UA20629U - Method for neurochemical assessment of generation of conditioned response of passive avoidance in animals - Google Patents
Method for neurochemical assessment of generation of conditioned response of passive avoidance in animals Download PDFInfo
- Publication number
- UA20629U UA20629U UAU200512600U UAU200512600U UA20629U UA 20629 U UA20629 U UA 20629U UA U200512600 U UAU200512600 U UA U200512600U UA U200512600 U UAU200512600 U UA U200512600U UA 20629 U UA20629 U UA 20629U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- formation
- brain
- neurochemical
- animals
- assessment
- Prior art date
Links
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 title claims abstract description 20
- 230000001722 neurochemical effect Effects 0.000 title claims abstract description 11
- 230000004044 response Effects 0.000 title abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 22
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000035699 permeability Effects 0.000 claims abstract description 11
- 210000000478 neocortex Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 210000001103 thalamus Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 31
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims description 27
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 21
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims description 11
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 claims description 9
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 claims description 9
- 210000001577 neostriatum Anatomy 0.000 claims description 9
- 102000005600 Cathepsins Human genes 0.000 claims description 7
- 108010084457 Cathepsins Proteins 0.000 claims description 7
- 102000004175 Cathepsin H Human genes 0.000 abstract description 16
- 108090000619 Cathepsin H Proteins 0.000 abstract description 16
- 210000004720 cerebrum Anatomy 0.000 abstract 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 30
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 13
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 8
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 5
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 4
- 238000012549 training Methods 0.000 description 4
- GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 1-prop-2-ynoxypropan-2-ol Chemical compound CC(O)COCC#C GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000013563 Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 3
- 108010051457 Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 210000005153 frontal cortex Anatomy 0.000 description 3
- 102000004400 Aminopeptidases Human genes 0.000 description 2
- 108090000915 Aminopeptidases Proteins 0.000 description 2
- 208000000044 Amnesia Diseases 0.000 description 2
- 208000031091 Amnestic disease Diseases 0.000 description 2
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 2
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 2
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 2
- 230000006986 amnesia Effects 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000036403 neuro physiology Effects 0.000 description 2
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 2
- 230000007171 neuropathology Effects 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 2
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 description 2
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 2
- 108010067225 Cell Adhesion Molecules Proteins 0.000 description 1
- 102000016289 Cell Adhesion Molecules Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 101000623903 Homo sapiens Cell surface glycoprotein MUC18 Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 230000003376 axonal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001925 catabolic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007248 cellular mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- JVXXKQIRGQDWOJ-UHFFFAOYSA-N naphthalene-2-carboxamide Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C(=O)N)=CC=C21 JVXXKQIRGQDWOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008533 pain sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000000946 synaptic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Photometry And Measurement Of Optical Pulse Characteristics (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Спосіб відноситься до медицини, насамперед до визначення, вимірів або реєстрації з діагностичною метою 2 після виклику відповідних реакцій і може бути використаний в теоретичній чи клінічній психології, нейрофізіології, невропатології тощо.The method refers to medicine, primarily to determination, measurements or registration with a diagnostic purpose 2 after causing appropriate reactions and can be used in theoretical or clinical psychology, neurophysiology, neuropathology, etc.
Відомий спосіб оцінки формування умовної реакції пасивного уникнення тварини, що включає формування реакції, візуальну реєстрацію та хронометраж окремих компонентів поведінки після початку навчання (11.There is a known method of assessing the formation of a conditioned reaction of passive avoidance of an animal, which includes the formation of a reaction, visual registration and timing of individual components of behavior after the beginning of training (11.
До причин, що перешкоджають досягненню очікуваного технічного результату відносяться як візуалізація 70 компонентів поведінки, так і хронометраж його окремих компонентів. Це пояснюється тим, що звичайна візуалізація позбавлена кількісних характеристик, хронометраж має суто суб'єктивний характер, а сукупність цих приймань значно знижує вірогідність оцінки результатів формування умовної реакції пасивного уникнення (УРПУ) тварини.The reasons preventing the achievement of the expected technical result include both the visualization of 70 components of behavior and the timing of its individual components. This is explained by the fact that the usual visualization lacks quantitative characteristics, the timing is purely subjective, and the totality of these receptions significantly reduces the probability of evaluating the results of the formation of the animal's conditioned passive avoidance response (CPR).
