UA19668U - Method for determining the content of glycated keratin - Google Patents
Method for determining the content of glycated keratin Download PDFInfo
- Publication number
- UA19668U UA19668U UAU200608288U UAU200608288U UA19668U UA 19668 U UA19668 U UA 19668U UA U200608288 U UAU200608288 U UA U200608288U UA U200608288 U UAU200608288 U UA U200608288U UA 19668 U UA19668 U UA 19668U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- glycated
- keratin
- determining
- content
- clinical
- Prior art date
Links
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 title claims abstract description 14
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 title claims abstract description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 claims abstract description 3
- 230000036252 glycation Effects 0.000 claims description 6
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 3
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 abstract description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract 1
- IXZISFNWUWKBOM-ARQDHWQXSA-N fructosamine Chemical compound NC[C@@]1(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O IXZISFNWUWKBOM-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 10
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 108091005996 glycated proteins Proteins 0.000 description 5
- 125000002015 acyclic group Chemical group 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- JPXMTWWFLBLUCD-UHFFFAOYSA-N nitro blue tetrazolium(2+) Chemical compound COC1=CC(C=2C=C(OC)C(=CC=2)[N+]=2N(N=C(N=2)C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC(=CC=2)[N+]([O-])=O)=CC=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 JPXMTWWFLBLUCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 2
- -1 acyclic carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 210000003780 hair follicle Anatomy 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- RVBUGGBMJDPOST-UHFFFAOYSA-N 2-thiobarbituric acid Chemical compound O=C1CC(=O)NC(=S)N1 RVBUGGBMJDPOST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003691 Amadori rearrangement reaction Methods 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical class OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- ODUCDPQEXGNKDN-UHFFFAOYSA-N nitroxyl Chemical compound O=N ODUCDPQEXGNKDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000005375 photometry Methods 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Корисна модель відноситься до медицини, біології, клінічної та лабораторної діагностики і може бути 2 використана для визначення якісного та кількісного вмісту глікованого кератину.The useful model relates to medicine, biology, clinical and laboratory diagnostics and can be used to determine the qualitative and quantitative content of glycated keratin.
Більшість білків крові людини та тварин, що контактують з глюкозою, схильні до неферментативного глікозування (глікування). Гліковані білки, на відміну від вуглеводно-білкових комплексів, утворюються посттрансляційно.Most of the blood proteins of humans and animals that come into contact with glucose are prone to non-enzymatic glycation (glycation). Glycated proteins, unlike carbohydrate-protein complexes, are formed post-translationally.
Ступінь глікування білків багато в чому залежить від наявності в молекулах білка вільних аміногруп, 70 вмісту в плазмі крові і тканинах ациклічних форм редукційних моносахаридів, зокрема глюкози, та тривалості контакту з ними.The degree of glycation of proteins largely depends on the presence of free amino groups in protein molecules, the content of acyclic forms of reducing monosaccharides in blood plasma and tissues, in particular glucose, and the duration of contact with them.
Оскільки у здорових людей вміст в біологічних рідинах ациклічної форми глюкози невеликий, концентрація в них неферментативно глікованих білків дуже мала. Разом з тим при стійкому збільшенні рівня глюкози (яке спостерігається при цукровому діабеті) вміст глікованих білків значно зростає внаслідок збільшення вмісту в 72 біологічних рідинах ациклічних форм редукційних вуглеводів.Since the content of the acyclic form of glucose in the biological fluids of healthy people is small, the concentration of non-enzymatically glycated proteins in them is very low. At the same time, with a steady increase in the level of glucose (which is observed in diabetes), the content of glycated proteins increases significantly due to an increase in the content of acyclic forms of reducing carbohydrates in 72 biological fluids.
На сьогоднішній день існує колориметричний метод визначення глікованих білків плазми крові - "фруктозаміну з використанням нітросинього тетразолію |В.С. Камьшников, Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике. - Москва, 20044. Метод заснований на здатності "фруктозаміну відновлювати нітросиній тетразолій в лужному середовищі, переводячи його у формазан з максимум поглинання при 5З3Онм. Реакція між "фруктозаміном" та нітросинім тетразолієм протікає при рН 10,8 (у карбонатному буфері) при температурі 372С; фотометрування проводять через 15 хвилин. Як стандарт використовують синтетичний кетоамін, фруктозолейцин.To date, there is a colorimetric method for determining glycated blood plasma proteins - "fructosamine using nitro blue tetrazolium | V.S. Kamshnikov, Reference book for clinical and biochemical research and laboratory diagnostics. - Moscow, 20044. The method is based on the ability of "fructosamine to reduce nitro blue tetrazolium in in an alkaline environment, converting it into formazan with an absorption maximum at 533 Ohm. The reaction between "fructosamine" and nitroblue tetrazolium occurs at pH 10.8 (in a carbonate buffer) at a temperature of 372C; photometry is carried out after 15 minutes. A synthetic ketoamine, fructoseleucine, is used as a standard.
Даний метод визначення "фруктозаміну" є найбільш близьким до того, що заявляється, по технічній сутності та результату, який може бути досягнутий, тому він вибраний як прототип. 29 Головним недоліком методу визначення "фруктозаміну є те, що визначається комплекс глікованих білків шщ плазми крові, які мають різні періоди життя та періоди напіврозпаду (від одного до трьох тижнів), а також різну спорідненість до неферментзумовлених реакцій. Крім цього, метод визначення "фруктозаміну" недостатньо специфічний, і на результати визначення можуть впливати багато редукційних речовин крові.This method of determining "fructosamine" is the closest to what is claimed in terms of technical essence and the result that can be achieved, therefore it is selected as a prototype. 29 The main drawback of the method of determining "fructosamine is that it determines a complex of glycated proteins of blood plasma, which have different life periods and half-life periods (from one to three weeks), as well as different affinity for non-enzyme-mediated reactions. In addition, the method of determining "fructosamine " is not specific enough, and the results of the determination can be affected by many reducing substances in the blood.
У зв'язку з вищесказаним в основу корисної моделі покладено завдання - розробити метод якісного та 09 кількісного визначення глікованого білка, що має певний і тривалий період життя, чітку спорідненість до (Се) неферментзумовленого глікозування та високу специфічність до ациклічних вуглеводів, а також розширити арсенал клініко-лабораторних методик визначення "фруктозаміну". ї-оіIn connection with the above, the basis of a useful model is the task of developing a method for qualitative and quantitative determination of glycated protein, which has a certain and long life span, a clear affinity for (Ce) non-enzymatic glycation and high specificity for acyclic carbohydrates, as well as to expand the arsenal clinical and laboratory methods of determining "fructosamine". uh-oh
Завдання, покладене в основу корисної моделі, вирішується тим, що метод визначення глікованого кератину, Ге») який заявляється, дозволяє визначити якісний та кількісний вміст глікованого кератину, який має строго певний 39 | тривалий період життя, чітку спорідненість до неферментативного глікозування та обмежений вплив супутніх -- редукційних речовин.The task, which is the basis of a useful model, is solved by the fact that the method for determining glycated keratin, Ge»), which is claimed, allows you to determine the qualitative and quantitative content of glycated keratin, which has a strictly defined 39 | a long period of life, a clear affinity for non-enzymatic glycation and a limited influence of accompanying reducing substances.
У основу методу, що заявляється, покладений процес посттрансляційного утворення глікованого кератину, який протікає у декілька етапів: « 1. Перший етап полягає в утворенні основ Шиффа; він протікає швидко і зворотньо; кератинові сполуки, що З7З 70 виникають при цьому, легко гідролізуються. с 2. Другий, триваліший, етап - перегруповування Амадорі - завершується утворенням стабільної кетоамінової "з сполуки. Вираженість процесу неферментативного глікозуваня кератину в першу чергу залежить від тривалості контакту з ним глюкози, який відбувається у волосяному фолікулі.The basis of the claimed method is the process of post-translational formation of glycated keratin, which proceeds in several stages: "1. The first stage consists in the formation of Schiff's bases; it flows quickly and backwards; keratin compounds that З7З70 arise in this case are easily hydrolyzed. c 2. The second, longer, stage - the Amadori rearrangement - ends with the formation of a stable ketoamine compound. The expression of the process of non-enzymatic glycosylation of keratin primarily depends on the duration of glucose contact with it, which occurs in the hair follicle.
Метод виконується наступним чином. -з 15 У пацієнта біля кореня зрізають або висмикують волосся разом з волосяним фолікулом, можна зрізати частину нігтя. Зважують отриманий матеріал. Переводять кератин в розчин за допомогою суміші відновника та (Се) детергента, або іншим будь-яким відомим і доступним шляхом, що дозволяє зруйнувати сульфідні зв'язки полімеру.The method is performed as follows. -from 15 The patient's hair is cut or pulled out at the root along with the hair follicle, a part of the nail can be cut. Weigh the obtained material. Keratin is transferred into a solution using a mixture of a reducing agent and (Ce) detergent, or by any other known and available method, which allows to destroy the sulfide bonds of the polymer.
Ф Потім 10 мілі і інкуб ї2 100С2 2,0 отім міліграмів отриманого розчину кератину інкубують протягом трьох годин при з 2,Омл (е)) 50 насиченої щавлевої кислоти (1моль/л). Після охолоджування додають в пробірку їмл 2095 трихлороцтової со кислоти та центрифугують протягом 10 хвилин при З000об/хв. Потім 2 проби супернатанту (по їмл кожна) відбирають і відставляють. Одну інкубують з 0,25мл насиченого розчину тіобарбітурової кислоти (дослідна проба), іншу - з О0,25мл дистильованої води (контрольна проба). Обидві пробірки інкубують протягом 50 хвилин при г 40С2,. Вимірювання проводять на спектрофотометрі в кюветах з довжиною оптичного шляху 1см проти контролю за хвилею 44Знм. Для калібрування можна використовувати серію розчинів по тммоль/л фруктози. с Одиниці вимірювання: мікромоль фруктозаміну (ФА) на 10 міліграмів кератину (мкмоль ФА/ЛОМГ).Then 10 ml and incubate 100C2 2.0 milligrams of the resulting keratin solution are incubated for three hours with 2.Oml (e)) 50 saturated oxalic acid (1 mol/l). After cooling, add 2095 ml of trichloroacetic acid to the test tube and centrifuge for 10 minutes at 3000 rpm. Then 2 samples of the supernatant (one ml each) are taken and set aside. One is incubated with 0.25 ml of a saturated solution of thiobarbituric acid (test sample), the other - with 0.25 ml of distilled water (control sample). Both test tubes are incubated for 50 minutes at 40C2. Measurements are carried out on a spectrophotometer in cuvettes with an optical path length of 1 cm against control at a wave of 44 nm. For calibration, you can use a series of solutions of tmol/l fructose. c Units of measurement: micromol of fructosamine (FA) per 10 milligrams of keratin (μmol FA/LOMG).
Допускаються незначні відхилення від заявлених параметрів та величин, що не впливають на кінцевий результат.Slight deviations from the declared parameters and values are allowed, which do not affect the final result.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200608288U UA19668U (en) | 2006-07-24 | 2006-07-24 | Method for determining the content of glycated keratin |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU200608288U UA19668U (en) | 2006-07-24 | 2006-07-24 | Method for determining the content of glycated keratin |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA19668U true UA19668U (en) | 2006-12-15 |
Family
ID=37606660
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAU200608288U UA19668U (en) | 2006-07-24 | 2006-07-24 | Method for determining the content of glycated keratin |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA19668U (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2017153359A1 (en) * | 2016-03-06 | 2017-09-14 | Universiteit Gent | Direct infrared analysis of post-translational modification of proteins |
-
2006
- 2006-07-24 UA UAU200608288U patent/UA19668U/en unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2017153359A1 (en) * | 2016-03-06 | 2017-09-14 | Universiteit Gent | Direct infrared analysis of post-translational modification of proteins |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Francis et al. | Analytical methodology for the determination of urea: current practice and future trends | |
| Baynes | Chemical modification of proteins by lipids in diabetes | |
| JP5829766B2 (en) | Hemolytic reagent composition for quantitative analysis of hemoglobin A1c using enzymatic method | |
| Mihaljev et al. | Comparison of the Kjeldahl method, Dumas method and NIR method for total nitrogen determination in meat and meat products | |
| AU712909B2 (en) | Method for quantitative measurement of an enzyme linked immunosorbent assay | |
| CN107870170A (en) | A kind of kit of luminol chemiluminescence analysis measure glycated albumin | |
| Cuchiaro et al. | Total protein analysis in algae via bulk amino acid detection: Optimization of amino acid derivatization after hydrolysis with O-phthalaldehyde 3-mercaptopropionic acid (OPA-3MPA) | |
| Aćimović et al. | Method for monitoring of the protein amino group changes during carbonylation | |
| CN102692411B (en) | A kind of reagent measuring glycolated hemoglobin percentage ratio | |
| Krizkova et al. | Comparison of Metallothionein Detection by Using Brdicka Reaction and Enzyme‐Linked Immunosorbent Assay Employing Chicken Yolk Antibodies | |
| UA19668U (en) | Method for determining the content of glycated keratin | |
| CN108896750A (en) | A kind of preparation method and purposes of BSA-Au/Ag NCs/OPD/HRP proportional-type fluorescent optical sensor | |
| Prabhu et al. | Chemical clocks, oscillations, and other temporal effects in analytical chemistry: oddity or viable approach? | |
| Tsiasioti et al. | Development and validation of a direct HPLC method for the determination of salivary glutathione disulphide using a core shell column and post column derivatization with o-phthalaldehyde | |
| CN113329690A (en) | Calibrator and control for determining the percentage of glycated hemoglobin in a liquid test sample of a patient | |
| UA19667U (en) | Method for determining the content of glycated blood albumin | |
| JPWO2008018596A1 (en) | Postprandial hyperglycemia marker, measuring method thereof and use thereof | |
| Portero‐Otin et al. | Glycaemic control and in vivo non‐oxidative Maillard reaction: urinary excretion of pyrraline in diabetes patients | |
| Aćimović et al. | Monitoring of the human serum albumin carbonylation level through determination of guanidino group content | |
| RU2376605C1 (en) | Method and set for immune-enzyme detection of functuinal activity of factor d of human complement | |
| CN106556595B (en) | A kind of Picric kinetic method detection kit of strong antijamming capability | |
| Sinha et al. | Biosensors for Point‐of‐Care Applications: Replacing Pathology Labs by Bedside Devices | |
| Van Aken et al. | Glycation in human fingernail clippings using ATR-FTIR spectrometry, a new marker for the diagnosis and monitoring of diabetes mellitus | |
| Filos et al. | A method for the measurement of ionized magnesium | |
| RU2568601C2 (en) | Method of estimating severity of general condition of patient with acute destructive pancreatitis and prediction of disease outcome |