21.
10. Maimaiti M, Sakamoto S, Yamada Y, Sugiura M, Rii J, Takeuchi N, et al. Expression of L type amino acid transporter 1 as a molecular target for prognostic and therapeutic indicators in bladder carcinoma. Sci Rep. 2020; 10: 1292.
11. Kaira K, Oriuchi N, Imai H, Shimizu K, Yanagitani N, Sunaga N, et al. Prognostic
significance of L-type amino acid transporter 1 expression in resectable stage I-III nonsmall cell lung cancer. Br J Cancer. 2008; 98: 742-8.
12. Kaira K, Oriuchi N, Imai H, Shimizu K, Yanagitani N, Sunaga N, et al. Expression of L type amino acid transporter 1 (LAT1) in neuroendocrine tumors of the lung. Pathol Res Pract. 2008; 204: 553-61.
13. Kaira K, Sunose Y, Arakawa K, Ogawa T, Sunaga N, Shimizu K, et al. Prognostic significance of L-type amino-acid transporter 1 expression in surgically resected pancreatic cancer. Br J Cancer. 2012; 107: 632-8.
14. Yanagisawa N, Ichinoe M, Mikami T, Nakada N, Hana K, Koizumi W, et al. High expression of L-type amino acid transporter 1 (LAT1) predicts poor prognosis in pancreatic ductal adenocarcinomas. J Clin Pathol. 2012; 65: 1019-23.
15. Kaira K, Sunose Y, Ohshima Y, Ishioka NS, Arakawa K, Ogawa T, et al. Clinical significance of L-type amino acid transporter 1 expression as a prognostic marker and potential of new targeting therapy in biliary tract cancer. BMC Cancer. 2013; 13: 482.
16. Oda K, Hosoda N, Endo H, Saito K, Tsujihara K, Yamamura M, et al. L-Type amino acid transporter 1 inhibitors inhibit tumor cell growth. Cancer Sci. 2010; 101: 173-9.
17. Kongpracha P, Nagamori S, Wiriyasermkul 814 P, Tanaka Y, Kaneda K, Okuda S, et al. Structure-activity relationship of a novel series of inhibitors for cancer type transporter L-type amino acid transporter 1 (LAT1). J Pharmacol Sci. 2017; 133: 96-102.
18. Napolitano L, Scalise M, Koyioni M, Koutentis P, Catto M, Eberini I, et al. Potent inhibitors of human LAT1 (SLC7A5) transporter based on dithiazole and dithiazine compounds for development of anticancer drugs. Biochem Pharmacol. 2017; 143: 39-52.
19. Premsrirut PK, Dow LE, Kim SY, Camiolo M, Malone CD, Miething C, et al. A rapid and scalable system for studying gene function in mice using conditional RNA interference. Cell. 2011; 145: 145-58.
20. Perl AKT, Wert SE, Nagy A, Lobe CG, Whitsett JA. Early restriction of peripheral and proximal cell lineages during formation of the lung. Proc Natl Acad Sci U S A. 2002; 99: 10482-7.
21. Kisanuki YY, Hammer RE, Miyazaki J ichi, Williams SC, Richardson JA, Yanagisawa M. Tie2-Cre transgenic mice: A new model for endothelial cell-lineage analysis in vivo. Dev Biol. 2001; 230: 230-42.
22. De Lange WJ, Halabi CM, Beyer AM, Sigmund CD. Germ line activation of the Tie2 and SMMHC promoters causes noncell-specific deletion of floxed alleles. Physiol Genomics. 2008; 35: 1-4.
23. Ohgaki R, Ohmori T, Hara S, Nakagomi S, Kanai-Azuma M, Kaneda-Nakashima K, et al. Essential roles of L-type amino acid transporter 1 in syncytiotrophoblast development by presenting fusogenic 4F2hc. Mol Cell Biol. 2017; 37: e00427-16.
