UA76474C2 - Method for conversion of nitrogen of primary aminogroup - or --hydroxy of primary amine into nitrogen of monounsaturated compound - Google Patents
Method for conversion of nitrogen of primary aminogroup - or --hydroxy of primary amine into nitrogen of monounsaturated compound Download PDFInfo
- Publication number
- UA76474C2 UA76474C2 UA2004010284A UA2004010284A UA76474C2 UA 76474 C2 UA76474 C2 UA 76474C2 UA 2004010284 A UA2004010284 A UA 2004010284A UA 2004010284 A UA2004010284 A UA 2004010284A UA 76474 C2 UA76474 C2 UA 76474C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- nitrogen
- cytotoxic
- carbon
- acid
- nmol
- Prior art date
Links
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 14
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 title claims abstract description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 title abstract description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title description 40
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 23
- -1 monounsaturated nitrogen-containing heterocyclic compound Chemical class 0.000 claims abstract description 17
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 10
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 9
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 21
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 claims description 8
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical group CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 4
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 abstract 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 59
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 52
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 45
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 45
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 39
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 34
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 33
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 32
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 27
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 26
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 23
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 21
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 20
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 19
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 18
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 17
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 16
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 16
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 16
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 16
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 15
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 15
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 14
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 14
- DNDCVAGJPBKION-DOPDSADYSA-N bombesin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1NC2=CC=CC=C2C=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C(C)C)C1=CN=CN1 DNDCVAGJPBKION-DOPDSADYSA-N 0.000 description 14
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 14
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 14
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 13
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 13
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 12
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 12
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 12
- 102000013585 Bombesin Human genes 0.000 description 10
- 108010051479 Bombesin Proteins 0.000 description 10
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 10
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 9
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 9
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 9
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 9
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- WHHSHXMIKFVAEK-UHFFFAOYSA-N 2-o-benzyl 1-o-octyl benzene-1,2-dicarboxylate Chemical compound CCCCCCCCOC(=O)C1=CC=CC=C1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 WHHSHXMIKFVAEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 8
- 239000002790 bombesin antagonist Substances 0.000 description 8
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 8
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 7
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 7
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 7
- WPJRFCZKZXBUNI-HCWXCVPCSA-N daunosamine Chemical compound C[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](N)CC=O WPJRFCZKZXBUNI-HCWXCVPCSA-N 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 7
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 7
- NOPNWHSMQOXAEI-PUCKCBAPSA-N (7s,9s)-7-[(2r,4s,5s,6s)-4-(2,3-dihydropyrrol-1-yl)-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione Chemical compound N1([C@H]2C[C@@H](O[C@@H](C)[C@H]2O)O[C@H]2C[C@@](O)(CC=3C(O)=C4C(=O)C=5C=CC=C(C=5C(=O)C4=C(O)C=32)OC)C(=O)CO)CCC=C1 NOPNWHSMQOXAEI-PUCKCBAPSA-N 0.000 description 6
- ZQTKCMWSSKTZHN-UHFFFAOYSA-N 4-iodobutanal Chemical compound ICCCC=O ZQTKCMWSSKTZHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 6
- 150000002366 halogen compounds Chemical class 0.000 description 6
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 6
- 229940075620 somatostatin analogue Drugs 0.000 description 6
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 5
- 238000011613 copenhagen rat Methods 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 5
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 5
- 239000000863 peptide conjugate Substances 0.000 description 5
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 5
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- ZOZQYWKGKLXGMK-UHFFFAOYSA-N 5-iodopentanal Chemical compound ICCCCC=O ZOZQYWKGKLXGMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N anhydrous glutaric acid Natural products OC(=O)CCCC(O)=O JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 4
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 4
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 4
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 4
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 4
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 4
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 4
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 4
- 238000012552 review Methods 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 4
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 4
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 4
- RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 1-methylsulfonylpiperidin-4-one Chemical compound CS(=O)(=O)N1CCC(=O)CC1 RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVRMBOTZMMCCO-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-1-chlorobutan-2-one Chemical compound ClCC(=O)CCBr WEVRMBOTZMMCCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YRDJQSNQBGEADF-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-1-chloropentan-2-one Chemical compound ClCC(=O)CCCBr YRDJQSNQBGEADF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940123804 Bombesin antagonist Drugs 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 3
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- ZHAFUINZIZIXFC-UHFFFAOYSA-N [9-(dimethylamino)-10-methylbenzo[a]phenoxazin-5-ylidene]azanium;chloride Chemical compound [Cl-].O1C2=CC(=[NH2+])C3=CC=CC=C3C2=NC2=C1C=C(N(C)C)C(C)=C2 ZHAFUINZIZIXFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 210000001638 cerebellum Anatomy 0.000 description 3
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 3
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 3
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 3
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 3
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 3
- FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M sodium iodide Chemical compound [Na+].[I-] FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 3
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 3
- ROUYUBHVBIKMQO-UHFFFAOYSA-N 1,4-diiodobutane Chemical compound ICCCCI ROUYUBHVBIKMQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAZBDRGXCKPVJU-MRXNPFEDSA-N 1-myristoyl-sn-glycerol 3-phosphate Chemical class CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O FAZBDRGXCKPVJU-MRXNPFEDSA-N 0.000 description 2
- 125000004214 1-pyrrolidinyl group Chemical group [H]C1([H])N(*)C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 2
- ZYJSTSMEUKNCEV-UHFFFAOYSA-N 3-diazo-1-diazonioprop-1-en-2-olate Chemical compound [N-]=[N+]=CC(=O)C=[N+]=[N-] ZYJSTSMEUKNCEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRTRXDSAJLSRTG-UHFFFAOYSA-N 4-bromobutanoyl chloride Chemical compound ClC(=O)CCCBr LRTRXDSAJLSRTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- KAKZBPTYRLMSJV-UHFFFAOYSA-N Butadiene Chemical compound C=CC=C KAKZBPTYRLMSJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000007571 Ovarian Epithelial Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 2
- WYNCHZVNFNFDNH-UHFFFAOYSA-N Oxazolidine Chemical compound C1COCN1 WYNCHZVNFNFDNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 206010071061 Small intestinal bacterial overgrowth Diseases 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 2
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- 125000002619 bicyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 2
- 230000001456 gonadotroph Effects 0.000 description 2
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 125000002346 iodo group Chemical group I* 0.000 description 2
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 2
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000036457 multidrug resistance Effects 0.000 description 2
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 2
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 2
- 125000000160 oxazolidinyl group Chemical group 0.000 description 2
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 230000007142 small intestinal bacterial overgrowth Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 2
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 2
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 2
- KQRWYZDETCDVGB-TZSSRYMLSA-N (7s,9s)-7-[(2r,4s,5s,6s)-4-amino-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-9-(2-bromoacetyl)-6,9,11-trihydroxy-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CBr)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 KQRWYZDETCDVGB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 1
- FQDIANVAWVHZIR-UPHRSURJSA-N (z)-1,4-dichlorobut-2-ene Chemical compound ClC\C=C/CCl FQDIANVAWVHZIR-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KPQFKCWYCKXXIP-XLPZGREQSA-N 1-[(2r,4s,5r)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-(methylamino)pyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1NC(=O)C(NC)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 KPQFKCWYCKXXIP-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- BLCJBICVQSYOIF-UHFFFAOYSA-N 2,2-diaminobutanoic acid Chemical compound CCC(N)(N)C(O)=O BLCJBICVQSYOIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HORQAOAYAYGIBM-UHFFFAOYSA-N 2,4-dinitrophenylhydrazine Chemical compound NNC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O HORQAOAYAYGIBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GFTDGDAKGDUYGO-UHFFFAOYSA-N 2-(4-chlorobutyl)-1,3-dioxolane Chemical compound ClCCCCC1OCCO1 GFTDGDAKGDUYGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SDWZXVTWORCAMD-MVGXARHUSA-N 2-[[3-hydroxy-2-methyl-6-[[(1s,3s)-3,5,12-trihydroxy-3-(2-hydroxyacetyl)-10-methoxy-6,11-dioxo-2,4-dihydro-1h-tetracen-1-yl]oxy]oxan-4-yl]amino]acetonitrile Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)C1CC(NCC#N)C(O)C(C)O1 SDWZXVTWORCAMD-MVGXARHUSA-N 0.000 description 1
- PECYZEOJVXMISF-UHFFFAOYSA-N 3-aminoalanine Chemical compound [NH3+]CC(N)C([O-])=O PECYZEOJVXMISF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IHBVNSPHKMCPST-UHFFFAOYSA-N 3-bromopropanoyl chloride Chemical compound ClC(=O)CCBr IHBVNSPHKMCPST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAURDMIAAAHJEE-UHFFFAOYSA-N 4-bromo-1-chloropentan-2-one Chemical compound CC(Br)CC(=O)CCl FAURDMIAAAHJEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMQQFSDIECYOQV-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-1,3-thiazolidin-3-ium-4-carboxylate Chemical compound CC1(C)SCNC1C(O)=O PMQQFSDIECYOQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 108010073466 Bombesin Receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 206010048610 Cardiotoxicity Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 1
- YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N Diazomethane Chemical compound C=[N+]=[N-] YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100291267 Drosophila melanogaster Miga gene Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 108700012941 GNRH1 Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- 101000825742 Homo sapiens Somatoliberin Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-L L-tartrate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-L 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 208000030070 Malignant epithelial tumor of ovary Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-diisopropylethylamine Substances CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000690745 Neides Species 0.000 description 1
- 206010061309 Neoplasm progression Diseases 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 206010061328 Ovarian epithelial cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N Pyroglutamic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229920002253 Tannate Polymers 0.000 description 1
- 241001424341 Tara spinosa Species 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N acide pyroglutamique Natural products OC(=O)C1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001350 alkyl halides Chemical group 0.000 description 1
- 230000002152 alkylating effect Effects 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 239000003817 anthracycline antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 229940034982 antineoplastic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 1
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 1
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 description 1
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 125000001246 bromo group Chemical group Br* 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 231100000259 cardiotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- GTZCVFVGUGFEME-IWQZZHSRSA-N cis-aconitic acid Chemical compound OC(=O)C\C(C(O)=O)=C\C(O)=O GTZCVFVGUGFEME-IWQZZHSRSA-N 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical group 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-L fumarate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)\C=C\C([O-])=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-L 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- VANNPISTIUFMLH-UHFFFAOYSA-N glutaric anhydride Chemical compound O=C1CCCC(=O)O1 VANNPISTIUFMLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003163 gonadal steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 1
- 150000002391 heterocyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 231100000171 higher toxicity Toxicity 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- 231100000508 hormonal effect Toxicity 0.000 description 1
- 239000003688 hormone derivative Substances 0.000 description 1
- 102000045304 human GHRH Human genes 0.000 description 1
- 210000004293 human mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 229910003480 inorganic solid Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000026045 iodination Effects 0.000 description 1
- 238000006192 iodination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 230000001050 lubricating effect Effects 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002080 lysosomotropic effect Effects 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-L malate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C(O)CC([O-])=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 231100000682 maximum tolerated dose Toxicity 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 1
- 238000005497 microtitration Methods 0.000 description 1
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 125000002757 morpholinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 208000004235 neutropenia Diseases 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 239000011368 organic material Substances 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 201000007426 ovarian cystadenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 108010011903 peptide receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000014187 peptide receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-O phosphonium Chemical compound [PH4+] XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000006798 ring closing metathesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000036299 sexual function Effects 0.000 description 1
- 235000009518 sodium iodide Nutrition 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000011343 solid material Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- KHVCOYGKHDJPBZ-WDCZJNDASA-N tetrahydrooxazine Chemical group OC[C@H]1ONC[C@@H](O)[C@@H]1O KHVCOYGKHDJPBZ-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- DZLNHFMRPBPULJ-UHFFFAOYSA-N thioproline Chemical compound OC(=O)C1CSCN1 DZLNHFMRPBPULJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000816 toxic dose Toxicity 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- 125000005270 trialkylamine group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005751 tumor progression Effects 0.000 description 1
- 229940070710 valerate Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Винахід здійснено при частковій Державній підтримці. В зв'язку з цим Держава має деякі права на її 2 використання.The invention was made with partial state support. In this regard, the State has some rights to its 2 use.
Цей винахід стосується хімізму цілеспрямованої дії протиракових похідних антрацикліну. Зокрема, він охоплює доксорубіцин (ОХ) та його модифіковані дауносаміном похідні (0ОМ-БОХ), які ковалентно зв'язуються з аналогами пептидних гормонів, такими як ГН-КН, бомбесин та соматостатин. Мішенню цих ковалентних кон'югатів є різноманітні рецептори для аналогів пептидних гормонів, які відповідають за розвиток пухлин. 70 В патентній заявці 5спайПу, дапаку і Ва|ив2, ЕР 0 450 461 В1, зареєстрованій 6 вересня 1995 року, описано аналоги І Н-КН, які мають цитотоксичні складові в шостому положенні.This invention relates to the chemistry of the targeted action of anticancer anthracycline derivatives. In particular, it covers doxorubicin (OX) and its daunosamine-modified derivatives (0OM-BOH), which covalently bind to peptide hormone analogs such as GN-KN, bombesin, and somatostatin. The target of these covalent conjugates are various receptors for analogs of peptide hormones, which are responsible for the development of tumors. 70 In the patent application 5spaiPu, dapak and Va|iv2, EP 0 450 461 B1, registered on September 6, 1995, analogues of I H-KN, which have cytotoxic components in the sixth position, are described.
Аналоги сСпКнН (І Н-КН), призначені для руйнування гонадотропних гормонів, описано в заявці Мей і сСіоде,Analogues of sSpKnN (I H-KN), intended for the destruction of gonadotropic hormones, are described in the application of May and Siode,
МО 90/09799, опублікованій 7 вересня 1990 року. В цій заявці описано такі токсини, як рицин, що приєднується до аналогів І Н-КН з метою руйнування гонадотропних гормонів і, таким чином, лікування хворих на залежні від 72 статевих гормонів види рака. В цій заявці - без опису хімізму зв'язків - згадано також про похідну доксорубіцину І Н-КН.MO 90/09799, published on September 7, 1990. This application describes such toxins as ricin, which joins analogues of I H-KN in order to destroy gonadotropic hormones and, thus, treat patients with 72 sex hormone-dependent types of cancer. In this application - without describing the chemistry of the bonds - the doxorubicin derivative I H-KN is also mentioned.
Цитотоксичні аналоги соматостатину описано в заявці США, зробленій ЗспайуУ еї аЇ. та зареєстрованій 6 квітня 1990 року та перезареєстрованій 15 липня 1993 року під реєстраційним номером 08/076.846. Огляд, здійснений А. М. Зспайу у статті Апіі-Сапсег ЮОгидвз 5, 115-130 (1994), детально розкриває наявність рецепторів на клітинних мембранах найрізноманітніших пухлин щодо аналогів І Н-КН, бомбесину чи соматостатину. б. МУескресКег у своєму огляді в Рагтас. Тег. 60, 245-264 (1993) наводить перелік посилань на деякі публікації, в яких описано наявність рецепторів та підтипів рецепторів для аналогів соматостатину на певних нормальних та уражених пухлинами тканинах. сCytotoxic analogues of somatostatin are described in a US application filed by the Commonwealth of Independent States. and registered on April 6, 1990 and re-registered on July 15, 1993 under registration number 08/076.846. The review carried out by A. M. Zspayu in the article Apii-Sapseg YuOgidvz 5, 115-130 (1994) reveals in detail the presence of receptors on the cell membranes of a wide variety of tumors for analogues of I H-KN, bombesin or somatostatin. b. MUescresKeg in his review in Ragtas. Tag. 60, 245-264 (1993) lists references to several publications describing the presence of receptors and receptor subtypes for somatostatin analogs on certain normal and tumor-affected tissues. with
Бомбесиноподібні пептиди та наявність рецепторів бомбесину/ЗзКР Ірилізинг-пептидів росту| на різних Ге) нормальних та уражених пухлинами тканинах описано в огляді М. Виппей іп и Реріідев: Віоспетівігу апаBombesin-like peptides and the presence of bombesin/ZzKR Irylyzing growth peptide receptors | on various Ge) normal and tumor-affected tissues is described in the review by M. Vyppei ip and Reriidev: Viospetivighu apa
Рпузіоїюду 423-445 (1994) Ба: 9. МУаівй і с. 9. ЮосКгау, Камеп Ргезз, Мем МогК і ру Е. ЗріпаеїЇ іп КесепіRpuzioyudu 423-445 (1994) Ba: 9. Muaivy and p. 9. JuosKgau, Kamep Rgezz, Mem MogK and ru E. Zripaeyi ip Kesepi
Ргодгезз іп Ногтопе Кезеагсі 48, (1993) |Асадетіс Ргезві.Rgodgezz ip Nogtope Kezeagsi 48, (1993) |Asadetis Rgezvi.
Доксорубіцин (ОХ) є зараз найбільш широко використовуємим та дуже ефективним протираковим агентом. ЗDoxorubicin (OX) is currently the most widely used and highly effective anticancer agent. WITH
Однак, пухлини певних типів не реагують на нього взагалі, і його застосування обмежується такими ча ускладненнями, як резистентність до багатьох препаратів (МОК) і кардіотоксичність, а також нейтропенія, які розвиваються внаслідок хронічних захворювань. З метою подолання цих недоліків і подальшого використання М значного протипухлинного потенціалу, властивого структурі антибіотиків ряду антрацикліну, було вивчено кілька «о тисяч їх синтетичних похідних, включаючи цілеспрямовані аналоги у сполученні з різноманітними 3о макромолекулами носіїв. вHowever, certain types of tumors do not respond to it at all, and its use is limited by complications such as multidrug resistance (MDR) and cardiotoxicity, as well as neutropenia, which develop as a result of chronic diseases. In order to overcome these shortcomings and further use the significant antitumor potential inherent in the structure of anthracycline antibiotics, several thousands of their synthetic derivatives, including targeted analogues in combination with various carrier macromolecules, were studied. in
Майже все про БОХ та його аналоги описано в "Адріаміцин", Оамід МУ. Непгу, АСЗ Зутрозішт Зегіев, Мо. 30,Almost everything about BOH and its analogues is described in "Adriamycin", Oamide MU. Nepgu, ASZ Zutrozisht Zegiev, Mo. 30,
Сапсег СпетоїПпегару, Атегісап Спетіса! Зосієїу, рр. 15-57 (1976), а також у монографії Доксорубіцин, РедегісоSapseg SpetoiPpegaru, Ategisap Spetis! Zosieiu, pp. 15-57 (1976), as well as in the monograph Doxorubicin, Redegiso
Агсатопе, Асадетіс Ргевзв, (1981). «Agsatope, Asadetis Rhevzv, (1981). "
Високоактивний, алкілований, не маючий перехресної резистентності З 50 З3'-деаміно-3'-(3"-ціано-4"-морфолініл)-ООХ та його похідні, які відзначаються протипухлинною активністю, с описано в патенті США Мо4.464.529, автори Мозпег, еї аіІ., зареєстрованому 7 серпня 1984 року. Синтез та оцінкуThe highly active, alkylated, non-cross-resistant C 50 C3'-deamino-3'-(3"-cyano-4"-morpholinyl)-OOX and its derivatives, which are noted for antitumor activity, are described in US patent Mo4,464,529, authors Mozpeg, ei aiI., registered on August 7, 1984. Synthesis and assessment
Із» біологічної активності цих препаратів |" піепзеу Роїепі Могрпоїїпу! Апійгасусіїпез"| розкрито також в ..From the biological activity of these drugs also revealed in ..
Мед. Спет. 1984, 27, 638-645.Honey. Spent 1984, 27, 638-645.
В Ргос. Май. Асад. Зсі. ОБА Мої. 88, рр. 4845-4849, червень 1991 року, автори бао еї аїЇ., описано формальдегід-опосередковане алкілювання послідовності ДНК похідною даунорубіцину. це. Застосування а, о-дийодо сполуки для алкілювання дауносамінового азоту в БОХ і, таким чином, для (Ге) утворення нової морфолінілової похідної ОХ описано в Європейському патенті ЕР 434 960, зареєстрованомуIn Rhos. May Asad All together. BOTH are mine. 88, pp. 4845-4849, June 1991, authors bao ei aiYi., formaldehyde-mediated alkylation of the DNA sequence by a daunorubicin derivative is described. it. The use of an a, o-diiodo compound for the alkylation of the daunosamine nitrogen in BOH and, thus, for the (He) formation of a new morpholinyl derivative of OH is described in European patent EP 434 960, registered
ІФармація Карло Ерба (РНнагтасіа Сагпіо Егра) 12 грудня 1989 року.) т М-Трифтороацетиладріаміцин14-О-геміглутарат і -геміадіпат як аналоги -І 50 М-трифтороацетиладріаміцин14-О-валерату (АО-32) з поліпшеною розчинністю у воді описано у таких авторів, якIPharmacy Carlo Erba (RNnagtasia Sagpio Egra) December 12, 1989.) t M-Trifluoroacetyladriamycin 14-O-hemiglutarate and -hemiadipate as analogs -I 50 M-Trifluoroacetyladriamycin 14-O-valerate (AO-32) with improved water solubility is described in such authors like
І» Івгаеї, ег аіІ., в патенті США 4.299.822, зареєстрованому 10 листопада 1981 року.Ivgaei, et al., in US patent 4,299,822, registered on November 10, 1981.
Нойоп і Ргіере (9. Апііріоїйсв, ХХХМІ, 1211-12151) описали декілька 14-О-естерів різних аналогів антрацикліну, які істотно не відрізняються з погляду на їхню протиракову активність у порівнянні з батьківськими аналогами 14-ОН. 59 В галузі створення цілеспрямованих хіміотерапевтичних агентів головними задачами виступають:Noyop and Rieger (9. Apirioiysv, XXXMI, 1211-12151) described several 14-O-esters of various anthracycline analogs that do not differ significantly in terms of their anticancer activity compared to the parent 14-OH analogs. 59 In the field of creation of targeted chemotherapeutic agents, the main tasks are:
ГФ) 1. Стабільність хімічного зв'язку між молекулою носія та власне хіміотерапевтичним агентом до повного т досягнення поставленої мети. 2. Збереження біологічних характеристик молекули носія в кон'югаті, насамперед збереження властивості зв'язування. 60 3. Збереження фармакологічної активності хіміотерапевтичного агента в кон'югаті, насамперед збереження цитотоксичної активності. 4. Як наслідок кон'югації - створення аналогів з більш інтенсивною активністю та/або нижчою периферійною токсичністю у порівнянні з некон'югованими складовими.GF) 1. The stability of the chemical bond between the carrier molecule and the actual chemotherapeutic agent until the goal is fully achieved. 2. Preservation of the biological characteristics of the carrier molecule in the conjugate, primarily preservation of the binding property. 60 3. Preservation of pharmacological activity of the chemotherapeutic agent in the conjugate, primarily preservation of cytotoxic activity. 4. As a result of conjugation - the creation of analogs with more intense activity and/or lower peripheral toxicity compared to unconjugated components.
Кон'югація ПООХ шляхом окислення МаЇО4 дауносамінової складової ОХ з подальшим відновлювальним 62 адлкілюванням за участю первинного аміну молекули носія описано в патенті США 4.263.279, автори зЗеїа, еї аї.,Conjugation of POOH by oxidation of MaЙО4 of the daunosamine component of ОХ followed by reductive 62 adalkylation with the participation of the primary amine of the carrier molecule is described in US patent 4.263.279, authors zZeia, ei ai.,
зареєстрованому 21 квітня 1981 року.registered on April 21, 1981.
