UA119568U - METHOD OF TREATMENT OF CHILDREN WITH SPINAL MUSCLE ATROPHY OF TYPE III - Google Patents
METHOD OF TREATMENT OF CHILDREN WITH SPINAL MUSCLE ATROPHY OF TYPE III Download PDFInfo
- Publication number
- UA119568U UA119568U UAU201704101U UAU201704101U UA119568U UA 119568 U UA119568 U UA 119568U UA U201704101 U UAU201704101 U UA U201704101U UA U201704101 U UAU201704101 U UA U201704101U UA 119568 U UA119568 U UA 119568U
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- stem cells
- suspension
- cells
- fetal liver
- fetal
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 206010028289 Muscle atrophy Diseases 0.000 title description 2
- 230000020763 muscle atrophy Effects 0.000 title description 2
- 201000000585 muscular atrophy Diseases 0.000 title description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 79
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 79
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 claims abstract description 76
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 48
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims abstract description 45
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 claims abstract description 29
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims abstract description 27
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 claims abstract description 24
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 9
- 230000036266 weeks of gestation Effects 0.000 claims abstract description 9
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000011301 standard therapy Methods 0.000 claims abstract description 4
- 208000002320 spinal muscular atrophy Diseases 0.000 claims description 38
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 8
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 6
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 claims description 6
- 238000009101 premedication Methods 0.000 claims description 6
- ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N diphenhydramine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229960000520 diphenhydramine Drugs 0.000 claims description 5
- OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N prednisolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N 0.000 claims description 5
- 229960005205 prednisolone Drugs 0.000 claims description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 5
- 210000000133 brain stem Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 3
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 claims description 2
- 208000003954 Spinal Muscular Atrophies of Childhood Diseases 0.000 abstract description 2
- 210000000604 fetal stem cell Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 15
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 12
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 11
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 10
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 8
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 6
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 description 5
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 description 5
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000032225 Proximal spinal muscular atrophy type 1 Diseases 0.000 description 4
- 208000037656 Respiratory Sounds Diseases 0.000 description 4
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 4
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 4
- 208000032471 type 1 spinal muscular atrophy Diseases 0.000 description 4
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 3
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 3
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 3
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 210000002161 motor neuron Anatomy 0.000 description 3
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 3
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 3
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 3
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 2
- 208000010428 Muscle Weakness Diseases 0.000 description 2
- 206010028372 Muscular weakness Diseases 0.000 description 2
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000007072 Nerve Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 208000004350 Strabismus Diseases 0.000 description 2
- 206010047924 Wheezing Diseases 0.000 description 2
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 2
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 2
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 2
- 238000004500 asepsis Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 230000007659 motor function Effects 0.000 description 2
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 238000010984 neurological examination Methods 0.000 description 2
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 2
- 239000003900 neurotrophic factor Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 238000009527 percussion Methods 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 238000000554 physical therapy Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000010349 pulsation Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 2
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102100024354 Dedicator of cytokinesis protein 6 Human genes 0.000 description 1
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 1
- 101001052950 Homo sapiens Dedicator of cytokinesis protein 6 Proteins 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 206010023506 Kyphoscoliosis Diseases 0.000 description 1
- 208000007623 Lordosis Diseases 0.000 description 1
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 1
- 208000024556 Mendelian disease Diseases 0.000 description 1
- 241001272996 Polyphylla fullo Species 0.000 description 1
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 description 1
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 229940064004 antiseptic throat preparations Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000001638 cerebellum Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000009193 crawling Effects 0.000 description 1
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000029036 donor selection Effects 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000005021 gait Effects 0.000 description 1
- 238000012812 general test Methods 0.000 description 1
- 238000013537 high throughput screening Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 238000000185 intracerebroventricular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 201000004815 juvenile spinal muscular atrophy Diseases 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000036630 mental development Effects 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 208000005264 motor neuron disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001964 muscle biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000004220 muscle function Effects 0.000 description 1
- 201000006938 muscular dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 210000000107 myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000001087 myotubule Anatomy 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 238000001584 occupational therapy Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000008132 psychomotor development Effects 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000033458 reproduction Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004202 respiratory function Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000013125 spirometry Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 210000003699 striated muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000009120 supportive therapy Methods 0.000 description 1
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 1
- 230000009747 swallowing Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006163 transport media Substances 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 208000032527 type III spinal muscular atrophy Diseases 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000021542 voluntary musculoskeletal movement Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Спосіб лікування дітей зі спінальною м'язовою атрофією III типу характеризується приготуванням та введенням щонайменше двох препаратів з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин у вигляді розморожених після кріоконсервації суспензій стовбурових клітин, кожна з яких містить терапевтично ефективну кількість стовбурових клітин, виділених з матеріалу фетуса людини 6-9 тижня гестації, при цьому одна суспензія містить стовбурові клітини з фетальної печінки, а друга суспензія містить стовбурові клітини фетального головного мозку, причому суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з фетальної печінки вводять внутрішньовенно в об'ємі не меншому за 0,1 мл з кількістю ядровмісних клітин не менше за 1,92(106 в 1 мл за одне введення, суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин фетального головного мозку фетуса людини вводять підшкірно в об'ємі не меншому за 0,7 мл з кількістю клітин не менше за 1,23(106 в 1 мл за одне введення, причому вказані суспензії стовбурових клітин вводять одночасно з проведенням стандартної терапії.The method of treatment of children with spinal muscular atrophy type III is characterized by the preparation and introduction of at least two preparations of material embryofetal origin and cells isolated from it in the form of thawed stem cell suspensions after cryopreservation, each of which contains a therapeutically effective amount of stem cell material person 6-9 weeks of gestation, with one suspension contains fetal liver stem cells, and the second suspension contains fetal stem cells of the brain, the suspension of cryopreserved stem cells from fetal liver is administered intravenously in a volume of not less than 0.1 ml with the number of nucleated cells of not less than 1.92 (106 in 1 ml per injection, a suspension of cryopreserved stem cells of the fetal liver human fetus is injected subcutaneously in a volume of not less than 0.7 ml with a cell number of not less than 1.23 (106 in 1 ml per injection, and these suspensions of stem cells are administered at the same time as standard therapy.
Description
Корисна модель належить до галузі медицини, а саме: до дитячої неврології, медичної реабілітації та клітинної терапії, та може бути використана при лікуванні дітей, хворих на спінальну м'язову атрофію ПП типу (СМА) шляхом введення препаратів з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин у вигляді суспензій, що містять стовбурові клітини, зокрема стовбурові клітини з фетальної печінки та стовбурові клітини фетального мозку фетуса людини на фоні стандартної медикаментозної терапії.The useful model belongs to the field of medicine, namely: pediatric neurology, medical rehabilitation and cell therapy, and can be used in the treatment of children with spinal muscular atrophy of the PP type (SMA) by administering drugs from material of embryofetal origin and isolated from of cells in the form of suspensions containing stem cells, in particular stem cells from the fetal liver and stem cells from the fetal brain of a human fetus against the background of standard drug therapy.
Спінальна м'язова атрофія (СМА або 5МА, аутосомна рецесивна проксимальна спінальна аміотрофія) - різнорідна група спадкових захворювань, що протікають з ураженням / втратою рухових нейронів передніх рогів спинного мозку (21.Spinal muscular atrophy (SMA or 5MA, autosomal recessive proximal spinal amyotrophy) is a heterogeneous group of hereditary diseases that occur with damage/loss of motor neurons of the anterior horns of the spinal cord (21.
Патогенез розвитку спінальної м'язової атрофії визначається геном, що кодує ЗММ білок, який експресується в усіх тканинах організму з домінуючою локалізацією в мотонейронах спинного мозку. В цитоплазмі та ядрі соматичних клітин ЗММ асоційований з іншим білком -The pathogenesis of the development of spinal muscular atrophy is determined by the gene encoding the ZMM protein, which is expressed in all tissues of the body with a dominant localization in the motoneurons of the spinal cord. In the cytoplasm and nucleus of somatic cells, ZMM is associated with another protein -
ЗІР1, що локалізується в гемах - спеціальних тільцях ядра. Рахується, що дані білки необхідні для регенерації та перетворювання мРНК, оскільки, при наявності мутації в 5ММ в гені, цей процес в хворих порушений |1, 21.ZIR1, which is localized in hemes - special bodies of the nucleus. It is believed that these proteins are necessary for the regeneration and conversion of mRNA, since, in the presence of a mutation in the 5MM gene, this process is disrupted in patients |1, 21.
