WO2010096951A1 - 一年生棉花的多年生杂交制种方法 - Google Patents

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WO2010096951A1
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cotton
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perennial
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PCT/CN2009/000213
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周瑞阳
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广西大学
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G2/00—Vegetative propagation
    • A01G2/30—Grafting
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H1/00—Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
    • A01H1/02—Methods or apparatus for hybridisation; Artificial pollination ; Fertility
    • A01H1/022—Genic fertility modification, e.g. apomixis
    • A01H1/023—Male sterility

Definitions

  • the present invention relates to a method of producing hybrid seed crops, particularly to a perennial annual cotton hybrid seed production methods. Background technique
  • the main cultivars of cotton include Upland cotton (Gossypium hirsutum L.) and Sea Island cotton (G. barbadence L. Terrestrial carp is an annual plant. Island cotton has two types of annual and perennial, but large-area is still an annual island cotton.
  • the heterosis of cotton is very significant, but the existing hybrid seeds are either annual land cotton or annual seaweed cotton parent, artificial emasculation, or hybridization of annual male sterile line and restorer line in the main cotton producing area. produce.
  • the main disadvantages are:
  • the male sterile line isolated from the nuclear male sterile line is generally used ( The genotype is msms)
  • the hybridization of the fertile sister strain (genotype Msms) mixed with the fertility gene is maintained, and the seed progeny from the sterile plant still exhibit the sterile and fertile plants' 1 : 1 Separation, therefore, hybrid breeding farms must remove about 50% of male fertile plants in the maternal area each year, 'concentrating workload, labor intensity; and because cotton is infinite inflorescence, long flowering period, when temperature>: 35 °C elbow
  • Some male sterile plants will have a small amount or a small amount of pollen (Liu Qiang, Zhongmian Institute 38 sterile line hybrid seed production technology, China Cotton, 2004 (8): .35), which will affect the purity of hybrid seeds; Due to the heterogene
  • the invention does not solve the breeding problem of the sterile line, but only utilizes the characteristics of the sterile line in the tropics: 3 ⁇ 4 area can be more 'years of growth, but because the annual cotton roots are shallow, easy to premature aging, is the best fit Under the growing temperature conditions, the cockroaches can only be cultivated for 3-5 years, and need to be reseeded. Summary of the invention
  • the object of the present invention is to overcome the deficiencies of the prior art and to provide a cotton hybrid seed production method which is simple, fast, low cost and wide in scope.
  • the present invention provides a perennial hybrid seed production method for annual cotton, the steps of which are as follows:
  • the environmental conditions for the perennial hybrid seed production method of the above annual cotton are preferably the coldest month in the winter, the average temperature > io °c and the lowest temperature. > o °c (including the climatic zone, special terrain and artificial conditions, etc.) ).
  • the parent is a female parent and/or a male parent, and is usually a female parent and/or a male parent who is difficult to breed (such as a male sterile line) or a sexually propagated offspring, and is capable of maintaining its traits.
  • the fertile, semi-sterile and hybrid plants are removed during the planting and/or grafting year.
  • the natural wintering rate is >75% for the winter survival rate.
  • the perennial cotton germplasm. Resources include the perennial type of sea-island cotton, the perennial type in the wild cotton of the upland cotton or other perennial cotton germplasm resources in the cotton genus.
  • the rootstock is a cotton seedling or plant.
  • the overwinter survival rate of the rootstock is 100%.
  • the rootstock has no adverse effects on the growth and development, fertility performance, yield and quality of the scion. In the area where there is cotton-borne disease, the rootstock should also be required to resist soil-borne diseases.
  • the scion is a sprout of cotton seedlings or plants, a regenerated shoot after natural wintering, or a regenerated shoot after wintering of the grafted plant.
