WO2016083653A1 - Método de esterilización con co2 y agua - Google Patents

Método de esterilización con co2 y agua Download PDF

Info

Publication number
WO2016083653A1
WO2016083653A1 PCT/ES2015/070862 ES2015070862W WO2016083653A1 WO 2016083653 A1 WO2016083653 A1 WO 2016083653A1 ES 2015070862 W ES2015070862 W ES 2015070862W WO 2016083653 A1 WO2016083653 A1 WO 2016083653A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
water
sterilization
sterilization method
weight
sterilized
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/ES2015/070862
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Maria Lourdes CALVO GARRIDO
Javier Casas Huertas
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Universidad Complutense de Madrid
Ministerio de Defensa
Original Assignee
Universidad Complutense de Madrid
Ministerio de Defensa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Universidad Complutense de Madrid, Ministerio de Defensa filed Critical Universidad Complutense de Madrid
Publication of WO2016083653A1 publication Critical patent/WO2016083653A1/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N59/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing elements or inorganic compounds
    • A01N59/04—Carbon disulfide; Carbon monoxide; Carbon dioxide

Definitions

  • the present invention relates to a method of sterilizing materials that have been contaminated by microorganisms, using CO2 and water.
  • the invention has been developed in the case that the material to be sterilized is a sensitive material against extreme conditions of pressure and temperature, such as electronic and optical material, and technical clothing, although it can be used for Any type of material.
  • the present invention also relates to the equipment for sterilization developed to carry out the method of the invention.
  • the inventors have developed a sterilization method for any type of material but specially designed so that materials sensitive to extreme conditions, such as optical or electronic elements or last generation fabrics so that they are recoverable after the sterilization treatment.
  • the method is able to eliminate the most resistant microorganisms, in the presence of CO2 and water.
  • the method of the invention is capable of eliminating spores by reducing their initial number by six logarithmic units. Spores are very resistant structures that can survive high temperatures and very unfavorable conditions.
  • Known sterilization processes can eliminate viruses or bacteria but to eliminate spores extreme temperature and pressure conditions are necessary.
  • the present invention proposes the use of high pressure CO2 as a sterilizing agent, under conditions of pressure and temperature around or above the critical point (31 ° C and 74 bar), where CO2 has special properties such as a gas dense with which it can penetrate very well in solids inactivating microorganisms.
  • a first aspect of the invention relates to a method of sterilization with CO2 and water of a microorganism carrier material comprising the step of:
  • Water is added by solubilization and entrainment of H2O by CO2 or by injecting it parallel to CO2.
  • a sterilization equipment comprising:
  • FIG. 1 shows a scheme of the sterilization equipment with CÜ2 and water.
  • the first aspect of the invention is a method of sterilizing a microorganism carrier material comprising the step of: contacting the material to be sterilized with CO2 at a pressure between 50 bar and 500 bar, a temperature between 25 ° C and 70 ° C, in the presence of an amount of water, between 10% and 100% by weight with respect to the weight of the material to be sterilized for a time between 15 minutes and 60 minutes; where the addition of water is done by solubilization and entrainment by CO2 or by injecting it parallel to CO2.
  • microorganism refers to bacteria, viruses, fungi, yeasts, molds, spores or combinations thereof. These microorganisms can be pathogens. In a preferred embodiment the microorganism is a spore.
  • the microorganism to be treated may be a "biological weapon". They are understood as any pathogen, bacteria, virus, spore, or fungus, that causes diseases and therefore can be used as a weapon of war.
  • Bacillus Anthracis Francisella Tularensis, Clostridium Botulinum, Vibrio Cholera, Bricella Spp, Yersinia Pestis, Shigela Spp.
  • Preferred viruses are: the virus that causes smallpox or the causes of equine encephalitis (VEE virus and WEEV) and viral hemorrhages type Ebola (Filovirus), Lass fever, Junin, (Arenavirus) and yellow or Dengue (Flavivirus).
  • the material is preferably a state-of-the-art textile material, technical clothing, an electronic material, an optical material or a sanitary material, and in general heat-sensitive materials.
  • the material is a military equipment.
  • military equipment refers to different materials for military use such as fabrics or elastomers or self-contained breathing apparatus (ERA) or eye protection, NBQ protective clothing (Nuclear, Biological and Chemical), such as various manufacturing fabrics, shims and gloves
  • NBQ protective clothing Nuclear, Biological and Chemical
  • military equipment can also be understood as sensitive electronic or electrical devices that could be carried by a combatant such as radios, mobiles, tablets, smartphones, weapons or military campaign equipment.
  • the material to be treated is an individual protection equipment (PPE) of different groups in contact with biological agents such as health personnel, firefighters, civil protection members, as well as personnel from biotechnology, agricultural, veterinary and kitchen laboratories, or in waste disposal plants.
  • PPE individual protection equipment
  • the amount of water between 10% and 40%, between 10% and 30% by weight with respect to the weight of the material. More preferably between 20% and 30%.
  • the pressure is between 50 bar and 500 bar, between 50 bar and 150 bar or between 50 bar and 100 bar.
  • the temperature is between 30 ° C and 50 ° C, or between 30 ° C and 40 ° C.
  • the time is between 15 minutes and 45 minutes or between 15 minutes and 30 minutes.
  • the water is acidified in a pH range of 3 to 5, preferably 3 to 4.
  • acidifying the water the same results are achieved at lower temperatures.
  • Acidification is preferably carried out with an organic acid except peracetic acid.
  • Preferred organic acids are citric acid or acetic acid. In general it can be acidified with any non-toxic organic acid.
  • the temperature is between 30 ° C and 40 ° C, the time between 30 ° C and 40 ° C and the pH between 3 and 4.
  • a second aspect of the invention as stated refers to a sterilization equipment comprising:
  • the container containing the material to be sterilized has devices that favor contact between the CO2 and the material, such as jet stirrers or rotating baskets, dispersers or atomizers of CO2, a high-speed CO2 recirculation line.
  • devices that favor contact between the CO2 and the material, such as jet stirrers or rotating baskets, dispersers or atomizers of CO2, a high-speed CO2 recirculation line.
  • the CO2 supply system is in pumping mode or in compressor mode.
  • the CO2 recovery line has equipment for cleaning it and adjusting its pressure and temperature conditions for subsequent reuse.
  • the source of water supply is a pumping system that injects it with CO2, a container that contains it through which the CO2 passes and that allows its introduction dissolved or dragged by the CO2.
  • the devices for safe operation are relief valves and rupture discs both in the container where the materials are housed and in the CO2 storage containers, as well as alarms for high pressure and temperature.
  • the system for depressurizing the container is a heated valve or a pressure balancing system and a vent line.
  • FIG. 1 shows the flowchart of a specific installation for the case of operation in pumping mode and introducing water into the high-speed CO2 recirculation line.