Для спінальних м'язових атрофій характерно порушення роботи поперечносмугастих м'язів ніг, а також голови і шиї. У хворих відзначаються порушення довільних рухів - повзання, хода, утримання голови, ковтання. М'язи рук зазвичай не страждають. Для спінальних аміотрофій характерно збереження чутливості, а також відсутність затримки психічного розвитку.Spinal muscular atrophy is characterized by dysfunction of the striated muscles of the legs, as well as the head and neck. In patients, violations of voluntary movements are noted - crawling, walking, holding the head, swallowing. Arm muscles usually do not suffer. Spinal amyotrophies are characterized by the preservation of sensitivity, as well as the absence of a delay in mental development.
Ураження рухових нейронів і отже, рухової мускулатури, зумовлює різноманітність клінічних симптомів даного захворювання. Пацієнти зі спінальною м'язовою атрофією страждають від наростаючої м'язової слабкості та атрофії м'язів, важкими порушеннями постави (кіфосколіоз), порушеннями дихання і рухової функції. Чутливість та психічна і інтелектуальна сфери повністю збережені |1, 51.Damage to the motor neurons and, therefore, the motor muscles causes a variety of clinical symptoms of this disease. Patients with spinal muscular atrophy suffer from increasing muscle weakness and muscle atrophy, severe posture disorders (kyphoscoliosis), breathing and motor function disorders. Sensitivity and mental and intellectual spheres are fully preserved |1, 51.
На сьогоднішній день не існує методів лікування СМА, здатних змінити перебіг захворювання |З, 4Ї. Підтримуюча терапія полягає в корекції симптомів і профілактиці ускладнень. Найбільш часті заходи включають в себе забезпечення необхідного споживання поживних речовин, респіраторну підтримку, лікувальну фізкультуру і заходи, які проводяться на термінальних стадіях захворювання. Незважаючи на те, що для СМА вже розроблені стандарти надання допомоги, існує необхідність в оновленні та деталізації останніх. Фізіо- та працетерапевтичні програми можуть допомогти як дітям, так і дорослим навчитися найкращому використанню наявних у них м'язових функцій, і знайти найбільш ефективні способи виконання повсякденних справ. Існуючі сьогодні різні допоміжні пристосування можуть допомогти навіть самим маленьким дітям в пізнанні навколишнього світу. Вертикалізатори, ходунки, різні типи електричних і ручних візків, ортези - все це може допомогти в стоянні і пересуванні.To date, there are no methods of treating SMA that can change the course of the disease. Supportive therapy consists in correction of symptoms and prevention of complications. The most frequent measures include ensuring the necessary intake of nutrients, respiratory support, physical therapy and measures that are carried out in the terminal stages of the disease. Despite the fact that assistance standards have already been developed for SMA, there is a need to update and detail the latter. Physical and occupational therapy programs can help both children and adults learn to make the best use of their available muscle functions and find the most efficient ways to perform everyday tasks. Various assistive devices available today can help even the smallest children in learning about the world around them. Verticalizers, walkers, various types of electric and manual wheelchairs, orthoses - all this can help in standing and moving.
В даний час СМА невиліковна, однак по всьому світу проводяться багатообіцяючі клінічні дослідження. У них вивчаються різні методи підвищення стримання білка 5ММ: шляхом заміщення або виправлення мутації в гені «ММ1, шляхом модуляції негативних і позитивних регуляторів сплайсингу для включення 7-го екзонів в ген 5ММ2, шляхом підвищення промоторної активності 5«ММ2 або шляхом стабілізації та протекції повнорозмірних білків 5ММ іCurrently, SMA is incurable, but promising clinical trials are underway around the world. They are studying various methods of increasing the retention of the 5MM protein: by replacing or correcting a mutation in the MM1 gene, by modulating negative and positive splicing regulators to include the 7th exons in the 5MM2 gene, by increasing the promoter activity of 5MM2, or by stabilizing and protecting full-length proteins 5MM and
ЗММ7. З огляду на те, що в розробці терапевтичної стратегії центральну роль відіграє аугментація білка 5ММ, важливим є визнання його мінімального вмісту, необхідного для виживання і функціонування клітини. Згідно з результатами доклінічних досліджень, для збереження фенотипу 5ММ у пацієнтів з двома копіями 5ЗММ2 необхідно щонайменше 25 905 збільшення вмісту повнорозмірного білка ЗММ (51.ZMM7. Given the fact that in the development of a therapeutic strategy, the increase of the 5MM protein plays a central role, it is important to recognize its minimum content, necessary for the survival and functioning of the cell. According to the results of preclinical studies, to maintain the 5MM phenotype in patients with two copies of 5ЗMM2, at least a 25,905 increase in the content of the full-length ZMM protein is required (51.
Проведено кілька високопродуктивних скринінгових тестів на з'єднання, здатні модулювати експресію ММ. Крім регуляції експресії 5ММ2 пропонувалися й інші підходи, наприклад застосування стовбурових клітин, нейропротективних молекул і сполук, що підвищують м'язову силу. Необхідно відзначити, що нейропротективні чинники зростання і м'язові стимулятори можуть призводити до системних небажаних реакцій, а їх позитивний вплив на сьогоднішній день залишається недоведеним. В даний час щонайменше 17 досліджень, як доклінічних, так і клінічних, присвячені вивченню різних методів терапії СМА ІЗІ.Several high-throughput screening tests for compounds capable of modulating MM expression have been performed. In addition to the regulation of 5MM2 expression, other approaches have been proposed, such as the use of stem cells, neuroprotective molecules, and compounds that increase muscle strength. It should be noted that neuroprotective growth factors and muscle stimulants can lead to systemic adverse reactions, and their positive effect remains unproven to date. At present, at least 17 studies, both preclinical and clinical, are devoted to the study of different methods of SMA IRI therapy.
Одним із перспективних напрямків може бути застосування клітинної терапії у лікуванні хворих з СМА.One of the promising directions may be the use of cell therapy in the treatment of patients with SMA.
Відомий спосіб модуляції рухливої функції у суб'єкта з порушенням рухових нейронів, що включає введення терапевтичної ефективної кількості композиції, що містить рекомбінатний віріон ААМ і фармацевтично приємний ексципієнт (заявка Російської Федерації на винахід Мо 2011149094, дата подання 27.04.2010). Також відомий спосіб забезпечення білка 5ММ у суб'єкта зі спинальною м'язовою атрофією (ЗМА), що включає введення рекомбінантного віріону ААМ,A known method of modulating motor function in a subject with a motor neuron disorder, which includes the introduction of a therapeutically effective amount of a composition containing a recombinant AAM virion and a pharmaceutically acceptable excipient (application of the Russian Federation for the invention Mo 2011149094, filing date 04/27/2010). Also known is a method of providing the 5MM protein to a subject with spinal muscular atrophy (SMA), which includes the administration of a recombinant AAM virion,
що містить вектор ААМ у клітини суб'єкта, що потребує цього (заявка Російської Федерації на винахід Мо 2011149094, дата подання 27.04.2010).containing the AAM vector in the cells of the subject who needs it (application of the Russian Federation for the invention MO 2011149094, filing date 04/27/2010).
При цьому композиції, згідно з вищезазначеними способами, вводять безпосередньо в щонайменше одну область глибоких ядер мозочка або шляхом прямої ін'єкції у спинний мозок, або безпосередньо за допомогою інтрацеребровентрикулярної ін'єкції, або за допомогою інтратекальної ін'єкції.At the same time, the compositions, according to the above-mentioned methods, are injected directly into at least one region of the deep nuclei of the cerebellum, either by direct injection into the spinal cord, or directly by intracerebroventricular injection, or by intrathecal injection.
Недоліком відомих способів є недостатня ефективність лікування дітей зі СМА І типу та складність і травматичність введення композиції.The disadvantage of the known methods is the lack of effectiveness in the treatment of children with type I SMA and the complexity and trauma of administering the composition.