  • the perennial cultivation takes the following management measures:
  • the invention adopts the perennial cotton hybrid parent to carry out perennial cultivation, and the hybrid breeding field does not need to be planted every year during the cultivation period except for the planting year, and does not need to cultivate the land every year, and does not need to go to the miscellaneous every year; using this method, the nuclear male is not It is not necessary to remove the fertile plants in the maternal area during the cultivation of the breeding line; because various types of male sterile lines can maintain their male sterility by using the method of cultivation, which greatly reduces the male The breeding cost of the sterile line; not only simplifies the hybrid seed production process, but also the seed production is about 30% higher than the annual cotton because of the long reproductive period of the cotton parent.
  • the invention realizes the perennial cultivation of the annual cotton hybrid parent which cannot be naturally wintered by grafting the annual cotton hybrid parent to the perennial cotton plant, and can overcome the shortcoming of the annual cotton root system and the short cultivation period of the perennial cotton, and the grafted plant can maintain the variety. Fertility characteristics, yield and quality, in which cotton shoots or regenerated shoots are used for scioning and perennial cultivation to achieve asexual reproduction of the variety, and to maintain the fertility characteristics, yield and quality of the variety.
  • the method of the present invention is applicable to the condition that the average temperature of the coldest month is > 10 ° C, thereby expanding the perennial cultivation area of cotton from the tropic to the south subtropical zone, ' ⁇ in both the southern subtropical zone and the south of the south, Can promote a wide range of applications. Because of the south of South China, which can be cultivated by cotton in China, it has become a cotton producing area with less cotton-planting surface, which is easy to be isolated. It is beneficial to improve the purity of hybrid seeds; and because of the rich source of insects, it is beneficial to insect pollination and increase seed production. Detailed ways
  • the natural winter survival rate is over 95.5 %, and the natural winter survival rate of the fertile sister plants is 65% (due to the need to remove all fertile plants during seed production, the lower wintering rate has no effect on hybrid seed production);
  • the natural winter survival rate of the Restoration State 284 is 75% (the next year, because the plant is tall, the density is thin, so 75% of the wintering rate can be), the wintering rate of the next year and the third year is 100. %, the fourth year (ie 2008)'s natural wintering rate is 0.
  • the cultivation of the cave A and the national trial 284 was carried out directly, and the cave A and the national trial 284 were planted in Nanning, Guangxi, according to the planting time, planting density and cultivation management methods of the local annual cotton.
  • the cotton field cultivating, 'cultivating soil, re-applying organic fertilizer; excavating the fertile plant of the dense cotton plant and the hole A; the pruning method of the subtropical fruit tree, the main stem stub
  • the height is 80-100cm, cut off the weak skills, disease skills, choose to keep 2-3 strong branches, such as the branches are weak, leaving no side branches, leaving only the main stem. From the next year of cotton planting, cotton enters the perennial period.
  • the sterile plants of the Suspension or the annual male sterile line A are used as the female parent, and the sustenance or the annual recovery is 284 as the male parent.
  • the results show that: the father and the mother are all twins, there are 3 ringing peaks, while the father and the mother are all annual, only two peaking, the former seed production is about 32% higher than the latter.
  • the labor consumption is reduced by 22%, and the cost of useless seeds is reduced by about 54% per unit weight of hybrid seeds.
  • the X-year-old restorer line of the male sterile line of the twins is equivalent to the annual output of the parents.
  • the production cost of hybrid seed was reduced by about 12%. Comparing the yield and quality of the male sterile line and the annual male sterile line with the same male parent, the results showed no significant difference. It can be seen that the use of the planting plants for hybridization has high yield, low labor and low cost.
  • rootstocks are: A, fluff cotton (a perennial cotton, collected from Hainan Island); B, jointed kapok (perennial island cotton, collected from Hainan Island); C, terrestrial cotton cytoplasmic male sterile line P2001A ( Quoted from Hubei Academy of Agricultural Sciences) X-Puffen cotton (sourced above)? 1 hybrid; D, P2001A (source as above) X-linked nuclear kapok (source as above) 1 hybrid. It has been identified that the above four rootstock materials have been 100% normal wintering in Nanning for 6 consecutive years, and their adult plants were treated with low temperature stress of 0 °C in artificial climate chamber, indicating that they can withstand low temperature of 0 °C for 5 consecutive days. These materials were inoculated and identified, indicating that the rootstock is resistant to cotton wilt and verticillium
  • the nuclear male sterile line GA5 does not normally winter in Hubei, and is a one-year-old cotton.
