WO2017149806A1 - 植物栽培方法、及び植物栽培装置 - Google Patents

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聡彦 山本
和志 飯屋谷
西川 和男
崇志 一家
明雄 森田
靖乃 田中
義貴 小野
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Definitions

  • the present invention relates to a plant cultivation method for promoting the growth of plants, and more particularly to a method for promoting the growth of plants cultivated in a plant cultivation apparatus. Moreover, this invention relates to the plant cultivation apparatus which accelerates
  • Patent Documents 1 to 3 have been developed.
  • Patent Document 1 describes that positive and negative ions are used to suppress the growth of mold and fungi in a plant cultivation environment.
  • Patent Document 2 describes that irradiation of negative ions promotes the growth of plants, and that the freshness of a crop irradiated with negative ions is maintained longer than a crop that does not. Yes.
  • Patent Document 3 describes that the accumulation of pigments in plants is promoted using positive ions and negative ions.
  • the inventors of the present invention have experimentally found a phenomenon in which plant growth is promoted by generating positive ions and negative ions in a plant cultivation environment. Efficient plant cultivation is a social request, and effective use of the above phenomenon is desired.
  • An object of the present invention is to realize a plant cultivation method and a plant cultivation apparatus capable of efficiently performing plant cultivation.
  • a plant cultivation method is a plant cultivation method that promotes plant growth, and includes a positive and negative ion irradiation step of irradiating the plant with positive ions and negative ions.
  • a plant cultivation apparatus is a plant cultivation apparatus that promotes plant growth, and generates positive ions and negative ions in a space where the plant is grown. It is the structure provided with the ion generator made to make.
  • the effect is that the growth of the plant can be promoted by a simple method.
  • (A) Root length and (b) Root fresh weight of plant (A) cultivated with plant cultivation apparatus of one embodiment of the present invention and plant (B) cultivated with plant cultivation apparatus of comparative example
  • (c) is a columnar graph showing the average and deviation of the dry weight of roots.
  • (A) nitrate ion (NO 3 ⁇ ) and (b) oxalic acid of the plant (A) cultivated by the plant cultivation apparatus of one embodiment of the present invention and the plant (B) cultivated by the plant cultivation apparatus of the comparative example It is a columnar graph which shows the average and deviation of content of.
  • FIG. 5 is a diagram showing a list of the expression patterns of the contigs and a result of annotation by the BLAST program for the obtained contigs.
  • FIG. 5 is a diagram showing a list of the expression patterns of the contigs and a result of annotation by the BLAST program for the obtained contigs.
  • FIG. 5 is a diagram showing a list of the expression patterns of the contigs and a result of annotation by the BLAST program for the obtained contigs.
  • FIG. 5 is a diagram showing a list of the expression patterns of the contigs and a result of annotation by the BLAST program for the obtained contigs.
  • FIG. 5 is a diagram showing a list of the expression patterns of the contigs and a result of annotation by the BLAST program for the obtained contigs.
  • FIG. 5 is a diagram showing a list of the expression patterns of the contigs and a result of annotation by the BLAST program for the obtained contigs.
  • FIG. 5 is a diagram showing a list of the expression patterns of the contigs and a result of annotation by the BLAST program for the obtained contigs.
  • FIG. 5 is a diagram showing a list of the expression patterns of the contigs and a result of annotation by the BLAST program for the obtained contigs.
  • FIG. 5 is a diagram showing a list of the expression patterns of the contigs and a result of annotation by the BLAST program for the obtained contigs.
  • FIG. 5 is a diagram showing a list of the expression patterns of the contigs and a result of annotation by the BLAST program for the obtained contigs. Based on the results of annotation by the BLAST program for contigs identified by RNA sequence using plants cultivated by the plant cultivation apparatus of one embodiment of the present invention and plants cultivated by the plant cultivation apparatus of the comparative example, It is a figure which shows the result of a gene ontology enrichment analysis.
  • the accumulated amount of some amino acids It is a figure which shows the analysis result.
  • the metabolites not drawn in the metabolic pathway diagram It is a figure which shows the analysis result of the accumulation amount of. It is a figure which shows the list
  • Embodiment 1 Hereinafter, Embodiment 1 of the present invention will be described in detail with reference to FIGS.
  • FIG. 1 is a diagram illustrating a schematic configuration of a plant cultivation apparatus 1 according to the first embodiment, in which (a) of FIG. 1 shows a front sectional view and (b) of FIG. 1 shows a top sectional view.
  • the plant cultivation apparatus 1 promotes the growth of the plant 10 while hydroponically cultivating the plant 10.
  • the plant cultivation device 1 is provided with a housing 30, a control device 20, a lighting device 21, a blower device 22, a door 31, a vent hole 23, and an ion generator 40 that generates positive ions and negative ions. .
  • a hydroponic liquid tank 14 is placed inside the plant cultivation apparatus 1 in order to grow the plant 10.
  • a float 12 having a hole into which a sponge 11 supporting the plant 10 is inserted is floated on the hydroponic liquid 13 inside the hydroponic liquid tank 14.
  • an xyz orthogonal coordinate system in which the long side direction of the bottom surface of the housing 30 is the x direction, the short side direction is the y direction, and the height direction of the housing 30 is the z direction. Shown in the figure.
  • the air conditioner which can adjust the temperature inside the housing
  • the plant cultivation apparatus 1 may be provided with equipment such as a circulation pump for circulating the hydroponic liquid 13.
  • the cultivation method of the plant 10 in the plant cultivation apparatus 1 is not limited to hydroponics cultivation, You may arrange
  • the plant 10 may be any plant such as leafy vegetable, real vegetable, root vegetable, or flower bud.
  • the plant 10 includes various varieties of lettuce such as Great Lakes, Gentilina Green, or Salad Bowl Red, Salad Vegetables, Sanchu, Shungiku, Mizuna, Shinkosai, Wasabi Vegetables, Nozawana, It may be a chingena, large leaf, Yamato Mana, arugula, tarsai, komatsuna, beet all red, or an herb such as Italian parsley, sweet basil, watercress, pachychi, spearmint, or peppermint. Alternatively, the plant 10 may be cultivated for the purpose of harvesting as a baby leaf instead of harvesting after sufficient growth.
  • lettuce such as Great Lakes, Gentilina Green, or Salad Bowl Red, Salad Vegetables, Sanchu, Shungiku, Mizuna, Shinkosai, Wasabi Vegetables, Nozawana
  • It may be a chingena, large leaf, Yamato Mana, arugula, tarsai, komatsun
  • the plant 10 may be, for example, a mini tomato, and as the root vegetables, the plant 10 may be, for example, a mini foggy or a radish.
  • Plant cultivation device 1 Next, the plant cultivation apparatus 1 is demonstrated based on FIG.1 and FIG.2.
  • the casing 30 is in a state where the door 31 is closed except for the blower 22 and the vent hole 23 so that the positive ions and negative ions generated by the ion generator 40 can be held inside the casing 30. It is almost airtight.
  • casing 30 is comprised by the translucent member in which a part is colorless and transparent so that the inside (especially the amount of water of the plant 10 and the hydroponic liquid 13) can be observed and appreciated from the exterior of the housing
  • the housing 30 only needs to be a structure that supports the control device 20, the lighting device 21, the blower device 22, and the door 31 and can protect the plant 10 being grown, and the material, shape, and size thereof are not limited. .
  • the control device 20 includes a temperature sensor 24, a clock 25, a storage device 26, and a control unit 27 inside.
  • the storage device 26 the illumination time and illumination light amount pattern of the illumination device 21 according to the time, the predetermined range in which the temperature inside the housing 30 should be maintained, and the drive pattern of the ion generator 40 according to the time, , Is stored.
  • the control unit 27 controls the illumination time and the illumination light amount of the illumination device 21 according to the time based on the time information from the clock 25, and sets the temperature inside the housing 30 to a predetermined value based on the temperature information from the temperature sensor 24.
  • the air volume of the air blower 22 is controlled so as to keep within the range.
  • the control unit 27 of the control device 20 may be realized by a logic circuit (hardware) formed in an integrated circuit (IC chip) or the like, or may be realized by software using a CPU (Central Processing Unit). .
  • the control unit 27 includes a CPU that executes instructions of a program that is software for realizing each function, a ROM (Read (Only Memory) in which the program and various data are recorded so as to be readable by a computer (or CPU), A storage device (these are referred to as “recording media”), a RAM (Random Access Memory) for expanding the program, and the like are provided. And the objective of this invention is achieved when a computer (or CPU) reads the said program from the said recording medium and runs it.
  • a “non-temporary tangible medium” such as a tape, a disk, a card, a semiconductor memory, a programmable logic circuit, or the like can be used.
  • the program may be supplied to the computer via an arbitrary transmission medium (such as a communication network or a broadcast wave) that can transmit the program.
  • a transmission medium such as a communication network or a broadcast wave
  • the present invention can also be realized in the form of a data signal embedded in a carrier wave in which the program is embodied by electronic transmission.
  • the temperature sensor 24 is a sensor that senses the temperature of the air inside the housing 30.
  • the control device 20 may include a sensor that senses the temperature or the amount of water in the hydroponic liquid 13 or the humidity or carbon dioxide concentration of the air inside the housing.
  • the lighting device 21 is provided on the top surface of the housing 30 so as to illuminate the plant 10 from above.
  • the illuminating device 21 is an LED (light emitting device) illuminating device with little calorific value, it will not be specifically limited if it can radiate
  • the blower 22 is an intake fan that sucks air from the outside to the inside of the housing 30, and the vent hole 23 is an exhaust hole that discharges air from the inside of the housing 30 to the outside.
  • the blower 22 and the vent hole 23 are provided on the wall surface of the housing 30 so as to face each other in the x direction. For this reason, as shown in FIG. 3, the air flow F by the blower 22 and the air holes 23 flows along the x direction and strikes the plant 10 growing in the z-axis positive direction from the side (ideal (It blows so that it may be substantially orthogonal).
  • the rotation speed of the fan of the blower 22 increases as the temperature detected by the temperature sensor 24 increases. With this configuration, an increase in temperature inside the housing 30 is suppressed.
  • the blower 22 may be an exhaust fan that discharges air.
