WO2014185603A1 - Novel peptide for inhibiting t cell activity and use thereof - Google Patents
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Abstract
A peptide according to the present invention can perform a function identical or similar to the function of natural CTLA-4 and has an excellent degree of skin penetration due to a small size. The peptide according to the present invention effectively binds to antigen presenting cell surface proteins (CD80 and CD86) to inhibit activity of T cells and thus is capable of inhibiting the expression of inflammatory cytokines (for example, IL-2 and IFN-ϒ). As a result, a composition comprising the peptide according to the present invention exhibits excellent effects in terms of preventing, treating, or improving Th1-mediated immune diseases. Therefore, the superior activity and stability of the peptide according to the present invention can be useful when applied to medicine, quasi-drugs, and cosmetics.
Description
【명세서】 【Specification】
【발명의 명칭】 [Name of invention]
T세포 활성 억제용 신규 펩타이드 및 이의 용도 [기술분야] Novel peptides for inhibiting T cell activity and uses thereof
본 특허출원은 2013년 05월 16일에 대한민국 특허청에 제출된 대한민국 특허출원 제 10-2013-0055590 호에 대하여 우선권을 주장하며， 상기 특허출원의 개시 사항은 본 명세서에 참조로서 삽입된다. This patent application claims priority to Korean Patent Application No. 10-2013-0055590 filed with the Korean Intellectual Property Office on May 16, 2013, the disclosure of which is hereby incorporated by reference.
본 발명은 T 세포 활성 억제용 신규 펩타이드 및 이의 용도에 관한 것이다. The present invention relates to novel peptides and their use for inhibiting T cell activity.
【배경기술】 Background Art
면역반웅은 활성화 또는 불활성화 상태로 조절이 가능하다. 이 면역반웅에 주된 세포로 알져진 것은 T 세포와 B 세포이며, 이 세포들의 역할에 대해선 많은 연구가 이루어지고 있다. 종래 연구를 토대로 보았을 때， 주로 T 세포의 면역반웅이 질병과 더 관계가 깊은 것으로 나타나고 있다. 면역반웅에서 T 세포의 활성은 다른 면역에 관련된 세포의 활성에 관여한다. 상기 T 세포가 활성화되기 위해서는 항원제시세포 (antigen presenting cell; APC)로부터 항원을 제시 받아야 한다. 항원제시세포 (APC)가 항원을 먼저 인식하고, MHC (주조직적합성항원)를 통해 T 세포의 항원수용체 (T cell receptor; TCR)에 항원을 제시하여야 T세포가 활성을 일으킬 수 있다. 또한, T 세포의 활성화에는 TCR을 통한 신호전달 뿐만 아니라， CD28과 같은 표면분자를 통한 추가 신호 전달이 있어야 한다. CD8CKB7-1)과 CD86(B7-2)는 CD28에 대해 리간드로 작용하여 활성신호 (stimulation signal)를 전달하여 T 세포의 사이토카인 생산 및 세포생존에 관여하게 된다. Immune response can be controlled to an activated or inactivated state. T cells and B cells are known to be the main cells of the immune response, and much research has been conducted on their role. Based on previous research, it has been shown that immune response of T cells is more closely related to disease. The activity of T cells in immune response is involved in the activity of cells involved in other immunity. In order for the T cells to be activated, an antigen must be presented from an antigen presenting cell (APC). Antigen-presenting cells (APCs) must first recognize antigens and present antigens to T cell receptors (TCRs) via MHC (major histocompatibility antigens) in order for T cells to become active. In addition, activation of T cells requires not only signaling through TCR, but also additional signaling through surface molecules such as CD28. CD8CKB7-1) and CD86 (B7-2) act as ligands for CD28 and deliver a stimulation signal to participate in cytokine production and cell survival of T cells.
CTLA-4 (Cytotoxic T lymphocyte一 associated antigen 4； CD152)는 CD28에 경쟁적으로 작용하는 면역글로블린 (I讓 unoglobulin, Ig)의 구성원으로, CD28보다 CD80 및 CD86 리간드에 높은 친화력을 가진 것이 특징이다. 이러한 CTLA— 4의 상호작용에 대해서는 억제신호 (inhibition signal)를 전달하게 되며， T 세포의 인터루킨 -2(interleukin-2, IL-2) 및 IL-2 수용체의 발현을 억제시켜 활성화된 T 세포의 활성과 증식을 억제한다.
본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다. CTLA-4 (Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4; CD152) is a member of the immunoglobulin (I 讓 unoglobulin, Ig) that competitively acts on CD28, and is characterized by having a higher affinity for CD80 and CD86 ligands than CD28. In this interaction of CTLA-4, it transmits an inhibitory signal and inhibits the expression of interleukin-2 (IL-2) and IL-2 receptors of T cells. Inhibits activity and proliferation. Throughout this specification, many papers and patent documents are referenced and their citations are indicated. The disclosures of cited papers and patent documents are incorporated herein by reference in their entirety, and the level of the technical field to which the present invention belongs and the contents of the present invention are more clearly explained.
【발명의 내용】 [Content of invention]
【해결하려는 과제】 [Problem to solve]
본 발명자들은 CTLA-4와 동일한 기능 또는 유사한 기능 유지하면서도 자연의 CTLA-4 단백질보다 활성 및 안정성이 우수한 물질을 개발하고자 노력하였다. 그 결과, 본 발명자들은 천연의 CTLA-4 단백질보다 생리 활성 (예컨대, 비장세포에서 JNK와 p38의 인산화 억제， T 세포에 의해 생성되는 IFN-Y 및 IL-2의 발현 억계)이 우수한 펩타이드를 선별함으로써 본 발명을 완성하게 되었다. The present inventors sought to develop a substance that retains the same or similar function as CTLA-4, while having better activity and stability than natural CTLA-4 protein. As a result, the present inventors screened peptides with superior physiological activity (eg, inhibition of phosphorylation of JNK and p38 in splenocytes, inhibition of expression of IFN-Y and IL-2 produced by T cells) than native CTLA-4 protein. Thus, the present invention has been completed.
따라서， 본 발명의 목적은 T-세포 활성 억제용 펩타이드를 제공하는 데 있다. Accordingly, an object of the present invention is to provide a peptide for inhibiting T-cell activity.
본 발명의 다른 목적은 Thl-매개 면역 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공하는 데 있다. Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating a Thl-mediated immune disease.
본 발명의 또 다른 목적은 Thl-매개 면역 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공하는 데 있다. 본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다. Another object of the present invention is to provide a method for preventing or treating a Thl-mediated immune disease. Other objects and advantages of the present invention will become apparent from the following detailed description, claims and drawings.
【과제의 해결 수단】 [Measures of problem]
본 발명의 일 양태에 따르면， 본 발명은 서열목록 제 1서열 및 제 2서열에 기재된 아미노산 서열로 구성된 군으로부터 선택되는 1종의 아미노산 서열로 이루어진 T-세포 활성 억제용 펩타이드를 제공한다. According to one aspect of the present invention, the present invention provides a peptide for inhibiting T-cell activity consisting of one amino acid sequence selected from the group consisting of amino acid sequences described in SEQ ID NO: 1 and 2.
본 발명의 다른 양태에 따르면， 본 발명은 상술한 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 Thl-매개 면역 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공한다.
본 발명자들은 CTLA-4와 동일한 기능 또는 유사한 기능 유지하면서도 자연의 CTLA— 4 단백질보다 활성 및 안정성이 우수한 물질을 개발하고자 노력하였다, 그 결과, 본 발명자들은 천연의 CTLA-4 단백질보다 생리 활성 (예컨대， 비장세포에서 JNK와 p38의 인산화 억제， T 세포에 의해 생성되는 IFN-Y 및 IL-2의 발현 억제)이 우수한 펩타이드를 합성하였다. 본 발명에세 본 발명의 펩타이드는 다음 일반식 1 및 2로 표시된다: 일반식 1 According to another aspect of the present invention, the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of Thl-mediated immune disease comprising the above-mentioned peptide as an active ingredient. The present inventors have tried to develop a substance having the same or similar function as CTLA-4, but having better activity and stability than the natural CTLA-4 protein. , Peptides with excellent inhibition of phosphorylation of JNK and p38 in the splenocytes, expression of IFN-Y and IL-2 produced by T cells) were synthesized. In the present invention, the peptide of the present invention is represented by the following general formulas (1) and (2).