  • the joint nuclear kapok perennial island cotton, collected from Hainan Island
  • the grafting method was used to breed the nuclear male sterile line GA5 (from the Institute of Economic Crops of Sichuan Academy of Agricultural Sciences). )
  • the fertile plants are removed during the flowering period, and the plastic greenhouses are used for heat preservation every winter, so that the average temperature in the greenhouse is greater than or equal to 10 °C in January, so that it can be safely overwintered and grow in the roots to establish nuclear male sterility in the main cotton producing areas.
  • the method of cultivation of the perennial is the same as in the first embodiment.
  • the cotton hybrid seed production method provided by the invention can carry out the perennial cotton parent for continuous multi-year cultivation and is used for hybrid seed production, and does not need to plant, cultivate the land and remove the miscellaneous, especially the cotton males, during the cultivation of the roots. Breeding of breeding lines, because it does not need to maintain the line, and can grow for many years, thereby greatly reducing the production cost of hybrid seeds, and the seed production during perennial cultivation is higher, therefore, the method of the present invention can simplify the hybridization of cotton. Procedures, reduce seed production costs and increase seed production.
  • the method of the invention has a wide application range, and only requires the coldest month average temperature > 10 ° 0 and the minimum temperature > o ° c , which is applicable in the hot zone and the southern subtropical region. Therefore, the method of the present invention has strong industrial applicability in cotton hybrid seed production.

