UA81100C2 - Isolated monoclonal human antibody that binds to human il-12 - Google Patents
Isolated monoclonal human antibody that binds to human il-12 Download PDFInfo
- Publication number
- UA81100C2 UA81100C2 UA2003021154A UA2003021154A UA81100C2 UA 81100 C2 UA81100 C2 UA 81100C2 UA 2003021154 A UA2003021154 A UA 2003021154A UA 2003021154 A UA2003021154 A UA 2003021154A UA 81100 C2 UA81100 C2 UA 81100C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- antibodies
- antibody
- human
- cells
- variable region
- Prior art date
Links
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 title claims description 133
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 146
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 119
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 58
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 56
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 56
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 claims abstract description 11
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 25
- 239000013598 vector Substances 0.000 abstract description 25
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 13
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 abstract description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 148
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 101
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 74
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 73
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 73
- 208000037956 transmissible mink encephalopathy Diseases 0.000 description 64
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 63
- 238000011247 total mesorectal excision Methods 0.000 description 58
- -1 SOMA Proteins 0.000 description 54
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 50
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 50
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 44
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 41
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 41
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 41
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 39
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 39
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 34
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 34
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 30
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 27
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 27
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 27
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 27
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 27
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 27
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 26
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 25
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 24
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 24
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 24
- 239000000047 product Substances 0.000 description 24
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 23
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 23
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 23
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 22
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 22
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 18
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 18
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 18
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 16
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 15
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N mandelic acid Chemical compound OC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 14
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 14
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 14
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 14
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 14
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 14
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 14
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 14
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 13
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 13
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 12
- 210000005056 cell body Anatomy 0.000 description 12
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 12
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 12
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 12
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 12
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 12
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 12
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 11
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 11
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 11
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 10
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 10
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 10
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 10
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 10
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 10
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 10
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 10
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 10
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 10
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 10
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 10
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 9
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 9
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical class OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 9
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 9
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 9
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 8
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 8
- 244000234179 Myrtus ugni Species 0.000 description 8
- 235000012093 Myrtus ugni Nutrition 0.000 description 8
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 8
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 8
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 8
- 229920006225 ethylene-methyl acrylate Polymers 0.000 description 8
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 8
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 8
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 8
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 8
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 8
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 7
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 7
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 7
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 7
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 7
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 7
- UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N cytokinin Natural products C1=NC=2C(NCC=C(CO)C)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(CO)O1 UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000004062 cytokinin Substances 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 7
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 7
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 7
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 7
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 7
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 7
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 7
- CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-m-cresol Chemical compound CC1=CC(O)=CC=C1Cl CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 6
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 6
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 6
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 6
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 6
- 208000027697 autoimmune lymphoproliferative syndrome due to CTLA4 haploinsuffiency Diseases 0.000 description 6
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 6
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 6
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 6
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- ADEBPBSSDYVVLD-UHFFFAOYSA-N donepezil Chemical compound O=C1C=2C=C(OC)C(OC)=CC=2CC1CC(CC1)CCN1CC1=CC=CC=C1 ADEBPBSSDYVVLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000006870 function Effects 0.000 description 6
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 6
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 6
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 6
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 6
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 6
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 description 6
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 6
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 6
- QWVGKYWNOKOFNN-UHFFFAOYSA-N o-cresol Chemical compound CC1=CC=CC=C1O QWVGKYWNOKOFNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N p-cresol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1 IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 6
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 6
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 6
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 6
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 6
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 5
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 5
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 5
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 5
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 5
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 5
- 101100460719 Mus musculus Noto gene Proteins 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 5
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 5
- 101100187345 Xenopus laevis noto gene Proteins 0.000 description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 description 5
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 5
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 5
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 5
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 5
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 5
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 5
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 5
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 5
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 5
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 5
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 5
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 5
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 5
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 5
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 5
- HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N micophenolic acid Natural products OC1=C(CC=C(C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229960000951 mycophenolic acid Drugs 0.000 description 5
- HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N mycophenolic acid Chemical compound OC1=C(C\C=C(/C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N 0.000 description 5
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 5
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 5
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 4
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 4
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical class OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 4
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 4
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 4
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 4
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 230000000561 anti-psychotic effect Effects 0.000 description 4
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 4
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 4
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 4
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 4
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 4
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 4
- 230000008676 import Effects 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 4
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 4
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 4
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 4
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 4
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 4
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 4
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 4
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 4
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 4
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 4
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 4
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 4
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 4
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 4
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- 229930182837 (R)-adrenaline Natural products 0.000 description 3
- BSIMZHVOQZIAOY-SCSAIBSYSA-N 1-carbapenem-3-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC[C@@H]2CC(=O)N12 BSIMZHVOQZIAOY-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 3
- PFWLFWPASULGAN-UHFFFAOYSA-N 7-methylxanthine Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1N=CN2C PFWLFWPASULGAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XHVAWZZCDCWGBK-WYRLRVFGSA-M Aurothioglucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](S[Au])[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O XHVAWZZCDCWGBK-WYRLRVFGSA-M 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 3
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 3
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 3
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010074604 Epoetin Alfa Proteins 0.000 description 3
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 3
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 3
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 3
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 3
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 3
- UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N Jacareubin Natural products CC1(C)OC2=CC3Oc4c(O)c(O)ccc4C(=O)C3C(=C2C=C1)O UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 3
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- 108010067902 Peptide Library Proteins 0.000 description 3
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 3
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 3
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000004288 Sodium dehydroacetate Substances 0.000 description 3
- 102100038803 Somatotropin Human genes 0.000 description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000000150 Sympathomimetic Substances 0.000 description 3
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 3
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 3
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 229940126575 aminoglycoside Drugs 0.000 description 3
- 239000003263 anabolic agent Substances 0.000 description 3
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 description 3
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 3
- 230000000954 anitussive effect Effects 0.000 description 3
- 230000001430 anti-depressive effect Effects 0.000 description 3
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 3
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 3
- 230000002141 anti-parasite Effects 0.000 description 3
- 230000002682 anti-psoriatic effect Effects 0.000 description 3
- 230000000767 anti-ulcer Effects 0.000 description 3
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 3
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000000935 antidepressant agent Substances 0.000 description 3
- 229940005513 antidepressants Drugs 0.000 description 3
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 3
- 239000000228 antimanic agent Substances 0.000 description 3
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 3
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 3
- 239000003096 antiparasitic agent Substances 0.000 description 3
- 239000003435 antirheumatic agent Substances 0.000 description 3
- 229940124584 antitussives Drugs 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 229960001799 aurothioglucose Drugs 0.000 description 3
- 229960004669 basiliximab Drugs 0.000 description 3
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 3
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 3
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 3
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 3
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 3
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 229960002242 chlorocresol Drugs 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 3
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 3
- 229960000265 cromoglicic acid Drugs 0.000 description 3
- IMZMKUWMOSJXDT-UHFFFAOYSA-N cromoglycic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)=CC(=O)C2=C1C=CC=C2OCC(O)COC1=CC=CC2=C1C(=O)C=C(C(O)=O)O2 IMZMKUWMOSJXDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 229960002806 daclizumab Drugs 0.000 description 3
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 3
- PCHPORCSPXIHLZ-UHFFFAOYSA-N diphenhydramine hydrochloride Chemical compound [Cl-].C=1C=CC=CC=1C(OCC[NH+](C)C)C1=CC=CC=C1 PCHPORCSPXIHLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 229960003530 donepezil Drugs 0.000 description 3
- 229960000533 dornase alfa Drugs 0.000 description 3
- 108010067396 dornase alfa Proteins 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 3
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 229960005139 epinephrine Drugs 0.000 description 3
- 229960003388 epoetin alfa Drugs 0.000 description 3
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 3
- 239000002834 estrogen receptor modulator Substances 0.000 description 3
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 3
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 125000005313 fatty acid group Chemical group 0.000 description 3
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 3
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 3
- 230000000147 hypnotic effect Effects 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 3
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 3
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 3
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 239000003589 local anesthetic agent Substances 0.000 description 3
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 3
- 229940071648 metered dose inhaler Drugs 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 230000002911 mydriatic effect Effects 0.000 description 3
- 239000003158 myorelaxant agent Substances 0.000 description 3
- 230000003533 narcotic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000842 neuromuscular blocking agent Substances 0.000 description 3
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 3
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 3
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 3
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 3
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 3
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 3
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 description 3
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 description 3
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 description 3
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 3
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 3
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 239000000932 sedative agent Substances 0.000 description 3
- 230000001624 sedative effect Effects 0.000 description 3
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 3
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 3
- 229940079839 sodium dehydroacetate Drugs 0.000 description 3
- 235000019259 sodium dehydroacetate Nutrition 0.000 description 3
- DSOWAKKSGYUMTF-GZOLSCHFSA-M sodium;(1e)-1-(6-methyl-2,4-dioxopyran-3-ylidene)ethanolate Chemical compound [Na+].C\C([O-])=C1/C(=O)OC(C)=CC1=O DSOWAKKSGYUMTF-GZOLSCHFSA-M 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 101150041594 soti gene Proteins 0.000 description 3
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 3
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 3
- NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N sulfasalazine Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(\N=N\C=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N 0.000 description 3
- 229960001940 sulfasalazine Drugs 0.000 description 3
- NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N sulfasalazine Natural products C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N=NC=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 3
- 230000001975 sympathomimetic effect Effects 0.000 description 3
- 229960001685 tacrine Drugs 0.000 description 3
- YLJREFDVOIBQDA-UHFFFAOYSA-O tacrine(1+) Chemical compound C1=CC=C2C([NH3+])=C(CCCC3)C3=NC2=C1 YLJREFDVOIBQDA-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 3
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 3
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 3
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 3
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010002198 Anaphylactic reaction Diseases 0.000 description 2
- 208000003343 Antiphospholipid Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 208000012657 Atopic disease Diseases 0.000 description 2
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 description 2
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical class O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical class OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 2
- 206010012442 Dermatitis contact Diseases 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 2
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical class OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 2
- 108010029961 Filgrastim Proteins 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 108700007698 Genetic Terminator Regions Proteins 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100039619 Granulocyte colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- 101000939500 Homo sapiens UBX domain-containing protein 11 Proteins 0.000 description 2
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 2
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 2
- 206010059176 Juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 2
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 2
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940121849 Mitotic inhibitor Drugs 0.000 description 2
- UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N Naphthalene Chemical compound C1=CC=CC2=CC=CC=C21 UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 2
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 2
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 2
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 2
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 2
- 206010036105 Polyneuropathy Diseases 0.000 description 2
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 2
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 2
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 description 2
- 235000011449 Rosa Nutrition 0.000 description 2
- 101150036800 SOV gene Proteins 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 206010051379 Systemic Inflammatory Response Syndrome Diseases 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Chemical class [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 2
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 2
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 description 2
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 2
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 2
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 2
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 2
- 230000001142 anti-diarrhea Effects 0.000 description 2
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 2
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 2
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000016063 arterial thoracic outlet syndrome Diseases 0.000 description 2
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011668 ascorbic acid Chemical class 0.000 description 2
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 229940127225 asthma medication Drugs 0.000 description 2
- 238000000889 atomisation Methods 0.000 description 2
- AUJRCFUBUPVWSZ-XTZHGVARSA-M auranofin Chemical compound CCP(CC)(CC)=[Au]S[C@@H]1O[C@H](COC(C)=O)[C@@H](OC(C)=O)[C@H](OC(C)=O)[C@H]1OC(C)=O AUJRCFUBUPVWSZ-XTZHGVARSA-M 0.000 description 2
- 229960005207 auranofin Drugs 0.000 description 2
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 2
- 239000013602 bacteriophage vector Substances 0.000 description 2
- 229940125388 beta agonist Drugs 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 2
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 2
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 2
- 239000000409 cytokine receptor agonist Substances 0.000 description 2
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 150000001991 dicarboxylic acids Chemical class 0.000 description 2
- KAKKHKRHCKCAGH-UHFFFAOYSA-L disodium;(4-nitrophenyl) phosphate;hexahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].[O-][N+](=O)C1=CC=C(OP([O-])([O-])=O)C=C1 KAKKHKRHCKCAGH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- DGXRZJSPDXZJFG-UHFFFAOYSA-N docosanedioic acid Chemical compound OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O DGXRZJSPDXZJFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 2
- 208000030172 endocrine system disease Diseases 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000000688 enterotoxigenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000009585 enzyme analysis Methods 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 229960004177 filgrastim Drugs 0.000 description 2
- 229940124307 fluoroquinolone Drugs 0.000 description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940015045 gold sodium thiomalate Drugs 0.000 description 2
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 150000005828 hydrofluoroalkanes Chemical class 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000002215 juvenile rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 239000008141 laxative Substances 0.000 description 2
- 230000002475 laxative effect Effects 0.000 description 2
- VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N leflunomide Chemical compound O1N=CC(C(=O)NC=2C=CC(=CC=2)C(F)(F)F)=C1C VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000681 leflunomide Drugs 0.000 description 2
- 239000003199 leukotriene receptor blocking agent Substances 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 2
- 239000003120 macrolide antibiotic agent Substances 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 2
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 2
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 2
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 2
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 2
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 2
- NOUWNNABOUGTDQ-UHFFFAOYSA-N octane Chemical compound CCCCCCC[CH2+] NOUWNNABOUGTDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 125000000962 organic group Chemical group 0.000 description 2
- 239000011146 organic particle Substances 0.000 description 2
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 2
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 2
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 2
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 2
- 229940090048 pen injector Drugs 0.000 description 2
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 2
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 2
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N phthalic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 2
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 2
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 2
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 2
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 2
- 230000007824 polyneuropathy Effects 0.000 description 2
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 2
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 2
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 2
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- AGHLUVOCTHWMJV-UHFFFAOYSA-J sodium;gold(3+);2-sulfanylbutanedioate Chemical compound [Na+].[Au+3].[O-]C(=O)CC(S)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(S)C([O-])=O AGHLUVOCTHWMJV-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- TYFQFVWCELRYAO-UHFFFAOYSA-N suberic acid Chemical compound OC(=O)CCCCCCC(O)=O TYFQFVWCELRYAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003456 sulfonamides Chemical class 0.000 description 2
- 239000013595 supernatant sample Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 2
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 2
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 239000011975 tartaric acid Chemical class 0.000 description 2
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 2
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 2
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 2
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 2
- MJIBOYFUEIDNPI-HBNMXAOGSA-L zinc 5-[2,3-dihydroxy-5-[(2R,3R,4S,5R,6S)-4,5,6-tris[[3,4-dihydroxy-5-(3,4,5-trihydroxybenzoyl)oxybenzoyl]oxy]-2-[[3,4-dihydroxy-5-(3,4,5-trihydroxybenzoyl)oxybenzoyl]oxymethyl]oxan-3-yl]oxycarbonylphenoxy]carbonyl-3-hydroxybenzene-1,2-diolate Chemical class [Zn++].Oc1cc(cc(O)c1O)C(=O)Oc1cc(cc(O)c1O)C(=O)OC[C@H]1O[C@@H](OC(=O)c2cc(O)c(O)c(OC(=O)c3cc(O)c(O)c(O)c3)c2)[C@H](OC(=O)c2cc(O)c(O)c(OC(=O)c3cc(O)c(O)c(O)c3)c2)[C@@H](OC(=O)c2cc(O)c(O)c(OC(=O)c3cc(O)c(O)c(O)c3)c2)[C@@H]1OC(=O)c1cc(O)c(O)c(OC(=O)c2cc(O)c([O-])c([O-])c2)c1 MJIBOYFUEIDNPI-HBNMXAOGSA-L 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IZUAHLHTQJCCLJ-UHFFFAOYSA-N (2-chloro-1,1,2,2-tetrafluoroethyl) hypochlorite Chemical compound FC(F)(Cl)C(F)(F)OCl IZUAHLHTQJCCLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CJVFIJXEPCVCTK-LWMBYGOMSA-N (2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-methylbutanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(C)C CJVFIJXEPCVCTK-LWMBYGOMSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N (R)-alpha-Tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 1
- FFJCNSLCJOQHKM-CLFAGFIQSA-N (z)-1-[(z)-octadec-9-enoxy]octadec-9-ene Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC FFJCNSLCJOQHKM-CLFAGFIQSA-N 0.000 description 1
- 150000005207 1,3-dihydroxybenzenes Chemical class 0.000 description 1
- TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 1-O-galloyl-3,6-(R)-HHDP-beta-D-glucose Natural products OC1C(O2)COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC1C(O)C2OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 1-hexadecanoyl-2-octadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- OHMHBGPWCHTMQE-UHFFFAOYSA-N 2,2-dichloro-1,1,1-trifluoroethane Chemical compound FC(F)(F)C(Cl)Cl OHMHBGPWCHTMQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XHKUTQNVGAHLPK-UHFFFAOYSA-N 2-fluorocyclohexa-2,5-diene-1,4-dione Chemical compound FC1=CC(=O)C=CC1=O XHKUTQNVGAHLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 2-phenoxyethanol Chemical compound OCCOC1=CC=CC=C1 QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 4-aminofolic acid Chemical compound C1=NC2=NC(N)=NC(N)=C2N=C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005541 ACE inhibitor Substances 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 208000009304 Acute Kidney Injury Diseases 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000026872 Addison Disease Diseases 0.000 description 1
- 102000009346 Adenosine receptors Human genes 0.000 description 1
- 108050000203 Adenosine receptors Proteins 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 208000035285 Allergic Seasonal Rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 244000003363 Allium ursinum Species 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- 229930183010 Amphotericin Natural products 0.000 description 1
- QGGFZZLFKABGNL-UHFFFAOYSA-N Amphotericin A Natural products OC1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C=CC=CC=CC=CCCC=CC=CC(C)C(O)C(C)C(C)OC(=O)CC(O)CC(O)CCC(O)C(O)CC(O)CC(O)(CC(O)C2C(O)=O)OC2C1 QGGFZZLFKABGNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N Amphotericin-B Natural products O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N 0.000 description 1
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 241000408923 Appia Species 0.000 description 1
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-M Arachidonate Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC([O-])=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-M 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 208000037157 Azotemia Diseases 0.000 description 1
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N Betaine Natural products C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 description 1
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 206010010071 Coma Diseases 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 206010010744 Conjunctivitis allergic Diseases 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 101710112752 Cytotoxin Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Chemical class OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QWIZNVHXZXRPDR-UHFFFAOYSA-N D-melezitose Natural products O1C(CO)C(O)C(O)C(O)C1OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O QWIZNVHXZXRPDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 239000004338 Dichlorodifluoromethane Substances 0.000 description 1
- 206010013457 Dissociation Diseases 0.000 description 1
- 101100428764 Drosophila melanogaster vret gene Proteins 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 241000168022 Elaphurus davidianus Species 0.000 description 1
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001331845 Equus asinus x caballus Species 0.000 description 1
- 241000402754 Erythranthe moschata Species 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 206010073306 Exposure to radiation Diseases 0.000 description 1
- 239000001263 FEMA 3042 Substances 0.000 description 1
- 206010058872 Fungal sepsis Diseases 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 208000003807 Graves Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 101710121697 Heat-stable enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010019728 Hepatitis alcoholic Diseases 0.000 description 1
- 206010019755 Hepatitis chronic active Diseases 0.000 description 1
- 208000002972 Hepatolenticular Degeneration Diseases 0.000 description 1
- 108010093488 His-His-His-His-His-His Proteins 0.000 description 1
- 101000694288 Homo sapiens 40S ribosomal protein SA Proteins 0.000 description 1
- 101000756632 Homo sapiens Actin, cytoplasmic 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001090483 Homo sapiens Glutathione S-transferase LANCL1 Proteins 0.000 description 1
- 101001126084 Homo sapiens Piwi-like protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000628693 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase 25 Proteins 0.000 description 1
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 1
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 1
- 241000701024 Human betaherpesvirus 5 Species 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010033098 IC 101 Proteins 0.000 description 1
- 201000009794 Idiopathic Pulmonary Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 108700002232 Immediate-Early Genes Proteins 0.000 description 1
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 102100026819 Inositol polyphosphate 1-phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 206010022491 Insulin resistant diabetes Diseases 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- 206010022941 Iridocyclitis Diseases 0.000 description 1
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 241000270322 Lepidosauria Species 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 101710161955 Mannitol-specific phosphotransferase enzyme IIA component Proteins 0.000 description 1
- 206010058858 Meningococcal bacteraemia Diseases 0.000 description 1
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000751119 Mila <angiosperm> Species 0.000 description 1
- 208000003250 Mixed connective tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 description 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O N,N,N-trimethylglycinium Chemical compound C[N+](C)(C)CC(O)=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N N-acetyl-beta-neuraminic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 241001325209 Nama Species 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 206010029240 Neuritis Diseases 0.000 description 1
- 241000849798 Nita Species 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000842783 Orna Species 0.000 description 1
- 101100491259 Oryza sativa subsp. japonica AP2-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 1
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010033647 Pancreatitis acute Diseases 0.000 description 1
- 241000282520 Papio Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 241000721454 Pemphigus Species 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N Penta-digallate-beta-D-glucose Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N 0.000 description 1
- BYPFEZZEUUWMEJ-UHFFFAOYSA-N Pentoxifylline Chemical compound O=C1N(CCCCC(=O)C)C(=O)N(C)C2=C1N(C)C=N2 BYPFEZZEUUWMEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031845 Pernicious anaemia Diseases 0.000 description 1
- 239000004264 Petrolatum Substances 0.000 description 1
- 102000011755 Phosphoglycerate Kinase Human genes 0.000 description 1
- 102000045595 Phosphoprotein Phosphatases Human genes 0.000 description 1
- 108700019535 Phosphoprotein Phosphatases Proteins 0.000 description 1
- 102100029365 Piwi-like protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010035742 Pneumonitis Diseases 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 description 1
- 229920001273 Polyhydroxy acid Polymers 0.000 description 1
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 208000003782 Raynaud disease Diseases 0.000 description 1
- 208000012322 Raynaud phenomenon Diseases 0.000 description 1
- 208000033626 Renal failure acute Diseases 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 241000271569 Rhea Species 0.000 description 1
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 1
- 241000714474 Rous sarcoma virus Species 0.000 description 1
- 101150060303 SOK2 gene Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 206010053879 Sepsis syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100026737 Serine/threonine-protein kinase 25 Human genes 0.000 description 1
- 206010062164 Seronegative arthritis Diseases 0.000 description 1
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 239000004147 Sorbitan trioleate Substances 0.000 description 1
- PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N Sorbitan trioleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N 0.000 description 1
- 201000002661 Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 101100289792 Squirrel monkey polyomavirus large T gene Proteins 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Chemical class OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004732 Systemic Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 101150104425 T4 gene Proteins 0.000 description 1
- UWHCKJMYHZGTIT-UHFFFAOYSA-N Tetraethylene glycol, Natural products OCCOCCOCCOCCO UWHCKJMYHZGTIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001099217 Thermotoga maritima (strain ATCC 43589 / DSM 3109 / JCM 10099 / NBRC 100826 / MSB8) Triosephosphate isomerase Proteins 0.000 description 1
- GFBKORZTTCHDGY-UWVJOHFNSA-N Thiothixene Chemical compound C12=CC(S(=O)(=O)N(C)C)=CC=C2SC2=CC=CC=C2\C1=C\CCN1CCN(C)CC1 GFBKORZTTCHDGY-UWVJOHFNSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 1
- 206010044248 Toxic shock syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000650 Toxic shock syndrome Toxicity 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 208000037386 Typhoid Diseases 0.000 description 1
- 102100029645 UBX domain-containing protein 11 Human genes 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 206010048709 Urosepsis Diseases 0.000 description 1
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 1
- 206010047642 Vitiligo Diseases 0.000 description 1
- 208000018839 Wilson disease Diseases 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- GYMWQLRSSDFGEQ-ADRAWKNSSA-N [(3e,8r,9s,10r,13s,14s,17r)-13-ethyl-17-ethynyl-3-hydroxyimino-1,2,6,7,8,9,10,11,12,14,15,16-dodecahydrocyclopenta[a]phenanthren-17-yl] acetate;(8r,9s,13s,14s,17r)-17-ethynyl-13-methyl-7,8,9,11,12,14,15,16-octahydro-6h-cyclopenta[a]phenanthrene-3,17-diol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1.O/N=C/1CC[C@@H]2[C@H]3CC[C@](CC)([C@](CC4)(OC(C)=O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C\1 GYMWQLRSSDFGEQ-ADRAWKNSSA-N 0.000 description 1
- 101150063325 ab gene Proteins 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 231100000230 acceptable toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 201000011040 acute kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 201000003229 acute pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000012998 acute renal failure Diseases 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 229940121359 adenosine receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 208000011341 adult acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 1
- 208000002353 alcoholic hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical group 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 208000002205 allergic conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 208000002029 allergic contact dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 description 1
- 208000006682 alpha 1-Antitrypsin Deficiency Diseases 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229960003896 aminopterin Drugs 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940009444 amphotericin Drugs 0.000 description 1
- 229960003942 amphotericin b Drugs 0.000 description 1
- 230000036783 anaphylactic response Effects 0.000 description 1
- 229940044094 angiotensin-converting-enzyme inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 201000004612 anterior uveitis Diseases 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000003474 anti-emetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001062 anti-nausea Effects 0.000 description 1
- 230000003356 anti-rheumatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000009830 antibody antigen interaction Effects 0.000 description 1
- 230000009227 antibody-mediated cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 239000002111 antiemetic agent Substances 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 229960005475 antiinfective agent Drugs 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000002216 antistatic agent Substances 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 229940114078 arachidonate Drugs 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 210000001106 artificial yeast chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024998 atopic conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N azide group Chemical group [N-]=[N+]=[N-] IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 1
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940116224 behenate Drugs 0.000 description 1
- UKMSUNONTOPOIO-UHFFFAOYSA-M behenate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UKMSUNONTOPOIO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 229910052797 bismuth Inorganic materials 0.000 description 1
- JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N bismuth atom Chemical compound [Bi] JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000001045 blue dye Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical class O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 1
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- FAKRSMQSSFJEIM-RQJHMYQMSA-N captopril Chemical compound SC[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O FAKRSMQSSFJEIM-RQJHMYQMSA-N 0.000 description 1
- 229960000830 captopril Drugs 0.000 description 1
- 150000001719 carbohydrate derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 229940082638 cardiac stimulant phosphodiesterase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- KYKAJFCTULSVSH-UHFFFAOYSA-N chloro(fluoro)methane Chemical compound F[C]Cl KYKAJFCTULSVSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 210000003763 chloroplast Anatomy 0.000 description 1
- 208000019069 chronic childhood arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000025302 chronic primary adrenal insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 238000012411 cloning technique Methods 0.000 description 1
- 238000011278 co-treatment Methods 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 230000006957 competitive inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000013211 curve analysis Methods 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- 230000003500 cycloplegic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229940096516 dextrates Drugs 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- PXBRQCKWGAHEHS-UHFFFAOYSA-N dichlorodifluoromethane Chemical compound FC(F)(Cl)Cl PXBRQCKWGAHEHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019404 dichlorodifluoromethane Nutrition 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 1
- UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K dihydroxy(stearato)aluminium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[Al](O)O UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- MUCZHBLJLSDCSD-UHFFFAOYSA-N diisopropyl fluorophosphate Chemical compound CC(C)OP(F)(=O)OC(C)C MUCZHBLJLSDCSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- VXIHRIQNJCRFQX-UHFFFAOYSA-K disodium aurothiomalate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(S[Au])C([O-])=O VXIHRIQNJCRFQX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 208000018459 dissociative disease Diseases 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101150116456 dri gene Proteins 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 229940112141 dry powder inhaler Drugs 0.000 description 1
- 230000001094 effect on targets Effects 0.000 description 1
- 239000003974 emollient agent Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 description 1
- 238000009505 enteric coating Methods 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 201000001155 extrinsic allergic alveolitis Diseases 0.000 description 1
- 239000010685 fatty oil Substances 0.000 description 1
- NBVXSUQYWXRMNV-UHFFFAOYSA-N fluoromethane Chemical compound FC NBVXSUQYWXRMNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005051 fluostigmine Drugs 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007499 fusion processing Methods 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-QWKBTXIPSA-N gallotannic acid Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-QWKBTXIPSA-N 0.000 description 1
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 238000012215 gene cloning Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Chemical class 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 150000002333 glycines Chemical class 0.000 description 1
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- ZJYYHGLJYGJLLN-UHFFFAOYSA-N guanidinium thiocyanate Chemical compound SC#N.NC(N)=N ZJYYHGLJYGJLLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001631 haemodialysis Methods 0.000 description 1
- 125000001475 halogen functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000322 hemodialysis Effects 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 1
- 150000004687 hexahydrates Chemical class 0.000 description 1
- 102000050113 human UBXN11 Human genes 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N hydrogen peroxide Substances OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000022098 hypersensitivity pneumonitis Diseases 0.000 description 1
- VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N icosanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O VKOBVWXKNCXXDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004201 immune sera Anatomy 0.000 description 1
- 229940042743 immune sera Drugs 0.000 description 1
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 1
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 229940102213 injectable suspension Drugs 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 208000036971 interstitial lung disease 2 Diseases 0.000 description 1
- 238000000185 intracerebroventricular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000007919 intrasynovial administration Methods 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000832 lactitol Substances 0.000 description 1
- 235000010448 lactitol Nutrition 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-JVCRWLNRSA-N lactitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-JVCRWLNRSA-N 0.000 description 1
- 229960003451 lactitol Drugs 0.000 description 1
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 1
- 239000012263 liquid product Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L magnesium acetate Chemical compound [Mg+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000011654 magnesium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000011285 magnesium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229940069446 magnesium acetate Drugs 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960002337 magnesium chloride Drugs 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N maleic anhydride Chemical compound O=C1OC(=O)C=C1 FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- QWIZNVHXZXRPDR-WSCXOGSTSA-N melezitose Chemical compound O([C@@]1(O[C@@H]([C@H]([C@@H]1O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O)CO)CO)[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O QWIZNVHXZXRPDR-WSCXOGSTSA-N 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 208000022089 meningococcemia Diseases 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 239000003475 metalloproteinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 235000020786 mineral supplement Nutrition 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002829 mitogen activated protein kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 239000011812 mixed powder Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 150000002763 monocarboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 1
- 239000002637 mydriatic agent Substances 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 208000001491 myopia Diseases 0.000 description 1
- 230000004379 myopia Effects 0.000 description 1
- 229940105132 myristate Drugs 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 150000002790 naphthalenes Chemical class 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 208000009928 nephrosis Diseases 0.000 description 1
- 231100001027 nephrosis Toxicity 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002687 nonaqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 238000011330 nucleic acid test Methods 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 1
- 201000005737 orchitis Diseases 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 150000002892 organic cations Chemical class 0.000 description 1
- 229920000620 organic polymer Polymers 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 210000002741 palatine tonsil Anatomy 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 229960001476 pentoxifylline Drugs 0.000 description 1
- 230000001175 peptic effect Effects 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 229940066842 petrolatum Drugs 0.000 description 1
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 239000008180 pharmaceutical surfactant Substances 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 229960005323 phenoxyethanol Drugs 0.000 description 1
- 229940096825 phenylmercury Drugs 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 229940080469 phosphocellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000002571 phosphodiesterase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 125000002743 phosphorus functional group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005222 photoaffinity labeling Methods 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 1
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920000098 polyolefin Polymers 0.000 description 1
- 150000007519 polyprotic acids Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 229940124606 potential therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 201000011461 pre-eclampsia Diseases 0.000 description 1
- 108010066381 preproinsulin Proteins 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 230000029983 protein stabilization Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 239000000296 purinergic P1 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N pyridine Substances C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- HJORMJIFDVBMOB-UHFFFAOYSA-N rolipram Chemical compound COC1=CC=C(C2CC(=O)NC2)C=C1OC1CCCC1 HJORMJIFDVBMOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950005741 rolipram Drugs 0.000 description 1
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M salicylate Chemical compound OC1=CC=CC=C1C([O-])=O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960001860 salicylate Drugs 0.000 description 1
- 108010038379 sargramostim Proteins 0.000 description 1
- 229960002530 sargramostim Drugs 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 206010040400 serum sickness Diseases 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 229920000260 silastic Polymers 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229960001315 sodium aurothiomalate Drugs 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- 229940061368 sonata Drugs 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000019337 sorbitan trioleate Nutrition 0.000 description 1
- 229960000391 sorbitan trioleate Drugs 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000008347 soybean phospholipid Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 1
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N succinimide Chemical class O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N sulfanilamide Chemical compound NC1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 229920002258 tannic acid Polymers 0.000 description 1
- 235000015523 tannic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940033123 tannic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960003676 tenidap Drugs 0.000 description 1
- LXIKEPCNDFVJKC-QXMHVHEDSA-N tenidap Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N(C(=O)N)C(=O)\C1=C(/O)C1=CC=CS1 LXIKEPCNDFVJKC-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- HQHCYKULIHKCEB-UHFFFAOYSA-N tetradecanedioic acid Natural products OC(=O)CCCCCCCCCCCCC(O)=O HQHCYKULIHKCEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(O)=O TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004044 tetrasaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229960003433 thalidomide Drugs 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- AOBORMOPSGHCAX-DGHZZKTQSA-N tocofersolan Chemical compound OCCOC(=O)CCC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C AOBORMOPSGHCAX-DGHZZKTQSA-N 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- 125000005490 tosylate group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229940125725 tranquilizer Drugs 0.000 description 1
- 239000003204 tranquilizing agent Substances 0.000 description 1
- 230000002936 tranquilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 125000001425 triazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- CYRMSUTZVYGINF-UHFFFAOYSA-N trichlorofluoromethane Chemical compound FC(Cl)(Cl)Cl CYRMSUTZVYGINF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940029284 trichlorofluoromethane Drugs 0.000 description 1
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229940073585 tromethamine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 201000008297 typhoid fever Diseases 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 208000009852 uremia Diseases 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 238000007879 vasectomy Methods 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 238000002629 virtual reality therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Ця заявка частково базується на, та посилається на пріоритет за (05 Ргомізіопа! (тимчасовою заявкою) 60/223,358 поданою 7 серпня 2000р. та 60/236,827, поданою 29 вересня 2000р.|, кожну з яких повністю включено до даної заявки шляхом посилання.This application is based in part on, and claims priority to (05 Rgomysiopa! (provisional application) 60/223,358 filed Aug. 7, 2000 and 60/236,827 filed Sep. 29, 2000|, each of which is incorporated herein by reference in its entirety.
Даний винахід відноситься до антитіл, включаючи вказані частини або варіанти, специфічні хоча б до одного Інтерлейкину-12 (І/-12), протеїну або його фрагменту, так само як до нуклеїнових кислот, що кодують антитіла до 1-12, комплементарних нуклеїнових кислот, векторів, клітин-хазяїв та способів їх одержання та використання, включаючи терапевтичні композиції, застосування та пристрої.The present invention relates to antibodies, including the specified parts or variants, specific to at least one Interleukin-12 (I/-12), protein or its fragment, as well as to nucleic acids encoding antibodies to 1-12, complementary nucleic acids , vectors, host cells and methods of their preparation and use, including therapeutic compositions, applications and devices.
Інтерлейкин-12 (11-12) є гетеродимерним цитокіном, який складається з глікозильованих поліпептидних ланцюгів із масою 35 та 40кДа, зв'язаних дисульфідним зв'язком. Цитокін синтезується та секретується антиген-презентованими клітинами, включаючи дендритні клітини, моноцити, макрофаги, В-клітини, клітиниInterleukin-12 (11-12) is a heterodimeric cytokine that consists of glycosylated polypeptide chains with a mass of 35 and 40 kDa, linked by a disulfide bond. The cytokine is synthesized and secreted by antigen-presenting cells, including dendritic cells, monocytes, macrophages, B cells,
Лангерганса та кератиноцити, так само як і природними клітинами-кілерами (МК-клітинами). 11-12 опосередковує різноманітні біологічні процеси, та згадується як фактор стимуляції МК-клітин (МК5Б), фактор стимуляції Т-клітин, цитотоксичний фактор дозрівання Т-лімфоцитів та фактор ЕВвВУ- трансформованих ліній В-клітин (Сигів, 5). Н. А. »., еї аї, Сіїпіса! Місгоріоюоду Неміємув, 10: 742-780 (1997)|.Langerhans and keratinocytes, as well as natural killer cells (MK cells). 11-12 mediates a variety of biological processes, and is referred to as a MK-cell stimulation factor (MK5B), a T-cell stimulation factor, a cytotoxic T-lymphocyte maturation factor, and a factor of EVvVU-transformed B-cell lines (Sygiv, 5). N. A. »., ey ai, Siipisa! Mishorioyudu Nemiemuv, 10: 742-780 (1997)|.
Інтерлейкин-12 може зв'язуватися з рецептором 1-12, експресованим на плазматичній мембрані клітин (напр., Т-клітин, МК-клітин), таким чином змінюючи (напр., ініціюючи, попереджуючи) біологічні процеси.Interleukin-12 can bind to receptor 1-12 expressed on the plasma membrane of cells (eg, T cells, MK cells), thus changing (eg, initiating, preventing) biological processes.
Наприклад, зв'язування 1-12 із рецептором І--12 може стимулювати проліферацію Т-клітин та МК-клітин, посилити цитолітичну активність цитотоксичних Т-клітин (СТІ), ГАК-клітин та МкК-клітин (кілерів, активованих лімфокіном), викликати вироблення гама-інтерферону (ЕМ САММА) Т- та МК-клітинами та викликати диференціацію простих ТпО-клітин у Тп1-клітини, що продукують ІЕМ САММА та 1--2 |іпспієті, а, Аппиа! Вемієм ої Іттипоіоду, 13: 251-276 (1995)). Зокрема, І--12 є життєво необхідним для утворення цитолітичних клітин (напр., МК, СТ) та для створення клітинної імунної відповіді (напр., клітинна відповідь, опосередкована ТП1 клітинами).For example, the binding of 1-12 to the I-12 receptor can stimulate the proliferation of T cells and MK cells, enhance the cytolytic activity of cytotoxic T cells (STI), HAC cells and MkC cells (killers activated by lymphokine), cause the production of gamma interferon (EM SAMMA) by T- and MK-cells and cause the differentiation of simple TpO cells into Tp1-cells that produce IEM SAMMA and 1--2 |ipspieti, a, Appia! Journal of Ittypoiodu, 13: 251-276 (1995)). In particular, I--12 is vital for the formation of cytolytic cells (eg, MK, ST) and for the generation of a cellular immune response (eg, a cellular response mediated by TP1 cells).
Таким чином, 1--12 є критично важливим для вироблення та регулювання як захисної імунної (напр., пригнічення інфекцій), так і патологічної імунної відповіді (напр., аутоіїмунітет) (Непаггак, 9. А. апа Вгипаа, М.Thus, 1--12 is critically important for the development and regulation of both protective immune (e.g., inhibition of infections) and pathological immune response (e.g., autoimmunity) (Nepaggak, 9. A. apa Vgypaa, M.
У., Гарогаюгу Іпмезіїдайоп, 72: 619-637 (1995)). Таким чином, імунна відповідь (напр., захисна та патогенна) може бути підсилена, пригнічена або попереджена через маніпулювання біологічною активністю 1-12 іп мімо, наприклад через антитіло.U., Garogayugu Ipmeziidayop, 72: 619-637 (1995)). Thus, an immune response (eg, protective and pathogenic) can be enhanced, suppressed or prevented through manipulation of biological activity 1-12 ip mimo, for example via an antibody.
Химерні, поліклональні (напр., антисироватки) та/(або моноклональні антитіла (Маре) та фрагменти (напр., протеїнові продукти їх протеолітичного розщеплення або злиття) ссавців крім людини, є потенційними терапевтичними засобами, котрі були вивчені у деяких випадках при спробі лікування певних захворювань. Однак, такі антитіла або фрагменти можуть викликати імунну відповідь при застосуванні на людях. Така імунна відповідь може спричинити опосередковане імунокомплексом вивільнення антитіл або їх фрагментів з циркуляції і зробити повторне застосування неприйнятним для терапії, знижуючи таким чином терапевтичну користь для пацієнта та обмежити повторне застосування антитіл чи фрагментів.Chimeric, polyclonal (eg, antisera) and/or monoclonal antibodies (Mare) and fragments (eg, protein products of their proteolytic cleavage or fusion) of non-human mammals are potential therapeutic agents that have been studied in some cases in an attempted treatment certain diseases. However, such antibodies or fragments may elicit an immune response when administered to humans. Such an immune response may cause immune complex-mediated release of the antibodies or fragments from the circulation and render re-administration unacceptable for therapy, thereby reducing therapeutic benefit to the patient and limiting re-administration use of antibodies or fragments.
Наприклад, повторне застосування антитіл або фрагментів, які включають частини антитіл не людини, можуть призвести до сироваткових захворювань та/або анафілаксії. Як відомо з рівня техніки, для того, щоб попередити ці та інші проблеми, було випробувано багато підходів для зниження імуногенності таких антитіл та їх частин, включаючи химеризацію та гуманізацію. Ці та інші підходи, тим не менш, можуть забезпечувати антитілами чи їх фрагментами з деякою імуногенністю, низькою афінністю, низькою авидністю або зі складнощами в клітинній культурі, при збільшенні масштабу, при продукуванні та/або низьким виходом продукту. Таким чином, такі антитіла чи фрагменти можуть бути недостатньо ідеально придатними для виробництва або використання в якості терапевтичних протеїнів.For example, repeated administration of antibodies or fragments that include non-human antibody portions may result in serum sickness and/or anaphylaxis. As is known in the art, in order to prevent these and other problems, many approaches have been tried to reduce the immunogenicity of such antibodies and parts thereof, including chimerization and humanization. These and other approaches, however, may provide antibodies or fragments thereof with some immunogenicity, low affinity, low avidity, or difficulty in cell culture, scale-up, production, and/or low product yield. Thus, such antibodies or fragments may not be ideally suited for production or use as therapeutic proteins.
Звідси випливає, що існує потреба як у запровадженні антитіл до 1І-12 або їх фрагментів, які подолають ще одну з зазначених проблем, так і в удосконаленні відомих антитіл чи їх фрагментів.It follows from this that there is a need both for the introduction of antibodies to 1I-12 or their fragments, which will overcome one of the mentioned problems, and for the improvement of known antibodies or their fragments.
Даний винахід пропонує виділені антитіла людини, приматів, гризунів, ссавців, химерні, гуманізовані та/або СОБВ-гібридизовані антитіла до 1-12, імуноглобуліни, продукти розщеплення та інші вказані їхні частини чи варіанти, так само, як композиції антитіл до ІЇ/-12, кодуючі чи комплементарні нуклеїнові кислоти, вектори, клітини-хазяї, композиції, склади, пристрої, трансгенні тварини, та способи їх одержання та застосування, як описано та здійснено тут, в комбінації з відомими з рівня техніки.The present invention provides isolated human, primate, rodent, mammalian antibodies, chimeric, humanized and/or SOBV-hybridized antibodies to 1-12, immunoglobulins, cleavage products and other specified parts or variants thereof, as well as compositions of antibodies to II/- 12, encoding or complementary nucleic acids, vectors, host cells, compositions, compositions, devices, transgenic animals, and methods of their preparation and use, as described and practiced herein, in combination with those known in the art.
Даним винаходом також запропоновано хоча б одне виділене антитіло до ІЇ-12, як описано тут.The present invention also provides at least one isolated antibody to II-12 as described herein.
Антитіло згідно з даним винаходом включає будь-який протеїн чи пептид, що містить молекулу, яка представлена хоча б частиною молекули імуноглобуліну, такою як, але не обмежено нею, регіон, що визначає компліментарність (СОК) важкого чи легкого ланцюга, чи регіон зв'язування з його лігандом, регіон варіабельності важкого чи легкого ланцюга, регіон константності важкого чи легкого ланцюга, каркасний регіон, або його частина, котрий може бути включений в антитіло даного винаходу. Антитіло винаходу може включати чи бути одержаним від будь-якого ссавця, такого як, але не обмеженого ним, людина, миша, кролик, щур, гризун, примат чи їх комбінації, та подібне.An antibody according to the present invention includes any protein or peptide containing a molecule that is represented by at least a portion of an immunoglobulin molecule, such as, but not limited to, a complementarity-determining region (CDO) of a heavy or light chain, or a region of binding to its ligand, the region of variability of the heavy or light chain, the region of constancy of the heavy or light chain, the framework region, or a part thereof, which can be included in the antibody of this invention. An antibody of the invention may include or be derived from any mammal, such as, but not limited to, human, mouse, rabbit, rat, rodent, primate, or combinations thereof, and the like.
Даним винаходом запропоновано, в одному з аспектів, молекули виділеної нуклеїнової кислоти, включаючи комплементарні чи гібридизовані, полінуклеотид, який кодує хоча б один ідіотип антитіл до ІІ-- 12, включаючи хоча б одну вказану послідовність, домен, частину або його варіант. Даний винахід також пропонує рекомбінантні вектори, що включають згадувані нуклеїнові молекули, які кодують антитіло до ідіотипу 1-12, клітину-хазяїн, яка містить таку нуклеїнову кислоту та/або вектори, так само як і способи одержання та/або використання таких нуклеїнових кислот антиідіотипічних антитіл, векторів та/або клітин- хазяїв.The present invention provides, in one aspect, isolated nucleic acid molecules, including complementary or hybridized, polynucleotides that encode at least one idiotype of antibodies to II--12, including at least one specified sequence, domain, part or variant thereof. The present invention also provides recombinant vectors comprising said nucleic acid molecules encoding an anti-idiotype antibody 1-12, a host cell containing such nucleic acid and/or vectors, as well as methods for obtaining and/or using such anti-idiotype nucleic acids antibodies, vectors and/or host cells.
Даний винахід також пропонує принаймні один спосіб експресії хоча б одного антитіла до 1-12 чи антитіла до ідіотипу 1-12 в клітині-хазяїні, який полягає в культивуванні клітини-хазяїна як описано тут, за умови, що хоча б одне антитіло до 1-12 експресується в кількостях, достатніх для детектування та/або виділення.The present invention also provides at least one method of expressing at least one antibody to 1-12 or antibody to idiotype 1-12 in a host cell, which comprises culturing the host cell as described herein, provided that at least one antibody to 1- 12 is expressed in amounts sufficient for detection and/or isolation.
Даний винахід також пропонує принаймні одну композицію, яка містить (а) виділену нуклеїнову кислоту антитіла до 1-12 та/або антитіло як показано тут; та (б) придатний носій або дилюент. Носій чи дилюент може бути, але не обов'язково, фармацевтично прийнятним, відповідно до відомих носіїв чи дилюентів.The present invention also provides at least one composition comprising (a) an isolated nucleic acid antibody to 1-12 and/or an antibody as shown herein; and (b) a suitable carrier or diluent. The carrier or diluent may be, but need not be, pharmaceutically acceptable, in accordance with known carriers or diluents.
Композиція може, не обов'язково, далі включати принаймні одну складову, протеїн чи композицію.The composition may optionally further include at least one component, protein or composition.
Даний винахід також пропонує принаймні один спосіб чи композицію антитіла до 1--12 для застосування в терапевтично ефективній кількості для модуляції чи лікування хоча б одного стану клітини, тканини, органу, тварини чи пацієнта, пов'язаного із І-12, та/або такого, що передує йому, слідує за ним, перебігає за пов'язаних причин, як показано тут.The present invention also provides at least one method or composition of an antibody to I-12 for use in a therapeutically effective amount to modulate or treat at least one condition of a cell, tissue, organ, animal or patient associated with I-12 and/or one that precedes it, follows it, runs over for related reasons, as shown here.
Даний винахід також пропонує принаймні одну композицію, пристрій та/або спосіб доставки терапевтично чи профілактично ефективної кількості принаймні одного антитіла до 1-12, згідно з даним винаходом.The present invention also provides at least one composition, device and/or method for delivering a therapeutically or prophylactically effective amount of at least one antibody to 1-12, according to the present invention.
Даний винахід далі пропонує хоча б один спосіб чи композицію з антитілами до 1-12, для діагностики хоча б одного стану клітини, тканини, органу, тварини чи пацієнта, пов'язаного із 1-12, та/або такого, що передує йому, слідує за ним, перебігає за пов'язаних причин, як показано тут.The present invention further provides at least one method or composition with antibodies to 1-12 for diagnosing at least one condition of a cell, tissue, organ, animal or patient associated with and/or preceding 1-12, follows him, defecting for related reasons, as shown here.
Даний винахід також пропонує принаймні одну композицію, пристрій та/або спосіб доставки для діагностики хоча б одного антитіла до ІІ --12, відповідно до даного винаходу.The present invention also provides at least one composition, device and/or method of delivery for the diagnosis of at least one anti-II-12 antibody according to the present invention.
Фігури ТА та 18: діаграми, які демонструють зв'язування, що залежить від концентрації моноклональних анти-1І.-12 антитіл з іммобілізованим І/-12 людини. Анти-ІЇ-12 антитіла послідовно були промиті 1905Figures 1A and 18: graphs showing concentration-dependent binding of monoclonal anti-1I.-12 antibodies to immobilized human I/-12. Anti-II-12 antibodies were sequentially washed 1905
В5БА/РВ5 та інкубовані на платівках, покритих гПІ--12 на протязі однієї години при 37"С. Потім платівки двічі промивали 0.0295 Твином 20 (поліоксиетилен (20) монолаурат сорбітану), 0.15М сольовим розчином і потім тестували пероксидазою хрону (НКР) міченими антитілами козла специфічними до до каппа людини на протязі 1 години при кімнатній температурі. Платівки потім знову промивали, обробляли субстратом о- фенілендиаміну (ОР) і оптична щільність (00) кожної лунки вимірювалася при 490нм.B5BA/RV5 and incubated on plates coated with hPI--12 for one hour at 37"C. Then the plates were washed twice with 0.0295 Tween 20 (polyoxyethylene (20) sorbitan monolaurate), 0.15M saline and then tested with horseradish peroxidase (HPR) with labeled goat anti-human anti-kappa antibodies for 1 hour at room temperature.The plates were then washed again, treated with o-phenylenediamine (OR) substrate, and the optical density (00) of each well was measured at 490 nm.
Фігура 2: смуги з ліва на право на Фігурах А та В відповідають 1-12 людини, І//12 р40 людини, 1-12 миші та маркерам молекулярної маси. На Фігурі А показано зони пофарбовані загальним протеїном.Figure 2: Left to right bands in Figures A and B correspond to human 1-12, human I//12 p40, mouse 1-12 and molecular weight markers. Figure A shows areas stained with total protein.
Первісні зони з кожної смуги є І--12 людини (75кДа), р40 людини 1-12 (40кДа), та І/-12 миші (75кДа). НаThe original bands from each lane are human I-12 (75kDa), human p40 1-12 (40kDa), and mouse I/-12 (75kDa). On
Фігурі 28 показано угевіегп ріої одержаний з гелю, ідентичного до приведеного на Фігурі 2А. Пляму, обробляли С340 після НЕР міченими антитілами козла, специфічними до анти-Ідо людини та специфічно виявляли лише ІЇ/-12 людини (мономери та мультимери) та І/-12 р40 людини. Контрольні плями (не приведено) оброблені НЕР, міченими антитілами козла специфічними до анти-дое людини зовсім не виявляли зон.Figure 28 shows an image obtained from a gel identical to that shown in Figure 2A. The blot was treated with C340 after HER with labeled goat antibodies specific for human anti-Ido and specifically detected only human I/-12 (monomers and multimers) and human I/-12 p40. Control spots (not shown) treated with HER, labeled with goat antibodies specific for human anti-doe showed no zones at all.
Фігура 3: Аналіз оберненою РСЕ-транскрипцією експресії гену ІЕМу у РВ5 людини оброблених І1І--2, І - 12, 1--2-41-12 з або без анти-ІІ/-12 антитіл С340, 8.6.2, ізотипом контрольних антитіл. Загальна ЕМА була обернено транскрибована, ампліфікована за допомогою РСЕ з використанням ген-специфічних праймерів.Figure 3: Analysis by RSE reverse transcription of the expression of the IEMu gene in human RV5 treated with I1I--2, I-12, 1--2-41-12 with or without anti-II/-12 antibodies C340, 8.6.2, isotype controls antibodies Total EMA was reverse transcribed, amplified by PCR using gene-specific primers.
Також було визначено рівень р-актинової тЕМА в кожному зразку, що слугувало контролем для цілісності та вмісту ТЕМА.The level of β-actin tEMA was also determined in each sample, which served as a control for the integrity and content of TEMA.
Фігура 4: є гістограмою, яка відображає те, що анти-ІЇ-12 тАБ людини (С340) пригнічує вироблення інтерферону-у (ІЕМу) моноцитами збідненими на СО3- мононуклеарними клітинами периферичної крові (РВМСО), стимульованими 1--2-1Ї1-12. РВМС були культивовані на протязі п'яти годин в контрольних середовищах (без додавання цитокінів), середовищах з додаванням 1-12 (0.1Тнг/мл) плюс 1-2 (50МО/мл) (С-12/1-2), контрольних середовищах з додаванням тАб С340 (10до/ті) та середовищах 1--12/І-2, які містили тА С340 (10до/ті). Міжклітинний ІРМ-у був визначений за допомогою двокольорового імунофарбування СОЗ-РЕ та ІЄМу-РІТС. Дані наведено для одного донора.Figure 4: is a histogram showing that human anti-II-12 TAB (C340) inhibits the production of interferon-γ (IEMu) by CO3-depleted monocytes from peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) stimulated with 1--2-1Й1- 12. PBMCs were cultured for five hours in control media (without the addition of cytokines), media with the addition of 1-12 (0.1 Tng/ml) plus 1-2 (50 IU/ml) (C-12/1-2), control environments with the addition of tAb C340 (10 do/ti) and environments 1--12/I-2, which contained tA C340 (10 do/ti). Intercellular IPM was determined using two-color immunostaining of SOZ-RE and IEMu-RITS. Data are given for one donor.
