WO2017109266A1 - Diagnosis of soft tissue cancer - Google Patents

Diagnosis of soft tissue cancer Download PDF

Info

Publication number
WO2017109266A1
WO2017109266A1 PCT/ES2016/070933 ES2016070933W WO2017109266A1 WO 2017109266 A1 WO2017109266 A1 WO 2017109266A1 ES 2016070933 W ES2016070933 W ES 2016070933W WO 2017109266 A1 WO2017109266 A1 WO 2017109266A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
chromosome
nucleotide
stat6
genes
rearrangement
Prior art date
Application number
PCT/ES2016/070933
Other languages
Spanish (es)
French (fr)
Inventor
Michele BISCUOLA
Enrique DE ÁLAVA CASADO
Original Assignee
Servicio Andaluz De Salud
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Servicio Andaluz De Salud filed Critical Servicio Andaluz De Salud
Publication of WO2017109266A1 publication Critical patent/WO2017109266A1/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids

Abstract

The invention relates to methods for the diagnosis of soft tissue cancer, to a kit or device, and to uses.

Description

Diagnóstico del cáncer de tejidos blandos  Soft tissue cancer diagnosis
CAMPO DE LA INVENCIÓN FIELD OF THE INVENTION
La presente invención se encuentra dentro del campo de la Biología Molecular y la Medicina Clínica. Específicamente, se refiere a un método de obtención de datos útiles para el diagnóstico del cáncer, preferiblemente cáncer de tejidos blandos. The present invention is within the field of Molecular Biology and Clinical Medicine. Specifically, it refers to a method of obtaining useful data for the diagnosis of cancer, preferably soft tissue cancer.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN BACKGROUND OF THE INVENTION
Los sarcomas de hueso y partes blandas son tumores poco frecuentes pero con alto grado de malignidad que incluyen una amplia familia constituida de más de 50 subtipos histológicos distintos que comparten como principal característica su diferenciación mesenquimal. Bone and soft tissue sarcomas are rare tumors but with a high degree of malignancy that include a large family consisting of more than 50 different histological subtypes that share their main characteristic mesenchymal differentiation.
En el caso de los sarcomas de partes blandas, la extirpación quirúrgica sigue siendo el tratamiento principal aunque alrededor de un 40% de los pacientes presentan recaídas y metástasis distales que finalmente terminan con el fallecimiento de los mismos. El Tumor Fibroso Solitario (TFS) y el Hemangiopericitoma (HPC) son tumores de partes blandas cuyo origen y clasificación clínico-patológica ha sido tema de debate durante muchos años. Consideradas inicialmente como entidades distintas y en muchas ocasiones confundidas a nivel histológico, desde la última clasificación de la Organización Mundial de la Salud (OMS, 2013) se han considerado como dos variantes solapantes de la misma neoplasia mesenquimal de origen probablemente fibroblástico. La modificación de la clasificación se ha basado en los recientes hallazgos moleculares puestos en evidencia mediante la nueva tecnología de secuenciación masiva (Next Generation Sequencing NGS) descritos en los trabajos de Mohajerief al., 2013. Genes Chromosomes Cáncer. Oct; 52(10): 873-86, Robinson et al., 2013. Nat. Genet. Feb; 45(2): 180-5 y Chmieleckief al. 2013. Nat. Genet. Feb;45(2): 131-2.En estos trabajos, mediante el análisis a través de la tecnología NGS de amplias series retrospectivas de tumores TFS y HPC se ha podido identificar una alteración molecular en el cromosoma 12q13 constituida por una inversión seguida de una traslocación de los genes NAB2 y STAT6. Debido a este reordenamiento intragénico, que puede involucrar distintos exones de ambos genes, se produce una sobreexpresión de la proteína STAT6 en los núcleos de las células tumorales. In the case of soft tissue sarcomas, surgical removal remains the main treatment although about 40% of patients have relapses and distal metastases that eventually end with their death. Solitary Fibrous Tumor (TFS) and Hemangiopericytoma (HPC) are soft tissue tumors whose origin and clinical-pathological classification has been the subject of debate for many years. Initially considered as distinct entities and in many cases confused at histological level, since the last classification of the World Health Organization (WHO, 2013) they have been considered as two overlapping variants of the same mesenchymal neoplasm of probably fibroblastic origin. The modification of the classification has been based on the recent molecular findings evidenced by the new mass sequencing technology (Next Generation Sequencing NGS) described in the works of Mohajerief al., 2013. Genes Chromosomes Cancer. Oct; 52 (10): 873-86, Robinson et al., 2013. Nat. Genet. Feb; 45 (2): 180-5 and Chmieleckief al. 2013. Nat. Genet. Feb; 45 (2): 131-2. In these studies, through the NGS technology analysis of large retrospective series of TFS and HPC tumors it has been possible to identify a molecular alteration in chromosome 12q13 constituted by an inversion followed by a translocation of the NAB2 and STAT6 genes. Due to this intragenic rearrangement, which may involve different exons of both genes, overexpression of the STAT6 protein occurs in the nuclei of the tumor cells.
Para los TFS/HPC la intervención quirúrgica sigue siendo la primera elección clínica. En estos últimos años, a la par de los últimos hallazgos moleculares descritos, se han puesto en marcha distintos ensayos clínicos para poder encontrar fármacos efectivos para el tratamiento de estas neoplasias y dirigidos a dianas terapéuticas, pero nunca hay que olvidar que el mejor abordaje clínico-quirúrgico empieza con un adecuado diagnóstico histológico. Los TFS se pueden clasificar según tres variantes más o menos aceptadas a nivel internacional: 1) TFS Típico, normalmente de buen pronóstico; 2) TFS Maligno; 3) TFS Desdiferenciado, estos últimos de pronóstico más infausto. Llegar a un diagnóstico histológico claro requiere en distintas ocasiones herramientas complementarias a las que se encuentran habitualmente a disposición de los patólogos, como pueden ser la Inmunohistoquímica o la Patología Molecular. La detección de la expresión proteica a nivel nuclear de la proteína STAT6 se ha descrito como una herramienta muy útil a nivel de la rutina diagnóstica (Kao YC et al., 2015. Histopathology. Jul 7 y Tai HC et al., 2015. Mod. Pathol. Oct; 28 (10): 1324-35) pero que lamentablemente no sirve para detectar todos los reordenamientos posibles que se pueden producir entre los genes NAB2-STAT6, ya que en algunas ocasiones las porciones génicas involucradas no dan lugar a ninguna proteína viable. For TFS / HPC, surgical intervention remains the first clinical choice. In recent years, along with the latest molecular findings described, different clinical trials have been launched to find effective drugs for the treatment of these neoplasms and aimed at therapeutic targets, but we must never forget that the best clinical approach -Surgical begins with an adequate histological diagnosis. The TFS can be classified according to three more or less internationally accepted variants: 1) Typical TFS, usually of good prognosis; 2) Malignant TFS; 3) Deferred TFS, the latter prognosis more infamous. Reaching a clear histological diagnosis requires, on different occasions, complementary tools to those that are usually available to pathologists, such as Immunohistochemistry or Molecular Pathology. The detection of nuclear protein expression of the STAT6 protein has been described as a very useful tool at the diagnostic routine level (Kao YC et al., 2015. Histopathology. Jul 7 and Tai HC et al., 2015. Mod Pathol. Oct; 28 (10): 1324-35) but that unfortunately does not serve to detect all possible rearrangements that can occur between the NAB2-STAT6 genes, since sometimes the gene portions involved do not give rise to any viable protein
Por tanto, la detección de los reordenamientos del gen STAT6 mediante estudios de citogenética molecular o biología molecular representa la mejor opción de estudio. Es necesario el desarrollo de herramientas eficientes en este campo que permitan la detección de dichos reordenamientos con el fin de diagnosticar a individuos que padecen un cáncer, preferiblemente, cáncer de tejidos blandos, y aún más preferiblemente Tumor Fibroso Solitario (TFS) y Hemangiopericitoma (HPC). Therefore, the detection of rearrangements of the STAT6 gene by means of molecular cytogenetic or molecular biology studies represents the best study option. It is necessary to develop efficient tools in this field that allow the detection of such rearrangements in order to diagnose individuals suffering from cancer, preferably soft tissue cancer, and even more preferably Solitary Fibrous Tumor (TFS) and Hemangiopericytoma (HPC ).
BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Un primer aspecto de la invención se refiere a un método para detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 en un cromosoma de una muestra biológica que comprende: poner en contacto dicha muestra biológica con dos sondas, de ahora en adelante sondas de la invención, una primera sonda específica para la región 57374319 - 57490959 del cromosoma 12 humano, y una segunda sonda específica para la región 57501389 - 57668584 del cromosoma 12 humano, donde si se observa una única señal para cada sonda y dichas señales son adyacentes, no ha habido reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2, y donde si se observa más de una única señal para cada sonda y/o dichas señales no son adyacentes, ha habido reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2. BRIEF DESCRIPTION OF THE INVENTION A first aspect of the invention relates to a method for detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes in a chromosome of a biological sample comprising: contacting said biological sample with two probes, hereinafter probes of the invention, a first probe specific for region 57374319-57490959 of human chromosome 12, and a second probe specific for region 57501389-57668584 of human chromosome 12, where if a single signal is observed for each probe and said signals are adjacent, there has been no rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes, and where if more than a single signal is observed for each probe and / or said signals are not adjacent, there was rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes.
Un segundo aspecto de la invención se refiere a un método de obtención de datos útiles para el diagnóstico del cáncer, de ahora en adelante segundo método de la invención, que comprende detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 en una muestra biológica de acuerdo con el método según se ha descrito en el primer método de la invención. A second aspect of the invention relates to a method of obtaining useful data for the diagnosis of cancer, hereinafter second method of the invention, which comprises detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes in a biological sample according to the method as described in the first method of the invention.
En una realización preferida de este aspecto de la invención, el cáncer es un tumor de partes blandas, y más preferiblemente Tumor Fibroso Solitario (TFS) y el Hemangiopericitoma (HPC). In a preferred embodiment of this aspect of the invention, the cancer is a soft tissue tumor, and more preferably Solitary Fibrous Tumor (TFS) and Hemangiopericytoma (HPC).
Un tercer aspecto de la invención se refiere a un método para el diagnóstico histológico del cáncer que comprende: a) detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 en una muestra biológica según se ha descrito en el primer método de la invención, y b) clasificar al individuo del que procede dicha muestra biológica en el grupo de individuos que presenta cáncer, cuando la detección del reordenamiento de los genes NAB2-STAT6 sea positiva. A third aspect of the invention relates to a method for the histological diagnosis of cancer comprising: a) detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes in a biological sample as described in the first method of the invention, and b) classifying to the individual from whom said biological sample comes from in the group of individuals presenting cancer, when the detection of the rearrangement of the NAB2-STAT6 genes is positive.
El método puede servir de apoyo a otros métodos de diagnóstico conocidos en el estado del arte, o puede realizarse individualmente. The method can support other diagnostic methods known in the state of the art, or it can be performed individually.
El diagnóstico histológico se basa en el examen de muestras de tejido bajo un microscopio. En una realización preferida de este aspecto de la invención, el cáncer es un tumor de partes blandas, y más preferiblemente Tumor Fibroso Solitario (TFS) y el Hemangiopericitoma (HPC). The histological diagnosis is based on the examination of tissue samples under a microscope. In a preferred embodiment of this aspect of the invention, the cancer is a soft tissue tumor, and more preferably Solitary Fibrous Tumor (TFS) and Hemangiopericytoma (HPC).
Un cuarto aspecto de la invención se refiere a un kit o dispositivo, de ahora en adelante kit o dispositivo de la invención, que comprende las sondas de la invención, que se han descrito según el primer método de la invención. A fourth aspect of the invention relates to a kit or device, hereinafter kit or device of the invention, comprising the probes of the invention, which have been described according to the first method of the invention.
En una realización preferida de este aspecto de la invención, el kit o dispositivo de la invenciónademás comprende todos aquellos elementos necesarios para llevar a cabo un procedimiento FISH. In a preferred embodiment of this aspect of the invention, the kit or device of the invention also comprises all those elements necessary to carry out an FISH procedure.
En otra realización preferida de este aspecto de la invención, los polinucleótidos según el primer método de la invención están modificados. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, the polynucleotides according to the first method of the invention are modified.
En otra realización preferida de este aspecto de la invención, los polinucleótidos de la invención están marcados con moléculas fluorescentes, preferiblemente con fluoróforos. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, the polynucleotides of the invention are labeled with fluorescent molecules, preferably with fluorophores.
En otra realización preferida de este aspecto de la invención, los polinucleótidos según el primer método de la invención, están marcados con moléculas no fluorescentes. En otra realización preferida de este aspecto de la invención, el kit o dispositivo de la invención además comprende anticuerpos o fragmentos de los mismos fluorescentes para la detección de los polinucleótidos según el primer método de la invención, marcados con moléculas no fluorescentes. Un quinto aspecto de la invención se refiere al uso del kit o dispositivo de la invención para detectar el reordenamiento genético de los genes STAT6 y NAB2 en una muestra biológica. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, the polynucleotides according to the first method of the invention are labeled with non-fluorescent molecules. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, the kit or device of the invention further comprises antibodies or fragments thereof fluorescent for the detection of polynucleotides according to the first method of the invention, labeled with non-fluorescent molecules. A fifth aspect of the invention relates to the use of the kit or device of the invention to detect the genetic rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes in a biological sample.
Un sexto aspecto de la invención se refiere al uso del kit o dispositivo de la invención para el diagnóstico del cáncer. En una realización preferida de este aspecto de la invención, el cáncer es un tumor de partes blandas, y más preferiblemente Tumor Fibroso Solitario (TFS) y el Hemangiopericitoma (HPC). A sixth aspect of the invention relates to the use of the kit or device of the invention for the diagnosis of cancer. In a preferred embodiment of this aspect of the invention, the cancer is a soft tissue tumor, and more preferably Solitary Fibrous Tumor (TFS) and Hemangiopericytoma (HPC).
DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS Figura 1. Localización de las dos sondas [señal verde correspondiente a la sonda posicionada en 3' de los genes a estudiar (STAT6_5p_BA_167Kb; Esquema Fig. 1) y señal roja correspondiente a la sonda posicionada en 5' de los genes a estudiar (STAT6_3p_BA_1 17Kb; Esquema Fig. 1)] en la región genómica donde se localizan los genes NAB2 y STAT6. DESCRIPTION OF THE FIGURES Figure 1. Location of the two probes [green signal corresponding to the probe positioned at 3 'of the genes to be studied (STAT6_5p_BA_167Kb; Scheme Fig. 1) and red signal corresponding to the probe positioned at 5' of the genes to study (STAT6_3p_BA_1 17Kb; Scheme Fig. 1)] in the genomic region where the NAB2 and STAT6 genes are located.
Figura 2. Ampliación de la región de interés mostrada en Fig. 1 para ver con mayor claridad el gap presente entre las dos sondas. Figure 2. Enlargement of the region of interest shown in Fig. 1 to see more clearly the gap between the two probes.
Figura 3. Descripción esquemática de la disposición de las sondas antes y después del reordenamiento. Figura 4. Gráfico obtenido de la tabla n°2. Figure 3. Schematic description of the arrangement of the probes before and after the rearrangement. Figure 4. Graph obtained from table 2.
Figura 5. Gráfico obtenido de la tabla n°4. Figure 5. Graph obtained from table 4.
Figuras 6 y 7. Ejemplo de célula positiva para el reordenamiento génico. En la imagen se observa la tinción nuclear en azul, las dos señales verdes, correspondientes a la sonda posicionada en 3' de los genes a estudiar (STAT6_5p_BA_157Kb; Esquema Fig. 1), por separado, las tres señales rojas, correspondiente a la sonda posicionada en 5' de los genes a estudiar (STAT6_3p_BA_1 17Kb; Esquema Fig. 1), indicativas de la presencia del reordenamiento génico de los genes NAB2-STAT6 y la imagen de los tres colores o filtros (azul, verde y rojo) solapados usados para la interpretación de la FISH. Figura 8. Dos células neoplásicas, una negativa para el reordenamiento (izquierda) y una positiva (derecha). En la imagen se observa la tinción nuclear en azul, las dos señales verdes, correspondientes a la sonda posicionada en 3' de los genes a estudiar (STAT6_5p_BA_157Kb; Esquema Fig. 1), por separado, y las tres señales rojas, correspondiente a la sonda posicionada en 5' de los genes a estudiar (STAT6_3p_BA_1 17Kb; Esquema Fig. 1), indicativas de la presencia del reordenamiento génico de los genes NAB2-STAT6. Figures 6 and 7. Example of a positive cell for gene rearrangement. The image shows the nuclear blue staining, the two green signals, corresponding to the probe positioned at 3 'of the genes to be studied (STAT6_5p_BA_157Kb; Scheme Fig. 1), separately, the three red signals, corresponding to the probe positioned at 5 'of the genes to be studied (STAT6_3p_BA_1 17Kb; Scheme Fig. 1), indicative of the presence of the gene rearrangement of the NAB2-STAT6 genes and the image of the three overlapping colors or filters (blue, green and red) used for the interpretation of the FISH. Figure 8. Two neoplastic cells, one negative for rearrangement (left) and one positive (right). The image shows the nuclear blue staining, the two green signals, corresponding to the probe positioned at 3 'of the genes to be studied (STAT6_5p_BA_157Kb; Scheme Fig. 1), separately, and the three red signals, corresponding to the probe positioned at 5 'of the genes to study (STAT6_3p_BA_1 17Kb; Scheme Fig. 1), indicative of the presence of gene rearrangement of the NAB2-STAT6 genes.
Figura 9. Variante de reordenamiento positivo. No se observan las tres señales rojas correspondiente a la sonda posicionada en 5' de los genes a estudiar (STAT6_3p_BA_117Kb; Esquema Fig. 1), sino una señal roja y una señal verde, correspondiente a la sonda posicionada en 5' de los genes a estudiar (STAT6_3p_BA_117Kb; Esquema Fig. 1), claramente separadas y una señale de fusión amarilla (verde y roja unidas). DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Figure 9. Positive rearrangement variant. The three red signals corresponding to the probe positioned at 5 'of the genes to be studied are not observed (STAT6_3p_BA_117Kb; Scheme Fig. 1), but a red signal and a green signal, corresponding to the probe positioned at 5' of the genes a study (STAT6_3p_BA_117Kb; Scheme Fig. 1), clearly separated and a yellow fusion signal (green and red together). DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Los autores de la presente invención han identificado regiones concretas del cromosoma 12 humano donde se producen reordenamientos genéticos útiles para el diagnóstico del cáncer, y concretamente, del cáncer de tejidos blandos. En consecuencia han diseñado sondas específicas para estudiar dicha región de interés mediante la técnica de Hibridación In Situ con Fluorescencia (FISH), demostrando la utilidad de dichas regiones. The authors of the present invention have identified specific regions of human chromosome 12 where genetic rearrangements are produced useful for the diagnosis of cancer, and specifically, soft tissue cancer. Consequently, they have designed specific probes to study said region of interest by means of the In Situ Hybridization with Fluorescence (FISH) technique, demonstrating the usefulness of these regions.
MÉTODOS DE LA INVENCIÓN Por tanto, un primer aspecto de la invención se refiere a un método para detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 en un cromosoma de una muestra biológica que comprende: poner en contacto dicha muestra biológica con dos sondas, una primera sonda específica para la región 57374319 - 57490959 del cromosoma 12 humano, y una segunda sonda específica para la región 57501389 - 57668584 del cromosoma 12 humano, donde si se observa una única señal para cada sonda y dichas señales son adyacentes, no ha habido reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2, y donde si se observa más de una única señal para cada sonda y/o dichas señales no son adyacentes, ha habido reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2. METHODS OF THE INVENTION Therefore, a first aspect of the invention relates to a method for detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes on a chromosome of a biological sample comprising: contacting said biological sample with two probes, a first specific probe for region 57374319 - 57490959 of human chromosome 12, and a second probe specific for region 57501389 - 57668584 of human chromosome 12, where if a single signal is observed for each probe and said signals are adjacent, there has been no rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes, and where if more than one single signal is observed for each probe and / or said signals are not adjacent, there has been rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes.
La notación de las coordenadas de las regiones de las secuencias se refieren al cromosoma 12 en la notación Ensembl Homo sapiens versión 70.37 (GRCh37). El experto en la materia conoce las secuenias de dichas regiones. The coordinate notation of the regions of the sequences refer to chromosome 12 in the Ensembl Homo sapiens version 70.37 (GRCh37) notation. The person skilled in the art knows the consequences of these regions.
En una realización preferida de este aspecto de la invención donde la sonda específica para la región 57374319 - 57490959 del cromosoma 12 humano comprende un polinucleótido capaz de hibridar con la secuencia comprendida entre In a preferred embodiment of this aspect of the invention where the probe specific for region 57374319-57490959 of human chromosome 12 comprises a polynucleotide capable of hybridizing with the sequence between
I. el nucleótido 57374319 y 57375519 de dicho cromosoma, y/o II. el nucleótido 57375.574 y 57380244 de dicho cromosoma, y/oI. nucleotide 57374319 and 57375519 of said chromosome, and / or II. nucleotide 57375.574 and 57380244 of said chromosome, and / or
III. el nucleótido 57380484 y 57381914 de dicho cromosoma, y/oIII. nucleotide 57380484 and 57381914 of said chromosome, and / or
IV. el nucleótido 57380484 y 57381914 de dicho cromosoma, y/oIV. nucleotide 57380484 and 57381914 of said chromosome, and / or
V. el nucleótido 57382009 y 57382814 de dicho cromosoma, y/o VI. el nucleótido 57382994 y 57383219 de dicho cromosoma, y/oV. nucleotide 57382009 and 57382814 of said chromosome, and / or VI. nucleotide 57382994 and 57383219 of said chromosome, and / or
VII. el nucleótido 57384354 y 57384509 de dicho cromosoma, y/oVII. nucleotide 57384354 and 57384509 of said chromosome, and / or
VIII. el nucleótido 57384689 y 57385864 de dicho cromosoma, y/oVIII. nucleotide 57384689 and 57385864 of said chromosome, and / or
IX. el nucleótido 57386994 y 57387169 de dicho cromosoma, y/oIX. nucleotide 57386994 and 57387169 of said chromosome, and / or
X. el nucleótido 57387324 y 57387589 de dicho cromosoma, y/o XI. el nucleótido 57387744 y 57387979 de dicho cromosoma, y/oX. nucleotide 57387324 and 57387589 of said chromosome, and / or XI. nucleotide 57387744 and 57387979 of said chromosome, and / or
XII. el nucleótido 57388184 y 57403154 de dicho cromosoma, y/oXII. nucleotide 57388184 and 57403154 of said chromosome, and / or
XIII. el nucleótido 57403499 y 57405414 de dicho cromosoma, y/oXIII nucleotide 57403499 and 57405414 of said chromosome, and / or
XIV. el nucleótido 57405619 y 57410689 de dicho cromosoma, y/oXIV nucleotide 57405619 and 57410689 of said chromosome, and / or
XV. el nucleótido 5741 1054 y 57411404 de dicho cromosoma, y/o XVI . el nucleótido 57411714 y 57412054 de dicho cromosoma, y/oXV. nucleotide 5741 1054 and 57411404 of said chromosome, and / or XVI. nucleotide 57411714 and 57412054 of said chromosome, and / or
XVII. el nucleótido 57412589 y 57413924 de dicho cromosoma, y/oXVII nucleotide 57412589 and 57413924 of said chromosome, and / or
XVIII. el nucleótido 57414054 y 57414359 de dicho cromosoma, y/oXVIII. nucleotide 57414054 and 57414359 of said chromosome, and / or
XIX. el nucleótido 57414724 y 57414994 de dicho cromosoma, y/oXIX. nucleotide 57414724 and 57414994 of said chromosome, and / or
XX. el nucleótido 57415349 y 57415964 de dicho cromosoma, y/o XXI. el nucleótido 57416694 y 57417299 de dicho cromosoma, y/oXX. nucleotide 57415349 and 57415964 of said chromosome, and / or XXI. nucleotide 57416694 and 57417299 of said chromosome, and / or
XXII. el nucleótido 57417609 y 57417909 de dicho cromosoma, y/oXXII. nucleotide 57417609 and 57417909 of said chromosome, and / or
XXIII. el nucleótido 57418119 y 57418534 de dicho cromosoma, y/oXXIII. nucleotide 57418119 and 57418534 of said chromosome, and / or
XXIV. el nucleótido 57418844 y 57424494 de dicho cromosoma, y/oXXIV nucleotide 57418844 and 57424494 of said chromosome, and / or
XXV. el nucleótido 57424639 y 57426309 de dicho cromosoma, y/o XXVI. el nucleótido 57426484 y 57426789 de dicho cromosoma, y/oXXV nucleotide 57424639 and 57426309 of said chromosome, and / or XXVI. nucleotide 57426484 and 57426789 of said chromosome, and / or
XXVII. el nucleótido 57426974 y 57427129 de dicho cromosoma, y/oXXVII. nucleotide 57426974 and 57427129 of said chromosome, and / or
XXVIII. el nucleótido 57427444 y 57427954 de dicho cromosoma, y/oXXVIII. nucleotide 57427444 and 57427954 of said chromosome, and / or
XXIX. el nucleótido 57428789 y 57434124 de dicho cromosoma, y/oXXIX nucleotide 57428789 and 57434124 of said chromosome, and / or
XXX. el nucleótido 57434179 y 57435549 de dicho cromosoma, y/o XXXI. el nucleótido 57435684 y 57435844 de dicho cromosoma, y/oXXX nucleotide 57434179 and 57435549 of said chromosome, and / or XXXI. nucleotide 57435684 and 57435844 of said chromosome, and / or
XXXII. el nucleótido 57436724 y 57437329 de dicho cromosoma, y/oXXXII nucleotide 57436724 and 57437329 of said chromosome, and / or
XXXIII. el nucleótido 57437434 y 57438174 de dicho cromosoma, y/oXXXIII nucleotide 57437434 and 57438174 of said chromosome, and / or
XXXIV. el nucleótido 57438464 y 57443324 de dicho cromosoma, y/oXXXIV nucleotide 57438464 and 57443324 of said chromosome, and / or
XXXV. el nucleótido 57443494 y 57444184 de dicho cromosoma, y/o XXXVI. el nucleótido 57444309 y 57444489 de dicho cromosoma, y/o XXXVII. el nucleótido 57444704 y 57445179 de dicho cromosoma, y/o XXXV nucleotide 57443494 and 57444184 of said chromosome, and / or XXXVI. nucleotide 57444309 and 57444489 of said chromosome, and / or XXXVII nucleotide 57444704 and 57445179 of said chromosome, and / or
XXXVIII. el nucleótido 57445319 y 57445909 de dicho cromosoma, y/o  XXXVIII nucleotide 57445319 and 57445909 of said chromosome, and / or
XXXIX. el nucleótido 57446219 y 57446444 de dicho cromosoma, y/o  XXXIX nucleotide 57446219 and 57446444 of said chromosome, and / or
XL. el nucleótido 57446684 y 57446834 de dicho cromosoma, y/o  XL nucleotide 57446684 and 57446834 of said chromosome, and / or
XLI. el nucleótido 57447904 y 57448224 de dicho cromosoma, y/o  XLI nucleotide 57447904 and 57448224 of said chromosome, and / or
XLII. el nucleótido 57448809 y 57454914 de dicho cromosoma, y/o  XLII nucleotide 57448809 and 57454914 of said chromosome, and / or
XLIII. el nucleótido 57454954 y 57455194 de dicho cromosoma, y/o  XLIII nucleotide 57454954 and 57455194 of said chromosome, and / or
XLIV. el nucleótido 57455794 y 57455979 de dicho cromosoma, y/o  XLIV nucleotide 57455794 and 57455979 of said chromosome, and / or
XLV. el nucleótido 57456634 y 57458754 de dicho cromosoma, y/o  XLV nucleotide 57456634 and 57458754 of said chromosome, and / or
XLVI. el nucleótido 57458999 y 57459234 de dicho cromosoma, y/o  XLVI nucleotide 57458999 and 57459234 of said chromosome, and / or
XLVII. el nucleótido 57460189 y 57460534 de dicho cromosoma, y/o  XLVII nucleotide 57460189 and 57460534 of said chromosome, and / or
XLVIII. el nucleótido 57461289 y 57461584 de dicho cromosoma, y/o  XLVIII nucleotide 57461289 and 57461584 of said chromosome, and / or
XLIX. el nucleótido 57461854 y 57462134 de dicho cromosoma, y/o  XLIX nucleotide 57461854 and 57462134 of said chromosome, and / or
