WO2010091046A3 - Systèmes et procédés pour un séquençage d'acides nucléiques à une seule molécule, haute fidélité, haut débit à l'aide d'une excitation multiplexée dans le temps - Google Patents

Systèmes et procédés pour un séquençage d'acides nucléiques à une seule molécule, haute fidélité, haut débit à l'aide d'une excitation multiplexée dans le temps Download PDF

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Abstract

L'invention porte sur un procédé d'utilisation de la microscopie dans un séquençage haut débit d'un acide nucléique cible. Le procédé consiste à : disposer dans un microréacteur un mélange en phase de solution comprenant une copie d'un acide nucléique cible, fournir un premier faisceau d'éclairage ayant une fréquence centrale de ωi qui est choisie pour provoquer la fluorescence d'un premier marqueur associé à un premier nucléotide, se procurer un second faisceau d'éclairage ayant une fréquence centrale de ct^ qui est choisie pour provoquer la fluorescence d'un second marqueur associé à un second nucléotide, et moduler le premier faisceau d'éclairage et le second faisceau d'éclairage de telle sorte qu'un faisceau d'excitation multiplexé est fourni qui comprend un éclairage provenant du premier faisceau d'éclairage et du second faisceau d'éclairage. Le procédé comprend également les étapes de direction et de concentration du faisceau d'excitation multiplexée vers un volume focal commun, et de détection d'un rayonnement au niveau d'un détecteur de réseau depuis l'intérieur du volume focal commun. Le rayonnement est associé à l'incorporation d'un nucléotide individuel durant une réplication dépendante d'une matrice d'une copie de l'acide nucléique cible pour obtenir un séquençage haut débit de l'acide nucléique cible.
PCT/US2010/022988 2009-02-03 2010-02-03 Systèmes et procédés pour un séquençage d'acides nucléiques à une seule molécule, haute fidélité, haut débit à l'aide d'une excitation multiplexée dans le temps WO2010091046A2 (fr)

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