Для приєднання дауносамінового азоту до макромолекулярних носіїв з чутливим до рН зв'язком використовували як спейсер цис-аконітову кислоту, як це описано в Віоспет. Віорпуз. Кез. Соттип. 1981 102, 1048-1054.To attach daunosamine nitrogen to macromolecular carriers with a pH-sensitive bond, cis-aconic acid was used as a spacer, as described in Viospet. Viorpuz. Kez. Sottype 1981 102, 1048-1054.
Утворення складноефірних та С-М-зв'язків між 14-бромодаунорубіцином і білками чи полі-І -амінокислотами описано таким авторами, як 7ипіпо еї.аі. (1981) в Титогі 67, 521-524 і (1984) Еиг. У. Сапсег Сіїп. Опсої. 20, 421-425.The formation of ester and C-M bonds between 14-bromodaunorubicin and proteins or poly-I amino acids has been described by such authors as 7ipipo ei.ai. (1981) in Tytogi 67, 521-524 and (1984) Eig. U. Sapseg Siip. Opsoi 20, 421-425.
Морфоліно-0ОХ (високоактивний, модифікований дауносаміном аналог ОХ) кон'югували з антитілом через 70 здатний до гідролізу (лізосомотроп, чутливий до рН) гідразоновий зв'язок, включаючи С-13-оксо-функцію цитотоксичного агента; це описано в Віосопіддаге Спетівігу 1990 1(5), 325-330.Morpholino-0OX (highly active, daunosamine-modified analogue of OX) was conjugated to the antibody through a 70-hydrolyzable (lysosomotropic, pH-sensitive) hydrazone bond, including the C-13-oxo function of the cytotoxic agent; this is described in Viosopiddage of Spetvig 1990 1(5), 325-330.
Чутливість карбоксамідного зв'язку лейцинового залишку до ферментативного розщеплення успішно застосовували в кон'югатах БОХ, які містять пептид "плеча спейсера" ("зрасег апт" рерііде)., переважноThe sensitivity of the carboxamide bond of the leucine residue to enzymatic cleavage has been successfully used in BOH conjugates containing the "spacer arm" peptide ("zraseg apt" reriide), mainly
Аїа-І ец-Аїа-І ем, де карбокси-закінчення І еш ацилює даунсаміновий азот в ОХ, у той час як зміно-закінчення 7/5 Ма приєднується до носія через спейсер - дикарбонову кислоту; це описано в РгоС.Маї!. Асад. Зсі. ОБА 1982 79, 626-629.Aia-I ec-Aia-I em, where the carboxy-terminus of I ech acylates the daunsamine nitrogen in OH, while the change-terminus of 7/5 Ma is attached to the carrier through a spacer - dicarboxylic acid; it is described in RgoS. Maya!. Asad All together. BOTH 1982 79, 626-629.
Дауносаміновий азот ОХ ацилювали спейсером - глутаровою кислотою - і приєднували до аналогів І Н-КН із значною втратою цитотоксичної активності, як це описано в РгоС.Маїї. Асад. сі. ОБА 1992 89, 972-976.Daunosamine nitrogen OX was acylated with a spacer - glutaric acid - and attached to analogues of I H-KN with a significant loss of cytotoxic activity, as described in RgoS. Maiya. Asad si. BOTH 1992 89, 972-976.
Нижче за текстом наведено додаткові публікації, на які робилися посилання у зв'язку із застосуванням сполук цього винаходу для лікування різноманітних пухлинних утворень в організмі людини. 1. ЗегіаПу есаї. (1996) в Лікування мйй СпКН Апаїодвг: Сопігомегзіез і Регересіїмев, едвз. Ріїсогі, М. 85 Ріатіодпі,Below the text are additional publications that were referenced in connection with the use of the compounds of this invention for the treatment of various tumors in the human body. 1. ZegiaPu Esai. (1996) in Treatment of my SpKN Apaiodvg: Sopygomegziez and Regeresimiev, edvz. Riisogi, M. 85 Riatiodpi,
С. (Раппепоп,Сагпіогій, О.К), рр. 33-44. 2. Маду ейаІ(1996) РгосС.Маїї. Асад. Зсі. О.5.А. 93, 7269-7273. 3. Хапо есцаї. (1994) РгоС.Маїї. Асад. 5сі. О.5.А. 91,7090-7094. с 4. Кеказвзі есаї. (1993) Епдостгіпоїоду 132(5) 1991-2000. 5. ЗгКкаЇоміс ега!. (1990) Сапсег Кез. 50, 1841-1846. і) 6. Етопз ега!. (1993) Сапсег Кев. 53, 5439-5446. 7. Етопзг ейа!. (1993) дошигпаї ої Сіїп. Епдостгіп. і Меїйабої. 77(6) 1458-) 8. Зепаїу, А. М. (1988) Опсоіодіса! арріїсайопе соматостатину апаІодв. Сапсег Кез. 48, 6977-6985. «г зо 9. зснпаїйу еа!. (1994) Іпіегпайопаї! доигпа! ої Рапстгеайюіоду 16, 277-280. 10. Бгкаіоміс ека). (1990) оцйгпа! ої Сіїпісаї Епадосгіпоїосду і Мейароїївт 70(3), 661-669. 4 Ріпвкі - еїаІ. (1994) Іпі. 93. Сапсег 57, 574-580. «г 11. Кадиоміс ега!. (1992) Сапсег І еЦеге 62, 263-271. 12. Оіп егаї. (1995) Іпі. У. Сапсег 60, 694-700. ісе) 13. Кайдиоміс еїаі. (1992) Р.5.Е.В.М. 200, 394-401. ча 14. Кадиоміс ега!. (1994) Асіа Опсоіодіса З33(6) 693-701. 15. Ріпекі еаї. (1993) Сапсег І еЦеге 71, 189-196. 16. О'Вугпе ег.а!ї. (1994) Еиг. У). ої Сапсег ЗОД(11) 1682-1687. 17. Ріпекі еса!. (1994) Вг. у). ої Сапсег 70, 886-892. « 18. Ріпекі еї. а. (1994) Сапсег Кев. 54, 5895-5901. з с 19. Ріпекі ега!ї. (1996) Іпі. 3. Сапсег 65, 870-874. . 20. Вапкз еї.а!. (1992) Апіїсапсег Огидв. З, 519-523. и?» 21. Кецрі і Кмоїв (1992) Сапсег Кев. 52, 6074-6078. 22. Зспайу еїа)!. (1994) Іпіегпайопаї! дошигпаї! ої Рапсгеаіюіоду 16, 277-280. 23. Наїтоз еї.аі!. (1995) Сапсег Кев. 55, 280-287. -І 24. Наїтоз ег.а!. (1994) Сапсег І ецЦегз 85, 111-118. 25. Оіп еїа!. (1994) 3. Сапсег Кез. Сп. Опсої. 120, 519-528 ме) 26. Оп ега!. (19940 Сапсег Кезв. 54, 1035-1041. ї5» 27. діп ека!. (1995) Іпі. У. Сапсег 63, 257-262. 28. Кеїе еа)|. (1994) Тне Ргозіайе 25, 29-38. ш- 29. Ріпекі еїаї. (1994) Іпі. У. Сапсег 57, 574-580. ї» 30. Кайдиоміс ейаІ. (1992) Р.5.Е.В.М. 200, 394-401. 31. Кайдшиоміс егаі. (1994) Асіа Опсоодіса 33(6) 693-701. 32. Ріпекі еїаі. (1993) Сапсег І еЦегз 71, 189-196. 33. Ріпекі егаї. (1994) Вг. 9. ої Сапсег 70, 886-892.S. (Rappepop, Sagpiogiy, O.K.), 33-44. 2. Madu eyaI (1996) RgosS. Maii. Asad All together. O.5.A. 93, 7269-7273. 3. Hapo essai. (1994) RgoS. Maii. Asad 5 O.5.A. 91,7090-7094. p 4. Kekazvzi essays. (1993) Epidosthypoiodu 132(5) 1991-2000. 5. ZgKkaYomis ego!. (1990) Sapseg Kez. 50, 1841-1846. i) 6. Etopz ego!. (1993) Sapseg Kev. 53, 5439-5446. 7. Etopzg eya!. (1993) doshigpai oi Siip. Epidosthip and Meijaboi. 77(6) 1458-) 8. Zepaiu, A. M. (1988) Opsoiodisa! Arrisaiope of somatostatin apaIodv. Sapseg Kez. 48, 6977-6985. «g zo 9. zsnpaiiyu ea!. (1994) Ipiegpaiopai! doigpa! oi Rapstgeaiyuiodu 16, 277-280. 10. Bgkaiomis eka). (1990) otsygpa! of Siipisai Epadosgipoiosdu and Meyaroivt 70(3), 661-669. 4 Ripvki - eiaI. (1994) Yipi. 93. Sapseg 57, 574-580. "g 11. Kadiomis ego!. (1992) Sapseg I eTsege 62, 263-271. 12. Oip egai. (1995) Yipi. U. Sapseg 60, 694-700. ise) 13. Kaidiomis eiai. (1992) R.5.E.V.M. 200, 394-401. cha 14. Kadiomis ego!. (1994) Asia Opsoiodisa Z33(6) 693-701. 15. Ripeki eai. (1993) Sapseg I eTsege 71, 189-196. 16. O'Vugpe eg.a!i. (1994) Eig. IN). oi Sapseg ZOD(11) 1682-1687. 17. Ripeki esa!. (1994) Vg. in). oi Sapseg 70, 886-892. " 18. Ripeki ey. and. (1994) Sapseg Kev. 54, 5895-5901. from p. 19. Ripeki ega!i. (1996) Yipi. 3. Sapseg 65, 870-874. . 20. Vapkz ei.a!. (1992) Apiisapseg Ogydv. Z, 519-523. and?" 21. Ketsri and Kmoiv (1992) Sapseg Kev. 52, 6074-6078. 22. I'm going to sleep!. (1994) Ipiegpaiopai! doshigpay! oi Rapsgeaiiuiodu 16, 277-280. 23. Naitosis ei.ai!. (1995) Sapseg Kev. 55, 280-287. -I 24. Naitosis eg.a!. (1994) Sapseg I etsCegz 85, 111-118. 25. Oip eiya!. (1994) 3. Sapseg Kez. Sp. Opsoi 120, 519-528 me) 26. Op ega!. (19940 Sapseg Kezv. 54, 1035-1041. i5» 27. dip eka!. (1995) Ipi. U. Sapseg 63, 257-262. 28. Keie ea)|. (1994) Tne Rgoziaye 25, 29-38. sh- 29. Ripeki eiai. (1994) Yipi. U. Sapseg 57, 574-580. i» 30. Kaidiomis eiaI. (1992) R.5.E.V.M. 200, 394-401. 31. Kaidshiomis egai. (1994) Asia Opsoodisa 33(6) 693-701. 32. Ripeki eiai. (1993) Sapseg I eTsegz 71, 189-196. 33. Ripeki Egai. (1994) Vg. 9. oi Sapseg 70, 886-892.
З4. Ріпекі еї. а). (1994) Сапсег Кев. 54, 5895-5901.C4. They are mature. and). (1994) Sapseg Kev. 54, 5895-5901.
Ф) Посилання на всі ці публікації включено у текст опису цього винаходу. ка Сполуки цього винаходу являють собою нові, цілеспрямовані цитотоксичні пептидні гормони, які включають антрацикліновий цитотоксичний агент, такий як ОХ чи ЮОМ-БОХ, кон'юговані з пептидним гормоном, таким як 6о аналоги ІН-КН, бомбесин та соматостатин. Ці кон'югати цитотоксичних пептидних гормонів розроблено для лікування пухлин, які несуть специфічні для кон'югата рецептори, наприклад, ракових пухлин грудної залози, яєчника, ендометрію, простати, підшлункової залози, товстої кишки, шлунку та легенів. Деякі з цих (некон'югованих) антрациклінових цитотоксичних агентів, запропоновані згідно з цим винаходом, є новими рег зе і мають високу активність; однак, рівень їхньої токсичності є надто високим для того, щоб їх можна було 65 Застосовувати в некон'югованій формі. Даунсамін-модифіковані аналоги ОХ, представлені в цьому винаході, під час проведення досліджень розроблялися як нові, високоактивні аналоги ОХ, які не мають перехресної резистентності і здатні утворювати разом з пептидними носіями ковалентні кон'югати.F) References to all these publications are included in the text of the description of the present invention. ka The compounds of the present invention are new, targeted cytotoxic peptide hormones, which include an anthracycline cytotoxic agent, such as OX or YOM-BOH, conjugated to a peptide hormone, such as 6o analogues of IN-KN, bombesin and somatostatin. These cytotoxic peptide hormone conjugates are designed to treat tumors that carry conjugate-specific receptors, such as breast, ovarian, endometrial, prostate, pancreatic, colon, gastric, and lung cancers. Some of these (unconjugated) anthracycline cytotoxic agents proposed according to the present invention are novel and highly active; however, their level of toxicity is too high to be used in unconjugated form. Daunsamine-modified analogues of OX, presented in this invention, were developed during research as new, highly active analogues of OX, which do not have cross-resistance and are able to form covalent conjugates together with peptide carriers.
Утворення стабільних ковалентно зв'язаних кон'югатів з повним збереженням біологічної активності їхніх складових було досягнуто завдяки використанню спейсера - дикарбонової кислоти, зокрема глутарової кислоти.The formation of stable covalently bound conjugates with full preservation of the biological activity of their components was achieved thanks to the use of a spacer - dicarboxylic acid, in particular glutaric acid.
Одна карбоксильна група спейсера утворює складноефірний зв'язок з групою 14-ОН в ОХ або ОМ-0ОХ, а інша карбоксильна група спейсера утворює карбоксамідний зв'язок з обгрунтовано вибраною вільною аміногрупою пептидного носія. Сполуки цього винаходу репрезентовані загальною формулоюOne carboxyl group of the spacer forms an ester bond with the 14-OH group in OH or OM-OH, and the other carboxyl group of the spacer forms a carboxamide bond with a reasonably selected free amino group of the peptide carrier. The compounds of the present invention are represented by the general formula
О014-0-в-Р (І) яка відрізняється тим, що С має загальну формулу 70 десO014-0-v-P (I), which differs in that C has the general formula 70 des
Ї Он Ї. (І) - (8) : я о он оY He Y. (I) - (8) : I o he o
ЕЕ но "0" означає складову С) з боковим ланцюгом в положенні 14,EE no "0" means component C) with a side chain in position 14,
К-являє собою Н або -С(0)-(СН 2)п-С(О)-, і п-:0-7,K-represents H or -C(0)-(CH 2)n-C(O)-, and n-:0-7,
К являє собою МН 5 або ароматичну, насичену або частково насичену 5- або б--ленну гетероциклічну сполуку з принаймні одним атомом азоту в кільці і - як варіант - з бутадієновою складовою, приєднаною до с суміжних атомів вуглецю згаданого кільця з утворенням біциклічної системи, Ге)K represents MH 5 or an aromatic, saturated or partially saturated 5- or b-heterocyclic compound with at least one nitrogen atom in the ring and - as an option - with a butadiene component attached to the adjacent carbon atoms of the mentioned ring to form a bicyclic system, Gee)
Р являє собою Н або пептидну складову, оптимально ІЇНКН, аналог соматостатину чи бомбесину, не виключаючи, однак, інші фізіологічно активні пептиди. Зокрема, бажаними є ті аналоги ІНКН, які мають спорідненість до рецепторів пухлинних клітин, особливо аналоги, в яких складова О-Іувз знаходиться в положенні б, а також аналоги соматостатину та бомбесину зі скороченою формулою. Проте, якщо К' являє З собою МН», тоді Е та Р є іншими, ніж Н. Якщо ЕК та Р являють собою Н, тоді К' є іншим, ніж МН». рч-P is H or a peptide component, optimally IINKN, an analogue of somatostatin or bombesin, not excluding, however, other physiologically active peptides. In particular, those analogs of INCN that have an affinity for tumor cell receptors are desirable, especially analogs in which the O-Iuvz component is in position b, as well as analogs of somatostatin and bombesin with a shortened formula. However, if K' is a MN", then E and P are other than H. If EC and P are H, then K' is different than MH". rch-
Під час проведення досліджень, пов'язаних з цим винаходом, було виявлено нову синтетичну реакцію. Було не лише виявлено те, що доксорубіцин та його похідні можуть зв'язуватись через дикарбоксильну складову в З положенні 14 з утворенням нових фармакологічно ефективних кон'югатів, але й знайдено новий шлях утворення Ге) частково насичених гетероциклічних складових з суміжних та відокремлених первинних амінів, таких як о,р- або осу-гідрокси. Особливої уваги в цьому винаході заслуговує утворення складових 2"-піролініл та - 1",8"-тетрагідропіридиніл на дауносаміновому цукрі. Проте цю реакцію застосовують у більш широкому аспекті.During research related to this invention, a new synthetic reaction was discovered. It was not only found that doxorubicin and its derivatives can bind through the dicarboxyl component in C-position 14 with the formation of new pharmacologically effective conjugates, but also found a new way of forming He) partially saturated heterocyclic components from adjacent and separated primary amines, such as o,p- or osu-hydroxy. The formation of the components 2"-pyrrolinyl and - 1",8"-tetrahydropyridinyl on daunosamine sugar deserves special attention in this invention. However, this reaction is used in a wider aspect.
Б--а 6-членні частково насичені гетероциклічні складові можуть утворюватися у випадку, коли суміжні або відокремлені гідроксиаміни реагує з галоген-заміщеним альдегідом, який має 2 або З складові між альдегідовим « дю атомом вуглецю і атомом вуглецю з групою гало. Такі складові можуть бути лише метиленовими групами або з складатися із різних атомів, наприклад, включати атом кисню. Реакція відбувається у три стадії. Значна с надлишкова кількість галоальдегіду реагує з кислотною сіллю гідроксиаміну, оптимально в полярному інертному :з» безводному органічному розчиннику. Таким чином утворюється п'ятичленне оксазолідинове кільце (або шестичленне тетрагідрооксазинове кільце), за допомогою конденсації альдегідної групи гідроксильною або аміно групами. Цей продукт обробляють органічною основою, оптимально третинним аміном, внаслідок чого елементи - 35 гідрогалогенової кислоти елімінуються з положення між галогеновою складовою першого галогенальдегіда і другою аміногрупою оксазолідину або 1,3-тетрагідрооксазинового кільця, з утворенням злитої кільцевої (о) структури шляхом приєднання 5- або б-членного кільця. Далі основу нейтралізують слабкою кислотою, 1» оптимально органічною кислотою, наприклад кристалізованою оцтовою кислотою. Обробка водним розчином кислоти, оптимально органічної кислоти, відкриває оксазолідинову або 1,3-тетрагідрооксазину частину злитого -і 20 кільця. Для фахівців є зрозумілим те, що - в залежності від вихідного альдегіду - кінцеве азот-вміщуючеB--a 6-membered partially saturated heterocyclic compounds can be formed when adjacent or separated hydroxyamines react with a halogen-substituted aldehyde that has 2 or 3 components between the aldehyde carbon atom and the carbon atom with the halo group. Such components can be only methylene groups or consist of different atoms, for example, include an oxygen atom. The reaction takes place in three stages. A significant excess of haloaldehyde reacts with an acid salt of hydroxyamine, optimally in a polar inert anhydrous organic solvent. In this way, a five-membered oxazolidine ring (or a six-membered tetrahydrooxazine ring) is formed by condensation of an aldehyde group with hydroxyl or amino groups. This product is treated with an organic base, optimally a tertiary amine, as a result of which elements - 35 of the hydrohalic acid are eliminated from the position between the halogen component of the first haloaldehyde and the second amino group of the oxazolidine or 1,3-tetrahydrooxazine ring, with the formation of a fused ring (o) structure by attaching 5- or b-membered ring. Next, the base is neutralized with a weak acid, preferably an organic acid, for example, crystallized acetic acid. Treatment with an aqueous solution of an acid, optimally an organic acid, opens the oxazolidine or 1,3-tetrahydrooxazine part of the fused -i 20 ring. For specialists, it is clear that - depending on the original aldehyde - the final nitrogen-containing
ГТ» кільце може містити принаймні один з зазначених вище додаткових гетероатомів. Загальний шлях реакції можна проілюструвати таким чином: -С-я-с- (т) з» о ОН ОоМНує ох о вноThe HT" ring may contain at least one of the above-mentioned additional heteroatoms. The general path of the reaction can be illustrated as follows:
ММ И 20 во С-(СнНата т (М) 0 МНОосняхMM I 20 in C-(SnNata t (M) 0 MNOosnyah
МИ -- т ть 65 Сн-А(сНна-т)МИ -- т т 65 Сн-А(сНна-т)
ГІ й -ен,GI and -en,
КОМИ я-WHO I-
СшнАеНна-тSshnAeNna-t
ТТ (М) /0 но п х /"TT (M) /0 no p x /"
МУ де Х' являє собою галоген, оптимально бромо або йодо, краще йодо,MU where X' is a halogen, optimally bromo or iodo, preferably iodo,
У являє собою СН», ОСН2, СНо-СН», 7 є нульовим або СН»U represents СН», ОСН2, СНо-СН», 7 is zero or СН»
Якщо 7 є нульовим, альдегідна складова на першій стадії утворює 5-членне оксазолідинове кільце. Якщо 7 являє собою СН 25, альдегідна складова утворює б--ленне 1,3-тетрагідрооксазинове кільце. Оскільки такі типи утворення кілець є добре відомими, в комбінації з замиканням циклу, зумовленим галогеналкановим боковим ланцюгом у основному середовищі, наприклад, третинним аміном у безводному середовищі, реакція є новою та оригінальною.If 7 is zero, the aldehyde component in the first stage forms a 5-membered oxazolidine ring. If 7 is CH 25, the aldehyde component forms a β-lens 1,3-tetrahydrooxazine ring. Since these types of ring formation are well known, in combination with ring closure induced by a haloalkane side chain in a basic environment, such as a tertiary amine in an anhydrous environment, the reaction is novel and original.
Фігура 1 являє собою графік зміни об'єму естроген-незалежних ракових пухлин молочної залози у мишей (МХТ) для різних рівнів дозування сполук цього винаходу і ОХ. сFigure 1 is a graph of changes in the volume of estrogen-independent breast cancer tumors in mice (MCT) for different dosage levels of the compounds of the present invention and OX. with
Фігура 2 являє собою графік зміни об'єму естроген-незалежних ракових пухлин молочної залози у мишей о (МХТ) для різних рівнів дозування однієї зі сполук цього винаходу, сполуки відомого рівня техніки, ОХ і в контрольній групі тварин.Figure 2 is a graph of changes in the volume of estrogen-independent mammary tumors in mice (MHT) for different levels of dosage of one of the compounds of the present invention, a compound of the known state of the art, and in a control group of animals.
Фігура З являє собою графік ефективності деяких цитотоксичних аналогів | НКН на виживання мишей (МХТ) із естроген-незалежними раковими пухлинами молочної залози. «ІFigure C is a graph of the effectiveness of some cytotoxic analogues NCS on the survival of mice with estrogen-independent mammary tumors. "AND
Фігура 4 являє собою графік зміни об'єму пухлини у самців копенгагенських щурів з трансплантантами щурячої карциноми простати Юиппіпд К-3327-Н впродовж лікування тварин відомим раніше агоністом і однією зі - сполук цього винаходу. «ІFigure 4 is a graph of the change in tumor volume in male Copenhagen rats with transplants of rat prostate carcinoma Yuppipd K-3327-H during the treatment of animals with a previously known agonist and one of the compounds of the present invention. "AND
Фігура 5 являє собою графік, який відображає вплив лікування однією зі сполук цього винаходу і відповідним цитотоксичним аналогом І Н-КН на об'єм злоякісної пухлини простати Оиппіпд К-3327-Н у щурів. ї-оFigure 5 is a graph showing the effect of treatment with one of the compounds of the present invention and the corresponding cytotoxic analogue of I H-KN on the volume of the malignant prostate tumor Oippipd K-3327-H in rats. oh
Фігура б являє собою графік, який відображає вплив лікування однією зі сполук цього винаходу і ї- відповідним цитотоксичним аналогом І Н-КН на вагу тіла копенгагенських щурів з трансплантантами щурячої карциноми простати Юиппіпд К-3327-НFigure b is a graph that shows the effect of treatment with one of the compounds of the present invention and its corresponding cytotoxic analog I H-KN on the body weight of Copenhagen rats with transplants of rat prostate carcinoma Yuppipd K-3327-H
Фігура 7 являє собою графік, що відображає інгібування зростання пухлини, яке досягається за допомогою « лікування однією зі сполук цього винаходу і ОХ.Figure 7 is a graph showing inhibition of tumor growth, which is achieved by treatment with one of the compounds of the present invention and OX.
