UA78164U

UA78164U - Composition for protecting plants against phytopathogenous microflora

Info

Publication number: UA78164U
Application number: UAU201210482U
Authority: UA
Inventors: Світлана Володимирівна Лапа; Светлана Владимировна Лапа; Віктор Михайлович Положенець; Виктор Михайлович Положенец; Ігор Васильович Шевчук; Игорь Васильевич Шевчук; Лілія Василівна Авдєєва; Лилия Васильевна Авдеева
Original assignee: Інститут Мікробіології І Вірусології Ім. Д.К. Заболотного Національної Академії Наук України; Институт Микробиологии И Вирусологии Им. Д.К. Заболотного Национальной Академии Наук Украины
Priority date: 2012-09-05
Filing date: 2012-09-05
Publication date: 2013-03-11

Abstract

A composition for protecting plants against pathogenous microflora on the basis of biomass of antagonistic bacteria of the genus Bacillus. It comprises Bacillus amyloliguefaciens IMB B-7099 and Bacillus subtilis IMB B-7243 with a titre of 1x109 - 1x1010 CFU/ml, taken in a ratio 1:1, as the antagonistic bacteria, and also a filler.

Description

Корисна модель належить до галузі біотехнології, зокрема, до композицій на основі мікроорганізмів, які забезпечують захист рослин від фітопатогенів. Запропонований препарат може використовуватися у сільському господарстві з метою захисту сільськогосподарських культур, знезараження грунту та захисту від хвороб, спричиненими грибковими та бактеріальними патогенами.The useful model belongs to the field of biotechnology, in particular, to compositions based on microorganisms that provide protection of plants against phytopathogens. The proposed drug can be used in agriculture for the purpose of protecting agricultural crops, disinfecting the soil and protecting against diseases caused by fungal and bacterial pathogens.

Провідне місце у системі захисту рослин від фітопатогенів та запобігання зниження врожаю посідають хімічні засоби. Проте використання пестицидів призводить до небажаних з точки зору екології наслідків. Розвиток та впровадження екологічно орієнтованих систем сільського господарства, одержання екологічно чистих продуктів є одним з найбільш перспективних напрямків розвитку сучасного сільського господарства. Основна роль у цьому підході належить способам боротьби із хворобами рослин, які базуються на біопрепаратах, до складу яких входять мікроорганізми, зокрема, такі, що відносяться до роду Васійн5. Основною позитивною властивістю біологічних засобів та способів, які базуються на їх застосуванні є те, що більшість мікроорганізмів, що входять до складу таких препаратів, виділені з природних умов і тому не призводять до небажаних змін в біоценозах, а також дають змогу уникнути забруднення повітря, води і рослин стійкими хімічними сполуками. Проте арсенал біопрепаратів для боротьби з фітопатогенними хворобами, на відміну від такого для пестицидів, на сьогоднішній день є недостатнім. Тому одним з важливих напрямків сучасної біотехнології є розробка композиційних препаратів на основі мікроорганізмів, які характеризуються високою ефективністю контролю фітопатогенної мікрофлори.The leading place in the system of plant protection against phytopathogens and prevention of yield reduction is occupied by chemical means. However, the use of pesticides leads to undesirable ecological consequences. Development and implementation of ecologically oriented systems of agriculture, production of ecologically clean products is one of the most promising directions of development of modern agriculture. The main role in this approach belongs to methods of combating plant diseases, which are based on biological preparations, which include microorganisms, in particular, those belonging to the genus Vasiyn5. The main positive property of biological means and methods based on their use is that most of the microorganisms included in such preparations are isolated from natural conditions and therefore do not lead to undesirable changes in biocenoses, and also make it possible to avoid air and water pollution and plants with persistent chemical compounds. However, the arsenal of biological preparations for combating phytopathogenic diseases, unlike that for pesticides, is currently insufficient. Therefore, one of the important directions of modern biotechnology is the development of composite preparations based on microorganisms, which are characterized by high efficiency in controlling phytopathogenic microflora.

На сьогодні в Україні відомі біопрепарати, які використовуються для пригнічення розвитку фітопатогенних бактерій та грибів. До таких відносяться, зокрема, Агат, Бактофіт, Планриз БТ,Today in Ukraine there are known biological preparations that are used to inhibit the development of phytopathogenic bacteria and fungi. These include, in particular, Agate, Bactophyte, Planriz BT,

Псевдобактерин -2, Мікосан В та Н, Фунгістоп (триходермін). (Перелік пестицидів і агрохімікатів, дозволених до використання в Україні: Офіційне видання. - К.: Юнівест маркетинг, 2010, стор. 354-359).Pseudobacterin-2, Mikosan B and H, Fungistop (trichodermin). (List of pesticides and agrochemicals approved for use in Ukraine: Official edition. - K.: Univest marketing, 2010, pp. 354-359).