  • the vent hole 23 is an intake hole that sucks air.
  • two air blowers 22 may be provided, one being an intake fan and the other being an exhaust fan. Further, if the air flow outside the housing 30 is sufficient, the two air holes 23 may be provided.
  • the door 31 is not particularly limited in arrangement and configuration as long as the hydroponic liquid tank 14 can be taken in and out of the housing 30 in a state where the plant 10 is grown.
  • the ion generator 40 is provided on the wall surface of the housing 30 so as to face the negative y-axis direction as shown in FIG. Details of the ion generator 40 will be described later. Since the inside of the housing 30 is a sealed space except for the air blower 22 and the vent hole 23, positive ions and negative ions generated by the ion generator 40 are diffused into the housing 30 by the flow of air. To do.
  • the concentration of each of positive ions and negative ions in the housing 30 is 1 million / cm 3 or more.
  • the control unit 27 may control the ion generator 40 so that the positive and negative ion concentrations are maintained. Furthermore, the ion generator 40 diffuses more positive ions and negative ions more efficiently as the air flow F generated by the blower 22 is faster. For this reason, the positive / negative ion density
  • the ion generator 40 includes a high voltage generation circuit that generates a high voltage pulse, a positive ion generation unit 41, and a negative ion generation unit 42 in the main body.
  • the positive ion generation unit 41 includes a dielectric electrode and a discharge electrode, and is applied with a positive voltage pulse generated by a high voltage generation circuit.
  • the negative ion generation unit 42 includes a dielectric electrode and a discharge electrode, and negative ions are generated from the negative ion generation unit 42 when a negative voltage pulse is applied.
  • the above-described configuration of the ion generator 40 is merely an example, and is not particularly limited as long as it is a device that can generate positive ions and negative ions having a desired concentration.
  • Positive ions generated by the ion generator 40 are ions mainly composed of H + (H 2 O) m (m is an arbitrary natural number), and negative ions are O 2 ⁇ (H 2 O) n (n is An ion composed mainly of any natural number).
  • the plant 10 is promoted to grow by the action of the generated positive ions and negative ions and the hydroxyl radical.
  • the hydroxyl radical gives oxidative stress to the plant 10 and the plant 10 promotes growth by this oxidative stress.
  • the concentration of positive ions and negative ions in the cultivation space of the plant 10 is preferably 1,000,000 pieces / cm 3 or more, respectively.
  • positive ions and negative ions are preferably uniformly irradiated to a plurality of plant individuals, it is not always necessary that positive ions and negative ions are uniformly distributed in the entire cultivation space of the plant 10.
  • the positive and negative ion concentrations described above are preferred concentrations around the individual plant 10.
  • the plant 10 can be irradiated with positive ions and negative ions throughout the cultivation period (positive and negative ion irradiation step). That is, the plant 10 may be irradiated continuously without setting an irradiation time zone or an irradiation period. Therefore, it is not necessary to set the irradiation time zone and irradiation period of positive ions and negative ions in detail.
  • FIG. 4 is a diagram showing a schematic configuration of the plant cultivation apparatus 2 according to Embodiment 2, and shows a top cross-sectional view.
  • the plant cultivation device 2 is the same as the plant cultivation device 1 according to the first embodiment except for the arrangement of the ion generation device 40.
  • the ion generation apparatus 40 is provided on the wall surface of the casing 30 facing the negative y-axis direction, and is arranged in parallel with the air flow F.
  • the ion generator 40 is provided on the wall surface of the housing 30 (the wall surface on which the blower 22 is provided) facing the negative x-axis direction, and air It is orthogonal to the direction of the flow F and is on the windward side of the air flow F.
  • the ion generation device 40 generates more positive ions and negative ions as the air flow F generated by the blower device 22 is faster.
  • the concentration of each positive ion and negative ion is 1,000,000 / cm 3 or more.
  • the ion generator 40 is located on the windward side of the air flow F, so that positive ions and negative ions generated by the ion generation device 40 ride on the air flow F. It is easy to diffuse more uniformly inside the housing 30. For this reason, in the plant cultivation apparatus 2, it is possible to uniformly apply oxidative stress to the plurality of plants 10 and to promote the growth of the plurality of plants 10 more uniformly.
  • the air around the ion generator 40 is moved away from the ion generator 40 by the air flow F. For this reason, the ion generator 40 can supply positive ions and negative ions efficiently.
  • the ion generator 40 is provided in the vicinity of the air blower 22 which generates the air flow F. For this reason, even if the air flow F is at the same speed, positive ions and negative ions are more likely to be placed on the air flow F in the plant cultivation apparatus 2 than in the plant cultivation apparatus 1. Therefore, the plant cultivation apparatus 2 can diffuse positive and negative ion concentrations more effectively than the plant cultivation apparatus 1.
  • Plant cultivating apparatus A “Green Farm UH-A01E” (hydroponic cultivator sold by Ewing Co., Ltd.) is attached and driven as in the plant cultivating apparatus 1 shown in FIG. It was.
  • Plant cultivation apparatus B “Green Farm UH-A01E” was used as it was.
  • Plant 10 Lettuce (variety is Gentilina Green. Seed is sold by Ewing Co., Ltd.) Sponge 11, float 12, and hydroponic tank 14: Accessories attached to “Green Farm UH-A01E” Hydroponic liquid 13: Liquid fertilizer attached to “Green Farm UH-A01E” is approximately 133 times with distilled water. Diluted liquid Cultivation period: 25 days Cultivation frequency: 3 times Lighting pattern: Off for the first 3 days (72 consecutive hours). During the next 22 days, “Daytime (6am to 22:00)” is lit during 24 hours, and “Night (0am to 6pm, 22:00 to 0am)” is off.
  • Thinning 15 seeds of the plant 10 were sown, and on the ninth day of cultivation, 10 individuals were left out.
  • Bacterial culture of hydroponic liquid During the cultivation period, a part of the hydroponic liquid 13 was collected every 5 days and cultured in an LB medium at 37 ° C. in the dark for 24 hours.
  • Measurement of fresh weight The fresh weight of the above-ground part and root of each individual plant 10 was measured.
  • Measurement of length The maximum leaf length and the maximum root length of the above-ground part of each individual plant 10 were measured.
  • Measurement of the number of leaves The number of leaves above the ground of each individual plant 10 was counted.
  • Measurement of leaf color value The content of chlorophyll a and chlorophyll b in the above-ground part of each individual plant 10 was measured.
  • Measurement of dry weight The above-ground part and the root of the harvested plant 10 were dried, and the dry weight between the above-ground part and the root of each individual was measured.
  • FIG. 5 is a photograph of the state of the plant 10 in (a) plant cultivation apparatus A (with ion generator 40) and (b) plant cultivation apparatus B (without ion generator 40) on the 25th day of the cultivation period. It is a copy of.
  • the plant cultivated by the plant cultivation apparatus A as shown in FIG. No. 10 had large leaves, good color luster, and good overall growth. Therefore, it is considered that the growth of the plant 10 was promoted by positive ions and negative ions generated by the ion generator 40.
  • the LB medium applied with the hydroponic liquid 13 collected from the plant cultivation apparatus A compared to the LB medium applied with the hydroponic liquid 13 collected from the plant cultivation apparatus B all three times.
  • the amount of bacteria in the hydroponic liquid 13 is suppressed by sterilizing and inactivating airborne bacteria, airborne viruses, and the like by positive ions and negative ions from the ion generator 40.
  • the possibility that the positive ions and the negative ions directly act on the bacteria in the hydroponic liquid 13 is also considered.
  • FIG. 6 is a copy of a photograph taken of the root of the plant 10 in (a) the plant cultivation apparatus A and (b) the plant cultivation apparatus B.
  • the plant 10 cultivated with the plant cultivating apparatus A has a good color, has large leaves, and the above-ground part compared to the plant 10 cultivated with the plant cultivating apparatus B three times. As shown in FIG. 6, the roots were well developed. And the above-mentioned visual observation at the time of cultivation and harvest is the maximum leaf length, the number of leaves, the fresh weight of the above-ground part, the dry weight of the above-ground part, the root length, the fresh weight of the root, the dry weight of the root, and the leaf color value. It was confirmed by the measurement.
  • FIG. 7 shows (a) the maximum leaf length, (b) the number of leaves, (c) the fresh weight of the above-ground part, and (d) the above-ground part of each individual plant 10 harvested in the first to third comparative experiments. It is a columnar graph which shows the average and deviation of dry weight.
  • FIG. 8 shows the average and deviation of (a) root length, (b) fresh root weight, and (c) dry root weight of each plant 10 harvested in the first to third comparative experiments. It is a columnar graph to show.
  • the left graph shows the measurement result of the plant 10 cultivated with the plant cultivation apparatus A
  • the right graph shows the measurement result of the plant 10 cultivated with the plant cultivation apparatus B. * Indicates that there is a significant difference (P ⁇ 0.05).
  • the above results show that the maximum leaf length, the number of leaves, the fresh weight of the aerial part, the dry weight of the aerial part, the root length, the fresh weight of the root, and the dry weight of the root have a significance probability of 5%. It was significant.
  • the content of chlorophyll a and chlorophyll b also showed that the plant 10 cultivated by the plant cultivation apparatus A was slightly larger than the plant 10 cultivated by the plant cultivation apparatus B ( Data not shown).
  • FIG. 9 is a columnar graph showing the average and deviation of the contained weight per dry weight of (a) nitrate ions (NO 3 ⁇ ) and (b) oxalic acid of the plant 10, and the graphs on the left are plant cultivation apparatuses. The measurement result of the plant 10 harvested from A is shown, and the graph on each right side shows the measurement result of the plant 10 harvested from the plant cultivation apparatus B. * Indicates that there is a significant difference (P ⁇ 0.05).
  • the plant 10 cultivated by the plant cultivation apparatus A showed a value larger than the plant 10 cultivated by the plant cultivation apparatus B.
  • the plant 10 cultivated by the product cultivation apparatus A showed a value smaller than the plant 10 cultivated by the plant cultivation apparatus B.
  • the results for nitrate ion and oxalic acid were significant with a significance probability of 5%.
  • the results for nitrate ions were also significant with a significance probability of 5% by the one-sided F test.
