WO2013057340A1 - Dispositivo y procedimiento de limpieza de una placa de pocillos - Google Patents

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WO2013057340A1
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Antonio Alonso Ortiz
Nieves Fernández Arcas
Armando Reyes Engel
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Servicio Andaluz De Salud
Universidad De Malaga
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Definitions

  • the present invention belongs to the field of biotechnology, and more specifically to the field of tests carried out using well plates.
  • a first object of the invention is a device designed for cleaning a well plate that is kept upside down at all times.
  • a second object of the invention is directed to a method for cleaning a well plate using the above device.
  • the ELISA technique (acronym for Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, or Enzyme-linked Immuno-Absorption Assay) is an immunoassay technique in which an immobilized antigen is detected by an antibody bound to an enzyme capable of generating a detectable product such as color change or some other type;
  • an enzyme capable of generating a detectable product such as color change or some other type;
  • a primary antibody that recognizes the antigen and that in turn is recognized by a secondary antibody that carries the aforementioned enzyme linked.
  • the appearance of dyes allows the antigen in the sample to be measured indirectly by spectrophotometry.
  • This technique is used in many laboratories to determine if a particular antibody is present in a patient's blood sample.
  • the procedure is routine and simple, it involves a large number of variables, such as reagent selection, temperature, volume measurement and time, which if not adjusted correctly can affect the successive steps and the test result.
  • Sowing of plates in an inverted position is a novel technique developed by the inventors of the present application and described in application P201 130501, which is directed to a device and method for applying a fluid to the wells of a plate while maintaining it in an inverted position. , that is, with the wells down.
  • This technique takes advantage of the predominant effect of surface tension over small distances so that a liquid, for example a liquid with a reagent, adheres to the inner surface of a well-small well being in an inverted position.
  • a great advantage of this procedure is that it is possible to fill all liquid the wells in a much faster, clean, uniform and simultaneous way throughout the plate.
  • Another important advantage is that it allows reagent volumes to be used much smaller, up to 1000 times, than those used using traditional techniques.
  • the inventors of this application have been based on similar principles for, according to a first aspect of the invention, to develop a novel device comprising means for cleaning the wells of a plate keeping it in an inverted position.
  • This device complements the one described in the previous application to allow the performance of the ELISA technique, or similar ones, keeping the plate in an inverted position both during the sowing or reagent application operations and in the cleaning operations.
  • Carrying out the cleaning of the wells by keeping them in an inverted position has the additional advantage of achieving a more complete cleaning, since the remains adhered to the well, as well as the cleaning liquid, no longer tend to remain stagnant at the bottom of it as was the case with prior art devices.
  • the force of gravity itself makes it easier for such remains to tend to leave the well
  • the measures of the impacity mentioned may in principle be any, provided that they allow the cleaning of the well by keeping it in an inverted position at all times.
  • said means basically comprise a base and a support, on which the plate will rest in an inverted position during the cleaning operations.
  • Both the base and the support are normally made of plastic, methacrylate, polypropylene or other similar material. Each of these parts is described in more detail below.
  • the base constitutes the part on which the support will rest when the device is in operation and comprises at least one suitable tank for housing a washing fluid.
  • the deposit will normally consist of a small blind hole in the upper surface of the base, preferably with a volume of between 100 and 300 m croltros.
  • the support is a somewhat more complex piece than the previous one, being essentially formed by a lower sheet and an upper sheet arranged in parallel:
  • the bottom sheet is essentially a flat plate that is configured to rest on the base.
  • the upper part of the base and the lower part of the base could be understood as complementary, which would facilitate the correct positioning of the support on the base, thus making both "fit” one on top of the other.
  • the lower sheet also comprises at least one needle that passes through it substantially perpendicularly.
  • the term “substantially” refers to the fact that small deviations from normal are possible.
  • Said at least one needle is positioned such that, when the support is placed in its correct position on the base, its lower end is inserted into the at least one base deposit.