Більш висока вірогідність результатів формування УРПУ властива способу, що грунтується на реєстрації змін 79 клітинних контактів головного мозку, в якому після навчання тварини визначають кількість експресії глікопротеїну МСАМ (Мечсгаї! СеїІ Аапевзіоп МоіІесшціе) в різноманітних структурах головного мозку (21.A higher probability of the results of the formation of URPU is characteristic of the method based on the registration of changes in 79 cell contacts of the brain, in which after training the animals determine the amount of expression of the glycoprotein MSAM (Mechsgai! Seyi Aapevsiop MoiIesshtie) in various structures of the brain (21.
Кількісне визначення експресії глікопротеїну МСАМ відбиває залежність концентрацій' білка, відповідального за процеси структурного синаптичного ремоделю-вання та аксонального зростання від характеру поведінки тварини |З), а від так, забезпечує оцінку ступеня участі окремих утворень головного мозку в процесі формування умовно-рефлекторних реакцій. Але зменшення уваги до активності катепсинів, властивих процесам катаболічного білкового обміну часто обмежує інформативність відомого технічного рішення.Quantitative determination of the expression of the MCAM glycoprotein reflects the dependence of the concentration of the protein responsible for the processes of structural synaptic remodeling and axonal growth on the nature of the animal's behavior |Z), and thus provides an assessment of the degree of participation of individual brain formations in the process of forming conditioned reflex reactions. But the reduction of attention to the activity of cathepsins, inherent in the processes of catabolic protein exchange, often limits the informativeness of the known technical solution.
Відомий спосіб оцінки формування умовної реакції пасивного уникнення тварини, що включає утворення умовної реакції та наступне дослідження активності кислої фосфатази, РНК-ази, катепсинів, як лізосомних ферментів, до гемоглобіну в корі й гіпокампі головного мозку |41.There is a known method of assessing the formation of a conditioned reaction of passive avoidance of an animal, which includes the formation of a conditioned reaction and the subsequent study of the activity of acid phosphatase, RNase, cathepsins, as lysosomal enzymes, to hemoglobin in the cortex and hippocampus of the brain |41.
Дослідження вільної активності чисельних лізосомних ферментів дещо підвищує інформативність об'єкта, шо насамперед, завдяки визначенню рівня протеолізу катепсинів в структурах мозку, але активність останніх відбиває лише сумарну протеолітичну реакцію до гемоглобіну, а від того, стримує подальший розвиток інформативності, а інколи є неспроможним при оцінці формування УРПУ для щурів деяких ліній.The study of the free activity of numerous lysosomal enzymes somewhat increases the informativeness of the object, which is primarily due to the determination of the level of proteolysis of cathepsins in the brain structures, but the activity of the latter reflects only the total proteolytic reaction to hemoglobin, and in addition, restrains the further development of informativeness, and is sometimes unable to evaluation of the formation of URPU for rats of some lines.
Найбільш близьким по кількості істотних ознак до заявленого способу є спосіб нейрохімічної оцінки о формування умовної реакції пасивного уникнення тварини, що включає утворення умовної реакції шляхом с комбінаційного світлового і електричного впливів і наступне дослідження проникності мембран лізосом великих півкуль мозку, з визначенням активності кислої фосфатази, РНК-ази, а проникності мембран лізосом великих ее, півкуль мозку - по концентрації лізосомних фракцій в гомогенатах останніх |5). Га»)The method of neurochemical assessment of the formation of a conditioned reaction of passive avoidance of an animal, which includes the formation of a conditioned reaction by combined light and electrical effects and the subsequent study of the permeability of the membranes of lysosomes of the large hemispheres of the brain, with the determination of the activity of acid phosphatase, RNA, is the closest in terms of the number of essential features to the claimed method -ases, and the permeability of the membranes of lysosomes of large ee, brain hemispheres - according to the concentration of lysosomal fractions in the homogenates of the latter |5). Ha")
Як і попереднє технічне рішення, прототип забезпечує реєстрацію слідів навчання тварин по змініLike the previous technical solution, the prototype ensures the registration of the traces of the animals' training after the shift
Зо проникності мембран лізосом мозку, а за рахунок умовного та безумовного подразнень, а саме, комбінації с світлового та електричного впливів - посилення ефективності формування УРПУ тварини після навчання у щурів відомих ліній.Due to the permeability of the brain lysosome membranes, and due to conditional and unconditional irritations, namely, a combination of light and electrical influences, the effectiveness of the formation of the animal's URPU after training in rats of known lines.