  • RNA sequence analysis In order to investigate the factor of the change in the growth amount of the plant 10 (lettuce (variety: Gentilina Green)) due to the positive ions and negative ions generated by the ion generator 40, the plant cultivation device A corresponding to the plant cultivation device 1, Using the plant cultivation apparatus B obtained by removing the ion generator 40 from the plant cultivation apparatus 1, RNA sequence analysis of the plant 10 was performed under the following conditions. The difference in the experimental conditions between the two plant cultivation apparatuses A and B is only the presence or absence of the ion generator 40.
  • FIG. 10 shows the results of RNA sequencing of the leaves of the plant 10 cultivated in the plant cultivation apparatus A and the plant cultivation apparatus B.
  • PCI 100 ward indicates the result of the plant cultivated by the plant cultivation apparatus A of the example
  • PCI 0 ward indicates the result of the plant cultivated by the plant cultivation apparatus B of the comparative example.
  • FIG. 11 is a figure which shows the result of the MA plot which shows the difference in the gene expression level in the leaf of the plant 10 cultivated in the plant cultivation apparatus A and the plant cultivation apparatus B.
  • the horizontal axis logCPM is a logarithm obtained by relatively calculating the number of short leads related to the contig among 1 million short leads and taking the bottom as 2.
  • a larger value of logCPM indicates a contig that constantly shows a high expression level in the plant 10, and a smaller value of logCPM indicates that the expression level is originally low in the plant 10.
  • the vertical axis logFC is a logarithm with a base of 2. The difference in the expression level of the contig between the plant cultivated by the plant cultivation apparatus A of the example and the plant cultivated by the plant cultivation apparatus B of the comparative example. It is an indicator to show. Contig with a positive value of logFC increased in the expression level in the plant cultivated in the plant cultivating apparatus A relative to the plant cultivated in the plant cultivating apparatus B (that is, expressed by irradiation of positive ions and negative ions). The amount has increased).
  • Contigs in which logFC takes a negative value have decreased expression in plants cultivated in plant cultivating apparatus A relative to plants cultivated in plant cultivating apparatus B (that is, expression levels are increased by irradiation of positive ions and negative ions). It means) Each plot shows a contig, a white plot shows a contig whose expression level is significantly increased or decreased by irradiation with positive ions and negative ions (P ⁇ 0.05), and a black plot shows positive ions and negative ions. The contig in which no significant difference was observed in the expression level by irradiation of.
  • FIG. 10 As shown in FIG. 10, as a result of RNA sequence analysis, 52,503 contig sequences were obtained (see “Contig” in FIG. 10), and 28,298 contigs were annotated by the BLAST program (FIG. 10). 10 (see “Annotations in BLASTX”). Moreover, as FIG. 10 and FIG. 11 shows, compared with the plant 10 in the plant cultivation apparatus B, 113 contigs whose expression level significantly increased in the plant 10 in the plant cultivation apparatus A (“ There were 44 lowered contigs (see “Downward Control” in FIG. 10).
  • FIGS. 12A to 12J show the expression pattern of contigs obtained by RNA sequencing performed using the leaves of plant 10 in plant cultivation apparatus A and plant cultivation apparatus B, and annotations by BLAST program for the obtained contigs. It is a figure which shows the list of results.
  • the meanings of the numerical values shown in FIGS. 12A to 12J are as follows.
  • FIG. 13A to FIG. 13J are gene ontology enrichments based on the results of annotation by the BLAST program for contigs identified by RNA sequences performed using the leaves of plant 10 in plant cultivation apparatus A and plant cultivation apparatus B. The results of the event analysis are shown. Each class shown in FIGS. 13A to 13J is classified based on the following concept.
  • Class BP Biological Process
  • CC Cellular Component
  • Cell component class MF Molecular Function
  • the ion generator 40 is removed from the plant cultivation apparatus A and the plant cultivation apparatus 1 corresponding to the plant cultivation apparatus 1.
  • a metabolome analysis of the plant 10 was performed under the following conditions. The difference in the experimental conditions between the two plant cultivation apparatuses A and B is only the presence or absence of the ion generator 40.
  • CE-TOFMS cation mode and anion mode were measured under the following conditions.
  • Run buffer Cation Buffer Solution (p / n: H3301-1001)
  • Rinse buffer Cation Buffer Solution (p / n: H3301-1001)
  • Sample injection 50 mbar, 10 seconds
  • Sheath fluid HMT sheath fluid (p / n: H3301-1020).
  • Run buffer Anion Buffer Solution (p / n: H3302-1021)
  • Rinse buffer Anion Buffer Solution (p / n: H3302-1021)
  • Sample injection 50 mbar, 25 seconds
  • CE voltage Positive, 30 kV MS ionization: ESI Negative MS capillary voltage: 3,500 V MS scan range: m / z 50-1,000
  • Sheath fluid HMT sheath fluid (p / n: H3301-1020).
  • peaks detected by CE-TOFMS automatic integration software MasterHands ver.2.17.1.11 (developed by Keio University) was used to automatically extract peaks with a signal / noise (S / N) ratio of 3 or more.
  • S / N signal / noise
  • the mass-to-charge ratio (m / z), peak area value, and migration time (MT) were obtained for the automatically extracted peak.
  • the obtained peak area value was converted into a relative area value using Equation 3 below.
  • these data include adduct ions such as Na + and K + and fragment ions such as dehydration and deammonium, these ions were deleted and the above-extracted peaks were examined closely.
  • the peaks between the samples were collated and aligned based on the values of m / z and MT.
  • Candidate compounds are narrowed down from the m / z and MT values of substances registered in the HMT metabolite library and the Know-Unknown library, and the plant 10 (PCI0 ward) and the plant cultivation apparatus A in the plant cultivation apparatus B are selected for the candidate compounds.
  • the calculation of the relative area value ratio with plant 10 (PCI100 ward) and Welch's T test were performed.
  • FIG. 14 depicts a part of the results of metabolome analysis using the leaves of plant 10 in plant cultivation apparatus A (PCI 100 ward) and plant cultivation apparatus B (PCI 0 ward) on the TCA cycle and urea cycle metabolic pathways.
  • FIG. The columnar graph described in each metabolite shows the relative area value of each metabolite in the plant cultivated by the plant cultivation apparatus A and the plant cultivated by the plant cultivation apparatus B.
  • FIG. 15 shows the analysis result of the accumulation amount of one part amino acid by a relative area value among the metabolome analysis results using the leaf of the plant 10 in plant cultivation apparatus A (A) and plant cultivation apparatus B (B). . * Indicates that there is a significant difference (P ⁇ 0.05).
  • the plant 10 cultivated by the plant cultivation apparatus A showed a value significantly larger than the plant 10 cultivated by the plant cultivation apparatus B for Asn (asparagine) and Thr (threonine). Moreover, according to the T test, the above-mentioned result was significant with a significance probability of 5%.
  • FIG. 16 shows the analysis result of the accumulation amount of the metabolite that is not drawn in the metabolic pathway diagram among the metabolome analysis results using the leaves of the plant 10 in the plant cultivation apparatus A (A) and the plant cultivation apparatus B (B). Is expressed as a relative area value. * Indicates that there is a significant difference (P ⁇ 0.05).
  • the plant 10 cultivated by the plant cultivation apparatus A showed a significantly larger value than the plant 10 cultivated by the plant cultivation apparatus B. Moreover, according to the T test, the above-mentioned result was significant with a significance probability of 5%.
  • FIG. 17 is a diagram showing a list of contigs identified by the RNA sequence among the contigs corresponding to the genes involved in the biosynthesis of the metabolite shown in FIG.
  • (1) is a dotted arrow extending from N-acetylglutamic acid semialdehyde to N-AcOrn in FIG. 14, and (2) is N-AcGlu-P to N-acetylglutamic acid in FIG.
  • (5) 14 is a dotted arrow extending from Arg to agmatine in FIG. 14
  • (6) is a thick arrow extending from Pro to hydroxyproline in FIG. 14
  • (7) is a dotted line extending from GSSG to GSH in FIG.
  • Arrows (8) are genes related to the reaction indicated by the thick double arrows extending from citric acid to cis-aconitic acid and from cis-aconitic acid to isocitric acid in FIG. Shows the Rukoto.
  • the plant cultivation method which concerns on aspect 1 of this invention is a plant cultivation method which accelerates
  • radicals are generated from the irradiated positive ions and negative ions. It is presumed that plant growth is promoted by the action of positive ions, negative ions, and radicals (for example, oxidative stress caused by radicals).
  • the plant cultivation method according to aspect 2 of the present invention includes, in aspect 1 described above, a blowing process that generates an air flow so as to be orthogonal to the direction in which the plant grows, and the positive and negative ion irradiation process and the above It is good also as a method performed simultaneously with a ventilation process.
  • the positive ions and negative ions irradiated in the positive / negative ion irradiation step are diffused by the air flow.
  • a plurality of plants can be uniformly irradiated with positive ions and negative ions.
  • the plant cultivation method according to aspect 3 of the present invention is the method of generating positive ions and negative ions on the windward side of the air flow with respect to the plant in the positive and negative ion irradiation step in the above aspect 2. Good.
  • positive ions and negative ions flow on the leeward side on the windward side, they are more uniformly diffused. With this more uniform diffusion, positive ions and negative ions can be uniformly irradiated by a plurality of plants.
  • the positive ion is an ion mainly composed of H + (H 2 O) m (m is an arbitrary natural number).
  • the negative ion may be an ion mainly composed of O 2 ⁇ (H 2 O) n (n is an arbitrary natural number).
  • a hydroxyl radical that is an active oxygen species is generated from H + (H 2 O) m and O 2 ⁇ (H 2 O) n .
  • the plant cultivation method according to Aspect 5 of the present invention is the plant cultivation method according to any one of Aspects 1 to 4, wherein the positive ion concentration and the negative ion concentration in the space around the plant are 1 million pieces / cm 3 , respectively. It is good also as the method which is the above.
  • the promotion of plant growth as a result to counter oxidative stress depends on the concentration of positive ions and negative ions, and the concentration of positive ions and negative ions is 1,000,000 / cm respectively. If it is 3 or more, the growth of the plant 10 is remarkably promoted.