  • the upper sheet comprises at least one hole of a size corresponding to a plate well, and is located parallel to the first one so that the upper end of the at least one needle protrudes through said hole, being between the two A suitable space to create the void.
  • suitable for creating the vacuum means that said space between the upper and lower sheets will be closed in some way at the edges of the support and will have at least one mouth or connection to couple a small vacuum pump or similar to create the void.
  • the top sheet is also configured so that the well plate in an inverted position rests on it, for example by means of suitable flanges that facilitate the correct positioning of the well plate in an inverted position on it.
  • the operation of this device is as follows.
  • the at least one tank of the base is filled with a cleaning liquid and then the support is placed on the base.
  • the lower end of the at least one needle of the support is inserted into the reservoir, while the upper end of the needle protrudes slightly through the at least one hole in the upper sheet.
  • the plate to be cleaned in an inverted position is placed on top of the support such that said upper end of the needle is inside a well. Finally, vacuum is applied between the lower and upper sheets.
  • the upper end of the needle could in principle be at any height inside the inverted well provided that the pressure of the cleaning liquid and the air is sufficient to reach the walls of the well and exert an effective cleaning function.
  • the distance protruding the upper end of the at least one needle above the upper sheet of the support is slightly less than the depth of a well of a plate.
  • the expression “slightly smaller” here refers to the needle protruding a height such that its end is at a distance from the bottom of the well small enough that a hypothetical drop of liquid coming out of the needle contacts the bottom of the well before of sliding down the needle by the action of gravity, but large enough so that the mouth of the needle is not blocked.
  • the closer the needle is to the bottom of the well the greater the drag effect of the materials attached to the well for equal pressure of the cleaning liquid or air.
  • the upper surface of the upper sheet comprises a coating that facilitates that the support of the inverted plate on said upper sheet is airtight, for example a coating comprising rubber, silicone, rubber, fiberglass, plastic polymers, or combinations thereof.
  • a coating comprising rubber, silicone, rubber, fiberglass, plastic polymers, or combinations thereof.
  • the addition of this coating hinders the entry of air between the edges of the well and the top sheet, thus facilitating the creation of a vacuum in the space between the bottom and top sheets.
  • the addition of this coating allows to control the distance protruding needles on the top sheet, since the distance will be greater for thin coatings and smaller for thick coatings. This allows the use of the device with well plates with different depths. Therefore, in a further preferred embodiment of the invention the coating is removable.
  • a particularly preferred embodiment of the invention comprises a plurality of deposits / needles / holes configured as a matrix whose positions would correspond to those of the wells of a plate.
  • a device with a matrix of 6, 12, 24, 48, 60, 72, 96 or 384 tanks / needles / holes could be conceived whose positions would correspond to those of the wells of the corresponding plates. This would allow all the wells of one of such plates to be washed simultaneously, or in two operations if a 48-tank device / needles / holes for a 96-well plate is used, and so on.
  • a second aspect of the invention is directed, in general, to a method of cleaning a well plate characterized in that it is carried out by holding the plate in an inverted position.
  • this procedure could be carried out in different ways, it can preferably be performed using the device described above, in which case it comprises the following operations:
  • Fig. 1 depicts a perspective view of a conventional 12-well plate.
  • Fig. 2 represents a view of a support corresponding to an example of a device of the invention.
  • Fig. 3 represents a view of a base corresponding to an example of the device of the invention.
  • Fig. 4 represents a cross section of the support and the base shown in the previous figures before mounting the device.
  • Fig. 5 shows a section of the device of the invention assembled, just before placing a plate.
  • Fig. 6 shows the device section of the previous figures during the cleaning of a plate.
  • the device (1) of the invention can be designed to be coupled to plates (100) of any number of wells (101), for example 6, 12, 24, 48, 60, 72, 96 or 384 wells.
  • plates (100) of any number of wells (101) for example 6, 12, 24, 48, 60, 72, 96 or 384 wells.
  • This example describes a plate (1 00) of 1 2 wells (1 01) solely for simplicity.
  • Fig. 1 shows a conventional 12-well plate (100) (101), which are arranged according to a 3 x 4 matrix.