L. el nucleótido 57462649 y 57465164 de dicho cromosoma, y/o  L. nucleotide 57462649 and 57465164 of said chromosome, and / or
Ll. el nucleótido 57465624 y 57465934 de dicho cromosoma, y/o  Ll. nucleotide 57465624 and 57465934 of said chromosome, and / or
Lll. el nucleótido 57466254 y 57466944 de dicho cromosoma, y/o  Lll. nucleotide 57466254 and 57466944 of said chromosome, and / or
Llll. el nucleótido 57468389 y 57468589 de dicho cromosoma, y/o  Llll. nucleotide 57468389 and 57468589 of said chromosome, and / or
LIV. el nucleótido 57471314 y 57471579 de dicho cromosoma, y/o  LIV nucleotide 57471314 and 57471579 of said chromosome, and / or
LV. el nucleótido 57471864 y 57473184 de dicho cromosoma, y/o  LV nucleotide 57471864 and 57473184 of said chromosome, and / or
LVI. el nucleótido 57473364 y 57473549 de dicho cromosoma, y/o  LVI nucleotide 57473364 and 57473549 of said chromosome, and / or
LVII. el nucleótido 57474694 y 57474939 de dicho cromosoma, y/o  LVII nucleotide 57474694 and 57474939 of said chromosome, and / or
LVIII. el nucleótido 57476034 y 57476184 de dicho cromosoma, y/o  LVIII nucleotide 57476034 and 57476184 of said chromosome, and / or
LIX. el nucleótido 57476829 y 57477554 de dicho cromosoma, y/o  LIX nucleotide 57476829 and 57477554 of said chromosome, and / or
LX. el nucleótido 57478044 y 57478294 de dicho cromosoma, y/o  LX nucleotide 57478044 and 57478294 of said chromosome, and / or
LXI. el nucleótido 57478349 y 57478939 de dicho cromosoma, y/o  LXI nucleotide 57478349 and 57478939 of said chromosome, and / or
LXII. e nucleótido 57479199 y 57483979 de dicho cromosoma, y/o  LXII and nucleotide 57479199 and 57483979 of said chromosome, and / or
LXIII. e nucleótido 57484294 y 57490959 de dicho cromosoma.  LXIII. and nucleotide 57484294 and 57490959 of said chromosome.
En otra realización preferida de este aspecto de la invención la sonda específica para la región 57501389 - 57668584 del cromosoma 12 humano comprende un polinucleótido capaz de hibridar con la secuencia comprendida entre In another preferred embodiment of this aspect of the invention the specific probe for region 57501389-57668584 of human chromosome 12 comprises a polynucleotide capable of hybridizing with the sequence between
I. el nucleótido 57501389 y 57502324 de dicho cromosoma, y/o I. nucleotide 57501389 and 57502324 of said chromosome, and / or
II. el nucleótido 57502469 y 57502699 de dicho cromosoma, y/o  II. nucleotide 57502469 and 57502699 of said chromosome, and / or
III. el nucleótido 57503264 y 57506394 de dicho cromosoma, y/o IV. el nucleótido 57506614 y 57507444 de dicho cromosoma, y/oIII. nucleotide 57503264 and 57506394 of said chromosome, and / or IV. nucleotide 57506614 and 57507444 of said chromosome, and / or
V. el nucleótido 57507714 y 57508259 de dicho cromosoma, y/oV. nucleotide 57507714 and 57508259 of said chromosome, and / or
VI. el nucleótido 57509549 y 57510249 de dicho cromosoma, y/oSAW. nucleotide 57509549 and 57510249 of said chromosome, and / or
VII. el nucleótido 57510369 y 57510794 de dicho cromosoma, y/o VIII. el nucleótido 5751 1389 y 5751 1714 de dicho cromosoma, y/oVII. nucleotide 57510369 and 57510794 of said chromosome, and / or VIII. nucleotide 5751 1389 and 5751 1714 of said chromosome, and / or
IX. el nucleótido 5751 1849 y 57512974 de dicho cromosoma, y/oIX. nucleotide 5751 1849 and 57512974 of said chromosome, and / or
X. el nucleótido 57513009 y 57513444 de dicho cromosoma, y/oX. nucleotide 57513009 and 57513444 of said chromosome, and / or
XI. el nucleótido 57516059 y 57516529 de dicho cromosoma, y/oXI nucleotide 57516059 and 57516529 of said chromosome, and / or
XII. el nucleótido 57516694 y 57517089 de dicho cromosoma, y/o XIII. el nucleótido 57517264 y 57517704 de dicho cromosoma, y/oXII. nucleotide 57516694 and 57517089 of said chromosome, and / or XIII. nucleotide 57517264 and 57517704 of said chromosome, and / or
XIV. el nucleótido 57517829 y 57517999 de dicho cromosoma, y/oXIV nucleotide 57517829 and 57517999 of said chromosome, and / or
XV. el nucleótido 57518164 y 57518889 de dicho cromosoma, y/oXV. nucleotide 57518164 and 57518889 of said chromosome, and / or
XVI. el nucleótido 57519204 y 57519479 de dicho cromosoma, y/oXVI. nucleotide 57519204 and 57519479 of said chromosome, and / or
XVII. el nucleótido 57520089 y 57528229 de dicho cromosoma, y/o XVIII. el nucleótido 57528979 y 57530529 de dicho cromosoma, y/oXVII nucleotide 57520089 and 57528229 of said chromosome, and / or XVIII. nucleotide 57528979 and 57530529 of said chromosome, and / or
XIX. el nucleótido 57531044 y 57531334 de dicho cromosoma, y/oXIX. nucleotide 57531044 and 57531334 of said chromosome, and / or
XX. el nucleótido 57531594 y 57533889 de dicho cromosoma, y/oXX. nucleotide 57531594 and 57533889 of said chromosome, and / or
XXI. el nucleótido 57534024 y 57534509 de dicho cromosoma, y/oXXI. nucleotide 57534024 and 57534509 of said chromosome, and / or
XXII. el nucleótido 57534819 y 57535484 de dicho cromosoma, y/o XXIII. el nucleótido 57535589 y 57537224 de dicho cromosoma, y/oXXII. nucleotide 57534819 and 57535484 of said chromosome, and / or XXIII. nucleotide 57535589 and 57537224 of said chromosome, and / or
XXIV. el nucleótido 57537349 y 57537959 de dicho cromosoma, y/oXXIV nucleotide 57537349 and 57537959 of said chromosome, and / or
XXV. el nucleótido 57538079 y 57538389 de dicho cromosoma, y/oXXV nucleotide 57538079 and 57538389 of said chromosome, and / or
XXVI. el nucleótido 57538399 y 57543964 de dicho cromosoma, y/oXXVI nucleotide 57538399 and 57543964 of said chromosome, and / or
XXVII. el nucleótido 57544274 y 57544524 de dicho cromosoma, y/o XXVIII. el nucleótido 57544664 y 57548704 de dicho cromosoma, y/oXXVII. nucleotide 57544274 and 57544524 of said chromosome, and / or XXVIII. nucleotide 57544664 and 57548704 of said chromosome, and / or
XXIX. el nucleótido 57548899 y 57549449 de dicho cromosoma, y/oXXIX nucleotide 57548899 and 57549449 of said chromosome, and / or
XXX. el nucleótido 57549759 y 57550784 de dicho cromosoma, y/oXXX nucleotide 57549759 and 57550784 of said chromosome, and / or
XXXI. el nucleótido 57550899 y 57551064 de dicho cromosoma, y/oXXXI nucleotide 57550899 and 57551064 of said chromosome, and / or
XXXII. el nucleótido 57551739 y 57554099 de dicho cromosoma, y/o XXXIII. el nucleótido 57554389 y 575571 14 de dicho cromosoma, y/oXXXII nucleotide 57551739 and 57554099 of said chromosome, and / or XXXIII. nucleotide 57554389 and 575571 14 of said chromosome, and / or
XXXIV. el nucleótido 57557484 y 57557669 de dicho cromosoma, y/oXXXIV nucleotide 57557484 and 57557669 of said chromosome, and / or
XXXV. el nucleótido 57558504 y 57558734 de dicho cromosoma, y/oXXXV nucleotide 57558504 and 57558734 of said chromosome, and / or
XXXVI. el nucleótido 57558779 y 57560054 de dicho cromosoma, y/oXXXVI nucleotide 57558779 and 57560054 of said chromosome, and / or
XXXVII. el nucleótido 57560374 y 57563289 de dicho cromosoma, y/o XXXVIII. el nucleótido 57563534 y 57563869 de dicho cromosoma, y/o XXXIX. el nucleótido 57563879 y 57564179 de dicho cromosoma, y/oXXXVII nucleotide 57560374 and 57563289 of said chromosome, and / or XXXVIII. nucleotide 57563534 and 57563869 of said chromosome, and / or XXXIX nucleotide 57563879 and 57564179 of said chromosome, and / or
XL. el nucleótido 57564624 y 57564859 de dicho cromosoma, y/oXL nucleotide 57564624 and 57564859 of said chromosome, and / or
XLI. el nucleótido 57565004 y 57565829 de dicho cromosoma, y/oXLI nucleotide 57565004 and 57565829 of said chromosome, and / or
XLII. el nucleótido 57566254 y 57566404 de dicho cromosoma, y/o XLII I. el nucleótido 57566499 y 57567929 de dicho cromosoma, y/oXLII nucleotide 57566254 and 57566404 of said chromosome, and / or XLII I. nucleotide 57566499 and 57567929 of said chromosome, and / or
XLIV. el nucleótido 575681 4 y 57568274 de dicho cromosoma, y/oXLIV nucleotide 575681 4 and 57568274 of said chromosome, and / or
XLV. el nucleótido 57568559 y 57570559 de dicho cromosoma, y/oXLV nucleotide 57568559 and 57570559 of said chromosome, and / or
XLVI. el nucleótido 57570664 y 57571719 de dicho cromosoma, y/oXLVI nucleotide 57570664 and 57571719 of said chromosome, and / or
XLVII. el nucleótido 57571839 y 57576009 de dicho cromosoma, y/o XLVIII. el nucleótido 57576629 y 57581314 de dicho cromosoma, y/oXLVII nucleotide 57571839 and 57576009 of said chromosome, and / or XLVIII. nucleotide 57576629 and 57581314 of said chromosome, and / or
XLIX. el nucleótido 57581464 y 57583799 de dicho cromosoma, y/oXLIX nucleotide 57581464 and 57583799 of said chromosome, and / or
L. el nucleótido 57583944 y 57584104 de dicho cromosoma, y/oL. nucleotide 57583944 and 57584104 of said chromosome, and / or
Ll. el nucleótido 57584324 y 57585444 de dicho cromosoma, y/oLl. nucleotide 57584324 and 57585444 of said chromosome, and / or
Lll. el nucleótido 57585849 y 57589229 de dicho cromosoma, y/o LUI. el nucleótido 57589359 y 57590294 de dicho cromosoma, y/oLll. nucleotide 57585849 and 57589229 of said chromosome, and / or LUI. nucleotide 57589359 and 57590294 of said chromosome, and / or
LIV. el nucleótido 57590469 y 57591749 de dicho cromosoma, y/oLIV nucleotide 57590469 and 57591749 of said chromosome, and / or
LV. el nucleótido 57591909 y 57592759 de dicho cromosoma, y/oLV nucleotide 57591909 and 57592759 of said chromosome, and / or
LVI. el nucleótido 57592924 y 57600604 de dicho cromosoma, y/oLVI nucleotide 57592924 and 57600604 of said chromosome, and / or
LVII. el nucleótido 57601629 y 57617899 de dicho cromosoma, y/o LVII I. el nucleótido 57618199 y 57618379 de dicho cromosoma, y/oLVII nucleotide 57601629 and 57617899 of said chromosome, and / or LVII I. nucleotide 57618199 and 57618379 of said chromosome, and / or
LIX. el nucleótido 57618499 y 57621419 de dicho cromosoma, y/oLIX nucleotide 57618499 and 57621419 of said chromosome, and / or
LX. el nucleótido 57621499 y 57621884 de dicho cromosoma, y/oLX nucleotide 57621499 and 57621884 of said chromosome, and / or
LXI. el nucleótido 57622489 y 57622954 de dicho cromosoma, y/oLXI nucleotide 57622489 and 57622954 of said chromosome, and / or
LXII. el nucleótido 57623134 y 57639154 de dicho cromosoma, y/o LXIII. el nucleótido 57639454 y 57639609 de dicho cromosoma, y/oLXII nucleotide 57623134 and 57639154 of said chromosome, and / or LXIII. nucleotide 57639454 and 57639609 of said chromosome, and / or
LXIV. el nucleótido 57639919 y 57640124 de dicho cromosoma, y/oLXIV nucleotide 57639919 and 57640124 of said chromosome, and / or
LXV. el nucleótido 57640469 y 57641209 de dicho cromosoma, y/oLXV nucleotide 57640469 and 57641209 of said chromosome, and / or
LXVI. el nucleótido 57641754 y 57642154 de dicho cromosoma, y/oLXVI nucleotide 57641754 and 57642154 of said chromosome, and / or
LXVII. el nucleótido 57642459 y 57643534 de dicho cromosoma, y/o LXVIII. el nucleótido 57644199 y 57645269 de dicho cromosoma, y/oLXVII. nucleotide 57642459 and 57643534 of said chromosome, and / or LXVIII. nucleotide 57644199 and 57645269 of said chromosome, and / or
LXIX. el nucleótido 57645564 y 57646529 de dicho cromosoma, y/oLXIX nucleotide 57645564 and 57646529 of said chromosome, and / or
LXX. el nucleótido 57647334 y 57647639 de dicho cromosoma, y/oLXX nucleotide 57647334 and 57647639 of said chromosome, and / or
LXXI. el nucleótido 57648314 y 57648634 de dicho cromosoma, y/oLXXI nucleotide 57648314 and 57648634 of said chromosome, and / or
LXXII. el nucleótido 57648664 y 57650589 de dicho cromosoma, y/o LXXIII. el nucleótido 57651434 y 57652089 de dicho cromosoma, y/o LXXIV. el nucleótido 57652419 y 57653764 de dicho cromosoma, y/o LXXII nucleotide 57648664 and 57650589 of said chromosome, and / or LXXIII. nucleotide 57651434 and 57652089 of said chromosome, and / or LXXIV nucleotide 57652419 and 57653764 of said chromosome, and / or
LXXV. el nucleótido 57654069 y 57657254 de dicho cromosoma, y/o  LXXV nucleotide 57654069 and 57657254 of said chromosome, and / or
LXXVI. el nucleótido 57657559 y 57657789 de dicho cromosoma, y/o  LXXVI nucleotide 57657559 and 57657789 of said chromosome, and / or
LXXVII. el nucleótido 57658714 y 57659019 de dicho cromosoma, y/o  LXXVII. nucleotide 57658714 and 57659019 of said chromosome, and / or
LXXVIII. el nucleótido 57659174 y 57659404 de dicho cromosoma, y/o  LXXVIII. nucleotide 57659174 and 57659404 of said chromosome, and / or
LXXIX. el nucleótido 57660319 y 57661059 de dicho cromosoma, y/o  LXXIX nucleotide 57660319 and 57661059 of said chromosome, and / or
LXXX. el nucleótido 57661664 y 57662784 de dicho cromosoma, y/o  LXXX nucleotide 57661664 and 57662784 of said chromosome, and / or
LXXXI. el nucleótido 57662784 y 57664004 de dicho cromosoma, y/o  LXXXI. nucleotide 57662784 and 57664004 of said chromosome, and / or
LXXXII. el nucleótido 57664654 y 57665674 de dicho cromosoma, y/o  LXXXII. nucleotide 57664654 and 57665674 of said chromosome, and / or
LXXXIII. el nucleótido 57665859 y 57667289 de dicho cromosoma, y/o  LXXXIII. nucleotide 57665859 and 57667289 of said chromosome, and / or
LXXXIV. el nucleótido 57667469 y 57667989 de dicho cromosoma, y/o  LXXXIV nucleotide 57667469 and 57667989 of said chromosome, and / or
LXXXV. el nucleótido 57668289 y 57668584 de dicho cromosoma.  LXXXV. nucleotide 57668289 and 57668584 of said chromosome.
En otra realización preferida de este aspecto de la invención, las secuencias de los polinucleótidos descritos anteriormente para la región 57374.319 - 57490959 y para la región 57501389 - 57668584 del cromosoma 12 humano son la secuencia complementaria a la comprendida entre las posiciones indicadas. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, the polynucleotide sequences described above for the region 57374.319-57490959 and for the region 57501389-57668584 of the human chromosome 12 are the sequence complementary to that between the indicated positions.
En una realización preferida de este aspecto de la invención, los polinucleótidos de cada sonda o las sondas están marcados con marcadores diferentes entre sí. En otra realización preferida de este aspecto de la invención, donde la detección se realiza mediante una hibridación fluorescente in situ (FISH), preferiblemente FISH directa. In a preferred embodiment of this aspect of the invention, the polynucleotides of each probe or the probes are labeled with different markers from each other. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, where the detection is carried out by means of in situ fluorescent hybridization (FISH), preferably direct FISH.
En otra realización preferida de este aspecto de la invención, donde la muestra biológica es una célula con núcleo, preferiblemente una célula neoplásica. Más preferiblemente, se utilizan las células en interfase de la muestra biológica. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, where the biological sample is a core cell, preferably a neoplastic cell. More preferably, the cells are used at the interface of the biological sample.
Preferiblemente, la célula neoplásica pertenece a un tumor mesenquimal cuyo diagnóstico diferencial podría ser un Tumor Fibroso Solitario o un Hemangiopericitoma. Preferably, the neoplastic cell belongs to a mesenchymal tumor whose differential diagnosis could be a Solitary Fibrous Tumor or a Hemangiopericytoma.
En otra realización preferida de este aspecto de la invención, la muestra biológica es material tisular, preferiblemente fresco o cortes del mismo fijados en formol e incluidos en parafina. Este material tisular se obtiene preferiblemente, aunque sin limitarnos, de tejido de partes blandas, tejido músculoesquelético y otros tejidos blandos donde se pueda generar una neoplasia. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, the biological sample is tissue material, preferably fresh or cuts thereof fixed in formalin and included in paraffin. This tissue material is preferably obtained, but not limited to, from soft tissue, musculoskeletal tissue and other soft tissues where a neoplasm can be generated.
En otra realización preferida de este aspecto de la invención, donde se utilizan células en interfase de la muestra biológica. En otra realización preferida de este aspecto de la invención, se utilizan células bloqueadas en metafase. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, where cells are used at the interface of the biological sample. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, metaphase locked cells are used.
En esta memoria se entiende por "célula en interfase", a la célula que se encuentra en el periodo del ciclo celular comprendido entre mitosis. La interfase comprende tres etapas: fase G1 , fase S y fase G2. La interfase se caracteriza por el crecimiento celular y duplicación del material genético. Preferiblemente el primer método de la invención se realiza in vitro. In this report, "interphase cell" is understood as the cell that is in the period of the cell cycle between mitosis. The interface comprises three stages: phase G1, phase S and phase G2. The interface is characterized by cell growth and duplication of genetic material. Preferably the first method of the invention is performed in vitro.
Tal como se muestra en los ejemplos de la invención, la identificación de dicho reordenamiento es útil para el diagnóstico del cáncer. Por tanto, un segundo aspecto de la invención se refiere a un método de obtención de datos útiles para el diagnóstico del cáncer, de ahora en adelante segundo método de la invención, que comprende emplear al menos un polinucleótido según se ha descrito en el primer método de la invención. As shown in the examples of the invention, the identification of said rearrangement is useful for the diagnosis of cancer. Therefore, a second aspect of the invention relates to a method of obtaining useful data for the diagnosis of cancer, hereafter referred to as the second method of the invention, which comprises using at least one polynucleotide as described in the first method. of the invention.
El segundo método de la invención comprende detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 en una muestra biológica empleando las sondas de la invención, de acuerdo con el primer método de la invención. En una realización preferida de este aspecto de la invención, el cáncer es un tumor de partes blandas, y más preferiblemente Tumor Fibroso Solitario (TFS) y el Hemangiopericitoma (HPC). The second method of the invention comprises detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes in a biological sample using the probes of the invention, in accordance with the first method of the invention. In a preferred embodiment of this aspect of the invention, the cancer is a soft tissue tumor, and more preferably Solitary Fibrous Tumor (TFS) and Hemangiopericytoma (HPC).
Un tercer aspecto de la invención se refiere a un método de apoyo al diagnóstico histológico del cáncer que comprende detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y/oNAB2 en una muestra biológica según se ha descrito en el primer y segundo método de la invención, y además comprende clasificar al individuo del que procede dicha muestra biológica en el grupo de individuos que presenta cáncer, cuando la detección del reordenamiento de los genes NAB2-STAT6 sea positiva. A third aspect of the invention relates to a method of supporting the histological diagnosis of cancer which comprises detecting the rearrangement of the STAT6 and / or NAB2 genes in a biological sample as described in the first and second method of the invention, and also It comprises classifying the individual from whom said biological sample comes from in the group of individuals who present with cancer, when the detection of the rearrangement of the NAB2-STAT6 genes is positive.
En una realización preferida de este aspecto de la invención, el cáncer es un tumor de partes blandas, y más preferiblemente Tumor Fibroso Solitario (TFS) y el Hemangiopericitoma (HPC). En esta memoria se entiende por "detección del reordenamiento positiva" cuando se observa: a) una separación de al menos una de las dos señales de fusión, observándose por lo tanto una señal verde [señal verde correspondiente a la sonda posicionada en 3' de los genes a estudiar (STAT6_5p_BA_157Kb; Esquema Fig. 1) y señal roja correspondiente a la sonda posicionada en 5' de los genes a estudiar (STAT6_3p_BA_117Kb; Esquema Fig. 1)] separada (Fig.9); b) la presencia de una tercera señal roja adyacente a una de las dos señales de fusión físicamente separada y de diámetro e intensidad reducidas comparadas con la señal normal (Fig. 6, 7, 8) Se considera que la neoplasia es "positiva" para el reordenamiento de los genes NAB2- STAT6 cuando dicha alteración se detecte preferiblemente en más 50% de los núcleos en inferíase de las células tumorales estudiadas, más preferiblemente en el más del 40%, aún más preferiblemente en más del 30%, y todavía más preferiblemente en el 20%. Preferiblemente se evalúan al menos una célula, más preferiblemente entre 20- 500 células, aún más preferiblemente entre 50-250 células y más preferiblemente se evalúan 100 células. Por otro lado, las células evaluadas preferiblemente pertenecen al menos a 2 áreas distintas del tumor, más preferiblemente pertenecen a 10 áreas. In a preferred embodiment of this aspect of the invention, the cancer is a soft tissue tumor, and more preferably Solitary Fibrous Tumor (TFS) and Hemangiopericytoma (HPC). In this report, "positive rearrangement detection" is understood when observing: a) a separation of at least one of the two fusion signals, thus observing a green signal [green signal corresponding to the probe positioned at 3 'of the genes to be studied (STAT6_5p_BA_157Kb; Scheme Fig. 1) and red signal corresponding to the probe positioned at 5 'of the genes to study (STAT6_3p_BA_117Kb; Scheme Fig. 1)] separated (Fig. 9); b) the presence of a third red signal adjacent to one of the two physically separated fusion signals and of reduced diameter and intensity compared to the normal signal (Fig. 6, 7, 8) The neoplasm is considered to be "positive" for the rearrangement of the NAB2-STAT6 genes when said alteration is preferably detected in more than 50% of the nuclei in inferred from the tumor cells studied, more preferably in more than 40%, even more preferably in more than 30%, and even more preferably in 20%. Preferably at least one cell is evaluated, more preferably between 20-500 cells, even more preferably between 50-250 cells and more preferably 100 cells are evaluated. On the other hand, the cells evaluated preferably belong to at least 2 different areas of the tumor, more preferably they belong to 10 areas.
El experto en la materia es capaz de detectar cuando las señales son adyacentes empleando técnicas rutinarias de microscopía. The person skilled in the art is able to detect when the signals are adjacent using routine microscopy techniques.
Los métodos descritos anteriormente pueden ser total o parcialmente automatizados, por ejemplo, por medio de un equipo robótico sensor para la detección del reordenamiento de los genes. The methods described above can be fully or partially automated, for example, by means of a robotic sensor device for the detection of gene rearrangement.
En esta memoria se entiende por "hibridación" como la capacidad que poseen los ácidos nucleicos para unirse de forma complementaria con determinada secuencia de ADN o ARN. La hibridación o unión de fragmentos marcados de ADN de una hebra o de ARN con secuencias complementarias (sondas) a ADN/ARN celular formarán híbridos estables que permitirá la detección de secuencias dianas. En general, la hibridación puede hacerse sobre soportes sólidos (filtros de nylon o nitrocelulosa), en solución (in vitro) o en cortes de tejido o preparaciones celulares (in situ). En esta memoria se entiende por "FISH o hibridación fluorescente in situ" a una técnica citogenética de mareaje de cromosomas mediante la cual estos son hibridados con sondas que emiten fluorescencia y permiten la visualización, distinción y estudio de los cromosomas así como de las anomalías que puedan presentar. Esta técnica permite la rápida determinación de aneuploidías, microdeleciones, duplicaciones, inversiones, así como la adjudicación de un marcador genético a un cromosoma (cartografía genética). La técnica FISH usa segmentos de una única hebra de ADN que son tintados, o etiquetados, con una sustancia fluorescente que puede ligarse a un cromosoma específico; estos segmentos de ADN son llamados sondas. En un principio se empleaban sondas de carácter radiactivo, pero este tipo de mareaje fue reemplazado por los fluoróforos por mayor seguridad, eficacia y facilidad de detección. La técnica FISH puede realizarse a los cromosomas en metafase o en interfase. In this specification, "hybridization" is understood as the ability of nucleic acids to bind in a complementary manner with a particular DNA or RNA sequence. Hybridization or binding of labeled strands of stranded DNA or RNA with complementary sequences (probes) to cellular DNA / RNA will form stable hybrids that will allow detection of target sequences. In general, hybridization can be done on solid supports (nylon or nitrocellulose filters), in solution (in vitro) or in tissue sections or cell preparations (in situ). In this report, "FISH or fluorescent in situ hybridization" means a cytogenetic chromosome mapping technique whereby these are hybridized with probes that emit fluorescence and allow the visualization, distinction and study of chromosomes as well as the anomalies that can present This technique It allows the rapid determination of aneuploidies, microdeletions, duplications, inversions, as well as the award of a genetic marker to a chromosome (genetic mapping). The FISH technique uses segments of a single strand of DNA that are stained, or labeled, with a fluorescent substance that can be linked to a specific chromosome; These segments of DNA are called probes. Initially, radioactive probes were used, but this type of marking was replaced by fluorophores for greater safety, efficiency and ease of detection. The FISH technique can be performed on chromosomes in metaphase or at interface.
Un procedimiento FISH convencional comprende, aunque sin limitarnos, los siguientes pasos: el primer paso de la técnica consiste en la desnaturalización del ADN para separar la doble hélice. A la muestra desnaturalizada se le añade entonces la sonda de interés (fragmento de ADN marcado fluorescentemente). Primero, las sondas hibridan a las regiones específicas para las que han sido diseñadas. Después, se tiñen los núcleos con un color de contraste inespecífico (generalmente DAPI). Las sondas de ADN pueden marcarse con moléculas fluorescentes denominados fluoróforos (método directo) o no fluorescentes que se detectan con anticuerpos fluorescentes (método indirecto). Por último, se visualiza la muestra preparada bajo un microscopio de fluorescencia. A conventional FISH procedure comprises, but is not limited to, the following steps: the first step of the technique consists in denaturing the DNA to separate the double helix. The probe of interest (fluorescently labeled DNA fragment) is then added to the denatured sample. First, the probes hybridize to the specific regions for which they have been designed. Then, the nuclei are stained with a nonspecific contrast color (usually DAPI). DNA probes can be labeled with fluorescent molecules called fluorophores (direct method) or non-fluorescent that are detected with fluorescent antibodies (indirect method). Finally, the prepared sample is visualized under a fluorescence microscope.
La técnica FISH según los métodos de la invención no se limita únicamente a la técnica FISH convencional, sino que también puede realizarse mediante alguna de sus variantes: FISH en hebra, FISH inversa, FISH on a chip o FISH multicolor, o cualquiera de sus combinaciones The FISH technique according to the methods of the invention is not limited solely to the conventional FISH technique, but can also be carried out by any of its variants: FISH in strand, reverse FISH, FISH on a chip or multicolored FISH, or any combination thereof
En esta invención se entiende por "reordenamiento de los genes" a una alteración estructural de los cromosomas que causa un cambio en el orden y disposición de determinados loci o genes. In this invention, "rearrangement of genes" is understood as a structural alteration of chromosomes that causes a change in the order and arrangement of certain loci or genes.
En esta invención se entiende por "cáncer de tejido blando o sarcomas de tejidos blandos" a las neoplasias malignas en los músculos, tendones, grasa, vasos sanguíneos, vasos linfáticos, nervios y tejidos alrededor de las articulaciones. Normalmente los sarcomas de tejidos blandos en adultos se pueden formar en casi cualquier parte del cuerpo, pero son más comunes en la cabeza, el cuello, los brazos, las piernas, el tronco y el abdomen. Ejemplos de cáncer de tejidos blandos son, aunque sin limitarnos, Tumor Fibroso Solitario (TFS), Hemangiopericitoma (HPC), sarcoma de Ewing, sarcoma sinovial, rabdomiosarcoma, y mixofibrosarcoma. Otros ejemplos de cáncer de tejidos blando se encuentran descritos en la publicación: Pathology and Genetics of Tumours of Soft Tissue and Bone, World Health Organizaron Classification of Tumours, 2013. In this invention, "soft tissue cancer or soft tissue sarcomas" is understood as malignant neoplasms in the muscles, tendons, fat, blood vessels, lymphatic vessels, nerves and tissues around the joints. Normally, soft tissue sarcomas in adults can form in almost any part of the body, but they are more common in the head, neck, arms, legs, trunk and abdomen. Examples of soft tissue cancer are, but are not limited to, Solitary Fibrous Tumor (TFS), Hemangiopericytoma (HPC), Ewing's sarcoma, synovial sarcoma, rhabdomyosarcoma, and myxofibrosarcoma. Others Examples of soft tissue cancer are described in the publication: Pathology and Genetics of Tumors of Soft Tissue and Bone, World Health Organized Classification of Tumors, 2013.