  • the plant cultivation method according to aspect 6 of the present invention is the plant cultivation method according to any one of the aspects 1 to 5, wherein the fresh weight, dry weight, number of leaves, leaf length, root length, and nitrate ion of the plant Either of the contents may be increased, or the oxalic acid content may be decreased.
  • the positive and negative ion irradiation step may be performed continuously during the cultivation period of the plant.
  • a plant cultivation apparatus is a plant cultivation apparatus that promotes the growth of a plant, and includes an ion generator that generates positive ions and negative ions in a space where the plant is grown. .
  • radicals are generated from positive ions and negative ions generated by the ion generator. It is presumed that the growth of plants is promoted by the action of positive ions and negative ions and radical radicals (for example, oxidative stress caused by radicals).

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Abstract

植物の成長を簡易な方法で促進する。植物(10)に正イオン及び負イオンを照射する。

Description

植物栽培方法、及び植物栽培装置
 本発明は、植物の成長を促進する植物栽培方法に関し、特に、植物栽培装置内で栽培される植物の成長を促進する方法に関する。また、本発明は、内部で栽培される植物の成長を促進する植物栽培装置に関する。
 計画的な農作物生産が望まれる中、天候などの影響を受けにくい施設栽培および植物工場への期待が高まっている。さらに、そのような施設栽培および植物工場において、植物栽培を効率的に行うことが社会的に要望されている。このような要望に応えて、例えば、下記特許文献1~3のような技術が開発されてきている。
 特許文献1には、正イオンおよび負イオンを利用して植物栽培環境においてカビおよび菌の繁殖を抑制することが記載されている。
 特許文献2には、マイナスイオンを照射して、植物の成長を促進することと、マイナスイオンが照射された収穫物の鮮度が、そうでない収穫物より長く保持されることと、が記載されている。
 特許文献3には、正イオンおよび負イオンを利用して、植物における色素の蓄積を促進することが記載されている。
日本国公開特許公報「特開2013-223457(2013年10月31日公開)」 日本国公開特許公報「特開平11-239418(1999年9月7日公開)」 日本国公開特許公報「特開2012-135288(2012年7月19日公開)」
 本発明の発明者らは、正イオンおよび負イオンを植物栽培環境において発生させることにより植物の成長が促進されるという現象を実験により見出した。植物栽培を効率的に行うことは社会的な要望であり、上記現象の有効利用が望まれる。
 本発明の目的は、植物栽培を効率的に行うことができる植物栽培方法および植物栽培装置を実現することにある。
 上記の課題を解決するために、本発明の一態様に係る植物栽培方法は、植物の成長を促進する植物栽培方法であって、上記植物に正イオンおよび負イオンを照射する正負イオン照射工程を含んでいる。
 上記の課題を解決するために、本発明の一態様に係る植物栽培装置は、植物の成長を促進する植物栽培装置であって、上記植物が栽培されている空間に正イオンおよび負イオンを発生させるイオン発生装置を備える構成である。
 簡易な方法で植物の成長を促進することができるという効果を奏する。
本発明の実施形態1に係る植物栽培装置の概略構成を示す(a)正面断面図と(b)上面断面図とある。 図1に示した植物栽培装置の概略機能を示す機能ブロック図である。 図1に示した植物栽培装置における空気の流れを示す概略図である。 本発明の実施形態2に係る植物栽培装置の概略構成を示す上面断面図である。 (a)本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び(b)比較例の植物栽培装置で栽培された植物を示す写真の写しである。 (a)本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物の根及び(b)比較例の植物栽培装置で栽培された植物の根を撮影した写真の写しである。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物(A)及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物(B)の各個体の(a)最大葉長、(b)葉数、(c)地上部の新鮮重量、(d)地上部の乾燥重量の平均と偏差とを示す柱状グラフである。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物(A)及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物(B)の各個体の(a)根長、(b)根の新鮮重量、及び(c)根の乾燥重量の平均と偏差とを示す柱状グラフである。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物(A)及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物(B)の(a)硝酸イオン(NO )および(b)シュウ酸の含有量の平均と偏差とを示す柱状グラフである。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物を用いたRNAシークエンスの結果を示す図である。 上記RNAシークエンスの結果得られた、遺伝子発現量の違いを示すMAプロットの結果を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物のRNAシークエンスで得られたコンティグの発現様式のうち、有意な発現量の増減が見られたコンティグの発現様式、および上記得られたコンティグに対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果の一覧を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物のRNAシークエンスで得られたコンティグの発現様式のうち、有意な発現量の増減が見られたコンティグの発現様式、および上記得られたコンティグに対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果の一覧を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物のRNAシークエンスで得られたコンティグの発現様式のうち、有意な発現量の増減が見られたコンティグの発現様式、および上記得られたコンティグに対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果の一覧を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物のRNAシークエンスで得られたコンティグの発現様式のうち、有意な発現量の増減が見られたコンティグの発現様式、および上記得られたコンティグに対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果の一覧を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物のRNAシークエンスで得られたコンティグの発現様式のうち、有意な発現量の増減が見られたコンティグの発現様式、および上記得られたコンティグに対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果の一覧を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物のRNAシークエンスで得られたコンティグの発現様式のうち、有意な発現量の増減が見られたコンティグの発現様式、および上記得られたコンティグに対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果の一覧を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物のRNAシークエンスで得られたコンティグの発現様式のうち、有意な発現量の増減が見られたコンティグの発現様式、および上記得られたコンティグに対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果の一覧を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物のRNAシークエンスで得られたコンティグの発現様式のうち、有意な発現量の増減が見られたコンティグの発現様式、および上記得られたコンティグに対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果の一覧を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物のRNAシークエンスで得られたコンティグの発現様式のうち、有意な発現量の増減が見られたコンティグの発現様式、および上記得られたコンティグに対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果の一覧を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物のRNAシークエンスで得られたコンティグの発現様式のうち、有意な発現量の増減が見られたコンティグの発現様式、および上記得られたコンティグに対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果の一覧を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物を用いたRNAシークエンスで同定されたコンティグ対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果を元に行った、遺伝子オントロジーエンリッチメント解析の結果を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物を用いたRNAシークエンスで同定されたコンティグ対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果を元に行った、遺伝子オントロジーエンリッチメント解析の結果を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物を用いたRNAシークエンスで同定されたコンティグ対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果を元に行った、遺伝子オントロジーエンリッチメント解析の結果を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物を用いたRNAシークエンスで同定されたコンティグ対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果を元に行った、遺伝子オントロジーエンリッチメント解析の結果