Ser-Thr-Gly-Lys-Lys-Al a-Val Ser-Thr-Gly-Lys-Lys-Al a-Val
일반식 2 Formula 2
Ar g-Thr-G 1 u-Met -Pr o-Thr-Leu-Tyr 본 발명자들은 인간 CTLACCytotoxic T lymphocyte-associated antigen)-4(GenBank Accession No.： AAH69566.1)의 기능과 관련 있는 부위를 기초하여 상술한 특성을 나타내는 다수의 CTLA-4-유래된 펩타이드를 합성하였다. 좀더 자세히 살펴보면， 면역 시스템을 하향조절하는 단백질 수용체인 CTLA-4 단백질의 여러 부위를 임의적으로 부분 합성하여 항원 제시 세포 표면 단백질에 대한 결합가능 부위를 1차 탐색한 뒤， 이 예측된 부위의 아미노산 서열을 최적화하여 본 발명의 펩타이드가 제조된다. 수용체 결합가능 예상부위를 검사하여 후보 펩타이드들을 제조하고， 이들 후부 펩타이드들 중에서 T 세포 활성화에 대한 억제 활성이 가장 우수한 펩타이드를 스크리닝 함으로써， 본 발명의 펩타이드가 제공된다. Ar g-Thr-G 1 u-Met-Pr-O-Thr-Leu-Tyr The inventors based the site related to the function of human CTLACCytotoxic T lymphocyte-associated antigen) -4 (GenBank Accession No .: AAH69566.1). To synthesize a number of CTLA-4-derived peptides exhibiting the characteristics described above. In more detail, the randomized partial synthesis of various sites of the CTLA-4 protein, a protein receptor that down-regulates the immune system, first searches for a binding site for antigen-presenting cell surface proteins, and then the amino acid sequence of the predicted site. By optimizing the peptide of the present invention is prepared. Peptides of the present invention are provided by screening for peptides capable of producing candidate peptides by screening for predictable receptor-binding sites and screening peptides with the highest inhibitory activity against T cell activation among these posterior peptides.
본 발명의 어떤 구현예에 따르면， 본 발명의 서열목록 제 1서열 및 서열목록 제 2서열 펩타이드는 인간 CTLA-4에서 유래하며, 이는 표 1에 예시되어 있다. According to certain embodiments of the invention, the SEQ ID NO: 1 and SEQ ID NO: 2 peptides of the present invention are derived from human CTLA-4, which is illustrated in Table 1.
본 발명의 펩타이드들은 천연 인간 CTLA-4의 기능 (예컨대， 항원 제시 세포 표면 단백질에 결합하는 기능)을 수행하여 T 세포의 활성화를 억제할 뿐 아니라， 염증성 사이토카인 (IL-2 및 IFN-Y )의 발현을 억제하는 펩타이드로 동정되었다. Peptides of the invention not only inhibit the activation of T cells by performing the functions of natural human CTLA-4 (eg, binding to antigen presenting cell surface proteins), but also inflammatory cytokines (IL-2 and IFN-Y). It was identified as a peptide that inhibits the expression of.
본 발명의 어떤 구현예에 따르면, 본 발명의 펩타이드는 JNK(c-Jun N-terminal kinase) 및 p38의 인산화를 억제한다 (참고 : 도 3a 및 도 3b) · 본 발명의 어떤 구현예에 γ따르면， 본 발명의 펩타이드는 염증성
사이토카인의 발현을 억제한다 (참조: 도 4a 및 도 4b). Thl-매개된 세포성 면역반웅에서， T 세포가 활성화되어 숙성되면 세포성 면역을 선호하는 T 세포가 인자들을 생산한다. 구체적으로는， 본 발명의 펩타이드는 INF( interferon)- γ , IL(interleukin)-2 또는 TNF( tumor necrosis factor)— β의 발현을 억제하고， 보다 더 구체적으로는, 및 IL-2의 발현을 억제시킨다. IFN-Y는 대식세포 (macrophages), 세포독성 T- 임파구 (cytotoxic T- lymphocytes, CTLs) 및 호중구 (neutrophi Is)를 활성화시키는 역할을 하고, IL-2는 T-세포 성장인자로서 역시 세포독성 T- 임파구 반웅을 촉진한다. According to some embodiments of the present invention, the peptide of the present invention inhibits phosphorylation of c-Jun N-terminal kinase (JNK) and p38 (see FIGS. 3A and 3B). ， The peptide of the present invention is inflammatory Inhibits the expression of cytokines (see FIGS. 4A and 4B). In Thl-mediated cellular immune response, T cells that favor cellular immunity produce factors when T cells are activated and matured. Specifically, the peptide of the present invention inhibits the expression of INF (interferon) -γ, IL (interleukin) -2 or TNF (tumor necrosis factor) —β, and more specifically, and inhibits the expression of IL-2. Suppress it. IFN-Y plays a role in activating macrophages, cytotoxic T-lymphocytes (CTLs) and neutrophi Is. IL-2 is also a cytotoxic T-cell growth factor. Promotes lymphocyte reactions.
본 명세서에서 사용되는 용어 "펩타이드" 는 펩타이드 결합에 의해 아미노산 잔기들이 서로 결합되어 형성된 선형의 분자를 의미한다. 본 발명의 펩타이드는 당 업계에 공지된 화학적 합성 방법, 특히 고상 합성 기술 (sol id—phase synthesis techniques)에 따라 제조될 수 있다 (Merrifield, J. Amer. Chem. Soc. 85:2149-54(1963)； Stewart, et al. , Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd. ed. , Pierce Chem. Co. ·' Rockford, 111(1984)). 본 발명에 따르면, 본 발명의 펩타이드는 천연 CTLA-4 단백질에 비해 매우 뛰어난 열안정성을 가진다 (참조: 도 5a, 도 5b). 천연 CTLA-4 단백질 (약 30-34 kDa)은 번역 후 변형 (예컨대, 세포질 및 막 분획 모두에서 검출)되어 2가지 형태의 다른 크기로 검출되는 등 적용 상의 난점이 존재한다. 또한, 제조의 어려움 뿐만 아니라, 은도 및 장기 보관 시에 낮은 안정성을 가진다. 하지만， 본 발명의 펩타이드는 매우 저렴하게 대량 합성이 가능하고 고온 등에서 물리화학적인 안정하기 때문에, 생리활성의 저하를 최대한으로 방지할 수 있으며 체내외에서의 잔존 기간을 증가시킴으로 좀 더 향상된 치료 효과를 갖는다. 따라서 본 발명의 펩타이드는 의약품， 의약외품 및 화장품과 같은 장기간 저장이 요구되는 제품에 유리하게 적용될 수 있다. The term "peptide" as used herein refers to a linear molecule formed by binding amino acid residues to each other by peptide bonds. Peptides of the invention can be prepared according to chemical synthesis methods known in the art, in particular sol id—phase synthesis techniques (Merrifield, J. Amer. Chem. Soc. 85: 2149-54 (1963). Stewart, et al., Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd.ed., Pierce Chem. Co. ' Rockford, 111 (1984)). According to the present invention, the peptides of the present invention have very excellent thermal stability compared to native CTLA-4 protein (see FIGS. 5A, 5B). Natural CTLA-4 proteins (about 30-34 kDa) present application difficulties such as post-translational modifications (eg, detected in both cytoplasmic and membrane fractions) to be detected in two forms of different sizes. In addition to difficulties in manufacturing, silver also has low stability in long term storage. However, since the peptide of the present invention can be synthesized at high cost and is physicochemically stable at high temperature, it can prevent the decrease of physiological activity to the maximum and have a more improved therapeutic effect by increasing the remaining period in vitro. . Therefore, the peptide of the present invention can be advantageously applied to products requiring long-term storage, such as pharmaceuticals, quasi-drugs and cosmetics.