В Україні є відомим препарат Триходермін, що використовується для захисту овочевих культур від кореневих гнилей, білої гнилі, фузаріозного та вертицильозного в'янення в захищеному грунті (Перелік пестицидів і агрохімікатів, дозволених до використання в Україні:In Ukraine, the drug Trichodermin is known, which is used to protect vegetable crops from root rot, white rot, fusarium and verticillium wilt in protected soil (List of pesticides and agrochemicals approved for use in Ukraine:

Офіційне видання. - К.: Юнівест маркетинг, 2010, стор. 358). До складу вказаного біопрепаратуOfficial publication. - K.: Univest marketing, 2010, p. 358). In the composition of the indicated biological preparation

Зо входять спори гриба Тгісподегта ІІдпогит штаму М-40 при титрі спор 1-10 млрд/см3. Вказаний препарат демонструє антагоністичну активність щодо популяцій Ривагпйт охузрогитIt includes spores of the fungus Tgispodegta IIdpogyt strain M-40 with a spore titer of 1-10 billion/cm3. This drug demonstrates antagonistic activity against populations of Ryvagpyt ochuzrogyt

Т.вр.сиситегтіпит - збудника кореневих гнилей іп мйго. Проте вказаний препарат характеризується рядом недоліків при застосуванні: - звичайне застосування Триходерміну в захищених грунтах приводить до надмірного заселення грунту видами ТГгісподепта, при цьому спостерігається пригнічення корисної мікрофлори грунту, а також заселення коріння рослин як звичайними патогенами, так і триходермою; - швидке розмноження Тгісподепта приводить до накопичення грибів роду ЕРизагішт у грунту, що виявляє несприятливий вплив на рослини; - види Тгісподенпта виявляється в комплексі збудників кореневих гнилей різних сімейств:T. vr. sisitegtipit - the causative agent of root rot and mygo. However, this drug is characterized by a number of disadvantages when used: - the usual use of Trichodermin in protected soils leads to excessive soil colonization by TGhispodepta species, while suppression of useful soil microflora is observed, as well as colonization of plant roots by both common pathogens and Trichoderma; - the rapid reproduction of Tgispodepta leads to the accumulation of fungi of the genus ERizagisht in the soil, which has an adverse effect on plants; - species of Tgispodenpta is found in the complex of causative agents of root rots of different families:

Сисигтіїасеає 9Уив55., Рарасеєає І іпаЇї, Зоїапасєає див5., Роазеає Ватнагі, Козасеає Дуиз55 та ін., що свідчить про фітопатогенні властивості триходерми.Sysigtiiaseae 9Uiv55., Raraseae I ipaYii, Zoyapaseae div5., Roaseae Vatnagi, Kozaseae Duiz55, etc., which testifies to the phytopathogenic properties of Trichoderma.

Широкого застосування на Україні набув біопрепарат Бактофіт на основі штаму бактерійBiopreparation Bactofit based on a strain of bacteria has become widely used in Ukraine

Васйив зиЇибійв ІПМ-215, що використовується для обробки зернових культур з метою захисту їх від бактеріальних та грибкових патогенів (Перелік пестицидів і агрохімікатів, дозволених до використання в Україні: Офіційне видання. - К.: Юнівест маркетинг, 2010, стор. 356). Вказаний біопрепарат, що застосовується у формі змочуваного порошку для захисту рослин від борошнистої роси та кореневих гнилей, є вибраним як прототип запропонованої корисної моделі. Одним 3 недоліків зазначеного препарату є те, що він характеризується вузьким спектром фінгицидної дії. Слід зазначити також низьку технологічність обробки рослин цим препаратом, що обумовлює, зокрема, необхідність його застосування декілька разів за сезон.IPM-215 herbicide, used to treat grain crops to protect them from bacterial and fungal pathogens (List of pesticides and agrochemicals approved for use in Ukraine: Official edition. - K.: Univest marketing, 2010, p. 356). The indicated biological preparation, used in the form of a wettable powder to protect plants from powdery mildew and root rot, is selected as a prototype of the proposed useful model. One of the 3 disadvantages of this drug is that it is characterized by a narrow spectrum of fungicidal action. It should also be noted the low manufacturability of processing plants with this drug, which determines, in particular, the need to use it several times per season.

Крім того, робоча суспензія Бактофіту при обприскування легко седиментується, що робить неможливим рівномірне нанесення біопрепарату.In addition, the working suspension of Bactofit easily sediments when sprayed, which makes it impossible to apply the biological preparation evenly.

Задачею даної корисної моделі є створення композиції для захисту рослин від фітопатогенної мікрофлори (грибів та бактерій), яка є більш ефективною за рахунок розширення спектру збудників хвороб рослин, які можуть піддаватися контролю. Додатковий технічний ефект, який забезпечує композиція, полягає у тому, що вона може застосовуватися як для обробки рослин, так і для знезараження грунту.The task of this useful model is to create a composition to protect plants from phytopathogenic microflora (fungi and bacteria), which is more effective due to the expansion of the spectrum of plant pathogens that can be controlled. An additional technical effect provided by the composition is that it can be used for both plant treatment and soil disinfection.