En esta memoria se entiende por "Tumor Fibroso Solitario" a una neoplasia poco frecuente que se describió originalmente en la pleura, visceral o parietal y que puede aparecer en cualquier localización del cuerpo. Se ha denominado desde que se describió con diferentes términos como mesotelioma localizado benigno, mesotelioma fibroso localizado, submesotelioma, tumor fibroso localizado de la pleura, fibroma pleural, fibroma subseroso y fibroma solitario benigno. En esta memoria se entiende por "hemangiopericitoma" a los tumores de los tejidos blandos que se pueden localizar en cualquier lugar del cuerpo. Los hemangioperitomas más frecuentes son los hemangioperitomas palpebrales u orbitales, óseos, pulmonares y de tejidos blandos. Los hemangiopericitomas de los tejidos blandos se localizan preferentemente en la periferia, sobre todo en los muslos (35% de los casos), pelvis y retroperitoneo. Como en todos los hemangiopericitomas, afecta más frecuentemente a los adultos de mediana edad, aunque pueden darse en los niños. In this report, "Solitary Fibrous Tumor" is understood as a rare neoplasm that was originally described in the pleura, visceral or parietal and may appear in any location of the body. It has been called since it was described under different terms as benign localized mesothelioma, localized fibrous mesothelioma, submesothelioma, localized pleural fibrous tumor, pleural fibroma, subserose fibroma and benign solitary fibroma. In this report, "hemangiopericytoma" means soft tissue tumors that can be located anywhere in the body. The most frequent hemangioperitomas are palpebral or orbital, bone, lung and soft tissue hemangioperitomas. Soft tissue hemangiopericytomas are preferentially located in the periphery, especially in the thighs (35% of cases), pelvis and retroperitoneum. As in all hemangiopericytomas, it affects middle-aged adults more frequently, although they can occur in children.
El primer y el segundo método de la invención comprenden adicionalmente la realización de procedimientos de amplificación del ADN, preferiblemente por reacción en cadena de la polimerasa (PCR). The first and second method of the invention further comprise performing DNA amplification procedures, preferably by polymerase chain reaction (PCR).
Una "muestra biológica aislada" incluye, pero sin limitarnos a, células, tejidos y/o fluidos biológicos de un organismo, obtenidos mediante cualquier método conocido por un experto en la materia. Preferiblemente, la muestra biológica aislada es una célula con núcleo, preferiblemente una célula neoplásica. Como se ha indicado anteriormente en esta descripción, la muestra biológica también podría ser material tisular, preferiblemente fresco o cortes del mismo fijados en formol e incluidos en parafina. An "isolated biological sample" includes, but is not limited to, cells, tissues and / or biological fluids of an organism, obtained by any method known to a person skilled in the art. Preferably, the isolated biological sample is a core cell, preferably a neoplastic cell. As indicated earlier in this description, the biological sample could also be tissue material, preferably fresh or formalin-fixed and paraffin-cut sections.
El término "individuo", tal y como se utiliza en la descripción, se refiere a animales, preferiblemente mamíferos, y más preferiblemente, humanos. El término "individuo" en esta memoria, es sinónimo de "paciente", y no pretende ser limitativo en ningún aspecto, pudiendo ser éste de cualquier edad, sexo y condición física. The term "individual", as used in the description, refers to animals, preferably mammals, and more preferably, humans. The term "individual" in this report is synonymous with "patient", and is not intended to be limiting in any way, and may be of any age, sex and physical condition.
KIT O DISPOSITIVO DE LA INVENCIÓN Y USOS Un cuarto aspecto de la invención se refiere a un kit o dispositivo, de ahora en adelante kit o dispositivo de la invención, que comprende los polinucleótidos o las sondas según el primer método de la invención. KIT OR DEVICE OF THE INVENTION AND USES A fourth aspect of the invention relates to a kit or device, hereinafter kit or device of the invention, comprising polynucleotides or probes according to the first method of the invention.
En una realización preferida de este aspecto de la invención, el kit o dispositivo de la invención además comprende todos aquellos elementos necesarios para llevar a cabo un procedimiento FISH. In a preferred embodiment of this aspect of the invention, the kit or device of the invention further comprises all those elements necessary to carry out an FISH process.
En otra realización preferida de este aspecto de la invención, los polinucleótidos y/o las sondas según el primer método de la invención están modificados. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, the polynucleotides and / or probes according to the first method of the invention are modified.
En otra realización preferida de este aspecto de la invención, los polinucleótidos y/o las sondas de la invención están marcados con moléculas fluorescentes, preferiblemente con fluoróforos. En otra realización preferida de este aspecto de la invención los polinucleótidos y/o las sondas de la invención están marcados con moléculas no fluorescentes. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, the polynucleotides and / or probes of the invention are labeled with fluorescent molecules, preferably with fluorophores. In another preferred embodiment of this aspect of the invention the polynucleotides and / or probes of the invention are labeled with non-fluorescent molecules.
En esta memoria se entiende por "fluoróforo o flurocromo" al componente de una molécula que hace que ésta sea fluorescente. Es un grupo funcional de la molécula que absorbe la energía de una longitud de onda específica y la vuelve a emitir en otra determinada de mayor longitud de onda (es decir, con menor energía). La cantidad de energía emitida y su longitud de onda dependen tanto del propio fluoróforo como de su ambiente químico. Por ejemplo, el isotiocianato de fluoresceína, derivado reactivo de la fluoresceína, ha sido uno de los fluorocromos que más habitualmente se han unido químicamente a otras moléculas no fluorescentes para generar nuevas moléculas fluorescentes para las más diversas aplicaciones. Otros fluorocromos que han sido comunes a lo largo de la historia son los derivados de la rodamina, cumarina y cianina. Existe una nueva generación de fluorocromos como el Alexa Flúor o los DyLight Flúor son generalmente más foto estable, brillante y menos sensible al pH que otros colorantes estándares de excitación y emisión comparable. In this specification, "fluorophore or flurochrome" is understood as the component of a molecule that makes it fluorescent. It is a functional group of the molecule that absorbs the energy of a specific wavelength and emits it again in a specific one of greater wavelength (that is, with less energy). The amount of energy emitted and its wavelength depend on both the fluorophore itself and its chemical environment. For example, fluorescein isothiocyanate, a reactive derivative of fluorescein, has been one of the fluorochromes that have most commonly chemically bound to other non-fluorescent molecules to generate new fluorescent molecules for the most diverse applications. Other fluorochromes that have been common throughout history are those derived from rhodamine, coumarin and cyanine. There is a new generation of fluorochromes such as Alexa Fluorine or DyLight Fluoride are generally more stable, bright and less pH sensitive than other standard excitation and comparable emission dyes.
En otra realización preferida de este aspecto de la invención, los polinucleótidos y/o las sondas según el primer método de la invención, están marcados con moléculas no fluorescentes. En otra realización preferida de este aspecto de la invención, el kit o dispositivo de la invención además comprende anticuerpos o fragmentos de los mismos fluorescentes para la detección de los polinucleótidos o de las sondas según el primer método de la invención, marcados con moléculas no fluorescentes. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, the polynucleotides and / or probes according to the first method of the invention are labeled with non-fluorescent molecules. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, the kit or device of the invention further comprises antibodies or fragments of the same fluorescents for the detection of polynucleotides or probes according to the first method of the invention, labeled with non-fluorescent molecules.
El kit de la invención puede incluir controles positivos y/o negativos. El kit además puede contener, sin ningún tipo de limitación, tampones, soluciones de extracción de proteínas, agentes para prevenir la contaminación, inhibidores de la degradación de las proteínas, etc. The kit of the invention may include positive and / or negative controls. The kit may also contain, without any limitation, buffers, protein extraction solutions, agents to prevent contamination, inhibitors of protein degradation, etc.
Por otro lado el kit puede incluir todos los soportes y recipientes necesarios para su puesta en marcha y optimización. Preferiblemente, el kit comprende además las instrucciones para llevar a cabo los métodos de la invención. En esta invención se entiende por "cromosoma 12 humano" a uno de los 23 pares de cromosomas del cariotipo humano. Los humanos poseen, en condiciones normales, dos copias de este cromosoma, uno heredado de la madre y uno del padre gracias a la reproducción sexual. Se ha estimado que el cromosoma 12 posee alrededor de 133 millones de pares de bases y que representan entre el 4-4,5% del ADN total de la célula. El cromosoma 12 alberga una cantidad estimada de entre 1000-1300 genes, y asimismo el clúster de genes Homeobox C. Alguno de los principales genes son: ACVRL1, CBX5, COL2A 1, HPDLRRK2, MMAB, MY01A, NANOG, PAH, PPP1R12A, PTPN11, VDR, NAB2 y STAT6. Algunas enfermedades y desórdenes conocidos relacionados con trastornos en este cromosoma son: Acidemiametilmalónica, Acondrogénesis tipo 2, Colagenopatía, tipos II y XI, Deficiencia de triosa-fosfato isomerasa, Displasia espondiloepifisaria congénita, Displasia de Kniest, Enfermedad de Rendu-Osler-Weber, Enfermedad de Parkinson, Enfermedad de Von Willebrand, Fenilcetonuria, Fundusalbipunctatus, Hipocondrogénesis, Raquitismo, Síndrome de Noonan, Síndrome de Pallister-Killian, Síndrome de Stickler, Síndrome de Papillon- Lefévre, Sordera no sindrómica y Tirosinemia. On the other hand, the kit can include all the supports and containers necessary for commissioning and optimization. Preferably, the kit further comprises instructions for carrying out the methods of the invention. In this invention, "human chromosome 12" is understood as one of the 23 pairs of chromosomes of the human karyotype. Humans have, under normal conditions, two copies of this chromosome, one inherited from the mother and one from the father thanks to sexual reproduction. It has been estimated that chromosome 12 has about 133 million base pairs and represents between 4-4.5% of the total cell DNA. Chromosome 12 harbors an estimated amount of between 1000-1300 genes, and also the Homeobox C gene cluster. Some of the main genes are: ACVRL1, CBX5, COL2A 1, HPDLRRK2, MMAB, MY01A, NANOG, PAH, PPP1R12A, PTPN11 , VDR, NAB2 and STAT6. Some known diseases and disorders related to disorders on this chromosome are: Acidemiamethylmalónica, Achondrogenesis type 2, Collagen disease, types II and XI, Triosa-phosphate isomerase deficiency, Congenital spondyloepiphyseal dysplasia, Kniest's dysplasia, Rendu-Osler-Weber's disease, Disease of Parkinson's, Von Willebrand disease, Phenylketonuria, Fundusalbipunctatus, Hypochondrogenesis, Rickets, Noonan syndrome, Pallister-Killian syndrome, Stickler syndrome, Papillon-Lefevre syndrome, Non-syndromic deafness and Tyrosinemia.
En otra realización preferida de este aspecto de la invención, el kit puede contener oligonucleótidos diseñados a partir de una secuencia conocida o un ARNm, y/o capaces de hibridar con la secuencia de los genes NAB2 y STAT6, para posterior amplificación por PCR. Más preferiblemente las secuencias de los genes NAB2y STAT6, son las secuencias nucleotídicas indicadas para cada gen en la tabla 1. Preferiblemente, los oligonucleótidos presentan modificaciones en alguno de sus nucleótidos, como por ejemplo, pero sin limitarnos a, nucleótidos que tengan alguno de sus átomos con un isótopo radiactivo, normalmente 32P o tritio, nucleótidos marcados inmunológicamente, como por ejemplo con una molécula de digoxigenina, y/o inmovilizadas en una membrana. Varias posibilidades son conocidas en el estado de la técnica. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, the kit may contain oligonucleotides designed from a known sequence or an mRNA, and / or capable of hybridizing with the sequence of the NAB2 and STAT6 genes, for subsequent PCR amplification. More preferably, the sequences of the NAB2 and STAT6 genes are the nucleotide sequences indicated for each gene in Table 1. Preferably, the oligonucleotides have modifications in some of their nucleotides, such as, but not limited to, nucleotides having any of their atoms with a radioactive isotope, usually 32 P or tritium, labeled nucleotides immunologically, as for example with a molecule of digoxigenin, and / or immobilized in a membrane. Several possibilities are known in the state of the art.
En otra realización preferida de este aspecto de la invención, el kit o dispositivo de la invención comprende anticuerpos o fragmentos de los mismos específicos frente a cualquiera de los productos de expresión de los genes NAB2 y STAT6 o frente a secuencias aminoacídicas que presenten un grado de identidad con dichas secuencias aminoacídicas de, al menos del 85%, típicamente de, al menos del 90%, preferiblemente de, al menos del 95%, más preferiblemente de, al menos del 98%, aún más preferiblemente de, al menos del 99%. En otra realización preferida de este aspecto de la invención, el anticuerpo es humano, humanizado o sintético. En otra realización preferida, el anticuerpo es monoclonal y/o se encuentra marcado con un fluorocromo. Preferiblemente, el flurocromo se selecciona de la lista que comprende Fluoresceína (FITC), Tetrametilrodamina y derivados, Ficoeritrina (PE), PerCP, Cy5, Texas, aloficocianina, o cualquiera de sus combinaciones. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, the kit or device of the invention comprises antibodies or fragments thereof specific against any of the expression products of the NAB2 and STAT6 genes or against amino acid sequences that have a degree of identity with said amino acid sequences of at least 85%, typically of at least 90%, preferably of at least 95%, more preferably of at least 98%, even more preferably of at least 99 %. In another preferred embodiment of this aspect of the invention, the antibody is human, humanized or synthetic. In another preferred embodiment, the antibody is monoclonal and / or is labeled with a fluorochrome. Preferably, the flurochrome is selected from the list comprising Fluorescein (FITC), Tetramethylrodamine and derivatives, Phycoerythrin (PE), PerCP, Cy5, Texas, allophycocyanin, or any combination thereof.
El genMAS2codifica un miembro de la familia de proteínas de unión de NGFI-A (NAB), que funcionan en el núcleo reprimiendo la transcripción inducida por algunos miembros de la EGR (crecimiento inicial de respuesta) de la familia de transactivadores. Las proteínas NAB pueden homo- o hetero-multimerizar con otras proteínas EGR o NAB través de un dominio N-terminal conservado, y reprimir la transcripción a través de dos dominios C-terminal parcialmente redundantes. La represión transcripcional de la proteína codificada está mediada en parte por las interacciones con la remodelación nucleosoma y complejo deactylase (NuRD). Se han descrito variantes de transcripción alternativamente empalmados, pero su validez biológica no se ha determinado. The genMAS2 encodes a member of the NGFI-A (NAB) binding protein family, which function in the nucleus repressing the transcription induced by some members of the EGR (initial response growth) of the transactivator family. NAB proteins can homo- or hetero-multimerize with other EGR or NAB proteins through a conserved N-terminal domain, and repress transcription through two partially redundant C-terminal domains. Transcriptional repression of the encoded protein is mediated in part by interactions with nucleosome remodeling and deactylase complex (NuRD). Alternatively spliced transcription variants have been described, but their biological validity has not been determined.
El gen STAT6 codifica una proteína que es un miembro de la familia de factores de transcripción SL 7. En respuesta a las citoquinas y factores de crecimiento, los miembros de la familia STAT son fosforilados por las quinasas asociadas a receptores y, a continuación, forman homo- o heterodímeros que se traslocan al núcleo celular donde actúan como activadores de la transcripción. Esta proteína juega un papel central en el ejercicio de las respuestas biológicas mediadas IL4. Se encuentra para inducir la expresión de Bcl2l1 / BCL-X (L), que es responsable de la actividad anti- apoptótica de IL4. Estudios en ratones Knockout sugieren las funciones de este gen en la diferenciación de las células T helper 2 (Th2), la expresión de marcadores de superficie celular, y de cambio de clase de las inmunoglobulinas. Resultados de splicing alternativo en múltiples variantes de la transcripción. The STAT6 gene encodes a protein that is a member of the SL 7 transcription factor family. In response to cytokines and growth factors, members of the STAT family are phosphorylated by receptor-associated kinases and then form homo- or heterodimers that are translocated to the cell nucleus where they act as activators of transcription. This protein plays a central role in the exercise of IL4 mediated biological responses. It is found to induce the expression of Bcl2l1 / BCL-X (L), which is responsible for the anti-apoptotic activity of IL4. Studies in Knockout mice suggest the functions of this gene in the differentiation of helper 2 (Th2) T cells, the expression of markers of cell surface, and class change of immunoglobulins. Results of alternative splicing in multiple transcription variants.
Tabla 1. Secuencias de la invención Table 1. Sequences of the invention
Figure imgf000020_0001
En el contexto de la presente invención, los genes NAB2 y STAT6 se definen también por una secuencia de nucleótidos o polinucleótido, que constituye la secuencia codificante de las proteínas recogidas respectivamente en la Tabla 1 , siendo dichas proteínas el producto de expresión de cada uno de los genes identificados en la tabla. Adicionalmente la presente invención comprende diversas variantes procedentes de cada una de las secuencias identificadas en la tabla 1.
Figure imgf000020_0001
In the context of the present invention, the NAB2 and STAT6 genes are also defined by a nucleotide or polynucleotide sequence, which constitutes the coding sequence of the proteins collected respectively in Table 1, said proteins being the expression product of each of the genes identified in the table. Additionally, the present invention comprises several variants from each of the sequences identified in Table 1.
En este sentido, variantes de las secuencias asociadas al gen NAB2 comprenden: a) molécula de ácido nucleico que codifican un polipéptido que comprende la secuencia aminoácidica de la SEQ ID NO: 2 ó SEQ ID NO: 4 recogida en la Tabla 1 . b) moléculas de ácido nucleico cuya cadena complementaria híbrida con la secuencia polinucleotídica de a) c) moléculas de ácido nucleico cuya secuencia difiere de a) y/o b) debido a la degeneración del código genético, d) moléculas de ácido nucleico que codifican un polipéptido que comprende la secuencia aminoacídica con una identidad de al menos un 80%, un 90%, un 95%, un 98% o un 99% con la SEQ ID NO: 2 ó SEQ ID NO: 4 recogidas en la Tabla 1 , respectivamente, y en las que el polipéptido codificado por dichos ácidos nucleicos posee la actividad y las características estructurales de la proteína NAB2. Entre dichas moléculas de ácido nucleico se encuentra la recogida en la SEQ ID NO:1 ó SEQ ID NO:3 indicada en la Tabla 1. In this sense, variants of the sequences associated with the NAB2 gene comprise: a) nucleic acid molecule encoding a polypeptide comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 or SEQ ID NO: 4 listed in Table 1. b) nucleic acid molecules whose complementary hybrid chain with the polynucleotide sequence of a) c) nucleic acid molecules whose sequence differs from a) and / or b) due to the degeneracy of the genetic code, d) nucleic acid molecules encoding a polypeptide comprising the amino acid sequence with an identity of at least 80%, 90%, 95%, 98% or 99% with SEQ ID NO: 2 or SEQ ID NO: 4 listed in Table 1, respectively, and in which the polypeptide encoded by said nucleic acids possesses the activity and structural characteristics of the NAB2 protein. Among said nucleic acid molecules is the collection in SEQ ID NO: 1 or SEQ ID NO: 3 indicated in Table 1.
Variantes de las secuencias asociadas al gen STAT6 comprenden: a) molécula de ácido nucleico que codifican un polipéptido que comprende la secuencia aminoácidica de la SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10,Variants of the sequences associated with the STAT6 gene comprise: a) nucleic acid molecule encoding a polypeptide comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10,
SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18 ó SEQ ID NO: 20 recogida en la Tabla 1. b) moléculas de ácido nucleico cuya cadena complementaria híbrida con la secuencia polinucleotídica de a) c) moléculas de ácido nucleico cuya secuencia difiere de a) y/o b) debido a la degeneración del código genético, d) moléculas de ácido nucleico que codifican un polipéptido que comprende la secuencia aminoacídica con una identidad de al menos un 80%, un 90%, un 95%, un 98% o un 99% con la SEQ I D NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ I D NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18 ó SEQ IDSEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18 or SEQ ID NO: 20 listed in Table 1. b) nucleic acid molecules whose complementary chain hybridizes with the polynucleotide sequence of a) c) nucleic acid molecules whose sequence differs from a) and / or b) due to the degeneracy of the genetic code, d) nucleic acid molecules that encode a polypeptide comprising the amino acid sequence with an identity of at least 80% , 90%, 95%, 98% or 99% with SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 18 or SEQ ID
NO: 20 recogida en la Tabla 1 , respectivamente, y en las que el polipéptido codificado por dichos ácidos nucleicos posee la actividad y las características estructurales de la proteína STAT6. Entre dichas moléculas de ácido nucleico se encuentra la recogida en la SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 1 1 , SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17,ó SEQ IDNO: 20 shown in Table 1, respectively, and in which the polypeptide encoded by said nucleic acids possesses the activity and structural characteristics of the STAT6 protein. Among said nucleic acid molecules is the collection in SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 1 1, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 17, or SEQ ID
NO: 19 indicada en la Tabla 1. NO: 19 indicated in Table 1.
Las secuencias de los genes NAB y STAT6, indicadas en la Tabla 1 son las siguientes; The sequences of the NAB and STAT6 genes, indicated in Table 1 are as follows;
NAB SEQ ID NO: 1 : CTCTCCCAGTCTCTAAGCCGCGGCGTCTCCGCGGCCGAGAGGCCCCAGCGCCC GCCTCCCCGGCCCCCGCCCCCACCCCCGCCCCCGGCTCTGCCCACGCCCTCCG CCCGCCAGCCCGGCAGCCAGCGCAGCTCCGGGCCTCGCTCCCTGTGCGTCCTG CGGGGGCGGAGGCGCGGAGAGGCGGCAAGCGCAGCCGGGGAGGGTGGGGGG GCAGAGGCACAGACAGAGGCGCGGAGGCTCGGAGAGAGAAGACGTGGAGGGAG GGACAGAGCCTGGACAGCGGTGGACACGGCATCGTGCGCGGGGAAGAGGGCAG CACGCAGCAGGCGCCGAGCGCCGGGCACCGAGAAGGGCAGCCCGGGTGATCTC CGGCCGTCCATGCACAGAGCGCCTTCCCCCACAGCCGAGCAGCCGCCGGGCGG AGGGGACAGCGCCCGCCGGACCCTGCAGCCCAGACTCAAGCCCAGTGCCCGAG CCATGGCACTGCCTCGGACGCTGGGGGAGCTGCAGCTGTACCGGGTCCTGCAG CGCGCCAACCTCCTTTCCTACTATGAGACCTTCATCCAGCAGGGAGGGGACGAC GTGCAGCAGCTGTGTGAGGCGGGTGAGGAGGAGTTTCTGGAGATCATGGCACTT GTGGGCATGGCCACCAAGCCCCTCCATGTCCGGCGCCTGCAGAAGGCACTGAGA GAGTGGGCCACCAATCCAGGGCTCTTCAGTCAACCAGTGCCTGCTGTTCCCGTCT CCAGCATCCCGCTCTTCAAGATCTCTGAGACTGCGGGTACCCGGAAAGGGAGCA TGAGCAATGGGCATGGCAGCCCAGGGGAAAAGGCAGGCAGTGCCCGCAGTTTTA GCCCCAAGAGCCCCCTTGAACTTGGAGAGAAGCTATCACCACTGCCTGGGGGAC CTGGGGCAGGGGACCCCCGGATCTGGCCAGGCCGGAGCACTCCAGAGTCGGAC GTTGGGGCAGGAGGAGAAGAGGAGGCTGGCTCGCCCCCCTTCTCCCCCCCTGC AGGGGGAGGAGTCCCTGAGGGGACTGGGGCTGGGGGGCTGGCAGCAGGTGGG ACTGGGGGTGGTCCAGACCGACTGGAGCCAGAGATGGTACGCATGGTGGTGGAA AGTGTGGAGAGGATCTTCCGGAGCTTCCCAAGGGGGGATGCTGGGGAGGTCACA TCCCTGCTAAAGCTGAATAAGAAGCTGGCACGGAGCGTTGGGCACATCTTTGAGA TGGATGATAATGACAGCCAGAAGGAAGAGGAGATCCGCAAATACAGCATCATCTA TGGCCGTTTCGACTCTAAGCGGCGGGAGGGCAAGCAGCTCAGCCTGCACGAGCT CACCATCAACGAGGCTGCTGCCCAGTTCTGCATGAGGGACAACACGCTCTTATTA CGGAGAGTGGAGCTCTTCTCTTTGTCCCGCCAAGTAGCCCGAGAGAGCACCTACT TGTCCTCCTTGAAGGGCTCCAGGCTTCACCCTGAAGAACTGGGAGGCCCTCCACT GAAGAAGCTGAAACAAGAGGTTGGAGAACAGAGTCACCCTGAAATCCAGCAGCCT CCCCCAGGCCCTGAGTCCTATGTACCCCCATACCGCCCCAGCCTGGAGGAGGAC AGCGCCAGCCTGTCTGGGGAGAGTCTGGATGGACATTTGCAGGCTGTGGGGTCA TGTCCAAGGCTGACGCCGCCCCCTGCTGACCTGCCTCTGGCATTGCCAGCCCAT GGGCTATGGAGCCGACACATCCTGCAGCAGACACTGATGGACGAGGGGCTGCG GCTCGCCCGCCTCGTCTCCCACGACCGCGTGGGCCGCCTCAGCCCCTGTGTGC CTGCGAAGCCACCTCTCGCAGAGTTCGAGGAAGGGCTGCTGGACAGATGTCCTG CCCCAGGACCCCATCCCGCGCTGGTGGAGGGTCGCAGGAGCAGCGTGAAAGTG GAGGCTGAGGCCAGCCGGCAGTGAGGGTTGGACTGGTGTCTTCAGACCCAGGA CCTCAGACTTCTGGCTCACACAGACCCCCACGCTCTCCATCCCCGGAATCTAGTC ACAACCCTGGATCCTTCCTCTGCCCTTCTCCTGCCTCCCCACCTGCTCCATGGGC ATAAGACTGTGGGGCTTCAAGCAATAACAAGCAGAGGCCTGGAGAGAGGACACA AGGAGGGTGCGTGGTGCCCTCACCCCTGCCCAGAGCGAGGGGGCAAGGACTCT GCCTCCAGGGCATCTGGGGTTTTCCCCTCCCTCACACAACACACTCCCATTCTCT TTAGGTTTGCACCAGTGGTGTGAGCAGTTGGACTCAGTTTGGACAAGGGGGAAAG GGGGACTTCCCTGGGAAGGTCCAGCTAAAAGTGGCAACATTTGCCCCCAGAATTG GGGGCCTGGGAACACTGGACCTGCTCCTTCTCCCCTCTCCTTCCCCGTTTTTGTG CTTCTGGTTTGTTTCTTTAATTAATTTAACAAGTGCTGCAGTTTGCCCTCCCATTCC CATCTATCCCCCAAGTCCTTTGCAATTTCTTCCCTGCCCTACATAGGGGCGGTGG GTGTGGGATCCCTTCACTGGCCCCCTCGGGAGGCCTGGGTTGGACTCAGGGTCT CCTCCAGCTGGGGGCTGGACCGCAGCACCTATCTGAGCAGTTAGAGCGTCTTTC TTTTCAGATTGTGTACAGTAGATTATTTATTTTGTTATTTTGGAATAAAATTTATTTTA TGGCTTAGGAAAAAAAAAAAAAAA NAB SEQ ID NO: 1: CTCTCCCAGTCTCTAAGCCGCGGCGTCTCCGCGGCCGAGAGGCCCCAGCGCCC GCCTCCCCGGCCCCCGCCCCCACCCCCGCCCCCGGCTCTGCCCACGCCCTCCG CCCGCCAGCCCGGCAGCCAGCGCAGCTCCGGGCCTCGCTCCCTGTGCGTCCTG CGGGGGCGGAGGCGCGGAGAGGCGGCAAGCGCAGCCGGGGAGGGTGGGGGG GCAGAGGCACAGACAGAGGCGCGGAGGCTCGGAGAGAGAAGACGTGGAGGGAG GGACAGAGCCTGGACAGCGGTGGACACGGCATCGTGCGCGGGGAAGAGGGCAG CACGCAGCAGGCGCCGAGCGCCGGGCACCGAGAAGGGCAGCCCGGGTGATCTC CGGCCGTCCATGCACAGAGCGCCTTCCCCCACAGCCGAGCAGCCGCCGGGCGG AGGGGACAGCGCCCGCCGGACCCTGCAGCCCAGACTCAAGCCCAGTGCCCGAG CCATGGCACTGCCTCGGACGCTGGGGGAGCTGCAGCTGTACCGGGTCCTGCAG CGCGCCAACCTCCTTTCCTACTATGAGACCTTCATCCAGCAGGGAGGGGACGAC GTGCAGCAGCTGTGTGAGGCGGGTGAGGAGGAGTTTCTGGAGATCATGGCACTT GTGGGCATGGCCACCAAGCCCCTCCATGTCCGGCGCCTGCAGAAGGCACTGAGA GAGTGGGCCACCAATCCAGGGCTCTTCAGTCAACCAGTGCCTGCTGTTCCCGTCT CCAGCATCCCGCTCTTCAAGATCTCTGAGACTGCGGGTACCCGGAAAGGGAGCA TGAGCAATGGGCATGGCAGCCCAGGGGAAAAGGCAGGCAGTGCCCGCAGTTTTA GCCCCAAGAGCCCCCTTGAACTTGGAGAGAAGCTATCACCACTGCCTGGGGGAC CTGGGGCAGGGGACCCCCGGATCTGGCCAGGCCGGAGCACTCCAGAGTCGGAC GTTGGGGCAGGAGGAGAAGAGG AGGCTGGCTCGCCCCCCTTCTCCCCCCCTGC AGGGGGAGGAGTCCCTGAGGGGACTGGGGCTGGGGGGCTGGCAGCAGGTGGG ACTGGGGGTGGTCCAGACCGACTGGAGCCAGAGATGGTACGCATGGTGGTGGAA AGTGTGGAGAGGATCTTCCGGAGCTTCCCAAGGGGGGATGCTGGGGAGGTCACA TCCCTGCTAAAGCTGAATAAGAAGCTGGCACGGAGCGTTGGGCACATCTTTGAGA TGGATGATAATGACAGCCAGAAGGAAGAGGAGATCCGCAAATACAGCATCATCTA TGGCCGTTTCGACTCTAAGCGGCGGGAGGGCAAGCAGCTCAGCCTGCACGAGCT CACCATCAACGAGGCTGCTGCCCAGTTCTGCATGAGGGACAACACGCTCTTATTA CGGAGAGTGGAGCTCTTCTCTTTGTCCCGCCAAGTAGCCCGAGAGAGCACCTACT TGTCCTCCTTGAAGGGCTCCAGGCTTCACCCTGAAGAACTGGGAGGCCCTCCACT GAAGAAGCTGAAACAAGAGGTTGGAGAACAGAGTCACCCTGAAATCCAGCAGCCT CCCCCAGGCCCTGAGTCCTATGTACCCCCATACCGCCCCAGCCTGGAGGAGGAC AGCGCCAGCCTGTCTGGGGAGAGTCTGGATGGACATTTGCAGGCTGTGGGGTCA TGTCCAAGGCTGACGCCGCCCCCTGCTGACCTGCCTCTGGCATTGCCAGCCCAT GGGCTATGGAGCCGACACATCCTGCAGCAGACACTGATGGACGAGGGGCTGCG GCTCGCCCGCCTCGTCTCCCACGACCGCGTGGGCCGCCTCAGCCCCTGTGTGC CTGCGAAGCCACCTCTCGCAGAGTTCGAGGAAGGGCTGCTGGACAGATGTCCTG CCCCAGGACCCCATCCCGCGCTGGTGGAGGGTCGCAGGAGCAGCGTGAAAGTG GAGGCTGAGGCCAGCCGGCAGTGAGGGTTGGACTGGTGTCTTCAGACCCAGGA CCTCAGACTTCTGGCTCACACAGACCCCCACGCTCTCCATCCCCGGAATCTAGTC ACAACCCTGGATCCTTCCTCTGCCCTTCTCCTGCCTCCCCACCTGCTCCATGGGC ATAAGACTGTGGGGCTTCAAGCAATAACAAGCAGAGGCCTGGAGAGAGGACACA AGGAGGGTGCGTGGTGCCCTCACCCCTGCCCAGAGCGAGGGGGCAAGGACTCT GCCTCCAGGGCATCTGGGGTTTTCCCCTCCCTCACACAACACACTCCCATTCTCT TTAGGTTTGCACCAGTGGTGTGAGCAGTTGGACTCAGTTTGGACAAGGGGGAAAG GGGGACTTCCCTGGGAAGGTCCAGCTAAAAGTGGCAACATTTGCCCCCAGAATTG GGGGCCTGGGAACACTGGACCTGCTCCTTCTCCCCTCTCCTTCCCCGTTTTTGTG CTTCTGGTTTGTTTCTTTAATTAATTTAACAAGTGCTGCAGTTTGCCCTCCCATTCC CATCTATCCCCCAAGTCCTTTGCAATTTCTTCCCTGCCCTACATAGGGGCGGTGG GTGTGGGATCCCTTCACTGGCCCCCTCGGGAGGCCTGGGTTGGACTCAGGGTCT CCTCCAGCTGGGGGCTGGACCGCAGCACCTATCTGAGCAGTTAGAGCGTCTTTC TTTTCAGATTGTGTACAGTAGATTATTTATTTTGTTATTTTGGAATAAAATTTATTTTA TGGCTTAGGAAAAAAAAAAAAAAA
SEQ ID NO: 2: SEQ ID NO: 2:
MHRAPSPTAEQPPGGGDSARRTLQPRLKPSARAMALPRTLGELQLYRVLQRANLLS YYETFIQQGGDDVQQLCEAGEEEFLEIMALVGMATKPLHVRRLQKALREWATNPGLF SQPVPAVPVSSIPLFKISETAGTRKGSMSNGHGSPGEKAGSARSFSPKSPLELGEKLS PLPGGPGAGDPRIWPGRSTPESDVGAGGEEEAGSPPFSPPAGGGVPEGTGAGGLA AGGTGGGPDRLEPEMVRMVVESVERIFRSFPRGDAGEVTSLLKLNKKLARSVGHIFE MDDNDSQKEEEIRKYSIIYGRFDSKRREGKQLSLHELTINEAAAQFCMRDNTLLLRRV ELFSLSRQVARESTYLSSLKGSRLHPEELGGPPLKKLKQEVGEQSHPEIQQPPPGPE SYVPPYRPSLEEDSASLSGESLDGHLQAVGSCPRLTPPPADLPLALPAHGLWSRHILQ QTLMDEGLRLARLVSHDRVGRLSPCVPAKPPLAEFEEGLLDRCPAPGPHPALVEGRR SSVKVEAEASRQ MHRAPSPTAEQPPGGGDSARRTLQPRLKPSARAMALPRTLGELQLYRVLQRANLLS YYETFIQQGGDDVQQLCEAGEEEFLEIMALVGMATKPLHVRRLQKALREWATNPGLF SQPVPAVPVSSIPLFKISETAGTRKGSMSNGHGSPGEKAGSARSFSPKSPLELGEKLS PLPGGPGAGDPRIWPGRSTPESDVGAGGEEEAGSPPFSPPAGGGVPEGTGAGGLA AGGTGGGPDRLEPEMVRMVVESVERIFRSFPRGDAGEVTSLLKLNKKLARSVGHIFE MDDNDSQKEEEIRKYSIIYGRFDSKRREGKQLSLHELTINEAAAQFCMRDNTLLLRRV ELFSLSRQVARESTYLSSLKGSRLHPEELGGPPLKKLKQEVGEQSHPEIQQPPPGPE SYVPPYRPSLEEDSASLSGESLDGHLQAVGSCPRLTPPPADLPLALPAHGLWSRHILQ QTLMDEGLRLARLVSHDRVGRLSPCVPAKPPLAEFEEGLLDRCPAPGPHPALVEGRR SSVKVEAEASRQ
SEQ ID NO: 3: SEQ ID NO: 3:
CTCTCCCAGTCTCTAAGCCGCGGCGTCTCCGCGGCCGAGAGGCCCCAGCGCCC GCCTCCCCGGCCCCCGCCCCCACCCCCGCCCCCGGCTCTGCCCACGCCCTCCG CCCGCCAGCCCGGCAGCCAGCGCAGCTCCGGGCCTCGCTCCCTGTGCGTCCTG CGGGGGCGGAGGCGCGGAGAGGCGGCAAGCGCAGCCGGGGAGGGTGGGGGG GCAGAGGCACAGACAGAGGCGCGGAGGCTCGGAGAGAGAAGACGTGGAGGGAG GGACAGAGCCTGGACAGCGGTGGACACGGCATCGTGCGCGGGGAAGAGGGCAG CACGCAGCAGGCGCCGAGCGCCGGGCACCGAGAAGGGCAGCCCGGGTGATCTC CGGCCGTCCATGCACAGAGCGCCTTCCCCCACAGCCGAGCAGCCGCCGGGCGG AGGGGACAGCGCCCGCCGGACCCTGCAGCCCAGACTCAAGCCCAGTGCCCGAG CCATGGCACTGCCTCGGACGCTGGGGGAGCTGCAGCTGTACCGGGTCCTGCAG CGCGCCAACCTCCTTTCCTACTATGAGACCTTCATCCAGCAGGGAGGGGACGAC GTGCAGCAGCTGTGTGAGGCGGGTGAGGAGGAGTTTCTGGAGATCATGGCACTT GTGGGCATGGCCACCAAGCCCCTCCATGTCCGGCGCCTGCAGAAGGCACTGAGA GAGTGGGCCACCAATCCAGGGCTCTTCAGTCAACCAGTGCCTGCTGTTCCCGTCT CCAGCATCCCGCTCTTCAAGATCTCTGAGACTGCGGGTACCCGGAAAGGGAGCA TGAGCAATGGGCATGGCAGCCCAGGGGAAAAGGCAGGCAGTGCCCGCAGTTTTA GCCCCAAGAGCCCCCTTGAACTTGGAGAGAAGCTATCACCACTGCCTGGGGGAC CTGGGGCAGGGGACCCCCGGATCTGGCCAGGCCGGAGCACTCCAGAGTCGGAC GTTGGGGCAGGAGGAGAAGAGGAGGCTGGCTCGCCCCCCTTCTCCCCCCCTGC AGGGGGAGGAGTCCCTGAGGGGACTGGGGCTGGGGGGCTGGCAGCAGGTGGG ACTGGGGGTGGTCCAGACCGACTGGAGCCAGAGATGGTACGCATGGTGGTGGAA AGTGTGGAGAGGATCTTCCGGAGCTTCCCAAGGGGGGATGCTGGGGAGGTCACA TCCCTGCTAAAGCTGAATAAGAAGCTGGCACGGAGCGTTGGGCACATCTTTGAGA TGGATGATAATGACAGCCAGAAGGAAGAGGAGATCCGCAAATACAGCATCATCTA TGGCCGTTTCGACTCTAAGCGGCGGGAGGGCAAGCAGCTCAGCCTGCACGAGCT CACCATCAACGAGGCTGCTGCCCAGTTCTGCATGAGGGACAACACGCTCTTATTA CGGAGAGTGGAGCTCTTCTCTTTGTCCCGCCAAGTAGCCCGAGAGAGCACCTACT TGTCCTCCTTGAAGGGCTCCAGGCTTCACCCTGAAGAACTGGGAGGCCCTCCACT GAAGAAGCTGAAACAAGAGGTTGGAGAACAGAGTCACCCTGAAATCCAGCAGCCT CCCCCAGGCCCTGAGTCCTATGTACCCCCATACCGCCCCAGCCTGGAGGAGGAC AGCGCCAGCCTGTCTGGGGAGAGTCTGGATGGACATTTGCAGGAGTTCGAGGAA GGGCTGCTGGACAGATGTCCTGCCCCAGGACCCCATCCCGCGCTGGTGGAGGG TCGCAGGAGCAGCGTGAAAGTGGAGGCTGAGGCCAGCCGGCAGTGAGGGTTGG ACTGGTGTCTTCAGACCCAGGACCTCAGACTTCTGGCTCACACAGACCCCCACGC TCTCCATCCCCGGAATCTAGTCACAACCCTGGATCCTTCCTCTGCCCTTCTCCTGC CTCCCCACCTGCTCCATGGGCATAAGACTGTGGGGCTTCAAGCAATAACAAGCAG AGGCCTGGAGAGAGGACACAAGGAGGGTGCGTGGTGCCCTCACCCCTGCCCAG AGCGAGGGGGCAAGGACTCTGCCTCCAGGGCATCTGGGGTTTTCCCCTCCCTCA CACAACACACTCCCATTCTCTTTAGGTTTGCACCAGTGGTGTGAGCAGTTGGACT CAGTTTGGACAAGGGGGAAAGGGGGACTTCCCTGGGAAGGTCCAGCTAAAAGTG GCAACATTTGCCCCCAGAATTGGGGGCCTGGGAACACTGGACCTGCTCCTTCTCC CCTCTCCTTCCCCGTTTTTGTGCTTCTGGTTTGTTTCTTTAATTAATTTAACAAGTG CTGCAGTTTGCCCTCCCATTCCCATCTATCCCCCAAGTCCTTTGCAATTTCTTCCC TGCCCTACATAGGGGCGGTGGGTGTGGGATCCCTTCACTGGCCCCCTCGGGAGG CCTGGGTTGGACTCAGGGTCTCCTCCAGCTGGGGGCTGGACCGCAGCACCTATC TGAGCAGTTAGAGCGTCTTTCTTTTCAGATTGTGTACAGTAGATTATTTATTTTGTT ATTTTGGAATAAAATTTATTTTATGGCTTAGGA CTCTCCCAGTCTCTAAGCCGCGGCGTCTCCGCGGCCGAGAGGCCCCAGCGCCC GCCTCCCCGGCCCCCGCCCCCACCCCCGCCCCCGGCTCTGCCCACGCCCTCCG CCCGCCAGCCCGGCAGCCAGCGCAGCTCCGGGCCTCGCTCCCTGTGCGTCCTG CGGGGGCGGAGGCGCGGAGAGGCGGCAAGCGCAGCCGGGGAGGGTGGGGGG GCAGAGGCACAGACAGAGGCGCGGAGGCTCGGAGAGAGAAGACGTGGAGGGAG GGACAGAGCCTGGACAGCGGTGGACACGGCATCGTGCGCGGGGAAGAGGGCAG CACGCAGCAGGCGCCGAGCGCCGGGCACCGAGAAGGGCAGCCCGGGTGATCTC CGGCCGTCCATGCACAGAGCGCCTTCCCCCACAGCCGAGCAGCCGCCGGGCGG AGGGGACAGCGCCCGCCGGACCCTGCAGCCCAGACTCAAGCCCAGTGCCCGAG CCATGGCACTGCCTCGGACGCTGGGGGAGCTGCAGCTGTACCGGGTCCTGCAG CGCGCCAACCTCCTTTCCTACTATGAGACCTTCATCCAGCAGGGAGGGGACGAC GTGCAGCAGCTGTGTGAGGCGGGTGAGGAGGAGTTTCTGGAGATCATGGCACTT GTGGGCATGGCCACCAAGCCCCTCCATGTCCGGCGCCTGCAGAAGGCACTGAGA GAGTGGGCCACCAATCCAGGGCTCTTCAGTCAACCAGTGCCTGCTGTTCCCGTCT CCAGCATCCCGCTCTTCAAGATCTCTGAGACTGCGGGTACCCGGAAAGGGAGCA TGAGCAATGGGCATGGCAGCCCAGGGGAAAAGGCAGGCAGTGCCCGCAGTTTTA GCCCCAAGAGCCCCCTTGAACTTGGAGAGAAGCTATCACCACTGCCTGGGGGAC CTGGGGCAGGGGACCCCCGGATCTGGCCAGGCCGGAGCACTCCAGAGTCGGAC GTTGGGGCAGGAGGAGAAGAGGAGGCTGGCTCGCCCCCCTTCTCCCCCCCTGC AGGGGGAGGAGTCCCTGAGGGGACTGGGGCTGGGGGGCTGGCAGCAGGTGGG ACTGGGGGTGGTCCAGACCGACTGGAGCCAGAGATGGTACGCATGGTGGTGGAA AGTGTGGAGAGGATCTTCCGGAGCTTCCCAAGGGGGGATGCTGGGGAGGTCACA TCCCTGCTAAAGCTGAATAAGAAGCTGGCACGGAGCGTTGGGCACATCTTTGAGA TGGATGATAATGACAGC CAGAAGGAAGAGGAGATCCGCAAATACAGCATCATCTA TGGCCGTTTCGACTCTAAGCGGCGGGAGGGCAAGCAGCTCAGCCTGCACGAGCT CACCATCAACGAGGCTGCTGCCCAGTTCTGCATGAGGGACAACACGCTCTTATTA CGGAGAGTGGAGCTCTTCTCTTTGTCCCGCCAAGTAGCCCGAGAGAGCACCTACT TGTCCTCCTTGAAGGGCTCCAGGCTTCACCCTGAAGAACTGGGAGGCCCTCCACT GAAGAAGCTGAAACAAGAGGTTGGAGAACAGAGTCACCCTGAAATCCAGCAGCCT CCCCCAGGCCCTGAGTCCTATGTACCCCCATACCGCCCCAGCCTGGAGGAGGAC AGCGCCAGCCTGTCTGGGGAGAGTCTGGATGGACATTTGCAGGAGTTCGAGGAA GGGCTGCTGGACAGATGTCCTGCCCCAGGACCCCATCCCGCGCTGGTGGAGGG TCGCAGGAGCAGCGTGAAAGTGGAGGCTGAGGCCAGCCGGCAGTGAGGGTTGG ACTGGTGTCTTCAGACCCAGGACCTCAGACTTCTGGCTCACACAGACCCCCACGC TCTCCATCCCCGGAATCTAGTCACAACCCTGGATCCTTCCTCTGCCCTTCTCCTGC CTCCCCACCTGCTCCATGGGCATAAGACTGTGGGGCTTCAAGCAATAACAAGCAG AGGCCTGGAGAGAGGACACAAGGAGGGTGCGTGGTGCCCTCACCCCTGCCCAG AGCGAGGGGGCAAGGACTCTGCCTCCAGGGCATCTGGGGTTTTCCCCTCCCTCA CACAACACACTCCCATTCTCTTTAGGTTTGCACCAGTGGTGTGAGCAGTTGGACT CAGTTTGGACAAGGGGGAAAGGGGGACTTCCCTGGGAAGGTCCAGCTAAAAGTG GCAACATTTGCCCCCAGAATTGGGGGCCTGGGAACACTGGACCTGCTCCTTCTCC CCTCTCCTTCCCCGTTTTTGTGCTTCTGGTTTGTTTCTTTAATTAATTTAACAAGTG CTGCAGTTTGCCCTCCCATTCCCATCTATCCCCCAAGTCCTTTGCAATTTCTTCCC TGCCCTACATAGGGGCGGTGGGTGTGGGATCCCTTCACTGGCCCCCTCGGGAGG CCTGGGTTGGACTCAGGGTCTCCTCCAGCTGGGGGCTGGACCGCAGCACCTATC TGAGCAGTTAGAGCGTCTTTCTTTTCAGATTGTGTACAGTAGATTATTTATTTTGTT ATTTTGGAATAAAATTTATTTTATGGCTTAGGA
SEQ ID NO: 4: SEQ ID NO: 4:
MHRAPSPTAEQPPGGGDSARRTLQPRLKPSARAMALPRTLGELQLYRVLQRANLLS YYETFIQQGGDDVQQLCEAGEEEFLEIMALVGMATKPLHVRRLQKALREWATNPGLF SQPVPAVPVSSIPLFKISETAGTRKGSMSNGHGSPGEKAGSARSFSPKSPLELGEKLS PLPGGPGAGDPRIWPGRSTPESDVGAGGEEEAGSPPFSPPAGGGVPEGTGAGGLA AGGTGGGPDRLEPEMVRMVVESVERIFRSFPRGDAGEVTSLLKLNKKLARSVGHIFE MDDNDSQKEEEIRKYSIIYGRFDSKRREGKQLSLHELTINEAAAQFCMRDNTLLLRRV ELFSLSRQVARESTYLSSLKGSRLHPEELGGPPLKKLKQEVGEQSHPEIQQPPPGPE SYVPPYRPSLEEDSASLSGESLDGHLQEFEEGLLDRCPAPGPHPALVEGRRSSVKVE AEASRQ MHRAPSPTAEQPPGGGDSARRTLQPRLKPSARAMALPRTLGELQLYRVLQRANLLS YYETFIQQGGDDVQQLCEAGEEEFLEIMALVGMATKPLHVRRLQKALREWATNPGLF SQPVPAVPVSSIPLFKISETAGTRKGSMSNGHGSPGEKAGSARSFSPKSPLELGEKLS PLPGGPGAGDPRIWPGRSTPESDVGAGGEEEAGSPPFSPPAGGGVPEGTGAGGLA AGGTGGGPDRLEPEMVRMVVESVERIFRSFPRGDAGEVTSLLKLNKKLARSVGHIFE MDDNDSQKEEEIRKYSIIYGRFDSKRREGKQLSLHELTINEAAAQFCMRDNTLLLRRV ELFSLSRQVARESTYLSSLKGSRLHPEELGGPPLKKLKQEVGEQSHPEIQQPPPGPE SYVPPYRPSLEEDSASLSGESLDGHLQEFEEGLLDRCPAPGPHPALVEGRRSSVKVE AEASRQ
STAT6 STAT6
SEQ ID NO: 5: AGAGCTCCAGGGAGGGACCTGGGTAGAAGGAGAAGCCGGAAACAGCGGGCTGG GGCAGCCACTGCTTACACTGAAGAGGGAGGACGGGAGAGGAGTGTGTGTGTGTG TGTGTGTGTGTGTGTGTATGTATGTGTGTGCTTTATCTTATTTTTCTTTTTGGTGGT GGTGGTGGAAGGGGGGAGGTGCTAGCAGGGCCAGCCTTGAACTCGCTGGACAG AGCTACAGACCTATGGGGCCTGGAAGTGCCCGCTGAGAAAGGGAGAAGACAGCA GAGGGGTTGCCGAGAGCATATATCAGAGGGACCCCCTGAAGCTGGTGGCCACTT TCAGACAAATACTTCAAGGAGAGAAAAAAGCTGTTATGGAACAGTTCCGCCACTTG CCAATGCCTTTCCACTGGAAGCAGGAAGAACTCAAGTTTAAGACAGGCTTGCGGA GGCTGCAGCACCGAGTAGGGGAGATCCACCTTCTCCGAGAAGCCCTGCAGAAGG GGGCTGAGGCTGGCCAAGTGTCTCTGCACAGCTTGATAGAAACTCCTGCTAATGG GACTGGGCCAAGTGAGGCCCTGGCCATGCTACTGCAGGAGACCACTGGAGAGCT AGAGGCAGCCAAAGCCCTAGTGCTGAAGAGGATCCAGATTTGGAAACGGCAGCA GCAGCTGGCAGGGAATGGCGCACCGTTTGAGGAGAGCCTGGCCCCACTCCAGG AGAGGTGTGAAAGCCTGGTGGACATTTATTCCCAGCTACAGCAGGAGGTAGGGG CGGCTGGTGGGGAGCTTGAGCCCAAGACCCGGGCATCGCTGACTGGCCGGCTG GATGAAGTCCTGAGAACCCTCGTCACCAGTTGCTTCCTGGTGGAGAAGCAGCCC CCCCAGGTACTGAAGACTCAGACCAAGTTCCAGGCTGGAGTTCGATTCCTGTTGG GCTTGAGGTTCCTGGGGGCCCCAGCCAAGCCTCCGCTGGTCAGGGCCGACATG GTGACAGAGAAGCAGGCGCGGGAGCTGAGTGTGCCTCAGGGTCCTGGGGCTGG AGCAGAAAGCACTGGAGAAATCATCAACAACACTGTGCCCTTGGAGAACAGCATT CCTGGGAACTGCTGCTCTGCCCTGTTCAAGAACCTGCTTCTCAAGAAGATCAAGC GGTGTGAGCGGAAGGGCACTGAGTCTGTCACAGAGGAGAAGTGCGCTGTGCTCT TCTCTGCCAGCTTCACACTTGGCCCCGGCAAACTCCCCATCCAGCTCCAGGCCCT GTCTCTGCCCCTGGTGGTCATCGTCCATGGCAACCAAGACAACAATGCCAAAGCC ACTATCCTGTGGGACAATGCCTTCTCTGAGATGGACCGCGTGCCCTTTGTGGTGG CTGAGCGGGTGCCCTGGGAGAAGATGTGTGAAACTCTGAACCTGAAGTTCATGG CTGAGGTGGGGACCAACCGGGGGCTGCTCCCAGAGCACTTCCTCTTCCTGGCCC AGAAGATCTTCAATGACAACAGCCTCAGTATGGAGGCCTTCCAGCACCGTTCTGT GTCCTGGTCGCAGTTCAACAAGGAGATCCTGCTGGGCCGTGGCTTCACCTTTTGG CAGTGGTTTGATGGTGTCCTGGACCTCACCAAACGCTGTCTCCGGAGCTACTGGT CTGACCGGCTGATCATTGGCTTCATCAGCAAACAGTACGTTACTAGCCTTCTTCTC AATGAGCCCGACGGAACCTTTCTCCTCCGCTTCAGCGACTCAGAGATTGGGGGC ATCACCATTGCCCATGTCATCCGGGGCCAGGATGGCTCTCCACAGATAGAGAACA TCCAGCCATTCTCTGCCAAAGACCTGTCCATTCGCTCACTGGGGGACCGAATCCG GGATCTTGCTCAGCTCAAAAATCTCTATCCCAAGAAGCCCAAGGATGAGGCTTTC CGGAGCCACTACAAGCCTGAACAGATGGGTAAGGATGGCAGGGGTTATGTCCCA GCTACCATCAAGATGACCGTGGAAAGGGACCAACCACTTCCTACCCCAGAGCTCC AGATGCCTACCATGGTGCCTTCTTATGACCTTGGAATGGCCCCTGATTCCTCCAT GAGCATGCAGCTTGGCCCAGATATGGTGCCCCAGGTGTACCCACCACACTCTCA CTCCATCCCCCCGTATCAAGGCCTCTCCCCAGAAGAATCAGTCAACGTGTTGTCA GCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCAGATGCCCCCCAGCCTGGGCCAGATGAGCCTG CCCTTTGACCAGCCTCACCCCCAGGGCCTGCTGCCGTGCCAGCCTCAGGAGCAT GCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCTGCTCTGCTCAGATGTGACCATGGTGGAAGAC AGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGACAGCGTTTCCTCAGGGCACTTGGATTGGTGAA GACATATTCCCTCCTCTGCTGCCTCCCACTGAACAGGACCTCACTAAGCTTCTCCT GGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGGGGAGGGTCCTTGGGGGCACAGCCCCTCCTG CAGCCCTCCCACTATGGGCAATCTGGGATCTCAATGTCCCACATGGACCTAAGGG CCAACCCCAGTTGGTGATCCCAGCTGGAGGGAGAACCCAAAGAGACAGCTCTTC TACTACCCCCACAGACCTGCTCTGGACACTTGCTCATGCCCTGCCAAGCAGCAGA TGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCCCACCTACTCCTGGGTCAGGAGGAAAAGACTA ACAGGAGAATGCACAGTGGGTGGAGCCAATCCACTCCTTCCTTTCTATCATTCCC CTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGACTGGAAGGGAAGTTCAGGCTCTGAGACACAC CCCAACATGCCTGCACCTGCAGCGCGCACACGCACGCACACACACATACAGAGC TCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAGCAGGAGGGGGGCTGGGTAAGAGCACAGGTT AGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCCCATTCTGACCCAGGGCCTAGGACGGATAGGC AGGAACATACAGACACATTTACACTAGAGGCCAGGGATAGAGGATATTGGGTCTC AGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAGCTCAAGGGACCCTGGGTGGGAGCATAGGAG GGGTCTGGACATGTGGTTACTAGTACAGGTTTTGCCCTGATTAAAAAATCTCCCAA AGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGGTGGAGGCTTCTGATACGTGTATGAGACTATG CAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCTTCGTGTATAGCTGTGTGAACGTGTATGTACCT AGGATATGTTAAATGTATAGCTGGCACCTTAGTTGCATGACCACATAGAACATGTG TCTATCTGCTTTTGCCTACGTGACAACACAAATTTGGGAGGGTGAGACACTGCAC AGAAGACAGCAGCAAGTGTGCTGGCCTCTCTGACATATGCTAACCCCCAAATACT CTGAATTTGGAGTCTGACTGTGCCCAAGTGGGTCCAAGTGGCTGTGACATCTACG TATGGCTCCACACCTCCAATGCTGCCTGGGAGCCAGGGTGAGAGTCTGGGTCCA GGCCTGGCCATGTGGCCCTCCAGTGTATGAGAGGGCCCTGCCTGCTGCATCTTT TCTGTTGCCCCATCCACCGCCAGCTTCCCTTCACTCCCCTATCCCATTCTCCCTCT CAAGGCAGGGGTCATAGATCCTAAGCCATAAAATAAATTTTATTCCAAAATAACAA AATAAATAATCTACTGTACACAATCTGAAAAGAAAAAAAAAAAAAAAA SEQ ID NO: 5: AGAGCTCCAGGGAGGGACCTGGGTAGAAGGAGAAGCCGGAAACAGCGGGCTGG GGCAGCCACTGCTTACACTGAAGAGGGAGGACGGGAGAGGAGTGTGTGTGTGTG TGTGTGTGTGTGTGTGTATGTATGTGTGTGCTTTATCTTATTTTTCTTTTTGGTGGT GGTGGTGGAAGGGGGGAGGTGCTAGCAGGGCCAGCCTTGAACTCGCTGGACAG AGCTACAGACCTATGGGGCCTGGAAGTGCCCGCTGAGAAAGGGAGAAGACAGCA GAGGGGTTGCCGAGAGCATATATCAGAGGGACCCCCTGAAGCTGGTGGCCACTT TCAGACAAATACTTCAAGGAGAGAAAAAAGCTGTTATGGAACAGTTCCGCCACTTG CCAATGCCTTTCCACTGGAAGCAGGAAGAACTCAAGTTTAAGACAGGCTTGCGGA GGCTGCAGCACCGAGTAGGGGAGATCCACCTTCTCCGAGAAGCCCTGCAGAAGG GGGCTGAGGCTGGCCAAGTGTCTCTGCACAGCTTGATAGAAACTCCTGCTAATGG GACTGGGCCAAGTGAGGCCCTGGCCATGCTACTGCAGGAGACCACTGGAGAGCT AGAGGCAGCCAAAGCCCTAGTGCTGAAGAGGATCCAGATTTGGAAACGGCAGCA GCAGCTGGCAGGGAATGGCGCACCGTTTGAGGAGAGCCTGGCCCCACTCCAGG AGAGGTGTGAAAGCCTGGTGGACATTTATTCCCAGCTACAGCAGGAGGTAGGGG CGGCTGGTGGGGAGCTTGAGCCCAAGACCCGGGCATCGCTGACTGGCCGGCTG GATGAAGTCCTGAGAACCCTCGTCACCAGTTGCTTCCTGGTGGAGAAGCAGCCC CCCCAGGTACTGAAGACTCAGACCAAGTTCCAGGCTGGAGTTCGATTCCTGTTGG GCTTGAGGTTCCTGGGGGCCCCAGCCAAGCCTCCGCTGGTCAGGGCCGACATG GTGACAGAGAAGCAGGCGCGGGAGCTGAGTGTGCCTCAGGGTCCTGGGGCTGG AGCAGAAAGCACTGGAGAAATCATCAACAACACTGTGCCCTTGGAGAACAGCATT CCTGGGAACTGCTGCTCTGCCCTGTTCAAGAACCTGCTTCTCAAGAAGATCAAGC GGTGTGAGCGGAAGGGCACTGAGTCTGTCACAGAGGAGAAGTGCGCTGTGCTCT TCTCTGCCAGCTTCACACTTGGCCCCGGCAAACTCCCCATCCAGCTCCAGGCCCT GTCTCTGCCCCTGGTGGTCATCGTCCATGGCAACCAAGACAACAATGCCAAAGCC ACTATCCTGTGGGACAATGCCTTCTCTGAGATGGACCGCGTGCCCTTTGTGGTGG CTGAGCGGGTGCCCTGGGAGAAGATGTGTGAAACTCTGAACCTGAAGTTCATGG CTGAGGTGGGGACCAACCGGGGGCTGCTCCCAGAGCACTTCCTCTTCCTGGCCC AGAAGATCTTCAATGACAACAGCCTCAGTATGGAGGCCTTCCAGCACCGTTCTGT GTCCTGGTCGCAGTTCAACAAGGAGATCCTGCTGGGCCGTGGCTTCACCTTTTGG CAGTGGTTTGATGGTGTCCTGGACCTCACCAAACGCTGTCTCCGGAGCTACTGGT CTGACCGGCTGATCATTGGCTTCATCAGCAAACAGTACGTTACTAGCCTTCTTCTC AT AATGAGCCCGACGGAACCTTTCTCCTCCGCTTCAGCGACTCAGAGATTGGGGGC CACCATTGCCCATGTCATCCGGGGCCAGGATGGCTCTCCACAGATAGAGAACA TCCAGCCATTCTCTGCCAAAGACCTGTCCATTCGCTCACTGGGGGACCGAATCCG GGATCTTGCTCAGCTCAAAAATCTCTATCCCAAGAAGCCCAAGGATGAGGCTTTC CGGAGCCACTACAAGCCTGAACAGATGGGTAAGGATGGCAGGGGTTATGTCCCA GCTACCATCAAGATGACCGTGGAAAGGGACCAACCACTTCCTACCCCAGAGCTCC AGATGCCTACCATGGTGCCTTCTTATGACCTTGGAATGGCCCCTGATTCCTCCAT GAGCATGCAGCTTGGCCCAGATATGGTGCCCCAGGTGTACCCACCACACTCTCA CTCCATCCCCCCGTATCAAGGCCTCTCCCCAGAAGAATCAGTCAACGTGTTGTCA GCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCAGATGCCCCCCAGCCTGGGCCAGATGAGCCTG CCCTTTGACCAGCCTCACCCCCAGGGCCTGCTGCCGTGCCAGCCTCAGGAGCAT GCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCTGCTCTGCTCAGATGTGACCATGGTGGAAGAC AGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGACAGCGTTTCCTCAGGGCACTTGGATTGGTGAA GACATATTCCCTCCTCTGCTGCCTCCCACTGAACAGGACCTCACTAAGCTTCTCCT GGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGGGGAGGGTCCTTGGGGGCACAGCCCCTCCTG CAGCCCTCCCACTATGGGCAATCTGGGATCTCAATGTCCCACATGGACCTAAGGG CCAACCCCAGTTGGTGATCCCAGCTGGAGGGAGAACCCAAAGAGACAGCTCTTC TACTACCCCCACAGACCTGCTCTGGACACTTGCTCATGCCCTGCCAAGCAGCAGA TGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCCCACCTACTCCTGGGTCAGGAGGAAAAGACTA ACAGGAGAATGCACAGTGGGTGGAGCCAATCCACTCCTTCCTTTCTATCATTCCC CTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGACTGGAAGGGAAGTTCAGGCTCTGAGACACAC CCCAACATGCCTGCACCTGCAGCGCGCACACGCACGCACACACACATACAGAGC TCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAGCAGGAGGGGGGCTGGGTAAGAGCACAGGTT AGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCCCATTCTGACCCAGGGCCTAGGACGGATAGGC AGGAACATACAGACACATTTACACTAGAGGCCAGGGATAGAGGATATTGGGTCTC AGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAGCTCAAGGGACCCTGGGTGGGAGCATAGGAG GGGTCTGGACATGTGGTTACTAGTACAGGTTTTGCCCTGATTAAAAAATCTCCCAA AGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGGTGGAGGCTTCTGATACGTGTATGAGACTATG CAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCTTCGTGTATAGCTGTGTGAACGTGTATGTACCT AGGATATGTTAAATGTATAGCTGGCACCTTAGTTGCATGACCACATAGAACATGTG TCTATCTGCTTTTGCCTACGTGACAACACAAATTTGGGAGGGTGAGACACTGCAC AGAAGACAGCAGCAAGTGTGCTGGCCTCTCTGACATATGCTAACCCCCAAATACT CTGAATTTGGAGTCTGACTGTGCCCAAGTGGGTCCAAGTGGCTGTGACATCTACG TATGGCTCCACACCTCCAATGCTGCCTGGGAGCCAGGGTGAGAGTCTGGGTCCA GGCCTGGCCATGTGGCCCTCCAGTGTATGAGAGGGCCCTGCCTGCTGCATCTTT TCTGTTGCCCCATCCACCGCCAGCTTCCCTTCACTCCCCTATCCCATTCTCCCT CT CAAGGCAGGGGTCATAGATCCTAAGCCATAAAATAAATTTTATTCCAAAATAACAA AATAAATAATCTACTGTACACAATCTGAAAAGAAAAAAAAAAAAAAAA
SEQ ID NO: 6: SEQ ID NO: 6:
MEQFRHLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIEMEQFRHLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIE
TPANGTGPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQTPANGTGPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQ
ERCESLVDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVL KTQTKFQAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEII NNTVPLENSIPGNCCSALFKNLLLKKIKRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPI QLQALSLPLVVIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLK FMAEVGTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFW QWFDGVLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAH VIRGQDGSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQM GKDGRGYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMV PQVYPPHSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLP CQPQEHAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTK LLLEGQGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW SEQ ID NO: 7: ERCESLVDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVL KTQTKFQAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEII NNTVPLENSIPGNCCSALFKNLLLKKIKRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPI QLQALSLPLVVIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLK FMAEVGTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFW QWFDGVLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAH VIRGQDGSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQM GKDGRGYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMV PQVYPPHSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLP CQPQEHAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTK LLLEGQGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW SEQ ID NO: 7:
AGAGCTCCAGGGAGGGACCTGGGTAGAAGGAGAAGCCGGAAACAGCGGGCTGG GGCAGCCACTGCTTACACTGAAGAGGGAGGACGGGAGAGGAGTGTGTGTGTGTG TGTGTGTGTGTGTGTGTATGTATGTGTGTGCTTTATCTTATTTTTCTTTTTGGTGGT GGTGGTGGAAGGGGGGAGGTGCTAGCAGGGCCAGCCTTGAACTCGCTGGACAG AGCTACAGACCTATGGGGCCTGGAAGTGCCCGCTGAGAAAGGGAGAAGACAGCA GAGGGGTTGCCGAGGGAGTTCCTGGTCGGCTCCGACGCCTTCTGCTGCAACTTG GCTAGTGCCCTACTTTCAGACACTGTCCAGCACCTTCAGGCCTCGGTGGGAGAG CAGGGGGAGGGGAGCACCATCTTGCAACACATCAGCACCCTTGAGAGCATATAT CAGAGGGACCCCCTGAAGCTGGTGGCCACTTTCAGACAAATACTTCAAGGAGAGA AAAAAGCTGTTATGGAACAGTTCCGCCACTTGCCAATGCCTTTCCACTGGAAGCA GGAAGAACTCAAGTTTAAGACAGGCTTGCGGAGGCTGCAGCACCGAGTAGGGGA GATCCACCTTCTCCGAGAAGCCCTGCAGAAGGGGGCTGAGGCTGGCCAAGTGTC TCTGCACAGCTTGATAGAAACTCCTGCTAATGGGACTGGGCCAAGTGAGGCCCTG GCCATGCTACTGCAGGAGACCACTGGAGAGCTAGAGGCAGCCAAAGCCCTAGTG CTGAAGAGGATCCAGATTTGGAAACGGCAGCAGCAGCTGGCAGGGAATGGCGCA CCGTTTGAGGAGAGCCTGGCCCCACTCCAGGAGAGGTGTGAAAGCCTGGTGGAC ATTTATTCCCAGCTACAGCAGGAGGTAGGGGCGGCTGGTGGGGAGCTTGAGCCC AAGACCCGGGCATCGCTGACTGGCCGGCTGGATGAAGTCCTGAGAACCCTCGTC ACCAGTTGCTTCCTGGTGGAGAAGCAGCCCCCCCAGGTACTGAAGACTCAGACC AAGTTCCAGGCTGGAGTTCGATTCCTGTTGGGCTTGAGGTTCCTGGGGGCCCCA GCCAAGCCTCCGCTGGTCAGGGCCGACATGGTGACAGAGAAGCAGGCGCGGGA GCTGAGTGTGCCTCAGGGTCCTGGGGCTGGAGCAGAAAGCACTGGAGAAATCAT CAACAACACTGTGCCCTTGGAGAACAGCATTCCTGGGAACTGCTGCTCTGCCCTG TTCAAGAACCTGCTTCTCAAGAAGATCAAGCGGTGTGAGCGGAAGGGCACTGAGT CTGTCACAGAGGAGAAGTGCGCTGTGCTCTTCTCTGCCAGCTTCACACTTGGCCC CGGCAAACTCCCCATCCAGCTCCAGGCCCTGTCTCTGCCCCTGGTGGTCATCGT CCATGGCAACCAAGACAACAATGCCAAAGCCACTATCCTGTGGGACAATGCCTTC TCTGAGATGGACCGCGTGCCCTTTGTGGTGGCTGAGCGGGTGCCCTGGGAGAAG ATGTGTGAAACTCTGAACCTGAAGTTCATGGCTGAGGTGGGGACCAACCGGGGG CTGCTCCCAGAGCACTTCCTCTTCCTGGCCCAGAAGATCTTCAATGACAACAGCC TCAGTATGGAGGCCTTCCAGCACCGTTCTGTGTCCTGGTCGCAGTTCAACAAGGA GATCCTGCTGGGCCGTGGCTTCACCTTTTGGCAGTGGTTTGATGGTGTCCTGGAC CTCACCAAACGCTGTCTCCGGAGCTACTGGTCTGACCGGCTGATCATTGGCTTCA TCAGCAAACAGTACGTTACTAGCCTTCTTCTCAATGAGCCCGACGGAACCTTTCTC CTCCGCTTCAGCGACTCAGAGATTGGGGGCATCACCATTGCCCATGTCATCCGG GGCCAGGATGGCTCTCCACAGATAGAGAACATCCAGCCATTCTCTGCCAAAGACC TGTCCATTCGCTCACTGGGGGACCGAATCCGGGATCTTGCTCAGCTCAAAAATCT CTATCCCAAGAAGCCCAAGGATGAGGCTTTCCGGAGCCACTACAAGCCTGAACAG ATGGGTAAGGATGGCAGGGGTTATGTCCCAGCTACCATCAAGATGACCGTGGAAA GGGACCAACCACTTCCTACCCCAGAGCTCCAGATGCCTACCATGGTGCCTTCTTA TGACCTTGGAATGGCCCCTGATTCCTCCATGAGCATGCAGCTTGGCCCAGATATG GTGCCCCAGGTGTACCCACCACACTCTCACTCCATCCCCCCGTATCAAGGCCTCT CCCCAGAAGAATCAGTCAACGTGTTGTCAGCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCAGAT GCCCCCCAGCCTGGGCCAGATGAGCCTGCCCTTTGACCAGCCTCACCCCCAGGG CCTGCTGCCGTGCCAGCCTCAGGAGCATGCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCTGCT CTGCTCAGATGTGACCATGGTGGAAGACAGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGACAGC GTTTCCTCAGGGCACTTGGATTGGTGAAGACATATTCCCTCCTCTGCTGCCTCCC ACTGAACAGGACCTCACTAAGCTTCTCCTGGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGGGGA GGGTCCTTGGGGGCACAGCCCCTCCTGCAGCCCTCCCACTATGGGCAATCTGGG ATCTCAATGTCCCACATGGACCTAAGGGCCAACCCCAGTTGGTGATCCCAGCTGG AGGGAGAACCCAAAGAGACAGCTCTTCTACTACCCCCACAGACCTGCTCTGGACA CTTGCTCATGCCCTGCCAAGCAGCAGATGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCCCACC TACTCCTGGGTCAGGAGGAAAAGACTAACAGGAGAATGCACAGTGGGTGGAGCC AATCCACTCCTTCCTTTCTATCATTCCCCTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGACTGG AAGGGAAGTTCAGGCTCTGAGACACACCCCAACATGCCTGCACCTGCAGCGCGC ACACGCACGCACACACACATACAGAGCTCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAGCAGG AGGGGGGCTGGGTAAGAGCACAGGTTAGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCCCATTC TGACCCAGGGCCTAGGACGGATAGGCAGGAACATACAGACACATTTACACTAGAG GCCAGGGATAGAGGATATTGGGTCTCAGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAGCTCAA GGGACCCTGGGTGGGAGCATAGGAGGGGTCTGGACATGTGGTTACTAGTACAGG TTTTGCCCTGATTAAAAAATCTCCCAAAGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGGTGGAG GCTTCTGATACGTGTATGAGACTATGCAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCTTCGTGT ATAGCTGTGTGAACGTGTATGTACCTAGGATATGTTAAATGTATAGCTGGCACCTT AGTTGCATGACCACATAGAACATGTGTCTATCTGCTTTTGCCTACGTGACAACACA AATTTGGGAGGGTGAGACACTGCACAGAAGACAGCAGCAAGTGTGCTGGCCTCT CTGACATATGCTAACCCCCAAATACTCTGAATTTGGAGTCTGACTGTGCCCAAGTG GGTCCAAGTGGCTGTGACATCTACGTATGGCTCCACACCTCCAATGCTGCCTGGG AGCCAGGGTGAGAGTCTGGGTCCAGGCCTGGCCATGTGGCCCTCCAGTGTATGA GAGGGCCCTGCCTGCTGCATCTTTTCTGTTGCCCCATCCACCGCCAGCTTCCCTT CACTCCCCTATCCCATTCTCCCTCTCAAGGCAGGGGTCATAGATCCTAAGCCATAAGAGCTCCAGGGAGGGACCTGGGTAGAAGGAGAAGCCGGAAACAGCGGGCTGG GGCAGCCACTGCTTACACTGAAGAGGGAGGACGGGAGAGGAGTGTGTGTGTGTG TGTGTGTGTGTGTGTGTATGTATGTGTGTGCTTTATCTTATTTTTCTTTTTGGTGGT GGTGGTGGAAGGGGGGAGGTGCTAGCAGGGCCAGCCTTGAACTCGCTGGACAG AGCTACAGACCTATGGGGCCTGGAAGTGCCCGCTGAGAAAGGGAGAAGACAGCA GAGGGGTTGCCGAGGGAGTTCCTGGTCGGCTCCGACGCCTTCTGCTGCAACTTG GCTAGTGCCCTACTTTCAGACACTGTCCAGCACCTTCAGGCCTCGGTGGGAGAG CAGGGGGAGGGGAGCACCATCTTGCAACACATCAGCACCCTTGAGAGCATATAT CAGAGGGACCCCCTGAAGCTGGTGGCCACTTTCAGACAAATACTTCAAGGAGAGA AAAAAGCTGTTATGGAACAGTTCCGCCACTTGCCAATGCCTTTCCACTGGAAGCA GGAAGAACTCAAGTTTAAGACAGGCTTGCGGAGGCTGCAGCACCGAGTAGGGGA GATCCACCTTCTCCGAGAAGCCCTGCAGAAGGGGGCTGAGGCTGGCCAAGTGTC TCTGCACAGCTTGATAGAAACTCCTGCTAATGGGACTGGGCCAAGTGAGGCCCTG GCCATGCTACTGCAGGAGACCACTGGAGAGCTAGAGGCAGCCAAAGCCCTAGTG CTGAAGAGGATCCAGATTTGGAAACGGCAGCAGCAGCTGGCAGGGAATGGCGCA CCGTTTGAGGAGAGCCTGGCCCCACTCCAGGAGAGGTGTGAAAGCCTGGTGGAC ATTTATTCCCAGCTACAGCAGGAGGTAGGGGCGGCTGGTGGGGAGCTTGAGCCC AAGACCCGGGCATCGCTGACTGGCCGGCTGGATGAAGTCCTGAGAACCCTCGTC ACCAGT TGCTTCCTGGTGGAGAAGCAGCCCCCCCAGGTACTGAAGACTCAGACC AAGTTCCAGGCTGGAGTTCGATTCCTGTTGGGCTTGAGGTTCCTGGGGGCCCCA GCCAAGCCTCCGCTGGTCAGGGCCGACATGGTGACAGAGAAGCAGGCGCGGGA GCTGAGTGTGCCTCAGGGTCCTGGGGCTGGAGCAGAAAGCACTGGAGAAATCAT CAACAACACTGTGCCCTTGGAGAACAGCATTCCTGGGAACTGCTGCTCTGCCCTG TTCAAGAACCTGCTTCTCAAGAAGATCAAGCGGTGTGAGCGGAAGGGCACTGAGT CTGTCACAGAGGAGAAGTGCGCTGTGCTCTTCTCTGCCAGCTTCACACTTGGCCC CGGCAAACTCCCCATCCAGCTCCAGGCCCTGTCTCTGCCCCTGGTGGTCATCGT CCATGGCAACCAAGACAACAATGCCAAAGCCACTATCCTGTGGGACAATGCCTTC TCTGAGATGGACCGCGTGCCCTTTGTGGTGGCTGAGCGGGTGCCCTGGGAGAAG ATGTGTGAAACTCTGAACCTGAAGTTCATGGCTGAGGTGGGGACCAACCGGGGG CTGCTCCCAGAGCACTTCCTCTTCCTGGCCCAGAAGATCTTCAATGACAACAGCC TCAGTATGGAGGCCTTCCAGCACCGTTCTGTGTCCTGGTCGCAGTTCAACAAGGA GATCCTGCTGGGCCGTGGCTTCACCTTTTGGCAGTGGTTTGATGGTGTCCTGGAC CTCACCAAACGCTGTCTCCGGAGCTACTGGTCTGACCGGCTGATCATTGGCTTCA TCAGCAAACAGTACGTTACTAGCCTTCTTCTCAATGAGCCCGACGGAACCTTTCTC CTCCGCTTCAGCGACTCAGAGATTGGGGGCATCACCATTGCCCATGTCATCCGG GGCCAGGATGGCTCTCCACAGATAGAGAACATCCAGCCATTCTCTGCCAAAGACC TGTCCATTCGCTCACTGGGGGACCGAATCCGGGATCTTGCTCAGCTCAAAAATCT CTATCCCAAGAAGCCCAAGGATGAGGCTTTCCGGAGCCACTACAAGCCTGAACAG ATGGGTAAGGATGGCAGGGGTTATGTCCCAGCTACCATCAAGATGACCGTGGAAA GGGACCAACCACTTCCTACCCCAGAGCTCCAGATGCCTACCATGGTGCCTTCTTA TGACCTTGGAATGGCCCCTGATTCCTCCATGAGCATGCAGCTTGGCCCAGATATG GTGCCCCAGGTGTACCCACCACACTCTCACTCCATCCCCCCGTATCAAGGCCTCT CCCCAGAAGAATCAGTCAACGTGTTGTCAGCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCAGAT GCCCCCCAGCCTGGGCCAGATGAGCCTGCCCTTTGACCAGCCTCACCCCCAGGG CCTGCTGCCGTGCCAGCCTCAGGAGCATGCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCTGCT CTGCTCAGATGTGACCATGGTGGAAGACAGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGACAGC GTTTCCTCAGGGCACTTGGATTGGTGAAGACATATTCCCTCCTCTGCTGCCTCCC ACTGAACAGGACCTCACTAAGCTTCTCCTGGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGGGGA GGGTCCTTGGGGGCACAGCCCCTCCTGCAGCCCTCCCACTATGGGCAATCTGGG ATCTCAATGTCCCACATGGACCTAAGGGCCAACCCCAGTTGGTGATCCCAGCTGG AGGGAGAACCCAAAGAGACAGCTCTTCTACTACCCCCACAGACCTGCTCTGGACA CTTGCTCATGCCCTGCCAAGCAGCAGATGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCCCACC TACTCCTGGGTCAGGAGGAAAAGACTAACAGGAGAATGCACAGTGGGTGGAGCC AATCCACTCCTTCCTTTCTATCATTCCCCTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGACTGG AAGGGAAGTTCAGGCTCTGAGACACACCCCAACATGCCTGCACCTGCAGCGCGC ACACGCACGCACACACACATACAGAGCTCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAGCAGG AGGGGGGCTGGGTAAGAGCACAGGTTAGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCCCATTC TGACCCAGGGCCTAGGACGGATAGGCAGGAACATACAGACACATTTACACTAGAG GCCAGGGATAGAGGATATTGGGTCTCAGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAGCTCAA GGGACCCTGGGTGGGAGCATAGGAGGGGTCTGGACATGTGGTTACTAGTACAGG TTTTGCCCTGATTAAAAAATCTCCCAAAGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGGTGGAG GCTTCTGATACGTGTATGAGACTATGCAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCTTCGTGT ATAGCTGTGTGAACGTGTATGTACCTAGGATATGTTAAATGTATAGCTGGCACCTT AGTTGCATGACCACATAGAACATGTGTCTATCTGCTTTTGCCTACGTGACAACACA AATTTGGGAGGGTGAGACACTGCACAGAAGACAGCAGCAAGTGTGCTGGCCTCT CTGACATATGCTAACCCCCAAATACTCTGAATTTGGAGTCTGACTGTGCCCAAGTG GGTCCAAGTGGCTGTGACATCTACGTATGGCTCCACACCTCCAATGCTGCCTGGG AGCCAGGGTGAGAGTCTGGGTCCAGGCCTGGCCATGTGGCCCTCCAGTGTATGA GAGGGCCCTGCCTGCTGCATCTTTTCTGTTGCCCCATCCACCGCCAGCTTCCCTT CACTCCCCTATCCCATTCTCCCTCTCAAGGCAGGGGTCATAGATCCTAAGCCATA
AAATAAATTTTATTCCAAAATAACAAAATAAATAATCTACTGTACACAATCTGAAAAGAAATAAATTTTATTCCAAAATAACAAAATAAATAATCTACTGTACACAATCTGAAAAG
AAAAAAAAAAAAAAAA AAAAAAAAAAAAAAAA
SEQ ID NO: 8: MEQFRHLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIE TPANGTGPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQ ERCESLVDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVL KTQTKFQAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEII NNTVPLENSIPGNCCSALFKNLLLKKIKRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPI QLQALSLPLVVIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLK FMAEVGTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFW QWFDGVLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAH VIRGQDGSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQM GKDGRGYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMV PQVYPPHSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLP CQPQEHAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTK LLLEGQGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW SEQ ID NO: 8: MEQFRHLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIE TPANGTGPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQ ERCESLVDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVL KTQTKFQAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEII NNTVPLENSIPGNCCSALFKNLLLKKIKRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPI QLQALSLPLVVIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLK FMAEVGTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFW QWFDGVLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAH VIRGQDGSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQM GKDGRGYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMV PQVYPPHSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLP CQPQEHAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTK LLLEGQGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW
SEQ ID NO: 9: SEQ ID NO: 9:
AGAGCTCCAGGGAGGGACCTGGGTAGAAGGAGAAGCCGGAAACAGCGGGCTGG GGCAGCCACTGCTTACACTGAAGAGGGAGGACGGGAGAGGAGTGTGTGTGTGTG TGTGTGTGTGTGTGTGTATGTATGTGTGTGCTTTATCTTATTTTTCTTTTTGGTGGT GGTGGTGGAAGGGGGGAGGTGCTAGCAGGGCCAGCCTTGAACTCGCTGGACAG AGCTACAGACCTATGGGGCCTGGAAGTGCCCGCTGAGAAAGGGAGAAGACAGCA GAGGGGTTGCCGAGGCAACCTCCAAGTCCCAGATCATGTCTCTGTGGGGTCTGG TCTCCAAGATGCCCCCAGAAAAAGTGCAGCGGCTCTATGTCGACTTTCCCCAACA CCTGCGGCATCTTCTGGGTGACTGGCTGGAGAGCCAGCCCTGGGAGTTCCTGGT CGGCTCCGACGCCTTCTGCTGCAACTTGGCTAGTGCCCTACTTTCAGACACTGTC CAGCACCTTCAGGCCTCGGTGGGAGAGCAGGGGGAGGGGAGCACCATCTTGCA ACACATCAGCACCCTTGAGAGCATATATCAGAGGGACCCCCTGAAGCTGGTGGC CACTTTCAGACAAATACTTCAAGGAGAGAAAAAAGCTGTTATGGAACAGTTCCGCC ACTTGCCAATGCCTTTCCACTGGAAGCAGGAAGAACTCAAGTTTAAGACAGGCTT GCGGAGGCTGCAGCACCGAGTAGGGGAGATCCACCTTCTCCGAGAAGCCCTGCA GAAGGGGGCTGAGGCTGGCCAAGTGTCTCTGCACAGCTTGATAGAAACTCCTGC TAATGGGACTGGGCCAAGTGAGGCCCTGGCCATGCTACTGCAGGAGACCACTGG AGAGCTAGAGGCAGCCAAAGCCCTAGTGCTGAAGAGGATCCAGATTTGGAAACG GCAGCAGCAGCTGGCAGGGAATGGCGCACCGTTTGAGGAGAGCCTGGCCCCAC TCCAGGAGAGGTGTGAAAGCCTGGTGGACATTTATTCCCAGCTACAGCAGGAGGT AGGGGCGGCTGGTGGGGAGCTTGAGCCCAAGACCCGGGCATCGCTGACTGGCC GGCTGGATGAAGTCCTGAGAACCCTCGTCACCAGTTGCTTCCTGGTGGAGAAGC AGCCCCCCCAGGTACTGAAGACTCAGACCAAGTTCCAGGCTGGAGTTCGATTCCT GTTGGGCTTGAGGTTCCTGGGGGCCCCAGCCAAGCCTCCGCTGGTCAGGGCCG ACATGGTGACAGAGAAGCAGGCGCGGGAGCTGAGTGTGCCTCAGGGTCCTGGG GCTGGAGCAGAAAGCACTGGAGAAATCATCAACAACACTGTGCCCTTGGAGAACA GCATTCCTGGGAACTGCTGCTCTGCCCTGTTCAAGAACCTGCTTCTCAAGAAGAT CAAGCGGTGTGAGCGGAAGGGCACTGAGTCTGTCACAGAGGAGAAGTGCGCTGT GCTCTTCTCTGCCAGCTTCACACTTGGCCCCGGCAAACTCCCCATCCAGCTCCAG GCCCTGTCTCTGCCCCTGGTGGTCATCGTCCATGGCAACCAAGACAACAATGCCA AAGCCACTATCCTGTGGGACAATGCCTTCTCTGAGATGGACCGCGTGCCCTTTGT GGTGGCTGAGCGGGTGCCCTGGGAGAAGATGTGTGAAACTCTGAACCTGAAGTT CATGGCTGAGGTGGGGACCAACCGGGGGCTGCTCCCAGAGCACTTCCTCTTCCT GGCCCAGAAGATCTTCAATGACAACAGCCTCAGTATGGAGGCCTTCCAGCACCGT TCTGTGTCCTGGTCGCAGTTCAACAAGGAGATCCTGCTGGGCCGTGGCTTCACCT TTTGGCAGTGGTTTGATGGTGTCCTGGACCTCACCAAACGCTGTCTCCGGAGCTA CTGGTCTGACCGGCTGATCATTGGCTTCATCAGCAAACAGTACGTTACTAGCCTT CTTCTCAATGAGCCCGACGGAACCTTTCTCCTCCGCTTCAGCGACTCAGAGATTG GGGGCATCACCATTGCCCATGTCATCCGGGGCCAGGATGGCTCTCCACAGATAG AGAACATCCAGCCATTCTCTGCCAAAGACCTGTCCATTCGCTCACTGGGGGACCG AATCCGGGATCTTGCTCAGCTCAAAAATCTCTATCCCAAGAAGCCCAAGGATGAG GCTTTCCGGAGCCACTACAAGCCTGAACAGATGGGTAAGGATGGCAGGGGTTAT GTCCCAGCTACCATCAAGATGACCGTGGAAAGGGACCAACCACTTCCTACCCCAG AGCTCCAGATGCCTACCATGGTGCCTTCTTATGACCTTGGAATGGCCCCTGATTC CTCCATGAGCATGCAGCTTGGCCCAGATATGGTGCCCCAGGTGTACCCACCACA CTCTCACTCCATCCCCCCGTATCAAGGCCTCTCCCCAGAAGAATCAGTCAACGTG TTGTCAGCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCAGATGCCCCCCAGCCTGGGCCAGATG AGCCTGCCCTTTGACCAGCCTCACCCCCAGGGCCTGCTGCCGTGCCAGCCTCAG GAGCATGCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCTGCTCTGCTCAGATGTGACCATGGTG GAAGACAGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGACAGCGTTTCCTCAGGGCACTTGGATT GGTGAAGACATATTCCCTCCTCTGCTGCCTCCCACTGAACAGGACCTCACTAAGC TTCTCCTGGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGGGGAGGGTCCTTGGGGGCACAGCCC CTCCTGCAGCCCTCCCACTATGGGCAATCTGGGATCTCAATGTCCCACATGGACC TAAGGGCCAACCCCAGTTGGTGATCCCAGCTGGAGGGAGAACCCAAAGAGACAG CTCTTCTACTACCCCCACAGACCTGCTCTGGACACTTGCTCATGCCCTGCCAAGC AGCAGATGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCCCACCTACTCCTGGGTCAGGAGGAAA AGACTAACAGGAGAATGCACAGTGGGTGGAGCCAATCCACTCCTTCCTTTCTATC ATTCCCCTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGACTGGAAGGGAAGTTCAGGCTCTGAG ACACACCCCAACATGCCTGCACCTGCAGCGCGCACACGCACGCACACACACATA CAGAGCTCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAGCAGGAGGGGGGCTGGGTAAGAGCA CAGGTTAGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCCCATTCTGACCCAGGGCCTAGGACGG ATAGGCAGGAACATACAGACACATTTACACTAGAGGCCAGGGATAGAGGATATTG GGTCTCAGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAGCTCAAGGGACCCTGGGTGGGAGCA TAGGAGGGGTCTGGACATGTGGTTACTAGTACAGGTTTTGCCCTGATTAAAAAATC TCCCAAAGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGGTGGAGGCTTCTGATACGTGTATGAG ACTATGCAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCTTCGTGTATAGCTGTGTGAACGTGTAT GTACCTAGGATATGTTAAATGTATAGCTGGCACCTTAGTTGCATGACCACATAGAA CATGTGTCTATCTGCTTTTGCCTACGTGACAACACAAATTTGGGAGGGTGAGACA CTGCACAGAAGACAGCAGCAAGTGTGCTGGCCTCTCTGACATATGCTAACCCCCA AATACTCTGAATTTGGAGTCTGACTGTGCCCAAGTGGGTCCAAGTGGCTGTGACA TCTACGTATGGCTCCACACCTCCAATGCTGCCTGGGAGCCAGGGTGAGAGTCTG GGTCCAGGCCTGGCCATGTGGCCCTCCAGTGTATGAGAGGGCCCTGCCTGCTGC ATCTTTTCTGTTGCCCCATCCACCGCCAGCTTCCCTTCACTCCCCTATCCCATTCT CCCTCTCAAGGCAGGGGTCATAGATCCTAAGCCATAAAATAAATTTTATTCCAAAA TAACAAAATAAATAATCTACTGTACACAATCTGAAAAGAAAAAAAAAAAAAAAA SEQ ID NC O: AGAGCTCCAGGGAGGGACCTGGGTAGAAGGAGAAGCCGGAAACAGCGGGCTGG GGCAGCCACTGCTTACACTGAAGAGGGAGGACGGGAGAGGAGTGTGTGTGTGTG TGTGTGTGTGTGTGTGTATGTATGTGTGTGCTTTATCTTATTTTTCTTTTTGGTGGT GGTGGTGGAAGGGGGGAGGTGCTAGCAGGGCCAGCCTTGAACTCGCTGGACAG AGCTACAGACCTATGGGGCCTGGAAGTGCCCGCTGAGAAAGGGAGAAGACAGCA GAGGGGTTGCCGAGGCAACCTCCAAGTCCCAGATCATGTCTCTGTGGGGTCTGG TCTCCAAGATGCCCCCAGAAAAAGTGCAGCGGCTCTATGTCGACTTTCCCCAACA CCTGCGGCATCTTCTGGGTGACTGGCTGGAGAGCCAGCCCTGGGAGTTCCTGGT CGGCTCCGACGCCTTCTGCTGCAACTTGGCTAGTGCCCTACTTTCAGACACTGTC CAGCACCTTCAGGCCTCGGTGGGAGAGCAGGGGGAGGGGAGCACCATCTTGCA ACACATCAGCACCCTTGAGAGCATATATCAGAGGGACCCCCTGAAGCTGGTGGC CACTTTCAGACAAATACTTCAAGGAGAGAAAAAAGCTGTTATGGAACAGTTCCGCC ACTTGCCAATGCCTTTCCACTGGAAGCAGGAAGAACTCAAGTTTAAGACAGGCTT GCGGAGGCTGCAGCACCGAGTAGGGGAGATCCACCTTCTCCGAGAAGCCCTGCA GAAGGGGGCTGAGGCTGGCCAAGTGTCTCTGCACAGCTTGATAGAAACTCCTGC TAATGGGACTGGGCCAAGTGAGGCCCTGGCCATGCTACTGCAGGAGACCACTGG AGAGCTAGAGGCAGCCAAAGCCCTAGTGCTGAAGAGGATCCAGATTTGGAAACG GCAGCAGCAGCTGGCAGGGAATGGCGCACCGTTTGAGGAGAGCCTGGCCCCAC TCCAGGAGAGGTGTGAAAGCCTGGTGGACATTTATTCCCAGCTACAGCAGGAGGT AGGGGCGGCTGGTGGGGAGCTTGAGCCCAAGACCCGGGCATCGCTGACTGGCC GGCTGGATGAAGTCCTGAGAACCCTCGTCACCAGTTGCTTCCTGGTGGAGAAGC AGCCCCCCCAGGTACTGAAGACTCAGACCAAGTTCCAGGCTGGAGTTCGATTCCT GTTGGGCTTGAGGTTCCTGGGGGCCCCAGCCAAGCCTCCGCTGGTCAGGGCCG ACATGGTGACAGAGAAGCAGGCGCGGGAGCTGAGTGTGCCTCAGGGTCCTGGG GCTGGAGCAGAAAGCACTGGAGAAATCATCAACAACACTGTGCCCTTGGAGAACA GCATTCCTGGGAACTGCTGCTCTGCCCTGTTCAAGAACCTGCTTCTCAAGAAGAT CAAGCGGTGTGAGCGGAAGGGCACTGAGTCTGTCACAGAGGAGAAGTGCGCTGT GCTCTTCTCTGCCAGCTTCACACTTGGCCCCGGCAAACTCCCCATCCAGCTCCAG GCCCTGTCTCTGCCCCTGGTGGTCATCGTCCATGGCAACCAAGACAACAATGCCA AAGCCACTATCCTGTGGGACAATGCCTTCTCTGAGATGGACCGCGTGCCCTTTGT GGTGGCTGAGCGGGTGCCCTGGGAGAAGATGTGTGAAACTCTGAACCTGAAGTT CATGGCTGAGGTGGGGACCAACCGGGGGCTGCTCCCAGAGCACTTCCTCTTCCT GGCCCAGAAGATCTTCAATGACAACAGCCTCAGTATGGAGGCCTTCCAGCACCGT TCTGTG TCCTGGTCGCAGTTCAACAAGGAGATCCTGCTGGGCCGTGGCTTCACCT TTTGGCAGTGGTTTGATGGTGTCCTGGACCTCACCAAACGCTGTCTCCGGAGCTA CTGGTCTGACCGGCTGATCATTGGCTTCATCAGCAAACAGTACGTTACTAGCCTT CTTCTCAATGAGCCCGACGGAACCTTTCTCCTCCGCTTCAGCGACTCAGAGATTG GGGGCATCACCATTGCCCATGTCATCCGGGGCCAGGATGGCTCTCCACAGATAG AGAACATCCAGCCATTCTCTGCCAAAGACCTGTCCATTCGCTCACTGGGGGACCG AATCCGGGATCTTGCTCAGCTCAAAAATCTCTATCCCAAGAAGCCCAAGGATGAG GCTTTCCGGAGCCACTACAAGCCTGAACAGATGGGTAAGGATGGCAGGGGTTAT GTCCCAGCTACCATCAAGATGACCGTGGAAAGGGACCAACCACTTCCTACCCCAG AGCTCCAGATGCCTACCATGGTGCCTTCTTATGACCTTGGAATGGCCCCTGATTC CTCCATGAGCATGCAGCTTGGCCCAGATATGGTGCCCCAGGTGTACCCACCACA CTCTCACTCCATCCCCCCGTATCAAGGCCTCTCCCCAGAAGAATCAGTCAACGTG TTGTCAGCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCAGATGCCCCCCAGCCTGGGCCAGATG AGCCTGCCCTTTGACCAGCCTCACCCCCAGGGCCTGCTGCCGTGCCAGCCTCAG GAGCATGCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCTGCTCTGCTCAGATGTGACCATGGTG GAAGACAGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGACAGCGTTTCCTCAGGGCACTTGGATT GGTGAAGACATATTCCCTCCTCTGCTGCCTCCCACTGAACAGGACCTCACTAAGC TTCTCCTGGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGGGGAGGGTCCTTGGGGGCACAGCCC CTCCTGCAGCCCTCCCACTATGGGCAATCTGGGATCTCAATGTCCCACATGGACC TAAGGGCCAACCCCAGTTGGTGATCCCAGCTGGAGGGAGAACCCAAAGAGACAG CTCTTCTACTACCCCCACAGACCTGCTCTGGACACTTGCTCATGCCCTGCCAAGC AGCAGATGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCCCACCTACTCCTGGGTCAGGAGGAAA AGACTAACAGGAGAATGCACAGTGGGTGGAGCCAATCCACTCCTTCCTTTCTATC ATTCCCCTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGACTGGAAGGGAAGTTCAGGCTCTGAG ACACACCCCAACATGCCTGCACCTGCAGCGCGCACACGCACGCACACACACATA CAGAGCTCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAGCAGGAGGGGGGCTGGGTAAGAGCA CAGGTTAGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCCCATTCTGACCCAGGGCCTAGGACGG ATAGGCAGGAACATACAGACACATTTACACTAGAGGCCAGGGATAGAGGATATTG GGTCTCAGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAGCTCAAGGGACCCTGGGTGGGAGCA TAGGAGGGGTCTGGACATGTGGTTACTAGTACAGGTTTTGCCCTGATTAAAAAATC TCCCAAAGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGGTGGAGGCTTCTGATACGTGTATGAG ACTATGCAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCTTCGTGTATAGCTGTGTGAACGTGTAT GTACCTAGGATATGTTAAATGTATAGCTGGCACCTTAGTTGCATGACCACATAGAA CATGTGTCTATCTGCTTTTGCCTACGTGACAACACAAATTTGGGAGGGTGAGACA CTGCACAGAAGACAGCAGCAAGTGTGCTGGCCTCTCTGACATATGCTAACCCCCA AATACTCTGAATTTGGAGTCTGACTGTGCCCAAGTGGGTCCAAGTGGCTGTGACA TCTACGTATGGCTCCACACCTCCAATGCTGCCTGGGAGCCAGGGTGAGAGTCTG GGTCCAGGCCTGGCCATGTGGCCCTCCAGTGTATGAGAGGGCCCTGCCTGCTGC ATCTTTTCTGTTGCCCCATCCACCGCCAGCTTCCCTTCACTCCCCTATCCCATTCT CCCTCTCAAGGCAGGGGTCATAGATCCTAAGCCATAAAATAAATTTTATTCCAAAA TAACAAAATAAATAATCTACTGTACACAATCTGAAAAGAAAAAAAAAAAAAAAA SEQ ID NC O:
MSLWGLVSKMPPEKVQRLYVDFPQHLRHLLGDWLESQPWEFLVGSDAFCCNLASAL LSDTVQHLQASVGEQGEGSTILQHISTLESIYQRDPLKLVATFRQILQGEKKAVMEQFR HLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIETPANGT GPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQERCESL VDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVLKTQTKF QAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEIINNTVPL ENSIPGNCCSALFKNLLLKKIKRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPIQLQAL SLPLVVIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLKFMAEV GTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFWQWFDG VLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAHVIRGQD GSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQMGKDGR GYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMVPQVYPP HSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLPCQPQE HAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTKLLLEG QGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW MSLWGLVSKMPPEKVQRLYVDFPQHLRHLLGDWLESQPWEFLVGSDAFCCNLASAL LSDTVQHLQASVGEQGEGSTILQHISTLESIYQRDPLKLVATFRQILQGEKKAVMEQFR HLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIETPANGT GPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQERCESL VDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVLKTQTKF QAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEIINNTVPL ENSIPGNCCSALFKNLLLKKIKRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPIQLQAL SLPLVVIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLKFMAEV GTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFWQWFDG VLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAHVIRGQD GSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQMGKDGR GYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMVPQVYPP HSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLPCQPQE HAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTKLLLEG QGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW
SEQ ID NO: 11 : SEQ ID NO: 11:
AGAGCTCCAGGGAGGGACCTGGGTAGAAGGAGAAGCCGGAAACAGCGGGCTGG GGCAGCCACTGCTTACACTGAAGAGGGAGGACGGGAGAGGAGTGTGTGTGTGTG TGTGTGTGTGTGTGTGTATGTATGTGTGTGCTTTATCTTATTTTTCTTTTTGGTGGT GGTGGTGGAAGGGGGGAGGTGCTAGCAGGGCCAGCCTTGAACTCGCTGGACAG AGCTACAGACCTATGGGGCCTGGAAGTGCCCGCTGAGAAAGGGAGAAGACAGCA GAGGGGTTGCCGAGGTGAGGGGTTGCCTCCGAGGCAACCTCCAAGTCCCAGATC ATGTCTCTGTGGGGTCTGGTCTCCAAGATGCCCCCAGAAAAAGTGCAGCGGCTCT ATGTCGACTTTCCCCAACACCTGCGGCATCTTCTGGGTGACTGGCTGGAGAGCCA GCCCTGGGAGTTCCTGGTCGGCTCCGACGCCTTCTGCTGCAACTTGGCTAGTGC CCTACTTTCAGACACTGTCCAGCACCTTCAGGCCTCGGTGGGAGAGCAGGGGGA GGGGAGCACCATCTTGCAACACATCAGCACCCTTGAGAGCATATATCAGAGGGAC CCCCTGAAGCTGGTGGCCACTTTCAGACAAATACTTCAAGGAGAGAAAAAAGCTG TTATGGAACAGTTCCGCCACTTGCCAATGCCTTTCCACTGGAAGCAGGAAGAACT CAAGTTTAAGACAGGCTTGCGGAGGCTGCAGCACCGAGTAGGGGAGATCCACCT TCTCCGAGAAGCCCTGCAGAAGGGGGCTGAGGCTGGCCAAGTGTCTCTGCACAG CTTGATAGAAACTCCTGCTAATGGGACTGGGCCAAGTGAGGCCCTGGCCATGCTA CTGCAGGAGACCACTGGAGAGCTAGAGGCAGCCAAAGCCCTAGTGCTGAAGAGG ATCCAGATTTGGAAACGGCAGCAGCAGCTGGCAGGGAATGGCGCACCGTTTGAG GAGAGCCTGGCCCCACTCCAGGAGAGGTGTGAAAGCCTGGTGGACATTTATTCC CAGCTACAGCAGGAGGTAGGGGCGGCTGGTGGGGAGCTTGAGCCCAAGACCCG GGCATCGCTGACTGGCCGGCTGGATGAAGTCCTGAGAACCCTCGTCACCAGTTG CTTCCTGGTGGAGAAGCAGCCCCCCCAGGTACTGAAGACTCAGACCAAGTTCCA GGCTGGAGTTCGATTCCTGTTGGGCTTGAGGTTCCTGGGGGCCCCAGCCAAGCC TCCGCTGGTCAGGGCCGACATGGTGACAGAGAAGCAGGCGCGGGAGCTGAGTG TGCCTCAGGGTCCTGGGGCTGGAGCAGAAAGCACTGGAGAAATCATCAACAACA CTGTGCCCTTGGAGAACAGCATTCCTGGGAACTGCTGCTCTGCCCTGTTCAAGAA CCTGCTTCTCAAGAAGATCAAGCGGTGTGAGCGGAAGGGCACTGAGTCTGTCAC AGAGGAGAAGTGCGCTGTGCTCTTCTCTGCCAGCTTCACACTTGGCCCCGGCAAA CTCCCCATCCAGCTCCAGGCCCTGTCTCTGCCCCTGGTGGTCATCGTCCATGGCA ACCAAGACAACAATGCCAAAGCCACTATCCTGTGGGACAATGCCTTCTCTGAGAT GGACCGCGTGCCCTTTGTGGTGGCTGAGCGGGTGCCCTGGGAGAAGATGTGTGA AACTCTGAACCTGAAGTTCATGGCTGAGGTGGGGACCAACCGGGGGCTGCTCCC AGAGCACTTCCTCTTCCTGGCCCAGAAGATCTTCAATGACAACAGCCTCAGTATG GAGGCCTTCCAGCACCGTTCTGTGTCCTGGTCGCAGTTCAACAAGGAGATCCTGC TGGGCCGTGGCTTCACCTTTTGGCAGTGGTTTGATGGTGTCCTGGACCTCACCAA ACGCTGTCTCCGGAGCTACTGGTCTGACCGGCTGATCATTGGCTTCATCAGCAAA CAGTACGTTACTAGCCTTCTTCTCAATGAGCCCGACGGAACCTTTCTCCTCCGCTT CAGCGACTCAGAGATTGGGGGCATCACCATTGCCCATGTCATCCGGGGCCAGGA TGGCTCTCCACAGATAGAGAACATCCAGCCATTCTCTGCCAAAGACCTGTCCATT CGCTCACTGGGGGACCGAATCCGGGATCTTGCTCAGCTCAAAAATCTCTATCCCA AGAAGCCCAAGGATGAGGCTTTCCGGAGCCACTACAAGCCTGAACAGATGGGTA AGGATGGCAGGGGTTATGTCCCAGCTACCATCAAGATGACCGTGGAAAGGGACC AACCACTTCCTACCCCAGAGCTCCAGATGCCTACCATGGTGCCTTCTTATGACCTT GGAATGGCCCCTGATTCCTCCATGAGCATGCAGCTTGGCCCAGATATGGTGCCC CAGGTGTACCCACCACACTCTCACTCCATCCCCCCGTATCAAGGCCTCTCCCCAG AAGAATCAGTCAACGTGTTGTCAGCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCAGATGCCCCC CAGCCTGGGCCAGATGAGCCTGCCCTTTGACCAGCCTCACCCCCAGGGCCTGCT GCCGTGCCAGCCTCAGGAGCATGCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCTGCTCTGCTC AGATGTGACCATGGTGGAAGACAGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGACAGCGTTTCC TCAGGGCACTTGGATTGGTGAAGACATATTCCCTCCTCTGCTGCCTCCCACTGAA CAGGACCTCACTAAGCTTCTCCTGGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGGGGAGGGTC CTTGGGGGCACAGCCCCTCCTGCAGCCCTCCCACTATGGGCAATCTGGGATCTC AATGTCCCACATGGACCTAAGGGCCAACCCCAGTTGGTGATCCCAGCTGGAGGG AGAACCCAAAGAGACAGCTCTTCTACTACCCCCACAGACCTGCTCTGGACACTTG CTCATGCCCTGCCAAGCAGCAGATGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCCCACCTACT CCTGGGTCAGGAGGAAAAGACTAACAGGAGAATGCACAGTGGGTGGAGCCAATC CACTCCTTCCTTTCTATCATTCCCCTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGACTGGAAGG GAAGTTCAGGCTCTGAGACACACCCCAACATGCCTGCACCTGCAGCGCGCACAC GCACGCACACACACATACAGAGCTCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAGCAGGAGGG GGGCTGGGTAAGAGCACAGGTTAGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCCCATTCTGAC CCAGGGCCTAGGACGGATAGGCAGGAACATACAGACACATTTACACTAGAGGCC AGGGATAGAGGATATTGGGTCTCAGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAGCTCAAGGG ACCCTGGGTGGGAGCATAGGAGGGGTCTGGACATGTGGTTACTAGTACAGGTTTT GCCCTGATTAAAAAATCTCCCAAAGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGGTGGAGGCT TCTGATACGTGTATGAGACTATGCAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCTTCGTGTATA GCTGTGTGAACGTGTATGTACCTAGGATATGTTAAATGTATAGCTGGCACCTTAGT TGCATGACCACATAGAACATGTGTCTATCTGCTTTTGCCTACGTGACAACACAAAT TTGGGAGGGTGAGACACTGCACAGAAGACAGCAGCAAGTGTGCTGGCCTCTCTG ACATATGCTAACCCCCAAATACTCTGAATTTGGAGTCTGACTGTGCCCAAGTGGGT CCAAGTGGCTGTGACATCTACGTATGGCTCCACACCTCCAATGCTGCCTGGGAGC CAGGGTGAGAGTCTGGGTCCAGGCCTGGCCATGTGGCCCTCCAGTGTATGAGAG GGCCCTGCCTGCTGCATCTTTTCTGTTGCCCCATCCACCGCCAGCTTCCCTTCAC TCCCCTATCCCATTCTCCCTCTCAAGGCAGGGGTCATAGATCCTAAGCCATAAAAT AAATTTTATTCCAAAATAACAAAATAAATAATCTACTGTACACAATCTGAAAAGAAAA AAAAAAAAAAAA AGAGCTCCAGGGAGGGACCTGGGTAGAAGGAGAAGCCGGAAACAGCGGGCTGG GGCAGCCACTGCTTACACTGAAGAGGGAGGACGGGAGAGGAGTGTGTGTGTGTG TGTGTGTGTGTGTGTGTATGTATGTGTGTGCTTTATCTTATTTTTCTTTTTGGTGGT GGTGGTGGAAGGGGGGAGGTGCTAGCAGGGCCAGCCTTGAACTCGCTGGACAG AGCTACAGACCTATGGGGCCTGGAAGTGCCCGCTGAGAAAGGGAGAAGACAGCA GAGGGGTTGCCGAGGTGAGGGGTTGCCTCCGAGGCAACCTCCAAGTCCCAGATC ATGTCTCTGTGGGGTCTGGTCTCCAAGATGCCCCCAGAAAAAGTGCAGCGGCTCT ATGTCGACTTTCCCCAACACCTGCGGCATCTTCTGGGTGACTGGCTGGAGAGCCA GCCCTGGGAGTTCCTGGTCGGCTCCGACGCCTTCTGCTGCAACTTGGCTAGTGC CCTACTTTCAGACACTGTCCAGCACCTTCAGGCCTCGGTGGGAGAGCAGGGGGA GGGGAGCACCATCTTGCAACACATCAGCACCCTTGAGAGCATATATCAGAGGGAC CCCCTGAAGCTGGTGGCCACTTTCAGACAAATACTTCAAGGAGAGAAAAAAGCTG TTATGGAACAGTTCCGCCACTTGCCAATGCCTTTCCACTGGAAGCAGGAAGAACT CAAGTTTAAGACAGGCTTGCGGAGGCTGCAGCACCGAGTAGGGGAGATCCACCT TCTCCGAGAAGCCCTGCAGAAGGGGGCTGAGGCTGGCCAAGTGTCTCTGCACAG CTTGATAGAAACTCCTGCTAATGGGACTGGGCCAAGTGAGGCCCTGGCCATGCTA CTGCAGGAGACCACTGGAGAGCTAGAGGCAGCCAAAGCCCTAGTGCTGAAGAGG ATCCAGATTTGGAAACGGCAGCAGCAGCTGGCAGGGAATGGCGCACCGTTTGAG GAG AGCCTGGCCCCACTCCAGGAGAGGTGTGAAAGCCTGGTGGACATTTATTCC CAGCTACAGCAGGAGGTAGGGGCGGCTGGTGGGGAGCTTGAGCCCAAGACCCG GGCATCGCTGACTGGCCGGCTGGATGAAGTCCTGAGAACCCTCGTCACCAGTTG CTTCCTGGTGGAGAAGCAGCCCCCCCAGGTACTGAAGACTCAGACCAAGTTCCA GGCTGGAGTTCGATTCCTGTTGGGCTTGAGGTTCCTGGGGGCCCCAGCCAAGCC TCCGCTGGTCAGGGCCGACATGGTGACAGAGAAGCAGGCGCGGGAGCTGAGTG TGCCTCAGGGTCCTGGGGCTGGAGCAGAAAGCACTGGAGAAATCATCAACAACA CTGTGCCCTTGGAGAACAGCATTCCTGGGAACTGCTGCTCTGCCCTGTTCAAGAA CCTGCTTCTCAAGAAGATCAAGCGGTGTGAGCGGAAGGGCACTGAGTCTGTCAC AGAGGAGAAGTGCGCTGTGCTCTTCTCTGCCAGCTTCACACTTGGCCCCGGCAAA CTCCCCATCCAGCTCCAGGCCCTGTCTCTGCCCCTGGTGGTCATCGTCCATGGCA ACCAAGACAACAATGCCAAAGCCACTATCCTGTGGGACAATGCCTTCTCTGAGAT GGACCGCGTGCCCTTTGTGGTGGCTGAGCGGGTGCCCTGGGAGAAGATGTGTGA AACTCTGAACCTGAAGTTCATGGCTGAGGTGGGGACCAACCGGGGGCTGCTCCC AGAGCACTTCCTCTTCCTGGCCCAGAAGATCTTCAATGACAACAGCCTCAGTATG GAGGCCTTCCAGCACCGTTCTGTGTCCTGGTCGCAGTTCAACAAGGAGATCCTGC TGGGCCGTGGCTTCACCTTTTGGCAGTGGTTTGATGGTGTCCTGGACCTCACCAA ACGCTGTCTCCGGAGCTACTGGTCTGACCGGCTGATCATTGGCTTCATCAGCAAA CAGTACGTTACTAGCCTTCTTCTCAATGAGCCCGACGGAACCTTTCTCCTCCGCTT CAGCGACTCAGAGATTGGGGGCATCACCATTGCCCATGTCATCCGGGGCCAGGA TGGCTCTCCACAGATAGAGAACATCCAGCCATTCTCTGCCAAAGACCTGTCCATT CGCTCACTGGGGGACCGAATCCGGGATCTTGCTCAGCTCAAAAATCTCTATCCCA AGAAGCCCAAGGATGAGGCTTTCCGGAGCCACTACAAGCCTGAACAGATGGGTA AGGATGGCAGGGGTTATGTCCCAGCTACCATCAAGATGACCGTGGAAAGGGACC AACCACTTCCTACCCCAGAGCTCCAGATGCCTACCATGGTGCCTTCTTATGACCTT GGAATGGCCCCTGATTCCTCCATGAGCATGCAGCTTGGCCCAGATATGGTGCCC CAGGTGTACCCACCACACTCTCACTCCATCCCCCCGTATCAAGGCCTCTCCC CAG AAGAATCAGTCAACGTGTTGTCAGCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCAGATGCCCCC CAGCCTGGGCCAGATGAGCCTGCCCTTTGACCAGCCTCACCCCCAGGGCCTGCT GCCGTGCCAGCCTCAGGAGCATGCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCTGCTCTGCTC AGATGTGACCATGGTGGAAGACAGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGACAGCGTTTCC TCAGGGCACTTGGATTGGTGAAGACATATTCCCTCCTCTGCTGCCTCCCACTGAA CAGGACCTCACTAAGCTTCTCCTGGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGGGGAGGGTC CTTGGGGGCACAGCCCCTCCTGCAGCCCTCCCACTATGGGCAATCTGGGATCTC AATGTCCCACATGGACCTAAGGGCCAACCCCAGTTGGTGATCCCAGCTGGAGGG AGAACCCAAAGAGACAGCTCTTCTACTACCCCCACAGACCTGCTCTGGACACTTG CTCATGCCCTGCCAAGCAGCAGATGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCCCACCTACT CCTGGGTCAGGAGGAAAAGACTAACAGGAGAATGCACAGTGGGTGGAGCCAATC CACTCCTTCCTTTCTATCATTCCCCTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGACTGGAAGG GAAGTTCAGGCTCTGAGACACACCCCAACATGCCTGCACCTGCAGCGCGCACAC GCACGCACACACACATACAGAGCTCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAGCAGGAGGG GGGCTGGGTAAGAGCACAGGTTAGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCCCATTCTGAC CCAGGGCCTAGGACGGATAGGCAGGAACATACAGACACATTTACACTAGAGGCC AGGGATAGAGGATATTGGGTCTCAGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAGCTCAAGGG ACCCTGGGTGGGAGCATAGGAGGGGTCTGGACATGTGGTTACTAGTACAGGTTTT GCCCTGATTAAAAAATCTCCCAAAGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGGTGGAGGCT TCTGATACGTGTATGAGACTATGCAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCTTCGTGTATA GCTGTGTGAACGTGTATGTACCTAGGATATGTTAAATGTATAGCTGGCACCTTAGT TGCATGACCACATAGAACATGTGTCTATCTGCTTTTGCCTACGTGACAACACAAAT TTGGGAGGGTGAGACACTGCACAGAAGACAGCAGCAAGTGTGCTGGCCTCTCTG ACATATGCTAACCCCCAAATACTCTGAATTTGGAGTCTGACTGTGCCCAAGTGGGT CCAAGTGGCTGTGACATCTACGTATGGCTCCACACCTCCAATGCTGCCTGGGAGC CAGGGTGAGAGTCTGGGTCCAGGCCTGGCCATGTGGCCCTCCAGTGTATGAGAG GGCCCTGCCTGCTGCATCTTTTCTGTTGCCCCATCCACCGCCAGCTTCCCTTCAC TCCCCTATCCCATTCTCCCTCTCAAGGCAGGGGTCATAGATCCTAAGCCATAAAAT AAATTTTATTCCAAAATAACAAAATAAATAATCTACTGTACACAATCTGAAAAGAAAA AAAAAAAAAAAA
SEQ ID NO: 12: MSLWGLVSKMPPEKVQRLYVDFPQHLRHLLGDWLESQPWEFLVGSDAFCCNLASAL LSDTVQHLQASVGEQGEGSTILQHISTLESIYQRDPLKLVATFRQILQGEKKAVMEQFR HLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIETPANGT GPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQERCESL VDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVLKTQTKF QAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEIINNTVPL ENSIPGNCCSALFKNLLLKKIKRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPIQLQAL SLPLWIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLKFMAEV GTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFWQWFDG VLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAHVIRGQD GSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQMGKDGR GYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMVPQVYPP HSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLPCQPQE HAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTKLLLEG QGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW SEQ ID NO: 13: SEQ ID NO: 12: MSLWGLVSKMPPEKVQRLYVDFPQHLRHLLGDWLESQPWEFLVGSDAFCCNLASAL LSDTVQHLQASVGEQGEGSTILQHISTLESIYQRDPLKLVATFRQILQGEKKAVMEQFR HLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIETPANGT GPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQERCESL VDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVLKTQTKF QAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEIINNTVPL ENSIPGNCCSALFKNLLLKKIKRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPIQLQAL SLPLWIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLKFMAEV GTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFWQWFDG VLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAHVIRGQD GSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQMGKDGR GYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMVPQVYPP HSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLPCQPQE HAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTKLLLEG QGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW SEQ ID NO: 13:
CCTGTCCTGGTCAAGCCAATCGACCCAGCCTTGTTATGGGTTGGGGTGGGGAGA AATGTGTCCTCCTGATGGCTGGGGAAGAAGAGGGGTTGGATATTTCTAGCCAGG GCCATGCCAGGAGGCTGGTCACTCTGCAAGGGGATGCAGAGGAAAGCGGTGCC CACTCACTCCAGAGGACCTTTCTCTCTTGGGCTAGAGAAAGGCCTATTGGAGGAA CCTGAGCAGGAGGGGCAACCTCCAAGTCCCAGATCATGTCTCTGTGGGGTCTGG TCTCCAAGATGCCCCCAGAAAAAGTGCAGCGGCTCTATGTCGACTTTCCCCAACA CCTGCGGCATCTTCTGGGTGACTGGCTGGAGAGCCAGCCCTGGGAGTTCCTGGT CGGCTCCGACGCCTTCTGCTGCAACTTGGCTAGTGCCCTACTTTCAGACACTGTC CAGCACCTTCAGGCCTCGGTGGGAGAGCAGGGGGAGGGGAGCACCATCTTGCA ACACATCAGCACCCTTGAGAGCATATATCAGAGGGACCCCCTGAAGCTGGTGGC CACTTTCAGACAAATACTTCAAGGAGAGAAAAAAGCTGTTATGGAACAGTTCCGCC ACTTGCCAATGCCTTTCCACTGGAAGCAGGAAGAACTCAAGTTTAAGACAGGCTT GCGGAGGCTGCAGCACCGAGTAGGGGAGATCCACCTTCTCCGAGAAGCCCTGCA GAAGGGGGCTGAGGCTGGCCAAGTGTCTCTGCACAGCTTGATAGAAACTCCTGC TAATGGGACTGGGCCAAGTGAGGCCCTGGCCATGCTACTGCAGGAGACCACTGG AGAGCTAGAGGCAGCCAAAGCCCTAGTGCTGAAGAGGATCCAGATTTGGAAACG GCAGCAGCAGCTGGCAGGGAATGGCGCACCGTTTGAGGAGAGCCTGGCCCCAC TCCAGGAGAGGTGTGAAAGCCTGGTGGACATTTATTCCCAGCTACAGCAGGAGGT AGGGGCGGCTGGTGGGGAGCTTGAGCCCAAGACCCGGGCATCGCTGACTGGCC GGCTGGATGAAGTCCTGAGAACCCTCGTCACCAGTTGCTTCCTGGTGGAGAAGC AGCCCCCCCAGGTACTGAAGACTCAGACCAAGTTCCAGGCTGGAGTTCGATTCCT GTTGGGCTTGAGGTTCCTGGGGGCCCCAGCCAAGCCTCCGCTGGTCAGGGCCG ACATGGTGACAGAGAAGCAGGCGCGGGAGCTGAGTGTGCCTCAGGGTCCTGGG GCTGGAGCAGAAAGCACTGGAGAAATCATCAACAACACTGTGCCCTTGGAGAACA GCATTCCTGGGAACTGCTGCTCTGCCCTGTTCAAGAACCTGCTTCTCAAGAAGAT CAAGCGGTGTGAGCGGAAGGGCACTGAGTCTGTCACAGAGGAGAAGTGCGCTGT GCTCTTCTCTGCCAGCTTCACACTTGGCCCCGGCAAACTCCCCATCCAGCTCCAG GCCCTGTCTCTGCCCCTGGTGGTCATCGTCCATGGCAACCAAGACAACAATGCCA AAGCCACTATCCTGTGGGACAATGCCTTCTCTGAGATGGACCGCGTGCCCTTTGT GGTGGCTGAGCGGGTGCCCTGGGAGAAGATGTGTGAAACTCTGAACCTGAAGTT CATGGCTGAGGTGGGGACCAACCGGGGGCTGCTCCCAGAGCACTTCCTCTTCCT GGCCCAGAAGATCTTCAATGACAACAGCCTCAGTATGGAGGCCTTCCAGCACCGT TCTGTGTCCTGGTCGCAGTTCAACAAGGAGATCCTGCTGGGCCGTGGCTTCACCT TTTGGCAGTGGTTTGATGGTGTCCTGGACCTCACCAAACGCTGTCTCCGGAGCTA CTGGTCTGACCGGCTGATCATTGGCTTCATCAGCAAACAGTACGTTACTAGCCTT CTTCTCAATGAGCCCGACGGAACCTTTCTCCTCCGCTTCAGCGACTCAGAGATTG GGGGCATCACCATTGCCCATGTCATCCGGGGCCAGGATGGCTCTCCACAGATAG AGAACATCCAGCCATTCTCTGCCAAAGACCTGTCCATTCGCTCACTGGGGGACCG AATCCGGGATCTTGCTCAGCTCAAAAATCTCTATCCCAAGAAGCCCAAGGATGAG GCTTTCCGGAGCCACTACAAGCCTGAACAGATGGGTAAGGATGGCAGGGGTTAT GTCCCAGCTACCATCAAGATGACCGTGGAAAGGGACCAACCACTTCCTACCCCAG AGCTCCAGATGCCTACCATGGTGCCTTCTTATGACCTTGGAATGGCCCCTGATTC CTCCATGAGCATGCAGCTTGGCCCAGATATGGTGCCCCAGGTGTACCCACCACA CTCTCACTCCATCCCCCCGTATCAAGGCCTCTCCCCAGAAGAATCAGTCAACGTG TTGTCAGCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCAGATGCCCCCCAGCCTGGGCCAGATG AGCCTGCCCTTTGACCAGCCTCACCCCCAGGGCCTGCTGCCGTGCCAGCCTCAG GAGCATGCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCTGCTCTGCTCAGATGTGACCATGGTG GAAGACAGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGACAGCGTTTCCTCAGGGCACTTGGATT GGTGAAGACATATTCCCTCCTCTGCTGCCTCCCACTGAACAGGACCTCACTAAGC TTCTCCTGGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGGGGAGGGTCCTTGGGGGCACAGCCC CTCCTGCAGCCCTCCCACTATGGGCAATCTGGGATCTCAATGTCCCACATGGACC TAAGGGCCAACCCCAGTTGGTGATCCCAGCTGGAGGGAGAACCCAAAGAGACAG CTCTTCTACTACCCCCACAGACCTGCTCTGGACACTTGCTCATGCCCTGCCAAGC AGCAGATGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCCCACCTACTCCTGGGTCAGGAGGAAA AGACTAACAGGAGAATGCACAGTGGGTGGAGCCAATCCACTCCTTCCTTTCTATC ATTCCCCTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGACTGGAAGGGAAGTTCAGGCTCTGAG ACACACCCCAACATGCCTGCACCTGCAGCGCGCACACGCACGCACACACACATA CAGAGCTCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAGCAGGAGGGGGGCTGGGTAAGAGCA CAGGTTAGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCCCATTCTGACCCAGGGCCTAGGACGG ATAGGCAGGAACATACAGACACATTTACACTAGAGGCCAGGGATAGAGGATATTG GGTCTCAGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAGCTCAAGGGACCCTGGGTGGGAGCA TAGGAGGGGTCTGGACATGTGGTTACTAGTACAGGTTTTGCCCTGATTAAAAAATC TCCCAAAGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGGTGGAGGCTTCTGATACGTGTATGAG ACTATGCAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCTTCGTGTATAGCTGTGTGAACGTGTAT GTACCTAGGATATGTTAAATGTATAGCTGGCACCTTAGTTGCATGACCACATAGAA CATGTGTCTATCTGCTTTTGCCTACGTGACAACACAAATTTGGGAGGGTGAGACA CTGCACAGAAGACAGCAGCAAGTGTGCTGGCCTCTCTGACATATGCTAACCCCCA AATACTCTGAATTTGGAGTCTGACTGTGCCCAAGTGGGTCCAAGTGGCTGTGACA TCTACGTATGGCTCCACACCTCCAATGCTGCCTGGGAGCCAGGGTGAGAGTCTG GGTCCAGGCCTGGCCATGTGGCCCTCCAGTGTATGAGAGGGCCCTGCCTGCTGC ATCTTTTCTGTTGCCCCATCCACCGCCAGCTTCCCTTCACTCCCCTATCCCATTCT CCCTCTCAAGGCAGGGGTCATAGATCCTAAGCCATAAAATAAATTTTATTCCAAAA TAACAAAATAAATAATCTACTGTACACAATCTGAAAAGAAAAAAAAAAAAAAAA SEQ ID NO: 14: CCTGTCCTGGTCAAGCCAATCGACCCAGCCTTGTTATGGGTTGGGGTGGGGAGA AATGTGTCCTCCTGATGGCTGGGGAAGAAGAGGGGTTGGATATTTCTAGCCAGG GCCATGCCAGGAGGCTGGTCACTCTGAGAGGGGGGGGGGG CACTCACTCCAGAGGACCTTTCTCTCTTGGGCTAGAGAAAGGCCTATTGGAGGAA CCTGAGCAGGAGGGGCAACCTCCAAGTCCCAGATCATGTCTCTGTGGGGTCTGG TCTCCAAGATGCCCCCAGAAAAAGTGCAGCGGCTCTATGTCGACTTTCCCCAACA CCTGCGGCATCTTCTGGGTGACTGGCTGGAGAGCCAGCCCTGGGAGTTCCTGGT CGGCTCCGACGCCTTCTGCTGCAACTTGGCTAGTGCCCTACTTTCAGACACTGTC CAGCACCTTCAGGCCTCGGTGGGAGAGCAGGGGGAGGGGAGCACCATCTTGCA ACACATCAGCACCCTTGAGAGCATATATCAGAGGGACCCCCTGAAGCTGGTGGC CACTTTCAGACAAATACTTCAAGGAGAGAAAAAAGCTGTTATGGAACAGTTCCGCC ACTTGCCAATGCCTTTCCACTGGAAGCAGGAAGAACTCAAGTTTAAGACAGGCTT GCGGAGGCTGCAGCACCGAGTAGGGGAGATCCACCTTCTCCGAGAAGCCCTGCA GAAGGGGGCTGAGGCTGGCCAAGTGTCTCTGCACAGCTTGATAGAAACTCCTGC TAATGGGACTGGGCCAAGTGAGGCCCTGGCCATGCTACTGCAGGAGACCACTGG AGAGCTAGAGGCAGCCAAAGCCCTAGTGCTGAAGAGGATCCAGATTTGGAAACG GCAGCAGCAGCTGGCAGGGAATGGCGCACCGTTTGAGGAGAGCCTGGCCCCAC TCCAGGAGAGGTGTGAAAGCCTGGTGGACATTTATTCCCAGCTACAGCAGGAGGT AGGGGCGGCTGGTGGGGAGCTTGAGCCCAAGACCCGGGCATCGCTGACTGGCC GGCTGGATGAAGTCCTGAGAACCCTCGTCACCAGTTGCTTCCTGGTGGAGAAGC AGCCCCCCCAGGTACTGAAGACTCAGACCAAGTTCCAGGCTGGAGTTCGATTCCT GTTGG GCTTGAGGTTCCTGGGGGCCCCAGCCAAGCCTCCGCTGGTCAGGGCCG ACATGGTGACAGAGAAGCAGGCGCGGGAGCTGAGTGTGCCTCAGGGTCCTGGG GCTGGAGCAGAAAGCACTGGAGAAATCATCAACAACACTGTGCCCTTGGAGAACA GCATTCCTGGGAACTGCTGCTCTGCCCTGTTCAAGAACCTGCTTCTCAAGAAGAT CAAGCGGTGTGAGCGGAAGGGCACTGAGTCTGTCACAGAGGAGAAGTGCGCTGT GCTCTTCTCTGCCAGCTTCACACTTGGCCCCGGCAAACTCCCCATCCAGCTCCAG GCCCTGTCTCTGCCCCTGGTGGTCATCGTCCATGGCAACCAAGACAACAATGCCA AAGCCACTATCCTGTGGGACAATGCCTTCTCTGAGATGGACCGCGTGCCCTTTGT GGTGGCTGAGCGGGTGCCCTGGGAGAAGATGTGTGAAACTCTGAACCTGAAGTT CATGGCTGAGGTGGGGACCAACCGGGGGCTGCTCCCAGAGCACTTCCTCTTCCT GGCCCAGAAGATCTTCAATGACAACAGCCTCAGTATGGAGGCCTTCCAGCACCGT TCTGTGTCCTGGTCGCAGTTCAACAAGGAGATCCTGCTGGGCCGTGGCTTCACCT TTTGGCAGTGGTTTGATGGTGTCCTGGACCTCACCAAACGCTGTCTCCGGAGCTA CTGGTCTGACCGGCTGATCATTGGCTTCATCAGCAAACAGTACGTTACTAGCCTT CTTCTCAATGAGCCCGACGGAACCTTTCTCCTCCGCTTCAGCGACTCAGAGATTG GGGGCATCACCATTGCCCATGTCATCCGGGGCCAGGATGGCTCTCCACAGATAG AGAACATCCAGCCATTCTCTGCCAAAGACCTGTCCATTCGCTCACTGGGGGACCG AATCCGGGATCTTGCTCAGCTCAAAAATCTCTATCCCAAGAAGCCCAAGGATGAG GCTTTCCGGAGCCACTACAAGCCTGAACAGATGGGTAAGGATGGCAGGGGTTAT GTCCCAGCTACCATCAAGATGACCGTGGAAAGGGACCAACCACTTCCTACCCCAG AGCTCCAGATGCCTACCATGGTGCCTTCTTATGACCTTGGAATGGCCCCTGATTC CTCCATGAGCATGCAGCTTGGCCCAGATATGGTGCCCCAGGTGTACCCACCACA CTCTCACTCCATCCCCCCGTATCAAGGCCTCTCCCCAGAAGAATCAGTCAACGTG TTGTCAGCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCAGATGCCCCCCAGCCTGGGCCAGATG AGCCTGCCCTTTGACCAGCCTCACCCCCAGGGCCTGCTGCCGTGCCAGCCTCAG GAGCATGCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCTGCTCTGCTCAGATGTGACCATGGTG GAAGACAGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGACAGCGTTTCCTCAGGGCACTTGGATT GGTGAAGACATATTCCCTCCTCTGCTGCCTCCCACTGAACAGGACCTCACTAAGC TTCTCCTGGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGGGGAGGGTCCTTGGGGGCACAGCCC CTCCTGCAGCCCTCCCACTATGGGCAATCTGGGATCTCAATGTCCCACATGGACC TAAGGGCCAACCCCAGTTGGTGATCCCAGCTGGAGGGAGAACCCAAAGAGACAG CTCTTCTACTACCCCCACAGACCTGCTCTGGACACTTGCTCATGCCCTGCCAAGC AGCAGATGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCCCACCTACTCCTGGGTCAGGAGGAAA AGACTAACAGGAGAATGCACAGTGGGTGGAGCCAATCCACTCCTTCCTTTCTATC AC ATTCCCCTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGACTGGAAGGGAAGTTCAGGCTCTGAG ACACCCCAACATGCCTGCACCTGCAGCGCGCACACGCACGCACACACACATA CAGAGCTCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAGCAGGAGGGGGGCTGGGTAAGAGCA CAGGTTAGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCCCATTCTGACCCAGGGCCTAGGACGG ATAGGCAGGAACATACAGACACATTTACACTAGAGGCCAGGGATAGAGGATATTG GGTCTCAGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAGCTCAAGGGACCCTGGGTGGGAGCA TAGGAGGGGTCTGGACATGTGGTTACTAGTACAGGTTTTGCCCTGATTAAAAAATC TCCCAAAGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGGTGGAGGCTTCTGATACGTGTATGAG ACTATGCAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCTTCGTGTATAGCTGTGTGAACGTGTAT GTACCTAGGATATGTTAAATGTATAGCTGGCACCTTAGTTGCATGACCACATAGAA CATGTGTCTATCTGCTTTTGCCTACGTGACAACACAAATTTGGGAGGGTGAGACA CTGCACAGAAGACAGCAGCAAGTGTGCTGGCCTCTCTGACATATGCTAACCCCCA AATACTCTGAATTTGGAGTCTGACTGTGCCCAAGTGGGTCCAAGTGGCTGTGACA TCTACGTATGGCTCCACACCTCCAATGCTGCCTGGGAGCCAGGGTGAGAGTCTG GGTCCAGGCCTGGCCATGTGGCCCTCCAGTGTATGAGAGGGCCCTGCCTGCTGC ATCTTTTCTGTTGCCCCATCCACCGCCAGCTTCCCTTCACTCCCCTATCCCATTCT CCCTCTCAAGGCAGGGGTCATAGATCCTAAGCCATAAAATAAATTTTATTCCAAAA TAACAAAATAAATAATCTACTGTACACAATCTGAAAAGAAAAAAAAAAAAAAAA SEQ ID NO: 14:
MSLWGLVSKMPPEKVQRLYVDFPQHLRHLLGDWLESQPWEFLVGSDAFCCNLASAL LSDTVQHLQASVGEQGEGSTILQHISTLESIYQRDPLKLVATFRQILQGEKKAVMEQFR HLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIETPANGT GPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQERCESL VDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVLKTQTKF QAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEIINNTVPL ENSIPGNCCSALFKNLLLKKIKRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPIQLQAL SLPLWIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLKFMAEV GTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFWQWFDG VLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAHVIRGQD GSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQMGKDGR GYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMVPQVYPP HSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLPCQPQE HAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTKLLLEG QGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW MSLWGLVSKMPPEKVQRLYVDFPQHLRHLLGDWLESQPWEFLVGSDAFCCNLASAL LSDTVQHLQASVGEQGEGSTILQHISTLESIYQRDPLKLVATFRQILQGEKKAVMEQFR HLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIETPANGT GPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQERCESL VDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVLKTQTKF QAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEIINNTVPL ENSIPGNCCSALFKNLLLKKIKRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPIQLQAL SLPLWIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLKFMAEV GTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFWQWFDG VLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAHVIRGQD GSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQMGKDGR GYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMVPQVYPP HSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLPCQPQE HAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTKLLLEG QGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW
SEQ ID NO: 15: SEQ ID NO: 15:
GGAAACAGCGGGCTGGGGCAGCCACTGCTTACACTGAAGAGGGAGGACGGGAG AGGAGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTATGTATGTGTGTGCTTTATCTT ATTTTTCTTTTTGGTGGTGGTGGTGGAAGGGGGGAGGTGCTAGCAGGGCCAGCC TTGAACTCGCTGGACAGAGCTACAGACCTATGGGGCCTGGAAGTGCCCGCTGAG AAAGGGAGAAGACAGCAGAGGGGTTGCCGAGAGAAAGGCCTATTGGAGGAACCT GAGCAGGAGGGGCAACCTCCAAGTCCCAGATCATGTCTCTGTGGGGTCTGGTCT CCAAGATGCCCCCAGAAAAAGTGCAGCGGCTCTATGTCGACTTTCCCCAACACCT GCGGCATCTTCTGGGTGACTGGCTGGAGAGCCAGCCCTGGGAGTTCCTGGTCGG CTCCGACGCCTTCTGCTGCAACTTGGCTAGTGCCCTACTTTCAGACACTGTCCAG CACCTTCAGGCCTCGGTGGGAGAGCAGGGGGAGGGGAGCACCATCTTGCAACA CATCAGCACCCTTGAGAGCATATATCAGAGGGACCCCCTGAAGCTGGTGGCCACT TTCAGACAAATACTTCAAGGAGAGAAAAAAGCTGTTATGGAACAGTTCCGCCACTT GCCAATGCCTTTCCACTGGAAGCAGGAAGAACTCAAGTTTAAGACAGGCTTGCGG AGGCTGCAGCACCGAGTAGGGGAGATCCACCTTCTCCGAGAAGCCCTGCAGAAG GGGGCTGAGGCTGGCCAAGTGTCTCTGCACAGCTTGATAGAAACTCCTGCTAATG GGACTGGGCCAAGTGAGGCCCTGGCCATGCTACTGCAGGAGACCACTGGAGAG CTAGAGGCAGCCAAAGCCCTAGTGCTGAAGAGGATCCAGATTTGGAAACGGCAG CAGCAGCTGGCAGGGAATGGCGCACCGTTTGAGGAGAGCCTGGCCCCACTCCA GGAGAGGTGTGAAAGCCTGGTGGACATTTATTCCCAGCTACAGCAGGAGGTAGG GGCGGCTGGTGGGGAGCTTGAGCCCAAGACCCGGGCATCGCTGACTGGCCGGC TGGATGAAGTCCTGAGAACCCTCGTCACCAGTTGCTTCCTGGTGGAGAAGCAGCC CCCCCAGGTACTGAAGACTCAGACCAAGTTCCAGGCTGGAGTTCGATTCCTGTTG GGCTTGAGGTTCCTGGGGGCCCCAGCCAAGCCTCCGCTGGTCAGGGCCGACAT GGTGACAGAGAAGCAGGCGCGGGAGCTGAGTGTGCCTCAGGGTCCTGGGGCTG GAGCAGAAAGCACTGGAGAAATCATCAACAACACTGTGCCCTTGGAGAACAGCAT TCCTGGGAACTGCTGCTCTGCCCTGTTCAAGAACCTGCTTCTCAAGAAGATCAAG CGGTGTGAGCGGAAGGGCACTGAGTCTGTCACAGAGGAGAAGTGCGCTGTGCTC TTCTCTGCCAGCTTCACACTTGGCCCCGGCAAACTCCCCATCCAGCTCCAGGCCC TGTCTCTGCCCCTGGTGGTCATCGTCCATGGCAACCAAGACAACAATGCCAAAGC CACTATCCTGTGGGACAATGCCTTCTCTGAGATGGACCGCGTGCCCTTTGTGGTG GCTGAGCGGGTGCCCTGGGAGAAGATGTGTGAAACTCTGAACCTGAAGTTCATG GCTGAGGTGGGGACCAACCGGGGGCTGCTCCCAGAGCACTTCCTCTTCCTGGCC CAGAAGATCTTCAATGACAACAGCCTCAGTATGGAGGCCTTCCAGCACCGTTCTG TGTCCTGGTCGCAGTTCAACAAGGAGATCCTGCTGGGCCGTGGCTTCACCTTTTG GCAGTGGTTTGATGGTGTCCTGGACCTCACCAAACGCTGTCTCCGGAGCTACTGG TCTGACCGGCTGATCATTGGCTTCATCAGCAAACAGTACGTTACTAGCCTTCTTCT CAATGAGCCCGACGGAACCTTTCTCCTCCGCTTCAGCGACTCAGAGATTGGGGG CATCACCATTGCCCATGTCATCCGGGGCCAGGATGGCTCTCCACAGATAGAGAAC ATCCAGCCATTCTCTGCCAAAGACCTGTCCATTCGCTCACTGGGGGACCGAATCC GGGATCTTGCTCAGCTCAAAAATCTCTATCCCAAGAAGCCCAAGGATGAGGCTTT CCGGAGCCACTACAAGCCTGAACAGATGGGTAAGGATGGCAGGGGTTATGTCCC AGCTACCATCAAGATGACCGTGGAAAGGGACCAACCACTTCCTACCCCAGAGCTC CAGATGCCTACCATGGTGCCTTCTTATGACCTTGGAATGGCCCCTGATTCCTCCAT GAGCATGCAGCTTGGCCCAGATATGGTGCCCCAGGTGTACCCACCACACTCTCA CTCCATCCCCCCGTATCAAGGCCTCTCCCCAGAAGAATCAGTCAACGTGTTGTCA GCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCAGATGCCCCCCAGCCTGGGCCAGATGAGCCTG CCCTTTGACCAGCCTCACCCCCAGGGCCTGCTGCCGTGCCAGCCTCAGGAGCAT GCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCTGCTCTGCTCAGATGTGACCATGGTGGAAGAC AGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGACAGCGTTTCCTCAGGGCACTTGGATTGGTGAA GACATATTCCCTCCTCTGCTGCCTCCCACTGAACAGGACCTCACTAAGCTTCTCCT GGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGGGGAGGGTCCTTGGGGGCACAGCCCCTCCTG CAGCCCTCCCACTATGGGCAATCTGGGATCTCAATGTCCCACATGGACCTAAGGG CCAACCCCAGTTGGTGATCCCAGCTGGAGGGAGAACCCAAAGAGACAGCTCTTC TACTACCCCCACAGACCTGCTCTGGACACTTGCTCATGCCCTGCCAAGCAGCAGA TGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCCCACCTACTCCTGGGTCAGGAGGAAAAGACTA ACAGGAGAATGCACAGTGGGTGGAGCCAATCCACTCCTTCCTTTCTATCATTCCC CTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGACTGGAAGGGAAGTTCAGGCTCTGAGACACAC CCCAACATGCCTGCACCTGCAGCGCGCACACGCACGCACACACACATACAGAGC TCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAGCAGGAGGGGGGCTGGGTAAGAGCACAGGTT AGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCCCATTCTGACCCAGGGCCTAGGACGGATAGGC AGGAACATACAGACACATTTACACTAGAGGCCAGGGATAGAGGATATTGGGTCTC AGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAGCTCAAGGGACCCTGGGTGGGAGCATAGGAG GGGTCTGGACATGTGGTTACTAGTACAGGTTTTGCCCTGATTAAAAAATCTCCCAA AGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGGTGGAGGCTTCTGATACGTGTATGAGACTATG CAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCTTCGTGTATAGCTGTGTGAACGTGTATGTACCT AGGATATGTTAAATGTATAGCTGGCACCTTAGTTGCATGACCACATA GGAAACAGCGGGCTGGGGCAGCCACTGCTTACACTGAAGAGGGAGGACGGGAG AGGAGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTATGTATGTGTGTGCTTTATCTT ATTTTTCTTTTTGGTGGTGGTGGTGGAAGGGGGGAGGTGCTAGCAGGGCCAGCC TTGAACTCGCTGGACAGAGCTACAGACCTATGGGGCCTGGAAGTGCCCGCTGAG AAAGGGAGAAGACAGCAGAGGGGTTGCCGAGAGAAAGGCCTATTGGAGGAACCT GAGCAGGAGGGGCAACCTCCAAGTCCCAGATCATGTCTCTGTGGGGTCTGGTCT CCAAGATGCCCCCAGAAAAAGTGCAGCGGCTCTATGTCGACTTTCCCCAACACCT GCGGCATCTTCTGGGTGACTGGCTGGAGAGCCAGCCCTGGGAGTTCCTGGTCGG CTCCGACGCCTTCTGCTGCAACTTGGCTAGTGCCCTACTTTCAGACACTGTCCAG CACCTTCAGGCCTCGGTGGGAGAGCAGGGGGAGGGGAGCACCATCTTGCAACA CATCAGCACCCTTGAGAGCATATATCAGAGGGACCCCCTGAAGCTGGTGGCCACT TTCAGACAAATACTTCAAGGAGAGAAAAAAGCTGTTATGGAACAGTTCCGCCACTT GCCAATGCCTTTCCACTGGAAGCAGGAAGAACTCAAGTTTAAGACAGGCTTGCGG AGGCTGCAGCACCGAGTAGGGGAGATCCACCTTCTCCGAGAAGCCCTGCAGAAG GGGGCTGAGGCTGGCCAAGTGTCTCTGCACAGCTTGATAGAAACTCCTGCTAATG GGACTGGGCCAAGTGAGGCCCTGGCCATGCTACTGCAGGAGACCACTGGAGAG CTAGAGGCAGCCAAAGCCCTAGTGCTGAAGAGGATCCAGATTTGGAAACGGCAG CAGCAGCTGGCAGGGAATGGCGCACCGTTTGAGGAGAGCCTGGCCCCACTCCA GGAGAGGTGTGAAAGCCTGGTGGACATTTATTCCCAGCTACAGCAGGAGGTAGG GGCGGCTGGTGGGGAGCTTGAGCCCAAGACCCGGGCATCGCTGACTGGCCGGC TGGATGAAGTCCTGAGAACCCTCGTCACCAGTTGCTTCCTGGTGGAGAAGCAGCC CCCCCAGGTACTGAAGACTCAGACCAAGTTCCAGGCTGGAGTTCGATTCCTGTTG GGCTTGAGGTTCCTGGGGGCCCCAGCCAAGCCTCCGCTGGTCAGGGCCGACAT GGTGACAGAGAAGCAGGCGCGGGAGCTGAGTGTGCCTCAGGGTCCTGGGGCTG GAGCAGAAAGCACTGGAGAAATCATCAACAACACTGTGCCCTTGGAGAACAGCAT TCCTGGGAACTGCTGCTCTGCCCTGTTCAAGAACCTGCTTCTCAAGAAGATCAAG CGGTGTGAGCGGAAGGGCACTGAGTCTGTCACAGAGGAGAAGTGCGCTGTGCTC TTCTCTGCCAGCTTCACACTTGGCCCCGGCAAACTCCCCATCCAGCTCCAGGCCC TGTCTCTGCCCCTGGTGGTCATCGTCCATGGCAACCAAGACAACAATGCCAAAGC CACTATCCTGTGGGACAATGCCTTCTCTGAGATGGACCGCGTGCCCTTTGTGGTG GCTGAGCGGGTGCCCTGGGAGAAGATGTGTGAAACTCTGAACCTGAAGTTCATG GCTGAGGTGGGGACCAACCGGGGGCTGCTCCCAGAGCACTTCCTCTTCCTGGCC CAGAAGATCTTCAATGACAACAGCCTCAGTATGGAGGCCTTCCAGCACCGTTCTG TGTCCTG GTCGCAGTTCAACAAGGAGATCCTGCTGGGCCGTGGCTTCACCTTTTG GCAGTGGTTTGATGGTGTCCTGGACCTCACCAAACGCTGTCTCCGGAGCTACTGG TCTGACCGGCTGATCATTGGCTTCATCAGCAAACAGTACGTTACTAGCCTTCTTCT CAATGAGCCCGACGGAACCTTTCTCCTCCGCTTCAGCGACTCAGAGATTGGGGG CATCACCATTGCCCATGTCATCCGGGGCCAGGATGGCTCTCCACAGATAGAGAAC ATCCAGCCATTCTCTGCCAAAGACCTGTCCATTCGCTCACTGGGGGACCGAATCC GGGATCTTGCTCAGCTCAAAAATCTCTATCCCAAGAAGCCCAAGGATGAGGCTTT CCGGAGCCACTACAAGCCTGAACAGATGGGTAAGGATGGCAGGGGTTATGTCCC AGCTACCATCAAGATGACCGTGGAAAGGGACCAACCACTTCCTACCCCAGAGCTC CAGATGCCTACCATGGTGCCTTCTTATGACCTTGGAATGGCCCCTGATTCCTCCAT GAGCATGCAGCTTGGCCCAGATATGGTGCCCCAGGTGTACCCACCACACTCTCA CTCCATCCCCCCGTATCAAGGCCTCTCCCCAGAAGAATCAGTCAACGTGTTGTCA GCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCAGATGCCCCCCAGCCTGGGCCAGATGAGCCTG CCCTTTGACCAGCCTCACCCCCAGGGCCTGCTGCCGTGCCAGCCTCAGGAGCAT GCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCTGCTCTGCTCAGATGTGACCATGGTGGAAGAC AGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGACAGCGTTTCCTCAGGGCACTTGGATTGGTGAA GACATATTCCCTCCTCTGCTGCCTCCCACTGAACAGGACCTCACTAAGCTTCTCCT GGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGGGGAGGGTCCTTGGGGGCACAGCCCCTCCTG CAGCCCTCCCACTATGGGCAATCTGGGATCTCAATGTCCCACATGGACCTAAGGG CCAACCCCAGTTGGTGATCCCAGCTGGAGGGAGAACCCAAAGAGACAGCTCTTC TACTACCCCCACAGACCTGCTCTGGACACTTGCTCATGCCCTGCCAAGCAGCAGA TGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCCCACCTACTCCTGGGTCAGGAGGAAAAGACTA ACAGGAGAATGCACAGTGGGTGGAGCCAATCCACTCCTTCCTTTCTATCATTCCC CTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGACTGGAAGGGAAGTTCAGGCTCTGAGACACAC CCCAACATGCCTGCACCTGCAGCGCGCACACGCACGCACACACACATACAGAGC TCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAGCAGGAGGGGGGCTGGGTAAGAGCACAGGTT AGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCCCATTCTGACCCAGGGCCTAGGACGGATAGGC AGGAACATACAGACACATTTACACTAGAGGCCAGGGATAGAGGATATTGGGTCTC AGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAGCTCAAGGGACCCTGGGTGGGAGCATAGGAG GGGTCTGGACATGTGGTTACTAGTACAGGTTTTGCCCTGATTAAAAAATCTCCCAA AGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGGTGGAGGCTTCTGATACGTGTATGAGACTATG CAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCTTCGTGTATAGCTGTGTGAACGTGTATGTACCT AGGATATGTTAAATGTATAGCTGGCACCTTAGTTGCATGACCACATA
SEQ ID NO: 16: SEQ ID NO: 16:
MSLWGLVSKMPPEKVQRLYVDFPQHLRHLLGDWLESQPWEFLVGSDAFCCNLASAL LSDTVQHLQASVGEQGEGSTILQHISTLESIYQRDPLKLVATFRQILQGEKKAVMEQFR HLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIETPANGT GPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQERCESL VDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVLKTQTKF QAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEIINNTVPL ENSIPGNCCSALFKNLLLKKIKRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPIQLQAL SLPLWIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLKFMAEV GTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFWQWFDG VLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAHVIRGQD GSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQMGKDGR GYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMVPQVYPP HSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLPCQPQE HAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTKLLLEG QGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW MSLWGLVSKMPPEKVQRLYVDFPQHLRHLLGDWLESQPWEFLVGSDAFCCNLASAL LSDTVQHLQASVGEQGEGSTILQHISTLESIYQRDPLKLVATFRQILQGEKKAVMEQFR HLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIETPANGT GPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQERCESL VDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVLKTQTKF QAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEIINNTVPL ENSIPGNCCSALFKNLLLKKIKRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPIQLQAL SLPLWIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLKFMAEV GTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFWQWFDG VLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAHVIRGQD GSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQMGKDGR GYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMVPQVYPP HSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLPCQPQE HAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTKLLLEG QGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW
SEQ ID NO: 17: GGAAACAGCGGGCTGGGGCAGCCACTGCTTACACTGAAGAGGGAGGACGGGAG AGGAGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTATGTATGTGTGTGCTTTATCTT ATTTTTCTTTTTGGTGGTGGTGGTGGAAGGGGGGAGGTGCTAGCAGGGCCAGCC TTGAACTCGCTGGACAGAGCTACAGACCTATGGGGCCTGGAAGTGCCCGCTGAG AAAGGGAGAAGACAGCAGAGGGGTTGCCGAGAGAAAGGCCTATTGGAGGAACCT GAGCAGGAGGGGTAAGGATTCTGCCTTGAGGAGAAAAGAGCTGGGGCAACCTCC AAGTCCCAGATCATGTCTCTGTGGGGTCTGGTCTCCAAGATGCCCCCAGAAAAAG TGCAGCGGCTCTATGTCGACTTTCCCCAACACCTGCGGCATCTTCTGGGTGACTG GCTGGAGAGCCAGCCCTGGGAGTTCCTGGTCGGCTCCGACGCCTTCTGCTGCAA CTTGGCTAGTGCCCTACTTTCAGACACTGTCCAGCACCTTCAGGCCTCGGTGGGA GAGCAGGGGGAGGGGAGCACCATCTTGCAACACATCAGCACCCTTGAGAGCATA TATCAGAGGGACCCCCTGAAGCTGGTGGCCACTTTCAGACAAATACTTCAAGGAG AGAAAAAAGCTGTTATGGAACAGTTCCGCCACTTGCCAATGCCTTTCCACTGGAA GCAGGAAGAACTCAAGTTTAAGACAGGCTTGCGGAGGCTGCAGCACCGAGTAGG GGAGATCCACCTTCTCCGAGAAGCCCTGCAGAAGGGGGCTGAGGCTGGCCAAGT GTCTCTGCACAGCTTGATAGAAACTCCTGCTAATGGGACTGGGCCAAGTGAGGCC CTGGCCATGCTACTGCAGGAGACCACTGGAGAGCTAGAGGCAGCCAAAGCCCTA GTGCTGAAGAGGATCCAGATTTGGAAACGGCAGCAGCAGCTGGCAGGGAATGGC GCACCGTTTGAGGAGAGCCTGGCCCCACTCCAGGAGAGGTGTGAAAGCCTGGTG GACATTTATTCCCAGCTACAGCAGGAGGTAGGGGCGGCTGGTGGGGAGCTTGAG CCCAAGACCCGGGCATCGCTGACTGGCCGGCTGGATGAAGTCCTGAGAACCCTC GTCACCAGTTGCTTCCTGGTGGAGAAGCAGCCCCCCCAGGTACTGAAGACTCAG ACCAAGTTCCAGGCTGGAGTTCGATTCCTGTTGGGCTTGAGGTTCCTGGGGGCC CCAGCCAAGCCTCCGCTGGTCAGGGCCGACATGGTGACAGAGAAGCAGGCGCG GGAGCTGAGTGTGCCTCAGGGTCCTGGGGCTGGAGCAGAAAGCACTGGAGAAAT CATCAACAACACTGTGCCCTTGGAGAACAGCATTCCTGGGAACTGCTGCTCTGCC CTGTTCAAGAACCTGCTTCTCAAGAAGATCAAGCGGTGTGAGCGGAAGGGCACTG AGTCTGTCACAGAGGAGAAGTGCGCTGTGCTCTTCTCTGCCAGCTTCACACTTGG CCCCGGCAAACTCCCCATCCAGCTCCAGGCCCTGTCTCTGCCCCTGGTGGTCAT CGTCCATGGCAACCAAGACAACAATGCCAAAGCCACTATCCTGTGGGACAATGCC TTCTCTGAGATGGACCGCGTGCCCTTTGTGGTGGCTGAGCGGGTGCCCTGGGAG AAGATGTGTGAAACTCTGAACCTGAAGTTCATGGCTGAGGTGGGGACCAACCGG GGGCTGCTCCCAGAGCACTTCCTCTTCCTGGCCCAGAAGATCTTCAATGACAACA GCCTCAGTATGGAGGCCTTCCAGCACCGTTCTGTGTCCTGGTCGCAGTTCAACAA GGAGATCCTGCTGGGCCGTGGCTTCACCTTTTGGCAGTGGTTTGATGGTGTCCTG GACCTCACCAAACGCTGTCTCCGGAGCTACTGGTCTGACCGGCTGATCATTGGCT TCATCAGCAAACAGTACGTTACTAGCCTTCTTCTCAATGAGCCCGACGGAACCTTT CTCCTCCGCTTCAGCGACTCAGAGATTGGGGGCATCACCATTGCCCATGTCATCC GGGGCCAGGATGGCTCTCCACAGATAGAGAACATCCAGCCATTCTCTGCCAAAGA CCTGTCCATTCGCTCACTGGGGGACCGAATCCGGGATCTTGCTCAGCTCAAAAAT CTCTATCCCAAGAAGCCCAAGGATGAGGCTTTCCGGAGCCACTACAAGCCTGAAC AGATGGGTAAGGATGGCAGGGGTTATGTCCCAGCTACCATCAAGATGACCGTGG AAAGGGACCAACCACTTCCTACCCCAGAGCTCCAGATGCCTACCATGGTGCCTTC TTATGACCTTGGAATGGCCCCTGATTCCTCCATGAGCATGCAGCTTGGCCCAGAT ATGGTGCCCCAGGTGTACCCACCACACTCTCACTCCATCCCCCCGTATCAAGGCC TCTCCCCAGAAGAATCAGTCAACGTGTTGTCAGCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCA GATGCCCCCCAGCCTGGGCCAGATGAGCCTGCCCTTTGACCAGCCTCACCCCCA GGGCCTGCTGCCGTGCCAGCCTCAGGAGCATGCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCT GCTCTGCTCAGATGTGACCATGGTGGAAGACAGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGAC AGCGTTTCCTCAGGGCACTTGGATTGGTGAAGACATATTCCCTCCTCTGCTGCCT CCCACTGAACAGGACCTCACTAAGCTTCTCCTGGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGG GGAGGGTCCTTGGGGGCACAGCCCCTCCTGCAGCCCTCCCACTATGGGCAATCT GGGATCTCAATGTCCCACATGGACCTAAGGGCCAACCCCAGTTGGTGATCCCAG CTGGAGGGAGAACCCAAAGAGACAGCTCTTCTACTACCCCCACAGACCTGCTCTG GACACTTGCTCATGCCCTGCCAAGCAGCAGATGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCC CACCTACTCCTGGGTCAGGAGGAAAAGACTAACAGGAGAATGCACAGTGGGTGG AGCCAATCCACTCCTTCCTTTCTATCATTCCCCTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGA CTGGAAGGGAAGTTCAGGCTCTGAGACACACCCCAACATGCCTGCACCTGCAGC GCGCACACGCACGCACACACACATACAGAGCTCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAG CAGGAGGGGGGCTGGGTAAGAGCACAGGTTAGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCC CATTCTGACCCAGGGCCTAGGACGGATAGGCAGGAACATACAGACACATTTACAC TAGAGGCCAGGGATAGAGGATATTGGGTCTCAGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAG CTCAAGGGACCCTGGGTGGGAGCATAGGAGGGGTCTGGACATGTGGTTACTAGT ACAGGTTTTGCCCTGATTAAAAAATCTCCCAAAGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGG TGGAGGCTTCTGATACGTGTATGAGACTATGCAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCT TCGTGTATAGCTGTGTGAACGTGTATGTACCTAGGATATGTTAAATGTATAGCTGG CACCTTAGTTGCATGACCACATA SEQ ID NO: 17: GGAAACAGCGGGCTGGGGCAGCCACTGCTTACACTGAAGAGGGAGGACGGGAG AGGAGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTATGTATGTGTGTGCTTTATCTT ATTTTTCTTTTTGGTGGTGGTGGTGGAAGGGGGGAGGTGCTAGCAGGGCCAGCC TTGAACTCGCTGGACAGAGCTACAGACCTATGGGGCCTGGAAGTGCCCGCTGAG AAAGGGAGAAGACAGCAGAGGGGTTGCCGAGAGAAAGGCCTATTGGAGGAACCT GAGCAGGAGGGGTAAGGATTCTGCCTTGAGGAGAAAAGAGCTGGGGCAACCTCC AAGTCCCAGATCATGTCTCTGTGGGGTCTGGTCTCCAAGATGCCCCCAGAAAAAG TGCAGCGGCTCTATGTCGACTTTCCCCAACACCTGCGGCATCTTCTGGGTGACTG GCTGGAGAGCCAGCCCTGGGAGTTCCTGGTCGGCTCCGACGCCTTCTGCTGCAA CTTGGCTAGTGCCCTACTTTCAGACACTGTCCAGCACCTTCAGGCCTCGGTGGGA GAGCAGGGGGAGGGGAGCACCATCTTGCAACACATCAGCACCCTTGAGAGCATA TATCAGAGGGACCCCCTGAAGCTGGTGGCCACTTTCAGACAAATACTTCAAGGAG AGAAAAAAGCTGTTATGGAACAGTTCCGCCACTTGCCAATGCCTTTCCACTGGAA GCAGGAAGAACTCAAGTTTAAGACAGGCTTGCGGAGGCTGCAGCACCGAGTAGG GGAGATCCACCTTCTCCGAGAAGCCCTGCAGAAGGGGGCTGAGGCTGGCCAAGT GTCTCTGCACAGCTTGATAGAAACTCCTGCTAATGGGACTGGGCCAAGTGAGGCC CTGGCCATGCTACTGCAGGAGACCACTGGAGAGCTAGAGGCAGCCAAAGCCCTA GTGCTGAAGAGGATCCAGATTTGGAAACGGCAGCAGCAGCTGGCAGGGAATGGC GCA CCGTTTGAGGAGAGCCTGGCCCCACTCCAGGAGAGGTGTGAAAGCCTGGTG GACATTTATTCCCAGCTACAGCAGGAGGTAGGGGCGGCTGGTGGGGAGCTTGAG CCCAAGACCCGGGCATCGCTGACTGGCCGGCTGGATGAAGTCCTGAGAACCCTC GTCACCAGTTGCTTCCTGGTGGAGAAGCAGCCCCCCCAGGTACTGAAGACTCAG ACCAAGTTCCAGGCTGGAGTTCGATTCCTGTTGGGCTTGAGGTTCCTGGGGGCC CCAGCCAAGCCTCCGCTGGTCAGGGCCGACATGGTGACAGAGAAGCAGGCGCG GGAGCTGAGTGTGCCTCAGGGTCCTGGGGCTGGAGCAGAAAGCACTGGAGAAAT CATCAACAACACTGTGCCCTTGGAGAACAGCATTCCTGGGAACTGCTGCTCTGCC CTGTTCAAGAACCTGCTTCTCAAGAAGATCAAGCGGTGTGAGCGGAAGGGCACTG AGTCTGTCACAGAGGAGAAGTGCGCTGTGCTCTTCTCTGCCAGCTTCACACTTGG CCCCGGCAAACTCCCCATCCAGCTCCAGGCCCTGTCTCTGCCCCTGGTGGTCAT CGTCCATGGCAACCAAGACAACAATGCCAAAGCCACTATCCTGTGGGACAATGCC TTCTCTGAGATGGACCGCGTGCCCTTTGTGGTGGCTGAGCGGGTGCCCTGGGAG AAGATGTGTGAAACTCTGAACCTGAAGTTCATGGCTGAGGTGGGGACCAACCGG GGGCTGCTCCCAGAGCACTTCCTCTTCCTGGCCCAGAAGATCTTCAATGACAACA GCCTCAGTATGGAGGCCTTCCAGCACCGTTCTGTGTCCTGGTCGCAGTTCAACAA GGAGATCCTGCTGGGCCGTGGCTTCACCTTTTGGCAGTGGTTTGATGGTGTCCTG GACCTCACCAAACGCTGTCTCCGGAGCTACTGGTCTGACCGGCTGATCATTGGCT TCATCAGCAAACAGTACGTTACTAGCCTTCTTCTCAATGAGCCCGACGGAACCTTT CTCCTCCGCTTCAGCGACTCAGAGATTGGGGGCATCACCATTGCCCATGTCATCC GGGGCCAGGATGGCTCTCCACAGATAGAGAACATCCAGCCATTCTCTGCCAAAGA CCTGTCCATTCGCTCACTGGGGGACCGAATCCGGGATCTTGCTCAGCTCAAAAAT CTCTATCCCAAGAAGCCCAAGGATGAGGCTTTCCGGAGCCACTACAAGCCTGAAC AGATGGGTAAGGATGGCAGGGGTTATGTCCCAGCTACCATCAAGATGACCGTGG AAAGGGACCAACCACTTCCTACCCCAGAGCTCCAGATGCCTACCATGGTGCCTTC TTATGACCTTGGAATGGCCCCTGATTCCTCCATGAGCATGCAGCTTGGCCCAGAT ATGGTGCCCCAGGTGTACCCACCACACTCTCACTCCATCCCCCCGTATCAAGGCC TCTCCCCAGAAGAATCAGTCAACGTGTTGTCAGCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCA GATGCCCCCCAGCCTGGGCCAGATGAGCCTGCCCTTTGACCAGCCTCACCCCCA GGGCCTGCTGCCGTGCCAGCCTCAGGAGCATGCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCT GCTCTGCTCAGATGTGACCATGGTGGAAGACAGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGAC AGCGTTTCCTCAGGGCACTTGGATTGGTGAAGACATATTCCCTCCTCTGCTGCCT CCCACTGAACAGGACCTCACTAAGCTTCTCCTGGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGG GGAGGGTCCTTGGGGGCACAGCCCCTCCTGCAGCCCTCCCACTATGGGCAATCT GGGATCTCAATGTCCCACATGGACCTAAGGGCCAACCCCAGTTGGTGATCCCA G CTGGAGGGAGAACCCAAAGAGACAGCTCTTCTACTACCCCCACAGACCTGCTCTG GACACTTGCTCATGCCCTGCCAAGCAGCAGATGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCC CACCTACTCCTGGGTCAGGAGGAAAAGACTAACAGGAGAATGCACAGTGGGTGG AGCCAATCCACTCCTTCCTTTCTATCATTCCCCTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGA CTGGAAGGGAAGTTCAGGCTCTGAGACACACCCCAACATGCCTGCACCTGCAGC GCGCACACGCACGCACACACACATACAGAGCTCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAG CAGGAGGGGGGCTGGGTAAGAGCACAGGTTAGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCC CATTCTGACCCAGGGCCTAGGACGGATAGGCAGGAACATACAGACACATTTACAC TAGAGGCCAGGGATAGAGGATATTGGGTCTCAGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAG CTCAAGGGACCCTGGGTGGGAGCATAGGAGGGGTCTGGACATGTGGTTACTAGT ACAGGTTTTGCCCTGATTAAAAAATCTCCCAAAGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGG TGGAGGCTTCTGATACGTGTATGAGACTATGCAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCT TCGTGTATAGCTGTGTGAACGTGTATGTACCTAGGATATGTTAAATGTATAGCTGG CACCTTAGTTGCATGACCACATA
SEQ ID NO: 18: MSLWGLVSKMPPEKVQRLYVDFPQHLRHLLGDWLESQPWEFLVGSDAFCCNLASAL LSDTVQHLQASVGEQGEGSTILQHISTLESIYQRDPLKLVATFRQILQGEKKAVMEQFR HLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIETPANGT GPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQERCESL VDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVLKTQTKF QAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEIINNTVPL ENSIPGNCCSALFKNLLLKKI KRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPIQLQAL SLPLWIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLKFMAEV GTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFWQWFDG VLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAHVIRGQD GSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQMGKDGR GYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMVPQVYPP HSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLPCQPQE HAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTKLLLEG QGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW SEQ ID NO: 18: MSLWGLVSKMPPEKVQRLYVDFPQHLRHLLGDWLESQPWEFLVGSDAFCCNLASAL LSDTVQHLQASVGEQGEGSTILQHISTLESIYQRDPLKLVATFRQILQGEKKAVMEQFR HLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIETPANGT GPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQERCESL VDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVLKTQTKF QAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEIINNTVPL ENSIPGNCCSALFKNLLLKKI KRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPIQLQAL SLPLWIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLKFMAEV GTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFWQWFDG VLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAHVIRGQD GSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQMGKDGR GYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMVPQVYPP HSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLPCQPQE HAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTKLLLEG QGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW
SEQ ID NO: 19: SEQ ID NO: 19:
GGAAACAGCGGGCTGGGGCAGCCACTGCTTACACTGAAGAGGGAGGACGGGAG AGGAGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTATGTATGTGTGTGCTTTATCTT ATTTTTCTTTTTGGTGGTGGTGGTGGAAGGGGGGAGGTGCTAGCAGGGCCAGCC TTGAACTCGCTGGACAGAGCTACAGACCTATGGGGCCTGGAAGTGCCCGCTGAG AAAGGGAGAAGACAGCAGAGGGGTTGCCGAGAGAAAGGCCTATTGGAGGAACCT GAGCAGGAGGGGTAAGGATTCTGCCTTGAGGAGAAAAGAGCTGGGGTAAGTGGG CACTGGAGGAAAGAGGGGCATGAAGGTCTTGGAGCAGAAACGTCCAGAGAAGGG ACCTCTCCATTTTCCATCCCTCTGAGAGGCCTGGGAGAGGCAACCTCCAAGTCCC AGATCATGTCTCTGTGGGGTCTGGTCTCCAAGATGCCCCCAGAAAAAGTGCAGCG GCTCTATGTCGACTTTCCCCAACACCTGCGGCATCTTCTGGGTGACTGGCTGGAG AGCCAGCCCTGGGAGTTCCTGGTCGGCTCCGACGCCTTCTGCTGCAACTTGGCT AGTGCCCTACTTTCAGACACTGTCCAGCACCTTCAGGCCTCGGTGGGAGAGCAG GGGGAGGGGAGCACCATCTTGCAACACATCAGCACCCTTGAGAGCATATATCAGA GGGACCCCCTGAAGCTGGTGGCCACTTTCAGACAAATACTTCAAGGAGAGAAAAA AGCTGTTATGGAACAGTTCCGCCACTTGCCAATGCCTTTCCACTGGAAGCAGGAA GAACTCAAGTTTAAGACAGGCTTGCGGAGGCTGCAGCACCGAGTAGGGGAGATC CACCTTCTCCGAGAAGCCCTGCAGAAGGGGGCTGAGGCTGGCCAAGTGTCTCTG CACAGCTTGATAGAAACTCCTGCTAATGGGACTGGGCCAAGTGAGGCCCTGGCC ATGCTACTGCAGGAGACCACTGGAGAGCTAGAGGCAGCCAAAGCCCTAGTGCTG AAGAGGATCCAGATTTGGAAACGGCAGCAGCAGCTGGCAGGGAATGGCGCACCG TTTGAGGAGAGCCTGGCCCCACTCCAGGAGAGGTGTGAAAGCCTGGTGGACATT TATTCCCAGCTACAGCAGGAGGTAGGGGCGGCTGGTGGGGAGCTTGAGCCCAAG ACCCGGGCATCGCTGACTGGCCGGCTGGATGAAGTCCTGAGAACCCTCGTCACC AGTTGCTTCCTGGTGGAGAAGCAGCCCCCCCAGGTACTGAAGACTCAGACCAAG TTCCAGGCTGGAGTTCGATTCCTGTTGGGCTTGAGGTTCCTGGGGGCCCCAGCC AAGCCTCCGCTGGTCAGGGCCGACATGGTGACAGAGAAGCAGGCGCGGGAGCT GAGTGTGCCTCAGGGTCCTGGGGCTGGAGCAGAAAGCACTGGAGAAATCATCAA CAACACTGTGCCCTTGGAGAACAGCATTCCTGGGAACTGCTGCTCTGCCCTGTTC AAGAACCTGCTTCTCAAGAAGATCAAGCGGTGTGAGCGGAAGGGCACTGAGTCT GTCACAGAGGAGAAGTGCGCTGTGCTCTTCTCTGCCAGCTTCACACTTGGCCCCG GCAAACTCCCCATCCAGCTCCAGGCCCTGTCTCTGCCCCTGGTGGTCATCGTCCA TGGCAACCAAGACAACAATGCCAAAGCCACTATCCTGTGGGACAATGCCTTCTCT GAGATGGACCGCGTGCCCTTTGTGGTGGCTGAGCGGGTGCCCTGGGAGAAGAT GTGTGAAACTCTGAACCTGAAGTTCATGGCTGAGGTGGGGACCAACCGGGGGCT GCTCCCAGAGCACTTCCTCTTCCTGGCCCAGAAGATCTTCAATGACAACAGCCTC AGTATGGAGGCCTTCCAGCACCGTTCTGTGTCCTGGTCGCAGTTCAACAAGGAGA TCCTGCTGGGCCGTGGCTTCACCTTTTGGCAGTGGTTTGATGGTGTCCTGGACCT CACCAAACGCTGTCTCCGGAGCTACTGGTCTGACCGGCTGATCATTGGCTTCATC AGCAAACAGTACGTTACTAGCCTTCTTCTCAATGAGCCCGACGGAACCTTTCTCCT CCGCTTCAGCGACTCAGAGATTGGGGGCATCACCATTGCCCATGTCATCCGGGG CCAGGATGGCTCTCCACAGATAGAGAACATCCAGCCATTCTCTGCCAAAGACCTG TCCATTCGCTCACTGGGGGACCGAATCCGGGATCTTGCTCAGCTCAAAAATCTCT ATCCCAAGAAGCCCAAGGATGAGGCTTTCCGGAGCCACTACAAGCCTGAACAGAT GGGTAAGGATGGCAGGGGTTATGTCCCAGCTACCATCAAGATGACCGTGGAAAG GGACCAACCACTTCCTACCCCAGAGCTCCAGATGCCTACCATGGTGCCTTCTTAT GACCTTGGAATGGCCCCTGATTCCTCCATGAGCATGCAGCTTGGCCCAGATATGG TGCCCCAGGTGTACCCACCACACTCTCACTCCATCCCCCCGTATCAAGGCCTCTC CCCAGAAGAATCAGTCAACGTGTTGTCAGCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCAGATG CCCCCCAGCCTGGGCCAGATGAGCCTGCCCTTTGACCAGCCTCACCCCCAGGGC CTGCTGCCGTGCCAGCCTCAGGAGCATGCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCTGCTC TGCTCAGATGTGACCATGGTGGAAGACAGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGACAGCG TTTCCTCAGGGCACTTGGATTGGTGAAGACATATTCCCTCCTCTGCTGCCTCCCA CTGAACAGGACCTCACTAAGCTTCTCCTGGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGGGGA GGGTCCTTGGGGGCACAGCCCCTCCTGCAGCCCTCCCACTATGGGCAATCTGGG ATCTCAATGTCCCACATGGACCTAAGGGCCAACCCCAGTTGGTGATCCCAGCTGG AGGGAGAACCCAAAGAGACAGCTCTTCTACTACCCCCACAGACCTGCTCTGGACA CTTGCTCATGCCCTGCCAAGCAGCAGATGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCCCACC TACTCCTGGGTCAGGAGGAAAAGACTAACAGGAGAATGCACAGTGGGTGGAGCC AATCCACTCCTTCCTTTCTATCATTCCCCTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGACTGG AAGGGAAGTTCAGGCTCTGAGACACACCCCAACATGCCTGCACCTGCAGCGCGC ACACGCACGCACACACACATACAGAGCTCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAGCAGG AGGGGGGCTGGGTAAGAGCACAGGTTAGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCCCATTC TGACCCAGGGCCTAGGACGGATAGGCAGGAACATACAGACACATTTACACTAGAG GCCAGGGATAGAGGATATTGGGTCTCAGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAGCTCAA GGGACCCTGGGTGGGAGCATAGGAGGGGTCTGGACATGTGGTTACTAGTACAGG TTTTGCCCTGATTAAAAAATCTCCCAAAGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGGTGGAG GCTTCTGATACGTGTATGAGACTATGCAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCTTCGTGT ATAGCTGTGTGAACGTGTATGTACCTAGGATATGTTAAATGTATAGCTGGCACCTT AGTTGCATGACCACATA GGAAACAGCGGGCTGGGGCAGCCACTGCTTACACTGAAGAGGGAGGACGGGAG AGGAGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTATGTATGTGTGTGCTTTATCTT ATTTTTCTTTTTGGTGGTGGTGGTGGAAGGGGGGAGGTGCTAGCAGGGCCAGCC TTGAACTCGCTGGACAGAGCTACAGACCTATGGGGCCTGGAAGTGCCCGCTGAG AAAGGGAGAAGACAGCAGAGGGGTTGCCGAGAGAAAGGCCTATTGGAGGAACCT GAGCAGGAGGGGTAAGGATTCTGCCTTGAGGAGAAAAGAGCTGGGGTAAGTGGG CACTGGAGGAAAGAGGGGCATGAAGGTCTTGGAGCAGAAACGTCCAGAGAAGGG ACCTCTCCATTTTCCATCCCTCTGAGAGGCCTGGGAGAGGCAACCTCCAAGTCCC AGATCATGTCTCTGTGGGGTCTGGTCTCCAAGATGCCCCCAGAAAAAGTGCAGCG GCTCTATGTCGACTTTCCCCAACACCTGCGGCATCTTCTGGGTGACTGGCTGGAG AGCCAGCCCTGGGAGTTCCTGGTCGGCTCCGACGCCTTCTGCTGCAACTTGGCT AGTGCCCTACTTTCAGACACTGTCCAGCACCTTCAGGCCTCGGTGGGAGAGCAG GGGGAGGGGAGCACCATCTTGCAACACATCAGCACCCTTGAGAGCATATATCAGA GGGACCCCCTGAAGCTGGTGGCCACTTTCAGACAAATACTTCAAGGAGAGAAAAA AGCTGTTATGGAACAGTTCCGCCACTTGCCAATGCCTTTCCACTGGAAGCAGGAA GAACTCAAGTTTAAGACAGGCTTGCGGAGGCTGCAGCACCGAGTAGGGGAGATC CACCTTCTCCGAGAAGCCCTGCAGAAGGGGGCTGAGGCTGGCCAAGTGTCTCTG CACAGCTTGATAGAAACTCCTGCTAATGGGACTGGGCCAAGTGAGGCCCTGGCC ATGCTACTGCAGGAGACCACTGGAGAGCTAGAGGCAGCCAAAGCCCTAGTGCTG AAGAGGATCCAGATTTGGAAACGGCAGCAGCAGCTGGCAGGGAATGGCGCACCG TTTGAGGAGAGCCTGGCCCCACTCCAGGAGAGGTGTGAAAGCCTGGTGGACATT TATTCCCAGCTACAGCAGGAGGTAGGGGCGGCTGGTGGGGAGCTTGAGCCCAAG ACCCGGGCATCGCTGACTGGCCGGCTGGATGAAGTCCTGAGAACCCTCGTCACC AGTTGCTTCCTGGTGGAGAAGCAGCCCCCCCAGGTACTGAAGACTCAGACCAAG TTCCAGGCTGGAGTTCGATTCCTGTTGGGCTTGAGGTTCCTGGGGGCCCCAGCC AAGCCTCCGCTGGTCAGGGCCGACATGGTGACAGAGAAGCAGGCGCGGGAGCT GAGTGTGCCTCAGGGTCCTGGGGCTGGAGCAGAAAGCACTGGAGAAATCATCAA CAACACTGTGCCCTTGGAGAACAGCATTCCTGGGAACTGCTGCTCTGCCCTGTTC AAGAACCTGCTTCTCAAGAAGATCAAGCGGTGTGAGCGGAAGGGCACTGAGTCT GTCACAGAGGAGAAGTGCGCTGTGCTCTTCTCTGCCAGCTTCACACTTGGCCCCG GCAAACTCCCCATCCAGCTCCAGGCCCTGTCTCTGCCCCTGGTGGTCATCGTCCA TGGCAACCAAGACAACAATGCCAAAGCCACTATCCTGTGGGACAATGCCTTCTCT GAGATGGACCGCGTGCCCTTTGTGGTGGCTGAGCGGGTGCCCTGGGAGAAGAT GTGTGAAACTCTGAACCTGAAGTTCATGGCTGAGGTGGGGACCAACCGGGGGCT GCTCCCAGAGCACTTCCTCTTCCTGGCCCAGAAGATCTTCAATGACAACAGCCTC AGTATGGAGGCCTTCCAGCACCGTTCTGTGTCCTGGTCGCAGTTCAACAAGGAGA TCCTGC TGGGCCGTGGCTTCACCTTTTGGCAGTGGTTTGATGGTGTCCTGGACCT CACCAAACGCTGTCTCCGGAGCTACTGGTCTGACCGGCTGATCATTGGCTTCATC AGCAAACAGTACGTTACTAGCCTTCTTCTCAATGAGCCCGACGGAACCTTTCTCCT CCGCTTCAGCGACTCAGAGATTGGGGGCATCACCATTGCCCATGTCATCCGGGG CCAGGATGGCTCTCCACAGATAGAGAACATCCAGCCATTCTCTGCCAAAGACCTG TCCATTCGCTCACTGGGGGACCGAATCCGGGATCTTGCTCAGCTCAAAAATCTCT ATCCCAAGAAGCCCAAGGATGAGGCTTTCCGGAGCCACTACAAGCCTGAACAGAT GGGTAAGGATGGCAGGGGTTATGTCCCAGCTACCATCAAGATGACCGTGGAAAG GGACCAACCACTTCCTACCCCAGAGCTCCAGATGCCTACCATGGTGCCTTCTTAT GACCTTGGAATGGCCCCTGATTCCTCCATGAGCATGCAGCTTGGCCCAGATATGG TGCCCCAGGTGTACCCACCACACTCTCACTCCATCCCCCCGTATCAAGGCCTCTC CCCAGAAGAATCAGTCAACGTGTTGTCAGCCTTCCAGGAGCCTCACCTGCAGATG CCCCCCAGCCTGGGCCAGATGAGCCTGCCCTTTGACCAGCCTCACCCCCAGGGC CTGCTGCCGTGCCAGCCTCAGGAGCATGCTGTGTCCAGCCCTGACCCCCTGCTC TGCTCAGATGTGACCATGGTGGAAGACAGCTGCCTGAGCCAGCCAGTGACAGCG TTTCCTCAGGGCACTTGGATTGGTGAAGACATATTCCCTCCTCTGCTGCCTCCCA CTGAACAGGACCTCACTAAGCTTCTCCTGGAGGGGCAAGGGGAGTCGGGGGGA GGGTCCTTGGGGGCACAGCCCCTCCTGCAGCCCTCCCACTATGGGCAATCTGGG ATCTCAATGTCCCACATGGACCTAAGGGCCAACCCCAGTTGGTGATCCCAGCTGG AGGGAGAACCCAAAGAGACAGCTCTTCTACTACCCCCACAGACCTGCTCTGGACA CTTGCTCATGCCCTGCCAAGCAGCAGATGGGGAGGGTGCCCTCCTATCCCCACC TACTCCTGGGTCAGGAGGAAAAGACTAACAGGAGAATGCACAGTGGGTGGAGCC AATCCACTCCTTCCTTTCTATCATTCCCCTGCCCACCTCCTTCCAGCACTGACTGG AAGGGAAGTTCAGGCTCTGAGACACACCCCAACATGCCTGCACCTGCAGCGCGC ACACGCACGCACACACACATACAGAGCTCTCTGAGGGTGATGGGGCTGAGCAGG AGGGGGGCTGGGTAAGAGCACAGGTTAGGGCATGGAAGGCTTCTCCGCCCATTC TGACCCAGGGCCTAGGACGGATAGGCAGGAACATACAGACACATTTACACTAGAG GCCAGGGATAGAGGATATTGGGTCTCAGCCCTAGGGGAATGGGAAGCAGCTCAA GGGACCCTGGGTGGGAGCATAGGAGGGGTCTGGACATGTGGTTACTAGTACAGG TTTTGCCCTGATTAAAAAATCTCCCAAAGCCCCAAATTCCTGTTAGCCAGGTGGAG GCTTCTGATACGTGTATGAGACTATGCAAAAGTACAAGGGCTGAGATTCTTCGTGT ATAGCTGTGTGAACGTGTATGTACCTAGGATATGTTAAATGTATAGCTGGCACCTT AGTTGCATGACCACATA
SEQ ID NO: 20: SEQ ID NO: 20:
MSLWGLVSKMPPEKVQRLYVDFPQHLRHLLGDWLESQPWEFLVGSDAFCCNLASAL LSDTVQHLQASVGEQGEGSTILQHISTLESIYQRDPLKLVATFRQILQGEKKAVMEQFR HLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIETPANGT GPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQERCESL VDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVLKTQTKF QAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEIINNTVPL ENSIPGNCCSALFKNLLLKKIKRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPIQLQAL SLPLWIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLKFMAEV GTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFWQWFDG VLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAHVIRGQD GSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQMGKDGR GYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMVPQVYPP HSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLPCQPQE HAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTKLLLEG QGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW Un quinto aspecto de la invención se refiere al uso del kit o dispositivo de la invención para detectar el reordenamiento génico de los genesSL 76 y/o NAB2 en una muestra biológica. MSLWGLVSKMPPEKVQRLYVDFPQHLRHLLGDWLESQPWEFLVGSDAFCCNLASAL LSDTVQHLQASVGEQGEGSTILQHISTLESIYQRDPLKLVATFRQILQGEKKAVMEQFR HLPMPFHWKQEELKFKTGLRRLQHRVGEIHLLREALQKGAEAGQVSLHSLIETPANGT GPSEALAMLLQETTGELEAAKALVLKRIQIWKRQQQLAGNGAPFEESLAPLQERCESL VDIYSQLQQEVGAAGGELEPKTRASLTGRLDEVLRTLVTSCFLVEKQPPQVLKTQTKF QAGVRFLLGLRFLGAPAKPPLVRADMVTEKQARELSVPQGPGAGAESTGEIINNTVPL ENSIPGNCCSALFKNLLLKKIKRCERKGTESVTEEKCAVLFSASFTLGPGKLPIQLQAL SLPLWIVHGNQDNNAKATILWDNAFSEMDRVPFVVAERVPWEKMCETLNLKFMAEV GTNRGLLPEHFLFLAQKIFNDNSLSMEAFQHRSVSWSQFNKEILLGRGFTFWQWFDG VLDLTKRCLRSYWSDRLIIGFISKQYVTSLLLNEPDGTFLLRFSDSEIGGITIAHVIRGQD GSPQIENIQPFSAKDLSIRSLGDRIRDLAQLKNLYPKKPKDEAFRSHYKPEQMGKDGR GYVPATIKMTVERDQPLPTPELQMPTMVPSYDLGMAPDSSMSMQLGPDMVPQVYPP HSHSIPPYQGLSPEESVNVLSAFQEPHLQMPPSLGQMSLPFDQPHPQGLLPCQPQE HAVSSPDPLLCSDVTMVEDSCLSQPVTAFPQGTWIGEDIFPPLLPPTEQDLTKLLLEG QGESGGGSLGAQPLLQPSHYGQSGISMSHMDLRANPSW A fifth aspect of the invention relates to the use of the kit or device of the invention to detect the gene rearrangement of the SL 76 and / or NAB2 genes in a biological sample.
Un sexto aspecto de la invención se refiere al uso del kit o dispositivo de la invención para el diagnóstico del cáncer. A sixth aspect of the invention relates to the use of the kit or device of the invention for the diagnosis of cancer.
En una realización preferida de este aspecto de la invención, el cáncer es un tumor de partes blandas, y más preferiblemente Tumor Fibroso Solitario (TFS) y el Hemangiopericitoma (HPC). In a preferred embodiment of this aspect of the invention, the cancer is a soft tissue tumor, and more preferably Solitary Fibrous Tumor (TFS) and Hemangiopericytoma (HPC).
Otro aspecto de la invención se refiere a unprograma de ordenador que comprende instrucciones de programa para hacer que un ordenador lleve a la práctica el procedimiento de acuerdo con cualquiera de los métodos de la invención. Another aspect of the invention relates to a computer program comprising program instructions to make a computer carry out the process according to any of the methods of the invention.
En particular, la invención abarca programas de ordenador dispuestos sobre o dentro de una portadora. La portadora puede ser cualquier entidad o dispositivo capaz de soportar el programa. Cuando el programa va incorporado en una señal que puede ser transportada directamente por un cable u otro dispositivo o medio, la portadora puede estar constituida por dicho cable u otro dispositivo o medio. Como variante, la portadora podría ser un circuito integrado en el que va incluido el programa, estando el circuito integrado adaptado para ejecutar, o para ser utilizado en la ejecución de, los procesos correspondientes. Por ejemplo, los programas podrían estar incorporados en un medio de almacenamiento, como una memoria ROM, una memoria CD ROM o una memoria ROM de semiconductor, una memoria USB, o un soporte de grabación magnética, por ejemplo, un disco flexible o un disco duro. Alternativamente, los programas podrían estar soportados en una señal portadora transmisible. Por ejemplo, podría tratarse de una señal eléctrica u óptica que podría transportarse a través de cable eléctrico u óptico, por radio o por cualesquiera otros medios. In particular, the invention encompasses computer programs arranged on or within a carrier. The carrier can be any entity or device capable of supporting the program. When the program is incorporated into a signal that can be directly transported by a cable or other device or medium, the carrier may be constituted by said cable or other device or means. As a variant, the carrier could be an integrated circuit in which the program is included, the integrated circuit being adapted to execute, or to be used in the execution of, the corresponding processes. For example, the programs could be incorporated into a storage medium, such as a ROM, a CD ROM or a semiconductor ROM, a USB memory, or a magnetic recording medium, for example, a floppy disk or a disk Lasted. Alternatively, the programs could be supported on a transmissible carrier signal. For example, it could be an electrical or optical signal that could be transported through an electrical or optical cable, by radio or by any other means.