본 발명의 어떤 구현예에 따르면 , 펩타이드의 N-말단 또는 C—말단은 히드록시기 (-0H), 아미노기 (-N¾), 아자이드 (-NHN¾) 등으로 변형될 수 있다. 본 발명의 어떤 구현예에 따르면ᅳ 상기 펩타이드의 N-말단은
아세틸기， 플투오레닐 메록시 카르보닐기， 포르밀기, 팔미토일기， 미리스틸기， 스테아릴기 및 폴리에틸렌글리콜 (PEG)로 구성된 군으로부터 선택되는 보호기가 추가적으로 결합될 수 있다. According to certain embodiments of the invention, the N-terminus or C-terminus of the peptide may be modified with a hydroxyl group (-0H), an amino group (-N¾), an azide (-NHN¾), and the like. According to some embodiments of the invention ᅳ the N-terminus of the peptide A protecting group selected from the group consisting of an acetyl group, flutolenyl methoxy carbonyl group, formyl group, palmitoyl group, myristyl group, stearyl group and polyethylene glycol (PEG) may be additionally bonded.
상술한 아미노산의 변형은 본 발명의 펩타이드의 안정성을 크게 개선하는 작용을 한다. 본 명세서에서 용어 "안정성" 은 、、인 비보" 안정성뿐만 아니라， 저장 안정성 (예컨대 , 상온 저장 안정성 )도 의미한다. 상술한 보호기는 생체 내의 단백질 절단효소의 공격으로부터 본 발명의 펩타이드를 보호하는 작용을 한다. 또한， 본 발명은 상술한 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 Thi-매개 면역 질환의 예방， 치료 또는 개선용 조성물을 제공한다. Modification of the above-mentioned amino acid serves to greatly improve the stability of the peptide of the present invention. As used herein, the term "stability" refers to not only "in vivo" stability but also storage stability (eg, room temperature storage stability). The above protecting groups act to protect the peptides of the invention from the attack of proteolytic enzymes in vivo. In addition, the present invention provides a composition for the prevention, treatment or amelioration of Thi-mediated immune disease comprising the above-mentioned peptide as an active ingredient.
하기의 실시예에서 입증된 바와 같이， 본 발명의 펩타이드는 T 세포 활성화와 관련된 JNK 및 p38의 인산화를 억제하고 이와 관련된 면역 관련 물질 (예컨대, INF-Y 및 IL-2)의 발현 또는 활성을 억제하여 감소시키는 능력을 가진다 (참조: 도 3-4). As demonstrated in the examples below, the peptides of the invention inhibit the phosphorylation of JNK and p38 associated with T cell activation and inhibit the expression or activity of immune related substances (eg, INF-Y and IL-2) associated with it. It has the ability to reduce by (see Fig. 3-4).
본 발명의 조성물은 상술한 본 발명의 CTLA-4 관련 펩타이드를 유효성분으로 포함하기 때문에， 이 둘 사이에 공통된 내용은 본 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여 그 기재를 생략한다. Since the composition of the present invention includes the above-described CTLA-4 related peptide of the present invention as an active ingredient, the common content between the two is omitted in order to avoid excessive complexity of the present specification.
본 발명의 어떤 구현예에 따르면， 본 발명의 Thl-매개 면역 질환은 이식 거부， 자가면역질환 및 염증 질환을 포함한다. According to certain embodiments of the invention, Thl-mediated immune diseases of the invention include transplant rejection, autoimmune diseases and inflammatory diseases.
본 발명의 어떤 구현예에 따르면， 본 발명의 자가면역질환은 루프스 류마티스 다발성 근육통， 공피증, 베게너육아종증， 측두 동맥염， 저온형글로불린혈증 (cryoglobulinemia), 심상성 천포창 (pemphigus vulgaris), 갑상선염 및 다발성 경화증을 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다. According to certain embodiments of the present invention, the autoimmune diseases of the present invention include lupus rheumatoid polymyalgia, scleroderma, Wegener's granulomatosis, temporal arteritis, cryoglobulinemia, vulgaris vulgaris, thyroiditis and multiple Including but not limited to sclerosis.
본 발명의 어떤 구현예에 따르면, 본 발명의 염증 질환은 천식， 습진， 건선， 여드름， 알러지, 류마티스 관절염， 건선 관절염 (psoriatic arthritis), 아토피성 피부염， 아토피성 비염 (예컨대, 건초열)， 알레르기성 피부염， 만성 부비동염 또는 지루성 피부염 (seborrheic dermatitis)을 포함하는 염증성 피부질환; 크론병 또는 궤양성 대장염을 포함하는 염증성 장질환; 강직성 척추염 (ankylosing spondylitis), 폐혈증, 폐혈성 쇼크
맥관염 및 활액낭염을 포함하는 급성 또는 만성 염증 질환; 골다공증; 골관절염; 제 1형 또는 제 2형 당뇨병; 고형암; 아테롬성 동맥경화증;According to some embodiments of the invention, the inflammatory disease of the invention is asthma, eczema, psoriasis, acne, allergy, rheumatoid arthritis, psoriatic arthritis, atopic dermatitis, atopic rhinitis (eg hay fever), allergic Inflammatory skin diseases including dermatitis, chronic sinusitis or seborrheic dermatitis; Inflammatory bowel disease, including Crohn's disease or ulcerative colitis; Ankylosing spondylitis, pneumonia, pulmonary shock Acute or chronic inflammatory diseases including vasculitis and bursitis; osteoporosis; Osteoarthritis; Type 1 or type 2 diabetes; Solid cancer; Atherosclerosis;
HIV(human immunodeficiency virus) 또는 인플루엔자 바이러스에 의한 바이러스 감염; 및 엡스타인-바 바이러스， 거대세포 바이러스， 헤르페스 바이러스 (herpes simplex virus)에 의한 만성 바이러스 감염을 포함하지만， 이에 한정되는 것은 아니다. Viral infection by human immunodeficiency virus (HIV) or influenza virus; And chronic viral infections by Epstein-Barr virus, cytomegalovirus, herpes simplex virus.
본 발명의 조성물은 (a) 상술한 본 발명의 CTLA-4 단백질의 활성을 나타내는 펩타이드의 약제학적 유효량; 및 (b) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물로 이용될 수 있다. The composition of the present invention comprises (a) a pharmaceutically effective amount of a peptide exhibiting the activity of the CTLA-4 protein of the present invention as described above; And (b) it can be used as a pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier.
본 명세서에서 용어 "약제학적 유효량" 은 상술한 CTLA-4 관련 펩타이드의 효능 또는 활성을 달성하는 데 층분한 양올 의미한다. As used herein, the term “pharmaceutically effective amount” means an amount sufficient to achieve the efficacy or activity of the CTLA-4 related peptide described above.
본 발명의 약제학적 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스， 덱스트로스， 수크로스, 솔비틀， 만니를, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트， 젤라틴， 규산 칼슴 , 미세결정성 셀를로스， 폴리비닐피를리돈， 셀를로스， 물 , 시럽， 메틸 셀를로스， 메틸히드록시벤조에이트， 프로필히드록시벤조에이트， 활석， 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나， 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약제학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제 , 감미제， 향미제， 유화제， 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutically acceptable carriers included in the pharmaceutical compositions of the present invention are those commonly used in the preparation of lactose, dextrose, sucrose, sorbet, manny, starch, acacia rubber, calcium phosphate, alginate, Gelatin, silicate, microcrystalline cellulose, polyvinylpyridone, cellulose, water, syrup, methyl cellulose, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil Including, but not limited to. In addition to the above components, the pharmaceutical composition of the present invention may further include a lubricant, a humectant, a sweetener, a flavoring agent, an emulsifier, a suspending agent, a preservative, and the like. Suitable pharmaceutically acceptable carriers and agents are Remington's
Pharmaceutical Sciences (19th ed. , 1995)에 상세히 기재되어 있다. Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995).
본 발명의 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있으며, 비경구 투여인 경우에는 정맥내 주입， 피하 주입， 근육 주입, 복강 주입， 국소 투여， 경피 투여 등으로 투여할 수 있다. The pharmaceutical composition of the present invention may be administered orally or parenterally, and in the case of parenteral administration, it may be administered by intravenous injection, subcutaneous injection, intramuscular injection, intraperitoneal injection, topical administration, transdermal administration, or the like.
본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식， 환자의 연령, 체중, 성， 병적 상태， 음식， 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반웅 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 한편， 본 발명의 약제학적 조성물의 바람직한 투여량은 1일 당 0.0001-100 Suitable dosages of the pharmaceutical compositions of the present invention may be prescribed in various ways depending on factors such as the formulation method, mode of administration, age, weight, sex, morbidity, food, time of administration, route of administration, rate of excretion and reaction response to the patient. Can be. On the other hand, the preferred dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is 0.0001-100 per day
/ig이다. / ig
또한, 본 발명의 약제학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에
따라， 약제학적으로 허용되는 담체 및 /또는 부형제를 이용하여 제제화 함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제， 정제, 캅셀제 또는 젤 (예컨대, 하이드로젤) 형태일 수도 있으며， 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다. In addition, the pharmaceutical composition of the present invention can be easily carried out by those skilled in the art to which the present invention pertains. Thus, by formulating with pharmaceutically acceptable carriers and / or excipients, it may be prepared in unit dose form or may be prepared by incorporation into a multi-dose container. In this case, the formulation may be in the form of a solution, suspension or emulsion in an oil or aqueous medium, or may be in the form of extracts, powders, granules, tablets, capsules or gels (eg hydrogels), and may further include a dispersing agent or a stabilizer. .
또한， 본 발명의 조성물은 (a) 상술한 본 발명의 펩타이드의 화장품학적 유효량 (cosmetically effective amount )； 및 (b) 화장품학적으로 허용되는 담체를 포함하는 화장품 조성물로 이용될 수 있다. 본 명세서에서 용어 "화장품학적 유효량" 은 상술한 본 발명의 조성물의 화장품학적 효능을 달성하는 데 층분한 양을 의미한다. In addition, the composition of the present invention can be used as a cosmetic composition comprising (a) a cosmetically effective amount of the peptide of the present invention described above; and (b) a cosmetically acceptable carrier. The term "cosmetic effective amount" herein means an amount sufficient to achieve the cosmetic efficacy of the composition of the present invention described above.
본 발명의 화장품 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며， 예를 들어， 용액， 현탁액, 유탁액， 페이스트， 겔, 크림， 로션, 파우더， 비누, 계면활성제 -함유 클린싱 , 오일， 분말 파운데이션， 유탁액 파운데이션， 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나， 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는， 유연 화장수， 영양 화장수， 영양 크림， 마사지 크림， 에센스， 아이 크림， 클렌징 크림， 클렌징 포음, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다. Cosmetic compositions of the present invention may be prepared in any formulation commonly prepared in the art, for example, solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, surfactant-containing cleansing , Oils, powder foundations, emulsion foundations, wax foundations and sprays, and the like, but are not limited thereto. More specifically, it may be prepared in the form of a flexible lotion, nutrition lotion, nutrition cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray or powder.
본 발명의 제형이 페이스트， 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유， 왁스， 파라핀， 전분， 트라칸트， 셀를로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜， 실리콘， 벤토나이트， 실리카， 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다. When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, the carrier components include animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide. Can be used.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스， 탈크， 실리카， 알루미늄 히드톡시드， 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판 /부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다. When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used, in particular, in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane Propellant such as butane or dimethyl ether.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매， 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고， 예컨대 물， 에탄을， 이소프로판올， 에틸 카보네이트， 에틸 아세테이트， 벤질 알코을 , 벤질
벤조에이트， 프로필렌 글리콜 1，3-부틸글리콜 오일， 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다. 본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄을 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 회석제, 에록실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비를 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제， 미소결정성 셀를로오스 알루미늄 메타히드록시드 벤토나이트， 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다. When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, a solubilizer or an emulsifier is used as the carrier component, for example water, ethane, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl Fatty acid esters of benzoate, propylene glycol 1,3-butylglycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan. When the formulation of the present invention is a suspension, suspensions such as water, ethane or liquid diluents such as propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbide esters and polyoxyethylene sorbitan esters are used as carrier components. Firstly, microcrystalline cellulose aluminum metamethoxide bentonite, agar or tracant and the like can be used.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트 , 지방족 알코올 에테르 설페이트， 설포숙신산 모노에스테르， 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트， 사르코시네이트， 지방산 아미드 에테르 설페이트， 알킬아미도베타인， 지방족 알코을， 지방산 글리세리드， 지방산 디에탄을아미드, 식물성 유， 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세를 지방산 에스테르 둥이 이용될 수 있다. When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing agent, the carrier component is an aliphatic alcohol sulfate, an aliphatic alcohol ether sulfate, a sulfosuccinic acid monoester, isethionate, an imidazolinium derivative, a methyltaurate, a sarcosinate, a fatty acid amide. Fatty acid esters may be used for ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol.
본 발명의 화장품 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 펩타이드류와 담체 성분 이외에， 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며， 예컨대 항산화제， 안정화제， 용해화제, 비타민， 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제를 포함할 수 있다. 본 발명의 또 다른 양태에 따르면， 본'발명은 상술한 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 조성물을 대상 (subject)에게 투여하는 단계를 포함하는 Thl-매개 면역 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공한다. The components included in the cosmetic composition of the present invention include components commonly used in cosmetic compositions, in addition to peptides and carrier components as active ingredients, and include, for example, antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and flavorings. Phosphorus adjuvant. In accordance with another aspect of the invention, the present 'invention provides for the prevention or treatment of Thl- mediated immune diseases comprising the step of administering a composition comprising the above peptide as an active ingredient to a subject (subject).
본 발명의 방법은 상술한 조성물을 이용하기 때문에, 이 둘 사이의 공통된 내용은 본 명세서의 과도한 복잡성을 회피하기 위하여 그 기재를 생략한다. Since the method of the present invention utilizes the composition described above, common content between the two is omitted in order to avoid excessive complexity of the present specification.
【발명의 효과】 【Effects of the Invention】
본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다: The features and advantages of the present invention are summarized as follows:
(0 본 발명의 펩타이드는 천연의 CTLA-4의 기능과 동일하거나 또는 유사한 기능을 할 수 있을 뿐 아니라 작은 크기에 따라 피부 투과도가 매우 우수하다.
(ii) 본 발명의 펩타이드는 항원제시세포 표면 단백질 (CD80 및 CD86)에 효과적으로 결합하여 T 세포의 활성화를 억제하고, 이에 따라 염증성 사이토카인 (예컨대, IL-2 및 IFN-Y)의 발현을 억제할 수 있다. (0) The peptides of the present invention not only have the same or similar functions as those of natural CTLA-4, but also have excellent skin permeability depending on the small size. (ii) the peptides of the present invention effectively bind to antigen presenting cell surface proteins (CD80 and CD86) to inhibit activation of T cells, thereby inhibiting expression of inflammatory cytokines (eg, IL-2 and IFN-Y) can do.
(Hi) 이에， 본 발명의 펩타이드를 포함하는 조성물은 Thl-매개 면역 질환의 예방， 치료 또는 개선하는 데 매우 우수한 효능올 발휘한다. (Hi) Accordingly, the composition comprising the peptide of the present invention exhibits very good efficacy in preventing, treating or ameliorating Thl-mediated immune diseases.
(iv) 따라서, 본 발명의 펩타이드의 우수한 활성 및 안정성은, 의약， 의약외품 및 화장품에 매우 유용하게 적용될 수 있다. (iv) Therefore, the excellent activity and stability of the peptide of the present invention can be very usefully applied to medicines, quasi-drugs and cosmetics.
【도면의 간단한 설명】 [Brief Description of Drawings]
도 1은 본 발명의 합성예에 의하여 제조된 서열목록 제 1서열과 제 2서열의 펩타이드의 고성능 액상 크로마토그래피 분석 결과를 나타내는 그래프이다. 1 is a graph showing the results of high performance liquid phase chromatographic analysis of the peptides of the first and second sequence listing prepared by the synthesis example of the present invention.
도 2a는 본 발명의 합성예에 의하여 제조된 서열목록 제 1서열의 펩타이드를 처리하여 마우스 비장세포의 성장 억제 효과를 보여주는 ΜΊΤ 어세이 결과이다. Figure 2a is a ΜΊΤ assay results showing the growth inhibitory effect of mouse splenocytes by treating the peptide of SEQ ID NO: 1 prepared by the synthesis example of the present invention.