Фігура 5: Діаграма, яка показує залежне від дози інгібування секреції ІЕМ-у лімфоцитами периферичної крові, стимульованими 1-2 плюс 1-12 двома різними групами анти-1ІЇ-12 тАбБр (С340) людини. РВІ людини (вх106/ті) культивувалися на протязі 24 годин із 10Ш/ті І--2, 1-2 плюс 4б0орад/ті 1І--12, або 1-2 плюс 1-12 та тА С340 як показано. Супернатанти культур було видалено та досліджено на ІЄМу за допомогою ЕА.Figure 5: Diagram showing dose-dependent inhibition of IEM secretion by peripheral blood lymphocytes stimulated with 1-2 plus 1-12 two different groups of human anti-1II-12 tAbBr (C340). Human RVI (in106/ti) were cultured for 24 hours with 10Sh/ti I--2, 1-2 plus 4b0orad/ti 1I--12, or 1-2 plus 1-12 and tA C340 as shown. Culture supernatants were removed and examined on IEM using EA.
Фігура 6: Гістограма, яка показує залежне від дози інгібування цитотоксичності І АК-клітин індукованихFigure 6: Histogram showing the dose-dependent inhibition of cytotoxicity of I AK cells induced
І/-12 плюс 1-2 антм-11І-12 тАр (0340) людини. Клітини ГАК-ефектори (РВІ людини, 8х106/ті) культивувалися на протязі 24 годин з 1-12 (400рд/ті) плюс 1-2 (100/ті) та тАБ С340 (5000пад/ті чи 50пд/ті як показано). Клітини ГАК-ефектори відмивалися та культивувалися із клітинами-мішенями Каї), міченими 51Сг на протязі чотирьох годин при співвідношенні ефектор до мішені (Е: Т) 80:11, та була визначена кількість 51Сг, вивільненого у середовище, внаслідок лізису клітин Каїї. Результати представлено як середнє при стандартній похибці трьох нормальних донорів. І/-12 позитивний контроль (1-12) є ефекторними клітинами, інкубованими з та без 1-12 антитіл. Фоном (ВКОБ) є ефекторні клітини, інкубовані без 1-12 або антитіл.I/-12 plus 1-2 antm-11I-12 tAr (0340) of a person. HAC effector cells (human RVI, 8x106/ti) were cultured for 24 hours with 1-12 (400 rd/ti) plus 1-2 (100/ti) and tAB C340 (5000pad/ti or 50pd/ti as shown). GAC effector cells were washed and cultured with Kai target cells labeled with 51Cg for four hours at an effector to target ratio (E:T) of 80:11, and the amount of 51Cg released into the medium as a result of Kai cell lysis was determined. Results are presented as mean with standard error of three normal donors. I/-12 positive control (1-12) are effector cells incubated with and without 1-12 antibodies. The background (VKOB) is effector cells incubated without 1-12 or antibodies.
Фігури 7А та 7В: є гістограмами, які демонструють, що 1-12 плюс ІС-2-індукована експресія СЮО95 на мононуклеарні клітини периферичної крові СОЗ3- інгібується анти-І./-12 тА (2340) людини. РВМСО культивувалися на протязі 72 годин на середовищі з вмістом 1-12 0.Тпд/ті та субоптимальній дозі 1-2 (5010/тіІ) в присутності чи відсутності тА С340 (10йд/тіІ). Експресія С0О95 вимірювалася проточною цитометрією клітин, оброблених анти-СО95-РІТС. Світлопропускання виконувалося за допомогою двоколіроного аналізу (СОЗ чи СО56-РЕ ув. СО95-РІТС) та прямим уз. ортогональним світлорозсіювання.Figures 7A and 7B: are histograms demonstrating that 1-12 plus IS-2-induced expression of ХО95 on peripheral blood mononuclear cells COZ3- is inhibited by human anti-I./-12 tA (2340). RVMSO were cultured for 72 hours on a medium with a content of 1-12 0.Tpd/ti and a suboptimal dose of 1-2 (5010/tiI) in the presence or absence of tA C340 (10yd/tiI). CO95 expression was measured by flow cytometry of cells treated with anti-CO95-RITS. Light transmission was performed with the help of two-color analysis (SOZ or СО56-РЕ uv. СО95-РІТС) and direct uz. orthogonal light scattering.
Фігура 8: На діаграмі показано, що рекомбінантні антитіла людини (гС340) до 1-12 людини зв'язуються з імобілізованим 1-12 у спосіб, що не відрізняється від очищених тАб С340. Було визначено концентрацію "9340 в супернатанті трьох рекомбінантних клітинних ліній, які продукують гС340, та було визначено зв'язування супернатанту з 1-12 в ЕГІ5А.Figure 8: The diagram shows that recombinant human antibodies (gC340) to human 1-12 bind to immobilized 1-12 in a manner that does not differ from purified tAb C340. The concentration of "9340 in the supernatant of three recombinant cell lines that produce hC340 was determined, and the binding of the supernatant to 1-12 in EHI5A was determined.
Платівки було покрито 2йд/ті ІЇ/-12 людини та інкубовано з очищеними тАБб С340 з оригінальної гібридоми (стандарт) або супернатантами рекомбінантних клітинних ліній. ІІ -12-поріг антитіл було визначено за допомогою антитіл козла до дО (важкий ланцюгнлегкий ланцюг) людини, кон'югованими з лужною фосфатазою.Plates were coated with 2 μl/ti of 11/-12 human and incubated with purified tABb C340 from the original hybridoma (standard) or supernatants of recombinant cell lines. The II -12-threshold of antibodies was determined using goat antibodies to dO (heavy chain-light chain) of a person, conjugated with alkaline phosphatase.
Фігура 9А-9С: є діаграмами, що показують кінетику росту та кількості антитіл, секретованих трьома незалежно одержаними КС-340 продукуючими субклонами рекомбінантних клітин (Ффіг.9А, субклон С3798В;Figure 9A-9C are graphs showing the kinetics of growth and amount of antibody secreted by three independently derived KS-340 producing recombinant cell subclones (Figure 9A, subclone C3798B;
Фіг.9В, субклон СЗ381А; Фіг.9С, субклон 389А). Рекомбінантні клітини було висаджено в колби 175 із початковою щільністю 2х1Оклітин/ті в стандартному середовищі. Через різні проміжки часу клітини ресуспендували і визначали кількість живих клітин та значення (нд/ті) "С34Ов середовищі.Fig. 9B, subclone SZ381A; Fig. 9C, subclone 389A). Recombinant cells were planted in flasks 175 with an initial density of 2x10 cells/th in a standard medium. After different time intervals, the cells were resuspended and the number of living cells and the value (n/t) of "C34O" in the medium were determined.
Даний винахід пропонує виділені рекомбінантні та/або синтетичні анти-іІІ-12 людини, приматів, гризунів,This invention offers isolated recombinant and/or synthetic anti-III-12 of humans, primates, rodents,
ссавців, химерні, гуманізовані чи СОК-гібридизовані, антитіла та їх антиідіотипічні 1-12 антитіла, крім того, композиції та кодуючі молекули нуклеїнової кислоти, які включають хоч би один полінуклеотид, який кодує хоч би одне анти-ІЇ-12 антитіло або антиідіотипічне антитіло. Даний винахід також включає, але не обмежується цим, способи одержання та використання таких нуклеїнових кислот, антитіл та антиідіотипічних антитіл, включаючи діагностичні та терапевтичні композиції, способи та пристрої.mammalian, chimeric, humanized or SOC-hybridized, antibodies and anti-idiotypic 1-12 antibodies thereof, in addition, nucleic acid compositions and encoding molecules that include at least one polynucleotide that encodes at least one anti-II-12 antibody or anti-idiotypic antibody . The present invention also includes, but is not limited to, methods of making and using such nucleic acids, antibodies, and anti-idiotypic antibodies, including diagnostic and therapeutic compositions, methods, and devices.
В цьому описі використані поняття, "антитіло до антиінтерлейкіну-12", " анти-ІЇ-12 антитіло", "частина анти-ІЇ-12 антитіла", "фрагмент анти-ІЇ-12 антитіла" та/або "варіант анти-ІЇ-12 антитіла" та подібні, включають будь-який протеїн чи пептид, що містить молекулу, представлену принаймні частиною молекули імуноглобуліну, такою як, але не обмежуючись, хоч би один регіон, який визначає компліментарність (СОК) важкого або легкого ланцюга чи його частину, що зв'язує ліганд, або регіон варіабельності важкого або легкого ланцюга, або константний регіон важкого або легкого ланцюга, каркасний регіон, чи будь-яка їхня частина, чи хоча б одна частина рецептора 1-12 чи зв'язуючого протеїну, який може бути включений в антитіло даного винаходу. Таке антитіло може діяти на специфічний ліганд, таким чаном, але не обмежуючись ним, що таке антитіло модулює, знижує, підвищує, антагонізує, агонізує, стримує, стимулює, блокує, інгібує, анулює та/або інтерферує з хоча б однією дією 1-12, хоча б з однією активністю чи зв'язуванням І/-12 або активністю чи зв'язуванням рецептора 1-12, іп мійго, іп 5йи та/або іп мімо. Як необмежуючий приклад, прийнятне анти-1ІЇ-12 антитіло, зазначена частина чи варіант даного винаходу може зв'язуватися принаймні з одним 1-12, з його зазначеною частиною, варіантом чи доменом. Прийнятне анти-1/-12 антитіло, зазначена частина чи варіант може також необов'язково впливати на принаймні одну активність чи функцію 1-12, таку як, але не обмежуючись нею: синтез ЕМА, ОМА чи протеїну, вивільненняThis description uses the terms "anti-interleukin-12 antibody", "anti-II-12 antibody", "anti-II-12 antibody part", "anti-II-12 antibody fragment" and/or "anti-II variant" -12 antibodies" and the like, include any protein or peptide containing a molecule represented by at least a portion of an immunoglobulin molecule, such as, but not limited to, at least one complementarity-determining region (CDO) of a heavy or light chain or part thereof , which binds the ligand, or the variable region of the heavy or light chain, or the constant region of the heavy or light chain, the framework region, or any part thereof, or at least one part of a receptor 1-12 or a binding protein that can be included in the antibody of this invention. Such an antibody may act on a specific ligand, such as, but not limited to, that such antibody modulates, decreases, enhances, antagonizes, agonizes, inhibits, stimulates, blocks, inhibits, abrogates and/or interferes with at least one action 1-12 , at least with one activity or binding of I/-12 or activity or binding of receptor 1-12, ip migo, ip 5yi and/or ip mimo. As a non-limiting example, an acceptable anti-1II-12 antibody, specified part or variant of the present invention can bind to at least one 1-12, with its specified part, variant or domain. An acceptable anti-1/-12 antibody, said portion or variant may also optionally affect at least one activity or function of 1-12, such as, but not limited to: EMA, OMA or protein synthesis, release
І/-12, передачу сигналів рецептора 1-12, розщеплення мембран ІІ--12, активність І--12, вироблення та/або синтез І/-12. Термін "антитіло" в подальшому описує антитіла в цілому, фрагменти розщеплення, їхні зазначені частини та варіанти, включаючи антитіла міметики або такі, що містять частини які імітують структуру та/"або функцію антитіл чи зазначених фрагментів чи частини їх, включаючи одноланцюгові антитіла та їхні фрагменти. Функціональні фрагменти включають антиген-зв'язуючі фрагменти, котрі зв'язують І/-12 людини. Даним винаходом охоплюються, наприклад, фрагмент антитіла здатний зв'язуватись із ІЇ-12 чи його частина, включаючи, але не обмежуючись цим: Раб (напр., гідроліз папаіном),I/-12, signaling of receptor 1-12, cleavage of II--12 membranes, activity of I--12, production and/or synthesis of I/-12. The term "antibody" further describes antibodies as a whole, cleavage fragments, specified parts and variants thereof, including antibody mimetics or those containing parts that mimic the structure and/or function of antibodies or specified fragments or parts thereof, including single-chain antibodies and their fragments. Functional fragments include antigen-binding fragments that bind human IL-12. The present invention includes, for example, an antibody fragment capable of binding to IL-12 or a portion thereof, including, but not limited to: Rab (eg, papain hydrolysis),
ЕРар' (напр., гідроліз пепсином та часткове відновлення) та К(аб) (напр., гідроліз пепсином), Тась (напр., гідроліз папаіном) рЕс' (напр., гідроліз пепсином чи плазміном) Ра (напр., гідроліз пепсином, часткове відновлення та реагрегація), Ем або 5сЕм (напр., методами молекулярної біології) (див. напр., Соїїїдап,EPar' (e.g., hydrolysis by pepsin and partial reduction) and K(ab) (e.g., hydrolysis by pepsin), Tas (e.g., hydrolysis by papain) pEs' (e.g., hydrolysis by pepsin or plasmin) Pa (e.g., hydrolysis pepsin, partial reduction and reaggregation), Em or 5cEm (e.g., molecular biology methods) (see, e.g., Soyiiidap,
Іттипоіоду, зирга).Ittypoiodu, zirga).
Такі фрагменти можуть бути одержані ферментативним розщепленням, методами синтезу чи рекомбінації, як відомо з рівня техніки та/або як описано тут. Антитіла також можуть бути одержані у вигляді різноманітних вкорочених форм, використовуючи гени антитіл, в яких один чи більше стоп-кодонів вставлені вище ніж природні стоп-сайти. Наприклад, комбінація генів, що кодують частину важкого ланцюгаSuch fragments may be obtained by enzymatic cleavage, synthesis or recombination methods as known in the art and/or as described herein. Antibodies can also be produced in various truncated forms using antibody genes in which one or more stop codons are inserted above the natural stop sites. For example, a combination of genes encoding part of the heavy chain
Е (ар)»2 може бути сконструйована включенням послідовності ОМА, що кодує СН, домен та/або петельну ланку важкого ланцюга. Різні частини антитіл можуть бути з'єднані разом звичайним хімічним способом, чи виготовлені як цілий протеїн методами генетичної інженерії.E(ar)"2 can be constructed by including the OMA sequence encoding the CH, domain and/or loop link of the heavy chain. Different parts of antibodies can be joined together by conventional chemical means, or made as a whole protein by genetic engineering methods.
Як використано тут, термін "антитіла людини" відноситься до антитіла в якому переважно кожна частина протеїну (напр., СОЕ, каркас, Сі, Сн домени (напр., Сн1!, Сн2г, Сн3З), петля, (Мі, Мн)) є, переважно, неімуногенними для людини, лише з незначними змінами в послідовності та варіантами. Подібним чином, антитіла зазначені, як приматів (мавп, бабуїнів, шимпанзе та ін.), гризунів (мишей, щурів, кролів, морських свинок, ховрахів та ін.) та інших антитіл, зазначених як специфічних для ссавців, виду, підроду, роду, підсімейства, сімейства. Далі, химерні антитіла включають будь-яку комбінацію вищезгаданих антитіл. Такі зміни чи варіації необов'язково та переважно зберігають чи знижують імуногенність у людини чи інших видів, відносяться до немодифікованих антитіл. Отже, антитіла людини відмінними від химерних чи гуманізованих. Відмічено, що антитіла людини можуть продукуватися іншими тваринами, прокаріотичними чи еукаріотичними клітинами, здатними експресувати функціонально перегрупований ген імуноглобуліну людини (напр., важкий та/або легкий ланцюг). Далі, коли антитіло людини є одноланцюговим антитілом, воно може містити лінкерний пептид, який не зустрічається в природних антитілах людини. Наприклад, Ем може містити лінкерний пептид, з такими як два-вісім гліцини чи іншими амінокислотними залишками, які з'єднують різні регіони важкого ланцюга та різні регіони легкого ланцюга. Такий лінкерний пептид може бути визнано як пептид людського походження.As used herein, the term "human antibody" refers to an antibody in which each portion of the protein (eg, SOE, framework, C, C domains (eg, Cn1!, Cn2g, Cn3Z), loop, (Mi, Mn)) are mostly non-immunogenic for humans, with only minor changes in sequence and variants. Similarly, antibodies are specified as primate (monkeys, baboons, chimpanzees, etc.), rodents (mice, rats, rabbits, guinea pigs, gophers, etc.) and other antibodies specified as specific for mammals, species, subgenus, genus , subfamilies, families. Further, chimeric antibodies include any combination of the aforementioned antibodies. Such changes or variations do not necessarily and preferably preserve or reduce immunogenicity in humans or other species, refer to unmodified antibodies. Therefore, human antibodies are different from chimeric or humanized ones. It has been noted that human antibodies can be produced by other animal, prokaryotic or eukaryotic cells capable of expressing a functionally rearranged human immunoglobulin gene (eg, heavy and/or light chain). Further, when the human antibody is a single-chain antibody, it may contain a linker peptide that is not found in natural human antibodies. For example, Em can contain a linker peptide, such as two to eight glycines or other amino acid residues, which connect different regions of the heavy chain and different regions of the light chain. Such a linker peptide can be recognized as a peptide of human origin.
Біспецифічні, гетероспецифічні, гетерокон'югатні чи подібні антитіла також можуть бути використані як моноклональні, переважно людські чи гуманізовані, антитіла які мають специфічне зв'язування з принаймні двома різними антигенами. В даному випадку, однією із специфічностей зв'язування має бути принаймні одна до 1-12 протеїну, а друга має бути до іншого протеїну. Способи одержання біспецифічних антитіл відомі з рівня техніки. Традиційно, рекомбінантні способи одержання біспецифічних антитіл базуються на одночасній експресії двох пар важких ланцюгів-легких ланцюгів імуноглобуліну, де два важких ланцюги мають різні специфічності (Міївіеїп апа Сиеїйо, Маїшге 305: 537 (1983)). Завдяки випадковому виборові важких та легких ланцюгів, ці гібридоми (квадроми) потенційно виробляють суміш з 10 різних молекул антитіл, з яких лише одна має правильну біспецифічну структуру. Очищення правильних молекул, зазвича й проводиться за допомогою афінної хроматографії, яка є досить складною, що призводить до низького виходу продукту. Подібні процедури описано, наприклад, (М/О 93/08829, патенти 05 6210668, 6193967, 6132992, 6106833, 6060285, 6037453, 6010902, 5989530, 5959084, 5959083, 5932448, 5833985, 5821333, 5807706, 5643759, 5601819, 5582996, 5496549, 4676980, УМО 91/00360, УМО 92/00373, ЕР 03089, Тгашпескег ега!І., ЕМВО .). 10: 3655 (1991), З!,гезп еї аі., Мешйоаз іп Епгуто!оду 121: 210 (1986), які повністю включено сюди шляхом посилання).Bispecific, heterospecific, heteroconjugate or similar antibodies can also be used as monoclonal, preferably human or humanized, antibodies that have specific binding to at least two different antigens. In this case, one of the binding specificities must be at least one to 1-12 protein, and the second must be to another protein. Methods of obtaining bispecific antibodies are known from the state of the art. Traditionally, recombinant methods of obtaining bispecific antibodies are based on the simultaneous expression of two pairs of immunoglobulin heavy chains-light chains, where the two heavy chains have different specificities (Miivieip apa Sieiyo, Maishge 305: 537 (1983)). Due to the random selection of heavy and light chains, these hybridomas (quadroms) potentially produce a mixture of 10 different antibody molecules, of which only one has the correct bispecific structure. Purification of the correct molecules is usually done using affinity chromatography, which is quite complex, resulting in low product yields. Подібні процедури описано, наприклад, (М/О 93/08829, патенти 05 6210668, 6193967, 6132992, 6106833, 6060285, 6037453, 6010902, 5989530, 5959084, 5959083, 5932448, 5833985, 5821333, 5807706, 5643759, 5601819, 5582996, 5496549, 4676980, UMO 91/00360, UMO 92/00373, ER 03089, Tgashpeskeg ega!I., EMVO .). 10: 3655 (1991), Z!,gezp ei ai., Meshioaz ip Epguto!odu 121: 210 (1986), which are incorporated herein by reference in their entirety).
Анти-1ІІ-12 антитіла (які також називають антитілами до 1-12) застосовні в способах та композиціях даного винаходу, можуть, необов'язково, характеризуватися високою афінністю зв'язування з 1ІІ/-12 та необов'язково та переважно, низькою токсичністю. Зокрема, придатними для даного винаходу є антитіла, зазначені фрагменти чи варіанти винаходу, де індивідуальні складові, такі як регіон варіабельності, регіон константності та каркас, поодиноко та/або разом, необов'язково та переважно мають низьку імуногенність.Anti-1II-12 antibodies (also called antibodies to 1-12) useful in the methods and compositions of the present invention may, optionally, be characterized by high binding affinity to 1II/-12 and optionally and preferably, low toxicity . In particular, antibodies, fragments or variants of the invention are suitable for this invention, where the individual components, such as the region of variability, the region of constancy and the framework, individually and/or together, optionally and preferably have low immunogenicity.
Антитіла, які можуть бути застосовані в даному винаході, необов'язково можуть характеризуватися їхньою здатністю лікувати пацієнтів на протязі тривалого періоду із явним полегшенням симптомів та низькою та/або прийнятною токсичністю. Низька чи прийнятна імуногенність та/або висока афінність, так само як прийнятні властивості, можуть складати отримані терапевтичні результати. "Низька імуногенність" визначається як перевищення значень НАНА, НАСА чи НАМА відповідей менш ніж на 7595, чи переважно менш ніж на 5095 у пацієнтів та/або перевищення низьких титрів у пацієнтів (менш ніж 300, переважно менш ніж 100 визначених ферментативним імуноаналізом подвійного антигену) І|див., напр., ЄЇПойк ег аї., Гапсеї 344: 1125-1127 (1994), які повністю включено сюди шляхом посилання).Antibodies that may be used in the present invention may optionally be characterized by their ability to treat patients over a long period of time with marked relief of symptoms and low and/or acceptable toxicity. Low or acceptable immunogenicity and/or high affinity, as well as acceptable properties, may account for the therapeutic results obtained. "Low immunogenicity" is defined as exceeding the values of NANA, NASA or NAMA responses by less than 7595, or preferably less than 5095 in patients and/or exceeding low titers in patients (less than 300, preferably less than 100 determined by double antigen enzyme immunoassay) (See, e.g., ЕЙПойк ег ай., Gapsei 344: 1125-1127 (1994), which is incorporated herein by reference in its entirety).
МодельModel
Виділені нуклеїнові амінокислоти даного винаходу можуть бути використані для виробництва принаймні одного антитіла до 1-12 чи вказаного його варіанту, який може бути використаний для визначення чи дії на клітину, тканину, орган чи тварину (включаючи ссавця та людей), діагностування, моніторингу, модулювання, лікування, підвищення, допомоги у попередженні погіршення, зниження симптомів хоча б одного зі станів, пов'язаних з ІІ--12, вибраних з, але не обмежених ними, принаймні одного імунного розладу чи захворювання, кардиоваскулярного розладу чи захворювання, інфекції, злоякісних новоутворень, та/або нейрологічних розладів чи захворювань, чи інших відомих чи визначених як станів, пов'язаних із ІІ -12.The isolated nucleic amino acids of the present invention can be used to produce at least one antibody to 1-12 or a specified variant thereof, which can be used to detect or act on a cell, tissue, organ or animal (including a mammal and humans), diagnose, monitor, modulate , treating, ameliorating, helping to prevent worsening, reducing symptoms of at least one of II--12-related conditions selected from, but not limited to, at least one immune disorder or disease, cardiovascular disorder or disease, infection, malignancy neoplasms, and/or neurological disorders or diseases, or other known or identified conditions associated with II -12.
Такий спосіб може включати застосування ефективної дози складу чи фармацевтичної композиції, яка містить принаймні одне анти-1ІЇ-12 антитіло до клітини, тканини, органу, тварини чи пацієнта для потреб такої модуляції, лікування, підвищення, попередження чи зниження симптомів, ефектів чи механізмів.Such a method may include administering an effective dose of a composition or pharmaceutical composition comprising at least one anti-1II-12 antibody to a cell, tissue, organ, animal or patient for the purposes of such modulation, treatment, enhancement, prevention or reduction of symptoms, effects or mechanisms.
Ефективна кількість може становити від 0.001 до 500тд/кд на одиницю (напр., болус), багатократне чи тривале вживання, чи для досягнення концентрації в сироватці 0.01-5000дд/ті на однократне, багатократне чи тривале вживання, чи будь-який її ефективний діапазон чи значення, як зроблено та визначено з використанням відомих методів та, як описано тут чи відомо з подібних робіт.An effective amount may be from 0.001 to 500 td/ti per unit (eg, bolus), multiple or prolonged administration, or to achieve a serum concentration of 0.01-5000 td/ti per single, multiple or prolonged administration, or any effective range thereof. or values as made and determined using known methods and as described herein or known from similar works.
Усі публікації чи патенти, процитовані тут є повністю включеними сюди шляхом посилання так, як вони відображають рівень техніки на час даного винаходу та/(або допомагають розкриттю та можливості здійснення даного винаходу. До публікацій віднесено будь-які наукові чи патентні публікації, чи будь-яка інформація доступна на носіях, включаючи всі записані, електронні чи друковані носії. Наступні посилання повністю включено шляхом посилання:All publications or patents cited herein are hereby incorporated by reference in their entirety to the extent that they reflect the state of the art at the time of this invention and/or assist in the disclosure and practice of this invention. Publications include any scientific or patent publications, or any which information is available in media, including all recorded, electronic or printed media The following links are incorporated by reference in their entirety:
ІАизибеї, єї аї., ед., Ситепі Ргоїосо!в іп МоіІесшаг Віоіоду, допп УМієу 5 Бопв, Іпс., МУ, МУ (1987-2001);Iaizibei, eyi ai., ed., Sitepi Rgoioso!v ip MoiIesshag Vioiodu, dopp UMieu 5 Bopv, Ips., MU, MU (1987-2001);
ЗатбгоокК, еї аї., МоІесшаг Сіопіпд: А ІГарогаїгу Мапиа), 2па Еайоп, Соїй бргіпд Натбог, МУ (1989);ZatbgookK, ei ai., MoIesshag Siopipd: A Igarogaigu Mapia), 2pa Eayop, Soii brgipd Natbog, MU (1989);
Напомапа І апе, анТтМбодієз, а І арогаїюгу Мапиаї, Соїа бргіпд Нагпог, МУ (1989); СоїПїдап, еї а!., єав., СштепіNapomapa I ape, anTtMbodyez, a I arogaiyugu Mapiai, Soia brgipd Nagpog, MU (1989); SoiPidap, ei a!., eaav., Sshtepi
Ргоїюсоїв іп Іттипоіоду, допп УМієу 5 Бопв, Іпс., МУ (1994-2001); СоїПдап еї аї., Ситепі Ргоїосої!5 іп РгоїєїпRgoiyusoiv ip Ittypoiodu, adjunct of UMieu 5 Bopv, Ips., MU (1994-2001); SoiPdap ei ai., Sitepi Rgoiosoi!5 ip Rgoieip
Зсієпсе, дхопп УМієу 5 Зопв, МУ, МУ, (1997-2001).Zsiepse, dhopp UMieu 5 Zopv, MU, MU, (1997-2001).
Антитіла даного винаходуAntibodies of this invention
Принаймні одне анти-1ІІЇ-12 антитіло даного винаходу може, необов'язково, бути вироблено клітинною лінією, змішаною клітинною лінією, іморталізованими клітинами чи клональною популяцією іморталізованих клітин, як відомо з рівня техніки. |Див. напр., А!Єзирбреї, еї аї., ед., Сиштепі Ргоїосо!5 іп Моїіесшаг Віоіоду, УуоппAt least one anti-1III-12 antibody of the present invention may optionally be produced by a cell line, a mixed cell line, immortalized cells, or a clonal population of immortalized cells, as is known in the art. | See eg.
ММПеу б бопв, Іпс., МУ, ММ (1987-2001); Затьгоок, еї аї., МоІесшаг Сіопіпд: А І арогаїюгу Мапиаї, 2"Еашцоп,MMPeu b bopv, Ips., MU, MM (1987-2001); Zatgook, ei ai., MoIesshag Siopipd: A I arogaiyugu Mapiai, 2"Eashtsop,
Со бргіпд Нагрог, ММ (1989); Напом апа І апе; антиродіез, а І арогаїогу Мапиаї!, Соїа бргіпд Нагбог, МУ (1989); СоїпПідап, єї а!., едв., Ситепі Ргоїосої!в іп Іттипоіоду, допп Улієу б опе, Іпс., МУ (1994-2001); СоїЇїдап еї аі., Сштепі Ргоїосоїв іп Ргоїеїп 5сіепсе, доп УМієу 5 Бопз, МУ, МУ, (1997-2001), всі повністю включено шляхом посилання).So brgipd Nagrog, MM (1989); Napom apa and ape; antirodiez, and I aroghaiogu Mapiai!, Soia brgipd Nagbog, MU (1989); SoipPidap, yei a!., edv., Sitepi Rgoiosoi!v ip Ittipoidodu, dopp Ulieu b ope, Ips., MU (1994-2001); SoiYidap ei ai., Sstepi Rgoiosoiv ip Rgoieip 5siepse, dop UMieu 5 Bopz, MU, MU, (1997-2001), all fully incorporated by reference).
Антитіла людини, специфічні до протеїну І/-12 людини чи його фрагментів, можуть мати перевагу порівняно з відповідним імуногенним антигеном, таким як виділений та/або протеїном 1І/-12 чи його частиною (включаючи синтетичні молекули, такі як синтетичні пептиди). Інші специфічні чи загальні антитіла ссавців також можуть одержати перевагу. Виготовлення імуногенних антигенів та виробництво моноклональних антитіл може бути виконано за прийнятною методикою.Human antibodies specific for human I/-12 protein or fragments thereof may have an advantage over a corresponding immunogenic antigen, such as isolated and/or I/-12 protein or a portion thereof (including synthetic molecules such as synthetic peptides). Other specific or general mammalian antibodies may also be preferred. The production of immunogenic antigens and the production of monoclonal antibodies can be performed according to an acceptable method.
Наприклад, гібридома може бути одержана злиттям прийнятних іморталізованих клітинних ліній (напр., мієломні клітинні лінії такі, як, але не обмежуючись цими, 5рг2/0, 5р2/0-АС14, МБО, М51, М52, АЕ-1, І. 5, »243, Р3УХбЗАд8. 653, 5ра ЗАЗ, 5ра2 МАЇ, 5ра2 551, 5ра 5АБ, 0937, МІ А 144, АСТ ІМ, МОЇ Т4, СА-1, Ч"0ОАКАТ,For example, the hybridoma can be obtained by fusion of acceptable immortalized cell lines (eg, myeloma cell lines such as, but not limited to, 5рg2/0, 5р2/0-АС14, MBO, M51, M52, AE-1, I. 5 , »243, R3UHbZAd8. 653, 5ra ZAZ, 5ra2 MAI, 5ra2 551, 5ra 5AB, 0937, MI A 144, AST IM, MOI T4, SA-1, Ch"0OAKAT,
МЕНІ, К-562, СО5, ВАШІ, МІН 313, НІ-60, МГА 144, МАМАЇМУА, МЕШКО 2А, чи подібні, чи гетеромієломи, продукти їх злиття), чи будь-які клітини або злиті клітини, одержані з них, чи інші прийнятні клітинні лінії відомі з рівня техніки (Див. напр., м/млу.аїсс.ого, мули. Пегесп.соті| та подібні, до клітин, що продукують антитіла, такими, як але не обмежуючись ними, виділені чи клоновані клітини селезінки, периферичної крові, лімфи, мигдалеподібної залози, чи інших, які містять імунні чи В-клітини, чи інші клітини, які експресують важкий чи легкий ланцюг, константний чи варіабельний регіон чи каркас чи СОК-послідовність, ендогенні так само, як гетерогенні нуклеїнові кислоти, рекомбінантні чи ендогенні вірусів, бактерій, водоростей, прокаріотів, амфібій, комах, рептилій, риб, ссавців, гризунів, коней, баранів, кози, приматів, еукаріотів, геномну ОМА, СОМА, ОМА, мітохондріальну ОМА чи КМА, хлоропластну ОМА чи КМА, ппПКМА,MENI, K-562, CO5, VASHI, MIN 313, NI-60, MHA 144, MAMAIMUA, MESHKO 2A, or similar, or heteromyelomas, their fusion products), or any cells or fusion cells derived from them, or other suitable cell lines are known in the art (see, e.g., m/mlu.aiss.ogo, mule. Pegesp.soti| and the like, to cells producing antibodies, such as, but not limited to, isolated or cloned cells spleen, peripheral blood, lymph, tonsil, or other that contain immune or B cells, or other cells that express a heavy or light chain, constant or variable region or framework or SOC sequence, endogenous as well as heterogeneous nucleic acids, recombinant or endogenous viruses, bacteria, algae, prokaryotes, amphibians, insects, reptiles, fish, mammals, rodents, horses, rams, goats, primates, eukaryotes, genomic OMA, SOMA, OMA, mitochondrial OMA or CMA, chloroplast OMA or KMA, ppPKMA,
ТЕМА, ТЕМА, одно-, дво-, чи три ланцюгову, гібридизовану, та подібну чи їх комбінацію. ІДив. напр., зирга, апа Соїїдап, Іттипо!оду, зирга, спарієг 2, який повністю включено шляхом посилання|.SUBJECT, SUBJECT, single-, double-, or triple-stranded, hybridized, and similar or a combination thereof. IDiv. e.g., zirga, apa Soiidap, Ittypo!odu, zirga, sparieg 2, which is fully incorporated by reference|.
Клітини, що продукують антитіла можуть бути одержані з периферичної крові чи переважно, селезінки чи лімфатичних вузлів людини чи інших прийнятних тварин, котрі були імунізовані цільовим антигеном.Antibody-producing cells can be obtained from peripheral blood or, preferably, the spleen or lymph nodes of a human or other suitable animal that has been immunized with the target antigen.
Інша прийнятна клітина-хазяїн може також бути використана для експресії гетерогенної чи ендогенної нуклеїнової кислоти, яка кодує антитіло, специфічний фрагмент чи його варіант, згідно з представленим винаходом. Злиті клітини (гібридоми) чи рекомбінантні клітини можуть бути виділені з використанням селективних культуральних умов чи інших прийнятних відомих методів, та клоновані обмеженим розведенням чи відбором клітин, чи іншим відомим способом. Клітини, які виробляють антитіла з бажаною специфічністю можуть бути відібрані прийнятним аналітичним методом (напр., ЕГІБЗА).Another acceptable host cell can also be used to express a heterogeneous or endogenous nucleic acid that encodes an antibody, a specific fragment, or a variant thereof, according to the present invention. Fusion cells (hybridomas) or recombinant cells can be isolated using selective culture conditions or other acceptable known methods, and cloned by limited dilution or selection of cells, or by other known methods. Cells that produce antibodies with the desired specificity can be selected by an acceptable analytical method (eg, EGIBZA).
Можуть бути використані інші прийнятні способи одержання чи виділення антитіл необхідної специфічності, включаючи, але не обмежуючись цим, способи за допомогою яких відбирають рекомбінантні антитіла з пептидної чи протеїнової бібліотеки напр. але не обмежуючись цим, бактеріофагової, рибосомної, олігонуклеотидної, ЕММА, СОМА чи подібних; Інапр., якщо доступні, з дисплейних бібліотекOther acceptable methods of obtaining or isolating antibodies of the desired specificity may be used, including, but not limited to, methods by which recombinant antibodies are selected from a peptide or protein library, e.g. but not limited to, bacteriophage, ribosomal, oligonucleotide, EMMA, SOMA or the like; E.g., if available, from display libraries
Сатрпдде апіроду Тесппоїодієз, Сатргпддевзпігтє. ШК; Могрпозув, Мапіпвгеід/Ріапед9, ОЕ; Віомайоп,Satrpdde apirodu Tesppoiodiez, Satrgpddevzpigtye. SHK; Mogrpozuv, Mapipvgeid/Riaped9, OE; Wiomayop,
Арегдеєп, бсойапа, ОК: Віоіпмепі, па, Змедеп; Оуах Согр., Епгоп, Апйутах/Віозіїє; Хота, ВегКкеїєу, СА;Aregdeep, bsoyapa, OK: Vioipmepi, pa, Zmedep; Ouah Sogr., Epgop, Apyutakh/Vioziye; Hota, WegKkeieu, SA;
Іхзуз. Зее, напр., ЕР 368, 684, РСТ/5891/01134; РСТ/5892/01755; РСТ/2В92/002240; РСТ/2В92/00883;Ikhzuz See, e.g., ER 368, 684, PCT/5891/01134; PCT/5892/01755; PCT/2B92/002240; PCT/2B92/00883;
РСТ/ав93/00605; 05 08/350260 (5/12/94); РСТ/а894/01422; РСТ/а894/02662; РСТ/2897/01835; (САТ/МКС);PCT/ав93/00605; 05 08/350260 (5/12/94); PCT/а894/01422; PCT/а894/02662; PCT/2897/01835; (SAT/ISS);
М/090/14443; М/090/14424; МО90/14430; РСТ/О594/1234; М/092/18619; М/096/07754; (Зспррв); ЕР 614989 (Могрпобувз); УУ095/16027 (Віоіпулеп); УУО88/06630; М/090/3809 (Оуах); 5 4,704,692 2 (Епгоп);M/090/14443; M/090/14424; MO90/14430; PCT/O594/1234; M/092/18619; M/096/07754; (Soviet Union); ER 614989 (Mogrpobuvz); UU095/16027 (Vioipulep); UUO88/06630; M/090/3809 (Ouach); 5 4,704,692 2 (Epgop);
РСТ/Ю591/02989 (АпПутах); УМО89/06283; ЕР 371998; ЕР 550400; (Хота); ЕР 229046; РСТ, 07149 (Іхвув)|; чи стохастично генерованих пептидів чи протеїнів - (05 5723323, 5763192, 5814476, 5817483, 5524514, 5976862, МО 86/05803, ЕР 590689 (Іхзуз, тепер Арріїеа МоїІесшаг Емоїшіоп (АМІЕ) кожну з яких повністю включено шляхом посилання)|, або такі, що застосовуються при імунізації трансгенних тварин Інапр., 5СІО тісе, Мдиуєп еї аї., Місгобріо!. Іттипої!. 41: 901-907 (1997); Запани еї аї., Ст. Аем. Віоїесппої. 16: 95-118 (1996); Егеп еї аї., Іттипої. 93: 154-161 (1998), які повністю включено шляхом посилання|, котрі здатні виробляти певний перелік антитіл людини, як відомо з рівня техніки та/або описано тут. Такі методики, включаючи, але не обмежуючись цим, "гірозоте аїізріау" (Напез еї аї., Ргос. Май). Асад. 5сі. ОБА, 94: 4937- 4942 (Мау 1997); Напез єї аїЇ., Ргос. Май. Асад. Осі. ОБА, 95: 14130-14135 (Мом. 1998))|; методики виробництва антитіл за допомогою поодиноких клітин Інапр., спосіб одержання антитіл селектованих лімфоцитів ("ЗІГАМ") (05 раї. Мо. 5,627,052, УМеп еї аї., 9. Іттипої. 17: 887-892 (1987); Варсоок еї аї., Ргос.PCT/Y591/02989 (ApPutakh); UMO89/06283; ER 371998; ER 550400; (Hota); ER 229046; PCT, 07149 (Ikhvuv)|; or stochastically generated peptides or proteins - (05 5723323, 5763192, 5814476, 5817483, 5524514, 5976862, MO 86/05803, EP 590689 (Ikhzuz, now Arriea MoiIesshag Emoisiop (AMIE) each of which is incorporated by reference in its entirety) , which are used in the immunization of transgenic animals, E.g., 5SIO tese, Mdyuep ei ai., Misgobryo!. Ittypoi!. 41: 901-907 (1997); Zapany ei ai., St. Aem. Vioiespoi. 16: 95-118 ( 1996); Egep et al., Ittypoi. 93: 154-161 (1998), which are hereby incorporated by reference in their entirety, capable of producing a specific list of human antibodies as known in the art and/or described herein. Such techniques, including but not limited to this, "gyrozote aiizriau" (Napez ei ai., Rgos. May). Asad. 5si. OBA, 94: 4937- 4942 (Mau 1997); Napez eyi aiYi., Rgos. May. Asad. Osi. OBA , 95: 14130-14135 (Mom. 1998))|; methods of antibody production with the help of single cells. For example, the method of obtaining antibodies of selected lymphocytes ("ZIGAM") (05 rai. Mo. 5,627,052, UMep ei ai., 9. Ittipoi. 17: 887-892 (1987); Varsook ei ai. , Rhos.
Май. Асад. Осі. ОБА 93: 7843-7848 (1996)); мікракрапельно-гелева та проточна цитометрія (Роуеї! еї аї.,May Asad Axes BOTH 93: 7843-7848 (1996)); microdrop-gel and flow cytometry (Rouei! ei ai.,
Віоїеснпої!. 8: 333-337 (1990); Опе Сеї! Зувієтв, Сатрбгідде, МА; Стгау еї а)., 9). Ітт. Меїй.182: 155-163 (1995);Vioyesnpoi!. 8: 333-337 (1990); Ope Sei! Zuvietv, Satrbigdde, MA; Stgau eyi a)., 9). Etc. Meiy. 182: 155-163 (1995);
Кеппу еї аї., Віоїесппої!. 13: 787-790 (1995)); відбір В-клітин |БіеепракКкКег"з еї аї., Моїес. Віої. Нерогів 19: 125- 134 (1994); допак еї а!ї., Ргодгез55 Віоїесі, Мої. 5, Іп Міго Іттипігайоп іп Нубгідота Тесппоіоду, Воїтераєск, ей., Еівемієг Зсіеєпсе РибіїзНегз В. М., Атвіегдат, МемШепапавз (1988)|.Keppu ei ai., Vioiesppoi!. 13: 787-790 (1995)); selection of B-cells |BieeprakKkKeg"z ei ai., Moies. Vioi. Nerohiv 19: 125-134 (1994); dopak ei a!i., Rgodgez55 Vioiyesi, Moi. 5, Ip Migo Ittipigayop ip Nubgidota Tesppoiodu, Voiterayesk, ei ., Eivemieg Zsieepse RybiizNegz V. M., Atviegdat, MemShepapavz (1988)|.
Також можуть бути використані способи створення чи гуманізації антитіл не людини та людини, які є загально відомими з рівня техніки. Загалом, гуманізовані чи сконструйовані антитіла мають один чи більше амінокислотних залишків з джерела, яке не є людиною, напр., але не обмежуючись до, миші, щура, кроля, примата - не людини чи інших ссавців. Ці амінокислотні залишки людини часто називають "імпортні" залишки, котрі звичайно одержуються з "Імпортного" варіабельного, константного чи іншого домену відомих послідовностей людини. Відомі послідовності Ід людини надано, напр.,Methods of creating or humanizing non-human and human antibodies that are generally known in the art can also be used. In general, humanized or engineered antibodies have one or more amino acid residues from a non-human source, eg, but not limited to, mouse, rat, rabbit, non-human primate, or other mammals. These human amino acid residues are often called "import" residues, which are usually derived from the "Import" variable, constant, or other domain of known human sequences. The known human Id sequences are given, e.g.,
Гмилллу. порі. піт.пій.дом/епігег/диегу.їсді; мили. агсс.ого/рпаде/пар.ніті; млмлу.всідевісот/; млмлму.арсат.соту/; млмли.апіїродугезоцгсе.сот/опіїпесотр. (ті; мли. рибіїс.іазіасге.еди/"реаго/гезеагспіооів. піті; мумлу. тдеп.ипіпеїідеІрего.ае/5О/ЛТЛТ.НЕті; мулу. м пітеетап.сот/ттипоіоду/СНОБ/Ккируоб. піт; мул Тюгагу Фіпкдневіого/12429/ЛІттипе/АНТМброау. піті; мули. пи ті.ого/дгапівЛесіигев/1996/мар/; мли. ра. сат.ас.ик/"тгс7/тпікеіїтадев.піті; мули. апіродугезоцгсе.сот/; тер.Нагмага.еди/Віо іпко/ттипоіоду.піті; мли. іттипоіодуїїпКосот/; рагтрохлмиві.еди/-Нсепіег/Іпаех. пі ті; мумлу.ріоїтесп. шт ейц/-псі/ 0 мумлу.ребіо.сот/ра/340913/340913.піті; /- мумлу.паї. изда.дом/ажіс/рирз/антироду/; мули. гп.епіте-и.ас.|р/"уазинію/Еїїва. піті; мм. ріодевзідп.сот/аріе.азр; млмлу. спе ик/ахр/асз/даміезлЛіпкв.піті;. милу. ріотесн. й. ейи/Тосі/ргоїосої.піті;. мли. ізаспеїого/зіев део.піті; ахітиН Ітіпі-тагриго.де/"гек/АЕР Бан. піті; Базегу.исі.Кип.пі/ігааївЛіпке1.піті; мумли.тесабр. ипі- нпа.де/лттипо.Юте. пуми. еди/; мулу. тто-сре.сат. ас. икК/ті-дос/риріїс/ІМТ ВО. піті; мила. рі ипат.тх/міг/М тісе.піті; ітд. спивс. 81047; мили. Віоспет. сі. ас. ик/етапіп/арз/Іпаєх. піті; аНТпроау.рак.ас.ик/; ардеп.смт.ати.едиЛарлиуммардеп. піті; мумлу.ипі2н.сп/"попедде/АНОзетіпаг/5іІїдеб1. пЕті; мумлм.сгувіВрК. ас.ик/"ирс9о75/; мм. пітг. тго.ас.ик/СС/ссаємд/ссаємо. піт; милу. рак. сат.ас.ик/е тгс7/питапізайоп/ТАННР. пІті; млмли. рі пат. тх/міг/5їисшге/внаї аїт. піті; ммлиу. ріозсі. тівзоцШгі.еди/5тіпор/іпаєх. піті; млмли.сгуві.ріос.сат. ас.ик/Утоїїпал//лер-радез/Реріувроцесн.пі ті; мали. |егіпі ел ргодисів. піт; мумлу. раїепів.Ірт.сот/ірт.піті. Кабаї єї аі., Зедоепсез ої Ргоїеїп5 ої Іттипоіодіса! Іпіегевзі, 0. 5. Оері. Неанйт (1983), повністю включено шляхом посилання). Дані імпортні послідовності можуть бути використані зниження імуногенності чи зниження, підвищення чи модифікації зв'язування, афінності, оп-гаїе, ой-гаїе, авідності, специфічності, періоду напів-розкпаду, чи інших прийнятних характеристик, як відомо з рівня техніки. Загалом, частина чи вся СОК-послідовність людини чи не людини зберігається тоді як константний та варіабельний регіони заміщуються амінокислотами людини чи іншими. Антитіла також, необов'язково, можуть бути гуманізовані зі збереженням високої афінності до антигену та інших бажаних біологічних властивостей. Щоб досягти цієї мети, гуманізовані антитіла можуть бути, необов'язково, одержані в результаті аналізу батьківських послідовностей та різноманітних концептуальних гуманізованих продуктів з використанням тривимірних моделей батьківських та гуманізованих послідовностей. Тривимірні моделі імуноглобуліну, взагалі, доступні та добре знайомі тим, хто обізнаний в рівні техніки.Hmyllu pores sweat.piy.dom/epigeg/diegu.isdi; cute agss.ogo/rpade/par.niti; mlmlu.vsidevisot/; mlmlmu.arsat.sotu/; mlmly.apiirodugezotsgse.sot/opiipesotr. (ti; mly. ribiis.iaziasge.edi/"reago/gezeagspiooiv. piti; mumlu. tdep.ipipeiideIrego.ae/5O/LTLT.NETi; mulu. m piteetap.sot/ttypoiodu/SNOB/Kkyruob. pit; mul Tyugagu Fipkdneviogo /12429/LIttipe/ANTMbroau. piti; muly. pi ti.ogo/dgapivLesiigev/1996/mar/; mly. ra. sat.as.ik/"tgs7/tpikeiitadev.piti; muly. apirodugezotsgse.sot/; ter.Nagmaga .edi/Vio ipko/typoiodu.piti; mli. ittypoioduiipKosot/; ragtrokhlmyvi.edi/-Nsepieg/Ipaeh. pi ti; mumlu.rioitesp sht eits/-psi/ 0 mumlu.rebio.sot/ra/340913/340913. piti; /- mumlu.pai. izda.dom/ajis/ryrz/antirodu/; muly. gp.epite-y.as.|r/"uaziniu/Eiiva. piti; mm. riodevzidp.sot/arie.azr; mlmlu . spe ik/akhr/asz/damiezlLipkv.piti;. milu. riotesn. y. eyi/Tosi/rgoiosoi.piti;. mly. izaspeiogo/ziev deo.piti; akhitN Itipi-tagrygo.de/"hek/AER Ban. piti; Bazegu.ysi.Kip.pi/igaaivLipke1.piti; mumly.tesabr. ipin-npa.de/ltypo.Yute. pumi. edi/; mulu. tto-sre.sat. as. ikK/ti-dos/ryriis /IMT VO. piti; mila. ri ipat.thx/mig/M tise.piti; etc. spivs. 81047; mili. Viospet. si. as. ik/eta pip/arz/Ipayeh. sweat; aNTproau.rak.as.ik/; ardep.smt.aty.edi Larlyummardep. sweat; mumlu.ypi2n.sp/"popedde/ANOzetipag/5iIideb1. pEti; mumlm.sguviVrK. as.ik/"irs9o75/; mm translation tgo.as.ik/SS/ssayemd/ssayemo. sweat; cute cancer. sat.as.ik/e tgs7/pitapizayop/TANNR. drinks; murmured ri pat. tx/mig/5iisshge/vnai ait. sweat; hmm riossi tivzotsShgi.edi/5tipor/ipayeh. sweat; mlmly.sguvi.rios.sat. as.ik/Utoiipal//ler-radez/Reriuvrotesn.pi ti; had |Egipi el Rgodisiv. sweat; mumble raiepiv.Irt.sot/irt.piti. Kabai ei ai., Zedoepsez oi Rgoieip5 oi Ittipoiodisa! Ipiegewzi, 0. 5. Oeri. Neanith (1983), incorporated by reference in its entirety). These import sequences can be used to decrease immunogenicity or decrease, increase or modify binding, affinity, op-gaie, o-gaie, avidity, specificity, half-life, or other acceptable characteristics, as known in the art. In general, some or all of the human or non-human SOC sequence is conserved while the constant and variable regions are replaced by human or other amino acids. Antibodies can also, optionally, be humanized while maintaining high affinity to the antigen and other desired biological properties. To achieve this goal, humanized antibodies can optionally be derived from analysis of parental sequences and various conceptual humanized products using three-dimensional models of parental and humanized sequences. Three-dimensional models of immunoglobulin are generally available and well known to those skilled in the art.
Доступні комп'ютерні програми, які ілюструють та відображають можливі тривимірні конформаційні структури відібраних кандидатів серед імуноглобулінових послідовностей. Дослідження цих відображень дозволяє проаналізувати можливі ролі залишків у функціонуванні кандидатних імуноглобулінових послідовностей, напр., аналіз залишків, які впливають на здатність кандидатних імуноглобулінів на зв'язування з антигеном. Таким чином ЕК залишки можуть бути відібрані та комбіновані з консенсних та імпортних послідовностей, таким чином, що будуть одержані бажані характеристики антитіл, такі як збільшена афінність до цільового антигену(ів). Загалом, СОК-залишки прямо та більш значно включаються у вплив на зв'язування антигену. Гуманізація та конструювання антитіл даного винаходу може бути виконана за допомогою будь-якого відомого способу, такого як, але не обмежуючись цим, описані в: (Ми/іпіег (Чопез еї аї., Машге 321: 522 (1986); Віесптапп еї а!., Машге 332: 323 (1988); Метоеуеп еї аї., Зсіеєпсе 239: 1534 (1988)), 5ітз еї аї., 9. Іттипої. 151: 2296 (1993); Споїпіа апа Г ез5К, 9. Мо. Вісі. 196: 901 (1987), Сапег єї а!., Ргос. Майї). Асай. сі. 0. 5. А. 89: 4285 (1992); Ргевіа вї аї., 9У. Іттипої. 151: 2623 (1993), О5 раїепі Мов : 5723323, 5976862, 5824514, 5817483, 5814476, 5763192, 5723323, 5766886, 5714352, 6204023, 6180370, 5693762, 5530101, 5585089, 5225539, 4816567, РСТ/: О598/16280, 00596/18978, 0591/09630, 0591/05939,Computer programs are available that illustrate and display possible three-dimensional conformational structures of selected candidates among immunoglobulin sequences. The study of these maps allows to analyze the possible roles of residues in the functioning of candidate immunoglobulin sequences, eg, the analysis of residues that affect the ability of candidate immunoglobulins to bind to an antigen. In this way, EC residues can be selected and combined from consensus and import sequences in such a way that the desired antibody characteristics, such as increased affinity for the target antigen(s), will be obtained. In general, SOC residues are directly and more significantly involved in influencing antigen binding. Humanization and construction of the antibodies of the present invention can be accomplished by any known method, such as, but not limited to, those described in: (Mi/ipieg (Copez et al., Mashge 321: 522 (1986); Wiesptapp et al! ., Mashge 332: 323 (1988); Metoeuep ei ai., Zsieepse 239: 1534 (1988)), 5its ei ai., 9. Ittipoi. 151: 2296 (1993); Spoipia apa G ez5K, 9. Mo. Visi . 196: 901 (1987), Sapeg eyi a!., Rgos. Maiyi). Asai. si. 0. 5. A. 89: 4285 (1992); Rgevia vy ai., 9U. And so on. 151: 2623 (1993), О5 раїепі Мов : 5723323, 5976862, 5824514, 5817483, 5814476, 5763192, 5723323, 5766886, 5714352, 6204023, 6180370, 5693762, 5530101, 5585089, 5225539, 4816567, РСТ/: О598/16280, 00596/18978, 0591/09630, 0591/05939,
О594/01234, 4889/01334, 891/01134, 1892/01755; М/090/14443, УМО90/14424, М090/14430, ЕР229246, усі повністю включено шляхом посилання, включаючи посилання приведені в них).O594/01234, 4889/01334, 891/01134, 1892/01755; M/090/14443, UMO90/14424, M090/14430, ЕР229246, all fully incorporated by reference, including references therein).
Анти-1/-12 антитіла також можуть бути одержані імунізацією трансгенних тварин (напр., мишей, щурів,Anti-1/-12 antibodies can also be obtained by immunization of transgenic animals (eg, mice, rats,
ховрахів, приматів, але не людей, та їм подібних) здатних виробляти різноманітні антитіла людини, як описано та/або відомо з рівня техніки.gophers, primates, but not humans, and the like) capable of producing a variety of human antibodies as described and/or known in the art.