  • the CO2 is supplied from the storage tank (1) and cooled in a changer (2), prior to pumping to prevent cavitation.
  • the liquid fraction of the CO2 stored in the tank is cooled in indirect contact with a refrigerant mixture that is at -25 ° C formed by 50% ethylene glycol-water.
  • the pump (3) brings the CO2 to the treatment pressure ( ⁇ 150 bar). As it does not get hot enough during compression, it should be heated further, up to the operating temperature in a heat exchanger (4) typically 40 ° C. Then it enters the sterilizer (5) where the decontamination sensitive material has been previously introduced.
  • CO2 is recirculated at high speed with the same pump (4), performing the circuit shown with dotted line.
  • the turbulence generated by the high-speed passage of the supercritical mixture favors contact with the material in all the recesses of the same to ensure the deactivation of the biological agent.
  • a filter (6) is installed in the recirculation line.
  • the CO2 loaded with dirt (normally suspended particles) leaves the sterilizer at the top, passing through said filter that retains this dirt.
  • the CO2 passing through this tank is moistened to return to the sterilizer.
  • the depressurization cycle begins to discharge the treated material and recover the CO2 that must be recycled to the process. So at this time, the CC water sterilizing mixture is passed through a line in which there is a separator, (8) where the water is retained. Then, the clean and dry CO2 is depressurized in a valve and stored in a high pressure tank for example, 35 bar (9).
  • the CO2 that remains in the sterilizer is taken to another low pressure storage tank (10), for example at 15 bar which would imply reaching -30 ° C.
  • the amount stored at low pressure can be returned to the sterilizer at the first moment of filling, simply by pressure difference.
  • the CO2 recovery and storage line is shown as discontinuous.
  • the rest of the CO2 that remains in the sterilizer is released into the atmosphere through a vent line (12) in order to open and discharge the treated material. This quantity must be replenished with fresh CO2 from the bullet (1). In total it is estimated that each operating cycle as described could take the order of 30 min.
  • Bacillus thuringiensis spores have been used as a model of contaminating microorganism, given which is from the same family and shares a lot of genetic information with Anthrax, which is the most widely used bioarma.
  • Anthrax which is the most widely used bioarma.
  • they are sporulated forms of the genus bacillus, it is representative of the biological indicators of sterilization processes used.
  • the inactivation of these spores in technical tissues of the NBQ military suit is shown.
  • a sensitive electronic material specifically a mobile.
  • the strain used is Bacillus thuringiensis (CET197T; ATCC10792; CIP 53.137; DSM 2046) from the Spanish type crop collection.
  • the specific medium recommended by the supplier is used for its cultivation: "nutrient broth / agar I" which contains: 5 g of meat extract, 10 g of peptone, 5 g of NaCI, 15 g of agar (only for solid medium) and 1 L distilled water, the pH being adjusted to 7.2.
  • agar only for solid medium
  • MnSCU H2O is added for the generation of spores. All reagents are supplied by Sigma Aldrich, Spain.
  • the microorganism is recovered from an eppendorf, in a flask with about 100 ml of specific medium, and grown in a shaking bath (150 rpm) for 8 hours at 45 ° C. Subsequently, 0.1 mL of this culture is added by surface seeding on Petri dishes with the specific medium that also contains 0.1 gL 1 of Mn (MnSCU H20, Panreac). They are then incubated in the oven for 2 days at 45 ° C.
  • the plates are washed by adding two batches of 7.5 mL of distilled H2O on each one on the surface. In each wash, a sterile slide is carried out along the entire surface of the plate to collect the formed spores.
  • the wash water is centrifuged at 10,000 rpm for 10 min. The supernatant is removed and the pellet is resuspended in sterile distilled H2O. It is then subjected to heat treatment (90 ° C for 15 min) to inactivate the vegetative forms that they could remain in the suspension, obtaining a concentration of 10 8 cfu mL "1 of viable spores.
  • pollution is done trying to simulate, to the extent possible, a terrorist attack, that is, dispersing the spores. Specifically, it is carried out as follows: in a laminar flow chamber, a diluted suspension of 10 7 cfu « mL " 1 of B. thuringiensis spores is atomized on the electronic material covering the entire surface of the latter and allowed to dry at room temperature also inside the laminar flow chamber.
  • the tissue is placed in a bag with 10 mL medium and left immersed in it for half an hour. Taking 1 mL of that medium, a table of serial dilutions is prepared to obtain the spore concentration by counting colony forming units (ufe) in the Petri dishes with the specific medium and salt.
  • the contamination in the electronic material is determined by passing a sterile swab through its surface.
  • the swab is then introduced into 10 mL of specific medium and the serial dilution table is prepared in the same way.
  • the procedure is the next.
  • the container is loaded with the material to be treated in a laminar flow chamber and taken to the high pressure equipment maintaining sterility.
  • pieces of approximately 5 g are used and placed in a 50 mL container.
  • When electronic material is treated it is made in the 250 mL container.
  • the corresponding container snaps into place and closes.
  • the CO2 supply is then opened and the pump is put into operation to reach the working pressure.
  • the CO2 is pumped at a speed of 4 g « min " 1 in order to generate turbulence with a high passing speed. It is then preheated by passage through a heated coil and thus passes through the bed of a water-soaked landfill.
  • the pH is measured during the treatment by test strips (MERCK, Spain) introduced into the sterilization vessel together with the materials, of two ranges: 4.0-7.0 and 2.5-4.5.
  • NBQ suit tissues for military use are designed to protect the torso and extremities from direct exposure to chemical, biological agents and to avoid contact with radioactive particles. They are usually made of an outer layer of green or waterproof camouflage, a layer of synthetic fibers treated with fire retardants or aluminized for use against firearms (carbonized fabric) and with an inner layer of cotton impregnated with activated carbon ( activated carbon foam).
  • the set is complemented with other elements for limb protection such as butyl gloves and leggings (or boots) designed for the purpose.
  • filter systems such as gas masks or self-contained breathing apparatus (ERA), which have breathable air bottles.
  • Results Table 1 shows the amount of water measured by weight with respect to the material to be treated that is necessary to add to achieve increasing degrees of deactivation of B. thuringiensis in an outer weave of NBQ suit.
  • the added amount necessary to reach that pH is 10% by weight with respect to water.
  • the addition of acidified water is not only capable of totally deactivating the spores, but also allows reducing the aggressiveness of the operating conditions and the operating time to achieve it.
  • Table 3 shows the results obtained with the same treatment of Example 1 to a mobile that previously atomized an aqueous spore suspension until a contamination of 10 7 cfu g _1 in the manner indicated in Example 1.
  • the treatment was also effective in this electronic material, even when the water introduced in the CO2 represented less than 20% by weight with respect to the mobile.
  • the death of the spores was achieved at only 40-45 ° C.
  • the results were also confirmed on a radio and a pen drive.