Вказана задача вирішується за рахунок створення композиції, що містить біомасу штамів бактерій Васіїи5 атупоїїдиегасівеп5 ІМВ В-7099 та Васійи5 5ибБійв ІМВ В-7243 із титром 1 х 1091 х 1019 КУО/мл, узятих у співвідношенні 1:1, та наповнювач при наступному співвідношенні, 90: біомаса штамів бактерій Васіїи5 атупоїїдиеїасівп5 ІМВ В- 7099 та Васійив 5и,ибійїїв ІМВThis task is solved by creating a composition containing the biomass of bacterial strains Vasiyya5 atupoiidiegasivep5 IMV B-7099 and Vasiyy5 5ibBiyv IMV B-7243 with a titer of 1 x 1091 x 1019 CFU/ml, taken in a ratio of 1:1, and a filler in the following ratio, 90: biomass of bacterial strains Vasiyy5 atupoiyidieiasivp5 IMV B- 7099 and Vasiyyv 5y,ibiyyyiv IMV

В- 7243 із титром 1 х 109-1 х 1019 КУО/мл, узятих у співвідношенні 1:1 92-98 наповнювач 2-8.B-7243 with a titer of 1 x 109-1 x 1019 CFU/ml, taken in a ratio of 1:1 92-98 filler 2-8.

Біомасу мікроорганізмів отримують шляхом вирощування поверхневим способом на твердому поживному середовищі сусло-агарі протягом 7-10 діб (у залежності від 95 спороутворення) при температурі культивування 37 "С. Як наповнювач використовують стерильну водну суміш, яка містить 1 9о желатину та 4 95 лактозу у перерахунку на загальний об'єм наповнювача.The biomass of microorganisms is obtained by surface cultivation on a solid wort-agar nutrient medium for 7-10 days (depending on 95 sporulation) at a cultivation temperature of 37 "C. As a filler, a sterile aqueous mixture containing 1 90 gelatin and 4 95 lactose in conversion to the total volume of the filler.

Штам Васійн5 атуїпоїїдиеїасієпге ІМВ В-7099 являє собою грампозитивні аеробні спороутворюючі палички, які продукують каталазу. На МПА, сусло-агарі, середовищі Громико, картопляному агарі відмічено значний ріст. На МПА утворює складчасті колонії в'язкої консистенції, бежевого кольору з краями неправильної форми. На картопляному агарі - колонії світло-бежевого кольору, блискучі, в'язкої консистенції, краї рівні. На середовищі Громико - колонії бежевого кольору, складчасті, з підвищеним центром, краї зрізані, консистенція в'язка.The strain Vasiin5 atuipoiidieiasiepge IMV B-7099 is a gram-positive aerobic spore-forming bacillus that produces catalase. Significant growth was noted on MPA, wort agar, Gromyko's medium, and potato agar. On MPA, it forms folded colonies of viscous consistency, beige in color with irregularly shaped edges. On potato agar - colonies of light beige color, shiny, viscous consistency, edges are even. On Gromyko's medium, the colonies are beige, folded, with a raised center, the edges are cut, the consistency is viscous.

В мазках з колоній, які виросли на МПА, через 18 годин можна побачити прямі паличкоподібні клітини розміром 1,6 х 0,6 мкм, які розташовані поодиноко, попарно та зрідка ланцюгом. Клітина при спороутворенні не роздувається, після росту на глюкозному агарі в протоплазмі вакуолі не утворюються. На МПБ культура утворює плівку. Ферментує глюкозу, арабінозу, манніт, ксилозу з утворенням кислоти, дає позитивну реакцію Фогес-Проскауера, гідролізує крохмаль, желатину, росте при концентрації МасСі! 795, утилізує цитрат, не використовує пропіонат. Культура не росте в анаеробних умовах і при концентрації масі 10 95, не утворює газ з МОз- в анаеробних умовах. Умови культивування: культивується на середовищі сусло-агар, МПА, Громико, картопляному агарі. Штам зберігається на сусло-агарі, середовищіIn smears from colonies grown on MPA, after 18 hours, straight rod-shaped cells measuring 1.6 x 0.6 µm can be seen singly, in pairs, and occasionally in chains. The cell does not swell during sporulation, after growth on glucose agar, vacuoles are not formed in the protoplasm. On the MPB, the culture forms a film. It ferments glucose, arabinose, mannitol, xylose with the formation of acid, gives a positive Voges-Proskauer reaction, hydrolyzes starch, gelatin, grows at the concentration of MaSi! 795, utilizes citrate, does not use propionate. The culture does not grow in anaerobic conditions and at a mass concentration of 10 95, does not form gas with MOz- in anaerobic conditions. Cultivation conditions: cultivated on wort-agar medium, MPA, Gromyko, potato agar. The strain is stored on wort-agar medium

Громико (МПАЖСА), агаризованому середовищі Гаузе Мо 2 під шаром стерильного вазелінового масла. Пересів 1 раз в рік.Gromyko (MPAZHA), agar medium Hause Mo 2 under a layer of sterile vaseline oil. Transplanted once a year.

Штам Васійни5 зиЇибБійв ІМВ В-7243 був виділений з грунту і являє собою грампозитивні аеробні спороутворюючі палички, які продукують каталазу. На МПА, сусло-агарі, середовищіThe Vasiyna5 ziYibBiiv IMV B-7243 strain was isolated from the soil and is a gram-positive aerobic spore-forming bacillus that produces catalase. On MPA, wort-agar, medium

Громико відмічено інтенсивний ріст, утворює матові складчасті колонії бежевого кольору з порізаними краями. В препаратах, виготовлених з чистої культури, яка виросла на МПА приGromyko noted intense growth, forming mat folded colonies of beige color with cut edges. In preparations made from a pure culture that grew on MPA at

Зо 37" С, час культивування - 18 годин, та забарвлених за Грамом, реєструються прямі паличкоподібні клітини розміром 2,1 х 1,0 мкм, розташовані поодиноко, зрідка ланцюгами.From 37" C, cultivation time - 18 hours, and stained by Gram, straight rod-shaped cells measuring 2.1 x 1.0 microns, located singly, occasionally in chains, are recorded.

Клітина при спороутворенні не роздувається, після росту на глюкозному агарі в протоплазмі вакуолі не утворюються. На МПБ культура утворює плівку. Ферментує глюкозу, арабінозу, манніт, ксилозу з утворенням кислоти, дає позитивну реакцію Фогес-Проскауера, гідролізує крохмаль, желатину, утилізує цитрат, не використовує пропіонат. Культура не росте в анаеробних умовах.The cell does not swell during sporulation, after growth on glucose agar, vacuoles are not formed in the protoplasm. On the MPB, the culture forms a film. Ferments glucose, arabinose, mannitol, xylose with the formation of acid, gives a positive Voges-Proskauer reaction, hydrolyzes starch, gelatin, utilizes citrate, does not use propionate. The culture does not grow in anaerobic conditions.

Культивування можна проводити на середовищах - МПА, середовищі Громико, агаризованому середовищі Гаузе Мо 2 при температурі 137 "С. Штам зберігається на МПА, середовищі Громико, агаризованому середовищі Гаузе Ме 2 під шаром стерильного вазелінового масла. Пересів 1 раз на рік. Проявляє антагоністичну активність стосовно бактерій родів Хапіотопав, Сіамібасієг, Рееидотопаз та Егміпіа.Cultivation can be carried out on media - MPA, Gromyko medium, Hause Mo 2 agar medium at a temperature of 137 "C. The strain is stored on MPA, Gromyko medium, Gause Me 2 agar medium under a layer of sterile vaseline oil. Reinoculation 1 time a year. Shows antagonistic activity regarding bacteria of the genera Hapiotopav, Siamibasieg, Rheidotopaz and Egmipia.

Для обробки рослин використовують зазначену композицію при нормі витрати робочої рідини 500-600 л/га. Запропоновану композицію використовують шляхом наземного обприскування грунту з подальшим дискуванням або шляхом замочуванням кореневищ розсади безпосередньо перед висаджуванням у грунт (суниці, лісові культури та ін.), або шляхом замочування насіння. Використання описаного біопрепарату дає можливість знизити інфекційний фон щодо фітопатогенних мікроорганізмів у грунті та забезпечити довготривалий та ефективний захист рослин від збудників хвороб.The specified composition is used for processing plants with a working fluid consumption rate of 500-600 l/ha. The proposed composition is used by ground spraying of the soil followed by disking, or by soaking the rhizomes of seedlings immediately before planting in the ground (strawberries, forest crops, etc.), or by soaking the seeds. The use of the described biological preparation makes it possible to reduce the infectious background of phytopathogenic microorganisms in the soil and provide long-term and effective protection of plants from pathogens.

Запропоновану композицію одержували наступним способом. Для цього штами, що входять до складу препарату, вирощували поверхневим способом на твердому поживному середовищі сусло-агар протягом 7-10 діб при температурі 28 "С. Вирощену біомасу змивали стерильним фізіологічним розчином. В якості наповнювача використовували 1 95 желатину і 4 9о лактозу від загального об'єму отриманої кількості суспензії. Композицію штамів змішували у співвідношенні 17.The proposed composition was obtained in the following way. For this, the strains included in the preparation were grown superficially on a solid wort-agar nutrient medium for 7-10 days at a temperature of 28 "C. The grown biomass was washed with a sterile physiological solution. As a filler, 1 95 gelatin and 4 9o lactose from of the total volume of the obtained amount of suspension. The composition of the strains was mixed in a ratio of 17.

Приклад 1. Експериментально в лабораторних умовах визначали антагоністичну активність запропонованої композиції щодо тест-культур фітопатогенів - збудників хвороб сільськогосподарських культур. Дослідження проводили методом радіальних штрихів заExample 1. Experimentally, in laboratory conditions, the antagonistic activity of the proposed composition was determined against test cultures of phytopathogens - causative agents of diseases of agricultural crops. The research was carried out by the method of radial strokes according to

Єгоровим (Єгоров, 1986). Для цього досліджувану композицію вносили в центр чашки Петрі з картопляним агаром та чашки інкубували в термостаті при 28 "С протягом 48 год. До композиції підсівали штрихом тест-культури грибів або бактерій (500 млн суспензії клітин мікроорганізмів у фізіологічному розчині). Засіяні таким чином чашки Петрі інкубували при 28 "С протягом 3-5 діб.Egorov (Egorov, 1986). To do this, the researched composition was placed in the center of a Petri dish with potato agar, and the dishes were incubated in a thermostat at 28 "C for 48 hours. Test cultures of fungi or bacteria (500 million suspensions of microorganism cells in physiological solution) were seeded with a dash to the composition. The dishes sown in this way Petri were incubated at 28 "C for 3-5 days.

Облік результатів проводили за величиною зон затримки росту тест-культур фітопатогенних мікроорганізмів. Контролем росту тест-культур слугувало паралельне вирощування їх на чашках з агаризованим картопляним середовищем без культур, які входять до складу композиції. Отримані результати досліджень представлені в Табл. 1.The results were calculated according to the growth retardation zones of test cultures of phytopathogenic microorganisms. The control of the growth of the test cultures was served by their parallel cultivation on plates with agarized potato medium without the cultures included in the composition. The obtained research results are presented in Table. 1.

Таблиця 1Table 1

Антагоністична активність композиції штамів щодо фітопатогенів, збудників хвороб сільськогосподарських культурAntagonistic activity of the composition of strains against phytopathogens, pathogens of agricultural crops

Отримані результати свідчать про те, що композиція штамів проявляє специфічну антагоністичною дію та характеризується високою та середньою активністю щодо культур фітопатогенних мікроорганізмів, збудників хвороб сільськогосподарських рослин.The obtained results indicate that the composition of the strains exhibits a specific antagonistic effect and is characterized by high and medium activity against the cultures of phytopathogenic microorganisms, the causative agents of diseases of agricultural plants.

Приклад 2. У польових умовах ефективність запропонованої композиції проти комплексу хвороб - кореневі гнилі, сірої грилі та вертицильозного в'янення визначали на полях ПП "Тарасівський", Київської обл., Києво-Святошинського р-н., с. Тарасівка, де висаджували розсаду суниці сорту Зенга-Зенгана. Схема захисту суниці передбачала: 1-поверхневий обробіток грунту, 2 - замочування розсади суниці перед посадкою в грунт, З - вприскування рослин до цвітіння. Для цього поверхню грунту обробляли шляхом обприскування композицією у відповідності з даною заявкою, а саме титр 1 х 1097 КУО/мл. Норма витрати робочої рідини складала 500 л/га. Використовували ранцевий оприскувач. Для знезараження від патогенної мікрофлори перед посадкою кореневище суниці занурювали в робочий розчин, який використовували для обробки грунту на 20 хв. Як еталон використовували фунгіцид Байлетон фірми Байер Кропсаєнс (ОЕ). Результати ефективності дії запропонованої композиції на розвиток хвороби та вплив на урожайність у порівнянні з еталоном представлені в Таблицях 2 та 3.Example 2. In field conditions, the effectiveness of the proposed composition against a complex of diseases - root rot, gray rot and verticillium wilt was determined in the fields of Tarasivskyi PE, Kyiv region, Kyiv-Svyatoshinsky district, village Tarasivka, where strawberry seedlings of the Zenga-Zengana variety were planted. The scheme of strawberry protection provided for: 1 - surface treatment of the soil, 2 - soaking of strawberry seedlings before planting in the soil, C - injection of plants before flowering. For this, the surface of the soil was treated by spraying with a composition in accordance with this application, namely, a titer of 1 x 1097 CFU/ml. The working fluid consumption rate was 500 l/ha. A knapsack sprayer was used. To disinfect the pathogenic microflora before planting, strawberry rhizomes were immersed in the working solution used for soil treatment for 20 minutes. Bayleton fungicide from Bayer Cropscience (OE) was used as a standard. The results of the effectiveness of the proposed composition on the development of the disease and the effect on productivity in comparison with the standard are presented in Tables 2 and 3.

Таблиця 2Table 2

Ефективність запропонованої композиції щодо комплексу хвороб суниці (Суниця, сорт Зенга-The effectiveness of the proposed composition against the complex of strawberry diseases (Strawberry, variety Zenga-

Зенгана. ПП "Тарасівський", Київська обл., Києво-Святошинський р-н, с. Тарасівка) 2010-2011 рр. 000000 Варіанти 00 орма витрати, Розвиток хвороби, 95 | Ефективність дії, 9о запропонована композиція 9 (В.атуюоїідиегасієпя. МВ /В- о 0,2 67,85 7099--8.5!00ї5 ІМВ В-7243Zengana PP "Tarasivskyi", Kyiv region, Kyiv-Svyatoshinsky district, village Tarasivka) 2010-2011 000000 Options 00 orm expenditure, Disease development, 95 | Effectiveness of action, 9o proposed composition 9 (V.atuyuoiidiegasiepya. MV /V- o 0.2 67.85 7099--8.5!00ъ5 IMV V-7243

Еталон (Байлетон), 25 95 з.п. 0,24 кг/гаEtalon (Baileton), 25 95 z.p. 0.24 kg/ha

Контроль.////777777771111111111111111Ї11111100711111111-1Control.////777777771111111111111111Ї11111100711111111-1

Нібвб 11111116 11111111Nibvb 11111116 11111111

Таблиця ЗTable C

Урожайність суниці при використанні запропонованої композиції (суниця, сорт Зенга-Зенгана. ПП "Тарасівський", Київська обл., Києво-Святошинський р-н., с. Тарасівка), 200 2010 рр.Strawberry yield when using the proposed composition (strawberry, Zenga-Zengana variety. "Tarasivskyi" PP, Kyiv region, Kyiv-Svyatoshinsky district, Tarasivka village), 200 in 2010.

Урожайність, ц/га й Маса ягоди, відношення доYield, c/ha and berry mass, relation to

Варіанти обробки г 2009 р. 2010р. | ЄРодняЗа урожайності в р. контролі, 90Variants of processing in 2009, 2010. | ЕRodnyaFor productivity in the control year, 90

Контроль (без обприскування) 86,35Control (without spraying) 86.35

Еталон (Байлетон, 25 95 з.п.,Etalon (Baileton, 25 95 z.p.,

Запропонована композиція (В.атуоїіїдиетасієпз ІМВ В- 11,8 104,0 110,0 107,0 123,9 7099--8.5!0Бї5 ІМВ В-7243 (Нібв6 77777711 255 | 13,6 | 141 | -The proposed composition (V.atuoiiidietasiepz IMV B- 11.8 104.0 110.0 107.0 123.9 7099--8.5!0Bi5 IMV B-7243 (Nibv6 77777711 255 | 13.6 | 141 | -

Як видно з представлених результатів, запропонована композиція на основі бактерій Васіїив5 ату!оїїдиеїасієпе ІМВ В-7099 та Васіїйив5 з!ИиБрійв ІМВ В-7243 з титром 1 х 109 КУО/мл, узятих у співвідношенні 1:1, забезпечувала захист суниці від ураження хворобами, такими, як кореневі гнилі, сіра гниль, вертицильозне в'янення суниці, які інтенсивно розвиваються за сприятливих для їх розвитку умов та дозволить отримати прибавку врожаю.As can be seen from the presented results, the proposed composition based on the bacteria Vasiyiv5 atu!oiidieiasiepe IMV B-7099 and Vasiyv5 z!IyBrijv IMV B-7243 with a titer of 1 x 109 CFU/ml, taken in a ratio of 1:1, provided protection of strawberries against disease damage , such as root rot, gray rot, verticillium wilt of strawberries, which develop intensively under favorable conditions for their development and will allow to obtain an increase in yield.

Приклад 3. У даному експерименті вивчали ефективність запропонованої композиції щодо ураження рослин картоплі мокрою бактеріальною гниллю під час вегетації рослин та бульб після збирання врожаю. Досліди проводились в господарстві Немешаєво, Київської обл. на сортах Слов'янка, Веста, Тетерів в трьохкратній повторності В першому варіанті висаджували візуально здорові необроблені бульби (контроль). В другому варіанті використовували фунгіцидExample 3. In this experiment, the effectiveness of the proposed composition was studied in terms of damage to potato plants by wet bacterial rot during the growing season of plants and tubers after harvesting. Experiments were conducted at the Nemeshaevo farm, Kyiv region. on Slovyanka, Vesta, and Teteriv varieties in three replicates. In the first variant, visually healthy, untreated tubers were planted (control). In the second option, a fungicide was used

Татту, к.с. з нормою витрати З л/га, робочим розчином якого обприскували рослини картоплі під час вегетації. В третьому варіанті бульби перед посадкою обробляли розчином запропонованої композиції.Tattu, k.s. with a consumption rate of Z l/ha, the working solution of which was sprayed on potato plants during the growing season. In the third option, the tubers were treated with a solution of the proposed composition before planting.

Так, у варіанті з застосуванням запропонованої композиції у всіх трьох сортів відзначалась найменша ступінь ураження мокрою гниллю як під час вегетації, так і після збору урожаю в порівнянні з контролем. (Таблиця 4).Thus, in the variant with the use of the proposed composition, all three varieties had the lowest degree of damage by wet rot both during the growing season and after harvesting compared to the control. (Table 4).

Таблиця 4Table 4

Ефективність дії препаратів щодо поширення мокрої бактеріальної гнилі картопліThe effectiveness of the drugs on the spread of wet bacterial rot of potatoes

Ступінь ураження . ш о препарату, 90 гниллю, 90Degree of damage. sh about the drug, 90 rot, 90

Запропонована композиціяSuggested composition

З |(В.атупоїїдиетасієпз ІМВ В-7099--В.5,Бів ІМВ 2,0 53,5With |(V. atupoiidietasiepz IMV B-7099--V.5, Biv IMV 2.0 53.5

В-7243 7 Щ|Контроль///777777777111111111111111111111Ї11111219 1111111В-7243 7 Sh|Control///777777777111111111111111111111Ї11111219 1111111

Офеохн юююннм зиOfeohn yuyuyunnm zi

З |(В.атупоїїдиетасієпз ІМВ В-7099--В.5,Бів ІМВ 12,1 44,7With |(V. atupoiidietasiepz IMV B-7099--V.5, Biv IMV 12.1 44.7

В-7243 7 (Контроль 77777771 Ї111179588 11111111 в ос С ПЕСB-7243 7 (Control 77777771 Y111179588 11111111 in axis C PES

З |(В.атуйюїідиеїасієпз ІМВ В-7099--8.5!Б0ї5 ІМВ 20,5 47,3With |(V.atuiyuiidieiasiepz IMV B-7099--8.5!B0i5 IMV 20.5 47.3

В-7243B-7243

В результаті досліджень встановлено, що запропонована композиція проявляла високу ефективність щодо зниження ураження картоплі збудниками мокрої бактеріальної гнилі під час вегетації, при цьому ефективність дії була вищою ніж при застосування хімічного фунгіциду.As a result of the research, it was found that the proposed composition was highly effective in reducing damage to potatoes by pathogens of wet bacterial rot during the growing season, while the effectiveness of the action was higher than when using a chemical fungicide.

При вивченні впливу застосованих препаратів на продуктивність картоплі нами встановлено, що при обробці бульб сорту Слов'янка перед посадкою запропонованою композицією урожайність виросла на 13,0 9о у порівнянні з контролем, сорту Веста - на 27,55, а сорту Тетерів - на 11,1 95 (Табл. 5).When studying the effect of the applied drugs on the productivity of potatoes, we found that when the tubers of the Slavyanka variety were treated with the proposed composition before planting, the yield increased by 13.0 9% compared to the control, the Vesta variety - by 27.55, and the Teteriv variety - by 11. 1 95 (Table 5).

Таблиця 5Table 5

Урожайність картоплі залежно від використаних препаратів куща, кг (Контголь/-://// 7/7 Ї777717171717108777771 17111011 Го (Татуталою.//-/-:/ 7 Ї771717171717171710811 11111011 Ї1110Yield of potatoes depending on the used preparations of the bush, kg (Kontgol/-://// 7/7 Ї777717171717108777771 17111011 Go (Tatutaloy.//-/-:/ 7 Ї771717171717171710811 11111011 Ї1110

ВЕК |в» | м (В.атуоїїдиеїтасівп5 ІМВ В- 012 15,0 7099--8.5!Бії5 1МВ В-7243 (Контголь/-:///777/ Ї7777171717171061111 11111011 Го. (Тату(еталою.//-/-:////|17717171717171711л0611111171 17111003. | ЮК 8 щю((СCENTURY | in» | m (V.atuoiidieitasivp5 IMV B- 012 15.0 7099--8.5!Bii5 1MV B-7243 (Kontgol/-:///777/ І7777171717171061111 11111011 Go. (Tatu (etal.//-/-:/// /|17717171717171711l0611111171 17111003. | YUK 8 shyu((С

МЕ ||» (В.атуоїїдиеїтасівп5 ІМВ В- 0,22 217,5 7099--8.5!0Бї5 ІМВ В-7243 (Контголь/-:/ г ЇЇ 777777177/7041 17111101 Го. (Тату(еталою.//-/-://// |177171711л06111111 17111102 | 33 2ME ||» (V.atuoiidieitasivp5 IMV B- 0.22 217.5 7099--8.5!0Bi5 IMV B-7243 (Kontgol/-:/ g ІІ 777777177/7041 17111101 Go. (Tatu(etal.//-/-:// // |177171711l06111111 17111102 | 33 2

ЕЕ | в» (В.атуоїіїдиетасієпз ІМВ В- 0,5 0,05 11,1 7099--8.5!0Бї5 ІМВ В-7243EE | in" (V.atuoiiidietasiepz IMV B- 0.5 0.05 11.1 7099--8.5!0Bi5 IMV B-7243

Таким чином, в результаті проведених досліджень встановлено, що обробка бульб композицією штамів перед посадкою дозволяє знизити ступінь ураження рослин мокрою гниллю під час вегетації та збільшити приріст врожаю на 11,1-27,5 Об.Thus, as a result of the conducted research, it was found that treating tubers with a composition of strains before planting allows to reduce the degree of damage to plants by wet rot during the growing season and increase the yield by 11.1-27.5%.

Приклад 4. В умовах сховища випробовували композицію запропонованих штамів на бульбах товарної картоплі сорту Тетерів з метою встановлення її лежкості в умовах зберігання.Example 4. In the storage conditions, the composition of the proposed strains was tested on tubers of marketable potatoes of the Teteriv variety in order to establish its shelf life in storage conditions.

Варіанти досліду: контроль - без обробки порівнювали з варіантом, у якому бульби обробили суспензією з титром 1-3 х 109 КУО/мл, норма витрати 15 г /л. Бульби картоплі зберігали в приміщенні при температурі 18 "С з метою створення умов для розвитку гнилей картоплі. Строк зберігання 2-4 місяці, періодично (через 10-14 днів) проводили візуальний огляд та облік розвитку гнилі. Результати досліду вказані в таблиці 6.Variants of the experiment: control - no treatment was compared with the option in which the tubers were treated with a suspension with a titer of 1-3 x 109 CFU/ml, consumption rate of 15 g/l. Potato tubers were stored indoors at a temperature of 18 "С in order to create conditions for the development of potato rot. The storage period was 2-4 months, periodically (after 10-14 days) a visual inspection and accounting for the development of rot was carried out. The results of the experiment are shown in Table 6.

Таблиця 6Table 6

Зберігання картоплі, яка оброблена запропонованою композицією (строк зберігання 4 місяці)Storage of potatoes treated with the proposed composition (storage period 4 months)

Розвиток хвороб - | Підвищення лежкості . Температура щі в Збережені , : .Development of diseases - | Increase of comfort. The temperature is cold in Zberezhen, : .

Варіант й о (бактерії р. Егміпіа, со/ картоплі в порівнянні з зберігання, "С : бульби, 95 о гриби Ризагіит), Уо контролем, 90Variant and o (bacteria of the Egmipia river, so/potato compared to storage, "C: tubers, 95 o mushrooms Rhyzagiit), Uo control, 90

Контроль (без о обробітку) нс 56,64,81 43,44,81Control (without processing) ns 56,64,81 43,44,81

Запропонована композиція (В. ау р'ючегасіопе ес 36,94,75 63,14,75 197676 7099--8.50!Бї5 ІМВ в-7243The proposed composition (V. au ryuchegasiope es 36,94,75 63,14,75 197676 7099--8.50!Bi5 IMV v-7243

З таблиці 6 видно, що при обробітку бульб картоплі культурами бацил, які мають виражені антагоністичні властивості щодо штамів - збудників гнилі картоплі, в лабораторних дослідах досягається значне підвищення зберігання картоплі у порівнянні з контролем.It can be seen from Table 6 that when processing potato tubers with bacillus cultures, which have pronounced antagonistic properties against the strains that cause potato rot, in laboratory experiments, a significant increase in the storage of potatoes is achieved in comparison with the control.

Таким чином, застосована композиція штамів бацил для захисту бульб картоплі при зберіганні дозволить зменшити розвиток гнилі під час зберігання в 1,5-3 рази та збільшити термін їх зберігання у сховищі.Thus, the applied composition of bacillus strains to protect potato tubers during storage will reduce the development of rot during storage by 1.5-3 times and increase their storage life.

Приклад 5. Ефективність запропонованої суспензії проти збудника клястероспоріозу сливи визначали в садових насадженнях ДГ "Новосілки". Ефективність дії двократної обробки суспензією композиції з титром 1 млрд. КУО/мл після цвітіння становила 78 95, а при збільшенні титру до З млрд. КУО/мл була дещо вищою і складала 94,0 95. (Таблиця 7).Example 5. The effectiveness of the proposed suspension against the causative agent of plum klasterosporiosis was determined in the garden plantations of the "Novosilka" DG. The effectiveness of the two-time treatment with a suspension of the composition with a titer of 1 billion CFU/ml after flowering was 78 95, and when the titer increased to 3 billion CFU/ml, it was slightly higher and amounted to 94.0 95. (Table 7).

Таблиця 7Table 7

Ефективність дії Спорофіту проти клястероспоріозу сливи (ДГ "Новосілки", 2010-2011 р) . Норма Ураження листя, |Розвиток хвороби, . оEffectiveness of Sporophyte action against clusterosporiosis of plum (DG "Novosilka", 2010-2011). Norm Damage to the leaves, |Development of the disease, . at

Варіанти витрати, л/га о/; о/; Ефективність, 95Consumption options, l/ha o/; at/; Efficiency, 95

Контроль безосAxisless control

Запропонована композиція титр 3,0 15,0 1,68 78,0 (1 х 109 КУО/мл)The proposed titer composition 3.0 15.0 1.68 78.0 (1 x 109 CFU/ml)

Запропонована композиція титр 3,0 14,0 1,5 94,0 (З х 109 КУО/мл)The proposed titer composition 3.0 14.0 1.5 94.0 (Z x 109 CFU/ml)

НП ВОНО ПОН КОН НОЯ ПОН Ж: ПОН КОNP VONO MON KON NOYA MON J: MON KO

Таким чином, застосування композиції з титром З х 109 КУО/мл дозволить знизити ураження та розвиток клястероспоріозу сливи.Thus, the use of a composition with a titer of 3 x 109 CFU/ml will reduce the damage and development of clusterosporosis of plums.

Claims

USEFUL MODEL FORMULA

1. A composition for the protection of plants from pathogenic microflora based on the biomass of antagonistic bacteria of the genus Vasiy5, which differs in that it contains as antagonistic bacteria VasiShiv5 atuioiidietasiepv IMV B-7099 and Vasiy5 vyshiv IMV B-7243 with a titer of 1x109-1x10'9 CFU /ml, taken in a ratio of 1:11, as well as a filler, with the following ratio of components, 9o: biomass of bacterial strains Vasiyishv5 atupoiiddieitasiep5 IMV B-7099 and Vasiy5 vyvyiv IMV B-7243 with a titer of 1 x 109 - 1 x 1010 CFU/ml, taken in a ratio of 1:1 92-98 filler 2-8.

2. The composition according to point 1, which is characterized by the fact that a sterile aqueous mixture including 195 gelatin and 495 lactose is used as a filler.