WO2008123602A1 - Therapeutic agent for arthropathy for intraarticular administration - Google Patents

Therapeutic agent for arthropathy for intraarticular administration Download PDF

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Yukihide Iwamoto
Shuichi Matsuda
Koichi Nakayama
Yukio Akasaki
Shingo Fukagawa
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Definitions

  • the arthropathy to which the therapeutic agent of the present invention is applied is preferably osteoarthritis.
  • Fig. 5 shows inflammatory cells (CD68-positive cells) when immunostaining a tissue section of synovial tissue of the knee joint after swinetin or physiological saline was administered intra-articularly to a model of osteoarthritis in Usagi It is a figure which shows the result of having analyzed.
  • the sutin used as the therapeutic agent of the present invention is not limited.
  • plabus yuchin, symbus yuchin, full bath yuchin, atorba yuchin, pi yuba bus yuchin, rosbas yuchin , Mevas Yuchin Chin and others can be used alone or in appropriate combination.
  • Prabus Yuchin “Mevalotin” (registered trademark), Daiichi Sankyo Co., Ltd.
  • Whether the therapeutic agent of the present invention is effective can be confirmed by, for example, safranin-0 staining, hematoxylin-eosin staining (HE staining), immunostaining, RT-PCR, and the like. These confirmation methods are techniques well known to those skilled in the art.
  • the kit of the present invention may appropriately include other optional components necessary for the treatment of arthropathy, such as a solution, a buffer solution, instructions for use, and a syringe, in addition to sutin.
  • a solution such as a solution, a buffer solution, instructions for use, and a syringe, in addition to sutin.
  • Mevas Yuchin (sigma) was used as Suchin. 1. Administration of Mevas Yuchin to Usagi's osteoarthritis model
  • genes for confirming expression by RT-PCR include inflammatory-related genes, cartilage-related genes, bone-related genes, and other genes related to differentiation, proliferation, and cell death. It is preferable to use sex-related genes and cartilage-related genes.
  • MCP-1 monocyte chemoattractant protein-1
  • cartilage-related genes for example, ⁇ -3, which is involved in cartilage destruction, Col2, Sox9, Aggrecan, etc. expressed in soft bone can be used.
  • MCP-1, MMP-3, IL-lj6, MMP-1 and MMP-13 were selected as genes for evaluating gene expression.

Abstract

Disclosed are a therapeutic agent for arthropathy and a joint protective agent, both of which are intended to be administered intraarticularly. Specifically disclosed is a therapeutic agent for arthropathy for intraarticular administration, which comprises statin, a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a solvate of statin or the salt as an active ingredient.

Description

明 細 書 関節内投与用関節症治療剤 技術分野  Description Arthritis therapeutic agent for intra-articular administration Technical Field
本発明は、ス夕チンを含有する関節内投与用の関節症治療剤及び関節保護剤に関 する。 背景技術  The present invention relates to an arthritis therapeutic agent and joint protective agent for intra-articular administration containing sustatin. Background art
関節症の一つである変形性関節症（Osteoarthritis, OA) は、 関節軟骨の損傷及 び Z又は変性を特徴とし、軟骨の損傷及び Z又は変性が進行することにより、二次 的に関節炎を生じ得る疾患である。変形性関節症は、全身性の自己免疫疾患ではな いこと、血液検査において炎症反応（赤血沈降速度（ESR)、 C反応性蛋白（CRP)) ゃリゥマチ因子が陰性であること等により、 関節リゥマチとは区別される。  Osteoarthritis (OA), which is one of the arthropathy, is characterized by articular cartilage damage and Z or degeneration, and secondary arthritis is caused by progressive cartilage damage and Z or degeneration. It is a disease that can occur. Osteoarthritis is not a systemic autoimmune disease, and inflammatory reactions (erythrocyte sedimentation rate (ESR), C-reactive protein (CRP)) or rheumatoid factor are negative in blood tests. It is distinguished from rheumatoid arthritis.
変形性関節症は、主に物理的要因と化学的要因によって発症する。物理的要因と して、 荷重、 摩擦、 機械的ストレスなどが考えられ、 化学的要因として、 軟骨細胞 から産生されるマトリックスメタ口プロテア一ゼ （MMP)、 ァグリカナーゼ (Aggrecanase) 等による細胞外マトリクス （軟骨コラーゲン、 プロテオダリ力ン 等） の破壊が考えられる。  Osteoarthritis develops mainly due to physical and chemical factors. Possible physical factors include load, friction, and mechanical stress, and chemical factors include extracellular matrix (MMP), aggrecanase, etc. produced by chondrocytes. The destruction of cartilage collagen, proteodal force, etc.) is considered.
変形性関節症の治療には、非ステロイド性鎮痛消炎剤の経口投与、 局所麻酔薬又 はステロイド薬の局所投与などが行われているが、これらの治療法は対症療法に過 ぎず、使用される治療薬の副作用も問題となる。 また、 ヒアルロン酸製剤の関節内 投与も行われているが、その作用は一時的な潤滑作用であり、軟骨保護作用は弱く、 現在のところ変形性関節症に対する有効な治療剤は存在しない状況にある。  Treatment of osteoarthritis includes oral administration of non-steroidal analgesic / anti-inflammatory drugs, local anesthetics or topical administration of steroids, but these treatments are used only for symptomatic treatment and are used. The side effects of therapeutic drugs are also a problem. In addition, hyaluronic acid preparations are also administered intra-articularly, but the effect is a temporary lubricating action, the cartilage protective action is weak, and there is currently no effective therapeutic agent for osteoarthritis. is there.
ところで、 HMG-CoA還元酵素阻害剤（ス夕チンともいう） は、 3-ヒドロキシ -3- メチルダル夕リル CoA (HMG-CoA) 還元酵素を競合的に阻害することにより、 肝臓におけるァセチル -CoAからのコレステロール生合成を初期段階で阻害する分 子である。 このことから、 ス夕チンは、 コレステロール合成阻害作用を介した高脂 血症治療薬として、 広く臨床で使用されている。 また、最近の報告において、ス夕チンは抗炎症作用を有することが示されておりBy the way, HMG-CoA reductase inhibitor (also called sutin) is an effective inhibitor of 3-hydroxy-3-methyldalylyl CoA (HMG-CoA) reductase from acetyl-CoA in the liver. It is a molecule that inhibits cholesterol biosynthesis in the early stage. For this reason, swatin is widely used clinically as a therapeutic agent for hyperlipidemia through its cholesterol synthesis inhibitory action. In addition, recent reports have shown that sutin is anti-inflammatory.
(Uwe S. et al., Circulation.109[suppl II] :11- 18-26, 2004)、ス夕チンを免疫抑制剤 ゃ抗炎症剤として用いることが示唆されている （米国特許出願公開第 20020156122号)。 しかしながら、 これらの文献は、 自己免疫疾患ゃァテローム性 動脈硬化症に関するものであり、関節症、特に変形性関節症の治療又は予防に関す るものではない。 (Uwe S. et al., Circulation. 109 [suppl II]: 11-18-26, 2004), suggesting that sutin is used as an immunosuppressant or anti-inflammatory agent (US Patent Application Publication No. 20020156122). However, these documents relate to autoimmune diseases, atherosclerosis, and not to the treatment or prevention of arthropathy, especially osteoarthritis.
さらに、ス夕チンが関節症の原因の一つとされる MMP-3の軟骨培養細胞からの 産生を抑制すること、及び滑膜培養細胞からの IL-6と IL-8の産生を抑制すること が in vitroにおける実験により示されている （Lazzerini PE et al., Ann. Rheum. Dis. 63 (7)： 867-9, 2004、 Yokota K et al., J. Rheumatol. 33 (3)： 463-71, 2006)。 しかしながら、これらの実験は、培養細胞を用いた in vitroの実験にすぎず、 in vivo におけるス夕チンの関節症、 特に変形性関節症に対する効果は明らかではない。 発明の開示  Furthermore, sutintin suppresses the production of MMP-3, which is one of the causes of arthropathy, from cultured cartilage cells, and suppresses the production of IL-6 and IL-8 from cultured synovial cells. Has been shown by in vitro experiments (Lazzerini PE et al., Ann. Rheum. Dis. 63 (7): 867-9, 2004, Yokota K et al., J. Rheumatol. 33 (3): 463 -71, 2006). However, these experiments are only in vitro experiments using cultured cells, and the effect of sweptin on arthropathy, particularly osteoarthritis, in vivo is not clear. Disclosure of the invention
本発明は、 このような状況に鑑みてなされたものであり、その解決しょうとする 課題は、ス夕チンを含有する関節内投与用の関節症治療剤及び関節保護剤を提供す ることにある。  The present invention has been made in view of such a situation, and the problem to be solved is to provide an arthritis therapeutic agent and joint protective agent for intra-articular administration containing sweptin. is there.