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Apparatus For Disinfection Or Sterilisation (AREA)

Abstract

Método de esterilización de materiales, que han sido contaminados biológicamente, utilizando CO2 y agua. Más concretamente, la invención se ha desarrollado para el caso de que el material a esterilizar sea material sensible como por ejemplo material electrónico y óptico y ropa técnica. La presente invención igualmente se refiere al equipo para la esterilización desarrollado para llevar a cabo el método de la invención. Las condiciones en las que se realiza el tratamiento permiten conservar las propiedades del material esterilizado y, por tanto, permiten la reutilización del mismo.

Description

METODO DE ESTERILIZACION CON CQ2 Y AGUA
DESCRIPCIÓN
OBJETO DE LA INVENCIÓN
La presente invención se refiere a un método de esterilización de materiales que han sido contaminados por microorganismos, utilizando CO2 y agua.
Más concretamente, la invención se ha desarrollado para el caso de que el material a esterilizar sea un material sensible frente a condiciones extremas de presión y temperatura, como por ejemplo es el material electrónico y óptico, y la ropa técnica, aunque puede ser utilizado para cualquier tipo de material.
La presente invención igualmente se refiere al equipo para la esterilización desarrollado para llevar a cabo el método de la invención.
ANTECEDENTES DE LA INVENCION
Sólo se puede decir que con una tecnología se consigue "esterilizar" si se demuestra que se alcanza una reducción de 6 ciclos logarítmicos (6 órdenes de magnitud). La norma EN 556-1 :2001+ /AC:2006 de esterilización de productos sanitarios, indica que el nivel de carga microbiana presente en un producto estéril debe ser inferior a 1 E-6 (una millonésima).
En la práctica este concepto se lleva a mayor exigencia. En la validación de técnicas de esterilización se usan bioindicadores de endoesporas de bacterias porque son los organismos vivos más resistentes a condiciones adversas. La normativa EN ISO 11 138 indica los indicadores biológicos para cada técnica. Se usan las esporas de Geobacillus stearothermophilus para autoclavado, las de Bacillus subtilis para tratamiento con óxido de etileno y las de Bacillus pumilis para tratamiento de irradiación. En alimentos, está legislado el recuento en Bacillus cereus y Clostridium por ser los más frecuentes y además patógenos. Son conocidos diversos métodos de esterilización para lograr este grado de esterilización.
Sin embargo estos métodos implican unas condiciones de temperatura o de presión o se utilizan en ellos unos aditivos que si son aplicados a determinados materiales los destruyen, lo que implica la no posible reutilización de los mismos, con la carga económica que esto conlleva.
Por ejemplo se han desarrollado métodos de esterilización con CO2 supercrítico para esterilizar alimentos. Así el documento titulado "Microbial inactivation of paprika using high-pressure C02" L. Torres, E. Torres, J. of Supercritical Fluids 52 (2010) 134-141 describe a adición de agua directamente al pimentón (paprika) para alcanzar un grado determinado de humedad previo a su desinfección con el CO2 en condiciones supercríticas. Para obtener los mejores resultados de desinfección la temperatura que se utiliza en dicho método está por encima de los 70°C.
Otros documentos describen similares experiencias en la desinfección de granos de trigo (Park et al. Disinfection of wheat grains contaminated with Penicillium oxalicum espores by a supercritical carbón dioxide-water cosolvent system. International Journal of food microbiology 150, 239-244 (2012) o de cacao (Calvo et al. Microbial inactivation and butter extraction in a cocoa derivative using high pressure C02.
Journal of Supercritical Fluigs 42, 80-87 (2007)); pero, es necesaria la adición de una importante cantidad de agua directamente sobre la materia prima y aplicar temperaturas mayores de 65-70°C. En el caso de determinados materiales como puede ser ropa técnica o dispositivos electrónicos, estas condiciones no son aceptables ya que a esas temperaturas se estropearían. Tampoco sería aceptable, como ocurre en los documentos antes citados, mezclarlos con agua previamente a la aplicación del CO2 supercrítico ya que esta carga de agua puede estropear los dispositivos electrónicos o vestimenta especializada. La patente US6149864 describe un método de esterilización con un fluido supercrítico en polímeros de aplicaciones médicas. En este documento se indica que la presencia de pequeñas cantidades de agua es preferible para reducir los tiempos de esterilización, pero también indica que podría causar daños o reducir la eficacia de los materiales expuestos. El procedimiento reivindica presiones relativamente elevadas y el uso de ciclos de presión. Los ejemplos muestran la eficacia del procedimiento solo si se emplean elevados tiempos de contacto. La descripción y los ejemplos realizan sobre bacterias en forma vegetativa, no esporulada. Para Bacillus cereus, que es algo más resistente se demuestra que hacen falta 60°C.
Otro documento donde se describe un método de esterilización con CO2 supercrítico es la solicitud de patente internacional con número de publicación WO2007008618, donde se desarrolla un método para la esterilización especialmente de elementos médicos e implantes. Este documento se enfoca especialmente a destruir esporas tal como la Bacillus subtilis y Geobacillus stearothermophilus. Se describe que para esporas especialmente resistentes como las mencionadas, el uso del agua como aditivo, no es suficiente para obtener el grado de esterilización deseado y que siempre es necesaria la presencia de agua oxigenada. Los mismos resultados se describen en la patente US2010080790 (Tabla 2).
