WO2011058600A1 - Pgc-1の発現制御装置、並びに虚血性疾患の治療装置及び治療方法 - Google Patents
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Abstract
Description
(第1の実施形態)
本発明に係るPGC-1の発現制御装置の一実施形態について、図1を参照して以下に説明する。図1は、本発明に係るPGC-1の発現制御装置1の一実施形態を示すブロック図である。図1に示すように、本発明に係るPGC-1の発現制御装置1は、本体部10及びプローブ20により構成されている。本体部10には、ユーザインターフェース(UI)11、コントローラ(制御手段)12、電源部13及び1つ以上の超音波送信部14(超音波照射手段)が備えられている。プローブ20には、1つ以上の探触子(超音波放出端子)21が備えられている。プローブ20は、本体部10とは独立したハウジング内に設けられていてもよく、本体部10と同一ハウジング内に、本体部10とは独立して設けられていてもよい。また、プローブ20を本体部10にケーブル等により接続し、プローブ20が本体部20から離れた位置で動作し得るように構成していてもよい。
本発明に係るPGC-1の発現制御装置の他の実施形態について、図2を参照して以下に説明する。図2は、本発明に係るPGC-1の発現制御装置1aの他の実施形態を示すブロック図である。図2に示すように、本実施形態に係るPGC-1の発現制御装置1aは、超音波送信部14が1つである点と、切り替えスイッチ15を備えている点とにおいて第1の実施形態のPGC-1の発現制御装置1と異なっている。本実施形態においては、第1の実施形態と異なる点についてのみ詳細に説明し、他の説明は省略する。
次に、PGC-1の発現制御装置1及び1aのプローブ20又は20aに備えられた探触子21の構成について、図3(a)及び(b)を参照して説明する。図3(a)及び(b)は、本発明に係るPGC-1の発現制御装置の1及び1aの探触子21の構成例を示す模式図である。図3中(a)は、探触子21の上面図を示しており、図3中(b)は探触子21の断面図を示している。
本発明に係る虚血性疾患の治療装置は、上述した本発明に係るPGC-1の発現制御装置1を備えている。本発明に係る虚血性疾患の治療方法は、生体に超音波を照射してPGC-1の発現を促進する発現促進工程を包含している。また、本発明に係る虚血性疾患の治療方法は、生体に超音波を照射する超音波照射工程をさらに包含していてもよい。本発明に係る虚血性疾患の治療方法において、発現制御工程及び超音波照射工程は本発明に係るPGC-1の発現制御装置1によって行うことができる。
(実施例1)
ヒト間葉系幹細胞(MSC)を用いて、超音波照射によるPGC-1及びVEGFの発現量の変化について調査した。
実施例1と同様に調製したヒト間葉系幹細胞において、超音波照射によるHIF-1αの発現量の変化を実施例1と同様に調査した。結果を図8に示す。図8に示すように、HIF-1αのRNA発現量は、超音波照射によって変化しなかった。
血管新生モデルマウスを用いて、超音波照射によるPGC-1及びVEGFの発現量の変化について調査した。
-80℃で保存していた凍結組織を、クリオスタット(LEICA CM1950)内で-25℃に戻し、5μmの厚みになるように薄切した。薄切組織切片をAPSコートスライドガラス(S8441;松浪硝子工業株式会社製)に接着させた。室温で30分間風乾させ、10%中性緩衝ホルマリン液中(062-01661;和光純薬工業株式会社製)で10分間固定した。固定した組織切片をマイヤーヘマトキシリン(サクラファインテックジャパン株式会社製)で12分間染色後、温水発色し、さらにエオジン(サクラファインテックジャパン株式会社製)で10分間染色後、流水水洗した。染色後の組織切片の脱水及び透徹処理を行い、封入した。封入した組織切片について、倒立式光学顕微鏡(OLYMPUS IX81)により顕微鏡写真を撮影した。結果を図15~17に示す。
-80℃で保存していた凍結組織を、クリオスタット(LEICA CM1950)内で-25℃に戻し、5μmの厚みになるように薄切した。薄切組織切片をAPSコートスライドガラス(S8441;松浪硝子工業株式会社製)に接着させた。室温で30分間風乾させ、アルカリ性ホスファターゼ染色キットを用い、定法に従ってアルカリ性ホスファターゼ染色を行った。染色した組織切片を、倒立式光学顕微鏡(OLYMPUS IX81)により顕微鏡写真を撮影した(図18~20)。
-80℃で保存していた凍結組織(虚血側下肢)を、クリオスタット(LEICA CM1950)内で-25℃に戻し、5μmの厚みになるように薄切した。薄切組織切片をAPSコートスライドガラス(S8441;松浪硝子工業株式会社製)に接着させた。室温で30分間風乾させ、10%中性緩衝ホルマリン液中で10分間固定した。TBSTで十分に洗浄し、1.5%過酸化水素水加メタノール処理により内在性ペルオキシダーゼを失活させた。TBSTで十分に洗浄した後、TBST中に溶解させた0.5%blocking reagent(1096176;ロシュダイアグノスティックス株式会社)を用いて、ブロッキング処理を室温で1時間行った。
10、10a 本体部
11 ユーザインターフェース
12 コントローラ(制御手段)
13 電源部
14 超音波送信部(超音波照射手段)
15 切り替えスイッチ
20、20a プローブ
21 探触子(超音波放出端子)
Claims (11)
- 対象に超音波を照射する超音波照射手段を備えたことを特徴とするPGC-1の発現制御装置。
- 周波数が0.5~3MHz±10%の範囲内の超音波を上記対象に照射するように上記超音波照射手段を制御する制御手段をさらに備えていることを特徴とする請求項1に記載のPGC-1の発現制御装置。
- 上記制御手段は、上記対象に超音波を1日あたり20~40分間±10%の範囲内で照射するように上記超音波照射手段を制御することを特徴とする請求項2に記載のPGC-1の発現制御装置。
- 上記超音波照射手段は、上記対象に対して媒体を介して非侵襲的に接触し、上記対象に照射する超音波を放出する少なくとも1つの超音波放出端子をさらに備えていることを特徴とする請求項1~3のいずれか1項に記載のPGC-1の発現制御装置。
- 複数の上記超音波放出端子のそれぞれを時分割で順次駆動して超音波を放出させるように上記超音波照射手段を制御する制御手段を備えていることを特徴とする請求項4に記載のPGC-1の発現制御装置。
- 請求項1~5のいずれか1項に記載のPGC-1の発現制御装置を備えたことを特徴とする虚血性疾患の治療装置。
- 生体に超音波を照射してPGC-1の発現を促進する発現促進工程を包含することを特徴とする虚血性疾患の治療方法。
- 周波数が0.5~3MHz±10%の範囲内の超音波を上記生体に照射する超音波照射工程をさらに包含することを特徴とする請求項7に記載の虚血性疾患の治療方法。
- 上記超音波照射工程において、上記生体に超音波を1日あたり20~40分間±10%の範囲内で照射することを特徴とする請求項8に記載の虚血性疾患の治療方法。
- 上記超音波照射工程において、複数の超音波放出端子のそれぞれから時分割で順次放出された超音波を、上記生体に照射することを特徴とする請求項8又は9に記載の虚血性疾患の治療方法。
- 上記超音波照射工程において、上記生体の患部に超音波を照射することを特徴とする請求項8~10のいずれか1項に記載の虚血性疾患の治療方法。
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