を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物を用いたRNAシークエンスで同定されたコンティグ対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果を元に行った、遺伝子オントロジーエンリッチメント解析の結果を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物を用いたRNAシークエンスで同定されたコンティグ対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果を元に行った、遺伝子オントロジーエンリッチメント解析の結果を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物を用いたRNAシークエンスで同定されたコンティグ対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果を元に行った、遺伝子オントロジーエンリッチメント解析の結果を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物を用いたRNAシークエンスで同定されたコンティグ対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果を元に行った、遺伝子オントロジーエンリッチメント解析の結果を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物を用いたRNAシークエンスで同定されたコンティグ対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果を元に行った、遺伝子オントロジーエンリッチメント解析の結果を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物を用いたRNAシークエンスで同定されたコンティグ対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果を元に行った、遺伝子オントロジーエンリッチメント解析の結果を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物を用いたメタボローム解析の結果の一部を、TCAサイクル及び尿素サイクル代謝経路上に描画した図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物(A)及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物(B)を用いたメタボローム解析の結果のうち、一部のアミノ酸の蓄積量の解析結果を示す図である。 本発明の一実施例の植物栽培装置で栽培された植物(A)及び比較例の植物栽培装置で栽培された植物(B)のメタボローム解析結果のうち、代謝経路図に描画されなかった代謝物質の蓄積量の解析結果を示す図である。 図14に示す代謝産物の生合成に関わる遺伝子に対応するコンティグのうち、上記RNAシークエンスによって同定されたコンティグのリストを示す図である。
〔実施形態1〕
 以下、本発明の実施形態1について、図1~図3に基づき、詳細に説明する。
 図1は、実施形態1に係る植物栽培装置1の概略構成を示す図であり、図1の(a)が正面断面図を示し、図1の(b)が上面断面図を示す。植物栽培装置1は、植物10を水耕栽培するとともに、植物10の成長を促進する。
 植物栽培装置1には、筐体30と、制御装置20、照明装置21、送風装置22、扉31、通気孔23、及び正イオン及び負イオンを発生させるイオン発生装置40が、設けられている。また、植物栽培装置1の内部には、植物10を栽培するために、水耕液槽14が置かれる。水耕液槽14の内部には、植物10を支持するスポンジ11が挿入された孔を有するフロート12が水耕液13の上に浮かべられている。
 また、図の理解を容易にするために、筐体30の底面の長辺方向をx方向、短辺方向をy方向とし、筐体30の高さ方向をz方向とするxyz直交座標系を図に示す。
 なお、栽培する植物10、及び植物栽培装置1を設置する環境に応じて、積極的に筐体30内部の温度を調整できる空調装置、水耕液13の溶存酸素量を増やすためのエアポンプ、又は水耕液13を循環させる循環ポンプなどの設備を、植物栽培装置1が備えてもよい。また、植物栽培装置1における、植物10の栽培方法は、水耕栽培に限定されず、固体培地(培養土など)を植物栽培装置1の内部に配置してもよい。
 (植物10)
 まず、栽培する植物10について、説明する。
 植物10は、葉物野菜、実物野菜、根物野菜、又は花卉など、どのような植物であってもよい。
 葉物野菜としては、植物10は例えば、グレートレイクス、ジェンティリナグリーン、又はサラダボウルレッドのような様々な品種のレタス、サラダ菜、サンチュ、春菊、水菜、新芯菜、わさび菜、野沢菜、チンゲン菜、大葉、大和真菜、ルッコラ、ターサイ、小松菜、ビートオールレッド、或いは、イタリアンパセリ、スイートバジル、クレソン、パクチー、スペアミント、又はペパーミントのようなハーブなどであってもよい。また、十分に成長した後に収穫するのではなく、ベビーリーフとして、収穫することを目的に植物10を栽培してもよい。
 実物野菜としては、植物10は例えば、ミニトマトなどであってもよく、根物野菜としては、植物10は例えば、ミニかぶら、又はラディッシュなどであってもよい。
 植物10を栽培するための設備である、スポンジ11、フロート12、水耕液13、及び水耕液槽14は、水耕栽培のため周知技術であるため、説明を省略する。また、水耕栽培以外の栽培方法も周知技術であるため、説明を省略する。
 (植物栽培装置1)
 次に、植物栽培装置1について、図1及び図2に基づき説明する。
 筐体30は、イオン発生装置40が発生させた正イオン及び負イオンを筐体30の内部に保持できるように、送風装置22と通気孔23とを除き、扉31が閉じられた状態で、略気密に構成されている。また、筐体30は、筐体30の外部から内部(特に、植物10および水耕液13の水量)を観察及び鑑賞できるように、一部が無色透明な透光部材で構成されている。筐体30は、制御装置20、照明装置21、送風装置22、及び扉31を支持し、栽培されている植物10を保護できる構造体であればよく、その材質、形状及び大きさは限定されない。
 図2に示すように、制御装置20は、内部に温度センサ24と時計25と記憶装置26と制御部27とを備える。記憶装置26には、時刻に応じた照明装置21の照明時間及び照明光量のパターンと、筐体30内部の温度が保たれるべき所定範囲と、時刻に応じたイオン発生装置40の駆動パターンと、が記憶されている。制御部27は、時計25からの時刻情報に基づき、時刻に応じて照明装置21の照明時間及び照明光量を制御するとともに、温度センサ24からの温度情報に基づき、筐体30内部の温度を所定範囲内に保つように送風装置22の送風量を制御する。
 制御装置20の制御部27は、集積回路(ICチップ)等に形成された論理回路(ハードウェア)によって実現してもよいし、CPU(Central Processing Unit)を用いてソ
フトウェアによって実現してもよい。
 後者の場合、制御部27は、各機能を実現するソフトウェアであるプログラムの命令を実行するCPU、上記プログラムおよび各種データがコンピュータ(またはCPU)で読み取り可能に記録されたROM(Read Only Memory)または記憶装置(これらを「記録媒体」と称する)、上記プログラムを展開するRAM(Random Access Memory)などを備えている。そして、コンピュータ(またはCPU)が上記プログラムを上記記録媒体から読み取って実行することにより、本発明の目的が達成される。上記記録媒体としては、「一時的でない有形の媒体」、例えば、テープ、ディスク、カード、半導体メモリ、プログラマブルな論理回路などを用いることができる。また、上記プログラムは、該プログラムを伝送可能な任意の伝送媒体(通信ネットワークや放送波等)を介して上記コンピュータに供給されてもよい。なお、本発明は、上記プログラムが電子的な伝送によって具現化された、搬送波に埋め込まれたデータ信号の形態でも実現され得る。
 温度センサ24は、筐体30内部の空気の温度を感知するセンサである。加えて、制御装置20は、水耕液13の温度又は水量、または、筐体内部の空気の湿度又は二酸化炭素濃度を感知するセンサを備えてもよい。
 照明装置21は、植物10に上方から照明するように、筐体30の天面に設けられている。また、照明装置21は、発熱量の少ないLED(light emitting device)照明装置
であるが、筐体30の内部が過熱されないように放熱できるのであれば、特に限定されない。また、照明装置を設ける代わりに、外光(太陽光または屋内照明)を利用してもよい。
 送風装置22は、筐体30の外部から内部へ空気を吸う吸気ファンであり、通気孔23は、筐体30の内部から外部へ空気を排出する排気孔である。また、送風装置22と通気孔23とは、x方向に互いに向かい合うように、筐体30の壁面に設けられる。このため、図3に示すように、送風装置22と通気孔23とによる空気の流れFは、x方向に沿って流れ、z軸正方向に成長する植物10に対して側方から当たる(理想的には略直交するように当たる)ように、生じる(送風工程)。
 送風装置22のファンの回転数は、温度センサ24によって検出された温度が高くなると上昇する。この構成により、筐体30の内部の温度の上昇が抑制される。
 なお、送風装置22は、空気を排出する排気ファンであってもよく、この場合、通気孔23は空気を吸う吸気孔である。また、送風装置22と通気孔23とを組み合わせる代わりに、2つの送風装置22を設け、一方を吸気ファン、他方を排気ファンとしてもよい。また、筐体30の外部の空気の流れが十分にあれば、2つの通気孔23を設けてもよい。
 扉31は、水耕液槽14を、植物10を栽培している状態で、筐体30に出し入れできれば、特に配置および構成を限定しない。
 イオン発生装置40は、空気の流れFに沿うように、図1(b)に示すように、y軸負方向を向くように筐体30の壁面に設けられている。イオン発生装置40の詳細については後述する。筐体30の内部は、送風装置22と通気孔23とを除けば、密閉空間であるため、イオン発生装置40により生じた正イオンおよび負イオンは、空気の流れにより、筐体30内部に拡散する。
 筐体30内部の正イオン及び負イオンのそれぞれの濃度は、100万個/cm以上である。この正負イオンの濃度が保たれるように、制御部27がイオン発生装置40を制御してもよい。さらに、イオン発生装置40は、送風装置22により生じる空気の流れFが速いほど、より多くの正イオンおよび負イオンを効率的に拡散させる。このため、送風装置22のファンの回転数が大きいほど、筐体30内部の正負イオン濃度は、上昇する。
 (イオン発生装置40)
 次に、イオン発生装置40の構成について、説明する。
 イオン発生装置40は、本体に、高電圧パルスを発生させる高電圧発生回路と、正イオン発生部41と、負イオン発生部42とを備える。正イオン発生部41は、図示しないが、誘電電極と放電電極とを備え、高電圧発生回路によって発生された正電圧パルスが印加される。これにより、正イオン発生部41から、正イオンが発生する。同様に、負イオン発生部42も、誘電電極と放電電極とを備え、負電圧パルスが印加されことにより、負イオン発生部42から、負イオンが発生する。
 上述のイオン発生装置40の構成は、あくまで一例であり、所望の濃度の正イオン及び負イオンを発生可能な装置であれば、特に限定しない。
 次に、イオン発生装置40による効果について、説明する。
 イオン発生装置40により発生する正イオンは、H(HO)(mは任意の自然数)を主体とするイオンであり、負イオンは、O (HO)(nは任意の自然数)を主体とするイオンである。
 したがって、正イオン及び負イオンが、空気中に同時に存在すると、下記の(式1)及び(式2)に示すように、化学反応して活性酸素種である水酸基ラジカル(・OH)が効率的に生成されると考えられる。(n’及びm’は、それぞれ任意の自然数)
 H(HO)+O (HO)
  →・OH+1/2O+(m+n)HO  (式1)
 H(HO)+H(HO)’+O (HO)+O (HO)n’
  →2・OH+O+(m+m’+n+n’)HO  (式2)