本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意研究を行った結果、スタチンを哺乳 動物の関節内に投与することによって、関節症、特に変形性関節症を治療及び Z又 は予防する効果が得られることを見出し、 本発明を完成するに至った。  As a result of intensive studies to solve the above-mentioned problems, the present inventors have the effect of treating and Z or preventing arthropathy, particularly osteoarthritis, by administering statin into the joints of mammals. As a result, the present invention has been completed.
すなわち、 本発明は以下の通りである。  That is, the present invention is as follows.
( 1 )ス夕チン、その製薬上許容される塩、 又はそれらの溶媒和物を有効成分とし て含有する、 関節内投与用の関節症治療剤。  (1) A therapeutic agent for arthritis for intra-articular administration, containing sutubin, a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a solvate thereof as an active ingredient.
( 2 )ス夕チン、その製薬上許容される塩、 又はそれらの溶媒和物を有効成分とし て含有する、 関節内投与用の関節保護剤。  (2) A joint protective agent for intra-articular administration, containing sufutin, a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a solvate thereof as an active ingredient.
( 3 ) 関節内投与用の関節症治療剤又は関節保護剤を製造するための、 ス夕チン、 その製薬上許容される塩、 又はそれらの溶媒和物の使用。  (3) Use of swatin, a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a solvate thereof for producing an arthritis therapeutic agent or joint protective agent for intraarticular administration.
( 4 )ス夕チン、その医薬上許容される塩、 又はそれらの溶媒和物を有効成分とし て含有する、 関節内投与のための関節症治療用又は関節保護用キット。 本発明において、 ス夕チンとしては、 例えばプラバス夕チン、 シンバス夕チン、 フルバス夕チン、 アトルバス夕チン、 ピ夕バス夕チン、 ロスバス夕チン及びメバス 夕チンからなる群から選択される少なくとも 1つ力 s挙げられる。 (4) A kit for treatment of arthropathy or joint protection for intra-articular administration, containing sutubitin, a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a solvate thereof as an active ingredient. In the present invention, the subin is, for example, at least one selected from the group consisting of plabus yu-chin, full-bass yu-chin, atorbus yu-chin, pi yuba yu-chin, ross-ba yu-chin and mebas yu-chin. Power s.
また、 本発明の治療剤の適用の対象となる関節症としては、 好ましくは、 変形性関 節症である。 The arthropathy to which the therapeutic agent of the present invention is applied is preferably osteoarthritis.
本発明により、スタチンを含有する関節内投与用の関節症治療剤及び関節保護剤 を提供することができる。本発明の治療剤により、経口投与よりも効果的に関節症 を治療することが可能となる。 図面の簡単な説明  INDUSTRIAL APPLICABILITY According to the present invention, a therapeutic agent for arthropathy and a joint protective agent for intraarticular administration containing statin can be provided. The therapeutic agent of the present invention makes it possible to treat arthropathy more effectively than oral administration. Brief Description of Drawings
図 1は、ゥサギの変形性関節症モデルに対しス夕チンを経口投与又は関節内投 与した後の関節軟骨を示す図である。黒く染色された部位は、損傷又は変性箇所を 示す。  FIG. 1 is a view showing articular cartilage after oral administration or intra-articular administration of sutinin to a rabbit osteoarthritis model. Sites that are stained black indicate damage or degeneration.
図 2は、ゥサギの変形性関節症モデルに対しス夕チン又は生理食塩水を関節内 投与した後の関節軟骨を示す図である。黒く染色された部位は、損傷又は変性を示 す。  FIG. 2 is a diagram showing articular cartilage after intramuscular administration of sustatin or physiological saline to a rabbit osteoarthritis model. Black stained areas indicate damage or degeneration.
図 3は、ゥサギの変形性関節症モデルに対しス夕チン又は生理食塩水を関節内 投与した後の膝関節の関節軟骨の組織切片をサフラニン一 0 染色した結果を示す 図である。 正常関節軟骨は、 サフラニン- 0 により赤色に染色されるのに対し、 関 節症発症部位は染色されない。  FIG. 3 is a graph showing the results of Safranin staining of tissue sections of articular cartilage of the knee joint after intra-articular administration of sutin or physiological saline to a maggot osteoarthritis model. Normal articular cartilage is stained red with safranin-0, whereas the site of arthropathy is not stained.
図 4は、ゥサギの変形性関節症モデルに対しス夕チン又は生理食塩水を関節内 投与した後の膝関節の滑膜組織の組織切片を HE染色した結果を示す図である。細 胞核は青色に染色され、増殖組織は赤色に染色される。炎症細胞が多いほど染色さ れた核の数が多く、 また増殖組織が強く （濃く） 染色される。  FIG. 4 is a view showing the result of HE staining of a tissue section of synovial tissue of the knee joint after administration of sutinin or physiological saline in a joint in a model of osteoarthritis of Usagi. Cell nuclei are stained blue and proliferating tissue is stained red. The more inflammatory cells, the more nuclei stained and the more proliferating tissue is stained (darker).
図 5は、ゥサギの変形性関節症モデルに対しス夕チン又は生理食塩水を関節内 投与した後の膝関節の滑膜組織の組織切片を免疫染色したときの炎症性細胞 (CD68陽性細胞） を解析した結果を示す図である。 （A) ：膝関節の滑膜組織の組 織切片を免疫染色した結果を示す図である。 炎症細胞 (CD68陽性細胞)は褐色に染 色される。 （B) ： CD68陽性細胞数の比較をス夕チンの濃度ごとに示すグラフであ る。 Fig. 5 shows inflammatory cells (CD68-positive cells) when immunostaining a tissue section of synovial tissue of the knee joint after swinetin or physiological saline was administered intra-articularly to a model of osteoarthritis in Usagi It is a figure which shows the result of having analyzed. (A): It is a figure which shows the result of having immunostained the tissue section | slice of the synovial tissue of a knee joint. Inflammatory cells (CD68 positive cells) are stained brown. (B): A graph showing a comparison of the number of CD68 positive cells for each concentration of swatin. The
図 6は、ゥサギの変形性関節症モデルに対しス夕チン又は生理食塩水を関節内 投与した後の膝関節の滑膜組織における遺伝子発現結果を示す図である。 発明を実施するための最良の形態  FIG. 6 is a graph showing gene expression results in synovial tissue of the knee joint after intra-articular administration of sutinin or physiological saline to the rabbit osteoarthritis model. BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
以下、本発明を詳細に説明する。以下の実施の形態は、本発明を説明するための 例示であり、本発明をこの実施の形態のみに限定する趣旨ではない。本発明は、そ の要旨を逸脱しない限り、 様々な形態で実施をすることができる。  Hereinafter, the present invention will be described in detail. The following embodiment is an exemplification for explaining the present invention, and is not intended to limit the present invention only to this embodiment. The present invention can be implemented in various forms without departing from the gist thereof.
なお、本明細書において引用した全ての文献、 および公開公報、特許公報その他 の特許文献は、参照として本明細書に組み込むものとする。また、本明細書は、 2007 年 3 月 30 日に出願された本願優先権主張の基礎となる日本国特許出願 （特願 2007-92096号） の明細書及び図面に記載の内容を包含する。 本発明は、 ス夕チン、その製薬上許容される塩、 又はそれらの溶媒和物を有効成 分として含有する、 関節内投与用の関節症治療剤に関する。  It should be noted that all documents cited in this specification, as well as published publications, patent gazettes and other patent documents are incorporated herein by reference. In addition, this specification includes the contents described in the specification and drawings of the Japanese patent application (Japanese Patent Application No. 2007-92096) which was filed on March 30, 2007, which is the basis of the claimed priority of the present application. The present invention relates to a therapeutic agent for arthritis for intra-articular administration, which contains sufutin, a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a solvate thereof as an active ingredient.