24. Nagamori S, Wiriyasermkul P, Okuda S, Kojima N, Hari Y, Kiyonaka S, et al. Structure activity relations of leucine derivatives reveal critical moieties for cellular uptake and activation of mTORC1-mediated signaling. Amino Acids. 2016; 48: 1045-58.
25. Ohgaki R, Wei L, Yamada K, Hara T, Kuriyama C, Okuda S, et al. Interaction of the sodium/glucose cotransporter (SGLT) 2 inhibitor canagliflozin with SGLT1 and SGLT2: Inhibition kinetics, sidedness of action, and transporter-associated incorporation accounting for its pharmacodynamic and pharmacokinetic featuress. J Pharmacol Exp Ther. 2016; 358: 94-102.
26. Kageyama T, Nakamura M, Matsuo A, Yamasaki Y, Takakura Y, Hashida M, et al. The 4F2hc/LAT1 complex transports L-DOPA across the blood-brain barrier. Brain Res.
873 2000; 879: 115-21.
27. Tarlungeanu DC, Deliu E, Dotter CP, Kara M, Janiesch PC 874 , Scalise M, et al. Impaired amino acid transport at the blood brain barrier is a cause of autism spectrum disorder. Cell. 2016; 167: 1481-1494.e18.
28. Saito Y, Li L, Coyaud E, Luna A, Sander C, Raught B, et al. LLGL2 rescues nutrient stress by promoting leucine uptake in ER+ breast cancer. Nature. 2019; 569: 275-9.
29. Hafliger P, Graff J, Rubin M, Stooss A, Dettmer MS, Altmann KH, et al. The LAT1 inhibitor JPH203 reduces growth of thyroid carcinoma in a fully immunocompetent mouse model. J Exp Clin Cancer Res. 2018; 37:234.
30. Enomoto K, Sato F, Tamagawa S, Gunduz M, Onoda N, Uchino S, et al. A novel the rapeutic approach for anaplastic thyroid cancer through inhibition of LAT1. Sci Rep. 2019; 9: 14616.
31. Yothaisong S, Dokduang H, Anzai N, Hayashi K, 828 Namwat N, Yongvanit P, et al. Inhibition of L-type amino acid transporter 1 activity as a new therapeutic target for cholangiocarcinoma treatment. Tumor Biol. 2017; 39: 1010428317694545.
32. Liu GY, Sabatini DM. mTOR at the nexus of nutrition, growth, ageing and disease. Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2020; 21: 183-203.
33. Baird TD, Wek RC. Eukaryotic initiation factor 2 phosphorylation and translational control in metabolism. Adv Nutr. 2012; 3: 307-21.
34. Kilberg MS, Shan J, Su N. ATF4-dependent transcription mediates signaling of amino acid limitation. Trends in Endocrinology and Metabolism. 2009; 20: 436-43.
35. Kume E, Mutou T, Kansaku N, Takahashi H, Wempe MF, Ikegami M, et al. Ultrastructural immunohistochemical study of L-type amino acid transporter 1-4F2 heavy chain in tumor microvasculatures of n-butyl-n-(4-hydroxybutyl) nitrosamine (BBN) induced rat bladder carcinoma. Microscopy. 2017; 66: 198-203.
36. Haining Z, Kawai N, Miyake K, Okada M, Okubo S, Zhang X, et al. Relation of LAT1/4F2hc expression with pathological grade, proliferation and angiogenesis in human gliomas. BMC Clin Pathol. 2012;12:4.
37. Gyanchandani R, Ortega Alves M V., Myers JN, Kim S. A proangiogenic signature is revealed in FGF-mediated bevacizumab-resistant head and neck squamous cell carcinoma. Mol Cancer Res. 2013.
38. Casanovas O, Hicklin DJ, Bergers G, Hanahan D. Drug resistance by evasion of
antiangiogenic targeting of VEGF signaling in late-stage pancreatic islet tumors. Cancer Cell. 2005; 8: 299-309.
39. Del Bufalo D, Ciuffreda L, Trisciuoglio D, Desideri M, Cognetti F, Zupi G, et al. Antiangiogenic potential of the mammalian target of rapamycin inhibitor temsirolimus. Cancer Res. 2006; 66: 5549-54.