  • the representation is schematic, showing more details of the shape of the plate (100) in the sections of Figs. 4-6.
  • the support (4) is shown in Fig. 2, although some internal details that are hidden in that figure can be seen more clearly in the section of any of Figs. 4-6.
  • the support (4) is formed by the lower sheet (5) and the upper sheet (7) arranged in parallel, with a space between them to create the vacuum (a cut has been made in the piece so that these elements can be seen ). It is observed how the needles (6) protrude through the holes (8) of the upper sheet (7). These needles (6) are fixed to the bottom sheet (5), as seen in the section of Figs. 4-6, where you can also see how the needles (6) protrude below the support (4).
  • Fig. 3 shows the base (2), which in this example consists essentially of a rectangular piece made of polypropylene and equipped with 1 2 tanks (3) also arranged according to a 3 x 4 matrix in positions corresponding to the wells (101) of Fig. 1.
  • the support (4) is placed on the base (2) such that the needles (6) enter the tanks (3), as shown in Figs. 4-5.
  • notches, projections, steps or the like can be devised that require a correct positioning of both pieces.
  • the plate (100) is supported on the support (4) such that each well (101) rests on the upper sheet (7) around one of the holes (8). In this position, the upper ends of the needles (6) will be inserted into the wells (101), near their bottom, as shown in Fig. 6.
  • the cleaning is then carried out by applying the vacuum in the free space between the lower (5) and upper (7) plates of the support (4).
  • the support (4) has a connection mouth that allows coupling a tube through which to make the vacuum with the help of a compressor or the like.
  • the vacuum absorbs a part of the residues or remains that are attached to the interior of the well (101).
  • the cleaning liquid of the tanks (3) is absorbed by the vacuum, rises by the needles (6) and is projected strongly towards the inner surface of the wells (101), washing the well (101) and dragging the rest of the waste.
  • the vacuum forces the air rise through the needles (6) and projects it against the inside of the wells (101), dragging the last remains that could remain and drying the well (101).

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Abstract

La invención describe un dispositivo para la limpieza de una placa de pocillos que se mantiene en todo momento boca abajo, comprendiendo una base (2) que tiene unos depósitos (3) de fluido de limpieza; y un soporte (4) dotado de unas agujas (6) diseñadas para lanzar a presión aire y/o dicho fluido de limpieza contra el interior invertido de los pocillos, ejerciendo un efecto de limpieza mucho mayor que los dispositivos actuales. La invención también se refiere a un procedimiento de limpieza utilizando el dispositivo anterior.

Description

DISPOSITIVO Y PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA DE UNA PLACA DE
POCILLOS OBJETO DE LA INVENCIÓN
La presente invención pertenece al campo de la biotecnología, y más concretamente al campo de los ensayos que se realizan empleando placas de pocilios.
Un primer objeto de la invención es un dispositivo diseñado para la limpieza de una placa de pocilios que se mantiene en todo momento boca abajo.
Un segundo objeto de la invención está dirigido a un procedimiento para limpiar una placa de pocilios empleando el dispositivo anterior.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
La técnica ELISA (acrónimo del inglés Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, o Ensayo por Inmuno-Absorción Ligado a Enzimas) es una técnica de inmunoensayo en la cual un antígeno inmovilizado se detecta mediante un anticuerpo enlazado a una enzima capaz de generar un producto detectable como cambio de color o algún otro tipo; en ocasiones, con el fin de reducir los costos del ensayo, nos encontramos con que existe un anticuerpo primario que reconoce al antígeno y que a su vez es reconocido por un anticuerpo secundario que lleva enlazado la enzima anteriormente mencionada. La aparición de colorantes permite medir indirectamente mediante espectrofotometría el antígeno en la muestra. Esta técnica se usa en muchos laboratorios para determinar si un anticuerpo particular está presente en la muestra de sangre de un paciente. Aunque el procedimiento es rutinario y sencillo, involucra a un gran número de variables, tales como selección de reactivo, temperatura, medición de volumen y tiempo, que si no se ajustan correctamente puede afectar a los pasos sucesivos y al resultado de la prueba.