Description

一年生棉花的多年生杂交制 ί中方法 技术领域
:本发明涉及作物的杂交制种方法，具体涉及一种一年生棉花多年 生杂交制种方法。 背景技术
棉花主要栽培种有陆地棉（ Gossypium hirsutum L. )和海岛棉（ G. barbadence L 陆地槺为一年生植物， 海岛棉有一年生和多年生两 种， 但大面积栽培的仍是一年生海岛棉。
棉花杂种优势十分显著，但现有的杂交种子都是用一年生陆地棉 或一年生海岛棉亲本， 釆用人工去雄杂交， 或利用一年生雄性不育系 与恢复系杂交的方法， 在棉花主产区生产。 其主要缺点是：
( 1 ) 必须每年耕整土地、 播种和繁殖亲本种子。
( 2 ) 亲丰繁殖和杂交制种， 必须每年去杂去劣。
( 3 ) ·利用细胞核雄性不育系虽然易于找到恢复系和组配出强优 势组合， 但不育系的繁殖存在问题， 一般利用细胞核雄性不育两用系 中分离出的雄性不育株 （基因型为 msms ) 与育性基因杂合的可育姊 妹株（基因型为 Msms ) 杂交的方法保持， 从不育株上收的种子繁殖 后代仍然表现不育株与可育株 '的 1 : 1分离， 因此， 杂交制种田必须每 年拔除母本区 50%左右的雄性可育株， '工作量集中， 劳动强度大； 且 因棉花是无限花序， 花期长， 当气温〉:35 °C肘， 有的雄性不育株会出 现少量或微量花粉（刘强， 中棉所 38不育系杂交制种技术浅谈, 中国 棉花， 2004 ( 8 ): .35 ), 由此将影响杂交种子纯度； 还因群体中可育 株与不育株分布的不均匀性,' 往往存在连续拔除多株可育株的问题， 既浪费.了土地空间， 又增加了种子生产成本。
( 4 )利用细胞质雄性不育系与保持系回交的方法虽能倮持雄性 不育特性， 但现有细胞质雄性不育系多.数具哈克尼西棉细胞质， 其恢 复系较少， 且杂交后代存在不育细胞质的不良效应等问题； 其他类型 的细胞质雄性不育系也由于多年釆用有性繁殖的方法， 于发生遗传 漂移， 导致不育系中可育株的发生。
/因此， 尽管人工去雄存在投入大、 成本高等问题, 但由于没有更 好的棉花杂交种子生产方法,'目前仍以人工去雄杂交制种为主， 为降 低种子生产成本， 一般利用 F2代。
.:四川省农业科学院经济作物育种栽培研究所和四川诺亚生物科 技有限公司， 根据棉花在热带地区的多年生特性， 于 2007年申请了 1 '项国家发明专利，'发明名.称为"利用棉花雄性不育系和恢复系进行宿 根再生的杂交制种方法 "， '申请号为 200710049843.0. · .该发明 '指出棉 . 花植株能够越冬的制.种区是冬季最低温度 10 °C， 年曰照时数 1700-2100小时， 日照百分率为 50-60%·, 全年降雨量为 800-1200mm的 地区。 从温度条件看, 应属于中热带地区 （盛承禹等编.著.中国气候 总论.科学出版社， 1986, 第 406页), 但热带有旱季和雨季之分， 雨. 季多台风，. 不利于棉花的杂交制种.， 所以， 又要求其降雨量小于 1200mm。 因此， 满足上述所有条件的地区是很少的， 可能只有云南 或云南与四川交界的部分地.区具有这种小气候特征， 而这些地区， 大 多比较偏远 ·， 交通不便， 不利于棉花的规模化杂'交制种。 而且， 该发 明连没有解决不育系的繁殖问题，只是利用了不育系在热带： ¾区可多' 年生长的特性， 但由于一年生棉花根系入土浅， 易早衰， 就是在最适 '合生长的温度条件下一般 ΐ只能宿根裁培 3-5年， 又需要重新播种。 发明内容