Por ello, las publicaciones de los últimos años se centran en procedimientos de esterilización aplicables a materiales termosensibles, mediante CO2 supercrítico modificado con agentes fuertemente oxidantes como el mencionado peróxido de hidrógeno o el ácido peracético y aplicación de elevados periodos de tiempo (Christensen, T.W. Burns, D.C. White.A.L. Ganem.B. Eisenhut.A.R. Sterilization methods and apparatus which employ additive-containing supercritical carbón dioxide sterilant, WO 2005/000364; D.C. Burns, R. J. Brown, A. R. Eisenhut, Sterilization of drugs using supercritical carbón dioxide sterilant, US20090041620). Por último se señala una publicación donde se describe la esterilización de un material sensible como es un pen drive. En dicho documento titulado "Sterilization of Bacillus pumilus spores using supercritical fluid carbón dioxide containing various modifier solutions" de Edison Shieh, J. Of Microbiological Methods, 76(2009), 247- 252, se describe la esterilización de un pen drive con CO2 supercrítico y con diferentes aditivos como agua oxigenada. Específicamente se dice que la presencia solo de agua junto a CO2 supercrítico no es suficiente para alcanzar la descontaminación del pen drive. Por ello, por lo que se conoce en el estado de la técnica, se deriva que es necesario y de gran interés el desarrollo de un método de esterilización que no destruya el material a esterilizar pero que de igual manera sea capaz de eliminar los microorganismos más resistentes (esporas) y que sea sencillo y limpio, sin ser necesaria la presencia de otros aditivos que no sea el agua.
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Los inventores han desarrollado un método de esterilización para cualquier tipo de material pero especialmente diseñado para que materiales sensibles a condiciones extremas, como elementos ópticos o electrónicos o tejidos de última generación para que sean recuperables tras el tratamiento de esterilización. Al mismo tiempo el método es capaz de eliminar los microorganismos más resistentes, en presencia de CO2 y agua. En particular el método de la invención es capaz de eliminar esporas reduciendo su número inicial en seis unidades logarítmicas. Las esporas son estructuras muy resistentes que pueden sobrevivir a altas temperaturas y a condiciones muy desfavorables. Procesos de esterilización conocidos pueden eliminar virus o bacterias pero para eliminar las esporas son necesarias condiciones extremas de temperatura y presión. En la presente invención se propone el uso de CO2 a alta presión como agente esterilizante, en condiciones de presión y temperatura alrededor o por encima del punto crítico (31°C y 74 bar), donde el CO2 tiene unas especiales propiedades como de un gas denso con las que puede penetrar muy bien en sólidos inactivando microorganismos.
Por lo tanto un primer aspecto de la invención se refiere a un método de esterilización con CO2 y agua de un material portador de microorganismos que comprende la etapa de:
poner en contacto el material a esterilizar con CO2 a una presión comprendida entre
50 bar y 500 bar, una temperatura entre 25°C y 70°C, en presencia de una cantidad de agua, comprendida entre el 10% y el 100% en peso respecto al peso del material a esterilizar durante un tiempo comprendido entre 15 minutos y 60 minutos; donde la adición del agua se realiza mediante solubilización y arrastre por el CO2 o inyectándola paralelamente al CO2.
Las ventajas de este método son varias. La más importante es que permite la recuperación del material esterilizado ya que las condiciones del tratamiento no son extremas. La temperatura de aplicación es relativamente baja. Por tanto, es un método energéticamente más económico ya que las temperaturas de temperatura y presión que se alcanzan no son tan altas como en otros métodos de esterilización. Desde el punto de vista tecnológico, el proceso es simple. El CO2 es inerte, no tóxico, apto para consumo humano, accesible y barato, y en condiciones ambientales es gas, de tal forma que no deja ningún residuo en el producto final. Además al ser capaz de esterilizar con un aditivo como agua, es un método muy limpio desde el punto de vista ecológico.
Es muy importante en la presente invención, señalar que gracias a las condiciones utilizadas, los tiempos se acortan de manera muy importante respecto a otros métodos en los que se utiliza CO2 y aditivos, e incluso en los métodos donde se utiliza condiciones más extremas de presión y temperatura.
Estos tiempos cortos se consiguen gracias al contacto óptimo que existe entre el material y el CO2. El CO2 se recircula sobre el material a alta velocidad, lo que mejora el contacto y aumenta el tiempo de contacto. Esto aumenta la eficacia del método y hace posible que los tiempos de este método de esterilización sean mucho menores respecto a otros métodos en los que se utiliza CO2 y aditivos.
La adición del agua se realiza mediante solubilización y arrastre del H2O por el CO2 o inyectándola paralelamente al CO2.
En un segundo aspecto de la invención se describe un equipo para esterilización que comprende:
a. Un recipiente para contener el material a esterilizar con una línea de recirculación del CO2;
b. Un sistema de suministro del CO2;
c. Una línea de recuperación del CO2; d. Una fuente de suministro de agua;
e. Dispositivos para el control y lectura de la presión y la temperatura;
f. Dispositivos para operar de manera segura;
g. Sistema para la despresurización del recipiente.
Se utiliza en ciclo cerrado, por tanto, sin apenas emisiones a la atmósfera y con alta eficiencia energética.
DESCRIPCION DE LAS FIGURAS
Las FIG. 1 muestra un esquema del equipo de esterilización con CÜ2 y agua. EXPOSICIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
Como se ha dicho anteriormente el primer aspecto de la invención es un método de esterilización de un material portador de microorganismos que comprende la etapa de: poner en contacto el material a esterilizar con CO2 a una presión comprendida entre 50 bar y 500 bar, una temperatura entre 25°C y 70°C, en presencia de una cantidad de agua, comprendida entre el 10% y el 100% en peso respecto al peso del material a esterilizar durante un tiempo comprendido entre 15 minutos y 60 minutos; donde la adición del agua se realiza mediante solubilización y arrastre por el CO2 o inyectándola paralelamente al CO2.
