WO2006087465A3 - Methode de preparation de fragments synthetiques d'acides nucleiques bicatenaires - Google Patents

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Abstract

La présente invention concerne une méthode de préparation d'un fragment synthétique d'acides nucléiques dans laquelle on prépare un grand premier fragment d'ADN synthétique double brin de séquence déterminée comprenant un enchaînement dans un ordre déterminé d'une pluralité de n deuxièmes petits fragments d'ADN synthétiques contigus, comprenant : une première étape de réaction d'amplification de type PCR en d'une série de n oligonucléotides de séquences déterminées, sans amorces exogènes, dans des conditions de températures permettant l'hybridation des dits oligonucléotides entre eux , suivie d'une élongation du complexe obtenu, destinée à mettre bout à bout dans un ordre déterminé les dits oligonucléotides, les séquences desdits oligonucléotides correspondant succes sivement et alternativement aux séquences sens et anti-sens des différents dits deuxièmes fragments synthétiques, et chaque dit oligonucléotide contenant dans ses régions 5' et 3' des séquences complémentaires de celles des oligonucléotides suivants et précédents, le cas échéant, et une deuxième étape d'amplification à l'aide d'amorces spécifiques des extrémités 5' et 3' du dit brin directe dudit grand premier fragment synthétique à préparer, permettant de produire des copies identiques dudit grand premier fragment.
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