Uno de los pasos que se repite varias veces al realizar la técnica ELISA es la limpieza de la placa de pocilios. Se trata de una operación importante, ya que si la limpieza no se realiza correctamente los resultados podrían quedar falseados debido a la presencia de restos de reactivo en los pocilios. De hecho, este no es un problema exclusivo de la técnica ELISA, ya que de modo general es necesario llevar a cabo una limpieza exhaustiva de cualquier placa que se va a utilizar por segunda vez.
Actualmente para limpiar los pocilios de una placa se deposita un volumen determinado liquido por gravedad en cada uno de los pocilios de una (o varias filas). Posteriormente se aspira dicho líquido. Este proceso de vertido-aspiración se repite varias veces por cada fila. Después se pasa a la fila siguiente, y así sucesivamente. Se trata por tanto de alternar vertido de líquido y aspiración. Un inconveniente de este sistema es que frecuentemente se producen fenómenos de arrastre líquidos de pocilio a pocilio. También, a veces quedan restos de reactivos en los bordes superiores del pocilio debido el menisco que forma el líquido con la pared del pocilio.
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
La siembra de placas en posición invertida es una novedosa técnica desarrollada por los inventores de la presente solicitud y descrita en la solicitud P201 130501 , que está dirigida a un dispositivo y procedimiento para aplicar un fluido a los pocilios de una placa manteniendo ésta en posición invertida, es decir, con los pocilios hacia abajo. Esta técnica aprovecha el efecto predominante de la tensión superficial en distancias pequeñas para que un líquido, por ejemplo un líquido con un reactivo, se adhiera a la superficie interior de un pocilio suficientemente pequeño estando esté en posición invertida. Una gran ventaja de este procedimiento es que se consigue llenar de líquido todos los pocilios de una forma mucho más rápida, limpia, uniforme y simultánea en toda la placa. Otra importante ventaja es que permite utilizar volúmenes de reactivo mucho menores, hasta 1000 veces, que aquellos utilizados empleando las técnicas tradicionales.
Los inventores de esta solicitud se han basado en parecidos principios para, de acuerdo con un primer aspecto de la invención, desarrollar un novedoso dispositivo que comprende medios para limpiar los pocilios de una placa manteniendo ésta en posición invertida. Este dispositivo viene a complementar al descrito en la solicitud anterior para permitir la realización de la técnica ELISA, u otras similares, manteniendo la placa en posición invertida tanto durante las operaciones de siembra o aplicación de reactivos como en las operaciones de limpieza. Llevar a cabo la limpieza de los pocilios manteniendo éstos en posición invertida tiene la ventaja adicional de conseguir una limpieza más completa, ya que los restos adheridos al pocilio, así como el líquido de limpieza, ya no tienden a quedar estancados en el fondo del mismo como ocurría con los dispositivos de la técnica anterior. Por el contrario, al encontrarse el pocilio en posición invertida, la propia fuerza de la gravedad facilita que dichos restos tiendan a salir del pocilio
Los med ios d e l im p ieza mencionados pued en en princip io ser cualesquiera, siempre que permitan la limpieza del pocilio manteniendo éste en posición invertida en todo momento . Sin embargo, en una real ización preferente de la invención dichos medios comprenden fundamentalmente una base y un soporte, sobre el cual se apoyará la placa en posición invertida durante las operaciones de limpieza. Tanto la base como el soporte están normalmente hechos de plástico, metacrilato, polipropileno u otro material similar. A continuación, se describe cada una de estas partes con mayor detalle. a) Base
La base constituye la pieza sobre la que se apoyará el soporte cuando el dispositivo está en funcionamiento y comprende al menos un depósito adecuado para alojar un fluido de lavado. El depósito normalmente consistirá en un pequeño agujero ciego en la superficie superior de la base, preferentemente con un volumen de entre 100 y 300 m ¡crol ¡tros. b) Soporte
El soporte es una pieza algo más compleja que la anterior, estando formada fundamentalmente por una lámina inferior y una lámina superior dispuestas en paralelo:
- La lámina inferior es fundamentalmente una placa plana que está configurada para apoyarse sobre la base. En este contexto, esto significa que la lámina inferior tiene una forma de algún modo complementaria con la forma de la base, de tal modo que ambas "encajan" en su posición correcta. Por ejemplo, la parte superior de l a base y l a l ám ina i nferior pod rían com prender rebord es complementarios que facilitasen el posicionamiento correcto del soporte sobre la base, quedando así ambas "encajadas" una sobre la otra.
