WO2015129603A1

WO2015129603A1 - 活性化血液凝固第Ｘ因子（ＦＸａ）阻害剤の高純度結晶

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Publication number: WO2015129603A1
Application number: PCT/JP2015/054943
Authority: WO
Inventors: 光太郎川波; 泰夫木谷
Original assignee: 第一三共株式会社
Priority date: 2014-02-25
Filing date: 2015-02-23
Publication date: 2015-09-03
Also published as: JPWO2015129603A1; TW201613940A; US20170022220A1; EP3112371A1; EP3112371A4

Abstract

活性化血液凝固第Ｘ因子（ＦＸａ）阻害剤である、式（１ａ）で表される化合物の高純度結晶を提供することが課題である。　解決手段：下記式（１ａ）で表される化合物の高純度結晶であって、結晶を溶媒に溶解した後に、再度結晶化する工程により得ること特徴とする、不純物の含有率として、１つの不純物の最大含量が０．０３％以下であり、かつ、不純物の合計含量が０．１３％以下である式（１ａ）で表される化合物の高純度結晶。

Description

活性化血液凝固第Ｘ因子（ＦＸａ）阻害剤の高純度結晶

　本発明は、活性化血液凝固第X因子(FXa)の阻害作用を示し、血栓性疾患の予防及び／又は治療薬として有用な化合物の高純度結晶の製造方法に関する。

　活性化血液凝固第X因子(FXa)の阻害作用を示し、血栓性疾患の予防及び／又は治療薬として有用な化合物として、下記式(1a)

で表されるN¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸　一水和物［以下、化合物(1a)と称する場合がある。］が知られている(例えば、特許文献1～8参照)。
　しかしながら、これら文献には、化合物(1a)の高純度の結晶については記載されていない。

国際公開第03／000657号パンフレット国際公開第03／000680号パンフレット国際公開第03／016302号パンフレット国際公開第04／058715号パンフレット国際公開第05／047296号パンフレット国際公開第07／032498号パンフレット国際公開第08／129846号パンフレット国際公開第08／156159号パンフレット

　本発明の課題は、活性化血液凝固第X因子(FXa)阻害剤である、化合物(1a)の高純度結晶を提供することにある。

　本発明者らは、既知のN¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物中に微量に含有する不純物（含有し得る不純物としては、エナンチオマー、各立体異性体、途中で生成する副生成物並びに、製造中間体に由来するものであり、N-[(1S,2R,4S)-2-アミノ-4-(N,N-ジメチルカルバモイル)シクロヘキシル]-N'-(5-クロロピリジン-2-イル)オキサミド、[(1R,2S,5S)-2-({[(5-クロロピリジン-2-イル)アミノ](オキソ)アセチル}アミノ)-5-(N,N-ジメチルカルバモイル)シクロヘキシ
ル]カルバミン酸tert-ブチル、N,N'-ビス(5-クロロピリジン-2-イル)エタンジアミド、その他である。）に着目して、不純物の含有率の低い高純度のN¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物の結晶を製造することに成功して本発明を完成した。
　すなわち、本発明は以下に記載のとおりである。
(1)下記式(1a)

で表される、N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物の高純度結晶であって、
不純物の含有率として、1種の不純物の最大含量が0．03％以下で、かつ、各不純物の合計含量が0．13％以下である、式(1a)で表される化合物の高純度結晶（なお、含量％は、式(1a)化合物のフリー体のHPLC面積値に対する％をいう）。
(2)下記式(1a)

で表される、N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物の高純度結晶であって、
下記の工程1～工程4により得られることを特徴とする、不純物の含有率として、1種の不純物の最大含量が0．03％以下で、かつ、各不純物の合計含量が0．13％以下である、式(1a)で表される化合物の高純度結晶（なお、含量％は、式(1a)化合物のフリー体のHPLC面積値に対する％をいう）。

［工程1］N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物(化合物(1a))に、化合物(1a)の1重量部に対して7容量部程度の含水エタノール［無水エタノール：精製水＝7：3(V／V)］を添加し、内温55～75℃に加温して溶解して溶解液1を調製する。
［工程2］溶解液1中の不溶物を、化合物(1a)の1重量部に対して1容量部程度の含水エタノール、次いで、2容量部程度の無水エタノールを用いて洗浄・分離する。洗浄・分離した溶解液を、内温55～75℃に加温して溶解して溶解液2を調製する。
［工程3］溶解液2を徐々に室温まで冷却し、化合物(1a)の1重量部に対して14容量部程度の無水エタノールを添加して、内温0～15℃に冷却して結晶を析出させる。
［工程4］結晶を集めて、化合物(1a)の1重量部に対して2容量部程度の無水エタノールで洗浄した後、結晶を50℃以下で減圧乾燥する。
(3)下記式(1a)

で表される、N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物(1a)の高純度結晶であって、
さらに、上記(2)の工程1～工程4を繰り返すことを特徴とする、不純物の含有率として、1種の不純物の最大含量が0．03％以下で、かつ、各不純物の合計含量が0．12％以下である、式(1a)で表される化合物の高純度結晶（なお、含量％は、式(1a)化合物のフリー体のHPLC面積値に対する％をいう）。
(4)上記の(2)の工程1～4により得られることを特徴とする、N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物の高純度結晶の製造方法。
(5)(4)の製造方法で製造した、N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物(1a)の高純度結晶の標準品としての使用。

　本発明によれば、不純物の含有率の低い高純度のN¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物の結晶を製造し、提供可能となる。
　本発明によれば、標準品などに使用できる、不純物の含有率の低い高純度のN¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物の結晶を製造し、提供可能となる。

　以下に本発明を詳細に説明する。

　下記式(1)

で表される、N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド(N¹-(5-Chloropyridin-2-yl)-N²-((1S,2R,4S)-4-[(dimethylamino)carbonyl］-2-{[(5-methyl-4,5,6,7-tetrahydrothiazolo[5,4-c]pyridine-2-yl)carbonyl]amino}cyclohexyl)ethanediamide)は、化合物(1a)のフリー体であり、世界保健機関(WHO)には、国際一般名称(International Nonproprietary Names、INN)：エドキサバン(edoxaban)、N-(5-クロロピリジン-2-イル)-N’-［(1S，2R，4S)-4-(N，N-ジメチルカルバモイル)-2-(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロ［1，3］チアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-カルボキサミド)シクロヘキシル］オキサミド(N-(5-Chloropyridin-2-yl)-N’-[(1S,2R,4S)-4-(N,N-dimethylcarbamoyl)-2-(5-methyl-4,5,6,7-tetrahydro[1,3]thiazolo[5,4-c]pyridine-2-carboxamido)cyclohexyl]oxamide)として登録されている。

　上記の化合物(1)は、その薬理学上許容される塩であってもよく、またそれらの水和物であってもよいが、下記式(1a)

で表される、N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸一水和物が好ましい。

　本発明の化合物(1a)及びその製造方法は、下記の工程1～4で提供される。
　工程1に使用する、化合物(1a)であるN¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物は、公知の製造方法で製造したものを用いればよく、例えば、後述の参考例に記載したように、国際公開第07／032498号パンフレットに記載された製造法で製造したものを使用すればよい。

　以下に［工程1］～［工程4］を詳細に説明する。

　［工程1］は、化合物(1a)を含水エタノールに溶解して溶解液1を調整する工程である。
ここで、本発明の用いる含水エタノールとは、無水エタノールと精製水を、7：3の容積比(V／V)で調製したものを使用する。
　より具体的には、化合物(1a)を、化合物(1a)の1重量部に対して7容量部の上記の含水エタノールを添加し、フラスコ容器の内温を55～75℃に加温して溶解して溶解液1を調製する。

　［工程2］は、［工程1］で調製した溶解液1を、熱時精密ろ過を行い、ろ過器及びろ去物を含水エタノールで洗浄後、さらに無水エタノールで洗浄する。ろ過液と洗浄液を合わせたろ液を、再度反応容器内の内温55～75℃に加温して溶解して、一部析出した結晶を溶解して溶解液2を調製する工程である。
　ここで、ろ過に使用するろ紙は、ガラス繊維のろ紙が好ましい。ガラス繊維のろ紙とは、市販のものを使用すればよく、例えば、GFP-25、GFP-60［いずれも、桐山製作所(有)］を挙げることができる。また、ろ過は減圧、加圧又は常圧のいずれでもよいが、減圧で行うときには結晶析出によるろ紙の目詰まりに留意する。さらに、熱時精密ろ過の工程の前或いは同時に、活性炭を使用してろ過を行ってもよく、使用する活性炭は市販のものが試用できる。ろ過器及びろ去物を洗浄する含水エタノールは、化合物(1a)の1重量部に対して1容量部の含水エタノールを使用するのが好ましい。
　また、洗浄に使用する無水エタノールは、化合物(1a)の1重量部に対して2容量部の無水エタノールを使用するのが好ましい。反応容器内の内温を55～75℃に加温するために、外部にかける温度としては75℃程度が好ましい。係る工程2の操作で、内温55～75℃の溶解液2が調製される。

　［工程3］は、工程2で調製した溶解液2を、徐々に冷却し、結晶化を完結させる工程である。
　工程3において溶解を確認後、溶解液2を、内温が50～65℃になるまで徐々冷却し、結晶化を開始させる。さらに、内温35℃以下のほぼ室温まで冷却した後、化合物(1a)の1重量部に対して14容量部の無水エタノールを添加して希釈する。エタノールで希釈後、内温0～15℃まで冷却して結晶の析出を完結させる。

　［工程4］は、析出した結晶を集めて、洗浄後、乾燥する工程である。
　結晶をろ過にて集め、化合物(1a)の1重量部に対して2容量部の無水エタノールで洗浄する。ろ過は、上述のように減圧、加圧又は常圧のいづれを採用してもよい。ここで、集めた結晶を無水エタノールで洗浄後、50℃以下で減圧乾燥する。ここで、減圧は通常の真空ポンプなどを使用すればよい。結晶重量が一定化した時点で乾燥終了とした。

　本発明は、上記［工程1］～［工程4］の操作で、化合物(1a)の高純度結晶を製造するものであるが、さらに［工程1］～［工程4］の操作を繰り返し行って、化合物(1a)の高純度結晶を製造することもできる。

　係る操作で製造した化合物(1a)の高純度結晶は、化合物(1a)の製造における、各製造バッチ間の均一性・純度確認等を行うときの標準品(標準サンプル)等として使用するのに好適である。

　次に、実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明は、なんらこれに限定されるものではない。
　磁気共鳴スペクトル(NMR)における内部標準物質としては、テトラメチルシランを使用し、多重度を示す略語は、s＝singlet、d＝doublet、t＝triplet、q＝quartet、m＝multiplet、及びbr　s＝broad　singletを示す。

＜HPLCを用いた分析条件＞

カラム：CAPCELL PAK C18 MGII (Shiseido Co．，Ltd．)
移動相：MeCN：リン酸緩衝液(pH＝7．0)＝10：90～30：70
温度：40℃，流量：1mL/min，検出波長：290nm

　(参考例1)　N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸　一水和物(1a)の合成(国際公開第07／032498号パンフレットに記載された方法)

　国際公開第07／032498号パンフレットに記載された方法で製造した、N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド(86．8g)を、60℃で、30％含水エタノール(418ml)に溶解後、p-トルエンスルホン酸一水和物(29．0g)の30％含水エタノール溶液(167ml)を加えた。反応混合物を、70℃で1時間攪拌後、徐々に室温まで冷却した後、エタノールを加え、16時間攪拌した。反応液を氷冷下、1時間攪拌後、結晶をろ取し、標題化合物102．9gを得た。
　得られた化合物は、IRにおいて標準品と(公知化合物)と同一波数に同様の強度の吸収ピークが認められた。
　また、得られた化合物は、HPLCを用いた分析において、不純物として、複数の不純物のピーク(いずれも0．03重量％以下)が確認され、各不純物の合計が0．16重量％であったことから、その純度は99．84％であった（なお、含量％は、式(1a)化合物のフリー体のHPLC面積値に対する％をいう）。

¹H-NMR(DMSO-d6)δ：1．45-1．54(1H，m)，1．66-1．78(3H，m)，2．03-2．10(2H，m)，2．28(3H，s)，2．79(3H，s)，2．91-3．02(1H，m)，2．93(3H，s)，2．99(3H，s)，3．13-3．24(2H，m)，3．46-3．82(2H，m)，3．98-4．04(1H，m)，4．43-4．80(3H，m)，7．11(2H，d，J＝7．8Hz)，7．46(2H，d，J＝8．2Hz)，8．01(2H，d，J＝1．8Hz)，8．46(1H，t，J＝1．8Hz)，8．75(1H，d，J＝6．9Hz)，9．10-9．28(1H，br．s)，10．18(1H，br．s)，10．29(1H，s)．
元素分析：Anal．Calcd．For：C；50．43％、H；5．46％、N；13．28％．
Found：C；50．25％、H；5．36％、N；13．32％