La invención se extiende también a programas de ordenador adaptados para que cualquier medio de procesamiento pueda llevar a la práctica los métodos de la invención. Tales programas pueden tener la forma de código fuente, código objeto, una fuente intermedia de código y código objeto, por ejemplo, como en forma parcialmente compilada, o en cualquier otra forma adecuada para uso en la puesta en práctica de los procesos según la invención. Los programas de ordenador también abarcan aplicaciones en la nube basadas en dicho procedimiento. The invention also extends to computer programs adapted so that any processing means can implement the methods of the invention. Such programs may have the form of source code, object code, an intermediate source of code and object code, for example, as in partially compiled form, or in any other form suitable for use in commissioning. practice of the processes according to the invention. Computer programs also cover cloud applications based on that procedure.
Por tanto, otro aspecto de la invención se refiere a un medio de almacenamiento legible por un ordenador que comprende instrucciones de programa capaces de hacer que un ordenador lleve a cabo los pasos de cualquiera de los métodos de la invención. Therefore, another aspect of the invention relates to a computer-readable storage medium comprising program instructions capable of having a computer perform the steps of any of the methods of the invention.
Otro aspecto de la invención se refiere a una señal transmisible que comprende instrucciones de programa capaces de hacer que un ordenador lleve a cabo los pasos de cualquiera de los métodos de la invención. Another aspect of the invention relates to a transmissible signal comprising program instructions capable of having a computer perform the steps of any of the methods of the invention.
Una secuencia de ácido nucleico o polinucleótido puede comprender las cinco bases que aparecen biológicamente (adenina, guanina, timina, citosina y uracilo) y/o bases distintas de las cinco que aparecen biológicamente. Estas bases pueden servir para distintos propósitos, por ejemplo, para estabilizar o desestabilizar la hibridación; para estimular o inhibir la degradación de la sonda; o como puntos de unión para restos detectables o restos de apantallamiento. Por ejemplo, un polinucleótido de la invención puede contener uno o más restos de base modificados, no estándar, derivatizados, incluyendo, pero sin limitarse a, N6-metil-adenina, N6-terc-butil-bencil-adenina, imidazol, imidazoles sustituidos, 5-fluorouracilo, 5-bromouracilo, 5-clorouracilo, 5- yodouracilo, hipoxantina, xantina, 4-acetilcitosina, 5-(carboxihidroximetil) uracilo, 5- carboximetilaminometil-2-tiouridina, 5-carboximetilaminometiluracilo, dihidrouracilo,beta-D-galactosilqueosina, inosina, N6-isopenteniladenina, 1- metilguanina, 1-metilinosina, 2,2-dimetilguanina, 2-metiladenina, 2-metilguanina, 3- metilcitosina, 5-metilcitosina, N6-metiladenina, 7-metilguanina, 5- metilaminometiluracilo, 5-metoxiaminometil-2-tiouracilo, beta-D-manosilqueosina, 5'- metoxicarboximetiluracilo, 5-metoxi uracilo, 2-metiltio-N6-isopenteniladenina, ácido uracil-5-oxiacético, wybutoxosina, pesudouracilo, queosina, 2-tiocitosina, 5-metil-2- tiouracilo, 2-tiouracilo, 2-tiouracilo, 4-tiouracilo, 5-metiluracilo (es decir, timina), éster metílico del ácido uracil-5-oxiacético, 3-(3-amino-3-N-2-carboxipropil) uracilo, (acp3)w, 2,6-diaminopurina, y 5-propinil pirimidina. Otros ejemplos de restos de bases modificados, no estándar, o derivatizados pueden encontrarse en las Patentes de EEUU Nos. 6.001.61 1 ; 5.955.589; 5.844.106; 5.789.562; 5.750.343; 5.728.525; y 5.679.785. Además, una secuencia de ácido nucleico o polinucleótido puede comprender uno o más restos de azúcares modificados incluyendo, pero sin limitarse a, arabinosa, 2-fluoroarabinosa, xilulosa, y una hexosa. Los términos "polinucleótido" y "ácido nucleico" se usan aquí de manera intercambiable, refiriéndose a formas poliméricas de nucleótidos de cualquier longitud, tanto ribonucleótidos (ARN ó RNA) como desoxirribonucleótidos (ADN ó DNA). A nucleic acid or polynucleotide sequence may comprise the five bases that appear biologically (adenine, guanine, thymine, cytosine and uracil) and / or bases other than the five that appear biologically. These bases can serve different purposes, for example, to stabilize or destabilize hybridization; to stimulate or inhibit probe degradation; or as junction points for detectable debris or screening debris. For example, a polynucleotide of the invention may contain one or more modified, non-standard, derivatized base moieties, including, but not limited to, N 6 -methyl-adenine, N 6 -terc-butyl-benzyl-adenine, imidazole, Substituted imidazoles, 5-fluorouracil, 5-bromouracil, 5-chlorouracil, 5- iodouracil, hypoxanthine, xanthine, 4-acetylcytosine, 5- (carboxyhydroxymethyl) uracil, 5- carboxymethylaminomethyl-2-thiouridine, 5-carboxymethylaminoomethyl, beta-diylocylocylmethylomethyl, beta-diyloxymethylomethyl, beta-diyloxymethylomethyl, beta-dihydroxymethyl D-galactosylkeosine, inosine, N6-isopentenyladenine, 1- methylguanine, 1-methylinosine, 2,2-dimethylguanine, 2-methylladenine, 2-methylguanine, 3- methylcytosine, 5-methylcytosine, N6-methylladenine, 7-methylguanine, 5- methylaminomethyluracil, 5-methoxyaminomethyl-2-thiouracil, beta-D-mannosylkeosine, 5'-methoxycarboxymethyluracil, 5-methoxy uracil, 2-methylthio-N6-isopentenyladenine, uracil-5-oxyacetic acid, wybutoxosine, thiocytosine , 5-methyl-2- thiouracil, 2-thiouracil, 2-thiouracil, 4-thiourac ilo, 5-methyluracil (i.e. thymine), uracil-5-oxyacetic acid methyl ester, 3- (3-amino-3-N-2-carboxypropyl) uracil, (acp3) w, 2,6-diaminopurine, and 5-propynyl pyrimidine. Other examples of modified, non-standard, or derivatized base moieties can be found in US Pat. Nos. 6,001.61 1; 5,955,589; 5,844,106; 5,789,562; 5,750,343; 5,728,525; and 5,679,785. In addition, a nucleic acid or polynucleotide sequence may comprise one or more modified sugar moieties including, but not limited to, arabinose, 2-fluoroarabinous, xylulose, and a hexose. The terms "polynucleotide" and "nucleic acid" are used interchangeably herein, referring to polymeric forms of nucleotides of any length, both ribonucleotides (RNA or RNA) and deoxyribonucleotides (DNA or DNA).
Los términos "secuencia aminoacídica", "péptido", "oligopéptido", "polipéptido" y "proteína" se usan aquí de manera intercambiable, y se refieren a una forma polimérica de aminoácidos de cualquier longitud, que pueden ser codificantes o no codificantes, química o bioquímicamente modificados. The terms "amino acid sequence", "peptide", "oligopeptide", "polypeptide" and "protein" are used interchangeably herein, and refer to a polymeric form of amino acids of any length, which may be coding or non-coding, Chemically or biochemically modified.
El término "identidad", tal y como se utiliza en esta memoria, hace referencia a la proporción de nucleótidos o aminoácidos idénticos entre dos secuencias nucleotídicas o aminoacídicas que se comparan. Los métodos de comparación de secuencias son conocidos en el estado de la técnica, e incluyen, aunque sin limitarse a ellos, el programa GAG, incluyendo GAP (Devereuxef al., Nucleic Acids Research 12: 287 (1984) Genetics Computer Group University of Wisconsin, Madison, (Wl); BLAST, BLASTP o BLASTN, y FASTA (Altschul et al., 1999. J. Mol. Biol. 215: 403-41). A lo largo de la descripción y las reivindicaciones la palabra "comprende" y sus variantes no pretenden excluir otras características técnicas, aditivos, componentes o pasos. Para los expertos en la materia, otros objetos, ventajas y características de la invención se desprenderán en parte de la descripción y en parte de la práctica de la invención. Los siguientes ejemplos y dibujos se proporcionan a modo de ilustración, y no se pretende que sean limitativos de la presente invención. The term "identity", as used herein, refers to the proportion of identical nucleotides or amino acids between two nucleotide or amino acid sequences that are compared. Sequence comparison methods are known in the state of the art, and include, but are not limited to, the GAG program, including GAP (Devereuxef al., Nucleic Acids Research 12: 287 (1984) Genetics Computer Group University of Wisconsin , Madison, (Wl); BLAST, BLASTP or BLASTN, and FASTA (Altschul et al., 1999. J. Mol. Biol. 215: 403-41) Throughout the description and the claims the word "comprises" and its variants are not intended to exclude other technical characteristics, additives, components or steps.For those skilled in the art, other objects, advantages and features of the invention will be derived partly from the description and partly from the practice of the invention. The following examples and drawings are provided by way of illustration, and are not intended to be limiting of the present invention.
EJEMPLO DE LA INVENCIÓN 1. Materiales y Métodos EXAMPLE OF THE INVENTION 1. Materials and Methods
1.1. Población y criterios de inclusión Se han incluido en el estudio 53 pacientes del Hospital Universitario Virgen del Rocío con diagnóstico histológico de TFS (34 de 53) y HPC (19 de 53) de distintas localizaciones desde el año 2008 hasta el año 2014. 1.1. Population and inclusion criteria 53 patients from the Virgen del Rocío University Hospital with histological diagnosis of TFS (34 of 53) and HPC (19 of 53) from different locations from 2008 to 2014 have been included in the study.
1.2. Variables del estudio. El reordenamiento de los genes NAB2 y SL 76 junto con la expresión proteica de la proteína STAT6 se han considerado como variables dependientes para el estudio observacional. 1.2. Variables of the study. The rearrangement of the NAB2 and SL 76 genes together with the protein expression of the STAT6 protein have been considered as dependent variables for the observational study.
Las variables independientes en este caso han sido la edad, el género, el tiempo de evolución de la enfermedad, las variantes histológicas del tumor (Típico, Maligno y Desdiferenciado para los TFS). The independent variables in this case have been age, gender, the time of evolution of the disease, the histological variants of the tumor (Typical, Malignant and Dedifferentiated for TFs).
1.3. Procedimientos y plan de trabajo 1.3. Procedures and work plan
1.3. 1. Revisión y selección de las muestras tumorales 1.3. 1. Review and selection of tumor samples
Las piezas quirúrgicas y/u otras biopsias presentes como bloques de tejido o tejido congelado se encuentran en los archivos del Servicio de Anatomía Patológica para su estudio histológico convencional con fines diagnósticos. Ha sido necesaria una revisión histológica de cada tumor, debido a que la población de estudio está compuesta por una serie de casos principalmente retrospectivos. Esto ha sido necesario para poder homogeneizar y actualizar todos los diagnósticos previamente emitidos a través de dos observadores siguiendo las recomendaciones de clasificación de la O.M.S. año 2013. Los TFS se han denominado según el subtipo histológico predominante. A parte confirmar el diagnóstico previamente emitido, se ha procedido a seleccionar las áreas específicas de cada subtipo para su posterior análisis molecular. Se han marcado tres áreas representativas para cada muestra sobre el mismo cristal de H&E: dos para la construcción de arrays de tejido y una para la posible extracción de ácidos nucleicos. The surgical pieces and / or other biopsies present as blocks of tissue or frozen tissue are found in the archives of the Pathology Department for conventional histological study for diagnostic purposes. A histological review of each tumor has been necessary, because the study population is composed of a series of mainly retrospective cases. This has been necessary in order to homogenize and update all previously issued diagnoses through two observers following the recommendations of the O.M.S. 2013. The TFs have been named according to the predominant histological subtype. Apart from confirming the previously issued diagnosis, the specific areas of each subtype have been selected for subsequent molecular analysis. Three representative areas for each sample have been marked on the same H&E crystal: two for the construction of tissue arrays and one for the possible extraction of nucleic acids.
1.3.2. Estudio Inmunohistoquímico 1.3.2. Immunohistochemical Study
El estudio de expresión de las proteínas STAT6, CD34, BCL2 se ha realizado en cortes parafinados de 3 μηι de espesor mediante técnicas de inmunohistoquímica de forma automatizada utilizando la plataforma OMNIS® y el kit de detección EnVysion- FLEX® (DAKO) basado en la conjugación de un anticuerpo secundario con la peroxidasa y tinción cromogénica con Diaminobencidina. Dos patólogos han valorado la presencia o ausencia de tinción nuclear, citoplasmática o de membrana en las células tumorales de cada anticuerpo, comparándolas con las del tejido sano adyacente usado como control interno de la técnica. The expression study of STAT6, CD34, BCL2 proteins has been performed in paraffin sections of 3 μηι thickness using automated immunohistochemical techniques using the OMNIS ® platform and the EnVysion-FLEX ® detection kit (DAKO) based on the conjugation of a secondary antibody with peroxidase and chromogenic staining with Diaminobenzidine. Two pathologists have assessed the presence or absence of nuclear, cytoplasmic or membrane staining in the tumor cells of each antibody, comparing them with those of adjacent healthy tissue used as internal control of the technique.
1.3.3. Hibridación In Situ La caracterización molecular del reordenamiento del gen NAB2 con el gen STAT6 se ha realizado mediante micro matrices de tejido (en inglés, TMAs) construidos con un tissue microarrayer (Beecham). La técnica consiste en tomar un pequeño cilindro de cada bloque de parafina (bloque donante) e insertarlo de forma precisa en un bloque receptor, siempre de parafina. Se han utilizado cilindros de 1 mm de grosor y se han seleccionados las dos zonas más representativas del tumor en los cortes de hematoxilina-eosina para poder confirmar por duplicado los resultados obtenidos. De cada tumor se han realizado cortes de 3 mieras para la tinción con hematoxilina-eosina y posterior estudio de Hibridación In Situ con Fluorescencia (FISH). Se ha llevado a cabo una recuperación antigénica, paso obligatorio para todas las muestras parafinadas, una digestión enzimática de las proteínas de membrana y nucleares como las histonas para permitir la correcta hibridación de las sondas fluorescente con la secuencia génica diana que se quiere estudiar, una hibridación mediada por calor durante toda la noche y una serie de lavados específicos para inactivar las sondas en exceso y eliminar posibles ruidos de fondo. Se han diseñado dos sondas por separado, una sonda específica para cubrir enteramente el gen NAB2 (nombre asignado STAT6_3p_BA117_kb) y una sonda específica para cubrir enteramente el gen STAT6 (nombre asignado STAT6_5p_BA167_kb) por lo que la sonda se compone de dos colores, una señal verde y una señal roja que marcan los extremos de los dos genes involucrados (Ver Figuras 1 , 2 y 3). 1.3.3. In Situ Hybridization The molecular characterization of the rearrangement of the NAB2 gene with the STAT6 gene has been performed using tissue microarrays (in English, TMAs) constructed with a tissue microarrayer (Beecham). The technique is to take a small cylinder from each paraffin block (donor block) and insert it precisely into a receiving block, always paraffin. 1 mm thick cylinders have been used and the two most representative areas of the tumor in the hematoxylin-eosin sections have been selected to be able to double confirm the results obtained. For each tumor, 3-micron sections were made for hematoxylin-eosin staining and subsequent study of In Situ Hybridization with Fluorescence (FISH). An antigenic recovery has been carried out, an obligatory step for all paraffin samples, an enzymatic digestion of membrane and nuclear proteins such as histones to allow the correct hybridization of fluorescent probes with the target gene sequence to be studied, a overnight heat-mediated hybridization and a series of specific washes to inactivate the probes in excess and eliminate possible background noises. Two separate probes have been designed, a specific probe to completely cover the NAB2 gene (assigned name STAT6_3p_BA117_kb) and a specific probe to completely cover the STAT6 gene (assigned name STAT6_5p_BA167_kb) so the probe is composed of two colors, a signal green and a red signal that mark the ends of the two genes involved (See Figures 1, 2 and 3).
En ausencia de traslocación las dos señales aparecerán juntas, en presencia de alteración separadas. In the absence of translocation the two signals will appear together, in the presence of separate alteration.
1.3.4. Análisis estadístico 1.3.4. Statistic analysis
El análisis se ha realizado a través del programa informático SPSS 18.0 para Windows para poder realizar los análisis de correlación entre alteraciones moleculares, inmunohistoquímica y diagnóstico histológico. Para la descripción de las variables cualitativas y cuantitativas se han utilizado la estadística descriptiva, calculando frecuencias, porcentajes, medias (en distribuciones simétricas) o mediana (en distribuciones asimétricas). Dependiendo de las distintas variables y parámetros se han estudiado se podrán realizar pruebas paramétricas, no paramétricas, el test del Chi cuadrado etc. The analysis was carried out through the SPSS 18.0 software for Windows in order to perform correlation analyzes between molecular alterations, immunohistochemistry and histological diagnosis. For the description of qualitative and quantitative variables, descriptive statistics have been used, calculating frequencies, percentages, means (in symmetric distributions) or median (in asymmetric distributions). Depending on the different variables and parameters that have been studied, parametric, non-parametric tests, the Chi-square test, etc. may be performed.
2. Resultados Se han incluido en el estudio 53 pacientes, el 64% de ellos con diagnóstico histológico de TFS (34 de 53) y el restante 36% HPC (19 de 53). La IHQ para la expresión de la proteína STAT6 ha sido valorable en el 100% de los casos, mientras el 4% de ellos la FISH ha resultado ser no valorable (2 de 53). 2. Results 53 patients were included in the study, 64% of them with histological diagnosis of TFS (34 of 53) and the remaining 36% HPC (19 of 53). The IHQ for the expression of the STAT6 protein has been valuable in 100% of the cases, while 4% of them the FISH has proved to be non-valuable (2 of 53).
Tabla 1. Resumen general de la IHQ y de la FISH para el estudio de STAT6 correlación con el diagnóstico clínico-patológico. Table 1. General summary of the IHQ and FISH for the study of STAT6 correlation with the clinical-pathological diagnosis.
Figure imgf000051_0001
Figure imgf000051_0001
IHQ IHQ
El estudio inmunohistoquímico ha sido valorable en todos los casos. Hemos detectado sobre-expresión de la proteína STAT6 a nuclear en el 58,5% de los casos, siendo el 13,2% tumores con diagnóstico histológico de Hemangiopericitoma (7 de 31 casos positivos) y el restante 45,3% (24 de 31 casos) con morfología de Tumor Fibroso Solitario (TFS). The immunohistochemical study has been valuable in all cases. We have detected over-expression of the STAT6 protein at nuclear in 58.5% of the cases, 13.2% being tumors with histological diagnosis of Hemangiopericytoma (7 of 31 positive cases) and the remaining 45.3% (24 of 31 cases) with Morphology of Solitary Fibrous Tumor (TFS).
En el caso de los HPC, hasta un 63,2% de casos (12 de 19 tumores) ha resultado negativo para la tinción nuclear, resultando ser por lo tanto una herramienta de escasa utilidad para discriminar entre este tipo de patología y otras de morfología parecida. In the case of HPCs, up to 63.2% of cases (12 of 19 tumors) have been negative for nuclear staining, thus proving to be a tool of little use to discriminate between this type of pathology and others of morphology similar.
Para el otro subtipo morfológico sin embargo hemos obtenido un porcentaje claramente más elevado de casos positivos (70,6%) frente a los tumores que no presentaban expresión proteica nuclear. Los resultados que hemos obtenido para los TFS concuerdan bastante con los descritos en la literatura, donde, en función de la casuística analizada, estos valores oscilan entre un 75-90% de casos. Como se puede observar en la tabla número 3 y en la figura n° 4, existe una asociación entre el subtipo histológico TFS y la expresión proteica nuclear de la proteína STAT6; este hallazgo se correlaciona con la alteración molecular descrita principalmente en estos tumores, sobre todo los que se localizan en partes blandas, comparados con los HPC que suelen ser neoplasias del SNC, como es el caso de nuestra casuística. For the other morphological subtype, however, we have obtained a clearly higher percentage of positive cases (70.6%) compared to tumors that did not have nuclear protein expression. The results we have obtained for the TFs are quite consistent with those described in the literature, where, depending on the casuistry analyzed, these values range between 75-90% of cases. As can be seen in table number 3 and in figure 4, there is an association between the histological subtype TFS and the nuclear protein expression of the STAT6 protein; This finding correlates with the molecular alteration described mainly in these tumors, especially those that are located in soft parts, compared with the HPCs that are usually CNS neoplasms, as is the case in our case study.
Tabla 2. Resumen de los porcentajes de casos positivos y negativos para la expresión proteica de STAT6 en función del subgrupo histológico. Table 2. Summary of the percentages of positive and negative cases for protein expression of STAT6 according to histological subgroup.
Figure imgf000052_0001
Tabla 3. Tabla de contingencia para la IHQ de STAT6 y el diagnóstico histológico.
Figure imgf000052_0001
Table 3. Contingency table for STAT6 IHQ and histological diagnosis.
Pruebas de ch -cuadrado Ch-squared tests
Valor gi Sig. Sig. exacta Sig. exacta asintótica (bilateral) (unilateral) (bilateral)  Gi value Sig next Exact next Exact asymptotic (bilateral) (unilateral) (bilateral)
Chi-cuadrado 5,717a 1 ,017 Chi-square 5,717 to 1, 017
de Pearson  from Pearson
Corrección por 4,412 1 ,036  Correction by 4,412 1,036
continuidad"  continuity"
Razón de 5,735 1 ,017  Reason of 5,735 1,017
verosimilitudes  likelihoods
Estadístico ,022 ,018 exacto de  Statistical, 022, 018 exact
Flsher N casos 53 Flsher N cases 53
válidos  valid
a. 0 casillas (,0% tienen una frecuencia esperada inferior a 5. La frecuencia esperada e 7,89. to. 0 boxes (, 0% have an expected frequency of less than 5. The expected frequency is 7.89.
FISH FISH
El estudio mediante técnica FISH ha sido valorable en el 96% de los casos, siendo dos de ellos no adecuados debido a la ausencia de hibridación de las sondas fluorescentes. Hemos detectado la presencia del reordenamiento NAB2-STAT6 en el 78,4% de los casos, siendo el 17,6% tumores con diagnóstico histológico de Hemangiopericitoma (9 de 40 casos positivos) y el restante 60,8% (31 de 40 casos) con morfología de Tumor Fibroso Solitario (TFS). The study using the FISH technique has been valued in 96% of the cases, two of them being unsuitable due to the absence of hybridization of the fluorescent probes. We have detected the presence of NAB2-STAT6 rearrangement in 78.4% of cases, with 17.6% being tumors with histological diagnosis of Hemangiopericytoma (9 of 40 positive cases) and the remaining 60.8% (31 of 40 cases ) with Solitary Fibrous Tumor Morphology (TFS).
En el caso de los HPC, un 47% de casos (8 de 17 tumores) ha resultado negativo para la alteración molecular frente a un 53% de muestras positivas. Estos valores indican la ausencia de asociación entre este tipo de reordenamiento y la variante morfológica estudiada. In the case of HPCs, 47% of cases (8 of 17 tumors) have been negative for molecular alteration versus 53% of positive samples. These values indicate the absence of association between this type of rearrangement and the morphological variant studied.
Para el otro subtipo morfológico sin embargo hemos obtenido un porcentaje claramente más elevado de casos positivos (91 ,2%) frente a los tumores que no presentaban dicho reordenamiento, demostrando que el estudio FISH posee una sensibilidad mayor que el estudio inmunohistoquímico para identificar correctamente este tipo de patología. Los resultados que hemos obtenido para los TFS concuerdan con los descritos en la literatura y que se han obtenido mediante secuenciación masiva. Como se puede observar en la tabla y en la figura n° 5, existe una clara asociación estadísticamente significativa entre el subtipo histológico TFS y la presencia del reordenamiento NAB2-STAT6 (p=0,03). Este hallazgo evidencia por un lado que no hay una correlación directa entre presencia de la alteración molecular y la sobre-expresión proteica ya que, como descrito en la introducción, no todos los reordenamientos producen proteínas funcionales; por otro lado, estos resultados evidencian que el estudio inmunohistoquímico podría dar lugar a un resultado falso negativo en un elevado número de casos. For the other morphological subtype, however, we have obtained a clearly higher percentage of positive cases (91.2%) compared to tumors that did not show such rearrangement, demonstrating that the FISH study has a greater sensitivity than the immunohistochemical study to correctly identify this type of pathology The results that we have obtained for the TFs are consistent with those described in the literature and have been obtained by mass sequencing. As can be seen in the table and in figure 5, there is a clear statistically significant association between the histological subtype TFS and the presence of the NAB2-STAT6 rearrangement (p = 0.03). This finding shows on the one hand that there is no direct correlation between the presence of molecular alteration and protein overexpression since, as described in the introduction, not all rearrangements produce functional proteins; On the other hand, these results show that the immunohistochemical study could lead to a false negative result in a large number of cases.
Tabla 4. Resumen de los porcentajes de casos positivos y negativos para el estudio mediante FISH de la detección del reordenamiento de los genes NAB2-STAT6 en función del subgrupo histológico. Tabla de contingencia Diagnóstico *FISH Table 4. Summary of the percentages of positive and negative cases for the FISH study of the detection of rearrangement of the NAB2-STAT6 genes according to the histological subgroup. Diagnostic contingency table * FISH
FISH  FISH
Total Total
Negativo Positivo Negative positive
Diagnóstico HPC Recuento % 8 9 17 del total 17,5% 17,6% 33,3% Diagnosis HPC Count% 8 9 17 of the total 17.5% 17.6% 33.3%
TFS Recuento % 3 31 34 del total 5,9% 60,8% 66,7%TFS Count% 3 31 34 of the total 5.9% 60.8% 66.7%
Total Recuento % 1 1 31 53 del total 21 ,6% 78,4% 100,0% Total Count% 1 1 31 53 of the total 21.6% 78.4% 100.0%
Tabla 5. Tabla de contingencia para FISH de NAB2-STAT6 y el diagnóstico histológico. Table 5. Contingency table for FAB of NAB2-STAT6 and histological diagnosis.
Figure imgf000054_0001
Figure imgf000054_0001
a. 0 casillas (,0% tienen una frecuencia esperada inferior a 5. La frecuencia esperada es 7,89.  to. 0 boxes (, 0% have an expected frequency of less than 5. The expected frequency is 7.89.
Se adjuntan a continuación algunas imágenes que representan distintos casos positivos del reordenamiento entre los genes NAB2-STAT6. Como descrito en M&M, lo esperado es que en presencia de la alteración cromosómica podamos observar 3 señales rojas, dos de ellas adyacentes y separadas por una distancia variable en función de los exones involucrados en el reordenamiento (la otra señal roja es la del alelo normal). Attached below are some images that represent different positive cases of rearrangement between the NAB2-STAT6 genes. As described in M&M, it is expected that in the presence of the chromosomal alteration we can observe 3 red signals, two of them adjacent and separated by a variable distance in function of the exons involved in the rearrangement (the other red signal is that of the normal allele).
En azul (tinción DAPI) se evidencia los márgenes nucleares. Las tres imágenes de la figuras 6 y 7 representan el estudio por separado de la sonda verde y roja y luego la imagen superpuesta donde se observa la ausencia del reordenamiento para uno de los dos alelos génicos (normal) y el otro que ha sufrido la alteración. Blue (DAPI staining) shows nuclear margins. The three images of figures 6 and 7 represent the study separately of the green and red probe and then the superimposed image where the absence of rearrangement is observed for one of the two (normal) gene alleles and the other that has undergone the alteration .
En la figura 8 se puede observar una célula tumoral normal para ambos alelos y al lado una célula tumoral que ha sufrido el reordenamiento. In figure 8 a normal tumor cell can be observed for both alleles and next to it is a tumor cell that has undergone the rearrangement.
La figuras 9 representa una variante de la alteración molecular. Figure 9 represents a variant of the molecular alteration.