Cuando en la presente invención se utiliza el término "microorganismo" se refiere a bacterias, virus, hongos, levaduras, mohos, esporas o combinaciones de ellos. Estos microorganismos pueden ser patógenos. En una materialización preferente el microorganismo es una espora.
También de manera preferente el microorganismo a tratar puede ser un "arma biológica". Por ellas se entiende cualquier patógeno, bacteria virus, espora, u hongo, que cause enfermedades y que por lo tanto pueda utilizarse como arma de guerra. Preferentemente Bacillus Anthracis, Francisella Tularensis, Clostridium Botulinum, Vibrio Cholera, Bricella Spp, Yersinia Pestis, Shigela Spp. Virus preferentes son: el virus que causa la viruela o los causantes de encefalitis equinas (virus de la EEV y WEEV) y de hemorragias virales tipo Ébola (Filovirus), fiebre de lass, Junin, (Arenavirus) y amarilla o Dengue (Flavivirus).
El método de la invención gracias a las condiciones no extremas permite la reutilización de los materiales esterilizados. Por lo tanto de manera preferente el material es un material textil de última generación, ropa técnica, un material electrónico, un material óptico o un material sanitario, y en general materiales termosensibles.
Particularmente el material es un equipamiento militar. El equipamiento militar se refiere a distintos materiales de uso militar como tejidos o elastómeros o equipos de respiración autónoma (ERA) o de protección ocular, trajes de protección NBQ (Nuclear, Biológico y Químico), tales como los diversos tejidos de fabricación, las calzas y guantes. También se puede entender por equipamiento militar dispositivos sensibles electrónicos o eléctricos que pudiera llevar un combatiente como por ejemplo radios, móviles, tablets, smartphones, armas o equipamiento de campaña militar.
Preferentemente el material a tratar es un equipo de protección individual (EPI) de distintos colectivos en contacto con agentes biológicos como, personal sanitario, bomberos, miembros de protección civil, así como personal de laboratorios de biotecnología, agrarios, veterinarios y de cocinas, o en plantas de eliminación de residuos.
En realizaciones preferentes la cantidad de agua entre comprendida entre el 10% y el 40%, entre el 10% y el 30% en peso respecto al peso del material. Más preferentemente entre un 20% y el 30%.
En realizaciones preferentes la presión se encuentra comprendida entre 50 bar y 500 bar, entre 50 bar y 150 bar o entre 50 bar y 100 bar.
En realizaciones preferentes la temperatura se encuentra comprendida entre 30°C y 50°C, o entre 30°C y 40°C. En realizaciones preferentes el tiempo se encuentra comprendido entre 15 minutos y 45 minutos o entre 15 minutos y 30 minutos.
En materializaciones preferentes el agua se acidifica en un rango de pH de 3 a 5, preferentemente 3 a 4. Al acidificar el agua, se consigue los mismos resultados a temperaturas menores.
La acidificación se realiza preferentemente con un ácido orgánico excepto ácido peracético. Ácidos orgánicos preferentes son el ácido cítrico o el ácido acético. En general se puede acidificar con cualquier ácido orgánico no tóxico.
En la realización más preferente la temperatura se encuentra entre 30°C y 40°C, el tiempo entre 30°C y 40°C y el pH entre 3 y 4.
Un segundo aspecto de la invención como se ha dicho se refiere a un equipo para esterilización que comprende:
a. Un recipiente para contener el material a esterilizar con una línea de recirculación de CO2;
b. Un sistema de suministro del CO2;
c. Una línea de recuperación del CO2;
d. Una fuente de suministro de agua;
e. Dispositivos para el control y lectura de la presión y la temperatura;
f. Dispositivos para operar de manera segura;
g. Sistema para la despresurización del recipiente.
Preferentemente el recipiente que contiene el material a esterilizar presenta dispositivos que favorecen el contacto entre el CO2 y el material, tales como agitadores tipo jet o cestas rotatorias, dispersores o atomizadores del CO2, una línea de recirculación del CO2 a alta velocidad.
Preferentemente el sistema de suministro de CO2 es en modo bombeo o en modo compresor. Preferentemente la línea de recuperación del CO2 presenta un equipamiento para la limpieza del mismo y ajuste de sus condiciones de presión y temperatura para su posterior reuso.
Preferentemente la fuente de suministro de agua es un sistema de bombeo que la inyecte junto al CO2, un recipiente que la contenga a través del cual pase el CO2 y que permita su introducción disuelta o arrastrada por el CO2.
Preferentemente los dispositivos para la operar de manera segura son válvulas de alivio y discos de ruptura tanto en el recipiente donde se alojan los materiales como en los recipientes de almacenamiento del CO2, así como alarmas por alta presión y temperatura.
Preferentemente el sistema para la despresurización del recipiente es una válvula calentada o un sistema de equilibramiento de presiones y una línea de venteo.
En la FIG. 1 muestra el diagrama de flujo de una instalación concreta para el caso de operación en modo bombeo e introduciendo el agua en la línea de recirculación del CO2 a alta velocidad. El CO2 se suministra desde el tanque de almacenamiento (1) y se refrigera en un cambiador (2), previo al bombeo para evitar la cavitación. En este cambiador, la fracción líquida del CO2 almacenado en el tanque se enfría en contacto indirecto con una mezcla refrigerante que está a -25 °C formada por etilenglicol-agua al 50%. La bomba (3) lleva el CO2 hasta la presión de tratamiento (<150 bar). Como durante la compresión no se calienta suficientemente, debe calentarse más, hasta la temperatura de operación en un cambiador de calor (4) típicamente 40°C. A continuación entra al esterilizador (5) donde se ha introducido previamente el material sensible a descontaminar.