 なお、正イオンのみまたは負イオンのみを空気中に放出した場合には、水酸基ラジカルは顕著には生成されず、正イオンおよび負イオンを同時に放出することで、水分子とクラスターを形成し安定化した正イオンと負イオンとが相互反応し、水酸基ラジカルの生成が顕著になると考えられる。
 生成された正イオンと負イオン、及び水酸基ラジカルの作用により、植物10は成長を促進されると考えられる。例えば、水酸基ラジカルは植物10に酸化ストレスを与え、植物10はこの酸化ストレスにより、成長を促進させると考えられる。
 植物10の栽培空間における正イオンおよび負イオンの濃度は、それぞれ100万個/cm以上であることが好ましい。
 なお、正イオン及び負イオンは、複数の植物個体に均一に照射されることが好ましいが、植物10の栽培空間の全てにおいて均一に正イオンおよび負イオンが分散している必要は必ずしもない。上述の正イオンおよび負イオンの濃度は、個々の植物10の周囲における好ましい濃度である。
 現在市販されているプラズマクラスター(シャープ社製)のうち、高濃度の正イオン及び負イオンを放出するものは、人間の居住空間に正負イオン濃度約10万個/cmの正イオン及び負イオンを放出する。それゆえ、植物10に照射される正負イオン濃度は、菌またはウイルスの除菌・不活化等を目的として人間の居住空間に放出される正負イオン濃度よりもかなり高いものである。
 正イオン及び負イオンは、植物10の生育を阻害しないため、栽培期間を通じて植物10に正イオン及び負イオンを照射すること(正負イオン照射工程)ができる。すなわち、植物10に対して、特に照射時間帯または照射期間を設定せずに連続的に照射してもよい。そのため、正イオン及び負イオンの照射時間帯および照射期間を細かく設定する必要はない。
 また、正イオン及び負イオンは、空気中の浮遊菌、浮遊ウイルス等を除菌・不活化する効果も有するため、植物栽培環境の除菌等もできるという付加的な効果も得られる。
 (効果)
 以上のように、イオン発生装置40により発生した正イオン及び負イオンにより、植物10の成長が促進される。これにより、植物10からの収穫量を増やすことができる。また、植物10を栽培する期間を短縮することができる。また、植物10の成長を観察または観賞等する目的で、植物栽培装置1を設置している場合、成長速度が速まることにより、植物10の成長に伴う変化を分かり易くすることができる。
 〔実施形態2〕
 本発明の他の実施形態について、図4に基づいて説明すれば、以下のとおりである。なお、説明の便宜上、前記実施形態にて説明した部材と同じ機能を有する部材については、同じ符号を付記し、その説明を省略する。
 図4は、実施形態2に係る植物栽培装置2の概略構成を示す図であり、上面断面図を示す。植物栽培装置2は、イオン発生装置40の配置を除き、前述の実施形態1に係る植物栽培装置1と同等である。
 したがって、以下には、植物栽培装置2におけるイオン発生装置40の配置、および、イオン発生装置40の配置の変更による効果のみを説明する。
 実施形態1に係る植物栽培装置1において、イオン発生装置40は、y軸負方向を向く筐体30の壁面に設けられており、空気の流れFに対して並列に配置されている。これに対し、実施形態2に係る植物栽培装置2において、イオン発生装置40は、x軸負方向を向く筐体30の壁面(送風装置22が設けられている壁面)に設けられており、空気の流れFの方向に直交し、空気の流れFの風上側にある。
植物栽培装置2においても、植物栽培装置1と同様に、イオン発生装置40は、送風装置22により生じる空気の流れFが速いほど、より多くの正イオンおよび負イオンを発生させ、筐体30内部の正イオン及び負イオンのそれぞれの濃度は、100万個/cm以上である。
 植物栽培装置2においては、植物栽培装置1と異なり、空気の流れFの風上側にイオン発生装置40があるため、イオン発生装置40により生じた正イオンおよび負イオンは、空気の流れFに乗り易く、筐体30内部でより均一に拡散する。このため、植物栽培装置2においては、複数の植物10により均一に、酸化ストレスを与え、複数の植物10の成長をより均一に促進することができる。
 また、イオン発生装置40の周りの空気が、空気の流れFにより、イオン発生装置40から遠ざかる。このため、イオン発生装置40は、効率的に正イオン及び負イオンを供給することができる。
 また、植物栽培装置2においては、空気の流れFを発生させる送風装置22の近傍に、イオン発生装置40が設けられている。このため、空気の流れFが同じ速さであっても、植物栽培装置1より植物栽培装置2において、空気の流れFに正イオンおよび負イオンが載り易い。したがって、植物栽培装置1より植物栽培装置2は、正負イオン濃度をより効果的に拡散させることができる。
 〔実施形態3〕
 本発明の具体的な実施例について、図1,図5~図17に基づいて説明すれば、以下のとおりである。なお、説明の便宜上、前記実施形態にて説明した部材と同じ機能を有する部材については、同じ符号を付記し、その説明を省略する。
 (実験条件)
 本実施例においては、イオン発生装置40により発生する正イオン及び負イオンによる効果を観察するために、植物栽培装置1に対応する植物栽培装置Aと植物栽培装置1からイオン発生装置40を除いた植物栽培装置Bとを用いて、以下の条件で図1のように、植物10の毛管水耕栽培を行う比較実験を行った。なお、2つの植物栽培装置A,Bにおける実験条件の差は、イオン発生装置40の有無のみである。
 植物栽培装置A:「Green Farm UH-A01E」(ユーイング株式会社から販売されている水耕栽培器)にイオン発生装置40を、図1に示した植物栽培装置1のように、取付け、駆動させた。
 植物栽培装置B:「Green Farm UH-A01E」をそのままを使用した。
 植物10:レタス(品種は、ジェンティリナグリーン。種は、ユーイング株式会社から販売されている。)
 スポンジ11、フロート12、及び水耕液槽14:「Green Farm UH-A01E」に付属の品
 水耕液13:「Green Farm UH-A01E」に付属の液体肥料を、蒸留水で約133倍に希釈した液
 栽培期間:25日
 栽培回数:3回
 照明パターン:最初の3日間(連続72時間)は、消灯。その後の22日間は、24時間のうち、「昼(6時~22時)」は点灯、「夜(0時~6時,22時~0時)」は消灯。
 間引き:植物10の種を15粒播き、栽培9日目に、10個体を残して間引いた。
 (観察及び測定)
 また、正イオン及び負イオンによる植物10への影響を、下記のように、観察及び測定した。
 栽培時の目視観察:栽培期間中、毎日、植物10の地上部を目視観察した。
 水耕液の細菌培養:栽培期間中、5日毎に、水耕液13を一部採取し、LB培地にて、37℃,暗所,24時間培養した。
 収穫時の目視観察:栽培期間後、植物10を地上部と根とに分けて収穫し、収穫した植物10の各個体の地上部と根とを目視観察した。
 新鮮重量の測定:収穫した植物10の各個体の地上部と根との新鮮重量を測定した。
 長さの測定:収穫した植物10の各個体の地上部の最大葉長と根の最大根長とを測定した。
 葉数の測定:収穫した植物10の各個体の地上部の葉数を数えた。
 葉色値の測定:収穫した植物10の各個体の地上部のクロロフィルaおよびクロロフィルbの含有量を測定した。
 乾燥重量の測定:収穫した植物10の地上部と根とを乾燥し、各個体の地上部と根との乾燥重量を測定した。
 成分測定:収穫した植物10の各個体の地上部の乾燥重量あたりの含有重量を、硝酸イオン(NO )およびシュウ酸について測定した。
 (実験結果)
 図5は、栽培期間の25日目の(a)植物栽培装置A(イオン発生装置40あり)と(b)植物栽培装置B(イオン発生装置40なし)とにおける植物10の様子を撮影した写真の写しである。
 栽培時の目視観察によれば、3回の比較実験とも、図5に示されるように、植物栽培装置Bで栽培されている植物10と比較して、植物栽培装置Aで栽培されている植物10は、葉が大きく、葉の色艶がよく、全体的な成長が良好であった。したがって、植物10は、イオン発生装置40による正イオン及び負イオンにより、成長が促進されたと考えられる。
 水耕液の細菌培養によれば、3回とも、植物栽培装置Bから採取した水耕液13を塗布したLB培地に比べて、植物栽培装置Aから採取した水耕液13を塗布したLB培地は、発生したコロニーの数が、明らかに少なかった。したがって、イオン発生装置40による正イオン及び負イオンにより、空気中の浮遊菌、及び浮遊ウイルスなどを除菌・不活性化することを通じて、水耕液13中の細菌量が抑制されたと推定される。また、正イオン及び負イオンが水耕液13中の細菌に直接作用した可能性も考えられる。
 図6は、(a)植物栽培装置Aと(b)植物栽培装置Bとにおける植物10の根を撮影した写真の写しである。
 収穫時の目視観察によれば、3回とも、植物栽培装置Bで栽培された植物10と比較して、植物栽培装置Aで栽培された植物10は、色が良く、葉が大きく、地上部の背が高く、図6に示されるように、根が良く発達していた。そして、上述の栽培時及び収穫時の目視観察は、最大葉長、葉数、地上部の新鮮重量、地上部の乾燥重量、根長、根の新鮮重量、根の乾燥重量、および葉色値の測定により、裏付けられた。
 図7は、第1~3回の比較実験で収穫された植物10の各個体の(a)最大葉長、(b)葉数、(c)地上部の新鮮重量、及び(d)地上部の乾燥重量の平均と偏差とを示す柱状グラフである。図8は、第1~3回の比較実験で収穫された植物10の各個体の(a)根長、(b)根の新鮮重量、及び(c)根の乾燥重量の平均と偏差とを示す柱状グラフである。また図7及び図8のそれぞれにおいて、左側のグラフが植物栽培装置Aで栽培された植物10の測定結果を示し、右側のグラフが植物栽培装置Bで栽培された植物10の測定結果を示す。*は有意差(P<0.05)があることを示す。
 図7及び図8に示すように、地上部及び根の新鮮重量、地上部及び根の乾燥重量、最大葉長及び最大根長のいずれについても、植物栽培装置Aで栽培された植物10は、植物栽培装置Bで栽培された植物10より大きい値を示した。
 T検定によれば、上述の結果は、最大葉長、葉数、地上部の新鮮重量、地上部の乾燥重量、根長、根の新鮮重量、及び根の乾燥重量において、有意確率5%で有意であった。
 葉色値の測定によれば、クロロフィルa及びクロロフィルbの含有量についても、植物栽培装置Aで栽培された植物10は、植物栽培装置Bで栽培された植物10よりも若干大きい値を示した(データは示さず)。
 したがって、イオン発生装置により、正イオン及び負イオンが発生することにより、植物10の成長が促進されたと結論できる。
 図9は、植物10の(a)硝酸イオン(NO )および(b)シュウ酸の乾燥重量あたりの含有重量の平均と偏差とを示す柱状グラフであり、各左側のグラフが植物栽培装置Aから収穫された植物10の測定結果を示し、各右側のグラフが植物栽培装置Bから収穫された植物10の測定結果を示す。*は有意差(P<0.05)があることを示す。
 図9に示すように、硝酸イオンについて、植物栽培装置Aで栽培された植物10は、植物栽培装置Bで栽培された植物10より大きい値を示した。また、シュウ酸について、物栽培装置Aで栽培された植物10は、植物栽培装置Bで栽培された植物10より小さい値を示した。T検定によれば、硝酸イオン、及びシュウ酸についての結果は、有意確率5%で有意であった。さらに、片側F検定によっても、硝酸イオンについての結果は、有意確率5%で有意であった。
 (RNAシークエンス解析)
 イオン発生装置40により発生する正イオン及び負イオンによる植物10(レタス(品種:ジェンティリナグリーン))の生育量の変化の要因を調べるため、植物栽培装置1に対応する植物栽培装置Aと、植物栽培装置1からイオン発生装置40を除いた植物栽培装置Bとを用いて、以下の条件で、植物10のRNAシークエンス解析を行った。なお、2つの植物栽培装置A,Bにおける実験条件の差は、イオン発生装置40の有無のみである。
 (実験条件)
 栽培期間の24日目の植物10の各個体の地上部の葉から、リーフパンチ(φ12mm)を用いてサンプルを採取し、RNeasy Plant Mini Kit(QIAGEN社製)により、植物10の各個体の地上部の葉のRNAを抽出した。SureSelect Strand-Specific RNA Library Prep for Illumina Multiplexed Sequencing(Agilent社製)によりライブラリ調製を行い、MiSeq(Illumina社製)によるRNAシークエンス解析を行った。
 (解析結果)