40. Guba M, Von Breitenbuch P, Steinbauer M, Koehl G, Flegel S, Hornung M, et al.
Rapamycin inhibits primary and metastatic tumor growth by antiangiogenesis: Involvement of vascular endothelial growth factor. Nat Med. 2002; 8: 128-35.
41. Sun S, Chen S, Liu F, Wu H, McHugh J, Bergin IL, et al. Constitutive activation of mTORC1 in endothelial cells leads to the development and progression of lymphangiosarcoma through VEGF autocrine signaling. Cancer Cell. 2015; 28: 758-72.
42. Ding Y, Shan L, Nai W, Lin X, Zhou L, Dong X, et al. DEPTOR deficiency-mediated mTORc1 hyperactivation in vascular endothelial cells promotes angiogenesis. Cell Physiol Biochem. 2018; 46: 520-31.
43. Simons M, Gordon E, Claesson-Welsh L. Mechanisms and regulation of endothelial VEGF receptor signalling. Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2016; 17: 611-25.
44. Seaman S, Stevens J, Yang MY, Logsdon D, Graff-Cherry C, St. Croix B. Genes that distinguish physiological and pathological angiogenesis. Cancer Cell. 2007; 11: 539-54.
45. Fonsato V, Buttiglieri S, Deregibus MC, Puntorieri V, Bussolati B, Camussi G. Expression of Pax2 in human renal tumor-derived endothelial cells sustains apoptosis resistance and angiogenesis. Am J Pathol. 2006;168:706-13.
46. Akiyama K, Ohga N, Hida Y, Kawamoto T, Sadamoto Y, Ishikawa S, et al. Tumor endothelial cells acquire drug resistance by MDR1 up-regulation via VEGF signaling in tumor microenvironment. Am J Pathol. 2012;180:1283-93.
47. Hayashi K, Jutabha P, Endou H, Anzai N. c-Myc is crucial for the expression of LAT1 in MIA Paca-2 human pancreatic cancer cells. Oncol Rep. 2012;28:862-6.
48. Yue M, Jiang J, Gao P, Liu H, Qing G. Oncogenic MYC activates a feedforward regulatory loop promoting essential amino acid metabolism and tumorigenesis. Cell Rep. 2017;21:3819-32.
49. Testini C, Smith RO, Jin Y, Martinsson P, Sun Y, Hedlund M, et al. Myc-dependent endothelial proliferation is controlled by phosphotyrosine 1212 in VEGF receptor-2. EMBO Rep. 2019;20:e47845.
50. Yu P, Wilhelm K, Dubrac A, Tung JK, Alves TC, Fang JS, et al. FGF-dependent metabolic control of vascular development. Nature. 2017;545:224-41.
