WO2013079546A1 - Composition topique comprenant une association d'au moins un extrait d'algue bleue avec au moins un acide alpha hydroxyle ou un de ses sels - Google Patents

Composition topique comprenant une association d'au moins un extrait d'algue bleue avec au moins un acide alpha hydroxyle ou un de ses sels Download PDF

Info

Publication number
WO2013079546A1
WO2013079546A1 PCT/EP2012/073860 EP2012073860W WO2013079546A1 WO 2013079546 A1 WO2013079546 A1 WO 2013079546A1 EP 2012073860 W EP2012073860 W EP 2012073860W WO 2013079546 A1 WO2013079546 A1 WO 2013079546A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
topical composition
composition according
lactate
salt
skin
Prior art date
Application number
PCT/EP2012/073860
Other languages
English (en)
Inventor
Yves Brunel
Nathalie Castex-Rizzi
Jacques Dubois
Original Assignee
Pierre Fabre Dermo-Cosmetique
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=47297209&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=WO2013079546(A1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Pierre Fabre Dermo-Cosmetique filed Critical Pierre Fabre Dermo-Cosmetique
Priority to ES12797837T priority Critical patent/ES2666306T5/es
Priority to EP12797837.7A priority patent/EP2785314B2/fr
Publication of WO2013079546A1 publication Critical patent/WO2013079546A1/fr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/02—Algae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
    • A61K8/36—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A61K8/365—Hydroxycarboxylic acids; Ketocarboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders

Definitions

  • the present invention relates to the field of blue algae and their use associated with at least one alpha hydroxylated acid or a salt thereof in a composition intended for topical use, of a pharmaceutical or cosmetic nature.
  • Blue-green algae are photosynthetic prokaryotes that use light energy as a source of energy. Their genetic information is carried by a cyclic molecule of deoxyribonucleic acid and plasmids. The oxidation of water in oxygen during photosynthesis is a property that completely separates them from other photosynthetic prokaryotes, purple and green bacteria.
  • blue algae is due to the presence of phycocyanines. If the soluble pigments in acetone (chlorophylls and carotenoids) are extracted from a blue-green algae culture, the blue color becomes perfectly visible.
  • Blue algae absorb mostly in blue and green. These wavelengths are active for photosynthesis. The maximum absorption takes place in blue ( ⁇ 500 nm), which allows blue algae to draw a greater chemical energy from the light energy absorbed.
  • Blue-green algae is a genetically and morphologically very heterogeneous group. They exhibit a great morphological diversity. Some are unicellular, spherical or sticky and multiply in binary divisions, others are filamentous and propagate by rupture of the vegetative filament or germination of akinetes (spores). This heterogeneity has allowed them to colonize the vast majority of terrestrial or aquatic ecosystems, including extreme hot, salty and hyper-salty and alkaline environments. There are terrestrial, aquatic, free and symbiotic forms.
  • AAH Hydroxylated acids
  • -OH hydroxyl function
  • the main AAH currently used in the cosmetics industry are lactic acid, glycolic acid, and citric acid, but there are others.
  • Alphahydroxy acids include, but are not limited to, lactic acid (50-21-5), glycolic acid (79-14-1), citric acid (77-92- 9), malic acid (6915-15-7), alpha-hydroxyethanoic acid, alpha-hydroxyoctanoic acid, alpha-hydroxycaprylic acid, mixed fruit acids, triple fruit acids, tri-alpha hydroxy fruit acids, alpha hydroxy complexes of plant extracts, L-alpha hydroxy acid and the glycomer of cross-linked fatty acids.
  • Lactic acid is used as an exfoliating agent (for sensitive skin), it can act as an antibacterial agent, it enters into the composition of the hydro-lipidic skin film and thus contributes to the maintenance of the pH of the skin, it thus avoids the bacterial infections and participates in the hydration of the skin. Lactic acid has the property of improving the absorption of cosmetics such as sun lotions.
  • This acid has the lowest molecular weight in the AAH category. It is a crystalline solid, soluble in water. It is widely used in various skin care products. The most common application of this acid concerns chemical peels at a concentration of 20 to 70% when prescribed and applied by dermatologists or up to 10% in products intended for private use. Glycolic acid is indicated for the treatment of acne, wrinkles, hyper-pigmentation and hyperkeratosis. When used in keratosis, its mechanism of action is to weaken lipid binding in dead skin cells, to reduce intercellular cohesion, and ultimately to exfoliate the stratum corneum.
  • Citric acid is present in fruits such as lemons, oranges and grapefruit. Citric acid has applications in many anti-aging or anti-wrinkle creams. He is also a good astringent and helps in the treatment of unsightly spots. It also improves the effectiveness of moisturizing principles for the skin. Citric acid is also used in hair products.
  • compositions according to the invention also extend to those containing other salts of organic acids and in particular to the following salts:
  • Tartrate (tartaric acid salt)
  • the basic work of the invention has particularly focused on the combination of blue algae and lactic acid salts, but the blue algae can be associated with any other alpha hydroxylated acid or a salt thereof.
  • Lactic acid (2-hydroxypropanoic acid) is an organic acid that plays a role in various biochemical processes. It is a hydroxyl carboxylic acid, of chemical formula C 3 H 6 O 3 . Lactic acid is present in milk, but also in wine, some fruits and vegetables, and in the muscles. A lactate is a salt of this acid.
  • Lactic acid is also in the form of salts: salt of sodium, potassium, magnesium and calcium. Its salts are in powder form and are also soluble in aqueous medium. It acts as a bacteriostatic agent especially on pathogenic bacteria such as salmonella (or listeria), but it is especially for their moisturizing and moisturizing properties that lactates have been used in cosmetics for a long time.
  • lactates In addition to their undeniable moisturizing properties, lactates also act as good buffers that help stabilize the pH and help maintain the microbial stability of the formulations, due to these bacteriostatic properties mentioned above.
  • the skin is formed of three layers, the hypodermis, the deepest, the dermis and the epidermis.
  • the latter is a keratinised squamous epithelium that protects the body from mechanical, chemical and biological aggressions, prevents water loss by limiting the evaporation of the water contained in the skin and participates in the photo-protection by adsorbing a part of the skin. ultraviolet rays.
  • These vital functions are collectively referred to as "epidermal barrier functions”.
  • the epidermis consists mainly of keratinocytes. These proliferate at the level of the basal layer and then undergo a vectorized differentiation program to successively constitute the thorny and then granular layers. Finally, during this process of keratinization, the cells degenerate and transform into corneocytes. The accumulation of corneocytes forms the outermost cellular layer of the epidermis, called the stratum corneum or stratum corneum. The stratum corneum is primarily responsible for the epidermal barrier functions, due to its mechanical strength, tightness and content.
  • the dermis is a connective tissue forming the skin with the epidermis and the hypodermis. Its thickness is variable according to the body regions.
  • the dermis also consists of mucopolysaccharides or glycosaminoglycans, proteins that in the manner of a sponge will capture water in the dermis and thus act as a reservoir of hydration.
  • the dermis contains various cells including fibroblasts and cells of the immune system.
  • the dermis is irrigated by the blood through an important vascular system. It supports the nutrition of the epidermis by diffusion.
  • the dermis In addition to its nutritive role, the dermis also plays a key role in thermoregulation and healing thanks to the numerous exchanges that exist between the dermis and the epidermis. The links between these two constituents of our skin have been demonstrated through the presence of epidermal receptors in the dermis such as CD44 and the many regulatory and interaction phenomena that exist between these two tissues.
  • the skin is the element of the human body that is most in contact with the external environment.
  • Skin aging is determined by genetic and environmental factors.
  • Intrinsic or chronological aging corresponds to unavoidable changes related to age; menopause or more precisely estrogen deficiency accelerates chronological skin aging. It affects the skin like other organs.
  • Extrinsic aging is related to environmental factors, including the sun.
  • actinic aging or heliodermia corresponds to characteristic changes in the skin related to chronic sun exposure and sits on the photo-exposed areas.
  • whitish scars in the form of a star may also be whitish scars in the form of a star (pseudo-stellar scar) especially on the forearms as a result of minimal trauma.
  • Skin aging results from complex phenomena determined genetically and by environmental factors that lead to abnormalities of the genome and the cellular and tissue organization.
  • the determining element of skin aging seems to be the production of reactive oxygen species leading to oxidative stress.
  • a composition containing a combination of at least one extract of blue algae and at least one alpha hydroxylated acid or one of its salts allows the prevention of signs of aging and more. especially skin aging.
  • Skin aging is understood to mean, in particular, a loss of elasticity of the tissues (loss of property to recover its initial state after stretching), a change in the texture of the skin (thickening or thinning), the decrease in collagen synthesis, the production reactive oxygen species leading to oxidative stress and surface dryness of the skin, the appearance of superficial abnormalities (wrinkles, brown spots, small vessels, reduction of vascularization and dermal circulation) , ).
  • vascular endothelial growth factor also called VEGF
  • MMPs extracellular matrix degrading enzymes
  • composition containing a combination of at least one extract of blue algae and at least one alpha hydroxylated acid or one of its salts allows the prevention of signs of skin aging through hydration.
  • epidermis for the improvement of any form of skin dryness; for strengthening the barrier functions of the epidermis by promoting healing and regeneration of the epidermis.
  • hydration of the epidermis is meant the improvement or maintenance of the water balance of the epidermis.
  • any form of cutaneous dryness is meant any improvement in the hydration of the epidermis, notably characterized by a lack of water in the stratum corneum, a hydrolipidic film situated on the surface which is too thin and which no longer protects the skin. skin, lack of sebum. This effect could be demonstrated through the stimulation of the production of hyaluronic acid and its CD44 receptor.
  • the object of the present invention therefore relates to a topical composition, pharmaceutical or cosmetic, containing at least one extract of blue algae and at least one alpha hydroxylated acid or a salt thereof in combination with at least one acceptable excipient for the application topically on the skin and integuments and mucous membranes.
  • the present invention will relate to a topical composition containing at least one extract of blue algae and at least one lactate salt in combination with at least one excipient allowing its topical application, in particular a pharmaceutically or cosmetically acceptable excipient.
  • the blue alga used will be Phormidium sp.
  • the aqueous organic acid salt which is soluble in an aqueous medium may be chosen from: a magnesium salt and / or a calcium salt and / or a sodium salt.
  • the aqueous organic-soluble organic acid salt used will contain at least one salt which is a magnesium salt.
  • the aqueous organic-soluble organic acid salt used will contain at least one salt which is a calcium salt.
  • composition according to the invention will comprise a combination of magnesium salt and calcium salt.
  • the composition according to the invention will comprise a combination ranging from 1/2 of magnesium lactate and 1/2 of calcium lactate to a combination of 1/4 of magnesium lactate and 3/4 of calcium lactate, ie a ratio of from 1 to 1 to 1 to 3 by weight.
  • the composition according to the invention will comprise a combination of 2/3 of magnesium lactate and 1/3 of calcium lactate, ie a ratio of 2 to 1 by weight.
  • the blue algae extract present in the composition will represent between 0.001% and 0.1% by weight of the total weight of the composition.
  • the salt (s) of alpha hydroxyl acid present in the composition represent (s), together or each considered separately, between 0.001% and 0.01% by weight. weight of the total weight of the composition.
  • the composition comprises from 0.001 to 0.01% of a magnesium salt of hydroxylated acid, (preferentially magnesium lactate) and from 0.001 to 0.01% by weight.
  • a calcium salt of hydroxylated alpha acid preferentially calcium lactate.
  • the composition according to the invention will preferably be in the form of a care product and / or make-up of the skin of the body or of the face, the lips, the eyelashes, the eyebrows, the hair, leather, nails or mucous membranes; a suntan or self-tanning product; a hair product including coloring, conditioning and / or hair care.
  • the composition according to the invention will comprise at least one liquid phase, which may comprise at least one compound chosen from oils and / or solvents of mineral, animal, vegetable or synthetic origin, carbonated, hydrocarbon-based, fluorinated and / or silicone-based, serum, volatile or non-volatile, alone or in a mixture.
  • oils and / or solvents of mineral, animal, vegetable or synthetic origin, carbonated, hydrocarbon-based, fluorinated and / or silicone-based, serum, volatile or non-volatile, alone or in a mixture.
  • composition according to the invention will be used in the prevention of all the signs related to the aging of the body, in particular those affecting the skin and / or the cutaneous appendages and / or the mucous membranes.
  • composition according to the invention will be used in the prevention of the signs of skin aging.
  • composition according to the invention is used to promote the production of VEGF (vascular endothelial growth factor) for its use in revascularization of the dermis and improvement of blood flow in the vessels.
  • VEGF vascular endothelial growth factor
  • the composition according to the invention is used to promote the natural production of elastin fibers.
  • composition according to the invention is used to promote the natural production of collagen.
  • the composition according to the invention is used to promote the natural production of hyaluronic acid.
  • composition according to the invention is used for its antioxidant properties.
  • composition according to the invention will be used in the prevention and repair of diseases of the oral mucosa.
  • the present invention also relates to a preparation process according to the invention comprising the following steps:
  • the biomass is harvested after a culture time of 10 to 20 days under conditions of adequate temperature and brightness,
  • the biomass is washed and then finely ground.
  • the aqueous fraction is separated from cell debris by centrifugation or filtration,
  • the dry product is obtained by removal of water by a suitable technique, which may for example be: a lyophilization process, atomization or drying in a low temperature ventilated oven. Determination of the antioxidant activity and concentrations used:
  • SOD-like activity measurements are carried out using a "Kit SOD525" measurement kit marketed by OXIS INTERNATIONAL - BIOXYTECH.
  • the Applicant realized each measurement of the antioxidant activity in triplicates.
  • Mg 2+ lactate has a significant "SOD-like" activity from a concentration of 3 mg / l, 5 ml (ie 2 mg / ml). At this concentration, an activity of 1.27 USOD / ml is measured. For concentrations greater than 2 mg / ml, the "SOD-like" activity measured increases to 1.74USOD / ml and 2.52USOD / ml for respective concentrations of 2.66 mg / ml and 4 mg / ml.
  • the "SOD-like" activity measured is not significant (respectively 0.14USOD / ml, 0.09USOD / ml, 0.09USOD / ml and 0.69USOD / ml) taking into account the detection threshold of the method used.
  • the "SOD-like" activity measured is not significant (respectively OUSOD / ml, OUSOD / ml and OUSOD / ml, 0.21USOD / ml, 0.38USOD / ml and 0, 61USOD / ml).
  • the results show that the Mg 2+ lactate salt (regardless of the concentrations) exhibits optimal "SOD-like" activity at a pH value of 7.0.
  • the "SOD-like” activity of the Mg 2+ lactate salt corresponding to the biological pH (pH 7.4) is slightly lower than the optimal "SOD-like” activity.
  • the results confirm the results obtained previously with regard to the minimum concentration threshold 2, 5 mg / l, 5 ml (ie 1.67 mg / ml) required for Mg 2+ lactate salt, to obtain a significant "SOD-like" activity. .
  • the Applicant has decided to carry out "SOD-like” activity measurements on mixtures of the two salts of Mg 2+ lactate and Ca 2+ lactate, in order to demonstrate a possible synergy.
  • the batches N ° 007 and PF (1,2,3,4 and 5) are batches prepared according to the specifications of the laboratories PIERRE FABRE starting from batches of phormidium sp.
  • the biomass is harvested after a culture time of 10 to 20 days under conditions of adequate temperature and brightness.
  • the biomass is washed and then finely ground.
  • the aqueous fraction is separated from cell debris by centrifugation or filtration.
  • the dry product is obtained by elimination of water by an appropriate technique, which may for example be: a freeze-drying, atomization or drying process in a low temperature ventilated oven.
  • the "SOD-like" activity increases to 1, 21USOD525 / ml 1, 93USOD525 / ml, 3, 57USOD525 / ml, 4, 29USOD52 / ml and, USOD52S / ml, respectively.
  • Mg 2+ lactate appears to significantly increase the "SOD-like" activity of the extract (up to 29USOD525 / ml for 2mg / ml). It is important to note that in the case of Mg 2+ lactate, this increase in "SOD-like” activity seems exponential and seems to reach a maximal level of activity starting from 2 mg / ml.
  • Figure 1 Representation of the keratinocyte cell migration (in IF) after migration for 24 hours of HaCaT keratinocytes.
  • Figure 2 Representation of the expression of secreted VEGF by HaCaT keratinocytes after migration for 24 hours.
  • Figure 3 Representation of the expression of hyaluronic acid secreted by HaCaT keratinocytes after migration for 24 hours by colorimetric assay.
  • FIG. 4 Immunolabeling of the effect of the "association" on the expression of the CD44 receptor on HaCaT keratinocytes incubated for 24 hours.
  • the CD 44 is visualized by a green fluorescence and the nucleus of the cells by a blue fluorescence (DAPI staining).
  • FIG. 5 Representation of the anti-radical activity of various extracts of blue-green algae incubated for 24 hours with respect to the lipoperoxidation induced by a chemical stress of 1 hour on L929 fibroblasts.
  • Figure 6 Representation of the expression of elastin and collagen I (mRNA) on fibroblasts made senescent by oxidative stress (H 2 0 2 ) after 72 hours. "The association" is pre-incubated for 16 hours.
  • Figure 7 Representation of the expression of matrix metalloproteinases (MMP-1, MMP-3 and MMP-12) (mRNA) on fibroblasts made senescent by replication "The association" is preincubated for 72 hours.
  • MMP-1, MMP-3 and MMP-12 matrix metalloproteinases
  • the tests were carried out with an association, hereinafter referred to as "the association", composed of an extract of blue algae of the Phormidium sp. for 1/3 by weight and a mixture of magnesium lactate and calcium lactate (in a ratio of 2 to 1) for 2/3 by weight.
  • the association composed of an extract of blue algae of the Phormidium sp. for 1/3 by weight and a mixture of magnesium lactate and calcium lactate (in a ratio of 2 to 1) for 2/3 by weight.
  • the migration of keratinocytes plays a key role in tissue repair and healing.
  • the Applicant has used HaCaT keratinocytes as a cellular model.
  • Figure 1 Representation of the keratinocyte cell migration (in IF) after migration for 24 hours of HaCaT keratinocytes.
  • the induction of keratinocyte migration is very clearly distinguished in comparison with TGF beta 5ng / ml.
  • the extracts of blue algae alone or the lactate salts alone induce a moderate migration (respectively + 33% and + 37%) visible in Figure 1.
  • VEGF Vascular Endothelial Growth Factor
  • Vascular endothelial growth factor has several important biological roles. For example, it limits the proliferation of endothelial cells, activates the formation of new blood vessels (angiogenesis) and increases vascular permeability. In doing so, the secreted VEGF secreted by keratinocytes contributes to the maintenance of a healthy skin by supplying nutrients to the cells and promotes healing.
  • Angiogenesis is a mechanism of neovascularization arising from a preexisting capillary network. It is particularly important and indispensable during many physiological processes such as embryonic development, placental implantation or tissue repair.
  • Figure 2 Representation of the expression of secreted VEGF by HaCaT keratinocytes after migration for 24 hours.
  • Blue algae thanks to the induction of VEGF secretion, therefore favor the revascularization of tissues and the regeneration of these tissues.
  • the composition according to the invention thus contributes to the maintenance of a healthy skin, promotes healing and helps to fill wrinkles.
  • the CD44 antigen represents a family of type I transmembrane glycoproteins.
  • Hyaluronic acid is a good friend, distributed widely among connective, epithelial and nervous tissues, but found in all tissues. It is one of the main components of the extracellular matrix. It contributes significantly to the proliferation and migration of cells.
  • the Applicant In order to perform the assay of the release of hyaluronic acid by the cultured keratinocytes, the Applicant assayed the amount of secreted AH present in the supernatants in a HaCaT keratinocyte migration experiment as described in Example 1.
  • the hyaluronic acid is then measured by competitive ELISA analyzed in colorimetry and expressed in ng / ml in comparison with a non-stimulated control and a positive control (EGF). The results of these measurements are shown in Figure 3.
  • Figure 3 Representation of the expression of hyaluronic acid secreted by HaCaT keratinocytes after migration for 24 hours by colorimetric assay.
  • the CD 44 is visualized by a green fluorescence and the nucleus of the cells by a blue fluorescence (DAPI staining).
  • association induces a higher CD44 receptor expression than basal expression.
  • the plasma membrane is the main and first target of oxygen free radicals (OIRs). It is the site of increased peroxidation because of its high lipid content.
  • OIRs oxygen free radicals
  • the Applicant has carried out an in vitro assay of the complexes between the lipid oxidation products and the thiobarbituric acid. These complexes are called TBARS (for Thiobarbituric Acid Reactive Substances) and give its name to the test: BARS test.
  • the Applicant has treated, for 1 hour, a fibroblast line, L929, with a complex composed of hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) and iron (Fe 2+ / Fe 3+ ) thus restoring the reaction of Fenton, source of RLO and more particularly of hydroxyl radical (OH °): H 2 O 2 + Fe 2+ OH ° + OH " + Fe 3+ .
  • This model made it possible to evaluate the antiradical activity of various extracts of blue-green algae, and to analyze their protective power vis-à-vis the lipoperoxidation induced by a chemical stress.
  • the Applicant has determined the antioxidant activity of the various combinations according to the invention after 24 hours of incubation by measuring the protection of the various compositions against lipid peroxidation in comparison with the protection provided by vitamin E as a positive control.
  • FIG. 5 Representation of the anti-radical activity of various extracts of blue-green algae incubated for 24 hours with respect to lipoperoxidation induced by chemical stress of 1 hour on L929 fibroblasts.
  • the Applicant has been able to show that the blue algae extract alone had no measurable activity while the lactate salts alone had a low activity (16%).
  • the combination blue algae / lactate salts according to the invention thus has a good antioxidant activity.
  • Type I collagen is a major fibrillar type collagen. It is present in the skin, bones, tendons, cornea and internal organs. Collagen I represents 90% of the collagen contained in the human body. It consists of three polypeptide chains helically wound in a part of the molecule.
  • Elastin is a fibrous protein rich in proline.
  • the elastic fibers that give the skin its elasticity are consisting of an elastin core surrounded by a sleeve of microfibrils.
  • Figure 6 Representation of the expression of elastin and collagen I (mRNA) on fibroblasts made senescent by oxidative stress (H 2 0 2 ) after 72 hours. "The association" is pre-incubated for 16 hours.
  • Example 7 Inhibition of MMP-1, MMP-3, MMP-12
  • Matrix metalloproteinase or matrix metalloproteinases are enzymes that degrade the constituents of the matrix and cause connective tissues, especially the skin.
  • metalloproteinases are zinc enzymes with endopeptidase activity, i.e. they hydrolyze proteins.
  • the majority of metalloproteinases are secreted by cells in the extracellular space. There are many types (about thirty) including:
  • the interstitial collagenase or MMP1 synthesized by fibroblasts or polynuclear, it degrades the fibrillar collagens I, II and III.
  • MMP12 mainly expressed by macrophages that plays a role in the phenomena of inflammation and scarring.
  • Figure 7 Representation of the expression of matrix metalloproteinases (MMP-1, MMP-3 and MMP-12) (mRNA) on fibroblasts made senescent by replication "The association" is preincubated for 72 hours.
  • MMP-1, MMP-3 and MMP-12 matrix metalloproteinases
  • the combination reveals a true inhibition of matrix metalloproteinase synthesis (MMP-1, MMP-3 and MMP-12) in senescent fibroblasts. By slowing the degradation of the constituents of the extracellular matrix
  • MMP-1, MMP-3 and MMP-12 matrix metalloproteinase synthesis
  • cetearyl cetearyl glucoside, glyceryl sterate, PEG100 stearate, potassium cetyl phosphate, sodium stearoyl glutamate, arachidyl alcohol, arachidyl glucoside, cetyl alcohol.
  • disodium EDTA disodium EDTA, tetrasodium EDTA, trisodium ethylenediamine diccinate.
  • mica tin oxide, titanium dioxide.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Botany (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

La présente invention a pour objet l'association d'au moins un extrait d'algue bleue et au moins un acide alpha hydroxylé ou un de ses sels dans une composition topique. La présente invention a aussi pour objet l'utilisation, notamment topique, des actifs susnommés, seuls ou en combinaison, pour favoriser la production de VEGF, pour son utilisation à la revascularisation de l'épiderme, pour favoriser la production naturelle de collagène, de fibres d'élastine et d'acide hyaluronique et pour leurs utilisations comme antioxydant et pour la prévention des signes de vieillissement de l'organisme.

Description

COMPOSITION TOPIQUE COMPRENANT UNE ASSOCIATION D'AU MOINS UN EXTRAIT D'ALGUE BLEUE AVEC AU MOINS UN ACIDE ALPHA HYDROXYLÉ
OU UN DE SES SELS La présente invention concerne le domaine des algues bleues et leur utilisation associée à au moins un acide alpha hydroxylé ou un de ses sels dans une composition destinée à un usage topique, de nature pharmaceutique ou cosmétique.
Les algues bleues (ou cyanophycées , ou cyanobactéries ) sont des procaryotes photosynthétiques qui utilisent l'énergie lumineuse comme source d'énergie. Leur information génétique est portée par une molécule cyclique d'acide désoxyribonucléique et des plasmides . L'oxydation de l'eau en oxygène au cours de la photosynthèse est une propriété qui les sépare totalement des autres procaryotes photosynthétiques, les bactéries pourpres et vertes .
Le nom d'algues bleues est dû à la présence de phycocyanines . Si l'on extrait les pigments solubles dans l'acétone (chlorophylles et caroténoïdes ) d'une culture d'algues bleues la couleur bleue devient alors parfaitement visible.
Leur couleur résulte de la présence de ces pigments (chlorophylles vertes, carotènes rouges et oranges, xanthophylles jaunes, phycocyanines bleues et phycoérythrines rouges) et de mucilage.
Les algues bleues absorbent surtout dans le bleu et dans le vert. Ces longueurs d'onde sont actives pour la photosynthèse. L'absorption maximale se réalise dans le bleu (< 500nm) ce qui permet aux algues bleues de tirer une plus grande énergie chimique de l'énergie lumineuse absorbée.
Les algues bleues constituent un groupe génétiquement et morphologiquement très hétérogène. Elles présentent une grande diversité morphologique. Certaines sont unicellulaires , sphériques ou en bâtonnets et se multiplient par divisions binaires, d'autres sont filamenteuses et se propagent par rupture du filament végétatif ou par germination des akinètes ( spores ) . Cette hétérogénéité leur a permis de coloniser la grande majorité des écosystèmes terrestres ou aquatiques y compris les milieux extrêmes chauds, salés et hyper salés et alcalins. Il existe des formes terrestres, aquatiques, libres et symbiotiques .
Dès 1962 une publication (Lefèvre/Laporte : Cyanostimulines et cicatrisation) décrivait les effets étonnants du jus d'algue bleu Phormidium Uncinatum, issue de bassins thermaux de Bagnères de Bigorre en France, sur la prolifération cellulaire (FR1345584) . Des études cliniques démontraient 1' accélération de la cicatrisation de plaies par des emplâtres de cette algue (FR2674M) .
Les acides alpha hydroxylés (AAH) sont des acides carboxyliques portant une fonction hydroxyle (-OH) ) sur le carbone adjacent du groupe carboxylique . Ces acides ont trouvé un large éventail d'applications dans l'industrie cosmétique comme elles se sont révélées être sans danger sur la peau. En raison de leur caractère acide, ils sont utilisés comme agent exfoliant pour le lissage de la peau. Cette propriété des acides alpha-hydroxylés est particulièrement utilisée en cosmétique pour retarder l'apparition des rides.
Les principaux AAH qui sont actuellement utilisés dans l' industrie cosmétique sont l'acide lactique, l'acide glycolique, et l'acide citrique mais il en existe d'autres.
Les acides alpha-hydroxylés comprennent, sans s'y limiter, les composés suivants : l'acide lactique (50-21-5), l'acide glycolique (79-14-1), l'acide citrique (77-92-9) , l'acide malique (6915-15-7), l'acide alpha-hydroxyéthanoïque , l'acide alpha-hydroxyoctanoïque, l'acide alpha-hydroxycaprylique , , les acides mixtes de fruits, les triples acides de fruits, les tri- alpha hydroxy acides de fruits, les complexes d'alpha hydroxy d'extraits de plantes, le L-alpha hydroxy acide et le glycomère d'acides gras réticulés.
- Acide lactique : L' acide lactique est utilisé comme agent exfoliant (pour les peaux sensibles), il peut agir comme un agent antibactérien, il entre dans la composition du film hydro-lipidique cutané et contribue ainsi au maintien du pH de la peau, il évite ainsi les infections bactériennes et participe à l'hydratation de la peau. L'acide lactique a la propriété d'améliorer l'absorption de cosmétiques tels que les lotions solaires .
- Acide Glycolique :
Cet acide a le plus faible poids moléculaire dans la catégorie des AAH . C'est un solide cristallin, soluble dans l'eau. Il est largement utilisé dans divers produits de soins de la peau. L'application la plus courante de cet acide concerne les peelings chimiques à une concentration de 20 à 70% lorsqu' ils sont prescrits et appliqués par les dermatologues ou jusqu'à 10% dans les produits destinés à l'usage des particuliers. L'acide glycolique est indiqué dans le traitement de l'acné, des rides, de l'hyper-pigmentation et de 1 ' hyperkératose . Lorsqu'il est utilisé dans la kératose, son mécanisme d' action consiste à affaiblir la liaison de lipides dans les cellules mortes de la peau, à diminuer la cohésion intercellulaire et, au final, à exfolier la couche cornée
- Acide citrique :
L' acide citrique est présent dans les fruits comme les citrons, les oranges et les pamplemousses. L'acide citrique trouve des applications dans de nombreux anti-vieillissements ou crèmes anti-rides . Il est également un bon astringent et aide dans le traitement des taches disgracieuses. Il améliore également l'efficacité des principes hydratants pour la peau. L' acide citrique est également utilisé dans les produits capillaires.
Les compositions selon l'invention s'étendent également à celles contenant d'autres sels d'acides organiques et en particulier aux sels suivants :
-L'acétate (sel d'acide acétique)
-Le propionate (sel d'acide propionique)
-Le butyrate (sel d'acide butyrique) -Le pyruvate (sel d'acide pyruvique)
-Le formate (sel d'acide formique)
-Le tartrate (sel d'acide tartrique)
-Le malate (sel d'acide malique)
-Le fumarate (sel d'acide fumarique)
-Le sorbate (sel d'acide sorbique)
Les travaux à la base de l' invention ont tout particulièrement porté sur l'association d'algue bleue et de sels d'acide lactique, mais les algues bleues peuvent être associées à tout autre acide alpha hydroxylé ou un de ses sels.
L'acide lactique (acide 2-hydroxypropanoïque) est un acide organique qui joue un rôle dans divers processus biochimiques. C'est un acide carboxylique hydroxylé, de formule chimique C3H603. L'acide lactique est présent dans le lait, mais également dans le vin, certains fruits et légumes, et dans les muscles. Un lactate est un sel de cet acide.
L' acide lactique se présente aussi sous forme de sels : sel de sodium, de potassium, de magnésium et de calcium. Ses sels sont sous forme de poudre et sont également solubles en milieu aqueux. Il agit comme agent bactériostatique notamment sur des bactéries pathogènes comme la salmonelle (ou la listeria) , mais c'est surtout pour leurs propriétés humectantes et hydratantes que les lactates sont utilisé en cosmétique depuis longtemps .
En plus de leurs propriétés hydratantes incontestables les lactates agissent aussi comme de bons tampons qui aident à stabiliser le pH et aide à maintenir la stabilité microbienne des formulations, due à ces propriétés bactériostatiques évoquées précédemment .
La peau est formée de trois couches, l'hypoderme, le plus profond, le derme et l'épiderme. Ce dernier est un épithélium malpighien kératinisé qui protège le corps des agressions mécaniques, chimiques et biologiques, empêche les pertes hydriques en limitant 1 ' évaporation de l'eau contenue dans la peau et participe à la photo-protection en adsorbant une partie des rayons ultra-violets . Ces fonctions vitales sont appelées collectivement «fonctions de barrière épidermique» .
L' épiderme est constitué majoritairement de kératinocytes . Ceux-ci prolifèrent au niveau de la couche basale puis subissent un programme de différenciation vectorisé pour constituer successivement les couches épineuse puis granuleuse. Finalement, au cours de ce processus de ké r a t i ni s a t i o n , les cellules dégénèrent et se transforment en cornéocytes . L'accumulation des cornéocytes forme la couche cellulaire la plus externe de 1' épiderme, appelée couche cornée ou stratum corneum. Le stratum corneum est le principal responsable des fonctions de barrière épidermique, en raison de sa résistance mécanique, de son étanchéité et de son contenu.
Le derme est un tissu de type conjonctif formant la peau avec l' épiderme et l'hypoderme. Son épaisseur est variable selon les régions corporelles.
Son caractère conjonctif vient de sa composition :
Il contient des macromolécules de type protéique, en particulier fibres de collagène, élastine et de fibronectine conférant à la peau souplesse, élasticité et assise. Ces fibres protéiques font de lui une véritable assise pour l' épiderme dont le vieillissement est à l'origine de l'apparition des rides et autres signes du vieillissement cutané.
Le derme est également constitué de mucopolysaccharides ou glycosaminoglycanes , protéines qui à la manière d'une éponge vont capter l'eau dans le derme et ainsi agir comme réservoir d ' hydratation .
Enfin le derme contient diverses cellules dont les fibroblastes et les cellules du système immunitaire.
Le derme est irrigué par le sang à travers un important système vasculaire. Il prend en charge la nutrition de 1 ' épiderme par diffusion.
Outre son rôle nutritif, le derme joue également un rôle primordial dans la thermorégulation et dans la cicatrisation grâce aux nombreux échanges qui existent entre le derme et 1' épiderme. Les liens entre ces deux constituants de notre peau ont pu être démontrés à travers la présence de récepteurs épidermiques dans le derme tel que CD44 et les nombreux phénomènes de régulation et d' interaction qui existent entre ces deux tissus.
La peau est l' élément du corps humain qui est le plus en contact avec l'environnement extérieur.
Malgré les travaux réalisés à ce jour, le vieillissement cutané est encore mal connu.
Le vieillissement cutané est déterminé par des facteurs génétiques et environnementaux.
On distingue 2 types de vieillissement :
Le vieillissement intrinsèque ou chronologique correspond aux changements inévitables liés à l'âge; la ménopause ou plus précisément la carence en œstrogènes accélère le vieillissement cutané chronologique. Il affecte la peau comme les autres organes .
Il correspond aux modifications observées sur les zones protégées du soleil chez tous les individus mais avec des variations entre les personnes qui sont génétiquement déterminées .
Ce type de vieillissement se caractérise par :
une sécheresse de la peau souvent à l'origine de démangeaisons
une réduction de l'élasticité cutanée
- une diminution de l'épaisseur cutanée (atrophie du derme et de l'épiderme)
des ridules et de fines rides
réduction de la vascularisation du derme et ralentissement de l'activité métabolique.
une fragilité cutanée et capillaire à l'origine d'ecchymoses et de plaies au moindre traumatisme.
Avec le vieillissement, on observe une réduction de la sudation et de l'hydratation cutanée du fait d'une réduction du nombre de follicules pileux et des glandes annexes de la peau. Le vieillissement extrinsèque est lié aux facteurs de l'environnement, notamment le soleil. Le terme de vieillissement actinique ou héliodermie correspond à des modifications caractéristiques de la peau liées à l'exposition solaire chronique et siège sur les zones photo-exposées .
Sur les zones de la peau exposées au soleil (visage, dos des mains, avant-bras) apparaissent des tâches pigmentées, des rides et des rougeurs.
Si les dommages s'intensifient, on observe un épaississement de l'épiderme et la peau apparaît jaunâtre, plus sèche, les rides se creusent ; la peau présente une pigmentation irrégulière avec des tâches brunes et blanches.
Il peut exister aussi des cicatrices blanchâtres en forme d'étoile (pseudo-cicatrice stellaire) en particulier sur les avant-bras à la suite de traumatismes minimes.
D' autres facteurs interviennent : le tabac, la consommation d'alcool et une mauvaise alimentation.
Le vieillissement cutané résulte de phénomènes complexes déterminés génétiquement et par des facteurs de l'environnement qui conduisent à des anomalies du génome et de l'organisation cellulaire et tissulaire.
L' élément déterminant du vieillissement cutané semble être la production d' espèces réactives de l' oxygène conduisant à un stress oxydatif.
Plusieurs études se sont intéressées au vieillissement cutané. Au cours du vieillissement cutané, on constate une altération du derme et de l'épiderme : diminution de la synthèse de collagène, altération des fibres élastiques, diminution de l'acide hyaluronique et de la vascularisation du derme.
De façon surprenante et inattendue, la demanderesse a montré qu'une composition contenant une association d'au moins un extrait d' algue bleue et d' au moins un acide alpha hydroxylé ou un de ses sels permettait la prévention des signes de vieillissement et plus particulièrement le vieillissement cutané. Par vieillissement cutané on entend notamment une perte d'élasticité des tissus (perte de la propriété à recouvrer son état initial après étirement), un changement de texture de la peau ( épaississement ou amincissement) , la diminution de la synthèse du collagène, la production d'espèces réactives de l'oxygène conduisant à un stress oxydatif et, en superficie, une sécheresse de la peau, l'apparition d'anomalies superficielles (rides, taches brunes, petits vaisseaux, réduction de la vascularisation et de la circulation du derme, ... ) .
Cette prévention à pu être démontrée au travers de la stimulation de la sécrétion du facteur de croissance de 1' endothélium vasculaire (aussi appelé VEGF) favorisant ainsi la revascularisation du derme et par conséquent la stimulation de la production naturelle de fibres de collagène et d' acide hyaluronique , l'inhibition d'enzymes dégradant la matrice extracellulaire (MMPs), et une activité anti-oxydante sur les fibroblastes .
La demanderesse a également montré qu'une composition contenant une association d' au moins un extrait d' algue bleue et d'au moins un acide alpha hydroxylé ou un de ses sels permettait la prévention des signes de vieillissement cutané au travers de l'hydratation de l'épiderme, pour l'amélioration de toute forme de sécheresse cutanée ; pour le renforcement des fonctions de barrière de l' épiderme en favorisant la cicatrisation et la régénération de l'épiderme.
Cet effet a pu être démontré au travers de la stimulation de la migration et de la prolifération des kératinocytes , de la vascularisation par la production de VEGF et de la synthèse d' acide hyaluronique .
Par hydratation de l'épiderme on entend l'amélioration ou le maintien de l'équilibre en eau de l'épiderme.
Par l'amélioration de toute forme de sécheresse cutanée on entend toute amélioration de l'hydratation de l'épiderme notamment caractérisée par un manque d' eau dans la couche cornée, un film hydrolipidique situé à la surface trop fin et qui ne protège plus la peau, le manque de sébum. Cet effet a pu être démontré au travers de la stimulation de la production d' acide hyaluronique et de son récepteur le CD44.
L'objet de la présente invention concerne donc une composition topique, pharmaceutique ou cosmétique, contenant au moins un extrait d' algue bleue et au moins un acide alpha hydroxylé ou un de ses sels en association avec au moins un excipient acceptable pour l' application topique sur la peau et les phanères et les muqueuses .
De préférence la présente invention concernera une composition topique contenant au moins un extrait d' algue bleue et au moins un sel de lactate en association avec au moins un excipient permettant son application topique, en particulier un excipient pharmaceutiquement ou cosmétiquement acceptable.
Dans un mode particulier de l'invention l'algue bleue utilisée sera de type Phormidium sp.
De préférence le sel d' acide organique biologique soluble en milieu aqueux pourra être choisi parmi : un sel de magnésium et/ou un sel de calcium et/ou un sel de sodium.
Préférentiellement le sel d' acide organique biologique soluble en milieu aqueux utilisé contiendra au moins un sel qui soit un sel de magnésium.
Préférentiellement le sel d' acide organique biologique soluble en milieu aqueux utilisé contiendra au moins un sel qui soit un sel de calcium.
Dans un mode particulier de l'invention la composition selon l' invention comprendra une association de sel de magnésium et de sel de calcium.
Préférentiellement la composition selon l'invention comprendra une association allant de 1/2 de lactate de magnésium et 1/2 de lactate de calcium à une association de 1/4 de lactate de magnésium et de 3/4 de lactate de calcium soit un rapport de 1 pour 1 à 1 pour 3 en poids .
Encore préférentiellement la composition selon l' invention comprendra une association de 2/3 de lactate de magnésium et de 1/3 de lactate de calcium, soit un rapport de 2 pour 1 en poids. De préférence l'extrait d'algue bleue présent dans la composition représentera entre 0,001 % et 0,1 % en poids du poids total de la composition.
Selon un mode de réalisation avantageux de l' invention, le ou les sel (s) d'acide alpha hydroxylé présent (s) dans la composition représente ( nt ) , ensemble ou chacun considéré séparément, entre 0,001 % et 0,01 % en poids du poids total de la composition.
Selon un mode de réalisation avantageux de l' invention, la composition comprend de 0,001 à 0,01 % d'un sel de magnésium d'acide alpha hydroxylé, (préférentiellement le lactate de magnésium) et de 0,001 à 0,01 % d'un sel de calcium d'acide alpha hydroxylé, (préférentiellement le lactate de calcium) .
Dans un mode de réalisation préféré la composition selon l'invention se présentera préférentiellement sous la forme d'un produit de soin et/ou de maquillage de la peau du corps ou du visage, des lèvres, des cils, des sourcils, des cheveux, du cuir cheveu, des ongles ou des muqueuses; d'un produit solaire ou autobronzant; d'un produit capillaire notamment de coloration, de conditionnement et/ou de soin des cheveux.
Préférentiellement la composition selon l'invention comprendra au moins une phase liquide, qui peut comprendre au moins un composé choisi parmi les huiles et/ou solvants d'origine minérale, animale, végétale ou synthétique, carbonés, hydrocarbonés, fluorés et/ou siliconés, sérum, volatils ou non volatils, seuls ou en mélange.
Dans un mode de réalisation préféré la composition selon 1' invention sera utilisée dans la prévention de tous les signes liés au vieillissement de l'organisme notamment ceux affectant la peau et/ou les annexes cutanées et/ou les muqueuses.
Préférentiellement la composition selon l'invention sera utilisée dans la prévention des signes de vieillissement cutané.
De préférence la composition selon l' invention est utilisée pour favoriser la production de VEGF (facteur de croissance de l' endothélium vasculaire) pour son utilisation à la revascularisation du derme et l' amélioration du flux sanguin dans les vaisseaux.
Préférentiellement la composition selon l'invention est utilisée pour favoriser la production naturelle de fibres d' élastine .
De préférence la composition selon l' invention est utilisée pour favoriser la production naturelle de collagène.
Préférentiellement la composition selon l'invention est utilisée pour favoriser la production naturelle d' acide hyaluronique .
De préférence la composition selon l' invention est utilisée pour ses propriétés anti-oxydantes .
Préférentiellement la composition selon l'invention sera utilisée dans la prévention et la réparation des affections de la muqueuse buccale.
La présente invention à également pour objet un procédé de préparation selon l'invention comportant les étapes suivantes :
1-Obtention de la biomasse d'algue bleue :
-La biomasse est récoltée après une durée de culture de 10 à 20 jours dans des conditions de température et de luminosité adéquates,
2-Obtention de l'extrait d'algue bleue:
-La biomasse est lavée puis broyée finement. La fraction aqueuse est séparée des débris cellulaires par centrifugation ou filtration,
3-La solution ainsi obtenue est additionnée :
-d' acide alpha hydroxylé ou un de ses sels -de maltodextrine servant de support
4-Le pH des échantillons est ramené à pH=6,5 en utilisant NaOH (0,1N),
5-Le produit sec est obtenu par élimination de l'eau par une technique appropriée, qui pourra par exemple être: un procédé de lyophilisation, d' atomisation ou de séchage sous étuve ventilée basse température. Détermination de l'activité anti-oxydante et des concentrations misent en oeuvre:
Afin de déterminer si le lactate de Mg2+ (et/ou le lactate de C a2+) présentai ( en ) t une activité spécifique (et plus particulièrement une activité anti-oxydante, «SOD-like») , plusieurs solutions de sels de lactate (lactate de Na+ ; lactate de Ca2+ et lactate de Mg2+) , à des concentrations différentes, ont été réalisées.
Pour chaque concentration et pour chaque sel, le pH ainsi que l'activité « SOD-like » ont été déterminés.
Des solutions mères (4,0mg/ml) de sels de lactate ont été réalisées à partir des produits suivants :
-lactate de Magnésium - L (FLUKA, p. m. =202 , 5g/mole)
-lactate de Calcium - L (SIGMA, p. m. =109, lg/mole)
-lactate de Sodium - D/L (SIGMA, p. m. =101, 2g/mole)
Chaque concentration a été réalisée par dilutions successives avec de l'eau distillée de pH=6,2.
Les mesures d'activité «SOD-like» sont effectuées à l'aide d'un kit de mesure «Kit SOD525» commercialisé par la société OXIS INTERNATIONAL - BIOXYTECH.
La demanderesse a réalisé chaque mesure de l'activité anti-oxydante en triplicatas .
Figure imgf000013_0001
Tableau 1
Les résultats obtenus montrent que le lactate de Mg2+ présente une activité «SOD-like» significative à partir d'une concentration de 3mg/l,5ml (soit 2mg/ml). A cette concentration, une activité de 1,27 USOD/ml est mesurée. Pour des concentrations supérieures à 2mg/ml, l'activité «SOD-like» mesurée augmente à l,74USOD/ml et 2,52USOD/ml pour des concentrations respectives de 2,66mg/ml et 4mg/ml.
En dessous de cette concentration ( 0 , 167mg/ml ; 0, 333mg/ml ; 0, 667mg/ml ; l, 333mg/ml), l'activité «SOD-like» mesurée n'est pas significative (respectivement 0,14USOD/ml ; 0,09USOD/ml ; 0,09USOD/ml et 0,69USOD/mI) compte tenu du seuil de détection de la méthode utilisée.
En ce qui concerne le lactate de Ca2+, les résultats obtenus montrent que ce sel présente une activité «SOD-like» significative ( 1 , llUSOD/ml ) pour une concentration de 4,0mg/ml.
En dessous de cette concentration ( 0 , 167mg/ml ; 0,333mg/ml ; 0,667mg/ml ; l,333mg/ml ; 2,0mg/ml et 2,66mg/ml), l'activité «SOD-like» mesurée n'est pas significative (respectivement OUSOD/ml ; OUSOD/ml et OUSOD/ml ; 0,21USOD/ml ; 0,38USOD/ml et 0 , 61USOD/ml ) .
Enfin, en ce qui concerne le lactate de Na+, les résultats obtenus montrent que ce sel ne présente aucune activité «SOD- like» significative quelle que soit la concentration (OUSOD/ml ; OUSOD/ml ; OUSOD/ml ; 0,21USOD/ml ; 0,38USOD/ml et 0,61USOD/ml pour des concentrations respectives de 0,167mg/ml ; 0,333mg/ml ; 0, 667mg/ml ; l,333mg/ml et 2,0mg/ml) .
En ce qui concerne le lactate de Mg2+, les résultats montrent que la dilution avec de l'eau distillée (pH=6,2) provoque une acidification progressive des solutions (de pH= 8,21 à pH=6, 44) .
Pour le lactate de Ca2+, les résultats obtenus montrent que la dilution avec de l'eau distillée (pH=6,2) provoque également une acidification progressive des solutions (de pH=6,86 à pH=6,2) .
Enfin, les résultats obtenus avec le lactate de Na+ montrent que la dilution avec de l'eau distillée (pH=6,2) provoque une alcalinisation progressive des solutions (de pH=5, 27 à pH=5, 58 ) .
Figure imgf000015_0001
Ta eau
En comparant les résultats obtenus lors de la mesure de l'activité «SOD-like» et lors de la mesure du pH des solutions testées (cf : tableau 1 et tableau 2) , la demanderesse a pu établir que:
-Le lactate de Mg2+ semble être le plus actif des 3 sels testés puisqu'il présente une activité significative ( 1, 27USOD/ml) pour une concentration de 3mg/ml, alors qu'à cette même concentration aucun des autres sels (lactate de Ca2+ et lactate de Na+ ne présentent une activité «SOD-like» équivalente (0,38USOD/ml et 0, 18USOD/ml) .
-Les activités «SOD-like» sont pratiquement toutes significatives (>1) pour des valeurs de pH proches et/ou supérieures à pH=7,0. En effet, en ce qui concerne le lactate de Mg2+, les valeurs significatives de l'activité , «SOD-like» (l,27USOD/ml ; l,74USOD/ml et 2,52USOD/ml) correspondent à des valeurs respectives de pH de pH=7,44 ; pH=7,53 et pH=8,21.
En ce qui concerne le lactate de Ca2+, une seule valeur significative de l'activité «SOD-like» ( 1 , llUSOD/ml ) correspond à une valeur de pH de pH=6,86. Enfin, en ce qui concerne le lactate de Na+, aucune valeur significative de l'activité «SOD- like» n'est observée étant donné le caractère très acide de ce sel.
La demanderesse à donc mis en évidence que le lactate de Mg2+ présente la plus forte activité «SOD-like» parmi les 3 sels de lactate testés. Cependant, compte tenu du fait qu ' il semble exister une corrélation étroite entre activité «SOD-like» et pH, des mesures complémentaires de l'activité «SOD-like» des trois sels, pour des valeurs de pH identiques ont été effectuées.
Le pH des échantillons à été ramené à pH=6,5 en utilisant NaOH (0,1N)
Figure imgf000016_0001
Tableau 3 La demanderesse a donc décidé d'effectuer des mesures d'activités «SOD-like» de ces deux sels, aux mêmes concentrations, et pour des valeurs de pH identiques (pH=6,0; pH=7,0 ; pH=7,4 et pH= 8,0).
Les solutions mères (4,0mg/ml) de sels de lactate de magnésium et de calcium sont les mêmes que décrites précédemment .
Les résultats obtenus (tableau 3) semblent démontrer que pour une même concentration en sel de lactate de Mg2+, les activités «SOD-like» mesurées varient linéairement en fonction du pH . Ce résultat confirme donc l'influence du pH sur L'activité «SOD-like».
En outre, les résultats montrent que le sel de lactate de Mg2+ (quelles que soient les concentrations) présente une activité «SOD-like» optimale pour une valeur de pH=7,0 . L'activité «SOD-like» du sel de lactate de Mg2+ correspondant au pH biologique (pH=7,4) est légèrement inférieure à l'activité «SOD-like» optimale. Enfin, les résultats confirment les résultats obtenus précédemment quant au seuil de concentration minimal 2, 5mg/l, 5ml (soit l,67mg/ml) nécessaire en sel de lactate de Mg2+, pour obtenir une activité «SOD-like» significative.
La demanderesse a décidé d'effectuer les mêmes mesures à pH=6 ; pH=7,0 et pH=7,5 pour le lactate de Ca2+.
Figure imgf000017_0001
Tableau 4 Les résultats obtenus (tableau 4) démontrent que pour une même concentration en sel de lactate de Ca2+, les activités «SOD- like» mesurées varient linéairement en fonction du pH . Ce résultat confirme donc l'influence du pH sur l'activité «SOD- like» du sel de lactate de Ca2+, comme pour le sel de lactate de Mg2+.
En outre, les résultats montrent que le sel de lactate de Ca2+ (quelles que soient les concentrations) présente une activité «SOD-like» optimale pour une valeur de pH égale à pH=6, 0.
Les résultats obtenus semblent d'une montrer que le pH joue un rôle dans l'activité «SOD-like» des sels de lactate de Mg2+ et de lactate de Ca2+. Pour ces deux sels, l'activité «SOD- like» maximale semble être déterminée pour une valeur de pH compris entre pH=6,0 et pH=7 , 0.
La Demanderesse a décidé de réaliser des mesures d'activités «SOD-like» sur des mélanges des deux sels de lactate de Mg2+ et lactate de Ca2+, afin de mettre en évidence une éventuelle synergie. Les mesures ont été réalisées pour une valeur de pH=6,5 qui correspond à une activité «SOD-like» maximale et qui constitue la valeur généralement utilisée dans les applications en dermo-cosmétique .
Les solutions mères (4 , Omg/ml) de sels de lactate de magnésium et de calcium sont les mêmes que décrites précédemment .
Figure imgf000018_0001
Tableau 6
Les résultats obtenus lors de cette expérience (tableau 5 et tableau 6) montrent que les activités «SOD-like» mesurées sur les mélanges de sels de lactate de Mg2+/ Ca2+ (1ères colonnes des tableaux 5 et 6) sont globalement toutes supérieures à la somme des activités des deux sels pris séparément (2èmes colonnes des tableaux 5 et 6) .
En outre, en comparant les résultats obtenus sur les différents mélanges, il apparaît que la proportion de type 3/1 (Mg2+/Ca2+) ( tableau 5) soit plus efficace que la proportion de type 1/1 (Mg2+/Ca2+ ) (tableau 6) .
En effet, même s'il existe une synergie pour les proportions de type 1/1, les activités obtenues dans la proportion 3/1 sont supérieures à celles obtenues dans les proportions 1/1 pour des concentrations totales équivalentes (ex: 0,3USOD/ml et l,0SUSOD/ml contre OUSOD/ml et OUSOD/ml pour des concentrations totales respectives de 0 , 667mg/ml et l, 333mg/ml en sels) . Ce résultat est en accord avec les expériences précédentes qui montraient que le sel de lactate de Mg2+ présentait une activité «SOD-like» supérieure à celle du sel de lactate de Ca2+.
De plus, il est important de noter qu'une activité de l,08USOD/ml est obtenue pour le mélange lmg lactate de Mg2+/0.33mg lactate Ca2+//ml.
Mesure l'activité «SOD-like» des lactates associés à des algues bleues :
Les lots N°007 et PF (1,2,3,4 et 5) sont des lots préparés selon le cahier des charges des laboratoires PIERRE FABRE à partir de lots de phormidium sp..
Obtention de la biomasse :
La biomasse est récoltée après une durée de culture de 10 à 20 jours dans des conditions de température et de luminosité adéquates .
Obtention de l'extrait d'algues bleues:
La biomasse est lavée puis broyée finement. La fraction aqueuse est séparée des débris cellulaires par centrifugation ou filtration .
La solution ainsi obtenue est additionnée :
-d' acide alpha hydroxylé ou un de ses sels
-de maltodextrine servant de support
Le pH des échantillons à été ramené à pH=6,5 en utilisant NaOH (0,1N)
Le produit sec est obtenu par élimination de l'eau par une technique appropriée, qui pourra par exemple être: un procédé de lyophilisation, d' atomisation ou de séchage sous étuve ventilée basse température.
L'ajout en sels à été réalisé par ajout des sels de lactate de magnésium et de calcium précédemment utilisés.
L'activité «SOD-like» des échantillons a été déterminée avec le même kit et selon la même méthode que précédemment. Résultat de l'activité «SOD-like» pour des associations contenant l'extrait de Phormidium et le mélange de sels de lactates .
Figure imgf000020_0001
Tableau 7
Les résultats présentés dans le tableau 7 représentent les différentes activités «SOD-like» mesurées pour le mélange de sels de lactate de Mg2+/Ca2+ en proportion 2/3 de lactate de Mg2+ et 1/3 de lactate de Ca2+.
On constate que la concentration optimale est obtenue pour une concentration du mélange actif de 0.30% (lot JCB2.
En outre, en comparant ces résultats avec ceux obtenus précédemment sur les différents mélanges, il apparaît que la proportion de type 2/1 (Mg2+/Ca2+) ( tableau 7) est plus efficace que les proportions de type 1/1 et 3/1 (Mg2+/Ca2+) .
Figure imgf000020_0002
Tableau 8 Les résultats obtenus lors de la surcharge du lot 007 au lactate de Mg2+ (Tableau 8) semblent montrer que lorsque le pH du lot 007 (activité, «SOD-like» initiale: 0 , 81USOD525 /ml ) est ramené à pH=6,5, l'activité augmente jusqu'à une valeur significative de 1,07 USOD525/ ml. En outre, les résultats obtenus semblent démontrer que l'ajout de lactate de Mg2+ dans l'extrait initial, augmente significativement son activité «SOD-like». En effet, en ajoutant respectivement 0,5mg/ ml de lactate de Mg2+ ; l,0mg/ml de lactate de Mg2+, l,5mg/ml de lactate de Mg2+, 2,0mg/ml de lactate de Mg2+ et 5,0mg/ml de lactate de Mg2+, l'activité «SOD-like» augmente respectivement à 1, 21USOD525/ml 1, 93USOD525/ml, 3, 57USOD525/ml, 4, 29USOD52/ml et , USOD52S/ml .
Enfin, il est important de noter que l'activité «SOD-like» de l'extrait semble atteindre un maximum ( 4 , 29USODs25/ml ) à partir d'une concentration de 2,0mg/ml de lactate de Mg2+.
Figure imgf000021_0001
Tableau 9 Les résultats obtenus (tableau 9) montrent que l'ajout de lactate de Ca2+ dans l'extrait initial, augmente significativement son activité «SOD-like».
En effet, en ajoutant respectivement 0,5mg/ml de lactate de Ca2+; l,0mg/ml de lactate de Ca2+, l,5mg/ml de lactate de Ca2+, 2,0mg/ml de lactate de Ca2+ et 5,0mg/ml de lactate de Ca2+, l'activité «SOD-like» augmente respectivement à 1, llUSOD525/ml;
1 , 52USOD525 /ml , 1 , 77 U S O D 525 / m 1 , 2 , 14 U S O D 525 / m 1 et
3, 83USOD525/ml .
Enfin, au cours de l'expérience, il ne semble pas que l'activité «SOD-like» de l'extrait ait atteint un maximum ( 3 , 83USOOS2S/ ml) puisqu'elle augmente régulièrement au fur et à mesure que l'on ajoute du lactate de Ca2+.
Les résultats obtenus lors de l'expérience de surcharge du lot 007 au lactate de Mg2+ semblent montrer qu'il est intéressant de ramener le pH de l'extrait 007 à pH=6,5 afin d'augmenter son activité «SOD-like».
En outre, l'ajout de lactate de Mg2+ semble augmenter significativement l'activité «SOD-like» de l'extrait (jusqu'à , 29USOD525/ml pour 2mg/ml) . Il est important de noter que dans le cas du lactate de Mg2+, cette augmentation de l'activité «SOD- like» semble exponentielle et semble atteindre un niveau maximal d'activité à partir de 2mg/ml.
Enfin, en comparaison avec les résultats présentés précédemment, l'ajout de lactate de Mg2+, à raison de 2mg/ ml, permet une augmentation de l'activité de l'extrait de 3, 22USOD525/ml (en tenant compte de son activité initiale soit 1, 07USOD525/ml ) , alors que l'activité obtenue avec 2mg/ml de lactate de Mg2+ seul, était environ de 2 , 6USOD525 /ml .
Description des figures :
Figure 1 : Représentation de la migration cellulaire des kératinocytes (en IF) après migration pendant 24h de Kératinocytes HaCaT.
Figure 2 : Représentation de l' expression de VEGF sécrété par les kératinocytes HaCaT après migration pendant 24h.
Figure 3 : Représentation de l'expression de l'acide hyaluronique sécrété par les kératinocytes HaCaT après migration pendant 24h par dosage colorimétrique .
Figure 4 : Révélation avec immunomarquage de l'effet de « l'association » sur l'expression du récepteur CD44 sur des kératinocytes HaCaT incubés pendant 24h. Le CD 44 est visualisé par une fluorescence verte et le noyau des cellules par une fluorescence bleu (coloration DAPI).
Figure 5 : Représentation de l'activité anti-radicalaire de différents extraits d' algues bleues incubés pendant 24 heures vis à vis de la lipoperoxydation induite par un stress chimique de 1 heure sur fibroblastes L929.
Figure 6 : Représentation de l'expression de l'élastine et du collagène I (ARNm) sur fibroblastes rendus sénescents par un stress oxydatif (H202 ) après 72 heures. « L'association » est pré-incubée pendant 16 heures. Figure 7 : Représentation de l'expression des métalloprotéinases matricielles (MMP-1, MMP-3 et MMP-12) (ARNm) sur fibroblastes rendus sénescents par réplication « L' association » est préincubée pendant 72 heures.
Les exemples suivants illustrent l'invention sans en limiter la portée .
Les tests ont été réalisés avec une association, ci-après dénommée « l'association », composée d'un extrait d'algues bleues de type Phormidium sp. pour 1/3 en poids et d'un mélange de lactate de magnésium et de lactate de calcium (dans un rapport de 2 pour 1) pour 2/3 en poids.
Exemple 1: Etude de l'induction de la migration des kératinocytes
La migration des kératinocytes, constituants principaux de l'épiderme, joue un rôle primordial dans la réparation tissulaire et la cicatrisation. Afin de déterminer les effets de « l'association » sur la migration des kératinocytes, la demanderesse a utilisé comme modèle cellulaire des Kératinocytes HaCaT.
Après migration pendant 24h des Kératinocytes avec des Kit
Oris Cell Migration Assay (96 puits), la demanderesse a effectué un dosage mesurant l'intensité de fluorescence (IF) .
L'induction de la migration des kératinocytes à été évaluée avec un témoin selon :
-Sels de Lactates seuls 200C^g/ml
-Extrait d'algues bleues seules HC^g/ml
- « L'association » = 20C^g/ml sels lactates + 110 g/ml algues bleues
Témoin positif :
-TGFipi 5ng/ml
Les résultats de la migration sont représentés à la figure
1.
Figure 1 : Représentation de la migration cellulaire des kératinocytes (en IF) après migration pendant 24h de Kératinocytes HaCaT . On distingue très nettement l' induction de la migration des kératinocytes en comparaison avec TGF beta 5ng/ml. Les extraits d' algues bleues seuls ou les sels de lactate seuls induisent une migration modérée (respectivement +33% et +37%) visible sur la figure 1.
« L' association » révèle une véritable synergie avec une induction de la migration des kératinocytes à +78%.
Exemple 2 : Production de facteurs sécrétés par les kératinocytes : VEGF
Le VEGF (pour Vascular Endothelial Growth Factor ou
Facteur de croissance endothélial vasculaire) a plusieurs rôles biologiques importants. Par exemple, il limite la prolifération des cellules endothéliales , active la formation de nouveaux vaisseaux sanguins ( angiogenèse ) et accroît la perméabilité vasculaire. Ce faisant, le VEGF sécrété par les kératinocytes contribue au maintien d'une peau saine par apport d'éléments nutritifs aux cellules et favorise la cicatrisation.
L ' angiogenèse est un mécanisme de néovas cular i s at ion prenant naissance à partir d'un réseau capillaire préexistant. Elle est particulièrement importante et indispensable au cours de nombreux processus physiologiques tels que le développement embryonnaire, l'implantation du placenta ou la réparation tissulaire .
Afin d' effectuer le dosage de la libération de VEGF par les kératinocytes en culture, la demanderesse à dosé, par technique ELISA, la quantité du Facteur de croissance endothélial vasculaire sécrété présente dans les surnageants des expériences de migration sur kératinocytes HaCaT comme décrit dans l'exemple 1.
Les résultats de ces mesures sont visibles dans la figure
2.
Figure 2 : Représentation de l' expression de VEGF sécrété par les kératinocytes HaCaT après migration pendant 24h.
Il apparaît que l'induction de la sécrétion de VEGF est principalement le résultat des algues bleues. En effet, la quantité de VEGF mesurée avec l'extrait d'algues bleues seuls (+117%) et « l'association » (+91%) est considérablement plus élevé qu' avec le témoin positif ayant donné le meilleur résultat EGF (67%) .
Les algues bleues grâce à l' induction de la sécrétion de VEGF favorisent donc la revascularisation des tissus et la régénération de ceux-ci. La composition selon l'invention contribue ainsi au maintien d'une peau saine, favorise la cicatrisation et aide au comblement des rides .
Exemple 3: Production d'acide hyaluronique (AH) et de son récepteur le CD44 sur les kératinocytes
L'antigène CD44 représente une famille de glycoprotéines transmembranaires de type I. La fonction de CD44 comme récepteur de l'acide hyaluronique, un composant crucial de la matrice extracellulaire, est bien connu. L'acide hyaluronique est un g 1 y c o s ami no g 1 yc a ne , réparti largement parmi les tissus conjonctifs, épithéliaux et nerveux mais que l'on retrouve dans tous les tissus. C'est l'un des principaux composants de la matrice extracellulaire. Il contribue de façon significative à la prolifération et à la migration des cellules .
Afin d'effectuer le dosage du relargage de l'acide hyaluronique par les kératinocytes en culture, la demanderesse a dosé la quantité d'AH sécrétée présente dans les surnageants dans une expérience de migration sur kératinocytes HaCaT comme décrit dans l'exemple 1.
L'acide hyaluronique est ensuite mesuré par ELISA compétitif analysé en colorimétrie et exprimé en ng/ml en comparaison avec un témoin non stimulé et un témoin positif (EGF) . Les résultats de ces mesures sont visibles dans la figure 3.
Figure 3 : Représentation de l'expression de l'acide hyaluronique sécrété par les kératinocytes HaCaT après migration pendant 24h par dosage colorimétrique .
Il apparaît que l' induction du relargage d'acide hyaluronique est plus importante avec les extraits d' algues bleues seuls (92%) qu'avec les sels de lactates seuls (34%) . L'association algues bleues/Sels de lactates Ca +/Mg + selon 1' invention présente quant à elle un effet additif par rapport aux extraits seuls avec 115% d'augmentation de l'acide hyaluronique mesuré dans le surnageant par rapport au témoin.
Afin d'évaluer l'expression du récepteur membranaire CD44 par les kératinocytes en culture, la demanderesse a effectué un immunomarquage à l'aide d'un anticorps anti-CD44 après 24 heures d'incubation en présence de « l'association » en comparaison d'un témoin neutre (figure 4) .
Figure 4 : Révélation avec immunomarquage de l'effet de
« l'association » sur l'expression du récepteur CD44 sur des kératinocytes HaCaT incubés pendant 24h. Le CD 44 est visualisé par une fluorescence verte et le noyau des cellules par une fluorescence bleu (coloration DAPI).
Ce résultat montre que « l'association » induit une expression du récepteur CD44 supérieure à l'expression basale.
Les effets de « l'association » sur l' induction de l'expression de l'acide hyaluronique et de son récepteur CD44, sont intéressants pour favoriser le comblement des rides dans une indication anti-âge, l'hydratation et la régénération tissulaire .
Exemple 4 : Activité anti-oxydante sur fibroblastes
La membrane plasmique constitue la principale et la première cible des radicaux libres oxygénés (RLO) . Elle est le site d'une peroxydation accrue de par sa richesse en lipides. Pour mesurer la peroxydation des lipides membranaires , la Demanderesse a réalisé un dosage in vitro des complexes entre les produits d' oxydations lipidiques et l ' acide thiobarbiturique . Ces complexes sont appelés TBARS (pour Thiobarbituric Acid Reactive Substances) et donnent son nom au test: Test des BARS.
Afin de reproduire les effets d'un stress oxydatif chimique, la Demanderesse a traité, pendant 1 heure, une lignée de fibroblastes , L929, par un complexe composé de peroxyde d'hydrogène (H202) et de fer (Fe2+/Fe3+) reconstituant ainsi la réaction de Fenton, source de RLO et plus particulièrement de radical hydroxyle (OH° ) : H202 + Fe2+ OH° + OH" + Fe3+.
Ce modèle a permis d'évaluer l'activité antiradicalaire de différents extraits d'algues bleues, et d'analyser leur pouvoir protecteur vis-à-vis de la lipoperoxydation induite par un stress chimique.
La demanderesse a déterminé l'activité anti-oxydante des différentes associations selon l'invention après 24 heures d'incubation en mesurant la protection des différentes compositions contre la peroxydation lipidique en comparaison avec la protection apportée par la vitamine E en tant que témoin positif .
Les résultats sont présentés sur la figure 5.
Figure 5 : Représentation de l'activité anti-radicalaire de différents extraits d' algues bleues incubés pendant 24 heures vis à vis de la lipopéroxydation induite par un stress chimique de 1 heure sur fibroblastes L929.
La demanderesse a pu montrer que l'extrait d'algues bleues seul n' avait pas d' activité mesurable alors que les sels de lactates seuls présentaient une faible activité (16%) .
« L'association » révèle une véritable synergie avec une un pourcentage de protection de 56% proche de celui obtenu avec la vitamine E (70%) .
L'association algues bleues/Sels de lactates selon l'invention présente donc une bonne activité anti-oxydante.
Exemple 6: Synthèse d' élastine et de collagène I sur fibroblastes
Le collagène de type I est un collagène de type fibrillaire majeur. Il est présent dans la peau, les os, les tendons, la cornée et les organes internes. Le collagène I représente 90% du collagène que contient le corps humain. Il est constitué de trois chaînes polypeptidiques enroulées en hélice dans une partie de la molécule.
L' élastine est une protéine fibreuse riche en proline. Les fibres élastiques qui donnent à la peau son élasticité sont constituées d' un noyau d' élastine entouré d' un manchon de microfibrilles .
Figure 6 : Représentation de l'expression de l' élastine et du collagène I (ARNm) sur fibroblastes rendus sénescents par un stress oxydatif (H202 ) après 72 heures. « L'association » est pré-incubée pendant 16 heures.
Les effets de « l'association » sur l'induction de la synthèse d'élastine et de collagène I sur les fibroblastes, permettent donc de favoriser le comblement des rides dans un indication anti-âge.
Exemple 7: Inhibition de MMP-1, MMP-3, MMP-12
Les métalloprotéinases matricielles ou MMP (de l'anglais Matrix metalloproteinase) sont des enzymes qui dégradent les constituants de la matrice e x t r a c e 11 u 1 a i r e des tissus conjonctifs, notamment de la peau.
Ces métalloprotéinases sont des enzymes à zinc ayant une activité endopeptidasique , c'est-à-dire qu'elles hydrolysent les protéines. La majorité des métalloprotéinases sont sécrétées par les cellules dans l'espace extracellulaire. Il en existe de nombreux types (une trentaine environ) dont :
-La collagénase intersticielle ou MMP1 : synthétisée par les fibroblastes ou les polynucléaires, elle dégrade les collagènes fibrillaires I, II et III.
-La stromélysine ou MMP3 : qui dégrade les constituants de la lame basale et l' élastine.
-La MMP12, principalement exprimé par les macrophages qui joue un rôle dans les phénomènes d'inflammation et de cicatrisation. Figure 7 : Représentation de l'expression des métalloprotéinases matricielles (MMP-1, MMP-3 et MMP-12) (ARNm) sur fibroblastes rendus sénescents par réplication « L' association » est préincubée pendant 72 heures.
« L' association » révèle une véritable inhibition de la synthèse des métalloprotéinases matricielles (MMP-1, MMP-3 et MMP-12) dans les fibroblastes sénescents. En ralentissant la dégradation des constituants de la matrice extracellulaire 1' association selon l' invention montre sa capacité à lutter contre le vieillissement cutané.
Exemple 8: Exemples de compositions cosmétiques selon 1' invention
formule 1
-eau ...4C - 65%
-tribehenin PEG- 20 esters ... 2 - 7%
-isodécyl néopentanoate ... 2 9%
-glycérine ...0. 5 - 10%
-PEG-8 ...0. 5 - 8%
-dimethicone ...0. 5 - 5%
-palmitate glycol ... 1 - 6%
-alcool cétyl ...0. 5 - 3%
-BHT ...0. 01 - 0. 03%
-disodium EDTA ...0. 05 - 0. 25%
-lécithine hydrogénée ...0. 25 - 0. 8%
-conservateur ...0. 5 - 3%
-parfum ...0. 2 - 0.5 o
o
-gomme de xanthane ...0. 1 - 0.4 o
o
avec -lactate de calcium ...0, 001 - 0 , 11 fio
-lactate de magnésium ...0, 001 - 0 , 11 fio
-maltodextrine ...0, 1 - 1%
-phormidium uncinatum ...0, 001 - 0 , 11 fio formule 2 :
-eau ...4C - 85%
-isodécyl néopentanoate ... 2 9%
-glycérine ...0. 5 - 10%
-alcool d' arachide ...0. 5 - 3%
-alcool behenyl ...0. 3 - 2%
-disodium EDTA ...0. 05 - 0. 25%
-glycéryl stéarate ...0. 5 - 4%
-lécithine hydrogénée ...0. 25 - 0. 8%
-conservateur ...0. 5 - 3%
-parfum ...0. 2 - 0.5
-mica ...0. 001 - 1
-polyméthyl métacrylate ...0. 01 - 0. 9%
-tin oxide ...0. 001 - 0 .65
-dioxide de titanium ...0. 01 - 0. 9%
-gomme de xanthane ...0. 1-0 .4%
avec -lactate de calcium ...0, 001 - 0 1%
-lactate de magnésium ...0, 001 - 0 , 11 fio
-maltodextrine ...0, 1 - 1%
-phormidium uncinatum ...0, 001 - 0 , 11 fio De manière non limitative, pourront notamment être utilisés seuls ou en mélanges :
Comme émulsionnants :
tribehenin PEG- 20 esters, lécithine hydrogénée, alcool
cétéaryl, cétéaryl glucoside, glyceryl stérate, PEG100 stéarate, potassium cétyl phosphate, sodium stéaroyl glutamate, alcool arachidyl, glucoside arachidyl, alcool cétyl.
Comme émollients :
isodécyl néopentanoate, dicaprylyl carbonate, ppg-15
stéarylether, C12-15alkylbenzoate, isododécane , isohexadecane .
Comme humectants :
glycérine, PEG-8, méthyl gluceth-20, butylène glycol
, sorbitol, dipropylène glycol, PEG-4 , PEG-12.
Comme agents de texture:
diméthicone, glycol palmitate, behenyl alcool, glycérol
monostéarate, polyméthyl métacrylate, nylon 12.
Comme anti-oxydants:
BHT, tocophérol, tocophéryl acétate.
Comme conservateurs:
disodium EDTA, tetrasodium EDTA, trisodium éthylènediamine diccinate .
Comme gélifiants :
Gomme de xanthane, gomme de gellane, magnésium aluminium silicate , acrylates copolymères, hydroxyéthylcellulose, polymère carboxyvynilique .
Comme colorants :
mica, oxide de tin, dioxide de titanium.