Durante la esterilización, el CO2 se recircula a alta velocidad con la misma bomba (4), realizando el circuito mostrado con línea punteada. La turbulencia generada por el paso a alta velocidad de la mezcla supercrítica favorece el contacto con el material en todos los recovecos del mismo para asegurar la desactivación del agente biológico. En la línea de recirculación, hay instalado un filtro (6). El CO2 cargado de suciedad (normalmente partículas en suspensión) deja el esterilizador por la parte superior, pasando a través de dicho filtro que retiene esta suciedad. También hay un depósito para alojar el agua ácida (7). El CO2 a su paso por este depósito se humedece para volver al esterilizador. Con la recirculación a alta velocidad del CO2 húmedo sobre el material depositado en el esterilizador se opera durante el periodo determinado como mínimo para la esterilización, típicamente 15 min.
Finalizado este ciclo propiamente de esterilización, comienza el ciclo de despresurización para descargar el material tratado y recuperar el CO2 que debe ser recirculado al proceso. Así que en este momento, se hace pasar la mezcla esterilizante CC agua por una línea en la que hay un separador, (8) donde el agua queda retenida. Después, el CO2 limpio y seco se despresuriza en una válvula y se almacena en un tanque de alta presión por ejemplo, 35 bar (9).
El CO2 que aún quede en el esterilizador se lleva a otro tanque de almacenamiento (10) de baja presión, por ejemplo a 15 bar que implicaría llegar a -30°C. Para evitar la congelación de agua atmosférica en la tubería o del poco agua que el CO2 llevase causando tapones de hielo en la línea, en esta segunda despresurización, se calienta en la línea con un elemento calefactor, (11) hasta 10°C. La cantidad almacenada a baja presión se puede retornar al esterilizador en el primer momento de llenado, simplemente por diferencia de presión. La línea de recuperación y almacenamiento del CO2 se muestra señalada en discontinuo. Finalmente, el resto del CO2 que queda en el esterilizador se libera a la atmosfera a través de una línea de venteo (12) para poder abrir y descargar el material tratado. Esta cantidad debe ser repuesta con CO2 fresco de la bala (1). En total se estima que cada ciclo de operación como el descrito podría tardar del orden de 30 min.
EJEMPLOS
La presente invención se ilustra mediante los siguientes ejemplos los cuales no pretenden ser limitativos al alcance de la misma. En todos ellos, se ha utilizado como modelo de microorganismo contaminante, esporas de Bacillus thuringiensis, dado que es de la misma familia y comparte mucha información genética con el Ántrax, que es el bioarma mas empleado. Además dado que son formas esporuladas del género bacillus, es representativa de los indicadores biológicos de procesos de esterilización utilizados. En el primer ejemplo, se muestra la inactivación de estas esporas en tejidos técnicos del traje militar NBQ (nuclear, biológico y químico). En el segundo, en un material electrónico sensible, concretamente un móvil.
Ejemplo 1
Microorganismo
La cepa utilizada es Bacillus thuringiensis (CET197T; ATCC10792; CIP 53.137; DSM 2046) procedente de la colección española de cultivos tipo.
Se utiliza para su cultivo el medio específico recomendado por el proveedor: "nutrient broth/agar I" que contiene: 5 g de extracto de carne, 10 g de peptona, 5 g de NaCI, 15 g de agar (solo para medio sólido) y 1 L agua destilada, ajustándose el pH a 7,2. Para la generación de esporas, se adiciona 0, 1g de MnSCU H2O. Todos los reactivos son suministrados por Sigma Aldrich, España.
Generación y concentración de esporas de B. thuringiensis
Se recupera el microorganismo a partir de un eppendorf, en un matraz con unos 100 ml_ de medio específico, y se cultiva en un baño con agitación (150 rpm) durante 8 horas a 45 °C. Posteriormente se adiciona 0,1 mL de este cultivo mediante siembra en superficie sobre placas Petri con el medio específico que además contiene 0,1 gL 1 de Mn (MnSCU H20, Panreac). A continuación se incuban en la estufa 2 días a 45 °C.
Pasado este tiempo se hace un lavado de las placas adicionando dos tandas de 7,5 mL de H2O destilada sobre cada una en la superficie. En cada lavado, se realiza un arrastre con un portaobjetos estéril por toda la superficie de la placa para recoger las esporas formadas.
El agua de lavado se centrifuga a 10.000 r.p.m durante 10 min. Se retira el sobrenadante y el pellet se resuspende en H2O destilada estéril. Después se somete a tratamiento térmico (90°C durante 15 min) para inactivar las formas vegetativas que pudieran quedar en la suspensión, obteniendo una concentración de 108 ufe mL"1 de esporas viables.
Contaminación de los materiales de equipamiento NBQ (Nuclear Biológico y Químico) según normativa OTAN.
La normativa OTAN para el nivel más exigente de esterilización, marca una contaminación de partida de los materiales de 107 ufc«g_1. Para lograrlo se introducen 5 g de cada tejido ensayado en la suspensión de esporas de concentración 108 ufcTnL"1 durante 10 minutos y se deja secar en cámara de flujo laminar.
En cuanto a los materiales electrónicos, la contaminación se realiza tratando de simular, en la medida de lo posible, un ataque terrorista, es decir, dispersando las esporas. Concretamente se realiza de la siguiente forma: en cámara de flujo laminar, se atomiza una suspensión diluida de 107 ufc«mL"1 de esporas de B. thuringiensis sobre el material electrónico cubriendo toda la superficie de éste y se deja secar a temperatura ambiente también dentro de la cámara de flujo laminar.
Determinación de la contaminación de B. thuringiensis en los tejidos del traje NBQ y el material electrónico antes y después del tratamiento con COa Supercrítico.
El tejido se introduce en una bolsa con 10 mL medio y se deja inmerso en él por media hora. Cogiendo 1 mL de ese medio, se prepara una tabla de diluciones seriadas para obtener la concentración de esporas por recuento de unidades formadoras de colonia (ufe) en las placas de Petri con el medio específico y la sal de
Mn.
La contaminación en el material electrónico, se determina pasando una torunda estéril por la superficie del mismo. A continuación la torunda se introduce en 10 mL de medio específico y se prepara la tabla de diluciones seriadas de la misma forma.
