UA113146C2

UA113146C2 - METHOD OF OBTAINING IN VITRO HETERODIMERAL PROTEIN

Info

Publication number: UA113146C2
Application number: UAA201213258A
Authority: UA
Priority date: 2010-04-20
Filing date: 2011-04-20
Publication date: 2016-12-26

Abstract

Винахід стосується способу отриманнягетеродимерного білка, який передбачає стадії надання першого гомодимерного білка, який включає Fc-ділянку імуноглобуліну, причому зазначена Fc-ділянка включає першу СН3-ділянку, де зазначений перший гомодимерний білок має заміну амінокислоти в позиції 409, надання другого гомодимерного білка, який включає Fc-ділянку імуноглобуліну, причому зазначена Fc-ділянка включає другу СН3-ділянку, де зазначений другий гомодимерний білок має заміну амінокислоти в позиції, обраній із групи, яка складається з позицій 366, 368, 370, 399, 405 та 407, при цьому послідовності зазначених першої й другої СН3-ділянок є різними й такими, що гетеродимерна взаємодія між зазначеними першою і другою СН3-ділянками є сильнішою, ніж кожна з гомодимерних взаємодій зазначених першої й другої СН3-ділянок, інкубацію зазначеного першого білка разом із зазначеним другим білком за умов відновлення, достатніх для того, щоб дати можливість цистеїнам у шарнірній ділянці проходити ізомеризацію дисульфідного зв'язку, і отримання зазначеного гетеродимерного білка. Також винахід стосується способу відбору біспецифічного антитіла з потрібною активністю, експресуючого вектора, гетеродимерного білка, фармацевтичної композиції, способу інгібування росту та/або проліферації пухлинних клітин.The invention relates to a method of obtaining a heterodimeric protein, which provides the stage of providing the first homodimeric protein, which includes the Fc region of the immunoglobulin, and said Fc region includes the first CH3 region, where said first homodimeric protein has the replacement of amino acids in position comprising the Fc region of an immunoglobulin, said Fc region comprising a second CH3 region, wherein said second homodimeric protein has an amino acid substitution at the position selected from the group consisting of positions 3 66, 368, 370, 399, 405 and 407, wherein the sequences of said first and second CH3 portions are different and such that the heterodimer interaction between said first and second CH3 portions is stronger than each of the homodimeric interactions of said first and second CH3 sites, incubation of said first protein together with said second protein under recovery conditions sufficient to enable cysteines in the hinge region to undergo isomerization of the disulfide bond, and to obtain said heterodimeric protein. The invention also relates to a method for selecting a bispecific antibody with the desired activity, expressing a vector, a heterodimeric protein, a pharmaceutical composition, a method of inhibiting the growth and / or proliferation of tumor cells.