Проте, ігнорування визначення вмісту лізосомної кислої протеїнази чи протеолізу у фронтальній зоні « неокортексу, гіпокампі, Варолієвому мості, медіальному таламусі, смугастому тілі при виробленні УРПУ ще 50 стримує інформативність об'єкта, бо зміна рівня вільної активності катепсинів в них більш компетентно З с відбиває зміни рівня проникності мембран лізосом, а кисла фосфатаза разом з РНК-азою головного мозку,However, ignoring the determination of the content of lysosomal acid proteinase or proteolysis in the frontal zone "neocortex, hippocampus, bridge of Varoli, medial thalamus, striatum during the production of URPU still 50 restrains the informativeness of the object, because the change in the level of free activity of cathepsins in them more competently reflects C changes in the level of permeability of lysosome membranes, and acid phosphatase together with brain RNase,
І» навпаки, виглядають під час протеолізу та модифікації білків не досить інформативними до відбиття слідів формування нейрологічної пам'яті й рівня вільного катепсину Н у великих півкулях мозку.On the contrary, during proteolysis and modification of proteins, they appear not informative enough to reflect traces of the formation of neurological memory and the level of free cathepsin H in the large hemispheres of the brain.
В основу заявленого способу поставлено задачу розробити такий спосіб нейро-хімічної оцінки формування умовної реакції пасивного уникнення тварини, який шляхом залучення структур головного мозку, що відповідають о за формування пам'яті, забезпечує покращення інформативності при використанні. ав | Для вирішення поставленої задачі у відомому способі нейрохімічної оцінки формування умовної реакції пасивного уникнення тварини, що включає утворення умовної реакції шляхом комбінаційного світлового та б електричного впливів і наступне дослідження проникності мембран лізосом великих півкуль мозку, додатково ка 20 визначають рівень вільної активності лізосомного цистеїнового катепсину Н у фронтальній зоні неокортексу, гіпокампі, Варолієвому мості, медіальному таламусі й смугастому тілі. с Ознаки, які відрізняють пропонований спосіб нейрохімічної оцінки формування умовної реакції пасивного уникнення тварини від прототипу полягають у додатковому визначенні рівня вільної активності лізосомного цистеїнового катепсину Н у фронтальній зоні неокортексу, гіпокампі, Варолієвому мості, медіальному таламусі й 25 смугастому тілі та забезпечують покращення інформативності, бо вищезазначені структури головного мозку с приймають участь у формуванні енграм пам'яті, а під час протеолізу та модифікації білків відбивають рівні змін цистеїнового катепсину Н і проникності мембран лізосом. Кількісне ж визначення вмісту вільного катепсинуThe stated method is based on the task of developing such a method of neuro-chemical assessment of the formation of a conditioned reaction of passive avoidance of an animal, which, by involving brain structures responsible for the formation of memory, ensures improved informativeness when used. av | To solve the problem in the well-known method of neurochemical assessment of the formation of a conditioned reaction of passive avoidance of an animal, which includes the formation of a conditioned reaction through combined light and electrical influences and the subsequent study of the permeability of the membranes of lysosomes of the large hemispheres of the brain, the level of free activity of the lysosomal cysteine cathepsin H is additionally determined the frontal zone of the neocortex, the hippocampus, the Varolia bridge, the medial thalamus and the striatum. c The features that distinguish the proposed method of neurochemical evaluation of the formation of the conditioned reaction of passive avoidance of the animal from the prototype consist in the additional determination of the level of free activity of lysosomal cysteine cathepsin H in the frontal zone of the neocortex, hippocampus, Varoliv bridge, medial thalamus and striatum and provide improved informativeness, because the above-mentioned structures of the brain take part in the formation of memory engrams, and during proteolysis and modification of proteins, they reflect changes in the levels of cysteine cathepsin H and the permeability of lysosome membranes. Quantitative determination of free cathepsin content
Н після вироблення умовної реакції тварини, дозволяє оцінити ступінь й тривалість участі окремих утворень головного мозку в процесі формування умовно-рефлекторної реакції, що констатує покращення інформативності бо дослідження.After developing a conditioned reaction of the animal, it allows to assess the degree and duration of participation of individual brain formations in the process of forming a conditioned reflex reaction, which states the improvement of the informativeness of the research.
Сукупність наданих ознак дозволяє визначити рівень цистеїнового катепсину Н після формування УРПУ у фронтальній корі, гіпокампі та Варолієвому мості мозкових структур, що у тварин відповідають за формування пам'яті, а від того, має зв'язок з покращенням заявленого технічного результату. Зміни концентрації вільного катепсину Н відбивають реакцію лізосомних протеїназ на формування, кодування та відтворення слідів бо нейрологічної пам'яті, наприклад, на молекулярних, надмолекулярних, субклітинних і міжклітинних рівнях.The set of given signs allows to determine the level of cysteine cathepsin H after the formation of URPU in the frontal cortex, hippocampus and Varolia's bridge of brain structures responsible for the formation of memory in animals, and therefore has a connection with the improvement of the declared technical result. Changes in the concentration of free cathepsin H reflect the reaction of lysosomal proteinases to the formation, encoding and reproduction of traces of neurological memory, for example, at the molecular, supramolecular, subcellular and intercellular levels.
На фіг. надана діаграма, що ілюструє розподіл рівня вільної активності цистеїнового катепсину Н у фронтальній корі (1), смугастому тілі (2), гіпокампі (3), медіальному таламусі (4) та Варолієвому мості (5) головного мозку інтактних, навчених і анам-незованих щурів після формування УРПУ.In fig. a diagram illustrating the distribution of the level of free activity of cysteine cathepsin H in the frontal cortex (1), striatum (2), hippocampus (3), medial thalamus (4) and pons of Varolia (5) of the brains of intact, trained and anamnesis rats after the formation of URPU.
Відомості, які підтверджують можливість відтворення способу полягають у наступному.Information that confirms the possibility of reproducing the method is as follows.
Для здійснення способу нейрохімічної оцінки формування УРПУ тварини можливо залучення білих статевозрілих щурів, спеціалізованого приміщення для їх подразнення, складеного з великої освітленої та малої темної камер, що поєднані круглим отвором і постачені електрифікованою підлогою, а для визначення кількісного вмісту катепсину Н-гомогенати на трис-буферній основі ("Зідта", ОА), гідролізат 2-нафіламіду І-лейцину 70. ЄКосп-ЦПоНЕ Гарогаюгіез", Англія) та спектрофотометр.To carry out a method of neurochemical assessment of the formation of the animal's URPU, it is possible to involve white sexually mature rats, a specialized room for their irritation, consisting of a large lighted and a small dark chamber, connected by a round hole and supplied with an electrified floor, and to determine the quantitative content of cathepsin H-homogenates on tris- on a buffer base ("Zidta", OA), hydrolyzate of 2-nafilamide I-leucine 70. ЕКосп-ЦПоНЕ Garogayugiez, England) and a spectrophotometer.
Сутність способу нейрохімічної оцінки формування УРПУ тварини полягає в утворенні умовної реакції шляхом комбінаційного світлового та електричного впливів, в дослідженні проникності мембран лізосомних фракцій, вмісту лізосомного цистеїнового катепсину Н у фронтальній зоні неокортексу, гіпокампі, Варолієвому мості, медіальному таламусі та смугастому тілі. Визначеня кількості цистеїнового катепсину Н в гомогенатах виділених /5 структур здійснюють шляхом гідроліза хромогенного субстрату лей-2-НА, з використанням спектрофотометра та ультрацентрифуги після відповідної обробки аналізату в буферних розчинах.The essence of the method of neurochemical evaluation of the formation of the URPU of an animal consists in the formation of a conditioned reaction through combined light and electrical effects, in the study of the permeability of the membranes of lysosomal fractions, the content of lysosomal cysteine cathepsin H in the frontal zone of the neocortex, the hippocampus, the Varolia bridge, the medial thalamus and the striatum. Determination of the amount of cysteine cathepsin H in homogenates of selected /5 structures is carried out by hydrolysis of the chromogenic substrate leu-2-HA, using a spectrophotometer and an ultracentrifuge after appropriate treatment of the analyte in buffer solutions.
Для перевірки інформативності способу був проведений експеримент (Таблиця 1). Перед формуванням УРПУ щура, його розташовували в середині освітленої камери, хвостом до отвору в темний відсік приміщення. Тварина досліджувала освітлений відсік, знаходила отвір у темну камеру та переходила до неї. Латентний період такої реакції враховували як час з моменту розміщення тварини в камері, до повного переходу до темної камери. Через 15сє на підлогу камери подавали змінний імпульсний струм (тривалістю, щонайменше 1Омс), інтенсивність стимуляції для кожної з тварин підбирали індивідуально за порогом больової чутливості. Отвір між камерами залишали відчиненим. За щуром, який переміщувався до освітленої камери та намагався повернутися до темного приміщення спостерігали протягом 3-х хвилин. Тварин, які повторно заходили до темної камери протягом 3-хAn experiment was conducted to check the informativeness of the method (Table 1). Before the formation of the rat's URPU, it was placed in the middle of the lighted chamber, with its tail to the hole in the dark compartment of the room. The animal explored the lighted compartment, found an opening into the dark chamber and moved to it. The latent period of such a reaction was calculated as the time from the moment the animal was placed in the chamber until the complete transition to the dark chamber. After 15 seconds, an alternating pulse current (with a duration of at least 1 Ohms) was applied to the floor of the chamber, the intensity of stimulation for each animal was selected individually according to the threshold of pain sensitivity. The opening between the chambers was left open. A rat that moved to the lighted chamber and tried to return to the dark room was observed for 3 minutes. Animals that repeatedly entered the dark chamber for 3
Хвилин з експерименту вилучали. Через 2 години після вироблення пасивного оборонного навичку кожну з тварин піддавали електрошокому впливу (І-200мА, (ї-500мс) для виклику амнезії та втрати УРПУ. Протягом 72 годин но спостерігали за поведінкою навчених щурів, а коли вони не відрізнялись від поведінки інтактних щурів, здійснювали перевірку збереження умовної реакції. За результатами перевірки щурів розділяли на 2 групи: з амнезією, втратою навички (3095) та збереженням УРПУ (7095). Після декапітації, у тварин вилучали головний б зо Мозок і виділяли фронтальну зону неокортексу, гіпокамп, Варолієв міст, медіальний таламус та смугасте тіло, які відбивають слід феномену пам'яті. Активність вільного катепсину Н, у відповідністю з корисною моделлю, с визначали у фронтальній зоні неокортексу, смугастому тілі, гіпокампі, медіальній частині таламусу і ГеMinutes were removed from the experiment. 2 hours after developing a passive defensive skill, each of the animals was subjected to an electric shock (I-200mA, (i-500ms) to cause amnesia and loss of URPU. During 72 hours, the behavior of trained rats was observed, and when they did not differ from the behavior of intact rats , checked the preservation of the conditioned response. According to the results of the check, the rats were divided into 2 groups: with amnesia, loss of skills (3095) and preservation of URPU (7095). After decapitation, the animals were removed from the brain and the frontal zone of the neocortex, hippocampus, Varoliev was isolated pons, medial thalamus and striatum, which reflect the trace of the memory phenomenon.The activity of free cathepsin H, in accordance with the useful model, was determined in the frontal zone of the neocortex, striatum, hippocampus, medial part of the thalamus and Ge
Варолієвому мості. Гомогенати (1095) готували на 0,025 трисбуфері, виготовленому на основі Масі (рН 7,4).Varoliev bridge. Homogenates (1095) were prepared in 0.025 Trisbuffer made on the basis of Mass (pH 7.4).
Фактори активності досліджували спектрофотометричним шляхом, за гідролізом 2-нафтіламіду І-лейцину. оActivity factors were studied spectrophotometrically by hydrolysis of 2-naphthylamide I-leucine. at
При цьому було встановлено, що у різних структурах мозку досліджуваних тварин при виробленні УРПУ с відзначались вірогідні зміни рівнів амінопептидазної активності катепсину Н як у амнезованих тварин, так і тварин, які після електрошокового впливу зберігали умовну навичку. Через 72 години спостерігалось виражене підвищення активності ферменту у всіх структурах мозку тих щурів, що зберегли навичку з істотними змінами у фронтальній корі, гіпокампі та Варолієвому мосту, наприклад, у 3,2, 2,8 і 1,9 рази, відповідно, при р«е0,05. «At the same time, it was established that in various structures of the brain of the studied animals, during the production of URPU c, probable changes in the levels of the aminopeptidase activity of cathepsin H were noted in both amnestic animals and animals that retained a conditional skill after electroshock exposure. After 72 hours, a pronounced increase in enzyme activity was observed in all brain structures of those rats that retained the skill with significant changes in the frontal cortex, hippocampus, and Varoliv bridge, for example, 3.2, 2.8, and 1.9 times, respectively, at p "e0.05. "
Порівняння рівнів амінопептидазної активності цистеїнового катепсину Н у інтактних, навчених і шв с амнезованих тварин (мкмоль-РрНА на 1мг білка) інформувало про різноспрямований характер змін у мозкових структурах: збільшення активності у фронтальному неокортексі та Варолієвому мосту у 2,5 та 1,9 рази та )» зниження її рівня в гіпокампі та смугастому тілі у 2,0 і 4,5 рази, відповідно (див. діаграму).A comparison of the levels of aminopeptidase activity of cysteine cathepsin H in intact, trained and amnestic animals (μmol-PpNA per 1 mg of protein) informed about the multidirectional nature of changes in brain structures: an increase in activity in the frontal neocortex and Varoliv bridge by 2.5 and 1.9 times and )" decrease in its level in the hippocampus and striatum by 2.0 and 4.5 times, respectively (see diagram).
Отже, підвищення вільної активності катепсину Н інформує про збільшення проникності мембран лізосом мозку, а разом із цим про отримання інформації більш високого порядку. Пропонований спосіб нейрохімічної ко оцінки формування УРПУ тварини може бути корисним, бо грунтується на залученні тих структур головного мозку тварини, які об'єктивно відповідають за формування пам'ятного сліду, а його використання в нейрофізіології, о невропатології, теоретичній або клінічній психології може забезпечити більш достовірні дослідження приTherefore, an increase in the free activity of cathepsin H informs about an increase in the permeability of brain lysosome membranes, and with it, about obtaining information of a higher order. The proposed method of neurochemical evaluation of the formation of an animal's URPU can be useful, because it is based on the involvement of those structures of the animal's brain that are objectively responsible for the formation of a memory trace, and its use in neurophysiology, neuropathology, theoretical or clinical psychology can provide more reliable research at
Ге» використанні меншої кількості лабораторних тварин розповсюджених лабораторних ліній.Ge" using a smaller number of laboratory animals of common laboratory lines.
Джерела інформації: ю 1. Буреш Я., Бурешова О. і Хьюстон П.Дж. Методики и основнье експериментьі по изучению мозга иSources of information: 1. Buresh Ya., Bureshova O. and Huston P.J. Methods and basic experiments for the study of the brain and
Ге) поведения. М.: Вьісшая школа, 1991. -236 с. 2. Дроздов О.Л., Лещинська І.О., Кошелєв О.С., Чорна В.І. Вміст молекули клітинної адгезії МСАМ в структурах головного мозку щурів при відтворенні умовної реакції пасивного уникнення // Меигорпузіоіоду.-І дв 999. -Моі.131. -Мо1. -С.73-75. 3. Ї апатеззег І. Зупаріїс ріазіїсцу: Тазіепіпд зупарзез Бу адпезіоп // Ситт. Біо!. -1997. -Мої!. 628. -Р.286-292. с 4. Дергачев В.В. Молекулярнье и клеточнье механизмь! памяти. М.: Медицина, 197 7.-250 с. 5. Нечаєва Г.А., Лопатина Н.Г. Проницаемость мембран лизосом головного мозга для кислой РНК-азьі при обучений крьс различной линии // Нейрохимия. 1987. -Т.6. -Мо4. -С.590-595. во 6. Покровский А.И., Тутельян В.А., Лизосомні. М.: Наука, 1976. -567 с.Ge) behavior. M.: Vyissaya Shkola, 1991. -236 p. 2. Drozdov O.L., Leshchinska I.O., Koshelev O.S., Chorna V.I. The content of the cell adhesion molecule MSAM in the structures of the brain of rats during the reproduction of the conditioned reaction of passive avoidance // Meyhorpusioiodu.-I dv 999. -Moi.131. -Mo1. - P. 73-75. 3. I apatezzeg I. Zupariis riaziistsu: Taziepipd zuparzez Bu adpeziop // Sitt. Bio!. -1997. -My!. 628. -R.286-292. p 4. Dergachev V.V. Molecular and cellular mechanism! memories M.: Medicine, 1977.-250 p. 5. Nechayeva G.A., Lopatina N.G. Permeability of brain lysosome membranes for acidic RNA in trained rats of different lines // Neurochemistry. 1987. - Vol. 6. -Mo4. - P.590-595. in 6. Pokrovsky A.I., Tutelyan V.A., Lysosomes. M.: Nauka, 1976. -567 p.
Експериментальні дані щодо нейрохімічної оцінки формуванняExperimental data on the neurochemical assessment of formation
УРПУ тварин за вмістом цистеї'нового катепсину Н в структурах головного мозку щурів б5URPU of animals according to the content of cysteine cathepsin H in rat brain structures b5
Лабораторні тварини Кількість активності цистеїнового катепсину Н у досліджених структурах головного мозку, у мкмоль-рНА на 1мг білкаLaboratory animals The amount of activity of cysteine cathepsin H in the studied structures of the brain, in μmol-pHA per 1 mg of protein
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200512600U UA20629U (en) | 2005-12-26 | 2005-12-26 | Method for neurochemical assessment of generation of conditioned response of passive avoidance in animals |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200512600U UA20629U (en) | 2005-12-26 | 2005-12-26 | Method for neurochemical assessment of generation of conditioned response of passive avoidance in animals |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA20629U true UA20629U (en) | 2007-02-15 |
Family
ID=37834436
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAU200512600U UA20629U (en) | 2005-12-26 | 2005-12-26 | Method for neurochemical assessment of generation of conditioned response of passive avoidance in animals |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA20629U (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2799897C1 (en) * | 2022-12-26 | 2023-07-13 | Общество с ограниченной ответственностью "Газпром добыча Уренгой" | Device for thermal neutralization of industrial waste water |
-
2005
- 2005-12-26 UA UAU200512600U patent/UA20629U/en unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2799897C1 (en) * | 2022-12-26 | 2023-07-13 | Общество с ограниченной ответственностью "Газпром добыча Уренгой" | Device for thermal neutralization of industrial waste water |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Neniskyte et al. | Errant gardeners: glial-cell-dependent synaptic pruning and neurodevelopmental disorders | |
| van Kerkhof et al. | Cellular activation in limbic brain systems during social play behaviour in rats | |
| Tirelli et al. | Ontogenesis of behavioral sensitization and conditioned place preference induced by psychostimulants in laboratory rodents | |
| Giurfa | Behavioral and neural analysis of associative learning in the honeybee: a taste from the magic well | |
| Hua-Cheng et al. | Behavioral animal models of depression | |
| Kim et al. | Identification and functional evidence of GABAergic neurons in parts of the brain of adult zebrafish (Danio rerio) | |
| Wang et al. | The phenotypic and behavioral defects can be transferred from zinc-exposed nematodes to their progeny | |
| US20190085394A1 (en) | Refining diagnosis and treatment of complex multi-symptom neurological disorders | |
| Wise et al. | Drive and reinforcement circuitry in the brain: origins, neurotransmitters, and projection fields | |
| Fuchs et al. | Effect of environmental complexity on size of the superior colliculus | |
| Maldonado et al. | Oxytocin shapes spontaneous activity patterns in the developing visual cortex by activating somatostatin interneurons | |
| CN110734924B (en) | Depression detection, treatment and prognosis target and application | |
| CN108938667B (en) | Method for constructing Alzheimer's disease model for drug screening | |
| Mistretta et al. | Taste responses in sheep medulla: Changes during development | |
| UA20629U (en) | Method for neurochemical assessment of generation of conditioned response of passive avoidance in animals | |
| Li et al. | Striatopallidal adenosine A2A receptors in the nucleus accumbens confer motivational control of goal-directed behavior | |
| ATE378423T1 (en) | POLYMORPHISMS OF THE HUMAN HPXR GENE AND THEIR APPLICATION IN DIAGNOSIS AND THERAPY | |
| Benjamin et al. | Lymnaea learning and memory | |
| UA82167U (en) | Method for determination of formation of temporary conditioned connection of brain in proteolysis reaction | |
| Leon et al. | Is there a space–time continuum in olfaction? | |
| Devadas et al. | Changes in NADPH diaphorase expression in the fish visual system during optic nerve regeneration and retinal development | |
| Tye et al. | Separable dorsal raphe dopamine projections mediate sociability and valence | |
| Chini et al. | Extreme distributions in the preconfigured developing brain | |
| Agranoff | Biochemical concomitants of the storage of behavioral information | |
| Cools et al. | [Question 8: How do emotion and cognition interact?] Can we advance our understanding of emotional behavior by reconceptualizing it as involving valuation? |