 図10は、植物栽培装置Aと植物栽培装置Bとにおいて栽培された植物10の葉のRNAシークエンスの結果を示す。「PCI100区」は、実施例の植物栽培装置Aで栽培された植物、「PCI0区」は、比較例の植物栽培装置Bで栽培された植物の結果を示す。また、図11は、植物栽培装置Aと植物栽培装置Bとにおいて栽培された植物10の葉における、遺伝子発現量の違いを示すMAプロットの結果を示す図である。横軸logCPMは、100万本のショートリード中、そのコンティグに関わるショートリードの本数を相対的に算出し、底を2としてとった対数である。logCPMの値が大きいほど、植物10において恒常的に高い発現量を示しているコンティグであることを、logCPMの値が小さいほど、植物10において発現量がもともと低いコンティグであることを示す。また、縦軸logFCは、底を2とした対数であり、実施例の植物栽培装置Aで栽培された植物と比較例の植物栽培装置Bで栽培された植物とのコンティグの発現量の違いを示す指標である。logFCが正の値を取るコンティグは、植物栽培装置Bで栽培された植物に対して、植物栽培装置Aで栽培された植物で発現量が増加した(すなわち、正イオン及び負イオンの照射によって発現量が増加した)ことを意味している。logFCが負の値を取るコンティグは、植物栽培装置Bで栽培された植物に対して植物栽培装置Aで栽培された植物で発現が減少した(すなわち、正イオン及び負イオンの照射によって発現量が減少した)ことを意味する。各プロットは各々コンティグを示し、白色のプロットは正イオン及び負イオンの照射によって有意(P<0.05)に発現量が増加あるいは減少したコンティグを示し、黒色のプロットは、正イオン及び負イオンの照射によって発現量に有意な差が見られなかったコンティグを示す。
 図10に示されるように、RNAシークエンス解析の結果、52,503のコンティグ配列が得られ(図10の「コンティグ」参照)、そのうちの28,298コンティグにBLASTプログラムによってアノテーションが付加された(図10の「BLASTXにおけるアノテーション」参照)。また、図10および図11に示されるように、植物栽培装置Bにおける植物10と比較して、植物栽培装置Aにおける植物10において、有意に発現量が増加したコンティグは113個(図10の「上方制御」参照)、低下したコンティグは44個(図10の「下方制御」参照)存在した。
 図12A~図12Jは、植物栽培装置Aと植物栽培装置Bとにおける植物10の葉を用いて行ったRNAシークエンスで得られたコンティグの発現様式、および上記得られたコンティグに対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果の一覧を示す図である。図12A~図12Jに示されている各数値の意義を次に示す。
logFC:コンティグの発現量の違いを示す指標
logCPM:コンティグに関わるリードの本数の指標
PValue(P値):仮説検定における有意水準の指標
FDR(偽発見率):多重検定における有意水準の指標
PCN_L2:植物栽培装置Bにおける植物10の各コンティグのリード数
PCN_L7:植物栽培装置Bにおける植物10の各コンティグのリード数
PCN_L9:植物栽培装置Bにおける植物10の各コンティグのリード数
PCP_L2:植物栽培装置Aにおける植物10の各コンティグのリード数
PCP_L7:植物栽培装置Aにおける植物10の各コンティグのリード数
PCP_L9:植物栽培装置Aにおける植物10の各コンティグのリード数
gi:NCBIに登録されている遺伝子ID
EValue(E値):BLASTプログラムによるアノテーションの指標
BLASTX:BLASTプログラムによるアノテーションの結果。
 図12A~図12Jに示されるように、植物栽培装置Bにおける植物10(PCI0区)と比較して、植物栽培装置Aにおける植物10(PCI100区)において、有意に発現量が変動した遺伝子のうち、特に、イオン発生装置40による正イオン及び負イオンにより、硫黄代謝に関与する遺伝子群の発現変動が見られた。
 図13A~図13Jは、植物栽培装置Aと植物栽培装置Bとにおける植物10の葉を用いて行ったRNAシークエンスで同定されたコンティグに対するBLASTプログラムによるアノテーションの結果を元に行った、遺伝子オントロジーエンリッチメント解析の結果を示す。図13A~図13Jに示す各クラスは、次に示す概念に基づいて分類されている。
クラスBP(Biological Process):生物学的なプロセス
クラスCC(Cellular Component):細胞の構成要素
クラスMF(Molecular Function):分子としての機能。
 図13A~図13Jに示されるように、遺伝子オントロジーエンリッチメント解析の結果、「生命に関する刺激に対する反応(図13Aの“response to biotic stimulus”)」に関連する遺伝子の発現量が、植物栽培装置Aにおける植物10において、Zscoreで-3.90低下した。
 (メタボローム解析)
 イオン発生装置40により発生する正イオン及び負イオンによる植物10の生育量の変化の要因を調べるため、植物栽培装置1に対応する植物栽培装置Aと植物栽培装置1からイオン発生装置40を除いた植物栽培装置Bとを用いて、以下の条件で、植物10のメタボローム解析を行った。なお、2つの植物栽培装置A,Bにおける実験条件の差は、イオン発生装置40の有無のみである。
 (実験条件)
 栽培期間の25日目の植物10(レタス(品種:ジェンティリナグリーン))の各個体の地上部の葉を用いてサンプルとし、上記サンプルに500μLのメタノール溶液(50μM)を加え、冷却下にて破砕機を用いて破砕(1500rpm,120秒×1回)した。上記サンプルの破砕後、500μLのクロロホルム及び200μLのMilli-Q水を加えて撹拌し、遠心分離(2,300×g,4°C,5分)を行った。上記遠心分離後、水層を限外ろ過チューブ(ウルトラフリーMC PLHCC,HMT,遠心式フィルターユニット 5kDa)に400μL×1本移し取った。これを遠心(9,100×g,4°C,120分)し、限外ろ過処理を行った。得られたろ液を乾固させ、乾固させたろ液を再び50μLのMilli-Q水に溶解して、得られた溶解液に対してCE-TOFMS(キャピラリー電気泳動-飛行時間型質量分析計)のカチオンモードおよびアニオンモードの測定を実施した。
 CE-TOFMSのカチオンモードおよびアニオンモードの測定は、以下に示す条件で行った。
 (i)陽イオン性代謝物質測定条件(カチオンモード)
 装置:Agilent CE-TOFMS system(Agilent Technologies 社)
 キャピラリー: Fused silica capillary i.d. 50 μm × 80 cm。
 ランバッファー: Cation Buffer Solution (p/n : H3301-1001)
 リンスバッファー: Cation Buffer Solution (p/n : H3301-1001)
 サンプル注入: 50 mbar, 10秒
 CE電圧: Positive, 27 kV
 MSイオン化: ESI Positive
 MSキャピラリー電圧: 4,000 V
 MSスキャン範囲: m/z 50-1,000
 シース液: HMTシース液(p/n : H3301-1020)。
 (ii)陰イオン性代謝物質測定条件(アニオンモード)
 装置:Agilent CE-TOFMS system(Agilent Technologies 社)
 キャピラリー: Fused silica capillary i.d. 50 μm × 80 cm。
 ランバッファー: Anion Buffer Solution (p/n : H3302-1021)
 リンスバッファー: Anion Buffer Solution (p/n : H3302-1021)
 サンプル注入: 50 mbar, 25秒
 CE電圧: Positive, 30 kV
 MSイオン化: ESI Negative
 MSキャピラリー電圧: 3,500 V
 MSスキャン範囲: m/z 50-1,000
 シース液: HMTシース液(p/n : H3301-1020)。
 CE-TOFMSで検出されたピークについては、自動積分ソフトウェアのMasterHands ver.2.17.1.11(慶應義塾大学開発)を用いて、シグナル/ノイズ(S/N)比が3以上のピークを自動抽出した。自動抽出したピークについて、質量電荷比(m/z)、ピーク面積値および泳動時間(MT)を得た。得られたピーク面積値は、下記の式3を用いて相対面積値に変換した。また、これらのデータにはNaやKなどのアダクトイオン及び、脱水、脱アンモニウムなどのフラグメントイオンが含まれているため、これらのイオンを削除し、上記自動抽出したピークを精査した。上記自動抽出されたピークについて、m/zおよびMTの値をもとに、各サンプル間のピークの照合・整列化を行った。
式3
Figure JPOXMLDOC01-appb-I000001
 HMT代謝物質ライブラリ及びKnown-Unknownライブラリに登録された物質のm/z及びMTの値から、候補化合物を絞り込み、上記候補化合物について、植物栽培装置Bにおける植物10(PCI0区)と植物栽培装置Aにおける植物10(PCI100区)とにおける相対面積値比の算出及びウェルチのT検定を実施した。
 上記相対面積値の比およびT検定の結果を、代謝物質定量データの代謝経路マップへ描画した。代謝経路の描画には、VANTED(Visualization and Analysis of Networks containing Experimental Data)を用いた。
 (解析結果)
 メタボローム解析の結果、HMT代謝物質ライブラリ及びKnown-Unknownライブラリに登録された物質の、m/z及びMTの値から、102ピーク(カチオン66ピーク,アニオン36ピーク)に候補化合物が付与された。
 図14は、植物栽培装置A(PCI100区)と植物栽培装置B(PCI0区)とにおける植物10の葉を用いたメタボローム解析の結果の一部を、TCAサイクル及び尿素サイクル代謝経路上に描画した図である。各代謝産物に記載された柱状グラフは、植物栽培装置Aで栽培された植物および植物栽培装置Bで栽培された植物における、各代謝産物の相対面積値を示す。
 図15は、植物栽培装置A(A)と植物栽培装置B(B)とにおける植物10の葉を用いたメタボローム解析結果のうち、一部のアミノ酸の蓄積量の解析結果を相対面積値で示す。*は有意差(P<0.05)があることを示す。
 図15に示されるように、Asn(アスパラギン)およびThr(トレオニン)について、植物栽培装置Aで栽培された植物10は、植物栽培装置Bで栽培された植物10より有意に大きい値を示した。また、T検定によれば、上述の結果は、有意確率5%で有意であった。
 図16は、植物栽培装置A(A)と植物栽培装置B(B)とにおける植物10の葉を用いたメタボローム解析結果のうち、代謝経路図に描画されなかった代謝物質の蓄積量の解析結果を相対面積値で示す。*は有意差(P<0.05)があることを示す。
 図16に示されるように、エタノールアミン、グリセロリン酸コリンおよびトリゴネリンについて、植物栽培装置Aで栽培された植物10は、植物栽培装置Bで栽培された植物10より有意に大きい値を示した。また、T検定によれば、上述の結果は、有意確率5%で有意であった。
 図17は、図14に示す代謝産物の生合成に関わる遺伝子に対応するコンティグのうち、上記RNAシークエンスによって同定されたコンティグのリストを示す図である。図17において各々、(1)は、図14中の、N-アセチルグルタミン酸セミアルデヒドからN-AcOrnに伸びる点線矢印、(2)は、図14中の、N-AcGlu-PからN-アセチルグルタミン酸セミアルデヒドに伸びる点線矢印、(3)は、図14中の、GluからN-AcGluに伸びる太線矢印、(4)は、図14中の、2-OGからGluに伸びる太線矢印、(5)は、図14中の、Argからアグマチンに伸びる点線矢印、(6)は、図14中の、Proからヒドロキシプロリンに伸びる太線矢印、(7)は、図14中の、GSSGからGSHに伸びる点線矢印、(8)は、図14中の、クエン酸からcis-アコニット酸およびcis-アコニット酸からイソクエン酸に伸びる太線両矢印が示す反応に関連する遺伝子であることを示す。
 〔まとめ〕
 本発明の態様1に係る植物栽培方法は、植物の成長を促進する植物栽培方法であって、上記植物に正イオンおよび負イオンを照射する正負イオン照射工程を含んでいる。