Claims

REIVINDICACIONES
1.- Un método para detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 en un cromosoma de una muestra biológica que comprende: poner en contacto dicha muestra biológica con dos sondas, una primera sonda específica para la región 57374319 - 57490959 del cromosoma 12 humano, y una segunda sonda específica para la región 57501389 - 57668584 del cromosoma 12 humano, donde si se observa una única señal para cada sonda y dichas señales son adyacentes, no ha habido reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2, y donde si se observa más de una única señal para cada sonda y/o si dichas señales no son adyacentes, ha habido reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 en el cromosoma. 1. A method for detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes in a chromosome of a biological sample comprising: contacting said biological sample with two probes, a first probe specific for the region 57374319-57490959 of human chromosome 12, and a second probe specific for the region 57501389 - 57668584 of human chromosome 12, where if a single signal is observed for each probe and said signals are adjacent, there has been no rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes, and where more than A single signal for each probe and / or if these signals are not adjacent, there has been rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes on the chromosome.
2.- El método para detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 en un cromosoma de una muestra biológica según la reivindicación anterior donde la sonda específica para la región 57374319 - 57490959 del cromosoma 12 humano comprende un polinucleótido capaz de hibridar con la secuencia comprendida entre: 2. The method for detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes in a chromosome of a biological sample according to the preceding claim wherein the specific probe for the region 57374319-57490959 of the human chromosome 12 comprises a polynucleotide capable of hybridizing with the sequence comprised between:
LXIV. e nucleótido 57374319 y 57375519 de dicho cromosoma, y LXIV and nucleotide 57374319 and 57375519 of said chromosome, and
LXV. e nucleótido 57375.574 y 57380244 de dicho cromosoma, y  LXV and nucleotide 57375.574 and 57380244 of said chromosome, and
LXVI. e nucleótido 57380484 y 57381914 de dicho cromosoma, y  LXVI and nucleotide 57380484 and 57381914 of said chromosome, and
LXVII. e nucleótido 57380484 y 57381914 de dicho cromosoma, y  LXVII. and nucleotide 57380484 and 57381914 of said chromosome, and
LXVIII. e nucleótido 57382009 y 57382814 de dicho cromosoma, y  LXVIII. and nucleotide 57382009 and 57382814 of said chromosome, and
LXIX. e nucleótido 57382994 y 57383219 de dicho cromosoma, y  LXIX and nucleotide 57382994 and 57383219 of said chromosome, and
LXX. e nucleótido 57384354 y 57384509 de dicho cromosoma, y  LXX and nucleotide 57384354 and 57384509 of said chromosome, and
LXXI. e nucleótido 57384689 y 57385864 de dicho cromosoma, y  LXXI and nucleotide 57384689 and 57385864 of said chromosome, and
LXXII. e nucleótido 57386994 y 57387169 de dicho cromosoma, y  LXXII and nucleotide 57386994 and 57387169 of said chromosome, and
LXXIII. e nucleótido 57387324 y 57387589 de dicho cromosoma, y  LXXIII. and nucleotide 57387324 and 57387589 of said chromosome, and
LXXIV. e nucleótido 57387744 y 57387979 de dicho cromosoma, y  LXXIV and nucleotide 57387744 and 57387979 of said chromosome, and
LXXV. e nucleótido 57388184 y 57403154 de dicho cromosoma, y  LXXV and nucleotide 57388184 and 57403154 of said chromosome, and
LXXVI. e nucleótido 57403499 y 57405414 de dicho cromosoma, y LXXVII. el nucleótido 57405619 y 57410689 de dicho cromosoma, yLXXVI and nucleotide 57403499 and 57405414 of said chromosome, and LXXVII. nucleotide 57405619 and 57410689 of said chromosome, and
LXXVIII. el nucleótido 57411054 y 5741 404 de dicho cromosoma, yLXXVIII. nucleotide 57411054 and 5741 404 of said chromosome, and
LXXIX. el nucleótido 57411714 y 57412054 de dicho cromosoma, yLXXIX nucleotide 57411714 and 57412054 of said chromosome, and
LXXX. el nucleótido 57412589 y 57413924 de dicho cromosoma, y LXXXI. el nucleótido 57414054 y 57414359 de dicho cromosoma, yLXXX nucleotide 57412589 and 57413924 of said chromosome, and LXXXI. nucleotide 57414054 and 57414359 of said chromosome, and
LXXXII. el nucleótido 57414724 y 57414994 de dicho cromosoma, yLXXXII. nucleotide 57414724 and 57414994 of said chromosome, and
LXXXIII. el nucleótido 57415349 y 57415964 de dicho cromosoma, yLXXXIII. nucleotide 57415349 and 57415964 of said chromosome, and
LXXXIV. el nucleótido 57416694 y 57417299 de dicho cromosoma, yLXXXIV nucleotide 57416694 and 57417299 of said chromosome, and
LXXXV. el nucleótido 57417609 y 57417909 de dicho cromosoma, y LXXXVI. el nucleótido 57418119 y 57418534 de dicho cromosoma, yLXXXV. nucleotide 57417609 and 57417909 of said chromosome, and LXXXVI. nucleotide 57418119 and 57418534 of said chromosome, and
LXXXVII. el nucleótido 57418844 y 57424494 de dicho cromosoma, yLXXXVII. nucleotide 57418844 and 57424494 of said chromosome, and
LXXXVI II. el nucleótido 57424639 y 57426309 de dicho cromosoma, yLXXXVI II. nucleotide 57424639 and 57426309 of said chromosome, and
LXXXIX. el nucleótido 57426484 y 57426789 de dicho cromosoma, yLXXXIX nucleotide 57426484 and 57426789 of said chromosome, and
XC. el nucleótido 57426974 y 57427129 de dicho cromosoma, y XCI. el nucleótido 57427444 y 57427954 de dicho cromosoma, yXC nucleotide 57426974 and 57427129 of said chromosome, and XCI. nucleotide 57427444 and 57427954 of said chromosome, and
XCII. el nucleótido 57428789 y 57434124 de dicho cromosoma, yXCII. nucleotide 57428789 and 57434124 of said chromosome, and
XCIII. el nucleótido 57434179 y 57435549 de dicho cromosoma, yXCIII. nucleotide 57434179 and 57435549 of said chromosome, and
XCIV. el nucleótido 57435684 y 57435844 de dicho cromosoma, yXCIV nucleotide 57435684 and 57435844 of said chromosome, and
XCV. el nucleótido 57436724 y 57437329 de dicho cromosoma, y XCVI. el nucleótido 57437434 y 57438174 de dicho cromosoma, yXCV nucleotide 57436724 and 57437329 of said chromosome, and XCVI. nucleotide 57437434 and 57438174 of said chromosome, and
XCVII. el nucleótido 57438464 y 57443324 de dicho cromosoma, yXCVII. nucleotide 57438464 and 57443324 of said chromosome, and
XCVIII. el nucleótido 57443494 y 57444184 de dicho cromosoma, yXCVIII. nucleotide 57443494 and 57444184 of said chromosome, and
XCIX. el nucleótido 57444309 y 57444489 de dicho cromosoma, yXCIX nucleotide 57444309 and 57444489 of said chromosome, and
C. el nucleótido 57444704 y 57445179 de dicho cromosoma, y Cl. el nucleótido 57445319 y 57445909 de dicho cromosoma, yC. nucleotide 57444704 and 57445179 of said chromosome, and Cl. Nucleotide 57445319 and 57445909 of said chromosome, and
OH. el nucleótido 574462 9 y 57446444 de dicho cromosoma, yOH nucleotide 574462 9 and 57446444 of said chromosome, and
Clll. el nucleótido 57446684 y 57446834 de dicho cromosoma, yClll nucleotide 57446684 and 57446834 of said chromosome, and
CIV. el nucleótido 57447904 y 57448224 de dicho cromosoma, yCIV nucleotide 57447904 and 57448224 of said chromosome, and
CV. el nucleótido 57448809 y 57454914 de dicho cromosoma, y CVI. el nucleótido 57454954 y 57455194 de dicho cromosoma, yCV nucleotide 57448809 and 57454914 of said chromosome, and CVI. nucleotide 57454954 and 57455194 of said chromosome, and
CVII. el nucleótido 57455794 y 57455979 de dicho cromosoma, yCVII. nucleotide 57455794 and 57455979 of said chromosome, and
CVI II. el nucleótido 57456634 y 57458754 de dicho cromosoma, yCVI II. nucleotide 57456634 and 57458754 of said chromosome, and
CIX. el nucleótido 57458999 y 57459234 de dicho cromosoma, yCIX nucleotide 57458999 and 57459234 of said chromosome, and
CX. el nucleótido 57460189 y 57460534 de dicho cromosoma, y CXI. el nucleótido 57461289 y 57461584 de dicho cromosoma, y CXII. el nucleótido 57461854 y 57462134 de dicho cromosoma, y CX nucleotide 57460189 and 57460534 of said chromosome, and CXI. nucleotide 57461289 and 57461584 of said chromosome, and CXII nucleotide 57461854 and 57462134 of said chromosome, and
CXIII. el nucleótido 57462649 y 57465164 de dicho cromosoma, y  CXIII. nucleotide 57462649 and 57465164 of said chromosome, and
CXIV. el nucleótido 57465624 y 57465934 de dicho cromosoma, y  CXIV nucleotide 57465624 and 57465934 of said chromosome, and
cxv. el nucleótido 57466254 y 57466944 de dicho cromosoma, y  cxv. nucleotide 57466254 and 57466944 of said chromosome, and
CXVI. el nucleótido 57468389 y 57468589 de dicho cromosoma, y  CXVI nucleotide 57468389 and 57468589 of said chromosome, and
CXVII. el nucleótido 57471314 y 57471579 de dicho cromosoma, y  CXVII. nucleotide 57471314 and 57471579 of said chromosome, and
CXVIII. el nucleótido 57471864 y 57473184 de dicho cromosoma, y  CXVIII. nucleotide 57471864 and 57473184 of said chromosome, and
CXIX. el nucleótido 57473364 y 57473549 de dicho cromosoma, y  CXIX nucleotide 57473364 and 57473549 of said chromosome, and
cxx. el nucleótido 57474694 y 57474939 de dicho cromosoma, y  cxx nucleotide 57474694 and 57474939 of said chromosome, and
CXXI. el nucleótido 57476034 y 57476184 de dicho cromosoma, y  CXXI. nucleotide 57476034 and 57476184 of said chromosome, and
CXXII. el nucleótido 57476829 y 57477554 de dicho cromosoma, y  CXXII nucleotide 57476829 and 57477554 of said chromosome, and
CXXIII. el nucleótido 57478044 y 57478294 de dicho cromosoma, y  CXXIII. nucleotide 57478044 and 57478294 of said chromosome, and
CXXIV. el nucleótido 57478349 y 57478939 de dicho cromosoma, y  CXXIV nucleotide 57478349 and 57478939 of said chromosome, and
cxxv. el nucleótido 57479199 y 57483979 de dicho cromosoma, y  cxxv. nucleotide 57479199 and 57483979 of said chromosome, and
CXXVI. el nucleótido 57484294 y 57490959 de dicho cromosoma.  CXXVI nucleotide 57484294 and 57490959 of said chromosome.
3.- El método para detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 en un cromosoma de una muestra biológica según cualquiera de las reivindicaciones 1-2, donde la sonda específica para la región 57501389 - 57668584 del cromosoma 12 humano comprende un polinucleótido capaz de hibridar con la secuencia comprendida entre 3. The method for detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes in a chromosome of a biological sample according to any of claims 1-2, wherein the specific probe for the region 57501389-57668584 of the human chromosome 12 comprises a polynucleotide capable of hybridize with the sequence between
LXXXVI. el nucleótido 57501389 y 57502324 de dicho cromosoma, y LXXXVI nucleotide 57501389 and 57502324 of said chromosome, and
LXXXVII. el nucleótido 57502469 y 57502699 de dicho cromosoma, y  LXXXVII. nucleotide 57502469 and 57502699 of said chromosome, and
LXXXVIII. el nucleótido 57503264 y 57506394 de dicho cromosoma, y  LXXXVIII. nucleotide 57503264 and 57506394 of said chromosome, and
LXXXIX. el nucleótido 57506614 y 57507444 de dicho cromosoma, y  LXXXIX nucleotide 57506614 and 57507444 of said chromosome, and
XC. el nucleótido 57507714 y 57508259 de dicho cromosoma, y  XC nucleotide 57507714 and 57508259 of said chromosome, and
XCI. el nucleótido 57509549 y 57510249 de dicho cromosoma, y  XCI nucleotide 57509549 and 57510249 of said chromosome, and
XCII. el nucleótido 57510369 y 57510794 de dicho cromosoma, y  XCII. nucleotide 57510369 and 57510794 of said chromosome, and
XCIII. el nucleótido 5751 1389 y 5751 1714 de dicho cromosoma, y  XCIII. nucleotide 5751 1389 and 5751 1714 of said chromosome, and
XCIV. el nucleótido 5751 1849 y 57512974 de dicho cromosoma, y  XCIV nucleotide 5751 1849 and 57512974 of said chromosome, and
xcv. el nucleótido 57513009 y 57513444 de dicho cromosoma, y  xcv. nucleotide 57513009 and 57513444 of said chromosome, and
XCVI. el nucleótido 57516059 y 57516529 de dicho cromosoma, y  XCVI nucleotide 57516059 and 57516529 of said chromosome, and
XCVII. el nucleótido 57516694 y 57517089 de dicho cromosoma, y  XCVII. nucleotide 57516694 and 57517089 of said chromosome, and
XCVIII. el nucleótido 57517264 y 57517704 de dicho cromosoma, y XCIX. el nucleótido 575 7829 y 575 7999 de dicho cromosoma, yXCVIII. nucleotide 57517264 and 57517704 of said chromosome, and XCIX nucleotide 575 7829 and 575 7999 of said chromosome, and
C. el nucleótido 57518164 y 57518889 de dicho cromosoma, yC. nucleotide 57518164 and 57518889 of said chromosome, and
Cl. el nucleótido 57519204 y 57519479 de dicho cromosoma, yCl. Nucleotide 57519204 and 57519479 of said chromosome, and
CU. el nucleótido 57520089 y 57528229 de dicho cromosoma, y Clll. el nucleótido 57528979 y 57530529 de dicho cromosoma, yCU. nucleotide 57520089 and 57528229 of said chromosome, and Clll. nucleotide 57528979 and 57530529 of said chromosome, and
CIV. el nucleótido 57531044 y 57531334 de dicho cromosoma, yCIV nucleotide 57531044 and 57531334 of said chromosome, and
CV. el nucleótido 57531594 y 57533889 de dicho cromosoma, yCV nucleotide 57531594 and 57533889 of said chromosome, and
CVI. el nucleótido 57534024 y 57534509 de dicho cromosoma, yCVI nucleotide 57534024 and 57534509 of said chromosome, and
CVII. el nucleótido 57534819 y 57535484 de dicho cromosoma, y CVI II. el nucleótido 57535589 y 57537224 de dicho cromosoma, yCVII. nucleotide 57534819 and 57535484 of said chromosome, and CVI II. nucleotide 57535589 and 57537224 of said chromosome, and
CIX. el nucleótido 57537349 y 57537959 de dicho cromosoma, yCIX nucleotide 57537349 and 57537959 of said chromosome, and
CX. el nucleótido 57538079 y 57538389 de dicho cromosoma, yCX nucleotide 57538079 and 57538389 of said chromosome, and
CXI. el nucleótido 57538399 y 57543964 de dicho cromosoma, yCXI nucleotide 57538399 and 57543964 of said chromosome, and
CXII. el nucleótido 57544274 y 57544524 de dicho cromosoma, y CXI 11. el nucleótido 57544664 y 57548704 de dicho cromosoma, yCXII nucleotide 57544274 and 57544524 of said chromosome, and CXI 11. nucleotide 57544664 and 57548704 of said chromosome, and
CXIV. el nucleótido 57548899 y 57549449 de dicho cromosoma, yCXIV nucleotide 57548899 and 57549449 of said chromosome, and
CXV. el nucleótido 57549759 y 57550784 de dicho cromosoma, yCXV nucleotide 57549759 and 57550784 of said chromosome, and
CXVI. el nucleótido 57550899 y 57551064 de dicho cromosoma, yCXVI nucleotide 57550899 and 57551064 of said chromosome, and
CXVII. el nucleótido 57551739 y 57554099 de dicho cromosoma, y CXVIII. el nucleótido 57554389 y 57557 4 de dicho cromosoma, yCXVII. nucleotide 57551739 and 57554099 of said chromosome, and CXVIII. nucleotide 57554389 and 57557 4 of said chromosome, and
CXIX. el nucleótido 57557484 y 57557669 de dicho cromosoma, yCXIX nucleotide 57557484 and 57557669 of said chromosome, and
CXX. el nucleótido 57558504 y 57558734 de dicho cromosoma, yCXX nucleotide 57558504 and 57558734 of said chromosome, and
CXXI. el nucleótido 57558779 y 57560054 de dicho cromosoma, yCXXI. nucleotide 57558779 and 57560054 of said chromosome, and
CXXII. el nucleótido 57560374 y 57563289 de dicho cromosoma, y CXXIII. el nucleótido 57563534 y 57563869 de dicho cromosoma, yCXXII nucleotide 57560374 and 57563289 of said chromosome, and CXXIII. nucleotide 57563534 and 57563869 of said chromosome, and
CXXIV. el nucleótido 57563879 y 57564179 de dicho cromosoma, yCXXIV nucleotide 57563879 and 57564179 of said chromosome, and
CXXV. el nucleótido 57564624 y 57564859 de dicho cromosoma, yCXXV nucleotide 57564624 and 57564859 of said chromosome, and
CXXVI. el nucleótido 57565004 y 57565829 de dicho cromosoma, yCXXVI nucleotide 57565004 and 57565829 of said chromosome, and
CXXVII. el nucleótido 57566254 y 57566404 de dicho cromosoma, y CXXVI II. el nucleótido 57566499 y 57567929 de dicho cromosoma, yCXXVII. nucleotide 57566254 and 57566404 of said chromosome, and CXXVI II. nucleotide 57566499 and 57567929 of said chromosome, and
CXXIX. el nucleótido 575681 14 y 57568274 de dicho cromosoma, yCXXIX nucleotide 575681 14 and 57568274 of said chromosome, and
CXXX. el nucleótido 57568559 y 57570559 de dicho cromosoma, yCXXX nucleotide 57568559 and 57570559 of said chromosome, and
CXXXI. el nucleótido 57570664 y 57571719 de dicho cromosoma, yCXXXI. nucleotide 57570664 and 57571719 of said chromosome, and
CXXXII. el nucleótido 57571839 y 57576009 de dicho cromosoma, y CXXXIII. el nucleótido 57576629 y 57581314 de dicho cromosoma, y CXXXIV. el nucleótido 57581464 y 57583799 de dicho cromosoma, yCXXXII. nucleotide 57571839 and 57576009 of said chromosome, and CXXXIII. nucleotide 57576629 and 57581314 of said chromosome, and CXXXIV nucleotide 57581464 and 57583799 of said chromosome, and
CXXXV. el nucleótido 57583944 y 57584 04 de dicho cromosoma, yCXXXV nucleotide 57583944 and 57584 04 of said chromosome, and
CXXXVI. el nucleótido 57584324 y 57585444 de dicho cromosoma, yCXXXVI nucleotide 57584324 and 57585444 of said chromosome, and
CXXXVII. el nucleótido 57585849 y 57589229 de dicho cromosoma, y CXXXVIII. el nucleótido 57589359 y 57590294 de dicho cromosoma, yCXXXVII. nucleotide 57585849 and 57589229 of said chromosome, and CXXXVIII. nucleotide 57589359 and 57590294 of said chromosome, and
CXXXIX. el nucleótido 57590469 y 57591749 de dicho cromosoma, yCXXXIX nucleotide 57590469 and 57591749 of said chromosome, and
CXL. el nucleótido 57591909 y 57592759 de dicho cromosoma, yCXL nucleotide 57591909 and 57592759 of said chromosome, and
CXLI. el nucleótido 57592924 y 57600604 de dicho cromosoma, yCXLI nucleotide 57592924 and 57600604 of said chromosome, and
CXLII. el nucleótido 57601629 y 57617899 de dicho cromosoma, y CXLIII. el nucleótido 57618199 y 57618379 de dicho cromosoma, yCXLII nucleotide 57601629 and 57617899 of said chromosome, and CXLIII. nucleotide 57618199 and 57618379 of said chromosome, and
CXLIV. el nucleótido 57618499 y 57621419 de dicho cromosoma, yCXLIV nucleotide 57618499 and 57621419 of said chromosome, and
CXLV. el nucleótido 57621499 y 57621884 de dicho cromosoma, yCXLV nucleotide 57621499 and 57621884 of said chromosome, and
CXLVI. el nucleótido 57622489 y 57622954 de dicho cromosoma, yCXLVI nucleotide 57622489 and 57622954 of said chromosome, and
CXLVII. el nucleótido 57623134 y 57639154 de dicho cromosoma, y CXLVIII. el nucleótido 57639454 y 57639609 de dicho cromosoma, yCXLVII. nucleotide 57623134 and 57639154 of said chromosome, and CXLVIII. nucleotide 57639454 and 57639609 of said chromosome, and
CXLIX. el nucleótido 57639919 y 57640124 de dicho cromosoma, yCXLIX nucleotide 57639919 and 57640124 of said chromosome, and
CL. el nucleótido 57640469 y 57641209 de dicho cromosoma, yCL. nucleotide 57640469 and 57641209 of said chromosome, and
CLI. el nucleótido 57641754 y 57642154 de dicho cromosoma, yCLI. nucleotide 57641754 and 57642154 of said chromosome, and
CLII. el nucleótido 57642459 y 57643534 de dicho cromosoma, y CLIII. el nucleótido 57644199 y 57645269 de dicho cromosoma, yCLII nucleotide 57642459 and 57643534 of said chromosome, and CLIII. nucleotide 57644199 and 57645269 of said chromosome, and
CLIV. el nucleótido 57645564 y 57646529 de dicho cromosoma, yCLIV. nucleotide 57645564 and 57646529 of said chromosome, and
CLV. el nucleótido 57647334 y 57647639 de dicho cromosoma, yCLV. nucleotide 57647334 and 57647639 of said chromosome, and
CLVI. el nucleótido 57648314 y 57648634 de dicho cromosoma, yCLVI. nucleotide 57648314 and 57648634 of said chromosome, and
CLVII. el nucleótido 57648664 y 57650589 de dicho cromosoma, y CLVII I. el nucleótido 57651434 y 57652089 de dicho cromosoma, yCLVII. nucleotide 57648664 and 57650589 of said chromosome, and CLVII I. nucleotide 57651434 and 57652089 of said chromosome, and
CLIX. el nucleótido 57652419 y 57653764 de dicho cromosoma, yCLIX nucleotide 57652419 and 57653764 of said chromosome, and
CLX. el nucleótido 57654069 y 57657254 de dicho cromosoma, yCLX nucleotide 57654069 and 57657254 of said chromosome, and
CLXI. el nucleótido 57657559 y 57657789 de dicho cromosoma, yCLXI nucleotide 57657559 and 57657789 of said chromosome, and
CLXII. el nucleótido 57658714 y 57659019 de dicho cromosoma, y CLXII I. el nucleótido 57659174 y 57659404 de dicho cromosoma, yCLXII nucleotide 57658714 and 57659019 of said chromosome, and CLXII I. nucleotide 57659174 and 57659404 of said chromosome, and
CLXIV. el nucleótido 57660319 y 57661059 de dicho cromosoma, yCLXIV nucleotide 57660319 and 57661059 of said chromosome, and
CLXV. el nucleótido 57661664 y 57662784 de dicho cromosoma, yCLXV nucleotide 57661664 and 57662784 of said chromosome, and
CLXVI. el nucleótido 57662784 y 57664004 de dicho cromosoma, yCLXVI nucleotide 57662784 and 57664004 of said chromosome, and
CLXVII. el nucleótido 57664654 y 57665674 de dicho cromosoma, y CLXVI II. el nucleótido 57665859 y 57667289 de dicho cromosoma, y CLXIX. el nucleótido 57667469 y 57667989 de dicho cromosoma, y CLXVII nucleotide 57664654 and 57665674 of said chromosome, and CLXVI II. nucleotide 57665859 and 57667289 of said chromosome, and CLXIX nucleotide 57667469 and 57667989 of said chromosome, and
CLXX. el nucleótido 57668289 y 57668584 de dicho cromosoma.  CLXX nucleotide 57668289 and 57668584 of said chromosome.
4. - El método para detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 en un cromosoma de una muestra biológica según cualquiera de las reivindicaciones 1-3, donde la secuencia de los polinucleótidos descritos en las reivindicaciones 2 y 3 de la sonda específica para la región 57374319 - 57490959 del cromosoma 12 humano, y de la sonda específica para la región 57501389 - 57668584 del cromosoma 12 humano, es la secuencia complementaria a la comprendida entre las posiciones indicadas en dichas reivindicaciones. 4. - The method for detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes on a chromosome of a biological sample according to any of claims 1-3, wherein the sequence of the polynucleotides described in claims 2 and 3 of the specific probe for region 57374319 - 57490959 of the human chromosome 12, and of the probe specific for the region 57501389 - 57668584 of the human chromosome 12, is the sequence complementary to that comprised between the positions indicated in said claims.
5. - El método para detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 según cualquiera de las reivindicaciones 1-4, donde las sondas están marcadas con marcadores diferentes entre sí. 5. - The method for detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes according to any of claims 1-4, wherein the probes are labeled with different markers from each other.
6. - El método para detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 según cualquiera de las reivindicaciones 1-5, donde la detección se realiza mediante una hibridación fluorescente in situ (FISH), preferiblemente FISH directa. 6. - The method for detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes according to any of claims 1-5, wherein the detection is carried out by means of in situ fluorescent hybridization (FISH), preferably direct FISH.
7. - El método para detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 según cualquiera de las reivindicaciones 1-6, donde la muestra biológica una célula con núcleo, preferiblemente una célula neoplásica. 7. - The method for detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes according to any of claims 1-6, wherein the biological sample is a nucleus cell, preferably a neoplastic cell.
8.- El método para detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 según cualquiera de las reivindicaciones 1-7, donde se utilizan las células en inferíase de la muestra biológica. 8. The method for detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes according to any of claims 1-7, wherein the cells are used to infer the biological sample.
9. - Un método de obtención de datos útiles para el diagnóstico del cáncer, que comprende detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 en una muestra biológica de acuerdo con el método según una cualquiera de las reivindicaciones 1-8. 9. - A method of obtaining useful data for the diagnosis of cancer, which comprises detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes in a biological sample according to the method according to any one of claims 1-8.
10. - El método según la reivindicación anterior, donde el cáncer es un tumor de partes blandas. 10. - The method according to the preceding claim, wherein the cancer is a soft tissue tumor.
1 1. - El método según cualquiera de las reivindicaciones 9-10, donde el cáncer es un Tumor Fibroso Solitario (TFS). 1 1. - The method according to any of claims 9-10, wherein the cancer is a Solitary Fibrous Tumor (TFS).
12. - El método según cualquiera de las reivindicaciones 9-1 1 , donde el cáncer es un Hemangiopericitoma. 12. - The method according to any of claims 9-1 1, wherein the cancer is a Hemangiopericytoma.
13. - Un método para el diagnóstico histológico del cáncer que comprende: a) detectar el reordenamiento de los genes STAT6 y NAB2 en una muestra biológica según cualquiera de las reivindicaciones 1-8, y b) clasificar al individuo del que procede dicha muestra biológica en el grupo de individuos que presenta cáncer, cuando la detección del reordenamiento de los genes NAB2-STAT6 sea positiva. 13. - A method for the histological diagnosis of cancer comprising: a) detecting the rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes in a biological sample according to any of claims 1-8, and b) classifying the individual from whom said biological sample is derived in the group of individuals presenting with cancer, when the detection of the rearrangement of the NAB2-STAT6 genes is positive.
14. - El método para el diagnóstico histológico según la reivindicación anterior, donde el cáncer se selecciona de la lista que consiste en: un tumor de partes blandas, un14. - The method for histological diagnosis according to the preceding claim, wherein the cancer is selected from the list consisting of: a soft tissue tumor, a
Tumor Fibroso Solitario (TFS) o un Hemangiopericitoma. Solitary Fibrous Tumor (TFS) or a Hemangiopericytoma.
15. - Un kit o dispositivo que comprende las sondas y/o los polinucleótidos según se definen cualquiera de las reivindicaciones 1-8. 15. - A kit or device comprising the probes and / or polynucleotides as defined in any of claims 1-8.
16. - El kit o dispositivo según la reivindicación anterior, que además comprende todos aquellos elementos necesarios para llevar a cabo un procedimiento FISH. 16. - The kit or device according to the preceding claim, which further comprises all those elements necessary to carry out an FISH procedure.
17. - El kit o dispositivo según cualquiera de las reivindicaciones 15-16, donde las sondas según cualquiera de las reivindicaciones 1-8 están modificadas. 17. - The kit or device according to any of claims 15-16, wherein the probes according to any of claims 1-8 are modified.
18. - El kit o dispositivo según cualquiera de las reivindicaciones 15-17, donde las sondas según cualquiera de las reivindicaciones 1-8 están marcadas con moléculas fluorescentes, preferiblemente con fluoróforos. 18. - The kit or device according to any of claims 15-17, wherein the probes according to any of claims 1-8 are labeled with fluorescent molecules, preferably with fluorophores.
19. - El kit o dispositivo según cualquiera de las reivindicaciones 15-18, donde las sondas según cualquiera de las reivindicaciones 1-8 están marcadas con moléculas no fluorescentes. 19. - The kit or device according to any of claims 15-18, wherein the probes according to any of claims 1-8 are labeled with non-fluorescent molecules.
20. - El kit o dispositivo según cualquiera de las reivindicaciones 15-19, que además comprende anticuerpos o fragmentos de los mismos fluorescentes para la detección de las sondas según una cualquiera de las reivindicaciones 1-8 marcadas con moléculas no fluorescentes tal y como se indica en la reivindicación 19. 20. - The kit or device according to any of claims 15-19, further comprising antibodies or fragments thereof fluorescent for the detection of probes according to any one of claims 1-8 labeled with non-fluorescent molecules as is indicated in claim 19.
21. - Uso del kit o dispositivo tal y como se define en las reivindicaciones 15-20, para detectar el reordenamiento génico de los genes STAT6 y NAB2 en una muestra biológica. 21. - Use of the kit or device as defined in claims 15-20, to detect the gene rearrangement of the STAT6 and NAB2 genes in a biological sample.
22. - Uso del kit o dispositivo tal y como se define en las reivindicaciones 15-20 para el diagnóstico del cáncer. 22. - Use of the kit or device as defined in claims 15-20 for the diagnosis of cancer.
23. - El uso del kit o dispositivo según la reivindicación anterior, donde el cáncer es un tumor de partes blandas. 23. - The use of the kit or device according to the preceding claim, wherein the cancer is a soft tissue tumor.
24. - El uso del kit o dispositivo según cualquiera de las reivindicaciones 22-23, donde el cáncer es un Tumor Fibroso Solitario (TFS). 24. - The use of the kit or device according to any of claims 22-23, wherein the cancer is a Solitary Fibrous Tumor (TFS).
25.- El uso del kit o dispositivo según cualquiera de las reivindicaciones 22-24, donde el cáncer es un hemangiopericitoma. 25. The use of the kit or device according to any of claims 22-24, wherein the cancer is a hemangiopericytoma.
PCT/ES2016/070933 2015-12-23 2016-12-23 Diagnosis of soft tissue cancer WO2017109266A1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ES201531898 2015-12-23
ESP201531898 2015-12-23

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2017109266A1 true WO2017109266A1 (en) 2017-06-29

Family

ID=59089191

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/ES2016/070933 WO2017109266A1 (en) 2015-12-23 2016-12-23 Diagnosis of soft tissue cancer

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2017109266A1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108229100A (en) * 2018-05-22 2018-06-29 至本医疗科技（上海）有限公司 DNA resets region and corresponding RNA product detections method, equipment and storage medium

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014026010A1 (en) * 2012-08-08 2014-02-13 The Regents Of The University Of Michigan Recurrent gene fusions in hemangiopericytoma

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014026010A1 (en) * 2012-08-08 2014-02-13 The Regents Of The University Of Michigan Recurrent gene fusions in hemangiopericytoma

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DAN R. ROBINSON ET AL.: "Identification of Recurrent NAB2-STAT6 Gene Fusions in Solitary Fibrous Tumor by Integrative Sequencing..", NAT. GENET., vol. 45, no. 2, 2013, pages 180 - 185, XP055393225 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108229100A (en) * 2018-05-22 2018-06-29 至本医疗科技（上海）有限公司 DNA resets region and corresponding RNA product detections method, equipment and storage medium

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Downing et al. Prevalence and importance of internal tandem duplications in exons 11 and 12 of c-kit in mast cell tumors of dogs
JP2003518920A (en) New human genes and gene expression products
US20080187934A1 (en) Method and probes for the detection of chromosome aberrations
KR20160068754A (en) Mutant calreticulin for the diagnosis of myeloid malignancies
US20070243176A1 (en) Human genes and gene expression products
TWI518325B (en) Identification, assessment, and therapy of cancers with innate or acquired resistance to alk inhibitors
JP2006501849A (en) Molecular subclassification of renal tumors and discovery of novel diagnostic markers
CA2213237A1 (en) Multiple-tumor aberrant growth genes
WO2007123896A2 (en) Mutated acvr1 for diagnosis and treatment of fibrodyplasia ossificans progressiva (fop)
Chen et al. From amplification to gene in thyroid cancer: a high-resolution mapped bacterial-artificial-chromosome resource for cancer chromosome aberrations guides gene discovery after comparative genome hybridization
WO2002036761A9 (en) Compositions and methods for the diagnosis of cancer
KR20240005018A (en) Methods and systems for analyzing nucleic acid molecules
US9963745B2 (en) Hematological disorder diagnosis by 3D q-FISH
WO2017109266A1 (en) Diagnosis of soft tissue cancer
US9096902B2 (en) Genetic barcodes
CN105229172A (en) For evaluating the materials and methods of colorectal adenomas
Boomer et al. Detection of E2A translocations in leukemias via fluorescence in situ hybridization
Mazzei et al. Karyotypes of basal lineages in notothenioid fishes: the genus Bovichtus
US20200087734A1 (en) DDR2 Mutations in Squamous Cell Lung Cancer
Saito et al. Human AQP2 and MIP genes, two members of the MIP family, map within chromosome band 12q13 on the basis of two-color FISH
CA2554440A1 (en) Novel nucleotide and amino acid sequences, and assays and methods of use thereof for diagnosis of breast cancer
JP2003530816A (en) Human genes and gene expression products
JP2003528630A (en) Human genes and expression products
JP2005518790A (en) Method for diagnosing abnormal proliferation of lymphocytes
Ekong et al. Chromosomal anomalies on 6p25 in iris hypoplasia and Axenfeld‐Rieger syndrome patients defined on a purpose‐built genomic microarray

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 16877843

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 16877843

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1