도 2b는 본 발명의 합성예에 의하여 제조된 서열목록 제 2서열의 펩타이드를 처리하여 마우스 비장세포의 성장 억제 효과를 보여주는 MTT 어세이 결과이다. Figure 2b is a result of the MTT assay showing the effect of inhibiting the growth of mouse splenocytes by treating the peptide of SEQ ID NO: 2 prepared by the synthesis example of the present invention.
도 3a는 본 발명의 합성예에 의하여 제조된 서열목록 제 1서열의 펩타이드를 처리한 JNK와 p38의 인산화 억제 효과를 보여주는 웨스턴 블롯팅 결과이다. Figure 3a is a Western blotting result showing the phosphorylation inhibitory effect of JNK and p38 treated with the peptide of SEQ ID NO: 1 prepared by the synthesis example of the present invention.
도 3b는 본 발명의 합성예에 의하여 제조된 서열목록 제 2서열의 펩타이드를 처리한 JNK와 p38의 인산화 억제 효과를 보여주는 웨스턴 블롯팅 결과이다. Figure 3b is a Western blotting result showing the phosphorylation inhibitory effect of JNK and p38 treated with the peptide of SEQ ID NO: 2 prepared by the synthesis example of the present invention.
도 4a는 본 발명의 합성예에 의하여 제조된 서열목록제 1서열의 펩타이드를 처리하였을 때 T 세포 활성화 연관되는 IFN-Y와 IL-2의 발현 억제 효과를 보여주는 RT-PCR( reverse transcript ion— polymerase chain reaction) 결과이다 . Figure 4a is RT-PCR (reverse transcript ion—polymerase showing the inhibitory effect of IFN-Y and IL-2 expression associated with T cell activation when the peptide of SEQ ID NO: 1 prepared by the synthesis example of the present invention chain reaction).
도 4b는 본 발명의 합성예에 의하여 제조된 서열목록 제 2서열의 펩타이드를 처리하였을 때 T 세포 활성화 연관되는 IFN-Y와 IL-2의 발현 억제 효과를 보여주는 RT-PCR 결과이다.
도 5a는 본 발명의 합성예에 의하여 제조된 서열목록 제 1서열의 펩타이드에 대한 열안정성을 보여주는 결과이다. Figure 4b is a result of RT-PCR showing the inhibitory effect of IFN-Y and IL-2 expression associated with T cell activation when the peptide of the second sequence prepared by the synthesis example of the present invention. Figure 5a is a result showing the thermal stability for the peptide of SEQ ID NO: 1 prepared by the synthesis example of the present invention.
도 5b 는 본 발명의 합성예에 의하여 제조된 서열목록 제 2서열의 펩타이드에 대한 열안정성을 보여주는 결과이다. Figure 5b is a result showing the thermal stability for the peptide of SEQ ID NO: 2 prepared by the synthesis example of the present invention.
【발명을 실시하기 위한 구체적인 내용 1 [Specific contents 1 to carry out invention
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다. 실시예 Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These examples are only for illustrating the present invention in more detail, it will be apparent to those skilled in the art that the scope of the present invention is not limited by these examples in accordance with the gist of the present invention. . Example
합성예 1: Ser-Thr"Gly-Lys-Lys-Ala-VaK서열목록 제 1서열)의 합성 Synthesis Example 1 Synthesis of Ser-Thr "Gly-Lys-Lys-Ala-VaK Sequence Listing # 1
클로로 트리틸 클로라이드 레진 (Chloro trityl chloride resin; CTL resin, Nova biochem Cat No. 01-64-0021) 700 mg을 반웅용기에 넣고 메틸렌 클로라이드 (MC) 10 ml를 가하여 3분 동안 교반하였다. 용액을 제거하고 디메틸포름 아마이드 (DMF) 10 ml를 넣어 3분 동임: 교반한 후 다시 용매를 제거하였다. 반웅기에 10 ml의 디클로로메탄 (DCM) 용액을 넣고 Fmoc-Val- OHCBachem, Swiss) 200 mmole 및 디이소프로필 에틸아민 (DIEA) 400 誦 ole을 넣은 후 교반하여 잘 녹이고， 1시간 동안 교반하면서 반웅시켰다. 반웅 후 세척하고 메탄올과 DIEA(2:1)를 DCM에 녹여 10분 동안 반웅시키고 과량의 DCM/DMF(1:1)로 세척하였다. 용액을 제거하고 DMF를 10 ml 넣어 3분 동안 교반한 후 다시 용매를 제거하였다. 탈보호 용액 (20%의 피페리딘 (Piperidine)/DMF) 10 ml를 반웅용기에 넣고 10분 동안 상온에서 교반한 후 용액을 제거하였다. 동량의 탈보호 용액을 넣고 다시 10분 동안 반응을 유지한 후 용액을 제거하고 각각 3분씩 DMF로 2회， MC로 1회, DMF로 1회 세척하여 Val-CTL 레진을 제조하였다. 새로운 반웅기에 10 ml의 DMF 용액을 넣고 Fmoc-Ala-0H(Bachem, Swiss) 200 醒 ole, HoBt 200 讓 ole 및 Bop 200 隱 ole을 넣은 후 교반하여 잘 녹였다. 반웅기에 400 mmole DIEA(N,N- Diisopropylethylamine)를 분획으로 2번에 걸쳐 넣은 후 모든 고체가 녹을 때까지 최소 5분 동안교반하였다. 녹인 아미노산흔합용액을 탈보호된 레진이
있는 반웅용기에 넣고 1시간 동안 상온에서 교반하면서 반웅시 켰다. 반웅액을 제거하고 DMF 용액으로 3회 5분씩 교반한 후 제거하였다. 반웅 레진을 소량 취하여 카이저 테스트 (Nihydrin test )를 이용하여 반웅 정도를 점검하였다. 탈보호 용액으로 상기와 같이 동일하게 2번 탈보호 반웅시켜 Ala-Val-CTL 레진올 제조하였다. DMF와 MC로 층분히 세척하고 다시 한 번 카이저 테스트를 수행한 다음 상기와 동일하게 아래의 아미노산 부착 실험을 수행하였다. 선정된 아미노산 서 열에 의거하여 Fmoc-Lys(Boc) , Fmoc-Lys(Boc) , Fmoc-Gly, Fmoc-Thr(tBu) 및 Fmoc-Ser(tBu) 순으로 연쇄반응을 시켰다. Fmoc-보호기를 탈보호 용액으로 10분씩 2번 반웅시킨 후 잘 세척하여 제거하였다. 무수초산과 DIEA, HoBt (Hydroxybenzotriazole)를 넣어 1시간 동안 아세틸화를 수행한 뒤 제조된 펩티딜 레진을 DMF, MC 및 메탄을로 각각 3번을 세척하고， 질소 공기를 천천히 흘려 건조한 후, 오산화인 (Phosphorus pent oxide, P205) 하에서 진공으로 감압하여 완전히 건조한뒤 탈루 용액 [TFA Tri f luroacet ic acid) 95%, 증류수 2.5%, 티오아니졸 (Thioanisole) 2.5%] 30 ml을 넣은 후 상온에서 가끔 흔들어주며 2시간 동안 반웅을 유지하였다. 필터링을 하여 레진올 거르고， 레진을 소량의 용액으로 세척한 후 모액과 합하였다. 감압을 이용하여 전체 볼륨이 절반 정도 남도록 증류하고 50 ml의 차가운 에테르를 가하여 침전을 유도 /분리하여 침전을 모으고， 2번 더 차가운 에테르로 세척하였다. 모액을 제거하고 질소 하에서 층분히 건조하여 정제 전 N¾-Ser-Thr-Gly-Lys-Lys-Ala- Val-0H 펩타이드 1을 0.069 g 합성하였다 (수율 : 89.9« . 분자량 측정기를 이용하여 측정시 분자량 689(이론값 ： 689.8 Da)를 얻을 수 있었다. 상술한 방법과 동일한 방법으로 서열목록 제 2서열의 펩타이드 2(N¾-Arg-Thr-Glu-Met- Pro-Thr-Leu-Tyr-OH)도 합성하였다. 분자량 측정기를 이용하여 측정시 분자량 1010(이론값: 1,010.2 Da)의 값을 얻을 수 있었다 (수율 ： 92.1%) . 700 mg of chloro trityl chloride resin (CTL resin, Nova biochem Cat No. 01-64-0021) was added to a semi-quilter and 10 ml of methylene chloride (MC) was added and stirred for 3 minutes. The solution was removed, and 10 ml of dimethylformamide (DMF) was added thereto for 3 minutes: After stirring, the solvent was again removed. Add 10 ml of dichloromethane (DCM) solution to the reaction machine, add 200 mmole of Fmoc-Val- OHCBachem, Swiss) and 400 誦 ole of diisopropyl ethylamine (DIEA), and stir to dissolve well. I was. After reaction, the resultant was washed, and methanol and DIEA (2: 1) were dissolved in DCM, reacted for 10 minutes, and washed with excess DCM / DMF (1: 1). The solution was removed, 10 ml of DMF was added thereto, stirred for 3 minutes, and then the solvent was removed again. 10 ml of deprotection solution (20% of Piperidine / DMF) was placed in a semi-agitator and stirred at room temperature for 10 minutes to remove the solution. After the same amount of deprotection solution was added to maintain the reaction for 10 minutes again, the solution was removed and washed 3 times with DMF, once with MC, once with DMF for 3 minutes each to prepare Val-CTL resin. 