- La lámina inferior comprende además al menos una aguja que la atraviesa sustancial mente en perpend icular. En este contexto, el término "sustancialmente" hace referencia a que son posibles pequeñas desviaciones de la normal. Dicha al menos una aguja está situada de tal modo que, cuando el soporte se coloca en su posición correcta sobre la base, su extremo inferior queda introducido en el al menos un depósito de la base. - La lámina superior comprende al menos un orificio de un tamaño correspondiente a un pocilio de la placa, y está situada en paralelo a la primera de modo que el extremo superior de la al menos una aguja sobresale a través de dicho orificio, quedando entre ambas un espacio adecuado para crear el vacío. En este documento, la expresión "adecuado para crear el vacío" quiere decir que dicho espacio entre las láminas superior e inferior estará cerrado de algún modo en los bordes del soporte y tendrá al menos una boca o conexión para acoplar una pequeña bomba de vacío o similar para crear el vacío.
- La lámina superior además está configurada para que la placa de pocilios en posición invertida se apoye sobre la misma, por ejemplo por medio de rebordes adecuados que faciliten el posicionamiento correcto de la placa de pocilios en posición invertida sobre la misma.
Así, el funcionamiento de este dispositivo es el siguiente. Se rellena el al menos un depósito de la base con un líquido de limpieza y, a continuación, se coloca el soporte sobre la base. Al llevar a cabo esta operación, el extremo inferior de la al menos una aguja del soporte queda introducido en el depósito, mientras que el extremo superior de la aguja sobresale ligeramente a través del al menos un orificio de la lámina superior. A continuación, se coloca la placa que se desea limpiar en posición invertida encima del soporte de tal modo que dicho extremo superior de la aguja queda dentro de un pocilio. Por último, se aplica vacío entre las láminas inferior y superior. Esto tiene el efecto, primero, de aspirar restos adheridos al pocilio; luego, de provocar el ascenso del líquido de limpieza a través de la aguja, proyectándose sobre el fondo del pocilio para arrastrar más restos adheridos; y por último, cuando se ha agotado el líquido de limpieza, provocar que una corriente de aire fluya por la aguja y se proyecte sobre el fondo del pocilio, secándolo. Cuando el dispositivo está montado y hay un pocilio sobre el soporte, el extremo superior de la aguja podría en principio quedar a cualquier altura dentro de pocilio invertido siempre que la presión del líquido de limpieza y del aire sea suficiente como para que alcancen las paredes del pocilio y ejerzan una función efectiva de limpieza. Sin embargo, en una realización preferida de la invención la distancia que sobresale el extremo superior de la al menos una aguja por encima de la lámina superior del soporte es ligeramente menor la profundidad de un pocilio de una placa. La expresión "ligeramente menor" hace aquí referencia a que la aguja sobresale una altura tal que su extremo está a una distancia del fondo del pocilio suficientemente pequeña como para que una hipotética gota de liquido que salga de la aguja contacte con el fondo del pocilio antes de resbalar hacia abajo por la aguja por la acción de la gravedad, pero suficientemente grande como para que la boca de la aguja no quede taponada. Así, cuanto más cerca esté la aguja del fondo del pocilio, mayor será el efecto de arrastre de los materiales adheridos al pocilio para igual presión del líquido de limpieza o del aire.