Відомий спосіб полегшення щонайменше одного симптому спінальної м'язової атрофії у суб'єкта, що включає введення суб'єкта, який має щонайменше один симптом, асоційований зі спінальною м'язовою атрофією, антисмислового з'єднання, що містить антисмисловой олігонуклеотид, комплементарний інтрону 7 пре-мРНК, що кодує людський 5ММ2, де антисмисловий олігонуклеотид має нуклеїнову послідовність, що складається із нуклеїнової послідовності ЗЕ ІЮ МО: 1, де кожний нуклеозид антисмислового олігонуклеотиду містить модифікований залишок цукру, де кожний модифікований залишок цукру являє собою 2'- метоксіетил залишок цукру і де кожний міжнуклеозидний зв'язок являє собою фосфоротіоатний зв'язок (патент Російської Федерації на винахід Мо 2566724, дата публікації - 27.10.2015р.).A method of alleviating at least one symptom of spinal muscular atrophy in a subject is disclosed, comprising administering to the subject having at least one symptom associated with spinal muscular atrophy an antisense compound comprising an antisense oligonucleotide complementary to intron 7 pre-mRNA encoding human 5MM2, wherein the antisense oligonucleotide has a nucleic sequence consisting of the nucleic sequence ZE IU MO: 1, wherein each nucleoside of the antisense oligonucleotide contains a modified sugar residue, wherein each modified sugar residue is a 2'-methoxyethyl sugar residue and where each internucleoside bond is a phosphorothioate bond (patent of the Russian Federation for the invention Mo 2566724, date of publication - 27.10.2015).
Недоліком відомого способу є недостатня ефективність лікування дітей зі СМА ЇЇ типу.The disadvantage of the known method is the lack of effectiveness in the treatment of children with SMA of its type.
Задачею корисної моделі, що заявляється, є створення способу лікування дітей зі спінальною м'язовою атрофією ІІІ типу препаратами з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин, в якому за рахунок запропонованої послідовності проведення лікування з використанням двох розморожених після кріоконсервації суспензій стовбурових клітин емпірично підібраного складу, забезпечується підвищення ефективності лікування дітей на СМА Ш типу, зокрема покращення функціонального стану дитини при зменшенні прогресування м'язової слабкості, атрофії м'язових волокон та покращенні дихальних функцій без необхідності підбору донора за антигенами гістосумісності. В результаті - покращуються рухові здібності дитини. Крім цього забезпечується запобігання виникнення алергійних реакцій дітей на СМА НІ типу при проведенні лікування.The purpose of the proposed useful model is to create a method of treating children with type III spinal muscular atrophy with drugs from material of embryofetal origin and cells isolated from it, in which, due to the proposed sequence of treatment using two suspensions of stem cells thawed after cryopreservation, empirically selected composition, the effectiveness of the treatment of children with SMA of the Ш type is ensured, in particular, the improvement of the functional state of the child with the reduction of the progression of muscle weakness, atrophy of muscle fibers, and the improvement of respiratory functions without the need to select a donor based on histocompatibility antigens. As a result, the child's motor skills improve. In addition, the occurrence of allergic reactions of children to SMA NI type during treatment is ensured.
Поставлена задача вирішується запропонованим способом лікування дітей зі СМА І типу,The task is solved by the proposed method of treating children with SMA type I,
Зо який характеризується приготуванням та введенням щонайменше двох препаратів з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин у вигляді розморожених після кріоконсервації суспензій стовбурових клітин, кожна з яких містить терапевтично ефективну кількість стовбурових клітин, виділених з матеріалу фетуса людини 6-9 тижня гестації, при цьому одна суспензія містить стовбурові клітини з фетальної печінки, а друга суспензія містить стовбурові клітини фетального головного мозку, причому суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з фетальної печінки вводять внутрішньовенно в об'ємі не меншому за 0,1 мл з кількістю ядровмісних клітин не менше за 1,92х105 в 1 мл за одне введення, суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин фетального головного мозку фетуса людини вводять підшкірно в об'ємі не меншому за 0,7 мл з кількістю клітин не менше за 1,23х105 в 1 мл за одне введення, причому вказані суспензії стовбурових клітин вводять одночасно з проведенням стандартної медикаментозної терапії а перед введенням суспензії кріоконсервованих стовбурових клітин з фетальної печінки додатково виконують премедикацію.Which is characterized by the preparation and administration of at least two preparations from material of embryofetal origin and cells isolated from it in the form of stem cell suspensions thawed after cryopreservation, each of which contains a therapeutically effective amount of stem cells isolated from the material of a human fetus of 6-9 weeks of gestation, while one suspension contains stem cells from the fetal liver, and the second suspension contains stem cells from the fetal brain, and the suspension of cryopreserved stem cells from the fetal liver is administered intravenously in a volume of at least 0.1 ml with a number of nucleated cells of at least 1.92x105 in 1 ml for one injection, a suspension of cryopreserved fetal brain stem cells of a human fetus is injected subcutaneously in a volume of at least 0.7 ml with a number of cells of at least 1.23x105 in 1 ml for one injection, and the indicated suspensions of stem cells administered at the same time as standard medicine mentose therapy, and before the introduction of the suspension of cryopreserved stem cells from the fetal liver, premedication is additionally performed.
Як стандартну терапію призначають комплексні інтегральні методики реабілітації.Complex integral rehabilitation techniques are prescribed as standard therapy.
Суспензію розморожених після кріоконсервації стовбурових клітин з фетальної печінки, як правило, вводять разом із фізіологічним розчином натрію хлориду зі швидкістю 20-40 крапель за хвилину.A suspension of thawed stem cells from the fetal liver after cryopreservation is usually administered together with a physiological solution of sodium chloride at a rate of 20-40 drops per minute.
При цьому премедикацію виконують шляхом внутрішньовенного введення 5 мг димедролу і 15 мг преднізолону.At the same time, premedication is performed by intravenous administration of 5 mg of diphenhydramine and 15 mg of prednisolone.
Перед введенням розмороженої після кріоконсервації суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки та розмороженої після кріоконсервації суспензії стовбурових клітин з фетального мозку фетуса людини додатково виконують неврологічне та інструментальне обстеження стану хворої дитини.Before the introduction of a suspension of stem cells thawed after cryopreservation from the fetal liver and a suspension of stem cells thawed after cryopreservation from the fetal brain of a human fetus, a neurological and instrumental examination of the condition of the sick child is additionally performed.
Перед проведенням лікування та через 6 і 12 місяців після введення розмороженої після кріоконсервації суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки та розмороженої після кріоконсервації суспензії кріоконсервованих стовбурових клітин з фетального мозку фетуса людини, здійснюють контроль активності стану дитини за клінічними та інструментальними показниками.Before the treatment and 6 and 12 months after the introduction of the suspension of stem cells thawed after cryopreservation from the fetal liver and the suspension of stem cells thawed after cryopreservation from the fetal brain of a human fetus, the activity of the child is monitored according to clinical and instrumental indicators.
Нами встановлено, що за рахунок введення принаймні двох суспензій емпірично підібраного складу, що містять стовбурові клітини ембріофетального походження, а саме бо внутрішньовенного введення суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки людини 6-9 тижня гестації в об'ємі не меншому за 0,1 мл з кількістю ядровмісних клітин не менше за 1,92х106 в 1 мл за одне введення та підшкірного введення суспензії стовбурових клітин з фетального мозку фетуса людини 6-9 тижня гестації, в об'ємі не меншому за 0,7 мл з кількістю ядровмісних клітин не менше за 1,23х105 в 1 мл за одне введення, забезпечується стимуляція роботи власних біологічно активних речовин хворого у природних умовах за рахунок різноманітних нейротрофічних факторів, що виділяють стовбурові клітини, та забезпечується потрапляння оптимальної кількості стовбурових клітин в ділянки пошкоджених м'язів, де стовбурові клітини активно розмножуються, в результаті чого відбувається регенерація міозитів та заміщення стовбуровими клітинами уражених м'язів. Крім того, відбувається утворення та проростання сітки нових кровоносних судин до ураженого органу та м'язів, що створюють додатковий кровотік При цьому покращується якість життя, хворих на СМА. Крім цього проведення премедикації перед введенням розмороженої після кріоконсервації суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки дозволяє запобігти виникненню алергійних реакцій хворих під час проведення лікування при хорошій переносимості лікування.We found that due to the introduction of at least two suspensions of an empirically selected composition containing stem cells of embryo-fetal origin, namely, intravenous administration of a suspension of stem cells from the human fetal liver of the 6-9th week of gestation in a volume of at least 0.1 ml with with the number of nucleated cells not less than 1.92x106 in 1 ml for one injection and subcutaneous injection of a suspension of stem cells from the fetal brain of a human fetus of 6-9 weeks of gestation, in a volume of not less than 0.7 ml with the number of nucleated cells not less than 1.23x105 in 1 ml for one administration, stimulation of the work of the patient's own biologically active substances in natural conditions is ensured due to various neurotrophic factors secreted by stem cells, and an optimal amount of stem cells is provided in areas of damaged muscles where stem cells are actively multiply, resulting in the regeneration of myocytes and their replacement by stem cells affected muscles. In addition, a network of new blood vessels is formed and sprouts to the affected organ and muscles, which create additional blood flow. At the same time, the quality of life of SMA patients improves. In addition, premedication before the introduction of a suspension of stem cells thawed after cryopreservation from the fetal liver allows to prevent the occurrence of allergic reactions in patients during treatment with good tolerability of the treatment.
Використання саме фетальної печінки та фетального мозку фетуса людини, для отримання стовбурових клітин з метою приготування лікувальних препаратів у вигляді суспензій обумовлено їх пластичністю, зокрема, здатністю таких клітин зазнавати змін та диференціації у відповідь на навколишній вплив або відповідно до їх внутрішньої програми. Відомо, що клітини ембріофетального походження здатні до росту, розмноження, диференціації, міграції та встановлення зв'язків з іншими клітинами. Порівняно з клітинами зрілих тканин, вони мають кращу здатність до проліферації. їх введення є ефективнішим також з огляду на утворення великої кількості ростових факторів. Клітини з фетальної печінки можуть виробляти значну кількість факторів росту, нейротрофічного фактору, цитокінів, інтерлейкінів, що сприяють виживанню та росту, проліферації, диференціації, та можуть стимулювати регенерацію за рахунок оточуючих клітин господаря.The use of the fetal liver and fetal brain of a human fetus to obtain stem cells for the purpose of preparing therapeutic drugs in the form of suspensions is due to their plasticity, in particular, the ability of such cells to undergo changes and differentiation in response to environmental influences or in accordance with their internal program. It is known that cells of embryofetal origin are capable of growth, reproduction, differentiation, migration and establishment of connections with other cells. Compared to the cells of mature tissues, they have a better ability to proliferate. their introduction is more effective also due to the formation of a large number of growth factors. Cells from the fetal liver can produce a significant amount of growth factors, neurotrophic factor, cytokines, interleukins, which promote survival and growth, proliferation, differentiation, and can stimulate regeneration at the expense of surrounding host cells.
Крім цього клітини з фетальної печінки мають здатність виживати при нижчому рівні кисню, ніж їх повністю диференційовані аналоги, що робить їх більш стійкими до ішемічного ушкодження як під час маніпуляцій іп міго, так і після їх введення. Проліферуючі або незрілі клітини з фетальної печінки переважно не мають довгих відростків або сильної міжклітинноїIn addition, cells from fetal liver have the ability to survive at lower oxygen levels than their fully differentiated counterparts, which makes them more resistant to ischemic damage both during ip migo manipulations and after their administration. Proliferating or immature cells from the fetal liver mostly lack long processes or strong intercellular
Зо адгезії і тому зазнають менших пошкоджень під час приготування суспензії стовбурових клітин.Due to adhesion, they are therefore less damaged during the preparation of the stem cell suspension.
Ці властивості дозволяють вводити стовбурові клітини з фетальної печінки шляхом внутрішньовенної ін'єкції у вигляді суспензії (4). Ці характеристики можуть пояснити і підвищене виживання клітин і тканин фетальної печінки, в порівнянні з дорослими, після кріоконсервації.These properties allow the introduction of stem cells from the fetal liver by intravenous injection in the form of a suspension (4). These characteristics can also explain the increased survival of fetal liver cells and tissues, compared to adults, after cryopreservation.
Високий вміст стовбурових клітин фетального мозку забезпечує їх ріст, міграцію та утворення міжклітинних контактів. Ці клітини здатні підлягати змінам і диференціюванню у відповідь на стимули оточуючого середовища.The high content of stem cells in the fetal brain ensures their growth, migration and the formation of intercellular contacts. These cells are able to change and differentiate in response to environmental stimuli.
Трансплантація стовбурових клітин фетальної печінки та фетального мозку має перевагу перед трансплантацією клітин і тканин від дорослого донора, тому що не викликає відторгнення трансплантованої тканини. Це забезпечується тим, що в нейронах іглії фетального мозку людини антигени 1 і 2 класу головного комплексу гістосумісності не експресовані.Transplantation of fetal liver and fetal brain stem cells has an advantage over transplantation of cells and tissues from an adult donor because it does not cause rejection of the transplanted tissue. This is ensured by the fact that antigens of classes 1 and 2 of the major histocompatibility complex are not expressed in the needle neurons of the human fetal brain.
Спосіб лікування дітей, хворих на СМА ІІ типу препаратами з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин, здійснюють таким чином.The method of treating children with type II SMA with preparations made from material of embryo-fetal origin and cells isolated from it is carried out as follows.
Спочатку проводять неврологічне та інструментальне обстеження дітей, хворих на СМА ЇЇ типу: 1. Обстеження неврологічного статусу. 2. Загальні аналізи крові, сечі. 3. Визначення рівня АЛТ, АСТ, КФК, ЛДГ. 4. Спірометрія. 5. Електронейроміографія. 6. Генетичне тестування.First, a neurological and instrumental examination of children with SMA of its type is carried out: 1. Examination of the neurological status. 2. General tests of blood and urine. 3. Determination of the level of ALT, AST, CK, LDH. 4. Spirometry. 5. Electroneuromyography. 6. Genetic testing.
Далі виготовляють два препарати у вигляді суспензій кріоконсервованих стовбурових клітин, одна з яких містить стовбурові клітини з фетальної печінки, а друга суспензія містить стовбурові клітини фетального мозку фетуса людини. Для цього в умовах операційної, з дотриманням правил асептики та антисептики, одержують ембріофетальний матеріал, а саме: тканину печінки, тканину фетального мозку фетуса людини від б до 9 тижнів гестації, які загинули внаслідок медичного аборту в випадках, коли вагітність переривали за соціальними показниками при відсутності патології розвитку чи інфікованості фетуса та наявності інформованої згоди жінки. Вилучені тканини ембріофетального походження поміщають в стерильне транспортне середовище розчину Хенкса. В стерильних умовах тканини сепарують бо та гомогенізують в розчині Хенкса. Отримані суспензії піддають фільтрації та кріоконсервують.Next, two preparations are made in the form of suspensions of cryopreserved stem cells, one of which contains stem cells from the fetal liver, and the second suspension contains stem cells from the fetal brain of a human fetus. For this, in the conditions of the operating room, in compliance with the rules of asepsis and antiseptics, embryofetal material is obtained, namely: liver tissue, fetal brain tissue of human fetuses from b to 9 weeks of gestation, who died as a result of medical abortion in cases where the pregnancy was terminated according to social indicators at the absence of developmental pathology or infection of the fetus and the presence of the woman's informed consent. The extracted tissues of embryo-fetal origin are placed in a sterile transport medium of Hanks' solution. Under sterile conditions, tissues are separated and homogenized in Hanks' solution. The resulting suspensions are filtered and cryopreserved.
Як кріопротектор використовують диметилсульфоксид. Далі готові суспензії розливають в кріопробірки в об'ємі 0,1-14,0 мл. Кріоконсервування суспензій клітин проводять у камері програмного заморожувача за розробленою програмою. Таке кріоконсервування забезпечує практично необмежене довгострокове зберігання вказаних суспензій, дозволяє протягом необхідного часу дослідити препарати у вигляді суспензії на бактеріологічну та вірусологічну безпеку, визначити якісні та кількісні показники суспензії, сформувати банк суспензій стовбурових клітин, відповідно до визначених вимог до препаратів. Суспензії, що містять стовбурові клітини з фетальної печінки та клітини з фетального мозку фетуса людини, зберігають в кріобанку в рідкому азоті при температурі -196 "6.Dimethyl sulfoxide is used as a cryoprotectant. Next, the finished suspensions are poured into cryotubes in a volume of 0.1-14.0 ml. Cryopreservation of cell suspensions is carried out in the chamber of a software freezer according to the developed program. Such cryopreservation provides practically unlimited long-term storage of the indicated suspensions, allows to examine the drugs in the form of a suspension for bacteriological and virological safety, to determine the qualitative and quantitative parameters of the suspension, to form a bank of stem cell suspensions, in accordance with the specified requirements for the drugs. Suspensions containing stem cells from the fetal liver and cells from the fetal brain of a human fetus are stored in a cryobank in liquid nitrogen at a temperature of -196 "6.
При формуванні банку суспензій з тканин ембріофетального походження для лікування хворих на СМА, суспензія стовбурових клітин з фетальної печінки та суспензія стовбурових клітин фетального мозку фетуса людини, повинні мати такі параметри: вміст ядровмісних клітин (підраховують загальну кількість ядровмісних клітин в одиниці об'єму за допомогою клітинного аналізатора чи візуально під мікроскопом в лічильній камері) повинен становити не менше ніж 1,92х105 в 1 мл суспензії для ядровмісних клітин з фетальної печінки та не менше за 1,23х105 в 1 мл суспензії для ядровмісних клітин з фетального мозку фетуса людини; вміст живих клітин після кріоконсервування - не менше, ніж 90 95.When forming a bank of suspensions from tissues of embryo-fetal origin for the treatment of patients with SMA, a suspension of stem cells from the fetal liver and a suspension of stem cells from the fetal brain of a human fetus must have the following parameters: the content of nucleated cells (the total number of nucleated cells per unit volume is calculated using cell analyzer or visually under a microscope in a counting chamber) should be at least 1.92x105 in 1 ml of suspension for nucleated cells from the fetal liver and not less than 1.23x105 in 1 ml of suspension for nucleated cells from the fetal brain of a human fetus; the content of living cells after cryopreservation is not less than 90 95.
Пробірки, що містять суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з фетальної печінки та суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з фетального мозку фетуса людини, безпосередньо перед введенням виймають з рідкого азоту, занурюють у водяну баню при температурі «37"С та витримують до появи рідкої фази. Подальші маніпуляції проводять при кімнатній температурі з суворим дотриманням правил асептики. Час перебування розмороженої суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки та суспензії стовбурових клітин фетального мозку фетуса людини, при кімнатній температурі не повинен перевищувати 10 хвилин.Tubes containing a suspension of cryopreserved stem cells from the fetal liver and a suspension of cryopreserved stem cells from the fetal brain of a human fetus are taken out of liquid nitrogen immediately before administration, immersed in a water bath at a temperature of "37"C and held until the liquid phase appears. Further manipulations are carried out at room temperature with strict adherence to the rules of asepsis.The time of thawed suspension of stem cells from the fetal liver and suspension of stem cells from the fetal brain of a human fetus at room temperature should not exceed 10 minutes.
При цьому перед введенням вказаних суспензій здійснюють додатковий контроль якості суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки та суспензії стовбурових клітин з фетального мозку фетуса людини, зокрема проводять мікроскопію та здійснюють підрахунок кількості життєздатних клітин за допомогою автоматичного клітинного аналізатора чи візуально під мікроскопом в лічильній камері. Вміст живих клітин після кріоконсервування - не менше, ніж 90At the same time, before the introduction of these suspensions, additional quality control of the suspension of stem cells from the fetal liver and the suspension of stem cells from the fetal brain of a human fetus is carried out, in particular, microscopy is performed and the number of viable cells is counted using an automatic cell analyzer or visually under a microscope in a counting chamber. The content of living cells after cryopreservation is not less than 90
Зо Чо.Zo Cho
Перед початком проведення лікування дітей, хворих на СМА ПП типу шляхом введення розморожених після кріоконсервації суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки та суспензії фетального мозку фетуса людини, виконують інструментальне (чи клінічне?) та неврологічне обстеження стану хворого. Далі, перед введенням розмороженої після кріоконсервації суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки, з метою запобігання виникнення алергійних реакцій під час лікування, виконують премедикацію шляхом внутрішньовенного введення 5 мг димедролу і 15 мг преднізолону через систему для переливання крові. Після цього разом із фізіологічним розчином натрію хлориду вводять розморожену суспензію стовбурових клітин з фетальної печінки шляхом внутрішньовенного введення зі швидкістю 20 - 40 крапель за хвилину. При цьому об'єм лікувальної дози суспензії для одного введення підбирають індивідуально, але не менше за 0,1 мл, з кількістю ядровмісних клітин не меншою за 1,92х105 в 1 мл. Введення розмороженої суспензії стовбурових клітин з фетального мозку фетуса людини, здійснюють підшкірно в об'ємі не меншому за 0,7 мл з кількістю ядровмісних клітин, не менше за 1,23х105 в 1 мл за одне введення. Така кількість клітин забезпечує необхідну якість суспензій та достатня для отримання високої ефективності лікування хворих на СМА.Before starting the treatment of children with SMA of the PP type by introducing a suspension of stem cells thawed after cryopreservation from a fetal liver and a suspension of a fetal brain of a human fetus, an instrumental (or clinical?) and neurological examination of the patient's condition is performed. Next, before introducing the thawed after cryopreservation suspension of stem cells from the fetal liver, in order to prevent the occurrence of allergic reactions during treatment, premedication is performed by intravenous administration of 5 mg of diphenhydramine and 15 mg of prednisolone through the blood transfusion system. After that, together with a physiological solution of sodium chloride, a thawed suspension of stem cells from the fetal liver is injected intravenously at a rate of 20 - 40 drops per minute. At the same time, the volume of the therapeutic dose of the suspension for one administration is selected individually, but not less than 0.1 ml, with the number of nucleated cells not less than 1.92x105 in 1 ml. Administration of a thawed suspension of stem cells from the fetal brain of a human fetus is carried out subcutaneously in a volume of not less than 0.7 ml with the number of nucleated cells not less than 1.23x105 in 1 ml for one administration. Such a number of cells ensures the necessary quality of suspensions and is sufficient to obtain high efficiency of treatment of patients with SMA.
Одночасно з введенням розморожених суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки та суспензії стовбурових клітин з фетального мозку фетуса людини, проводять стандарту терапію, що включає проведення комплексних інтегральних методик реабілітації.Simultaneously with the introduction of thawed suspension of stem cells from the fetal liver and suspension of stem cells from the fetal brain of a human fetus, standard therapy is carried out, which includes the implementation of complex integral rehabilitation techniques.
Після введення розморожених після кріоконсервації суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки та суспензії стовбурових клітин з фетального мозку фетуса людини, хворий знаходиться під спостереженням. Причому після проведення лікування через 6 і 12 місяців здійснюють контроль активності стану хворого за клінічними та інструментальними показниками.After the introduction of a suspension of stem cells from the fetal liver thawed after cryopreservation and a suspension of stem cells from the fetal brain of a human fetus, the patient is under observation. Moreover, after the treatment, after 6 and 12 months, the activity of the patient's condition is monitored according to clinical and instrumental indicators.
При цьому точки спостереження вибирають, згідно з протоколом клінічного застосування препарату з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин, розробленим на основі клінічного досвіду.At the same time, observation points are selected according to the protocol for clinical use of the drug from material of embryo-fetal origin and cells isolated from it, developed on the basis of clinical experience.
Ефективність лікування дітей, хворих на СМА ІІ типу оцінюють за покращенням соціальної адаптації дитини та покращенням дихання.The effectiveness of the treatment of children with type II SMA is evaluated by improving the child's social adaptation and improving breathing.
Так, з 2004 по 2016 роки у клініці клітинної терапії були проліковані 17 дітей, хворих на СМАThus, from 2004 to 2016, 17 children with SMA were treated in the cell therapy clinic
І типу, відповідно до способу лікування СМА І типу, що заявляється. У всіх хворих спостерігався синдром раннього післяінфузійного покращення: відбувалося поліпшення сну, покращився апетит. Після проведеного введення суспензії кріоконсервованих стовбурових клітин з фетальної печінки в жодному випадку не спостерігались ускладнення чи побічні явища, в тому числі реакція «трансплантат проти господаря» (РТПГ).Type I, according to the method of treatment of type I SMA, which is claimed. All patients had a syndrome of early post-infusion improvement: sleep improved, appetite improved. After the introduction of the suspension of cryopreserved stem cells from the fetal liver, no complications or side effects, including graft-versus-host disease (GVHD), were observed in any case.
Після проведеного лікування спостерігалось покращення якості життя хворих, покращились функціональні можливості легенів (форсована життєва ємкість легенів (ФЖЄЛ), об'єм форсованого видиху за 1 секунду (ОФВІ) (див. табл.).After the treatment, the quality of life of the patients improved, the functional capabilities of the lungs improved (forced vital capacity of the lungs (FVC), forced expiratory volume in 1 second (EFVI) (see table).
Таблиця нини УСТ; З 5: ЗИ З хх - р«0,05 - статистично значуще покращення перед лікуванням та через 6 місяців після лікування и - р«е0,05 - статистично значуще покращення перед лікуванням та через 12 місяців після лікуванняTable of current UST; C 5: ZI Z xx - p«0.05 - statistically significant improvement before treatment and 6 months after treatment and - p«e0.05 - statistically significant improvement before treatment and 12 months after treatment
Отже, після проведеного лікування через 12 місяців спостерігалось статистично значуще покращення показників ФЖЄЛ та ОФВІ1 - 98,24-5,1 95 та 99,24--2,6 95 відповідно в порівнянні з показниками до лікування (87,26--44,1 95) та (90,12--3,5 95) відповідно.Therefore, after the treatment, after 12 months, a statistically significant improvement in the indicators of FJEL and FEVI1 was observed - 98.24-5.1 95 and 99.24--2.6 95, respectively, compared to the indicators before treatment (87.26--44, 1 95) and (90.12--3.5 95) respectively.
Також, після проведеного лікування спостерігалось покращення таких лабораторних показників, які відображають міоліз. У пацієнтів 3 СМА П типу спостерігалося достовірне зниження креатинфосфокінази (КФК), починаючи з б місяця в порівнянні 3 показниками до лікування (2583,4249,22 Од/л до лікування, 1912,32531,12 Од/л через 6 місяців, 918,02-19,27 Од/л через 12 місяців), р«0,05. До лікування середній бал показника лактатдегідрогенази (ЛДГ) дорівнював 526,4-18,04 Од/л. Через 6 місяців після лікування спостерігається тенденція до зниження рівня ЛДГ (379-21,03 Од/л). Через 12 місяців цей показник достовірно знизився та становив 284:х-19,11 Од/л, р«е0,05.Also, after the treatment, there was an improvement in such laboratory indicators that reflect myolysis. In patients with type 3 SMA P, a significant decrease in creatine phosphokinase (CPK) was observed starting from month b in comparison with 3 indicators before treatment (2583.4249.22 U/l before treatment, 1912.32531.12 U/l after 6 months, 918, 02-19.27 Units/l after 12 months), p«0.05. Before treatment, the average score of the lactate dehydrogenase (LDH) index was 526.4-18.04 units/l. 6 months after treatment, there is a tendency to decrease the level of LDH (379-21.03 units/l). After 12 months, this indicator significantly decreased and amounted to 284:x-19.11 Units/l, p«e0.05.
Корисна модель, що заявляється, пояснюється наступними прикладами.The claimed utility model is illustrated by the following examples.
Приклад 1.Example 1.
Зо Пацієнт С., 2007 р.н., історія хвороби Мо 193. Хворий знаходився в клініці клітинної терапії з метою лікування СМА ПІ типу. Із анамнезу відомо, що перші симптоми у вигляді слабкості в м'язах ніг батьки помітили в 2-орічному віці. Народився від 1-ої вагітності, ускладненої стресом, при терміні 39 тижнів, з вагою 2850 г. Ранній психомоторний розвиток був з затримкою.Zo Patient S., born in 2007, medical history No. 193. The patient was in the cell therapy clinic for the treatment of SMA type PI. It is known from the anamnesis that the first symptoms in the form of weakness in the leg muscles were noticed by the parents at the age of 2 years. He was born from the 1st pregnancy, complicated by stress, at 39 weeks, weighing 2850 g. Early psychomotor development was delayed.
Об'єктивно: Правильної будови тіла, ходить самостійно. Шкірні покриви та слизові оболонки чисті, звичайного кольору. Язик чистий, вологий. Доступні огляду лімфовузли не пальпуються.Objectively: Correct body structure, walks independently. Skin and mucous membranes are clean, normal color. The tongue is clean, moist. Lymph nodes available for examination are not palpable.
Перкуторно: межі серця без змін. Мелодія серцевої діяльності правильна, тони звучні. При перкусії легень - на симетричних ділянках - легеневий ясний звук. В легенях вислуховується везикулярне дихання без хрипів, жорстке. Живіт при пальпації м'який, безболісний. Петлі кишечнику без змін. Печінка та селезінка не збільшені, безболісні при пальпації. СимптомPercussion: the borders of the heart are unchanged. The melody of cardiac activity is correct, tones are sonorous. When percussing the lungs - in symmetrical areas - a clear lung sound. In the lungs, vesicular breathing is heard without wheezing, hard. The abdomen is soft and painless on palpation. Intestinal loops unchanged. The liver and spleen are not enlarged, painless on palpation. Symptom
Пастернацького негативний з обох боків. Фізіологічні випорожнення не порушені, регулярні.Pasternakskyi is negative from both sides. Physiological bowel movements are not disturbed, regular.
Пульсація периферичних артерій збережена.Pulsation of peripheral arteries is preserved.
Неврологічний статус: Дитина активна, на огляд реагує адекватно. Спостерігається збіжна правобічна косоокість. Очні щілини 0-5. Обличчя симетричне. М'язовий тонус в ногах дещо знижений, 0-5. М'язова сила знижена в ногах, 0-5 3 ОАР 4 б. Голову утримує. Самостійно сидить. Сухожилкові рефлекси дещо знижені в ногах, 0-5. Патологічний рефлекс Бабінського не викликається з обох боків. Менінгеальні знаки не визначаються.Neurological status: The child is active, responds adequately to examination. Convergent right-sided strabismus is observed. Eye slits 0-5. The face is symmetrical. Muscle tone in the legs is slightly reduced, 0-5. Muscle strength is reduced in the legs, 0-5 3 OAR 4 b. Holds the head. Sits independently. Tendon reflexes are slightly reduced in the legs, 0-5. Babinski's pathological reflex is not elicited on both sides. Meningeal signs are not determined.
Перед введенням розмороженої після кріоконсервації суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки хворому була проведена премедикація шляхом внутрішньовенного введення 5 мг димедролу і 15 мг преднізолону. Введено суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з фетальної печінки в об'ємі 1,Рр9 мл шляхом внутрішньовенного крапельного введення. На другий день введено суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з фетального мозку фетуса людини, підшкірно в об'ємі 2,1 мл. Характеристика введеної суспензії кріоконсервованих стовбурових клітин з фетальної печінки: вік фетуса - 7 тижнів гестації; кількість ядровмісних клітин - 11,6х109 в 1 мл. Характеристика введеної суспензії кріоконсервованих стовбурових клітин з фетального мозку фетуса: вік фетуса - 7 тижнів гестації; кількість ядровмісних клітин - 9,03х105 в 1 мл.Before the introduction of the thawed after cryopreservation suspension of stem cells from the fetal liver, the patient was premedicated by intravenous administration of 5 mg of diphenhydramine and 15 mg of prednisolone. A suspension of cryopreserved stem cells from the fetal liver in a volume of 1.Pp9 ml was administered by intravenous drip. On the second day, a suspension of cryopreserved stem cells from the fetal brain of a human fetus was injected subcutaneously in a volume of 2.1 ml. Characteristics of the injected suspension of cryopreserved stem cells from the fetal liver: fetal age - 7 weeks of gestation; the number of nucleated cells - 11.6x109 in 1 ml. Characteristics of the injected suspension of cryopreserved stem cells from the fetal brain: the age of the fetus is 7 weeks of gestation; the number of nucleated cells - 9.03x105 in 1 ml.
У перші кілька діб після введення вказаних суспензій спостерігався синдром раннього після інфузійного покращення, який проявлявся покращенням сну та апетиту.In the first few days after the introduction of these suspensions, an early post-infusion improvement syndrome was observed, which was manifested by an improvement in sleep and appetite.
Після проведеного лікування через 12 місяців спостерігалось статистично значуще покращення показників ФЖЄЛ та ОФВІ1 - 97,15-4,2 95 та 98,17--1,6 95 відповідно в порівнянні з показниками до лікування (86,15--3,1 95) та (90,12--2,5 95) відповідно.After 12 months of treatment, there was a statistically significant improvement in FJEL and FEVI1 indicators - 97.15-4.2 95 and 98.17--1.6 95, respectively, compared to the indicators before treatment (86.15--3.1 95 ) and (90.12--2.5 95) respectively.
Також, після проведеного лікування спостерігалось покращення таких лабораторних показників, які відображають міоліз. У пацієнтів 3 СМА П типу спостерігалося достовірне зниження креатинфосфокінази (КФК), починаючи з б місяця, в порівнянні з показниками до лікування (2342,4241,21 Од/л до лікування, 1844,32430,12 Од/л через 6 місяців, 987,05-14,17 Од/л через 12 місяців), р«0,05. До лікування середній бал показника лактатдегідрогенази (ЛДГ) дорівнював 426,4-28,04 Од/л. Через 6 місяців після лікування спостерігається тенденція до зниження рівня ЛДГ (3632420,02 Од/л). Через 12 місяців цей показник достовірно знизився та становив 273:х218,21 Од/л, р«е0,05.Also, after the treatment, there was an improvement in such laboratory indicators that reflect myolysis. In patients with type 3 SMA P, a significant decrease in creatine phosphokinase (CPK) was observed, starting from month b, in comparison with the indicators before treatment (2342.4241.21 U/l before treatment, 1844.32430.12 U/l after 6 months, 987 ,05-14,17 U/l after 12 months), p«0,05. Before treatment, the average score of the lactate dehydrogenase (LDH) index was 426.4-28.04 units/l. 6 months after the treatment, there is a tendency to decrease the level of LDH (3632420.02 units/l). After 12 months, this indicator significantly decreased and amounted to 273:x218.21 Units/l, p«e0.05.
Приклад 2.Example 2.
Пацієнт С., 2011 р. н., історія хвороби Мо 105. Хворий знаходився в клініці клітинної терапії з метою лікування СМА І типу. В віці 2,5 років батьки помітили проблеми з ходою у дитини, звернулись до лікаря, був ообстежений. Проведений неврологічний огляд, генетичне дослідження, біопсія м'язів, після чого був виставлений діагноз СМА ПІ типу.Patient S., born in 2011, medical history No. 105. The patient was in the cell therapy clinic for the treatment of SMA type I. At the age of 2.5 years, the parents noticed problems with the child's gait, consulted a doctor, and he was examined. A neurological examination, a genetic study, and a muscle biopsy were performed, after which a diagnosis of type 1 SMA was made.
Об'єктивно: Правильної будови тіла, дитина ходить самостійно. Шкірні покриви та слизові оболонки чисті, звичайного кольору. Язик чистий, вологий. Доступні огляду лімфовузли не пальпуються. Перкуторно: межі серця без змін. Мелодія серцевої діяльності правильна, тони звучні. При перкусії легень - на симетричних ділянках - легеневий ясний звук. В легенях вислуховується везикулярне дихання без хрипів, жорстке. Живіт при пальпації м'який, безболісний. Петлі кишечнику без змін. Печінка та селезінка не збільшені, безболісні при пальпації. Симптом Пастернацького негативний з обох боків. Фізіологічні відправлення не порушені, регулярні. Пульсація периферичних артерій збережена.Objectively: The child has the correct body structure, walks independently. Skin and mucous membranes are clean, normal color. The tongue is clean, moist. Lymph nodes available for examination are not palpable. Percussion: the borders of the heart are unchanged. The melody of cardiac activity is correct, tones are sonorous. When percussing the lungs - in symmetrical areas - a clear lung sound. In the lungs, vesicular breathing is heard without wheezing, hard. The abdomen is soft and painless on palpation. Intestinal loops unchanged. The liver and spleen are not enlarged, painless on palpation. Pasternacki's symptom is negative on both sides. Physiological discharges are not disturbed, regular. Pulsation of peripheral arteries is preserved.
Неврологічний статус: Дитина активна, на огляд реагує адекватно. Спостерігається збіжнаNeurological status: The child is active, responds adequately to examination. Convergence is observed
Зо правобічна косоокість. Очні щілини 0-5. Обличчя симетричне. М'язовий тонус в ногах дещо знижений, 0-5. М'язова сила знижена, 0-5 з ОАР до 4,5 6. Голову утримує. Самостійно сидить.From right-sided strabismus. Eye slits 0-5. The face is symmetrical. Muscle tone in the legs is slightly reduced, 0-5. Muscle strength is reduced, 0-5 with OAR to 4.5 6. Holds the head. Sits independently.
Сухожилкові рефлекси дещо знижені в ногах, 0-5. Патологічний рефлекс Бабінського не викликається з обох боків. Менінгеальні знаки не визначаються. Згладжений поперековий лордоз.Tendon reflexes are slightly reduced in the legs, 0-5. Babinski's pathological reflex is not elicited on both sides. Meningeal signs are not determined. Smoothed lumbar lordosis.
Перед введенням розмороженої після кріоконсервації суспензії стовбурових клітин з фетальної печінки хворому була проведена премедикація шляхом внутрішньовенного введення 5 мг димедролу і 15 мг преднізолону. Введено суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з фетальної печінки в об'ємі 1,7 мл шляхом внутрішньовенного крапельного введення. На другий день введено суспензію кріоконсервованих стовбурових клітин з фетального мозку фетуса людини, підшкірно в об'ємі 2,3 мл. Характеристика введеної суспензії кріоконсервованих стовбурових клітин з фетальної печінки: вік фетуса - 8 тижнів гестації; кількість ядровмісних клітин - 31,0х106 в 1 мл. Характеристика введеної суспензії кріоконсервованих стовбурових клітин з фетального мозку фетуса: вік фетуса - 8 тижнів гестації; кількість ядровмісних клітин - 8,15х106 в 1 мл.Before the introduction of the thawed after cryopreservation suspension of stem cells from the fetal liver, the patient was premedicated by intravenous administration of 5 mg of diphenhydramine and 15 mg of prednisolone. A suspension of cryopreserved stem cells from the fetal liver in a volume of 1.7 ml was introduced by intravenous drip. On the second day, a suspension of cryopreserved stem cells from the fetal brain of a human fetus was injected subcutaneously in a volume of 2.3 ml. Characteristics of the injected suspension of cryopreserved stem cells from the fetal liver: fetal age - 8 weeks of gestation; the number of nucleated cells - 31.0x106 in 1 ml. Characteristics of the injected suspension of cryopreserved stem cells from the fetal brain of the fetus: age of the fetus - 8 weeks of gestation; the number of nucleated cells - 8.15x106 in 1 ml.
У перші кілька діб після введення вказаних суспензій спостерігався синдром раннього після інфузійного покращення, який проявлявся покращенням сну та апетиту.In the first few days after the introduction of these suspensions, an early post-infusion improvement syndrome was observed, which was manifested by an improvement in sleep and appetite.
Після проведеного лікування через 12 місяців спостерігалось статистично значуще покращення показників ФЖЄЛ та ОФВІ1 - 97,31-5,1 95 та 99,78--2,7 95 відповідно в порівнянні з показниками до лікування (88,15--44,1) 95 та (92,23--2,5) 95 відповідно.After 12 months of treatment, there was a statistically significant improvement in FJEL and FEVI1 indicators - 97.31-5.1 95 and 99.78--2.7 95, respectively, compared to the indicators before treatment (88.15--44.1) 95 and (92.23--2.5) 95, respectively.
Також, після проведеного лікування спостерігалось покращення таких лабораторних показників, які відображають міоліз. У пацієнтів 3 СМА П типу спостерігалося достовірне зниження КФК, починаючи з 6 місяця, в порівнянні з показниками до лікування (1787,45232,21Also, after the treatment, there was an improvement in such laboratory indicators that reflect myolysis. In patients with type 3 SMA P, a significant decrease in CPK was observed, starting from the 6th month, in comparison with the indicators before treatment (1787.45232.21
Од/л до лікування, 978,3х527,13 Од/л через 6 місяців, 921,0216,21 Од/л через 12 місяців), р«е0,05.Units/l before treatment, 978.3х527.13 Units/l after 6 months, 921.0216.21 Units/l after 12 months), p«e0.05.
До лікування середній бал показника лактатдегідрогеназа (ЛДГ) дорівнював 434,4ж212,05 Од/л.Before treatment, the average score of the lactate dehydrogenase (LDH) indicator was 434.4x212.05 units/l.
Через 6 місяців після лікування спостерігається тенденція до зниження рівня ЛДГ (327ж522,036 months after the treatment, there is a tendency to decrease the level of LDH (327x522.03
Од/л). Через 12 місяців цей показник достовірно знизився та нормалізувався та становив 2025-15,12 Од/л, р«е0,05.units/l). After 12 months, this indicator significantly decreased and normalized and amounted to 2025-15.12 Units/l, p«e0.05.
Отже, запропонований спосіб лікування дітей, хворих на СМА Ш типу препаратами з матеріалу ембріофетального походження та виділених з нього клітин дозволяє підвищити бо ефективність лікування хворих на СМА І типу, зокрема покращити функціональний стан хворого, підтримати дихання дитини та соціальну адаптацію дитини без необхідності підбору донора за антигенами гістосумісності. В результаті - продовжується тривалість та якість життя, полегшуються симптоми дітей, хворих на СМА І типу.So, the proposed method of treatment of children with SMA type Ш with preparations made from material of embryofetal origin and cells isolated from it allows to increase the effectiveness of treatment of patients with SMA type I, in particular to improve the functional state of the patient, support the child's breathing and social adaptation of the child without the need for donor selection by histocompatibility antigens. As a result, the duration and quality of life is extended, the symptoms of children with SMA type I are alleviated.
Джерела інформації: 1. Евтушенко С.К., Шаймурзин М.Р., Евтушенко О.С., Евтушенко Л.Ф., Дегонская БЕ.В.,Sources of information: 1. Evtushenko S.K., Shaymurzyn M.R., Evtushenko O.S., Evtushenko L.F., Degonskaya BE.V.,
Евтушенко И.С., Сохань Д.А. Ранняя клинико-инструментальная диагностика и терапия бьістро- и медленнопрогрессирующих мьішечньїх дистрофий и амиотрофий // Международньй неврологический журнал. - 2007. - Мо 4 (14). - С. 8-12. 2. Казаков В.М. Клинико-молекулярно-генетическая классификация мьішечньїх дистрофий (научньй обзор с комментариями) // Неврол. журнал. - 2001. - Мо 3. - С. 47-52.Evtushenko I.S., Sokhan D.A. Early clinical-instrumental diagnosis and therapy of rapidly and slowly progressing muscular dystrophy and amyotrophy // International Neurological Journal. - 2007. - Mo 4 (14). - P. 8-12. 2. Kazakov V.M. Clinical-molecular-genetic classification of muscular dystrophies (scientific review with comments) // Neurol. magazine. - 2001. - Mo. 3. - P. 47-52.
З. Рагамеїїї І., Мі27агдо М., Соті С.Р., Сопі 5. Зріпа! тизсціаг аїгорпу - гесепі Іегарешіс адмапсевз ог ап сід спаПепде // Маї. Нем. Мешгої. 2015. - М. 11. Мо 6. - Р. 351-359. 4. Сабапеїа Р., Сагіввіті С, Овівїо А., Реї22опі Г. ТНе асіїміу ої Пе 5ріпа! тизсшаг апорну ргоївїіп і5 гедціагей дигіпд демеіортепі апа сеїшіаг айегепіайоп // Нит. Мої. Сепеї. - 2005. - М. 14,Z. Ragameii I., Mi27agdo M., Soti S.R., Sopi 5. Zripa! tizsciag aihorpu - hesepi Iegareshis admapsevs og ap sid spaPepde // Mai. German Mashgoi 2015. - M. 11. Mo. 6. - R. 351-359. 4. Sabapeia R., Sagivviti S, Ovivio A., Rei22opi G. Tne asiimiu oi Pe 5ripa! tizsshag apornu rgoiviiip i5 gedsiagei digipd demeiortepi apa seishiag ayegepiayop // Nit. My. Sepoys - 2005. - M. 14,
Мо 23. - Р. 3629-3642. 5. Мопапі Ц.Н., І оївоп С.І.., Рагзоп5 ОМ. єї аї. А 5іпдіє писієоїіде дінегепсе паї аї(егз з5ріїсіпу рацегп5 аізііпдиієпез Ше ЗМА депе 5ММІ1 їтот Ше сору депе ЗММ2//Нит. Мої. Сепеї. - 1999. - М. 8, Ме7. - Р. 1177-1183.Mo. 23. - R. 3629-3642. 5. Mopapi C.N., I oivop S.I.., Ragzop5 OM. oh yeah A 5ipdie pisieoiide dinegepse pai ai(egz z5riisipu racegp5 aiziipdiiepez She ZMA depe 5MMI1 itot She soru depe ZMM2//Nit. Moi. Sepei. - 1999. - M. 8, Me7. - R. 1177-1183.
Claims (6)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU201704101U UA119568U (en) | 2017-04-25 | 2017-04-25 | METHOD OF TREATMENT OF CHILDREN WITH SPINAL MUSCLE ATROPHY OF TYPE III |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UAU201704101U UA119568U (en) | 2017-04-25 | 2017-04-25 | METHOD OF TREATMENT OF CHILDREN WITH SPINAL MUSCLE ATROPHY OF TYPE III |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA119568U true UA119568U (en) | 2017-09-25 |
Family
ID=59894597
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAU201704101U UA119568U (en) | 2017-04-25 | 2017-04-25 | METHOD OF TREATMENT OF CHILDREN WITH SPINAL MUSCLE ATROPHY OF TYPE III |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA119568U (en) |
-
2017
- 2017-04-25 UA UAU201704101U patent/UA119568U/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5649786B2 (en) | Compositions containing human embryonic stem cells and their derivatives, methods of use, and methods of preparation | |
| RU2283119C1 (en) | Autologic hemopoietic stem cells preparation and method for producing, cryogenic preserving and applying it in treating traumatic nervous system disease cases | |
| Rushkevich et al. | The use of autologous mesenchymal stem cells for cell therapy of patients with amyotrophic lateral sclerosis in belarus | |
| CN110724203A (en) | Short peptide for promoting TFEB (T-Epstein-Barr) nuclear translocation, linear short peptide based on short peptide and application of short peptide in relieving cerebral ischemic injury | |
| US8277795B2 (en) | Methods and compositions for treating motor neuron diseases comprising mesenchymal stem cells | |
| US20240100097A1 (en) | Using autologous mesenchymal stem cells to treat multiple system atrophy | |
| CN110755450B (en) | Application of extracellular vesicles derived from mesenchymal stem cells in treatment of subarachnoid hemorrhage | |
| UA119568U (en) | METHOD OF TREATMENT OF CHILDREN WITH SPINAL MUSCLE ATROPHY OF TYPE III | |
| CN108904782A (en) | CTRP3 is used to prepare the application of prophylactic treatment myocardial hypertrophy drug | |
| CN104288781B (en) | Application in the medicine of preparation prevention and/or treatment ischemic ocular disease for the miR 329 | |
| Guthrie | Experimental shock | |
| Peng et al. | Hyperbaric oxygen therapy combined with Schwann cell transplantation promotes spinal cord injury recovery | |
| RU2444732C1 (en) | Diagnostic technique for cerebral glioblastoma | |
| WO2008031448A1 (en) | Preparation of autologous non-hematopoietic progenitor stem cells, method of preparation and use thereof | |
| UA145507U (en) | METHOD OF COMBINED TREATMENT OF TYPE 2 DIABETES MELLITUS AND ITS COMPLICATIONS | |
| Burrows | Neuritis of the cranial nerves in lethargic encephalitis and the differential anatomic diagnosis between it and acute poliomyelitis | |
| CN112587662A (en) | Application of miR-155/PEA15 signal pathway inhibitor in medicine for pathological cardiac remodeling | |
| UA97540U (en) | METHOD OF TREATMENT OF LATER AMYOTROPHIC SCLEROSIS BY PREPARATION FROM MATERIAL OF EMBRYOPHETAL ORIGIN AND SEPARATED ITS | |
| ES2748475T3 (en) | Compositions comprising human embryonic stem cells and their derivatives, methods of use and preparation procedures | |
| UA119837C2 (en) | METHOD OF REJUVENATION OF THE HUMAN BODY BY APPLYING STEM CELLS, WHICH ARE OBTAINED FROM THE BLOOD OF THE PATIENT | |
| RU2238745C2 (en) | Method for treating neonatals and small children with cerebral hypoxia and organic lesions of central nervous system | |
| UA120443C2 (en) | METHOD OF TREATMENT OF PSYCHOMOTOR DEVELOPMENTAL DELAY IN CHILDREN WITH PERINATAL NERVOUS NERVOUS LEVELS BY DRUGS FROM EMBLYOGRIFE MATERIAL | |
| UA122966U (en) | METHOD OF TREATMENT OF DIABETIC RETINOPATHY BY PREPARATIONS FROM MATERIAL OF EMBRIOPHETAL ORIGIN AND SEPARATED FROM ITS CELLS | |
| UA134912U (en) | METHOD OF RADCHENKO-SIRMAN OF MULTI-STAGE REJUVENATION OF WOMEN'S ORGANISM | |
| CN117180435A (en) | Frizzled2 as target in the treatment of pressure overload myocardial injury |