変形性関節症などの関節症に対しては、その原因となる軟骨破壊を抑制する有効 な治療法はなく、 人工関節力使用されているに過ぎないのが現状である。 この点、 ス夕チンは、 in vitroにおいて MMP-3など軟骨破壊に関与する分子の産生を抑制 することが報告されているため、関節症治療への応用が期待される。しかしながら、 これらの報告は培養細胞を用いた実験結果によるものに過ぎず、実際に関節症に対 して治療又は予防し得るか否か、 その効果は明らかではない。  For arthropathy such as osteoarthritis, there is no effective treatment to suppress the cartilage destruction that is the cause, and only artificial joint force is currently used. In this regard, swatin has been reported to suppress the production of molecules involved in cartilage destruction such as MMP-3 in vitro, and is expected to be applied to the treatment of arthropathy. However, these reports are only based on the experimental results using cultured cells, and it is not clear whether or not it can actually be treated or prevented for arthropathy.
そこで、本発明者らは、 ゥサギ変形性関節症モデルを用いて、ス夕チンを関節内 に投与することにより、ス夕チンが軟骨保護作用、及び軟骨破壊に伴う関節炎の抑 制作用を有することを見出し、 本発明を完成するに至った。  Accordingly, the present inventors have used sutubin for joint cartilage protection and arthritis suppression associated with cartilage destruction by administering swuttin into the joint using a smelt osteoarthritis model. As a result, the present invention has been completed.
従って、 本発明は、 ス夕チン、 その製薬上許容される塩、 又はそれらの溶媒和物 を関節症患者に投与することを特徴とする関節症の治療方法も提供する。また、本 発明は、関節内投与用の関節症治療剤又は関節保護剤を製造するための、ス夕チン、 その製薬上許容される塩、 又はそれらの溶媒和物の使用を提供する。  Therefore, the present invention also provides a method for treating arthropathy characterized by administering swatin, a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a solvate thereof to an arthritic patient. The present invention also provides use of swuttin, a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a solvate thereof for producing an arthritis therapeutic agent or joint protective agent for intraarticular administration.
本発明において、 「関節症」 とは、 関節に疼痛、 変形又は炎症などを生じる疾患 を意味する。治療又は保護の対象となる関節症としては、限定されるものではない 力 変形性関節症、 関節リウマチ、 半月板損傷、 靭帯損傷、 離断性骨軟骨炎、 関節 炎などが挙げられ、 好ましくは変形性関節症である。 In the present invention, “arthropathy” refers to a disease that causes pain, deformation or inflammation in the joint. Means. The arthropathy to be treated or protected includes, but is not limited to, force osteoarthritis, rheumatoid arthritis, meniscal injury, ligament injury, transected osteochondritis, arthritis, etc. It is osteoarthritis.
「変形性関節症」 とは、 荷重、 摩擦、 機械的ストレス等の物理的要因、 細胞外マ トリクス破壊分子等 （マトリックスメタ口プロテアーゼ （MMP)、 ァグリカナー ゼ （Aggrecanase) ) による軟骨破壊などの化学的要因、 あるいは遺伝的要因、 年 齢、 肥満、性別その他の要因により関節において発生する疾患であり、 軟骨損傷の 進行により二次的に発生する関節炎も含まれる。なお、変形性関節症は、血液検査、 及び X線検査などによる所見から、 関節リゥマチや痛風などと区別される。  “Osteoarthritis” refers to chemical factors such as physical factors such as load, friction, mechanical stress, destruction of extracellular matrix (matrix meta-oral protease (MMP), aggrecanase) and cartilage destruction. Diseases that occur in joints due to genetic factors, genetic factors, age, obesity, gender, and other factors, including arthritis that occurs secondary to the progression of cartilage damage. Osteoarthritis is distinguished from rheumatoid arthritis and gout based on findings from blood tests and X-ray examinations.
本発明の治療剤及び保護剤の対象となる関節部位としては、例えば膝関節、股関 節、 指関節、 脊椎、 腰椎、 肘関節、 肩関節、 手関節、 足関節等が挙げられる。 本発明の治療剤及び保護剤は、細胞外マ卜リクスの破壊を抑制することにより関 節症の症状を消失又は軽減できると考えられ、関節内に投与した場合に軟骨保護作 用を示し、 関節炎を抑制する効果を示すものである。  Examples of joint sites to which the therapeutic agent and protective agent of the present invention are applied include knee joints, hip joints, finger joints, spine, lumbar vertebrae, elbow joints, shoulder joints, wrist joints and ankle joints. The therapeutic agent and protective agent of the present invention are considered to be able to eliminate or reduce symptoms of arthropathy by suppressing the destruction of extracellular matrix, and exhibit cartilage protective action when administered intra-articularly. It shows the effect of suppressing arthritis.
本発明において関節症の 「治療」 とは、 関節軟骨の損傷、 変性および関節内の炎 症を抑制することによって、 関節破壊に伴う疼痛、機能障害を緩和することを意味 する。  In the present invention, “treatment” of arthropathy means alleviating pain and dysfunction associated with joint destruction by suppressing articular cartilage damage, degeneration, and inflammation in the joint.
また、 本発明において関節の 「保護」 とは、 関節軟骨破壊物質の産生や炎症細胞 の浸潤を抑制することで、関節軟骨の破壊を止めることを意味し、 関節症の予防も 含まれる。  In the present invention, “protection” of the joint means that the destruction of the articular cartilage is stopped by suppressing the production of the articular cartilage destruction substance and the infiltration of inflammatory cells, and also includes prevention of arthropathy.
本発明の治療剤として使用されるス夕チンは、限定されるものではないが、例え ばプラバス夕チン、 シンバス夕チン、 フルバス夕チン、 アトルバス夕チン、 ピ夕バ ス夕チン、 ロスバス夕チン、 メバス夕チン等力挙げられる。 本発明においては、 こ れらのス夕チンを単独で、 又は適宜組み合わせて使用することができる。  The sutin used as the therapeutic agent of the present invention is not limited. For example, plabus yuchin, symbus yuchin, full bath yuchin, atorba yuchin, pi yuba bus yuchin, rosbas yuchin , Mevas Yuchin Chin and others. In the present invention, these inhibitors can be used alone or in appropriate combination.
プラバス夕チン は （+ ) — ( 3 R， 5 R) — 3 , 5—ジヒドロキシー 7— [( 1 S , 2 S , 6 S , 8 S , 8 a R) — 6—ヒドロキシー 2—メチルー 8— [( S ) - 2—メチルプチリルォキシ] _ 1， 2， 6 , 7 , 8， 8 a—へキサヒドロ— 1 —ナ フチル] ヘプタン酸であり （特公昭 6 1 - 1 3 6 9 9号)、 次式 Iに示される構造 を含む化合物である。
Figure imgf000007_0001
Pravas Yuchin is (+) — (3 R, 5 R) — 3, 5—Dihydroxy-7— [(1 S, 2 S, 6 S, 8 S, 8 a R) — 6-Hydroxy-2-methyl-8 — [(S) -2-Methylptyryloxy] _ 1, 2, 6, 7, 8, 8 a-Hexahydro-1-naphthyl] heptanoic acid (Japanese Patent Publication Sho 6 1-1 3 6 9 9), a compound containing the structure represented by the following formula I:
Figure imgf000007_0001
(D シンバス夕チンは、 （+) ― (1 S, 3R, 7 S, 8 S, 8 aR) 一 1， 2, 3, 7, 8， 8 a—へキサヒドロー 3， 7—ジメチル _8— [2 - [(2 R, 4R) - テ卜ラヒドロ一 4—ヒドロキシ一 6 _ォキソ一 2 H—ピラン一 2—ィル] ェチル] 一 1一ナフチル 2， 2—ジメチルブチレートであり、 次式 IIに示される化合物で ある (特公昭 64— 1476号)。 (D Symbus Yuchin is (+) ― (1 S, 3R, 7 S, 8 S, 8 aR) 1 1, 2, 3, 7, 8, 8 a-hexahydro-3,7-dimethyl _8— [ 2-[(2 R, 4R)-Tetrahydro 4-hydroxy-1- 6 _oxo 2 H-pyran-2-yl] ethyl] 1 11 naphthyl 2,2-dimethylbutyrate It is a compound shown in II (Japanese Examined Patent Publication No. 64-1476).
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(ID フルバス夕チンは、 （士） (3 R*, 5S*， 6 E) - 7 - [3 - (4—フルオロフ ェニル） —1— (1ーメチルェチル） _ 1H—インドールー 2—ィル] —3, 5— ジヒドロキシ— 6—ヘプテン酸であり、 次式 IIIに示される化合物である （特公平 2— 46031号）。 (ID Full bath Yuchin is (shi) (3 R *, 5S *, 6 E)-7-[3-(4-Fluorophenyl) —1— (1-methylethyl) _ 1H—indole 2 —yl] —3, 5-Dihydroxy-6-heptenoic acid, a compound represented by the following formula III (Japanese Patent Publication No. 46031).
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(ΠΙ) (ΠΙ)
アトルバス夕チンは、 （3R， 5 S) 一 7— [2— （4—フルオロフェニル） ― 5 - (1—メチルェチル） 一 3—フエニル— 4—フエニルァミノカルボニル— 1 H ーピロール _1_ィル] —3, 5—ジヒドロキシヘプタン酸であり、 次式 IVに示 される構造を含む化合物である （特開平 3— 58967号)。
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Atorvas yutin is (3R, 5 S) 1 7- [2- (4-Fluorophenyl)-5-(1-methylethyl) 1-phenyl-4-phenylaminocarbonyl-1 H-pyrrole _1_ ] -3,5-Dihydroxyheptanoic acid, which is a compound having a structure represented by the following formula IV (Japanese Patent Laid-Open No. 3-58967).
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(TV) ピ夕バス夕チンは、 （E) -3, 5—ジヒドロキシー 7— [4'一 （4"一フルォ 口フエニル） —2 '—シクロプロピルキノリン _ 3'—ィル] —6—ヘプテン酸であ り、 次式 Vに示される構造を含む化合物である （特開平 1一 279866号)。 (TV) Piyu Bus Yu Chin is (E) -3, 5-Dihydroxy-7- [4'-one (4 "-Fluorophenyl) —2 '-Cyclopropylquinoline _ 3'-yl] —6 —Heptenoic acid, which is a compound having the structure represented by the following formula V (Japanese Patent Laid-Open No. 1-279866).
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(V) ロスバス夕チンは、 （+) - (3R, 5S) -7- [4- (4—フルオロフェニ ル） — 6 _イソプロピル一 2 _ (N—メチルー N—メタンスルフォニルァミノ） ピ リミジン _ 5—ィル] _3， 5—ジヒドロキシー 6 (E) —ヘプテン酸であり、 次 式 VIに示される構造を含む化合物である （特開平 5— 178841号)。 (V) Rosbass Yuchin is (+)-(3R, 5S) -7- [4- (4-Fluorophenyl) — 6 _Isopropyl-2- (N-Methyl-N-methanesulfonylamino) Pyrimidine _5—yl] _3,5-Dihydroxy-6 (E) —heptenoic acid, a compound having the structure represented by the following formula VI (Japanese Patent Laid-Open No. 5-178841).
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(VI) (VI)
メバス夕チンは、式 VIIに示される化合物である（特開昭 5 0— 1 5 5 6 9 0号)。 Mebasyutin is a compound represented by the formula VII (Japanese Patent Application Laid-Open No. 5 0-1 5 5 6 90).
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(VII) (VII)
上記ス夕チンは、それぞれの公報に記載の方法により得ることができる力 以下 の商品として購入することもできる。 Such sutin can also be purchased as a product of less than the strength that can be obtained by the method described in each publication.
プラバス夕チン： 「メバロチン」 （登録商標)、 第一三共株式会社  Prabus Yuchin: “Mevalotin” (registered trademark), Daiichi Sankyo Co., Ltd.
シンバス夕チン：「リポバス」 （登録商標)、 万有製薬株式会社 フルバス夕チン： 「ローコール」 （登録商標）、 ノバルティスファ一マ株式会社 ァトルバス夕チン： 「リピトール」 （登録商標)、 フアイザ一株式会社 Symbus Yu Chin: “Lipobus” (registered trademark), Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Full Bus Yu Chin: “Low Call” (registered trademark), Novartis Pharma Co., Ltd. Battle Bus Yu Chin: “Lipitor” (registered trademark), Hua Isa Co., Ltd.
ピ夕バス夕チン： 「リバ口」 （登録商標)、 興和株式会社  Pi Yu Bus Yu Chin: “Ribaguchi” (registered trademark), Kowa Co., Ltd.
ロスバス夕チン： 「クレストール」、 塩野義製薬株式会社  Ross Bass Yu Chin: “Crestor”, Shionogi & Co., Ltd.
メバス夕チン： Sigma-Aldnch Corporation  Mevas Yu Chin: Sigma-Aldnch Corporation
本発明において使用されるス夕チンは、製薬上許容される塩を形成する場合もあ る。製薬上許容される塩は、本発明の治療剤としての効果を有する限り特に限定さ れるものではなく、 酸との塩を形成しても塩基との塩を形成してもよい。  The sutin used in the present invention may form a pharmaceutically acceptable salt. The pharmaceutically acceptable salt is not particularly limited as long as it has an effect as the therapeutic agent of the present invention, and may form a salt with an acid or a salt with a base.
酸との塩としては、 例えば塩酸塩、 臭化水素酸塩、 硫酸塩、 燐酸塩等の無機酸塩 との塩、蟻酸、酢酸、 乳酸、 コ八ク酸、 フマル酸、 マレイン酸、 クェン酸、酒石酸、 安息香酸、 メタンスルホン酸、 ベンゼンスルホン酸、 p _トルエンスルホン酸、 ト リフルォロ醉酸などの有機酸との塩などを挙げることができる。  Salts with acids include, for example, salts with inorganic acid salts such as hydrochloride, hydrobromide, sulfate, phosphate, formic acid, acetic acid, lactic acid, octaoctanoic acid, fumaric acid, maleic acid, citrate And salts with organic acids such as tartaric acid, benzoic acid, methanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, p_toluenesulfonic acid, and trifluorosuccinic acid.
また、塩基との塩としては、 例えばナトリウム塩、 カリウム塩などのアルカリ金 属塩、 カルシウム塩、 マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、 トリメチルアミ ン、 トリェチルァミン、 ピリジン、 ピコリン、 ジシクロへキシルァミン、 Ν， Ν' —ジベンジルエチレンジァミン等め有機塩基との塩 （有機ァミン塩)、 あるいはァ ンモニゥム塩などを挙げることができる。  Examples of salts with bases include alkali metal salts such as sodium salt and potassium salt, alkaline earth metal salts such as calcium salt and magnesium salt, trimethylamine, triethylamine, pyridine, picoline, dicyclohexylamine, Ν , Ν '— Salts with organic bases such as dibenzylethylenediamine (organic amine salts) or ammonium salts.
本発明において、ス夕チンの水和物などの溶媒和物が存在する場合には、 これら 溶媒和物も本発明における関節症治療剤及び関節保護剤に含まれる。 溶媒和物は、 例えば、 水和物、 非水和物などを挙げることができ、 好ましくは水和物である。 溶 媒は、 例えば、 水、 アルコール （例えばメタノール、 エタノール、 η-プロパノール 等） を挙げることができるが、 これらに限定されるものではない。  In the present invention, when a solvate such as a hydrate of sutin is present, these solvates are also included in the therapeutic agent for arthropathy and the joint protective agent in the present invention. Examples of solvates include hydrates and non-hydrates, and hydrates are preferred. Examples of the solvent include water and alcohol (for example, methanol, ethanol, η-propanol, etc.), but are not limited thereto.
本発明の治療剤又は関節保護剤に用いる添加剤として、関節投与に適切なものを 適宜選択することができる。 このような添加剤としては、 例えば、 乳化剤、 界面活 性剤、 懸濁化剤、 緩衝剤、 安定化剤、 防腐剤、 保存剤、 溶解補助剤、 等張化剤、 吸 収促進剤などが挙げられる。 これらを単独又は適宜組み合わせ、定法により関節投 与用製剤を製造することができる。  As the additive used for the therapeutic agent or joint protective agent of the present invention, those suitable for joint administration can be appropriately selected. Examples of such additives include emulsifiers, surfactants, suspending agents, buffers, stabilizers, preservatives, preservatives, solubilizers, tonicity agents, absorption accelerators, and the like. Can be mentioned. These can be used alone or in appropriate combination, and a preparation for joint administration can be produced by a conventional method.
ここで、 関節投与用製剤としては、注射剤、 点滴注射剤などの液体製剤が好まし く、 注射剤がより好ましい。液体製剤は、 使用前に生理食塩水等で溶解する用時調 製用粉末 （例えば凍結乾燥粉末） の形態であってもよい。 Here, as the preparation for joint administration, liquid preparations such as injections and infusions are preferable, and injections are more preferable. Liquid preparations should be dissolved in saline before use. It may be in the form of a production powder (for example, freeze-dried powder).
本発明の治療剤又は関節保護剤の投与経路としては、関節内投与が好ましく、投 与する関節としては、 好ましくは膝関節、 股関節、 指関節、 脊椎、 腰椎、 肘関節、 肩関節、 手関節、 足関節である。  As a route of administration of the therapeutic agent or joint protective agent of the present invention, intra-articular administration is preferable, and the joint to be administered is preferably knee joint, hip joint, finger joint, spine, lumbar spine, elbow joint, shoulder joint, wrist joint. The ankle joint.
本発明の治療剤又は関節保護剤は哺乳動物に対して投与することができる。ここ で、 哺乳動物としては、 例えば、 ヒト、 ゥサギ、 モルモット、 ラッ卜、 マウス、 ハ ムスター、ネコ、 ィヌ、ャギ、 ブ夕、 ヒッジ、 ゥシ、 ゥマ、サルなどが挙げられる。 本発明の治療剤又は関節保護剤に含まれるス夕チンの有効投与量は、症状の程度、 患者の年齢、 性別、 体重、 感受性差、 投与方法、 投与時期、 投与間隔、 投与期間、 又は調剤の種類などにより異なるが、当業者であれば、適宜設定することができる。 例えば、 成人 （体重 60kg) に週 1回から数回、 好ましくは 1〜7回投与すること ができ、 その投与量は、 1回当たり下限は O.OOlmgであり、 上限は 100 mgであ る。 好ましくは、 1回あたり下限は 0.01 mgであり、 上限は 10 mgである。 より 好ましくは 0.1 mg〜5 mg、さらに好ましくは 0.5 mg〜3 mgである。投与時期は、 症状に応じて適宜定めることができ、複数回分を同時に又は時間を置いて別々に投 与することができる。  The therapeutic agent or joint protective agent of the present invention can be administered to a mammal. Examples of mammals include humans, rabbits, guinea pigs, rabbits, mice, hamsters, cats, dogs, goats, buyu, hidge, ushi, horses, monkeys, and the like. The effective dose of sutinin contained in the therapeutic agent or joint protective agent of the present invention is the degree of symptoms, patient age, sex, body weight, sensitivity difference, administration method, administration time, administration interval, administration period, or preparation. However, it can be set as appropriate by those skilled in the art. For example, it can be administered to adults (body weight 60 kg) once to several times a week, preferably 1 to 7 times, with a lower limit of O.OOlmg per dose and an upper limit of 100 mg . Preferably, the lower limit per dose is 0.01 mg and the upper limit is 10 mg. More preferably, it is 0.1 mg-5 mg, More preferably, it is 0.5 mg-3 mg. The timing of administration can be determined as appropriate according to the symptoms, and multiple doses can be administered simultaneously or separately over time.
なお、本発明の治療剤を他の関節症治療薬と併用する場合は、投与量を適宜下げ ることも可能である。  Note that when the therapeutic agent of the present invention is used in combination with other therapeutic agents for arthropathy, the dose can be appropriately reduced.
本発明の治療剤が有効であるか否かの確認は、 例えばサフラニン- 0染色、 へマ トキシリン-ェォシン染色 （HE染色)、 免疫染色、 RT-PCR等により実施すること ができる。 これらの確認手法は、 当業者に周知の技術である。  Whether the therapeutic agent of the present invention is effective can be confirmed by, for example, safranin-0 staining, hematoxylin-eosin staining (HE staining), immunostaining, RT-PCR, and the like. These confirmation methods are techniques well known to those skilled in the art.
本発明は、 ス夕チン、 その製薬上許容される塩、 又はそれらの溶媒和物を有効成 分として含有する、関節内投与のための関節症治療用又は関節保護用キットを提供 する。  The present invention provides a kit for treating arthropathy or protecting joints for intra-articular administration, which contains sufutin, a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a solvate thereof as an active ingredient.
本発明のキットは、ス夕チンの他に、溶解液、緩衝液、使用説明書、注射器など、 関節症の治療に必要な他の任意の構成要素を適宜含めることができる。 以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定 されるものではない。 実施例 The kit of the present invention may appropriately include other optional components necessary for the treatment of arthropathy, such as a solution, a buffer solution, instructions for use, and a syringe, in addition to sutin. EXAMPLES Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to examples, but the present invention is not limited to these examples. Example
以下の実施例においては、 ス夕チンとしてメバス夕チン （sigma社） を用いた。 1 . ゥサギの変形性関節症モデルへのメバス夕チンの投与  In the following examples, Mevas Yuchin (sigma) was used as Suchin. 1. Administration of Mevas Yuchin to Usagi's osteoarthritis model
( 1 ) 変形性関節症モデル動物  (1) Osteoarthritis model animal
変形性関節症モデルは、 6ヶ月齢のォスの日本白色ゥサギを購入し （入手先：九 動株式会社)、膝前十字靱帯を切離し、内側半月板を切除することにより作製した。 The osteoarthritis model was prepared by purchasing a 6-month-old male Japanese white rabbit (obtained from Kudo Co., Ltd.), cutting off the anterior cruciate ligament and excising the medial meniscus.
( 2 ) メパスタチンの関節内投与 (2) Intra-articular administration of mepastatin
メバス夕チン （sigma社） を生理食塩水に溶解することにより、 0.1mg/mlのメ バス夕チン溶液を調製した。 また、 コントロールとして生理食塩水を用いた。 本実施例では、 変形関節症モデルゥサギに、 テルモシリンジ （1ml) を用いて週 に 1回、 6週間にわたり、 メバス夕チン又は生理食塩水を関節内投与した。 メバス 夕チン (0.015mg/0.15 ml/kg)を関節内投与した群をメバス夕チン関節内投与群と し、生理食塩水を関節内投与した群をコントロール群として、後述する各種評価に 用いた。 Mebasyutin solution (0.1 mg / ml) was prepared by dissolving Mebasyutin (sigma) in physiological saline. In addition, physiological saline was used as a control. In this example, Mevas Yutin or physiological saline was administered intraarticularly to osteoarthritis model rabbits using a Terumo syringe (1 ml) once a week for 6 weeks. The Mebasu evening Chin (0.015m g /0.15 ml / kg) the group administered intraarticularly and Mebasu evening Chin intraarticular administration group, use saline as a control group in a group administered intraarticularly, the various evaluations described below It was.
( 3 ) メバス夕チンの経口投与  (3) Oral administration of Mevas Yuchin
メバス夕チンの関節内投与がメバス夕チンの経口投与と比較してどの程度の治 療又は保護効果を有するかを検討するため、変形性関節症モデルに対する経口投与 試験も行なった。  In order to examine the degree of therapeutic or protective effect of intramuscular administration of mebasyutin compared to oral administration of mebasyutin, an oral administration test was also conducted on an osteoarthritis model.
具体的には、 0.5mg/mlのメバス夕チン生食溶液を調製し、 変形性関節症モデル に対し、 7回/週の投与間隔で 6週間経口投与した （メバス夕チン経口投与群)。 2 . メバス夕チンの関節内投与による治療効果についての各種評価 Specifically, a 0.5 mg / ml mevasutin saline solution was prepared and orally administered to the osteoarthritis model at an administration interval of 7 times / week for 6 weeks (mebasutatin oral administration group). 2. Various evaluations of therapeutic effects of intramuscular administration of Mevas Yuchin
( 1 ) 肉眼的評価  (1) Macroscopic evaluation
メバス夕チン関節内投与群又はメバス夕チン経口投与群のそれぞれに属する個 体について、 関節内投与又は経口投与後 6週目に膝関節を摘出し、両者の軟骨表面 を墨汁で染色し、 粗雑化などを肉眼的に評価した。 なお、 メバス夕チンの代わりに 生理食塩水を関節注射した群をコントロール群とした。  For individuals belonging to the Mevas Yuchin intra-articular administration group or Mevas Yuchin oral administration group, the knee joint was removed 6 weeks after intra-articular administration or oral administration, and the cartilage surfaces of both were stained with black ink and rough. Visualization was evaluated. A group in which physiological saline was jointly injected instead of Mevas Yuchin was used as a control group.
その結果、メバス夕チン関節内投与では墨汁の染色力 S認められなかったのに対し、 メバス夕チン経口投与群では、墨汁による染色が認められ、軟骨の損傷又は変性が 生じていた （図 1 )。 また、 メバス夕チン関節内投与群では、 コントロール群と比 較して墨汁の染色割合が低く、メバス夕チンの関節内投与により関節軟骨の損傷が 抑制されることが示された （図 2 )。 As a result, in the intramuscular administration of Mebasyutin, the ink staining S was not observed, whereas in the Mebasyuchin oral administration group, the ink was stained and the cartilage was damaged or degenerated. It occurred (Figure 1). In addition, in the Mevas Yuchin intra-articular administration group, the ink staining ratio was lower than that in the control group, and it was shown that Mevas Yuchin intra-articular administration suppressed joint cartilage damage (Fig. 2). .
従って、 メバス夕チンの関節内投与は、経口投与よりも関節症の治療効果を有す ることがわかった。  Therefore, it was found that the intra-articular administration of Mevas Yuchin has a therapeutic effect on arthropathy than the oral administration.
( 2 ) サフラニン- 0染色による関節軟骨の組織学的評価  (2) Histological evaluation of articular cartilage by safranin-0 staining
メバス夕チンの軟骨保護作用について、 サフラニン- 0染色により組織学的に評 価した。 具体的には、 メバス夕チン関節内投与群とコントロール群（生理食塩水を 関節内投与した群）のそれぞれの膝関節軟骨から、軟骨組織を含む組織切片を作製 後、 組織切片のサフラニン- 0染色を行った。  The cartilage protective action of Mevas Yutin was evaluated histologically by safranin-0 staining. Specifically, tissue sections containing cartilage tissue were prepared from the knee joint cartilage of the Mevas Yuchin intra-articular administration group and the control group (group in which physiological saline was intra-articularly administered), and then safranin-0 of the tissue section was prepared. Staining was performed.
その結果、 関節内投与群の関節軟骨はサフラニン- 0 により赤色に染色されたの に対し、 コントロール群では染色されずに関節軟骨の破壊が認められた （図 3 )。 従って、メバス夕チン関節内投与群では、軟骨の破壊が抑制されることが示された。  As a result, articular cartilage in the intra-articular administration group was stained red with safranin-0, whereas in the control group, articular cartilage destruction was observed without staining (Fig. 3). Therefore, it was shown that destruction of cartilage was suppressed in the Mevas Yuchin intra-articular administration group.
( 3 ) HE染色による滑膜組織の組織学的評価  (3) Histological evaluation of synovial tissue by HE staining
メバス夕チンの関節炎抑制効果について、 HE染色により組織学的に評価した。 具体的には、メバス夕チン関節内投与群とコントロール群それぞれの膝関節から滑 膜組織を採取し、 組織切片を作製後、 組織切片の HE染色を行った。  The arthritis inhibitory effect of Mevas Yuchin was evaluated histologically by HE staining. Specifically, synovial tissue was collected from the knee joints of the Mevas Yuchin intra-articular administration group and the control group, and tissue sections were prepared, followed by HE staining of the tissue sections.
その結果、コントロール群では滑膜細胞の増殖による炎症所見を示す青色及び赤 色の染色及び組織細胞増殖が認められた。 これに対し、 メバス夕チン関節内投与群 では炎症が抑制された （図 4 )。  As a result, in the control group, blue and red staining and tissue cell proliferation indicating inflammation due to synovial cell proliferation were observed. In contrast, inflammation was suppressed in the Mevas Yuchin intra-articular administration group (Fig. 4).
( 4 ) 免疫染色による滑膜組織の組織学的評価  (4) Histological evaluation of synovial tissue by immunostaining
メバス夕チンの関節内投与による関節炎抑制効果を評価するため、免疫染色によ り組織学的検査を行った。具体的には、 メバス夕チン関節内投与群及びコントロー ル群のそれぞれの膝関節から滑膜組織を採取し、組織切片を作製後、組織切片の免 疫染色を行い、メバス夕チン関節内投与群とコントロール群とを比較した。ここで、 一次抗体としては、 抗 CD68抗体を用い、 二次抗体として抗 IgG抗体を用いた。 また、 メバス夕チン関節内投与群とコントロール群の CD68 陽性細胞の数を比較 した。  In order to evaluate the arthritis inhibitory effect of Mevas Yuchin intra-articular administration, histological examination was performed by immunostaining. Specifically, synovial tissues were collected from the knee joints of the Mevas Yuchin intra-articular administration group and the control group, and tissue sections were prepared. The group and the control group were compared. Here, an anti-CD68 antibody was used as the primary antibody, and an anti-IgG antibody was used as the secondary antibody. In addition, the number of CD68 positive cells in the Mevas Yuchin intra-articular administration group and the control group were compared.
その結果、 炎症性細胞であって軟骨破壊物質を産生する CD68 陽性細胞は褐色 に染色された。 また、 コントロール群では、 CD68陽性細胞の遊走及び浸潤が認め られたのに対し、 メバス夕チン関節内投与群では、 CD68陽性細胞の遊走及び浸潤 が抑制された （図 5A)。 さらに、 滑膜組織に浸潤した CD68陽性細胞の数は、 0.1 mg/ml以上のメバス夕チンを関節内投与した群ではコントロール群と比較して有 意に少なく （図 5 B)、 メバス夕チンの関節内投与による関節炎抑制効果が示され た。 図 5Aにおける顕微鏡の倍率は、 上パネルが 100倍、 下パネルが 400倍であ る。 As a result, CD68 positive cells that are inflammatory cells and produce cartilage destructive substances are brown. Stained. In addition, migration and invasion of CD68 positive cells were observed in the control group, whereas migration and invasion of CD68 positive cells were suppressed in the Mevas Yutin intra-articular administration group (FIG. 5A). Furthermore, the number of CD68 positive cells that infiltrated the synovial tissue was significantly lower in the group that received 0.1 mg / ml or more of mevasubutin in the joint compared to the control group (Fig. 5B). Inhibition of arthritis by intra-articular administration of. The magnification of the microscope in Figure 5A is 100x for the top panel and 400x for the bottom panel.
( δ ) RT-PCRによる滑膜組織における遺伝子発現解析  (δ) Gene expression analysis in synovial tissue by RT-PCR
メバス夕チンの関節内投与による関節炎抑制効果について、 RT-PCRにより生化 学的評価を行った。具体的には、 メバス夕チン関節内投与群とコントロール群それ ぞれの膝関節から滑膜組織を採取し、 採取した滑膜組織から mRNA を抽出し、 RT-PCR法により遺伝子発現を評価した。  The biochemical evaluation of RT-PCR was conducted to determine the arthritis-suppressing effect of Mevas Yuchin intra-articular administration. Specifically, synovial tissues were collected from the knee joints of the Mevas Yuchin intra-articular administration group and the control group, mRNA was extracted from the collected synovial tissues, and gene expression was evaluated by RT-PCR. .
ここで、 RT-PCRにより発現を確認するための遺伝子としては、炎症関連遺伝子、 軟骨関連遺伝子、 骨関連遺伝子等のほか、 分化、 増殖、 細胞死に関連する遺伝子な ど力 s挙げられるが、炎症性関連遺伝子及び軟骨関連遺伝子を使用することが好まし レ^炎症関連遺伝子として、例えば、 炎症性細胞の遊走を促進するケモカインであ る MCP-1 (monocyte chemoattractant protein- 1) , Ίン夕一口つキンなと 使用 することができ、 軟骨関連遺伝子として、 例えば軟骨破壊に関与する ΜΜΡ-3、 軟 骨で発現する Col2、 Sox9、 Aggrecanなどを使用することができる。  Here, examples of genes for confirming expression by RT-PCR include inflammatory-related genes, cartilage-related genes, bone-related genes, and other genes related to differentiation, proliferation, and cell death. It is preferable to use sex-related genes and cartilage-related genes. For example, MCP-1 (monocyte chemoattractant protein-1), a chemokine that promotes inflammatory cell migration, As cartilage-related genes, for example, ΜΜΡ-3, which is involved in cartilage destruction, Col2, Sox9, Aggrecan, etc. expressed in soft bone can be used.
そこで、本実施例では、遺伝子発現を評価する遺伝子として、 MCP-1、 MMP-3、 IL-l j6、 MMP-1及び MMP-13を選択した。  Therefore, in this example, MCP-1, MMP-3, IL-lj6, MMP-1 and MMP-13 were selected as genes for evaluating gene expression.
また、 MMPの生体内における活性を検討するためには、 MMPの発現量のみな らず、 MMP の活性を制御するインヒビ夕一である TIMP (Tissue inhibitor of metalloproteinase) の発現量も検討する必要があることから、 TIMP-1 も遺伝子 発現を評価する遺伝子として選択した。  In addition, in order to examine the in vivo activity of MMP, it is necessary to examine not only the expression level of MMP but also the expression level of TIMP (Tissue inhibitor of metalloproteinase), an inhibitor that controls MMP activity. Therefore, TIMP-1 was also selected as a gene for evaluating gene expression.
RT-PCRに使用したプライマーは以下の通りである。  The primers used for RT-PCR are as follows.
MCP-1：  MCP-1:
フォワードプライマー GTC TCT GCAACG CTT CTG TGC C (配列番号 1 ) リバースプライマー AGT CGT GTG TTC TTG GGT TGT GG (配列番号 2 ) MMP-3： Forward primer GTC TCT GCAACG CTT CTG TGC C (SEQ ID NO: 1) Reverse primer AGT CGT GTG TTC TTG GGT TGT GG (SEQ ID NO: 2) MMP-3:
フォワードプライマー GCCAAGAGATGCTGTTGATG (配列番号 3) リバースプライマ一 AGG TCT GTG AAG GCG TTG TA (配列番号 4 ) IL-lj8 ：  Forward primer GCCAAGAGATGCTGTTGATG (SEQ ID NO: 3) Reverse primer AGG TCT GTG AAG GCG TTG TA (SEQ ID NO: 4) IL-lj8 ：
フォワードプライマー TGCTGTCCAGACGAGGGCAT (配列番号 5) リバースプライマー ACT CTC CAG CTG CAG GGTAG (配列番号 6 ) MMP-1：  Forward primer TGCTGTCCAGACGAGGGCAT (SEQ ID NO: 5) Reverse primer ACT CTC CAG CTG CAG GGTAG (SEQ ID NO: 6) MMP-1:
フォワードプライマー TCAGTTCGTCCTCACTCCAG (配列番号 7) リバースプライマー TTG GTC CAC CTG TCA TCT TC (配列番号 8 ) MMP-13：  Forward primer TCAGTTCGTCCTCACTCCAG (SEQ ID NO: 7) Reverse primer TTG GTC CAC CTG TCA TCT TC (SEQ ID NO: 8) MMP-13:
フォワードプライマ一 GATGCCATTACCAGTCTCC (配列番号 9) リバースプライマ一 GCT GTA TTC AAA CTG TAT GG (配列番号 10 ) TIMP-1：  Forward primer GATGCCATTACCAGTCTCC (SEQ ID NO: 9) Reverse primer GCT GTA TTC AAA CTG TAT GG (SEQ ID NO: 10) TIMP-1:
フォワードプライマ一 ACC TTG TCA TCA GGG CCA (配列番号 11 ) リバースプライマー ACA GGC AAA CAC TGT GCA (配列番号 12 )  Forward primer ACC TTG TCA TCA GGG CCA (SEQ ID NO: 11) Reverse primer ACA GGC AAA CAC TGT GCA (SEQ ID NO: 12)
PCRは、 TaKaRa RNA PCR™ Kit (AMV) Ver.3.0 (夕カラバイォ株式会社）キ ットを用いて、 添付の製品説明書に従い PCR反応組成液を調製し、 30サイクル の条件にて行った。 発現量の測定は、 PCRエクスプレス II (英国サーモハイべィ ト社） を用いて行った。 各遺伝子の発現量の値は、 GAPDHを用いて標準化した。 その結果、 メバス夕チン投与群の滑膜組織における MCP-1、 IL-1)8、 MMP-3, MMP-13の遺伝子発現は、 いずれもコントロール （無処置） と比較して有意に抑 制されることが示された （図 6)。 PCR was performed under the conditions of 30 cycles using a TaKaRa RNA PCR ™ Kit (AMV) Ver.3.0 (Even Caravaio Co., Ltd.) kit, preparing a PCR reaction composition according to the attached product instructions. The expression level was measured using PCR Express II (Thermometer, UK). The expression level of each gene was standardized using GAPDH. As a result, the gene expression of MCP-1, IL-1) 8, MMP-3, and MMP-13 in the synovial tissue of the mevasutin administration group was significantly suppressed compared to the control (no treatment). (Figure 6).
一方、 TIMP-1の発現量は、 メバス夕チン投与群とコントロールとの比較におい て有意差は認められなかった。  On the other hand, there was no significant difference in the expression level of TIMP-1 in the comparison between the mevasyutin-administered group and the control.
この結果は、 MMPの活性がメバス夕チン投与群において抑制されていることを 示すものである。  This result shows that the activity of MMP is suppressed in the mevasutin administration group.
以上より、本発明の関節治療剤の治療効果および関節保護剤の保護効果が明らか となつに。 産業上の利用可能性 From the above, the therapeutic effect of the joint therapeutic agent of the present invention and the protective effect of the joint protective agent become clear. Industrial applicability
本発明の治療剤及び関節保護剤は、例えば、変形性関節症の患者に定期的に関節 内投与することにより、変形性関節症の治療又は関節の保護に利用することができ る。 配列表フリーテキス卜  The therapeutic agent and joint protective agent of the present invention can be used for treating osteoarthritis or protecting joints by, for example, regularly administering intraarticularly to patients with osteoarthritis. Sequence listing free text フ リ ー
配列番号 1〜： 1 2 ：合成 DNA  SEQ ID NO: 1 to: 1 2: synthetic DNA

Claims

請求 の 範 囲 The scope of the claims
I . ス夕チン、 その製薬上許容される塩、 又はそれらの溶媒和物を有効成分と して含有する、 関節内投与用の関節症治療剤。 I. A therapeutic agent for arthropathy for intraarticular administration, containing suyutin, a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a solvate thereof as an active ingredient.
2 . ス夕チンが、 プラバス夕チン、 シンバス夕チン、 フルバス夕チン、 ァトル バス夕チン、 ピ夕バス夕チン、 ロスバス夕チン及びメバス夕チンからなる群か ら選択される少なくとも 1つである、 請求項 1に記載の関節症治療剤。 2. Suyu Chin is at least one selected from the group consisting of Prabus Yu Chin, Symbus Yu Chin, Full Bus Yu Chin, Phat Bus Yu Chin, Pi Yu Bus Yu Chin, Ross Bas Yu Yu Chin and Mebas Yu Chin The therapeutic agent for arthropathy according to claim 1.
3 . ス夕チンがメバス夕チンである、 請求項 1に記載の関節症治療剤。  3. The therapeutic agent for arthropathy according to claim 1, wherein the sutin is Mebas yutin.
4. 関節症が変形性関節症である、 請求項 1〜 3のいずれか 1項に記載の関節 症治療剤。  4. The therapeutic agent for arthritis according to any one of claims 1 to 3, wherein the arthropathy is osteoarthritis.
5. ス夕チン、 その製薬上許容される塩、 又はそれらの溶媒和物を有効成分と して含有する、 関節内投与用の関節保護剤。  5. A joint protective agent for intra-articular administration, containing swatin, a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a solvate thereof as an active ingredient.
6 . ス夕チンが、 プラバス夕チン、 シンバス夕チン、 フルバス夕チン、 ァトル バス夕チン、 ピ夕バス夕チン、 ロスバス夕チン及びメバス夕チンからなる群か ら選択される少なくとも 1つである、 請求項 5に記載の関節保護剤。  6. Suyu Chin is at least one selected from the group consisting of Prabus Yu Chin, Symbus Yu Chin, Full Bus Yu Chin, Phat Bus Yu Chin, Pi Yu Bus Yu Chin, Ross Bas Yu Yu Chin and Mebas Yu Chin The joint protective agent according to claim 5.
7 . ス夕チンがメバス夕チンである、 請求項 5に記載の関節保護剤。  7. The joint protecting agent according to claim 5, wherein the sutin is a mevas yutin.
8 . 関節内投与用の関節症治療剤又は関節保護剤を製造するための、 ス夕チン、 その製薬上許容される塩、 又はそれらの溶媒和物の使用。  8. Use of swuttin, a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a solvate thereof for the manufacture of an arthritis therapeutic agent or joint protective agent for intraarticular administration.
9 . ス夕チンが、 プラバス夕チン、 シンバス夕チン、 フルバス夕チン、 ァトル バス夕チン、 ピ夕バス夕チン、 ロスバス夕チン及びメバス夕チンからなる群か ら選択される少なくとも 1つである、 請求項 8に記載の使用。  9. Suyu Chin is at least one selected from the group consisting of Prabus Yu Chin, Symbus Yu Chin, Full Bus Yu Chin, Myrtle Bus Yu Chin, Pi Yu Bus Yu Chin, Ross Bas Yu Yu Chin and Mebas Yu Chin Use according to claim 8.
1 0. ス夕チンがメバス夕チンである、 請求項 8に記載の使用。  1 0. Use according to claim 8, wherein the sutin is Mebas.
I I . 関節症が変形性関節症である、 請求項 8〜 1 0のいずれか 1項に記載の使 用。  I I. Use according to any one of claims 8 to 10, wherein the arthropathy is osteoarthritis.
1 2 . ス夕チン、 その製薬上許容される塩、 又はそれらの溶媒和物を有効成分と して含有する、 関節内投与のための関節症治療用又は関節保護用キット。 1 3. ス夕チンが、 プラバス夕チン、 シンバス夕チン、 フルバス夕チン、 ァトル バス夕チン、 ピ夕バス夕チン、 ロスバス夕チン及びメバス夕チンからなる群か ら選択される少なくとも 1つである、 請求項 1 2に記載のキット。 1 2. A kit for the treatment of arthropathy or joint protection for intra-articular administration, containing sutubin, a pharmaceutically acceptable salt thereof, or a solvate thereof as an active ingredient. 1 3. At least one selected from the group consisting of Prabus Yu Chin, Symbus Yu Chin, Full Bus Yu Chin, Myrtle Bus Yu Chin, Pi Yu Bus Yu Chin, Ross Bas Yu Yu Chin and Mebas Yu Chin. The kit according to claim 12.
4. ス夕チンがメバス夕チンである、 請求項 1 2に記載のキット。 4. The kit according to claim 12, wherein the switch is Mevas Yu Chin.
5. 関節症が変形性関節症である、 請求項 1 2〜 1 4のいずれか 1項に記載の キッ卜。 5. The kit according to any one of claims 12 to 14, wherein the arthropathy is osteoarthritis.
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS62205033A (en) * 1986-03-04 1987-09-09 Osamu Matsuo Remedy for rheumatoid arthritis
US20050152905A1 (en) * 2002-08-22 2005-07-14 Omoigui Osemwota S. Method of biochemical treatment of persistent pain

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS62205033A (en) * 1986-03-04 1987-09-09 Osamu Matsuo Remedy for rheumatoid arthritis
US20050152905A1 (en) * 2002-08-22 2005-07-14 Omoigui Osemwota S. Method of biochemical treatment of persistent pain

Non-Patent Citations (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
AKASAKI M. ET AL.: "Kato Henkeisei Hiza Kansetsusho Model ni Taisuru Statin Kansetsunai Toyo no Koka", JAPANESE SOCIETY OF CARTILAGE METABOLISM PROGRAM.SHOROKUSHU, vol. 21ST, 2008, pages 116 *
DATABASE MEDLINE [online] KATO K. ET AL.: "HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS VECTOR-MEDIATED INTRA-ARTICULAR EXPRESSION OF ANGIOSTATIN INHIBITS PROGRESSION OF COLLAGEN-INDUCED ARTHRITIS IN MICE", XP019335225, accession no. STN Database accession no. (2005495313) *
JANSEN T.L.: "ATROVASTATINE FOR CHRONIC SYNOVITIS DUE TO MASSIVE INTRA-ARTICULAR CHOLESTEROL MONOHYDRATE DEPOSITION IN LONG-STANDING RHEUMATOID ARTHRITIS", RHEUMATOLOGY, vol. 45, no. 12, 2006, pages 1577 - 1578 *
KATO O. ET AL.: "Ulinastatin no Jikkenteki Kansetsuen ni Taisuru Sayo", FOLIA PHARMACOLOGICA JAPONICA, vol. 91, no. 1, 1988, pages 29 - 40 *
KONDO S. ET AL.: "HMG-CoA Kangen Koso Sogaizai (Statin) wa Kotsuzui Kan'yokei Saibo no Nankotsu Tokuiteki Idenshi Hatsugen o Sokushin suru", THE JOURNAL OF THE JAPANESE ORTHOPAEDIC ASSOCIATION, vol. 80, no. 8, 2006, pages S1106 + ABSTR. NO. 2-P5-26 *
MCCAREY D.W. ET AL.: "TRIAL OF ATROVASTATIN IN RHEUMATOID ARTHRITIS (TARA): DOUBLE-BLIND RANDOMISED PLACEBO-CONTROLLED TRIAL", LANCET, vol. 363, no. 9426, 2004, pages 2015 - 2021 *
NAGASHIMA S.: "Kekkan Shinsei Yokusei kara Mita Kansetsu Rheumatism Katsumaku Saibo Zoshoku no Seigyo -Kekkan Shinsei Yokusei Inshi no Idenshi Donyu-", J. NIPPON MED. SCH., vol. 68, no. 6, 2001, pages 549 - 550 *
RHEUMATOL. INT., vol. 25, no. 7, 2005, pages 522 - 529 *
SATO E. ET AL.: "Kansetsu Rheumatism (RA) Nankotsu Hakai ni Oyobosu Ko-Calpastatin Jiko Kotai no Yakuwari", THE PHARMACEUTICAL SOCIETY OF JAPAN NENKAI YOSHISHU, vol. 124TH, no. 4, 2004, pages 14 + ABSTR. NO. 29 [P2] II-379 *
WANG C.R. ET AL.: "PROPHYLACTIC ADENOVIRUS-MEDIATED HUMAN KALLISTATIN GENE THERAPY SUPPRESSES RAT ARTHRITIS INHIBITING ANGIOGENESIS AND INFLAMMATION", ARTHRITIS RHEUM., vol. 52, no. 4, 2005, pages 1319 - 1324 *
WATANABE E. ET AL.: "Kansetsu Rheumatism (RA) Kanja Kansetsu Ekichu no Ko-Calpastatin Jiko Kotai no Calpain no Kyodo", THE PHARMACEUTICAL SOCIETY OF JAPAN NENKAI YOSHISHU, vol. 123RD, no. 7, 2003, pages 7 + ABSTR. NO. 29 [P2] I-473 *
WU Y.S. ET AL.: "THE MATRIX METALLOPROTEINASES AS PHARMACOLOGICAL TARGET IN OSTEOARTHRITIS: STATINS MAY BE OF THERAPEUTIC BENEFIT", MED. HYPOTHESIS, vol. 69, no. 3, 13 March 2007 (2007-03-13), pages 557 - 559, XP022140485 *
YUDO T. ET AL.: "Nankotsu Hensei ni Taisuru Statin no Yokusei Koka no Kento: Statin wa Nankotsu Saibo Kino Teika - Roka o Yokusei suru", JAPANESE JOURNAL OF CLINICAL IMMUNOLOGY, vol. 29, no. 4, 2006, pages 252 + ABSTR. NO. 11-7 *

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