(実施例1)　N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸　一水和物(1a)
　無水エタノール(350mL)及び精製水(150mL)を混合して含水エタノールを調製した。この含水エタノールを実施例1～3で使用した。
参考例1で製造したN¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸　一水和物(化合物1a)(10g)フラスコに入れ、含水エタノール(70mL)を加え、外温75℃で20分攪拌した。フラスコ内の溶液温度が65℃で溶解を確認した。ガラス繊維製のろ紙を用い、溶解液を注いでろ過した。ろ過器及びろ紙を、化合物(1a)1重量部に対して1容量部の含水エタノール(10mL)で洗浄し、次いで、化合物(1a)1重量部に対して2容量部の無水エタノール(20mL)で洗浄した。ろ過液及び洗浄液を合わせ(このときの溶液の温度は45℃で一部結晶の析出が確認された)、外温75℃に加温して撹拌した。内温が62℃に到達した時点で溶解を確認したことから、外温を内温と同じ温度に下げた。引き続いて、4時間をかけて外温を徐々に室温(約25℃)まで下げ、さらに外温を6℃に下げ、約1時間半を要して内温が6℃となった。撹拌混合液に化合物(1a)の化合物の1重量部に対して14容量部の無水エタノール(140mL)を添加して1時間撹拌した(無水エタノールを添加後、内温が15℃に上昇したが、約1時間撹拌を続け、内温が6℃となった)。析出結晶をろ過にて集め、ろ過した結晶を化合物(1a)1重量部に対して2容量部の無水エタノール(20mL)で洗浄した。結晶(12．33g)を室温で1時間減圧乾燥(結晶重量は9．15g)、さらに1時間減圧乾燥し、表題物［9．15g，収率(回収率)＝91．5％］を、白色の結晶として得た。

　得られた化合物は、IRにおいて標準品と(公知化合物)と同一波数に同様の強度の吸収ピークが認められた。
　また、得られた化合物は、HPLCを用いた分析において、不純物として、複数の不純物のピーク(いずれも0．03重量％)が確認され、各不純物の合計が0．13重量％であったことから、その純度は99．87％であった（なお、含量％は、式(1a)化合物のフリー体のHPLC面積値に対する％をいう）。
　残留溶媒としては、300ppmより少ないエタノールが確認されている。また、無機不純物としては、、重金属及び強熱残分を測定した結果、ほとんど残留していないことを確認している。

(実施例2)　N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸　一水和物(1a)
実施例1で製造したN¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸　一水和物(化合物(1a)，8g)フラスコに入れ、含水エタノール(56mL)を加え、外温75℃で15分攪拌した。フラスコ内の溶液温度が64℃で溶解を確認した。ガラス繊維製のろ紙を用い、溶解液を注いでろ過した。ろ過器及びろ紙を、含水エタノール(8mL)で洗浄し、次いで、無水エタノール(16mL)で洗浄した。ろ過液及び洗浄液を合わせ(このときの溶液の温度は40℃で一部結晶の析出が確認された)、外温75℃に加温して撹拌した。内温が63℃に到達した時点で溶解を確認したことから、外温を内温と同じ温度に下げた。引き続いて、2時間半をかけて外温を徐々に室温(約25℃)まで下げ、さらに外温を6℃に下げ、約1時間半を要して内温が6℃となった。撹拌混合液に無水エタノール(112mL)を添加して1時間撹拌した(無水エタノールを添加後、内温が14℃に上昇したが、約1時間撹拌を続け、内温が6℃となった)。析出結晶をろ過にて集め、ろ過した結晶を無水エタノール(16mL)で洗浄した。結晶(9．02g)を室温で1時間減圧乾燥(結晶重量は7．33g)、さらに1時間減圧乾燥し、表題物［7．33g，収率(回収率)＝91．6％］を、白色の結晶として得た。

　得られた化合物は、IRにおいて標準品と(公知化合物)と同一波数に同様の強度の吸収ピークが認められた。
　また、得られた化合物は、HPLCを用いた分析において、不純物として、複数の不純物のピーク(いずれも0．03重量％)が確認され、各不純物の合計が0．12重量％であったことから、その純度は99．88％であった（なお、含量％は、式(1a)化合物のフリー体のHPLC面積値に対する％をいう）。
　残留溶媒としては、300ppmより少ないエタノールが確認されている。また、無機不純物としては、重金属及び強熱残分を測定した結果、ほとんど残留していないことを確認している。