51. Okano N, Naruge D, Kawai K, Kobayashi T, Nagashima F, Endou H, et al. First-in-human phase I study of JPH203, an L-type amino acid transporter 1 inhibitor, in patients with advanced solid tumors. Invest New Drugs. 2020. https://doi.org/10.1007/s10637-020-00924-3
Claims (10)
- L型アミノ酸トランスポーター1(LAT1)阻害剤を含む、腫瘍内異常血管内皮細胞に発現するLAT1を介したアミノ酸の細胞内輸送を抑えることにより、がん細胞の増殖及び/または転移を抑制することを特徴とする、がんの治療剤。
- LAT1阻害剤が、腫瘍血管新生抑制剤として作用する、請求項1に記載の治療剤。
- がんにおける腫瘍新生血管にLAT1が存在する、請求項1または2に記載の治療剤。
- がんが、結腸がん、直腸がん、非小細胞肺がん、卵巣がん、子宮頸がん、乳がん、肺がん、膵臓がん、胆道がん、食道がん、大腸がん、前立腺がん、膀胱がん、脳腫瘍、胃がん、肝臓がん、皮膚がん、絨毛がん、腎がん、頭頚部がん、舌がん、骨髄腫、胸腺腫、中皮腫、下垂体腫瘍、転移性がん、及び浸潤がんからなる群から選択される、請求項1~3のいずれかの請求項に記載の治療剤。
- がんが肺がんである、請求項4に記載の治療剤。
- がんが膵がんである、請求項4に記載の治療剤。
- 免疫チェックポイント阻害薬の奏効性を上昇させるための薬剤となる、請求項1~6のいずれかの請求項に記載の治療剤。
- LAT1阻害剤が、O-(5-アミノ-2-フェニルベンズオキサゾール-7-イル)メチル-3,5-ジクロロ-L-チロシンである、請求項1~7のいずれかの請求項に記載の治療剤。
- LAT1阻害剤を含む、腫瘍血管新生抑制剤。
- LAT1阻害剤が、O-(5-アミノ-2-フェニルベンズオキサゾール-7-イル)メチル-3,5-ジクロロ-L-チロシンである、請求項9に記載の腫瘍血管新生抑制剤。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2022561980A JPWO2022102687A1 (ja) | 2020-11-11 | 2021-11-11 |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2020-187983 | 2020-11-11 | ||
JP2020187983 | 2020-11-11 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
WO2022102687A1 true WO2022102687A1 (ja) | 2022-05-19 |
Family
ID=81601291
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
PCT/JP2021/041444 WO2022102687A1 (ja) | 2020-11-11 | 2021-11-11 | がん治療剤 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPWO2022102687A1 (ja) |
WO (1) | WO2022102687A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2020073586A (ja) * | 2017-12-28 | 2020-05-14 | ジェイファーマ株式会社 | がん治療薬 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2015173970A1 (ja) * | 2014-05-15 | 2015-11-19 | ジェイファーマ株式会社 | 抗悪性腫瘍剤組成物 |
WO2019093383A1 (ja) * | 2017-11-07 | 2019-05-16 | ジェイファーマ株式会社 | 抗pd-1抗体若しくは抗pd-l1抗体療法の奏効性を予測する方法、がんの悪性度を評価する方法、及び抗pd-1抗体若しくは抗pd-l1抗体療法の奏効性を上昇させる方法 |
WO2019130637A1 (ja) * | 2017-12-28 | 2019-07-04 | ジェイファーマ株式会社 | がん治療薬 |
-
2021
- 2021-11-11 WO PCT/JP2021/041444 patent/WO2022102687A1/ja active Application Filing
- 2021-11-11 JP JP2022561980A patent/JPWO2022102687A1/ja active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2015173970A1 (ja) * | 2014-05-15 | 2015-11-19 | ジェイファーマ株式会社 | 抗悪性腫瘍剤組成物 |
WO2019093383A1 (ja) * | 2017-11-07 | 2019-05-16 | ジェイファーマ株式会社 | 抗pd-1抗体若しくは抗pd-l1抗体療法の奏効性を予測する方法、がんの悪性度を評価する方法、及び抗pd-1抗体若しくは抗pd-l1抗体療法の奏効性を上昇させる方法 |
WO2019130637A1 (ja) * | 2017-12-28 | 2019-07-04 | ジェイファーマ株式会社 | がん治療薬 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
HAYASHI, KEITARO; JUTABHA, PROMSUK; ENDOU, HITOSHI; ANZAI, NAOHIKO: "P3-70 Suppressive effect of LAT1 inhibitor on human angiogenesis", JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES, vol. 128, no. Suppl. 3, 1 July 2015 (2015-07-01), JP , pages S237 , XP009536737, ISSN: 1347-8613 * |
OHGAKI, RYUICHI: "S4-2 Expression of amino acid transporter LAT1 in vascular endothelial cells and contribution to tumor angiogenesis", PROGRAM AND ABSTRACTS OF THE 13TH ANNUAL MEETING OF THE JAPAN TRANSPORTER RESEARCH ASSOCIATION; JULY 21-22, 2018, JAPAN TRANSPORTER RESEARCH ASSOCIATION, JP, vol. 13, 1 January 2018 (2018-01-01) - 22 July 2018 (2018-07-22), JP, pages 37, XP009536781 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2020073586A (ja) * | 2017-12-28 | 2020-05-14 | ジェイファーマ株式会社 | がん治療薬 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPWO2022102687A1 (ja) | 2022-05-19 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Chen et al. | Four decades after the discovery of regenerating islet-derived (Reg) proteins: current understanding and challenges | |