本发明的目的是克服现有技术的缺陷， 提供简便、'快捷、 成本低 且适用范围广的棉花杂交制种方法。
为实现上述目的，本 明提供一种一年生棉花的多年生杂交制种 方法， 其步骤如下：
( 1 ) .种植配制杂交组杏所需的一年生棉花杂交亲本， 鉴定其自 然越冬再生力'；
( 2 )对于不能自然越冬的 '一年生棉花杂交亲本， 以棉属中能够 自然越冬的多年生棉花种质资源为砧木， 以不能自然越冬的一年生棉' 花牵交亲本为接穗进行嫁接， 并宿根栽培所得嫁接植株； 对于能够自 然越冬的一年生棉花杂交亲本, 直接种植并宿根栽培其实生植株， 或 以上述方法嫁接后宿根栽培嫁接植株；
( 3 )在种'植和 /或嫁接的当年和宿根栽培期间， '利用上述实生植 株和 /或嫁接植株， 进行杂交制种。
上述一年生棉花的多年生杂交制种方法的环境条件优选为冬季 最冷月平均气温 > io°c且最低气温 .> o°c (包括符合这一气温条件的 气候带、.特殊地形和人工条件等）。
所述亲本为母本和 /或父本， 通常为繁殖难度高（如雄性不育系） 或有性繁殖后代难以保持其性状的母本和 /或父本， 对其进行宿根栽 培， 能够降低杂交制种的难度和成本。
所述母本为细胞核雄性不育两用系时， 在种植和 /或嫁接当年拔 除其中的可育株、 半不育株和混杂株。
所述母本为细胞质雄性不育系时， 在种植和 /或嫁接当年需要去 杂去劣。
所述能够自然越冬为越冬成活率 > 75 %。
因一年生棉花的根系较弱，所述能够自然越冬的一年生棉花杂交 亲本直接种植并宿根栽培 5年后需重新播种。
所述多年生棉花种质.资源包括海岛棉多年生类型、陆地棉野生种 系中的多年生类型或棉属中其他多年生棉花种质资源^其杂交后代。
所述砧木为棉花实生苗或植株。
.所述砧木的越冬成活率为 100%。
所述砧木对接穗的生长发育.、育性表现、产量和品质无不良效应。 在有棉花土传病害的地段种植， 还应要求所述砧木抗土传病害。 所述接穗为棉花实生苗或植株的嫩芽、自然越冬后的再生芽或其 嫁接植株越冬后的再生芽。
所述宿根栽培釆取如下管理措施：
( 1 ) 种植棉花当年： 按照当地一年生棉花的播种期、 种植密度 和栽培管理方法进行栽培和管理；父母本行比与一年生棉花杂交制种 相同；
( 2 ) 种植棉花次年及以后 早春萌发新芽后， 选留健壮芽培育 成侧枝， 并及时去除赘芽； 夏季和秋季打顶、 修剪和抹除赘芽， 多次 施肥并及早防治病虫害； 冬季进行棉田中耕、 培土并重施有机肥； 冬 季或早春， 挖除过密棉株， 参照亚热带果树的修剪方法修剪。
本发明对一年生棉花杂交亲本进行宿根栽培，杂交制种田除种植 当年外， 宿生栽培期间不需每年播种， 不需每年耕整土地， 不需每年 去杂去劣; 利用该方法， 细胞核雄性不育系宿生栽培期间也不需拔除 制种田母本区的可育株； 因各种类型的雄性不育系均可釆用宿生栽培 法保持其雄性不育特性， 从而极大地减少了雄性不育系的繁殖费用； 不但简化了杂交种子生产程序, 且因宿生棉花亲本的生殖生长期长, 制种产量比一年生棉花高 30%左右。
本发明通过将一年生棉花杂交亲本嫁接于多年生棉花植株，实现 了对不能自然越冬的一年生棉花杂交亲本的多年生栽培，并能够克服 一年生棉花根系浅、 宿根栽培期短的缺点， 嫁接植株能够保持品种的 育性特征、 产量和品质， 其中以棉花植株上的嫩芽或再生芽为接穗进 行嫁接和多年生栽培能够实现品种的无性'繁殖，并保持品种的育性特 征、 产量和品质。
此外， 本发明方法适用.于最冷月平均气温 > 10°C的条件下， 从而 将棉花的多年生栽培区域由热带向北扩展到南亚热带, '·在南亚热带及 其以南地区均适用， 能够大范围推广应用。 由于我国能进行棉花宿生 栽培的华南南部， 已成为植棉面积极少的棉花产区， 易于空间隔离， 有利于提高杂交种子纯度； 且因虫源丰富， 有利于昆虫传粉和提高制 种产量。 具体实施方式
以下实施例用于说明本发明， 但不用来限制本发明的范围。 经 2004年种植鉴定， 陆地棉细胞核雄性不育系洞 A (引自湖北省 种子集团公司） 的不育株在广西南宁 .（1月平均温度为 14.1 °C， 最低 温度为 5.6°C )的自然越冬成活率达 95.5 %以上， 而其可育姊妹株的自 然越冬成活率为 65% (因制种时需要将可育株全部拔除， 其越冬率较 低对杂交制种没有影响）； 其恢复系国审邯 284的自然越冬成活率为 75% (种植次年， 因植株高大， 密度宜稀， 所以 75%的越冬率就可以 了）， 种植次年和第三年的越冬率为 100%, 第四年（即 2008年）'的自 然越冬率为 0。
2004〜2007年， 直接对洞 A和国审邯 284进行宿根栽培， 在广西南 宁播种洞 A和国审邯 284, 按照当地一年生棉花的播种时间、 种植密 度和栽培管理方法进行种植和管理。 种植棉花当年的越冬期即次年 1 月份进行棉田中耕、'培土， 重施有机肥； 挖除过密棉株和洞 A的可育 株； 参照亚热带果树的修剪方法修剪， 一般主茎留桩高度为 80-100cm, 剪除弱技、 病技， 选留 2-3根健壮枝条， 如枝条均较弱， 可不留侧枝， 只留主茎。 自种植棉花次年开始， 棉花进入宿根期， 每 年 1-2月份是多年生棉的越冬期， 此时棉株生长缓慢或停止生长， 在 1 月份， 要进行棉田中耕、 培土， 重施有机肥； 挖除过密棉株； 参照亚 热带果树的修剪方法修剪。 从 3月〜 12月， 是多年生棉花的生长期。 要 注意： 早春萌发新芽后， 选留 3个左右健壮芽培育成侧技， 并及时去 除赘芽； 夏季和秋季要注意打顶、修剪、抹除赘芽，使通风透光良好; 多年生棉产量高， 需肥量大,.要多次施肥以增加施肥量， 并及早防治 病虫害。 然后分别以宿生或一年生雄性不育系洞 A的不育株为母本， 以宿 生或一年生恢复系国审邯 284为父本， 父本： 母本的行比为 1 : 4, 比 较宿生不育系 X宿生恢复系、宿生不育系 X 年生恢复系、一年生不育 系 X—年生恢复系棉花的杂交制种产量。 结果表明： 父、 母本均为宿 生的， 有 3次结铃高峰， 而父、 母本均为一年生的， 只有两次结铃高 峰， 前者的制种产量比后者提高了约 32 % , 用工量减少了 22%, 且无 用种成本， 单位重量杂交种子的生产成本降低了约 54%; 宿生雄性不 育系 X—年生恢复系， 其制种产量与父母本均为一年生的相当， 但杂 交种子生产成本降低了约 12%; 比较宿生雄性不育系及一年生雄性不 育系与同一父本杂交后代的产量、品质，表明二者无显箸差异。可见， 利用宿生栽培植株进行杂交制种产量高、 用工少且成本低。
上述洞 A的不育株种植 3-5年后需重新播种， 恢复系国审邯 284种 植 3年后需重新播种。
实施例 2
2005年， 以实施例 1中所述的不育系洞 A和恢复系国审邯 284植株 的越冬再生芽为接穗， 以蓬蓬棉（一种多年生棉花， 釆自海南岛）.和 联核木棉（一种多年生棉花， 采自海南岛）为砧木进行嫁接， 栽培嫁 接株， 嫁接植株连续 4年的越冬成活率为 100%, 且经受了 2008年 1月 的寒冷天气考验。 宿根栽培该嫁接植株并进行杂交制种， 能够提高制 种产量， 并降低生产成本。
实施例 3
'经鉴定，欲配制杂交组合的母本陆地棉细胞核雄性不育两用系洞 A和海岛棉细胞核雄性不育两用系 H04A (广西大学自选）中的不育株 2004年在广西南宁的自然越冬成活率分别为 95.5 %和 92.3 %。
2004年在广西南宁 （1月.平均温度为 14.1 °C， 最低温度为 5.6°C ) 进行了 4种砧木与 2个雄性不育系接.穗的嫁接组合试验， 共 8个嫁接组 合， 并与恢复系进行了杂交制种： 其中 2个接穗为： A、 2004年引自湖北省种子集团公司的陆地棉 细胞核雄性不育两用系洞 A的种子繁殖苗； B、 自选的一年生海岛棉 细胞核雄性不育两用系 H04A的种子繁殖苗。 经鉴定， 接穗 A和 B在南 宁不能 100%自然越冬。
其中 4种砧木为： A、 蓬蓬棉 （一种多年生棉花， 采自海南岛）； B、 联核木棉 （多年生海岛棉， 采自海南岛）； C、 陆地棉细胞质雄性 不育系 P2001A (引自湖北省农业科学院） X蓬蓬棉 （来源同上）？1杂 交种； D、 P2001A (来源同上） X联核木棉 （来源同上） 1杂交种。 经鉴定， 上述 4份砧木材料在南宁连续 6年种植均表现 100%正常越冬， 其成株期经人工气候箱 0°C的低温胁迫处理，表明其能忍耐 0°C低温连 续 5天。 对这些材料进行了接种鉴定， 表明砧木耐棉花枯萎病和黄萎 病 '
2004年 3月 7日， 在南宁同时播种砧木和接穗的种子， 砧木在营养 杯中育苗， 接穗在苗床育苗； 待砧木长出真叶时取接穗进行嫁接。 嫁 接后， 将嫁接苗置于盖有塑料薄膜的小拱棚内保温、 保湿， 嫁接后， 将嫁接苗置于盖有透明塑料薄膜的小拱棚内保温、保湿， 待接口愈合 后（嫁接后第 6天）揭开塑料薄膜, .遮阳网下炼苗 2天后， 选择嫁接成 功并生长健壮的嫁接苗移栽大田， 进行宿根栽培。 宿根栽培的方法同 实施例 1。
2006年 2月 15日提早播种恢复系国审邯 284,在塑料大棚中营养杯 育苗， 当气温适合棉花栽培时移栽到大田， 母本（上述 8个嫁接组合 中雄性不育系的不育嫁接株）与父本（恢复系国审邯 284 )的行比为 1: 4, 采取高肥水管理措施促进生长发育， '以使其生育期与上述嫁接植 株接近， 以提高制种产量。 上述 8个嫁接组合的嫁接株与恢复系的杂 交种子产量比 3月份正常播种的相应一年生雄性不育系 X—年生恢复 系提高 10%左右。 .
2008年 1月， 南宁遭遇有史以来最严重的冷害天气。 1月 14日至 2 月 5曰连续 23天日平均气温在 10°C以下， 其中日均温在 5°C以下的有 7 天， 最低气温 5°C以下的有 13天， 极端最低温度为 1.6°C , 月均温为 9.8°C。 但 4中砧木材料的成活率仍为 100%, 上述 8个嫁接组合的嫁接 棉株在南宁经受了 2008年 1月的低温.灾害天气后， 成活率亦为 100%, 而未嫁接的洞 A和 H04A的自根苗对照株则全部因冷害死亡。
对上述 4种砧木、 2种不育系接穗所形成的 8种嫁接组合进行的试 验表明， 所有砧木与接穗的嫁接亲和性很好， 不存在砧木与接穗的特 异性选择， 所有砧木对接穗的经济性状和产量品质均无不利影响。 至 2009年 1月 , 上述 8个嫁接组合的嫁接株已连续宿根栽培达 5年之久， 能够 100%安全越冬， 生长正常， 并且没有可育株的分离， 能够持续 用于杂交制种， 极大减少了雄性不育系的繁殖费用， 简化了杂交制种 的程序。
实施例 4
经鉴定， 细胞核雄性不育两用系 GA5在湖北不能正常越冬， 为一 年生棉花。 2006年， 在湖北省公安县， 以联核木棉 （多年生海岛棉， 采自海南岛） 为砧木， 釆用嫁接法繁殖细胞核雄性不育两用系 GA5 (引自四川省农业科学院经济作物研究所）, 花期拔除可育株， 以后 每年冬季用塑料大棚保温， 使大棚内 1月平均气温大于或等于 10°C， 使其安全越冬， 得以宿根生长， 以在棉花主产区建立细胞核雄性不育 系的原始亲本圃。 宿根栽培的方法同实施例 1。
2007年和 2008年， 每年以上述联核木棉为砧木， 以雄性不育系 GA5原始亲本圃中越冬植株上的再生芽为接穗嫁接， 栽培其嫁接株， 同时栽培种子繁殖的恢复系国审邯 284的实生苗， 进行杂交制种。