 上記方法によれば、照射された正イオン及び負イオンからラジカルが生じる。この正イオンと負イオン、及びラジカルの作用(例えば、ラジカルによる酸化ストレス)により、植物の成長が促進されると推測される。
 正イオン及び負イオンは、植物の成長に悪影響を及ぼさないことが確認されており、正イオン及び負イオンを照射する条件を厳密に設定する必要はない。このため、簡易な方法で植物の成長を促進することができる。
 本発明の態様2に係る植物栽培方法は、上記の態様1において、上記植物が成長する方向に対して、直交するように空気の流れを発生させる送風工程を含み、上記正負イオン照射工程と上記送風工程とは、同時に行われる方法としてもよい。
 上記方法によれば、正負イオン照射工程において照射される正イオン及び負イオンは、空気の流れにより拡散する。この拡散によって、複数の植物に均一に正イオン及び負イオンを照射することができる。
 本発明の態様3に係る植物栽培方法は、上記の態様2において、上記正負イオン照射工程において、前記植物に対して上記空気の流れの風上側で、正イオンおよび負イオンを発生させる方法としてもよい。
 上記方法によれば、風上側で正イオンおよび負イオンは風下側に流されるため、より均一に拡散される。このより均一な拡散により、複数の植物により均一に正イオン及び負イオンを照射することができる。
 本発明の態様4に係る植物栽培方法は、上記の態様1から3の何れか1項において、前記正イオンは、H(HO)(mは任意の自然数)を主体とするイオンであり前記負イオンは、O (HO)(nは任意の自然数)を主体とするイオンである方法としてもよい。
 上記方法によれば、H(HO)とO (HO)とから活性酸素種である水酸基ラジカルが生じる。
 本発明の態様5に係る植物栽培方法は、上記の態様1から4の何れか1項において、前記植物の周囲の空間における前記正イオンおよび前記負イオンの濃度は、それぞれ100万個/cm以上である方法としてもよい。
 上記方法によれば、酸化ストレスに対抗するための結果としての植物の成長の促進は、正イオンおよび負イオンの濃度に依存しており、正イオンおよび負イオンの濃度がそれぞれ100万個/cm以上であれば、植物10の成長は、顕著に促進される。
 本発明の態様6に係る植物栽培方法は、上記の態様1から5の何れか1項において、前記植物の新鮮重量、乾燥重量、葉数、葉の長さ、根の長さ、および硝酸イオン含有量の何れかを増加させるか、あるいは、シュウ酸含有量を減少させる方法としてもよい。
 本発明の態様7に係る植物栽培方法は、上記の態様1から6の何れか1項において、前記正負イオン照射工程は、前記植物の栽培期間において、連続的に行われる方法としてもよい。
 上記方法によれば、正イオン及び負イオンは、植物の成長に悪影響を及ぼさないことが確認されており、連続的な照射が可能である。
 本発明の態様8に係る植物栽培装置は、植物の成長を促進する植物栽培装置であって、上記植物が栽培されている空間に正イオンおよび負イオンを発生させるイオン発生装置を備える構成である。
 上記構成によれば、イオン発生装置が発生させる正イオン及び負イオンからラジカルが生じる。この正イオンと負イオン、及びラジカルラジカルの作用(例えば、ラジカルによる酸化ストレス)により、植物の成長が促進されると推測される。
 正イオン及び負イオンは、植物の成長に悪影響を及ぼさないことが確認されており、正イオン及び負イオンを発生させる条件を厳密に設定する必要はない。このため、簡易な構成で植物の成長を促進することができる。
 本発明は上述した各実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。さらに、各実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を組み合わせることにより、新しい技術的特徴を形成することができる。
 1、2 植物栽培装置
 10 植物
 11 スポンジ
 12 フロート
 13 水耕液
 14 水耕液槽
 20 制御装置
 21 照明装置
 22 送風装置
 23 通気孔
 24 温度センサ
 25 時計
 26 記憶装置
 27 制御部
 30 筐体
 31 扉
 40 イオン発生装置
 41 正イオン発生部
 42 負イオン発生部
 F 空気の流れ

Claims (5)

  1.  植物の成長を促進する植物栽培方法であって、
     上記植物に正イオンおよび負イオンを照射する正負イオン照射工程を含むことを特徴とする植物栽培方法。
  2.  上記植物の側方に当たるように空気の流れを発生させる送風工程を含み、
     上記正負イオン照射工程と上記送風工程とは、同時に行われ、
     上記正負イオン照射工程において、上記植物に対して上記空気の流れの風上側で、正イオンおよび負イオンを発生させることを特徴とする請求項1に記載の植物栽培方法。
  3.  上記植物の周囲の空間における上記正イオンおよび上記負イオンの濃度は、それぞれ100万個/cm以上であることを特徴とする請求項1または2に記載の植物栽培方法。
  4.  上記植物の新鮮重量、乾燥重量、葉数、葉の長さ、根の長さ、および硝酸イオン含有量の何れかを増加させるか、
     あるいは、シュウ酸含有量を減少させることを特徴とする請求項1から3の何れか1項に記載の植物栽培方法。
  5.  植物の成長を促進する植物栽培装置であって、
     上記植物が栽培されている空間に正イオンおよび負イオンを発生させるイオン発生装置を備えることを特徴とする植物栽培装置。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2025197766A1 (ja) * 2024-03-19 2025-09-25 シャープ株式会社 植物栽培方法

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10863679B2 (en) * 2016-09-08 2020-12-15 Fork Farms Holdings, Llc Modular plant growth apparatus
US11540452B2 (en) 2016-12-14 2023-01-03 Mankaew MUANCHART Air movement control and air source device for cultivation
US10667472B2 (en) * 2016-12-14 2020-06-02 Mankaew MUANCHART Air movement control and air source device for cultivation
NL2018324B1 (nl) * 2017-02-07 2018-09-03 Priva Holding B V Werkwijze en inrichting voor het telen van een gewas
JP6207001B1 (ja) * 2017-03-23 2017-10-04 eアグリテック株式会社 植物育成促進システム
US20180325040A1 (en) * 2017-05-09 2018-11-15 Casa Flora, Inc. Plant Material Containers and Methods
US11233688B2 (en) * 2018-02-23 2022-01-25 Qualcomm Incorporated Physical downlink control channel (PDCCH) aggregation level (AL) design for new radio (NR) ultra-reliable low latency communication (URLLC)
US11707027B2 (en) 2019-12-02 2023-07-25 Fork Farms Holdings, Llc Hydroponic grow assembly
US20230066266A1 (en) * 2021-08-27 2023-03-02 Geoffrey C. Landis Aqueous grow nutrient control system and calibration
CN117694230A (zh) * 2024-01-30 2024-03-15 贵州省园艺研究所(贵州省园艺工程技术研究中心) 一种白菜培养装置
CN119655075A (zh) * 2024-11-20 2025-03-21 深圳市朗科智能电气股份有限公司 一种利用负离子促进生菜生长的控制方法和系统

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3002226B2 (ja) * 1990-04-19 2000-01-24 石川島播磨重工業株式会社 植物生長促進方法および装置
JP2008011830A (ja) * 2006-07-10 2008-01-24 Sharp Corp キノコの栽培方法およびキノコの生育障害を低減する方法
JP2012135288A (ja) * 2010-12-27 2012-07-19 Sharp Corp 色素蓄積促進システム、イオン発生装置および色素蓄積促進方法
JP2013223457A (ja) * 2012-04-23 2013-10-31 Sharp Corp 植物育成方法および植物育成装置
JP2015008673A (ja) * 2013-06-28 2015-01-19 シャープ株式会社 植物栽培装置

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5117579A (en) * 1991-02-15 1992-06-02 Tellefson Willis A Method and apparatus for applying fixed nitrogen to plants
JP2012161244A (ja) * 2011-02-03 2012-08-30 Tokyo Electron Ltd 植物育成光源ユニットおよび植物育成システム
KR101283915B1 (ko) * 2012-09-25 2013-07-16 (주)유양디앤유 작물의 발아 및 육묘 환경을 제공하는 조사료 재배장치
US20150105716A1 (en) * 2013-01-16 2015-04-16 Orteron (T.O) Ltd. Physical means and methods for inducing regenerative effects on living tissues and fluids
US20150070812A1 (en) * 2013-09-12 2015-03-12 Jimmy Luther Lee Solar powered plant ionizer
PT3199673T (pt) * 2014-09-24 2020-10-15 Kai Li Huang Fibra de controle ambiental de energia verde, método de fabricação e tecidos feitos pelo mesmo

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3002226B2 (ja) * 1990-04-19 2000-01-24 石川島播磨重工業株式会社 植物生長促進方法および装置
JP2008011830A (ja) * 2006-07-10 2008-01-24 Sharp Corp キノコの栽培方法およびキノコの生育障害を低減する方法
JP2012135288A (ja) * 2010-12-27 2012-07-19 Sharp Corp 色素蓄積促進システム、イオン発生装置および色素蓄積促進方法
JP2013223457A (ja) * 2012-04-23 2013-10-31 Sharp Corp 植物育成方法および植物育成装置
JP2015008673A (ja) * 2013-06-28 2015-01-19 シャープ株式会社 植物栽培装置

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2025197766A1 (ja) * 2024-03-19 2025-09-25 シャープ株式会社 植物栽培方法

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