Andersson et al. | Mouse model of Alagille syndrome and mechanisms of Jagged1 missense mutations | |
Zeng et al. | CD36 promotes de novo lipogenesis in hepatocytes through INSIG2-dependent SREBP1 processing | |
Quan et al. | Amino acid transporter LAT1 in tumor-associated vascular endothelium promotes angiogenesis by regulating cell proliferation and VEGF-A-dependent mTORC1 activation | |
Koeppen et al. | Interplay of hypoxia and A2B adenosine receptors in tissue protection | |
Gallot et al. | Myostatin gene inactivation prevents skeletal muscle wasting in cancer | |
Eckle et al. | A2B adenosine receptor dampens hypoxia-induced vascular leak | |
Lee et al. | Phosphoinositide 3-kinase signaling mediates β-catenin activation in intestinal epithelial stem and progenitor cells in colitis | |
Plaza-Menacho et al. | Mechanisms of RET signaling in cancer: current and future implications for targeted therapy | |
Hu et al. | Targeted disruption of peptide transporter Pept1 gene in mice significantly reduces dipeptide absorption in intestine | |
Zhang et al. | Haploinsufficiency of Klippel-Trenaunay syndrome gene Aggf1 inhibits developmental and pathological angiogenesis by inactivating PI3K and AKT and disrupts vascular integrity by activating VE-cadherin | |
Rochette et al. | Functional roles of GDF15 in modulating microenvironment to promote carcinogenesis | |
WO2018160772A1 (en) | Method of treating obesity, insulin resistance, non-alcoholic fatty liver disease including non-alcoholic steatohepatitis | |
Ding et al. | DEPTOR deficiency-mediated mTORc1 hyperactivation in vascular endothelial cells promotes angiogenesis | |
Ando et al. | Tumor-specific interendothelial adhesion mediated by FLRT2 facilitates cancer aggressiveness | |
WO2022102687A1 (ja) | がん治療剤 | |
Nagano et al. | Cooperative action of APJ and α1A-adrenergic receptor in vascular smooth muscle cells induces vasoconstriction | |
Bernier-Latmani et al. | Apelin-driven endothelial cell migration sustains intestinal progenitor cells and tumor growth | |
Tian et al. | LKB1IP promotes pathological cardiac hypertrophy by targeting PTEN/Akt signalling pathway | |
Hu et al. | ANGPTL8 is a negative regulator in pathological cardiac hypertrophy | |
WO2011054644A1 (en) | A low density lipoprotein-related protein 1 splice variant as cancer marker | |
WO2021040043A1 (ja) | 特定の遺伝子マーカーを有する患者に用いる医薬組成物 | |
Sommer et al. | Elevated blood pressure and cardiac hypertrophy after ablation of the gly96/IEX-1 gene | |
Niizeki et al. | Cardiac-specific overexpression of diacylglycerol kinase ζ attenuates left ventricular remodeling and improves survival after myocardial infarction | |
Adhikara et al. | Chondroitin sulfate N-acetylgalactosaminyltransferase-2 deletion alleviates lipoprotein retention in early atherosclerosis and attenuates aortic smooth muscle cell migration |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
121 | Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application |
Ref document number: 21891932 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |
|
ENP | Entry into the national phase |
Ref document number: 2022561980 Country of ref document: JP Kind code of ref document: A |
|
NENP | Non-entry into the national phase |
Ref country code: DE |
|
122 | Ep: pct application non-entry in european phase |
Ref document number: 21891932 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |