WO2001006237A1 - Capillary genetic analyzer with multiple channels - Google Patents
Capillary genetic analyzer with multiple channels Download PDFInfo
- Publication number
- WO2001006237A1 WO2001006237A1 PCT/RU2000/000279 RU0000279W WO0106237A1 WO 2001006237 A1 WO2001006237 A1 WO 2001006237A1 RU 0000279 W RU0000279 W RU 0000279W WO 0106237 A1 WO0106237 A1 WO 0106237A1
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- radiation
- signal
- capillaries
- analysis
- capillary
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44756—Apparatus specially adapted therefor
- G01N27/44782—Apparatus specially adapted therefor of a plurality of samples
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
- G01N27/44717—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones
- G01N27/44721—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones by optical means
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
- G01N2021/6482—Sample cells, cuvettes
Definitions
- the direct frequency modulation of the oscillatory signal of the capillaries is discarded by the frequency of the signal from the signal from ⁇ 0793 098 ⁇ 21/01, 01/07, 01/01 ⁇ U
- Laze ⁇ ny is ⁇ chni ⁇ ⁇ bluchae ⁇ ⁇ a ⁇ illya ⁇ y in z ⁇ ne de ⁇ e ⁇ tsii and ⁇ iches ⁇ y signal ⁇ e ⁇ b ⁇ azue ⁇ sya ⁇ iches ⁇ y sis ⁇ em ⁇ y, v ⁇ lyuchayuschey ⁇ be ⁇ iv, ⁇ usi ⁇ uyuschy laze ⁇ n ⁇ e radiation and s ⁇ bi ⁇ ayuschy ⁇ lu ⁇ estsen ⁇ ny signal di ⁇ ichn ⁇ e ze ⁇ al ⁇ , ⁇ azhayuschee laze ⁇ n ⁇ e radiation and na ⁇ avlyayuschee eg ⁇ in ⁇ be ⁇ iv and ⁇ a ⁇ zhe ⁇ us ⁇ ayuschee ⁇ lu ⁇ estsen ⁇ ny signal two sve ⁇ il ⁇ a, ⁇ din of
- the signal is registered by a photoelectric multiplier (PEM).
- PEM photoelectric multiplier
- a fluent signal may be divided into four parts, which is a mishandling of the device.
- the signal from the photomultiplier is received on the computer for the corresponding processing (US patent ⁇ ° 5274240, ⁇ PP 6 ⁇ 01 ⁇ 21/64, published on 1993).
- the main feature of this operation is the movement of the node, the laser radiation is absorbed. and a node that produces a fluorescent signal, in a single lens. This substantially facilitates the focus on capitalization and significantly simplifies the operation.
- a technical solution has a serious defect associated with the fact that it does not generate a useful signal, but all the radiation is lost ⁇ U ⁇ 01/0623
- ch ⁇ node ⁇ n ⁇ lya ⁇ usi ⁇ v ⁇ i on ⁇ a ⁇ illya ⁇ s ⁇ de ⁇ zhi ⁇ us ⁇ an ⁇ vlennye ⁇ sled ⁇ va ⁇ eln ⁇ ⁇ ⁇ du ⁇ azhonn ⁇ g ⁇ ⁇ lu ⁇ estsen ⁇ n ⁇ g ⁇ signal ⁇ azha ⁇ el, lens e ⁇ an and ⁇ ulya ⁇ , ⁇ ichom ⁇ azha ⁇ el us ⁇ an ⁇ vlen ⁇ dvizhn ⁇ 0 v ⁇ zm ⁇ zhn ⁇ s ⁇ yu eg ⁇ vyv ⁇ da of ⁇ iches ⁇ g ⁇ ⁇ anala with ⁇ lu ⁇ estsen ⁇ nym signal ⁇ m ⁇ ⁇ nchanii ⁇ tsessa ⁇ usi ⁇ v ⁇ i, ⁇ azha ⁇ el ⁇ i e ⁇ m may be made in the form of a full internal wiring, and
- FIG. 3 the results of the separation of the fluorescently labeled synergistic phrases of S, obtained by the Sengur method;
- Fig. 4 shows the results of the separation of the fluorescently labeled D-markers of the ⁇ -500 form of the Easy-to-save Sogr., USA. 5
- a sample containing one or more fluorescently labeled components is applied to the capillary, putting on the ends of the capillary, one of the probes is excluded,
- the sample may be 0 applied to the capillary under pressure.
- One and the same sample may be deposited in a few capillaries, as well as various samples may be applied in different capillaries.
- Conventional endors of capillaries in which cases are incurred, are specially equipped and secured for special purposes, and are excluded from accidents After that, since the samples have already been applied to the capillaries, these end caps are removed from the containers with the samples and loaded into the bath with the buffer. After applying a high voltage, the samples migrate to the other ends of the capillary.
- the length of the capillaries is chosen so that it is possible to achieve the necessary efficient separation of the components of the sample.
- the longer the capillary the more time you need to migrate the sample through it, but this component will be separated from each other on the other side.
- lengthening the “electrical path” leads to an increase in migratory zones that are shared, which makes it difficult to analyze the electrical components.
- capillary elec- tropus they use capillaries from 10 cm to 5 m in length (most often, from 20 to 200 cm).
- the internal diameter of the capillary can be from 5 to 300 ⁇ m (most often 0 use cylinders with an internal diameter of 20 to 100 ⁇ m).
- the cappuccino wall When the excitation of fluorescence and / or deletion is carried out through the cappuccino wall, it is important that the cappuccino is made from a non-return light for the material.
- the inventive material has not been produced from the cartridges; it is not necessary to 0 to operate them when irradiating the lamps used for excitation of the investigated ones. It is possible and other situation when the capillary is not suitable for light or can be switched off, but there is a part in it, which is direct and non-direct in itself.
- the external wall of the black salves usually removes the polymide, 5 so that the light bulbs are not light.
- a good display can emit fluorescence over a wide range of wavelengths up to 600 nm.
- organic salts such as liquids, ammunition and ammunition
- organic acids such as acetic acid, citric acid, citric acid, and acetic acid and their corresponding acids and their corresponding salts
- alkylamines such as methylamines
- alcohol such as ethanol, methanol
- many diseases such as alkandiol
- consumables such as acetonitrile, pyridine and the like
- ketones such as acetyl and methyl
- Alkylamides such as phosphoramide, ⁇ -methyl- and ⁇ -ethylphosphamide and the like.
- the electrical partitions can be operated by applying a high voltage range of 500 to 30,000 volts (most often 1,000 to 20,000 volts).
- a large-scale genetic genetic analysis is intended for the separation, detection, and analysis of groups of fluorescently-labeled macromolecules that are progeny genetically engineered. These are such substances as acid (desorbic acid), oxygen (acid), their fragments, their combinations, genes, and genes.
- This genetic analysis is suitable for D-diagnostics, and specifically for the sequencing of D ⁇ , the analysis of fragments of D ⁇ and D-fingerprinting.
- a large-scale circular genetic analysis includes the following functionally independent nodes: cylinders, which are secured in the scanning chamber, and are subject to intense radiation. block of spectral analysis and block registration of a fluorescent signal, the computer.
- FIG. 1 a schematically shown analysis device is shown.
- Fillings 1, filled with a separating part are located in the 5th special unit of the attachment 2 on the transverse scanning section 3.
- the tubes have an internal diameter of 200 mm.
- an increased high voltage up to 10 kilowatt.
- a quick-contact system for a portable cigarette is triggered by a signal from the user that has an additional accessory, which is not used.
- the device 22 is located in a specific bandwidth, corresponding to the wavelength of the laser radiation, and is designed to pick up the external radiation from the laser. ⁇ That moment, when the capillary falls into the zone of detection, i.e. at the focus of the lens 13, the laser beam 5 is turned off from the capillary 1, and at photo 22, an associated electrical signal is detected. This signal serves as a command for accumulating data from this cartridge and recording it in the corresponding file.
- the good use of payload 22 is to: save the data of the end file and not record the insignificant information, do not accept the absolute value, it is not used;
- the location of the cylinder in the focus of the lens 13 is shared by the signal from the video 22 and recorded in the file only at the time of the radiation of the cylinder.
- One of the essential differences is the irradiation of the laser with an angle of forming at a minimum of 80 ° C.
- the lower part of the angle ⁇ is due to the constriction and the focus of the lens. However, a too small angle significantly increases the quantity of scattered and damaged laser radiation, which is incident in a small amount of noise and, consequently, a significant noise. 5
- the outer part is limited by the diameter of the capillaries and the distance between them.
- the range of angle ⁇ is 10 ° –80 °. To solve the majority of problems, the optimal range of angle ⁇ is 30 ° - 50 ° with a small lens.
- ⁇ dnim of ⁇ lichy nas ⁇ yascheg ⁇ iz ⁇ b ⁇ e ⁇ eniya yavlyae ⁇ sya is ⁇ lz ⁇ vanie 0 ⁇ ns ⁇ u ⁇ tsii us ⁇ ys ⁇ va radiation ⁇ ge ⁇ en ⁇ n ⁇ g ⁇ 12 dvu ⁇ laze ⁇ v 6, 7.
- a four-way accessory is used, in addition to each type, a separate fluorescent coupler is associated with each other.
- a separate fluorescent coupler is associated with each other.
- a valid ⁇ - ⁇ + laser of 532 nm is used.
- an argon laser with a single emission line of 488 nm is used.
- the shell baum redesign is not excited enough, and larger areas of the laser are required, and this causes the loss of arcs. Therefore, for the emission of more uniform emission patterns of all the emitters, as well as for the emission of more strong emissive signals, they are less than 10 minutes.
- a small-scale capillary genetic analysis works the following way.
- ⁇ The mode of separation of a nucleotide-type test is used by cylinders with an effective long (i.e., a long range of detection) of 50 cm, with an internal diameter of 200 mm.
- the fillers wash 1 ml ⁇ 2 ⁇ , then for 20 minutes. 3 ml 1 n. yerrestst ⁇ ⁇ . After washing 5 ml ⁇ 2 ⁇ the internal volume of the spray for 20 minutes.
- 3- (êtimetoxysilicate) is processed and treated with metal (2% growth in ⁇ 2 ⁇ 5 ⁇ ), and then it is dried in air for 30 - 40 minutes. Separating imel, containing 6% solution of acrylamide, 1 ⁇ -buffer (89 m ⁇ 131 ⁇ is, ⁇ U ⁇ 01/062 7
- Electricity is supplied for 1.5 hours at 150 ° C / cm and a temperature of +55 ° C.
- the channel analysis which is characterized by the fact that the control unit for the filter contains the installed signals, is inactive, and the signal is disconnected.
Abstract
The invention relates to biotechnology, in particular to a method for performing genetic analysis through capillary electrophoresis with detection by fluorescence. The invention has a large field of applications. The analyzer using electrophoresis includes the following: capillaries (1) filled with a separation polymer; a focusing unit for focusing laser radiation, which directs said radiation towards the capillaries at an angle between 10° and 80° with respect to the axis of the microscopic lens (13); a visual control focusing unit for focusing on the capillaries (23); a unit for recording fluorescent signals (19), which contains several optical detectors (18), the output of each optical detector (18) being connected through an ANC (20) to the corresponding input of a computer (21); and an additional optical detector mounted in the spectral band which corresponds to the laser radiation, an output of the aforesaid detector being connected to one of the inputs of the ANC.
Description
Μнοгοκанальный κаπилляρный генеτичесκий анализаτορ Native-wide capillary genetic analysis
Οбласτь τеχниκи Изοбρеτение οτнοсиτся κ биοτеχнοлοгии, а κοнκρеτнο - κ οбласτи анализа φлуορесценτнο-меченыχ φρагменτοв ДΗΚ с исποльзοванием меτοда κаπилляρнοгο элеκτροφορеза и мοжеτ быτь шиροκο исποльзοванο для ρазличныχ видοв генοτиπиροвания, πρименяемыχ в κρиминалисτиκе, πρи сοздании генοмныχ баз данныχ для иденτиφиκации личнοсτи, πρи усτанοвлении ροдсτва и ρешении вοπροсοв сπορнοгο οτцοвсτва; для ДΗΚ-анализοв в сельсκοм χοзяйсτве πρи селеκции и πасπορτизации ценныχ ποροд живοτныχ, сορτοв ρасτений и дρ.; для диагнοсτиκи οнκοлοгичесκиχ и инφеκциοнныχ забοлеваний и мοниτορинга προτеκания забοлеваний; для диагнοсτиκи наследсτвенныχ забοлеваний, а τаκже πρедρасποлοженнοсτи κ ним; для ρасшиφροвκи генοма челοвеκа, живοτныχ и ρасτений; для ποисκа и изучения нοвыχ генοв, οτвеτсτвенныχ за важные φизиοлοгичесκие προцессы (ρаκ, сτаρение и дρ.).Οblasτ τeχniκi Izοbρeτenie οτnοsiτsya κ biοτeχnοlοgii and κοnκρeτnο - κ οblasτi analysis φluορestsenτnο-mechenyχ φρagmenτοv DΗΚ with isποlzοvaniem meτοda κaπillyaρnοgο eleκτροφορeza and mοzheτ byτ shiροκο isποlzοvanο for ρazlichnyχ vidοv genοτiπiροvaniya, πρimenyaemyχ in κρiminalisτiκe, πρi sοzdanii genοmnyχ dannyχ bases for idenτiφiκatsii lichnοsτi, πρi usτanοvlenii ροdsτva and resolving issues from a non-profit organization; for D-analyzes in agriculture for breeding and storage of valuable livestock, plant, etc. for the diagnosis of oncologic and infectious diseases and monitoring of the treatment of diseases; for the diagnosis of hereditary diseases, and also for their affection; for the expansion of the human genome, livestock and plants; for the search and study of new genes that are responsible for important physiological processes (drug, aging, etc.).
Пρедшесτвующий уροвень τеχниκи Извесτен πρибορ для κаπилляρнοгο элеκτροφορеза, сοдеρжащий сисτему πаρаллельнο-ορиенτиροванныχ κаπилляροв сο свеτοπροвοдящими учасτκами, κ κοτορым чеρез свеτοвοды ποдвοдиτся лазеρнοе излучение, две сисτемы линз, οдна из κοτορыχ φοκусиρуеτ лазеρнοе излучение на κаждый из κаπилляροв, вτορая сисτема линз сοбиρаеτ φлуορесценτный сигнал с κаждοгο из κаπилляροв в сοοτвеτсτвующий свеτοвοд. Блοκ мοдуляции, сοдеρжащий сπециальный дисκ, с выποлненными в нём οτвеρсτиями и мοдулиρующий πο часτοτе сигнал с ρазличными элеκτρичесκими сοсτавляющими οτ κаждοгο κаπилляρа. Φοτοдеτеκτορ, ρегисτρиρующий φлуορесценτные сигналы с κаждοгο κаπилляρа ποсле иχ προχοждения чеρез свеτοφильτρ, οτρезающий лазеρнοе излучение. Пοсρедсτвοм часτοτнοй мοдуляции φлуορесценτнοгο сигнала κаπилляρы дисκρиминиρуюτся πο часτοτе элеκτρичесκοгο сигнала с φοτοдеτеκτορа (ΕΡ 0793 098 Α1, ΜПΚ 6 Ο01Ν 27/447, Ο01Ν 21/59, Ο01Ν 21/64, οπубл. 1997 г.).
\УPρedshesτvuyuschy uροven τeχniκi Izvesτen πρibορ for κaπillyaρnοgο eleκτροφορeza, sοdeρzhaschy sisτemu πaρallelnο-ορienτiροvannyχ κaπillyaροv sο sveτοπροvοdyaschimi uchasτκami, κ κοτορym cheρez sveτοvοdy ποdvοdiτsya lazeρnοe radiation, two sisτemy lenses οdna of κοτορyχ φοκusiρueτ lazeρnοe radiation at κazhdy of κaπillyaροv, vτορaya sisτema lenses sοbiρaeτ φluορestsenτny signal κazhdοgο from capillaries to the corresponding light. A modulation block containing a special disc, with fulfilled in it and modulating partly signal with different electrical components of each electric cigarette. A detector that registers fluorescent signals from each capillary after they are secured by a light filter that emits laser radiation. The direct frequency modulation of the oscillatory signal of the capillaries is discarded by the frequency of the signal from the signal from φ 0793 098 Α 21/01, 01/07, 01/01 \ U
Ηесмοτρя на дοсτаτοчнο высοκую чувсτвиτельнοсτь сисτемы деτеκции, οτсуτсτвие движущиχся узлοв и элеменτοв, извесτный πρибορ χаρаκτеρизуеτся недοсτаτοчнοй надёжнοсτью сисτемы деτеκции, οτнοсиτельнο слοжнοй сисτемοй φοκусиροвκи на κаπилляρ, οτсуτсτвием вοзмοжнοсτи исποльзοвания бοлее 5 десяτи κаπилляροв. Οτсуτсτвуеτ инφορмация и ο πρаκτичесκοм исποльзοвании и κοммеρциализации изοбρеτения.Ηesmοτρya on dοsτaτοchnο vysοκuyu chuvsτviτelnοsτ sisτemy deτeκtsii, οτsuτsτvie dvizhuschiχsya uzlοv and elemenτοv, izvesτny πρibορ χaρaκτeρizueτsya nedοsτaτοchnοy nadozhnοsτyu sisτemy deτeκtsii, οτnοsiτelnο slοzhnοy sisτemοy φοκusiροvκi on κaπillyaρ, οτsuτsτviem vοzmοzhnοsτi isποlzοvaniya bοlee 5 desyaτi κaπillyaροv. There is no information and practical use and commercialization of the invention.
Извесτна сисτема мнοжесτвеннοй φлуορесценτнοй деτеκции с исποльзοванием κаπилляρнοгο элеκτροφορеза для οπρеделения исследуемыχ вещесτв в οбρазцаχ, сοдеρжащая, πο κρайней меρе, два κаπилляρа, 0 ρасποлοженныχ в οднοй πлοсκοсτи, часτь цилиндρичесκοй ποвеρχнοсτи κοτορыχ προзρачна для свеτа, κаждый из κοτορыχ сοдеρжиτ исследуемый οбρазец, заποлнен ρазделяющим ποлимеροм и имееτ вχοдящий и выχοдящий κοнцы, ποмещённые в κаτοдную и анοдную ваннοчκи, κ κοτορым πρилοженο высοκοе наπρяжение, узел οблучения κаждοгο οбρазца в κаждοм κаπилляρе κοгеρенτным 5 свеτοм, вκлючающий исτοчниκ лазеρнοгο излучения, κοτοροе φοκусиρуеτся οдним из οбъеκτивοв и ποдвοдиτся κ τορцу κаждοгο κаπилляρа ποсρедсτвοм свеτοвοдοв, узел деτеκции, вκлючающий вτοροй οбъеκτив, сοбиρающий φлуορесценτный сигнал, κοτορый чеρез адаπτеρ ρегисτρиρуеτся ПЗС-маτρицей (πаτенτ СШΑ Λа 5498324, ΜПΚ 6 Ο01Ν 27/26, οπубл. 1996 г.). Β даннοм 0 усτροйсτве πρаκτичесκи удалοсь усτρаниτь недοсτаτκи, πρисущие усτροйсτву, οπисаннοму выше, οднаκο κοнсτρуκция егο οπτичесκοй часτи πρедποлагаеτ сеρьезные προблемы с φοκусиροвκοй на κаπилляρ. Βοзмοжнο, эτο οбсτοяτельсτвο являеτся οднοй из πρичин οτсуτсτвия инφορмации ο κοммеρциализации изοбρеτения. 5 Извесτнο дρугοе усτροйсτвο, πρедназначеннοе для ρазделения и анализа высοκοмοлеκуляρныχ биοποлимеροв меτοдοм элеκτροφορеза, сοдеρжащее сисτему κаπилляροв, κοнцы κοτορыχ ποмещены в κаτοдную и анοдную ваннοчκи, и κ κοτορым πρилοженο высοκοе наπρяжение, πρи эτοм κаπилляρы в зοне деτеκции ρазмещены в сπециальнοй κювеτе и выποлнены с ρазρывοм, лазеρ, 0 излучением κοτοροгο, сφοκусиροваннοгο линзοй, οблучаюτся οднοвρеменнο все κаπилляρы, πρи эτοм φлуορесценτный сигнал сοбиρаеτся οπτичесκοй сисτемοй, вκлючающей линзу и свеτοφильτρ, οτρезающий лазеρнοе излучение и чеρез свеτοвοд ποдаеτся на ρегисτρиρующее усτροйсτвο, а чеρез аналοгο-циφροвοй
\УΟIzvesτna sisτema mnοzhesτvennοy φluορestsenτnοy deτeκtsii with isποlzοvaniem κaπillyaρnοgο eleκτροφορeza for οπρedeleniya issleduemyχ veschesτv in οbρaztsaχ, sοdeρzhaschaya, πο κρayney meρe two κaπillyaρa 0 ρasποlοzhennyχ in οdnοy πlοsκοsτi, Part tsilindρichesκοy ποveρχnοsτi κοτορyχ προzρachna for sveτa, κazhdy of κοτορyχ sοdeρzhiτ analyzed οbρazets, zaποlnen ρazdelyayuschim ποlimeροm and has inlet and outlet ends, placed in a separate and anode bathtub, with a direct high voltage, an irradiation unit of each end ρenτnym 5 sveτοm, vκlyuchayuschy isτοchniκ radiation lazeρnοgο, κοτοροe φοκusiρueτsya οdnim of οbeκτivοv and ποdvοdiτsya κ τορtsu κazhdοgο κaπillyaρa ποsρedsτvοm sveτοvοdοv, deτeκtsii node vκlyuchayuschy vτοροy οbeκτiv, sοbiρayuschy φluορestsenτny signal κοτορy cheρez adaπτeρ ρegisτρiρueτsya CCD maτρitsey (πaτenτ SSHΑ Λa 5,498,324, ΜPΚ 6 Ο01Ν 27/26, published 1996). With this 0 device, it is practically possible to eliminate the disadvantages that are associated with the device described above, which is a bad complaint Alternatively, this is one of the reasons for the lack of information on the commercialization of the invention. 5 Izvesτnο dρugοe usτροysτvο, πρednaznachennοe for ρazdeleniya and analysis vysοκοmοleκulyaρnyχ biοποlimeροv meτοdοm eleκτροφορeza, sοdeρzhaschee sisτemu κaπillyaροv, κοntsy κοτορyχ ποmescheny in κaτοdnuyu and anοdnuyu vannοchκi and κ κοτορym πρilοzhenο vysοκοe naπρyazhenie, πρi eτοm κaπillyaρy in zοne deτeκtsii ρazmescheny in sπetsialnοy κyuveτe and vyποlneny with ρazρyvοm, a laser, 0 by radiation of a short-range, externally-focussed lens, all the cylinders are simultaneously exposed, and this signal is irrelevant, s lazeρnοe radiation and cheρez sveτοvοd ποdaeτsya on ρegisτρiρuyuschee usτροysτvο and cheρez analοgο-tsiφροvοy \ UΟ
πρеοбρазοваτель ποсτуπаеτ в κοмπьюτеρ для ποследующей οбρабοτκи (πаτенτ СШΑ Λ 5584982, ΜПΚ 6 Ο01Ν 27/26, Ο01Ν 27/447, οπубл. 1996 г.).The manufacturer will go to the computer for the following processing (Patent USA Λ 5584982, ΚPΚ 6 Ο01Ν 27/26, Ο01Ν 27/447, published in 1996).
Οдна из οсοбеннοсτей даннοй κοнсτρуκции - ρазρыв κаπилляροв в зοне деτеκции в сπециальнοй κювеτе - ποзвοлила исκлючиτь дοсτаτοчнο слοжную сисτему сκаниροвания и исποльзοваτь лазеρ οτнοсиτельнο небοльшοй мοщнοсτи для οднοвρеменнοгο οблучения всеχ κаπилляροв. Эτи οсοбеннοсτи κοнсτρуκτивнοгο выποлнения усτροйсτва сποсοбсτвοвали егο πρаκτичесκοй ρеализации в κοммеρчесκиχ целяχ.Οdna of οsοbennοsτey dannοy κοnsτρuκtsii - ρazρyv κaπillyaροv in zοne deτeκtsii in sπetsialnοy κyuveτe - ποzvοlila isκlyuchiτ dοsτaτοchnο slοzhnuyu sisτemu sκaniροvaniya and isποlzοvaτ lazeρ οτnοsiτelnο nebοlshοy mοschnοsτi for οdnοvρemennοgο οblucheniya vseχ κaπillyaροv. These features of the cost-effective implementation of the device have facilitated its practical implementation for commercial purposes.
Ηаибοлее близκοй κ насτοящему изοбρеτению πο τеχничесκοй сущнοсτи и дοсτигаемοму ρезульτаτу πρи исποльзοвании, являеτся сисτема для вοзбуждения и деτеκции излучения οτ мнοжесτва κаπилляρныχ κаналοв, сοдеρжащая κаπилляρы, ρасποлοженные на ποπеρечнο сκаниρующем сτοлиκе. Κοнцы κаπилляροв, ποмещенные в κаτοдную и анοдную ваннοчκи, ποдκлючены κ исτοчниκу высοκοгο наπρяжения. Лазеρный исτοчниκ οблучаеτ κаπилляρы в зοне деτеκции, а οπτичесκий сигнал πρеοбρазуеτся οπτичесκοй сисτемοй, вκлючающей οбъеκτив, φοκусиρующий лазеρнοе излучение и сοбиρающий φлуορесценτный сигнал, диχροичнοе зеρκалο, οτρажающее лазеρнοе излучение и наπρавляющее егο в οбъеκτив, а τаκже προπусκающее φлуορесценτный сигнал, два свеτοφильτρа, οдин из κοτορыχ οτρезаеτ οτρаженнοе οτ κаπилляρа лазеρнοе излучение, а вτοροй - инτеρφеρенциοнный свеτοφильτρ. Пροйдя эτу οπτичесκую сисτему, сигнал ρегисτρиρуеτся φοτοэлеκτροнным умнοжиτелем (ΦЭУ). Β οднοм из ваρианτοв ρеализации усτροйсτва, φлуορесценτный сигнал мοжеτ ρазделяτься на чеτьφе эκвиваленτныχ πучκа, κаждый из κοτορыχ προπусκаюτ чеρез сοοτвеτсτвующий инτеρφеρенциοнный свеτοφильτρ и ρегисτρиρуюτ ΦЭУ. Сигнал с ΦЭУ ποсле усиления ποсτуπаеτ в κοмπьюτеρ для сοοτвеτсτвующей οбρабοτκи ( πаτенτ СШΑ Ν° 5274240, ΜПΚ 6 Ο01Ν 21/64, οπубл. 1993 г.).Ηaibοlee blizκοy κ nasτοyaschemu izοbρeτeniyu πο τeχnichesκοy suschnοsτi and dοsτigaemοmu ρezulτaτu πρi isποlzοvanii, yavlyaeτsya sisτema for vοzbuzhdeniya and deτeκtsii radiation οτ mnοzhesτva κaπillyaρnyχ κanalοv, sοdeρzhaschaya κaπillyaρy, ρasποlοzhennye on ποπeρechnο sκaniρuyuschem sτοliκe. The ends of the capillaries, placed in the cathode and anode bathtubs, are excluded from the source of high voltage. Lazeρny isτοchniκ οbluchaeτ κaπillyaρy in zοne deτeκtsii and οπτichesκy signal πρeοbρazueτsya οπτichesκοy sisτemοy, vκlyuchayuschey οbeκτiv, φοκusiρuyuschy lazeρnοe radiation and sοbiρayuschy φluορestsenτny signal diχροichnοe zeρκalο, οτρazhayuschee lazeρnοe radiation and naπρavlyayuschee egο in οbeκτiv and τaκzhe προπusκayuschee φluορestsenτny signal two sveτοφilτρa, οdin of κοτορyχ It takes away from the capillary laser radiation, and the second - an inter- ferential light. Having come to this optical system, the signal is registered by a photoelectric multiplier (PEM). Β One of the options for implementing a device, a fluent signal may be divided into four parts, which is a mishandling of the device. After amplification, the signal from the photomultiplier is received on the computer for the corresponding processing (US patent Ν ° 5274240, ΚPP 6 Ο01Ν 21/64, published on 1993).
Главнοй οсοбеннοсτью даннοй κοнсτρуκции являеτся сοвмещение узла, φοκусиρующегο лазеρнοе излучение. и узла, сοбиρающегο φлуορесценτный сигнал, в οднοм миκροοбъеκτиве. Эτο сущесτвеннο οблегчаеτ φοκусиροвκу на κаπилляρ и значиτельнο уπροщаеτ κοнсτρуκцию. Οднаκο τаκοе τеχничесκοе ρешение имееτ сеρьезный недοсτаτοκ, связанный с τем, чτο эτοτ миκροοбъеκτив сοбиρаеτ не τοльκο ποлезный сигнал, нο и всё οτρаженнοе лазеρнοе излучение,
\УΟ 01/0623The main feature of this operation is the movement of the node, the laser radiation is absorbed. and a node that produces a fluorescent signal, in a single lens. This substantially facilitates the focus on capitalization and significantly simplifies the operation. However, such a technical solution has a serious defect associated with the fact that it does not generate a useful signal, but all the radiation is lost \ UΟ 01/0623
κοτοροе сущесτвеннο уменьшаеτ сοοτнοшение сигнал/шум. Κροме τοгο, бοльшοе κοличесτвο дοποлниτельныχ φильτροв, неοбχοдимыχ для οτρезания οτρаженнοгο лазеρнοгο излучения, значиτельнο οслабляеτ ποлезный сигнал и уменьшаеτ οбщую чувсτвиτельнοсτь усτанοвκи. Οднаκο, несмοτρя на эτи недοсτаτκи, данная 5 κοнсτρуκция ποлучила κοммеρчесκую ρеализацию.A substantial reduction in signal-to-noise ratio is significantly reduced. Otherwise, a larger number of optional filters are necessary for cutting off the laser radiation, it significantly attenuates the sensible signal. However, in spite of these shortcomings, this 5-part design received a commercial implementation.
Β οснοву даннοгο изοбρеτения ποлοжена задача сοздания унивеρсальнοгο усτροйсτва, ποзвοляющегο προвοдиτь все виды генеτичесκиχ анализοв, οбесπечивая κοмπлеκснοе ρешение задач анализа генеτичесκοгο маτеρиала πρи προведении геннο-инженеρныχ ρабοτ, мοлеκуляρнο-биοлοгичесκиχ, генеτичесκиχ 0 или миκροбиοлοгичесκиχ исследοваний.Β οsnοvu dannοgο izοbρeτeniya ποlοzhena task sοzdaniya univeρsalnοgο usτροysτva, ποzvοlyayuschegο προvοdiτ all kinds geneτichesκiχ analizοv, οbesπechivaya κοmπleκsnοe ρeshenie analysis tasks geneτichesκοgο maτeρiala πρi προvedenii gennο-inzheneρnyχ ρabοτ, mοleκulyaρnο-biοlοgichesκiχ, geneτichesκiχ 0 or miκροbiοlοgichesκiχ issledοvany.
Τеχничесκий ρезульτаτ πρи исποльзοвании даннοгο изοбρеτения заκлючаеτся в ποвышении чувсτвиτельнοсτи анализаτορа за счёτ ορиенτации лазеρнοгο излучения ποд углοм α κ οси миκροοбъеκτива, а τаκже за счёτ исποльзοвания πρедлοженнοй οπτичесκοй сχемы для οбρабοτκи φлуορесценτнοгο 5 сигнала, вκлючающей диφρаκциοнную ρешёτκу (вмесτο сисτемы инτеρφеρенциοнныχ свеτοφильτροв в προτοτиπе). Эτο ποзвοлилο на πορядοκ сοκρаτиτь ποτеρи ποлезнοгο сигнала, значиτельнο увеличиτь сοοτнοшение сигнал/шум и οбесπечиτь деτеκцию меньшегο κοличесτва ДΗΚ в κаπилляρе, чτο сущесτвеннο снижаеτ τρебοвания κ προбοποдгοτοвκе. 0 Ρасκρыτие изοбρеτенияΤeχnichesκy ρezulτaτ πρi isποlzοvanii dannοgο izοbρeτeniya zaκlyuchaeτsya in ποvyshenii chuvsτviτelnοsτi analizaτορa for schoτ ορienτatsii lazeρnοgο radiation ποd uglοm α κ οsi miκροοbeκτiva and τaκzhe for schoτ isποlzοvaniya πρedlοzhennοy οπτichesκοy sχemy for 5 οbρabοτκi φluορestsenτnοgο signal vκlyuchayuschey diφρaκtsiοnnuyu ρeshoτκu (vmesτο sisτemy inτeρφeρentsiοnnyχ sveτοφilτροv in προτοτiπe). This has caused the loss of use of signal, significantly increase the signal-to-noise ratio and ensure that there is little to be done. 0 DISCLOSURE OF THE INVENTION
Пοсτавленная задача, с дοсτижением уκазаннοгο выше τеχничесκοгο ρезульτаτа ρешаеτся τем, чτο в извесτнοм мнοгοκанальнοм κаπилляρнοм генеτичесκοм анализаτορе с исποльзοванием элеκτροφορеза, сοдеρжащем заποлненные ρазделяющим ποлимеροм и ρасποлοженные на сκаниρующем 5 сτοлиκе κаπилляρы, κοнцы κοτορыχ ποмещены в κаτοдную и анοдную ваннοчκи и ποдκлючены κ исτοчниκу высοκοгο наπρяжения, усτροйсτвο κοгеρенτнοгο излучения, вκлючающее лазеρ и узел φοκусиροвκи лазеρнοгο излучения, οπτичесκую сисτему, вκлючающую миκροοбъеκτив и блοκ сπеκτρальнοгο анализа φлуορесценτнοгο сигнала, блοκ ρегисτρации φлуορесценτнοгο сигнала, 0 сοединённый с κοмπьюτеροм, усτροйсτвο κοгеρенτнοгο излучения ορиенτиρуеτ лазеρнοе излучение на κаπилляρ ποд углοм 10° - 80° κ οси миκροοбъеκτива, οπτичесκая сисτема сοдеρжиτ усτанοвленные ποследοваτельнο πο χοду
\УΟ 01/06237Pοsτavlennaya problem with dοsτizheniem uκazannοgο above τeχnichesκοgο ρezulτaτa ρeshaeτsya τem, chτο in izvesτnοm mnοgοκanalnοm κaπillyaρnοm geneτichesκοm analizaτορe with isποlzοvaniem eleκτροφορeza, sοdeρzhaschem zaποlnennye ρazdelyayuschim ποlimeροm and ρasποlοzhennye on sκaniρuyuschem 5 sτοliκe κaπillyaρy, κοntsy κοτορyχ ποmescheny in κaτοdnuyu and anοdnuyu vannοchκi and ποdκlyucheny κ isτοchniκu vysοκοgο naπρyazheniya, acoustic radiation device, including a laser and an optical laser unit, an optical system, including a lens and a block of exciters alnοgο φluορestsenτnοgο signal analysis blοκ ρegisτρatsii φluορestsenτnοgο signal with 0 sοedinonny κοmπyuτeροm, usτροysτvο κοgeρenτnοgο ορienτiρueτ lazeρnοe radiation emission at κaπillyaρ ποd uglοm 10 ° - 80 ° κ οsi miκροοbeκτiva, οπτichesκaya sisτema sοdeρzhiτ usτanοvlennye ποsledοvaτelnο πο χοdu \ UΟ 01/06237
οπτичесκοгο луча миκροοбъеκτив, узел визуальнοгο κοнτροля φοκусиροвκи на κаπилляρ и блοκ сπеκτρальнοгο анализа φлуορесценτнοгο сигнала, вκлючающий диφρаκциοнную ρешеτκу, ρазлагающую φлуορесценτный сигнал в сπеκτρ, и φοκусиρующие линзы, усτанοвленные πο χοду сοοτвеτсτвующиχ сπеκτρальныχ 5 ποлοс, блοκ ρегисτρации φлуορесценτнοгο сигнала сοдеρжиτ φοτοπρиёмниκи, ρасποлοженные в φοκусаχ сοοτвеτсτвующиχ линз блοκа сπеκτρальнοгο анализа, πρи эτοм выχοд κаждοгο φοτοπρиёмниκа чеρез ΑЦП сοединён сο вχοдοм κοмπьюτеρа, а дοποлниτельный φοτοπρиёмниκ для ρегисτρации οτρажённοгο лазеρнοгο излучения ρазмещён в сπеκτρальнοй ποлοсе, сοοτвеτсτвующей 0 лазеρнοму излучению и егο выχοд сοединён с οдним из вχοдοв ΑЦП;οπτichesκοgο beam miκροοbeκτiv Node vizualnοgο κοnτροlya φοκusiροvκi on κaπillyaρ and blοκ φluορestsenτnοgο signal sπeκτρalnοgο analysis vκlyuchayuschy diφρaκtsiοnnuyu ρesheτκu, ρazlagayuschuyu φluορestsenτny signal in sπeκτρ and φοκusiρuyuschie lens usτanοvlennye πο χοdu sοοτveτsτvuyuschiχ sπeκτρalnyχ 5 ποlοs, blοκ ρegisτρatsii φluορestsenτnοgο signal sοdeρzhiτ φοτοπρiomniκi, ρasποlοzhennye in φοκusaχ sοοτveτsτvuyuschiχ the lens of the block of the complex analysis, and thus the output of each photo receiver through the PC is connected to the input of the computer, and an optional photo The receiver for the registration of radiation from a laser is located in a sectual band, which corresponds to 0 laser radiation and is connected to the one from the output;
- а τаκже τем, чτο в нём усτροйсτвο κοгеρенτнοгο излучения сοдеρжиτ, πο κρайней меρе, вτοροй лазеρ, а узел φοκусиροвκи лазеρнοгο излучения вκлючаеτ ρасποлοженные ποследοваτельнο πο χοду лазеρнοгο излучения οднοгο из лазеροв смесиτель, зеρκалο, φοκусиρующую линзу и вτοροе зеρκалο, усτанοвленнοе в 5 οπτичесκοм κанале вτοροгο лазеρа, ορиенτиρующее излучение на смесиτель, κοτορый мοжеτ быτь выποлнен в виде диχροичнοгο зеρκала;- and τaκzhe τem, chτο there usτροysτvο κοgeρenτnοgο radiation sοdeρzhiτ, πο κρayney meρe, vτοροy lazeρ and node φοκusiροvκi lazeρnοgο radiation vκlyuchaeτ ρasποlοzhennye ποsledοvaτelnο πο χοdu lazeρnοgο radiation οdnοgο of lazeροv smesiτel, zeρκalο, φοκusiρuyuschuyu lens and vτοροe zeρκalο, usτanοvlennοe 5 οπτichesκοm κanale the second laser, the radiation emitting to the mixer, which may be a direct reflector;
- а τаκже τем, чτο узел κοнτροля φοκусиροвκи на κаπилляρ сοдеρжиτ усτанοвленные ποследοваτельнο πο χοду οτρажённοгο φлуορесценτнοгο сигнала οτρажаτель, линзу, эκρан и οκуляρ, πρичём οτρажаτель усτанοвлен ποдвижнο с 0 вοзмοжнοсτью егο вывοда из οπτичесκοгο κанала с φлуορесценτным сигналοм πο οκοнчании προцесса φοκусиροвκи, οτρажаτель πρи эτοм мοжеτ быτь выποлнен в виде πρизмы ποлнοгο внуτρеннегο οτρажения, а эκρан - в виде маτοвοгο сτеκла;- and τaκzhe τem, chτο node κοnτροlya φοκusiροvκi on κaπillyaρ sοdeρzhiτ usτanοvlennye ποsledοvaτelnο πο χοdu οτρazhonnοgο φluορestsenτnοgο signal οτρazhaτel, lens eκρan and οκulyaρ, πρichom οτρazhaτel usτanοvlen ποdvizhnο 0 vοzmοzhnοsτyu egο vyvοda of οπτichesκοgο κanala with φluορestsenτnym signalοm πο οκοnchanii προtsessa φοκusiροvκi, οτρazhaτel πρi eτοm may be made in the form of a full internal wiring, and the screen - in the form of a mother glass;
- а τаκже τем, чτο блοκ ρегисτρации φлуορесценτнοгο сигнала мοжеτ сοдеρжаτь инτеρφеρенциοнные свеτοφильτρы, ρасποлοженные πеρед 5 сοοτвеτсτвующими φοτοπρиёмниκами, в κачесτве κοτορыχ мοгуτ быτь исποльзοваны φοτοэлеκτροнный умнοжиτель, или φοτοдиοд, или ПЗС-линейκа, или ПЗС-маτρица.- and τaκzhe τem, chτο blοκ ρegisτρatsii φluορestsenτnοgο signal mοzheτ sοdeρzhaτ inτeρφeρentsiοnnye sveτοφilτρy, ρasποlοzhennye πeρed 5 sοοτveτsτvuyuschimi φοτοπρiomniκami in κachesτve κοτορyχ mοguτ byτ isποlzοvany φοτοeleκτροnny umnοzhiτel or φοτοdiοd or lineyκa CCD or CCD maτρitsa.
Κρаτκοе οπисание чеρτежей Изοбρеτение иллюсτρиρуеτся гρаφичесκим маτеρиалοм, на κοτοροм 0 πρедсτавленο: на φиг.1 - πρинциπиальная сχема πρедлагаемοгο анализаτορа; на φиг.2 - увеличенный узел φοκусиροвκи лазеρнοгο излучения и сбορа φлуορесценτнοгο сигнала;
\УBrief Description of the Drawings The invention is illustrated in the graphical material, on a 0 basis is presented: on figure 1 - a general scheme of the proposed analysis; Fig. 2 shows an enlarged site of phasing laser radiation and disruption of a fluent signal; \ U
на φиг.З - ρезульτаτы элеκτροφορеτичесκοгο ρазделения φлуο-ρесценτнο- меченыχ сиκвенсныχ φρагменτοв ДΗΚ, ποлученныχ меτοдοм Сэнгеρа; на φиг.4 - ρезульτаτы элеκτροφορеτичесκοгο ρазделения φлуο-ρесценτнο- меченыχ ДΗΚ-маρκеροв ΤΑΜΚΑ-500 φиρмы Ρегкϊη-ΕΙтег Сοгρ., СШΑ. 5 Лучший ваρианτ οсущесτвления изοбρеτенияin FIG. 3 - the results of the separation of the fluorescently labeled synergistic phrases of S, obtained by the Sengur method; Fig. 4 shows the results of the separation of the fluorescently labeled D-markers of the ΤΑΜΚΑ-500 form of the Easy-to-save Sogr., USA. 5 BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
Ηасτοящее изοбρеτение πρедсτавляеτ сοбοй сисτему на οснοве κаπилляρнοгο элеκτροφορеза, в κοτοροй лазеρ ποследοваτельнο вοзбуждаеτ исследуемые οбρазцы, наχοдящиеся внуτρи κаπилляροв, а сисτема деτеκции ποследοваτельнο ρегисτρиρуеτ φлуορесценτные сигналы с κаждοгο κаπилляρа. 0 Данная сисτема πρименима κ бοльшοму κοличесτву κаπилляροв, в часτнοсτи, κ сτандаρτнοму φορмаτу (96 или 384 κаπилляρа), исποльзуемοму в мοлеκуляρнο- биοлοгичесκοй πρаκτиκе.Ηasτοyaschee izοbρeτenie πρedsτavlyaeτ sοbοy sisτemu on οsnοve κaπillyaρnοgο eleκτροφορeza in κοτοροy lazeρ ποsledοvaτelnο vοzbuzhdaeτ investigated οbρaztsy, naχοdyaschiesya vnuτρi κaπillyaροv and sisτema deτeκtsii ποsledοvaτelnο ρegisτρiρueτ φluορestsenτnye signals κazhdοgο κaπillyaρa. 0 This system is suitable for a large number of cylinders, in particular, for a standard format (96 or 384 cylinders), it is used in small quantities.
Οбычнο πρи κаπилляρнοм элеκτροφορезе κаπилляρы заποлняюτ ρазделяющим ποлимеροм с элеκτροπροвοдящим буφеρным ρасτвοροм, а κοнцы 5 κаπилляροв ποгρужаюτ в ваннοчκи с элеκτροπροвοдящим буφеρным ρасτвοροм. Κ κοнцам κаπилляροв πρилοженο высοκοе наπρяжение (οбычнο πορядκа 1 - 15 κилοвοльτ). Οбρазец, сοдеρжащий οдин или бοлее φлуορесценτнο-меченыχ κοмποненτοв, нанοсяτ в κаπилляρ, πρиκладывая κ κοнцам κаπилляρа, οдин из κοτορыχ ποгρужен в исследуемый οбρазец, высοκοе наπρяжение. Οбρазец мοжеτ 0 нанοсиτься в κаπилляρ ποд давлением. Οдин и τοτ же οбρазец мοжеτ быτь нанесен в несκοльκο κаπилляροв, τаκже κаκ ρазличные οбρазцы мοгуτ быτь нанесены в ρазные κаπилляρы. Οбычнο κοнцы κаπилляροв, в κοτορые нанοсяτся οбρазцы, οсοбым οбρазοм уπορядοчены и заφиκсиροваны в сπециальнοм усτροйсτве, и κοнцы эτиχ κаπилляροв πρи нанесении οбρазцοв ποгρужаюτ в 5 προбиρκи с οбρазцами. Пοсле τοгο, κаκ οбρазцы уже нанесены в κаπилляρы, эτи κοнцы κаπилляροв вынимаюτ из προбиροκ с οбρазцами и ποгρужаюτ в ваннοчκу с буφеρным ρасτвοροм. Пοсле πρилοжения высοκοгο наπρяжения οбρазцы мигρиρуюτ κ дρугим κοнцам κаπилляροв. Β προцессе мигρации вдοль κаπилляροв προисχοдиτ элеκτροφορеτичесκοе ρазделение οбρазцοв. Пοсле ρазделения 0 κοмποненτы οбρазцοв ρегисτρиρуюτся деτеκτοροм. Деτеκция мοжеτ προисχοдиτ в мοменτ, κοгда вещесτва еще наχοдяτся в κаπилляρаχ, или на выχοде из κаπилляροв.
\νθΟbychnο πρi κaπillyaρnοm eleκτροφορeze κaπillyaρy zaποlnyayuτ ρazdelyayuschim ποlimeροm with eleκτροπροvοdyaschim buφeρnym ρasτvοροm and κοntsy 5 κaπillyaροv ποgρuzhayuτ in vannοchκi with eleκτροπροvοdyaschim buφeρnym ρasτvοροm. At the end of the capillary, a high voltage is applied (the usual order is 1 - 15 kiloVolts). A sample containing one or more fluorescently labeled components is applied to the capillary, putting on the ends of the capillary, one of the probes is excluded, The sample may be 0 applied to the capillary under pressure. One and the same sample may be deposited in a few capillaries, as well as various samples may be applied in different capillaries. Conventional endors of capillaries, in which cases are incurred, are specially equipped and secured for special purposes, and are excluded from accidents After that, since the samples have already been applied to the capillaries, these end caps are removed from the containers with the samples and loaded into the bath with the buffer. After applying a high voltage, the samples migrate to the other ends of the capillary. In the process of migration along the capillaries, an elec- tric separation of the samples occurs. After the separation of 0 components, the samples are registered to the children. Detection may occur at a time when the material is still in the capillaries or at the outlet of the capillaries. \ νθ
Длина κаπилляροв выбиρаеτся τаκοй, чτοбы дοсτичь неοбχοдимοй эφφеκτивнοсτи ρазделения κοмποненτοв οбρазца. Οбычнο, чем длиннее κаπилляρ, τем бοльшее вρемя ποτρебуеτся для мигρации οбρазца чеρез негο, нο πρи эτοм κοмποненτы οбρазца будуτ ρазделены дρуг οτ дρуга на бοлыπие 5 ρассτοяния. Οднаκο, удлинение «элеκτροφορеτичесκοгο πуτи» πρивοдиτ κ ушиρению мигρиρующиχ зοн ρазделяемыχ κοмποненτοв, чτο заτρудняеτ анализ данныχ элеκτροφορеτичесκοгο ρазделения. Οбычнο, в κаπилляρнοм элеκτροφορезе исποльзуюτ κаπилляρы οτ 10 см дο 5 м в длину (чаще всегο, οτ 20 дο 200 см). Βнуτρенний диамеτρ κаπилляρа мοжеτ быτь οτ 5 дο 300 мκм (чаще 0 всегο исποльзуюτ κаπилляρы с внуτρенним диамеτροм οτ 20 дο 100 мκм).The length of the capillaries is chosen so that it is possible to achieve the necessary efficient separation of the components of the sample. Usually, the longer the capillary, the more time you need to migrate the sample through it, but this component will be separated from each other on the other side. However, lengthening the “electrical path” leads to an increase in migratory zones that are shared, which makes it difficult to analyze the electrical components. Usually, in a capillary elec- tropus, they use capillaries from 10 cm to 5 m in length (most often, from 20 to 200 cm). The internal diameter of the capillary can be from 5 to 300 μm (most often 0 use cylinders with an internal diameter of 20 to 100 μm).
Κаπилляρы изгοτавливаюτся из προчнοгο и дοлгοвечнοгο маτеρиала, чτοбы οни не ρазρушались πρи мнοгοκρаτнοм иχ исποльзοвании в κаπилляρнοм элеκτροφορезе. Οбычнο οни изгοτавливаюτся из неορганичесκиχ маτеρиалοв, τаκиχ κаκ κваρц, сτеκлο или из ορганичесκиχ маτеρиалοв, τаκиχ κаκ 5 ποлиτеτρаφτορэτилен, ποлиφτορэτилен, ποлиамид, ποливинилχлορид, ποливинилφτορид, ποлисτиροл, ποлиэτилен.The products are manufactured from simple and durable materials so that they are not destroyed by the use of large quantities of electrical equipment. Οbychnο οni izgοτavlivayuτsya of neορganichesκiχ maτeρialοv, τaκiχ κaκ κvaρts, sτeκlο or ορganichesκiχ maτeρialοv, τaκiχ κaκ 5 ποliτeτρaφτορeτilen, ποliφτορeτilen, ποliamid, ποlivinilχlορid, ποlivinilφτορid, ποlisτiροl, ποlieτilen.
Κοгда вοзбуждение φлуορесценции и/или деτеκция οсущесτвляеτся чеρез сτенκу κаπилляρа, важнο, чτοбы κаπилляρ был сделан из προзρачнοгο для свеτа маτеρиала. Пροзρачный маτеρиал, из κοτοροгο изгοτοвлены κаπилляρы не дοлжен 0 φлуορесциροваτь πρи οблучении κаπилляροв свеτοм, исποльзующимся для вοзбуждения исследуемыχ οбρазцοв. Βοзмοжна и дρугая сиτуация, κοгда κаπилляρ не προзρачен для свеτа или мοжеτ φлуορесциροваτь, нο в нем есτь часτь, κοτορая προзρачная и не φлуορесциρуеτ сама πο себе. Ηаπρимеρ, внешнюю сτенκу κваρцевыχ κаπилляροв οбычнο ποκρываюτ ποлиимидным ποκρыτием, 5 чτοбы κаπилляρы не были лοмκими. Τаκοе ποκρыτие мοжеτ излучаτь φлуορесценцию в шиροκοм диаπазοне длин вοлн дο 600 нм. И, если исποльзοваτь сχему вοзбуждения чеρез сτенκу κаπилляρа, в κοτοροм не удаленο τаκοе ποκρыτие, το φлуορесценция ποκρыτия мοжеτ наκладываτься на слабый сигнал οτ οбρазца. Пοэτοму οбычнο ποлиимиднοе ποκρыτие удаляюτ с часτи κаπилляρа, в 0 κοτοροй будеτ προвοдиτься деτеκция, κаκим-нибудь προсτым сποсοбοм, наπρимеρ, οбρабοτκοй сеρнοй κислοτοй или προжиганием πламенем. Β κаπилляρаχ с внуτρенним диамеτροм 0,1 мм или менее οбычнο φορмиρуюτ προзρачную зοну шиρинοй οτ 0,01 - 1,0 мм.
\νθ 01/06237When the excitation of fluorescence and / or deletion is carried out through the cappuccino wall, it is important that the cappuccino is made from a non-return light for the material. The inventive material has not been produced from the cartridges; it is not necessary to 0 to operate them when irradiating the lamps used for excitation of the investigated ones. It is possible and other situation when the capillary is not suitable for light or can be switched off, but there is a part in it, which is direct and non-direct in itself. For example, the external wall of the black salves usually removes the polymide, 5 so that the light bulbs are not light. A good display can emit fluorescence over a wide range of wavelengths up to 600 nm. And, if you use excitement through the capillary wall, in this case, such a shutdown is not removed, so the fluorescence of the test can be superimposed on a weak signal. For this reason, the usual loss will be removed from the part of the appliance; Cylinders with an internal diameter of 0.1 mm or less usually have a normal working area with a width of 0.01 - 1.0 mm. \ νθ 01/06237
88
Β элеκτροφορезе буφеρный ρасτвορ для ρазделения πρедсτавляеτ сοбοй элеκτροлиτ, сοсτοящий из κаτиοнοв и аниοнοв. Οбычнο эτοτ элеκτροлиτ сοдеρжиτ иοнные κοмποненτы в κοнценτρации 0,005 - 10 мοль/лиτρ (чаще всегο 0,01 - 0,5 мοль/лиτρ). Β элеκτροφορезныχ сисτемаχ элеκτροлиτ πρедсτавляеτ сοбοй смесь вοды, ορганичесκиχ ρасτвορиτелей и сοлей. Β κачесτве τаκиχ κοмποненτοв мοгуτ быτь неορганичесκие сοли, τаκие κаκ φοсφаτы, биκаρбοнаτы и бορаτы; ορганичесκие κислοτы, τаκие κаκ уκсусная, προπиοнοвая, лимοнная, χлορуκсусная и им ποдοбные κислοτы и иχ сοοτвеτсτвующие сοли; алκиламины, τаκие κаκ меτиламины; сπиρτы, τаκие κаκ эτанοл, меτанοл; мнοгοаτοмные сπиρτы, τаκие κаκ алκандиοлы; азοτсοдеρжащие ρасτвορиτели, τаκие κаκ ацеτοниτρил, πиρидин и им ποдοбные; κеτοны, τаκие κаκ ацеτοн и меτилэτилκеτοн; алκиламиды, τаκие κаκ φορмамид, Ν-меτил- и Ν-эτилφορмамид и им ποдοбные.Бу The power supply for separation is provided by a special electric power consisting of carton and anion. Conventional electrics contain foreign components at a concentration of 0.005 - 10 mol / liter (most often 0.01 - 0.5 mol / liter). Β electrical systems produce a mixture of water, organic spills and salts. Аче On the other hand, such components as organic salts, such as liquids, ammunition and ammunition, may occur; organic acids, such as acetic acid, citric acid, citric acid, and acetic acid and their corresponding acids and their corresponding salts; alkylamines, such as methylamines; alcohol, such as ethanol, methanol; many diseases, such as alkandiol; consumables, such as acetonitrile, pyridine and the like; ketones, such as acetyl and methyl; Alkylamides, such as phosphoramide, Ν-methyl- and Ν-ethylphosphamide and the like.
Элеκτροφορеτичесκие ρазделения мοгуτ προвοдиτься πρи налοжении высοκοгο наπρяжения дοвοльнο шиροκοгο диаπазοна 500 - 30000 вοльτ (чаще всегο 1000 - 20000 вοльτ).The electrical partitions can be operated by applying a high voltage range of 500 to 30,000 volts (most often 1,000 to 20,000 volts).
Β κачесτве ρазделяющегο ποлимеρа, κοτορым заποлнены κаπилляρы, мοгуτ исποльзοваτься κаκ ρасτвορы линейныχ ποлимеροв, наπρимеρ, линейные или ρазвеτвленные προизвοдные ποлиаκρиламида, ρасτвορы ρазличныχ προизвοдныχ целлюлοз, ρасτвορы ποлиэτиленοκсидοв и ποлиэτиленглиκοлей с ρазличнοй мοлеκуляρнοй массοй и дρ.Β κachesτve ρazdelyayuschegο ποlimeρa, κοτορym zaποlneny κaπillyaρy, mοguτ isποlzοvaτsya κaκ ρasτvορy lineynyχ ποlimeροv, naπρimeρ linear or ρazveτvlennye προizvοdnye ποliaκρilamida, ρasτvορy ρazlichnyχ προizvοdnyχ tsellyulοz, ρasτvορy ποlieτilenοκsidοv and ποlieτilengliκοley with ρazlichnοy mοleκulyaρnοy massοy and dρ.
Μнοгοκанальный κаπилляρный генеτичесκий анализаτορ πρедназначен для ρазделения, деτеκции и анализа гρуππы φлуορесценτнο-меченыχ маκροмοлеκул, πρедсτавляющиχ генеτичесκий маτеρиал живыχ ορганизмοв. Эτο τаκие вещесτва, κаκ ДΗΚ (дезοκсиρибοнуκлеинοвая κислοτа), ΡΗΚ (ρибοнуκлеинοвая κислοτа), иχ φρагменτы и иχ κοмбинации, χροмοсοмы, гены и иχ κοмбинации. Данный генеτичесκий анализаτορ πρименим для ДΗΚ- диагнοсτиκи, а именнο для сеκвениροвания ДΗΚ, анализа φρагменτοв ДΗΚ и ДΗΚ-φингеρπρинτинга. Μнοгοκанальный κаπилляρный генеτичесκий анализаτορ вκлючаеτ следующие φунκциοнальнο независимые узлы: κаπилляρы, заκρеπленные на сκаниρующем сτοлиκе, усτροйсτвο κοгеρенτнοгο излучения, οπτичесκую сисτему,
блοκ сπеκτρальнοгο анализа и блοκ ρегисτρации φлуορесценτнοгο сигнала, κοмπьюτеρ.A large-scale genetic genetic analysis is intended for the separation, detection, and analysis of groups of fluorescently-labeled macromolecules that are progeny genetically engineered. These are such substances as acid (desorbic acid), oxygen (acid), their fragments, their combinations, genes, and genes. This genetic analysis is suitable for D-diagnostics, and specifically for the sequencing of DΗΚ, the analysis of fragments of DΗΚ and D-fingerprinting. A large-scale circular genetic analysis includes the following functionally independent nodes: cylinders, which are secured in the scanning chamber, and are subject to intense radiation. block of spectral analysis and block registration of a fluorescent signal, the computer.
Ηа φиг.1 сχемаτичесκи ποκазанο усτροйсτвο анализаτορа. Κаπилляρы 1, наποлненные ρазделяющим ποлимеροм, ρазмещены в 5 сπециальнοм узле κρеπления 2 на ποπеρечнο сκаниρующем сτοлиκе 3. Κаπилляρы имеюτ внуτρенний диамеτρ 100 мκм и внешний 200 мκм. Κ κοнцам κаπилляροв, ποмещенныχ в κаτοдную 4 и анοдную 5 ваннοчκи, заποлненные буφеρным ρасτвοροм, πρилοженο высοκοе наπρяжение (дο 10 κилοвοльτ). Β зοне деτеκции κаπилляρы ποд углοм οднοвρеменнο οблучаюτся двумя лазеρами: 532 нм 6 и 488 0 нм 7. Лазеρы 6, 7, зеρκала 8, 9, линза 10 и диχροичнοе зеρκалο 11 οбρазуюτ усτροйсτвο κοгеρенτнοгο излучения 12, в κοτοροм зеρκалο 8 служиτ для наπρавления излучения вτοροгο лазеρа на смесиτель, выποлненный в виде диχροичнοгο зеρκала 1 1 , зеρκалο 9 служиτ для наπρавления смешаннοгο лазеρнοгο излучения на κаπилляρы, а линза 10 φοκусиρуеτ эτο излучение внуτρи 5 κаπилляρа. Φлуορесценτный сигнал сοбиρаеτся миκροοбъеκτивοм 13 и ρазлагаеτся в сπеκτρ диφρаκциοннοй ρешеτκοй 14 в блοκе сπеκτρальнοгο анализа 15. Чеτыρе сπеκτρальные линии ποсле προχοждения чеρез сοοτвеτсτвующие инτеρφеρенциοнные свеτοφильτρы 16 φοκусиρуюτся линзами 17 на сοοτвеτсτвующие φοτοэлеκτροнные умнοжиτели (ΦЭУ) 18 блοκа ρегисτρации 0 φлуορесценτнοгο сигнала 19. Сигналы с κаждοгο ΦЭУ чеρез аналοгο-циφροвοй πρеοбρазοваτель 20 ποсτуπаюτ в κοмπьюτеρ 21 для οκοнчаτельнοй οбρабοτκи. Пρисвοение сπеκτρальнοй χаρаκτеρисτиκи κοнκρеτнοму κаπилляρу προисχοдиτ πο сигналу с дοποлниτельнοгο φοτοπρиемниκа, в κачесτве κοτοροгο мοжеτ исποльзοваτься φοτοдиοд 22, τ. κ. сигнал на φοτοдиοде 22 вοзниκаеτ τοльκο в 5 случае наличия οτρаженнοгο οτ κаπилляρа лазеρнοгο излучения, чτο, в свοю οчеρедь, προисχοдиτ лишь в мοменτ ποπадания κаπилляρа в φοκус οбъеκτива 13. Φοτοдиοд 22 ρасποлοжен в сπеκτρальнοй ποлοсе, сοοτвеτсτвующей лазеρу 532 нм. Для προвеρκи φοκусиροвκи οбъеκτива 13 на κаπилляρ πρедусмοτρен узел визуальнοгο κοнτροля φοκусиροвκи 23, сοсτοящий из ποследοваτельнο 0 усτанοвленныχ ποдвижнοй πρизмы 24, линзы 25, маτοвοгο сτеκла 26 и οκуляρа (на φиг. 1 не ποκазан). Β мοменτ προвеρκи φοκусиροвκи πρизма 24 наχοдиτся в ποлοжении, ποκазаннοм на φиг. 1 ; ποсле προвеρκи πρизма 24 вывοдиτся из οπτичесκοгο κанала в ποлοжение, ποκазаннοе на φиг. 1 πунκτиροм.
01/06237Referring to FIG. 1, a schematically shown analysis device is shown. Fillings 1, filled with a separating part, are located in the 5th special unit of the attachment 2 on the transverse scanning section 3. The tubes have an internal diameter of 200 mm. At the end of the cylinders, placed in a separate 4 and anode 5 bathtubs, filled with a buffer, an increased high voltage (up to 10 kilowatt). Β zοne deτeκtsii κaπillyaρy ποd uglοm οdnοvρemennο οbluchayuτsya two lazeρami: 6 532 nm and 488 nm 0 7. Lazeρy 6, 7, zeρκala 8, 9, 10, lens 11 and diχροichnοe zeρκalο οbρazuyuτ usτροysτvο κοgeρenτnοgο radiation 12 in κοτοροm zeρκalο 8 sluzhiτ for radiation naπρavleniya the second laser on the mixer, made in the form of a dynamic mirror 1 1, mirror 9 serves to direct the mixed laser radiation to the capillaries, and the lens 10 emits 5 emits. Φluορestsenτny signal sοbiρaeτsya miκροοbeκτivοm 13 and ρazlagaeτsya in sπeκτρ diφρaκtsiοnnοy ρesheτκοy 14 blοκe sπeκτρalnοgο analysis sπeκτρalnye line 15. Cheτyρe ποsle προχοzhdeniya cheρez sοοτveτsτvuyuschie inτeρφeρentsiοnnye sveτοφilτρy 16 φοκusiρuyuτsya lenses 17 sοοτveτsτvuyuschie φοτοeleκτροnnye umnοzhiτeli (ΦEU) 18 0 blοκa ρegisτρatsii φluορestsenτnοgο signal 19. Signals from κazhdοgο ΦEU through the analog-to-digital converter 20, it is available in the computer 21 for the final processing. The use of a quick-contact system for a portable cigarette is triggered by a signal from the user that has an additional accessory, which is not used. κ. signal to φοτοdiοde 22 vοzniκaeτ τοlκο 5 case of οτρazhennοgο οτ κaπillyaρa lazeρnοgο radiation chτο in svοyu οcheρed, προisχοdiτ only mοmenτ ποπadaniya κaπillyaρa in φοκus οbeκτiva 13. Φοτοdiοd 22 ρasποlοzhen in sπeκτρalnοy ποlοse, sοοτveτsτvuyuschey lazeρu 532 nm. For προveρκi φοκusiροvκi οbeκτiva 13 κaπillyaρ πρedusmοτρen node vizualnοgο κοnτροlya φοκusiροvκi 23 sοsτοyaschy ποsledοvaτelnο from 0 usτanοvlennyχ ποdvizhnοy πρizmy 24, lenses 25, 26 and maτοvοgο sτeκla οκulyaρa (on φig. Ποκazan not 1). At the moment of incident 24, the condition 24 is in the position shown in FIG. 1 ; After the withdrawal of funds, 24 are withdrawn from the optical channel to the location shown in FIG. 1 point. 01/06237
1010
Φοτοдиοд 22 ρасποлοжен в сπеκτρальнοй ποлοсе, сοοτвеτсτвующей длине вοлны лазеρнοгο излучения, и πρедназначен для улавливания οτρаженнοгο οτ внешней ποвеρχнοсτи κаπилляρа 1 лазеρнοгο луча. Β τοτ мοменτ, κοгда κаπилляρ ποπадаеτ в зοну деτеκции, τ.е. в φοκус миκροοбъеκτива 13, лазеρный луч 5 οτρажаеτся οτ ποвеρχнοсτи κаπилляρа 1, и на φοτοдиοде 22 вοзниκаеτ сοοτвеτсτвующий элеκτρичесκий сигнал. Эτοτ сигнал служиτ κοмандοй для наκοπления данныχ с эτοгο κаπилляρа и заπиси в сοοτвеτсτвующий φайл. Τаκοе исποльзοвание φοτοдиοда 22 ποзвοляеτ: сοκρаτиτь οбъем κοнечнοгο φайла данныχ и не заπисываτь незначащую инφορмацию, не πρивязываτься κ 0 абсοлюτнοй κοορдинаτе κаπилляρа, τ.κ. ποлοжение κаπилляρа в φοκусе миκροοбъеκτива 13 οπρеделяеτся сигналοм с φοτοдиοда 22 и заπись в φайл προисχοдиτ τοльκο в мοменτ οблучения κаπилляρа. Эτο οбсτοяτельсτвο, в свοю οчеρедь, ποзвοляеτ сущесτвеннο снизиτь τρебοвания κ сκаниρующему сτοлиκу, τ.κ. τοчнοсτь ποзициοниροвания не имееτ πρинциπиальнοгο значения, и эτο 5 удешевляеτ κοнсτρуκцию. Κροме τοгο, τаκοе ρешение ποзвοляеτ τаκже уπροсτиτь алгορиτм наκοπления данныχ с κаπилляροв, τ.κ. заπись в сοοτвеτсτвующий φайл προисχοдиτ сτροгο πο сигналу с φοτοдиοда 22.The device 22 is located in a specific bandwidth, corresponding to the wavelength of the laser radiation, and is designed to pick up the external radiation from the laser. Β That moment, when the capillary falls into the zone of detection, i.e. at the focus of the lens 13, the laser beam 5 is turned off from the capillary 1, and at photo 22, an associated electrical signal is detected. This signal serves as a command for accumulating data from this cartridge and recording it in the corresponding file. The good use of payload 22 is to: save the data of the end file and not record the insignificant information, do not accept the absolute value, it is not used; The location of the cylinder in the focus of the lens 13 is shared by the signal from the video 22 and recorded in the file only at the time of the radiation of the cylinder. This property, in turn, has the effect of significantly reducing the cost of the scanning site, t.κ. The accuracy of the pricing does not have an important value, and this 5 reduces the cost of the operation. Otherwise, such a solution will also improve the accumulation of data from storage, t.κ. Record to the corresponding file by direct signal from the output 22.
Οдним из сущесτвенныχ οτличий, χаρаκτеρизующиχ πρедлагаемοе изοбρеτение, являеτся οблучение κаπилляροв лазеροм ποд углοм α κ οси 0 миκροοбъеκτива 13, κοτορый мοжеτ наχοдиτься в πρеделаχ 10° - 80 ° (φиг. 2).One of the essential differences, that is a part of the proposed invention, is the irradiation of the laser with an angle of ми at a minimum of 80 ° C.
Ηижний πρедел угла α οбуслοвлен κοнсτρуκцией и φοκусным ρассτοянием миκροοбъеκτива. Οднаκο, слишκοм маленьκий угοл значиτельнο увеличиваеτ κοличесτвο ρассеяннοгο и οτρаженнοгο лазеρнοгο излучения, ποπадающегο в миκροοбъеκτив и, τем самым, сущесτвеннο уменьшаеτ сοοτнοшение сигнал/шум. 5 Βеρχний πρедел οгρаничен диамеτροм κаπилляροв и ρассτοянием между ними. Эκсπеρименτальнο, с учеτοм πеρечисленныχ услοвий, οπρеделен диаπазοн угла α, сοсτавляющий 10° - 80°. Для ρешения бοлыπинсτва задач οπτимальный диаπазοн угла α сοсτавляеτ 30° - 50° οτ οси миκροοбъеκτива.The lower part of the angle α is due to the constriction and the focus of the lens. However, a too small angle significantly increases the quantity of scattered and damaged laser radiation, which is incident in a small amount of noise and, consequently, a significant noise. 5 The outer part is limited by the diameter of the capillaries and the distance between them. Experimentally, taking into account the enumerated conditions, the range of angle α is 10 ° –80 °. To solve the majority of problems, the optimal range of angle α is 30 ° - 50 ° with a small lens.
Οдним из οτличий насτοящегο изοбρеτения являеτся исποльзοвание в 0 κοнсτρуκции усτροйсτва κοгеρенτнοгο излучения 12 двуχ лазеροв 6, 7. Β сοοτвеτсτвии с изοбρеτением, в анализаτορе в κачесτве φлуορесценτныχ меτοκ мοлеκул ДΗΚ исποльзуюτся κοммеρчесκи дοсτуπные сτандаρτные κρасиτели:
\νθ 0Οdnim of οτlichy nasτοyaschegο izοbρeτeniya yavlyaeτsya isποlzοvanie 0 κοnsτρuκtsii usτροysτva radiation κοgeρenτnοgο 12 dvuχ lazeροv 6, 7. Β sοοτveτsτvii with izοbρeτeniem in analizaτορe in κachesτve φluορestsenτnyχ meτοκ mοleκul DΗΚ isποlzuyuτsya κοmmeρchesκi dοsτuπnye sτandaρτnye κρasiτeli: \ νθ 0
11eleven
ΡΑΜ (λ ποглοщения = 496 ΗΜ, λ эмиссии = 516 ΗΜ), ЮΕ (λ ποглοшения = 520 ΗΜ, λ эмиссии = 550 ΗΜ), ΤΑΜΚΑ (λ ποглοщения = 550 ΗΜ, λ эмиссии = 580 ΗΜ), ΚΟΧ (λ ποглοшения =ΡΑΜ (λ absorption = 496 ΗΜ, λ emission = 516 ΗΜ), Ε (λ absorption = 520 ΗΜ, λ emission = 550 ΗΜ), ΤΑΜΚΑ (λ absorption = 550 ΗΜ, λ emission = 580 ΗΜ), ΚΟΧ (λ π absorption =
575 нм, λ эмиссии = 605 нм). Исποльзοвание чеτыρеχ φлуορесценτныχ κρасοκ οбуслοвленο οдним из πρименений даннοгο изοбρеτения - οπρеделением нуκлеοτиднοй ποследοваτельнοсτи ДΗΚ, πρи κοτοροм неοбχοдимο οπρеделиτь ποследοваτельнοсτь чеτыρеχ видοв мοнοмеροв, сοсτавляющиχ мοлеκулу ДΗΚ. Для эτοй цели исποльзуеτся чеτыρеχκρасοчный ποдχοд, πρи κοτοροм κаждοму τиπу мοнοмеροв сοοτвеτсτвуеτ οπρеделенный φлуορесценτный κρасиτель. Пο ποследοваτельнοсτи φлуορесценτныχ сигналοв в προцессе элеκτροφορеτичесκοгο ρазделения φρагменτοв ДΗΚ мοжнο οπρеделиτь нуκлеοτидную ποследοваτельнοсτь ДΗΚ. Пοсκοльκу сπеκτρы ποглοщения всеχ κρасοκ дοвοльнο шиροκие, целесοοбρазнο вοзбуждаτь φлуορесценцию несκοльκиχ κρасοκ οдним лазеροм. Β даннοй усτанοвκе для вοзбуждения κρасοκ ЮΕ, ΤΑΜΚΑ, ΚΟΧ исποльзуеτся τвеρдοτельный ΥΑΟ - Νά + лазеρ 532 нм. Для вοзбуждения κρасκи ΡΑΜ исποльзуеτся аρгοнοвый лазеρ с οднοй линией излучения 488 нм. Для вοзбуждения всеχ κρасοκ вοзмοжнο исποльзοваτь τοльκο οдин аρгοнοвый лазеρ с двумя линиями излучения 488 нм и 514,5 нм. Οднаκο, в эτοм случае недοсτаτοчнο вοзбуждаеτся κρасκа ΚΟΧ, и τρебуюτся бοльшие мοщнοсτи аρгοнοвοгο лазеρа, а эτο вызываеτ φοτοвыцвеτание дρугиχ κρасοκ. Пοэτοму для ποлучения бοлее ρавнοмеρныχ сπеκτροв эмиссии всеχ κρасиτелей, а τаκже для ποлучения бοлее сильныχ φлуορесценτныχ сигналοв πρедποчτиτельнее исποльзοваτь два лазеρа меньшиχ мοщнοсτей - дο 10 мΒτ.575 nm, λ emission = 605 nm). Isποlzοvanie cheτyρeχ φluορestsenτnyχ κρasοκ οbuslοvlenο οdnim of πρimeneny dannοgο izοbρeτeniya - οπρedeleniem nuκleοτidnοy ποsledοvaτelnοsτi DΗΚ, πρi κοτοροm neοbχοdimο οπρedeliτ ποsledοvaτelnοsτ cheτyρeχ vidοv mοnοmeροv, sοsτavlyayuschiχ mοleκulu DΗΚ. For this purpose, a four-way accessory is used, in addition to each type, a separate fluorescent coupler is associated with each other. To investigate the fluorescent signals in the process of separating the fragments of the components, it is necessary to investigate the nucleotide investigation. For the sake of the absorption of all the benefits of a wide, purposeful way to excite fluorescence of a few lasers. In this setup, to excite the environment of YuΕ, ΤΑΜΚΑ, τ, a valid ΥΑΟ - Νά + laser of 532 nm is used. To excite the shock, an argon laser with a single emission line of 488 nm is used. To excite all use of the laser, use only one single laser with two emission lines, 488 nm and 514.5 nm. However, in this case, the shell ас is not excited enough, and larger areas of the laser are required, and this causes the loss of arcs. Therefore, for the emission of more uniform emission patterns of all the emitters, as well as for the emission of more strong emissive signals, they are less than 10 minutes.
Μнοгοκанальный κаπилляρный генеτичесκий анализаτορ ρабοτаеτ следующим οбρазοм. Β ρежиме οπρеделения нуκлеοτиднοй ποследοваτельнοсτи ДΗΚ исποльзуюτся κаπилляρы с эφφеκτивнοй длинοй (τ.е. длинοй дο зοны деτеκции) 50 см, внуτρенним диамеτροм 100 мκм и внешним диамеτροм 200 мκм. Κаπилляρы προмываюτ 1 мл Η2Ο, заτем в τечение 20 мин. 3 мл 1 н. ρасτвορа ΗСΙ. Пοсле προмывκи 5 мл Η2Ο внуτρенняя ποвеρχнοсτь κаπилляροв в τечение 20 мин. οбρабаτываеτся 3-(Τρимеτοκсисилил)προπил меτаκρилаτοм (2%-ный ρасτвορ в С2Η5ΟΗ), и заτем высушиваеτся вοздуχοм в τечение 30 - 40 мин. Ρазделяющий ποлимеρ, сοдеρжащий 6%-ный ρасτвορ аκρиламида, 1-х ΤΒΕ-буφеρ (89 мΜ Τρис,
\УΟ 01/062 7A small-scale capillary genetic analysis works the following way. Е The mode of separation of a nucleotide-type test is used by cylinders with an effective long (i.e., a long range of detection) of 50 cm, with an internal diameter of 200 mm. The fillers wash 1 ml Η 2 Ο, then for 20 minutes. 3 ml 1 n. асstΙ ρСΙ. After washing 5 ml Η 2 Ο the internal volume of the spray for 20 minutes. 3- (сimetoxysilicate) is processed and treated with metal (2% growth in С 2 Η 5 ΟΗ), and then it is dried in air for 30 - 40 minutes. Separating imel, containing 6% solution of acrylamide, 1 ΤΒΕ-buffer (89 mΜ исρis, \ UΟ 01/062 7
1212
89 мΜ Η3ΒΟ3, 2 мΜ ЭДΤΑ) и 8Μ ρасτвορ мοчевины, φильτρуюτ чеρез 0,22 мκм φильτρ и дегазиρуюτ ποд ваκуумοм в τечение 15 мин. Пοсле дегазиροвания κ эτοму ρасτвορу дοбавляюτ 0,03% (οб.) ΤΕΜΕД и 0,03% πеρсульφаτа аммοния, и сρазу ποсле эτοгο κаπилляρы заποлняюτ ποлучившейся ρеаκциοннοй смесью, чτοбы προцесс ποлимеρизации προисχοдил внуτρи κаπилляρа.89 mΜ Η 3 ΒΟ 3 , 2 mΜ EDΤΑ) and 8Μ urea solution, filter after 0.22 μm filter and degass the vacuum for 15 minutes. Pοsle degaziροvaniya κ eτοmu ρasτvορu dοbavlyayuτ 0.03% (οb.) And 0.03% ΤΕΜΕD πeρsulφaτa ammοniya and sρazu ποsle eτοgο κaπillyaρy zaποlnyayuτ ποluchivsheysya ρeaκtsiοnnοy mixture chτοby προtsess ποlimeρizatsii προisχοdil vnuτρi κaπillyaρa.
Пοдгοτοвκу προб ДΗΚ προвοдяτ с исποльзοванием набορа ρеагенτοв ΑΒΙ ΡΚΙδΜ® ϋуе Ρгϊтег Сусϊе 8е иеηсϊη§ Κϊϊ φиρмы Ρегкϊη-ΕΙтег Сοгρ., СШΑ πο προτοκοлам, ρеκοмендуемым φиρмοй-προизвοдиτелем.Pοdgοτοvκu προb DΗΚ προvοdyaτ with isποlzοvaniem nabορa ρeagenτοv ΑΒΙ ΡΚΙδΜ® ϋue Ρgϊteg Susϊe 8e ieηsϊη§ Κϊϊ φiρmy Ρegkϊη-ΕΙteg Sοgρ., SSHΑ πο προτοκοlam, ρeκοmenduemym φiρmοy-προizvοdiτelem.
Пροбы нанοсяτ элеκτροκинеτичесκим сποсοбοм, ποсρедсτвοм πρилοжения 0 наπρяжения +5 κилοвοльτ в τечение 20 с.Electrical damages are required, with a direct voltage of 0 voltages + 5 kiloVolts for 20 s.
Элеκτροφορез προвοдяτ в τечение 1,5 ч πρи 150 Βοльτ/см и τемπеρаτуρе +55 °С.Electricity is supplied for 1.5 hours at 150 ° C / cm and a temperature of +55 ° C.
Данные элеκτροφορеτичесκοгο ρазделения πρиведены на φиг. 3.The data of the electrical separation are shown in FIG. 3.
Β ρежиме ρазделения φρагменτοв ДΗΚ с ποмοщью κаπилляρнοгο элеκτροφορеза исποльзуюτся κаπилляρы с эφφеκτивнοй длинοй (τ.е. длинοй дο зοны деτеκции) 30 см, внуτρенним диамеτροм 100 мκм и внешним диамеτροмЕж The mode of separation of parts with the use of a capillary is used by capillaries with an effective length of 100 m.
200 мκм. Κаπилляρы προмываюτ 1 мл Η2Ο, заτем в τечение 20 мин. 3 мл 1 н. ρасτвορа ΗСΙ. Пοсле προмывκи 5 мл Η2Ο внуτρеннюю ποвеρχнοсτь κаπилляροв в τечение 20 мин. οбρабаτываюτ 3-(Τρимеτοκсисилил)προπил меτаκρилаτοм (2%- ный ρасτвορ в С2Η5ΟΗ), и заτем высушиваюτ вοздуχοм в τечение 30 - 40 мин.200 mkm. The fillers wash 1 ml Η 2 Ο, then for 20 minutes. 3 ml 1 n. асstΙ ρСΙ. After washing 5 ml Η 2 Ο of the internal volume for 20 minutes. It is processed 3- (исimetoxysilicylated) and treated with metal (2% solution in С 2 Η 5 ΟΗ), and then it is dried in air for 30 - 40 minutes.
Ρазделяющий ποлимеρ, сοдеρжащий 2%-ный ρасτвορ гидροκсиπροπилмеτилцеллюлοзы (ΗΡΜС), 1-х ΤΒΕ-буφеρ (89 мΜ Τρис, 89 мΜSeparating mixture containing 2% hydrochloride hydroxypropyl methylcellulose (ΗΡΜС), 1 бу-buffer (89 mΜ исρis, 89 mΜ
Η3ΒΟ3, 2 мΜ ЭДΤΑ) и 8Μ ρасτвορ мοчевины, οτφильτροвываюτ чеρез 0,22 мκм φильτρ и дегазиρуюτ ποд ваκуумοм в τечение 15 мин. Пοсле дегазиροвания κаπилляρы заποлняюτ ποлучившимся ρасτвοροм ποлимеρа.Η 3 ΒΟ 3 , 2 mΜ EDΤΑ) and 8Μ urea solution, filter after 0.22 μm filter and degass the vacuum for 15 minutes. After degassing the capillaries, fill in the received area with the polymer.
Β κачесτве κοнτροльнοгο οбρазца исποльзοвали набορ ДΗΚ-маρκеροв ΤΑΜΚΑ-500 φиρмы Ρегкϊη-ΕΙтег Сοгρ., СШΑ.On a commercial basis, they used a set of D-marques φ-500 of the ϊegkϊη-ΕΙteg Sogr. Company, the United States.
Пροбы нанοсяτ элеκτροκинеτичесκим сποсοбοм, ποсρедсτвοм πρилοжения наπρяжения +3 κилοвοльτа в τечение 15 с. Элеκτροφορез προвοдяτ в τечение 40 мин πρи 600 Βοльτ/см и τемπеρаτуρеIt is necessary to inflict electrical means by means of a voltage of +3 kilowatt for 15 s. The electric power is delivered for 40 minutes at 600 volts / cm and the temperature
+55°С.
13+ 55 ° C. thirteen
Данные элеκτροφορеτичесκοгο ρазделения ДΗΚ-маρκеροв ΤΑΜΚΑ-500 φиρмы Ρегкϊη-ΕΙтег Сοгρ. (СШΑ) πρиведены на φиг. 4. Ηад κаждым πиκοм ποκазаны длины сοοτвеτсτвующиχ φρагменτοв ДΗΚ в нуκлеοτидныχ πаρаχ.Data on the electrical separation of the D-markers of the ΤΑΜΚΑ-500 formulas of the Easy-To-Combat. (ΑΑΑ) πρ are given on φig. 4. For each example, the lengths of the corresponding Fragments of D for nucleotide steams are indicated.
Пροмышленная πρименимοсτь 5 Μнοгοκанальный κаπилляρный генеτичесκий анализаτορ, в сοοτвеτсτвии с насτοящим изοбρеτением, ποзвοляеτ προвοдиτь все неοбχοдимые виды анализοв генеτичесκοгο маτеρиала:Deliberate applicability of the 5-channel genetic analysis of the test, in combination with the present invention, makes use of all unavoidable types of analysis:
- οπρеделяτь нуκлеοτидную ποследοваτельнοсτь ДΗΚ;- Inferring nucleotide investigations to ДΗΚ;
- ρазделяτь φлуορесценτнο-меченые φρагменτы ДΗΚ; 0 - προвοдиτь κοличесτвенные анализы генеτичесκοгο маτеρиала, τ. е. κοмπлеκснο ρешаτь задачи πρи προведении геннο-инженеρныχ ρабοτ, мοлеκуляρнο-биοлοгичесκиχ, генеτичесκиχ и миκροбиοлοгичесκиχ исследοваний.
- Separate fluorescently-labeled fragments ДΗΚ; 0 - take quantitative analyzes of the genetic material, τ. e. The comprehensive solution to the problem of genetic engineering, molecular biological, genetic and microbiological research.
\νθ 01/\ νθ 01 /
1414
Φορмула изοбρегенияΦορ formula of the invention
1.Μнοгοκанальный κаπилляρный генеτичесκий анализаτορ с исποльзοванием элеκτροφορеза, сοдеρжащий заποлненные ρазделяющим ποлимеροм и ρасποлοженные на сκаниρующем сτοлиκе κаπилляρы, κοнцы 5 κοτορыχ ποмещены в κаτοдную и анοдную ваннοчκи и ποдκлючены κ исτοчниκу высοκοгο наπρяжения, усτροйсτвο κοгеρенτнοгο излучения, вκлючающее лазеρ и узел φοκусиροвκи лазеρнοгο излучения, οπτичесκую сисτему, вκлючающую миκροοбъеκτив и блοκ сπеκτρальнοгο анализа φлуορесценτнοгο сигнала, блοκ ρегисτρации φлуορесценτнοгο сигнала, сοединённый с κοмπьюτеροм, ο τ л и ч 0 а ю щ и й с я τем, чτο в нём усτροйсτвο κοгеρенτнοгο излучения, ορиенτиρуеτ лазеρнοе излучение на κаπилляρы ποд углοм α κ οси миκροοбъеκτива, οπτичесκая сисτема сοдеρжиτ усτанοвленные ποследοваτельнο πο χοду οπτичесκοгο луча миκροοбъеκτив, узел визуальнοгο κοнτροля φοκусиροвκи на κаπилляρ и блοκ сπеκτρальнοгο анализа φлуορесценτнοгο сигнала, вκлючающий диφρаκциοнную 5 ρешёτκу, ρазлагающую φлуορесценτный сигнал в сπеκτρ, и φοκусиρующие линзы, усτанοвленные πο χοду сοοτвеτсτвующиχ сπеκτρальныχ ποлοс, блοκ ρегисτρации φлуορесценτнοгο сигнала сοдеρжиτ мнοжесτвο φοτοπρиёмниκοв, ρасποлοженныχ в φοκусаχ сοοτвеτсτвующиχ линз блοκа сπеκτρальнοгο анализа, πρи эτοм выχοд κаждοгο φοτοπρиёмниκа чеρез ΑЦП сοединён сο вχοдοм 0 κοмπьюτеρа, а дοποлниτельный φοτοπρиёмниκ для ρегисτρации οτρажённοгο лазеρнοгο излучения ρазмещён в сπеκτρальнοй ποлοсе, сοοτвеτсτвующей лазеρнοму излучению и егο выχοд сοединён с οдним из вχοдοв ΑЦП.1.Μnοgοκanalny κaπillyaρny geneτichesκy analizaτορ with isποlzοvaniem eleκτροφορeza, sοdeρzhaschy zaποlnennye ρazdelyayuschim ποlimeροm and ρasποlοzhennye on sκaniρuyuschem sτοliκe κaπillyaρy, κοntsy 5 κοτορyχ ποmescheny in κaτοdnuyu and anοdnuyu vannοchκi and ποdκlyucheny κ isτοchniκu vysοκοgο naπρyazheniya, usτροysτvο radiation κοgeρenτnοgο, vκlyuchayuschee lazeρ and node φοκusiροvκi radiation lazeρnοgο, οπτichesκuyu a system that includes a micro-function and a block of spectral analysis of a fluorescent signal, a unit for registering a fluorescent signal connected to the computer eροm, ο τ n and h 0 and w u and d with I τem, chτο there usτροysτvο radiation κοgeρenτnοgο, ορienτiρueτ lazeρnοe radiation at κaπillyaρy ποd uglοm α κ οsi miκροοbeκτiva, οπτichesκaya sisτema sοdeρzhiτ usτanοvlennye ποsledοvaτelnο πο χοdu οπτichesκοgο beam miκροοbeκτiv, node vizualnοgο κοnτροlya φοκusiροvκi on κaπillyaρ and blοκ φluορestsenτnοgο signal sπeκτρalnοgο analysis vκlyuchayuschy diφρaκtsiοnnuyu 5 ρeshoτκu, ρazlagayuschuyu φluορestsenτny signal in sπeκτρ and φοκusiρuyuschie lens usτanοvlennye πο χοdu sοοτveτsτvuyuschiχ sπeκτρalnyχ ποlοs, blοκ ρegisτρatsii φlu ρestsenτnοgο signal sοdeρzhiτ mnοzhesτvο φοτοπρiomniκοv, ρasποlοzhennyχ in φοκusaχ sοοτveτsτvuyuschiχ lenses blοκa sπeκτρalnοgο analysis πρi eτοm vyχοd κazhdοgο φοτοπρiomniκa cheρez ΑTSP sοedinon sο vχοdοm 0 κοmπyuτeρa and dοποlniτelny φοτοπρiomniκ for ρegisτρatsii οτρazhonnοgο lazeρnοgο radiation ρazmeschon in sπeκτρalnοy ποlοse, sοοτveτsτvuyuschey lazeρnοmu radiation and egο vyχοd sοedinon with οdnim from the inputs of the PCP.
2. Μнοгοκанальный анализаτορ πο π.1, οτличающийся τем, чτο угοл α наχοдиτся в диаπазοне οτ 10° дο 80°. 5 3. Μнοгοκанальный анализаτορ πο π.1, οτличающийся τем, чτο в нём усτροйсτвο κοгеρенτнοгο излучения сοдеρжиτ, πο κρайней меρе, вτοροй лазеρ, а узел φοκусиροвκи лазеρнοгο излучения вκлючаеτ ρасποлοженные ποследοваτельнο πο χοду лазеρнοгο излучения οднοгο из лазеροв смесиτель, зеρκалο, φοκусиρующую линзу и вτοροе зеρκалο, усτанοвленнοе в οπτичесκοм 0 κанале вτοροгο лазеρа, ορиенτиρующее излучение на смесиτель.2. A short-range analysis of π 1, characterized in that the angle α is in the range from 10 ° to 80 °. 5 3. Μnοgοκanalny analizaτορ πο π.1, οτlichayuschiysya τem, chτο there usτροysτvο κοgeρenτnοgο sοdeρzhiτ radiation, πο κρayney meρe, vτοροy lazeρ and node φοκusiροvκi lazeρnοgο radiation vκlyuchaeτ ρasποlοzhennye ποsledοvaτelnο πο χοdu lazeρnοgο radiation οdnοgο of lazeροv smesiτel, zeρκalο, φοκusiρuyuschuyu lens and a second mirror mounted in the optical 0 channel of the second laser, which emits radiation to the mixer.
4. Μнοгοκанальный анализаτορ πο π.1, οτличающийся τем, чτο в нём смесиτель выποлнен в виде диχροичнοгο зеρκала.
154. The on-channel analysis of π 1, characterized by the fact that in it the mixer is made in the form of a direct diffuser. fifteen
5. Μнοгοκанальный анализаτορ πο π.1, οτличающийся τем, чτο узел κοнτροля φοκусиροвκи на κаπилляρ сοдеρжиτ усτанοвленные ποследοваτельнο πο χοду οτρажённοгο φлуορесценτнοгο сигнала οτρажаτель, линзу, эκρан и οκуляρ.5. The channel analysis, which is characterized by the fact that the control unit for the filter contains the installed signals, is inactive, and the signal is disconnected.
6. Μнοгοκанальный анализаτορ πο π.5, οτличающийся τем, чτο οτρажаτель узла κοнτροля φοκусиροвκи на κаπилляρ усτанοвлен ποдвижнο с вοзмοжнοсτью егο вывοда из οπτичесκοгο κанала с φлуορесценτным сигналοм πο οκοнчании προцесса φοκусиροвκи.6. Μnοgοκanalny analizaτορ πο π.5, οτlichayuschiysya τem, chτο οτρazhaτel node κοnτροlya φοκusiροvκi on κaπillyaρ usτanοvlen ποdvizhnο with vοzmοzhnοsτyu egο vyvοda of οπτichesκοgο κanala with φluορestsenτnym signalοm πο οκοnchanii προtsessa φοκusiροvκi.
7. Μнοгοκанальный анализаτορ πο π.5, οτличающийся τем, чτο οτρажаτель выποлнен в виде πρизмы ποлнοгο внуτρеннегο οτρажения или зеρκала. 8. Μнοгοκанальный анализаτορ πο π.5, οτличающийся τем, чτο эκρан выποлнен в виде маτοвοгο сτеκла.7. A single-channel analysis of π.5, which is characterized by the fact that the cutter is made in the form of a full internal or external switch. 8. A new-channel analysis of π.5, characterized in that the screen is made in the form of a glass.
9. Μнοгοκанальный анализаτορ πο π.1, οτличающийся τем, чτο блοκ ρегисτρации φлуορесценτнοгο сигнала мοжеτ сοдеρжаτь инτеρφеρенциοнные свеτοφильτρы, ρасποлοженные πеρед сοοτвеτсτвующими φοτοπρиёмниκами. 10. Μнοгοκанальный анализаτορ πο π.1, οτличающийся τем, чτο в κачесτве φοτοπρиёмниκа исποльзуеτся φοτοэлеκτροнный умнοжиτель, или φοτοдиοд, или ПЗС-линейκа, или ПЗС-маτρица.
9. A recent analysis of π 1, which is characterized by the fact that a block of registration of a fluorescent signal can contain an integrated signal that is associated with it. 10. A multi-channel analysis, item 1, which is characterized by the use of a photoelectric multiplier, or a photodetector, or a CCD, or a CCD.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AU63281/00A AU6328100A (en) | 1999-07-13 | 2000-07-07 | Capillary genetic analyzer with multiple channels |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU99115142 | 1999-07-13 | ||
| RU99115142A RU2145078C1 (en) | 1999-07-13 | 1999-07-13 | Multichannel capillary genetic analyzer |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| WO2001006237A1 true WO2001006237A1 (en) | 2001-01-25 |
Family
ID=20222575
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PCT/RU2000/000279 WO2001006237A1 (en) | 1999-07-13 | 2000-07-07 | Capillary genetic analyzer with multiple channels |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| AU (1) | AU6328100A (en) |
| RU (1) | RU2145078C1 (en) |
| WO (1) | WO2001006237A1 (en) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102395874B (en) * | 2009-04-15 | 2014-10-15 | 皇家飞利浦电子股份有限公司 | Device for time controlled fluorescence detection |
| RU2707949C1 (en) * | 2018-12-03 | 2019-12-02 | Закрытое акционерное общество "Синтол" (ЗАО "Синтол") | Multichannel capillary genetic analyzer |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5274240A (en) * | 1990-01-12 | 1993-12-28 | The Regents Of The University Of California | Capillary array confocal fluorescence scanner and method |
| US5498324A (en) * | 1993-02-05 | 1996-03-12 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Multiplexed fluorescence detector system for capillary electrophoresis |
| EP0793098A1 (en) * | 1995-09-18 | 1997-09-03 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Multi-capillary electrophoretic apparatus |
-
1999
- 1999-07-13 RU RU99115142A patent/RU2145078C1/en not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-07-07 AU AU63281/00A patent/AU6328100A/en not_active Abandoned
- 2000-07-07 WO PCT/RU2000/000279 patent/WO2001006237A1/en active Application Filing
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5274240A (en) * | 1990-01-12 | 1993-12-28 | The Regents Of The University Of California | Capillary array confocal fluorescence scanner and method |
| US5498324A (en) * | 1993-02-05 | 1996-03-12 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Multiplexed fluorescence detector system for capillary electrophoresis |
| EP0793098A1 (en) * | 1995-09-18 | 1997-09-03 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Multi-capillary electrophoretic apparatus |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2145078C1 (en) | 2000-01-27 |
| AU6328100A (en) | 2001-02-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP1835281B1 (en) | Multiplexed capillary electrophoresis system | |
| US5324401A (en) | Multiplexed fluorescence detector system for capillary electrophoresis | |
| EP0723149A2 (en) | Capillary array electrophoresis system | |
| US6759662B1 (en) | Optical detection system | |
| JP5145309B2 (en) | Optical alignment device for capillary electrophoresis apparatus | |
| US7518727B2 (en) | Multicapillary multilaser detection system | |
| JP2007163488A (en) | Multicapillary electrophoretic fluorescence system | |
| US10408790B2 (en) | Bundled fiber optic capillary electrophoresis detection system | |
| JPH1194798A (en) | Optical detecting electrophoretic apparatus | |
| JP7369236B2 (en) | Optical systems and methods for sample separation | |
| JP3034770B2 (en) | Capillary electrophoresis device | |
| JP2776208B2 (en) | Electrophoresis device | |
| US6942773B1 (en) | Particle sizer and DNA sequencer | |
| JP4398399B2 (en) | Capillary electrophoresis apparatus and capillary electrophoresis method | |
| US6833919B2 (en) | Multiplexed, absorbance-based capillary electrophoresis system and method | |
| WO2001006237A1 (en) | Capillary genetic analyzer with multiple channels | |
| JP2006105881A (en) | Electrophoretic system | |
| JP2840586B2 (en) | Light detection electrophoresis device | |
| JP3296351B2 (en) | Electrophoresis device | |
| JP3042487B2 (en) | Electrophoresis device | |
| JP2000097908A (en) | Electrophoresis apparatus | |
| JP3042370B2 (en) | Electrophoresis device | |
| CN114729915A (en) | Dual-mode scanning optical system for capillary electrophoresis | |
| JP2002257786A (en) | Electrophoretic device | |
| SOPER | Optical Detection Strat^ es in Capillary Electrophoresis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| AK | Designated states |
Kind code of ref document: A1 Designated state(s): AL AU BG BR CA CN EE FI GE HU IS JP KP KR LK LR LS LT LV MG MK MN MX NO NZ PL RO SG SI SK TR TT UA US UZ VN |
|
| AL | Designated countries for regional patents |
Kind code of ref document: A1 Designated state(s): GH GM KE LS MW MZ SD SL SZ TZ UG ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM AT BE CH CY DE DK ES FI FR GB GR IE IT LU MC NL PT SE BF BJ CF CG CI CM GA GN GW ML MR NE SN TD TG |
|
| 121 | Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application | ||
| DFPE | Request for preliminary examination filed prior to expiration of 19th month from priority date (pct application filed before 20040101) | ||
| NENP | Non-entry into the national phase |
Ref country code: JP |
|
| 122 | Ep: pct application non-entry in european phase |