由此建立了雄性不育系塑料大棚越冬再生与一年生恢复系的杂 交种制种技术体系。 其优点是可直接在棉花主产区杂交制种， 以利于 制种技术指导和减少种子运输费用，缺点是每年要进行不育系和恢复 系的繁殖。 工业实用性
本发明所提供的棉花杂交制种方法，能够对一年生棉花亲本进行 连续多年的宿根栽培并用于杂交制种， 宿根栽培期间不需每年播种、 耕整土地和去杂去劣，特别是棉花雄性不育系的繁殖，因不需保持系， 且可多年生长， 从而极大地减少了杂交种子生产费用， 并且宿根栽培 期间的制种产量较高， 因此， 应用本发明方法的方法可简化棉花杂交 制种程序、 降低制种成本并提高制种产量。 此外， 本发明方法的适用 范围比较广， 仅要求最冷月平均气温> 10°0且最低气温 > o°c , 在热 带和南亚热带地区均适用。 因此， 本发明方法在棉花杂交制种中具有 较强的工业实用性。

Claims

权 利 要 求 书
1、 一种一年生棉花的多年生杂交制种方法， 其步骤如下：
( 1 )种植配制杂交组合所需的一年生棉花杂交亲本， 鉴定其自 然越冬能力;
( 2 )对于不能自然越冬的一年生棉花杂交亲本， 以棉属中能够 自然越冬的多年生棉花种质资源为砧木, 以不能自然越冬的一年生棉 花杂交亲本为接穗进行嫁接， 并宿根栽培所得嫁接植株； 对于能够自 然越冬的一年生棉花杂交亲本， 直接种植并宿根栽培其实生植株， 或 以上述方法嫁接后宿根栽培嫁接植株，
( 3 )在种植和 /或嫁接的当年和宿根栽培期间， 利用上述实生植 株和 /或嫁接植株， 进行杂交制种。
2、 如权利要求 1所述的方法， 其环境条件为冬季最冷月平均气温 > 1.0°C且最低气温 > 0°C的气候带、 特珠地形或人工条件。
3、 如杈利要求 1或 2所述的方法， 其特征在于， 所述亲本为母 本和 /或父本。
4、 如权利要求 3所述的方法， 其特征在于， 所述母本为细胞核 雄性不育两用系时， 在种植和 /或嫁接当年拔除其中的可育株、 半不 育株和混杂株。
5、 如权利要求 3所述的方法， '其特征在于， 所述母本为细胞质 雄性不育系时， 在种植和 /或嫁接当年需要去杂去劣。
6、 如.权利要求 1或 2所述的方法， 其特征在于， 所述能够自然越 冬为越冬成活率> 75 %。
7、 如权利要求 1或 2所述的方法， 其特征在于， 所述能够自然越 冬的一年生棉花杂交亲本直接种植并宿根栽培 3- 5年后需重新播种。
8、 如权利要求 1或 2所述的方法， 其特征在于， 所述多年生棉花 种质资源包括海岛棉多年生类型、陆地棉野生种系中的多年生类型或 棉属中其他多年生棉花种质资源或其杂交后代。
9、 如杈利要求 1或 2所述的方法， 其特征在于， 所述砧木为棉花 实生苗或植株， 其越冬成活率为 100%, 对接穗的生长发育、 育性表 现、 产量和品质没有不利效应。 ' ·
10、 如权利要求 1或 2所述的方法， 其特征在于， 在有棉花土传病 害的地段种植时， 所述砧木抗土传病害。
11、 如权利要求 1或 2所述的方法， 其特征在于， 所述接穗为棉 花实生苗或棉花植株的嫩芽、 自然越冬后的再生芽或其嫁接植株越冬 后的再生芽。
• 12、 如权利要求 1或 2所述的方法， 其特征在于， 所述宿根栽培 的方法为:
( 1 )种植棉花当年： 按照当地一年生棉花的播种期、 种植密度 和栽培管理方法进行栽培和管理；父母本行比与一年生棉花杂交制种 相同； '
( 2 )种植棉花次年及以后： 早春萌发新芽后， 选留健壮芽培育 成侧枝，.并及时去除赘芽； '夏季和秋季打顶、 修剪和抹除赘芽， 多次 施肥并及早防治病虫害； 冬季进行棉田中耕、 培土并重施有机肥； 冬 季或早春， 挖除过密棉株，.参照亚热带果树的修剪方法修剪。
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