Клітини, що продукують анти-ІЇ/-12 антитіла також можуть бути виділені з таких тварин та бути іморталізованими прийнятними способоми, такими як способи приведені тут.Cells producing anti-II/-12 antibodies can also be isolated from such animals and immortalized by suitable methods, such as those described herein.
Трансгенні миші, які можуть виробляти спектр антитіл людина, що зв'язуються з антигенами людини, можуть бути одержані відомими способами І|напр., але не обмежуючись ними, . 5. Раї. Мов: 5,770,428, 5,569,825, 5,545,806, 5,625,126, 5,625,825, 5,633,425, 5,661,016 апа 5,789,650 видані на Гопрегу еї а).;Transgenic mice that can produce a spectrum of human antibodies that bind to human antigens can be obtained by known methods, such as, but not limited to, . 5. Paradise. Languages: 5,770,428, 5,569,825, 5,545,806, 5,625,126, 5,625,825, 5,633,425, 5,661,016 apa 5,789,650 issued on Gopreg ei a).;
УаКобоміїв еї аі. УУО 98/50433, ЧдаКобоміїв еї а. УУО 98/24893, І опрего єї аІ. УУО 98/24884, І опрего еї а. МО 97/13852, І опрего єї а. МО 94/25585, Киспепараїе єї аі. УУО 96/34096, Киспепараїе еї аІ. ЕР 0463151 ВІ1,UaKobomiiv ei ai. UUO 98/50433, ChdaKobomiiv eyi a. UUO 98/24893, I oprego eyi aI. UUO 98/24884, I oprego her a. MO 97/13852, I oprego eyi a. MO 94/25585, Kispeparaye eyi ai. UUO 96/34096, Kispeparaye ei aI. ER 0463151 VI1,
Киспепараїе єї а. ЕР 0710719 АТ, Бигапі еї а. 05. Раї. Мо. 5,545,807, Впддетапп еї аі. УУ/УО 90/04036,Kispeparaie eyi a. ER 0710719 JSC, Bigapi eyi a. 05. Paradise. Mo. 5,545,807, Vpddetapp ei ai. UU/UO 90/04036,
Вгоддетапп еї аї. ЕР 0438474 В 1, І опрегу еї аі. ЕР 0814259 А2, І опрего еї аІ. ОВ 2272440 А, І опрего еї а.Vgoddetapp ei ai. ER 0438474 В 1, I opregu ei ai. ER 0814259 A2, I oprego ei aI. OV 2272440 A, I oprego eyi a.
Майте 368: 856-859 (1994), Тауїог єї аї., Іпі. Іттипої. 6 (4) 579-591 (1994), Стгееп вї аї, Майте Сепеїйсв 7: 13- 21 (1994), Мепаеє? еї аї., Майшге Сепеїйсв 15: 146-156 (1997), єї аї., Мисієїс Асідз Незєагсі 20 (23): 6287-6295 (1992), Тиайоп еї аї., Ргос Маї! Асай 5сі ОБА 90 (8) 3720-3724 (1993), І опрего еї аї., Іпї Вем Іттипої 13 (1): 65-93 (1995) апа Рівпмаїа еї аї., Маї Віоїесппої! 14 (7): 845-851 (1996), котрі повністю включено шляхом посилання).Mayte 368: 856-859 (1994), Tauiog et al., Ipi. And so on. 6 (4) 579-591 (1994), Stgeep vy ai, Mayte Sepeiysv 7: 13- 21 (1994), Mepaee? ei ai., Maishge Sepeiysv 15: 146-156 (1997), ei ai., Misiyeis Asidz Nezeagsi 20 (23): 6287-6295 (1992), Tiayop ei ai., Rgos Mai! Asai 5si OBA 90 (8) 3720-3724 (1993), I oprego ei ai., Ipi Vem Ittipoi 13 (1): 65-93 (1995) apa Rivpmaia ei ai., Mai Vioiesppoi! 14 (7): 845-851 (1996), the entirety of which is incorporated by reference).
В загалі, ці миші включають принаймні одну ОМА, що містить трансген з принаймні одного локусу імуноглобуліну людини, що функціонально перебудований, чи такий, що може бути підданий функціонаній перебудові. Ендогенні локуси імуноглобуліну в таких мишей можуть бути подрібнені чи видалені для того, щоб пригнітити здатність тварини виробляти антитіла, кодовані ендогенними генами.In general, these mice include at least one OMA containing a transgene from at least one human immunoglobulin locus that is functionally rearranged or can be functionally rearranged. Endogenous immunoglobulin loci in such mice can be truncated or deleted to suppress the animal's ability to produce antibodies encoded by the endogenous genes.
Скринінг антитіл на специфічність зв'язування з подібними протеїнами чи фрагментами може бути просто проведений за допомогою дисплейних пептидних бібліотек. Цей метод включає скринінг великих колекцій пептидів для виявлення окремих, які мають потрібні функції чи властивості. Скринінг антитіл в пептичних дисплейних бібліотеках є дуже відомим в практиці. Дисплейні пептидні послідовності можуть мати довжину від З до 5000 чи більше амінокислот, найчастіше довжина становить 5-100 амінокислот, та ще частіше від 8 до 25 амінокислот. На додаток до способів генерування пептидних бібліотек прямим хімічним синтезом, описано декілька методів рекомбінантної ОМА.Screening of antibodies for the specificity of binding to similar proteins or fragments can be easily carried out using display peptide libraries. This method involves screening large collections of peptides to identify those that have the desired function or property. Antibody screening in peptic display libraries is well known in practice. Display peptide sequences can be from 3 to 5000 or more amino acids in length, most commonly 5-100 amino acids in length, and even more commonly 8 to 25 amino acids in length. In addition to the methods of generating peptide libraries by direct chemical synthesis, several methods of recombinant OMA have been described.
Один тип включає відображення пептидної послідовності на поверхні бактеріофагу чи клітини. Кожний бактеріофаг чи клітина містить нуклеотидну послідовність, що кодує, зокрема дисплейну пептидну послідовність. Такий метод описано в |РСТ Раїепі Рибіїсайоп Мо5 91/17271, 91/18980, 91/19818, та 93/08278). Інші системи генерування бібліотек пептидів мають риси як хімічного синтезу іп міго так і рекомбінантних методів. Див. РСТ Раїепі Рибіїсайоп Мо5. 92/05258, 92/14843, та 96/19256. Див. також, 0. 5.One type involves displaying a peptide sequence on the surface of a bacteriophage or cell. Each bacteriophage or cell contains a nucleotide sequence that encodes, in particular, a display peptide sequence. This method is described in PCT Raiepi Rybiisayop Mo5 91/17271, 91/18980, 91/19818, and 93/08278). Other systems for generating peptide libraries have features of both chemical synthesis and recombinant methods. See PCT Raiepi Rybiisayop Mo5. 92/05258, 92/14843, and 96/19256. See also, 0. 5.
Раїепі Мов. 5,658,754; апа 5,643,768)|. Пептидні дисплейні бібліотеки, вектори та скринінгові набори комерційно доступні у таких поставників як: Ппмігодеп (Сагізрайд, СА), апа Сатьгідде Антироду Тесппоіодіе5 (Сатрьгіддезпіге, ОК). Зеє, напр., Ш. 5. Раї. Мо5. 4704692, 4939666, 4946778, 5260203, 5455030, 5518889, 5534621, 5656730, 5763733, 5767260, 5856456, виданих на Еплоп; 5223409, 5403484, 5571698, 5837500, виданих на Оуах, 5427908, 5580717, виданих на АПйутах; 5885793, виданих на Сатюрюгідде антиродуRaiepi Mov. 5,658,754; apa 5,643,768)|. Peptide display libraries, vectors, and screening kits are commercially available from suppliers such as: Ppmigodep (Saghizride, CA), apa Satgidde Antirodou Tesppoiodie5 (Satrgiddespige, OK). See, for example, Sh. 5. Rai. Mo5. 4704692, 4939666, 4946778, 5260203, 5455030, 5518889, 5534621, 5656730, 5763733, 5767260, 5856456, issued on Eplop; 5223409, 5403484, 5571698, 5837500, issued in Ouah, 5427908, 5580717, issued in APyut; 5885793, issued on Saturyugidde of the anti-genus
ТесппоІодіе5; 5750373, виданих на Сепепіесп, 5618920, 5595898, 5576195, 5698435, 5693493, 5698417, виданих на Хота, Соїїїдап, зирга; А!,зибеї, зирга; ог затрьгоок, зирга. Кожний з перерахованих патентів та публікацій включено повністю шляхом посилання).ThesppoIodie5; 5750373, issued on Sepepiesp, 5618920, 5595898, 5576195, 5698435, 5693493, 5698417, issued on Khota, Soiida, Zirga; A!, zibei, zirga; oh zatrgook, zirga. Each of the listed patents and publications is incorporated by reference in its entirety).
Антитіла даного винаходу можуть також бути вироблені з використанням принаймні однієї нуклеїнової кислоти, що кодує анти-1Ї-12 антитіло для створення трансгенних тварин чи ссавців таких як козлів, корів, коней, овець, та подібних, для вироблення таких антитіл в їхньому молоці. Такі тварини можуть бути створені з використанням відомих методів. |Див. напр., але не обмежуючись цими, О5 раїепі пов. 5,827,690; 5,849,992; 4,873,316; 5,849,992; 5,994,616; 5,565,362; 5,304,489, та подібними, кожне з яких повністю включено шляхом посилання).Antibodies of the present invention may also be produced using at least one nucleic acid encoding an anti-1Y-12 antibody to generate transgenic animals or mammals such as goats, cows, horses, sheep, and the like, to produce such antibodies in their milk. Such animals can be created using known methods. | See e.g., but not limited to these, О5 raiepi pov. 5,827,690; 5,849,992; 4,873,316; 5,849,992; 5,994,616; 5,565,362; 5,304,489, et seq., each of which is incorporated by reference in its entirety).
Антитіла даного винаходу додатково можуть бути вироблені з використанням принаймні однієї нуклеїнової кислоти, що кодує анти-1ІЇ-12 антитіло для створення трансгенних рослин та культивованих рослинних клітин (напр., але не обмежуючись ними, тютюн, кукурудза) котрі продукують такі антитіла, зазначені частини чи варіанти в частинах рослин чи в клітинах культивованих з них. Як не обмежуючий приклад, трансгенние листя тютюну, які експресує рекомбінантні протеїни було успішно застосовано для створення великої кількості рекомбінантних протеїнів, напр., з використанням індуцибельного промотору.Antibodies of the present invention can additionally be produced using at least one nucleic acid encoding an anti-1II-12 antibody to generate transgenic plants and cultured plant cells (eg, but not limited to, tobacco, corn) that produce such antibodies, said parts or variants in parts of plants or in cells cultured from them. As a non-limiting example, transgenic tobacco leaves that express recombinant proteins have been successfully used to create a large number of recombinant proteins, eg, using an inducible promoter.
Див. напр., Статег еї аї., Сигг. Тор. Місгорої. Іттипої. 240: 95-118 (1999) та посилання, цитовані в ній).See e.g., Stateg ei ai., Sigg. Torus. Misgoroi And so on. 240: 95-118 (1999) and references cited therein).
Також, трансгенна кукурудза була використана для експресування протеїнів ссавців в комерційних кількостях, та з біологічними властивостями еквівалентними до таких, що продуковані в інших рекомбінантних системах чи виділені з природних джерел. |Див. напр., Носа еї а!., Аду. Ехр. Мед. Віо!. 464: 127-147 (1999) та цитовані там посилання), антитіла також були вироблені у великих кількостях з насіння трансгенних рослин, включаючи фрагменти антитіл, такі як одноланцюгове антитіло (5СЕУ5), включаючи насіння тютюну та коренеплоди картоплі. (Див. напр., Сопгай еї аї., Ріапі Мої. Віої. 38: 101- 109 (1998) та цитовані там посилання|. Таким чином, антитіла даного винаходу також можуть бути вироблені з використання трансгенних, відповідно до відомих способів. Див. також, напр., Різспег еї а!., Віоїтесппої. Аррі.Also, transgenic maize has been used to express mammalian proteins in commercial quantities, and with biological properties equivalent to those produced in other recombinant systems or isolated from natural sources. | See e.g., Nosa ei a!., Adu. Ex. Honey. Vio!. 464: 127-147 (1999) and references cited therein), antibodies have also been produced in large quantities from seeds of transgenic plants, including antibody fragments such as single-chain antibody (5SEU5), including tobacco seeds and potato roots. (See, e.g., Sopgai et al., Riapi Moi. Vioi. 38: 101-109 (1998) and references cited therein|. Thus, the antibodies of the present invention can also be produced using transgenes, according to known methods. See . also, for example, Rizspeg ei a!., Vioitesppoi. Arri.
Віоспет. 30: 99-108 (Осі., 1999), Ма еї аї., Тгепаз Віотеснпої. 13: 522-7 (1995); Ма еї аї., Ріапі Рпузіо!. 109: 341-6 (1995); М/піеЇіат еї аї!., Віоспет. бос. Тгапв.22: 940-944 (1994); та посилання в них). Також загальні для експресії антитіл у рослин, але не обмежуючись цим. Кожні з приведених вище посилань повністю включено шляхом посилання.Viospet. 30: 99-108 (Osi., 1999), Ma ei ai., Tgepaz Viotesnpoi. 13: 522-7 (1995); Ma ei ai., Riapi Rpuzio!. 109: 341-6 (1995); M/pieYiat ei ai!., Viospet. boss. Tgapv. 22: 940-944 (1994); and references therein). Also general for expression of antibodies in plants, but not limited to this. Each of the above references is incorporated by reference in its entirety.
Антитіла винаходу можуть зв'язувати анти-І.-12 людини з широким спектром афінності (Ко). У переважному втіленні принаймні одне тАр людини може зв'язувати І/-12 людини з високою афінністю.Antibodies of the invention can bind human anti-I.-12 with a wide spectrum of affinity (Ko). In a preferred embodiment, at least one human tAr can bind human I/-12 with high affinity.
Наприклад, тАб людини може зв'язувати 1-12 з Ко рівним чи менше ніж 1077М, так само як, але не обмежуючись цим, 0.1-9.9 (чи інше значення чи діапазон з) Х 1077, 1098, 1079, 1079, 1071, 1072, 1073 чи інше значення чи діапазон з них.For example, a human tAb can bind 1-12 with a Co equal to or less than 1077M, as well as, but not limited to, 0.1-9.9 (or other value or range of) X 1077, 1098, 1079, 1079, 1071, 1072, 1073, or some other value or range thereof.
Афінність чи авидність антитіла до антигену може бути визначена експериментально з використанням відповідного методу, |див. напр., Веггої5Кку, еї аї., "Антироду-Антидеп Іпіегасіпе", по ЕипдатепіаїThe affinity or avidity of an antibody to an antigen can be determined experimentally using the appropriate method, see eg.
Іттипоіоду, Раш, М. Е., Еа., Намеп Ргев55: Мем/ МоїКк, МУ (1984); Кибу, дапіз Іттипоіоду, МУ. Н. Егеетап апаIttypoiodu, Rush, M.E., Ea., Namep Rgev55: Mem/ MoiKk, MU (1984); Kybu, dapiz Ittypoiodu, MU. N. Egeetap apa
Сотрапу: Мем Моїк, МУ (1992); та способи приведені тут). Значення афінності, окремих взаємодій антитіло- антиген можуть змінюватися в залежності від різних умов визначення (напр., концентрації солей, рН). Таким чином, визначення афінності та інших параметрів зв'язування антигену (напр., Ко, Ка, Ка) переважно виконують із стандартизованими розчинами антигену та антитіла, стандартизованим буфером, таким як буфер описаний тут.Sotrapu: Mem Moik, Moscow State University (1992); and methods are given here). Values of affinity, individual antibody-antigen interactions may vary depending on different conditions of determination (e.g., salt concentration, pH). Thus, determination of affinity and other antigen binding parameters (eg, Co, Ka, Ka) is preferably performed with standardized solutions of antigen and antibody, a standardized buffer, such as the buffer described herein.
Молекули нуклеїнової кислотиNucleic acid molecules
За допомогою інформації наведеної тут, такої як нуклеотидна послідовність, що кодує принаймні 70- 10095 безперервних амінокислот принаймні однієї з ЗЕО ІО МОБ: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, специфічних фрагментів, варіантів чи консенсусних їх послідовностей, депонованих векторів, які містять принаймні одну з цих послідовностей, молекулу нуклеїнової кислоти даного винаходу та принаймні одне антитіло анти-1І-12 можуть бути одержані за допомогою методів описаних тут чи відомих з рівня техніки.Using the information provided herein, such as a nucleotide sequence encoding at least 70-10095 contiguous amino acids of at least one of ZEO IO MOB: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, specific fragments, variants, or consensus sequences thereof , deposited vectors that contain at least one of these sequences, a nucleic acid molecule of the present invention and at least one anti-1I-12 antibody can be obtained using the methods described herein or known in the art.
Молекули нуклеїнової кислоти даного винаходу можуть бути у вигляді ЕМА, таких як теМА, ппеМА,Nucleic acid molecules of this invention can be in the form of EMA, such as teMA, ppeMA,
ІВЕМА чи будь-яких інших форм, чи у вигляді ОМА, включаючи але не обмежуючсь, СОМА та геномної ОМА, одержаної клонуванням чи синтетично, чи будь-яких їх комбінацій. ОМА може бути триланцюгова, дволанцюгова чи будь-які їх комбінації. Будь-яка частина принаймні одного ланцюга ОМА чи РМАможе біти кодуючим ланцюгом, також відомим як смислова послідовність, чи може бути некодуючим ланцюгом, також відомим як антисмислова послідовність.IVEMA or any other forms, or in the form of OMA, including but not limited to SOMA and genomic OMA obtained by cloning or synthetically, or any combination thereof. OMA can be three-chain, two-chain or any combination thereof. Any part of at least one chain of OMA or RMA can be a coding chain, also known as a sense sequence, or can be a non-coding chain, also known as an antisense sequence.
Виділені молекули нуклеїнової кислоти даного винаходу можуть включити молекули нуклеїнової кислоти які мають одну відкриту рамку зчитування (ОРЕ), необов'язково з одним чи більше інтронів, напр., але не обмежуючись до, принаймні одна зазначена частина принаймні однієї СОР, як СОК1, СОБКО та/абоIsolated nucleic acid molecules of the present invention may include nucleic acid molecules that have a single open reading frame (OPE), optionally with one or more introns, e.g., but not limited to, at least one specified portion of at least one ORP, such as SOK1, SOBKO and/or
СОКЗ, принаймні одного важкого ланцюга (напр., ЗЕО ІЮ МОБ: 1-3) чи легкого ланцюга (напр., ЗЕО ІЮ МОБ: 4-6); та молекули нуклеїнової кислоти, котрі містять нуклеотидну послідовність значно відмінну від такої, що наведена, але котра завдяки виродженості генетичного коду, все ще може кодувати принаймні одне анти-SOCZ, at least one heavy chain (eg, ZEO IU MOB: 1-3) or light chain (eg, ZEO IU MOB: 4-6); and nucleic acid molecules that contain a nucleotide sequence significantly different from that given, but which, due to the degeneracy of the genetic code, can still encode at least one anti-
І/--12 антитіло, як показано тут чи відомо з рівня техніки. Звичайно, генетичний код є дуже відомим на практиці. Таким чином, для обізнаного в даній галузі було б лише механічною процедурою створити такі вироджені варіанти нуклеїнової кислоти, що кодують специфічні анти-1І-12 антитіла. (Див. напр., А!изибреї, еї а!., зиргаї, і такі варіанти нуклеїнової кислоти також включено до даного винаходу. Необмужуючі приклади виділених молекул нуклеїнової кислоти даного винаходу включають ЗЕО ІЮ МОБ: 10-15, і відносяться до не обмежуючих прикладів нуклеїнової кислоти, яка кодує, відповідно НС СОК1, НС СОК2, НС СО3, 1 С СОМ1.I/--12 antibody as shown herein or known in the art. Of course, the genetic code is very well known in practice. Thus, it would be a mere mechanical procedure for one skilled in the art to generate such degenerate nucleic acid variants encoding specific anti-1I-12 antibodies. (See, e.g., A!zibrei, ei a!., zirgai, and such nucleic acid variants are also included in the present invention. Non-limiting examples of isolated nucleic acid molecules of the present invention include ZEO IU MOB: 10-15, and are non-limiting examples of nucleic acid that encodes, respectively, НС СОК1, НС СОК2, НС СО3, 1 С СОМ1.
Го сОок2, 1 С СОМ, НС варіабельний регіон І С варіабельний регіон.Го сОок2, 1 С СОМ, NS variable region AND С variable region.
З іншого боку, винахід пропонує виділені молекули нуклеїнової кислоти, які кодують а(п) анти-1(--12 антитіло, що має амінокислотну послідовність, що кодується нуклетовою кислотою, яка міститься в плазміді, за депонованій як зазначене ім'я клону та АТОС Оерозії Мо5. відповідно, задепоновані в .On the other hand, the invention provides isolated nucleic acid molecules that encode a(n) anti-1(--12) antibody having the amino acid sequence encoded by the nucleic acid contained in the plasmid deposited as the specified clone name and ATOS Oerosion Mo5, respectively, deposited in .
Як вказано тут, молекули нуклеїнової кислоти даного винаходу, котрі містять нуклеїнову кислоту, що кодує анти-І--12 антитіла можуть включати, але не обмежуються цим, таку кодуючу амінокислотну послідовність фрагменту антитіла, саму себе; кодуючу послідовність для повного антитіла частина її; кодуюча послідовність антитіла, фрагмент чи частина, так само як додаткові послідовності, так як і кодуюча послідовність принаймні одного сигнального лідерного чи злитого пептиду, з чи без вищезгаданої додаткової кодуючої послідовності, такий як, принаймні один інтрон разом із додатковою, некодуючою послідовністю, включаючи але не обмежуючи до, некодуючі 5' та 3' послідовності, такі як транскрибовані, не трансльовані послідовності, котрі грають роль в транскрипції, процесингу теМА, включаючи сплайсинг та сигнали поліаденілування (наприклад - зв'язування рибосоми та стабільність ТЕМА); додаткова кодуюча послідовність, що кодує додадкові амінокислоти, такі як ті, що надають додаткові функціональні характеристики. Таким чином, послідовність що кодує антитіло може бути злита з маркерною послідовністю, так як послідовність, що кодує пептид, котрий полегшує очищення злитого антитіла, що включає фрагменти чи частину.As indicated herein, nucleic acid molecules of the present invention that contain nucleic acid encoding anti-I-12 antibodies may include, but are not limited to, such encoding amino acid sequence of the antibody fragment, itself; the coding sequence for a complete antibody is part of it; an antibody coding sequence, fragment or part, as well as additional sequences, as well as the coding sequence of at least one signal leader or fusion peptide, with or without the aforementioned additional coding sequence, such as at least one intron together with an additional, non-coding sequence, including but but not limited to, non-coding 5' and 3' sequences, such as transcribed, untranslated sequences that play a role in transcription, processing of TEMA, including splicing and polyadenylation signals (eg, ribosome binding and TEMA stability); an additional coding sequence encoding additional amino acids, such as those providing additional functional characteristics. Thus, the sequence encoding the antibody can be fused to a marker sequence, such as the sequence encoding a peptide, which facilitates purification of the fused antibody, including fragments or part.
Полінуклеотиди, котрі вибірково гібридизуються з полінуклеотидом, описаним тутPolynucleotides that selectively hybridize to a polynucleotide described herein
Даний винахід пропонує виділені нуклеїнові кислоти, котрі гібридизуються за певних умов гібридизації з нуклеотидом описаним тут. Отже, полінуклеотиди даної реалізації можуть використовуватися для виділення, визначення та/або підрахунку кількості нуклеїнової кислоти, яка містить такі полінуклеотиди.The present invention provides isolated nucleic acids that hybridize under certain hybridization conditions with a nucleotide described herein. Therefore, the polynucleotides of this embodiment can be used to isolate, determine and/or count the amount of nucleic acid that contains such polynucleotides.
Наприклад, полінуклеотиди даного винаходу можуть використовуватися для ідентифікації, виділення чи ампліфікації часткових чи повних клонів в депозитній бібліотеці. В деяких реалізаціях, полінуклеотиди є геномними чи виділеної послідовності СОМА, чи комплементарними до СОМА з бібліотеки нуклеїнових кислот людини чи ссавців.For example, the polynucleotides of this invention can be used to identify, select or amplify partial or complete clones in a deposit library. In some embodiments, the polynucleotides are genomic or isolated SOMA sequences, or complementary to SOMA from a human or mammalian nucleic acid library.
Переважно, бібліотека СОМА містить принаймні 8095 повних послідовностей, переважно принаймні 8590 чи 9095 послідовностей повної довжини, більш переважно принаймні 9595 повних послідовностей.Preferably, the SOMA library contains at least 8095 complete sequences, preferably at least 8590 or 9095 full-length sequences, more preferably at least 9595 complete sequences.
Бібліотеки СОМА можуть бути нормалізовані для збільшення присутності послідовностей, що рідко зустрічаються. Низькі чи посередні умови жорсткості гібридизації є типовими, але не виключними, та застосовуються при послідовностях з низхькою схожістю до комплементарних послідовностей. Помірні чи жорсткі умови можуть, іноді, застосовуватися для послідовностей з більшою схожістю.SOMA libraries can be normalized to increase the presence of rare sequences. Low or medium stringency hybridization conditions are typical, but not exclusive, and are used for sequences with low similarity to complementary sequences. Moderate or strict conditions may sometimes be applied to sequences with greater similarity.
Умови низької жорсткості забезпечують селективну гібридизацію послідовностей із 7095-ю ідентичністю послідовностей та можуть застосуватися для ідентифікації ортологічних чи паралогічних послідовностей.Low stringency conditions provide selective hybridization of sequences with 7095 sequence identity and can be applied to identify orthologous or paralogous sequences.
Необов'язково, полінуклеотиди даного винаходу будуть кодувати принаймні частину антитіла, кодованого полінуклеотидами описаними тут. Полінуклеотиди даного винаходу охоплюють послідовності нуклеїнової кислоти, котрі можуть бути використані для селективної гібридизації з полінуклеотидом, що кодує антитіло даного винаходу. (Див. напр., А!изибеї, зирга; Соїїїдап, зирга, які повністю включено шляхом посилання).Optionally, the polynucleotides of this invention will encode at least a portion of the antibody encoded by the polynucleotides described herein. Polynucleotides of this invention include nucleic acid sequences that can be used for selective hybridization with a polynucleotide encoding an antibody of this invention. (See, e.g., A!izibei, zirga; Soiiyidap, zirga, which are incorporated by reference in their entirety).
Конструювання нуклеїнових кислотConstruction of nucleic acids
Виділені нуклеїнові кислоти даного винаходу можуть бути виготовлені з використанням (а) рекомбінантних методів, (б) синтетичних методів, (с) методів очищення, чи їх комбінацій, які відомо з рівня техніки.The isolated nucleic acids of this invention can be prepared using (a) recombinant methods, (b) synthetic methods, (c) purification methods, or combinations thereof, which are known in the art.
Нуклеїнові кислоти можуть включати послідовності на додаток до полінуклеотиду даного винаходу.Nucleic acids may include sequences in addition to the polynucleotide of the present invention.
Наприклад, мультиклонований сайт, який включає один або більше сайтів рестрикції ендонуклеази, може бути вставлений в нуклеїнову кислоту, для полегшення виділення полінуклеотиду.For example, a multicloned site that includes one or more endonuclease restriction sites can be inserted into the nucleic acid to facilitate isolation of the polynucleotide.
Також, послідовності здатні до трансляції можуть бути введені для полегшення виділення полінуклеотиду даного винаходу. Наприклад, гексагістидинова маркерна послідовність забезпечує прийнятний спосіб для очищення протеїнів даного винаходу. Нуклеїнова кислота даного винаходу, крім кодуючої послідовності - необов'язково є вектором, адаптером чи лінкером для клонування та/або експресії полінуклеотиду даного винаходу.Also, translatable sequences can be introduced to facilitate isolation of the polynucleotide of the present invention. For example, a hexahistidine marker sequence provides an acceptable method for purifying the proteins of this invention. The nucleic acid of this invention, except for the coding sequence, is not necessarily a vector, adapter or linker for cloning and/or expression of the polynucleotide of this invention.
Додаткові послідовності можуть бути додані до такого клонування та/або експресії послідовностей для оптимізації їхньої функції при клонуванні та/або експресії, для полегшення виділення полінуклеотиду, чи покращення введення поінуклеотиду в клітину. Використання векторів клонування, експресивних векторів, адаптерів та лінкерів добре відоме з практики. (див. напр., Ац,изибеї, зирга; ог Затьгоок, зирга)|.Additional sequences can be added to such cloning and/or expression sequences to optimize their function during cloning and/or expression, to facilitate isolation of a polynucleotide, or to improve the introduction of a polynucleotide into a cell. The use of cloning vectors, expression vectors, adapters and linkers is well known in the art. (see, for example, Ats,izibei, zirga; og Zatgook, zirga)|.
Рекомбінантні методи конструювання нуклеїнових кислотRecombinant methods of nucleic acid construction
Композиції виділених нуклеїнових кислот даного винаходу, такі як ЕММА, СОМА, геномна ОМА чи будь-яка їх комбінація, можуть бути одержана з біологічних джерел з використанням багатьох методик клонування, відомих спеціалістом в даній галузі У деяких втіленнях, олігонуклеотидні зразки, які вибірково гібридизуються, за суворих умов, з полінуклеотидами даного винаходу використовуються для ідентифікації бажаної послідовності в бібліотеках ОМА чи геномної СОМА. Виділення ЕМА та конструювання СОМА та геном них бібліотек, є добре відомим для спеціаліста в даній галузі, (див. напр., А,изибеї, зирга; ог Затьгоок, зиргаї.The isolated nucleic acid compositions of the present invention, such as EMMA, SOMA, genomic OMA, or any combination thereof, can be obtained from biological sources using many cloning techniques known to those skilled in the art. In some embodiments, oligonucleotide samples that selectively hybridize, under strict conditions, with the polynucleotides of this invention are used to identify the desired sequence in libraries of OMA or genomic SOMA. Isolation of EMA and construction of SOMA and their genome libraries is well known to a specialist in this field (see, for example, A,izibei, zirga; og Zatgook, zirgai.
Скринінг нуклеїнових кислот та методи виділення сОМА чи геномна бібліотека може бути сринінгована з використанням зразку, який базується на послідовності полінуклеотиду даного винаходу, такого як описано тут. Зразки можуть бути використані для гібридизації з геномними послідовностями ОМА та СсОМА для виділення гомологічних генів з того самого чи іншого організму. Спеціалісти в даній галузі оцінять які різноманітні рівні жорсткості гібридизації можуть бути використані при аналізі; також жорсткими можуть бути середовища гібридизації та відмивання. При створенні більш жорстких умов гібридизації, збільшується ступінь компліментарності між зразком та цільовим продуктом для створення дуплексу. Рівень жорсткості може контролюватися одним або більше параметрами, такими як: температура, іонна сила, рН та присутність частково денатуруючого агенту, такого як формамід. Наприклад, жорсткості гібридизації може бути легко змінена зміною полярності реагуючого розчину через, наприклад, маніпулювання концентрацією формаміду в межах від 09о до 50905. Рівень компліментарності (ідентичності послідовності) потрібен для того, щоб зв'язування, яке визначається змінювалося відповідно до жорсткості гібридизаційного середовища та/або середовища для відмивання.Nucleic Acid Screening and Methods for Isolation A cOMA or genomic library can be screened using a sample based on a polynucleotide sequence of the present invention, such as described herein. Samples can be used for hybridization with genomic sequences of OMA and CsOMA to isolate homologous genes from the same or another organism. Those skilled in the art will appreciate the various levels of hybridization stringency that can be used in the analysis; hybridization and washing media can also be harsh. By creating more stringent hybridization conditions, the degree of complementarity between the sample and the target product to create a duplex is increased. The level of rigidity can be controlled by one or more parameters such as temperature, ionic strength, pH, and the presence of a partially denaturing agent such as formamide. For example, the stringency of the hybridization can be easily changed by changing the polarity of the reactant solution through, for example, manipulating the concentration of formamide between 090 and 50905. A level of complementarity (sequence identity) is required so that the binding that is detected varies according to the stringency of the hybridization medium and /or washing medium.
Рівень компліментарності буде оптимальним 10095 чи 70-10095 чи інше значення чи діапазон в цих межах.The level of complementarity would be optimally 10095 or 70-10095 or some other value or range within these limits.
Однак, має бути зрозуміло, що варіації дзеркальної послідовності в зразках та праймерах можуть бути компенсовані зниженням жорсткості гібридизаційного середовища та/або середовища для відмивання.However, it should be understood that mirror sequence variations in samples and primers can be compensated for by reducing the stringency of the hybridization medium and/or washing medium.
Методи ампліфікації ОМА чи ЕМА є добре відомими для спеціалістів в галузі та можуть бути використані відповідно до даного винаходу без зайвого експериментування, з використанням навчальних засобів та керівництв присутні в них.OMA or EMA amplification methods are well known to those skilled in the art and can be used in accordance with the present invention without undue experimentation, using the teaching aids and guidance contained therein.
Методи ампліфікації ОМА чи ЕМА включають, але не обмежуються цим, реакцію полімеразного ланцюга (РСК) та схожі ампліфікаційні процеси, (див. напр., ШЮ. 5. Раїепі Мо5. 4,683,195, 4,683,202, 4,800,159, 4,965,188, юю МиїЇїв, еї аї.; 4,795,699 апа 4,921,794 юю Тарбог, еї а1.; 5,142,033 (ю Іппів: 5,122,464 юю М/ізоп, еї аї.; 5,091,310 юю Іппів; 5,066,584 тю СуППепвієп, еї а!ї.; 4,889,818 ю Сейапа, єї а1!.; 4,994,370 о 5іМмег, еї а).; 4,766,067 10 Вібзулаз; 4,656,134 їо Кіпдоїд| та КМА-опосередковані ампліфікації, котрі використовують антисмислові ЕМА до цільової послідовності як шаблон для синтезу дволанцюгової ОМА (ШО. 5. Раїепі Мо. 5,130,238 о Маїек, еї аї., із комерційною назвою МАЗВАЇ, повний зміст котрого повністю включено шляхом посилання (Див. напр., А!,5ибеї, зирга; ог затогоок, зирга|. Наприклад, технологія реакції полімеразного ланцюга (РСЕ) може бути використана для ампліфікації послідовностей полінуклеотидів даного винаходу та подібних генів прямо з геномної ОМА чи СОМА бібліотеки. РСЕ та інші методи ампліфікації іп міго можуть бути корисні, наприклад, для клонування послідовностей нуклеїнових кислот, які кодують протеїни, які будуть експресовані, для того, щоб створити нуклеїнові кислоти для їх використання як зразків для визначення присутності бажаної теМА в зразку, для секвенування нуклеїнових кислот, чи для інших потреб. Приклади способів, достатніх для осіб, обізнаних в методах ампліфікації іп мйго знаходяться вAmplification methods for OMA or EMA include, but are not limited to, polymerase chain reaction (PCR) and similar amplification processes (see, e.g., Shyu. 5. Raiepi Mo5. 4,683,195, 4,683,202, 4,800,159, 4,965,188, yuyu MiiYiiv, ei ai. ; 4,795,699 APA 4,921,794 Yu Tarbog, ei A1.; 5,142,033 (Yu IPPs: 5,122,999999, 4,3,311; o 5iMmeg, ei a).; 4,766,067 10 Vibzulaz; 4,656,134 io Kypdoid| and KMA-mediated amplifications, which use antisense EMAs to the target sequence as a template for the synthesis of double-stranded OMA (SHO. 5. Raiepi Mo. 5,130,238 o Majek, ei ai. , under the trade name MAZVAI, the entire content of which is fully incorporated by reference (See, e.g., A!,5ibei, zirga; og zatogook, zirga|. For example, polymerase chain reaction (PCR) technology can be used to amplify the polynucleotide sequences of the present invention and similar genes directly from the genomic OMA or SOMA library who PCR and other ip migo amplification techniques can be useful, for example, in cloning nucleic acid sequences that encode proteins to be expressed, in order to generate nucleic acids for use as samples to determine the presence of a desired teMA in a sample, in sequencing nucleic acids acids, or for other needs. Examples of methods sufficient for persons skilled in the art of ip amplification can be found in
ІВегдег, зирга, затргоок, зирга, та А!зибеї, зирга, так само як і в Миїйї5, еї аІ., ШЮ. 5. Раїепі Мо. 4,683,202 (1987); та Іппів, єї аі., РОСА Ргоїосоіз А Сшіде Юю Меїйпод» апа Арріїсайопе, Едз., Асадетіс Ргев5 Іпс., ЗапIVegdeg, zirga, zatrgook, zirga, and A!zibei, zirga, as well as in Miiyya5, ei aI., SHYU. 5. Raiepi Mo. 4,683,202 (1987); and Ippiv, ei ai., ROSA Rgoiosoiz A Sshide Yuyu Meiipod" apa Arriisayope, Edz., Asadetis Rgev5 Ips., Zap
Оіедо, СА (1990)). Комерційно доступні набори для геномних РСЕК-ампліфікацій відомі. Див. напр.,Oiedo, SA (1990)). Commercially available kits for genomic RSEK amplifications are known. See e.g.
Адмапіаде-аС Сепотіс РОСА Кії (Сіопієсп)). Додатково, напр., може біти використаний Т4 ген 32 протеїну (Воепгіпдег Мапппеїт) для покращення виходу продукту довгих РСР продуктів.Admapiade-as Sepotis ROSA Kii (Siopiesp)). Additionally, for example, T4 gene 32 protein (Voephipdeg Mapppeit) can be used to improve the product yield of long PCP products.
Синтетичні методи конструювання нуклеїнових кислотSynthetic methods of nucleic acid construction
Виділені нуклеїнові кислоти даного винаходу можуть бути одержані прямим хімічним синтезом за допомогою відомих методів |див., напр., А!,зибеї, еї а!., зирга). Хімічний синтез взагалі дає одноланцюговий олігонуклеотид, котрий може бути перетворений на дволанцюговий ОМА гібридизацією із комплементарною послідовністю чи полімеризацією ЮОМА-полімеразою з використанням одноланцюгової ОМА як шаблону.The isolated nucleic acids of this invention can be obtained by direct chemical synthesis using known methods (see, e.g., A!,zibei, ei a!., zirga). Chemical synthesis generally yields a single-stranded oligonucleotide, which can be converted to a double-stranded OMA by hybridization with a complementary sequence or polymerization by UOMA polymerase using a single-stranded OMA as a template.
Спеціалісти в даній галузі можуть побачити, що тоді як хімічний синтез ОМА може бути обмежений послідовністю близько 100 чи більше основ, довші послідовності можуть бути одержані об'єднуванням коротших послідовностей.Those skilled in the art can see that while the chemical synthesis of OMA can be limited to a sequence of about 100 or more bases, longer sequences can be obtained by combining shorter sequences.
Касети рекомбінантної експресіїRecombinant expression cassettes
Даний винахід також пропонує касети рекомбінантної експресії, які включають нуклеїнові кислоти даного винаходу. Послідовності нуклеїнових кислот даного винаходу, наприклад, ОМА чи геномні послідовності, що кодують антитіла даного винаходу, можуть бути використані для конструювання касет рекомбінантної експресії, які можуть бути введені, принаймні, в одну клітину хазяїна. Касета рекомбінантної експресії буде, як правило, включати полінуклеотид даного винаходу, операбельно зв'язаний з регуляторними послідовностями ініціації транскрипції котрі будуть спрямовувати транскрипцію полінуклеотиду в конкретній клітині-хазяїні. Для прямого експресування нуклеїнових кислот даного винаходу можуть бути застосовані як гетерологічні, так і негетерологічні (напр., ендогенні) промотори.The present invention also provides recombinant expression cassettes that include the nucleic acids of the present invention. Nucleic acid sequences of the present invention, for example, OMA or genomic sequences encoding antibodies of the present invention, can be used to construct recombinant expression cassettes that can be introduced into at least one host cell. A recombinant expression cassette will typically include a polynucleotide of this invention operably linked to regulatory transcription initiation sequences that will direct transcription of the polynucleotide in a specific host cell. Both heterologous and non-heterologous (eg, endogenous) promoters can be used for direct expression of the nucleic acids of this invention.
У деяких втіленнях, виділенні нуклеїнові кислоти можуть слугувати промотором, енхансером, чи інший елемент може бути введений у відповідне місце (вище чи нижче, чи в інтрон) негетерологічної форми полінуклеотиду даного винаходу для підвищення чи зниження експресії полінуклеотиду даного винаходу.In some embodiments, the isolated nucleic acid may serve as a promoter, enhancer, or other element may be introduced into an appropriate location (upstream, downstream, or intron) of a non-heterologous form of a polynucleotide of the present invention to increase or decrease expression of the polynucleotide of the present invention.
Наприклад, ендогенні промотори можуть бути змінені іп ммо чи іп міго мутаціями, делеціями та/або заміною.For example, endogenous promoters can be altered by ip mmo or ip migo mutations, deletions and/or substitutions.
Вектори та клітини-хазяїVectors and host cells
Даний винахід також відноситься до векторів, котрі включають виділені нуклеїнові кислоти даного винаходу, генетично сконструйовані клітини-хазяї з рекомбінантними векторами, та продукування принаймні одного анти-І--12 антитіла рекомбінантними методами які відомі з рівня техніки. Див. напр., затюогоок, еї а!., зирга; А!,изибеї, еї а!., зирга, кожний з яких повністю включено шляхом посилання).The present invention also relates to vectors that include isolated nucleic acids of the present invention, genetically engineered host cells with recombinant vectors, and production of at least one anti-I-12 antibody by recombinant methods known in the art. See e.g., zatyuogook, ei a!., zirga; A!,izibei, ei a!., zirga, each of which is fully incorporated by reference).
Полінуклеотиди можуть, необов'язково, бути введеними в вектор, котрий містить селективний маркер для вирощування в клітині. Взагалі, плаз мідний вектор вводиться в преципітат, такий як преципітат фосфату кальцію, чи в комплекс із зарядженими ліпідами. Якщо вектор є вірусом, він може бути спакований іп міго за допомогою відповідної пакуючої клітинної лінії і потім перенесений в клітину хазяїна.Polynucleotides can optionally be introduced into a vector that contains a selective marker for growing in a cell. Generally, the plasma copper vector is introduced into a precipitate, such as a calcium phosphate precipitate, or in a complex with charged lipids. If the vector is a virus, it can be packaged ip migo using an appropriate packaging cell line and then transferred into the host cell.
ОМА-вставка має бути безпосередньо прив'язана до відповідного промотора. Експресій ний конструкт в подальшому буде містити сайти ініціації транскрипції, термінації та, в транскрипційному регіоні, сайт зв'язування рибосоми для трансляції (напр., ШАА, ОСА чи ЦАС) відповідно розташований на кінці трансльованої ткМА, із переважанням ЦАА та АС для експресії еукаріотичних клітин.The OMA insert must be directly linked to the corresponding promoter. The expression construct will further contain sites for transcription initiation, termination, and, in the transcriptional region, a ribosome binding site for translation (e.g., CAA, OACA, or CAA) respectively located at the end of the translated tcMA, with a predominance of CAA and AC for eukaryotic expression cells
Вектори експресії бажано, але не обов'язково будуть включати принаймні один селективний маркер.Expression vectors will preferably, but not necessarily, include at least one selectable marker.
Такі маркери включають, напр., але не обмежуючи цим, метотрексат (МТХ), дигідрофолат редуктазу (ОНЕК,Such markers include, for example, but are not limited to, methotrexate (MTX), dihydrofolate reductase (ONEK,
Раї. Мов. 4,399,216; 4,634,665; 4,656,134; 4,956,288; 5,149,636; 5,179,017|, ампіцилін, неоміцин (5418), мікофенолову кислоту, глютамат синтетазу (5, ИО5 Раї Мо5. 5,122,464; 5,770,359; 5,827,739|, резистентність до культури еукаріотичних клітин, та гени резистентності до тетрацикліну чи ампіциліну для культивування БЕ. соїї та інших бактерій чи прокаріотів (вище приведені патенти повністю включено сюди шляхом посилання). Відповідні культуральні середовища та умови описаних вище клітин-хазяїв добре відомі для спеціалістів в даній галузі.Paradise As. 4,399,216; 4,634,665; 4,656,134; 4,956,288; 5,149,636; 5,179,017|, ampicillin, neomycin (5418), mycophenolic acid, glutamate synthetase (5, IO5 Rai Mo5. 5,122,464; 5,770,359; 5,827,739|, resistance to culture of eukaryotic cells, and tetracycline or ampicillin resistance genes for cultivation of BE. soybean and other bacteria or prokaryotes (the above patents are fully incorporated herein by reference.) Suitable culture media and conditions for the host cells described above are well known to those skilled in the art.
Прийнятні вектори є очевидними для обізнаних професіоналів. Введення векторного конструкту до клітини хазяїна може бути виконано шляхом трансфекції фосфату кальцію, ОЕАЕ-декстран опосередкованої трансфекції, катіонної ліпід-опосередкованої трансфекції, електропорації, трансдукції, інфекції, чи іншими відомими способами. Такі способи описано в роботах, таких як (Затрбгоок, 5ирга,Acceptable vectors are obvious to those skilled in the art. The introduction of the vector construct into the host cell can be performed by calcium phosphate transfection, OEAE-dextran mediated transfection, cationic lipid-mediated transfection, electroporation, transduction, infection, or other known methods. Such methods are described in works such as (Zatrbgook, 5irga,
Спаріеєгз» 1-4 та 16-18; Аизибреї!. зирга, Спарієгз: 1, 9, 13, 15, 16).Sparieegz" 1-4 and 16-18; Aisybrei!. zirga, Spariegz: 1, 9, 13, 15, 16).
Принаймні одне антитіло даного винаходу може бути експресоване в модифікованій формі, такій як злитий протеїн, та може включати не лише сигнали експресії, але також додатковий гетерологічний функціональний регіон. Наприклад, регіон додаткових амінокислот, зокрема заряджених амінокислот, може бути доданим до М-ткінця антитіла для підвищення стабільності та стійкості в клітині-хазяїні, під час очищення, використання та зберігання.At least one antibody of the present invention may be expressed in a modified form, such as a fusion protein, and may include not only expression signals, but also an additional heterologous functional region. For example, a region of additional amino acids, particularly charged amino acids, can be added to the M-tissue of an antibody to increase stability and stability in the host cell during purification, use, and storage.
Також частини пептидів можуть бути додані до антитіл даного винаходу для полегшення очищення. Такі регіони можуть бути видалені перед кінцевим приготуванням антитіла чи принаймні його фрагменту. Такі методи описані в багатьох стандартних лабораторних керівництвах, таких як, |(Затогоок, зирга, Спарієг5 17.29-17.42 та 18.1-18.74; А!,зибеї, зирга, Спаріег» 16, 17 та 181.Also, peptide moieties can be added to the antibodies of this invention to facilitate purification. Such regions can be removed before the final preparation of the antibody or at least a fragment thereof. Such methods are described in many standard laboratory manuals, such as, |(Zatogook, zirga, Sparieg5 17.29-17.42 and 18.1-18.74; A!,zibei, zirga, Sparieg» 16, 17 and 181.
Такі пересічні навички в роботі є дуже поширеними в багатьох системах експресії придатних для експресування нуклеїнових кислот, які кодують протеїн даного винаходу.Such intermediate skills in operation are very common in many expression systems suitable for expressing nucleic acids that encode the protein of this invention.
Інакше, нуклеїнові кислоти даного винаходу можуть бути експресовані включанням (маніпуляцією) в клітині хазяїні, що містить ендогенну ОМА, яка кодує антитіла даного винаходу. Такий метод є добре відомим спеціалістам, напр., як описано в (05 рагепі Мо5. 5,580,734, 5,641,670, 5,33,46, та 5,733,761, які повністю включено шляхом посилання|.Alternatively, the nucleic acids of the present invention can be expressed by inclusion (manipulation) in a host cell containing an endogenous OMA that encodes the antibodies of the present invention. Such a method is well known to those skilled in the art, e.g., as described in U.S. Pat.
Наочним прикладом клітинних культур, корисних для вироблення антитіл, зазначених частин та їхніх варіантів є клітини ссавців. Клітинна система ссавців часто буває у вигляді моношарів, хоча також використовуються суспензії чи біореактори клітин ссавців. Було розроблено багато ліній клітин-хазяїв, придатних для експресування інтактних глікозильованих протеїнів, включаючи СО5-1 (напр., АТОС СК. 1650), СО5-7 (напр., АТСС СВІ. 1651), НЕК293, ВНК21 (напр., АТСС СА -10), СНО (напр., АТСС СВІ. 1610) та клітинні лінії В5С-1 (напр., АТС СКІ -26), клітини Со5-7, клітини СНО, клітини пер 52, РЗУХбЗА98.653,An illustrative example of cell cultures useful for the production of antibodies, the specified parts and their variants are mammalian cells. Mammalian cell systems are often in the form of monolayers, although suspensions or bioreactors of mammalian cells are also used. Many host cell lines suitable for expressing intact glycosylated proteins have been developed, including СО5-1 (eg, ATOS SK. 1650), СО5-7 (eg, ATSS SVI. 1651), NEK293, VNK21 (eg, ATSS CA -10), CHO (e.g., ATSS SVI. 1610) and cell lines B5C-1 (e.g., ATS SKI -26), Co5-7 cells, CHO cells, per 52 cells, RZUKhbZA98.653,
ЗР2/О-АдіЯ4, клітини 293, клітини Нега та їм подібні, котрі завжди є в розпорядженні, наприклад в (АтегісапZR2/O-AdiYa4, 293 cells, Nega cells and the like, which are always available, for example in (Ategisap
Туре Сийиге СоПесіоп, Мапавзза5, Ма (млум/.аїсс.ог9)). Переважні клітини-хазяї включають клітини лімфоїдного походження такі, як клітини мієломи та лімфоми. Зокрема переважними клітинами-хазяями єToure Siyige SoPesiop, Mapavzza5, Ma (mlum/.aiss.og9)). Preferred host cells include cells of lymphoid origin such as myeloma and lymphoma cells. In particular, the preferred host cells are
РЗХбЗАОдВ, клітини 653 (АТСС Ассезвіоп Митбрег СКІ -1580) та клітини 5Р2/0-Аді4 (АТСС Ассезвіоп МитрегРХбЗАОдВ, cells 653 (ATSS Assezviop Mitbreg SKI -1580) and 5P2/0-Adi4 cells (ATSS Assezviop Mitreg
СВІ-1851).SVI-1851).
Експресивні вектори цих клітин можуть включати одну чи більше послідовностей управління експресією, таких як, але не обмежуючи до походження реплікації: промотор (напр., пізній чи ранній промотори 5М40, промотор СММ (ОБ Раї. Мо5. 5,168,062; 5,385,839), промотор НЗМ ІК, промотор рак (фосфогліцерат кіназа), арпа промотор ЕБ-1 (ОБ Раї Мо. 5,266,491)|, принаймні один промотор імуноглобуліну людини, енхансер, та/або сайти інформації процесингу, такі як сайти зв'язування рибосоми, сайти сплайсингу КМА, сайти поліаденілування Інапр., ЗМ40 великий Т Ад роїу А додатковий сайті, послідовності термінаторів транскрипції. |Див. А!Єзибреї еї аї., зирга; затюогоок, еї аї., зирга|. Інші клітини придатні для вироблення нуклеїнових кислот та протеїнів даного винаходу є відомими та/або доступними.Expression vectors of these cells may include one or more expression control sequences, such as, but not limited to the origin of replication: a promoter (eg, late or early 5M40 promoters, SMM promoter (OB Rai. Mo5. 5,168,062; 5,385,839), NZM IC promoter , rac promoter (phosphoglycerate kinase), arpa promoter EB-1 (OB Rai Mo. 5,266,491) |, at least one human immunoglobulin promoter, enhancer, and/or processing information sites, such as ribosome binding sites, KMA splicing sites, polyadenylation, e.g., ZM40 large T Addroi A additional site, transcription terminator sequences. known and/or available.
Напр., з |Атегісап Туре Сшштге СоПесіп СаїаІодие ої Сеї! Гіпез апа Нурідотав (м/млу.аїсс.ога)| чи інших відомих комерційних джерел.E.g., with |Ategisap Ture Sshshtge SoPesip SaiaIodie oi Seii! Hypez apa Nuridotav (m/mlu.aiss.oga)| or other known commercial sources.
Коли застосовуються еукаріотичні клітини-хазяї, у вектор звичайно вводяться послідовності поліаденілування чи термінації транскрипції. Прикладом послідовності термінатора є послідовність поліаденілування з бичачого гену гормону росту. Також можуть включатися послідовності для точного сплайсингу транскрипту. Прикладом сплайсингової послідовності є інтрон МР1 з 5М40 ІЗргадие, еї аї.,».When eukaryotic host cells are used, polyadenylation or transcription termination sequences are usually introduced into the vector. An example of a terminator sequence is the polyadenylation sequence from the bovine growth hormone gene. Sequences for precise splicing of the transcript may also be included. An example of a splicing sequence is the MP1 intron from 5М40 IZrgadie, ей ай.,».
Міго!. 45: 773-781 (1983)). До того ж, для контролю за реплікацією в клітині-хазяїні генетичні послідовності можуть бути включені у вектор, що є добре відомим з рівня техніки.Migo!. 45: 773-781 (1983)). In addition, to control replication in the host cell, genetic sequences can be included in the vector, which is well known in the art.
Очищення антитілPurification of antibodies
Антитіла до анти-І/-12 можуть бути одержані з рекомбінантної культури клітин добре відомими методами, але не обмежуючись ними, очищенням протеїну А, преципітацією сульфатом амонію чи етанолом, кислотною екстракцією, аніоно- чи катіонообмінною хроматографією, фосфоцелюлозною хроматографією, гідрофобною інтеракційною хроматографією, афінною хроматографією, гідроксиапатитною хроматографією та пектиновою хроматографією. Також може бути використана високо ефективна рідинна хроматографія (НРІ С") (див. напр., Соїйдап, Сигепі Ргоїосої5 іп Іттипоіоду, абоAntibodies to anti-I/-12 can be obtained from recombinant cell culture by well-known methods, but not limited to protein A purification, ammonium sulfate or ethanol precipitation, acid extraction, anion or cation exchange chromatography, phosphocellulose chromatography, hydrophobic interaction chromatography, affinity chromatography, hydroxyapatite chromatography and pectin chromatography. High performance liquid chromatography (HPLC") can also be used (see, e.g.,
Сшитепі Ргоїосоїв іп Ргоїєїп бсіепсе, дхопп УМіїєу 5 опе, МУ, ММ, (1997-2001), Спаріег5 1, 4,6, 8, 9, 10, кожен повністю включено шляхом посилання|.Sshitepi Rgoiosoiiv ip Rgoieip bsiepse, dhopp UMiieu 5 ope, MU, MM, (1997-2001), Sparieg5 1, 4,6, 8, 9, 10, each fully incorporated by reference|.
Антитіла даного винаходу звичайно включають очищені продукти, продукти процедури хімічного синтезу, продукти одержані методом рекомбінації з еукаріотичного хазяїна, включаючи, наприклад, клітини дріжджів, вищих рослин, комах та ссавців. Залежно від застосованого хазяїна в процесі рекомбінантного продукування, антитіла даного винаходу можуть бути глікозильовані чи неглікозильованими, з відданням переваги глікозильваним. Такі методи описано в багатьох стандартних лабораторних керівництвах, таких як, (Затргоок, зирга, Зесііоп5 17.37-17.42; Айвибеї, взирга, Спаріеєгз 10, 12, 13, 16, 18 апа 20, Соїїдап, РгоїєїпAntibodies of the present invention typically include purified products, products of chemical synthesis procedures, products obtained by recombination from a eukaryotic host, including, for example, cells of yeast, higher plants, insects and mammals. Depending on the host used in the process of recombinant production, the antibodies of this invention can be glycosylated or non-glycosylated, with preference given to glycosylated. Such methods are described in many standard laboratory manuals, such as, (Zatrgook, zirga, Zesiiop5 17.37-17.42; Ivybei, vzyrga, Sparieegz 10, 12, 13, 16, 18 apa 20, Soiidap, Rgoieip
Зсієпсе, зирга, Спарієгв 12-14, котрі повністю включено шляхом посилання).Zsiepse, Zirga, Spariegv 12-14, which are fully incorporated by reference).
Анти-1ІІ -2 антитілаAnti-1II -2 antibodies
Виділені антитіла даного винаходу включають антитіла, кодовані будь-яким з полінуклеотидів даного винаходу, як буде тут розглянуто більш докладно, чи інше виділене чи приготоване антитіло. Переважно, антитіло людини, чи антиген-зв'язуючий фрагмент, що зв'язує ІЇ/-12 людини, і таким чином, частково чи суттєво нейтралізує принаймні одну з біологічних активностей протеїну. Антитіло чи зазначена його частина чи варіант, котра частково чи, переважно, значною мірою, нейтралізує, принаймні одну біологічну активність принаймні одного протеїну І/-12 чи фрагменту, може зв'язувати протеїн чи фрагмент, і таким чином інгібувати дії, опосередковані зв'язуванням 1-12 з рецептором 1-12 або через інші залежні чи опосередковані 1-12 механізми. Термін "нейтралізуюче антитіло", як воно вживається тут, відноситься до антитіла, котре може інгібувати активність залежну від І--12 до 20-12095, переважно до 10, 20, 30, 40, 50, 55,60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 10095, чи більше, в залежності від проби.Isolated antibodies of the present invention include antibodies encoded by any of the polynucleotides of the present invention, as will be discussed in more detail herein, or another isolated or prepared antibody. Preferably, a human antibody or an antigen-binding fragment that binds human II/-12 and thus partially or substantially neutralizes at least one of the biological activities of the protein. An antibody or a specified part or variant thereof, which partially or, preferably, to a large extent, neutralizes at least one biological activity of at least one I/-12 protein or fragment, can bind the protein or fragment, and thus inhibit the actions mediated by by binding of 1-12 to the 1-12 receptor or through other 1-12-dependent or mediated mechanisms. The term "neutralizing antibody" as used herein refers to an antibody that can inhibit I-12 to 20-12095, preferably up to 10, 20, 30, 40, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 10095, or more, depending on the sample.
Здатність анти-ІЇ/-12 антитіл пригнічувати ІЇ/-12-залежну активність переважно визначалася, принаймні однією прийнятною пробою протеїну чи рецептору 1-12, як описано тут, чи відомо з рівня техніки. Антитіла людини згідно з винаходом можуть належати до будь-якого класу (Ідс, ІДдДА, І9М, ІЧЕ, до, еїс.) чи ізотипу, і можуть включати легкі ланцюги каппа чи лямбда. В одному з втілень, антитіла людини включають важкий ланцюг дб чи визначений фрагмент, наприклад, принаймні один з ізотипів, (951, Ідс2, ДдДОЗ чи ді.The ability of anti-II/-12 antibodies to inhibit II/-12-dependent activity is preferably determined by at least one acceptable protein or receptor 1-12 assay as described herein or known in the art. Human antibodies according to the invention may belong to any class (Ids, IDdDA, I9M, ICHE, to, eis.) or isotype, and may include kappa or lambda light chains. In one embodiment, the human antibody comprises a db heavy chain or a defined fragment, e.g., at least one of the isotypes, (951, Ids2, DdDOZ, or di.
Антитіла цього типу можуть бути виготовлені із застосуванням принаймні одного тарансгену легкого ланцюга людини (напр., дос, ІдДА та І9ДМ (напр., ут, уг, уЗ, у4), як описано тут та/або відомо з рівня техніки. В іншому втіленні, антитіло до ІЇ-12 людини включає важкий ланцюг ІдО1 та легкий ланцюг ІдО1.Antibodies of this type can be produced using at least one human light chain transgene (eg, dos, IdDA and I9DM (eg, ut, ug, yZ, y4) as described herein and/or known in the art. In another embodiment , the human anti-II-12 antibody includes a heavy chain of IdO1 and a light chain of IdO1.
Принаймні одне антитіло винаходу, зв'язує принаймні один зазначений епітоп, специфічний до принаймні одного протеїну 1--12, субодиниці, фрагменту, частини чи їх комбінації. Принаймні один епітоп може включати, принаймні один регіон зв'язування антитіла, який включає принаймні частину згаданого протеїну, епітоп котрого, переважно включає принаймні одну екстра целюлярну, розчинну чи цитоплазматичну частину вказаного протеїну. Принаймні один вказаний епітоп може включати будь-яку комбінацію з принаймні одного амінокислотного ланцюга з принаймні 1-3 амінокислот до повної зазначеної частини безперервних амінокислот ЗЕО ІЮ МО:9.At least one antibody of the invention binds at least one specified epitope specific to at least one protein 1-12, subunit, fragment, part or combination thereof. At least one epitope may include at least one antibody binding region that includes at least part of said protein, the epitope of which preferably includes at least one extracellular, soluble or cytoplasmic part of said protein. At least one specified epitope may include any combination of at least one amino acid chain of at least 1-3 amino acids to the entire specified portion of continuous amino acids ZEO IU MO:9.
В загальному випадку, антитіло людини чи фрагмент зв'язування антигену даного винаходу буде включати регіон зв'язування антигену, котрий включає принаймні один регіон визначення компліментарності (СОВ1, СОК2 та СОКЗ) чи варіант принаймні одного варіабельного регіону важкого ланцюга, та принаймні один регіон визначення компліментарності (СОК!І, СОМК2 та СОКЗ) чи варіант принаймні одного варіабельного регіону легкого ланцюга. Як не обмежуючий приклад, антитіло чи частина зв'язування антигенучи варіант може включати принаймні один важкий ланцюг СОКЗ, який має амінокислотну послідовність ЗЕО ІО МО:З та або один легкий ланцюг СОКЗ, який має амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮIn general, a human antibody or antigen-binding fragment of the present invention will include an antigen-binding region that includes at least one complementarity-determining region (COB1, SOC2, and SOCZ) or a variant of at least one heavy chain variable region, and at least one detection region complementarity (SOK!I, SOMK2 and SOKZ) or a variant of at least one variable region of the light chain. By way of non-limiting example, the antibody or antigen-binding portion may optionally include at least one heavy chain of the HCZ having the amino acid sequence ZEO IO MO:Z and or one light chain of the HCZ having the amino acid sequence 5EO IU
МО:6. В конкретному випадку, антитіло чи антиген-зв'язуючий фрагмент може мати регіон зв'язування антигену, який включає принаймні частину принаймні одного важкого ланцюга СОК (напр., СОКІ, СОМК2 та/або СОКЗ), котра має амінокислотну послідовність, що відповідає СОК -ам 1, 2 та/або З (напр., зЕО ІЮMO:6. In a particular case, the antibody or antigen-binding fragment may have an antigen-binding region that includes at least a portion of at least one heavy chain of a SOC (eg, SOCI, SOMB2, and/or SOC3) that has an amino acid sequence corresponding to SOC -am 1, 2 and/or Z (e.g., zEO IU
МОЗ: 1, 2 та/або 3). В іншому окремому втіленні, антитіло чи антиген-зв'язуюча частина, чи варіант може мати регіон зв'язування антигену, який включає принаймні частину одного легкого ланцюга СОК (напр.,Ministry of Health: 1, 2 and/or 3). In another specific embodiment, the antibody or antigen-binding portion or variant may have an antigen-binding region that includes at least a portion of one SOC light chain (e.g.,
СОМ, СОК2 та/або СОКЗ) яка має амінокислотну послідовність, що відповідає СОВ-ам 1, 2 та/або З(напр.,SOM, SOK2 and/or SOKZ) which has an amino acid sequence corresponding to SOBs 1, 2 and/or C (e.g.
ЗЕО ІО МОЗ: 4. 5. та/або 6). В переважному втіленні три важкі ланцюги СОР -и та три легкі ланцюги СОК-и антитіла чи антиген-зв'язуючого фрагменту мають амінокислотні послідовності, які відповідають СОН, принаймні одного з тАб 12875, С340, чи будь-якому іншому, як описано тут. Такі антитіла можуть бути виготовлені хімічним введенням разом з різними частинами (напр., СОК»5, каркас) антитіл з використанням загальноприйнятих методик, виготовленням чи експресією (напр., однієї чи більше) молекул нуклеїнової кислоти, котра кодує антитіла з використанням загально відомих методик технологій рекомбінантних ОМА чи з використанням будь-якого іншого придатного методу.ZEO IO MOH: 4. 5. and/or 6). In a preferred embodiment, the three heavy chains of the COP and the three light chains of the SOC of the antibody or antigen-binding fragment have amino acid sequences that correspond to the SON of at least one of tAb 12875, C340, or any other as described herein. Such antibodies can be produced by chemically introducing together with various parts (eg, SOC'5, framework) of antibodies using conventional techniques, by making or expressing (eg, one or more) nucleic acid molecules encoding the antibodies using generally known techniques technologies of recombinant OMA or using any other suitable method.
Анти-1І-12 антитіла можуть включати принаймні один легкий чи важкий ланцюг варіабельного регіону визначеної амінокислотної послідовності. Наприклад, в переважній реалізації, анти-І/-12 антитіла включають принаймні одне з принаймні один варіабельний регіон важкого ланцюга, який необов'язково має амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:7 та/або принаймні один варіабельний регіон легкого ланцюга, який необов'язково має амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО:8. Антитіла, котрі можуть зв'язувати 1-12 людини, та включають визначені варіабельні регіони важкого та легкого ланцюгів можуть бути виготовлені придатними методами, такими як фаговий дисплей (Каїзире, У., еї а)ї., Іпї УМої. Меа, 1 (5): 863-868 (1998)| чи методами, які використовують трансгенних тварин, як відомо з рівня техніки та/або описано тут. Наприклад, трансгенна миша, яка має функціонально перебудований трансген важкого ланцюга імуноглобуліну людини та трансген, який містить ОМА з локусу легкого ланцюга імуноглобуліну людини, котрий було піддано функціональній перебудові, може бути імунізована І/-12 людини чи його фрагментом для викликання вироблення антитіл. При потребі, клітини, що продукують антитіла, можуть бути виділені й гібридоми чи можуть бути виготовлені інші іморталізовані клітини, що продукують антитіла, як описано тут та/або відомо з рівня техніки.Anti-1I-12 antibodies can include at least one light or heavy chain of the variable region of a defined amino acid sequence. For example, in a preferred embodiment, anti-I/-12 antibodies include at least one of at least one heavy chain variable region that optionally has the amino acid sequence ZEO IU MO:7 and/or at least one light chain variable region that optionally has has the amino acid sequence 5EO IU MO:8. Antibodies that can bind 1-12 people and include defined variable regions of heavy and light chains can be produced by suitable methods, such as phage display (Kaisire, U., ei a)i., Ipi UMoi. Mea, 1 (5): 863-868 (1998)| or by methods using transgenic animals as known in the art and/or described herein. For example, a transgenic mouse that has a functionally rearranged human immunoglobulin heavy chain transgene and a transgene that contains an OMA from a human immunoglobulin light chain locus that has been functionally rearranged can be immunized with human I/-12 or a fragment thereof to induce antibody production. If desired, antibody-producing cells can be isolated and hybridomas or other immortalized antibody-producing cells can be made, as described herein and/or known in the art.
Як альтернатива, можуть бути експресовані антитіла, за допомогою кодуючих нуклеїнових кислот чи їх частин в придатній клітині хазяїні.Alternatively, antibodies may be expressed using the encoding nucleic acids or parts thereof in a suitable host cell.
Винахід, також стосується антитіл, антиген-зв'язуючих фрагментів, імуноглобулінових ланцюгів та СОВ- ів, котрі містять амінокислоти в послідовності, котра, значно схожа на амінокислотну послідовність, описану тут. Переважно, такі антитіла чи фрагменти зв'язування антигену та антитіла, котрі включають такі ланцюги чи СОВ-и, можуть зв'язувати 1-12 людини з високою афінністю (напр., Ко менше чи дорівнює приблизно 10:The invention also relates to antibodies, antigen-binding fragments, immunoglobulin chains and SOVs that contain amino acids in a sequence that is significantly similar to the amino acid sequence described herein. Preferably, such antibodies or antigen-binding fragments and antibodies that include such chains or SOVs can bind 1-12 humans with high affinity (eg, a K of less than or equal to about 10:
ЗМ). Амінокислотні послідовності, котрі значно схожі на послідовність, описану тут, включають послідовності, які мають замінені консервативні амінокислоти, так само як делеції та/або інерції амінокислот. Заміна консервативної амінокислоти відноситься до такої заміни однієї амінокислоти другою, котра має хімічні та/або фізичні властивості (такі як, заряд, структура, полярність, гідрофобність/гідрофільність) схожі до таких у першої амінокислоти. Консервативні заміщення включають заміну однієї кислоти іншою в межах таких груп: лізин (К), аргінін (К) та гістидин (Н); аспартат (0) та глютамат (Е); аспарагін (М), глютамін (0), серин (5), треонін (Т), тирозин (ХУ). К, К, Н, О та Е; аланін (А), валін (М), лейцин (У), ізолейцин (І), пролін (Р), фенілаланін (Р), триптофан (М/), метионін (М), цистеїн (С) та гліцин (С); Е, УМ та М; С, 5 та Т.ZM). Amino acid sequences that are substantially similar to the sequence described herein include sequences that have conservative amino acid substitutions, as well as deletions and/or amino acid inversions. Substitution of a conservative amino acid refers to the replacement of one amino acid with another that has chemical and/or physical properties (such as charge, structure, polarity, hydrophobicity/hydrophilicity) similar to those of the first amino acid. Conservative substitutions include replacing one acid with another within the following groups: lysine (K), arginine (K) and histidine (H); aspartate (0) and glutamate (E); asparagine (M), glutamine (0), serine (5), threonine (T), tyrosine (XU). K, K, H, O and E; alanine (A), valine (M), leucine (U), isoleucine (I), proline (P), phenylalanine (P), tryptophan (M/), methionine (M), cysteine (C) and glycine (C) ; E, UM and M; C, 5 and T.
Амінокислотні кодиAmino acid codes
Амінокислоти, що складають анти-1ІЇ-12 антитіла даного винаходу зазвичай скорочують. Позначення амінокислот можуть бути проставлені однолітерним кодом амінокислот, трилітерним кодом амінокислот чи тринуклеотидним кодоном(и) як це добре відомо з літератури (див. Аїрегів, В., еї аІ., Моїесшаг Віоіоду ої ТпеAmino acids that make up anti-1II-12 antibodies of this invention are usually shortened. Amino acid designations can be denoted by a one-letter amino acid code, a three-letter amino acid code or a trinucleotide codon(s), as is well known from the literature (see Airegiv, V., ei aI., Moiesshag Vioiodu oi Tpe
Сеї, Тпіга Ед., Сапапа Рибіїзпіпо, Іпс., Мем Могк, 1994): 07777771 ТФАбр,///////// |Аврайс// |бАСсАС/С/С/С/:///:/:/С:(/4ШСУС- 77777777 не 7 |івоєнсіпе,д/ ФАСАД АОС, АОЮЇГСГС/7777777777772С мМ 77777777 |Ммеє////////// |Мешоппе// АВ С////:////::ОЕ.С:( АИ СГЦSeyi, Tpiga Ed., Sapapa Rybiizpipo, Ips., Mem Mogk, 1994): 07777771 TFAbr,///////// |Avrays// |бАСсАС/С/С/С/:///:/: /С:(/4ШСУС- 77777777 no 7 |ivoyensipe,d/ FASAD AOS, AOYUIGSGS/7777777777772С mm 77777777 |Mmeye////////// |Meshoppe// AV С///////// ::OE.S:( AI SGC
Р 77777771 Ф|Рю ////////////////// |Рюїле //// |ССАСоСсосссЙ42222г2ш9 о 77777777 (б |Сішатпе // |СААДСАСС//////7///77/7//:/:У/)?-R 77777771 Ф|Ryu ////////////////// |Ryuile //// |ССАСоСсосссЙ42222г2ш9 о 77777777 (b |Sishatpe // |SAADSASS//////7// /77/7//:/:U/)?-
А 77777770 |Аю //////// |Аюїпйне / |АСА Або СоАСоС,Сос,соОсССш9А 77777770 |Ayu //////// |Ayuipyne / |АСА Or СоАСоС,Сос,соОсССш9
Анти-1ІІ-12 антитіла даного винаходу можуть включати одну чи більше амінокислотних замін, делецій чи вставок, як природніх мутацій так і маніпульованих людиною, як зазначено тут.Anti-1II-12 antibodies of the present invention may include one or more amino acid substitutions, deletions, or insertions, both naturally occurring mutations and human engineered ones, as specified herein.
Звісно, що багато амінокислотних замін кваліфікована особа в даній галузі може зробити залежно від багатьох факторів, включаючи вище описані. Взагалі говорячи, кількість амінокислотних замін, вставок та делецій для будь-якого даного протеїну, фрагменту чи його варіанту, що походить від анти-1Ї -12 Ід, не може бути більшою за 40, 30, 20, 19, 18.17, 16, 15, 14, 13, 12,11.10,9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1, так як і 1-30 чи значення в їх межах, як тут зазначено.Of course, many amino acid substitutions can be made by one skilled in the art depending on many factors, including those described above. Generally speaking, the number of amino acid substitutions, insertions and deletions for any given protein, fragment or variant thereof derived from anti-1Y -12 Id cannot be greater than 40, 30, 20, 19, 18.17, 16, 15 .
Амінокислоти в анти-ІЇ-12 антитілі даного винаходу, котрі є основними для функції, можуть бути визначені добре відомими з рівня техніки методами, такими як сайт-спрямованим мутагенезом чи аланін- скануючим мутагенезом (Інапр., А!,зибреї, зирга, Спарієїв 8, 15; Сиппіпойат апа Му/єїї5, Зсіеєпсе 244: 1081- 1085 (1989)Ї. Подальша процедура призводить до поодиноких аланінових мутацій в кожному залишку молекули. Одержані мутантні молекули потім перевіряються на біологічну активність, таку як, але не обмежену до, принаймні однієї дії нейтралізації І--12. Сайти, які є критичними для зв'язування антитіла, також можуть бути виявлені структурним аналізом, таким як кристалізація, ядерний магнітний резонанс чи фотоафінне мічення (Зтій, еї аї., У. Мої. Віо!. 224: 899-904 (1992) апа де Мов, єї аї., Зсієпсе 255: 306-312 (1992)).Amino acids in the anti-II-12 antibodies of the present invention that are essential for function can be determined by methods well known in the art, such as site-directed mutagenesis or alanine-scanning mutagenesis (eg, A!, Zibrei, Zirga, Sparieev 8, 15; Sippipoiate apa Mu/iei5, Science 244: 1081-1085 (1989). The following procedure results in single alanine mutations in each residue of the molecule. The resulting mutant molecules are then tested for biological activity such as, but not limited to, of at least one neutralizing action of I--12. Sites that are critical for antibody binding can also be revealed by structural analysis, such as crystallization, nuclear magnetic resonance, or photoaffinity labeling (Ztiy, ei ai., U. Moi. Vio! . 224: 899-904 (1992) apa de Mov, eyii ai., Zsiepse 255: 306-312 (1992)).
Анти-І/-12 антитіла даного винаходу можуть включати, не обмежуючи до, принаймні одну частину, послідовність чи комбінацію від 5 до всіх безперервних амінокислот принаймні однієї з ЗЕО ІЮ МОБ: 1, 2, 3, 4,5, 6.Anti-I/-12 antibodies of the present invention may include, without limitation, at least one part, a sequence or combination of 5 to all continuous amino acids of at least one of ZEO IU MOB: 1, 2, 3, 4, 5, 6.
І/-12 антитіла чи зазначені частини чи варіанти даного винаходу можуть включати, але не обмежуючись до, принаймні одну частину, послідовністі чи комбінації вибраних з 3-5 безперервних амінокислот з ЗЕО ІЮО МО: 1, 5-17 безперервних амінокислот ЗЕО ІЮ МО: 2, 5-10 безперервних амінокислот з 5ЕО ІЮ МО: 3, 5-11 безперервних амінокислот з ЗЕО ІО МО: 4, 5-7 безперервних амінокислот з БЕО ІЮI/-12 antibodies or specified parts or variants of the present invention may include, but are not limited to, at least one part, a sequence or combination selected from 3-5 continuous amino acids from ZEO IJU MO: 1, 5-17 continuous amino acids ZEO IJU MO: 2, 5-10 continuous amino acids with 5EO IU MO: 3, 5-11 continuous amino acids with ZEO IO MO: 4, 5-7 continuous amino acids with BEO IU
МО: 5; 5-9 безперервних амінокислот з ЗЕО ІО МО: 6; І ец21, І уз76, Меї83, 5ег85 з ЗЕО ІЮ МО: 7.MO: 5; 5-9 continuous amino acids with ZEO IO MO: 6; I ets21, I uz76, Mei83, 5eg85 with ZEO IU MO: 7.
Анти-1/-12 антитіла також необов'язково можуть включати поліпептид з принаймні 70-10090 з 5, 17, 10, 11, 7, 9, 119, чи 108 безперервних амінокислот, принаймні однієї з ЗЕО ІЮ МОБ: 1,2, 3,4, 5,6, 7 чи 8.Anti-1/-12 antibodies can also optionally include a polypeptide of at least 70-10090 of 5, 17, 10, 11, 7, 9, 119, or 108 contiguous amino acids, at least one of ZEO IU MOB: 1,2, 3,4, 5,6, 7 or 8.
В одній з реалізацій, амінокислотна послідовність ланцюга імуноглобуліну, чи його частини (напр., варіабельний регіон, СОК) має приблизно 70-10095 подібності (напр., 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100 чи будь-який їх діапазон чи значення) до амінокислотної послідовності, відповідного ланцюга з принаймні одного з ЗЕО ІЮО МОБ: 7, 8.In one embodiment, the amino acid sequence of the immunoglobulin chain, or part thereof (eg, variable region, VOC) has about 70-10095 similarity (eg, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100 or any range thereof or value) to the amino acid sequence, the corresponding chain from at least one of the ZEO IYUO MOB: 7, 8.
Наприклад, амінокислотна послідовність варіабельного регіону легсого ланцюга може бути порівняна з послідовністю ЗЕО ІО МО: 8, чи амінокислотна послідовність важкого ланцюгу СОКЗ може бути порівняна з 5ЕО ІЮО МО: 3. Переважно, 70-10095 подібності до амінокислот (напр., 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100 чи будь-який їх діапазон чи значення) визначено за допомогою добре відомого на практиці комп'ютерного алгоритму.For example, the amino acid sequence of the variable region of the light chain can be compared to the sequence of ZEO IO MO: 8, or the amino acid sequence of the heavy chain of SOKZ can be compared to 5EO IUO MO: 3. Preferably, 70-10095 amino acid similarities (eg, 90, 91 , 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100 or any range or value thereof) is determined using a computer algorithm well known in practice.
Зразкові послідовності варіабельного регіону легкого та важкого ланцюгів представлені в 5ЕО ГО МО5: 7 апа 8. Антитіла даного винаходу, чи зазначені їх варіанти, можуть включати будь-яку кількість безперервних амінокислотних залишків з антитіла даного винаходу, де це число вибрано з групи цілих значень, які знаходяться в межах 10-10095 від кількості безперервних залишків з анти-1ІЇ-12 антитіл.Exemplary sequences of the variable region of the light and heavy chains are presented in 5EO GO MO5: 7 apa 8. Antibodies of the present invention, or variants thereof, may include any number of contiguous amino acid residues from an antibody of the present invention, where this number is selected from the group of integer values, which are within 10-10095 of the number of continuous residues from anti-1II-12 antibodies.
Необов'язково, підпослідовність неперервних амінокислот має довжину принаймні приблизно 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250 чи більше амінокислот, чи будь-який інтервал чи значення з них. Також, кількість таких підпослідовностей може бути будь-яким цілим числом, вибраним з групи від 1 до 20, таким як, принаймні 2, 3, 4, чи 5.Optionally, the contiguous amino acid subsequence is at least about 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200 in length. , 210, 220, 230, 240, 250 or more amino acids, or any interval or value thereof. Also, the number of such subsequences may be any integer selected from the group of 1 to 20, such as at least 2, 3, 4, or 5.
Спеціалістам у даній галузі зрозуміло, що даний винахід включає принаймні одне біологічно активне антитіло даного винаходу. Біологічно активні антитіла мають специфічну дію, принаймні, 2095, 3095, чи 4095, та переважно, принаймні, 5095, 6095, чи 7095, та більш переважно, принаймні, 80905, 9095, чи 9595-100092 активності природних (несинтетичних), ендогенних чи подібних та відомих антитіл. Методи визначення та підрахунку ферментативної активності та специфічності до субстрату є добре відомими спеціалістам у даній галузі.Those skilled in the art will appreciate that the present invention includes at least one biologically active antibody of the present invention. Biologically active antibodies have a specific activity of at least 2095, 3095, or 4095, and preferably at least 5095, 6095, or 7095, and more preferably, at least 80905, 9095, or 9595-100092 of the activity of natural (non-synthetic), endogenous or similar and known antibodies. Methods for determining and calculating enzymatic activity and substrate specificity are well known to those skilled in the art.
В іншому аспекті, винахід відноситься до антитіл людини та антиген зв'язуючих фрагментів, як описано тут, які модифіковані ковалентним приєднанням органічної частини. Така модифікація може давати антитіла чи антиген зв'язуючий фрагмент із поліпшеними фармакокінетичними показниками (такими як, збільшений періодом напіврозпаду сироватки іп мімо). Органічна частина може бути лінійною чи розгалуженою гідрофільною полімерною групою, групою жирної кислоти, чи групою естеру жирної кислоти.In another aspect, the invention relates to human antibodies and antigen binding fragments, as described herein, which are modified by covalent attachment of an organic moiety. Such modification can provide antibodies or antigen-binding fragments with improved pharmacokinetic parameters (such as increased serum half-life). The organic part can be a linear or branched hydrophilic polymer group, a fatty acid group, or a fatty acid ester group.
В окремому випадку даного винаходу, гідрофільна полімерна група може мати молекулярну масу від приблизно 800 до приблизно 120,000Да та може бути поліалкановим гліколем (таким як, поліетиленгліколь (РЕС), поліпропіленгліколь (РЕСб)), вуглеводним полімером, амінокислотним полімером чи полівінілпіролідоном, та жирнокислотна група чи естерна жирно кислотна група може містити від восьми до чотирнадцяти атомів вуглецю.In a particular embodiment of the present invention, the hydrophilic polymer group can have a molecular weight of from about 800 to about 120,000 Da and can be a polyalkane glycol (such as polyethylene glycol (PES), polypropylene glycol (PESb)), a carbohydrate polymer, an amino acid polymer, or polyvinylpyrrolidone, and a fatty acid group or ester fatty acid group may contain from eight to fourteen carbon atoms.
Модифіковані антитіла та антиген зв'язуючі фрагменти винаходу можуть містити одну або більше органічних часток які є прямо чи непрямо ковалентно зв'язаними з антитілом. Кожна органічна частка, зв'язана з антитілом чи антиген зв'язуючим фрагментом винаходу може незалежно бути гідрофільною полімерною групою, жирнокислотною групою чи естерною жирнокислотною групою. Як використано тут, термін "жирна кислота" охоплює монокарбоксильні та дикарбоксильні кислоти. Термін "гідрофільна полімерна група", як вжито тут, відноситься до органічних полімерів, котрі більш розчинні в воді ніж октан.Modified antibodies and antigen-binding fragments of the invention may contain one or more organic particles that are directly or indirectly covalently linked to the antibody. Each organic particle linked to the antibody or antigen binding fragment of the invention can independently be a hydrophilic polymer group, a fatty acid group or an ester fatty acid group. As used herein, the term "fatty acid" encompasses monocarboxylic and dicarboxylic acids. The term "hydrophilic polymer group" as used herein refers to organic polymers that are more soluble in water than octane.
Наприклад, полілізин є більш розчинним у ваді ніж октан. Таким чином, антитіла, модифіковані ковалентним приєднанням полілізину охоплені винаходом. Гідрофільні полімери, прийнятні для модифікування антитіл винаходу можуть бути лінійні чи розгалужені та включати, наприклад, поліалканові гліколі (такі як, РЕС, монометоксиполіетиленгліколь (пРЕС), РРО та подібні), вуглеводи (такі як, декстрин, целюлоза, олігосахариди, полісахариди та подібні), поліалканові оксиди (такі як, поліетиленоксид, поліпропілен оксид та подібні) та полівінілпіролідон. Переважно, гідрофільний полімер, котрий модифікує антитіло винаходу має молекулярну вагу від приблизно 800 до приблизно 150,000Да, як окрема молекулярна одиниця.For example, polylysine is more soluble in water than octane. Thus, antibodies modified by covalent attachment of polylysine are covered by the invention. Hydrophilic polymers suitable for modifying the antibodies of the invention may be linear or branched and include, for example, polyalkane glycols (such as PES, monomethoxy polyethylene glycol (MPES), PPO, and the like), carbohydrates (such as dextrin, cellulose, oligosaccharides, polysaccharides, and the like ), polyalkane oxides (such as polyethylene oxide, polypropylene oxide and the like) and polyvinylpyrrolidone. Preferably, the hydrophilic polymer which modifies the antibody of the invention has a molecular weight of from about 800 to about 150,000 Da, as a single molecular unit.
Наприклад, може бути використаний РЕСвооо та РЕСгоооо, де нижній індекс вказує на середню молекулярну вагу полімеру в дальтонах. Гідрофільна полімерна група може бути заміщена від одного до шести алкілів, жирнокислотною чи естерною жирнокислотною групами.For example, PESvooo and PESgoooo may be used, where the subscript indicates the average molecular weight of the polymer in daltons. The hydrophilic polymer group can be substituted with one to six alkyl, fatty acid or ester fatty acid groups.
Гідрофільні полімери, заміщені жирними кислотами чи естерами жирних кислот можуть бути одержані прийнятними способами. Наприклад, полімер, котрий включає аміногрупу може бути приєднаний до карбоксилату жирної кислоти чи естеру жирної кислоти, та активований карбоксилат (такий як, активованийHydrophilic polymers substituted with fatty acids or fatty acid esters can be prepared by suitable methods. For example, a polymer that includes an amino group can be attached to a fatty acid carboxylate or fatty acid ester, and an activated carboxylate (such as an activated
М,М-карбонілдиіїімідоазолем) на жирній кислоті чи естері жирної кислоти може бути приєднаний до гідроксильної групи на полімері.M,M-carbonyldiimidazole) on the fatty acid or fatty acid ester can be attached to the hydroxyl group on the polymer.
Жирні кислоти та естери жирних кислот, придатні для модифікування антитіл винаходу можуть бути насиченими чи мати одну чи більше одиниць ненесиченості. Жирні кислоти, придатні для модифікування антитіл винаходу, включають, наприклад, п-додеканоат (Сіг2, лаурат), п-тетрадеканоат (Ста, мирістат), п- октадеконоат (Сів, стеарат), п-еікозаноат (Сго, арахідат) п-докозаноат (Сгг, бегенат), п-триаконтаноат (Сзо), п-тетраконтаноат (Сло), цис-лУ9-октадеканоат (Стів, олеат), усі цис-АБ5,8,11,14-еікозатетраеноати (Сго, арахідонат), октандіонову кислоту, тетрадекандіонову кислоту, актандіонову кислоту, докозандіонова кислота та подібні.Fatty acids and fatty acid esters suitable for modifying the antibodies of the invention may be saturated or have one or more units of unsaturation. Fatty acids suitable for modifying the antibodies of the invention include, for example, p-dodecanoate (Sig2, laurate), p-tetradecanoate (Sta, myristate), p- octadecanoate (Siv, stearate), p-eicosanoate (Sgo, arachidate) p- docosanoate (Sgg, behenate), p-triacontanoate (Szo), p-tetracontanoate (Slo), cis-lU9-octadecanoate (Steve, oleate), all cis-AB5,8,11,14-eicosatetraenoates (Sgo, arachidonate), octanedioic acid, tetradecandioic acid, actandioic acid, docosandioic acid and the like.
Придатні естери жирних кислот включають моноестери дикарбонових кислот, які мають лінійну чи розгалужену нижню алкильну групу. Нижня алкильна група може мати від одного до дванадцяти, переважно, від одного до шести, атомів вуглецю.Suitable fatty acid esters include monoesters of dicarboxylic acids having a linear or branched lower alkyl group. The lower alkyl group can have from one to twelve, preferably from one to six, carbon atoms.
Модифіковані антитіла людини та антиген зв'язуючі фрагменти можуть бути одержані з використанням придатних методів, таких як реакцією з одним чи більше модифікуючих агентів. Термін "модифікуючий агент", використовується тут, по відношенню до придатних органічних груп (таких як, гідрофільний полімер, жирна кислота чи естер жирної кислоти) котрі мають активуючі групи. Термін "активуюча група" є хімічною одиницею чи функціональною групою, котра може, за відповідних умов, реагувати з другою хімічною групою, утворюючи, таким чином, ковалентний зв'язок між модифікуючим агентом та другою хімічною групою. Наприклад, аменореактивна активуюча група включає електорофільні групи такі як, тозилат,Modified human antibodies and antigen-binding fragments can be obtained using suitable methods, such as reaction with one or more modifying agents. The term "modifying agent" is used herein to refer to suitable organic groups (such as a hydrophilic polymer, fatty acid or fatty acid ester) having activating groups. The term "activating group" is a chemical unit or functional group that can, under appropriate conditions, react with a second chemical group, thus forming a covalent bond between the modifying agent and the second chemical group. For example, the amenoreactive activating group includes electrophilic groups such as tosylate,
мезилат, гало (хлоро, бромо, фторо, йодо), М-гідроксисукцинімідил естери (МН), та подібні. Активуючі групи можуть реагувати з тіолами, включаючи, наприклад, малеімідин, йодоацетил, акрололіл, піридин дисульфіди, тиол 5-тиол-2-нітробензойної кислоти (ТМВ-тиол) та подібні. Альдегідна функціональна група може бути приєднана до молекули, що містить амін- чи гідразид, та азидна група може реагувати з тривалентною фосфорною групою, утворюючи фосфоамідат чи фосфоїімідний зв'язки. Придатні способи введення груп в молекули відомі з рівня техніки (див., наприклад, Нептапзоп, 0. Т., Віосопішдаїеmesylate, halo (chloro, bromo, fluoro, iodo), M-hydroxysuccinimidyl esters (MH), and the like. Activating groups can react with thiols, including, for example, maleimidine, iodoacetyl, acrololol, pyridine disulfides, 5-thiol-2-nitrobenzoic acid thiol (TMB-thiol), and the like. An aldehyde functional group can be attached to an amine- or hydrazide-containing molecule, and an azide group can react with a trivalent phosphorus group to form a phosphoamidate or phosphoimide bond. Suitable methods of introducing groups into molecules are known in the art (see, for example, Neptapzop, 0. T., Viosopishdaie
Тесппіднез, Асадетіс Ргев5: Зап Оієдо, СА (1996)). Активуючі групи можуть бути зв'язані безпосередньо до органічних груп (таких як, гідрофільні полімери, жирні кислоти та естери жирних кислот), чи через лінкерні частки, наприклад, двовалентну Сі1-Сі2 групу в якій один чи більше атомів вуглецю можуть бути заміщені на гетероатом, такий як кисень, азот чи сірку. Придатні лінкерні частки включають, наприклад, тетраетиленгліколь, -(СНг)з-, /-МН-(СНг)в-МН-, /-(СНг)»-МН- та /-СН2-О-СНо-СНг-0О-СН2-СНг2-0О-СН-МН-.Tesppidnez, Asadetis Rgev5: Zap Oiedo, SA (1996)). Activating groups can be linked directly to organic groups (such as hydrophilic polymers, fatty acids and fatty acid esters), or through linker moieties, for example, a divalent C1-C2 group in which one or more carbon atoms can be replaced by a heteroatom , such as oxygen, nitrogen, or sulfur. Suitable linker moieties include, for example, tetraethylene glycol, -(CHg)z-, /-MH-(CHg)v-MH-, /-(CHg)»-MH- and /-CH2-O-CHno-CHg-0O- СН2-СН2-ОО-СН-МН-.
Модифікуючі агенти, які мають лінкерні частки можуть бути одержані, наприклад, реагуванням моно-Вос- алкілдиамінів (таких як, моно-Вос-етилендиамін, моно-Вос-диаміногексан) із жирною кислотою в присутності 1-етил-3-(З-диметиламінопропил)-карбодиіміду (ЕОС), утворюючи амідний зв'язок між вільним аміном та карбоксилатом жирної кислоти. Захисна група Вос може бути видалена з продукту обробленням три хлороцтовою кислотою (ТЕА), для того, щоб відкрити первинний амін, котрий може бути приєднаний до іншого карбоксилату, як показано, чи може взаємодіяти з малеїновим ангідридом, та циклізацією отриманого продукту для одержання активованого малеїмідного похідного жирної кислоти Ідив., наприклад,Modifying agents having linker moieties can be prepared, for example, by reacting mono-Bos-alkyldiamines (such as mono-Bos-ethylenediamine, mono-Bos-diaminohexane) with a fatty acid in the presence of 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) )-carbodiimide (EOS), forming an amide bond between the free amine and the fatty acid carboxylate. The Boc protecting group can be removed from the product by treatment with trichloroacetic acid (TEA) to expose the primary amine, which can be attached to another carboxylate, as shown, or react with maleic anhydride, and cyclization of the resulting product to give an activated maleimide fatty acid derivative See, for example,
Тпотрзоп, еї аіІ., УМО 92/16221, повний зміст якого повністю включено сюди шляхом цитування|.Tpotrzop, ei aiI., UMO 92/16221, the full content of which is fully incorporated herein by reference.
Модифіковані антитіла винаходу можуть бути одержані взаємодією антитіла людини чи антиген зв'язуючого фрагменту з модифікуючим агентом. Наприклад, органічна частка може бути приєднана до антитіла, несайт-специфічрим чином з використанням амінорективного модифікуючого агенту, наприклад,Modified antibodies of the invention can be obtained by interaction of human antibodies or antigen binding fragment with a modifying agent. For example, an organic moiety can be attached to an antibody in a non-site-specific manner using an aminoreactive modifying agent, e.g.
МН5 естер РЕб.MH5 ester REb.
Модифіковані антитіла людини чи антиген-зв'язуючі фрагменти можуть, також, бути одержані відновленням дисульфідних зв'язків (таких як, міжланцюгові дисульфідні зв'язки) антитіл чи антиген- зв'язуючих фрагментів. Відновлені антитіла чи антиген-зв'язуючі фрагменти, потім можуть реагувати з тиол- реагуючим модифікуючим фрагментом для одержання модифікованих антитіл винаходу. Модифіковані антитіла людини та/чи антиген-зв'язуючі фрагменти, які містять органічні частки, котрі специфічно зв'язуються з сайтами антитіла даного винаходу, можуть бути отримані використанням придатних методів, таких як реверс ний протеолізи |Різсп еї аї., Віосопісдагє Спеепі., 3: 147-153 (1992); Мепеп еї аї.,Modified human antibodies or antigen-binding fragments can also be obtained by reducing disulfide bonds (such as interchain disulfide bonds) of antibodies or antigen-binding fragments. The reconstituted antibodies or antigen-binding fragments can then be reacted with a thiol-reactive modifying fragment to produce modified antibodies of the invention. Modified human antibodies and/or antigen-binding fragments that contain organic moieties that specifically bind to the antibody sites of the present invention can be prepared using suitable methods such as reverse proteolysis. , 3: 147-153 (1992); Mepep ei ai.,
Віосопішдаїе Спет., 5: 411-417 (1994); Китагап еї аї., Ргоїєїп 5сі. 6 (10): 2233-2241 (1997); НП еї а)., Вісага.Viosopishdaye Spet., 5: 411-417 (1994); Kitagap ei ai., Rgoieip 5si. 6 (10): 2233-2241 (1997); NP ei a)., Visaga.
Спет., 24 (1): 59-68 (1996); Сарейаз еї аї., Віоїесппої. Віоепад., 56 (4): 456-463 (1997)), та методами описаними в |Негтапзоп, 0. Т. Віосопіцдаге Тесппідне5, Асадетіс Рге55: зап Оіедо, СА (1996).Spet., 24 (1): 59-68 (1996); Sareyaz ei ai., Vioyesppoi. Vioepad., 56 (4): 456-463 (1997)), and by the methods described in |Negtapzop, 0. T. Viosopitsdage Tesppidne5, Asadetis Rge55: zap Oiedo, SA (1996).
Похідні протеїнові композиції антиідіотипічних анти-і! 2 |з антитілDerivative protein compositions of anti-idiotypic anti-i! 2 from antibodies
На додаток до моноклональних чи химерних анти-1І-12 антитіл, даний винахід також спрямований на антиідіотипічні (анти-Іа) антитіла, специфічні до таких антитіл винаходу. Анти-|Іа антитіла є антитілами, котрі розпізнають унікальні детермінанти звичайно пов'язані з регіоном зв'язування антигену іншого антитіла.In addition to monoclonal or chimeric anti-1I-12 antibodies, the present invention is also directed to anti-idiotypic (anti-Ia) antibodies specific for such antibodies of the invention. Anti-Ia antibodies are antibodies that recognize unique determinants usually associated with the antigen-binding region of another antibody.
Анти-іа можуть бути одержані імунізацією тварин того ж виду та генетичного типу (такихяк, мишачі лінії) так як і джерело Ід-антитіл чи його регіон, який СОК. Імунізовані тварини будуть розпізнавати та відповідати на ідиотипічні детермінанти імунізуючих антитіл та виробляти анти-ій антитіла.Anti-Ia can be obtained by immunization of animals of the same species and genetic type (for example, mouse lines) as well as the source of Id-antibodies or its region, which is SOC. Immunized animals will recognize and respond to the idiotypic determinants of the immunizing antibodies and produce anti-I antibodies.
Похідні протеїнові композиції анти-1Ї -2 ІЗDerived protein compositions of anti-1Y -2 IZ
Даний винахід також пропонує принаймні одну композицію анти-1Ї-12 антитіл, котра містить принаймні одне, принаймні два, принаймні три, принаймні чотири, принаймні п'ять, принаймні шість чи більше анти-І-- 12 його антитіл, як показано тут та/або відомо з рівня техніки, котрі представлені у вигляді композиції, суміші чи у формі, що не зустрічається в природі. Такі композиції включають, принаймні, композиції, що не зустрічаються в природі, включаючи, принаймні, одну чи дві амінокислотні послідовності анти-1І-12 антитіла повної довжини, варіанти, домени, фрагменти чи зазначені варіанти позбавлені С- та/або М-термінальної послідовності, вибрані з групи, що містить 70-10095 від повних амінокислотних послідовностей з 5ЕО ІЮThe present invention also provides at least one anti-I-12 antibody composition comprising at least one, at least two, at least three, at least four, at least five, at least six or more anti-I-12 antibodies thereof, as shown herein and /or known from the state of the art, which are presented in the form of a composition, mixture or in a form that does not occur in nature. Such compositions include at least non-naturally occurring compositions including at least one or two amino acid sequences of a full-length anti-1I-12 antibody, variants, domains, fragments, or said variants lacking the C- and/or M-terminal sequence , selected from the group containing 70-10095 of the complete amino acid sequences with 5EO IU
МОБ: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 чи 8 чи зазначених, фрагментів, доменів чи їх варіантів. Переважні композиції похідних анти-1ІЇ--12 протеїнів, фрагментів чи варіантів, включають принаймні одну чи дві повної довжини, фрагмент чи варіант частини послідовності анти-1І -12 антитіла, що містить СОР, 70-10095 5ЕО ІЮ МОБ: 1, 2,MOB: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 or 8 or the specified fragments, domains or their variants. Preferred compositions of derivatives of anti-1II-12 proteins, fragments or variants, include at least one or two full-length, fragment or variant part of the sequence of anti-1II-12 antibodies, containing COP, 70-10095 5EO IYU MOB: 1, 2,
З, 4, 5, 6, чи зазначений фрагмент, домен чи їх варіант. Така композиція може мати процентний склад по масі, об'єму, концентрації, полярності чи моляльності як на рідкий так і на сухий розчин, суміш. Суспензію, емульсію чи колоїд, як відомо з рівня техніки чи описано тут.With, 4, 5, 6, is the specified fragment, domain or their variant. Such a composition can have a percentage composition by mass, volume, concentration, polarity or molality, both for a liquid and for a dry solution, a mixture. Suspension, emulsion or colloid as known in the art or described herein.
Композиції анти-ІЇ/-12 антитіл даного винаходу також можуть включати принаймні одну з будь-яких придатних та ефективних кількостей композиції чи фармацевтичної композиції, що включає принаймні одне анти-1--12 антитіло в клітині, тканині, органі, тварині чи пацієнті за потреби в модуляції, лікуванні чи терапії, яка необов'язково включає принаймні один ТМЕ-антагоніст (такий як, яле не обмежуючи ним, ТМЕ- антитіло, чи фрагмент, розчинний ТМЕ-рецептор чи фрагмент, злитий його протеїн чи мала молекула ТМЕ- антагоніста), анти ревматичний засіб (такий як, метотрексат, ауранофін, ауротіоглюкоза, азатіоприн, етанерсепт, золото-натрію тіомалат, гадроксихлорохін сульфат, лефлюномід, сульфазалзин), м'язовий релаксант, наркотик, нестероїдний протизапальний засіб (М5АЇ!Ю), анальгетик, анестетик, седативний засіб, місцевий анестетик, нервово-м'язовий блокатор, протимікробний (такий як, аміноглікозид, протигрибковий, протипаразитний, антивірусний, карбапенем, цефалоспорин, фторохінолон, макроліт, пеніцилін, сульфонамід, тетрациклін, інший антимікробний засіб), антипсоріатичний, корти костероїд, анаболічний стероїд, діабетичний агент, мінеральні й харчові добавки, тироїдний агент, вітамін, гормон пов'язаний з кальцієм, протидіарейний засіб, засіб проти кашлю, проти виразковий, послаблюючий, антикоагулянт, еритропоетин (такий як епоетин альфа), фіграстим (такий як, 6-С5Е, Мепродеп), саграмостим (СМ-С5БЕ,The anti-II/-12 antibody compositions of the present invention may also include at least one of any suitable and effective amounts of a composition or pharmaceutical composition comprising at least one anti-1-12 antibody in a cell, tissue, organ, animal, or patient according to the need for modulation, treatment or therapy, which optionally includes at least one TME antagonist (such as, but not limited to, a TME antibody or fragment, a soluble TME receptor or a fragment, a fusion protein thereof, or a small molecule TME antagonist ), anti-rheumatic agent (such as methotrexate, auranofin, aurothioglucose, azathioprine, etanercept, gold-sodium thiomalate, hadroxychloroquine sulfate, leflunomide, sulfasalazine), muscle relaxant, narcotic, non-steroidal anti-inflammatory agent (NSAID), analgesic, anesthetic, sedative, local anesthetic, neuromuscular blocker, antimicrobial (such as, aminoglycoside, antifungal, antiparasitic, antiviral, carbapenem, cephalosporin, fluoroquinolone, macrolith, peni cilin, sulfonamide, tetracycline, other antimicrobial), antipsoriatic, corticosteroid, anabolic steroid, diabetic agent, mineral and dietary supplement, thyroid agent, vitamin, calcium-related hormone, antidiarrheal, antitussive, antiulcer, laxative , anticoagulant, erythropoietin (such as epoetin alfa), figrastim (such as, 6-C5E, Meprodep), sagramostim (SM-C5BE,
І ешкіпе), імунізатор, імуноглобулін, імуносупресор, (такий як базіліксимаб, циклоспорин, даклизумаб), гормон росту, замінюючі гормони ліки, модулятор рецептору естрогену, мідріатичний, циклопедичний, алкілуючий агент, антиметаболіт, інгібітор мітозу, радіо фармацевтичний засіб, антидепресант, антиманійний агент, антипсихотичний, антиксиолітичний, гіпнотичний, симпатомемічний засоби, стимулятор, донепезіл, такрин, асматичні ліки, бета агоніст, інгаляційний стероїд, інгібітор лейкотриену,And crew), immunizer, immunoglobulin, immunosuppressant, (such as basiliximab, cyclosporine, daclizumab), growth hormone, hormone replacement drug, estrogen receptor modulator, mydriatic, cyclopedic, alkylating agent, antimetabolite, mitosis inhibitor, radiopharmaceutical, antidepressant, antimanic agent, antipsychotic, antixiolytic, hypnotic, sympathomimetic, stimulant, donepezil, tacrine, asthma medication, beta agonist, inhaled steroid, leukotriene inhibitor,
метилксантин, хромолин, епінефрин чи аналог, дорназа альфа(Ри!тогуте), цитокін чи агоніст цитокіну.methylxanthine, cromolyn, epinephrine or analog, dornase alfa (Rytogute), cytokine or cytokine agonist.
Необмежуючі приклади таких цитокінінів включають, але не обмежують до, будь-який з від І/-1 до 1-23. придатні дозування є добре відомини. Див. напр., УмеїІ5 еї аІ., еа5., Рпаппасоїйпегару Напароок, 2па Еайіоп,Non-limiting examples of such cytokinins include, but are not limited to, any of I/-1 to 1-23. suitable dosages are well known. See eg.
Арріеєюп апа Гапде, біатіога, СТ (2000); РОВ Рпаптасоровїа, Тагазсоп Роскеї Рнпаптасоровєїа 2000, ОеїшхеArrieyup apa Gapde, biatioga, ST (2000); ROV Rpaptasorovia, Tagazsop Roskei Rnapptasorovia 2000, Oeishke
Еайоп, Тагазсоп Рибіївєпіпо, Сота Гіпда, СА (2000), кожен з яких повністю включено шляхом посилання).Eayop, Tagazzop Rybiivepipo, Sota Gipda, SA (2000), each of which is incorporated by reference in its entirety).
Протиракові та проти інфекційні засоби можуть також включати молекули токсинів, котрі пов'язані, зв'язані, разом формулюються чи разом приймаються з принаймні одним антитілом даного винаходу.Anti-cancer and anti-infective agents may also include toxin molecules that are linked, bound, co-formulated or co-administered with at least one antibody of the present invention.
Токсин може, необов'язково діяти, селективно вбиваючи патогенні клітини чи тканини. Патогенні клітини можуть бути раковими чи іншими клітинами. Такі токсини можуть бути, але не обмежуючись цим, очищеними чи рекомбінантними токсинами, чи фрагментом токсину, який включає принаймні один цитотоксичний домен токсину, такий як, вибраний з принаймні одного з, рицин, зміїний (тваринний) токсин, чи бактеріальний токсин. Термін "токсин" також включає як ендотоксини, так і екзотоксини, які виробляються будь-якими природніми, мутантними чи рекомбінантними бактеріями чи вірусами, котрі можуть призводити до будь-яких патологічних станів у людей та інших ссавців, включаючи токсиновий шок, котрий може призвести до смерті. Такі токсини можуть включати, але не обмежуючись до них, теплолабільний ентеротоксин (ІТ), та тепло-стабільний ентеротоксин (57), ентеротоксигенної Е.соїї, цитотоксин ЗПпідеЇПа, ентеротоксини Аеготопав, їохіп-1 синдрому токсичного шоку (Т551-1), стафілококовий ентеротоксин А (5ЕА), епіегоїохіп В (ЗЕВ), чи С (ЗЕС), стрептококові ентеротоксини та подібні. Такі бактерії включають, але не обмежуються ними, штами та види ентеротоксигенної Е. соїї (ЕТЕС), ентерогеморрагічної ЄЕ. соїї (такі як, штами серотипу 0157:Н7), еїарпуюсосси5 о5ресіе5 (такі як,A toxin may optionally act by selectively killing pathogenic cells or tissues. Pathogenic cells can be cancerous or other cells. Such toxins may be, but are not limited to, purified or recombinant toxins, or a toxin fragment that includes at least one cytotoxic toxin domain, such as, selected from at least one of, ricin, snake (animal) toxin, or bacterial toxin. The term "toxin" also includes both endotoxins and exotoxins produced by any natural, mutant or recombinant bacteria or virus that can cause any pathological condition in humans and other mammals, including toxin shock that can lead to death Such toxins may include, but are not limited to, heat-labile enterotoxin (IT), and heat-stable enterotoxin (57), enterotoxigenic E. soya, Cytotoxin ZPpideIPa, Aegotopav enterotoxins, toxic shock syndrome Iohip-1 (T551-1), staphylococcal enterotoxin A (5EA), epiegoihip B (ZEV), or C (ZES), streptococcal enterotoxins and the like. Such bacteria include, but are not limited to, strains and species of enterotoxigenic E. soya (ETES), enterohemorrhagic EE. soybeans (such as strains of serotype 0157:H7), soybeans (such as
Зарнуососси5 ацгеи5, Зіарпуіососсиз руодепевз), ЗпідеПйа зресіез (такі як, ЗпідейПа дузепіегіає, ЗпідеПаZarnuosossi5 atsgei5, Ziarpuiosossiz ruodepevz), ZpidePya zresiez (such as, ZpideiPa duzepiegiae, ZpidePa
Пехпегі, Зпідеїа роудіїї, апа ЗпідеПа зоппеї), Заітопеїйа з5ресіез5 (такі як, ЗаІтопеїІа їурпі, Заітопейа споїега- зців, Заітопеї Іа епіегійаїв), Сіозіпаішт з5ресіез (такі як, Сіовігідіит регітіпдеп5, Сіозігідішт аїйсіе, Сіовігідінт роїшіпит), Сатру!обасіег зресіез (такі як, Сатруобасіег іе)пі, Сатруорасіег Ттеф5), Неїїсорасіег зресіев, (такі як, Неїїсорасієег руїогі), Аеготопах 5зресіез (такі як, Аеготопаз зобра, Аеготопаз пуагорпіїа, Аеготопав саміає), Ріезіотопаз 5ПідеПоїде5, Мегзіпа епіегосоїйіса, Мірпйобз зресіез (е. 9., Мібпоз сНоіегає, Міргіоз раганетої/уїїсив), Кіервзієа зресіеєх, Реендотопавз аєгидіпоза, апа бігеріососсі. |Див., такі як, 5беїп, ед.,Pehpegi, Zpideia rowidii, apa ZpidePa zoppei), Zaitopeiia z5resiez5 (such as, ZaItopeiIa iurpi, Zaitopeia spoiegaztsiv, Zaitopei Ia epiegiyaiv), Siozipaisht z5resiez (such as, Siovigidiit regitipdep5, Siozigidisht aiysie, Siovigid Satruez roisige) such as, Satruobasieg ie)pi, Satruorasieg Ttef5), Neijsorasieg zresiev, (such as, Neijsorasieg ruiogi), Aegotopach 5zresiez (such as, Aegotopaz zbra, Aegotopaz puagorpiia, Aegotopav samiae), Riesiotopaz 5PidePoide5, Megzipa epiegosoiiisa, Mirpez (obz. zresieg 9., Mibpoz sNoiegae, Myrgioz raganetoi/uiissiv), Kiervziea zresieeh, Reendotopavz aegidiposa, apa bigeriosossi. |See, such as, 5beip, ed.,
ІМТЕАМАЇ МЕБІСІМЕ, Зга ей., рр.1-13, ГішШе, Вгом/п апа Со., Возіюоп, (1990); Емапв еї аї., еадз., Васієгіа!IMTEAMAI MEBISIME, Zga ey., pp. 1-13, GishShe, Vgom/p apa So., Voziyuop, (1990); Emapv ei ai., eadz., Vasiegia!
Іп'єсіоп5е ої Нитапе: Ерідетіоіюду апа Сопігої, 26. Ед., рр.239-254, Ріепит Меаїса! ВоокК Со., Мем/ Хоїк (1991); Мапавеї! єї а), Рііпсіріє5 апа Ргасіїсе ої Іпгесійсив Оізеазев5, За. Еа., СпигспіїЇ Пміпдвіопе. Мем Хоїк (1990); Вегком єї а, едв., Те Мегок Мапиаї, 16ї1йп еайоп, Мегсок апа Со., Вапмау, М. у., 1992; Мооа еї аї,Ipiesiop5e oi Nytape: Eridetioiyudu apa Sopigoi, 26. Ed., pp. 239-254, Riepyt Meais! VookK So., Mem/ Khoik (1991); Mapavai! eyi a), Riipsiriye5 apa Rgasiise oi Ipgesiysiv Oizeazev5, Za. Ea., SpigspiiY Pmipdviope. Mem Hoik (1990); Vegkom yei a, edv., Te Megok Mapiai, 16i1yp eayop, Megsok apa So., Wapmau, M. u., 1992; Mooa hey ay
ЕРЕМ5 Місгобіоіоду Іттипоіоду, 76: 121-134 (1991); Маїтаск еї аїЇ, бсієпсе, 248: 705-711 (1990), зміст цих посилань повністю включено шляхом посилання).EREM5 Misgobioiodu Ittypoiodu, 76: 121-134 (1991); Maytask et al., Biopsy, 248: 705-711 (1990), the contents of these references are incorporated by reference in their entirety).
Суміші, композиції чи комбінації анти-іІІ-12 антитіл даного винаходу, також можуть включати принаймні один будь-який придатний допоміжний компонент, такий як, але не обмежуючись ними, розбавник, зв'язувач, стабілізатор, буфери, солі, ліофільні сольвенти, консерванти, ад'ювант, або подібний.Anti-II-12 antibody mixtures, compositions or combinations of the present invention may also include at least one of any suitable excipient such as, but not limited to, a diluent, binder, stabilizer, buffers, salts, lyophilic solvents, preservatives , adjuvant, or similar.
Фармацевтично придатні допоміжні агенти є переважними. Не обмежуючі приклади та методи отримання таких стерильних розчинів є добре відомими, такі як, але не обмежуючись ними, (Сеппаго, Еда.,Pharmaceutically acceptable excipients are preferred. Non-limiting examples and methods of preparing such sterile solutions are well known, such as, but not limited to, (Seppago, Ed.,
Кепііпдіоп'є Рпаптасешіса! Зсіепсе5, 18п Еайіоп, Маск Рибіїзпіпд Со. (Еазіоп, РА) 1990). Фармацевтично придатні носії, які можуть бути підібрані звичайним чином, є придатними за способом вживання, розчинністю та/або стабільністю композицій анти-1І-12 антитіл, фрагментів чи варіантів, як добре відомо з практики чи описано тут.Kepiipdiopye Rpaptaseshis! Zsiepse5, 18p Eaiiop, Musk Rybiizpipd So. (Easiop, RA) 1990). Pharmaceutically acceptable carriers, which may be selected in a conventional manner, are suitable for the route of administration, solubility and/or stability of the anti-1I-12 antibody compositions, fragments or variants, as is well known in the art or described herein.
Фармацевтичні наповнювачі та добавки корисні в даній композиції включають, але не обмежують до, протеїни, пептиди, амінокислоти, ліпіди та вуглеводи (такі як, цукри, включаючи моносахариди, ди-, три-, тетра- та олігосахариди; похідні сахаридів такі як алдитоли, альдонові кислоти, естерифіковані цукри та подібні; полісахариди та полімери цукрів), котрі можуть бути представлені окремо чи в комбінації, включаючи один чи комбінацію 1-99.9995 за вагою чи об'ємом. Показовий протеїновий екципієнт включає сироватковий альбумін, такий як, сироватковий альбумін людини (Н5А), рекомбінантний альбумін людини (НА), желатин, казеїн та подібні. Представником амінокислотного /антитіло компоненту, котрий може діяти з буферною здатністю, включаючи аланін, гліцин, аргінін, бетаїн, гістидин, глютамінову кислоту, аспарагінову кислоту, цистеїн, лізин, лейцин, ізолейцин, валін, метіонін, фенілаланін, аспартам, та подібні.Pharmaceutical excipients and additives useful in this formulation include, but are not limited to, proteins, peptides, amino acids, lipids, and carbohydrates (such as sugars, including monosaccharides, di-, tri-, tetra-, and oligosaccharides; saccharide derivatives such as alditols, aldonic acids, esterified sugars and the like; polysaccharides and polymers of sugars), which may be present alone or in combination, including alone or in combination 1-99.9995 by weight or volume. Exemplary protein excipients include serum albumin, such as human serum albumin (H5A), recombinant human albumin (HA), gelatin, casein, and the like. A representative amino acid/antibody component that can act with a buffering capacity, including alanine, glycine, arginine, betaine, histidine, glutamic acid, aspartic acid, cysteine, lysine, leucine, isoleucine, valine, methionine, phenylalanine, aspartame, and the like.
Переважною амінокислотою є гліцин.The predominant amino acid is glycine.
Вуглеводневі наповнювачі, придатні для використання у винаході включають, наприклад, моносахариди, такі як, лактозу, сахарозу, трегалозу, целобіозу, та подібні; полісахариди, такі як, рафінозу, мелезітозу, мальтодекстрини, декстрини, крохмалі, та подібні, альдитоли, такі як, манітол, ксилітол, малтітол, лактітол, ксилітол сорбітолу (глюцитол) міоінозитол, та подібні. Переважним вуглеводним наповнювачем для використання у винаході є манітол, трегалоза та рафіноза.Hydrocarbon fillers suitable for use in the invention include, for example, monosaccharides such as lactose, sucrose, trehalose, cellobiose, and the like; polysaccharides such as raffinose, melezitose, maltodextrins, dextrins, starches, and the like, alditols such as mannitol, xylitol, maltitol, lactitol, xylitol, sorbitol (glucitol), myoinositol, and the like. Preferred carbohydrate fillers for use in the invention are mannitol, trehalose and raffinose.
Композиції анти-І/-12 антитіл також можуть включати буфер чи агент, що корегує рН; звичайно, буфером є сіль, одержана з органічної кислоти чи основи. Типовими представниками буферів є солі органічних кислот, таких як солі лимонної кислоти, аскорбінової кислоти, глюконової кислоти, вугільної кислоти, тартакової кислоти, бурштинової кислоти, оцтової кислоти, фталевої кислоти; Тріс, трометамін гідрохлорид чи фосфатний буфер. Переважними буферами для використання в даних композиціях є солі органічних кислот, такі як цитрат.Anti-I/-12 antibody compositions may also include a buffer or pH-adjusting agent; of course, a buffer is a salt derived from an organic acid or base. Typical representatives of buffers are salts of organic acids, such as salts of citric acid, ascorbic acid, gluconic acid, carbonic acid, tartaric acid, succinic acid, acetic acid, phthalic acid; Tris, tromethamine hydrochloride or phosphate buffer. Preferred buffers for use in these compositions are salts of organic acids, such as citrate.
Також, композиції анти-ІЇ-12 антитіл винаходу можуть включати полімерні наповнювачі/добавки такі як полівінілпіролідони, фіколи (полімерні цукри), декстрати (такі як, циклодекстрини, такі як 2-гідроксипропіл- (З-циклодекстрин), поліетиленгліколі, ароматизуючи агенти, атимікробні агенти, підсоллоджувачі, антиоксиданти, антистатичні агенти, сурфактанти (такі як, полісорбати, напр., "ТВИН 20" та "ТВИН 80"), ліпіди (такі як, фосфоліпіди, жирні кислоти) стероїди (напр., холестирол) та хелатоутворюючі агенти (напр.,Also, anti-II-12 antibody compositions of the invention may include polymeric fillers/additives such as polyvinylpyrrolidones, ficols (polymeric sugars), dextrates (such as cyclodextrins, such as 2-hydroxypropyl-(3-cyclodextrin), polyethylene glycols, flavoring agents, antimicrobial agents, sweeteners, antioxidants, antistatic agents, surfactants (such as polysorbates, e.g., TWIN 20 and TWIN 80), lipids (such as phospholipids, fatty acids), steroids (e.g., cholesterol) and chelating agents agents (eg
ЕОТА).EOTA).
ЦІ та інші відомі фармацевтичні наповнювачі та/або добавки придатні для використання в композиціях анти-1--12 антитіл, їх частин чи варіантів, відповідно до винаходу є добре відомими спеціалістам, як це описано в ("Кетіпдіоп: Те Зсіепсе 8 Ргасіїсе ої Рпаптасу", 19 ей., УММіШате 8 УМіПатв, (1995), апа іпThese and other known pharmaceutical excipients and/or additives suitable for use in anti-1-12 antibody compositions, parts or variants thereof, according to the invention are well known to those skilled in the art, as described in ", 19 ey., UMMiShate 8 UMiPatv, (1995), apa ip
Іпе"Рпузісіап'є ОезК Кетегепсе", 5274 ед., Медіса! Есопотіс5, МопімаІе, МУ (1998), дані розкриття повністю включено шляхом посилання)|. Переважним носієм чи наповню вальним матеріалом є вуглеводи (такі як, сахариди та алдітоли) та буфери (напр., цитрат) чи полімерні агенти.Ipe "Rpuzisiapye OezK Ketegepse", 5274 ed., Medisa! Esopotis5, Mopimaie, MU (1998), disclosures incorporated in their entirety by reference)|. Preferred carriers or bulking materials are carbohydrates (such as saccharides and alditols) and buffers (eg, citrate) or polymeric agents.
СкладиWarehouses
Як було зазначено вище, винаходом передбачуються стабільні склади, котрі переважно є фосфатним буфером із сольовим розчином чи розчином певної солі, так само як консервований розчин містить консерванти, а консервовані склади широкого призначення придатні для фармацевтичного чи ветеринарного використання, які включають принаймні одне анти-ІЇ/-12 антитіло у фармацевтично прийнятному складі. Консервовані склади містять принаймні один відомий консервант чи, необов'язково, вибраний з групи, яка має принаймні один фенол, т-крезол, р-крезол, о-крезол, хлорокрезол, бензольний спирт, фенілртутний нітрил, феноксиетанол, формальдегід, хлорбутанол, магнію хлорид, (напр., гексагідрат), алкиллпарабен (метил, етил, пропил, бутил, та ін.), бензалконій хлорид, бензетоній хлорид, натрію дегідроацетат та тримерозал, чи їхні суміші в водному розчиннику. Можуть бути використані будь-які придатні концентрації чи суміші, як відомо з рівня техніки, такі як 0.001-595, чи будь-який інтервал чи значення в ньому, такі як, але не обмежуючись ними, 0.001, 0.003, 0.005, 0.009, 0.01, 0.02, 0.03, 0.05, 0.09, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1.0, 1.1, 1.2, 1.5, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8,1.9,2.0,2.1,2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.1,2.8,2.9, 3.0, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4.0, 4.3, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9 чи будь-який інтервал чи значення в ньому. Не обмежуючі приклади включають: без консервантів, 0.1-295 т-крезол (напр., 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.9, 1.095), 0.1-395 бензил алкоголь (напр., 0.5, 0.9, 1.1, 1.5, 1.9, 2.0, 2.5905), 0.001-0.595 тримерозал (напр., 0.005, 0.01), 0.001-2.095 фенол (напр., 0.05, 0.25, 0.28, 0.5, 0.9, 1.095), 0.0005-1.095 алкилпарабен(и) (напр., 0.00075, 0.0009, 0.001, 0.002, 0.005, 0.0075, 0.009, 0.01, 0.02, 0.05, 0.075, 0.09, 0.1, 0.2, 0.3, 0.5, 0.75, 0. 9, 1.095), та подібне.As stated above, the invention provides stable formulations, which are preferably phosphate buffered saline or a solution of a specific salt, just as the preserved solution contains preservatives, and the preserved formulations of general purpose suitable for pharmaceutical or veterinary use, which include at least one anti-II /-12 antibody in a pharmaceutically acceptable composition. The preserved formulations contain at least one known preservative or optionally selected from the group consisting of at least one phenol, t-cresol, p-cresol, o-cresol, chlorocresol, benzene alcohol, phenylmercury nitrile, phenoxyethanol, formaldehyde, chlorobutanol, magnesium chloride, (e.g., hexahydrate), alkylparaben (methyl, ethyl, propyl, butyl, etc.), benzalkonium chloride, benzethonium chloride, sodium dehydroacetate and trimerosal, or mixtures thereof in an aqueous solvent. Any suitable concentration or mixture known in the art may be used, such as 0.001-595, or any interval or value therein, such as, but not limited to, 0.001, 0.003, 0.005, 0.009, 0.01 , 0.02, 0.03, 0.05, 0.09, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1.0, 1.1, 1.2, 1.5, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8. ,2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.1,2.8,2.9, 3.0, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4.0, 4.3, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9 or any interval or value within it. Non-limiting examples include: preservative free, 0.1-295 t-cresol (eg, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.9, 1.095), 0.1-395 benzyl alcohol (eg, 0.5, 0.9, 1.1, 1.5, 1.9, . 0.00075, 0.0009, 0.001, 0.002, 0.005, 0.0075, 0.009, 0.01, 0.02, 0.05, 0.075, 0.09, 0.1, 0.2, 0.3, 0.5, 0.75, 0.9, 1.095), and the like.
Як було зазначено вище, винаходом запропоновано виріб, який складається зпакувального матеріалу та принаймні одиного флакону, який містить розчин принаймні одного анти-1ІЇ-12 антитіла, із певними буферами та/або консервантами, необов'язково у водному розчиннику, де зазначений пакувальний матеріал має зазначення, котре вказує на те, що цей розчин може зберігатися на протязі 1,2, 3,4,5,6, 9, 12, 18, 20, 24, 30, 36, 40, 48, 54, 60, 66, 72 годин чи більше.As stated above, the invention provides an article consisting of a packaging material and at least one vial containing a solution of at least one anti-1II-12 antibody, with certain buffers and/or preservatives, optionally in an aqueous solvent, wherein said packaging material has indication that this solution can be stored for 1,2, 3,4,5,6, 9, 12, 18, 20, 24, 30, 36, 40, 48, 54, 60, 66, 72 hours or more.
Винахід також включає виріб, який складається з пакувального матеріалу, пешого флакону із ліофілізованим принаймні одним антитілом, та другого флакону із водним розчинником з буфером чи консервантом, де зазначений пакувальний матеріал має зазначення з інструкцією для пацієнта, як правильно розчинити принаймні одне анти-1ІЇ-12 антитіло у водному розчиннику для одержання розчину, котрий може зберігатися на протязі двадцяти чотирьох годин чи більше.The invention also includes an article consisting of a packaging material, a foot vial with lyophilized at least one antibody, and a second vial with an aqueous solvent with a buffer or preservative, where said packaging material is marked with instructions for the patient how to properly dissolve at least one anti-1II- 12 antibody in an aqueous solvent to obtain a solution that can be stored for twenty-four hours or more.
Принаймні одне анти-1І -12 антитіло, яке застосовується у відповідності з даним винаходом і може бути одержане методом рекомбінації, та включає приготування з клітин ссавців чи трансгенні, чи може бути виділено з біологічних джерел, як описано тут чи відомо з практики.At least one anti-1I-12 antibody, which is used in accordance with the present invention and can be obtained by the method of recombination, and includes preparations from mammalian cells or transgenic, or can be isolated from biological sources, as described herein or known in the art.
Певний набір принаймні одного анти-1ІЇ-12 антитіла в продукті даного винаходу може включати певну кількість отриману в наслідок регідратації, якщо в системі вологий/сухий, концентрації будуть становити від приблизно 1.0нд/ті до приблизно 1000тд/ті, хоча нижчі чи вищі концентрації є допустимими та залежними від призначеного носія чи засобу доставки, наприклад, склади у розчині будуть відрізнятися від трансдермального пластиру, легеневого, трансмукозного чи осмотичного чи мікронасосного методу.A certain set of at least one anti-1II-12 antibody in a product of the present invention may include a certain amount obtained as a result of rehydration, if in a wet/dry system, the concentrations will be from about 1.0 nd/ti to about 1000 td/ti, although lower or higher concentrations are permissible and dependent on the intended carrier or delivery method, for example, formulations in a solution will differ from a transdermal patch, pulmonary, transmucosal or osmotic or micropump method.
Переважно, водний розчинник необов'язково може включати фармацевтично прийнятну кількість консерванту. Переважні консерванти включають вибрані з групи: фенол, т-крезол, р-крезол, о-крезол, хлорокрезол, бензольний спирт, алкилпарабен (метил, етил, пропил, бутил, та ін.), бензалконій хлорид, бензетоній хлорид, натрію дегідроацетат та тримерозал, чи їхні суміші. Концентрації консерванту, що використовується у складах є концентраціями, достатніми для досягнення антимікробного ефекту. Такі концентрації залежать від вибраного консерванту та завжди можуть бути визначені досвідченим професіоналом.Preferably, the aqueous solvent may optionally include a pharmaceutically acceptable amount of preservative. Preferred preservatives include phenol, t-cresol, p-cresol, o-cresol, chlorocresol, benzene alcohol, alkylparaben (methyl, ethyl, propyl, butyl, etc.), benzalkonium chloride, benzethonium chloride, sodium dehydroacetate and trimerozal, or their mixtures. Concentrations of the preservative used in the formulations are concentrations sufficient to achieve an antimicrobial effect. Such concentrations depend on the preservative chosen and can always be determined by an experienced professional.
Інші наповнювачі, наприклад, ізотонічні агенти, буфери, антиоксиданти, підсилювачі консервантів, можуть, необов'язково, бути доданими до розчинника. Ізотонічний агент, такий як гліцерин, є загально вживаним у відомих концентраціях. Фізіологічно толерантний буфер, переважно додається для покращення контролю рН. Склади можуть мати широкий спектр значень рн, такий як від приблизно рН 4 до приблизно рН 10, та переважні значення від приблизно рН 5 до приблизно рн 9, та більш переважні значення від приблизно рН 6.0 до приблизно рН 8.0. Переважні склади даного винаходу мають значення рн від приблизно рН 6.8 до приблизно рН 7.8. Переважні буфери включають фосфатні буфери, біль переважно фосфат натрію, закрема забуферений сольовий розчин (РВ5Б).Other excipients, for example, isotonic agents, buffers, antioxidants, preservative enhancers, may optionally be added to the solvent. An isotonic agent such as glycerin is commonly used in known concentrations. Physiologically tolerant buffer, preferably added to improve pH control. The formulations can have a wide range of pH values, such as from about pH 4 to about pH 10, and preferably from about pH 5 to about pH 9, and more preferably from about pH 6.0 to about pH 8.0. Preferred compositions of this invention have a pH value of about pH 6.8 to about pH 7.8. Preferred buffers include phosphate buffers, preferably sodium phosphate, in particular buffered saline (PB5B).
Інші добавки, такі як фармацевтично прийнятні солюбілізатори, як Твин 20 (поліоксиетилен (20) сорбітан монолаурат), Твин 40 (поліоксиетилен (20) сорбітан монолаурат), Твин 80 (поліоксиетилен (20) сорбітан монолаурат), Рійгопіс Еб8 (блок сополімери поліоксиетилен полаоксипропілен) та РЕО (поліетиленгліколь) чи неіонні сурфактанти, такі як полісорбати 20 чи 80, чи роїохатег184 чи 188 Рішгопісю поліли, інші блок сополімери та хелатори, такі як ЕОТА та ЕСТА, необов'язково можуть бути додані до складів чи композицій для зменшення агрегації. Ці добавки, зокрема, є корисними, якщо для введення складу використовується пластиковий контейнер си помпа. Присутність фармацевтично прийнятного сурфактанту знижує схильність протеїну до агрегації.Other additives such as pharmaceutically acceptable solubilizers such as Twin 20 (polyoxyethylene (20) sorbitan monolaurate), Twin 40 (polyoxyethylene (20) sorbitan monolaurate), Twin 80 (polyoxyethylene (20) sorbitan monolaurate), Rygopis Eb8 (block copolymer polyoxyethylene polaoxypropylene ) and REO (polyethylene glycol) or nonionic surfactants, such as polysorbates 20 or 80, or Roiochateg 184 or 188 Rishgopisyu polyls, other block copolymers and chelators, such as EOTA and ESTA, may optionally be added to formulations or compositions to reduce aggregation. These additives, in particular, are useful if a plastic container and pump are used to introduce the composition. The presence of a pharmaceutically acceptable surfactant reduces the tendency of the protein to aggregate.
Склад за даним винаходом може бути виготовлений у спосіб, котрий включає змішування принаймні одного анти-іІЇ/-12 антитіла та консерванту вибраного з групи: фенол, т-крезол, р-крезол, о-крезол, хлорокрезол, бензольний спирт, алкилпарабен (метил, етил, пропил, бутил, та ін.), бензалконій хлорид, бензетоній хлорид, натрію дегідроацетат та тримерозал, чи їхні суміші в водному розчиннику. Змішування принаймні одного анти-1ІІ-12 антитіла та консерванту в водному розчиннику проводиться з використанням загальноприйнятих методів розчинення та змішування. Для виготовлення прийнятного складу, наприклад, відміряну кількість принаймні одного анти-ІЇ-12 антитіла в буферному розчині комбінують із бажаним консервантом в буферному розчині в кількості достатній для одержання протеїну та консерванту в бажаних концентраціях. Варіації цього процесу є зрозумілими для будь-кого кваліфікованого спеціаліста в даній галузі. Наприклад, для додавання компонентів, при використанні додаткових добавок, потрібно створити відповідні температурні умови та рН, а також оптимізувати усі фактори для концентрації та способу приймання.The composition according to the present invention can be made in a way that includes mixing at least one anti-III/-12 antibody and a preservative selected from the group: phenol, t-cresol, p-cresol, o-cresol, chlorocresol, benzene alcohol, alkylparaben (methyl , ethyl, propyl, butyl, etc.), benzalkonium chloride, benzethonium chloride, sodium dehydroacetate and trimerozal, or their mixtures in an aqueous solvent. Mixing of at least one anti-1II-12 antibody and preservative in an aqueous solvent is carried out using conventional dissolution and mixing methods. To make an acceptable composition, for example, a measured amount of at least one anti-III-12 antibody in a buffer solution is combined with a desired preservative in a buffer solution in an amount sufficient to obtain the protein and preservative in the desired concentrations. Variations on this process will be apparent to one skilled in the art. For example, to add components, when using additional additives, you need to create appropriate temperature conditions and pH, as well as optimize all factors for concentration and method of administration.
Заявлений склад може бути приготований для пацієнтів як готовий розчин чи як двофлаконовий із флаконом ліофілізованого, принаймні одного, анти-ІЇ-12 антитіла, котре розводиться другим флаконом, котрий містить воду, консервант та/або наповнювач, переважно фосфатний буфер та або сольовий розчин та вибрану сіль, у водному розчиннику. І флакон з одним розчином, і двофлаконовий, що потребує розведення, можуть бути використані повторно багато разів та можуть задовольнити пацієнтів на одно чи багато циклічне лікування, і таким чином може бути застосований більш зручний режим лікування, ніж доступні тепер.The claimed composition can be prepared for patients as a ready-made solution or as a two-vial with a vial of lyophilized, at least one, anti-II-12 antibody, which is diluted with a second vial containing water, a preservative and/or filler, preferably a phosphate buffer and or a saline solution and selected salt, in an aqueous solvent. Both the single-solution vial and the two-vial that require dilution can be reused multiple times and can accommodate patients for one or more cycles of treatment, and thus provide a more convenient treatment regimen than currently available.
Існуючі заявлені вироби є придатними для вживання на протязі до двадцяти чотирьох годин чи більше.Existing claimed products are suitable for use for up to twenty-four hours or more.
Відповідно до цього, нині заявлені вироби, надають більше переваг для пацієнтів. Склади винаходу можуть, необов'язково, надійно зберігатися при температурах від приблизно 27 до приблизно 40"С та зберігати біологічні властивості протеїну на протязі тривалого періоду часу, дозволяючи таким чином, зазначення на етикетці упаковки, що розчин може зберігатися та/або використовуватися через 6, 12, 18, 24, 36, 48, 72, чи 96 годин чи більше. Якщо використовується консервований розчинник, таке зазначення може містити термін використання до 1-12 місяців, півроку, півтора року, та/або два роки.Accordingly, the currently claimed products provide more benefits for patients. The compositions of the invention can, optionally, be reliably stored at temperatures of from about 27 to about 40°C and retain the biological properties of the protein over an extended period of time, thus allowing the indication on the package label that the solution can be stored and/or used after 6 , 12, 18, 24, 36, 48, 72, or 96 hours or more.If a canned solvent is used, such indication may include a shelf life of up to 1-12 months, six months, one and a half years, and/or two years.
Розчин принаймні одного анти-І/-12 антитіла винаходу може бути виготовлений способом, який включає змішування принаймні одного антитіла у водному розчиннику. Змішування проводиться за допомогою загальноприйнятих методик розчинення та змішування. Для виготовлення придатного розчиннику, наприклад, відміряна кількість, принаймні одного антитіла у воді чи буфері з'єднується в кількості достатній для одержання протеїну та, необов'язково, консерванту чи буферу в бажаних концентраціях. Варіанти цього процесу є зрозумілими звичайному спеціалісту в даній галузі. Наприклад, для додавання компонентів, при використанні додаткових добавок, потрібно створити відповідні температурні умови та рн, а також оптимізувати усі фактори для концентрації та способу приймання.A solution of at least one anti-I/-12 antibody of the invention can be prepared by a method that includes mixing at least one antibody in an aqueous solvent. Mixing is carried out using generally accepted methods of dissolution and mixing. To make a suitable solvent, for example, a measured amount of at least one antibody in water or buffer is combined in an amount sufficient to obtain the protein and, optionally, the preservative or buffer in the desired concentrations. Options for this process are readily apparent to one of ordinary skill in the art. For example, to add components, when using additional additives, you need to create appropriate temperature conditions and pH, as well as optimize all factors for concentration and method of administration.
Заявлений продукт може бути приготований для пацієнтів як готовий розчин чи як двофлаконовий із флаконом ліофілізованого, принаймні одного, анти-ІЇ-12 антитіла, котре розводиться другим флаконом, котрий містить воду, консервант та/або наповнювач, переважно фосфатний буфер та або сольовий розчин та вибрану сіль, у водному розчиннику. | флакон з одним розчином, і двофлаконовий набір, що потребує розведення, можуть бути використані повторно багато разів та можуть задовольнити пацієнтів при одно- чи багатоциклічному лікуванні і, таким чином, може бути застосований більш зручний режим лікування ніж доступні тепер.The claimed product can be prepared for patients as a ready-made solution or as a two-vial with a vial of lyophilized, at least one, anti-II-12 antibody, which is diluted with a second vial that contains water, a preservative and/or filler, preferably a phosphate buffer and or a saline solution and selected salt, in an aqueous solvent. | the single-solution vial and the two-vial kit requiring dilution can be reused many times and can accommodate patients for single or multi-cycle treatment and thus provide a more convenient treatment regimen than currently available.
Заявлений продукт може бути виготовлений не безпосередньо для пацієнтів, а через виготовлення для аптек, клінік чи інших подібних установ та закладів, у вигляді готового розчину чи як двофлаконовий із флаконом ліофілізованого, принаймні одного, анти-ІЇ-12 антитіла, котре розводиться другим флаконом, котрий містить водний розчинник. Готовий розчин в даному випадку може бути до одного літра чи більшого розміру, з такого великого резервуару менші порції розчину принаймні одного антитіла можуть бути одержані одноразово чи багаторазово для перенесення їх у менші флакони та запропоновані аптеками чи клініками для своїх покупців та/або пацієнтів.The claimed product can be manufactured not directly for patients, but through manufacturing for pharmacies, clinics or other similar institutions and establishments, in the form of a ready-made solution or as a two-vial with a vial of lyophilized, at least one, anti-III-12 antibody, which is diluted with a second vial, which contains an aqueous solvent. The finished solution in this case can be up to one liter or larger, from such a large reservoir, smaller portions of the solution of at least one antibody can be obtained once or repeatedly to transfer them to smaller vials and offered by pharmacies or clinics to their customers and/or patients.
Загально прийнятними пристроями, включаючи однофлаконові системи та пенін'єкторні пристрої для доставки розчину, такі як. ВО Реп5, ВО Ашо/|есіогт, Нита)есіб, МомоРепФ, В-ОФРеп, АшоРепФ, апаCommonly accepted devices, including single-vial systems and peninjector devices for solution delivery, such as VO Rep5, VO Asho/|esiogt, Nita)esib, MomoRepF, V-OFRep, AshoRepF, apa
ОріїРепФ, СепоїгоріпРепФ), Сепоїгопогт РепФ),, Нитаїйго РепФ), Несо-РепФ), Воїегоп РепФ, Віо|есюгФ,, і|есіф,OriiRepF, SepoigoripRepF), Sepoigopogt RepF),, Nitaigo RepF), Neso-RepF), Voiegop RepF, Vio|esyugF,, i|esif,
УЗ-Яйре,, МееаіІе-Ргее ІпіесіогФ), Іпіга)есіФ, Меаї-УесіФф, напр., як виготовлені чи розроблені Весіоп біскепзепUZ-Yayre,, MeeaiIe-Rgee IpiesiogF), Ipiga)esiF, Meai-UesiFf, e.g., how made or developed Vesiop biscepzep
ІЕгапкіїп таке, МУ, мли. ресіопаіїскепзоп.соті, Оізеїопіс |(Вигддог, 5угепапа, мумлиу.аїзеїопіс.соті, Віо|есі,IEhapkiip such, MU, mly. resiopaiiskepzop.soti, Oiseiopis
Рошапа, Огедоп |млмили.ріо|есі.соті|; Майопа! Меаіса! Ргодисіє, МУевіоп Меайіса! (Регегтфогоцди, ШК, мулу мевіоп-теаіїса!.сот)|, Меаі-Уесі Согр |Міппеароїї5, ММ, м/млиу. теаі)есісот|. Загально прийнятними пристроями двофлаконових систем, включаючи пенін'єкторні пристрої для розведення ліофілізованих ліків в картриджі для доставки розведеного розчину є такий як НитайїоРепФф.Roshapa, Ogedop |mlmyli.rio|esi.soti|; Myopia! Meaisa! Rhodisie, MUeviop Meayisa! (Regegtfogotsdy, ShK, mulu meviop-teaiisa!.sot)|, Meai-Uesi Sogr |Mippearoii5, MM, m/mliu. teai)esisot|. Generally acceptable devices of two-vial systems, including peninjector devices for diluting lyophilized drugs in a cartridge for delivery of a diluted solution is such as NitayoRepFf.
Продукти, заявлені тут, включають пакувальний матеріал. Пакувальний матеріал надає, на додачу до інформації, що вимагається дозволяючими органами, умови, за яких продукт може застосовуватись.The products claimed here include packaging material. The packaging material provides, in addition to the information required by the regulatory authorities, the conditions under which the product may be used.
Пакувальний матеріал даного винаходу надає інструкціє пацієнтам по розведенню принаймні одного анти- 1--12 антитіла у водному розчиннику для утворення розчину, та використанню розчину на протязі 2-24 годин чи більше для двох флаконів сухого/рідкого продукту. Для одного флаконового розчину продукт може містити зазначення, що такий розчин може бути використаний на протязі 2-24 годин чи більше. Заявлені тут продукти є придатними для фармацевтичних продуктів для людей.The packaging material of the present invention instructs patients to dilute at least one anti-1-12 antibody in an aqueous solvent to form a solution, and to use the solution within 2-24 hours or more for two vials of dry/liquid product. For one vial solution, the product may contain an indication that such a solution can be used for 2-24 hours or more. The products disclosed herein are suitable for human pharmaceutical use.
Склади даного винаходу можуть бути виготовлені способом, котрий включає змішування принаймні одного анти-І/!-12 антитіла з вибраним буфером, переважно фосфатним буфером, що містить сольвий розчин чи вибрану сіль. Змішування принаймні одного антитіла та буфера у водному розчиннику проводиться загально прийнятими мотодами розчинення чи змішування. Для приготування прийнятного складу, наприклад, відміряну кількість принаймні одного антитіла у воді чи буфері комбінують із бажаним буферним агентом у воді в концентраціях, достатніх для одержання протеїну та буферу в бажаних концентраціях. Варіації цього процесу мають бути зрозумілі будь-кому середньому спеціалісту у даній галузі. Наприклад, для додавання компонентів, при використанні додаткових добавок, потрібно створити відповідні температурні умови та рН, а також оптимізувати усі фактори для концентрації та способу приймання.The compositions of the present invention can be prepared by a method that includes mixing at least one anti-I/!-12 antibody with a selected buffer, preferably a phosphate buffer containing a saline solution or a selected salt. Mixing of at least one antibody and buffer in an aqueous solvent is carried out by generally accepted methods of dissolution or mixing. To prepare an acceptable formulation, for example, a measured amount of at least one antibody in water or buffer is combined with a desired buffering agent in water at concentrations sufficient to produce the protein and buffer at the desired concentrations. Variations of this process should be apparent to any person of ordinary skill in the art. For example, to add components, when using additional additives, you need to create appropriate temperature conditions and pH, as well as optimize all factors for concentration and method of administration.
Заявлені стабільні чи консервовані склади можуть бути надані пацієнтам як готові розчини чи як двофлаконові препарати, із флаконом ліофілізованого, принаймні одного, анти-іЇ-12 антитіла, котре розводиться другим флаконом, котрий містить консервант чи буфер і наповнювач у водному розчиннику. І флакон з одним розчином, і двофлаконовий препарат, що потребує розведення, можуть бути використані повторно багато разів та можуть задовольнити пацієнтів при одно- чи багатоциклічному лікуванні і таким чином, може бути застосований більш зручний режим лікування ніж доступні тепер.The claimed stable or preserved formulations can be provided to patients as ready-made solutions or as two-vial preparations, with a vial of lyophilized at least one anti-II-12 antibody, which is diluted with a second vial containing a preservative or buffer and a filler in an aqueous solvent. Both the single solution vial and the two-vial preparation requiring dilution can be reused many times and can accommodate patients in single or multi-cycle treatment and thus provide a more convenient treatment regimen than currently available.
Принаймні одне анти-1І--12 антитіло як в стабільному так і в консервованому складах чи розчинах, як описано тут, можуть вживатися пацієнтами, у відповідності з даним винаходом різними способами даставки, включаючи 5С чи ІМ ін'єкції; трансдермальний, легеневий, трансмукозний способи, імплантат, осмотичний насос, картридж, мікро насос чи інший спосіб, названий спеціалістом у даній галузі, як добре відомий у практиці.At least one anti-1I--12 antibody in both stable and preserved formulations or solutions, as described herein, may be administered to patients in accordance with the present invention by various delivery methods, including 5C or IM injection; transdermal, pulmonary, transmucosal, implant, osmotic pump, cartridge, micro pump, or other method designated by one skilled in the art as well known in the art.
Терапевтичні ЗастосуванняTherapeutic Uses
Даний винахід також пропонує спосіб для модуляції чи лікування принаймні одного імунного захворювання клітини, тканини, органу, тварини чи пацієнта, включаючи, але не обмежуючись, принаймні один з: ревматоїдний артрит, підлітковий ревматоїдний артрит, системний прояв підліткового ревматоїдного артриту, псоріатичний артрит, анкілозний спондиліт, виразка шлунку, серонегативна артропатія, остеоартрит, запальні кишкові хвороби, виразкові коліти, системна ериматозна вовчанка, антифосфоліпідний синдром, іридоцикліт/уреїт/очний неврит, ідіопатичний легеневий фіброз, системний васкуліт/грануломатоз Вегнера, саркоїдоз, орхіт/лроцедури повної вазектомії, алергічні/атопічні захворювання, астма, алергічний риніт, екзема, алергічний контактний дерматит, алергічний конюктивіт, гіперчетливий пневмоніт, трансплантації відторгнення трансплантованих органів, захворювання "трансплантат проти хазяїна", синдром системної запальної відповіді, синдром сепсису, грам-позитивний сепсис, грам-негативний сепсис, сепсис негативний до культури, грибковий сепсис, нейропенічна лихоманка, уросепсис, менінгококкемія, травма/геморрагія, опіки, опромінення іонізуючою радіацією, гострий панкреатит, синдром дихальної недостатності дорослих, ревматоїдний артрит, гепатит спричинений алкоголем, хронічні запальні патології, саркоїдози, патологія Крона, серпово-клітинна анемія, діабет, нефроз, атопічні захворювання, реакції гіперчутливості, алергічні риніти, сінна лихоманка, затяжний риніт, кон'юнктивіт, ендометріоз, астма, кропивниця, системна анафілаксія, дерматит, злоякісна анемія, гемолітичні захворювання, тромбоцитопенія, відторгнення трансплантатом ореану чи тканини, відторгнення транпоантованої нирки, відторгнення транплантованоого серця, відторгнення трансплантованої печінки, відторгнення трансплантованої підшлункової залози, відторгнення трансплантованої легені, відторгнення трансплантованого кісткового мозку (ВМТ), відторгнення алотрансплантату шкіри, відторгнення трансплантованого хряща, відторгнення трансплантованої кістки, відторгнення трансплантованого тонкого кишківнику, відторгнення вживленого ембріонального тимусу, відторгнення трансплантованої пара щитовидної залози, відторгнення ксенотрансплантату будь-якого органу чи тканини, відторгнення алотрансплантатів, реакції анти рецепторної гіперчутливості хвороба Грейва, хвороба Рейнода (віброхвороба), інсулін-резистентний діабет типу В, астма, злоякісна міастенія, сито токсичність опосередкована антитілами, реакції гіперчутливостит типу ЇЇ, системна ериматозна вовчанка, РОЕМ5 синдром (поліневропатія, органомегалія, ендокринопатія, моноклональні грамопатія, та синдром змін в шкірі), поліневропатія, органомегалія, ендокринопатія, моноклональні грамопатія, та синдром змін в шкірі, антифосфоліпідний синдром, пемфігус, склеродерма, змішане захворювання сполучної тканини, ідіопатична хвороба Аддісона, цукровий діабет, хронічний активний гепатит, первинний міліарний цироз, вітіліго, васкуліт, синдром пост-ІМ кардіотомії, гіперчутливість ІМ типу, контактний дерматит, пневмоніт гіперчутливості, відторгнення алотрансплантату, грануллома спричинена внутрішньоклітинними організмами, чутливість до ліків, метаболічний/діопатичний, хворобі Вілсона, гемахроматоз, недостатність альфа-1-антитрипсину, діабетична ретинопатія, тироїдит Хашимото, остеопороз, оцінка гіпоталамо- гіпофізарно-адренальнальної вісі, первинний міліарний цироз, тироїдит, енцефаломієліт, кахексія, цистичний фіброз, хронічне захворювання легенів новонароджених, хронічне обструктивне захворювання легенів (СОРО), спадковий гематофогоцитний лімфогістіцистоз, дерматологічні стани, псоріаз, алопеція, нефротичний синдром, нефрит, гломерулярний нефрит, гостра ниркова недостатність, гемодіаліз, уремія, токсичність, прееклампсія, окКІЗ терапія, анти-саЗ терапія, цитокінінова терапія, хіміотерапія, радіаційна терапія (напр., включає, але не обмежується, тоастенія, анемія, кахексія, та подібні), хронічні отруєння саліцилатами, та подібні. |Див., наприклад, Мегок Мапиаї, 1211-17 Еайіопв, Мегек 5 Сотрапу, Вапмау, МУ (1972, 1977, 1982, 1987, 1992, 1999), РпаптпасоїШегару Напаброок, У/еїІв єї аї., едв., Зесопа Еайоп, Аррієюп апа Гапде, Зїатіога, Сопп. (1998, 2000), всі повністю включено шляхом посидання |.The present invention also provides a method for modulating or treating at least one immune disease of a cell, tissue, organ, animal or patient, including, but not limited to, at least one of: rheumatoid arthritis, juvenile rheumatoid arthritis, systemic juvenile rheumatoid arthritis, psoriatic arthritis, ankylosing spondylitis spondylitis, gastric ulcer, seronegative arthropathy, osteoarthritis, inflammatory bowel disease, ulcerative colitis, systemic lupus erythematosus, antiphospholipid syndrome, iridocyclitis/ureitis/ocular neuritis, idiopathic pulmonary fibrosis, systemic vasculitis/Wegner's granulomatosis, sarcoidosis, orchitis/total vasectomy procedures, allergic /atopic diseases, asthma, allergic rhinitis, eczema, allergic contact dermatitis, allergic conjunctivitis, hypersensitive pneumonitis, transplant rejection of transplanted organs, "graft versus host" disease, systemic inflammatory response syndrome, sepsis syndrome, gram-positive sepsis, gram-negative sepsis , culture-negative sepsis, fungal sepsis, neuropenic fever, urosepsis, meningococcemia, trauma/hemorrhage, burns, ionizing radiation exposure, acute pancreatitis, adult respiratory distress syndrome, rheumatoid arthritis, alcoholic hepatitis, chronic inflammatory conditions, sarcoidosis, Crohn's disease, sickle cell - cellular anemia, diabetes, nephrosis, atopic diseases, hypersensitivity reactions, allergic rhinitis, hay fever, protracted rhinitis, conjunctivitis, endometriosis, asthma, urticaria, systemic anaphylaxis, dermatitis, pernicious anemia, hemolytic diseases, thrombocytopenia, orean transplant rejection or tissue rejection, transplanted kidney rejection, transplanted heart rejection, transplanted liver rejection, transplanted pancreas rejection, transplanted lung rejection, transplanted bone marrow (BMT), rejection of skin allograft, rejection of transplanted cartilage, rejected rejection of a transplanted bone, rejection of a transplanted small intestine, rejection of a transplanted embryonic thymus, rejection of a transplanted thyroid gland, rejection of a xenograft of any organ or tissue, rejection of allografts, anti-receptor hypersensitivity reactions, Grave's disease, Raynaud's disease (vibrodisease), insulin-resistant diabetes type B, asthma, malignant myasthenia gravis, antibody-mediated cytotoxicity, hypersensitivity reactions type IA, systemic lupus erythematosus, ROEM5 syndrome (polyneuropathy, organomegaly, endocrinopathy, monoclonal gramopathies, and skin change syndrome), polyneuropathy, organomegaly, endocrinopathy, monoclonal gramopathies, and skin change syndrome, antiphospholipid syndrome, pemphigus, scleroderma, mixed connective tissue disease, idiopathic Addison's disease, diabetes, chronic active hepatitis, primary miliary cirrhosis, vitiligo, vasculitis, post-MI cardiotomy syndrome, hypersensitivity type MI, contact dermatitis, hypersensitivity pneumonitis, allograft rejection, intracellular granuloma, drug sensitivity, metabolic/diopathic, Wilson's disease, hemachromatosis, alpha-1 antitrypsin deficiency, diabetic retinopathy, Hashimoto's thyroiditis, osteoporosis, hypothalamic-pituitary evaluation -adrenal axis, primary miliary cirrhosis, thyroiditis, encephalomyelitis, cachexia, cystic fibrosis, chronic lung disease of newborns, chronic obstructive pulmonary disease (COPD), hereditary hematophagocytic lymphohisticystosis, dermatological conditions, psoriasis, alopecia, nephrotic syndrome, nephritis, glomerular nephritis, acute renal failure, hemodialysis, uremia, toxicity, pre-eclampsia, OCKIZ therapy, anti-CAZ therapy, cytokinin therapy, chemotherapy, radiation therapy (eg, includes but not limited to toasthenia, anemia, cachexia, and the like), chronic salicylate poisoning, and the like. |See, for example, Megok Mapiai, 1211-17 Eaiopv, Megek 5 Sotrapu, Wapmau, MU (1972, 1977, 1982, 1987, 1992, 1999), RpaptpasoiShegaru Napabrook, U/eiIv eyi ai., edv., Zesopa Eaiop , Arriyup apa Gapde, Ziatioga, Sopp. (1998, 2000), all are fully incorporated by settling |.
Даний винахід також пропонує спосіб модуляції чи лікування принаймні одного кардіоваскулярного захворювання в клітині, тканині, органі, тварині чи пацієнті, включаючи але не обмежуючи до,The present invention also provides a method of modulating or treating at least one cardiovascular disease in a cell, tissue, organ, animal or patient, including but not limited to,
Втрачено при публікаціїLost in publication
Втрачено при публікації одночасно та/або після, принаймні одного вибраного з принаймні одного ТМЕ-антагоніста, (напр., але не обмежуючи до, ТМЕ-антитіла чи фрагмента, розчинного ТМЕ-рецептора чи фрагмента, їхніх злитих протеїнів, чи малих молекул ТМЕ-антагоніста), анти ревматичного (напр., метотрексат, ауронафін, ауротіоглюкоза, азатіопрін, етанерсепт, тіомалат натрію золота, сульфат гідроксихлорохінону, лефлюномід сульфазалзіну) мязевий релаксант, наркотик, нестероїдні протизапальні ліки (МЗАЇІО), анальгетик, анестетик, седативні ліки, місцевий анестетик, нейромязевий блокатор, протимікробні (напр., аміноглікозид, протигрибковій, протипаразитний, противірусний препарати, карбапенем, цефалоспорин, фторхінон, макроліт, пеніцилін, сульфонамід, тетрациклін, інший протимікробний засіб), протипсоріатик, кортикостероїд, анаболічний стероїд, діабетичні агенти, мінерали, харчові добавки, тифоїдні агенти, вітаміни, гормон пов'язаний з кальцієм, протидіарейний, протикашльовий, протинудотний, противиразковий, послаблюючий, антикоагулянт, еритропоетин (напр., епоетин альфа), філграстим (напр., с-С5БЕ,Lost in publication at the same time and/or after at least one selected from at least one TME antagonist, (eg, but not limited to, a TME antibody or fragment, a soluble TME receptor or fragment, fusion proteins thereof, or TME small molecules antagonist), anti-rheumatic (eg, methotrexate, auronafine, aurothioglucose, azathioprine, etanercept, gold sodium thiomalate, hydroxychloroquinone sulfate, sulfasalazine leflunomide) muscle relaxant, narcotic, nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs), analgesic, anesthetic, sedative drugs, local anesthetic , neuromuscular blocker, antimicrobial (eg, aminoglycoside, antifungal, antiparasitic, antiviral, carbapenem, cephalosporin, fluoroquinone, macrolide, penicillin, sulfonamide, tetracycline, other antimicrobial), antipsoriatic, corticosteroid, anabolic steroid, diabetic agents, minerals, nutritional supplements, typhoid agents, vitamins, calcium-related hormone, antidiarrheal, antitussive, antinausea, pro antiulcer, emollient, anticoagulant, erythropoietin (eg, epoetin alfa), filgrastim (eg, c-C5BE,
Меипродеп), саргамостим (5М-С5БЕ, лейкин), імунізатор, імуноглобулін, імуносупресор (напр., базиліксимаб, циклоспорин, даклізумаб), гормон росту, гормонозамісний препарат, модулятор рецептору естрогену, мідріатичний, мідріатичний, алкілуючий агент, антиметаболіт, мітотичний інгібітор, радіопрепарати, антидепресант, антиманійний агент, антипсихотичний, нейролептик, гіпнотичний, симпатоміметик, стимулятор, донепезіл, такрин, асматичні препарати, бета антагоністи, інгаляторні ліки, інгібітор лейкотриену, метилксантин, хромолін, епінефрин чи аналог, дорназа альфа (Риітолуте), цитокін чи антагоніст цитокіну. Прийнятні дозування добре відомі спеціалістам. Див. наприклад, Умеїї5 еї аї., еав5.,Meiprodep), sargamostim (5M-C5BE, leucine), immunizer, immunoglobulin, immunosuppressant (eg, basiliximab, cyclosporine, daclizumab), growth hormone, hormone replacement drug, estrogen receptor modulator, mydriatic, mydriatic, alkylating agent, antimetabolite, mitotic inhibitor, radiopharmaceutical, antidepressant, antimanic agent, antipsychotic, antipsychotic, hypnotic, sympathomimetic, stimulant, donepezil, tacrine, asthma medication, beta antagonist, inhaler medication, leukotriene inhibitor, methylxanthine, cromolyn, epinephrine or analog, dornase alfa (Ryitolute), cytokine or antagonist cytokine. Acceptable dosages are well known to those skilled in the art. See for example, Umeii5 ei ai., eav5.,
РПпапгтасоїШегару Напароок, 2па Еайоп, Аррієюп апа ІГапде, біатіога, СТ (2000); РОА РНагтасоровіа,RPpapgtasoiShegaru Naparook, 2pa Eayop, Arriyup apa IGapde, biatioga, ST (2000); ROA RNaghtasorovia,
Тагазсоп РосКеї Рпаптасороєїа 2000, ЮОеєїихе Еайіоп, Тагавсоп Рибіїзпіпд, Сота Сіпда, СА (2000), кожне з цих посилань повністю включено шляхом посилання).Taghsop RosKei Rpaptasoroyeia 2000, YuOyeiihe Eaiiop, Taghavsop Rybiizpipd, Sota Sipda, SA (2000), each of these references is incorporated by reference in its entirety).
ТМЕ-антагоністи придатні для композицій, комбінації терапевтичних пристроїв та/або способів даного винаходу (також включає принаймні одне антитіло даного винаходу, зазначену частину, чи його варіант), включаючи, але не обмежуючись, анти-ТМЕ антитіла, ТМЕ-ТМЕ антитіла, антиген-звязуючі його фрагменти, та рецепторні молекули, котрі специфічно зв'язуються з ТМЕ; сполуки, котрі попереджують та/або інгібують синтез ТМЕ, вивільнення ТМЕ чи його дію на клітини-мішені, такі як талідомід, тенідап, інгібітори фосфодіестирази (напр., пентоксифілін та роліпрам), А2о антагоніст аденозинового рецептора та А2р підсилювач аденозинового рецептора; сполуки, котрі попереджують та/або інгібують сигналювання ТМЕ- рецептора, такі як інгібітори кінази протеїну активованого мітогеном (МАР); сполуки, що блокують та/або інгібують мембранне розщеплення ТМЕ, такі як, інгібітори металопротеїнази; сполуки, що блокують та/або інгібують ТМЕ-дію, такі як, інгібітори ферменту конвертуючого ангіотензин (напр., каптоприл); сполуки, що блокують та/або інгібують синтез та/або вироблення ТМЕ, такі як інгібітори МАР-кінази.TME antagonists are suitable for compositions, combination therapeutic devices and/or methods of the present invention (also including at least one antibody of the present invention, specified portion, or variant thereof), including, but not limited to, anti-TME antibodies, TME-TME antibodies, antigen - its binding fragments and receptor molecules that specifically bind to TME; compounds that prevent and/or inhibit TME synthesis, TME release, or its effect on target cells, such as thalidomide, tenidap, phosphodiesterase inhibitors (eg, pentoxifylline and rolipram), A2o adenosine receptor antagonist, and A2p adenosine receptor enhancer; compounds that prevent and/or inhibit TME receptor signaling, such as mitogen-activated protein kinase (MAP) inhibitors; compounds that block and/or inhibit membrane cleavage of TME, such as metalloproteinase inhibitors; compounds that block and/or inhibit TME action, such as angiotensin-converting enzyme inhibitors (eg, captopril); compounds that block and/or inhibit the synthesis and/or production of TME, such as MAP kinase inhibitors.
Як використано тут, "антитіла фактору некрозу пухлини", "антитіла ТМЕ" "антитіла ТМЕ" чи фрагменти та подібні знижують, блокують, інгібують анулюють чи перешкоджають активності ТМЕ іп міїго, іп 5йи та/або іп мімо. Наприклад, придатні ТМЕ-антитіла людини даного винаходу можуть зв'язувати ТМЕс, включаючи анти-ТМЕ антитіла, антиген-звязуючі їх фрагменти, та зазначені їх мутанти чи домени, котрі специфічно зв'язуються з ТМЕо. Придатні ТМЕ-антитіла чи їх фрагменти здатні також знижувати блоккування, інгібування, анулювання чи перешкоджання синтезу ЕМА, ОМА чи протеїну ТМЕ, вивільнення ТМЕ, сигналювання рецептора ТЕ, мембранного розщеплення ТМЕ, активності ТМЕ, вироблення та/або синтезуAs used herein, "tumor necrosis factor antibody", "TME antibody", "TME antibody" or fragments and the like reduce, block, inhibit, abrogate or interfere with the activity of TME ip migo, ip 5yi and/or ip mimo. For example, suitable human TME antibodies of the present invention can bind TMEs, including anti-TME antibodies, antigen-binding fragments thereof, and specified mutants or domains thereof that specifically bind to TMEo. Suitable TME antibodies or fragments thereof are also capable of reducing blocking, inhibiting, abrogating or interfering with EMA, OMA or TME protein synthesis, TME release, TE receptor signaling, TME membrane cleavage, TME activity, production and/or synthesis
ТМЕ.TME.
Химерні антитіла сСА2 складаються з антиген-зв'язуючого варіабельного регіону високоафінного мишачого антитіла до ТМЕРа дО | людини, зазначеного як А2, та константного регіону ДО І, каппа імуноглобуліну. Регіон Ес |до | людини надає галогенним антитілам ефекторну функцію, збільшує півперіод циркуляції сироватки та знижує імуногенність антитіл. Авидність та епітопна специфічність химерного антитіла сА2 походить від варіабельного регіону мишачого антитіла А2. В окремому виконанні, перевожним джерелом нуклеїнових кислот, що кодують варіабельний регіон мишачого антитіла А2 є клітинна лінія гібридоми Аг.CCA2 chimeric antibodies consist of the antigen-binding variable region of a high-affinity mouse antibody to TMERa dO | human, designated as A2, and constant region TO I, immunoglobulin kappa. Region ES | to | human gives halogenated antibodies an effector function, increases the half-life of serum circulation and reduces the immunogenicity of antibodies. Avidity and epitope specificity of the chimeric cA2 antibody is derived from the murine A2 antibody variable region. In a separate embodiment, the preferred source of nucleic acids encoding the variable region of murine antibody A2 is a cell line hybridoma Ag.
Химерні А2 (сСА2) нейтралізують цитотоксичну дію природніх та рекомбінантних ТМЕосо людини в залежності від дозування. При аналізуванні зв'язування антитіл А2 та рекомбінантного ТМЕРа людини, константа афінності була визначена рівною 1.04х10'7М". Переважні методи визначення специфічності моноклональних антитіл та афінності конкурентним інгібуванням можуть бути знайдені в (Напохму, еї аї., антиродіеєв: А ІГарогаюгу Мапиаї, Соїй Зргіпд Нагброг ІГарогасогу Ргез5, Соїа Зргіпд Нагрог, Мемж/ Могк, 1988;Chimeric A2 (cCA2) neutralizes the cytotoxic effect of natural and recombinant human TMEoso depending on the dosage. When analyzing the binding of A2 antibodies and recombinant human TMER, the affinity constant was determined to be equal to 1.04x10'7M". Preferred methods of determining the specificity of monoclonal antibodies and affinity by competitive inhibition can be found in (Napokhmu, ei ai., antirodieev: A Igarogayugu Mapiai, Soy Zrgipd Nagbrog IGarogasogu Rgez5, Soy Zrgipd Nagrog, Memzh/ Mogk, 1988;
Соїїдап еї а)ї., едв., Ситепі Ргоїосої5 іп Ітп2ипоіоду, Стеєпе Рибіїзпіпд Авзос. апа Умієу Іпіегзсіеєпсе, Мем мок, (1992-2000); Когброгеїа!., ІттипоїЇ. Тодау, 4: 72-79 (1983); А!йвиреї єї аї., єд5. Ситепі Ргоїюосоїв5 іпSoiidap ei a)i., edv., Sitepi Rgoiosoi5 ip Itp2ypoiodu, Steepe Rybiizpipd Avzos. apa Umieu Ipiegssieepse, Mem mok, (1992-2000); Cogbrogeia!., IttypoiY. Todau, 4: 72-79 (1983); A!yvyrei eyi ai., ed5. Sitepi Rgoiyuosoiv5 ip
Моїесшаг Віоіоду, У/іеу Іпіегесіепсе, Мем ХогК (1987-2000); апа Миїег, Мей. Егагуто)., 92: 589-601 (1983), ці посилання повністю включено сюди шляхом посилання).Moiesshag Vioiodu, U/ieu Ipiegesiepse, Mem HogK (1987-2000); apa Miiieg, May. Egaguto)., 92: 589-601 (1983), these references are incorporated herein by reference in their entirety).
В окремому втіленні, моноклональні мишачі антитіла А2 вироблялися клітинною лінією, позначеною як с134А. Химерні антитіла сА2 вироблялися клітинною лінією, позначеною як с1684А.In a separate embodiment, monoclonal mouse A2 antibodies were produced by a cell line designated as c134A. Chimeric cA2 antibodies were produced by a cell line designated as c1684A.
Додаткові приклади моноклональних анти-ТМЕ антитіл, котрі можуть бути використані в даному прикладі описані в спеціальній літературі (див. напр., О.5.Раїепі Мо. 5,231,024; МоїПег, А. еїа!., Суююкіпе 2 (3): 162-169 (1990); 0О.5.Раїепі Арріїсайоп Мо.07/943,852 (йей Зеріетбрег 11, 1992); Вацієп еї аї., Іпіегпайопаї!Additional examples of monoclonal anti-TME antibodies that can be used in this example are described in the special literature (see, for example, O.5. Raiepi Mo. 5,231,024; Moipeg, A. eia!., Suyuyukipe 2 (3): 162- 169 (1990); 0О.5.Raiepi Arriisayop Mo.07/943,852 (yey Zerietbreg 11, 1992); Vaciep ei ai., Ipiegpaiopai!
Рибіїсайоп МО.М/091/02078 (рибріїзпей Рергоагу 21,1991); Кибіп еї аІ., ЕРО Раїепі Рибіїсайоп Мо.0218868 (риріїзпей Аргії 22, 1987); опе еї аІ.,, ЕРО Раїепі Рибіїсайоп Мо.0288088 (Осіорег 26,1988) Гіапд, еї аї.,Rybiisayop MO.M/091/02078 (ribriizpei Rergoagu 21,1991); Kybip eyi aI., ERO Raiepi Rybiisayop Mo. 0218868 (ririizpei Argii 22, 1987); ope ei aI.,, ERO Raiepi Rybiisayop Mo. 0288088 (Osioreg 26, 1988) Giapd, ei ai.,
Віоспет.Віоррпуз. Вез.Сотт. 137:847-854 (1986); Меаодег, еї аї., Нубгідота 6:305-311 (1987); Репаїу еї аї.,Viospet. Viorrpuz. Vez. Sott. 137:847-854 (1986); Meaodegh, ei ai., Nubgidota 6:305-311 (1987); Repaiu ei ai.,
Нубргідота 6:359-369 (1957); Вііпдтап, еї аї., Нургідота 6:489-507 (1987); апа Нігаї, єї аї., дУ.Іттипої. Мей. 96:57-62 (1987), ці посилання повністю включено сюди шляхом посилання|.Nubrgidota 6:359-369 (1957); Viipdtap, ei ai., Nurgidota 6:489-507 (1987); apa Nigai, eyi ai., dU. Ittipoi. May 96:57-62 (1987), these references are hereby incorporated by reference in their entirety.
Молекули рецептора ТМЕTME receptor molecules
Переважними молекулами рецептора ТМЕ данного винаходу є такі, котрі зв'язують ТМЕ з високою афінністю |див. напр., РеІдтапп еї аї., ІпсТегпайопа! Рибіїсайоп Мо. УМО 92/07076 (риріїзпеа Аргії 30, 1992); зепаї! еї аї., Сеї! 61 : 361-370 (1990); апа І оєївспег єї аї., Се 61 : 351-359 (1990), ці посилання повністю включено сюди шляхом посилання), та не обов'язково мають низьку імуногенність. Зокрема, 55КОа (робPreferred TME receptor molecules of this invention are those that bind TME with high affinity | see e.g., ReIdtapp ei ai., IpsTegpayopa! Rybiysayop Mo. UMO 92/07076 (Ririizpea Argii 30, 1992); cheers! hey ay., Seii! 61: 361-370 (1990); apa I oeyivspeg eyi ai., Se 61 : 351-359 (1990), these references are fully incorporated herein by reference), and do not necessarily have low immunogenicity. In particular, 55 KOa (works
ТМЕ-К) та 75КОа (р75 ТМЕ-К) клітинні поверхневі рецептори ТМЕ є корисними в даному винаході. Вкорочені форми цих рецепторів, які містять зовнішньоклітинні домени (ЕСО) цих рецепторів чи їх функціональні частини (див. напр., Согсогап еї а!., Еиг. У. Віоспет. 223: 831-840 (1994)), є також придатними для даного винаходу. Вкорочені форми ТМЕ-рецепторів, які містять ЕСО, були знайдені в сечі та сироватці та ідентифіковані, як З0кКОа та 40кКОа інгібіторні протеїни зв'язування ТМЕ (ЕпдеІтапп, Н. еї аї., 9. ВіоїЇ. С/ает. 265: 1531-1536 (1990)). Мультимерні молекули ТМЕ-рецепторів та злиті молекули ТМЕ-імунорецептора, та їх похідні, фрагменти чи частини є додатковими прикладами ТМЕ-рецепторних молекул, котрі є придатними для методів та композицій даного винаходу. Молекули ТМЕ-рецептора, котрі можу використовуватися у винаході, характеризуються їхньою здатністю лікувати пацієнтів на протязі тривалого періоду із від доброго до відмінного полегшення симптомів та низькою токсичністю. Низька імуногенність та/або висока афінність, так само як інші невизначені властивості, можуть робити внесок в досягнення терапевтичних результатів.TME-K) and 75KOa (p75 TME-K) TME cell surface receptors are useful in the present invention. Truncated forms of these receptors that contain the extracellular domains (ECDs) of these receptors or their functional parts (see, e.g., Sogsogap et al., Eig. U. Biospet. 223: 831-840 (1994)) are also suitable for of this invention. Truncated forms of TME receptors, which contain ESO, have been found in urine and serum and identified as 30kKOa and 40kKOa inhibitory proteins of TME binding (EpdeItapp, N. ei ai., 9. Violyi. S/aet. 265: 1531- 1536 (1990)). Multimeric TME receptor molecules and TME immunoreceptor fusion molecules, and derivatives, fragments or parts thereof, are additional examples of TME receptor molecules that are suitable for the methods and compositions of the present invention. The TME receptor molecules that can be used in the invention are characterized by their ability to treat patients over a long period of time with good to excellent relief of symptoms and low toxicity. Low immunogenicity and/or high affinity, as well as other undefined properties, may contribute to therapeutic outcomes.
Мультимерні молекули ТМЕ-рецептора корисні для даного винаходу включають всю чи функціональну частису ЕСО чи ще ТМЕ-рецептори одним очи більше поліпептидними лінкерами чи іншими неполіпептидними лінкерами, такими як поліетиленгліколь (РЕС). Мультимерні молекули також можуть містити сигнальний пептид декретованого протеїну для спрямування експресії мультимерної молекули. Ці мультимерні молекули та способи їх одержання були описані в (0.5.Раїепі Арріїсайоп Мо.08/437,533 (йеаMultimeric TME receptor molecules useful for this invention include all or a functional part of ESO or TME receptors with one or more polypeptide linkers or other non-polypeptide linkers, such as polyethylene glycol (PEG). Multimeric molecules can also contain a signal peptide of a secreted protein to direct the expression of the multimeric molecule. These multimeric molecules and methods of their preparation were described in (0.5. Raiepi Arriisayop Mo.08/437,533
Мау 9, 1995), зміст посилання повністю включено сюди через посилання).Mau 9, 1995), the contents of which are incorporated herein by reference in their entirety).
Злиті молекули ТМЕ-імунорецептора корисні для методів і складів даного винаходу, охоплюють як мінімум одну частину одієї або більше молекул імуноглобуліну та всю або функціональну частину одого або більше рецепторів ТМЕ. Ці злиті молекули імунорецептора можуть збиратися як мономери, або гетеро- або гомо-мультимери. Злиті молекули імунорецептора можуть також бути моно валентні або мультивалентні.TME immunoreceptor fusion molecules useful in the methods and compositions of the present invention comprise at least one portion of one or more immunoglobulin molecules and all or a functional portion of one or more TME receptors. These immunoreceptor fusion molecules can assemble as monomers or hetero- or homo-multimers. Immunoreceptor fusion molecules can also be monovalent or multivalent.
Приклад такої злитої молекули ТМЕ-імунорецептора - це злитий протеїн ТМЕ-гесеріог/до. Злиті молекулиAn example of such a TME-immunoreceptor fusion molecule is the TME-heseriog/do fusion protein. Fused molecules
ТМЕ-імунорецептора і методи для їх одержання були описані в літературі (Геззіацег еї а!., Еиг. У. ІЧ 101.TME-immunoreceptor and methods for their preparation were described in the literature (Gezziaceg ei a!., Eig. U. IC 101.
21: 2883-2886 (1991); АзПКепа?і єї а!., Ргос. Маї). Асад. 5сі. ОБА 88: 10535-10539 (1991); Рерреї еї а|., 9. Е, гр.21: 2883-2886 (1991); AzPKepa?i eyi a!., Rhos. Mai). Asad 5 BOTH 88: 10535-10539 (1991); Rerrei ei a|., 9. E, gr.
Мед. 174: 1483-1489 (1991); Коїї5 еї аї!., Ргос. іМеШ., Ісі2сіІ. Зсі. С БА 91: 215-219 (1994); Вишйег еєїа!., СуюкКіпе 6(6): 616623 (1994); ВаКег еїа!., ей. 9. Іттипої. 24: 2040-2048 (1994); Вешег еї аІ., ШО. 5. Раїєпі Мо. 5,447,851; апа |. 5. Арріїсайоп Мо. 08/442, 133 (Пеа Мау 16, 1995), кожне з цих посилань повністю включено тут через посилання|. Методи одержання злитиз молекул імунорецептора можуть бути також знайдені вHoney. 174: 1483-1489 (1991); Koiih5 ei ai!., Rgos. iMeSh., Isi2siI. All together. S BA 91: 215-219 (1994); Vyshyeg eyia!., SuyukKipe 6(6): 616623 (1994); VaKeg eia!., hey. 9. Ittipoi. 24: 2040-2048 (1994); Vesheg her AI., SHO. 5. Raiepi Mo. 5,447,851; apa |. 5. Arriisayop Mo. 08/442, 133 (Pea Mau 16, 1995), each of which is incorporated herein by reference in its entirety. Methods of obtaining fusions of immunoreceptor molecules can also be found in
ІСароп еї а!., ). 5. Раїепі Мо. 5,116,964; Сароп еї аї., ). 5. Раїепі Мо. 5,225,538; апа Сароп вї а!., Машге 337: 525-531 (1989), це посиланння повністю включено тут через посилання).ISarop ei a!., ). 5. Raiepi Mo. 5,116,964; Sarop ei ai., ). 5. Raiepi Mo. 5,225,538; apa Sarop vi a!., Mashge 337: 525-531 (1989, this reference is incorporated herein by reference in its entirety).
Функціональний еквівалент, похідне, фрагмент або регіон молекули рецептора ТМЕ відноситься до частини молекули рецептора ТМЕ, або частини послідовності молекули рецептора ТМЕ, яка кодує молекулу рецептора ТМЕ, яка має достатній розмір і послідовності, щоб функціонально мати схожість до молекул рецептора ТМЕ, які можуть використовуватися в даному винаході (напр., зв'язувати ТМЕ з високою афінністю та мати низьку імуногенність). Функціональний еквівалент молекули рецептора ТМЕ також включає модифіковані молекули рецептора ТМЕ, які функціонально схожі до молекул рецептора ТМЕ, які можуть використовуватися в даному винаході (напр., зв'язувати ТМЕ з високою афінністю та мати низьку імуногенність). Наприклад, функціональний еквівалент молекули рецептора ТМЕ може містити "мовчазний" кодон або одну або більше замін амінокислот, делецій або доповнень (є. 9., заміна однієї кислотної амінокислоти на іншу з кислотну амінокислоту; або заміна одного кодону, що кодує гідрофобну амінокислоту на такий же чи інший кодон, що кодує гідрофобну амінокислоту). |Див. А!,Мзибеї еї аї., СигепіA functional equivalent, derivative, fragment, or region of a TME receptor molecule refers to a portion of a TME receptor molecule, or a portion of the sequence of a TME receptor molecule that encodes a TME receptor molecule that is of sufficient size and sequence to be functionally similar to TME receptor molecules that may be used in the present invention (eg, bind TME with high affinity and have low immunogenicity). A functional equivalent of a TME receptor molecule also includes modified TME receptor molecules that are functionally similar to the TME receptor molecules that can be used in the present invention (eg, bind TME with high affinity and have low immunogenicity). For example, a functional equivalent of a TME receptor molecule may contain a "silent" codon or one or more amino acid substitutions, deletions or additions (ie. or another codon encoding a hydrophobic amino acid). | See A!, Mzybei ei ai., Sygepi
Ргоїюсоїв іп МоіІесшцаг Віоіоду, Сгеєпе Рибіївзпіпд Авзос. апа, У/ієу-Іпіегвсієпсе, Мем Хоїк (1987-2000)).Rgoiyusoiv ip MoiIesshtsag Vioiodu, Sgeyepe Rybiivzpipd Avzos. apa, U/ieu-Ipiegvsiepse, Mem Hoik (1987-2000)).
Цитокініни включають будь-який відомий цитокінін. Див. напр., ммлу.СоремппСміокКіпе5.сот. Антагоністи цитокініну включають, але не обмежують цими, будь-яке антитіло, фрагмент або міметик, будь-який розчинний рецептор, фрагмент або міметик, будь-який малу молекулу антагоніста, або будь-яку їхню комбінацію.Cytokinins include any known cytokinin. See e.g., mmlu.SoremppSmiokKipe5.sot. Cytokinin antagonists include, but are not limited to, any antibody, fragment or mimetic, any soluble receptor, fragment or mimetic, any small molecule antagonist, or any combination thereof.
Терапевтичні Лікування. Будь-який метод даного винаходу може охоплювати метод тікування розладу опосередкованого 1-12, включаючи застосування ефективної кількості композиції або фармацевтичного композиції, що включає як мінімум одне антитіло анти-ІЇ-12 до клітини, тканини, органу, тварини або хворого за потреби такої модуляції, лікування або терапії. Такий метод може необов'язково включати охоплюють одночасне застосування або комбінаційну терапію для лікування таких імунних хвороб, там, де застосування зазначеного як мінімум одного антитіла анти-1ІЇ-12, його зазначеної частини або варіанту, також охоплює застосування, перед, одночасно, та/або після, як мінімум одного вибраного з антагоніста (напр., але не обмежено цим, антитіло ТМЕ або фрагмент, розчинний рецептор ТМЕ або фрагмент, їх злитими протеїнами, або малою молекулою антагоніста ТМЕ), антиревматик (е. 9д., метотрексат, ауранофін, ауротіоглюкоза, азатіопірин, етенерсепт, ауротіомалат натрію, сульфат гідроксихлорохінону, лерфлюномід, сульфазалзін), мязевий релаксант, наркотик, не стероїдні протизапальні ліки, болезаспокійливий засіб, анестезуючий засіб, заспокійливий засіб, місцевий анестетик, нейромязевий блокатор, антимікробний засіб (напр., аміноглікозид, протигрибковий засіб, антипаразитичний, противірусний, карбапенем, цефалоспорин, фторохінолон, макролід, пеніцилін, сульфонамід, тетрациклін, інший антимікробний засіб), антипсоріатичний засіб, кортикостероїд, анаболічний стероїд, агент пов'язаний з діабетом, мінерал, харчова добавка, тироїдний агент, вітамін, гормон пов'язаний з кальцієм, притилиарейний, притикашльвий, антиблювотне, противиразковий засіб, послаблюючий засіб, антикоагулятн, еритропеотин (напр., епоетин альфа), філграстим (напр. 5-С5Е, Мепродеп), сарграмостим (М-С5Е, лейкін), імунізатор, імуноглобулін, імуносупресант (напр., базілікксимаб, циклоспорин, даклізумаб), гормон росту, ліки заміни гормону, модулятор рецептора естрогену, мідриатичний засіб, циклоплегік, аклілуючий агент, антиметаболіт, мітотичний інгібітор, радіо фармацевтичний засіб, антидепресант, антиманійний агент, антипсихотичний, транквілізатор, снодійний засіб, симпатоммемічний засіб, стимулято, донепезіл, такрин, засіб для лікування астми, бета агоніст, вдихальний стероїд, інгібітор лейкотрену, метилксантин, хромолін, епінефрин або аналог, дорназа альфа (Риїтогуте), цитокінін або антагоніст цитокініну.Therapeutic treatment. Any method of the present invention may include a method of treating a 1-12-mediated disorder, including administering an effective amount of a composition or a pharmaceutical composition comprising at least one anti-II-12 antibody to a cell, tissue, organ, animal, or patient in need of such modulation , treatment or therapy. Such a method may optionally include the simultaneous use or combination therapy for the treatment of such immune diseases, where the use of said at least one anti-1II-12 antibody, said part or variant thereof, also covers the use, before, simultaneously, and/ or after at least one selected from an antagonist (eg, but not limited to, a TME antibody or fragment, a soluble TME receptor or fragment, their fusion proteins, or a small molecule TME antagonist), an antirheumatic drug (e.g. 9d, methotrexate, auranofin , aurothioglucose, azathiopyrine, etanercept, sodium aurothiomalate, hydroxychloroquinone sulfate, lerflunomide, sulfasalazine), muscle relaxant, narcotic, nonsteroidal anti-inflammatory drug, analgesic, anesthetic, sedative, local anesthetic, neuromuscular blocker, antimicrobial (eg, aminoglycoside , antifungal, antiparasitic, antiviral, carbapenem, cephalosporin, fluoroquinolone, macrolide, penicillin, sul fonamide, tetracycline, other antimicrobial), antipsoriatic, corticosteroid, anabolic steroid, diabetes-related agent, mineral, dietary supplement, thyroid agent, vitamin, calcium-related hormone, pritillary, antitussive, antiemetic, antiulcer, laxative, anticoagulant, erythropoietin (eg, epoetin alfa), filgrastim (eg, 5-C5E, Meprodep), sargramostim (M-C5E, leucine), immunizer, immunoglobulin, immunosuppressant (eg, basiliximab, cyclosporine, daclizumab), growth hormone, hormone replacement drug, estrogen receptor modulator, mydriatic agent, cycloplegic, acylating agent , antimetabolite, mitotic inhibitor, radiopharmaceutical, antidepressant, antimanic agent, antipsychotic, tranquilizer, hypnotic, sympathomimetic, stimulant, donepezil, tacrine, asthmatic, beta agonist, inhaled steroid, leukotrene inhibitor, methylxanthine, cromolyn, epinephrine or analog, dornase alfa (Riitogute), cytokinin, or cytokinin antagonist.
Звичайно, лікування патологічних станів проводиться за допомогою застосування ефективної кількості або дози як мінімум однієї композиції анти-І--12 антитіла, що повністю, в середньому, чи проміжок з як мінімум приблизно 0.01 до 500 міліграмів, принаймні одого анти-1І--12 антитіла /кілограм хворого на дозу, і переважно від як мінімум близько 0.1 до 100 міліграмів, антитіла /кілограм хворого на одне чи багаторазове вживання, залежно від специфічності дії, яка міститься в складі. Альтернативно, ефективна концентрація сироватки може становити 0.1-5000дд/т! сироватки, за одноразове або багаторазове застосування.Of course, the treatment of the pathological conditions is carried out by the use of an effective amount or dose of at least one anti-I-12 antibody composition that is wholly, on average, or in the range of at least about 0.01 to 500 milligrams of at least one anti-I-12 antibodies / kilogram of the patient per dose, and preferably from at least about 0.1 to 100 milligrams, antibodies / kilogram of the patient for one or multiple use, depending on the specificity of the action contained in the composition. Alternatively, the effective serum concentration can be 0.1-5000dd/t! serum, for single or repeated use.
Прийнятні дозування відомі медичним практикуючим фахівцям і буде, звичайно, залежати від специфіки стану хвороби, специфічності активності застосовуваної композиції, і специфіки перебігу лікування. В деяких прикладах, для досягнення бажаної терапевтичної кількості, може бути необхідно запровадити багаторазове вживання, напр., повторювані індивідуальні вживання контрольованої або відміряної дози, де індивідуальні вживання повторюються, поки бажана щоденна доза або результат не буде досягнута.Acceptable dosages are known to medical practitioners and will, of course, depend on the specificity of the disease state, the specificity of the activity of the composition used, and the specificity of the course of treatment. In some examples, to achieve the desired therapeutic amount, it may be necessary to implement multiple administrations, eg, repeated individual administrations of a controlled or metered dose, where individual administrations are repeated until the desired daily dose or result is achieved.
Переважні можуть необов'язково включати 0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,0.9,1,2,3,4,5,6,7,8,9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, АЗ, 44, 45, Аб. 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76. 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 та/або 100-500тд/кд/застосування, чи будь-який проміжок, значення чи його частина, чи до досягнення концентрації сироватки 0.1, 0.5, 0.9, 1.0, 1.1, 1.2, 1.5, 1.9, 2.0, 2.5, 2.9, 3.0, 3.5, 3.9, 4.0, 4.5, 4.9, 5.0, 5.5, 5.9, 6.0, 6.5, 6.9, 7.0, 7.5, 7.9, 8.0, 8.5, 8.9, 9.0, 9.5, 9.9, 10, 10.5, 10.9, 11, 11.5, 11.9, 12, 12.5, 12.9, 13.0, 13.5, 13.9, 14.0, 14.5, 4.9, 5.0, 5.5, 5.9, 6.0, 6.5, 6.9, 7.0, 7.5, 7.9, 8.0, 8.5, 8.9, 9.0, 9.5, 9.9, 10, 10.5, 10.9, 11, 11.5, 11.9, 12, 12.5, 12.9, 13.0, 13.5, 13.9, 14, 14.5, 15, 15.5, 15.9, 16, 16.5, 16.9, 17, 17.5, 17.9, 18, 18.5, 18.9, 19, 19.5, 19.9, 20, 20.5, 20.9, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 96, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 4500, та/або 5000ш/ті концентрація сироватки за єдине або багаторазове застосування, або будь-який проміжок, значення або його частину.Preferred may optionally include 0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,0.9,1,2,3,4,5,6,7,8,9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, AZ, 44, 45, Ab. 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76. 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 and/or 100-500td/kd/application, or any interval, value or part thereof, or until reaching a serum concentration of 0.1, 0.5, 0.9, 1.0, 1.1, 1.2, 1.5, 1.9, 2.0, 2.5, 2.9, 3.0, 3.5, 3.9, 4.0, 4.5, 4.9, 5.0, 5.5, 5.9, 6.0, 6.5, 6.9, 7.0, 7.5, 7.9, 8.0, 8.5, 8.9, 9.0, 9.5, 9.9, 10, 10.5, 10.9, 11, 11.5, 11.9, 12, 12.5, 12.9, 13.0, 13.5, 13.9, 14.0, 14.5, 4.9, 5.0, 5.5, 5.9, 6.0, 6.5, 6.9, 7.0, 7.5, 7.9, 8.0, 8.5, 9.0,9 9.5, 9.9, 10, 10.5, 10.9, 11, 11.5, 11.9, 12, 12.5, 12.9, 13.0, 13.5, 13.9, 14, 14.5, 15, 15.5, 15.9, 16, 16.5, 16.9, 17, 17.5 18, 18.5, 18.9, 19, 19.5, 19.9, 20, 20.5, 20.9, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 96, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 4 500, and/or 5,000 U/ti serum concentration for a single or multiple use, or any interval, value, or part thereof.
Альтернативно, дозування вживання може зміватися, залежно від відомих чинників, як наприклад особливості фармакодинаміки специфічного агенту, і його способу та шляху застосування; віку, здоров'я, і ваги одержувача; природи і тривалості симптомів, виду сумісного лікування, частоти застосування, та бажаного результату. Звичайно дозування активного інгредієнта може становити від близько 0.1 до 100 міліграмів на кілограм ваги тіла. Звичайно 0.1-50, і переважно 0.1-10 міліграмів на кілограм за застосування або в формі повільного вивільнення, є ефективним, для отримання бажаних результатів.Alternatively, the dosage of use may vary, depending on known factors, such as the specifics of the pharmacodynamics of a specific agent, and its method and route of application; age, health, and weight of the recipient; the nature and duration of symptoms, the type of concomitant treatment, the frequency of use, and the desired result. Typically, the dosage of the active ingredient can range from about 0.1 to 100 milligrams per kilogram of body weight. Typically 0.1-50, and preferably 0.1-10 milligrams per kilogram per application or in a slow release form, is effective for obtaining the desired results.
Як необмежуючий приклад, лікування людини або тварини може проведене як одноразове або періодичне дозування принаймні одного антитіла даного винаходу 0.1-100тод/код, як наприклад 0.5, 0.9, 1.0, 1.1,1.5,2,3,4,5,6, 7,8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 або 100то/кад, за день, принаймні одне з на день 1, 2, 3,4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21,22, 23, 24,25, 26,27, 28,29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, або 40, або альтернативно або додатково, принаймні одне з на тиждень 1,2,3,4,5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, АЗ, 44, 45, Аб, 47, 48, 49, 50, 51, або 52, або альтернативно або додатково, принаймні одне з 1, 2, 3, 4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, або 20 років, або будь-якої комбінації цього, використовуючи одноразове вливання або повторювані дози.As a non-limiting example, the treatment of a person or an animal can be carried out as a single or periodic dosage of at least one antibody of the present invention 0.1-100tod/code, such as 0.5, 0.9, 1.0, 1.1, 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 or 100 tons per day, at least one of per day 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21,22, 23, 24,25, 26,27, 28,29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, or 40, or alternatively or additionally, at least one of per week 1,2,3,4,5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 , 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, AZ, 44 , 45, Ab, 47, 48, 49, 50, 51, or 52, or alternatively or additionally, at least one of 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, or 20 years, or any combination thereof, using a single infusion or repeated and doses.
Форми (композиції) дозування, відповідні для внутрішнього вживання, загалом містять від близько 0.1 міліграмів до близько 500 міліграмів активного інгредієнта на одиницю або контейнер. В цих фармацевтичних комподиціях активний інгредієнт звичайно присутній в кількості близько 0.5-99.99995 маси, від загальної ваги складу.Dosage forms (compositions) suitable for internal use generally contain from about 0.1 milligrams to about 500 milligrams of active ingredient per unit or container. In these pharmaceutical compositions, the active ingredient is usually present in an amount of about 0.5-99.99995 mass, from the total weight of the composition.
Для парентерального вдивання, антитіло може бути у вигляді розчину, суспензії, емульсії або ліофілізованого порошку в поєднанні, або окремо поданим, з прийнятним фармацевтичним парентеральним носієм. Приклади такого транспорту - це - вода, сольовий розчин, розчин Зінгера, розчин глюкози, і 1-1095-на сироватка альбуміну людини. Ліпосоми і неводний носій, як наприклад нелеткі олії також можуть використовуватися. Носій або ліофілізований порошок може містити добавки, які підтримують ізотонічність (напр., хлорид натрію, маннітол) і хімічну стабільність (напр., буфери і консерванти). Склади стерилізовані відомими або придатними методами.For parenteral administration, the antibody may be in the form of a solution, suspension, emulsion, or lyophilized powder in combination with, or separately administered, an acceptable pharmaceutical parenteral carrier. Examples of such transport are water, saline, Singer's solution, glucose solution, and 1-1095-per human serum albumin. Liposomes and non-aqueous vehicles such as non-volatile oils can also be used. The carrier or lyophilized powder may contain additives that maintain isotonicity (eg, sodium chloride, mannitol) and chemical stability (eg, buffers and preservatives). Formulations are sterilized by known or suitable methods.
Придатні фармацевтичні носії, описані в останньому виданні, (Кетіпдіоп'є Рпагтасешііса! Зсіепсев, А.Suitable pharmaceutical carriers described in the latest edition, (Ketipdiopye Rpagtaseshiisa! Zsiepsev, A.
Озої, стандартний текст посилання в цьому полі)Ї.Yes, the standard link text in this field.
Альтернативне ЗастосуванняAlternative Application
Багато відомих і тих що розробляються методів може що використовується згідно даного винаходу для застосування фармацевтично ефективних кількостей як мінімум одного анти-1ІЇ-12 антитіла, згідно даного винаходу. Тоді як легеневе вживання приводилося в даному описі, інші методи вживання можуть бути використувані згідно даного винаходу з прийнятними результатами.Many known and currently being developed methods can be used according to this invention to apply pharmaceutically effective amounts of at least one anti-1II-12 antibody according to this invention. While pulmonary administration has been provided in this description, other methods of administration can be used according to this invention with acceptable results.
Антитіла І--12 даного винаходу можуть представлені в носії, як розчин, емульсія, колоїд, або суспензія, або як сухий порошок, з використанням будь-яких з різноманітних пристроїв і методів, придатних для інгаляторного застосування або іншими методами, описаними тут або відомими в практиці.Antibodies I--12 of the present invention may be presented in a carrier, as a solution, emulsion, colloid, or suspension, or as a dry powder, using any of a variety of devices and methods suitable for inhaler use or by other methods described herein or known in practice.
Парентеральні Склади і ЗастосуванняParenteral Formulations and Application
Склади для парентерального застосування можуть містити, як звичайннаповнювач стерильну воду або сольовий розчин, поліалкильні гліколі, як наприклад поліетиленгліколь, олії рослинного походження, гідрогенований нафталін і подібні. Водні або масляні суспензії для ін'єкцій можуть виготовлені, використовуючи відповідний емульгатор або зволожувач і суспензійний агент, згідно відомих методів.Formulations for parenteral use may contain, as a common filler, sterile water or saline solution, polyalkyl glycols, such as polyethylene glycol, oils of vegetable origin, hydrogenated naphthalene, and the like. Aqueous or oily suspensions for injections can be prepared using a suitable emulsifier or wetting agent and a suspending agent according to known methods.
Агенти для ін'єкції можуть бути нетоксичними, не для орального прийому розбавлювач, як наприклад водні розчини або ін'єкційний стерильний розчин або суспензія в розчиннику. Як придатний до вживання носій або розчинник можуть бути використані, вода, розчин Рінгера, ізотонічний сольовий розчин, і т.п. дозволений; як звичайний носій, або суспензійний розчинник може використовуватися стерильне нелетке масло. Для цих цілей може що використовується, будь-який вид нелеткого масла і жирної кислоти, включаючи природні або синтетичні або напівсинтетичні жирні масла або жирні кислоти; природні або синтетичні або напівсинтетичні моно- або ди- або тригліцериди. Парентеральне застосування, є відомим в практиці, і включає, але не обмежує, звичайний засіб для ін'єкцій, безголковий пристрій для ін'єкції стислого газу як описано в (0.5.Раї.Мо.5,851,198), та лазерний перфоруючий пристрій як описано в (О.5.Раї.Мо.5,839,446 повністю включений тут посиланням).Agents for injection may be non-toxic, not orally diluted, such as aqueous solutions or a sterile injectable solution or suspension in a solvent. As a suitable carrier or solvent, water, Ringer's solution, isotonic saline, etc. can be used. permitted; sterile non-volatile oil may be used as the usual carrier or suspension solvent. For these purposes, any kind of non-volatile oil and fatty acid can be used, including natural or synthetic or semi-synthetic fatty oils or fatty acids; natural or synthetic or semi-synthetic mono- or di- or triglycerides. Parenteral administration is known in the art and includes, but is not limited to, a conventional injection device, a needleless device for injecting compressed gas as described in (0.5.Rai.Mo.5,851,198), and a laser perforating device as described in (O.5.Rai.Mo.5,839,446 is fully included here by reference).
Альтернативне ДоставленияAlternative Delivery
Винахід крім того стосується вживання як мінімум одного антитіла анти-1І-12 парентерально, підшкірно, внутрішньом'язево, внутрішньовенно, внутрішньосуглобово, внутрішньобронхіально, внутрішньоочеревинно, іпігасарзшіаг внутрішньосуглобово, внутрішньохрящово. внутрішньопорожнинно, внутрішньоцеліарно, внутрішньоцеребрально, внутрішньоцеребровентрикулярно, внутрішньоободочно, внутрішньоцервікально, внутрішньошлунково, внутрішньопечінково, внутрішньоміокардіально, внутрішньокістково, внутрішньотазово, внутрішньоперікардіально, внутрішньоперіотонально, внутрішньоплеврально, внутрішньопростатно, внутрішньолегенево, внутрішньоректально, внутрішньонирково, внутрішньосітківково, внутрішньоспінально, внутрішньосиновіально, внутрішньоторакально, внутрішньоутробно, внутрішньоміхурово, за допомогою болюса, вагінально, ректально, буккально, підязиково, інтраназально, або трансдермальні засоби. Як мінімум один склад антитіла анти-ІЇ-12 може призначений для використовування парентерально (підшкірно, внутрішньом'язево або внутрішньовенно) або будь-якого іншого застосування особливо у формі рідких розчинів або суспензій; для використовування у вагінальному або ректальному застосуванні особливо у напівтвердих формах, як наприклад, але не обмежено до таких, креми і суппозиторії: для буккального, або підязикового застосування, як наприклад, але не обмежений до таких, у формі таблеток або капсул; або інтранозально, як наприклад, але не обмежено ними, у форма порошкув, носових крапель або аерозолів або певних агентв; або трансдермально, як наприклад, не обмежуючий, гель, мазь, примочка, суспензія або пластирна системою доставки з хімічним наповнювачем, як наприклад диметил сульфоксид, для зміни структури шкіри або збільшення концентрації ліків в трансдермальному пластирі |(Чипдіпдег, еї а). п "Опд РептеєайопIn addition, the invention relates to the use of at least one anti-1I-12 antibody parenterally, subcutaneously, intramuscularly, intravenously, intraarticularly, intrabronchially, intraperitoneally, intraarticularly, intracartilaginously. intracavitary, intraceliac, intracerebral, intracerebroventricular, intracolonic, intracervical, intragastric, intrahepatic, intramyocardial, intraosseous, intrapelvic, intrapericardial, intraperitoneal, intrapleural, intraprostatic, intrapulmonary, intrarectal, intrarenal, intraretinal, intraspinal, intrasynovial, intrathoracic, intrauterine, intravesical, with bolus, vaginal, rectal, buccal, sublingual, intranasal, or transdermal means. At least one formulation of the anti-II-12 antibody may be intended for parenteral (subcutaneous, intramuscular or intravenous) or any other use, especially in the form of liquid solutions or suspensions; for vaginal or rectal use, especially in semi-solid forms such as, but not limited to, creams and suppositories: for buccal or sublingual use, such as, but not limited to, tablet or capsule form; or intranasally, such as, but not limited to, in the form of powders, nasal drops or aerosols or certain agents; or transdermally, such as non-limiting, gel, ointment, lotion, suspension, or patch delivery system with a chemical filler, such as dimethyl sulfoxide, to change the structure of the skin or increase the drug concentration in the transdermal patch |(Chipdipdeg, ей а). n "Opd Repteyeayop
Еппапсетепі"; Нвієей, 0. 5., Ейв., рр.59-90 (Магсе! ОекКег, Іпс. Мем Могк 1994, повністю включено посиланням)і, або з окислюючими агентами, які уможливлюють використання формулювань, що містять протеїни і пептиди на шкірі (М/098/53847|, або використання електричних полів, для створення швидкоплинні транспортих шляхів, як наприклад електропорація, для збільшення рухливості заряджених ліків через шкіру, як наприклад іонофорез, або використання ультразвуку, як наприклад сонофорезEppapsetepi"; Nvieei, 0. 5., Ev., pp. 59-90 (Magse! OekKeg, Ips. Mem Mogk 1994, fully incorporated by reference) and, or with oxidizing agents, which enable the use of formulations containing proteins and peptides on the skin (M/098/53847|, or the use of electric fields, to create fast transport pathways, such as electroporation, to increase the mobility of charged drugs through the skin, such as iontophoresis, or the use of ultrasound, such as sonophoresis
ІУ.5.Раї.Мо5.4,309,989 та 4,767,402| (згадані вище публікації і патенти, що є повністю включені тут посиланням).IU.5.Rai.Mo5.4,309,989 and 4,767,402| (the aforementioned publications and patents are incorporated herein by reference in their entirety).
Легеневе/Назальне застосуванняPulmonary/Nasal use
Для легеневої адміністрації, переважно як мінімум один склад з антитілом анти-1Ї-12, доставлений в розмірі частинки, ефективному для досягнення більш низьких повітряних шляхів легенів або пазух. Згідно винаходу, як мінімум одне антитіло анти-1ІЇ-12 може доставлене будь-яким з різноманітних інгаляторних або назальних пристроїв, відомих в практиці для застосування терапевтичного агента вдихом. Ці пристрої, здатні до депонування аерозолізованих формулювань в синусні пазухи або альвеоли хворого, включають мірне дозування інгаляторів, розпилювачів, генераторів сухих пудр, пульверизаторів, і подібних. Інші пристрої, придатні для застосування для легеневого або носового застосування антитіл, також відомі в практиці. Всі такі пристрої можуть використовувати формулювання, придатні для застосування для розподілу антитіла в аерозолі. Такі аерозолі можуть включати або розчини (як водний, так і не водний) або тверді частки. Міряні інгаляторні дозатори подібно мірному інгалятору дозатору Мепіоїїп5, звичайно використовують рушійний газ і вимагають приведення в дію за допомогою вдиху Ідив. напр., МО 94/16970,For pulmonary administration, preferably at least one anti-1Y-12 antibody formulation is delivered in a particle size effective to reach the lower airways of the lungs or sinuses. According to the invention, at least one anti-1II-12 antibody can be delivered by any of the various inhaler or nasal devices known in practice for the use of a therapeutic agent by inhalation. These devices capable of depositing aerosolized formulations into the patient's sinuses or alveoli include metered dose inhalers, nebulizers, dry powder generators, nebulizers, and the like. Other devices suitable for use for pulmonary or nasal administration of antibodies are also known in the art. All such devices can use formulations suitable for use in aerosolized antibody delivery. Such aerosols may include either solutions (both aqueous and non-aqueous) or solid particles. Metered inhaler dispensers, like the metered metered inhaler Mepiop5 dispenser, usually use a propellant gas and require actuation by inhaling Idv. e.g., MO 94/16970,
УМО 98/35888)|. Сухі інгалятори пудри подібні до Тигрипа|егтм (Авіга), Ноїапа|его (Стіахо), ОізкизФ (Спахо),UMO 98/35888)|. Dry powder inhalers similar to Tigripa|egtm (Aviga), Noiapa|ego (Stiaho), OizkyzF (Spaho),
ЗрігозФіппа|ег (Оига), пристрої, що продаються, Іппаіе Тпегарешісв, і ЗзріппаіегФ інгалятор пудри (Різопв) котрий приводиться в дію вдиханням змішаної пудри (05 4668218 Авіга, ЕР 237507 Авіга, МО 97/25086ZrigozFippa|eg (Oiga), devices for sale, Ippaie Tpegareshisv, and ZzrippaiegF powder inhaler (Rizopv) which is actuated by inhalation of mixed powder (05 4668218 Aviga, ER 237507 Aviga, MO 97/25086
Сіахо, МО 94/08552 Бига, 5 5458135 Іппаіє, УМО 94/06498 ГРізоп5, повністю включено тут посиланнямі.Siaho, MO 94/08552 Byga, 5 5458135 Ippaie, UMO 94/06498 GRizop5, fully incorporated herein by reference.
Розпилювачі подібно АЕкх'""Агадідт, ОКгамепіФпериції2ег (МаїПпсКгоаюО, і розпилювач Асогп ПФ (МедичнаSprayers like AEkh'""Agadidt, OKgamepiFperitsi2eg (MaiPpsKgoayuO, and sprayer Asogp PF (Medical
Продукція Магдне5з) (05 5404871 Агадідт, УМО 97/223761|, вище згадані, повністю включено тут посиланням, утворюють аерозолі з розчинів, тоді як дозовані аерозолі, сухі інгалятори пудри, і т.п. генерують малі аерозольні частки. Ці специфічні приклади комерційно доступних пристроїв для інгаляцій є представниками специфічних пристроїв, придатних для цього винаходу, і не є обмеженням даного винаходу винаходу.Products Magdne5z) (05 5404871 Agadidt, UMO 97/223761|, mentioned above, fully incorporated herein by reference), generate aerosols from solutions, while metered dose aerosols, dry powder inhalers, etc. generate small aerosol particles. These specific examples are commercially available inhalation devices are representative of specific devices suitable for this invention and are not a limitation of this invention of the invention.
Переважно, композиція, яка включає принаймні одне антитіло анти-1І-12, доставляється як інгалятор сухої пудри або пульверизатор. Це є окремі бажані особливості пристрою вдиху для застосування як мінімум одного антитіла даного винаходу. Наприклад, доставления інгаляційним пристроєм значно вигіднішою, легше відтворюваною, і точною. Пристрій вдиху може необов'язково доставляти малі сухі частки, наприклад менш ніж близько 10цт, краще близько 1-5дт, для покращення вдихуваності.Preferably, the composition, which includes at least one anti-1I-12 antibody, is delivered as a dry powder inhaler or nebulizer. These are some desirable features of the inhalation device for the use of at least one antibody of this invention. For example, delivery by an inhalation device is much more profitable, easier to reproduce, and more accurate. The inhalation device may optionally deliver small dry particles, for example less than about 10ct, preferably about 1-5dt, to improve respirability.
Застосування композицій антитіла 1-12 АерозолемApplication of antibody compositions 1-12 Aerosol
Аерозоль, що включає протеїн композиції антитіла І/-12, може отримуватися, випирскуванням під тиском через насадку суспензій чи розчинів як мінімум одного антитіла анти-1Ї -12.An aerosol containing a protein composition of the antibody I/-12 can be obtained by spraying under pressure through a nozzle of suspensions or solutions of at least one anti-1I-12 antibody.
Розмір насадки і конфігурація, тиск застосовується, і рідка швидкість подачі можуть бути вибрані таким чином, щоб досягти бажаного виходу і розміру часток. Електроаерозоль може отримуватися, наприклад, електричним полем у поєднанні з капіляром або живлючою насадкою. Переважно, частки як мінімум композиції одного протеїну антитіла анти-ІЇ-12, доставляються пульверизатором, мають розмір частоки менш ніж близько 10шт, краще межах від приблизно 1 шт до приблизно 5идт, і краще за все від приблизно дит до приблизно Здт.Nozzle size and configuration, pressure applied, and liquid feed rate can be selected to achieve the desired yield and particle size. An electroaerosol can be obtained, for example, by an electric field in combination with a capillary or a feeding nozzle. Preferably, the particles of at least one anti-II-12 antibody protein composition, delivered by a nebulizer, have a particle size of less than about 10 units, preferably from about 1 unit to about 5 units, and most preferably from about 1 unit to about 1 unit.
Формулювання як мінімум одного протеїну композиції антитіла анти-1ІЇ-12, придатне для використання пульверизатором, звичайно включають протеїн композиції антитіла у водному розчині з концентрацією від приблизно 0.1п9 до приблизно 100та4 0.1 як мінімум одного протеїу композиції антитіла анти-1ІЇї-12 на ті розчину або тд/дт, або будь-який проміжок або значення в ньому, напр., але не не обмежуючись до нього, 1,2,3,4,5,6,7,8,9,1,2,3,4,5,6, 7, 8,9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 або 100тд/ті або тд/д. Композиція може включати агенти, як наприклад наповнювач, буфер, ізотонічний агент, консервант, сурфактант, і, краще, цинк. Композиція може також включати наповнювач або агент стабілізації протеїну композиції антитіла, як наприклад буфер, відновлюючий засіб, додатковий протеїн, або вуглевод. Додаткові протеїни, корисні у формулюванні протеїнів композиції антитіла, включають альбумін, протамін, або подібний. Типові вуглеводи, корисні у формулюванні протеїнів композиції антитіла, включають сахарозу, манітол, лактозу, трегалозу, глюкозу, або подібний. Формулювання протеїну композиції антитіла може також включати сурфактант, який може знизити або запобігти поверхневу агрегацію протеїну композиції антитіла, викликану атомізацією розчину у формуванні аерозоля. Можуть використовуватися різні традиційні сурфактанти, як наприклад жирні кислотні поліоксиетиленефіри і алкоголі, та жирнокислотні естери поліоксиетилен сорбітолу. Кількості загалом можуть мати значення у проміжку 0.001-1495 ваги формулювання. Особливо переважним сурфактантами, для цілей цього винаходу є - поліоксиетилен сорбітан моноолеал, полісорбат 80, полісорбат 20, або подібний. Додаткові агенти, відомі в практиці для формулювань протеїну, як наприклад антитіла 1-12, або вказаних частин або варіантів, також можуть входити у формулювання.Formulations of at least one protein of the anti-1II-12 antibody composition suitable for use in a nebulizer typically include the protein of the antibody composition in an aqueous solution at a concentration of from about 0.1 to about 100% 0.1 of at least one protein of the anti-1II-12 antibody composition per ti of the solution or td/dt or any interval or value therein eg but not limited to 1,2,3,4,5,6,7,8,9,1,2,3,4 ,5,6, 7, 8,9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 , 30, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 or 100td/ti or td/d. The composition may include agents such as a filler, a buffer, an isotonic agent, a preservative, a surfactant, and, preferably, zinc. The composition may also include a filler or protein stabilization agent of the antibody composition, such as a buffer, reducing agent, additional protein, or carbohydrate. Additional proteins useful in the formulation of protein antibody compositions include albumin, protamine, or the like. Typical carbohydrates useful in the formulation of protein antibody compositions include sucrose, mannitol, lactose, trehalose, glucose, or the like. The formulation of the protein antibody composition may also include a surfactant that can reduce or prevent surface aggregation of the protein antibody composition caused by atomization of the solution in the aerosol formation. Various traditional surfactants can be used, such as polyoxyethylene fatty acid esters and alcohols, and polyoxyethylene sorbitol fatty acid esters. Amounts may generally range from 0.001-1495 of the weight of the formulation. Particularly preferred surfactants for the purposes of the present invention are polyoxyethylene sorbitan monooleal, polysorbate 80, polysorbate 20, or the like. Additional agents known in the art for protein formulations, such as antibodies 1-12, or specified portions or variants, may also be included in the formulation.
Застосування композицій антитіла 1-12 за допомогою розпилювачаApplication of antibody compositions 1-12 using a sprayer
Протеїнова композиція антитіла може бути застосована як розпилювач, як наприклад струйний розпилювач або ультразвуковий розпилювач. Звичайно, в струйному розпилювачі! використовується джерело стислого повітря, для створення повітряного струменя високої швидкості через отвір. Оскільки газ розширяється після насадки, зона низького тиску створюється, який витягує розчин протеїну композиції антитіла через капілярну трубку, сполучену з резервуаром рідини. Потік рідини від капілярної трубки, розпадається в нестабільні філаменти і крапельки, на виході з трубки, створюючи аерозоль. Може використовуватися ряд конфігурацій, норм витоку, і типу перегородки, для досягнення бажаних особливостей від даного струйного розпилювача. В ультразвуковому розпилювачі, звичайно використовується п'єзоелектричний перетворювач для перетворення електричної енергії високої частоти, у вібраційну, механічну енергію. Ця енергія, передана формулюванню протеїну композиції антитіла або безпосередньо, або через зчіпну рідину, створюючи аерозоль, який включає протеїн композиції антитіла.The protein composition of the antibody can be applied as a nebulizer, such as a jet nebulizer or an ultrasonic nebulizer. Of course, in a jet sprayer! a source of compressed air is used to create a high-velocity air jet through the opening. As the gas expands after the nozzle, a low-pressure zone is created that pulls the protein solution of the antibody composition through a capillary tube connected to the liquid reservoir. The liquid flow from the capillary tube breaks up into unstable filaments and droplets at the exit of the tube, creating an aerosol. A number of configurations, leak rates, and baffle types can be used to achieve the desired features from a given jet atomizer. In an ultrasonic atomizer, a piezoelectric transducer is usually used to convert high-frequency electrical energy into vibrational, mechanical energy. This energy is transferred to the protein formulation of the antibody composition either directly or through the coupling liquid, creating an aerosol that includes the protein composition of the antibody.
Більше переваг надає виконання в якому, частинки протеїну композиції антитіла, доставленого розпилювачем, мають розмір частинки менш ніж близько 1Ошт, краще в проміжку від близько їшт до близько 5мйт, і краще всього від близько 2йит до близько Здт.More preferred is an embodiment in which the protein particles of the nebulizer-delivered antibody composition have a particle size of less than about 1 µm, preferably in the range from about 1 µm to about 5 µm, and most preferably from about 2 µm to about 1 µm.
Формулювання як мінімум одного антитіла анти-ІЬ-12, придатне для використання або з струйним або ультразвековим розпилювачем, звичайно мають концентрацію від близько 0.1т79 до близько 100т4д як мінімум одного протеїну антитіла анти-ІЇ-12 на ті розчину. Формулювання може включати такі агенти, як наприклад наповнювач, буфер, ізотонічний агент, консервант, сурфактант, і, краще, цинк. Формулювання може також включати наповнювач або стабілізатор як мінімум одного протеїну композиції антитіла анти- І - 12, як наприклад буфер, відновлюючий засіб, додатковий протеїн, або вуглевод. Додаткові протеїни, корисні у формулюванні як мінімум одного протеїну складу антитіла анти-ІЇ-12, включають альбумін, протамін, або подібний. Типові вуглеводи, корисні у формулюванні як мінімум одного антитіла анти-1І--12, включають сахарозу, манітол, лактоза, трегалозу, глюкоза, або подібний. Як мінімум одне формулювання антитіла анти-ІЇ-12 може також включати сурфактант, який може знизити або запобігти поверхневій агрегації як мінімум одного антитіла анти-1ІЇ-12, викликаній атомізацією розчину у формуванні аерозоля.Formulations of at least one anti-IL-12 antibody suitable for use with either a jet or ultrasonic nebulizer typically have a concentration of from about 0.1 t79 to about 100 t4d of at least one anti-IL-12 antibody protein per unit of solution. The formulation may include such agents as, for example, a filler, a buffer, an isotonic agent, a preservative, a surfactant, and, preferably, zinc. The formulation may also include a filler or stabilizer of at least one protein of the anti-I-12 antibody composition, such as a buffer, reducing agent, additional protein, or carbohydrate. Additional proteins useful in the formulation of at least one protein of the anti-II-12 antibody composition include albumin, protamine, or the like. Typical carbohydrates useful in the formulation of at least one anti-1I--12 antibody include sucrose, mannitol, lactose, trehalose, glucose, or the like. At least one anti-II-12 antibody formulation may also include a surfactant that can reduce or prevent surface aggregation of at least one anti-II-12 antibody caused by atomization of the solution in the aerosol formation.
Можуть використовуватися різні придатні сурфактанти, як наприклад жирнокислотні ефіри поліоксиетилену, алкоголі і жирнокислотні ефіри поліоксиетилен сорбіталу. Кконцентрація речовини звичайно становить від приблизно 0.001 до приблизно 495 ваги формулювання. Особливо переважні сурфактанти, для цілей цього винаходу - це поліоксиетилен сорбітан моноолеат, полісорбат 80, полісорбат 20, або подібний. Додаткові агенти, відомі в практиці для формулювань протеїну, як наприклад протеїну антитіла можуть також увійти до формулювання.Various suitable surfactants can be used, such as polyoxyethylene fatty acid esters, alcohols and polyoxyethylene sorbital fatty acid esters. The concentration of the substance is usually from about 0.001 to about 495 by weight of the formulation. Particularly preferred surfactants for the purposes of the present invention are polyoxyethylene sorbitan monooleate, polysorbate 80, polysorbate 20, or the like. Additional agents known in the art for protein formulations, such as protein antibodies may also be included in the formulation.
Застосування композицій антитіла І/-12 дозований Інгалятор В дозованому інгаляторі (МОЇ), газ- витіснювач, як мінімум одне антитіло анти-ІЇІ -12, і будь-хто з наповнювачів або інші добавки, що містяться в контейнері у вигляді мікстури, включаючи зріджений, стислий газ. Приведення в дію дозуючого клапану випускає мікстуру у вигляді аерозоля, котра переважно містить частки розміром від менш ніж близько 10пшт, краще близько 1 шт до близько 5дт, і краще за все від близько 2 до близько Здшт. Бажаний розмір частки аерозоля може отриманий, при використанні формулювання протеїну композиції антитіла, одержуваної різними методами, відомими з приктики, включаючи такі, як струйні, розпилювальну сушку, конденсація критичної точки, або подібні. Переважні дозовані інгалятори, включають вироблювані ЗМ або сіахо і використовують як витіснюючий газ фторвуглеводень.Use of I/-12 Antibody Compositions Metered Inhaler In a metered dose inhaler (MEI), a propellant gas, at least one anti-III-12 antibody, and any of the excipients or other additives contained in the container in the form of a mixture, including liquefied , compressed gas. Actuation of the metering valve releases the mixture in the form of an aerosol, which preferably contains particles of a size of less than about 10 µm, preferably about 1 µm to about 5 µm, and most preferably from about 2 µm to about Zd µm. The desired particle size of the aerosol can be obtained, when using the formulation of the protein composition of the antibody obtained by various methods known in the art, including such as jetting, spray drying, critical point condensation, or the like. Preferable metered dose inhalers include manufactured ZM or siaho and use fluorocarbon as a displacing gas.
Формулювання як мінімум одного антитіла анти-І--12 для використовування з пристроєм дозуючого інгалятора загалом включають тонко дисперговану пудру, містячи як мінімум одне антитіло анти-1Ї-12 як суспензію в неводному середовищі, наприклад, суспендований в витіснюючому газі за допомогою сурфактанту. Витіснюючий газ може бути будь-яким загально прийнятним матеріалом, що використовується для цієї мети, як наприклад хлорфторвуглець, гідрохлорфторвуглець, гідрофторвуглець, або вуглеводень, включаючи трихлорфторометан, диихлордифторометан, дихлортетрафторетанол і 1,1,1,2-тетрафторметан, НЕА-134а (гідрофторалкан-134а), НЕА-227 (гідрофторалкан -227), або подібний.Formulations of at least one anti-I-12 antibody for use with a metered dose inhaler device generally include a finely dispersed powder containing at least one anti-I-12 antibody as a suspension in a non-aqueous medium, for example, suspended in a displacer gas using a surfactant. The displacing gas can be any commonly accepted material used for this purpose, such as chlorofluorocarbon, hydrochlorofluorocarbon, hydrofluorocarbon, or a hydrocarbon, including trichlorofluoromethane, dichlorodifluoromethane, dichlorotetrafluoroethanol, and 1,1,1,2-tetrafluoromethane, NEA-134a (hydrofluoroalkane -134a), NEA-227 (hydrofluoroalkane -227), or similar.
Кращий пропелянт - це гідрофторвуглець. Сурфактант може бути вибраний, для стабілізації як мінімум одного антитіла анти-І--12 як як суспензії в пропелянті, щоб захисту активного агента від хімічної деградації, і подібне. Відповідний сурфапктант включає сорбітан триолеат, соєвий лецитин, олеїнова кислота, або подібний. В деяких випадках аерозолі розчину, яким віддана перевага, використовують розчинники, як наприклад етанол.The best propellant is hydrofluorocarbon. The surfactant may be selected to stabilize at least one anti-I-12 antibody as a suspension in a propellant to protect the active agent from chemical degradation, and the like. A suitable surfactant includes sorbitan trioleate, soy lecithin, oleic acid, or the like. In some cases, solution aerosols, which are preferred, use solvents such as ethanol.
Додаткові агенти, відомі в практиці для формулювань протеїну, як наприклад протеїн можуть також увійти до формулювання.Additional agents known in the art for protein formulations, such as protein may also be included in the formulation.
Бідь-хто досвідчений в даній галузі розуміє, що методи даного винаходу можуть бути включати легеневе застосування як мінімум одного складу антитіла анти-ІЇ-12 за допомогою пристрої, не описаних тут.Anyone skilled in the art will understand that the methods of this invention may include pulmonary administration of at least one anti-II-12 antibody formulation using devices not described herein.
Ротові Формулювання і ЗастосуванняOral Formulation and Application
Формулювання для ротового вживання залежать від одночасного застосування із адювантами (напр., резорциноли і неіїонні сурфактанти, як наприклад оолеіловий ефір ополіоксиетилену і ефір п- гексадецилполіутилену), для штучного збільшення проникності стін кишківнику, також як і ферментативних інгібіторів (напр., інгібітори панкреатичного трипсину, диізопропілфторфосфату (ОРЕ) і триазоліл), для перешкоджання ферментативної деградації. Основа активної суміші для твердої форми дозування для орального застосування може дути одержана з принаймні однією добавкою з перерахованих сахароза, лактоза, целюлоза, манітол.трегалоза, рафіноза, мальтитол, декстран, крохмалі, агар, аргінати, хітини, хітозани, пектини, трагакантова камідь, гуміарабік, желатин, колаген, казеїн, альбумін, синтетичний або напівсинтетичний полімер, і гліцерид. Ці форми дозування можуть також містити інший вид(и) добавок, напр., інертний розбавлюючий агент, любрикант, як наприклад стеарат магнію, парабен, консервеючі агента, як наприклад сорбінова кислота, аскорбінова кислота, альфа-токоферол, антиоксидант, як наприклад цистеїн, дезинтегратор, звязувач, загущувач, буферний агент, підсолоджуючий агент, смаковий агента, ароматизуючий агент, і т.п.Oral formulations depend on the simultaneous use of adjuvants (eg, resorcinols and nonionic surfactants, such as polyoxyethylene oleyl ether and p-hexadecylpolyethylene ether) to artificially increase the permeability of the intestinal wall, as well as enzymatic inhibitors (eg, pancreatic trypsin inhibitors , diisopropylfluorophosphate (ORE) and triazolyl), to prevent enzymatic degradation. The basis of the active mixture for the solid dosage form for oral use can be obtained with at least one additive from the listed sucrose, lactose, cellulose, mannitol, trehalose, raffinose, maltitol, dextran, starches, agar, arginates, chitins, chitosans, pectins, gum tragacanth, gum arabic, gelatin, collagen, casein, albumin, synthetic or semi-synthetic polymer, and glyceride. These dosage forms may also contain other type(s) of additives, e.g., an inert diluting agent, a lubricant such as magnesium stearate, a paraben, a preservative such as sorbic acid, ascorbic acid, alpha-tocopherol, an antioxidant such as cysteine, disintegrant, binder, thickener, buffering agent, sweetening agent, flavoring agent, flavoring agent, etc.
Таблетки і пілюлі можуть також мати кишково-розчинне покриття. Рідкі препарати для орального застосування включають емульсію, сироп, еліксир, суспензію і розчин, придатні для медичного використовування. Ці препарати можуть містити інертні розбавлюючі агенти, що звичайно використовуються в даній галузі, напр., вода. Ліпосоми також зустрічаються як системи доставки ліків для інсуліну і гепарину (0.5.Раї.Мо.4,239,754)|. Також штучні полімерні мікросфери суміші використовувалися, для доставити фармпрепаратів амінокислот (протеіноїдів), (Ш. 5. Раї. Мо. 4,925,673)|. До того ж, носієві суміші, описані в (Ю. 5. Раї. Мо. 5,879,681 і Ш. 5. Раї. Мо. 5,5,871,753| які використовувалися, для доставки біологічно активних агентів, для внутрішнього прийому відомі в практиці. --------стали здесь-------Tablets and pills may also have an enteric coating. Liquid preparations for oral use include emulsion, syrup, elixir, suspension and solution suitable for medical use. These preparations may contain inert diluents commonly used in the art, e.g., water. Liposomes are also found as drug delivery systems for insulin and heparin (0.5.Rai.Mo.4,239,754)|. Artificial polymer microspheres of the mixture were also used to deliver pharmaceutical preparations of amino acids (proteinoids), (Sh. 5. Rai. Mo. 4,925,673)|. In addition, the carrier mixtures described in (Yu. 5. Rai. Mo. 5,879,681 and Sh. 5. Rai. Mo. 5,5,871,753| which were used for the delivery of biologically active agents for internal administration are known in practice. -- ------stopped here-------
Формулювання для слизової і застосуванняMucosal formulation and application
Для абсорбції через поверхні слизових оболонок, композиції і методи застосування як мінімум одного антитіла анти-ІЇ-12 включають емульсію, що включає велику кількість субмікронних часток, макромолекули адгезивні до слизової, біоактивні пептиди, і водну безперервну фазу, яка здійснює абсорбцію через поверхні слизових оболонок за допомогою досягнення мікроадгезії часток емульсії (0.5.Раї.Мо. 5,514,6701І.For absorption through mucosal surfaces, compositions and methods of application of at least one anti-II-12 antibody include an emulsion comprising a large number of submicron particles, macromolecules adhesive to the mucosa, bioactive peptides, and an aqueous continuous phase that performs absorption through mucosal surfaces by achieving microadhesion of emulsion particles (0.5.Rai.Mo. 5,514,6701I.
Слизисті оболонки, придатні для застосування емульсій даного винаходу, можуть включати рогівковий, конюктивний, буккальний, підязиковий, носовий, вагінальний, легеневий, шлунковий, кишковий, і ректальний маршрути застосування. Формулювання для вагінального або ректального застосування, наприклад суппозиторії, можуть містити, як ноповнювачі, наприклад, поліалкенгліколі, вазелін, масло какао, і подібні. Формулювання для інтраназального застосування можуть бути твердими і містити, як наповнювачі, наприклад, лактозу або можуть бути водними чи маслянистими розчинами носових крапель.Mucous membranes suitable for application of the emulsions of this invention may include corneal, conjunctival, buccal, sublingual, nasal, vaginal, pulmonary, gastric, intestinal, and rectal routes of administration. Formulations for vaginal or rectal use, such as suppositories, may contain excipients such as polyalkene glycols, petrolatum, cocoa butter, and the like. Formulations for intranasal use can be solid and contain, as fillers, for example, lactose, or can be aqueous or oily solutions of nasal drops.
Наповнювачі для буккального застосування включають цукри, стеарат кальцію, стеарат магнію, крохмаль прежелатинізований, і подібне (Ш.5.Раї.Мо. 5,849,6951І.Fillers for buccal use include sugars, calcium stearate, magnesium stearate, pregelatinized starch, and the like (Sh.5.Rai.Mo. 5,849,6951I.
Трансдермальні Формулювання і застосуванняTransdermal formulations and applications
Для трансдермального застосування, як мінімум одне анти-1ІІ-12антитіло, інкапсульоване в засоби доставки, як наприклад ліпосоми або полімерні наночастки, мікрочастки, макрокапсули або мікросфери (звичайно усі називаються мікрочастками, хоча іноді їх розрізняють), існує ряд відомих засобів доставки, включаючи синтетичні полімерні мікрочастки, зроблених, як наприклад з полігідрокси кислот, як наприклад полі молочна кислота, поліглікольна кислота і їх сополімери, поліортоестери, поліангідриди, і поліфосфазени, і природні полімери, як наприклад колаген, поліамінокислоти, альбумін і інші протеїни, альгінати та інші полісахариди, і їх комбінації (0.5.Раї.Мо. 5,814,599).For transdermal administration, at least one anti-1II-12 antibody encapsulated in delivery vehicles such as liposomes or polymeric nanoparticles, microparticles, macrocapsules, or microspheres (usually all called microparticles, although sometimes distinguished), there are a number of known delivery vehicles, including synthetic polymeric microparticles made, for example, from polyhydroxy acids, such as polylactic acid, polyglycolic acid and their copolymers, polyorthoesters, polyanhydrides, and polyphosphazenes, and natural polymers, such as collagen, polyamino acids, albumin and other proteins, alginates and other polysaccharides, and their combinations (0.5.Rai.Mo. 5,814,599).
Тривале застосування і формулюванняLong-term use and formulation
Іноді може бути бажаним, щоб доставляти суміші даного винаходу до суб'єкта на протязі тривалого часу, наприклад, на протязі від одного тижня до одного року від одніго застосування. Можуть використовуватися різні дозувальні форми повільного вивільнення, депо або імплант.Sometimes it may be desirable to deliver the compounds of this invention to the subject over a long period of time, for example, from one week to one year from a single application. Various dosage forms of slow release, depot or implant can be used.
Наприклад, форма дозування може містити фармацевтично прийнятну неотруйну сіль сполук, які мають низький ступінь розчинності в біологічних рідинах, наприклад (а) кислотна сіль з багатоосновною кислотою, такою як фосфорна кислота, сірчана кислота, лимонна кислота, тартарова кислота, дубильна кислота, кислота ратоїс, альгінінова кислота, кислота поліглютамінова, нафталенові моно- або дисульфонові кислоти, полігалактуронова кислота, і подібне; (Б) сіль з багатовалентним катіоном металу, як наприклад цинк, кальцій, вісмут, барій, магній, алюміній, мідь, кобальт, нікель, кадмій і подібні, або з органічним катіоном, утвореним від напр., М,М'-дибензил-етилендиаміну або етилендиаміну; або (с) комбінації (а) і (б) наприклад сіль танату цинку. Додатково, сполуки даного винаходу або, краще, відносно нерозчинна сіль, як наприклад тільки що описані, можуть бути сформульовані в гелі, наприклад, гель моностеарату алюмінію з, наприклад маслом сезаму, придатне для ін'єкцій. Особливо переважними солями, - є солі цинку, солі таннату цинку, солі ратоаїге, і подібні. Інший тип депонувального формулювання для повільного вивільнення для ін'єкцій могли б містити суміш або сіль, диспергована для інкапсуляції в повільно розкладаючийся, нетоксичний, неатнтигенний, полімер, як наприклад полімер полімолочної кислоти асід/полігліколевої кислоти наприклад як описано в (Ш.5.Раї.Мо.3,773,919|. Суміші або, краще, відносно нерозчинні солі, як наприклад описані вище можуть також бути сформульовані в силастикові пілюлі з холестерольною матрицею, зокрема для використання на тваринах. Додатково, формулювання повільного вивільнення, депо або імплантів, наприклад газові або рідинні ліпосоми, відомі в літературі (0. 5.For example, the dosage form may contain a pharmaceutically acceptable non-toxic salt of compounds that have a low degree of solubility in biological fluids, for example (a) an acid salt with a polybasic acid such as phosphoric acid, sulfuric acid, citric acid, tartaric acid, tannic acid, rathoic acid , alginic acid, polyglutamic acid, naphthalene mono- or disulfonic acids, polygalacturonic acid, and the like; (B) a salt with a multivalent metal cation, such as zinc, calcium, bismuth, barium, magnesium, aluminum, copper, cobalt, nickel, cadmium, and the like, or with an organic cation formed from, e.g., M,M'-dibenzyl- ethylenediamine or ethylenediamine; or (c) combinations of (a) and (b) such as zinc tannate salt. Additionally, the compounds of this invention or, preferably, a relatively insoluble salt, such as those just described, can be formulated in a gel, for example, an aluminum monostearate gel with, for example, sesame oil, suitable for injection. Particularly preferred salts are zinc salts, zinc tannate salts, ratoaige salts, and the like. Another type of slow-release depot formulation for injection could contain a mixture or salt dispersed for encapsulation in a slowly degradable, non-toxic, non-antigenic, polymer, such as a polylactic acid/polyglycolic acid polymer, for example as described in (Sh.5.Rai .Mo.3,773,919|. Mixtures or, preferably, relatively insoluble salts such as those described above may also be formulated into silastic pills with a cholesterol matrix, particularly for use in animals. Additionally, slow-release, depot or implant formulations, such as gas or liquid liposomes known in the literature (0. 5.
Раї. Мов. 5,770,222 апа "Зивіаіпей апа СопігоПей НеїІєазе ЮОгпид Оєїїмегу бузіетв", У. А. Вобіпзоп єд., Магсе!Paradise As. 5,770,222 apa "Zyviaipei apa SopigoPei NeiIease YuOgpid Oeiiimegu buzietv", U. A. Vobipzop ed., Magse!
Оеккегт, Іпс., М. У., 19781.Oekkegt, Ips., M.U., 19781.
Те саме, що приведено в описі винаходу, може бути так зрозуміло з наступних прикладів, котрі приводяться як ілюстрації і не, що маються на увазі як обмеження.The same as set forth in the description of the invention may be made clear from the following examples, which are given by way of illustration and are not intended to be limiting.
Втрачено при публікаціїLost in publication
Вектор рС4 використовується для експресії антитіла 1-12. Плазміда рс4 - це похідне плазміди рем2- апт (АТСС Ассезвзіоп Мо.37146). Плазміда містить ген миші ОНЕРК під контролем більш раннього промотора 5М40. Клітини яєчнику або інші китайського хом'яка, з недостатньою активністю дигідросульфолату, яка є трансфековані цими плазмідами, можуть бути вибрані, вирощуванням клітин на селективному середовищіVector pC4 is used for expression of antibodies 1-12. Plasmid rs4 is a derivative of plasmid rem2-apt (ATSS Aseszvsiop Mo.37146). The plasmid contains the mouse ONERK gene under the control of the earlier 5M40 promoter. Ovary or other Chinese hamster cells deficient in dihydrosulfolate activity that are transfected with these plasmids can be selected by growing the cells on a selective medium
Інапр., аїрпа тіпиз МЕМ, Гіте Тесппоіодіе5, сСайпегзригд, МОЇ доповнене з хемотерапевтичним агентом метатрексату. Ампліфікація генів ОНЕК в клітинах, стійких до метотрету (МТХ), добре описана |див., напр.,For example, airpa tipiz MEM, Gite Tesppoiodie5, cSypegzrigd, MOI supplemented with the chemotherapeutic agent methotrexate. Amplification of ONEK genes in cells resistant to methotret (MTX) is well described | see, e.g.
Р. МУ. АЇ,, еї а)., 9. Віої. Снет. 253: 1357-1370 (1978); 9. М. Натіїп апа С. Ма, Віоспет. єї Віорпув. Асіа 1097: 107-143 (1990); апа М. у. Раде апа М. А. будепнат, Віоїесппоіоду 9: 64-68 (1991)). Клітини, вирощені за збільшених концентрацій МТХ, розвивають резистентність до ліків, перевиробляючи цільовий фермент,R. MU. АЙ,, ей а)., 9. Vioi. Snet 253: 1357-1370 (1978); 9. M. Natiip apa S. Ma, Viospet. her Viorpuv. Asia 1097: 107-143 (1990); apa M. u. Rade apa M. A. budepnat, Vioyesppoiodo 9: 64-68 (1991)). Cells grown at increased concentrations of MTX develop drug resistance by overproducing the target enzyme,
ОСНЕРК, в результаті ампліфікації гена ОНЕК. Якщо другий ген зв'язаний з геном ОНЕК, то він звичайно коампліфікується і переекспресовується. Є відомим в практиці, що цей підхід може використовуватися, для одержання клітинних ліній, які несуть більш ніж 1, 000 копій ампліфікованого гену(ів). Згодом, коли метотрексат видалено, отримані клітинні лінії, які містять ампліфікований ген, з'єднаний з однією або більше хромосомою/(ми) клітини хазяїна.OSNERK, as a result of amplification of the ONEK gene. If the second gene is connected to the ONEK gene, it is usually coamplified and overexpressed. It is known in practice that this approach can be used to obtain cell lines that carry more than 1,000 copies of the amplified gene(s). Subsequently, when the methotrexate is removed, cell lines are obtained that contain the amplified gene linked to one or more chromosomes/(s) of the host cell.
Плазміда рес. експресії цільового гену містить сильний промотор довгого кінцевого повтору (ІТК) вірусу саркоми Роуса (Сшіеп, еї а!., МоїІес. СеїІ. ВіоІ.5: 438-447 (1985)| плюс фрагмент, ізольований з енхансера безпосереднього раннього гену цитомегаловірусу людини (СМУ) |Возпаїгї, еї а!., Сеї! 41: 521-530 (1985)|.Plasmid Res. expression of the target gene contains the strong promoter of the long terminal repeat (LTC) of the Rous sarcoma virus (Schiep, et al., MoiIes. SeiI. BioI. 5: 438-447 (1985) | plus a fragment isolated from the enhancer of the human cytomegalovirus immediate early gene ( SMU) |Vozpaigi, ei a!., Seii! 41: 521-530 (1985)|.
Пізніше розташованим за промотором є Ватні, Хваї, і Азр718 сайти рестрикції літичними ферментами, які дозволяють інтеграцію генів. Після клону вальних сайтів плазміда містить З інтрон та сайт поліаденілування щурячого препроінсулінового гену. Також можуть бути використані інші високоефективні промотори для експресії, наприклад, промотор б-актину людини, ранній чи пізній промотори 5М40 чи довгий термінальний повтор з іншого ретровірусу, наприклад, ВІЛ та НТІМІ, Сіопіесп5 Теї-ОйЙ та Тег-Оп системи генної експресії та подібні системи можуть бути використані для експресії регульованого типу 1-12 в клітинах ссавців М. Сбоззеп, апа Н. Вшага, Ргос. Май. Асай. зЗсі. ОБА 89: 5547-5551 (1992))Ї. Для поліаденілування ткМА також можуть застосовуватися інші сигнали, наприклад, з гормону росту людини чи тобі нового гену. Стабільні клітинні лінії, які несуть цільовий ген інтегрований в хромосому також можуть бути виділені сотрансфекцією селектовним маркером таким як орі, 5418 чи гігроміцин. Використання більше ніж одного маркера на початку, наприклад, 5418 із метотрексатом дає значні переваги.Laterally located downstream of the promoter are Watni, Hwai, and Azr718 restriction sites by lytic enzymes that allow gene integration. After cloning of the main sites, the plasmid contains the C intron and the polyadenylation site of the rat preproinsulin gene. Other highly efficient promoters for expression may also be used, such as the human β-actin promoter, early or late 5M40 promoters, or the long terminal repeat from another retrovirus, such as HIV and NTIMI, Siopiesp5 Tei-OyY and Tag-Op gene expression systems and the like systems can be used for expression of regulated type 1-12 in mammalian cells M. Sbozzep, apa N. Vshaga, Rgos. May Asai. zZsi OBA 89: 5547-5551 (1992)). Other signals can also be used for tkMA polyadenylation, for example, from human growth hormone or a novel gene. Stable cell lines that carry the target gene integrated into the chromosome can also be selected by cotransfection with a selectable marker such as ori, 5418 or hygromycin. The use of more than one marker early on, such as 5418 with methotrexate, offers significant advantages.
Плазміда рС4 розщеплюється ферментами рестрикції і потім дефосфорилюється за допомогою телячої кишкової фосфатази, загально відомим методом. Потім вектор виділяється з 195 агарозного гелю.Plasmid pC4 is cleaved by restriction enzymes and then dephosphorylated using calf intestinal phosphatase, a commonly known method. The vector is then separated from the 195 agarose gel.
Використовується послідовність ОМА, що кодує повне антитіло 1-12, наприклад, ЗЕО ІЮ МОБ: ІМ5ЕКТThe OMA sequence encoding the complete antibody 1-12 is used, for example, ZEO IU MOB: IM5EKT
МАВ АА 5ЕО ІО 1, та ІМ5ЕКТ МАВ АА 5ЕО ІО МО2, відповідно до варіабельний регіонів НС та І С антитілаMAV AA 5EO IO 1, and IM5ECT MAV AA 5EO IO MO2, according to the variable regions of NS and I C antibodies
І/-12 даного винаходу, відповідними відомими методами. Віділення нуклеїнової кислоти, що кодує придатний константний регіон людини (напр., регіони НС та ІС) також використовуються для цього конструкту Інапр., як у векторі р 1351: ІМБЕНТ АТСС АССЕББІОМ МОМВЕА АМО АООІТІОМАГ НСЛ С плазмід).I/-12 of this invention, by appropriate known methods. Nucleic acid isolations encoding a suitable human constant region (eg, NS and IS regions) are also used for this construct (eg, as in vector p 1351: IMBENT ATSS ASSEBBIOM MOMVEA AMO AOOITIOMAG NSL C plasmid).
Виділені ОМА, що кодують варіабельні та константні регіони, та дефосфорильований вектор потім лігуються Т4 ОМА лігазою. Клітини Е. соїї НВ 101 чи ХІ-1 Віе потім трансформують та ідентифікують бактерії, котрі містять фрагмент, вставлений в плазміну рС4 за допомогою, наприклад, аналізу рестрикцій ними ферментами.The isolated OMAs encoding the variable and constant regions and the dephosphorylated vector are then ligated with T4 OMA ligase. Cells of E. soya HB 101 or XI-1 Vie are then transformed and identify bacteria that contain a fragment inserted into plasmin pC4 using, for example, restriction enzyme analysis.
Для трансфекції використовуються яєчникові клітини китайського хомяка (СНО), позбавлені активного гену ОНЕК. 594 плазміни експресії рС4 котрансфекуються з 0,59 плазміди реМ2пео, за допомогою ліпофесцину. Плазміда реМ2пео містить домінантний селектабельний маркер, ген пео з Тп5 кодує фермент, який призводить до резистентності до групи антибіотиків включаючи 0418. Після 2 днів, клітини трипсинізують й висівають на платівки клонування гібридом (сгеїпег, бегптапу) в альфа мінус МЕМ із доданням 10, 25, чи 5бпд/ті метотрексату з Ттд/ті 5418. після приблизно 10-14 днів поодинокі клони трипсинізують й висівають в б-лункові чашки Петрі чи 10ті! колби з використанням різних концентрацій метотрексату 50пМ, 100пМ, 200пМ, 400пМ, 800пМ). Клони, що росли з найвищими концентраціями метотрексату потім було перенесено в нові б-лункові чашки з ще більшим вмістом метотрексату (1тМ, 2тМ, 5тМ, 10тМ, 20тМ). Така ж процедура повторялася, поки не були одержані клони котрі росли при концентрації 100-200тМ. Експресія бажаного генного продукту вивчалася, наприклад, за допомогою 505-For transfection, Chinese hamster ovary cells (CHO), devoid of the active ONEK gene, are used. 594 pC4 expression plasmins are cotransfected with 0.59 reM2peo plasmids using lipofescin. Plasmid reM2peo contains a dominant selectable marker, the peo gene from Tp5 encodes an enzyme that leads to resistance to a group of antibiotics including 0418. After 2 days, cells are trypsinized and plated on hybridoma cloning plates (sgeipeg, begptapa) in alpha minus MEM with the addition of 10, 25 , or 5bpd/ti of methotrexate with Ttd/ti 5418. after about 10-14 days, individual clones are trypsinized and sown in b-well Petri dishes or 10ti! flasks using different concentrations of methotrexate 50 pM, 100 pM, 200 pM, 400 pM, 800 pM). Clones growing with the highest methotrexate concentrations were then transferred to new b-well plates with even higher methotrexate contents (1tM, 2tM, 5tM, 10tM, 20tM). The same procedure was repeated until clones were obtained that grew at a concentration of 100-200 tM. The expression of the desired gene product was studied, for example, using 505-
РАСЕ та Ууевіет Бріої за допомогою реверсивно фазного НРІ С-аналізу.RACE and Uueviet Brioi using reverse-phase NRI C-analysis.
Приклад 2: Одержання,за допомогою трансгенних мишей, високоафінних моноклональних антитіл (дО людини, що реагують з І-12 людиниExample 2: Obtaining, with the help of transgenic mice, high-affinity monoclonal antibodies (human dO reacting with human I-12
Стисле викладенняA concise statement
Для одержання високоафінних, повністю людських, моноклональних антитіл, котрі можуть бути терапевтично застосовані для інгібування дії І/-12 для лікування одного чи більше захворювань опосередкованих 1І--12, було використано трансгенних мишей, котрі мали гени легкого та важкого ланцюгів імуноглобуліну людини. Гібридні миші (СВА/) х С57/8ВІ6/У) Е, які мали трансгени варіабельного та константного регіонів важкого та легкого ланцюгів людини, були імунізовані рекомбінантним 1-12 людиниTo obtain high-affinity, fully human, monoclonal antibodies that can be used therapeutically to inhibit the action of I/-12 for the treatment of one or more diseases mediated by I--12, transgenic mice were used that had genes for light and heavy chains of human immunoglobulin. Hybrid mice (SBA/) x C57/8VI6/U) E, which had transgenes of the variable and constant regions of human heavy and light chains, were immunized with recombinant human 1-12
ІТаупог еї аї., Іпі). Іттипо)ї. 6: 579-591 (1993); І опрего, еї а!., Майшге 368: 856-859 (1994); Мейибрегоетг, М., МайтеITaupog ei ai., Ipi). Ittypo)y. 6: 579-591 (1993); And oprego, ei a!., Maishge 368: 856-859 (1994); Meiybregoetg, M., Mayte
Віоїтесн. 14: 826 (1996); Різпмд, еї аі!., Маштге Віосесппоїоду 14: 845-851 (1996)). Декілька злиттів дали одне чи більше панелей повністю людських ІЇ/-12 реактивних моноклональних антитіл дО. Повністю людські анти-І-12 антитіла буде описано далі. Усі вони є дО. Було визначено, що такі антитіла мають константу афінності десь між 1х109 та 9х1012, неочікувано високі афінності цих повністю людських моноклональних антитіл робить їх придатними кандидатами для терапевтичних застосувань в захворюваннях, патологіях чи розладах пов'язаних з 1-12.Vioitesn. 14: 826 (1996); Rizpmd, ei ai!., Journal of Biochemistry 14: 845-851 (1996)). Several fusions yielded one or more panels of fully human II/-12 reactive dO monoclonal antibodies. Fully human anti-I-12 antibodies will be described below. All of them are dO. Such antibodies have been determined to have an affinity constant somewhere between 1x109 and 9x1012, the unexpectedly high affinities of these fully human monoclonal antibodies making them suitable candidates for therapeutic applications in diseases, pathologies or disorders related to 1-12.
СкороченняAbbreviation
ВЗА - бичачий сироваточний альбумінVZA - bovine serum albumin
СО2 - диоксид вуглецюСО2 - carbon dioxide
ОМ5О - диметисульфоксидOM5O - dimethylsulfoxide
ЕІА - ферментативний імуноаналізEIA - enzyme immunoassay
ЕВ5 - ембріональний бичача сироваткаEB5 - embryonic bovine serum
Нг02-пероксид воднюHg02-hydrogen peroxide
НРР - пероксидаза хрінуNRR - horseradish peroxidase
ІО - інтрадермальнийIO - intradermal
Ід - імуноглобулінId - immunoglobulin
І/-12 - інтерлейкин-12I/-12 - interleukin-12
ІР - внутрішньоочеревиннийIR - intraperitoneal
ІМ - внутрішньовеннийIM - intravenous
Маб - моноклональні антитілаMab - monoclonal antibodies
ОО - оптична щільністьOO - optical density
ОРО-о - фенілендиамін дихлоридOPO-o - phenylenediamine dichloride
РЕ - поліетиленглікольPE - polyethylene glycol
РБЗА - пеніцилін, стрептоміцин, амфотеріцинRBZA - penicillin, streptomycin, amphotericin
ВТ - кімнатна температура 5О - підшкірний м/м - об'єм на об'єм м/м - вага на об'ємVT - room temperature 5O - subcutaneous m/m - volume per volume m/m - weight per volume
Матеріали та методиMaterials and methods
ТвариниAnimals
Добре відомими з літератури є трансгенні миші, здатні експресувати антитіла людини, котрі експресують імуноглобуліни людини, але не мишачий ІдМ чи Ід, вони також є комерційно доступними Інапр., від сепРПагт Іпіегпайіопаї, Зап дуозе, СА; Ардепіх, Егеетопі, СА, та інших). Наприклад, такі трансгенні миші мають послідовність трансгенів людини, котрі було піддано М(0)У введенню, перемикача класу важкого ланцюга, та соматичним мутаціям для одержання переліку імуноглобулінів з людською послідовністюWell known from the literature are transgenic mice capable of expressing human antibodies that express human immunoglobulins, but not murine IdM or Id, they are also commercially available In eg., from sepRPagt Ipiegpaiiopai, Zap duose, CA; Ardepikh, Egeetopi, SA, and others). For example, such transgenic mice have a human transgene sequence that has been subjected to M(0)U insertion, a heavy chain class switch, and somatic mutations to produce a list of immunoglobulins with human sequence
ІГопбего, еї аї., Майте 368: 856-859 (1994)). Трансген легкого ланцюга може бути отриманий, наприклад, частково з клону штучної хромосоми дріжджів, котрий включає приблизно половину регіону М геметних ліній людини. Додатково, трансген важкого ланцюга може кодувати як й так і | (Різпм/йа, еї аї., МаїшгеIHopbego, ei ai., Mayte 368: 856-859 (1994)). A light chain transgene can be obtained, for example, in part from a clone of an artificial yeast chromosome, which includes approximately half of the M region of human gamete lines. Additionally, a heavy chain transgene can encode both and and | (Rizpm/ya, ei ai., Maishge
Віоїесппоіюду 14: 845-851 (1996)| та/"або З константні регіони людини. Миші отримані з відповідних генотипових ліній можуть бути використані в імунізаційних процесах та процесах злиття для одержання моноклональних антитіл людини до 1-12.Biosciences 14: 845-851 (1996). and/or human C constant regions. Mice derived from the appropriate genotypic lines can be used in immunization and fusion processes to produce human monoclonal antibodies to 1-12.
ІмунізаціяImmunization
Один чи більше імунізаційних регламентів можуть бути використані для одержання гібридом анти-1І/-12 людини, перші декілька злиттів можуть бути виконані після наступного зразкового протоколу імунізації, але можуть також бути використані й інші відомі подібні протоколи. Декілька 14-20-и тижневих самок та/або хірургічно кастрованих трансгенних самців мишей імунізовано ІР та/або ІО з 1-1000н9 рекомбінантних 1-12 людини емульсованих з рівним об'ємом ТІТЕЕМАХ чи повного адюванту Фройнда з остаточним об'ємом 100-400 (напр., 200). Кожна миша може також необов'язково отримати 1-10ц9 в 100щі фізіологічного розчину на кожний з двох 50 сайтів. Миші потім можуть бути імунізовані на 1-7, 5-12, 10-18, 17-25 та/або 21- 34 день після ІР (1-400д9) та 5О (1-400ддхг2) емульгованими 1-12 з рівним об'ємом ТІТЕКМАХ чи неповним адювантом Фройнда. У мишей може бути взята кров на 17-25 та 25-40 дні після ретро-орбітальної пунктири без антикоагулянта. Потім кров може бути залишена для зсідання при КТ на одну годину, а сироватка зібрана й титрована 1-12 ЕІА пробою відповідно до відомих методів. Злиття виконуються коли повторювані ін'єкції не призводять до підвишення титру. В цей час, можуть бути передані в фінальну ІМ посилену ін'єкцію 1-400рн49 11-12 розсинених в Тобі фізиологічного розчину.One or more immunization regimens can be used to produce a human anti-1I/-12 hybridoma, the first few fusions can be performed after the following exemplary immunization protocol, but other known similar protocols can also be used. Several 14-20-week-old female and/or surgically castrated transgenic male mice were immunized with IR and/or IO of 1-1000n9 recombinant human 1-12 emulsified with an equal volume of TITEEMAH or complete Freund's adjuvant with a final volume of 100-400 (e.g., 200). Each mouse may also optionally receive 1-10c9 in 100% saline at each of the two 50 sites. Mice can then be immunized 1-7, 5-12, 10-18, 17-25 and/or 21-34 days after IR (1-400d9) and 5O (1-400ddhg2) emulsified 1-12 with equal vol. by TITEKMACH or Freund's incomplete adjuvant. Mice can be bled on days 17-25 and 25-40 after retro-orbital puncture without anticoagulant. The blood can then be allowed to settle under CT for one hour, and the serum collected and titrated with 1-12 EIA sample according to known methods. Fusions are performed when repeated injections do not lead to an increase in the titer. At this time, an enhanced injection of 1-400 rn49 11-12 of the physiological solution dissolved in you can be transferred to the final MI.
Трьома днями пізніше, миші можуть бути евтаназовані шийною дислокацією та асепрично видалено селезінку та поміщено в 10ті холодного фосфатного буферного розчину (РВ5), котрий містив 100Ш/ті. пеніциліну, 100дд/ті. стрептоміцину, та 0.25нд4/ті. амфотеріцину В (РБЗА). Клітини селезінки збиралися стерильною перфузією селезінки РБА-РВ5. Клітини відмивалися одноразово в холодному РБА-РВБ5, підраховувалися ексклюзією з використанням барвнику Трипану синього та ресуспендувалися в середовищіThree days later, the mice can be euthanized by cervical dislocation and the spleen is aseptically removed and placed in 10 µl of cold phosphate buffer solution (PB5) containing 100 µl/µl. penicillin, 100dd/ti. streptomycin, and 0.25nd4/ti. amphotericin B (RBZA). Spleen cells were harvested by sterile perfusion of the spleen with RBA-RV5. Cells were washed once in cold RBA-RVB5, counted by exclusion using Trypan blue dye, and resuspended in medium
ЕРМІ 1640, яке містило 25тМ Нерез.ERMI 1640, which contained 25 tons of stainless steel.
Злиття клітинFusion of cells
Злиття проводилося при відношенні від 1:11 до 1:10 клітин мишачої мієломи до життєздатних клітин селезінки, відповідно до відомих методів, тобто методів відомих з літератури. Як не обмежуючий приклад, клітини селезінки та клітини мієломи можуть бути пелетовані разом. Пелети потім можуть бути повільно ресуспендовані, за 30 секунд, в тт. 5095 (м/у) розчину РЕС/РВЗ (молекулярна маса РЕС 1.450, 5ідта) аї 37"С. Злиття потім може бути зупинено повільним додаванням 10.5тп!. середовища КЕРМІ 1640, яке містить 25М Нерез (37"С) на протязі 1 хвилини. Злиті клітини центрифугуються на протязі 5 хвилин при 500- 1500об/хв. клітини потім ресуспендуються в середовищі НАТ (ЕРМІ 1640, яке містить 25тМ Неревз, 1095 сироватки Ембріонального Клону І (Нусіопе), 1тМ пирувату натрію, 4тМ І--глютаміну, 1Одд/ті. гентаміцину, 2.590 культуральної добавки Огідеп (Різпег), 1095 653-стандартизованого ЕРМІ 1640/середовища Нерев,Fusion was performed at a ratio of 1:11 to 1:10 mouse myeloma cells to viable spleen cells, according to known methods, that is, methods known from the literature. As a non-limiting example, spleen cells and myeloma cells can be pelleted together. The pellets can then be slowly resuspended, in 30 seconds, in tt. 5095 (m/u) of RES/RVZ solution (molecular weight RES 1.450, 5idta) and 37"C. The fusion can then be stopped by slowly adding 10.5 tp!. medium KERMI 1640 containing 25M Nerez (37"C) over 1 minutes The merged cells are centrifuged for 5 minutes at 500-1500 rpm. the cells are then resuspended in NAT medium (ERMI 1640, which contains 25 tM Nerevz, 1095 serum of Embryonic Clone I (Nusiope), 1 tM sodium pyruvate, 4 tM I--glutamine, 1Ud/ti. gentamicin, 2.590 culture supplement Ogidep (Rizpeg), 1095 653 -standardized ERMI 1640/Nerev environment,
БОМ 2-меркаптоетанолу, 100фМ гіпоксантину, 0.4дМ аміноптерину, та 16дМ тимідину) та потім поміщені в г00ш лмеї!! в п'ятнадцяти 96-луночних платівках з плоским дном для тканинної культури. Платівки потім поміщали у зволожений інкубатор при 37"С з 595 СО» та 9595 повітря на 7-10 днів.BOM of 2-mercaptoethanol, 100µM hypoxanthine, 0.4dM aminopterin, and 16dM thymidine) and then placed in g00sh lmei!! in fifteen 96-well flat-bottom tissue culture plates. The plates were then placed in a humidified incubator at 37"C with 595 CO" and 9595 air for 7-10 days.
Визначення до Анти-1ІІ-12антитіл людини в сироватці мишіDetermination of anti-1II-12 human antibodies in mouse serum
Для скринінгу мишиних сироваток на Ідо антитіла специфічні до І--12 людини може бути використано твердофазну ЕІА"5. Коротко, платівки можуть бути вкриті ІЇ/-12 в кількості 2нд/ті. в РВ5 на ніч. Після відмивання в 0,15М сольовому розчині, котрий містить 0.02905 (м//) Твин 20, лунки можуть бути блоковані 1905 (м/у) ВБА в РВ5. 200щші/лунку на 1 годину при КТ. Платівки можуть використовуватися негайно чи заморожені при -207"С для подальшого використання. Розведена мишина сироватка інкубується на вкритихFor the screening of mouse sera for Ido antibodies specific to human I--12, a solid-phase EIA"5 can be used. Briefly, the plates can be coated with II/-12 in the amount of 2nd/ti. in RV5 overnight. After washing in 0.15M saline solution containing 0.02905 (m//) Tween 20, wells may be blocked with 1905 (m/u) VBA in РВ5. 200 µl/well for 1 hour at CT. Plates may be used immediately or frozen at -207"C for later use . Diluted mouse serum is incubated on coverslips
І/-12 платівках з 50 /лунку при КТ на протязі одного часу. Платівки відмиваються й тестуються 50ді /лункуI/-12 discs with 50 /well at CT during one time. Plates are washed and tested 50di/well
НАР -міченими козячими дос до людини, Ес специфічно розведених 1:30,000 в 1906 ВБА-РВ5 на протязі 1 години при КТ. Платівки знову можуть бути промиті та додаванням 100ці/лунку розчином цитрат- фосфатним субстрату (0.1М лимонної кислоти та 0.2М фосфату натрію, 0.019565 Нг2О» апа 1тад/т/. ОРО) на протязі 15 хвилин при КТ. Потім додається стоп-розчин (4Н сірчана кислота) в кількості 25йі /лунку та вимірюється 005 при 490пт на автоматизованому пластинчастому спектрофотометрі.NAR-labeled goat dos to humans, Es specifically diluted 1:30,000 in 1906 VBA-RV5 for 1 hour at CT. Plates can be washed again by adding 100 cells/well of citrate-phosphate substrate solution (0.1 M citric acid and 0.2 M sodium phosphate, 0.019565 Ng2O» apa 1 tad/t/. ORO) for 15 minutes at CT. Then a stop solution (4N sulfuric acid) is added in the amount of 25 µl/well and 005 is measured at 490pt on an automated plate spectrophotometer.
Визначення повністю людських імуноглобулінів в гібридом них супернатантахDetermination of fully human immunoglobulins in their hybridoma supernatants
Декретування ріст-позитивними гібрид омами повністю людських імуноглобулінів може бути визначено придатним ЕІА. Коротко, 96-лункові платівки з виступами (МУ, 610744) можуть бути вкриті 1Орна/ті. козячими до Ес до людини в буфері карбонату натрію на ніч при 4"С. Платівки відмивають та блокують 195The determination of growth-positive hybrids of fully human immunoglobulins can be determined by suitable EIA. Briefly, 96-well plates with protrusions (MU, 610744) can be covered with 1 Orna/ti. goat to Es to human in sodium carbonate buffer overnight at 4"C. Plates are washed and blocked 195
ВЗА-РВ5 на протязі 1 години при 37"С й можуть використовуватися негайно чи заморожуватися при -20"С.VZA-RV5 for 1 hour at 37"C and can be used immediately or frozen at -20"C.
Нерозведені супернатанти гібридоми інкубуються в платівках на протязі однієї години при 37"С. Платівки відмивали та тестували НЕР-міченими козячими дос каппа до людини розведеними 1:10,000 в 1956 ВБА-РВ5 на протязі однієї години при 37"С. Платівки потім інкубували як описано вище.Undiluted hybridoma supernatants are incubated in plates for one hour at 37°C. Plates are washed and tested with HER-labeled goat dos kappa to human diluted 1:10,000 in 1956 VBA-RV5 for one hour at 37°C. The plates were then incubated as described above.
Визначення реактивності повністю людських Анти-1Ї -12Determination of the reactivity of fully human Anti-1Y -12
Гібридоми, такі як вище описано, можуть бути одночасно опротестовані на реактивність до 1-12 з використанням КІА чи іншого тесту. Наприклад, супернатанти інкубуються козячими ДС Ес до людини платівках, як зазначено вище, відмито і потім випробувано радіоміченим 1-12 з відпорною кількістю на лунку на протязі однієї години при КТ. Лунки промивали двічі РВ5 та зв'язаний радіомічений 1-12 підраховевався відповідним лічильником.Hybridomas such as those described above may be simultaneously tested for reactivity to 1-12 using a KIA or other test. For example, supernatants are incubated with goat DCs to human plates as indicated above, washed and then tested with radiolabeled 1-12 with a countermeasure per well for one hour at CT. The wells were washed twice with RV5 and the bound radiolabeled 1-12 was counted with an appropriate counter.
Гібридоми, що секретували анти-ІЇ-12 Іде! людини можуть бути розвинені в клітинній культурі та послідовно субклоновані в лімітуючому розведенні. Одержані клон альні популяції можуть бути розширені та кріоконсеквовані в заморожуючому середовищі (9595 ЕВ5, 5956 ОМ5О) й збережені в рідкому азоті.Hybridomas that secreted anti-II-12 Go! human can be developed in cell culture and serially subcloned in limiting dilution. The resulting clonal populations can be expanded and cryopreserved in a freezing environment (9595 ЕВ5, 5956 ОМ5О) and preserved in liquid nitrogen.
ІзотипуванняIsotyping
Визначення ізотипу антитіл може бути проведено з використанням ЕЇА у спосіб подібний до того, який було застосовано для скринування імунних сироваток мишей на специфічні тітри. І--12 може бути нанесений на 96-лункові платівки, як описано вище, та очищені антитіла 2дд/ті. можуть бути інкубовані на платівках на протязі однієї години при КТ. Платівки відмиваються та тестуються козячими до до людини чиAntibody isotype determination can be performed using EIA in a manner similar to that used to screen mouse immune sera for specific titers. I--12 can be applied to 96-well plates as described above and purified antibodies 2dd/ti. can be incubated on plates for one hour under CT. Plates are washed and tested by goats and humans
НЕР міченими козячими ІдОЗ до людини розведеними 1:4000 в 195 ВБА-РВ5З на протязі однієї години приHER with labeled goat IdOZ to humans diluted 1:4000 in 195 VBA-RV5Z for one hour at
ЕТ. Платівку знову відмивають й інкубують з субстратним розчином як показано вище.ET. The plate is washed again and incubated with the substrate solution as shown above.
Кінетика зв'язування антитіл людини до 1-12 людини з 1-12 людиниBinding kinetics of human antibodies to 1-12 human from 1-12 human
Характеристики зв'язування антитіл можуть бути прийнятно оцінено за допомогою, наприклад, 1-12 захвату ЕЇА та ВіАсоге їесппоІоду. Ступінчасті концентрації очищених антитіл до 1-12 людини можуть бути протестестовані на зв'язування на платівках ЕЇІА, вкритих 2рдад/ті. антитіл І-12 за методом, описаним вище.Antibody binding characteristics can be reasonably assessed using, for example, 1-12 capture of EIA and ViAsog esppoIod. Gradual concentrations of purified antibodies up to 1-12 people can be tested for binding on EIIA plates coated with 2rdad/ti. antibodies I-12 according to the method described above.
Оптичтична щільність може бути представлена як напівлогарифмічний графік, який відображає відносну ефективність зв'язування.Optical density can be represented as a semi-logarithmic plot that reflects the relative efficiency of binding.
Може бути отримана кількісна константа зв'язування, наприклад, як показано далі, чи будь-яким іншим придітним методом. Чіп ВідАсоге СМ-5 (карбоксиметил) поміщують в ВіАсоге 2000. Буфер НВ5 (0.01МA quantitative binding constant can be obtained, for example, as shown below, or by any other suitable method. The ViAsoge CM-5 (carboxymethyl) chip is placed in ViAsoge 2000. HB5 buffer (0.01M
НЕРЕЗ, 0.15М Масі, ЗтМ ЕОТА, 0.005965 м/м Р2О сурфактант, рН 7.4) пропускається через потік клітин чіпу із швидкістю бні/хв до досягнення вихідного рівня. Розчин (10041) 5тд ЕС (М-етил-М'-(З-диметил- амінопропіл)-карбодиїмід гідрохлорид) в 200ціЇ води додається до 100! розчину 2.3т9 ої МН (М- гідроксисукцинимід) в 200йіЇ води. Сорок (40) ші! одержаного розчину ін'єктується на чіп. Шість ші розчинуNEREZ, 0.15 M Mass, ZtM EOTA, 0.005965 m/m P2O surfactant, pH 7.4) is passed through the flow of chip cells at a rate of bni/min until the initial level is reached. A solution (10041) of 5td ES (M-ethyl-M'-(3-dimethyl-aminopropyl)-carbodiimide hydrochloride) in 200 ml of water is added to 100! of a solution of 2.3 ml of MH (M-hydroxysuccinimide) in 200 ml of water. Forty (40) shi! of the obtained solution is injected onto the chip. Sixth solution
І--12 людини (15дд/ті. в 10тМ ацетату натрію, рН 4.8) ін'єктується на чіп, що призводить до збільшення са. 500 КО. Буфер замінюють на ТВ5/Са/Ма/В5А проточний буфер (20тМ Трис, 0.15М хлориду натрію, 27М хлориду кальцію, 27 М ацетату магнію, 0.595 Тгтйоп Х-100, 25на/т!. ВЗА, рН 7.4) та протікає через чіп на протязі ночі для його зрівноваження та гідролізу або блокування будь-яких непрореагованих естерів сукциніміду.I--12 of a person (15dd/ti. in 10tM sodium acetate, pH 4.8) is injected on the chip, which leads to an increase in sa. 500 KO. The buffer is replaced with TV5/Ca/Ma/B5A flow buffer (20tM Tris, 0.15M sodium chloride, 27M calcium chloride, 27M magnesium acetate, 0.595 Tgtyop X-100, 25na/t!. VZA, pH 7.4) and flows through the chip overnight to equilibrate it and hydrolyze or block any unreacted succinimide esters.
Антитіла розводять в проточному буфері при 33.33, 16.67, 8.33 та 4.17пМ. Швидкість потоку доводиться до ЗОді/хв., а температура приладу до 25"С. Дві проточні комірки використовуються для кінетичних досліджень, на одній з яких були імобілізовані І/-12 (зразок), а друга була чистою. На 12041 кожної концентрації антитіло інєктувалося при потоці клітин ЗО /хв. (асоційовна фаза), що виконувалося при безперервному потоці буферу Зб0Осек (дисоційовна фаза). Поверхню чіпу регенерували (дисоційований комплекс Інтерлейкін-12/антитіло) двома послідовними нанесеннями Збді 2М тіоціанату гуанідіну.Antibodies are diluted in flow buffer at 33.33, 16.67, 8.33 and 4.17 pM. The flow rate is adjusted to ZOdi/min, and the temperature of the device to 25"С. Two flow cells are used for kinetic studies, one of which was immobilized I/-12 (sample), and the other was pure. At 12041 of each concentration, the antibody was injected with a cell flow of 30/min (association phase), which was performed with a continuous flow of Zb0Osec buffer (dissociation phase).The surface of the chip was regenerated (dissociated Interleukin-12/antibody complex) by two consecutive applications of Zbdi 2M guanidine thiocyanate.
Аналіз даних проводили з використанням оцінювання ВІА 3.0 або СІ АМР 2.0, як відомо з рівня техніки.Data analysis was performed using VIA 3.0 or SI AMP 2.0 evaluation, as known in the art.
Для кожних концентрацій антитіла чисті сенсограми віднімалися від сенсограм зразків. Глобальні вирівнювання виконувалися як для дисоціацій (Ка зес"), так і для асоціацій (Ка то!" вес") та була визначена константа дисоціації (Ко, тої) (Ка/ка). Де афінність антитіл була високою настільки, що КО захоплених антитіл були »100, проводилися додаткові розбавлення антитіл.For each antibody concentration, pure sensograms were subtracted from sample sensograms. Global alignments were performed for both dissociations (Ka zes") and associations (Ka to!" ves") and the dissociation constant (Ko, toi) (Ka/ka) was determined. Where the affinity of the antibodies was so high that the captured KO of antibodies were »100, additional dilutions of antibodies were carried out.
Результати та обговоренняResults and discussion
Вироблення 1-12 моноклональних антитіл людиниProduction of 1-12 human monoclonal antibodies
Було виконано декілька злиттів і кожне злиття висівалося в 15 платівок (1440лунок/злиття), що дало декілька дюжин антитіл до 1-12 людини. З них було виявлено деякі, що мали ланцюги Ід людини та миші.Several fusions were performed and each fusion was seeded in 15 plates (1440 wells/fusion), yielding several dozen antibodies to 1-12 individuals. Of these, some were found to have human and mouse Id chains.
Всі інші гібридомні секрети анти-1І--12 антитіл містили лише важкі та легкі ланцюги людини. Усі гібридоми людини мали бути Ід.All other hybridoma secretions of anti-1I--12 antibodies contained only human heavy and light chains. All human hybridomas were supposed to be Id.
Кінетика зв'язування антитіл проти 1-12 людиниBinding kinetics of antibodies against 1-12 people
Аналіз ЕГІЗБА підтвердив, що очищені антитіла більшості з цих гібридом зв'язують І/-12 у спосіб, залежний від концентрації. Фігури 1-2 демонструють результати відносної ефективності зв'язування цих антитіл. В цьому випадку, вимірювалася авидність антитіл до їх спорідненого антигену (епітопу). Має бути відзначено, що зв'язування 1//-12 безпосередньо з платівками ЕІА може бути спричинено денатурацією протеїну, і такі афінності зв'язування не можуть бути відображенням зв'язування не денатурованого протеїну. 1595 зв'язування було відмічено в ряді концентрацій.Analysis of EHIZBA confirmed that the purified antibodies of the majority of these hybrids bind I/-12 in a concentration-dependent manner. Figures 1-2 demonstrate the results of the relative binding efficiency of these antibodies. In this case, the avidity of antibodies to their related antigen (epitope) was measured. It should be noted that binding of 1//-12 directly to EIA plates may be caused by denaturation of the protein, and such binding affinities may not reflect binding of non-denatured protein. 1595 binding was observed in a range of concentrations.
Чисельна константа зв'язування антитіл людини одержувалася за допомогою тесту ВіАсоге та показала, що деякі моноклональні антитіла людини мали дуже високу афінністю зі значенням Ко в межах від 1х10 до 7х10-12,The numerical binding constant of the human antibodies was obtained using the ViAsoge assay and showed that some human monoclonal antibodies had very high affinity with K values ranging from 1x10 to 7x10-12,
ЗаключанняConclusion
Деякі злиття виконуванися з використанням клітин селезінки з гібридних мишей, які були імунізовані ІІ. - 12 людини, котрі мали трансгени варіабельного та константного регіонів антитіл. Було одержано набір моноклональних антитіл реактивного (ДО до повністю людських 1-12 антитіл з ізотипу (91. Далі буде описано повністю людські анти-1ІЇ-12 антитіла людини. Деякі з одержаних антитіл мали константи афінності від 1х109 апа 9х1012, Неочікувано високі афінності цих повністю людських моноклональних антитіл роблять їх придатними для терапевтичного застосування при захворюваннях, патологіях чи подібних станах, пов'язаних з 1І--12.Some fusions were performed using spleen cells from hybrid mice that had been immunized with II. - 12 people who had transgenes of variable and constant regions of antibodies. A set of monoclonal antibodies reactive (TO) to fully human 1-12 antibodies of the isotype (91. Fully human anti-1II-12 human antibodies will be described below. Some of the obtained antibodies had affinity constants from 1x109 apa to 9x1012. Unexpectedly high affinities of these completely of human monoclonal antibodies make them suitable for therapeutic use in diseases, pathologies or similar conditions associated with 1I--12.
Приклад 3: С340 нейтралізує моноклональні антитіла людиниExample 3: C340 neutralizes human monoclonal antibodies
Було показано, що біологічна активність 1-12 може бути нейтралізована на різних тестах, пов'язаних з активністю 1-12. Оскільки І--12 підсилює вироблення ІЕМ САММА МК-клітинами та Т-лімфоцитами, було вивчено дію антитіл С340 на підсилюючу регуляцію ІЕМ САММА та дію антитіл С340 на вироблення протеїну ІЕМ САММА Пііпепієті, (х., Сштепі Оріпіоп іп Іттипоіоду, 9: 17-23 (1997), Могтів, 5. С, вї аї., дошпаї! ої Іттипоіоду, 152: 1047-1056 (1994)). Здатність С340 нейтралізувати І--12 спрямоване індукування клітин- кілерів активованих лімфокіном (ГАК), також була досліджена в цих роботах |Киїга, У. апа Мигазко, 0. М.,It has been shown that the biological activity of 1-12 can be neutralized in various tests related to the activity of 1-12. Since I--12 enhances the production of IEM SAMMA by MK-cells and T-lymphocytes, the effect of C340 antibodies on the up-regulation of IEM SAMMA and the effect of C340 antibodies on the production of the IEM SAMMA protein were studied. -23 (1997), Mogtiv, 5. S, vy ai., doshpai! oi Ittypoiodu, 152: 1047-1056 (1994)). The ability of C340 to neutralize I--12-directed induction of killer cells activated by lymphokine (GAK) was also investigated in these works |Kiiga, U. apa Mygazko, 0. M.,
Меспапівтв ої Адеїпд апа ОємеІортепі, 90: 209-222 (1996), 5ієет, А. 5., єї а)., Ргосеєдіпдз ої Ше Майопаї!Mespapivtv oi Adeipd apa OyemeIortepi, 90: 209-222 (1996), 5ieet, A. 5., eyi a)., Rgoseedipdz oi She Mayopai!
Асадету ої бЗсіепсе5 ої їйпе у. 5. А., 87 : 6308-6812 (1990)). На закінчення, було протестовано на Т- та МК- клітинах вплив С340 на підсилюючу регуляцію поверхневої клітинної експресії СО95, опосередкованої ІІ. -12.Asadetu oi bZsiepse5 oi ilipe u. 5. A., 87: 6308-6812 (1990)). In conclusion, the effect of C340 on the up-regulation of cell surface expression of CO95, mediated by II, was tested on T- and MK- cells. -12.
ІМедмедем, А. Е., єї аі!., Суїокіпе, 9: 394404 (1997)|.IMedmedem, A.E., ейі аі!., Suiokipe, 9: 394404 (1997)|.
Інгібування транскрипції ТЕМА ІЕМ даттаInhibition of transcription THEME IEM datta
Було виконано аналіз оберненою РСК-транскрипцією, для визначення того, чи С340 інгібує 11-12, транскрипцію гену ІЕМ САММА індукованого 1--2 в РВІ. людини. Були застосовані специфічні праймери р- актину (контроль цілісності та вмісту тЕМА) та ІЕМ САММА для ампліфікації СОМА одержаної із стимульованих РВІ людини. Фігура З показує, що С340 негативно регулює ІЕМ САММА тЕМА в РВМО активованих 1--12/1І -2 (2 години).A reverse transcription PCR analysis was performed to determine whether C340 inhibits 11-12 transcription of the IEM SAMMA gene induced by 1--2 in RVI. a person Specific p-actin primers (control of tEMA integrity and content) and SAMMA IEM were used to amplify SOMA obtained from stimulated human RVI. Figure C shows that C340 negatively regulates IEM SAMMA tEMA in RVMO activated 1--12/1I -2 (2 hours).
Інгібування внутрішньоклітинного ІЕМ САММА визначене проточною цитометрієюInhibition of intracellular IEM by SAMMA was determined by flow cytometry
У відповідь на різноманітні сигнали та як показник активації Т- та МК-клітини можуть бути індуковані до секреції цитокінів. Більш докладно, РВІ., оброблені 1-2 та 1-12 ініціюють значне вироблення ІЕМ САММА на протязі 4-8 годин після стимуляції. Продукування в цитоплазмі може бути визначене проточною цитометрією РВІ, оброблених ВгетеІдіп-А. Фігура 4 показує 6095 зниження вироблення ІЕМ САММА в культурах, де було додано С340 ІІ -12 в поєднанні з 1-12 на протязі п'яти годин.In response to various signals and as an indicator of activation, T- and MK-cells can be induced to secrete cytokines. In more detail, RVI., processed 1-2 and 1-12 initiate significant production of IEM SAMMA during 4-8 hours after stimulation. Production in the cytoplasm can be determined by flow cytometry of RVI treated with VheteIdip-A. Figure 4 shows the 6095 decrease in IEM SAMMA production in cultures where C340 II -12 was added in combination with 1-12 for five hours.
Інгібування секреції ІЕМ САММА індукованої 1-12Inhibition of IEM SAMMA secretion induced by 1-12
Фігура 5 ясно показує, що два різні зразки С340 інгібують секрецію ІЕМ САММА лімфоцитами периферичної крові у залежний від дози спосіб. 400 пікограм було додано до різних кількостей С340 та потім додано до культури РВІ,, стимульованої 1-12. коли визначали ІЕМ САММА за допомогою ЕЇА через 18-24 години інкубування, було виявлено значне зниження кількості ІЕМ САММА із вмістом антитіл С340 менше ніж 1 ?д/ті.Figure 5 clearly shows that two different samples of C340 inhibit the secretion of IEM SAMMA by peripheral blood lymphocytes in a dose-dependent manner. 400 picograms were added to various amounts of C340 and then added to the RVI culture stimulated 1-12. when IEM SAMMA was determined using EIA after 18-24 hours of incubation, a significant decrease in the number of IEM SAMMA with C340 antibody content of less than 1 ?d/ti was found.
Інгібування цитотоксичності І АК-клітин, індукованої 1-12Inhibition of cytotoxicity of AK-cells induced by 1-12
Клітини Каї), клітинна лінія чутлива до 1-12, одержана з лімфоми Буркіта, що є резистентними МК- клітинами. Клітинні лінії чутливі до ГАК-клітин. Клітини Каїї, в триплеті. Було культивовано на протязі чотирьох годин з ГАК-клітинами, котрі були активовані 400рда/ті. 1-12 та 10ШО/т/. 1-2 в присутності чи відсутності моноклональних антитіл людини С340 (5000пад/ті. ог 50пд/т/). Фігура 6 показує результати від тьох нормальних здорових донорів. Активація 1 -12--ІЇ -2 разом, ефекторних клітин призвела до підвищення цитотоксичної активності більше ніж активація одним 1І--2. антитіла С340 інгібували цей, залежний від 1І--12, ефект. Потужність підсилення залежала від концентрації антитіл, при найвищій концентрації цитотоксичність повернулася до фонових значень.Kai cells), a cell line sensitive to 1-12, derived from Burkitt's lymphoma, which are resistant MK cells. Cell lines are sensitive to HAC cells. Kaia cells, in triplet. It was cultured for four hours with HAC cells, which were activated 400 rda/ti. 1-12 and 10SHO/t/. 1-2 in the presence or absence of human monoclonal antibodies C340 (5000pad/ti. og 50pd/t/). Figure 6 shows the results from those normal healthy donors. Activation of 1-12--II-2 together, effector cells led to an increase in cytotoxic activity more than activation of 1I--2 alone. C340 antibodies inhibited this 1I--12-dependent effect. The power of enhancement depended on the concentration of antibodies, at the highest concentration cytotoxicity returned to background values.
Інгібування регуляції стимулювання С0У5Inhibition of regulation of C0U5 stimulation
Доклад описує регуляцію підвищення СО95 на поверхні високо очищених СО56-РВІ.. Як видно з фігур 7А та 7В, розподільний проточний цитометричний аналіз виявив, що експресія СО95 була в значній мірі стимульована на СОЗ«Т-клітинах апа СО56-МК-клітинахпісля оброблення їх 1-12 плюс 1-2 на протязі 72 годин. Супутнє оброблення анти-1Ї-12 інгібувало експресію СО0О95 як в СОЗ- та і в СО5б популяціях.The report describes the up-regulation of CO95 on the surface of highly purified CO56-RVI. As can be seen in Figures 7A and 7B, distributive flow cytometric analysis revealed that the expression of CO95 was significantly stimulated on COZ T cells and apa CO56-MK cells after their treatment 1-12 plus 1-2 within 72 hours. Co-treatment with anti-1Й-12 inhibited the expression of СОО95 both in SOZ- and in СО5b populations.
СОЗхклітини було інгібовано на 5095, тоді як СО56 - було інгібовано на 8595 (Фігура 7В), що підтверджується показником МРЇ (процент більший у нестимульованого контролю).COX cells were inhibited by 5095, while CO56 - was inhibited by 8595 (Figure 7B), as confirmed by the MPI index (percentage greater than unstimulated control).
Приклад 4: Клонування генів та ідентифікаціяExample 4: Gene cloning and identification
Геномні фрагменти ОМА, котрі містили ген важкого ланцюга С340 або легкого ланцюга С340 було клоновано та очищено. Геном на ОМА очищена з гібридом них клітин С340 була частково оброблена рестрикцій ним ферментом заизА та розділена за розмірами центрифугуванням в 10-4095 сахарозному градієнті. Фрагменти ОМА із розмірами в межех 15-23Кр біли клоновані в бактеріофапговий вектор, ЕМВІ 3, (комерційно доступний 7) та упаковано в бактеріофагові частки. Деякі реакцій пакування дали в результаті бібліотеку в 1 мільйон клонів бактеріофагу.Genomic fragments of OMA containing the C340 heavy chain or C340 light chain gene were cloned and purified. The OMA genome purified from a hybrid of C340 cells was partially treated with the restriction enzyme zaizA and separated by size by centrifugation in a 10-4095 sucrose gradient. OMA fragments with sizes in the range of 15-23 Kr were cloned into the bacteriophage vector, EMVI 3, (commercially available 7) and packaged into bacteriophage particles. Some packaging reactions resulted in a library of 1 million bacteriophage clones.
Приблизно 600,000 клонів з бібліотеки було скриновано бляшковою гібридизацією із застосуванням фрагментів геномної ОМА міченої 32Р, котрі включали як послідовність константного регіону важкого ланцюга ІДС1 людини або послідовність константного регіону легкого ланцюга карра людини як зразок.Approximately 600,000 clones from the library were screened by plaque hybridization using 32P-labeled genomic OMA fragments that included either the human IDS1 heavy chain constant region sequence or the human Carr light chain constant region sequence as a template.
Було знайдено тринадцять клонів важких ланцюгів та девять легких ланцюгів. З них, три клони важких ланцюгів та два з клонів легких ланцюгів було виділено додатковими двома циклами скринінгу. За допомогою РСК-аналізу ОМА бактеріофагу, було показано, що один з клонів важкого ланцюга та два клони легкого ланцюга містили 5' та 3' кінці кодуючої послідовності. Вставка ОМА у клон НА важкого ланцюга (НС) мала розмір 16Кр та включала 3.6КБЬ 5'-кінцевої та як мінімум 2КЬ 3'-кінцевої послідовності. Вставка ОМА у клон НА легкого ланцюга (І С) мала розмір 15КЬ та включала 4.4КЬ 5'-кінцевої та як мінімум 6.ОКЬ 3'-кінцевої послідовності. Вставки повністю було видалено з вектору бактеріофагу як ЗаіІІ-фрагменти та клоновані між сайтами Хпої! та Заї! вектору експресії плазміди р1351, котрий має селективний маркерний ген орі. Оскільки вони були зовнішніми ЗаїІ-сайтами у послідовності, що кодує варіабельний регіон важкого ланцюга, дваThirteen heavy chain and nine light chain clones were found. Of these, three heavy chain clones and two light chain clones were isolated by an additional two rounds of screening. By means of RSC analysis of bacteriophage OMA, it was shown that one of the clones of the heavy chain and two clones of the light chain contained the 5' and 3' ends of the coding sequence. The OMA insert in the HA clone of the heavy chain (HC) was 16 Kb in size and included 3.6 Kb of the 5'-terminal and at least 2 Kb of the 3'-terminal sequence. The OMA insertion in the NA light chain clone (I C) was 15 Kb in size and included 4.4 Kb of the 5'-end and at least 6.OKb of the 3'-end sequence. The inserts were completely removed from the bacteriophage vector as ZaiII fragments and cloned between the sites of Khpoi! and Zai! expression vector of plasmid p1351, which has a selective marker gene ori. Because they were external ZI sites in the sequence encoding the variable region of the heavy chain, the two
ЗаіІІ-фрагменти мали бути перенесені з бактеріофагу НА до вектору експресії рі351. Одержані плазміди експресії важкого ланцюга та легкого ланцюга було названо ріб5б60О та рі558, відповідно. Орієнтація генів важкого та легкого ланцюгівв цих двох плазмідахвідносно до послідовності вектору рі351 було визначено за допомогою аналізу ферментами рестрикції та РСЕ, відповідно. В обох випадках орієнтація була такою, що 5-кінець гену АБ був наближений до 3'-кінця гену дрі. Обидва напрямки кодуючи регіонів клонованих генів було секвеновано. Послідовності плазмід рі560 та ріІ558 представлено на Фігурах 11А-11К та Фігурах 1ЗА-13, відповідно.ZaiII fragments had to be transferred from bacteriophage NA to the expression vector ri351. The resulting heavy chain and light chain expression plasmids were named rib5b60O and rib558, respectively. The orientation of heavy and light chain genes in these two plasmids relative to the sequence of the ri351 vector was determined by restriction enzyme analysis and RCE, respectively. In both cases, the orientation was such that the 5-end of the AB gene was close to the 3'-end of the dri gene. Both directions of the coding regions of the cloned genes were sequenced. The sequences of plasmids ri560 and riI558 are presented in Figures 11A-11K and Figures 13A-13, respectively.
Приклад 5: Одержання рекомбінантних клітинних лінійExample 5: Production of recombinant cell lines
Плазміда рі560 важкого ланцюга була лінеаризована обробкою ферментом рестрикції Руці та плазміда рі558 лінеаризована обробкою ферментом рестрикції За. рахб3зА9д8. 653 (653) та 5Р2/0-Адії (5Р2/О0) клітини були окремо трансфектовані додаванням лінеаризованиз плазмід електропорацією, клітини культивувалися та трансфектанти селектувлися із застосуванням мікофенольної кислоти, як описано вPlasmid ri560 of the heavy chain was linearized by treatment with the restriction enzyme Ruci and plasmid ri558 was linearized by treatment with the restriction enzyme Za. rahb3zA9d8. 653 (653) and 5P2/0-Adia (5P2/O0) cells were separately transfected by adding linearized plasmids by electroporation, cells were cultured, and transfectants were selected using mycophenolic acid as described in
ІКпідні, еї аЇ. Моїіесшаг Іттипоіоду 30: 1443 (1993)). Клітинні супернатанти Х колоній, резистентних до мікофенольної кислоти тестувалися на протязі двох тижнів на (до людини (напр., рекомбінантний С340 (пї5340)). Для цього, клітинні супернатанти інкубували в 96-луносних платівках ЕГІБА, котрі були вкриті антитілами козла специфічними до Ес частини (Дб людини. ЇДб людини, котрий зв'язувався з вкритими платівками визначався за допомогою лужної фосфатази, конюгованої з антитілами козла до (до людини (важкий ланцюгнлегкий ланцюг) та субстратом лужної фосфатази як описано ІКпідні, еї а!., МоїесшагIKpidni, ей аЙ. Moiiesshag Ittypoiodu 30: 1443 (1993)). Cell supernatants of X colonies resistant to mycophenolic acid were tested for two weeks against human (e.g., recombinant C340 (pi5340)). For this, cell supernatants were incubated in 96-well EHIBA plates, which were coated with goat antibodies specific for E part of human Db. The human Db bound to the coated plates was determined using alkaline phosphatase conjugated with goat anti-human antibodies (heavy chain-light chain) and alkaline phosphatase substrate as described by IKpidni, ei a!., Moiesshag
Іттипоїіоду 30: 1443 (1993)). Клітини з високо продукуючи клонів було перенесено в 24-лункові культуральні чашки в стандартному середовищі та збільшено (селективна суміш ІМОМ, 595 ЕВ5, 2тМ глютаміну, мікофенольна кислота).Ittipoiiodu 30: 1443 (1993)). Cells from highly producing clones were transferred to 24-well culture dishes in standard medium and grown (selective mixture of IMOM, 595 EB5, 2tM glutamine, mycophenolic acid).
Кількість вироблених антитіл (напр., секретованих в середовище відпрацьованих культур) точно підраховувалося за допомогою ЕГІЗА, з використанням С340 тАбБ, як стандарту. Відібрані клони потім розширювали у колбах 175 і вироблення до людини цими клонами підраховувалося за допомогою ЕГІЗА.The amount of antibodies produced (eg, secreted into the medium of spent cultures) was accurately counted using EHIZA, using C340 tAbB as a standard. The selected clones were then expanded in 175 flasks and the human production of these clones was counted using EGIS.
Грунтуючись на цих значеннях, шість незалежних трансфектантів 653 та три незалежних трансфектантів 5Р2/0 було субклоновано (висіюванням в середньому однієї клітини в кожну лунку в 96б-лункових планшетах), Кількість антитіл вироблених субклонами підраховувалася за аналізом ЕГІ5А супернатантів з індивідуальних колоній субклонів. Було відібрано три субклони: трансфектант 653 19-20 (С3798) та трансфектант ЗР2/О 84-81 (С3814А) та 22-56 (СЗ89А), для подальшого аналізу.Based on these values, six independent 653 transfectants and three independent 5P2/0 transfectants were subcloned (by plating an average of one cell per well in 96b-well plates), the number of antibodies produced by the subclones was calculated by EHI5A analysis of supernatants from individual subclones colonies. Three subclones were selected: transfectant 653 19-20 (С3798) and transfectant ЗР2/О 84-81 (С3814А) and 22-56 (СЗ89А), for further analysis.
Аналіз зв'язування антигену гС340Analysis of hS340 antigen binding
Перед субклонуванням відібраних клітинних ліній, як описано вище, клітинні супеннатанти з трьоз батьківських ліній (трансфектант 653 клон 2 та клон 18 та трансфектант 5Р2/0 клон 1) були використані для тесту на зв'язування гС340. Спочатку за допомогою ЕГІЗА було визначено концентрації "С340 в трьох зразках супернатантів. Титровані кількості зразків супернатантів, або очищеного С340 контролю, потім інкубували в 96-луносних планшетах вкритих 2на/т! І/-12 людини. Зв'язок тАр потім детектували за допомогою лужної фосфатази конюгованої з антитілами до до людини (важкий ланцюгилегкий ланцюг) та відповідним субстратом лужної фосфатази. Як показано на Фігурі 8, "2340 специфічно зв'язується з 1-12 людини таким самим способом як і оригінальні С340 тАб.Before subcloning the selected cell lines as described above, cell supernatants from three parental lines (transfectant 653 clone 2 and clone 18 and transfectant 5P2/0 clone 1) were used for the hC340 binding test. First, the concentrations of C340 in three supernatant samples were determined using EGIS. Titrated amounts of supernatant samples, or purified C340 control, were then incubated in 96-well plates coated with 2 na/t! I/-12 humans. TAr binding was then detected using alkaline phosphatase conjugated with anti-human antibodies (heavy chain and light chain) and the corresponding alkaline phosphatase substrate. As shown in Figure 8, "2340 specifically binds to human 1-12 in the same way as the original C340 tAb.
Ідентифікація відібраних клітинних лінійIdentification of selected cell lines
Аналіз кривої росту було виконано на С3798, СЗ814А, та СЗ89А, висіюванням у колби 175 із початковою щільністю клітин 2Х105клітин/т!І в стандартному середовищі або безсироватковому ЗЕМ-5 середовищі й подальшим щоденним моніторингом кількості клітин та концентрації /Сб340 до виснаження клітин.Growth curve analysis was performed on C3798, CZ814A, and CZ89A, by seeding in 175 flasks with an initial cell density of 2X105 cells/t!I in standard medium or serum-free ZEM-5 medium and subsequent daily monitoring of cell number and /Cb340 concentration until cell exhaustion.
Результати культур на стандартному середовищі представлено на Фігурах 9А-96.The results of cultures on standard medium are presented in Figures 9A-96.
Максимальні рівні вироблення С340 тА для С379В, С381А, та СЗ89А були 135на/ті, 150рна/ті, та 110дд/ті, відповідно. Спроби адаптувати клітини С379В до середовища 5ЕМ-5 не дістали успіху. КлітиниThe maximum production levels of C340 tA for C379B, C381A, and SZ89A were 135na/ti, 150rna/ti, and 110dd/ti, respectively. Attempts to adapt C379B cells to 5EM-5 medium were unsuccessful. Cells
С381А виробляли таку саму кількість "С340 в середовищі ЗЕМ-5, як і на стандартному середовищі.C381A produced the same amount of "C340" in the ZEM-5 medium as in the standard medium.
Стабільність вироблення "27340 тА в часу для трьох субклонів оцінювалася культивуванням в 24- лункових планшетах із стандартним середовищем або із стандартним середовищем без селекції мікофенольною кислотою в різні періоди часу. Лінії С379В та С381А виявили стабільне вироблення /гС340 в присутності та відсутності селектору на протязі 30 днів (максимальний час тестування) та 75 днів відповідно. Лінія СЗ89А була нестабільною й після 43 днів культури виробляла лише максимум 2095 антитіл від початку вивчення.The stability of production of 27340 tA over time for the three subclones was evaluated by cultivation in 24-well plates with standard medium or with standard medium without mycophenolic acid selection at different time periods. Lines C379B and C381A showed stable production of /gC340 in the presence and absence of the selector for 30 days (maximum testing time) and 75 days, respectively.The SZ89A line was unstable and after 43 days of culture produced only a maximum of 2095 antibodies from the start of the study.
Стає зрозумілим, що винахід може бути здійснений інакшим способом ніз частково описано в приведеному описі та прикладах.It becomes clear that the invention can be implemented in a different way than that partially described in the given description and examples.
Можливі численні модифікації та варіанти даного винаходу в світлі показаного вище, а також в межах приведеної формули.Numerous modifications and variants of this invention are possible in the light of the above, as well as within the limits of the given formula.
. ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ «ІН: Шилі, Девід: Найт, Девід; Скеллон, Берні; Готес-Комар, Джіля; Перріт, Девід «іже АНТИ 12 АНТИТІЛА, КОМПОЗИЦІЇ, СПОСОБИ ТА ВИКОРИСТАННЯ «1305 СЕМО45 «1650» 15 «170» Рея ет 70 «10 1 «В «10 РЕТ «Тіз» Нощо варієре «Ас 1. LIST OF SEQUENCES 'IN: Shealy, David: Knight, David; Skellon, Bernie; Gotes-Komar, Gilya; Perritt, David "izhe ANTI 12 ANTIBODIES, COMPOSITIONS, METHODS AND USES "1305 SEMO45 "1650" 15 "170" Rhea et 70 "10 1 "B "10 RET "Tiz" Noscho variere "Ac 1
Ті Тук Яр Ти (У 1 Е «5» «і» Ії «І» РЕТ «132 Мото вареов «АTi Tuk Yar Ty (U 1 E "5" "i" Ii "I" RET "132 Moto vareov "A
Пе Меєег Рто УЗ Авр бат зр Це ге Тут Чех Ро Мех Рре сни 1 5 ни 15 су «210» 3 І «іх юЮ «Зм РЕТ «23» Ношще зарієне «Ак 3Pe Meeeg Rto UZ Avr bat zr Tse ge Tut Cheh Ro Meh Rre sny 1 5 ni 15 su "210" 3 I "ih yuYu "Zm RET "23" Noshsche zariyene "Ak 3
Дек Ав то Су Сів Су Тук Рів Аяр БВ 1й 5 16 «ох «11» її «17» РЕГ «21325 Бошо варівня «ох 4Dec Av to Su Siv Su Tuk Riv Ayar BV 1st 5 16 "oh "11" her "17" REG "21325 Bosho jam "oh 4
Ат Аїв бех Спа ЗІУ Пе бек Заг тр Гей Ав і 5 юю «10» 5 «І 7 «рій» ВВЕ «213» Нопо зарісце «дО 5At Ayiv beh Spa ZIU Pe bek Zag tr Gay Av i 5 yuyu "10" 5 "I 7 "rii" VVE "213" Nopo zaristce "dO 5
Ав Аза Бех Зех Це іп 5ех 1 5 «10 6 «І» 9 - «122» РЕТ «2132 Ното вапівва «А» 6Av Aza Beh Zeh Tse ip 5eh 1 5 "10 6 "I" 9 - "122" RET "2132 Noto vapivva "A" 6
Сів Сію Тух Ап Де Кук Рго Тут ТЕ 1 5 ох 7 «из Нео «12» ВРЕТ «із Ното вивісву «ад» 7Siv Siyu Tuh Ap De Kuk Rgo Tut TE 1 5 oh 7 "from Neo "12" VRET "from Noto vyvisvu "hell" 7
Св Уві сів еи Уві Сп ет Су Ада Он Уа! Туя Був Ро ЗУ СSv Uvi siv ey Uvi Sp et Su Ada On Ua! Tuya Buv Ro ZU S
Н 5 10 15H 5 10 15
Бек Гей Був Пе бет Суб уз Су Зег Су Тут Бех Роде Те ТВ ТухBek Gay Was Pe bet Sub uz Su Zeg Su Tut Beh Rode Te TV Tuh
КІCI
Теріа У Тер Уа Ате сів Ме Рго СПУ уз Су Ген Аяр Тер Те 33 40 45Teria U Ter Ua Ate siv Me Rgo SPU uz Su Gen Ayar Ter Te 33 40 45
Оу Це Мас бст Рго Уві Авр Зех Ар Пе Аху Тух Бех Ріо ет Ве 50 55 50 сів слу ін Уа! ТЕ Меї Бех Уві Аяр їгує Зех Це Тк ТОК Ав Ту 55 70 7 80Ou Ce Mas bst Rgo Uvi Avr Zeh Ar Pe Ahu Tukh Beh Rio et Ve 50 55 50 siv slu in Ua! TE Mei Beh Uvi Ayar eats Zeh Tse Tk TOK Av Tu 55 70 7 80
Соч Зі Тер Асп Бег їі Гуз Ада ет Ар Тв АВ Ме тую Тух Сук 55 59 95Soch Zi Ter Asp Beg ii Guz Ada et Ar Tv AV Me tuyu Tukh Suk 55 59 95
Ав Ат Ахе Ату Ріо пу бів Су Тут Ре дер Те Тур ЛУ Св СТУ 100 105 їЮюAv At Ahe Atu Rio pu biv Su Tut Re der Te Tour LU Sv STU 100 105 th
Твсіси уві є Мі Бог Вег 115 «МО» 8 «іх 108 «ие РЕЖ «3» Ното зарієпе «охTvsisi uv is Mi God Veg 115 "MO" 8 "ih 108 "ie РЖ "3" Noto zariepe "oh
Авр ті бів Ме Твт бір бек хо бек дек пеп Веж Аза бек уві СІ1уУ 1 а 160 ї8 дАвр Акта Ууаї ТАЖ І1е Тк Су АкЯ Він Бех Зір Зіу їіїє Чек йех Тх» 20 28 зоAvr ti biv Me Tvt bir bek ho bek dec pep Tower Aza bek in SI1uU 1 a 160 i8 dAvr Akta Uuai TAZH I1e Tk Su AkYa Vin Beh Zir Ziu yiiye Chek yeh Thx» 20 28 zo
Бема вла Тер тух бів зіп бує Рхо Зі» пув Аза Рко Був бех Пви її «0 і5Bema vla Ter tuh biv zip buye Rho Zi" puv Aza Rko Buv beh Pvy her "0 i5
ТУух вів Аів бек бек іс сів бек со1у Уаїі Ро Зек йде Вб Вех 01у ва 55 І-1TUuh viv Aiv bek bek iss siv bek so1u Uaii Ro Zek goes Vb Veh 01u va 55 I-1
Бек СІ1У Бак біу ТІ дДлр Ре Тк Гей Тк їЗа бах бах Пец біп Бо 65 70 75 наBek SI1U Bak biu TI dDlr Re Tk Gay Tk iZa bah bah Pec beep Bo 65 70 75 na
ФІо дар о рРВе Аза Тих Тук Тук був сіп біп Тук Ап ї1ї6 Тут РуОо Тух 85 20 ЗвФио дар о рРВе Аза Тих Тук Тук бул сип бип Тук Ап и1и6 Тут РуОо Тух 85 20 Св
Так де піу піп Ту ТВх Пує цей біз ї3Зе Гув Ах 109 105 «2102 а «і» 303 «12» РЕТ «3». Ношо зарієні «ох В вхо дв обец ко Ууаі Аза Тс Ртго Агро Ехо біу Ме ББе рхо Сув Пе ії 5 Що ї8So de piu pip Tu TVh Puye this biz y3Ze Guv Ah 109 105 "2102 a "i" 303 "12" RET "3". Nosho zariyeni «oh In the entrance of two objects ko Uuai Aza Ts Rtgo Agro Echo biu Me BBe rho Suv Pe ii 5 What i8
БКів Нів бех Зіп АБ би гез Ака Аза уаї Бек дви Мес Пе іп Мув 2 25 30BKiv Niv beh Zip AB by gez Aka Aza wai Bek dvy Mes Pe ip Muv 2 25 30
Аа Ах бій Так опе) зій не тТук Ро Сув ТВЖ Бех біз зЗіз їТе ДарAa Ah bij Tak ope) ziy ne tTuk Ro Suv TVZH Beh biz zZiz iTe Dar
ЗЕ 35 45ZE 35 45
Нів біз дер ї1е Тпс буз Авр о Був Так Бех ТЬжх Уа 91 Аза Сув беч во 25 БО хо ей 41 беб о їйк був Ввп осі бат був Бей дво бек Ах біз Тв. 70 75 80Niv biz der i1e Tps buz Avr o Buv Tak Beh Tzhh Ua 91 Aza Suv bech vo 25 BO ho ey 41 beb o oylk was Vvp osi bat was Bey dvo bek Ah biz Tv. 70 75 80
Зек Рпе їЛе ТБЕ Авпосіу Бех Су Пец Аіїа Бех Аке був Так Бек Вде ва 98 55Zek Rpe iLe TBE Avposiu Beh Su Pec Aiia Beh Ake was Tak Bek Wde va 98 55
Мес Мен о діва Бей Суб Їнех Зеж бек Іїфе ТУкК іч бер рев Був меж Тук а 105 115 бів Чві сі вБе пуз Тк Меб Авп Аія Був пед без Меб Аврорхо Пув 115 120 125 вга бід І1є Ве пео дяр бів Ави Мес їнмі Аза Уаі Те дар 3 цейMes Men o diva Bey Sub Yineh Zezh bek Iife TUkK ich ber rev Buv mezh Tuk a 105 115 biv Chvi si vBe puz Tk Meb Avp Aiya Buv ped bez Meb Avrorho Puv 115 120 125 vga bid I1e Ve peo dyar biv Avi Mes yinmi Aza Uai That gift 3 this
Жао і35 134Zhao i35 134
Мей сів ва Бей двп оре Ав Бех Сій Та Маї ко їй Був дек беж 145 150 їі58 160Mei siv va Bey dvp ore Av Beh Siy Ta Mai ko ila Buv dec bej 145 150 iii58 160
Беца бій Що хо др о Рве Тух Мув Тнж Був Її Мув пей Сун Ті Бей ї55 29 75 їви Нія дія Ре дку ІТ1є Аку діа уаі лпж Т1іє Авно йку уні Меб беє жаб їв 185 тТук їву дей Аїа Бек їЗе Тхр січ Бей Був цув Авроуаі Тук чаї Чаї 155 250 898 біз їева АвроТкротух Ро Авродіз вхо Зіу бів мес УуУаії Маї пеп Ту 210 215 Неяи спуя вив ТВт бкс віч іч Авросіу Т1з тТрх тТкроТат ей вро біп бек аа ав 235 29 беж Яїй Маї їв) 01У бех п1у Був Тих Пе ТК ї1е Збій Уа) пуб І:Betsa biy What ho dr o Rve Tuh Muv Tnj Buv Her Muv pey Sun Ti Bei yi55 29 75 yiv Niya deya Red dku IT1e Aku dia uai lpzh T1ie Avno yku uni Meb bee zab iv 185 tTuk ivu dey Aia Bek yZe Thr sich Bey Buv tsuv Avrouai Tuk chai Chai 155 250 898 biz ieva AvroTkrotuh Ro Avrodiz vho Ziu biv mes UuUaii Mai pep Tu 210 215 Neyai spuya vyv TVt bks vich ich Avrosiu T1z tTrh tTcroTat ei vro bip bek aa av 235 29 bej Yaii Mai iv) 01U beh p1u Buv Those Pe TK i1e Failure Ua) pub I:
245 850 255245,850,255
Зме 01у Авр одіз 01іу 515 Тух ЖБх Суб нів пув сту 01уУ сій уаї їв 285 265 270Zme 01u Avr odiz 01iu 515 Tuh ZhBh Sub niv puvstu 01uU siy uai yiv 285 265 270
Бек Вів Бех Пе) ев рей Бе) нів Ппує пуз бі дя» Зіу хів тТжв Бех 275 4385 285Bek Viv Beh Pe) ev rey Be) niv Ppuye puz bi dia» Ziu hiv tTzhv Beh 275 4385 285
Так днр їїе паз Був Аврозів був їй ко Муз Ав ув Жак Ве їх 235 285 305So dnr her paz was Avroziv was her ko Mus Av in Jacques Ve ikh 235 285 305
Ака Сув сіш Аза цув дев Тут Бех Сіу Аку Ре ТНХ Сує Тер Тр рей зов зло зії за тТвх тах їІЗе бау ТВжЖ о Абр обез тре Рйа бек Чаї Був бех Бех Ака БіуУ з25 За з дек бек дер рко біп 0іУу Уві ТВх Сув піу Віа Аза лу їви бек іа 340 за5 зоAka Suv sish Aza tsuv dev Tut Beh Siu Aku Re TNH Sue Ter Tr rey zov zlo ziy za tTvh tah iIZe bau TVzhJ o Abr obez tre Rya bek Chai Buv beh Beh Aka BiuU z25 Za z dec bek der rko bip 0iUu Uvi TVh Suv piu Via Aza lu yvi bek ia 340 za5 zo
Зі дк уаї ву Б3іу Авр ода пу уч тТук біз тТух Веж узі с Мі Сун 355 360 з55 сій біз дар Бех Аза Сув Бо діа Аза 1 біз бек бей ро Т1е Піч 170 375 380 чаї Ме чаї АБр діа Чаї Нів Був Пец бує Тух бі) лад Тух ЖК бек 385 394 395 ооZ dk wai vu B3iu Avr oda pu uch tTuk biz tTuh Vezh uzi s Mi Sun 355 360 z55 sii biz dar Beh Aza Suv Bo dia Aza 1 biz bek bey ro T1e Pich 170 375 380 chai Me chai ABr dia Chai Niv Buv Pec buye Tukh b) lad Tukh residential complex bek 385 394 395 oo
Бах Бе На 1128 ДК Авороїіє тї1є Був РЕ Аврорхо рт Ппув дви їв 05 410 415 «ій вч був РО ек Буя Ав) бек Ахо іп уаї зі Уву беж Тхр б жа же 430Bah Be Na 1128 DK Avoroiie ti1e Buv RE Avrorho rt Ppuv dvy yiv 05 410 415 «ii vch bu RO ek Buya Av) bek Aho ip uai z Uvu bej Thr b zha zhe 430
Тук Рго Авр оту Ткр Бех Тнх Бго йід Бех Ту РБа бак ей Тпж Ве «35 «40 448Tuk Rgo Avr otu Tkr Beh Tnh Bho yid Beh Tu RBa bak ey Tpzh Ve «35 «40 448
Сув уві 10 Уві біз зі цу Зег Бу Аха Зій був Пув Аво Джо чаї 455 455 чей вне ТІ Ав цув Тпх Бек Атїа ТБх Заз її був ху дує дввоАіз бек «в ато «78 ад їїе Вех Уаї Ахо Аїа зів Авр о Ахоа Тук Тут Бех Беж бех Тхр Бех 1 «85 439 2955 ткр'Аїа Бех Маії Рко Суб вах 50о0 «0: юЮ «і» я «міх ДНК «1» КНоло зарікая «Ае 1 вевівізсія Сас 15 «ІН 1 «1» 2135 ДНКSuv in 10 Uvi biz z tsu Zeg Bu Aha Zyy was Puv Avo Jo chai 455 455 chei vne TI Av tsuv Tph Bek Atia TBh Zaz her was hu due dvvoAiz bek "v ato "78 ad yiye Veh Uai Aho Aia ziv Avr o Ahoa Tuk Tut Beh Beh beh Thr Beh 1 "85 439 2955 tkr'Aia Beh Maii Rko Sub vah 50o0 "0: yuYu "i" i" mih DNA "1" KNolo zarikaya "Ae 1 vevivizsia Sas 15 "IN 1 "1" 2135 DNA
«13» «Ното варієтя «нах Лі рова са анар спжванає всвіанасі ссетованнв с зі «210 15 «211» 30 «2122 ДНК «215» Нощо зарієвх «щю» кевнссовтє пасе с Ниряс Ко «ре 13 «І» 33 «о» ДНК «213» Нато вабієйе «ах 3 силової вевссаріса рарівцвре вистав; сс 33 «Зх й «4 21 «312» ДНК «із /Номю варікоє «аю М атесвісох асавоксе 18 «Зх 15 «аБім 27 «22» ДНК «132: Ното зврісхів «цю 5 саксадсвіа ясавсівисої 21 25 . поіжті -О341 2.0 ес: лЬЯ --02 5340 н- о А | --С2333 сх "а ся» 0883 х й"13" "Noto varietya "nah Li rova sa anar pzzhvanae vsvianasi ssetovannv s with "210 15 "211" 30 "2122 DNA "215" Noscho zarievh "shyu" kevnssovte pase s Nyrias Ko "re 13 "I" 33 "o" DNA "213" Nato wabieye "ah 3 power vevssaris rarivtsvre performances; ss 33 "Zh y "4 21 "312" DNA "from /Nomyu varikoye "ayu Matesvisoh asavokse 18 "Zh 15 "aBim 27 "22" DNA "132: Noto zvrishiv "this 5 saksadsvia yasavsivysoi 21 25 . take -О341 2.0 ес: ЛЯ --02 5340 n- o А | --C2333 x "a sya" 0883 x y
Е зв. ще: - 331E zv. more: - 331
З ке Ж --0330 з В Ша ЧИ: --0329 0.5. с Б на 00 ОТ ня 10.000 .000 0190 0010 в.О0From ke F --0330 from V Sha CHI: --0329 0.5. with B on 00 OT nya 10.000 .000 0190 0010 v.O0
Код мк мл очищених матCode of micro ml of purified mats
Фіг А ої 4 і -- СБFig. A oi 4 and -- SB
ЖЕ зо --- св п й пнів а 05 Сб дол -ее :SAME zo --- sv fri and mon a 05 Sat dol -ee:
ОБО 0о500 00050 00005OR 0о500 00050 00005
Концентрація антитіл (мкг/мл)Antibody concentration (μg/ml)
Фіг. 18Fig. 18
ГУ г вGU g
Е 8 : 2 Е ї г ч а а що т 5 - т ШЕE 8 : 2 E i g h a a what t 5 - t SHE
Ук ж : іUk same: i
Ж хх а 8 Е Є ч я я З - Ге щЖ хх а 8 E Е ч я З - Ге щ
М оM o
Се о ре ! появ зе жаSe oh re! appeared ze zha
КК Кт 5 ШннйKK Kt 5 Shnny
ТК З ШЩИЙ ЇTC Z Shshchiy Y
Укр уве о: 00 това оЕатв БУШНЙUkr uve o: 00 tova oEatv BUSHNY
ЕЛЕКТ ор кВ яви тий я шли лу, НН 4ELECT or KV yavy ty i shly lu, NN 4
В кН ! чи ик тирсу ЗДА п і и НН зі о и В и УТ вк рос лесинх ти я супи Б сер фл вит нн Й ;In kN! Chi ik sawdust ZDA p i i NN z o i V i UT vkros lesynh ti i supy B ser fl vit nn Y ;
Фіг, 2А 5 Е гЗ яFig, 2A 5 E gZ i
Ж ЮJ. Yu
« 2 і 4 Е г кі - Е їі« 2 and 4 E g ki - E ii
ВХ є вх т шо З х ж ХЕ Ж щ хх й й я 5ВХ is вх т ш Х х ж Х Х Х xx y y y 5
ЗЕ г. З с - В ж 5ZE g. Z c - V z 5
КУН и о ЯKUN and about Ya
НАON
ПО пЬ хи к "ей соди ване ну а М ЕНPO p h k "ey soda vane nu a M EN
ТЕКИ сту ВН сум екв нене ект о з ШИ й мTEKY st VN sum equ ne ekt o z SHY and m
Бен иBen and
Ша ик и зд я: кн - яЯх ад «ра уSha yk and zd ya: kn - yaYah ad «ra u
ШТ ту ст КИ МSht tu st KI M
Оп енOp en
ТОК, ав оTOK, Av
ПК кет їх хи зх НИ ово пи а са ІPC ket ikh hi zhh NI ovo pi a sa I
Б хи ШЕ бля ев нар АВ :B hi SHE blya ev nar AV:
Фіг. 28Fig. 28
Донор 141 Понор 1457 пев ОВа о ПО ВН ОК Кс В доби и зве ни о МК А Сан й ен ан а и КБ Веде пане в НА Ваш и НН сDonor 141 Ponor 1457 pev OVA o PO VN OK Ks V doby i zve ni o MK A San i en an a i KB Vede pane v NA Vash i NN s
В вн Екон у І. КонтрольIn the University of Econ at I. Kontrol
ДАНО о КРУ СО ВК КВ ЕН Я 2. цх 3. А пвх пут то ВН ся ОД я. певніGIVEN o KRU SO VC KV EN I 2. chx 3. A pvh put to VN sia OD i. certain
В ОМ я поки ні ВIn OM, I am not yet V
ПО Ах ПЕН ВН о 5. ПАН. 126340 вна р А ов 6. ПАС а о Ва и о СИ тк м иа о в (ізотиповий контроль для СЗ340 се ня В З я п т. оон тво о п ни КН НУК вже Ми, Е - ша в Ж. СОНАТА жен в ізотиповий контроль для 8.8.2) и іч ти Р ! пн КИ о р КЕ КИ ща НЕPO Ah PEN VN at 5. PAN. 126340 vna r A ov 6. PAS a o Va i o SY tk m ia o ov (isotype control for SZ340 sen nya VZya p t. oon tvo o pny KN NUK already Mi, E - sha in Zh. SONATA women in isotype control for 8.8.2) and ich ti P ! mon KI o r KE KI shcha NE
Фіг. З гFig. From
З о. - хWith Fr. - x
Е.А т що в воE. And what in vo
У 8 гЯ гЗ 70In 8 gYa gZ 70
Х во жX in the same
Ж тв х еЕ 1 г ща 8 зв ко 20 р во о їх ж в пан МИZh tv h eE 1 h shcha 8 zv ko 20 r vo o ih same v pan MY
МАЛІ ПАТ -2 -С340MALI PAT -2 -C340
Характеристикі культур. .Characteristics of cultures. .
Фіг. 4Fig. 4
«вка. : я ЗО Со у - аг 3064 кА у, У зксою ЦДнЕ"Vka. : i ZO So u - ag 3064 kA u, In zksoy CDnE
Е зате зов Бек чне еф зх й ни ов ли жо ях ою вв як дю» чо вх ж чик ою жи з сво же де і инE zaze zov Bek chne ef zh y ny ov ly jo yah oyu vv as du» cho vh zh chik oyu zhi with his same where and in
В ; З г, с щ рIn ; From the city, from the city of R
Ж ло. :Wow. :
Е ї ; ш ай наван и иEy ; sh ay navan i i
Концентрація антитій (пгмп)Antibody concentration (pgmp)
Фіг. 5Fig. 5
Щ 5000 нгіми5000 Ng
ШАБО -чнс/мя - «0SHABO -chns/mya - "0
БB
Ге я х з 30 е - о ЗИGe i x z 30 e - o zy
Б. ЗИ 1035 . о Їй Кк "И ДиB. ZY 1035. about Her Kk "And Dy
Фіг. 6Fig. 6
У д хIn d
Бу 2 шо ве я а 1 | ІА т: Шиж оСтимо 340 АВBu 2 sho ve i a 1 | IA t: Shizh oStimo 340 AV
Я з хх ет : 25 8 оI from xx et: 25 8 o
ЕК оо. 55 шах 7 55EK oo. 55 chess 7 55
ЇХ яI am THEIR
Ге г 5Ge g 5
ЗЕ 9ZE 9
ХарактеристикіCharacteristics
Фіг. 7АFig. 7A
БB
5 ж5 w
Е зо. га вE zo. ha in
Е Е 375E E 375
В Б жо.Not in B.
Е ї сна зн? аж з25. 9 шт з СЗАб тАDid you sleep well? up to 25 9 pieces from SZAb and A
Її єIt is there
ЕЕ з ЩеEE with more
УIN
Зх в 50Ex at 50
ЕВ х е ЕхEV x e Ex
ВЕ ХарактеристикіVE Characteristics
Фіг. 78Fig. 78
І -- очищ; (5340 ва --5Б5З клон 2 078 --653 клон 18 а -сю- БРОЮ «клон З їі а56 025 ао уперта : ! тп таз тал 102 КТеВ мксіма 1340And -- cleansing; (5340 va --5B5Z clone 2 078 --653 clone 18 a -su- BROYU "clone Z ii a56 025 ao uperta : ! tp taz tal 102 KTeV maxima 1340
Фіг. 8 ша | 160 снів КліТИНІМА с379в 140 я мкг/мл о зво тя 126 2 зо яFig. 8 sha | 160 dreams of KliTINIMA c379v 140 micrograms/ml of oil 126 2 zo
Ж їдою о єIt is food
З | 80 5.окчо ; бWith | 80 5. okcho ; b
Обктоа ся хни и вик й 01238567 8 о 01119134Contact 01238567 8 o 01119134
Днів ЙDniv Y
Фіг. ЗА "Тез. зо й 140 и ідо. І 420Fig. FOR "Thesis. Zo and 140 and Ido. And 420
З . : 100With : 100
Б зомоз б Е м й охо т охо : нт ; 1234887 8 8з01119544B zomoz b E m y okho t okho : nt ; 1234887 8 8z01119544
Днівdays
Фіг. 98Fig. 98
ЗДО мент тот тт тттн зво. Кпітин/млZDO ment tot tttttn zvo. Kpitin/ml
СЗ8ЗА зїа0 007 мкг/ми 1.Бкідря- ї2аSZ8ZA zia0 007 μg/mi 1. Bkidrya-i2a
Е той є -8. р 5 1010 а Е а 50 й і І в оо нт - гомо ї т 12345579 101112153154And that one is -8. r 5 1010 a E a 50 y i I v oo nt - homo y t 12345579 101112153154
Днів .days
Фіг. 90Fig. 90
Claims (6)
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US09/920,262 US6902734B2 (en) | 2000-08-07 | 2001-08-01 | Anti-IL-12 antibodies and compositions thereof |
PCT/US2001/024720 WO2002012500A2 (en) | 2000-08-07 | 2001-08-07 | Anti-il-12 antibodies, compositions, methods and uses |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
UA81100C2 true UA81100C2 (en) | 2007-12-10 |
Family
ID=39228574
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
UA2003021154A UA81100C2 (en) | 2001-08-01 | 2001-07-08 | Isolated monoclonal human antibody that binds to human il-12 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
TW (1) | TWI329672B (en) |
UA (1) | UA81100C2 (en) |
-
2001
- 2001-07-08 UA UA2003021154A patent/UA81100C2/en unknown
-
2002
- 2002-05-17 TW TW91110319A patent/TWI329672B/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
TWI329672B (en) | 2010-09-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US9676848B2 (en) | Anti-IL-12 antibodies and compositions | |
UA81743C2 (en) | HUMAN MONOCLONAL ANTIBODY WHICH SPECIFICALLY BINDS TUMOR NECROSIS FACTOR ALFA (TNFα), PHARMACEUTICAL MIXTURE CONTAINING THEREOF, AND METHOD FOR TREATING ARTHRITIS | |
EA007617B1 (en) | Monoclonal antibody to dual integrin protein and a fragment thereof, pharmaceutical composition and method for treatment | |
UA81100C2 (en) | Isolated monoclonal human antibody that binds to human il-12 | |
ZA200301867B (en) | Anti-IL-12 antibodies, compositions, methods and uses. | |
TR201820506T4 (en) | Anti-Tnf Antibodies, Compositions, Methods and Uses |