Складова ОО при заміщенні радикалу К' певними прийнятними групами має субскладові з додатковими - с позначеннями С)/-Ов, з яких субскладові 02-Ов є новими цитотоксичними складовими. а К має оптимальні значення, при яких одержують бажані складові Сх, позначені в дужках: МН 5» (0), "» піролідин-1-іл (02), ізоіндолін-2-іл (05), З-піролін-1-іл. (04), З-піролідон-1-іл (С5), 2-піролін-1-іл (Ов),The OO component, when the K' radical is replaced by certain acceptable groups, has subcomponents with additional designations C)/-Ov, of which the 02-Ov subcomponents are new cytotoxic components. and K has optimal values at which the desired Cx components are obtained, indicated in brackets: МН 5» (0), "» pyrrolidin-1-yl (02), isoindolin-2-yl (05), З-pyrrolin-1- Fig. (04), 3-pyrrolidone-1-yl (C5), 2-pyrrolin-1-yl (Ov),
З-піперидон-1-іл (07), або 1,3-тетрагідропіридин-1-іл (Ов).Z-piperidon-1-yl (07), or 1,3-tetrahydropyridin-1-yl (Ov).
Отже, якщо К-Р являє собою Н, і -К' являє собою -МН 5, 04 являє собою БОХ, якщо К-Р являє собою Н і-К -і являє собою піролідин-1-іл, Со являє собою 3'-деаміно-3'-(піролідин-1"-іл)-доксорубіцин (0 5), якщо К-Р являє собою Н і -К' являє собою ізоіндолін-2-іл, Оз являє собою 3'-деаміно-3'-(ізоіндолін-2"-іл)-доксорубіцин (0 5); якщоSo, if K-P is H, and -K' is -MH 5, 04 is BOH, if K-P is H and -K -i is pyrrolidin-1-yl, Co is 3' -deamino-3'-(pyrrolidin-1"-yl)-doxorubicin (0 5), if K-P is H and -K' is isoindolin-2-yl, Oz is 3'-deamino-3' -(isoindolin-2"-yl)-doxorubicin (0 5); if
К-Р являє собою НН і -кк являє собою З-піролін-1-іл,; 0 4 являє собоюK-P represents NN and -kk represents Z-pyrrolin-1-yl,; 0 4 represents
Її 3'-деаміно-3'-(3"-піролін-1"-іл)у-доксорубіцин (0/4); якщо К-Р являє собою Н і -К' являє собою 5-піролідон-1-іл, 0 5 -1 50 являє собою 3'-деаміно-3'-(3"-піролідон-1"-іл)у-доксорубіцин (0 5); якщо К-Р являє собою Н і -К' являє собою 2-ругт.оїїпе-1-іл, Об являє собою 3'-деаміно-3'-(2"-піролін-1"-іл)-доксорубіцин (0 6), якщо К-Р являє собою Н і-Е чз» являє собою З-піперидон-1-іл, ОО , являє собою 3'-деаміно-3'-(3"-піперидон-1"-іл)-доксорубіцин (0 7), якщо К-Р являє собою НН і -К являє особою 1,3-тетрагідро-піридин-1-іл, в являє собою 3-деаміно-3'-(1",3"-тетрагідропіридин-1"-іл)-доксорубіцин (Ов).Its 3'-deamino-3'-(3"-pyrroline-1"-yl)y-doxorubicin (0/4); if K-P represents H and -K' represents 5-pyrrolidone-1-yl, 0 5 -1 50 represents 3'-deamino-3'-(3"-pyrrolidone-1"-yl)y-doxorubicin (0 5); if K-P represents H and -K' represents 2-rut.proper-1-yl, Ob represents 3'-deamino-3'-(2"-pyrrolin-1"-yl)-doxorubicin (0 6 ), if K-P represents H and -E chz" represents 3-piperidon-1-yl, OO , represents 3'-deamino-3'-(3"-piperidon-1"-yl)-doxorubicin ( 0 7), if K-P represents NN and -K represents 1,3-tetrahydro-pyridin-1-yl, v represents 3-deamino-3'-(1",3"-tetrahydropyridin-1"- il)-doxorubicin (Ov).
Сполуки, які містять дауносаміновий азот в п'ятичленному кільці з алкілювальною функцією є в 10-50 разів більш активними іп міїго, ніж їхні аналоги, які містять дауносаміновий азот в шестичленному кільці. (Такими о парами є ОБ і 97, а також Ов і Ов). де В оптимальних варіантах реалізації цього винаходу в речовині формули 077-О-В-Р, В. і Р є іншими, ніж водень. Якщо Р є іншим, ніж водень, тобто якщо він являє собою РІ, Р2 і РЗ, оптимально якщо Р1 являє собою 60 носій агоніста І! Н-КН, носій антагоніста /Н-КН або носій скороченого аналога І Н-КН, Р2 являє собою скорочений аналог соматостатину, і РЗ являє собою антагоніст бомбесину.Compounds that contain a daunosamine nitrogen in a five-membered ring with an alkylating function are 10-50 times more active against miigo than their counterparts that contain a daunosamine nitrogen in a six-membered ring. (Such o pairs are OB and 97, as well as Ov and Ov). where In the optimal variants of the implementation of the present invention in the substance of the formula 077-O-B-R, V. and R are other than hydrogen. If P is other than hydrogen, i.e. if it represents PI, P2 and P3, optimally if P1 represents 60 carriers of the agonist I! H-KN, the carrier of the antagonist /H-KN or the carrier of the shortened analog AND H-KN, P2 is a shortened analog of somatostatin, and RZ is an antagonist of bombesin.
Оптимально, Р1 являє собою Ааа-ВрЬ-Ссс-Зег- Туг-О-І ув(Ххх)-І еи-Аго-Рго-Пай, де (Ххх) являє собою водень або замісник діаміно, наприклад, А»Ви або АР", де якщо:Optimally, P1 is Aaa-PrB-Css-Zeg-Tug-O-I uv(Xxx)-I ei-Ago-Rho-Py, where (Xxx) is hydrogen or a diamino substituent, for example, A»Vy or AR ", where if:
Ааа являє собою бір, тоді ВрЬ являє собою Нів, Ссс являє собою Ттгр, і Сад являє собою С1Іу-МН», 65 Ааа являє собою Ас-О-Ма|(2), Ас-ЮО-Рпе або АсОр-Рне(4сСІ), тоді ВЬБЬ являє собою О-РН(4СІ) або О-РНе, Ссс являє собою О-Ра/(3), і кожний з О-Тгтр та Ода являє собою О-Аїа-МН 5; і якщо Ааа-Врр-Ссс являє собою Ас, тоді раа являє собою -МН-СНО-СНЗ; тAaa is Bir, then Brb is Niv, Css is Ttgr, and Sad is C1Iu-MH", 65 Aaa is As-O-Ma|(2), As-UO-Rpe or AsOr-Pne(4cSi ), then ВББ is О-РН(4СІ) or О-РНе, Ссс is О-Ра/(3), and each of О-Тгтр and Ода is О-Aia-МН 5; and if Aaa-Brr-Sss is As, then raa is -MH-CHO-CHZ; t
РаівАавгстув-ВЬО-Ттр-Ї х8-Ссс-сувг прог МН» де: якщо Ааа являє собою О-РПе, тоді ВБЬ являє собою Туг, Ссс являє собою Маї і Бад являє собою Тиг абоRaivAavgstuv-BYO-Ttr-Y x8-Sss-suvg prog MN" where: if Aaa is O-RPe, then VBB is Tug, Sss is Mai and Bad is Tig or
Тер;і якщо Ааа являє собою О-Тгр, тоді ВЬЬ являє собою РнНе, і Ссс і ай являють собою Тнг; іTer; and if Aaa is O-Tgr, then ВІ is RnNe, and Ссс and ай are Tng; and
РЗ являє собою Ааа-сіІп-Тгр-АІа-МаІ-с1у-Нів-І еи ВЬБ-МН; якщо: Ааа є нульовим, кожний з ЮО-Трі або Ю-Рпе і ВрБ являють собою (СНО 2-МН)Г ем, (СН.-МН)РНе, 70. (СНО-МН)Тгр, (СНо-М)Тас або (СН.-КООМТТас.RZ is Aaa-siIp-Tgr-AIa-MaI-s1u-Niv-I ey ВББ-МН; if: Aaa is zero, each of ХО-Tri or Х-Рпе and ВрБ are (СНО 2-МН)Г em, (СН.-МН)РНе, 70. (СНО-МН)Тгр, (СНо-М) Tas or (SN.-KOOMTTas.
В нових сполуках цього винаходу, які містять аналоги І Н-КН, цитотоксичний радикал ОО приєднується до бокового ланцюга О-І уз аналогів І Н-КН або зв'язаної з ними групи Ххх через спейсер - дикарбонову кислоту, як це видно з Формули МІЇ:In the new compounds of the present invention, which contain analogues of I H-KN, the cytotoxic radical OO is attached to the side chain O-I of the analogues of I H-KN or the Xxx group bound to them through a spacer - dicarboxylic acid, as can be seen from Formula MII :
Ааа-ВЬБ-Сссо-Зег-Туг-О-І ув(Хххут(О 17-0-К)п-І еи-Агоа-Рго-Юда (МІ!) де т дорівнює 1 або 0, і п дорівнює 1 або 2, за умови, що коли т дорівнює 1, тобто (Ххх) являє собою АоВи або АоР', п дорівнює 1 або 2, мЛпеп т дорівнює 0, тобто (Ххх) являє собою Н, п дорівнює 1.Aaa-ВББ-Сссо-Zег-Туг-О-И ув(Хххут(О 17-0-К)п-И ей-Agoa-Rgo-Yuda (MI!) where t is equal to 1 or 0, and n is equal to 1 or 2, provided that when t is 1, i.e. (Xxx) is AoVy or AoP', n is 1 or 2, mLpep t is 0, i.e. (Xxx) is H, n is 1.
В нових сполуках цього винаходу, які містять аналоги соматостатину, цитотоксичний радикал О приєднується до аміно-закінчення аналогів соматостатину через спейсер -дикарбонову кислоту, як це видно з Формули МІП: тт. ЗБЗМБЗБЗЗБЗБЗБЗ3Ш31 МІ си-О0-РеАав-сув-Вов-С-Т ері ме ссс-сув-ОСаа-МНо тIn the new compounds of the present invention, which contain analogs of somatostatin, the cytotoxic radical O is attached to the amino-terminus of analogs of somatostatin through a spacer -dicarboxylic acid, as can be seen from the Formula MIP: vol. ЗБЗМБЗБЗЗБЗБЗБЗ3Ш31 MI si-O0-ReAav-suv-Vov-S-T eri me sss-suv-OSaa-MNo t
В нових сполуках цього винаходу, які містять аналоги антагоністів бомбесину, цитотоксичний радикал о приєднується до аміно-закінчення антагоністів бомбесину, як це видно з Формули ІХ: 012-0-в-Ава-СіІп-Тгр-АІа-УаІ-СІу-Нів-І ем ВББ-МН» (ІХ)In the new compounds of the present invention, which contain analogues of bombesin antagonists, the cytotoxic radical o is attached to the amino terminus of bombesin antagonists, as can be seen from Formula IX: And em VBB-MN" (IX)
До найбільш оптимальних варіантів реалізації цього винаходу належать пептидні кон'югати, які містять ФО. і Ов с 29 як цитотоксичні радикали і глутарову кислоту - як дикарбоновокислотний спейсер, що утворює 14-О-естерний Ге) зв'язок з СО (доксорубіцином) або Ов (2-піроліно-доксорубіцином) і карбоксамідний зв'язок з пептидним носієм.Peptide conjugates that contain FD belong to the most optimal implementation options of this invention. and Ov with 29 as cytotoxic radicals and glutaric acid as a dicarboxylic acid spacer that forms a 14-O-ester He) bond with CO (doxorubicin) or Ov (2-pyrrolino-doxorubicin) and a carboxamide bond with a peptide carrier.
До найбільш оптимальних варіантів реалізації цього винаходу належать цитотоксичні аналоги І! Н-КН таких формул: 1. сір-Нів-Тгр-Зег- Туг-О-І ув(О417-0-91І0-І еи-Аго-Рго-СІу-МН»; З то 2. сір-Нів-Тгр-Зег- Туг-О-І ув(Ов17-0-910-Ї еи-Агу-Рго-С1уУ-МН»; - цитотоксичні аналоги соматостатину таких формул: « т ; щи1-0-9-0-Р Не-слв- ГА О- ТерА ум ану п-МНа (Се) ' ї- ве 0-9 САРИпе-сСув Гу О- Ттр- ув-масув ТпеАМН. пн ; ви-о-аО-ТтвАСУуВРНе-С-ТтвА у ТА См ТА МНа « плоти ; 50 дет О-91-О- Ттр-Суг-Рне-О-Т те иа-Ти- Су вт МН З с гтют 1 ; апа :з» ви О0-аС-РАв-СУВ ТУ О-Ттв- ув масув ТтрАМН. т ; дв -0-90-РНе-Ств- Те 0-Тер- им астми Ттр-МНа - і цитотоксичні аналоги антагоністів бомбесину таких формул:The most optimal implementation options of this invention include cytotoxic analogues of I! H-KN of the following formulas: 1. Sulfur-Niv-Tgr-Zeg-Tug-O-I uv(О417-0-91І0-I ей-Ago-Rho-Сиу-МН"; Z to 2. Sulfur-Niv-Tgr -Zeg- Tug-O-I uv(Ov17-0-910-І ей-Агу-Рго-С1уУ-МН"; - cytotoxic analogs of somatostatin of the following formulas: "t; shchy1-0-9-0-Р Ne-slv - GA O- TerA um anu p-MNa (Se) ' іve 0-9 SARIpe-sSuv Gu O- Ttr-uv-masuv TpeAMN. pn; vy-o-aO-TtvASUuVRNe-S-TtvA u TA Sm TA MNa " rafts; 50 det O-91-O- Ttr-Sug-Rne-O-T te ia-Ty- Su ut MN Z s gtyut 1 ; apa :z" vy O0-aS-RAv-SUV TU O-Ttv - in the mass of TtrAMN. t; dv -0-90-РНе-Ств- Te 0-Ter-im asthma Ttr-МНа - and cytotoxic analogues of bombesin antagonists of the following formulas:
Ге» 9. 24 717-О-д-оп- Тгтр-АІа-Ма!-СІу-Нів-І еи (СНо-МН) еи-МН»; їх 10. Ов17-О-дн-оІп-Тгр-Ага-Уа!-СІу-Нів-І еи (СНо-МН) еш-МН»; 11. 0474-0-9-О-Трі-СІп-Тгр-Аіа-МаІ-СІу-Нів-І ем (СНо-МН еи-МН»; і - 7о 12. Ов617-0-9-О-Трі-СІп-Тгр-Аіа-Ма!І-СІу-Нів-І ешщСНо-МН) еи-МН».Ge» 9. 24 717-O-d-op- Tgtr-AIa-Ma!-SIu-Niv-I ей (СНо-МН) ей-МН»; their 10. Ov17-O-dn-oIp-Tgr-Aga-Ua!-SIu-Niv-I ey (SNo-MN) esh-MN"; 12. SiP-Tgr-Aia-Ma!I-SIu-Niv-I eshshSNo-MN) ei-MN".
Т» В новому способі утворення частково насиченого гетероциклічного кільця з атомом азоту суміщеного або відокремленого - тобто о,3- або оу-гідрокси аміну першу стадії реакції проводять в безводному інертному органічному полярному негідроксильному (апротонному) розчиннику, оптимально - в диметилформаміді, із в Значним, оптимально - ЗО-разовим надлишком галогенальдегіду, з яких найефективнішими /-є 4-йодобутиральдегід і 5-йодовалеральдегід. Проте винахід не обмежується цими сполуками, і замість йодо- (Ф. використовують також бромо-. Цю реакцію першої стадії способу, які і наступні стадії, виконують при ко температурі оточуючого середовища. Стадію перетворення в основу виконують у надлишку, оптимально у 2-4-разовому, органічної основи. Для цього прийнятними є такі третинні аміни, як тріалкіламіни. во Утворене таким чином біциклічне кільце є відкритим для вивільнення суміщеної чи відокремленої гідроксильної групи шляхом обробки органічною кислотою в присутності води. Можуть використовувати розбавлений водний розчин трифторооцтової кислоти, оптимально в інертному органічному розчиннику, наприклад, в ацетонітрилі. Одержаний продукт очищають шляхом видалення летких компонентів при зменшеному тиску, надлишок галогене екстрагують гексаном, і залишок очищають на ВЕРХ. 65 Скорочення Для опису пептидів та їхніх похідних згідно з цим винаходом застосовують традиційні скорочення для амінокислот, які є загальноприйнятими в галузі хімії пептидів і рекомендовані КомісієюT» In the new method of formation of a partially saturated heterocyclic ring with a combined or separated nitrogen atom - i.e. o,3- or o-hydroxy amine, the first stage of the reaction is carried out in an anhydrous inert organic polar non-hydroxyl (aprotic) solvent, optimally - in dimethylformamide, with significant , optimally - a 30-fold excess of haloaldehyde, of which 4-iodobutyraldehyde and 5-iodovaleraldehyde are the most effective. However, the invention is not limited to these compounds, and bromo- is also used instead of iodo- -single, organic base. Tertiary amines such as trialkylamines are acceptable for this purpose. The bicyclic ring thus formed is open to liberation of the combined or separated hydroxyl group by treatment with an organic acid in the presence of water. A dilute aqueous solution of trifluoroacetic acid can be used, optimally in in an inert organic solvent, e.g., in acetonitrile. The resulting product is purified by removing the volatile components under reduced pressure, the excess halogen is extracted with hexane, and the residue is purified by HPLC. 65 Abbreviations To describe the peptides and their derivatives according to the present invention, traditional abbreviations are used for amino acids that are generally accepted in the field of chemistry of peptides and recommended by the Commission
ІОРАС-ІШВ з біохімічної номенклатури (Ешигореап .-). Віоспет., 138, 9-37(19841.IORAS-ISV on biochemical nomenclature (Eshigoreap .-). Viospet., 138, 9-37(19841.
Скорочення для окремих залишків амінокислот грунтуються на звичайних назвах амінокислот, наприклад, "бір" означає піроглутамову кислоту, "Нів" означає гістидин, "Тр" означає триптофан тощо. Скорочення відображають І -ізометричну форму амінокислот, за винятком спеціально оговорених моментів, наприклад, "Зег" означає І -серин, а "О-І ув" - О-лізинAbbreviations for individual amino acid residues are based on common amino acid names, for example, "Bir" means pyroglutamic acid, "Niv" means histidine, "Tr" means tryptophan, etc. Abbreviations reflect the I-isometric form of amino acids, except where specifically stated, for example, "Zeg" means I-serine, and "O-I uv" means O-lysine
Скорочення нетрадиційних амінокислот цього винаходу такі: "О-Ма(2)" означає О-3-(2-нафтил)аланін, і "р-РаІ(3)" означає О-3-(З-піридил)аланін, "О-Рпе(4СІ)" означає Ю-4-хлорофенілаланін.Abbreviations of unconventional amino acids of the present invention are as follows: "O-Ma(2)" means O-3-(2-naphthyl)alanine, and "p-RaI(3)" means O-3-(3-pyridyl)alanine, "O -Rpe(4CI)" means Y-4-chlorophenylalanine.
Написання пептидних послідовностей відповідає вимогам згаданого договору; отже амінокислота з 7/0. М-закінченням позначається в лівій частині напису, в той час як амінокислота з С-закінченням позначається в правій частині напису, наприклад, сіІр-Нів-Тгр.The writing of peptide sequences meets the requirements of the mentioned contract; so an amino acid with 7/0. An M-terminus is indicated on the left side of the inscription, while an amino acid with a C-terminus is indicated on the right side of the inscription, for example, siIr-Niv-Tgr.
Формула ГІ еи (СНО-МН)ец-МН»о описує відновлений пептидний зв'язок між лейцином та амідним залишком лейцину на С-закінченні пептидної послідовності. Використовуються також інші скорочення:The formula GI еи (СНО-МН)ец-МН»о describes the restored peptide bond between leucine and the amide residue of leucine at the C-terminus of the peptide sequence. Other abbreviations are also used:
Аави: діамінобутирова кислотаAavs: diaminobutyric acid
АР: діамінопропіонова кислотаAR: diaminopropionic acid
ВМ: бомбесин реанент ВОР: бензотріазол-1-ілокситрисі(ідиметиламіно)фосфонію гексафторофосфатVM: bombesin reanent VOR: benzotriazol-1-yloxytris(idimethylamino)phosphonium hexafluorophosphate
ПІРЕА: М,М-діїізопропілетиламін рм-рох: дауносамін-модифікований доксорубіцинPIREA: M,M-diisopropylethylamine rm-roh: daunosamine-modified doxorubicin
ОМЕ: М,М-диметилформамідOME: M,M-dimethylformamide
ОМтас: 5,5-диметил-тіазолідин-4-карбонова кислота рох: доксорубіцинOMtas: 5,5-dimethyl-thiazolidine-4-carboxylic acid roh: doxorubicin
Етос: 9-флуоренілметилоксикарбоніл аіє -К(0)-СН.-СНО-СНо-«(0)-, глутарил счEthos: 9-fluorenylmethyloxycarbonyl aie -К(0)-СН.-СНО-СНо-«(0)-, glutaryl sc
СІБО: ангідрид глутарової кислотиSIBO: glutaric anhydride
НОВІ 1-гідроксибензотріазол і)NEW 1-Hydroxybenzotriazole i)
НО-аІ ОН: глутарова кислотаНО-аИ ОН: glutaric acid
НоБЗи: М-гідроксисукцинімідNoBZy: M-hydroxysuccinimide
ВЕРХ: високоефективна рідинна хроматографія «г зо ТЕА: трифторооцтова кислотаHPLC: high-performance liquid chromatography with TEA: trifluoroacetic acid
Тас: тіазолідин-4-карбонова кислота -Tas: thiazolidine-4-carboxylic acid -
Трі: 2,3,4,9-тетрагідро-1Н-піридої|З,4-в|індол-3-карбонова кислота «гTri: 2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyridoi|3,4-indole-3-carboxylic acid «g
Застосовували аналітичну систему ВЕРХ |ВесКтап апаїуїіса! НРІ С зузіеті, обладнану діодним матричним детектором (модель 168) і оснащену програмним забезпеченням для хроматографії Зузіет Сода ІВесктап), за ісе)We applied the analytical system of HPLC | VesKtap apaiuiisa! NRI C zuzieti, equipped with a diode matrix detector (model 168) and equipped with software for chromatography Zuziet Soda Ivesktap), according to ISE)
Зб Допомогою якого здійснюється управління хімічними реакціями і перевірка хімічної чистоти сполуки цього ї- винаходу. Застосовували колонку бупатах С-18 (250(4,бмм); розмір пор: ЗО0А; розмір частинок: 12 нм. Система розчинників, яка складалася із двох компонентів: (і) 0,190 ТЕА у воді та (ії) 0,195 ТРА в 709565 водному ацетонітрилі, використовувалась в режимі лінійного градієнту, починаючи з 195 (ії) протягом 1 хвилини. Це було необхідно для контролю за хімічною реакцією. Систему використовували в ізократичному режимі для « проведення контролю чистоти. в с Для виділення та очищення сполуки винаходу застосовували напівпрепаративну систему ВЕРХ модель 342, . ВесКтап). Використовували колонку типу Адоароге ОСЦІ (250(10мм; розмір пор: 300 А; розмір часток: 15 мкм). и?» Система розчинників була тією ж, що описана вище для аналітичної ВЕРХ.Zb With the help of which chemical reactions are controlled and the chemical purity of the compound of this invention is checked. A Bupatakh C-18 column (250(4.bmm); pore size: ZO0A; particle size: 12 nm) was used. The solvent system consisted of two components: (i) 0.190 TEA in water and (ii) 0.195 TPA in 709565 aqueous acetonitrile, was used in a linear gradient mode, starting at 195 (ii) for 1 minute. This was necessary to control the chemical reaction. The system was used in an isocratic mode to "carry out purity control. In c, a semi-preparative HPLC system was used to isolate and purify the compound of the invention model 342, VesKtap). An Adoaroge OSCI column (250 (10 mm; pore size: 300 A; particle size: 15 µm) was used). The solvent system was the same as described above for analytical HPLC.