Claims

REVENDICATIONS
1. Composition topique caractérisée en ce qu'elle contient au moins un extrait d' algue bleue et au moins un sel d' acide alpha hydroxylé soluble en milieu aqueux, choisi parmi les sels de magnésium, de calcium et de sodium ainsi que leurs mélanges, en association avec au moins une excipient acceptable pour l'application topique.
2. Composition topique selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit sel d' acide alpha hydroxylé est un lactate .
3. Composition topique selon l'une des revendications 1 ou
2, caractérisée en ce que l'algue bleue est de type Phormidium sp.
4. Composition topique selon l'une des revendications 1 à
3, caractérisée en ce qu'elle contient au moins un sel de magnésium.
5. Composition topique selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce qu'elle contient au moins un sel de calcium.
6. Composition topique selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce qu'elle comprend une association de sel de magnésium et de sel de calcium.
7. Composition topique selon la revendication 6, caractérisée en ce qu' elle comprend une association allant de
1/2 de lactate de magnésium et 1/2 de lactate de calcium à une association de 1/4 de lactate de magnésium et de 3/4 de lactate de calcium soit un rapport de 1 pour 1 à 1 pour 3 en poids total de la composition.
8. Composition topique selon la revendication 7, caractérisée en ce qu'elle comprend une association de sel de magnésium et de sel de calcium dans une proportion de 2/3 // 1/3 soit un rapport de 2 pour 1 en poids .
9. Composition topique selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'extrait d' algue bleue présent dans la composition représente entre 0,001% et 0,01% en poids, du poids total de la composition.
10. Composition topique selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le ou les sel (s) d'acide alpha hydroxylé présent (s) dans la composition représente (nt) , ensemble ou chacun considéré séparément, entre 0,001% et 0,01% en poids, du poids total de la composition.
11. Composition topique selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'un produit de soin et/ou de maquillage de la peau du corps ou du visage, des lèvres, des cils, des sourcils, des cheveux, du cuir chevelu, des ongles ou des muqueuses; d'un produit solaire ou autobronzant; d'un produit capillaire notamment de coloration, de conditionnement et/ou de soin des cheveux.
12. Composition topique selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins une phase liquide comprenant au moins un composé choisi parmi les huiles et/ou solvants d'origine minérale, animale, végétale ou synthétique, carbonés, hydrocarbonés, fluorés et/ou siliconés, sérum, volatils ou non volatils, seuls ou en mélange.
13. Composition topique selon l'une des revendications 1 à 12, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement de tous les signes liés au vieillissement de l'organisme notamment ceux affectant la peau et/ou les annexes cutanées et/ou les muqueuses.
14. Composition topique selon la revendication 13, pour son utilisation dans la prévention des signes de vieillissement cutané .
15. Composition topique selon la revendication 13, pour favoriser la production de VEGF (facteur de croissance de l' endothélium vasculaire) pour son utilisation à la revascularisation de l'épiderme.
16. Composition topique selon la revendication 13, pour favoriser la production naturelle de fibres d'élastine.
17. Composition topique selon la revendication 13, pour favoriser la production naturelle de collagène.
18. Composition topique selon la revendication 13, pour favoriser la production naturelle d'acide hyaluronique.
19. Composition topique selon la revendication 13, pour son utilisation comme anti-oxydant.
20. Composition topique selon la revendication 13 pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement des affections de la muqueuse buccale.
21. Procédé de traitement cosmétique des matières kératiniques , notamment de la peau du corps ou du visage, des lèvres, des ongles, des cheveux, des cils et/ou des muqueuses, comprenant l'application sur lesdites matières d'une composition cosmétique telle que définie à l'une des revendications 1 à 10.
22. Procédé de préparation de compositions selon les revendications 1 à 20 caractérisé en ce qu' il comporte les étapes suivantes :
1-Obtention de la biomasse d'algue bleue:
-La biomasse est récoltée après une durée de culture de 10 à 20 jours dans des conditions de température et de luminosité adéquates,
2-Obtention de l'extrait d'algue bleue:
-La biomasse est lavée puis broyée finement. La fraction aqueuse est séparée des débris cellulaires par centrifugation ou filtration,
3-La solution ainsi obtenue est additionnée :
-d' acide alpha hydroxylé ou un de ses sels -de maltodextrine servant de support
4-Le pH des échantillons est ramené à pH=6,5 en utilisant NaOH (0,1N),
5-Le produit sec est obtenu par élimination de l'eau par une technique appropriée, qui pourra par exemple être: un procédé de lyophilisation, d' atomisation ou de séchage sous étuve ventilée basse température.
PCT/EP2012/073860 2011-11-28 2012-11-28 Composition topique comprenant une association d'au moins un extrait d'algue bleue avec au moins un acide alpha hydroxyle ou un de ses sels WO2013079546A1 (fr)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
ES12797837T ES2666306T5 (es) 2011-11-28 2012-11-28 Composición tópica que comprende una asociación de por lo menos un extracto de alga azul con por lo menos un ácido alfa-hidroxilado o una de sus sales
EP12797837.7A EP2785314B2 (fr) 2011-11-28 2012-11-28 Composition topique comprenant une association d'au moins un extrait d'algue bleue avec au moins un acide alpha hydroxyle ou un de ses sels

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1160853 2011-11-28
FR1160853A FR2983076B1 (fr) 2011-11-28 2011-11-28 Composition topique comprenant une association d'au moins un extrait d'algue bleue avec au moins un acide alpha hydroxyle ou un de ses sels

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2013079546A1 true WO2013079546A1 (fr) 2013-06-06

Family

ID=47297209

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/EP2012/073860 WO2013079546A1 (fr) 2011-11-28 2012-11-28 Composition topique comprenant une association d'au moins un extrait d'algue bleue avec au moins un acide alpha hydroxyle ou un de ses sels

Country Status (4)

Country Link
EP (1) EP2785314B2 (fr)
ES (1) ES2666306T5 (fr)
FR (1) FR2983076B1 (fr)
WO (1) WO2013079546A1 (fr)

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR1345584A (fr) 1962-08-06 1963-12-13 Centre Nat Rech Scient Procédé de culture accélérée d'algues, algues ainsi obtenues et leurs applications
EP0273202A2 (fr) * 1986-12-23 1988-07-06 Eugene J. Dr. Van Scott Utilisation d'acides polycarboxyliques améliorant l'activité thérapeutique de compositions topiques contre les infections mycotiques et les taches pigmentées.
EP0385841A1 (fr) * 1989-02-28 1990-09-05 Pierre Fabre Cosmetique Extraits de cyanobactéries filamenteuses, leur procédé de préparation et leur activité en tant que facteur de croissance
FR2787711A1 (fr) * 1998-12-29 2000-06-30 C3D Sarl Composition cosmetique a activite depigmentante et son utilisation
DE10059107A1 (de) * 1999-12-23 2001-06-28 Henkel Kgaa Extrakt aus der Blaualge Spirulina und seine Verwendung in kosmetischen und dermatologischen Mitteln zur Haut- und Körperpflege
FR2876030A1 (fr) * 2004-10-01 2006-04-07 Evaux Laboratoires Composition cosmetique ou medicamenteuse a activite anti-inflammatoire et/ou antiprolifrerative ainsi qu'utilisations de cette composition

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5389677B1 (en) 1986-12-23 1997-07-15 Tristrata Inc Method of treating wrinkles using glycalic acid
FR2796556B1 (fr) 1999-07-22 2001-12-28 Fabre Pierre Dermo Cosmetique Association de fribiline et d'un extrait de cyanophycee, son procede de preparation et son utilisation en tant que medicament
FR2809400B1 (fr) 2000-05-25 2004-04-09 Inst Francais Du Petrole Materiaux comportant des groupements organiques contenant du soufre et du phosphore lie par l'intermediaire d'atomes d'oxygenes a un oxyde mineral
DE10054479A1 (de) 2000-11-03 2002-05-08 Henkel Kgaa Kosmetische Pflaster zur Hautaufhellung
DE10231468A1 (de) 2002-07-08 2004-02-26 Coty B.V. Anti-Hautalterungskosmetikum
DE102005063062A1 (de) 2005-12-29 2007-07-05 Henkel Kgaa Synergistische Proteinhydrolysat-Kombinationen zur Behandlung reifer Haut
GB2451889B (en) * 2007-08-16 2012-04-25 Danakim Invest Ltd Apparatus for treating the skin with steam

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR1345584A (fr) 1962-08-06 1963-12-13 Centre Nat Rech Scient Procédé de culture accélérée d'algues, algues ainsi obtenues et leurs applications
EP0273202A2 (fr) * 1986-12-23 1988-07-06 Eugene J. Dr. Van Scott Utilisation d'acides polycarboxyliques améliorant l'activité thérapeutique de compositions topiques contre les infections mycotiques et les taches pigmentées.
EP0385841A1 (fr) * 1989-02-28 1990-09-05 Pierre Fabre Cosmetique Extraits de cyanobactéries filamenteuses, leur procédé de préparation et leur activité en tant que facteur de croissance
FR2787711A1 (fr) * 1998-12-29 2000-06-30 C3D Sarl Composition cosmetique a activite depigmentante et son utilisation
DE10059107A1 (de) * 1999-12-23 2001-06-28 Henkel Kgaa Extrakt aus der Blaualge Spirulina und seine Verwendung in kosmetischen und dermatologischen Mitteln zur Haut- und Körperpflege
FR2876030A1 (fr) * 2004-10-01 2006-04-07 Evaux Laboratoires Composition cosmetique ou medicamenteuse a activite anti-inflammatoire et/ou antiprolifrerative ainsi qu'utilisations de cette composition

Also Published As

Publication number Publication date
EP2785314B1 (fr) 2018-02-14
FR2983076B1 (fr) 2014-08-08
ES2666306T3 (es) 2018-05-03
EP2785314A1 (fr) 2014-10-08
ES2666306T5 (es) 2021-06-09
FR2983076A1 (fr) 2013-05-31
EP2785314B2 (fr) 2020-11-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2010006708A (ja) 皮膚外用剤、美白剤、抗老化剤および抗酸化剤
CN110430865A (zh) 包含桦褐孔菌提取物的化妆品组合物及其用途
CA3173590C (fr) Extrait du tourteau des graines de moringa peregrina, son procede d&#39;obtention et son utilisation dans des compositions cosmetiques ou nutricosmetiques
EP3102181B1 (fr) Complexe actif pour un produit cosmétique contre le vieillissement cutané
WO2013080205A1 (fr) Extrait de jojoba utilisé dans l&#39;amélioration des fonctions barrières de la peau
FR3051369B1 (fr) Extraits de faine de hetre, compositions et utilisations
EP3801778B1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de bixa orellana
EP2291173B1 (fr) Association d&#39;extraits de passiflore et d&#39;anchuse utilisable en cosmetique
EP1131048B1 (fr) Extrait de tourteau de graines de noix
KR102530481B1 (ko) 오스톨을 포함하는 피부 노화 방지용 피부외용제 조성물
EP2785314B1 (fr) Composition topique comprenant une association d&#39;au moins un extrait d&#39;algue bleue avec au moins un acide alpha hydroxyle ou un de ses sels
JP4757157B2 (ja) 皮膚外用剤
NL2029500B1 (en) Cosmetic preparation using hedychium coronarium as an anti-aging skin care factor and preparation method thereof
FR3067594A1 (fr) Utilisation d&#39;extraits de plantes pour le traitement dermatocosmetique des etats inflammatoires lies a une surproduction de il-17
KR102689356B1 (ko) 천연소재를 이용해 자외선 차단, 미백 및 항균 기능을 제공하는 화장료 조성물
OA21068A (fr) Extrait du tourteau des graines de Moringa Peregrina, son procédé d&#39;obtention et son utilisation dans des compositions cosmétiques ou nutricosmétiques.
WO2023186353A1 (fr) Dextrines hyperbranchees pour leur utilisation topique pour la prevention ou le traitement d&#39;au moins un symptome de l&#39;inflammation cutanee
EP4340630A1 (fr) Extrait de vaccinium macrocarpon et ses effets cosmétiques anti-âge
FR3034989A1 (fr) Compositions cosmetiques comprenant des oligomeres d&#39;acide hyaluronique et des cellules vegetales dedifferenciees et elicitees de bougainvillier encapsulant un extrait de safran
FR3110346A1 (fr) Extrait du tourteau des graines de Moringa peregrina, son procédé d’obtention et son utilisation dans des compositions cosmétiques ou nutricosmétiques
FR2997854A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de saba senegalensis dans une composition cosmetique anti-age
FR2986708A1 (fr) Composition a base d&#39;extrait de feuille de pommier pour le raffermissement de la peau
KR20220044488A (ko) 분홍바늘꽃 추출물의 신규 화장료 용도
FR3112685A1 (fr) Extrait de fleurs de bombax costatum riche en polysaccharides
OA21067A (fr) Extrait de graines de Moringa Peregrina riche en 2,5-diformylfuran, son procédé d&#39;obtention et son utilisation dans des compositions cosmétiques.

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 12797837

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE