WO1990010011A1 - Use of 2-tert.-alkylimino-2-di-c1-4-alkylamino-1,3-di-c1-3-alkylperhydro-1,3,2-diazaphosphorine for o-substitution reactions of ribonucleosides - Google Patents

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tert
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Brian Sproat
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Europäisches Laboratorium für Molekularbiologie (EMBL)
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Definitions

  • Ribonucleic acids as carriers of the genetic information stored in the DNA for protein biosynthesis, are part of all living cells. Their structure and their chemistry are therefore of great importance. The structure and chemistry of their ribonucleoside units are of particular importance, e.g. for structural analysis and for the synthesis of model substances.
  • the object of the present invention was therefore to provide a method for the selective O-substitution of protected ribonucleosides which can be carried out simply and safely and is very general and which can be used to obtain good yields. This object is achieved with the present invention.
  • the invention relates to the use of '* 2-tert.-alkylimino-2-di-C ._.- alkyl-amino-1,3-di-C ._, - al3yl-per-hydro-1,3, 2-diazaphosphorine for O substitution of protected ribonucleosides with alkyl, alkenyl or aralkyl groups in the presence of the corresponding group transfer compounds.
  • a protected ribonucleoside is understood to be one in which reactive H atoms carry protective groups at positions of the molecule which are not to be alkylated.
  • Suitable compounds which transfer alkyl, alkenyl or aralkyl groups are the substances known to the person skilled in the art, in particular the halides.
  • the invention further relates to a process for the O-substitution of protected ribonucleosides with alkyl, alkenyl or aralkyl groups, which is characterized in that the substitution is carried out with a compound which transfers the desired substituents in the presence of 2-tert-alkylimino 2-di-C ._.-alkylamino-1,3-di-C "_, - alkylperhydro-l, 3,2-diazaphosphorin.
  • the tert-alkyl group in position 2 is preferably a tert-butyl or neopentyl group.
  • the alkylino groups in position 2, which can be the same or different, have 1 to 4 carbon atoms and can therefore be methyl, ethyl, propyl, isopropyl and butyl groups.
  • positions 1 and 3 methyl, ethyl, propyl and isopropyl groups can be present independently of one another.
  • a symmetrical substitution of the 2 * dialkylamino group and positions 1 and 3 is preferred.
  • BDDDP 2-tert-butylimino-2-diethylamino-l, 3-dimethylperhydro-l, 3,2-diazaphosphorine
  • the alkyl group of the alkylating agents used according to the invention is derived from a branched or straight-chain alkyl group with 1 to 7 carbon atoms and preferably with 1 to 3 carbon atoms, and is e.g. n-propyl, isopropyl, ethyl and in particular methyl.
  • alkenylation agents in which the alkenyl group 3 has up to 7 carbon atoms. Allyl bromide is preferably used.
  • An aralkyl group is also to be understood as an aralkyl group which is optionally substituted in the aryl radical, for example 2-nitrobenzyl.
  • an optionally substituted benzyl group is preferably introduced using an optionally substituted benzyl halide.
  • the halide can be chloride, bromide or iodide.
  • the methyl iodide is particularly preferably used as the alkyl halide.
  • the ribonucleosides can be derived from a pyrimidine or purine base, it being necessary to convert an NH 2 or OH group into a group which is inert to the O substitution in a manner known per se.
  • the protected ribonucleosides contain the protective groups in the ribose part on one or two OH groups of the ribose residue, depending on whether mono or disubstitution is intended. Mono substitution is preferably carried out, in particular in the 2'-position of 3 ', 5'-O-protected ribonucleosides. 3 ', 5'-0- (tetraisopropyldisiloxane-1,3-diyl) -protected ribonucleosides are preferred.
  • the OH groups to be protected can be protected by two or preferably by a common protective group.
  • the usual protective groups can be used as protective groups, e.g. tert-butyldimethylsilyl, methoxytrityl and especially tetraisopropyldisiloxane-1,3-diyl.
  • the O substitution is carried out in an anhydrous polar organic solvent, preferably in anhydrous acetonitrile. Usually one works at room temperature or slightly elevated temperature, eg up to approx. 50 ° C.
  • the process is expediently carried out under water-free conditions and under an inert gas atmosphere, such as, for example, under argon.
  • alkylating, alkenylating or aralkylating agent and the BDDDP are generally used in equivalent amounts or in a slight excess of up to 10%, based on the ribonucleoside.
  • reaction step XXIII ⁇ -) XXIV of the reaction scheme shown in the drawing.
  • the foam was dissolved in anhydrous acetonitrile (140 ml) under argon, and BDDDP (17.3 ml, 59.7 mmol) and methyl iodide (3.72 ml, 59.7 mmol) were added with stirring and exclusion of moisture.
  • the reaction mixture was evaporated to dryness in vacuo.
  • the yield is generally 60 to 62% and about 12% of the starting material is recovered, which can be recycled and then gives a total methylation yield of about 70%.
  • Product separation by preparative HPLC is simple and the reaction can easily be carried out with large batches (100 mmol).
  • the methylation was carried out using 1 molar equivalent of silver oxide and 2 molar equivalents of methyl iodide in dry 2-butanone; the desired product was obtained in a yield of less than 20% after a reaction time of 2 weeks, and no starting material could be recovered.
  • the predominant reaction is the methylation of the heterocycle.
  • the OH group in the 2 • position of the ribose ester is strongly activated without the disiloxane bridge being cleaved, as a result of which the methylation takes place essentially only on the OH group and practically no methylation of the Heterocycle, as long as there are no reactive H atoms that are protected. The formation of isomers is also prevented.
  • the yield can be increased to about 70 to 75%.
  • the separated organic layer was dried (a 2 SO 4 ), filtered and the solvent was removed in vacuo.
  • the crude product was taken up in dichloromethane (2 ml) and applied to a silica gel 60 column (12 g) in petroleum ether / ethyl acetate (6: 1, v / v). The column was eluted with petroleum ether / ethyl acetate (6: 1, v / v) under nitrogen pressure and the outflow was monitored by means of thin layer chromatography. After removal of the solvent in vacuo, the pure title compound was obtained as an off-white foam (420 mg, 53%).

Abstract

2-tert.-alkylimino-2-di-C1-4-alkylamino-1,3-di-C1-3-alkylperhydro-1,3,2-diazaphosphorines are suitable for O-substitution of protected ribonucleosides with alkyl, alkenyl or aralalkyl groups in the presence of corresponding group-transfer compounds.

Description

Verwendung von 2-tert.-Alkylimino-2-di-C1_4-alkyl- amino-1,3-di-C, --alkyl-perhydro-1,3,2-diazaphosphorin für O-Substituierungsreaktionen von RibonukleosidenUse of 2-tert-alkylimino-2-di-C 1 _ 4 alkyl amino-1,3-di-C, --alkyl-perhydro-1,3,2-diazaphosphorine for O-Substituierungsreaktionen of ribonucleosides
Ribonukleinsäuren sind als Überträger der in der DNA gespeicherten genetischen Information für die Proteinbio¬ synthese Bestandteil aller lebenden Zellen. Ihrer Struktur und ihrer Chemie kommt deshalb eine hervorra¬ gende Bedeutung zu. Eine besondere Bedeutung kommt hierbei der Struktur und der Chemie ihrer Ribonukleosid- Einheiten zu, z.B. zur Strukturuntersuchung und zur Synthese von Modellsubstanzen.Ribonucleic acids, as carriers of the genetic information stored in the DNA for protein biosynthesis, are part of all living cells. Their structure and their chemistry are therefore of great importance. The structure and chemistry of their ribonucleoside units are of particular importance, e.g. for structural analysis and for the synthesis of model substances.
Eine Schlüsselrolle spielt dabei die selektive O-Alkylie- rung von geschützten (mit Schutzgruppen versehenen) Ribonukleosiden.The selective O-alkylation of protected (with protecting groups) ribonucleosides plays a key role.
Es ist bekannt, die O-Methylierung mit Diazomethan durchzuführen (vgl. A.D. Broom und R.K. Robins, J.Am. Chem.Soc. (1965) 87, 1145-1146; T.A. Khwaja und R.K. Robins, J.Am.Chem.Soc. (1966), 88, 3640-3643; D.M.G. Martin et al, Biochemistry (1968), 7, 1406-1412; J.B. Gin und CA. Dekker, Biochemistry (1968), 7, 1413-1420; M.J. Robins und S.R. Naik, Biochemistry (1971), 10, 3591-3597) . Diese Verfahren besitzen aber den Nachteil, daß ein sehr großer Überschuß des gefährlichen Diazo- methans erforderlich ist, das bekanntlich ein toxisches, hochexplosives und carcinogenes Gas ist; außerdem werden nur schlechte Ausbeuten erhalten, und die Gegen¬ wart von unerwünschten isomeren Methylierungsprodukten erfordert aufwendige Reinigungsschritte. Das bevorzugte Verfahren zur Monomethylierung der 2' ,3'-Diol-Struktur- einheit war deshalb bis jetzt die Verwendung eines Äquivalents Diazomethan in Kombination mit Zinn(II)- chlorid als Katalysator (vgl. M.J. Robins et al, J.Org. Chem. (1974), 39, 1891-1899). Im Fall von Guanosin werden aber auch nach diesem Verfahren schlechte Ausbeu¬ ten erhalten, und die Auftrennung der Isomeren ist problematisch; bei der Anwendung dieses Methylierungs- verfahrens auf 5 '-O-tert.-Butyldimethylsilylguanosin wurden der 2'- und 3 '-O-Methylether nach fraktionierter Kristallisation mit Ausbeuten von 13 % (21) und 28 % (3') erhalten (vgl. G.Ekborg und P.J. Garegg, J.Carbohydr, Nucleosides and Nucleotides (1980) , 7, 57-61) , und bei Anwendung auf 5!-0-Monomethoxytrityl-N2-isobutyryl-gua- nosin wurde der 2 '-O-Methylether in 30 %iger Ausbeute erhalten, wobei das 3 '-Isomere chromatographisch ent¬ fernt wurde (vgl. H. Inoue et al, Nucleic Acids Res. (1987) , 15, 6131-6148) .It is known to carry out O-methylation with diazomethane (cf. AD Broom and RK Robins, J.Am. Chem. Soc. (1965) 87, 1145-1146; TA Khwaja and RK Robins, J.Am. Chem. Soc . (1966), 88, 3640-3643; DMG Martin et al, Biochemistry (1968), 7, 1406-1412; JB Gin and CA. Dekker, Biochemistry (1968), 7, 1413-1420; MJ Robins and SR Naik , Biochemistry (1971), 10, 3591-3597). However, these processes have the disadvantage that a very large excess of the dangerous diazo methane is required, which is known to be a toxic, highly explosive and carcinogenic gas; moreover, only poor yields are obtained, and the presence of undesired isomeric methylation products requires complex purification steps. The preferred method for monomethylating the 2 ', 3'-diol structural unit has therefore hitherto been the use of an equivalent of diazomethane in combination with tin (II) chloride as a catalyst (cf. MJ Robins et al, J.Org. Chem (1974), 39, 1891-1899). In the case of guanosine however, poor yields are obtained even after this process, and the separation of the isomers is problematic; when this methylation process was applied to 5'-O-tert-butyldimethylsilylguanosine, the 2'- and 3'-O-methyl ether were obtained after fractional crystallization with yields of 13% (2 1 ) and 28% (3 ') ( see G.Ekborg and PJ Garegg, J. Carbohydr, Nucleosides and Nucleotides (1980), 7, 57-61), and when applied to 5 ! -0-Monomethoxytrityl-N 2 -isobutyryl-guanosine, the 2'-O-methyl ether was obtained in 30% yield, the 3 'isomer being removed by chromatography (cf. H. Inoue et al, Nucleic Acids Res. (1987), 15, 6131-6148).
In einem anderen bekannten Methylierungsverfahren wird die Kombination von Methyljodid und Silberoxid verwendet (vgl. Y. Furukawa et al, Chem.Pharm.Bull. (1965) , 13, 1273-1278) ; durch die Vermeidung von Diazomethan ist dieses Verfahren sicher und mit geeignet geschützten Ribonukleosiden werden in den Pyrimidinserien gute Ergebnisse erhalten (vgl. T. Kamimura et al, Chemistry Letters (1982) , 965-968; C.J. Welch und J. Chattopad- hyaya, Acta Chem.Scand. (1983) , B37, 147-150; A.Nyilas und J. Chattopadhyaya, Acta Chem.Scand. (1986) , B40, 826-830) ; die mit Purinen erhaltenen Ergebnisse sind schlecht.In another known methylation process, the combination of methyl iodide and silver oxide is used (cf. Y. Furukawa et al, Chem. Pharm.Bull. (1965), 13, 1273-1278); by avoiding diazomethane, this method is safe and with suitably protected ribonucleosides good results are obtained in the pyrimidine series (see T. Kamimura et al, Chemistry Letters (1982), 965-968; CJ Welch and J. Chattopad-hyaya, Acta Chem. Scand. (1983), B37, 147-150; A. Nyilas and J. Chattopadhyaya, Acta Chem. Scand. (1986), B40, 826-830); the results obtained with purines are poor.
Aufgabe der vorliegenden Erfindung war deshalb die Bereitstellung einer Methode zur selektiven O-Substi- tution von geschützten Ribonukleosiden, die einfach und gefahrlos durchzuführen und sehr allgemein anwendbar ist und mit der gute Ausbeuten erhalten werden können. Diese Aufgabe wird mit der vorliegenden Erfindung gelöst. Gegenstand der Erfindung ist die Verwendung von'*2-tert.- Alkylimino-2-di-C._.-alkyl-amino-1,3-di-C._,-al3yl-per- hydro-1,3,2-diazaphosphorin zur O-Substitution geschütz¬ ter Ribonukleoside mit Alkyl-, Alkenyl- oder Aralkyl¬ gruppen in Gegenwart der entsprechenden Gruppenüberträ- gerverbindungen.The object of the present invention was therefore to provide a method for the selective O-substitution of protected ribonucleosides which can be carried out simply and safely and is very general and which can be used to obtain good yields. This object is achieved with the present invention. The invention relates to the use of '* 2-tert.-alkylimino-2-di-C ._.- alkyl-amino-1,3-di-C ._, - al3yl-per-hydro-1,3, 2-diazaphosphorine for O substitution of protected ribonucleosides with alkyl, alkenyl or aralkyl groups in the presence of the corresponding group transfer compounds.
Im Rahmen der Erfindung wird als geschütztes Ribonukleo- sid ein solches verstanden, in dem reaktionsfähige H-Atome an nicht zu alkylierenden Positionen des Mole¬ küls Schutzgruppen tragen. Als Alkyl-, Alkenyl- oder Aralkylgruppen übertragende Verbindungen kommen die dem Fachmann bekannten Substanzen wie insbesondere die Halogenide in Betracht.In the context of the invention, a protected ribonucleoside is understood to be one in which reactive H atoms carry protective groups at positions of the molecule which are not to be alkylated. Suitable compounds which transfer alkyl, alkenyl or aralkyl groups are the substances known to the person skilled in the art, in particular the halides.
Weiterer Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur O-Substitution geschützter Ribonukleoside mit Alkyl-, Alkenyl- oder Aralkylgruppen, welches dadurch gekenn¬ zeichnet ist, daß man die Substitution mit einer den gewünschten Substituenten übertragenden Verbindung in Gegenwart von 2-tert.-Alkylimino-2-di-C._.-alkylamino- 1,3-di-C»_,-alkylperhydro-l,3,2-diazaphosphorin durch¬ führt.The invention further relates to a process for the O-substitution of protected ribonucleosides with alkyl, alkenyl or aralkyl groups, which is characterized in that the substitution is carried out with a compound which transfers the desired substituents in the presence of 2-tert-alkylimino 2-di-C ._.-alkylamino-1,3-di-C "_, - alkylperhydro-l, 3,2-diazaphosphorin.
In dem im Rahmen der Erfindung verwendeten Diazaphospho- rin ist in Stellung 2 als tert.-Alkylgruppe eirre tert.- Butyl- oder Neopentylgruppe bevorzugt. Die Alkyla ino- gruppen in Stellung 2, die gleich oder verschieden sein können, weisen 1 bis 4 C-Atome auf und können daher Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Isopropyl- und Butylgruppen sein. In den Positionen 1 und 3 können jeweils unabhän¬ gig voneinander Methyl-, Ethyl-, Propyl- und Isopropyl- gruppen vorliegen. Eine symmetrische Substitution der 2*-Dialkylaminogruppe und der Positionen 1 und 3 wird bevorzugt. - 1-In the diazaphosphorine used in the context of the invention, the tert-alkyl group in position 2 is preferably a tert-butyl or neopentyl group. The alkylino groups in position 2, which can be the same or different, have 1 to 4 carbon atoms and can therefore be methyl, ethyl, propyl, isopropyl and butyl groups. In positions 1 and 3, methyl, ethyl, propyl and isopropyl groups can be present independently of one another. A symmetrical substitution of the 2 * dialkylamino group and positions 1 and 3 is preferred. - 1-
Erfindungsgemäß ist es möglich, eine selektive O-Substi¬ tution geeignet geschützter Ribonukleoside mit wenig¬ stens einer Alkyl-, Alkenyl- oder Aralkylgruppe auf einfache Weise und mit guten Ausbeuten durchzuführen; eine unerwünschte konkurrierende Substitution des Hete- rozyklus tritt praktisch nicht auf, wenn in diesem etwa vorhandene reaktive H-Atome geschützt sind, und die Verwendung des gefährlichen Diazomethans wird vermieden.According to the invention, it is possible to carry out a selective O substitution of suitably protected ribonucleosides with at least one alkyl, alkenyl or aralkyl group in a simple manner and with good yields; an undesired competing substitution of the heterocycle practically does not occur if reactive hydrogen atoms which are present therein are protected, and the use of the dangerous diazomethane is avoided.
Die erfindungsgemäß verwendeten Diazaphosphorine, wie z.B. das bevorzugte 2-tert.-Butylimino-2-diethylamino- l,3-dimethylperhydro-l,3,2-diazaphosphorin (BDDDP) sind extrem starke, sterisch gehinderte Basen (vgl. R. Schwesinger, Chimia, 39 (1985) 269). BDDDP weist fol¬ gende Strukturformel auf:The diazaphosphorines used according to the invention, e.g. the preferred 2-tert-butylimino-2-diethylamino-l, 3-dimethylperhydro-l, 3,2-diazaphosphorine (BDDDP) are extremely strong, sterically hindered bases (cf. R. Schwesinger, Chimia, 39 (1985) 269 ). BDDDP has the following structural formula:
Figure imgf000006_0001
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Im Falle der O-Alkylierung leitet sich die Alkylgruppe der erfindungsgemäß eingesetzten Alkylierungsmittel, insbesondere der Alkylhalogenide von einer verzweigten oder geradkettigen Alkylgruppe mit 1 bis 7 Kohlenstoff¬ atomen und vorzugsweise mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen ab, und ist z.B. n-Propyl, Isopropyl, Ethyl und insbe¬ sondere Methyl.In the case of O-alkylation, the alkyl group of the alkylating agents used according to the invention, in particular the alkyl halides, is derived from a branched or straight-chain alkyl group with 1 to 7 carbon atoms and preferably with 1 to 3 carbon atoms, and is e.g. n-propyl, isopropyl, ethyl and in particular methyl.
Im Falle der O-Alkenylierung werden zweckmäßig Alkeny- lierungs ittel verwendet, in denen die Alkenylgruppe 3 bis 7 C-Atome aufweist. Bevorzugt wird Allylbromid verwendet. Unter einer Aralkylgruppe ist auch eine im Arylrest gegebe¬ nenfalls substituierte Aralkylgruppe zu verstehen, z.B. 2- Nitrobenzyl. Bei der O-Aralkylierung wird vorzugsweise eine gegebenenfalls substituierte Benzylgruppe eingeführt unter Verwendung eines gegebenenfalls substituierten Benzylhalo- genids.In the case of O-alkenylation, it is expedient to use alkenylation agents in which the alkenyl group 3 has up to 7 carbon atoms. Allyl bromide is preferably used. An aralkyl group is also to be understood as an aralkyl group which is optionally substituted in the aryl radical, for example 2-nitrobenzyl. In the O-aralkylation, an optionally substituted benzyl group is preferably introduced using an optionally substituted benzyl halide.
Das Halogenid kann Chlorid, Bromid oder Jodid sein. Besonders bevorzugt wird als Alkylhalogenid das Methyljodid einge¬ setzt.The halide can be chloride, bromide or iodide. The methyl iodide is particularly preferably used as the alkyl halide.
Die Ribonukleoside können sich von einer Pyrimidin- oder Purinbase ableiten, wobei es erforderlich ist, eine NH2- oder OH-Gruppierung in an sich bekannter Weise in eine gegenüber der O-Substitution inerte Gruppierung zu überführen.The ribonucleosides can be derived from a pyrimidine or purine base, it being necessary to convert an NH 2 or OH group into a group which is inert to the O substitution in a manner known per se.
Die geschützten Ribonukleoside enthalten die Schutzgruppen im Riboseteil an ein oder zwei OH-Gruppen des Riboserestes, je nachdem, ob eine Mono- oder Disubstitution beabsichtigt ist. Vorzugsweise wird eine Monosubstitution durchgeführt, ins¬ besondere in der 2'-Stellung von 3' ,5'-O-geschützten Ribo¬ nukleosiden. 3',5'-0-(Tetraisopropyldisiloxan-1,3-diyl)-ge¬ schützte Ribonukleoside werden bevorzugt.The protected ribonucleosides contain the protective groups in the ribose part on one or two OH groups of the ribose residue, depending on whether mono or disubstitution is intended. Mono substitution is preferably carried out, in particular in the 2'-position of 3 ', 5'-O-protected ribonucleosides. 3 ', 5'-0- (tetraisopropyldisiloxane-1,3-diyl) -protected ribonucleosides are preferred.
Im Falle einer Monosubstitution können die zu schützenden OH- Gruppen durch zwei oder vorzugsweise durch eine gemeinsame Schutzgruppe geschützt sein. Als Schutzgruppen können die dafür üblichen Schutzgruppen eingesetzt werden, wie z.B. tert.-Butyldimethylsilyl, Methoxytrityl und insbesondere Tetraisopropyldisiloxan-1,3-diyl.In the case of mono substitution, the OH groups to be protected can be protected by two or preferably by a common protective group. The usual protective groups can be used as protective groups, e.g. tert-butyldimethylsilyl, methoxytrityl and especially tetraisopropyldisiloxane-1,3-diyl.
Die O-Substitution wird in einem wasserfreien polaren orga¬ nischen Lösungsmittel durchgeführt, vorzugsweise in wasser¬ freiem Acetonitril. Üblicherweise arbeitet man bei Raumtemperatur oder schwach erhöhter Temperatur, z.B. bis ca. 50°C. Zweckmäßigerweise wird unter wasser¬ freien Bedingungen und unter Inertgasatmosphäre, wie z.B. unter Argon gearbeitet.The O substitution is carried out in an anhydrous polar organic solvent, preferably in anhydrous acetonitrile. Usually one works at room temperature or slightly elevated temperature, eg up to approx. 50 ° C. The process is expediently carried out under water-free conditions and under an inert gas atmosphere, such as, for example, under argon.
Das Alkylierungs-, Alkenylierungs- oder Aralkylierungs- mittel und das BDDDP werden in der Regel in äquivalenten Mengen oder auch in einem geringen Überschuß bis zu 10 % verwendet, bezogen auf das Ribonukleosid.The alkylating, alkenylating or aralkylating agent and the BDDDP are generally used in equivalent amounts or in a slight excess of up to 10%, based on the ribonucleoside.
Die Erfindung wird im folgenden am Reaktionsschritt XXIII ■ -)XXIV des in der Zeichnung gezeigten Reaktions¬ schemas veranschaulicht.The invention is illustrated below in reaction step XXIII ■ -) XXIV of the reaction scheme shown in the drawing.
Im Reaktionsschema gemäß Zeichnung wurden in den einzel¬ nen Reaktionsschritten die folgenden Reagenzien einge¬ setzt:In the reaction scheme according to the drawing, the following reagents were used in the individual reaction steps:
(i) Chlortri ethylsilan und Triethylamin in Dichlorethan; (ii) tert.-Butylnitrit und Antimontrichlorid in Dichlor¬ ethan bei -10°C; (iii) p-Toluolsulfonsäure in Dioxan/Di- chlormethan; (iv) 2,6-Dichlorphenol, Triethylamin und l,4-Diazabicyclo/2.2.2,_7octan in Dichloroethan; (v) Methyljodid und 2-tert.-Butylirnino-2-diethylamino-l,3- dimethylperhydro-l,3,2-diazaphosphorin (BDDDP) in Acetonitril (erfindungsgemäßer Schritt) ; (vi) 2-Nitro- benzaldoxim und 1,1,3,3-Tetramethylguanidin in Aceton- nitril; (vii) Hydrazin; (viii) Raney-Nickel/Wasserstoff; (ix) 4-tert.-Butylbenzoylchlorid in Pyridin; (x) Tetra- butylammoniumfluorid in Tetrahydrofuran; (xi) 4,4'-Di- methoxytritylchlorid und Triethylamin in Pyridin; (xii) 2-Cyanoethoxy-N,N-diisopropylaminochlorphosphin und N,N,-Diisopropylethylamin in Dichlorethan.(i) chlorotriethylsilane and triethylamine in dichloroethane; (ii) tert-butyl nitrite and antimony trichloride in dichloroethane at -10 ° C; (iii) p-toluenesulfonic acid in dioxane / dichloromethane; (iv) 2,6-dichlorophenol, triethylamine and 1,4-diazabicyclo / 2.2.2, _7octane in dichloroethane; (v) methyl iodide and 2-tert-butylirnino-2-diethylamino-l, 3-dimethylperhydro-l, 3,2-diazaphosphorine (BDDDP) in acetonitrile (step according to the invention); (vi) 2-nitrobenzaldoxime and 1,1,3,3-tetramethylguanidine in acetonitrile; (vii) hydrazine; (viii) Raney nickel / hydrogen; (ix) 4-tert-butylbenzoyl chloride in pyridine; (x) tetra-butylammonium fluoride in tetrahydrofuran; (xi) 4,4'-dimethoxytrityl chloride and triethylamine in pyridine; (xii) 2-cyanoethoxy-N, N-diisopropylaminochlorophosphine and N, N, -diisopropylethylamine in dichloroethane.
Aus dem Reaktionsschema ist am Beispiel der Synthese des '^'-O-methylguanosine building block" (XXIX; Zwischen¬ produkt zur Herstellung von 2'-O-Methylguanosin) auch die Schlüsselrolle ersichtlich, die der erfindungsgemäs- sen O-Substitutionsstufe (XXIII ->XXIV) und demThe example of the synthesis of the '^' - O-methylguanosine building block "(XXIX; intermediate for the production of 2'-O-methylguanosine) also shows the reaction scheme the key role can be seen that the O substitution level according to the invention (XXIII -> XXIV) and the
Zwischenprodukt 2'-O-Methyl-3' ,5'-0-(tetraisopropyldi- siloxan-1,3-diyl)-2-chlor-6-(2,6-dichlorphenoxy)-purin- ribosid (XXIV) zukommt. Das Zwischenprodukt XXIV kann auch zur Bildung von basenmodifizierten Analogen desIntermediate 2'-O-methyl-3 ', 5'-0- (tetraisopropyldisiloxane-1,3-diyl) -2-chloro-6- (2,6-dichlorophenoxy) purine riboside (XXIV) is added. Intermediate XXIV can also be used to form base-modified analogs of
"2*-0-methylguanosine building block" (XXIX) verwendet werden, z.B. zur Bildung der N 2-Methyl- oder N2-Dimethyl- derivate. über die Bedeutung der 2'-O-Methyloligoribo- nukleoside und verschiedener Analoga davon wird bei H."2 * -0-methylguanosine building block" (XXIX) can be used, e.g. to form the N 2-methyl or N2-dimethyl derivatives. The importance of the 2'-O-methyloligoribonucleosides and various analogues thereof is discussed in H.
Inoue et al, Nucleic Acids, Res. (1985) SymposiumInoue et al, Nucleic Acids, Res. (1985) Symposium
Series No. 16, 165-168; H. Inoue et al, Nucleic AcidsSeries No. 16, 165-168; H. Inoue et al, Nucleic Acids
Res. (1987), 15, 6131-6148; S. Mukai et al, NucleicRes. (1987), 15, 6131-6148; S. Mukai et al, Nucleic
Acids Res. (1988), Symposium Series No. 19, 117-120; H.Acids Res. (1988), Symposium Series No. 19, 117-120; H.
Inoue et al., Nucleic Acids Res. (1988), SymposiumInoue et al., Nucleic Acids Res. (1988) Symposium
Series No. 19, 135-138; S. Shibahara et al, NucleicSeries No. 19, 135-138; S. Shibahara et al, Nucleic
Acids Res. (1987), 15, 4403-4415; H.Inoue et al, FEBSAcids Res. (1987), 15, 4403-4415; H. Inoue et al, FEBS
Letters (1987), 215, 327-330 und S.Shibahara et al,Letters (1987), 215, 327-330 and S.Shibahara et al,
Nucleic Acids Res. (1989), 17, 239-252, berichtet.Nucleic Acids Res. (1989), 17, 239-252.
B e i s p i e l 1Example 1
Herstellung von 2'-O-Methyl-3* ,5'-0-(tetraisopropyldi- siloxan-1,3-diyl)-2-chlor-6-(2,6-dichlorphenoxy) -purin- ribosid (XXIV)Preparation of 2'-O-methyl-3 *, 5'-0- (tetraisopropyldisiloxane-1,3-diyl) -2-chloro-6- (2,6-dichlorophenoxy) purine riboside (XXIV)
Zu einer Lösung der Verbindung XXIII des Reaktionssche¬ mas (34,1 g, 60,6 mMol) in 1,2-Dichlorethan (300 ml) wurde eine Lösung von 2,6-Dichlorphenol (9,88 g, 60,6 mMol), l,4-DiazabicycloZ"2.2.2,_7octan (340 mg, 3,03 mMol) und Triethylamin (8,43 ml, 60,6 mMol) in trocke¬ nem 1,2-Dichlorethan (60 ml) unter Rühren zugefügt. Es bildet sich rasch ein voluminöser Niederschlag von Triethylaminhydrochlorid; Dünnschichtchromatographie an Silicagel in Petrolether/Ethylacetat (2:1, v/v) zeigte nach 30 Minuten eine vollständige Umsetzung, mit einem neuen Fleck bei R,. = 0,41. Die Mischung wurde mit Dichlormethan (200 ml) verdünnt und dann mit 1 M wäßri¬ gem Natriumcarbonat (500 ml) gewaschen. Die organische Phase wurde getrocknet (Na-SO.) , filtriert und im Vakuum eingedampft und ergab die 6-(2,6-Dichlorphenoxy)- Verbindung als Schaum (41,2 g, 98,5 %) , der durch Verdampfung mit trockenem Acetonitril (2 x 200 ml) im Vakuum getrocknet wurde. Der Schaum wurde in wasser¬ freiem Acetonitril (140 ml) unter Argon gelöst, und unter Rühren und Feuchtigkeitsausschluß wurden BDDDP (17,3 ml, 59,7 mMol) und Methyljodid (3,72 ml, 59,7 mMol) zugefügt. Dünnschichtchromatographie an Silicagel in Petrolether/Ethylacetat (1:1, v/v) zeigte, daß die Methylierung nach 5 Stunden zum Großteil vervollständigt war, und es zeigte sich ein von dem gewünschten Produkt hervorgerufener intensiver Fleck bei R_ = 0,57, und schwache Flecken bei Rf = 0,5, 0,23 und 0. Die Reaktions¬ mischung wurde im Vakuum zur Trockne eingeengt. Zum Rückstand wurde Ethylacetat (90 ml) , und dann Petrol- ether (270 ml) zugefügt und gerührt. Das unlösliche Hydrojodid-Salz des BDDDP wurde abfiltriert, und das Filtrat wurde in vier aliquoten Teilen durch präpara- tive Flüssigkeitschomatographie unter Verwendung von Petrolether/Ethylacetat (3:1, v/v) als Eluens gereinigt. Die reine Verbindung XXIV wurde als fester weißer Schaum erhalten (26,65 g, Ausbeute = 62,5 %) .A solution of 2,6-dichlorophenol (9.88 g, 60.6 mmol) was added to a solution of compound XXIII of the reaction scheme (34.1 g, 60.6 mmol) in 1,2-dichloroethane (300 ml) ), 1,4-diazabicycloZ " 2.2.2, _7octane (340 mg, 3.03 mmol) and triethylamine (8.43 ml, 60.6 mmol) in dry 1,2-dichloroethane (60 ml) with stirring A voluminous precipitate of triethylamine hydrochloride is formed rapidly, by thin layer chromatography Silica gel in petroleum ether / ethyl acetate (2: 1, v / v) showed complete conversion after 30 minutes, with a new spot at R ,. = 0.41. The mixture was diluted with dichloromethane (200 ml) and then washed with 1 M aqueous sodium carbonate (500 ml). The organic phase was dried (Na-SO.), Filtered and evaporated in vacuo to give the 6- (2,6-dichlorophenoxy) compound as a foam (41.2 g, 98.5%), which was evaporated with dry Acetonitrile (2 x 200 ml) was dried in vacuo. The foam was dissolved in anhydrous acetonitrile (140 ml) under argon, and BDDDP (17.3 ml, 59.7 mmol) and methyl iodide (3.72 ml, 59.7 mmol) were added with stirring and exclusion of moisture. Thin layer chromatography on silica gel in petroleum ether / ethyl acetate (1: 1, v / v) showed that the methylation was largely completed after 5 hours, and an intense spot at R_ = 0.57 caused by the desired product was found and weak Stains at R f = 0.5, 0.23 and 0. The reaction mixture was evaporated to dryness in vacuo. To the residue was added ethyl acetate (90 ml) and then petroleum ether (270 ml) and stirred. The insoluble hydroiodide salt of the BDDDP was filtered off and the filtrate was purified in four aliquots by preparative liquid chromatography using petroleum ether / ethyl acetate (3: 1, v / v) as the eluent. The pure compound XXIV was obtained as a solid white foam (26.65 g, yield = 62.5%).
13C NMR-Spektrum (CDC13) f : 158,12 (C-6) , 153,13 und 152,54 (C-2 und C-4) , 144,66 (Phenyl C-l) , 142,43 (C-8), 128,77 (Phenyl C-2 und 6), 128,52 (Phenyl C-3 und 5), 127,12 (Phenyl C-4), 120,51 (C-5) , 88,26 (C-l»), 83,10 (C-2'), 81,16 (C-4«), 69,54 (C-31), 59,61 (C-51), 59,29 (CH3-0) , 17,19-16,63 (Isopropyl CH3s) , 13,16, 12,70 und 12,29 p.p.m. (Isopropyl CHs) . - 3 ' 13 C NMR Spectrum (CDC1 3 ) f: 158.12 (C-6), 153.13 and 152.54 (C-2 and C-4), 144.66 (phenyl Cl), 142.43 (C -8), 128.77 (phenyl C-2 and 6), 128.52 (phenyl C-3 and 5), 127.12 (phenyl C-4), 120.51 (C-5), 88.26 (Cl » ), 83.10 (C-2 '), 81.16 (C-4 « ), 69.54 (C-3 1 ), 59.61 (C-5 1 ), 59.29 (CH 3-0 ), 17.19-16.63 (isopropyl CH 3 s), 13.16, 12.70 and 12.29 ppm (isopropyl CHs). - 3 '
Die Ausbeute beträgt im allgemeinen 60 bis 62 %, und ca. 12 % Ausgangsmaterial werden zurückgewonnen, das rezyklisiert werden kann und dann eine Gesamtausbeute der Methylierung von ca. 70 % ergibt. Die Produktabtren¬ nung durch praparative HPLC ist einfach und die Reaktion kann leicht mit großen Ansätzen ( ) 100 mMol) durchge¬ führt werden.The yield is generally 60 to 62% and about 12% of the starting material is recovered, which can be recycled and then gives a total methylation yield of about 70%. Product separation by preparative HPLC is simple and the reaction can easily be carried out with large batches (100 mmol).
Zum Vergleich wurde die Methylierung mit 1 Mol-Äquiva¬ lent Silberoxid und 2 Mol-Äquivalenten Methyljodid in trockenem 2-Butanon durchgeführt; dabei wurde das gewünschte Produkt in einer Ausbeute von weniger als 20 % nach einer Reaktionszeit von 2 Wochen erhalten, und es konnte kein Ausgangsmaterial zurückgewonnen werden. Trotz der relativ starken sterischen Hinderung ist die vorherrschende Reaktion die Methylierung des Heterozyklus. Mit dem erfindungsgemäß eingesetzten BDDDP wird die OH-Gruppe in 2•-Stellung des Ribosere- stes stark aktiviert, ohne daß dabei eine Spaltung der Disiloxan-Brücke erfolgt, wodurch die Methylierung im wesentlichen nur an der OH-Gruppe stattfindet und praktisch keine Methylierung des Heterozyklus, soweit dort keine reaktiven H-Atome vorliegen, die geschützt werden. Auch die Bildung von Isomeren wird verhindert. For comparison, the methylation was carried out using 1 molar equivalent of silver oxide and 2 molar equivalents of methyl iodide in dry 2-butanone; the desired product was obtained in a yield of less than 20% after a reaction time of 2 weeks, and no starting material could be recovered. Despite the relatively strong steric hindrance, the predominant reaction is the methylation of the heterocycle. With the BDDDP used according to the invention, the OH group in the 2 • position of the ribose ester is strongly activated without the disiloxane bridge being cleaved, as a result of which the methylation takes place essentially only on the OH group and practically no methylation of the Heterocycle, as long as there are no reactive H atoms that are protected. The formation of isomers is also prevented.
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B e i s p i e l 2Example: 2
Herstellung von 2'-O-Allyl-3 ' ,5'-O-(tetraisopropyldisiloxan- 1 ,3-diyl)-6-(2,6-dichlorphenoxy)-purinribosidPreparation of 2'-O-allyl-3 ', 5'-O- (tetraisopropyldisiloxane-1, 3-diyl) -6- (2,6-dichlorophenoxy) purine riboside
3' ,5'-0-(Tetraisopropyldisiloxan-1 ,3-diyl)-6-(2,6-dichlor- phenoxy)-purinribosid (6,56 g, 10 mMol) wurde durch Ver¬ dampfen mit wasserfreiem Acetonitril im Vakuum getrocknet. Der erhaltene weiße Schaum wurde in wasserfreiem Aceto¬ nitril (20 ml) gelöst, und BDDDP (2,89 ml, 10 mMol), gefolgt von Allylbromid (865 ul, 10 mMol) wurden unter Rühren und Feuchtigkeitsausschluß zugegeben. Silicagel-Dünnschicht- chromatographie in Petrolether/Ethylacetat (2:1, v/v) zeigte nach 6 Stunden einen von dem gewünschten Produkt hervorge¬ rufenen intensiven Fleck bei Rf = 0,52 einen Fleck bei Rf = 0,29, von ca. 10 % zurückbleibendem Ausgangsmaterial und einen schwachen Basislinienfleck. Es wurde weiteres BDDDP und Allylbromid (je 1 mMol) zugefügt, und die Reaktion weitere 2 Stunden fortgesetzt. Die dünnschichtchromato- graphische Analyse zeigte praktisch kein verbleibendes Aus¬ gangsmaterial mehr. Die Reaktionsmischung wurde im Vakuum zur Trockne eingedampft, und der zurückbleibende Schaum wurde in Dichlor ethan (200 ml) gelöst. Die Lösung wurde mit Phosphatpuffer pH = 7 (300 ml, 1 M) gewaschen, mit a2S04 getrocknet, filtriert und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde in Dichlormethan (20 ml) ge¬ löst und die Lösung auf eine Kieselgel 60-Säule (120 g) in Petrolether/Ethylacetat (6:1, v/v) aufgebracht. Die Säule wurde mit Petrolether/Ethylacetat (6:1, v/v) unter einem leichten Stickstoffdruck eluiert und der Ausfluß durch Dünnschichtchromatographie überwacht. Die reinen Fraktionen wurden gesammelt und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Die reine Titelverbindung wurde als weißer Schaum erhalten (3,6 g, Ausbeute = 52 %) .3 ', 5'-0- (tetraisopropyldisiloxane-1,3-diyl) -6- (2,6-dichlorophenoxy) purine riboside (6.56 g, 10 mmol) was evaporated with anhydrous acetonitrile in vacuo dried. The white foam obtained was dissolved in anhydrous acetonitrile (20 ml), and BDDDP (2.89 ml, 10 mmol), followed by allyl bromide (865 μl, 10 mmol) were added with stirring and with exclusion of moisture. Silica gel thin layer chromatography in petroleum ether / ethyl acetate (2: 1, v / v) showed after 6 hours an intense spot caused by the desired product at R f = 0.52 and a spot at R f = 0.29 approx. 10% residual starting material and a weak baseline stain. Further BDDDP and allyl bromide (1 mmol each) were added, and the reaction was continued for a further 2 hours. The thin-layer chromatographic analysis showed practically no remaining starting material. The reaction mixture was evaporated to dryness in vacuo and the remaining foam was dissolved in dichloroethane (200 ml). The solution was washed with phosphate buffer pH = 7 (300 ml, 1 M), dried with a 2 SO 4 , filtered and the solvent removed in vacuo. The crude product was dissolved in dichloromethane (20 ml) and the solution applied to a silica gel 60 column (120 g) in petroleum ether / ethyl acetate (6: 1, v / v). The column was eluted with petroleum ether / ethyl acetate (6: 1, v / v) under a slight nitrogen pressure and the outflow was monitored by thin layer chromatography. The pure fractions were collected and the solvent removed in vacuo. The pure title compound was obtained as a white foam (3.6 g, yield = 52%).
13C NMR-Spektrum (CDCl3)δ :157.81 (C-6) , 151.92 (C-4), 151.23 (C-2), 145.00 (Phenyl C-1 ) , 141.61 (C-8) , 133.81 (Allyl CH) , - II 13 C NMR spectrum (CDCl 3 ) δ: 157.81 (C-6), 151.92 (C-4), 151.23 (C-2), 145.00 (phenyl C-1), 141.61 (C-8), 133.81 (allyl CH), - II
128.97 (Phenyl C-2 und C-6), 128.25 (Phenyl C-3 und C-5), 126.59 (Phenyl C-4), 121.38 (C-5), 116.73 (Allyl = CH2) , 88.43 (C-11), 81.07 (C-4'), 80.60 (C-2'), 71.35 (Allyl CH2-0) , 69.07 (C-31), 59.45 (C-5'), 17.02-16.48 (Isopropyl CH3 s), 12.98, 12.49 und 12.25 p.p.m. (Isopropyl CH s) .128.97 (phenyl C-2 and C-6), 128.25 (phenyl C-3 and C-5), 126.59 (phenyl C-4), 121.38 (C-5), 116.73 (allyl = CH 2 ), 88.43 (C -1 1 ), 81.07 (C-4 '), 80.60 (C-2'), 71.35 (Allyl CH 2 -0), 69.07 (C-3 1 ), 59.45 (C-5 '), 17.02-16.48 ( Isopropyl CH 3 s), 12.98, 12.49 and 12.25 ppm (isopropyl CH s).
Wird die Allylierung in einem größeren Ansatz durchgeführt und das Produkt durch praparative Flüssigkeitschromato¬ graphie isoliert, dann kann die Ausbeute auf ca. 70 bis 75 % gesteigert werden.If the allylation is carried out in a larger batch and the product is isolated by preparative liquid chromatography, the yield can be increased to about 70 to 75%.
B e i s p i e l 3Example 3
2'-0-(2-Nitrobenzyl)-3' ,5'-0-(tetraisopropyldisiloxan-1 ,3- diyl)-6-(2,6-dichlorphenoxy)-purinribosid2'-0- (2-nitrobenzyl) -3 ', 5'-0- (tetraisopropyldisiloxane-1,3-diyl) -6- (2,6-dichlorophenoxy) purine riboside
3' ,5'-0-(Tetraisoρropyldisiloxan-1 ,3-diyl)-6-(2,6-dichlor- phenoxy)-purinribosid (656 mg, 1 mMol) wurden durch Ver¬ dampfung mit wasserfreiem Acetonitril im Vakuum getrocknet. Der erhaltene Schaum wurde in wasserfreiem Acetonitril (3 ml) gelöst, und unter Rühren und Feuchtigkeitsausschuß BDDDP (289 μl , 1 mMol), gefolgt von 2-Nitrobenzylbromid (216 mg, 1 mMol) zugefügt. Nach 5 Stunden zeigte eine Dünnschicht¬ chromatographie an Silicagel in Petrolether/Ethylacetat (2:1, v/v), daß die Nitrobenzylierung zum Großteil vervoll¬ ständigt war, und es zeigte sich ein von dem gewünschten Produkt hervorgerufener intensiver Fleck bei Rf = 0,44, und ein vom Ausgangsmaterial hervorgerufener Fleck bei Rf = 0,29, und schwache Flecken bei Rf = 0,55, 0,36, 0,08 und 0. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum abgedampft und hinterließ einen schwach gelben Schaum. Dieser Schaum wurde in Dichlor¬ methan (50 ml) gelöst und die Lösung mit Phosphatpuffer pH = 7 (2 x 50 ml, 1 M) gewaschen. Die abgetrennte organische Schicht wurde getrocknet ( a2S04), filtriert und das Lösungs¬ mittel ir Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde in Dichlor¬ methan aufgenommen (2 ml) und auf eine Kieselgel 60-Säule (12 g) in Petrolether/Ethylacetat (6:1, v/v) aufgebracht. Die Säule wurde mit Petrolether/Ethylacetat (6:1, v/v) unter Stickstoffdruck eluiert und der Ausfluß wurde mittels Dünn¬ schichtchromatographie überwacht. Nach Entfernung des Lö¬ sungsmittels im Vakuum wurde die reine Titelverbindung als cremefarbener Schaum erhalten (420 mg, 53 %) .3 ', 5'-0- (tetraisodropyldisiloxane-1,3-diyl) -6- (2,6-dichlorophenoxy) -purine riboside (656 mg, 1 mmol) were dried in vacuo by evaporation with anhydrous acetonitrile. The resulting foam was dissolved in anhydrous acetonitrile (3 ml) and BDDDP (289 µl, 1 mmole) was added with stirring and moisture removal followed by 2-nitrobenzyl bromide (216 mg, 1 mmole). After 5 hours, thin-layer chromatography on silica gel in petroleum ether / ethyl acetate (2: 1, v / v) showed that the nitrobenzylation had largely been completed, and an intense spot at R f = caused by the desired product was found 0.44, and a spot caused by the starting material at R f = 0.29, and faint spots at R f = 0.55, 0.36, 0.08 and 0. The solvent was evaporated in vacuo to leave a pale yellow Foam. This foam was dissolved in dichloromethane (50 ml) and the solution was washed with phosphate buffer pH = 7 (2 x 50 ml, 1 M). The separated organic layer was dried (a 2 SO 4 ), filtered and the solvent was removed in vacuo. The crude product was taken up in dichloromethane (2 ml) and applied to a silica gel 60 column (12 g) in petroleum ether / ethyl acetate (6: 1, v / v). The column was eluted with petroleum ether / ethyl acetate (6: 1, v / v) under nitrogen pressure and the outflow was monitored by means of thin layer chromatography. After removal of the solvent in vacuo, the pure title compound was obtained as an off-white foam (420 mg, 53%).
13C NMR-Spektrum (CDC13):£ : 158.07 (C-6) , 152.09 (C-4), 151.60 (C-2), 147.08 (C-2 von Nitrobenzyl) , 145.18 (C-1 von Dichlorphenyl), 141.64 (C-8) , 134.45 (C-1 von Nitrobenzyl) , 133.33 (C-5 von Nitrobenzyl), T29.21 (C-2 und C-6 von Di¬ chlorphenyl), 128.54 (C-3 und C-5 von Dichlorphenyl, 128.39 (C-4 von Nitrobenzyl), 127.80 (C-6 von Nitrobenzyl), 126.89 (C-4 von Dichlorphenyl, 124.38 ( C-3 von Nitrobenzyl ), 121,64 (C-5), 88.43 (C-1'), 82.10 (C-4'), 81.45 (C-2'), 69.54 (C-3«), 69.37 (CH2 von Nitrobenzyl) , 59.58 (C-5'), 17.26-16.69 (Iso¬ propyl CH3 s) , 13.24, 12.76, 12.69 und 12.52 p.p.m. (Iso¬ propyl CH2 s) . 13 C NMR spectrum (CDC1 3 ): £ 158.07 (C-6), 152.09 (C-4), 151.60 (C-2), 147.08 (C-2 of nitrobenzyl), 145.18 (C-1 of dichlorophenyl) , 141.64 (C-8), 134.45 (C-1 of nitrobenzyl), 133.33 (C-5 of nitrobenzyl), T29.21 (C-2 and C-6 of dichlorophenyl), 128.54 (C-3 and C -5 from dichlorophenyl, 128.39 (C-4 from nitrobenzyl), 127.80 (C-6 from nitrobenzyl), 126.89 (C-4 from dichlorophenyl, 124.38 (C-3 from nitrobenzyl), 121.64 (C-5), 88.43 (C-1 '), 82.10 (C-4'), 81.45 (C-2 '), 69.54 (C-3 ' ), 69.37 (CH 2 from nitrobenzyl), 59.58 (C-5 '), 17.26-16.69 (Isopropyl CH 3 s), 13.24, 12.76, 12.69 and 12.52 ppm (isopropyl CH 2 s).

Claims

P a t e n t a n s p r ü c h e Patent claims
1. Verwendung von 2-tert.-Alkylimino-2-di-C, .-alkyl- amino-1,3-di-Cj_g-alkyl-perhyd.ro-1,3,2-diazaphosp- horin zur O-Substitution geschützter Ribonukleoside mit Alkyl-, Alkenyl- oder Aralkylgruppen in Gegen¬ wart der entsprechenden Gruppenüberträgerverbindun- gen.1. Use of 2-tert.-alkylimino-2-di-C,.-Alkyl-amino-1,3-di-C j _g-alkyl-perhyd.ro-1,3,2-diazaphosphorine for O Substitution of protected ribonucleosides with alkyl, alkenyl or aralkyl groups in the presence of the corresponding group transfer compounds.
2. Verwendung nach Anspruch 1 zur O-Alkylierung oder O-Alkenylierung von 3' ,5'-O-geschützten Ribonukleo¬ siden..2. Use according to claim 1 for O-alkylation or O-alkenylation of 3 ', 5'-O-protected ribonucleosides.
3. Verwendung nach Anspruch 1 oder 2, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß man als Alkylierungsmittel Methyljodid verwen¬ det.3. Use according to claim 1 or 2, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t that methyl iodide is used as the alkylating agent.
4. Verwendung nach Anspruch 1 oder 2, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß man als Alkenylierungsmittel Allylbromid verwendet.4. Use according to claim 1 or 2, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t that allyl bromide is used as the alkenylating agent.
5. Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 4 zur O-Substitution von 3' ,5'-0-(Tetraisopropyldisilo- xan-1,3-diyl)-geschützten Pyrimidin- oder Purinri- bonukleosiden.5. Use according to one of claims 1 to 4 for the O-substitution of 3 ', 5'-0- (tetraisopropyldisiloxane-1,3-diyl) -protected pyrimidine or purine ribonucleosides.
6. Verfahren zur O-Substitution geschützter Ribonukleo¬ side mit Alkyl-, Alkenyl- oder Aralkylgruppen, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß man die Substitution mit einer den gewünschten Substituenten übertragenden Verbindung in Gegenwart von 2-tert.-Alkylimino-2-di-C1_4-alkylamino-l,3-di- C. 3~alkylperhydro-l,3,2-diazaphosphorin durchführt, 6. Process for the O-substitution of protected ribonucleosides with alkyl, alkenyl or aralkyl groups, characterized in that the substitution with a compound transferring the desired substituents in the presence of 2-tert-alkylimino-2-di-C 1 _ 4 -alkylamino-l, 3-di- C. 3 ~ alkylperhydro-l, 3,2-diazaphosphorin,
7. Verfahren nach Anspruch 6, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß man in Gegenwart von 2-tert.-Butylimino-2-di-ethyl- amino-1 , 3-dimethylperhydro-l , 3 , 2-diazaphosphorin (BDDDP ) substituiert .7. The method according to claim 6, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t that in the presence of 2-tert-butylimino-2-di-ethyl-amino-1, 3-dimethylperhydro-l, 3, 2-diazaphosphorine (BDDDP) substituted.
8. Verfahren nach Anspruch 6 oder 7, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß man als den gewünschten Substituenten übertragende Verbindung ein Alkylhalogenid, Alkenylhalogenid oder, gegebenenfalls substituiertes, Benzylhalogenid verwen¬ det.8. The method according to claim 6 or 7, d a d u r c h g e k e n e z e i c h n e t that an alkyl halide, alkenyl halide or, optionally substituted, benzyl halide is used as the compound transferring the desired substituent.
9. Verwendung nach einem der Ansprüche 6 bis 8 , d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß man.die Umsetzung in einem inerten wasserfreien polaren organischen Lösungsmittel durchführt.9. Use according to any one of claims 6 to 8, d a d u r c h g e k e n n e e c h n e t that one carries out the reaction in an inert anhydrous polar organic solvent.
10. Verfahren nach Anspruch 9, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß man die Reaktion in wasserfreiem Acetonitril durch¬ führt.10. The method according to claim 9, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t that one carries out the reaction in anhydrous acetonitrile.
11. Verfahren nach einem der Ansprüche 6 bis 10, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß man die den gewünschten Substituenten übertragende Verbindung und das Diazaphosphorin in äquivalenten Mengen einsetzt.11. The method according to any one of claims 6 to 10, so that the compound transferring the desired substituents and the diazaphosphorine are used in equivalent amounts.
12. Verfahren nach einem der Ansprüche 6 bis 11, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß man 3',5'-0-geschützte Ribonukleoside einsetzt. 12. The method according to any one of claims 6 to 11, characterized in that 3 ', 5'-0-protected ribonucleosides are used.
13. Verfahren nach Anspruch 12, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß man 3' ,5'-O-(Tetraisopropyldisiloxan-1,3-diyl) geschützte Pyrimidin- oder Purinribonukleoside O-alkyliert oder -alkenyliert.13. The method according to claim 12, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t that 3 ', 5'-O- (tetraisopropyldisiloxane-1,3-diyl) protected pyrimidine or purine ribonucleosides O-alkylated or alkenylated.
14. Verfahren nach einem der Ansprüche 6 bis 13, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß man zur O-Alkylierung Methyljodid einsetzt.14. The method according to any one of claims 6 to 13, that the use of methyl iodide for the O-alkylation is carried out.
15. Verfahren nach einem der Ansprüche 6 bis 13, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t , daß man zur O-Alkenylierung Allylbromid einsetzt. 15. The method according to any one of claims 6 to 13, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t that allyl bromide is used for O-alkenylation.
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