Los resultados se expresan en ambos casos como el logaritmo del recuento después del tratamiento (N) dividido por el recuento inicial (No). La máxima desviación estándar en las lecturas es de 0,3 ciclos logarítmicos. Tratamiento de las muestras con CO2 supercrítico para la desactivación de B. thuríngiensis El equipo utilizado para los ensayos de los ejemplos es una forma concreta de la instalación reivindicada, a escala laboratorio, donde el CO2 no se recupera por utilizarse en pequeña cantidad.
El procedimiento es el siguiente. Se carga el recipiente con el material a tratar en cámara de flujo laminar y se lleva al equipo de alta presión manteniendo la esterilidad. Para los ensayos sobre tejidos del traje NBQ, se emplean trozos de aproximadamente 5 g que se introducen en un recipiente de 50 mL. Cuando se trata material electrónico se hace en el recipiente de 250 mL. El recipiente correspondiente se encaja en su lugar y se cierra. A continuación se abre el suministro de CO2 y se pone la bomba en funcionamiento para alcanzar la presión de trabajo. Se bombea el CO2 a una velocidad de 4 g«min"1 con el fin de generar turbulencia con una alta velocidad de paso. Después se precalienta mediante paso por un serpentín calefactado y así pasa por el lecho de un relleno empapado en agua. El CO2 húmedo entra por la parte inferior del recipiente y atraviesa el tejido contaminado o el material electrónico comenzando así el tiempo de operación. Trascurrido el tiempo establecido, se apaga la bomba, se cierra el suministro de CO2 y comienza la despresurización de forma muy lenta para evitar la congelación. Una vez despresurizado y separado del equipo, el recipiente se lleva de forma estéril a cámara de flujo laminar, donde se recoge la muestra tratada para realizar los posteriores análisis microbiológicos.
Medida de pH
El pH se mide durante el tratamiento mediante tiras reactivas (MERCK, España) introducidas en el recipiente de esterilización junto con los materiales, de dos rangos: 4,0-7,0 y 2,5-4,5.
Desactivación de B. Thuríngiensis en tejidos de traje NBQ Los trajes NBQ para uso militar, están pensados para proteger el torso y las extremidades de la exposición directa ante agentes químicos, biológicos y para evitar el contacto con partículas radiactivas. Suelen estar hechos de una capa exterior de color verde o de camuflaje impermeabilizado, una capa de fibras sintéticas tratadas con retardantes del fuego o aluminizadas para su uso contra armas de fuego (tejido carbonizado) y con una capa interna de algodón impregnada en carbón activo (espuma de carbón activo). El conjunto se complementa con otros elementos para la protección de las extremidades como guantes de butilo y calzas (o botas) diseñadas para el fin. Para la cara es imprescindible el uso de sistemas filtrantes como las máscaras antigás o equipos de respiración autónoma (ERA), los cuales disponen de botellas de aire respirable.
Resultados En la Tabla 1 se muestra la cantidad de agua medida en peso respecto el material a tratar que es necesaria añadir para lograr crecientes grados de desactivación de B. thuringiensis en un tejido exterior de traje NBQ.
Tabla 1. Desactivación de B. thuringiensis en tejido exterior de traje NBQ a distintos porcentajes de humedad. Otras condiciones de operación: presión, 350 bar; temperatura, 70°C; tiempo de operación, 60 minutos.
Figure imgf000015_0001
Estos resultados, por un lado, confirman la necesidad de la presencia de agua para lograr la desactivación de B. thuringiensis y, por otro lado, la necesidad de alcanzar un bajo pH, debido a la formación de ácido carbónico, para conseguirlo. En la Tabla 2 se muestra el efecto de añadir ácido cítrico al agua. Dada la importancia que tiene el bajo pH, se prueba a tratar el tejido exterior con el CO2 mezclado con agua pero acidificada a pH 3,9 con ácido cítrico, que es un ácido orgánico poco agresivo y nada tóxico ya que incluso se utiliza como aditivo conservante alimentario.
La cantidad añadida necesaria para alcanzar ese pH es del 10 % en peso respecto del agua.
Tabla 2. Impacto de la adición de agua acidificada con ácido cítrico hasta pH=3,9 en la desactivación de esporas de B. thuringiensis impregnadas en tejido exterior de traje NBQ en diferentes condiciones de operación. El tiempo de operación fue de 15 min y se introdujo aproximadamente un 30% en peso de agua respecto del tejido.
Figure imgf000016_0001
Como se observa, la adición de agua acidificada, no solo es capaz de desactivar totalmente las esporas, sino que permite rebajar la agresividad de las condiciones de operación y el tiempo de operación para conseguirlo.
Así, a condiciones de 150 bar, 60°C y 15 min sería posible descontaminar trajes NBQ infectados con esporas de armas biológicas acorde a los estándares más restrictivos de la OTAN. Además, los tejidos tratados no perdieron ni propiedades mecánicas ni físico- químicas. Salían prácticamente secos del tratamiento. Ejemplo 2. Desactivación de B. Thuríngiensis en material electrónico sensible
La Tabla 3 muestra los resultados obtenidos aplicando el mismo tratamiento del Ejemplo 1 a un móvil al que previamente se había atomizado una suspensión acuosa de esporas hasta alcanzar una contaminación de 107 ufe g_1 de la forma que se ha indicado en el Ejemplo 1. El tratamiento también fue eficaz en este material electrónico, incluso cuando el agua introducida en el CO2 suponía menos de un 20% en peso respecto del móvil. Es más, cuando se adicionó cantidad suficiente de ácido cítrico para rebajar el pH a 3,3, se logró la muerte de las esporas a tan sólo 40-45°C. Los resultados se confirmaron también en una radio y en un pen drive.
Tabla 3. Impacto del uso de CO2 supercrítico mezclado con agua acidificada con ácido cítrico en la desactivación de esporas de B. thuríngiensis que contaminaban un móvil a diferentes pH y decrecientes temperaturas. La presión de operación fue de 150 bar y el tiempo de tratamiento de 15 min, lo que permitió introducir un total de alrededor del 20% en peso de agua respecto del móvil.
Figure imgf000017_0001
Los tres materiales electrónicos después de estos tratamientos fueron recuperad en perfecto estado con plena capacidad funcional.