АналізAnalysis
Для ідентифікації структури похідних доксорубіцину використовували ЯМР-спектрометр АКХЗО0 (Вгикег, -І частота ЗООМГЦ 1Н, частота 75МГц 13) і електродисперсний мас-спектрометр ЯМР Ріппідап-МАТ Т50 7000.To identify the structure of doxorubicin derivatives, we used an NMR spectrometer AKHZO0 (Vhykeg, -I frequency ZOOMHC 1H, frequency 75 MHz 13) and an electrodispersive NMR mass spectrometer Rippidap-MAT T50 7000.
Синтез пептидних носіївSynthesis of peptide carriers
Ме. Пептиди цього винаходу зазвичай вводять у формі фармацевтичне прийнятних нетоксичних солей, ї5» наприклад, у формі солей, утворених приєднанням кислоти. Прикладами таких солей є гідрохлорид, гідробромід, 5ор бульфат, фосфат, фумарат, гліконат, танат, малеат, ацетат, трифтороацетат, цитрат, бензоат, сукцинат, ш- альгінат, памоат, малат, аскорбат, тартрат тощо. Якщо активний компонент призначений для введення у формі ї» таблетки, така таблетка має містити фармацевтично прийнятний розріджувач, який включає зв'язувальну речовину, наприклад, трагакант, зерновий крохмаль або желатин, диспергаційний агент, наприклад, альгінову кислоту, і змащувальну присадку, наприклад, стеарат магнію.Me. Peptides of the present invention are usually administered in the form of pharmaceutically acceptable non-toxic salts, for example, in the form of salts formed by acid addition. Examples of such salts are hydrochloride, hydrobromide, sodium sulfate, phosphate, fumarate, gluconate, tannate, maleate, acetate, trifluoroacetate, citrate, benzoate, succinate, x-alginate, pamoate, malate, ascorbate, tartrate, etc. If the active ingredient is intended for administration in the form of a tablet, such tablet should contain a pharmaceutically acceptable diluent, which includes a binding agent, for example, tragacanth, corn starch or gelatin, a dispersing agent, for example, alginic acid, and a lubricating additive, for example, magnesium stearate.
При необхідності введення у формі рідини застосовують підсолоджування фармацевтично-прийнятних розріджувачів і додавання до них ароматизаторів та смакових добавок; при внутрішньовенному введенніIf it is necessary to introduce in the form of a liquid, sweetening of pharmaceutically acceptable diluents and the addition of flavorings and taste additives are used; with intravenous administration
Ф) ефективним є використання ізотонічного розчину, буферних розчинів фосфатів тощо. ка Фармацевтичні композиції зазвичай містять пептид, кон'югований зі стандартним фармацевтично-прийнятним носієм. Як правило, доза для введення становить від близько 1 до близько 100 мікрограмів пептиду на кілограм бр ваги тіла пацієнта для введення внутрішньовенне; дози для орального введення бувають значно більшими.F) the use of isotonic solution, phosphate buffer solutions, etc. is effective. Pharmaceutical compositions usually contain a peptide conjugated with a standard pharmaceutically acceptable carrier. Typically, the dose for administration is from about 1 to about 100 micrograms of peptide per kilogram of body weight of the patient for intravenous administration; doses for oral administration are much higher.
Загалом, лікування пацієнтів цими пептидами зазвичай проводять у такий самий спосіб, як і лікування в клінічних умовах з використанням інших аналогів І НКН, соматостатину і аналогів доксорубіцину.In general, treatment of patients with these peptides is usually carried out in the same way as treatment in clinical conditions using other analogues of NKN, somatostatin and doxorubicin analogues.
Для одержання біологічного гормонального впливу шляхом приєднання до специфічних рецепторів ці пептиди вводять в організм ссавців внутрішньовенне, підшкірне, внутрішньом'язово чи внутрішньовагінально. У 65 Випадку застосування аналогів | НКН цей вплив передбачає зворотне пригнічення статевої функції, а у випадку застосування аналогів соматостатину - інгібування функції шлунково-кишкового тракту. Ефективні дози змінюються в залежності від форми введення та від конкретного виду хворого ссавця. Одним з прикладів типового дозування є фізіологічний розчин, що містить пептид: цей розчин вводять у дозах від близько 0,1 до 2,5мг/кг ваги тіла пацієнта. Оральним шляхом пептид вводять як у твердій, так і у 18 рідкій формі.These peptides are administered intravenously, subcutaneously, intramuscularly, or intravaginally in order to obtain a biological hormonal effect by binding to specific receptors. In 65 cases of using analogues | According to NKN, this effect involves the reverse inhibition of sexual function, and in the case of the use of somatostatin analogues - inhibition of the function of the gastrointestinal tract. Effective doses vary depending on the form of administration and the specific species of the affected mammal. One example of a typical dosage is a physiological solution containing a peptide: this solution is administered in doses of about 0.1 to 2.5 mg/kg of the patient's body weight. The peptide is administered orally in both solid and liquid form.
Синтез пептидних носіїв цього винаходу виконують за допомогою способів, відомих фахівцям у галузі хімії пептидів. Підсумки щодо застосування прийнятних способів можна знайти ум. ВодапзагкКу, Ргіпсіріеєв ої РеріїдеSynthesis of peptide carriers of the present invention is carried out using methods known to specialists in the field of peptide chemistry. Conclusions on the use of acceptable methods can be found in Art. VodapzagkKu, Rgipsirieev oi Reriide
Зупіпевзів, Зргіпдег-Мепіаг, Неїде!їрегт, 1984. Способи виконання твердофазного синтезу пептидів можна знайти у підручнику таких авторів, як 9У.М. Біемай і 9.0. Моцпг, Зоїй Ріазе Рерііде Зупіпевзіз, Ріегсе Спет. Со.,Zupipevziv, Zrhipdeg-Mepiag, Neide!iregt, 1984. Methods of solid-phase synthesis of peptides can be found in a textbook by such authors as 9U.M. Biemaj and 9.0. Motspg, Zoey Riaze Reriide Zupipevziz, Riegse Speth. Co.,
Косктога, І, 1984 (2пй еа.), а також в огляді, зробленому С. Вагапу еї аї., Іпї 9. Реріїде апа Ргоїеіп 70 Кез. 30, 705-739 (1987). Синтез носіїв аналогів І Н-КН, що їх використовують згідно з цим винаходом, детально наведено в прикладах патенту США 5.258.492, автори Запдог Ва|ив2 і Апагем/ М. Зспайпу, зареєстрованому 2 листопада 1993 року, а також у статтях Ва|ив2 еї аїЇ., Ргос. МаїЇ. Асад. Зсі. ОБА 85, 1637-1641 (1988) і 86, 6318-6322 (1989) і дапаку егйаІ., Ргос. Май. Асад. Зсі. ОБА, 89, 1023-1027 і 972-976 (1992). Синтез носіїв аналогів соматостатину, що їх використовують згідно з цим винаходом, детально наведено в прикладах патенту 7/5 США 4.650.787, зареєстрованому 17 березня 1987 року, автори Апагем/ М. ЗсНаїу і Кеп 7. Саї. Опис цього синтезу можна також знайти в статтях Саї еї аІ.,, Ргос. Май. Асад. сі. БА 83, 1896-1900 (1986) і Ргос.Kosktoga, I, 1984 (2nd ea.), as well as in the review made by S. Vagapu ei ai., Ipi 9. Reriide apa Rgoieip 70 Kez. 30, 705-739 (1987). Synthesis of carriers of analogues of I H-KN, which are used in accordance with this invention, is detailed in the examples of US patent 5.258.492, authors Zapdog Va|iv2 and Apagem/ M. Zspaipu, registered on November 2, 1993, as well as in the articles of Va| iv2 ei aiYi., Rhos. Maya Asad All together. BOTH 85, 1637-1641 (1988) and 86, 6318-6322 (1989) and dapaku egyaI., Rgos. May Asad All together. BOTH, 89, 1023-1027 and 972-976 (1992). The synthesis of the somatostatin analog carriers used in the present invention is detailed in the Examples of US Patent 7/5 4,650,787, filed March 17, 1987, to Apagem/M. Zsnaiu and Kep 7. Sai. A description of this synthesis can also be found in the articles of Sai ei aI.,, Rgos. May Asad si. BA 83, 1896-1900 (1986) and Rhos.
Май. Асад. Зсі. ОБА 84, 2502-2506 (1987). Синтез носіїв антагоністів бомбесину, що їх використовують згідно з цим винаходом, детально наведено в статтях Соу еї аї., 9У. Віої Спет. 263, 5056-5060 (1988) і 264, 14691-14697 (1989), а також Саї еї аї., Реріїдез 13, 267-271 (1992) і Ргос. Май. Асай. Зсі. ОБА 91, 2о 12564-12668 (1994). Синтез похідних доксорубіцину, що їх використовують у цьому винаході, а також утворення їхніх кон'югатів з різними пептидними носіями детально описано в прикладах, що їх наведено нижче у цьому тексті; ці приклади мають ілюстративний характер, і застосування сполук винаходу ними не обмежується.May Asad All together. BOTH 84, 2502-2506 (1987). The synthesis of bombesin antagonist carriers used in accordance with the present invention is detailed in the articles Sou et al., 9U. Vioi Speth. 263, 5056-5060 (1988) and 264, 14691-14697 (1989), as well as Sai ei ai., Reridez 13, 267-271 (1992) and Rhos. May Asai. All together. OBA 91, 2o 12564-12668 (1994). The synthesis of doxorubicin derivatives used in this invention, as well as the formation of their conjugates with various peptide carriers, is described in detail in the examples given below in this text; these examples are illustrative in nature, and the use of the compounds of the invention is not limited to them.
ПРИКЛАД 1.EXAMPLE 1.
Приготування та виділення М-Етос-0ОХ 17-О-геміглутарату. ГаPreparation and isolation of M-Etos-0OH 17-O-hemiglutarate. Ha
Сіль НСІ сполуки ОХ, 5Омг (8бмкмоль) розчиняли в їмл ОМЕ, і додавали ЗОмг (дОмкмоль) Етос-О5и, після чого додавали Зімкл (180мкмоль) СІРЕА. Після перемішування протягом трьох годин проходження реакції і9) оцінювали за допомогою аналітичної ВЕРХ. Розчинник випаровували до сухості у високовакуумному випарнику (Зрееєа Мас), і залишок кристалізували за допомогою перетирання з 0,195 ТЕА в Н2О. Кристали відфільтровували і промивали один раз холодним ефіром, з метою видалення слідів надлишку ЕГтос-О5и. Після висушування в «І ексикаторі одержували т-б2мг 98905-вого очищеного М-Етос-ОХ. Вихід: 94905.The HCI salt of compound OX, 5mg (8bmmol) was dissolved in 1ml of OME, and 3mg (dOmmol) Etos-O5y was added, after which Zimcl (180mmol) SIREA was added. After stirring for three hours, reaction i9) was assessed by analytical HPLC. The solvent was evaporated to dryness in a high vacuum evaporator (Zreea Mas) and the residue was crystallized by trituration with 0.195 TEA in H2O. The crystals were filtered and washed once with cold ether to remove traces of excess EGtos-O5y. After drying in the I desiccator, t-b2mg of 98905 purified M-Etos-OH was obtained. Exit: 94905.
Ця проміжна речовина реагувала протягом доби з 11,4мг (10О0мкмоль) ЗИ 20 в 1їмл безводного ОМЕ у - присутності 26,1мкл (150мкмоль) БІРЕА. Розчинник випаровували в бреей Мас, і залишок масляної речовини «І робили твердим за допомогою перетирання з 0,195-им водним розчином ТРА (об./06.). Одержана у такий спосіб неочищена речовина містить 70956-ий. М-Етос-0ОХ14-О-геміглутарат, 20950 М-Гтос-СОХ, що не прореагував, і і-й 1095 інших домішків (за оцінкою аналітичної ВЕРХ). Цей неочищений продукт застосовують для приготування - пептидних кон'югатів ОХ без додаткового очищення. Далі цей неочищений матеріал розчиняли в 20мл 60905-ого водного розчину ацетонітрилу з вмістом ТЕА 0,195 і піддавали напівпрепаративній ВЕРХ, як кінцевий продукт одержували 45,7мг 9895-вого очищеного М-Етос-0ОХ7-О-геміглутарату. (Вихід: 6495). «This intermediate substance reacted within a day with 11.4 mg (1000 μmol) of ZY 20 in 1 ml of anhydrous OME in the presence of 26.1 μl (150 μmol) of BIREA. The solvent was evaporated in a breai Mas, and the residue of the oily substance «I was made solid by trituration with a 0.195-th aqueous solution of TPA (vol./06.). The crude substance obtained in this way contains 70956th. M-Etos-OOX14-O-hemiglutarate, 20950 unreacted M-Etos-COX, and 1095 other impurities (estimated by analytical HPLC). This crude product is used for the preparation of OH peptide conjugates without additional purification. Next, this crude material was dissolved in 20 ml of 60905 aqueous solution of acetonitrile with a TEA content of 0.195 and subjected to semi-preparative HPLC, as the final product 45.7 mg of 9895 purified M-Etos-0OH7-O-hemiglutarate was obtained. (Output: 6495). "
ПРИКЛАД 2.EXAMPLE 2.
Приготування та виділення 3'-деаміно-3-(піролідин-1"-іл)у-доксорубіцинової солі ТРА (0 Дю») і ів - с 14-О-геміглутаратової (АМ-193) солі ТЕА. а Сіль НСІ сполуки ОХ, 5Омг (8бмкмоль), розчиняли в їмл ОМЕ, і додавали 171мкл (1,3ммоль) 15-разового ,» надлишку 1,4-дийодобутан, після чого додавали 45мкл (26б0мкмоль) З-разового надлишку ОІРЕА. Реакційну суміш перемішували протягом доби при кімнатній температурі. Через 16 годин проходження реакції оцінювали за допомогою аналітичної ВЕРХ. Розчинник випаровували в Зреед Мас, залишок масляної речовини розчиняли в -| Змл 0,196-ого ТЕА в НО, екстрагували ефіром для видалення надлишку 1,4-дийодобутану. Водний екстракт б після цього очищали на ВЕРХ, і одержували 41,бмг 9890-ої очищеної похідної ОХ. (Вихід 6890) 41,б6мг (5в8ммоль) 3'-деаміно-3-(піролідин-1"-іл)у-доксорубіцинової солі ТЕА (05), одержаної у такий спосіб,Preparation and isolation of 3'-deamino-3-(pyrrolidin-1"-yl)y-doxorubicin salt TPA (0 Du") and 14-O-hemiglutarate (AM-193) salt TEA. , 5Omg (8bμmol) was dissolved in iml OME, and 171μl (1.3mmol) of a 15-fold excess of 1,4-diiodobutane was added, after which 45μl (26b0μmol) of a 3-fold excess of OIREA was added. The reaction mixture was stirred for a day at at room temperature. After 16 hours, the progress of the reaction was assessed by analytical HPLC. The solvent was evaporated in Zreed Mas, the remaining oily substance was dissolved in -|3 ml of 0.196% TEA in HO, extracted with ether to remove excess 1,4-diiodobutane. The aqueous extract was after this was purified by HPLC to give 41.bmg of purified OH derivative 9890. (Yield 6890) 41.b6mg (5v8mmol) of 3'-deamino-3-(pyrrolidin-1"-yl)y-doxorubicin TEA salt (05) , obtained in this way,
Її вводили в реакцію з 1,2 еквіваленту СІБО в сухому ОМЕ у такий самий спосіб, який описано в Прикладі 1. Вихід - 50 становив 3595 (16.9мг), а чистота - 98965.It was reacted with 1.2 equivalents of SIBO in dry OME in the same manner as described in Example 1. The yield of 50 was 3595 (16.9mg), and the purity was 98965.
СНВЕКРЕЇ 3. чз» Приготування та виділення 3'-деаміно-3'-(ізоіндолін-2"-іл)доксорубіцинової солі ТРА (05).SNVEKREI 3. chz» Preparation and isolation of 3'-deamino-3'-(isoindolin-2"-yl) doxorubicin salt ТРА (05).
Сіль НСІ сполуки ОХ, 50мг(8бмкмоль), розчиняли в їмл ОМЕ, і додавали 226бмг (1,3ммоль) 15-разового надлишку оо -дихлоро-орто-ксилену, після чого додавали 45мкл (2б0мкмоль) З-разового надлишку ОІРЕА і каталітичну кількість Маї. Через 16 годин розчинники видаляли за допомогою Зреед Мас, залишок розчиняли в о Змл 0,195-ого водного розчину ТЕА і екстрагували Змл ефіру, з метою видалення надлишку сполуки галогену.The HCI salt of compound OX, 50 mg (8 bmmol), was dissolved in one ml of OME, and 226 bmg (1.3 mmol) of a 15-fold excess of oo -dichloro-ortho-xylene was added, after which 45 μl (2 b0mmol) of a 3-fold excess of OIREA and a catalytic amount were added May After 16 hours, the solvents were removed using Zreed Mas, the residue was dissolved in about 3 ml of 0.195% aqueous TEA solution and extracted with 3 ml of ether, in order to remove the excess of the halogen compound.
Одержану у такий спосіб неочищену речовину очищали за допомогою ВЕРХ. Після очищення одержували ЗбмгГ, іме) 9896-ого очищеного кінцевого продукту. (Вихід: 5595)The crude substance obtained in this way was purified by HPLC. After purification, ZbmgH was obtained, i.e.) the 9896th purified final product. (Output: 5595)
ПРИКЛАД 4. бо Приготування та виділення 3'-деаміно-3'-(3"-піролін-1"-іл)-доксорубіцинової солі ТРА (О4).EXAMPLE 4. Preparation and isolation of 3'-deamino-3'-(3"-pyrrolin-1"-yl)-doxorubicin salt TRA (O4).
Сіль НСІ сполуки ОХ, 5Омг (8бмкмоль), розчиняли в їмл ОМЕ, і додавали 136,8мкл (1,3ммоль) 15-разового надлишку цис-1,4-дихлоро-2-бутену (Аїйдгісп), після чого додавали 45мкл (2бО0мкмоль) З-разового надлишкуThe HCI salt of the compound OX, 5mg (8bmmol), was dissolved in one ml of OME, and 136.8μl (1.3mmol) of a 15-fold excess of cis-1,4-dichloro-2-butene (Aiydhisp) was added, after which 45μl (2bO0mmol ) One-time surplus
ПІРЕА. Через 16 годин розчинники видаляли в Зреєей Мас, залишок розчиняли в Змл 0,195-ого водного розчинуPIREA. After 16 hours, the solvents were removed in Zreeei Mas, the residue was dissolved in Zml of 0.195% aqueous solution
ТЕА і екстрагували Змл гексану, з метою видалення надлишку сполуки галогену. Одержану у такий спосіб 65 неочищену речовину обробляли за допомогою ВЕРХ. Після очищення одержували 22,бмг, 9895-ого очищеного кінцевого продукту. (Вихід: 3790)TEA and extracted with 3 ml of hexane, in order to remove excess halogen compounds. The crude material obtained in this way was processed by HPLC. After purification, 22.bmg of the 9895th purified final product was obtained. (Output: 3790)
ПРИКЛАД 5.EXAMPLE 5.
Приготування та виділення 1-хлоро-4-бромо-2-бутанону (С4НбСІВгО) і 1-хлоро-5-бромо-2-пентанону (С5НВСІВГО).Preparation and isolation of 1-chloro-4-bromo-2-butanone (С4НбСИВгО) and 1-chloro-5-bromo-2-pentanone (С5НВСИВГО).
З-Бромопропіонілхлорид, 100,8мкл (ммоль) (Аїдгісп), змішували з діазометаном в ефірі. Через 1 год ефірний розчин елюювали і піддавали аналізу плям за допомогою ХШТ. Як стаціонарну фазу використовували прийняті в хроматографії тонких шарів алюмінієві пластини, покриті силікагелем 60 Е254 (МегсК Агі Мо. 5554), а як рухливу фазу - СНСІЗ:МеОН 95:5 (об./о6.). Для проведення аналізу плям реагент 2,4-динітрофенілгідразинZ-Bromopropionyl chloride, 100.8 μl (mmol) (Aidgisp), was mixed with diazomethane in ether. After 1 h, the ethereal solution was eluted and subjected to spot analysis using HST. Aluminum plates coated with silica gel 60 E254 (MegsK Agi Mo. 5554) used in thin-layer chromatography were used as a stationary phase, and SNCIZ:MeOH 95:5 (vol./o6.) was used as a mobile phase. 2,4-dinitrophenylhydrazine reagent for stain analysis
Моде!: А їехірооК ої Ргасіїсаї Огдапіс Спетівігу, раде 1061, Тріга Еаййоп, Іопдтапв, Мем МогКк.| після 7/0 елюювання наносили на пластину ХШТ. Таким чином утворювалося жовта пляма діазометилкетону з КГО,3.Mode!: A yehirooK oi Rgasiisai Ogdapis Spetivigu, rade 1061, Triga Eayyop, Iopdtapv, Mem MogKk.| after 7/0 elution, it was applied to the KSHT plate. In this way, a yellow spot of diazomethylketone with KHO,3 was formed.
Ефірний розчин після цього змішували з безводним розчином НСЇІ в ефірі, перетворюючи діазометилкетон на бажаний кінцевий продукт, 1-хлоро-4-бромо-2-бутанон. Цей продукт одержували у вигляді жовтої плями, яка є характерною для оксо-сполук з КГО,8, у тій самій системі розчинника і з тим самим реагентом для аналізу плям, що його описано вище. Після випаровування розчинника неочищений продукт обробляли на колонці (15см /5 завдовжки, 2,5 в діаметрі), з силікагелевим наповненням (15г силікагелю, МегсК, марка 9385, розмір чарунок сита 230-400, розмір пор бОА. Як рідину, тобто мобільну фазу, застосовували нерозбавлений СНСЇІЗ. Фракції з вмістом бажаного кінцевого продукту (визначеного за допомогою згаданого аналізу плям) змішували і випаровували до сухості. Одержували чисту масляну речовину (1,5г). Вихід: 80905. 1-хлоро-5-бромо-2-пентанон приготовляли з 4-бромобутирилхлорид у такий самий спосіб, як описано для 1-хлоро-4-бромо-2-пентанону, за винятком того, що замість 3-бромопропіоніл хлорид використовували 4-бромобутирил хлорид. Одержували чисту масляну речовину(1,6бг). Вихід: 80965.The ethereal solution was then mixed with an anhydrous solution of HCIII in ether, converting the diazomethylketone to the desired end product, 1-chloro-4-bromo-2-butanone. This product was obtained as a yellow spot, which is characteristic of oxo-compounds with KHO,8, in the same solvent system and with the same spot analysis reagent as described above. After evaporation of the solvent, the crude product was processed on a column (15 cm /5 in length, 2.5 in diameter), with silica gel filling (15 g of silica gel, MegsK, brand 9385, sieve cell size 230-400, pore size BOA. As a liquid, that is, mobile phase , undiluted SNCIIII was used. Fractions containing the desired end product (as determined by the aforementioned spot analysis) were mixed and evaporated to dryness. A pure oily substance (1.5 g) was obtained. Yield: 80905. 1-Chloro-5-bromo-2-pentanone was prepared from 4-bromobutyryl chloride in the same manner as described for 1-chloro-4-bromo-2-pentanone, except that 4-bromobutyryl chloride was used instead of 3-bromopropionyl chloride. Output: 80965.
ПРИКЛАД 6.EXAMPLE 6.
Приготування та виділення 3'-деаміно-3'-(3"-піролідон-1"-іл)-доксорубіцинової солі ТРА (О5).Preparation and isolation of 3'-deamino-3'-(3"-pyrrolidone-1"-yl)-doxorubicin TPA salt (O5).
Сіль НСІ сполуки ОХ, 5О0мг (8бмкмоль), розчиняли в їмл ОМЕ, і додавали 241мг (1,3ммоль) 15-разового сч ов надлишку 1-хлоро-4-бромо-2-бутанону, після чого додавали 45мкл (260мкмоль) З-разового надлишку ОІРЕА.The HCI salt of compound OX, 5O0mg (8bmmol), was dissolved in one ml of OME, and 241mg (1.3mmol) of a 15-fold excess of 1-chloro-4-bromo-2-butanone was added, after which 45ml (260mmol) of Z- OIREA one-time surplus.
Через 16 годин розчинники видаляли в Зреед Мас, залишок розчиняли в Змл 0,195-ого водного розчину ТРА і і) екстрагували Змл гексану, з метою видалення надлишку галогенової сполуки.After 16 hours, the solvents were removed in Zreed Mas, the residue was dissolved in 3 ml of 0.195th aqueous solution of TPA and i) extracted with 3 ml of hexane, in order to remove the excess halogen compound.
Одержану у такий спосіб неочищену речовину очищали за допомогою ВЕРХ. Після очищення одержували 20,бмг, 98965-ого очищеного кінцевого продукту. (Вихід: 33905) « зо ПРИКЛАД 7.The crude substance obtained in this way was purified by HPLC. After purification, 20.bmg, 98965th purified final product was obtained. (Output: 33905) « from EXAMPLE 7.
Приготування та виділення 3'-деаміно-3'-(3"-піперидон-1"-іл)-доксорубіцинової солі ТРА (07). -Preparation and isolation of 3'-deamino-3'-(3"-piperidon-1"-yl)-doxorubicin TPA salt (07). -
Сіль НСІ сполуки ОХ, 50мг(8бмкмоль), розчиняли в їмл ОМЕ, і додавали 2бОмг (1,3ммоль) 15-разового «г надлишку 1-хлоро-5-бромо-2-пентанону, після чого додавали 45мкл (260мкмоль) З-разового надлишку ОІРЕА.The HCI salt of compound OX, 50mg (8bmmol), was dissolved in one ml of OME, and 2bOmg (1.3mmol) of a 15-fold "g excess of 1-chloro-5-bromo-2-pentanone was added, after which 45ml (260mmol) of Z- OIREA one-time surplus.
Через 16 годин розчинники видаляли в Зреед Мас, залишок розчиняли в Змл 0,195-ого водного розчину ТРА і ісе) з5 екстрагували Змл гексану, з метою видалення надлишку сполуки галогену. Одержану у такий спосіб неочищену р речовину очищали за допомогою ВЕРХ. Після очищення одержували 18мг (9595) очищеного кінцевого продукту. (Вихід: 2896)After 16 hours, the solvents were removed in Zreed Mas, the residue was dissolved in 3ml of 0.195% aqueous solution of TPA and extracted with 3ml of hexane in order to remove the excess halogen compound. The crude substance obtained in this way was purified by HPLC. After purification, 18 mg (9595) of the purified final product was obtained. (Output: 2896)
ПРИКЛАД 8.EXAMPLE 8.
Приготування та виділення 4-йодобутиральдегід і 5-йодовалеральдегіду 2-(3-Хлоропропіл)-1,3-діоксолан « (4-хлоро-п-бутиральдегід етиленацеталь), в кількості 1,3мл (1Оммоль, Ріка) розчиняли в 200мл ацетону, який з с містив ЗбОг (200ммоль, 20-разовий надлишок) йодиду натрію Маї!. Розчин нагрівали зі зворотним охолодженням . впродовж 24 годин, після чого випаровували до сухості. Для того, щоб екстрагувати органічний матеріал з и?» неорганічного твердого залишку, використовували 100мл ефіру. Ефірний розчин після цього промивали 50млPreparation and isolation of 4-iodobutyraldehyde and 5-iodovaleraldehyde. which contained ZbOg (200 mmol, 20-fold excess) of sodium iodide May!. The solution was heated with reverse cooling. for 24 hours, after which it was evaporated to dryness. In order to extract organic material from the inorganic solid residue, used 100 ml of ether. The ethereal solution was then washed with 50 ml
НО, 5Омл 595 водного розчину Ма25202 і З рази - Хомл НО. Ефір видаляли іп масцо, і масляний залишок розчиняли в Змл 50795-го водного розчину оцтової кислоти. Через 1 год до цього розчину додавали 100мл ефіру, і -І оцтову кислоту та етиленгліколь видаляли за допомогою промивання 5Омл Н 20 (3 рази). Головний продукт елюювали при КГО,8 на колонці ХТШ в нерозбавленому СНСЇІЗ. Аналіз плям, який використовували для функції ме) альдегіду, був такий самий, як описано для кетонів в Прикладі 5. Ефір після цього видаляли, і масляну їх речовину чорного кольору обробляли на колонці (15см завдовжки, 2,5см в діаметрі), наповненій силікагелем (15г7), Мегск, чистота 9385, розмір чарунок сита 230-400, розмір пор бОА. Як рідину, тобто рухливу фазу,HO, 5 Oml of 595% aqueous solution of Ma25202 and 3 times - Khoml HO. The ether was removed from the oil, and the oily residue was dissolved in 3 ml of 50795 aqueous solution of acetic acid. After 1 hour, 100 ml of ether was added to this solution, and -I acetic acid and ethylene glycol were removed by washing with 5 ml of H 20 (3 times). The main product was eluted at KHO, 8 on a HTSh column in undiluted SNSIIZ. The spot analysis used for the me)aldehyde function was the same as described for the ketones in Example 5. The ether was then removed and the black oily substance was worked up on a column (15 cm long, 2.5 cm in diameter) packed with silica gel (15g7), Megsk, purity 9385, sieve cell size 230-400, pore size bOA. As a liquid, that is, a mobile phase,
Ш- використовували СНСІЗ. Фракції з вмістом бажаного кінцевого продукту (визначеного за допомогою згадано ї» аналізу плям) перемішували і випаровували до сухості. Одержували 1,6бг масляної речовини жовтого кольору.Sh- used SNSIZ. Fractions containing the desired end product (determined by the aforementioned spot analysis) were mixed and evaporated to dryness. 1.6 g of a yellow oily substance was obtained.
Вихід: 8095. 5-Йодовалеральдегід одержували у такий самий спосіб, починаючи з 2-(4-хлоробутил)-1,3-діоксолану дво (б-хлоро-п-валеральдегід етиленацеталю) (Рішка). Одержували 1,65г масляної речовини жовтого кольору. Вихід: 8090. іФ) ПРИКЛАД 9. ка Приготування та виділення 3'-деаміно-3'-(2"-піролін-1"-іл)-доксорубіцинової солі ТРА (СО 6).Yield: 8095. 5-Iodovaleraldehyde was obtained in the same way, starting from 2-(4-chlorobutyl)-1,3-dioxolane dvo (b-chloro-p-valeraldehyde of ethylene acetal) (Rishka). 1.65 g of yellow oily substance was obtained. Yield: 8090. iF) EXAMPLE 9. ka Preparation and isolation of 3'-deamino-3'-(2"-pyrrolin-1"-yl)-doxorubicin salt TPA (CO 6).
Сіль НСІ сполуки ОХ, 5О0мг (8бмкмоль), розчиняли в їмл ОМЕ, і додавали 515мг (2,бммоль) ЗО-разового 6о надлишку 4-йодобутиральдегіду, після чого додавали 45мкл (260мкмоль, З-разового надлишку) ОІРЕА. Через 1 годину 100мкл льодяної оцтової кислоти додавали до реакційної суміші, яку після цього по краплинах додавали до Бмл 0,195-ого ТРА в 7095-ому водному розчину ацетонітрилу (розчинник ії системи ВЕРХ)). Цей розчин розводили 2мл 0,195-ого водного розчину ТРА, після чого ацетонітрил видаляли в Зреед Мас. Одержаний розчин екстрагували гексаном, з метою видалення надлишку сполуки галогену. Матеріал, одержаний у такий спосіб, б5 очищали за допомогою ВЕРХ. Після очищення одержували 52мг (9895) очищеного кінцевого продукту. (Вихід: 8590)The HCI salt of compound OX, 500 mg (8 bmmol), was dissolved in one ml of OME, and 515 mg (2.bmmol) of a 3-fold 60-fold excess of 4-iodobutyraldehyde was added, after which 45 μl (260 μmol, a 3-fold excess) of OIREA was added. After 1 hour, 100 μl of glacial acetic acid was added to the reaction mixture, which was then added dropwise to Bml of 0.195% TPA in 7095% aqueous acetonitrile (the solvent of the HPLC system)). This solution was diluted with 2 ml of a 0.195th aqueous solution of TPA, after which the acetonitrile was removed in Zreed Mas. The obtained solution was extracted with hexane in order to remove the excess halogen compound. The material obtained in this way was purified by HPLC. After purification, 52 mg (9895) of the purified final product was obtained. (Output: 8590)
ПРИКЛАД 10.EXAMPLE 10.
Приготування та виділення 3'-деаміно-3-(1",3"-тетрагідропіридин-1"-іл)-доксорубіцинової солі ТРА (Ов).Preparation and isolation of 3'-deamino-3-(1",3"-tetrahydropyridin-1"-yl)-doxorubicin salt TPA (Ov).
Сіль НСІ сполуки ОХ, 5О0мг (8бмкмоль), розчиняли в їмл ОМЕ, і додавали 552мг (2,бммоль) ЗО0-разового надлишку 5-йодовалеральдегіду, після чого додавали 45мкл (2б0мкмоль) З-разового надлишку ОІРЕА. Через 1 годину 100мкл льодяної оцтової кислоти додавали до реакційної суміші, яку після цього по краплинах додавали до бмл 0,195-ого ТРА в 7095-ому водному розчині ацетонітрилу (розчинник її системи ВЕРХ). Цей розчин розбавляли 2мл 0,195-ого водного розчину ТРА, після чого в Зреед Мас видаляли ацетонітрил. Одержаний розчин екстрагували гексаном, з метою видалення надлишку галогенової сполуки. Матеріал, одержаний у такий 70 спосіб, очищали за допомогою ВЕРХ. Після очищення одержували 4бмг (9895) очищеного кінцевого продукту. (Вихід: 7596).The HCI salt of compound OX, 5O0mg (8bmmol), was dissolved in one ml of OME, and 552mg (2.bmmol) of a 30-fold excess of 5-iodovaleraldehyde was added, after which 45μl (2b0mmol) of a 3-fold excess of OIREA was added. After 1 hour, 100 μl of glacial acetic acid was added to the reaction mixture, which was then added dropwise to bml of 0.195% TPA in 7095% aqueous acetonitrile (the solvent of her HPLC system). This solution was diluted with 2 ml of a 0.195th aqueous solution of TPA, after which acetonitrile was removed in Zreed Mas. The obtained solution was extracted with hexane in order to remove the excess halogen compound. The material obtained in this way was purified by HPLC. After purification, 4 mg (9895) of the purified final product was obtained. (Output: 7596).
ПРИКЛАД 11.EXAMPLE 11.
Приготування та виділення цитотоксичного агоністичного аналога ІН-КН, який містить ОХ. (О-Гуврох 17-о-дІ01-Н-вН,О ді) 19 ІО-Гув"Н-ЕН, бомг (37,5мкмоль) і 52мг (6495-вого очищеного, 37,5мкмоль). М-Етос-0ОХ14-О-геміглутарату (див. Приклад 1), розчиняли в їмл ОМЕ, і додавали 22мг (5бмкмоль) реагенту ВОР (бензилоктилфталату) (Аагісп), 13,5мг (10О0мкмоль) НОВІ, а також 52мкл (З0Омкмоль) ПІРЕА. Після перемішування протягом 1 год при кімнатній температурі реакція завершується. Розчинники випаровували, залишок масляної речовини кристалізували Змл етилацетату і після цього двічі промивали Змл етилацетату. ЗОмг неочищеної твердої речовини після цього розчиняли в Змл ОМЕ, і додавали З0Омкл піперидину. Через 5 хвилин реакційну суміш поміщали в льодяну ванну і підкислювали за допомогою додавання суміші ЗоОмкл ТЕА, 7ООмкл піридину і 2млPreparation and isolation of a cytotoxic agonist analogue of IN-KN, which contains OX. (O-Guvroh 17-o-dI01-H-vH,O di) 19 IO-Guv"H-EN, bomg (37.5 μmol) and 52 mg (6495th purified, 37.5 μmol). M-Etos-0OH14 -O-hemiglutarate (see Example 1) was dissolved in 1 ml of OME, and 22 mg (5 μmol) of BOR (benzyl octyl phthalate) reagent (Aagisp), 13.5 mg (1000 μmol) of NOVI, as well as 52 μl (30 μmol) of PIREA were added. After stirring for 1 h at room temperature, the reaction is complete. The solvents were evaporated, the residue of the oily substance was crystallized in 3 ml of ethyl acetate and then washed twice with 3 ml of ethyl acetate. 30 mg of the crude solid was then dissolved in 3 ml of OME, and 30 μl of piperidine was added. After 5 minutes, the reaction mixture was placed in an ice bath and acidified by adding a mixture of 3000 ml of TEA, 7000 ml of pyridine and 2 ml
ОМРЕ. Після випаровування розчинників масляний залишок робили твердим за допомогою етилацетату.OMRE. After evaporation of the solvents, the oily residue was solidified with ethyl acetate.
Неочищений твердий продукт, одержаний у такий спосіб, розчиняли в їЛмл 7090-ого водного розчину ацетонітрилу з вмістом ТРА 0,195 (ї), розбавляли Змл 0,190-ого водного розчину ТЕА (її) і піддавали с напівпрепаративній ВЕРХ. Одержували 40мг (14,8мкмоль) 9895-го очищеного кінцевого продукту. Вихід: 48965. Ге)The crude solid product obtained in this way was dissolved in 1Lml of a 7090% aqueous solution of acetonitrile with a TPA content of 0.195%, diluted with 3ml of a 0.190% aqueous TEA solution and subjected to semi-preparative HPLC. 40 mg (14.8 μmol) of the 9895th purified final product was obtained. Output: 48965. Ge)
ПРИКЛАД 12.EXAMPLE 12.
Приготування цитотоксичНнОго агоністичного аналога Гн-кНн, який містить 2-піроліно-ПОХ((О-І уз (-піроліно-2ОХ 77-О-дідІ Н-ВН,Ов "Я зо Од, 11,2мг (бмкмоль) (див. Приклад 11) розчиняли в 200мкл ЮОМЕ, і додавали ЗОмг (15О0мкмоль, тPreparation of the cytotoxic agonistic analogue Hn-kNn, which contains 2-pyrrolino-POX((O-I uz (-pyrrolino-2ОХ 77-O-didI Н-ВН,Ов "Я зо Од, 11.2 mg (bmmol)) (see Example 11) was dissolved in 200 μl of UOME, and ZOmg (150 μmol, t
ЗО-разовий надлишок) 4-йодобутиральдегіду (Приклад 8), після чого додавали Змкл (17мкмоль) ОІРЕА. Через 1 в. годину реакція завершувалася (див. Приклад 9), ії їОмкл льодяної оцтової кислоти додавали до реакційної « суміші, яку після цього по краплинах додавали до мл 0,195-ого ТЕА в 7095-ому водному розчині ацетонітрилу.3-fold excess) of 4-iodobutyraldehyde (Example 8), after which Zmcl (17 μmol) of OIREA was added. After 1 century After an hour, the reaction was completed (see Example 9), and 1 µM of glacial acetic acid was added to the reaction mixture, which was then added dropwise to ml of 0.195% TEA in 7095% aqueous acetonitrile solution.
Цей розчин після цього розбавляли їмл 0,190-ого водного розчину ТЕА, і ацетонітрил видаляли іп масио. (Се)This solution was then diluted with 0.190 mL of aqueous TEA solution, and the acetonitrile was removed by mass. (Se)
Залишковий водний розчин після цього екстрагували 1мл гексану і очищали за допомогою ВЕРХ. Одержували їч- 7 бмг (9996) очищеного кінцевого продукту. (Вихід: 66905.)The residual aqueous solution was then extracted with 1 ml of hexane and purified by HPLC. 7 mg (9996) of the purified final product were obtained. (Output: 66905.)
ПРИКЛАД 13.EXAMPLE 13.
Приготування та виділення цитотоксичного аналогу соматостатину, який містить ОХ « тт з рок о-ЯО-РНе-сСув- Ту О-Ттв і ме мансухтнемМНа, о 95) 7 с 0-Рпе-Суз-Туг-О-Тгр-Ї ув(Етос)-МаІ-Сув-Тиг-МН о», 20мг (14,5мкмоль) (Ргос. Май. Асад. Зсі. ОБА 1986, рр. ц 1986-1990), і 20мг (6490-вого очищеного, 14,5мкмоль). М-Етос-0ОХ14-0-геміглутарату (Приклад 1) розчиняли в "» 200мкл ОМЕ, і додавали 8,8мг (2О0мкмоль) реагенту ВОР (бензилоктилфталату) (Аїагісн), 5,4мг (4О0мкмоль) НОВІ, а також 17мкл (100мкмоль) ОІРЕА. Після перемішування протягом 1 год при кімнатній температурі одержували 5 реакційну суміш. Після видалення розчинників іп масо залишок стверджували етилацетатом. Далі твердий -І матеріал розчиняли в їмл ОМЕ, і додавали 10Омкл піперидину. Через 7 хвилин реакційну суміш поміщали в льодяну ванну і підкислювали за допомогою додавання суміші 1ї0Омкл ТЕА, З0Омкл піридину і 2мл ЮОМЕ. Після б випаровування розчинників масляний залишок стверджували етилацетатом. Неочищений твердий продукт, «г» одержаний у такий спосіб, розчиняли в їмл 7095-ого водного розчину ацетонітрилу з вмістом ТЕА 0,196 (Її), розбавляли Змл 0,195-ого водного розчину ТРА (ії) і піддавали напівпрепаративній ВЕРХ. Одержували 9,7мг і (5,1мкмоль) 9596-го очищеного кінцевого продукту. Вихід: 35905. с» ПРИКЛАД 14.Preparation and isolation of a cytotoxic analog of somatostatin, which contains ОХ « tt with rok o-YAO-РНе-сСув-Ту О-Ттв and me mansukhtnemМНа, о 95) 7 с 0-Рпе-Суз-Туг-О-Тгр-Й ув( Etos)-MaI-Suv-Tig-MN o", 20 mg (14.5 μmol) (Rhos. Mai. Asad. Zsi. OBA 1986, yr. ts 1986-1990), and 20 mg (purified 6490th, 14.5 μmol ). M-Ethos-OOX14-O-hemiglutarate (Example 1) was dissolved in "» 200 μl of OME, and 8.8 mg (200 μmol) of the reagent BOR (benzyl octyl phthalate) (Alagisn), 5.4 mg (400 μmol) of NOVI, as well as 17 μl (100 μmol) were added ) OIREA. After stirring for 1 h at room temperature, the reaction mixture 5 was obtained. After removing the solvents and mass, the residue was solidified with ethyl acetate. Next, the solid -I material was dissolved in one ml of OME, and 10 µl of piperidine was added. After 7 minutes, the reaction mixture was placed in an ice bath and was acidified by adding a mixture of 1.0 µM of TEA, 30 µM of pyridine and 2 ml of UOME. After evaporation of the solvents, the oily residue was solidified with ethyl acetate. The crude solid product, "g" obtained in this way, was dissolved in 1 ml of a 7095% aqueous solution of acetonitrile with a TEA content of 0.196 (Her ), diluted with 3 ml of 0.195% aqueous solution of TRA (iii) and subjected to semi-preparative HPLC. 9.7mg and (5.1µmol) of 9596th purified final product were obtained. Yield: 35905.s" EXAMPLE 14.
Приготування цитотксичного аналогу соматостатину, який містить 2-піроліно-ОЙОХ т (2-піропінн-ПСХТ Од О-Рпв-сСув Ту О- Тр ув мавнсхьв Т-МН;, СвізЯ45у гсбУМВ8.вї "ОЗ МК 1 (б,4мМмг, бмкмоль) розчиняли в 1ООмкл ЮОМЕ, і додавали о 0-РПв-Схив- Ту-О-Тер- ГГ ув-арнсу ВАТА МН. по 2-піроліно-ОХ 14.О-геміглутарат (4,1мг, мкмоль), після чого додавали реагент ВОР. (бензилоктилфталат) (4,4мг, 1Омкмоль), НОВІ (100мкмоль) і ОІРЕА (5Омкмоль). Після перемішування протягом 2 год при кімнатній 60 температурі реакційну суміш підкислювали 20мкл АсОН, розбавляли 5О0Омкл 7090-ого водного розчину ацетонітрилу з вмістом ТРА 0,195, далі розбавляли 7О0Омкл 0,195-ого водного розчину ТЕА і очищали за допомогою ВЕРХ. Одержували З,У9мг (Вихід: 4095) 9995-го очищеного кінцевого продукту. 2-Піроліно-ПОХ 17-О-геміглутарат приготовляли за допомогою реакції ОХ "-О-геміглутарату з б 4-йодобутиральдегідом, як це описано в ПРИКЛАДІ 9. рох14-О-геміглутарат приготовляли з М-Етос-0ОХ-О-геміглутарату шляхом розщеплення захисної групиPreparation of a cytotoxic analogue of somatostatin, which contains 2-pyrrolino-OYOH t (2-pyropinn-PSHT Od O-Rpv-sSuv Tu O- Tr uv mavnskhv T-MN;, SvizYa45u gsbUMV8.vy "OZ MK 1 (b,4mMmg, bmmol ) was dissolved in 100 μl of UOME, and 0-RPv-Shyv-Tu-O-Ter-GG uv-arns VATA MN was added to 2-pyrrolino-OX 14.O-hemiglutarate (4.1 mg, μmol), after which it was added BOR reagent (benzyl octyl phthalate) (4.4 mg, 1 μmol), NOVI (100 μmol) and OIREA (5 μmol). After stirring for 2 h at room temperature at 60, the reaction mixture was acidified with 20 μl of AcOH, diluted with 500 μl of a 7090 aqueous solution of acetonitrile containing TPA 0.195, then diluted with 7O0Oml of 0.195% TEA aqueous solution and purified by HPLC. 3.U9mg (Yield: 4095) of the 9995% purified final product was obtained. 2-Pyrrolino-POH 17-O-hemiglutarate was prepared using the reaction ОХ "- of O-hemiglutarate with β-4-iodobutyraldehyde as described in EXAMPLE 9. roh14-O-hemiglutarate was prepared from M-Ethos-0OH-O-hemiglutarate by cleavage of the protective groups
Етос, як це описано в ПРИКЛАДІ 11. (Вихід: 40905)Ethos as described in EXAMPLE 11. (Exit: 40905)
ПРИКЛАД 15.EXAMPLE 15.
Приготування та виділення цитотоксичного антагоніста бомбесину, який містить ОХ (ро 7-О-дпоІп-Тгр-Ага-Ма!І-сту-Нів-Г ем (СНо-МН еи-МН», 24 48)Preparation and isolation of the cytotoxic antagonist bombesin, which contains OX (ro 7-O-dpoIp-Tgr-Aga-Ma!I-stu-Niv-Hem (СНо-МН ей-МН», 24 48)
СіІп-Ттр-АІа-МаІ-сіу-Ніз-Геи. (СНО-МН) ец-МН»о, 20мг (15,8мкмоль) (Іпї У. Рерііде Ргоїеіп Кев. 38, 1991, рр. 593-600) і 22мг (6496-вого очищеного, 15,8мкмоль) М-Етос-0ОХ14-О-геміглутарату (Приклад 1) розчиняли в 200мкл ОМЕ, і додавали 8,8мг (2О0мкмоль) реагенту ВОР (бензилоктилфталату) (Аїагісн), 5,4мг (4О0мкмоль) НОВІ, а також 17мкл (100мкмоль) БІРЕА. Після перемішування протягом 1 год при кімнатній температурі реакція 70 завершувалася. Після видалення розчинників іп масцо залишок кристалізували етилацетатом. Одержаний у такий спосіб твердий матеріал після цього розчиняли в їмл ОМЕ, і додавали 100мкл піперидину. Через Бхв реакційну суміш поміщали в льодяну ванну і підкислювали за допомогою додавання суміші 10Омкл ТЕА, ЗО0Омкл піридину і 2мл ОМЕРЕ. Після випаровування розчинників масляний залишок стверджували етилацетатом.SiIp-Ttr-AIa-MaI-siu-Niz-Gei. (SHO-MH) ets-MH»o, 20 mg (15.8 μmol) (Ipi U. Reiriede Rgoieip Kev. 38, 1991, pp. 593-600) and 22 mg (6496th purified, 15.8 μmol) M-Ethos -OOX14-O-hemiglutarate (Example 1) was dissolved in 200 μl of OME, and 8.8 mg (200 μmol) of BOR (benzyl octyl phthalate) reagent (Alagisn), 5.4 mg (400 μmol) of NOVI, and 17 μl (100 μmol) of BIREA were added. After stirring for 1 h at room temperature, the reaction 70 was completed. After removal of solvents and oil, the residue was crystallized with ethyl acetate. The solid material obtained in this way was then dissolved in 1 ml of OME, and 100 μl of piperidine was added. Through Bhv, the reaction mixture was placed in an ice bath and acidified by adding a mixture of 10 µM TEA, 30 µM pyridine and 2 ml OMERE. After evaporation of the solvents, the oily residue was solidified with ethyl acetate.
Неочищений твердий продукт, одержаний у такий спосіб, розчиняли в їЛмл 7090-ого водного розчину 75 ацетонітрилу з вмістом ТРА 0,195 (ї), розбавляли Змл 0,195-ого водного розчину ТЕА (ії) і піддавали напівпрепаративній ВЕРХ. Одержували 13,5мг (7,1мкмоль) 98905-ого очищеного кінцевого продукту. Вихід: 4590.The crude solid product obtained in this way was dissolved in 1L ml of a 7090% aqueous solution of 75 acetonitrile with a TPA content of 0.195% (i), diluted with 3ml of a 0.195% aqueous solution of TEA (ii) and subjected to semi-preparative HPLC. 13.5 mg (7.1 μmol) of the 98905th purified final product was obtained. Output: 4590.
ПРИКЛАД 16.EXAMPLE 16.
Приготування та виділення цитотоксичного аналога антагоніста бомбесину, який містить 2-піроліно-ОЙОХ 2-піроліно-ЮОХ 71-О-ді-СІп-Тгр-Аіа-Ма!-Сіу-Нів-Г ец(СНо-МНИ еш-МНо, Ов'98, 98 9,Бмг о (Бмкмоль) (Приклад 15) розчиняли в 200мкл ОМЕ, і додавали ЗОмг (150мкмоль, ЗО0-разовий надлишок) 4-йодобутиральдегіду (Приклад 8), після чого додавали Змкл (17мкмоль) БІРЕА. Через 1 годину реакція завершувалася (Приклад 9), і 1Омкл льодяної оцтової кислоти додавали до реакційної суміші, яку після цього по краплинах додавали до мл 0,195-ого ТЕА в 7090-ому водному розчині ацетонітрилу. Цей розчин після цього розбавляли мл 0,195-ого водного розчину ТРА, і ацетонітрил видаляли іп масцо. Залишковий водний розчин с 29 після цього екстрагували 1їмл гексану і обробляли за допомогою ВЕРХ. Одержували бмг 9895-ого очищеного Ге) кінцевого продукту. (Вихід: 60905.)Preparation and isolation of a cytotoxic analogue of the bombesin antagonist, which contains 2-pyrrolino-OYOH 2-pyrrolino-YOH '98, 98 9.Bmg o (Bmmol) (Example 15) was dissolved in 200μl of OME, and 30mg (150μmole, 30-fold excess) of 4-iodobutyraldehyde (Example 8) was added, after which 3mcl (17μmol) of BIREA was added. After 1 hour, the reaction was complete (Example 9), and 1 µl of glacial acetic acid was added to the reaction mixture, which was then added dropwise to ml of 0.195% TEA in 7090% aqueous acetonitrile.This solution was then diluted with ml of 0.195% aqueous TPA , and the acetonitrile was removed by mass. The residual aqueous solution from 29 was then extracted with 1 mL of hexane and processed by HPLC. The final product was obtained in 9895 mg of purified Ge). (Output: 60905.)
Визначення цитотоксичної активності іп мігоюDetermination of the cytotoxic activity of ip miga
Від д-ра Гюнтера Бернхардта з Регенсбурзького Університету, Німеччина (Ог. «зипіег Вегпанагаї, Опімегейу ої Кедепзригт, (зептапу)|, отримали клітинну лінію естроген-незалежної карциноми молочної залози мишей - (МХТ). Всі інші клітинні лінії, що їх використовували для визначення антипроліферативної активності сполук М цього винаходу, отримали з Американської колекції типових культур (АТСС). Для оцінки активності аналогів застосовували колориметричний тест на цитотоксичність в планшетах для мікротитрації, який грунтується на - кількісному визначенні біомаси за допомогою штучного забарвлювання клітин крезиловим фіолетовим, що дуже Ге добре корелює з визначенням числа клітин. (Кейе еї аі.; АпаІ. Віоспет. 187, 262-267, 1990: Вегпнагаї о. еїFrom Dr. Gunther Bernhardt of the University of Regensburg, Germany (Og. "zipieg Wegpanagai, Opimegeiu oi Kedepzrigt, (zeptapu)|) received an estrogen-independent murine mammary carcinoma cell line - (MHT). All other cell lines used to determine the antiproliferative activity of compounds M of the present invention, were obtained from the American Collection of Type Cultures (ATSC). To assess the activity of analogs, a colorimetric test for cytotoxicity in microtitration tablets was used, which is based on - quantitative determination of biomass using artificial staining of cells with cresyl violet, which is very Ge correlates well with the determination of the number of cells.
Зо а), 9. Сапсег Кев. Сіїп. Опсої. (1992), 118, 35-43; Зргивз ТИ. ей а), у). Сапсег Кев. Сііп. Опсої 117, в. 435-443, 1991; СіШев, К. ., АпаЇ. Віоспет. 159, 109-113, 1986; Киепг, МУ. еї аї.; АпаїЇ. Віоспет., 182 16-19, 19894 Протокол тестуванняZo a), 9. Sapseg Kev. Siip. Opsoi (1992), 118, 35-43; Zrgivz YOU. hey a), u). Sapseg Kev. Siip. Opsoi 117, c. 435-443, 1991; SiShev, K. ., ApaYi. Viospet. 159, 109-113, 1986; Kiepg, MU. ей яй.; Apayi Viospet., 182 16-19, 19894 Test protocol
Через один-два дні після посіву клітин в 9б-лункових планшетах культуральне середовище замінюють свіжим « середовищем, яке містить досліджувані сполуки, і свіжим середовищем лише для контрольних культур. Після різних періодів інкубації клітини фіксують діальдегідом глутарової кислоти і зберігають у фетальній сироватці З с ВРХ (ЕВ5) при 42С до самого кінця експерименту. Клітини забарвлюють крезиловим фіолетовим, забарвлену "з речовину екстрагують 70906-им водним розчином ЕН. Оптичну густину вимірюють пристроєм ЕІА Кеадег " (Віо-Тек Іпзігитепів) або Віогпек 1000 (ВесКктап) при довжині хвилі 590 нм або 600 нм, відповідно. Кожна експериментальна точка спостереження представлена середнім значенням для восьми лунок з культурою.One to two days after seeding cells in 9b-well plates, the culture medium is replaced with fresh medium containing the test compounds and fresh medium only for control cultures. After different periods of incubation, the cells are fixed with glutaric acid dialdehyde and stored in fetal serum of 3 c cattle (EB5) at 42C until the very end of the experiment. The cells are stained with cresyl violet, the stained substance is extracted with 70906 aqueous solution of EN. The optical density is measured with an EIA Keadeg device (Vio-Tek Ipzigitepiv) or Viogpek 1000 (VesKktap) at a wavelength of 590 nm or 600 nm, respectively. Each experimental observation point is represented by the mean value for eight wells with culture.
Значення Т/С5 розраховують як Т/С-(Т-СО)0С-СО), де Т- оптична густина оброблених культур, С- оптичнаThe value of T/С5 is calculated as T/С-(Т-СО)0С-СО), where T is the optical density of the treated crops, C is the optical
Ше густина контрольних (необроблених) культур, СО- оптична густина культур на початку інкубації (1-0).She is the density of control (untreated) cultures, СО is the optical density of cultures at the beginning of incubation (1-0).
Ге») ПРИКЛАД 17.Ge") EXAMPLE 17.
Цитотоксична активність дауносамін-модифікованих похідних БОХ іп міїго. ть В Таблиці 17-1 показано вплив доксорубіцину та його дауносамін-модифікованих похідних на клітинну лінію -І 20 карциноми молочної залози людини (МСЕ-7) іп міго. Цитотоксичні радикали, які мають даунсомін М, що включений в п'ятичленне кільце з реакційною функцією, є в 5-50 разів більш активними, ніж їхній гомологічнийCytotoxic activity of daunosamine-modified derivatives of BOH and miigo. Table 17-1 shows the effect of doxorubicin and its daunosamine-modified derivatives on the human breast carcinoma cell line -I 20 (MCE-7) and migo. Cytotoxic radicals that have daunsomin M included in a five-membered ring with a reactive function are 5-50 times more active than their homologous
Т» аналог із шестичленним кільцем, наприклад, З-піролідоно-ПОХ (О5) і З-піперидино-ЮОХ (О8), а також 2-піроліно-ЮОХ (Ов) і 1,3-тетрагідро-піридино-0ОХ (Ов). зв о з те 0000 дров жест дев 10111051 в | в | 5 вбюю0111111110ю1011 56. прядяю 00106111 1515 бхея 00000101 пд 00010091T" analogue with a six-membered ring, for example, 3-pyrrolidone-POX (О5) and 3-piperidino-ХОХ (О8), as well as 2-pyrrolino-ХОХ (Ов) and 1,3-tetrahydro-pyridino-0ОХ (Ов) . zv o z te 0000 drov gesture dev 10111051 v | in | 5 I kill 0111111110ю1011 56. I spin 00106111 1515 bheya 00000101 pd 00010091
Вода 00015019 61001 бо Ізоїіндоліно- 70 118 86 -11 вх 00000151 91 15 лю 000001000000ю9000110001101693Water 00015019 61001 bo Izoiindolino- 70 118 86 -11 in 00000151 91 15 ju 000001000000ю9000110001101693
СЕСтННННННННЯ НИ: ННЯ ННЯ КОНЯ КОС НЯ ПОС ЗОН ПО ЧНО 50000овпвядю 00010001 1800 вхсю 000000100900010000110116186 пери 00000000ю9010000011000109600ю8 вхо» 00000019 зп 00010ю601ю501031080 ов 0001010101100ю000180010281811 палетвайдю 00000009 пвидиютох 10000299Stnnnnnynnianny:
Клітини інкубували в середовищі ІМЕМ, яке містить 595 НІ-ОСС-ЕВ5 (нагрітий інактивований декстран, покритий обробленою активованим вугіллям фетальною сироваткою ВРХ), на 9б-лункових планшетах.Cells were incubated in IMEM medium containing 595 NI-OSS-EV5 (heated inactivated dextran coated with activated carbon-treated fetal bovine serum) in 9b-well plates.
Відношення числа клітин в оброблених та контрольних планшетах визначали способом забарвлювання крезиловим фіолетовим і виражали у вигляді значень Т/С, де Т/С-(Т1-С0/С-С0) х 100 |(Т- спектральна поглинальна здатність (оптична густина) оброблених культур, С- спектральна поглинальна здатність (оптична густина) контрольних культур, Со- спектральна поглинальна здатність (оптична густина) культур на початку інкубації (1-0). Спектральна поглинальна здатність (оптична густина), що вимірюється, є пропорційною числу клітин.| Більш низькі значення Т/С свідчать про зниження рівня виживання ракових клітин завдяки обробці.The ratio of the number of cells in treated and control tablets was determined by staining with cresyl violet and expressed in the form of T/C values, where T/C-(T1-C0/C-C0) x 100 |(T- spectral absorption capacity (optical density) of treated cultures, C - spectral absorbance (optical density) of control cultures, Co - spectral absorbance (optical density) of cultures at the beginning of incubation (1-0). The spectral absorbance (optical density) measured is proportional to the number of cells.| Lower T/C values indicate a decrease in the survival rate of cancer cells due to treatment.
Коротко кажучи, "75" означає 7595 виживання клітин у порівнянні зі 10095 для контрольних чи з 2595 інгібованих.Briefly, "75" means 7595 cell survival compared to 10095 for control or 2595 inhibited.
ПРИКЛАД 18.EXAMPLE 18.
Повне збереження іп мйго цитотоксичної активності ОХ в пептидному кон'югаті С 741 агоніста І Н-ВН і сч суперактивного 2-піроліно-ОХ (Ов) в пептидному кон'югаті Ов "ді. агоніста І Н-ВН. оComplete preservation of the cytotoxic activity of OX in the peptide conjugate C 741 of the agonist I H-VN and the superactive 2-pyrrolino-OX (Ov) in the peptide conjugate Ov of the agonist I H-VN.
Таблиця 18-1 показує вплив доксорубіцину та його дауносамін-модифікованої похідної, 2-піролінодоксорубіцину (Ов) - у порівнянні до їхніх кон'югатів з агоністичними аналогами І Н-ВН (О-І уз У-Н-ЕН (04"ді ії Овб'дЇ, відповідно) - на ріст клітинної лінії карциноми молочної залози людини (МСЕ-7) і «ж естроген-незалежної клітинної лінії карциноми молочної залози мишей (МХТ) іп міго. їч- «Table 18-1 shows the effect of doxorubicin and its daunosamine-modified derivative, 2-pyrrolinodoxorubicin (Ov) - in comparison with their conjugates with agonist analogues I H-VN (O-I uz U-H-EN (04"di ii Ovb'dY, respectively) - on the growth of the human mammary gland carcinoma cell line (MSE-7) and "the estrogen-independent mouse mammary gland carcinoma cell line (MHT) ip migo. ich-"
М ди рюю тю ко сю ве вк воMdy ryu tyu ko syu ve vk vo
ЗБ деююруєции 00000т91ю 00100001 9896. вже ва 00 ст ПОСЛИ ПОН ПОН НО НОЯ ПО НО НК ЗА СНЗB deyuyuruetsii 00000т91ю 00100001 9896. already at 00 st.
ПИ ПЕ НЯ ПОЛЯ ПОЛЯ ПО ПОН КОН Ох СНИ НО Я НИЄ ТИ 193181 я 00001118 111 з с ач 1 пли ЕЕ" ПО ПО ПО ПО ОНЯ ПОЛООНЯ ПОННЯ ПО КОХ ї» ації ж 17771 ві ще фо | злою | ме | лоз | ов | зов | т дешево 10000061 815PI PE NYA POLYA POLYA PO PON KON Oh SNY BUT I NIE YOU 193181 i 00001118 111 z sach 1 pli EE" PO PO PO PO ONIA POLOONIA PONNYA PO KOH i" ation same 17771 still fo | evil | me | loz | ov | call | t cheap 10000061 815
Ф юю 11117111117111111111111111111м1ю з :"УВИНИ сх: чинни ни зи ПОН НО НО ПЯ ПО НОссаня НС СН юю ав ї» пили п я ПО ПО ПО Я ПОН ПОЛЯ ПОН НО КОХФ юю 11117111117111111111111111111м1ю with :"GUILS sx: active below MON NO NO FRI PO Nossania NS SN yuyu av y" drank p ia PO PO PO I MON POLYA MON NO KOH
ЕВ ПО НЯ ПОС НО СТОНИ НОСА НОЯ ПОН НО НОя НОЯ в 00000011 15 ЇмEV PO NYA POS NO STONY NOSA NOYA PON NO NOYA NOYA in 00000011 15 Im
Клітини МСЕ-7 інкубували в середовищі ІМЕМ, яке містило 595 НІ-ОСС-ЕВ5 на 96б-лункових планшетах. Клітини МХТ інкубували в середовищі : "Визначено аналогічно тому, як в Таблиці 17-1. іме)MSE-7 cells were incubated in IMEM medium containing 595 NI-OSS-EV5 on 96b-well plates. MHT cells were incubated in the medium: "Defined similarly to that in Table 17-1. ime)
ПРИКЛАД 19. 60 Таблиця 19-1 показує, що цитотоксична активність іп мйго аналогів соматостатину, який містить сполуку рох цього винаходу, повністю зберігається.EXAMPLE 19. 60 Table 19-1 shows that the cytotoxic activity of many analogs of somatostatin containing the compound of the present invention is completely preserved.
Вплив цитотоксичних аналогів соматостатину, який містив доксорубіцин, на ріст МІІА Раса-2 лінії ракових клітин підшлункової залози 65 людини іп міго т ши нн ИН ПО ПО ПО пол ПО СТО ПОЛОН ПОН НО ТИThe effect of cytotoxic analogues of somatostatin, which contained doxorubicin, on the growth of MIIA Rasa-2 pancreatic cancer cell line 65 people
Фо (юєююввлит 00000081 и и В Я ПО ПО и ни В ЛО ПО по ПО ЗИFo (yuyuyuuvvlit 00000081 и и В Я ПО По и ни В ЛО По ПО ЗИ
Клітини інкубували в середовищі КРМІ 1640, яке містило 1095 фетальної сироватки ВРХ, на 96-лункових планшетах. т ; хр-ТукСув-Рипв-С-Т тр у Сув- ТА МНа т,---.ШИИШИШCells were incubated in KRMI 1640 medium, which contained 1095 fetal bovine serum, on 96-well plates. t; khr-TukSuv-Ripv-S-T tr u Suv- TA MNa t,---.SHYISHISH
П-РНе- ств Ти О-Ттр- ум а-сСуив Т-МНаP-RNestv Ti O-Ttr-um a-sSuiv T-MNa
ПРИКЛАД 20,EXAMPLE 20,
Вплив цитотоксичних аналогів антагоністів бомбесину, які містили доксорубіцин, на ріст СЕРАС-1 ракових клітин підшлункової залози людини іп мійго Таблиця 20-1 показує, що цититиксична активність іп мйго антагоністичних аналогів бомбесину, який містить ОХ цього винаходу, повністю зберігається. сч щі о вохяояі 01616618 з ЗThe effect of cytotoxic analogues of bombesin antagonists, which contained doxorubicin, on the growth of SERAS-1 human pancreatic cancer cells. Table 20-1 shows that the cytotoxic activity of the antagonist analogues of bombesin, which contains OX of the present invention, is completely preserved. sch shchi about vohyaoiai 01616618 from Z
ЕЕ УНН ПН ЗНННННЯ НОСИН НИЄ З НОТ НОЯ в ва 64 « ни и и ПО ЗО ПО ПОЛ У ПОТ вв во о зв вохтоввю 0100000600000000020000009600000ю00005 - 00001118 0001192 ви 86105395 нн их ИН ИН т и НО ч 2 пн ПЕ ЗИ ПО: ЗИ ПО ПО НО 2 с вко00111111601111в8001501000501 . 11811151 г» пн ни ІІ НО ВИ ИН Є ЗО ОН "біп-Тгтр-Аїа-МаІ-сіу-Ніз-Гец- ц(СНо-М)-Геш-МН2 -ЕЕ UNН МН ЗННННЯ НОСИН НИЕ З НОТ НОЙ в ва 64 " ни и ПО ЗО ПО ПОЛ У ПОТ ввво озвотвую 0100000600000000020000009600000ю00005 - 00001118 0001192 вы 86105395 ИН ИН ПО ПО Т И ПИН BUT 2 s vko00111111601111v8001501000501. 11811151 g» pn ni II BUT VI YN Е ZO ОН "bip-Tgtr-Aia-MaI-siu-Niz-Hec- ts(СНо-М)-Геш-МН2 -
Властивості зв'язування похідних гормонів, що збереглися.Binding properties of preserved hormone derivatives.
Її ПРИКЛАД 21. -1 50 Гормональна активність і здатність приєднуватись до рецептора цитотоксичного агоністичного аналогаHer EXAMPLE 21. -1 50 Hormonal activity and the ability to bind to the receptor of a cytotoxic agonist analogue
Гн-вн а. аг. (О-ГузбІ Н-ВН, що містить ОХ) і Св'"аї. (ФО-Гуз-Н-ВН, що містить 2-піроліно-СОХ) у порівнянніHn-vn a. ag. (O-HuzbI H-VN, containing OX) and Sv'"ai. (FO-Huz-N-VN, containing 2-pyrrolino-SOH) in comparison
Т» з пептидом-носієм, (О-І уві Н-ВЕН і (І Н-відповідь відн. ГН-КН-1) гіпофізу щурів (НМ) грудної залози (НМ) о з бовео0100000008000001128118ю 60 "Відповіді ІН на аналоги визначали в гиперфузній системі суспендованих клітин щуриного мозочка, як це описано в 5. Мідп і А. М.T" with the carrier peptide, (O-I in H-VEN and (I H-response relative to HN-KH-1) pituitary gland of rats (NM) mammary gland (NM) o z boveo0100000008000001128118yu 60 "Responses of IN to analogues were determined in to the hyperfused system of suspended cells of the rat cerebellum, as described in 5. Midp and A.M.
Зспапу, Реріідев 5, 241-247 (1984). альтернативних експериментів щодо зв'язування з використанням (12511|-міченого (О-Тгрб) ГН-КН як радіоактивного ліганду, як це описано в 65 В. 520Ке еї а!., Реріідев5, 15(2), 359-366 (1994). Зв'язувальну спорідненість виражали у формі значень ІС5О, тобто концентрації неміченого аналога, потрібної для інгібування 5095 специфічного зв'язування радіоактивного ліганду.Zspapu, Reriidev 5, 241-247 (1984). alternative binding experiments using (12511|-labeled (O-Tgrb) Н-КН as a radioactive ligand, as described in 65 V. 520Ke ei a!., Reriidev5, 15(2), 359-366 (1994 ).Binding affinity was expressed in the form of IC50 values, that is, the concentration of the unlabeled analog required to inhibit 5095 specific binding of the radioactive ligand.
ПРИКЛАД 22.EXAMPLE 22.
Аналоги соматостатину інгібують виділення гормону росту (СН)) зі спеціально підготовленого щурячого мозочка, як це описано в Сагівоп еї аї., Тпугоігоріп-геїеазіпд Погтопе зійтиціайоп і зотайзвіайп іппірйіоп ої дгоУлЛй Ппогтопе зесгейоп їот репизей гаї адепопурорпузез Епдосгіпоіоду, 94, 1709-(1974). Відповідно, цей спосіб використовували для порівняння цитотоксичних аналогів соматостатину цього винаходу з батьківськими молекулами-носіями стосовно їхньої гормональної активності.Somatostatin analogues inhibit the release of growth hormone (GH)) from specially prepared rat cerebellum, as described in Sagivop ei ai., Tpugoigorip-geieeazipd Pogtope zyytitsiayop i zotaizviayp ippiryiop oi dgoUlLy Ppogtope zesgeyop iot repizey gai adepopurorpuzez Epdoshypoiodu, 94, 17409)-(19 . Accordingly, this method was used to compare the cytotoxic analogues of somatostatin of the present invention with parent carrier molecules in relation to their hormonal activity.
Інгібування рилізинг-гормону гормону росту людини (пОН-РН(1-29)МН2)-індуковане вивільнення гормону / росту з гиперфузних клітин щурячого мозочка за допомогою аналогів соматостатину 5-98-1 т ; р-Ттвр-сув-РНе-С-Ттр-Ї у8- ТА су ТАМН, та 5-121Inhibition of human growth hormone-releasing hormone (pOH-PH(1-29)МН2)-induced release of growth hormone from hyperfused cells of the rat cerebellum with the help of somatostatin analogues 5-98-1 t ; r-Ttvr-suv-РНе-С-Ттр-Й u8- TA su TAMN, and 5-121
ІД тп ; 75 0-РПве-ств- ТУ О-Тер-Г ум аі-СувА т п МНь у порівнянні з 0/0 їхньою цитотоксичною похідною, 0000 1149598-4(рОХ 15-0-91-5-98-1) іID tp; 75 0-RPve-stv-TU O-Ter-G um ai-SuvA t p МН in comparison with 0/0 their cytotoxic derivative, 0000 1149598-4(рОХ 15-0-91-5-98-1) and
О.4149572(рох1-0-91-8-121), відповідно.O.4149572 (roh1-0-91-8-121), respectively.
У суперфузну систему клітин щурячого мозочка аналоги соматостатину вводили протягом Зхв при дозі 1 нм одночасно з 1 НМ пОН-КН(1-29)МН»о. Введення аналогів соматостатину продовжували ще бхв. ОН-відповіді на 20 З-хвилинне введення 1 нМ пОН-КН(1-29)МН» визначали під час перфузії аналогів соматостатину (0 хв) і черезIn the superfused system of rat cerebellar cells, somatostatin analogs were injected during 3 hours at a dose of 1 nm simultaneously with 1 NM pOH-KH(1-29)MH»o. The administration of somatostatin analogues was continued for two years. OH responses to a 20-minute injection of 1 nM pOH-KH(1-29)MH" were determined during perfusion of somatostatin analogues (0 min) and after
ЗО, 60 і 9Охв після припинення введення. Дані наведено у Таблиці 22-1. й соматостатину аналогів соматостатину (5) ва 00100028 айв 1611 - » м соматостатину. «ІZO, 60 and 9Okhv after stopping the introduction. The data are shown in Table 22-1. and somatostatin analogues of somatostatin (5) va 00100028 aiv 1611 - » m somatostatin. "AND
ПРИКЛАД 23. ї-оEXAMPLE 23
Вивчення зв'язування рецепторів з цитотоксичними антагоністами бомбесину Радіоактивне йодування -Study of binding of receptors with cytotoxic bombesin antagonists Radioactive iodination -
ІТУГІВМ (бЗідта) з використанням комплекту пристрою Віо-Кай Епгутореай Радіо Іодіпайоп і виділення монойодованого |125І-ТУг|ВМ виконували у спосіб, описаний раніше (1). Зв'язування міченим (Туг "ВМ і заміщення цитотоксичним аналогом антагоніста бомбесину, ОО 6''9В проводили за допомогою виповненого « моношару клітин Змізз ЗТЗ (отриманих з Американської колекції типових культур) в 24-лункових планшетах в модифікації (2) способу, який викладено у Кгіз еї а! (3). Через три-п'ять днів після посіву моношарові не) с клітини двічі промивали збалансованим сольовим розчином Хенкса (НапКз' Ваїапсед Заїї ЗоІшщіоп (НВ55)) та з інкубували протягом ЗОхв при 372С з використанням 50 пМ (|125І-Туг"|ВМ у відсутності або у присутності певних концентрацій немічених конкурентів (06798 або ВМ) в сумарному об'ємі О,5мл буфера зв'язування (ОМЕМ з 5О0мм НЕРЕБ, 0,195 бичого сироваточного альбуміну (ВЗА), мм МасСі» і 100 мкг/мл бакітрацину, рН:7,4). -1 Неспецифічне зв'язування визначали у присутності 1 мкМ неміченого ліганда. Після трьох промивань льодяним збалансованим сольовим розчином Хенкса (НВБЗ5), який містив 0,195 ВЗА (рн; 7,4), клітини відокремлювали за (22) допомогою 0,0595-го розчину Тгурзіп/0,53мм ЕОТА Ц(етилендіамінтетраоцтова кислота) і переносили в пробірки. їх Радіоактивність вимірювали за допомогою гамма-лічильника ІМісготедіс Зувіетв Іпс, НипівзуЙе, АГ). Дані про характер зв'язування оцінювали за допомогою програм радіоактивного аналізу зв'язування ліганду (МеРПетгзоп, -і (4)). Значення К), що їх представлено в Таблиці 23-1, розраховували за формулою Ченга і Прусоффа (Спепа іITUGIVM (bZidta) using the Vio-Kai Epgutoray Radio Iodipaiop device kit and the selection of monoiodinated |125I-TUg|VM was performed in the manner described earlier (1). Binding with labeled (Tug "VM and replacement with a cytotoxic analogue of the bombesin antagonist, OO 6''9B was carried out using a filled monolayer of Zmizz ZTZ cells (obtained from the American Collection of Type Cultures) in 24-well plates in a modification (2) of the method, which (3). Three to five days after seeding, the monolayer cells were washed twice with Hanks' balanced salt solution (NapKz' Vaiapsed Zaii ZoIshschiop (HB55)) and incubated for 30 h at 372C using 50 pM (|125I-Tug"|VM in the absence or presence of certain concentrations of unlabeled competitors (06798 or VM) in a total volume of 0.5 ml of binding buffer (OMEM with 500 mm NEREB, 0.195 bovine serum albumin (BZA), mm MassSi" and 100 μg/ml bacitracin, pH: 7.4). -1 Non-specific binding was determined in the presence of 1 μM unlabeled ligand. After three washes with ice-cold Hanks' balanced salt solution (NVBZ5), which contained 0.195 VZA (pH; 7 ,4), cells were separated according to (22) using 0 ,0595th solution of Tgurzip/0.53 mm EOTA Ts (ethylenediaminetetraacetic acid) and transferred to test tubes. their radioactivity was measured using a gamma counter IMisgotedis Zuvietv Ips, NypivzuYe, AG). Data on the nature of binding were evaluated using programs of radioactive analysis of ligand binding (MeRPetzhop, -i (4)). The values of K) presented in Table 23-1 were calculated by the formula of Cheng and Prusoff (Spepa and
Т» Ргизоїй) (5). 1. НаІтоз.еда!|., Сапсег І еЦегв,85,111-118 (1994) 2. Саї, ес аї,, Ргос. Маїї. Асад. зсі., ОБА 91:12664 -12668, (1994.) 5 З. Ктів, еї аї., 9. Віої. Спет, 262: 11215-11220, (1987) 4. МеРПеггоп, О.А., ).Рпагтасо Меїпосд3вз, 14: 213-228, (1985)T» Rhyzoiy) (5). 1. NaItoz.eda!|., Sapseg I eTsegv,85,111-118 (1994) 2. Sai, es ai,, Rhos. Maya Asad zsi., OBA 91:12664 -12668, (1994.) 5 Z. Ktiv, ei ai., 9. Vioi. Spet, 262: 11215-11220, (1987) 4. MeRPeggop, O.A., ).Rpagtaso Meiposd3vz, 14: 213-228, (1985)
ГФ) 5. Спепа і Ргизоїї, Віоспет.РІагтасої. 22:3099-3108, (1973) іме) бо 961498(2-піроліно-ПОХ14-О-дй-с1Іп- Тгр-Аїа-Ма!-сіу-Нів-І еш-(-(СН2-М) еи-МН2 з рецепторами бомбесину в клітинній лінії Змівв ЗТЗ у порівнянні з бомбесином б5GF) 5. Spepa and Rgizoii, Viospet.RIagtasoi. 22:3099-3108, (1973) name) bo 961498(2-pyrrolino-POKH14-O-dy-s1Ip-Tgr-Aia-Ma!-siu-Niv-I esh-(-(СН2-М) ей-МН2 with bombesin receptors in the Zmivv ZTZ cell line in comparison with bombesin b5
Порівняння ефективності і токсичності кон'югатів гормонів і цитотоксичного радикалу.Comparison of efficacy and toxicity of conjugates of hormones and cytotoxic radical.
ПРИКЛАД 24.EXAMPLE 24.
Лікування 2-піроліно-ОХ (Ов), цитотоксичним агоністичним аналогом І Н-ВН О51491. (О-ІГузН-ВН, зв'язаним з О67-О-геміглутарат), і (ОХ) естроген-незалежних ракових пухлин молочної залози мишей (МХТ) (К5-49) Для порівняння активності інгібування пухлин цитотоксичною похідною доксорубіцину - С б - та її цілеспрямованого цитотоксичного пептидного кон'югата, Ов, а також добре відомого антинеопластичного агента, ОХ, і для визначення оптимального шляху введення та нетоксичного дозування, МХТ, що має рецептор І Н-КН (3.2) з ділянок пухлин (1мм У), вводили підшкірне мишам-самицям ВбЄО2Е1. Через день після трансплантації мишей за способом випадкового вибору розділяли на групи по п'ять тварин у кожній, після чого розпочинали лікування. 70 Сполуки розчиняли в 0,195-їй трифторооцтовій кислоті (рН2) та вводили внутрішньочеревним шляхом. Групи, схеми лікування та дозування, а також середню тривалість виживання наведено в Таблиці 24-1. Результати підсумовано в Таблиці 24-2 та на Фігурі 1.Treatment with 2-pyrrolino-OX (Ов), a cytotoxic agonist analogue of Н-ВН О51491. (О-ИГузН-ВН, bound to О67-О-hemiglutarate), and (ОХ) of estrogen-independent mouse mammary tumors (МХТ) (К5-49) To compare the tumor inhibition activity of the cytotoxic derivative of doxorubicin - С b - and its targeted cytotoxic peptide conjugate, Ov, as well as the well-known antineoplastic agent, OX, and to determine the optimal route of administration and non-toxic dosage, MHT, which has a receptor I H-KN (3.2) from tumor sites (1 mm U), administered subcutaneously to female VbEO2E1 mice. One day after transplantation, mice were randomly divided into groups of five animals each, after which treatment was started. 70 The compounds were dissolved in 0.195 trifluoroacetic acid (pH2) and administered intraperitoneally. The groups, regimens, and dosages, and median survival are shown in Table 24-1. The results are summarized in Table 24-2 and Figure 1.
У Таблиці 24-2 наведено вплив введення Сб і цитотоксичного аналогу ІН-ВН Ов'"ді на розміри пухлин та виживання мишей з естроген-незалежними раковими пухлинами молочної залози. Як видно з Таблиці 24-2, С 6 у кількості 125 нмол вводили на 1, 2, 7, 8, 14 та 15 день; в групі 2 відзначено було сильно підвищену токсичність із середньою тривалістю виживання 17, 4 днів, що значно менше, ніж тривалість виживання у контрольній групі тварин, яким не вводили препарат. Для порівняння, введення таких самих доз С 6791. (група 6) призвело до збільшення середньої тривалості виживання 30,8 днів, що є значно більшим строком, ніж у контрольній групі. Більш висока ефективність Св'"ді у порівнянні з СО також підтверджується за підсумками порівняння середнього остаточного розміру пухлин в групі 2 (1065мм на 16 день) і в групі 6 (863мм? на 31 день).Table 24-2 shows the effect of administration of Сb and the cytotoxic analogue IN-VN Ov'"di on the size of tumors and survival of mice with estrogen-independent mammary tumors. As can be seen from Table 24-2, C 6 in the amount of 125 nmol was administered on 1, 2, 7, 8, 14, and 15 days; significantly increased toxicity was noted in group 2 with a mean survival time of 17.4 days, which was significantly less than the survival time of the untreated control group. the introduction of the same doses of C 6791. (group 6) led to an increase in the average duration of survival of 30.8 days, which is significantly longer than in the control group. The higher effectiveness of Sv'"di in comparison with CO is also confirmed by the results of the comparison of the average of the final size of tumors in group 2 (1065 mm on day 16) and in group 6 (863 mm on day 31).
Аналогічні висновки можна зробити при порівнянні Ов і Ов'"ді. для іншого режиму лікування, коли О0,5ммоль препаратів вводили по п'ять днів на тиждень впродовж трьох послідовних тижнів.Similar conclusions can be drawn when comparing Ov and Ov'"di. for another treatment regimen, when O0.5 mmol of the drug was administered five days a week for three consecutive weeks.
Доксорубіцин у токсичній дозі (сумарна кількість 1560 нмоль, середня тривалість виживання 20 діб) не може ГаDoxorubicin in a toxic dose (total amount 1560 nmol, average survival time 20 days) cannot
Знищити та викоренити пухлину, у той час як лікування за допомогою С) 8'7ді у нетоксичній дозі (сумарна о кількість 7 нмоль, середня тривалість виживання » 31 діб) призводить до такого показника виживання, як 2 тварини з 5, без подальшого прогресування пухлини. « зо лют 111Гв ї- 78 « 5 2Destroy and eradicate the tumor, while treatment with C) 8'7di at a non-toxic dose (7 nmol total, median survival » 31 days) results in a survival rate of 2 out of 5 animals without further tumor progression . "from February 111Gv-78" 5 2
Ф зв ї- 6 овма 12629112 151 75F zvi-6 ovma 12629112 151 75
КЗН- ов ме 5 2 вKZN-ov me 5 2 c
ЕН їх ' 2 не с в хз " "Виживання -ІЕН их ' 2 ne с в хз " "Survival -I
Ф розм. пухл. / вимір. | трив. без ознак пухл., з 5-ти -І 50 (мм3) вижив. (діб) | твар. на групуF size plump / measurement. | continued without signs of tumor, survived from 5 to 50 (mm3). (days) | creature per group
Доза/ Немає / Пауза між | Триваллі Сумар. кільк на день 18 | на день 31 : ще (нмоль) | тижд бюті 01001011 1волв00100 я 00 015 20501050107800096006 | тая 060000 о ай ВЕНИ ДБН ПОН ПОН По оо Боба НАННЯ НН аг ю з 05502515 и вв 000000000 й зал льні Ноя Бльсо кі НБН ШЕ 60 9і- ой ой ВБДИ БИ НОЯ ПОЛЕ ПИ ПЕН Пак НОДНН МЕН аг пн тре аг 65 13 рох 520 1 6 З 1560 1560 28 20 1 о контрольними даними (використовували тест Дункана).Dose/ None / Pause between | Tripalli Sumar. how many per day 18 | on day 31: more (nmol) | week of beauty 01001011 1volv00100 i 00 015 20501050107800096006 | taya 060000 o ay VENI DBN MON PON Po oo Boba NANNYA NN ag u z 05502515 i vv 000000000 y zal lni Noya Blso ki NBN SHE 60 9i- oi oi VBDY BI NOYA FIELD PI PEN Pak NODNN MEN ag mon tre ag 65 13 roh 520 1 6 From 1560 1560 28 20 1 about control data (Duncan's test was used).
ПРИКЛАД 25. 2 Вплив лікування мишей з естроген-незалежними раковими пухлинами молочної залози (МХТ) (К5-55) окремо сполукою (ОХ), цитотоксичними аналогами І Н-ВН 1Т-107 і 24 "ді.EXAMPLE 25. 2 Effect of treatment of mice with estrogen-independent mammary tumors (MHT) (K5-55) separately with compound (OX), cytotoxic analogs of I H-VN 1T-107 and 24 "di.
Вивчаємі сполуки:The studied compounds:
Од: Доксорубіцин 7-О-геміглутарат, зв'язаний з (О-ІГ уві Н-ЕН 70 тТ-107: М-глутарил-доксорубіцин, зв'язаний з (О-І ув? Н-ЕН Ргос. Май). Асад. Зсі. Мої. 89. Рр. 972-976 (1992); і рохOd: Doxorubicin 7-O-hemiglutarate, bound to (O-Ig in H-EN 70 tT-107: M-glutaryl-doxorubicin, bound to (O-I uv? H-EN Rgos. May). Asad. Zsi. Moi. 89. Rr. 972-976 (1992); and roh
Тестування проводили таким чином:Testing was carried out as follows:
З метою визначення максимальних толерантних доз та порівняння їх впливу частини пухлин МХТ (3.2) (мм) підшкірне вводили мишам-самицям Вб6О2Е1. Через деякий час після трансплантації мишей способом 7/5 випадкового вибору розділяли на групи по п'ять тварин у кожній та лікували окремими внутрішньочеревними ін'єкціями. Групи та дози наведено в Таблиці 25-1. В цій таблиці також наведено кількість мишей, які мали пухлини під час вимірювання розмірів, а також середню тривалість виживання по групах. Зміни розмірів пухлин показано на Фігурі 2. Сполуки розчиняли в 0,195-ому ТЕА (рН 2,0). Розмір пухлин вимірювали на 10,13, 17 та 20 день.In order to determine the maximum tolerated doses and compare their effects, a portion of MHT tumors (3.2) (mm) was injected subcutaneously into female Vb6O2E1 mice. Some time after transplantation, the mice were divided into groups of five animals each and treated with separate intra-abdominal injections by the method of 7/5 random selection. Groups and doses are listed in Table 25-1. This table also shows the number of mice that had tumors when the sizes were measured, as well as the median survival time by group. Changes in tumor size are shown in Figure 2. Compounds were dissolved in 0.195 TEA (pH 2.0). Tumor size was measured on days 10, 13, 17 and 20.
Як показано у Таблиці 25-1 та на Фігурі 2, Т-107, (О-Гуз|-Н-ВЕН, зв'язаний з М-глутарил-ПОХ) є абсолютно неефективним для інгібування росту цього типу пухлини при дозі 850 нмоль/20г ваги миші. Навпаки, С 4 ді, (О-Гуз 51 Н-ВН, зв'язаний з 14-О-глутарил- ОХ) значно пригнічує ріст пухлини (Фігура) в нетоксичній дозі 650 нмоль/20г ваги миші. Сам по собі ОХ виявився високотоксичним (середня тривалість виживання 13,6 діб) при зв одноразовій дозі 650 нмоль/20г ваги миші та суттєво менш ефективним, ніж О4 "ді (Фігура 2). с о вижили виживання (діб) « зо сет 8685185 юю чAs shown in Table 25-1 and Figure 2, T-107, (O-Hus|-H-VEN bound to M-glutaryl-POX) is completely ineffective in inhibiting the growth of this tumor type at a dose of 850 nmol/ 20g of mouse weight. On the contrary, C 4 di, (O-Huz 51 H-VN, connected with 14-O-glutaryl-OX) significantly suppresses tumor growth (Figure) in a non-toxic dose of 650 nmol/20 g of mouse weight. OX itself was highly toxic (average survival time 13.6 days) at a single dose of 650 nmol/20g of mouse weight and significantly less effective than О4 (Figure 2). yuyu ch
ВИ ПО ПОЛ ПОЛЯ ПОН ПОН ПОН НО НО НО с НІ те 35 -YOU PO PO POL POLYA PON PON PON NO NO NO s NI te 35 -
Ви ПО ПО ПОЛЯ ПОЛЯ ПОН ПОН НО НО НО « 5бох | тю | яюз50)00290000002900000220010000000000000ваяю вх лю ятиYou PO PO FIELDS FIELDS PON PON NO NO NO « 5boh | tyu | yayuz50)00290000002900000220010000000000000vayayu in
Форт мє00565600000085000055400100 яю пюв тя юю ще |008550001005660000085001000000000ияют 45 день, було виключено з розрахунку для цих двох груп). -І б ПРИКЛАД 26.Fort ме00565600000085000055400100 яю пув яю юю шет |008550001005660000085001000000000ияют 45 days, was excluded from the calculation for these two groups). -I b EXAMPLE 26.
Вплив цитотоксичних аналогів ЇН-КН на естроген-незалежні ракові пухлини молочної залози мишей (МХТ) ве (К8-47) -І 20 Речовини, які використовували для лікування.The effect of cytotoxic analogues of ХН-КН on estrogen-independent cancerous tumors of the mammary gland of mice (МХТ) and (K8-47) -І 20 Substances used for treatment.
В попередньому експерименті було виявлено, що введення О2 при щоденній дозі 20 нмоль впродовж 17 днів їз» справляло лише помірний вплив на ріст пухлини і було токсичним при дозі 40 нмоль (середня тривалість виживання становила 14,6 днів). Для цього експерименту було вибрано щоденну дозу ЗО нмоль, на базі введення якої проводилося порівняння ефективності та токсичності С 5 "ді. (Со, зв'язаний з (О-ІГ уз УН-ЕН), 2 (піролідино-доксорубіцин) і (О-І уз)-Н-ВН) я С».In a previous experiment, it was found that administration of O2 at a daily dose of 20 nmol for 17 days had only a moderate effect on tumor growth and was toxic at a dose of 40 nmol (mean survival was 14.6 days). For this experiment, a daily dose of 30 nmol was chosen, based on the administration of which a comparison was made of the effectiveness and toxicity of C 5 "di. -I uz)-N-VN) i S".
ГФ) Фрагменти пухлини МХТ (3.2) (1ммУ) трансплантували мишам-самицям В6О2Е1. Лікування розпочиналиGF) MHT (3.2) tumor fragments (1 mmU) were transplanted into female B6O2E1 mice. Treatment was started
ГФ через один день після трансплантації та продовжували 12 днів за допомогою внутрішньочеревних ін'єкцій раз на добу. В усіх групах тварини отримували еквімолярні кількості сполук, як це видно з Таблиці 26-1. Розмір во пухлин вимірювали на 10, 14 та 18 день, на базі чого розраховували об'єм пухлин. Дані представлені в Таблиці 26-1 тп на Фігурі 3.HF one day after transplantation and continued for 12 days by intra-abdominal injections once daily. In all groups, animals received equimolar amounts of the compounds as shown in Table 26-1. The size of the tumors was measured on the 10th, 14th and 18th day, based on which the volume of the tumors was calculated. The data are presented in Table 26-1 tp in Figure 3.
Лікування при щоденній дозі 30 нмоль дауносамін-модифікованого аналога доксорубіцину С 2 (піролідино-0ОХ) призвело до значної інгібіції зростання пухлин (об'єм пухлин 144мм З на 14 день, порівняно з 1391мм3 для тварин контрольної групи), але виявилося надто токсичним для тварин: усі тварини загинули ще до 65 завершення експерименту (середня тривалість виживання становила 17, 9 діб). Аналогічно, застосування 2. у комбінації (суміш) з (О-Г уз Н-ЕН мало істотний інгібувальний ефект на розвиток пухлини (на 14 день об'єм пухлини становив 8Омм), але через високу токсичність середня тривалість доживання (18,5 діб) виявилася значно коротшою, ніж для контрольної групи (23,1 доби). Внаслідок лікування С) 2 ""ді. (до ковалентно зв'язано зTreatment with a daily dose of 30 nmol of the daunosamine-modified analog of doxorubicin C 2 (pyrrolidine-0OX) resulted in a significant inhibition of tumor growth (tumor volume 144 mm C on day 14, compared to 1391 mm3 for control animals), but was too toxic for the animals : all animals died before the end of the experiment (average survival time was 17.9 days). Similarly, the use of 2. in combination (mixture) with (O-G with H-EN) had a significant inhibitory effect on tumor development (on the 14th day, the tumor volume was 8 mm), but due to high toxicity, the average survival time (18.5 days ) turned out to be significantly shorter than for the control group (23.1 days). As a result of treatment C) 2 "di. (to covalently connected with
ІО-Гуз У Н-ЕН) дві тварини загинули, одна на 16, а друга - на 26 день. З тих 8 мишей, що вижили, лише в одної виявилося збільшення розмірів пухлин - по підсумках останнього вимірювання на 18 день, і всі з цих тварин виглядали у той момент здоровими, але пізніше в усіх почали розвиватися пухлини. Середня тривалість виживання для цієї групи була значно більшою (28,3 діб), ніж у контрольній групі. Лікування з використанням окремо 0-І уз Н-ВН не мало впливу на ріст пухлини.IO-Huz In N-EN) two animals died, one on the 16th, and the other on the 26th day. Of the 8 mice that survived, only one showed an increase in the size of the tumors - at the last measurement on day 18, and all of these animals appeared healthy at that time, but later all developed tumors. The average survival time for this group was significantly longer (28.3 days) than in the control group. Treatment using separate 0-I uz H-VN had no effect on tumor growth.
Цей експеримент підтверджує, що більш висока лікувальна ефективність та нижчий рівень періферійної 70 токсичності С2д!. у порівняння з цитотоксичним радикалом С)» є властивістю, пов'язаною саме з ковалентною кон'югацією цитотоксичного радикалу до цілеспрямованого носія аналога І Н-КН. 715 Серед, тривал. виживання після трансплантування (в добах) день: ше ТТТ бек 2This experiment confirms that higher therapeutic efficiency and lower level of peripheral 70 toxicity of C2d!. in comparison with the cytotoxic radical C)" is a property related precisely to the covalent conjugation of the cytotoxic radical to the targeted carrier of the analogue of I H-KN. 715 Middle, duration. survival after transplantation (in days) day: TTT back 2
Бобееюняна; я юю вBobeyunyan; I swim in
Значно коротша, ніж в контрольній групі (р«0,05) Ге! х Значно довша, ніж в контрольній групі (р«0,01), по результатах тестування Дункана. оMuch shorter than in the control group (p«0.05) Gee! х It is significantly longer than in the control group (p>0.01), according to the results of Duncan's test. at
ПРИКЛАД 27.EXAMPLE 27.
Вплив 2-піроліно-СОХ (Об) і цитотоксичного агоністичного аналога І Н-ЕН 05 "ді, (ФО-І уз У Н-ВН, зв'язаний з Ов"!-О-геміглутаратом) на ріст андроген-незалежної карциноми простати у щурів (ЮОиппіпуд К-3327-Н). «The effect of 2-pyrrolino-COX (Ob) and the cytotoxic agonist analogue I H-EN 05 "di, (FO-I uz U H-VN, connected with Ov"!-O-hemiglutarate) on the growth of androgen-independent prostate carcinoma in rats (YuOippipud K-3327-N). "
Самців копенгагенських щурів з гормон-незалежною карциномою простати Юиппіпд К-3327-Н лікували св а, новим цитотоксичним аналогом рилізинг-гормону лютеїнізуючого гормону (І Н-КН), який містить агоніст -Male Copenhagen rats with hormone-independent prostate carcinoma Yuppipd K-3327-H were treated with sva, a new cytotoxic analogue of the luteinizing hormone-releasing hormone (I H-KN), which contains an agonist -
ІО-Гувз У Н-ВН, зв'язаний з 2-піролінодоксорубіцином. В першому експерименті 2-піролінодоксорубіцин вводили « при концентрації 50 нмоль/кг ваги тіла, як окремий препарат (ОО 5), а також як некон'юговану суміш з Ге)IO-Huvz U H-VN bound to 2-pyrrolinodoxorubicin. In the first experiment, 2-pyrrolinodoxorubicin was administered "at a concentration of 50 nmol/kg of body weight, as a separate drug (OO 5), and also as an unconjugated mixture with He)
ІО-Гуз І Н-ЕН або кон'юговану з носієм (0-Іуз"|-Н-ВН (О6'79). Внаслідок другого введення 50 нмоль/кг ваги МIO-Huz AND H-EN or conjugated with the carrier (0-Iuz"|-H-VN (О6'79). As a result of the second administration of 50 nmol/kg of weight M
Зо окремо радикалу Об або у суміші з (О-ГузН-ВЕН усі щури загинули з ознаками загальної інтоксикації, у той час як тварини, яких лікували цитотоксичним кон'югатом І Н-ВН Ов "ді, вижили.From the Ob radical alone or in a mixture with (O-HuzH-VEN) all rats died with signs of general intoxication, while animals treated with the cytotoxic conjugate I H-VN Ov "di survived.
Після 5 тижнів лікування при сумарній дозі 150 нмол/кг ваги Ов'"ді. було відзначено регрес у розвитку пухлин « від вихідного об'єму 8,35--1,7 см на початку експерименту до 4,47--0,8 см, у той час як пухлини у тварин контрольної групи продовжували зростати, і виміри дали значення 17,84 2,2 см. Лікування С 674 також З с призвело до значного зменшення ваги і розмірів пухлини. У другому експерименті, призначеному для порівняння :з» ефективності і токсичності Ов і Ов "ді, режим лікування включав З введення по 25 нмол/кг ваги С 6 або по 25 нмол/кг і 50 нмол/кг Ов "ді.After 5 weeks of treatment at a total dose of 150 nmol/kg of body weight, a regression was noted in the development of tumors "from the initial volume of 8.35--1.7 cm at the beginning of the experiment to 4.47--0.8 cm, while tumors in control animals continued to grow, and the measurements gave a value of 17.84 2.2 cm. Treatment with C 674 also caused a significant decrease in tumor weight and size. In a second experiment, designed for comparison: with » effectiveness and toxicity of Ov and Ov "di, the treatment regimen included administration of 25 nmol/kg of weight C 6 or 25 nmol/kg and 50 nmol/kg of Ov "di.
Коли лікування розпочинали, об'єм пухлин у всіх групах становив від 3,9 і 4,5 см. Через 5 тижнів лікування -І пухлини, що їх лікували 50-ю нмол/кг Ов, зменшилися у об'ємі до 2,3 0,51 сму, у той час як доза 25 б» нмол/кг Ов все ще була токсичною, а лікувальний ефект її полягав лише у зменшенні кінцевого об'єму пухлин до 6,76-4-1,4 см, тобто приблизно був таким самим, як і при застосування дози 25 нмол/кг С в'7ді. (6,744 см), у ть порівнянні з розміром пухлин 15,6--2,2 см? у тих тварин, яких не піддавали лікуванню. Гістологічна оцінка -І 50 свідчила про суттєве зменшення мітотичних клітин лише у групах, де тварин лікували введення С) вд.When treatment was started, the volume of tumors in all groups was between 3.9 and 4.5 cm. After 5 weeks of treatment, tumors treated with 50 nmol/kg of Ov decreased in volume to 2.3 0.51 cmu, while the dose of 25 nmol/kg Ov was still toxic, and its therapeutic effect consisted only in reducing the final volume of tumors to 6.76-4-1.4 cm, that is, it was approximately the same as when using a dose of 25 nmol/kg C in 7 days. (6.744 cm), in comparison with the size of tumors 15.6--2.2 cm? in those animals that were not subjected to treatment. Histological assessment -I 50 indicated a significant decrease in mitotic cells only in groups where animals were treated with the introduction of C) vd.
Т» Рецептори І Н-КН з гарною зв'язувальною здатністю було виявлено в мембранах необроблених препаратами зразках пухлин (Ошппіпд (тог зресітепв), але після лікування за допомогою СО 6 "ді не було виявлено сайтів зв'язування для рецепторів І Н-КН. Інгібування росту пухлин за допомогою АМ-201 і С вд. також пов'язувалося 5 З істотним зменшенням зв'язувальної здатності рецепторів ЕСЕ. Як видно на Фігурах 4-6 цілеспрямований цитотоксичний аналог І Н-ВЕН Ов'"ді. є ефективним протипухлинним агентом, який сприяє знищенню карциномT» I H-KN receptors with good binding ability were detected in the membranes of tumor samples not treated with drugs (Oshppipd (tog zresitepv), but after treatment with CO 6 "and no binding sites for I H-KN receptors were detected . Inhibition of tumor growth by AM-201 and C vd. was also associated with a significant decrease in the binding capacity of ESE receptors. As can be seen in Figures 4-6, the targeted cytotoxic analog I H-VEN Ov'"di. is an effective antitumor an agent that promotes the destruction of carcinomas
ІФ) простати типу Юиппіпд К-3327-Н. Авторські дослідження свідчать про те, що цитотоксичний аналог ІН-КН ко Ов а. є значно менш токсичним, ніж включений антинеопластичний радикал (О65), і набагато активнішим з погляду на інгібування росту пухлин. бо Умовні позначення для фігур по ПРИКЛАДУ 27:IF) prostate type Yuppipd K-3327-N. The author's studies indicate that the cytotoxic analogue of IN-KN ko Ov a. is much less toxic than the included antineoplastic radical (O65), and much more active in terms of tumor growth inhibition. because Conventional designations for figures according to EXAMPLE 27:
Фіг.4. Експеримент 1: Об'єм пухлин у самців копенгагенських щурів з трансплантантами щурячої карциноми простати Юиппіпд К-3327-Н впродовж лікування, яке включало З введення по 50 нмол/кг ваги агоністаFig. 4. Experiment 1: Tumor volume in male Copenhagen rats with transplants of the rat prostate carcinoma Juppipd K-3327-H during treatment, which included administration of 50 nmol/kg agonist weight
ІО-Гув ЧІ Н-ВН і 50 нмол/кг цитотоксичного аналога І Н-ВН Ов'"ді.. Вертикальними лініями позначали дані РЕМ. "7 р-0,05; 7 р«0,01 відносно контрольної групи, за результатами множинного тестування Дункана. Лікування, яке бо умовно позначене стрілками, застосовували на 1,8 і 29 день. - Тварини, що їх лікували Об як окремим препаратом або некон'югованою сумішшю з (О-І уз Н-ВН, загинули на другий тиждень. Для цих двох груп наведено розміри пухлин, зареєстровані на 8 день.IO-Guv CHI H-VN and 50 nmol/kg of the cytotoxic analogue I H-VN Ov'"di.. The vertical lines marked the data of REM. "7 r-0.05; 7 p«0.01 relative to the control group, according to the results of Duncan's multiple testing. The treatment, which is conventionally marked with arrows, was applied on days 1, 8 and 29. - Animals that were treated with Ob as a separate drug or an unconjugated mixture with (O-I with H-VN) died on the second week. For these two groups, the sizes of tumors registered on the 8th day are shown.
Фіг.5. Експеримент ІІ: Вплив лікування 25 нмол/кг сполуки 2-піролінодоксорубіцину (О 6), 25 нмол/кг і 50 нмол/кг цитотоксичного аналога І Н-ВН Ов'"ді. на об'єм пухлин у щурів з раковою пухлинною простати ОиппіпуFig. 5. Experiment II: The effect of treatment with 25 nmol/kg of the 2-pyrrolinodoxorubicin compound (O 6), 25 nmol/kg and 50 nmol/kg of the cytotoxic analogue I H-VN Ov'"di. on the volume of tumors in rats with Oippipp's cancerous prostate tumor
К-3327-Н. Вертикальними лініями позначено РЕМ. " р«0,05; 7 р«0,01 у порівнянні з контрольною групою.K-3327-N. REM is indicated by vertical lines. "p" 0.05; 7 p" 0.01 in comparison with the control group.
Лікування, позначене стрілками, застосовували З рази, а саме на 1, 8 і 29 день.The treatment indicated by the arrows was applied three times, namely on day 1, 8 and 29.
Фіг.6. Експеримент ІІ: Вплив лікування введенням 25 нмол/кг 2-піролінодоксорубіцину (О 6), 25 нмол/кг і 50 нмол/кг цитотоксичного аналога ІН-КН Од на вагу тіла копенгагенських щурів з раковими пухлинами 70 простати Юиппіпд К-3327-Н. Вертикальними лініями позначено результати РЕМ. " р«0,05;5 и р«0,01 стосовно контрольної групи. Лікування, умовно позначене стрілками, проводили З рази, а саме на 1, 8 і 29 день.Fig. 6. Experiment II: The effect of treatment with the introduction of 25 nmol/kg 2-pyrrolinodoxorubicin (O 6), 25 nmol/kg and 50 nmol/kg of the cytotoxic analog IN-KN Od on the body weight of Copenhagen rats with 70 prostate cancer tumors Yuppipd K-3327-N. The results of REM are indicated by vertical lines. " p«0.05;5 and p«0.01 in relation to the control group. The treatment conventionally indicated by arrows was carried out 3 times, namely on the 1st, 8th and 29th day.
ПРИКЛАД 28.EXAMPLE 28.
Порівняльні дослідження впливу доксорубіцину (ОХ) і цілеспрямованого цитотоксичного агоністичного аналога І Н-ВН 0. "ді. (ФО-І уз Н-ВН, зв'язаний з ОХ 7-О-геміглутаратом) на ріст ОМ-1063 карциноми яєчника 79 людини у "голих" мишей. Клітинну лінію епітеліального рака яєчника людини ОМ-1063, походила з метастазуючої соскоподібної цистаденокарциноми яєчника 57-річної жінки (Ногом/її? ейа). (1985) Опсоіроду 42, 332-337).Comparative studies of the effect of doxorubicin (OX) and the targeted cytotoxic agonist analog I H-VN 0. "di. (FO-I uz H-VN, bound to OX 7-O-hemiglutarate) on the growth of OM-1063 ovarian carcinoma 79 human in "naked" mice. The human ovarian epithelial cancer cell line OM-1063 was derived from a metastatic mammary cystadenocarcinoma of the ovary of a 57-year-old woman (Nogom/her? eia). (1985) Opsoirodu 42, 332-337).
Десять мільйонів клітин ОМ-1063 підшкірне вводили в організм трьох "голих" мишей з метою спостереження за розвитком пухлини. Частинки розміром їмм3 цих пухлин трансплантували в організми шістдесяти тварин з метою дослідження інгібування їх росту іп мімо. Метою експерименту було показати, що - як наслідок присутності рецепторів І Н-КН на ОМ-1063 - цитотоксичний кон'югат І! Н-КН виявився більш ефективним та менш токсичним, ніж ОХ, цитотоксичний радикал, який входив до складу досліджуваної речовини. Таким чином, вплив цитотоксичного кон'югата ЇН-КН порівнювали з впливом БОХ, суміші ОХ молекулою-носієм, впливом окремо носія, а також з розвитком пухлин в контрольних групах тварин, що їх не піддавали лікуванню. Всі ін'єкції виконували внутрішньочеревним шляхом. Сполуки розчиняли в 0,990-ому розчині хлориду натрію у воді с (слабкому розсолі). Ге)Ten million OM-1063 cells were injected subcutaneously into the body of three "naked" mice in order to monitor tumor development. Particles the size of mm3 of these tumors were transplanted into the bodies of sixty animals for the purpose of researching the inhibition of their growth by mimo. The purpose of the experiment was to show that - as a result of the presence of I H-KN receptors on OM-1063 - the cytotoxic conjugate I! H-KN turned out to be more effective and less toxic than OX, a cytotoxic radical that was part of the substance under study. Thus, the effect of the cytotoxic ІН-КН conjugate was compared with the effect of BOH, a mixture of OH with a carrier molecule, the effect of the carrier alone, as well as with the development of tumors in control groups of animals that were not treated. All injections were performed intraperitoneally. The compounds were dissolved in a 0.990% solution of sodium chloride in water (weak brine). Gee)
Мишей із середнім розміром 15мм? розділяли на шість груп по дев'ять тварин і піддавали їх лікуванню протягом семи днів після введення пухлини за такою схемою: група 1, слабкий розсіл; група 2, 0 4 "ді. при дозі 700 нмол/г20г ваги тварини; група 3, 2.4 7д4і при дозі 413 нмол/20г ваги тіла тварини (доза, що є максимально «г зо допустимою - МДД - для ОХ); група 4, ОХ при дозі 413 нмол/20г ваги тварини (МДД); група 5, суміш сполуки рох (700 нмол/20г ваги тварини) і 700 нмол/20г ваги тварини - сполуки (О-Г уз Н-ВЕН; група 6, аналог - агоністаносія (О-І ув У Н-ВН при дозі 700 нмол/20г ваги тварини. ЙA mouse with an average size of 15mm? were divided into six groups of nine animals and were treated for seven days after tumor injection according to the following scheme: group 1, weak saline; group 2, 0 4 "di. at a dose of 700 nmol/g20g of the animal's weight; group 3, 2.4 7d4i at a dose of 413 nmol/20g of the animal's body weight (the dose that is the maximum "g with admissible - MDD - for OX); group 4 , OX at a dose of 413 nmol/20g of animal weight (MDD); group 5, a mixture of the compound roh (700 nmol/20g of animal weight) and 700 nmol/20g of animal weight - compounds (O-H uz H-VEN; group 6, analog - agonistic effect (O-I uv U H-VN at a dose of 700 nmol/20 g of animal weight.
Аналіз рецепрорі ОМ-1063 підтвердив наявність сайтив зв'язування для ІН-КН з високим рівнем спорідненості. шоAnalysis of the OM-1063 receptor confirmed the presence of binding sites for IN-KN with a high level of affinity. what
Результати: як видно на Фіг.7, значне інгібування росту пухлин було досягнуто за допомогою лікування ї- полукою 4 "ді. при дозі 413 нмол/20г ваги тіла тварини (група 3). У тварин не було виявлено суттєвих ознак інтоксикації. Для порівняння, лікування сполукою БОХ, яку вводили у такій самій дозі - 413 нмол/20 ваги (12мг/кг, МДД, група 4) не призвело для суттєвого інгібування росту пухлин у трьох тварин, які дожили до « кінця експерименту. Три тварини загинуло на п'ятий день і шість тварин - на дев'ятий день, внаслідок інтоксикації. При більшій дозі (700 нмол/20г ваги, група 2) введення Од! було відзначено значне інгібування З с росту пухлини (Фіг.7). Дві тварини з дев'яти загинуло через інтоксикацію і одна - випадково. У шести тварин, » що вижили, в кінці експерименту було виявлено втрату ваги близько 20905. В групі 6 таку саму високу дозу (700 нмол/20г ваги) сполуки ОХ змішували з 700 нмол сполуки (О-І уз) Н-ВЕН. На 5 день всі тварини в цій групі загинули через сильну інтоксикацію.Results: as can be seen in Fig. 7, a significant inhibition of tumor growth was achieved by treatment with i-polku 4 "di. at a dose of 413 nmol/20g of the animal's body weight (group 3). No significant signs of intoxication were found in the animals. For comparison , treatment with the BOH compound, which was administered at the same dose - 413 nmol/20 body weight (12 mg/kg, DMD, group 4) did not result in a significant inhibition of tumor growth in three animals that survived until the end of the experiment. Three animals died at on the eighth day and six animals on the ninth day, as a result of intoxication. At a higher dose (700 nmol/20 g of weight, group 2) administration of Od!, a significant inhibition of tumor growth was noted (Fig. 7). Two animals out of nine "one died due to intoxication and one died by accident. In the six animals that survived, at the end of the experiment, a weight loss of about 20905 was detected. In group 6, the same high dose (700 nmol/20g of weight) of the OX compound was mixed with 700 nmol of the compound ( O-I uz) H-VEN On day 5, all animals in this group died due to severe intoxication.
Висновки: результати авторських досліджень свідчать про те, що - завдяки наявності рецепторів для І Н-КНConclusions: the results of the author's research indicate that - due to the presence of receptors for I H-KN
Ш- : "теді : и и ' 14 на клітинах епітеліального рака яєчника ОМ-1063 - цілеспрямований цитотоксичний кон'югат ГН-КН ОО а. (о) відзначається нижчою токсичністю та більшою протипухлинною активністю, ніж доксорубіцин (0 4), їз цитотоксичний радикал, який він містить.Ш- : "tedi : и и ' 14 on epithelial ovarian cancer cells OM-1063 - a targeted cytotoxic conjugate ГН-КН ОО а. (о) is characterized by lower toxicity and greater antitumor activity than doxorubicin (0 4), which is cytotoxic the radical it contains.
Claims (5)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA98063318A UA67722C2 (en) | 1995-11-27 | 1996-11-14 | Anthracycline derivatives, pharmaceutical composition, a method for treatment of mammals with cancer diseases, a method for the preparation of pharmaceutical composition for treatment of different tumors of humans |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA76474C2 true UA76474C2 (en) | 2006-08-15 |
Family
ID=37503887
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2004010284A UA76474C2 (en) | 1996-11-14 | 1996-11-14 | Method for conversion of nitrogen of primary aminogroup - or --hydroxy of primary amine into nitrogen of monounsaturated compound |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA76474C2 (en) |
-
1996
- 1996-11-14 UA UA2004010284A patent/UA76474C2/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3987575B2 (en) | Target cytotoxic anthracycline analogues | |
| JP6784790B2 (en) | Methylene carbamate linker for use with targeted drug conjugates | |
| ES2886884T3 (en) | Targeted Delivery of Pharmaceutical Substances Containing Tertiary Amines | |
| Nagy et al. | Cytotoxic analogs of luteinizing hormone-releasing hormone containing doxorubicin or 2-pyrrolinodoxorubicin, a derivative 500-1000 times more potent. | |
| Orbán et al. | In vitro degradation and antitumor activity of oxime bond-linked daunorubicin–GnRH-III bioconjugates and DNA-binding properties of daunorubicin–amino acid metabolites | |
| EA037203B1 (en) | Antibody-drug conjugates with self-stabilizing linkers | |
| CA2976064A1 (en) | Antibody drug conjugates | |
| UA76474C2 (en) | Method for conversion of nitrogen of primary aminogroup - or --hydroxy of primary amine into nitrogen of monounsaturated compound | |
| AU748507B2 (en) | Novel synthetic reaction and targeted cytotoxic anthracycline analogs obtained thereby | |
| BR112017003975B1 (en) | COMPOSITION OF DRUG-LINKER CONJUGATE, AND DRUG-BINDING COMPOUND |