(実施例3)　N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸　一水和物(1a)
実施例2で製造したN¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸　一水和物(化合物(1a)，6．08g)フラスコに入れ、含水エタノール(42mL)を加え、外温75℃で10分間攪拌した。フラスコ内の溶液温度が63℃で溶解を確認した。ガラス繊維製のろ紙を用い、溶解液を注いでろ過した。ろ過器及びろ紙を、含水エタノール(6mL)で洗浄し、次いで、無水エタノール(12mL)で洗浄した。ろ過液及び洗浄液を合わせ(このときの溶液の温度は42℃で一部結晶の析出が確認された)、外温75℃に加温して撹拌した。内温が63℃に到達した時点で溶解を確認したことから、外温を内温と同じ温度に下げた。引き続いて、約4時間をかけて外温を徐々に室温(約25℃)まで下げ、さらに外温を6℃に下げ、約40分を要して内温が6℃となった。撹拌混合液に無水エタノール(84mL)を添加して1時間撹拌した(無水エタノールを添加後、内温が15℃に上昇したが、約1時間撹拌を続け、内温が6℃となった)。析出結晶をろ過にて集め、ろ過した結晶を無水エタノール(12mL)で洗浄した。結晶(6．30g)を室温で1時間減圧乾燥(結晶重量は5．49g)、さらに1時間減圧乾燥し、表題物［5．49g，収率(回収率)＝91．5％］を、白色の結晶として得た。

　得られた化合物は、IRにおいて標準品と(公知化合物)と同一波数に同様の強度の吸収ピークが認められた。
　また、得られた化合物は、HPLCを用いた分析において、不純物として、複数の不純物のピーク(いづれも0．03重量％)が確認され、各不純物の合計が0．12重量％であったことから、その純度は99．88％であった（なお、含量％は、式(1a)化合物のフリー体のHPLC面積値に対する％をいう）。
　残留溶媒としては、300ppmより少ないエタノールが確認されている。また、無機不純物としては、重金属及び強熱残分を測定した結果、ほとんど残留していないことを確認している。

　(評価例1)
　参考例1、及び実施例1～3で製造した化合物(1a)の純度検定を、HPLCを用いて実施した。
その結果を表1に記載した。

　(結果)

　実施例1～3で製造した化合物(1a)は、不純物として、1種不純物の最大含量が0．03％以下であり、かつ、各不純物の合計が、0．13％又は0．12％程度であり、化合物(1a)の純度として99．87％以上の高純度であることが明らかになった（なお、含量％は、式(1a)化合物のフリー体のHPLC面積値に対する％をいう）。

Claims

　下記式(1a)

で表される、N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物の高純度結晶であって、
不純物の含有率として、１種の不純物の最大含量が0．03％以下で、かつ、各不純物の合計含量が0．13％以下である、式(1a)で表される化合物の高純度結晶（なお、含量％は、式(1a)化合物のフリー体のHPLC面積値に対する％をいう）。
　下記式(1a)

で表される、N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物の高純度結晶であって、
下記の工程1～工程4により得られることを特徴とする、不純物の含有率として、1種の不純物の最大含量が0．03％以下で、かつ、各不純物の合計含量が0．13％以下である、式(1a)で表される化合物の高純度結晶（なお、含量％は、式(1a)化合物のフリー体のHPLC面積値に対する％をいう）。
［工程1］N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物(化合物(1a))に、化合物(1a)の1重量部に対して7容量部程度の含水エタノール［無水エタノール：精製水＝7：3(V／V)］を添加し、内温55～75℃に加温して溶解して溶解液1を調製する。
［工程2］溶解液1中の不溶物を、化合物(1a)の1重量部に対して1容量部程度の含水エタノール、次いで、2容量部程度の無水エタノールを用いて洗浄・分離する。洗浄・分離した溶解液を、内温55～75℃に加温して溶解して溶解液2を調製する。
［工程3］溶解液2を徐々に室温まで冷却し、化合物(1a)の1重量部に対して14容量部程度の無水エタノールを添加して、内温0～15℃に冷却して結晶を析出させる。
［工程4］結晶を集めて、化合物(1a)の1重量部に対して2容量部程度の無水エタノールで洗浄した後、結晶を50℃以下で減圧乾燥する。
　下記式(1a)

で表される、N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物の高純度結晶であって、
さらに、請求項2の工程1～工程4を繰り返すことを特徴とする、不純物の含有率として、1種不純物の最大含量が0．03％以下で、かつ、各不純物の合計含量が0．12％以下である、式(1a)で表される化合物の高純度結晶（なお、含量％は、式(1a)化合物のフリー体のHPLC面積値に対する％をいう）。
請求項2の工程1～工程4により得られることを特徴とする、N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物(1a)の高純度結晶の製造方法。
請求項4の製造方法で製造した、N¹-(5-クロロピリジン-2-イル)-N²-((1S，2R，4S)-4-［(ジメチルアミノ)カルボニル］-2-｛［(5-メチル-4，5，6，7-テトラヒドロチアゾロ［5，4-c］ピリジン-2-イル)カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル)エタンジアミド p-トルエンスルホン酸塩一水和物(1a)の高純度結晶の標準品としての使用。