Claims

REIVINDICACIONES
1. Método de esterilización con CO2 y agua de un material portador de microorganismos que comprende la etapa de:
poner en contacto el material a esterilizar con CO2 a una presión comprendida entre 50 bar y 500 bar, una temperatura entre 25°C y 70°C, en presencia de una cantidad de agua, comprendida entre el 10% y el 100% en peso respecto al peso del material a esterilizar durante un tiempo comprendido entre 15 minutos y 60 minutos; donde la adición del agua se realiza mediante solubilizacion y arrastre por el CO2 o inyectándola paralelamente al CO2.
2. Método de esterilización según reivindicación 1 , donde el material portador de microorganismo es ropa técnica.
3. Método de esterilización según reivindicación 1 , donde el material portador de microorganismos es material electrónico.
4. Método de esterilización según reivindicación 1 , donde el material portador de microorganismo es un material óptico.
5. Método de esterilización según reivindicación 1 , donde el material portador de microorganismo es un material sanitario.
6. Método de esterilización según reivindicaciones 1-5, donde el microorganismo es un patógeno.
7. Método de esterilización según reivindicaciones 1 -6, donde el microorganismo es una espora.
8. Método de esterilización según reivindicaciones 1-7, donde la cantidad de agua está comprendida entre el 10% y el 40% en peso respecto al peso del material a esterilizar.
9. Método de esterilización según reivindicaciones 1-7, donde la cantidad de agua está comprendida entre el 20% y el 30% en peso respecto al peso del material a esterilizar.
10. Método de esterilización según reivindicaciones 1-9, donde el agua se acidifica hasta alcanzar pH comprendido entre 3 y 5.
1 1. Método de esterilización según reivindicaciones 10, donde el agua se acidifica hasta alcanzar pH comprendido entre 3 y 4.
12. Equipo para llevar a cabo el procedimiento reivindicado en los puntos 1 a 1 1 que comprende:
a. Un recipiente para contener el material a esterilizar con una línea de recirculación del CO2;
b. Un sistema de suministro del CO2;
c. Una línea de recuperación del CO2;
d. Una fuente de suministro de agua;
e. Dispositivos para el control y lectura de la presión y la temperatura;
f. Dispositivos para operar de manera segura;
g. Sistema para la despresurización del recipiente.
13. Equipo para la esterilización según reivindicación 12 donde la fuente de suministro de agua es un sistema de bombeo que la inyecta junto al CO2 o un recipiente que la contenga a través del cual pasa el CO2 y que permite su introducción disuelta o arrastrada por el CO2.
PCT/ES2015/070862 2014-11-27 2015-11-27 Método de esterilización con co2 y agua Ceased WO2016083653A1 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ESP201400961 2014-11-27
ES201400961A ES2533537B1 (es) 2014-11-27 2014-11-27 Método de esterilización con CO2 y agua

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2016083653A1 true WO2016083653A1 (es) 2016-06-02

Family

ID=52780600

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/ES2015/070862 Ceased WO2016083653A1 (es) 2014-11-27 2015-11-27 Método de esterilización con co2 y agua

Country Status (2)

Country Link
ES (1) ES2533537B1 (es)
WO (1) WO2016083653A1 (es)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6149864A (en) * 1998-06-25 2000-11-21 Massachusetts Institute Of Technology Supercritical fluid sterilization method
US20100080790A1 (en) * 2005-07-13 2010-04-01 University Of South Carolina Sterilization using high-pressure carbon dioxide

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6149864A (en) * 1998-06-25 2000-11-21 Massachusetts Institute Of Technology Supercritical fluid sterilization method
US20100080790A1 (en) * 2005-07-13 2010-04-01 University Of South Carolina Sterilization using high-pressure carbon dioxide

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CALVO L ET AL.: "Microbial inactivation and butter extraction in a cocoa derivative using high pressure C02.", JOURNAL OF SUPERCRITICAL FLUIDS, vol. 42, no. 1, August 2007 (2007-08-01), pages 80 - 87, XP022088544, ISSN: 0896-8446, DOI: doi:10.1016/j.supflu.2007.01.009 *
GARCIA-GONZALEZ L ET AL.: "High pressure carbon dioxide inactivation of microorganisms in foods: the past, the present and the future.", INTERNATIONAL JOURNAL OF FOOD MICROBIOLOGY NETHERLANDS, vol. 11 7, no. 1, 10 June 2007 (2007-06-10), pages 1 - 28, ISSN: 0168-1605 *
HAAS G J ET AL.: "Inactivation of microorganisms by carbon dioxide under pressure.", JOURNAL OF FOOD SAFETY, vol. 9, no. 4, 1989, pages 253 - 266, ISSN: 0149-6085 *
PARK HYONG SEOK ET AL.: "Disinfection of wheat grains contaminated with Penicillium oxalicum spores by a supercritical carbon dioxide-water cosolvent system", INTERNATIONAL JOURNAL OF FOOD MICROBIOLOGY NETHERLANDS, vol. 156, no. 3, 1 June 2012 (2012-06-01), pages 239 - 244, ISSN: 1879-3460 *
ZHANG JIAN ET AL.: "Sterilizing Bacillus pumilus spores using supercritical carbon dioxide.", JOURNAL OF MICROBIOLOGICAL METHODS NETHERLANDS, vol. 66, no. 3, September 2006 (2006-09-01), pages 479 - 485, ISSN: 0167-7012 *

Also Published As

Publication number Publication date
ES2533537B1 (es) 2015-10-27
ES2533537A1 (es) 2015-04-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Ribeiro et al. A new era for sterilization based on supercritical CO2 technology
US8551399B2 (en) Healthcare facility disinfecting system
Zhang et al. Sterilizing Bacillus pumilus spores using supercritical carbon dioxide
US20100080790A1 (en) Sterilization using high-pressure carbon dioxide
Epelle et al. Application of ultraviolet-C radiation and gaseous ozone for microbial inactivation on different materials
WO2005000364A2 (en) Sterilization methods and apparatus which employ additive-containing supercritical carbon dioxide sterilant
US8721963B2 (en) Cold sterilization of tissue engineering scaffolds with compressed carbon dioxide
US20140037499A1 (en) Healthcare facility disinfecting system
CN204932361U (zh) 一种医用消毒箱
CN107484774A (zh) 一种环保灭菌消毒组合物及其制备方法
Kumar et al. Basic concepts of sterilization techniques
ES2533537B1 (es) Método de esterilización con CO2 y agua
Leanse et al. Shedding UVC light on Covid-19 to protect dentistry staff and patients
Patterson et al. Efficacy of directed misting application of a peroxygen disinfectant for environmental decontamination of a veterinary hospital
Pekovic et al. Efficacy of ozone gas against mumps virus under experimental environment conditions
Ragland et al. Staphylococcus xylosus PCR-validated Decontamination of Murine Individually Ventilated Cage Racks and Air Handling Units by Using'Active-Closed'Exposure to Vaporized Hydrogen Peroxide.
CN113164636B (zh) 使用超临界二氧化碳对噬菌体产品进行消毒
Mukhopadhayay et al. Sterilization of biomaterials and medical devices with supercritical CO2
Rogina-Car et al. Cellulosic textiles as wrapping material in medical sterilization
US20260108646A1 (en) Method and device for disinfecting and/or sterilising objects
US20260115346A1 (en) Method and device for disinfecting and/or sterilising objects
Blessie et al. Ozone to Control Virus: Mechanisms And Applications
CN110721326A (zh) 一种实验室多功能消毒清洗机制造及应用
Ford Sterile pharmaceutical products
Salman Sterilization and disinfection

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 15864082

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 15864082

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1