En otra realización particular de la invención, la superficie superior de la lámina superior comprende un recubrimiento que facilita que el apoyo de la placa invertida sobre dicha lámina superior sea hermético, por ejemplo un recubrimiento que comprende caucho, silicona, goma, fibra de vidrio, polímeros plásticos, o combinaciones de los mismos. La adición de este recubrimiento dificulta la entrada de aire entre los bordes del pocilio y la lámina superior, facilitando así la creación del vacío en el espacio entre las láminas inferior y superior. Además, la ad ición de este recubrim iento permite controlar la distancia que sobresalen las agujas sobre la lámina superior, ya que la distancia será mayor para recubrimientos delgados y más pequeña para recubrimientos gruesos. Se permite así el uso del dispositivo con placas de pocilios con diferentes profundidades. Por eso, en una realización preferida más de la invención el recubrimiento es desmontable. Por ejemplo, podría tener un lado adhesivo adecuado para fijarse a la superficie superior de la lámina superior. La presente descripción se ha realizado con la intención de abarcar la versión más básica del dispositivo, que puede comprender únicamente un depósito, una aguja y un orificio, en cuyo caso la limpieza de varios pocilios se realizaría secuencialmente uno tras otro. Por ese motivo, en la descripción se ha mencionado en todo momento "al menos un depósito", "al menos una aguja" y "al menos un orificio". Sin embargo, es evidente que una realización particularmente preferida de la invención comprende una pluralidad de depósitos/agujas/orificios configurados como una matriz cuyas posiciones corresponderían a las de los pocilios de una placa. Por ejemplo, se podría concebir un dispositivo dotado de una matriz de 6, 12, 24, 48, 60, 72, 96 ó 384 depósitos/agujas/orificios cuyas posiciones corresponderían a aquellas de los pocilios de las placas correspondientes. Esto permitiría lavar simultáneamente todos los pocilios de una de tales placas, o bien en dos operaciones si se usa un dispositivo de 48 depósitos/agujas/orificios para una placa de 96 pocilios, y así sucesivamente.
Un segundo aspecto de la invención está dirigido, en general, a un procedimiento de limpieza de una placa de pocilios caracterizado porque se realiza manteniendo la placa en posición invertida. Aunque este procedimiento se podría llevar a cabo de diferentes modos, preferentemente se puede realizar empleando el dispositivo descrito anteriormente, en cuyo caso comprende las siguientes operaciones:
1 ) Rellenar el al menos un depósito con un líquido de limpieza.
2) Colocar el soporte con la lámina inferior apoyada sobre la base, de modo que el extremo inferior de la al menos una aguja se introduzca dentro del al menos un depósito.
3) Colocar la placa en posición invertida sobre la lámina superior de modo que el extremo superior de la al menos una aguja quede dentro de un pocilio de la placa invertida. 4) Aplicar el vacío en el espacio entre la placa inferior y la placa superior del soporte, lo cual provoca:
primero la aspiración del contenido adherido al pocilio, - después el ascenso del líquido de limpieza a través de la aguja, lavando el pocilio de arriba abajo,
por último, agotado el líquido de limpieza, una corriente de aire que arrastra posibles restos que puedan quedar y seca el pocilio BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS
La Fig. 1 representa una vista en perspectiva de una placa de 12 pocilios convencional. La Fig. 2 representa una vista de un soporte correspondiente a un ejemplo de dispositivo de la invención.
La Fig. 3 representa una vista de una base correspondiente a un ejemplo del dispositivo de la invención.
La Fig. 4 representa una sección transversal del soporte y la base representados en las figuras anteriores antes de montar el dispositivo.
La Fig. 5 muestra una sección del dispositivo de la invención montado, justo antes de colocar una placa.
La Fig. 6 muestra la sección del dispositivo de las figuras anteriores durante la limpieza de una placa. REALIZACIÓN PARTICULAR DE LA INVENCIÓN
Se describe a continuación una realización particular del dispositivo (1 ) de la invención y de su modo de operación haciendo referencia a las figuras adjuntas. Como se ha mencionado anteriormente, el dispositivo (1 ) de la invención se puede concebir para acoplarse a placas (100) de cualquier número de pocilios (101 ), por ejemplo 6, 12, 24, 48, 60, 72, 96 ó 384 pocilios. En este ejemplo se describe una placa (1 00) de 1 2 pocilios (1 01 ) únicamente por motivos de simplicidad.