10 ml of DMF solution was added to the new reaction vessel, Fmoc-Ala-0H (Bachem, Swiss) 200 醒 ole, HoBt 200 讓 ole, and Bop 200 隱 ole were added to the solution and stirred to dissolve well. 400 mmole DIEA (N, N-Diisopropylethylamine) was added twice in fractions and stirred for a minimum of 5 minutes until all solids dissolved. The deprotected resin of the amino acid mixture solution The reaction was put in a semi-agitator and stirred at room temperature for 1 hour. The reaction solution was removed and stirred three times with DMF solution for 5 minutes and then removed. A small amount of reaction resin was taken and the reaction level was checked using a Nihydrin test. Ala-Val-CTL resin was prepared by deprotection reaction twice in the same manner as above with the deprotection solution. After washing thoroughly with DMF and MC and performing a Kaiser test once again, the following amino acid attachment experiments were performed. Based on the selected amino acid sequence, the chain reaction was performed in the order of Fmoc-Lys (Boc), Fmoc-Lys (Boc), Fmoc-Gly, Fmoc-Thr (tBu), and Fmoc-Ser (tBu). The Fmoc-protector was reacted twice with deprotection solution twice for 10 minutes and then washed well. After acetic anhydride, DIEA, and HoBt (Hydroxybenzotriazole) were added to acetylate for 1 hour, the prepared peptidyl resin was washed three times with DMF, MC and methane, and dried slowly with nitrogen air. After drying under reduced pressure under vacuum (Phosphorus pent oxide, P 2 0 5 ), add 30 ml of a fugitive solution (TFA Tri-Fluroacetic Acid) 95%, distilled water 2.5%, Thianisole 2.5%] Shake from time to time to maintain reaction for 2 hours. The resin was filtered off and the resin was washed with a small amount of solution and combined with the mother liquor. Distillation was carried out to reduce the total volume by half using reduced pressure, and 50 ml of cold ether was added to induce / separate the precipitation to collect the precipitate, and washed twice with cold ether. The mother liquor was removed and dried thoroughly under nitrogen to synthesize 0.069 g of N¾-Ser-Thr-Gly-Lys-Lys-Ala- Val-0H peptide 1 prior to purification (yield: 89.9 «. 689 (theoretical value: 689.8 Da) was obtained, and peptide 2 (N¾-Arg-Thr-Glu-Met-Pro-Thr-Leu-Tyr-OH) of SEQ ID NO: 2 was prepared by the same method as described above. The molecular weight 1010 (theoretical value: 1,010.2 Da) was obtained by the measurement using a molecular weight measuring instrument (yield: 92.1%).
【표 1】 Table 1
비장에서 분리한 비장세포 (splenocyte)를 각각 100 mm의 세포 배양 디쉬 (코닝, 미국)에 RPMI1640 배양액을 이용하여 배양하였다. 상기 배양된 세포주들을 배양용기 바닥에서 떼어낸 후 원심 분리하여 세포 침전물만을 모았다. 이를 FBS가 함유되지 않은 RPIM1640 배양액에 다시 현탁한 후， 48- 웰 조직 배양용 플레이트에 각 웰 당 3 X 107 세포가 되도록 넣고 24시간 동안 37°C, 5% C02 조건 하에서 배양하였다. 24시간 뒤 혈청올 완전히 제외한 동일한 배양액으로 배지를 교환한 뒤 표준을 잡기위한 공 시료와 합성 펩타이드를 10% 증류수에 멸균상태로 녹인 뒤 1 μ ΐ/ml, 10 μ 1/ml 및 50 μ 1/ml의 농도로 48시간을 위와 동일 조건으로 배양하였다. 배양이 완료된 후 배양 상층액에 ΜΊΤ 어세이 용액을 넣고 3시간을 37 °C, 5% C02 조건 하에서 배양하였다. 3시간 후 배양액을 완전히 제거하고 DMS0 500 μ ΐ에 세포를 녹인 뒤 , 자외선 540 nm에서 흡광도를 측정하여 세포의 생존 상태를 측정하였다. 도 2a 및 도 2b에서 확인할 수 있듯이， 본 발명의 펩타이드들은 비장세포의 성장을 효과적으로 억제하였다. 시험예 2: 합성 펩타이드인 CIL4(서열목록 제 1서열) 및 CTL8(서열목록 게 2서열) 시그널 촉진 효과 확인 Splenocytes isolated from the spleens were cultured in RPMI1640 medium in 100 mm cell culture dishes (Corning, USA), respectively. The cultured cell lines were removed from the bottom of the culture vessel and centrifuged to collect only cell precipitates. After resuspending in the RPIM1640 culture medium containing no FBS, it was put in a 48-well tissue culture plate to 3 X 10 7 cells per each well and incubated for 24 hours at 37 ° C, 5% C0 2 conditions. After 24 hours, the medium was changed to the same medium except for the serum completely.The blank sample and the synthetic peptide for sterilization were sterilely dissolved in 10% distilled water, and then 1 μΐ / ml, 10 μ1 / ml and 50 μ1 / 48 hours at the concentration of ml was incubated under the same conditions. After the incubation was completed, the Μ 용액 Τ assay solution was added to the culture supernatant and incubated for 3 hours under 37 ° C. and 5% CO 2 conditions. After 3 hours, the culture solution was completely removed and the cells were dissolved in 500 μΐ of DMS0, and the cell viability was measured by measuring the absorbance at 540 nm. As can be seen in Figures 2a and 2b, the peptides of the present invention effectively inhibited the growth of splenocytes. Test Example 2: Confirmation of the synergistic effect of the synthetic peptides CIL4 (SEQ ID NO: 1) and CTL8 (SEQ ID NO: 2)
쥐의 비장에 분리한 비장세포에 합성예 1에서 합성한 펩타이드들을 처리하고 1시간 경과 후, Con ACconcanavalin A, 양성 대조군; 시그마， 미국)를 15분 동안 처리하여 T 세포에 활성을 유도하였다. 상기 세포를 수득하여 CTLA-4 단백질에 관여하는 MAPK인 JNK와 p38의 인산화 정도를 포스포 (phospho)— JNK 및 포스포 -p38의 항체 (Cell Signaling, 미국)를 이용한 웨스턴 블롯팅을 통해 확인하였다. 본 발명의 펩타이드들로 전ᅳ 처리하였을 경우, JNK는 펩타이드 처리 농도 -의존적으로 인산화 저해 효과를 나타냈다 (도 3a 및 도 3b) 또한， T 세포가 활성 시 발현이 유도되는
것으로 알려진 IFN( interferon)- γ 및 IL-2의 발현 정도를 각각의 특이적인 프라이머를 사용한 RT-PCR를 통해 관찰하였다. T 세포가 활성화됨으로서 발현이 증가되는 IFN-Y와 IL-2는 본 발명의 펨타이드들에 의해 발현이 저해되는 것을 확인할 수 있었다 (도 4a 및 4b). 시험예 1 및 2의 실험 결과를 종합하면, 본 발명의 펩타이드가 JNK와 p38의 인산화를 억제하고 T 세포 활성화 억제에 의한 IFN-γ 및 IL-2의 발현 감소를 유도함으로써 염증반웅이 억제된다는 것을 확인할 수 있었다. 시험예 3 ： 제조된 펩타이드의 열 안정성 1 hour after treatment of the peptides synthesized in Synthesis Example 1 to the splenocytes isolated in the mouse spleen, Con ACconcanavalin A, positive control; Sigma, USA) was treated for 15 minutes to induce activity on T cells. The cells were obtained, and the degree of phosphorylation of JNK and p38, MAPKs involved in CTLA-4 protein, was confirmed by Western blotting using phospho-JNK and phospho-p38 antibodies (Cell Signaling, USA). . When transfected with the peptides of the present invention, JNK showed a peptide treatment concentration-dependent phosphorylation inhibitory effect (FIG. 3A and FIG. 3B). The expression levels of IFN (interferon) -γ and IL-2, which were known to have been observed, were observed by RT-PCR using respective specific primers. It was confirmed that IFN-Y and IL-2 whose expression is increased by activating T cells are inhibited by femide of the present invention (FIGS. 4A and 4B). In summary, the experimental results of Test Examples 1 and 2 show that the inflammatory response is suppressed by the peptide of the present invention inhibiting the phosphorylation of JNK and p38 and inducing the expression of IFN-γ and IL-2 by inhibition of T cell activation. I could confirm it. Test Example 3 Thermal Stability of the Prepared Peptides
합성예 1를 통해 제조된 서열목록 제 1서열 및 서열목록 제 2서열의 펩타이드와 NIBSC JK)에서 구입한 표준품 성장인자 (CTLA-4)를 0.1 mg/ml와 농도의 인산완층용액으로 제조하였다. 준비된 용액을 1 ml씩 유리 바이알에 넣은 후 37°C에서 정치하였다. 37°C에 정치된 용액을 0, 5, 10, 20, 30, 50, 그리고 70일째에 샘플링하여 날자별로 원심 분리하여 변성된 펩타이드나 단백질을 제거하고 상층액을 취해 HPLC를 이용해 정량을 하였다 (도 5a 및 도 5b). 실시예 1: 나노화 펩타이드의 제조 The standard growth factor (CTLA-4) purchased from the peptides of SEQ ID NO: 1 and SEQ ID NO: 2 prepared according to Synthesis Example 1 and NIBSC JK) was prepared in 0.1 mg / ml and phosphate buffer solution. The prepared solution was placed in a glass vial of 1 ml each and left at 37 ° C. The solution which was left at 37 ° C was sampled at 0, 5, 10, 20, 30, 50, and 70 days and centrifuged by date to remove denatured peptide or protein, and the supernatant was taken and quantified using HPLC ( 5a and 5b). Example 1: Preparation of Nanonized Peptides
상기 합성예에서 얻은 펩타이드 2종을 50 mg을 각각 정확히 칭량한 뒤 증류수 500 mi로 층분히 교반하여 용해하였다. 배합체 용액을 레시틴 5 g, 소듐 을리에이트 (sodium oleate) 0.3 ml, 에탄올 50 ml 그리고 약간의 유상과 함께 흔합한 후, 총량이 1 L가 되도록 증류수로 양을 맞추고 마이크로플루다이저로 고압을 이용하여 유화시켜 사이즈 100 nm 정도의 나노좀을 제조하였다. 제조된 나노좀은 최종 농도가 약 50 ppm으로 단독 혹은 복합적으로 화장품 제조용으로 사용되었다. 제형예 1: 유연화장수 The two peptides obtained in the above synthesis example were accurately weighed 50 mg , and then dissolved in 500 mi of distilled water. The blend solution was mixed with 5 g of lecithin, 0.3 ml of sodium oleate, 50 ml of ethanol and a slight oil phase, then the volume was adjusted to 1 L with distilled water and high pressure with a microfluidizer. To emulsify to prepare a nanosome of about 100 nm size. The prepared nanosomes were used for cosmetic preparation alone or in combination with a final concentration of about 50 ppm. Formulation Example 1: Softening Longevity
상기 실시예 1에서 제조된 펩타이드 나노좀을 포함하며， 하기 조성으로 이루어진 유연화장수를 일반적인 화장수 제조방법에 따라 제조하였다.
【표 2】 Including the peptide nanosomes prepared in Example 1, the flexible cosmetics consisting of the following composition was prepared according to a general lotion manufacturing method. Table 2
상기 실시예 1에서 제조된 펩타이드 나노좀을 포함하며, 하기 조성으로 이루어진 영양크림을 일반적인 보습크림 제조방법에 따라 제조하였다. Peptide nanosomes prepared in Example 1, the nutrition cream consisting of the following composition was prepared according to the general moisturizing cream manufacturing method.
【표 3】 Table 3
상기 실시예 1에서 제조된 펩타이드 나노좀을 포함하며, 하기 조성으로 이루어진 영양화장수를 일반적인 화장수 제조방법에 따라 제조하였다. Including the peptide nanosomes prepared in Example 1, nutrient lotion consisting of the following composition was prepared according to a general lotion manufacturing method.
【표.4】 [Table. 4]
상기 실시예 1에서 제조된 4종의 펩타이드 나노좀 중 적어도 한 종류의 나노좀을 포함하며, 하기 조성으로 이루어진 에센스를 일반적인 에센스 제조방법에 따라 제조하였다 At least one kind of nanosomes of the four peptide nanosomes prepared in Example 1 was prepared, and an essence consisting of the following composition was prepared according to a general essence preparation method.
【표 5】 Table 5
Claims
【청구항 1】 [Claim 1]
서열목록 제 1서열 및 계 2서열에 기재된 아미노산 서열로 구성된 군으로부터 선택되는 1종의 아미노산 서뎔로 이루어진 T-세포 활성 억제용 펩타이드. Peptide for inhibiting T-cell activity consisting of one amino acid sequence selected from the group consisting of amino acid sequences described in SEQ ID NO: 1 sequence and series 2 sequence.
【청구항 2】 [Claim 2]
제 1 항에 있어서， 상기 펩타이드는 인간 CTLA-4(Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4； CD 152) 단백질에서 유래된 것을 특징으로 하는 펩타이드. The peptide of claim 1, wherein the peptide is derived from human CTLA-4 (Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4; CD 152) protein.
【청구항 3】 [Claim 3]
제 1 항에 있어서, 상기 펩타이드는 JNK(c-Jun N-terminal kinase) 및 p38의 인산화를 억제하는 것을 특징으로 하는 펩타이드. The peptide of claim 1, wherein the peptide inhibits phosphorylation of c-Jun N-terminal kinase (JNK) and p38.
【청구항 4】 [Claim 4]
제 1 항에 있어서, 상기 펩타이드는 염증성 사이토카인의 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는 펩타이드. The peptide of claim 1, wherein the peptide inhibits the expression of inflammatory cytokines.
【청구항 5】 [Claim 5]
제 4 항에 있어서， 상기 염증성 사이토카인은 인터페론- γ (interferon- , IFN- γ ) 또는 인터루킨 -2(inter leukin-2)의 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는 펩타이드. The peptide of claim 4, wherein the inflammatory cytokine inhibits the expression of interferon- γ (interferon-, IFN- γ) or inter leukin-2.
【청구항 6】 [Claim 6]
제 1 항에 있어서， 상기 펩타이드의 N- 또는 C-말단은 아세틸기， 플루오레닐 메톡시 카르보닐기， 포르밀기， 팔미토일기， 미리스틸기， 스테아릴기 및 폴리에틸렌글리콜 (PEG)로 구성된 군으로부터 선택되는 보호기를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 템타이드.
The N- or C-terminus of the peptide according to claim 1, wherein the N- or C-terminus of the peptide is selected from the group consisting of acetyl group, fluorenyl methoxy carbonyl group, formyl group, palmitoyl group, myristyl group, stearyl group and polyethylene glycol (PEG). A tempide further comprising a protecting group selected.
【청구항 7】 [Claim 7]
상기 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항의 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 Thl—매개 면역 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물. . A pharmaceutical composition for preventing or treating Thl-mediated immune disease, comprising the peptide of any one of claims 1 to 6 as an active ingredient. .
[청구항 8】 [Claim 8]
제 7 항에 있어서, 상기 Thl—매개 면역 질환은 이식 거부， 자가면역질환 또는 염증 질환인 것올 특징으로 하는 약제학적 조성물. 8. The pharmaceutical composition of claim 7, wherein the Thl-mediated immune disease is transplant rejection, autoimmune disease or inflammatory disease.
【청구항 9】 [Claim 9]
제 8 항에 있어서， 상기 자가면역질환은 루프스, 류마티스 다발성 근육통， 공피증， 베게너육아종증， 측두 동맥염, 저온형글로불린혈증 (cryoglobulinemia), 심상성 천포창 (pemphigus vulgaris), 갑상선염 또는 다발성 경화증인 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물. The method of claim 8, wherein the autoimmune diseases are lupus, rheumatoid polymyalgia, scleroderma, Wegener's granulomatosis, temporal arteritis, cryoglobulinemia, pemphigus vulgaris, thyroiditis or multiple sclerosis Pharmaceutical composition.
【청구항 10】 [Claim 10]
제 8 항에 있어서, 상기 염중 질환은 천식， 습진, 건선， 여드름， 알러지， 류마티스 관절염, 건선 관절염 (psoriatic arthritis), 아토피성 피부염， 아토피성 비염， 알레르기성 피부염, 만성 부비동염 또는 지루성 피부염 (seborrheic dermatitis)을 포함하는 염증성 피부질환; 크론병 또는 궤양성 대장염을 포함하는 염증성 장질환; 강직성 척추염 (ankylosing spondylitis), 폐혈증, 폐혈성 쇼크， 맥관염 및 활액낭염을 포함하는 급성 또는 만성 염증 질환; 골다공증; 골관절염; 제 1형 또는 제 2형 당뇨병; 고형암; 아테롬성 동맥경화증; HIV(human immunodeficiency virus) 또는 인플루엔자 바이러스에 의한 바이러스 감염 ; 또는 엡스타인-바 바이러스， 거대세포 바이러스, 헤르페스 바이러스 (herpes simplex virus)에 의한 만성 바이러스 감염인 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물. The disease of claim 8, wherein the disease is asthma, eczema, psoriasis, acne, allergy, rheumatoid arthritis, psoriatic arthritis, atopic dermatitis, atopic rhinitis, allergic dermatitis, chronic sinusitis or seborrheic dermatitis Inflammatory skin diseases, including; Inflammatory bowel disease, including Crohn's disease or ulcerative colitis; Acute or chronic inflammatory diseases including ankylosing spondylitis, pneumonia, pulmonary shock, vasculitis and bursitis; osteoporosis; Osteoarthritis; Type 1 or type 2 diabetes; Solid cancer; Atherosclerosis; Viral infection with human immunodeficiency virus (HIV) or influenza virus; Or a chronic viral infection caused by Epstein-Barr virus, cytomegalovirus, herpes simplex virus.
【청구항 11】 [Claim 11]
상기 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항의 펩타이드를
유효성분으로 포함하는 조성물을 대상 (subject)에게 투여하는 단계를 포함하는 Thl-매개 면역 질환의 예방 또는 치료 방법 . The peptide of any one of claims 1 to 6 A method of preventing or treating a Thl-mediated autoimmune disease comprising administering to a subject a composition comprising as an active ingredient.
【청구항 12】 [Claim 12]
제 11 항에 있어서， 상기 Thl-매개 면역 질환은 이식 거부, 자가면역질환 또는 염증 질환인 것을 특징으로 하는 방법. The method of claim 11, wherein the Thl-mediated immune disease is transplant rejection, autoimmune disease or inflammatory disease.
【청구항 13] [Claim 13]
제 12 항에 있어서， 상기 자가면역질환은 루프스， 류마티스 다발성 근육통, 공피증， 베게너육아종증， 측두 동맥염， 저온형글로불린혈증 (cryoglobulinemia；)， 심상성 천포창 (pemphigus vulgaris), 갑상선염 또는 다발성 경화증인 것을 특징으로 하는 방법. 13. The method of claim 12, wherein the autoimmune disease is lupus, rheumatoid polymyopathy, scleroderma, Wegener's granulomatosis, temporal arteritis, cryoglobulinemia, pemphigus vulgaris, thyroiditis or multiple sclerosis. How to feature.
【청구항 14】 [Claim 14]
제 12 항에 있어서， 상기 염증 질환은 천식， 습진, '건선, 여드름， 알러지 , 류마티스 관절염， 건선 관절염 (psoriatic arthritis), 아토피성 피부염， 아토피성 비염, 알레르기성 피부염， 만성 부비동염 또는 지루성 피부염 (seborrheic dermatitis)을 포함하는 염증성 피부질환; 크론병 또는 궤양성 대장염을 포함하는 염증성 장질환; 강직성 척추염 (ankylosing spondylitis), 폐혈증， 폐혈성 쇼크, 맥관염 및 활액낭염을 포함하는 급성 또는 만성 염증 질환; 골다공증; 골관절염; 제 1형 또는 제 2형 당뇨병; 고형암; 아테롬성 동맥경화증; HIV(human i隱 unodef iciency virus) 또는 인플루엔자 바이러스에 의한 바이러스 감염; 또는 엡스타인-바 바이러스, 거대세포 바이러스， 헤르페스 바이러스 (herpes simplex virus)에 의한 만성 바이러스 감염인 것을 특징으로 하는 방법.
13. The method of claim 12, wherein the inflammatory disease is asthma, eczema, psoriasis, acne, allergies, rheumatoid arthritis, psoriatic arthritis (psoriatic arthritis), atopic dermatitis, atopic rhinitis, allergic dermatitis, chronic sinusitis, or seborrheic dermatitis (seborrheic inflammatory skin diseases, including dermatitis); Inflammatory bowel disease, including Crohn's disease or ulcerative colitis; Acute or chronic inflammatory diseases including ankylosing spondylitis, pneumonia, pulmonary shock, vasculitis and bursitis; osteoporosis; Osteoarthritis; Type 1 or type 2 diabetes; Solid cancer; Atherosclerosis; Viral infection by human i (unodef iciency virus (HIV) or influenza virus; Or chronic viral infection with Epstein-Barr virus, cytomegalovirus, herpes simplex virus.
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|---|---|---|---|---|
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Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20110098444A1 (en) * | 2008-03-14 | 2011-04-28 | Cel-Sci Corporation | Methods of preparation and composition of peptide constructs useful for treatment of rheumatoid arthritis |
| US8309083B2 (en) * | 1999-02-03 | 2012-11-13 | Amgen, Inc. | Polypeptides involved in immune response |
Family Cites Families (1)
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|---|---|---|---|---|
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-
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Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8309083B2 (en) * | 1999-02-03 | 2012-11-13 | Amgen, Inc. | Polypeptides involved in immune response |
| US20110098444A1 (en) * | 2008-03-14 | 2011-04-28 | Cel-Sci Corporation | Methods of preparation and composition of peptide constructs useful for treatment of rheumatoid arthritis |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| ALLEN, S. D. ET AL.: "Therapeutic peptidomimetic strategies for autoimmune diseases : costimulation blockade", THE JOURNAL OF PEPTIDE RESEARCH, vol. 65, no. 6, 2005, pages 591 - 604 * |
| BID WELL III, GENE L. ET AL.: "Therapeutic peptides for cancer therapy. Part I-peptide inhibitors of signal transduction cascades", EXPERT OPINION ON DRUG DELIVERY, vol. 6, no. 10, 2009, pages 1033 - 1047 * |
| ZHOU, CHUN-LEI ET AL.: "The latest developments in synthetic peptides with immunoregulatory activities", PEPTIDES, vol. 32, no. 2, 2011, pages 408 - 414 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108834417A (en) * | 2016-04-15 | 2018-11-16 | 凯尔格恩有限公司 | Peptide and application thereof with anti-inflammatory activity |
| CN108834417B (en) * | 2016-04-15 | 2022-01-11 | 凯尔格恩有限公司 | Peptides with anti-inflammatory activity and uses thereof |
| WO2022211486A1 (en) * | 2021-03-30 | 2022-10-06 | 주식회사 소젠 | Composition for preventing, treating, or ameliorating viral infectious diseases, comprising cytokine inhibitor, active oxygen production inhibitor, and scavenger complex as active ingredients |
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