La Fig. 1 muestra una placa (100) convencional de 12 pocilios (101 ), que están dispuestos según una matriz de 3 x 4. La representación es esquemática, apreciándose más detalles de la forma de la placa (100) en las secciones de las Figs. 4-6.
El soporte (4) se ha representado en la Fig. 2, aunque algunos detalles internos que están ocultos en esa figura se aprecian más claramente en la sección de cualquiera de las Figs. 4-6. El soporte (4) está formado por la lámina (5) inferior y la lámina (7) superior dispuestas en paralelo, con un espacio entre ambas para crear el vacío (se ha realizado un corte en la pieza para que se puedan ver estos elementos). Se observa cómo las agujas (6) sobresalen a través de los orificios (8) de la lámina (7) superior. Estas agujas (6) están fijadas a la lámina inferior (5), como se observa en la sección de las Figs. 4-6, donde también se puede ver cómo las agujas (6) sobresalen por debajo del soporte (4).
La Fig. 3 muestra la base (2), que en este ejemplo consiste fundamentalmente en una pieza rectangular hecha de polipropileno y dotada de 1 2 depósitos (3) dispuestos también según una matriz 3 x 4 en posiciones correspondientes a los pocilios (101 ) de la Fig. 1 .
Así, una vez se han llenado de un líquido de limpieza los depósitos (3) de la base (2), se coloca el soporte (4) sobre la base (2) de tal modo que las agujas (6) entran en los depósitos (3), como se muestra en las Figs. 4-5. Para asegurar su correcta ubicación, pueden idearse muescas, salientes, escalones o similares que obliguen a un correcto posicionamiento de ambas piezas. A continuación, se apoya la placa (100) sobre el soporte (4) de tal modo que cada pocilio (101 ) se apoye sobre la lámina (7) superior alrededor de uno de los orificios (8). En esta posición, los extremos superiores de las agujas (6) quedarán introducidos en los pocilios (101 ), cerca de su fondo, como se observa en la Fig. 6. De un modo similar al descrito anteriormente, para asegurar un correcto posicionamiento de la placa (100) sobre el soporte (4) es posible concebir muescas, salientes, escalones o similares que indiquen al usuario la posición adecuada.
La limpieza se lleva entonces a cabo aplicando el vacío en el espacio libre entre las placas inferior (5) y superior (7) del soporte (4). Aunque no se ha representado en las figuras, se entiende que el soporte (4) tiene una boca de conexión que permita acoplar un tubo a través del cual hacer el vacío con ayuda de un compresor o similar. Al aplicar el vacío, se suceden tres fases diferenciadas de operación que dan como resultado la limpieza óptima de los pocilios (101 ). Primeramente, el vacío absorbe una parte de los residuos o restos que se encuentren adheridos al interior del pocilio (101 ). En segundo lugar, el líquido de limpieza de los depósitos (3) es absorbido por el vacío, sube por las agujas (6) y es proyectado con fuerza hacia la superficie interior de los pocilios (101 ), lavando el pocilio (101 ) y arrastrando el resto de los residuos. Por último, una vez el líquido del depósito (3) se ha agotado, el vacío fuerza el ascenso de aire a través de las agujas (6) y lo proyecta contra el interior de los pocilios (101 ), arrastrando los últimos restos que pudiesen quedar y secando el pocilio (101 ).

Claims

REIVINDICACIONES
1 . Dispositivo (1 ) de limpieza de una placa (100) de pocilios (101 ), caracterizado porque comprende medios para lavar el pocilio (101 ) manteniendo dicha placa (100) en posición invertida.
2. Dispositivo (1 ) de acuerdo con la reivindicación 1 , donde dichos medios comprenden: - una base (2), que comprende al menos un depósito (3) adecuado para alojar un fluido de lavado; y
- un soporte (4), que comprende
una lámina (5) inferior configurada para apoyarse sobre dicha base (2) y que comprende al menos una aguja (6) hueca que la atraviesa sustancialmente en perpendicular de tal modo que, cuando el soporte (4) está apoyado sobre la base (2), su extremo inferior se introduce en el al menos un depósito (3) de la base (2); y
una lámina (7) superior que comprende al menos un orificio (8) de un tamaño correspondiente a un pocilio (101 ) de la placa (100), y está situada en paralelo a la lámina (5) inferior de modo que el extremo superior de la al menos una aguja (6) sobresale a través de dicho orificio (8), existiendo entre lámina (5) inferior y la lámina (7) superior un espacio adecuado para crear el vacío, y donde dicha lámina (7) superior está configurada para que la placa (100) de pocilios (101 ) en posición invertida se apoye sobre la misma.
3. Dispositivo (1 ) de acuerdo con la reivindicación 2, donde el al menos un depósito (3) tiene un volumen de entre 100 y 300 microlitros.
4. Dispositivo (1 ) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2-3, donde la distancia que sobresale el extremo superior de la al menos una aguja (6) por encima de la lámina (7) superior del soporte (4) es ligeramente menor que la profundidad de un pocilio (101 ) de una placa (100).
5. Dispositivo (1 ) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2-4, donde la parte superior de la base (2) y la lámina (5) inferior del soporte (4) comprenden rebordes complementarios para facilitar un posicionamiento correcto del soporte (4) sobre la base (2).
6. Dispositivo (1 ) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2-5, donde la lámina (7) superior del soporte (4) comprende rebordes adecuados para facilitar un posicionamiento correcto de la placa (100) de pocilios (101 ) en posición invertida sobre el soporte (4).
7. Dispositivo (1 ) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2-6, donde la superficie superior de la lámina (7) superior comprende un recubrimiento que facilita que el apoyo de la placa (100) invertida sobre dicha lámina superior (7) sea hermético.
8. Dispositivo (1 ) de acuerdo con la reivindicación 7, donde el recubrimiento comprende caucho, silicona, goma, fibra de vidrio o polímeros plásticos, o combinaciones de los mismos.
9. Dispositivo (1 ) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 7-8, donde el recubrimiento es desmontable.
10. Dispositivo (1 ) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2-9, que comprende una pluralidad de depósitos (3), orificios (8) y agujas (6) formando una matriz cuyas posiciones son equivalentes a las de los pocilios (101 ) de una placa (100).
1 1 . Dispositivo (1 ) de acuerdo con la reivindicación 10, donde la matriz de depósitos (3), orificios (8) y agujas (6) tiene 6, 12, 24, 48, 60, 72, 96 ó 384 posiciones.
12. Procedimiento de limpieza de una placa (100) de pocilios (101 ), caracterizado porque se realiza manteniendo la placa (100) en posición invertida.
13. Procedimiento de limpieza de acuerdo con la reivindicación 12 que se lleva a cabo empleando el dispositivo (1 ) de cualquiera de las reivindicaciones 2-1 1 , que comprende las siguientes operaciones:
- rellenar el al menos un depósito (3) con un líquido de limpieza; - colocar el soporte (4) sobre la base (2), de modo que el extremo inferior de la al menos una aguja (6) se introduzca dentro del al menos un depósito (3);
- colocar la placa (100) en posición invertida sobre la lámina (7) superior de modo que el extremo superior de la al menos una aguja (6) quede dentro de un pocilio (101 ) de la placa (100) invertida; y
- aplicar el vacío en el espacio entre la placa (5) inferior y la placa (7) superior del soporte (4), lo cual provoca
primero la aspiración del contenido adherido al pocilio (101 ), después el ascenso del líquido de limpieza a través de la aguja (6) que lava el pocilio (101 ) de arriba abajo,
por último, agotado el líquido de limpieza, una corriente de aire a través de la aguja (6) que arrastra posibles restos que puedan quedar y seca el pocilio (101 ).
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