TWI770463B - 用於預防或治療雷特氏症的乳酸菌組成物 - Google Patents

Abstract

本揭露提供一種在有其需要的個體中預防或治療雷特氏症的方法，包括向該個體投予有效量的植物乳酸桿菌植物亞種PS128。本揭露還提供包含植物乳酸桿菌植物亞種的PS128及其載劑的組成物，用於預防或治療有其需要的個體中的雷特氏症。

Description

用於預防或治療雷特氏症的乳酸菌組成物

本揭露涉及一種使用包含乳酸菌的組成物於預防或治療雷特氏症(Rett syndrome，RTT)的方法；更具體地，本揭露涉及植物乳酸桿菌植物亞種PS128於有其需要的個體中預防或治療雷特氏症的用途。

雷特氏症是一種罕見的神經系統遺傳疾病，最早於嬰兒期發現，且幾乎都是在女嬰中觀察到此病症。全世界發生率為每10,000名女嬰中會有1名，在男嬰中則更為罕見。雷特氏症通常在孩童6至18個月時發現，儘管在此之前雷特氏症患者的發育正常，但他們開始錯過發展的里程碑或喪失所獲得的能力。雷特氏症首先是在早期階段喪失語言能力和自閉症行為，接著逐漸導致嚴重的發展障礙。在嬰兒晚期或1至4歲之間的兒童時期，雷特氏症的特徵是出現重複的手部動作，如扭手、拍手、敲擊、搓手和咬手等，是最容易發現的診斷標準之一。其他心理動作呈現包括共濟失調(ataxic)的步態不穩、過度換氣或呼吸暫停發作，以及可能在一半以上的患者中發生的癲癇。之後，雷特氏症患者經歷運動功能惡化，並以漸進性的運動功能障礙為特徵，例如肌肉張力增加、肌肉消瘦、磨牙症、便秘和脊柱側彎。雷特氏症呈現的失能範圍廣泛，包括輕度至 重度。雷特氏症的病程和嚴重程度取決於在甲基CpG結合蛋白2(MECP2)基因上發現突變的位置、類型和嚴重程度以及X染色體不活化。

雷特氏症最主要和最不利的方面是失用症(apraxia)或功能障礙，即無法或難以控制身體進行運動。結果，包括眼神和語言在內的各種身體運動都受到影響，使雷特氏症患者很難自理日常活動。此外，由於失用症或功能障礙以及他們無法說話，可能很難對雷特氏症患者的智力進行準確評估。大多數用於智力評估的傳統測試方法都涉及到手和/或語言的使用，這對雷特氏症患者可能是無法做到的。

儘管最近對雷特氏症的發病機制和治療策略進行了研究，但雷特氏症的治療目前仍僅是姑息(palliative)治療，雷特氏症個體的心理動作或神經症狀的任何減輕都將對患者及其家庭有益。目前，除了其他物理和職能療法外，雷特氏症患者還接受針對癲癇、逆流、呼吸和情緒等症狀的治療。

因此，仍然需要一種安全有效的方法來預防或治療與雷特氏症有關的心理動作或神經系統症狀。

鑑於前述內容，本揭露提供一種預防或治療有其需要的個體中的雷特氏症的方法，包括向該個體投予包含有效量的植物乳酸桿菌植物亞種PS128及其載劑的組成物。在一個實施例中，PS128的有效量為至少1×10⁹菌落形成單位(colony-forming unit，CFU)、至少1×10¹⁰CFU或至少1×10¹¹CFU，包括1×10⁹CFU、2×10⁹CFU、3×10⁹CFU、4×10⁹CFU、5×10⁹CFU、6×10⁹CFU、7×10⁹CFU、8×10⁹CFU、9×10⁹CFU、1×10¹⁰CFU、2×10¹⁰CFU、3×10¹⁰CFU、4×10¹⁰CFU、5×10¹⁰ CFU、6×10¹⁰CFU、7×10¹⁰CFU、8×10¹⁰CFU、9×10¹⁰CFU、1×10¹¹CFU、2×10¹¹CFU、3×10¹¹CFU、4×10¹¹CFU、5×10¹¹CFU、6×10¹¹CFU、7×10¹¹CFU、8×10¹¹CFU和9×10¹¹CFU，但不限於此。

在本揭露的一個實施例中，該組成物投予至個體至少1週、至少2週、至少3週、至少4週、至少5週或至少6週。在另一個實施例中，該組成物投予至個體至少1個月、至少2個月、至少3個月、至少4個月、至少5個月或至少6個月。

在本揭露的一個實施例中，用於預防或治療雷特氏症的方法包括在認知、視知覺、精細運動、接受性語言、表達性語言、語言年齡、非語言年齡和整體精神年齡中的至少一者的改善。在另一個實施例中，以穆倫早期學習量表(Mullen Scales of Early Learning)評估認知狀態。

在本揭露的另一個實施例中，該預防或治療雷特氏症的方法包括肌張力不全的改善。在另一個實施例中，以范馬氏登評分量表(Fahn-Marsden Rating Scale)評估肌張力不全的改善。在另一個實施例中，用於預防或治療雷特氏症的方法包括改善年齡小於18歲的個體的肌張力不全。

在本揭露的一個實施例中，提供一種預防或治療有其需要的個體中的雷特氏症的方法，該方法包括投予包含有效量的植物乳酸桿菌植物亞種PS128及其載劑的組成物，以減少與雷特氏症相關的一種或多種症狀。在本揭露的一個實施例中，與雷特氏症相關的症狀包括但不限於：行為異常，包括重複的手部動作，例如扭手、拍手、敲擊、搓手和咬手；心理動作呈現，包括共濟失調的步態不穩、過度換氣或呼吸暫停發作和癲癇；以及運動能力惡化或漸進性運動障礙，例如肌肉張力增加、肌肉消瘦、磨牙症、便秘和脊柱側彎。

在本揭露的一個實施例中，該組成物包含植物乳桿菌植物亞種PS128作為用於預防或治療有其需要的個體中的雷特氏症的唯一活性成分。

在本揭露的一個實施例中，該組成物係以口服投予至個體。

在本揭露的一個實施例中，該方法還包括對個體投予額外的治療。在進一步的實施例中，額外的治療選自由癲癇發作治療、逆流治療、呼吸或情緒療法、物理療法和職能療法所組成之群組。

在本揭露的一個實施例中，該組成物是進一步包含藥學上可接受的載劑的醫藥組成物。在本揭露的另一個實施例中，藥學上可接受的載劑可以是生理上可接受的賦形劑或稀釋劑。在本揭露的又一實施例中，生理上可接受的賦形劑或稀釋劑的實例包括，但不限於：乳糖、澱粉、糊精、環糊精、羧甲基澱粉鈉、羧化澱粉丙酸酯、微晶纖維素、羧甲基纖維素、麥芽糖糊精和硬脂酸鎂。

在本揭露的一個實施例中，提供包含有效量的植物乳酸桿菌植物亞種PS128及其載劑的組成物，用於預防或治療有其需要的個體中的雷特氏症。

圖1顯示肌張力不全評估之最終評估與基線之間的差異，該評估係針對益生菌組和安慰劑組的18歲以下的雷特氏症個體並使用范馬氏登評分量表進行的評估。

以下實施例用於舉例說明本揭露。根據本揭露的說明書，本技術領域中具有通常知識者可以想到本揭露的其他優點。本揭露也可以如不同的實 施例中所描述的而實現或應用。在不背離本揭露精神和範圍下，可以修飾和/或改變實施本揭露的實例，以用於不同方面和應用。

本文中使用的所有術語，包括描述性或技術性術語，應被解釋為對本技術領域中具有通常知識者具有顯而易見的含義。然而，根據本技術領域中具有通常知識者的意圖、先前案例或新技術的出現，這些術語可以具有不同的含義。另外，在本揭露中可以任意選擇一些術語，在這種情況下，所選擇的術語的含義將在本揭露的實施方式中詳細描述。因此，須基於術語的含義以及整個說明書中的描述來定義本文中使用的術語。

此外，當一個部分「包括」或「包含」成分或步驟時，除非有與之相反的特定描述，否則該部分可以進一步包括其他成分或其他步驟，而不排除其他成分或步驟。

還應注意的是，如在本說明書中所使用的，單數形式「一個」、「一種」和「該」除非明確地和無疑義地限於一個指示物，否則包括複數個指示物。除非上下文另外明確指出，否則術語「或」與術語「和/或」可互換使用。

「有效量」一詞是指導致減少、抑制或預防個體的行為障礙、異常或症狀所需的活性成分的量。如本技術領域中具有通常知識者所理解的，根據投予途徑、賦形劑的使用以及與其他治療方法共同使用的可能性，有效量將有所變化。

如本文所使用，術語「個人」可與「個體」互換，並且包括可能發生神經發育障礙的單個生物體，包括但不限於動物，尤其是脊椎動物，例如哺乳動物，特別是人類。

如本文所使用，術語「狀況」、「病症」或「症狀」是指患有雷特氏症的個體所呈現的心理動作或神經症狀。

術語「需要治療的個體」是指呈現或患有與雷特氏症有關的一種或多種症狀的人。合適的合格人員或醫師能夠使用標準行為測試程序或指南來識別需要治療的此類個體。相同的行為測試程序或指南也可用於決定個體的疾病或症狀是否有所改善，或決定要向需要治療的個體投予的乳酸菌的最有效劑量。

如本文所使用，術語「改善」是指在診斷為雷特氏症的個體中，預防或減少其所呈現的一種或多種症狀或異常的嚴重性或頻率，改善可以由接受治療的個體本身或另一個人觀察得到。

使用不同的實施例來說明本揭露。以下實施例不應被視為對本揭露內容範圍的限制。

實施例

本揭露檢驗植物乳酸桿菌植物亞種PS128治療雷特氏症的效果。

實施例1：補充PS128對雷特氏症個體的認知能力改善

於本實施例中，進行了一項前瞻性的隨機、雙盲、使用安慰劑對照組的試驗，入選標準為年齡在1至50歲之間，被診斷患有RTT和MECP2突變的個體。排除標準是在加入試驗前四週食用抗生素、優格或益生菌產品。在研究期間，參與者必須避免食用優格或益生菌產品，但允許他們繼續常規藥物治療。但是，在研究期間經處方指示使用抗生素的人被排除在外。

共有36名年齡為1至35歲的雷特氏症和MECP2突變的個體參加這項研究。根據2次的分層塊狀排列隨機分派(Random permuted Blocks within Strata)，將他們隨機分配為接受安慰劑或PS128，PS128組和安慰劑組的比例為1：1。醫師、研究人員和個體對組分配不知情。安慰劑使用與PS128完全相同的膠囊、包裝、標籤和投予時間表，以隱藏所使用的補充劑類別。

植物乳酸桿菌植物亞種PS128經單離，並以DSMZ登錄號DSM 28632(Bened Biomedical Co.,Ltd.)保藏。PS128產品以包含乳白色粉末的膠囊的最終形式提供。益生菌膠囊重425±25mg，每粒PS128膠囊含有3×10¹⁰CFU，並以微晶纖維素為載劑。安慰劑膠囊僅包含微晶纖維素。所有膠囊的味道和外觀均相同，保存於冷藏溫度(4至8℃)中。每天間隔12小時，分別向治療組和安慰劑組的參與者口服投予1粒膠囊PS128或安慰劑。

36名患者中的1名無法完成研究，而35名患者完成了研究。安慰劑組有17例，益生菌PS128則有18例。兩組患者的年齡或突變類型無差異。下表1顯示基線時個體的人口統計資訊和臨床特徵。

表1、基線人口統計資訊和臨床特徵

安慰劑組和益生菌組之間的基因型差異使用卡方/費氏精確檢定法進行分析，以t檢驗評估年齡之間的差異。雷特氏症嚴重度量表(RSSS)用於評估臨床嚴重程度，RSSS由先前研究中所述的七個參數組成(Chin Wong L、Hung PL、Jan TY、Lee WT。雷特氏症個體中的刻板舉動的變化：台灣的全國性橫斷面研究。Autism research：Official Journal of the International Society for Autism Research,2017,10：1204-1214)。由父母完成的焦慮、抑鬱和情緒量表(ADAMS)和社交互動篩查(SSI)用於記錄當前與自閉症相關的行為。ADAMS用於審視智力低下者的焦慮、抑鬱和情緒障礙。已經確定了30到60個月大的患者的SSI總分和百分位得分的可靠性和有效性。進行早期的社會溝通量表(ESCS)來測量指稱性(protodeclarative)和祈使性(protoimperative)聯合注意力行為。為了進行胃腸道評估，在基線和研究結束時測量糞便特徵和便秘。

為了評估參與者的認知狀態，採用了穆倫早期學習量表(MSEL)和文蘭適應行為量表(VABS)，在研究開始(基線)和研究結束時取得測量值。專門研究兒童心理學的檢測員擔任MSEL的評分人員。MSEL包含5個子量表：視知覺、表達性語言、接受性語言、大肌肉動作、和精細動作。它是針對0到68個月大的孩子的全面性標準參照發育測試。由於此研究招募的女孩年齡超出本測試的預定年齡範圍，因此，其表現均以等同的年齡報告。非語言心智年齡是對視知覺和精細動作量表的等同年齡進行平均，語言心智年齡為接受性語言量表和表達性語言量表的平均等同年齡。使用父母完成的VABS測量每日適應功能。使用迴歸分析以決定兩次就診之間的治療效果。使用多變項分析控制潛在干擾因子的影響。統計顯著性定義為P值<0.05。

結果發現，以多變項迴歸分析模型進行估計，以基線心理年齡和年齡進行調整之後，與安慰劑組相比，益生菌組在4個月後複診時的整體心理年齡顯著增加了0.77個月(如下表2所示)。與安慰劑組相比，益生菌組複診時的語言和非語言年齡也有所增加(分別為p=0.47和p=0.13)。

針對MSEL個別子量表數值進行分析，以基線和年齡進行調整之後，與安慰劑組相比，益生菌組複診時的視知覺(p=0.069)、精細動作(p=0.36)、表達語言(p=0.75)和接受語言(p=0.67)也有所增加。

表2、穆倫早期學習量表(MSEL)之整體心智年齡迴歸分析

實施例2：補充PS128對個體的肌張力不全明顯改善

此研究亦評估實施例1中受試者的肌張力不全。兩名小兒神經科醫生使用范馬氏登肌張力不全評分量表和肌張力不全統一評分量表對肌張力不全進行評估，分數越高表示肌張力不全越嚴重。在研究開始時的基線和研究結束時取得測量值。使用迴歸分析決定兩次就診之間的治療效果，並使用多變項分析控制潛在干擾因子的影響。統計顯著性定義為P值<0.05。

以多變項迴歸分析模型估計與4個月後複診時針對范馬氏登肌張力不全評分量表(F-M)評分之間的相關性，以基線分數和年齡進行調整之後，與安慰劑組相比，益生菌組的范馬氏登肌張力不全評定量表(FM)明顯降低了8.78分(如下表3所示)。

表3、范馬氏登肌張力不全評分量表迴歸分析

實施例3：補充PS128對個體的肌張力不全和認知能力顯著改善

進行為期16週的前瞻性雙盲隨機對照研究，以確定益生菌植物乳桿菌(PS128)對雷特氏症的核心臨床特徵的影響。招募具有雷特氏症臨床診斷的患者，排除標準為研究前4週或研究期間服用益生菌或益生菌相關產品的人、在研究前4週服用抗生素的人、對研究的任何方面服從性差的人、以及對PS128有不良反應的人。

共有34位年齡在1.8至35.8歲之間的MECP2突變患者完成了為期4個月的試驗。根據2次的分層塊狀排列隨機分派，將這些個體以1：1的比例隨機分配為接受安慰劑或PS128治療。醫師、研究人員和個體對組別分配不知情。

使用范馬氏登肌張力不全評分量表和肌張力不全統一評分量表評估肌張力不全狀態。使用穆倫早期學習量表(MSEL)、文蘭適應行為量表(VABS)和早期社會溝通量表(ESCS)獲得認知數據。使用雷特氏症嚴重度量表評估PS128對臨床嚴重程度的影響。糞便特徵通過修改後的布里斯托爾糞便圖表(Bristol stool chart)進行評估。統計分析方法使用的是獨立的t檢驗，用於分析每個參數的最終評估值和基線評估值之間的差異。

在研究結束時，發現所有個體都對益生菌PS128耐受良好。補充益生菌後，如圖1所示，在具有MECP2突變且年齡低於18歲的個體中，肌張力不全有統計學上的顯著改善(p=0.027)。

此外，對於以MSEL進行的認知能力評估，在安慰劑組中觀察到退化，特別是在視知覺、精細動作和表達性語言方面。然而，在益生菌組中未觀察到這種退化。相對地，與安慰劑組相比，益生菌組在視知覺、接受性語言、精細動作和表達性語言方面得分有進步。下面的表4和表5顯示在安慰劑組和益生菌組之間，使用獨立t檢驗在年齡<18歲和≧18歲的雷特氏症患者中所進行的每個參數的最終評估和基線之間的差異。

表4、使用獨立t檢驗年齡18歲以下的雷特氏症患者之每個參數的最終評估和基線之間的差異

表5、使用獨立t檢驗年齡18歲以上的雷特氏症患者之每個參數的最終評估和基線之間的差異

上述對具體實施例的描述僅是為了說明本揭露的原理和功能，並不用於限制本揭露的範圍。本技術領域中具有通常知識者應理解，根據本揭露原理的所有修飾和改變均應落入所附的申請專利範圍內。說明書和實施例旨在作為示例，本揭露的實際範圍應由所附的申請專利範圍所示。

Claims (12)

1. 一種包含植物乳酸桿菌植物亞種PS128及其載劑的組成物用於製備預防或治療雷特氏症的藥物的用途，其中，該雷特氏症的預防或治療係肌張力不全的改善。
2. 如請求項1所述之用途，其中，該雷特氏症的預防或治療進一步包括在認知、視知覺、精細運動、接受性語言、表達性語言、語言年齡、非語言年齡和整體精神年齡中至少一者的改善。
3. 如請求項2所述之用途，其中，該認知的改善係以穆倫早期學習量表評估。
4. 如請求項1所述之用途，其中，該雷特氏症的預防或治療係用於年齡小於18歲之個體。
5. 如請求項1所述之用途，其中，該肌張力不全的改善係以范馬氏登評分量表評估。
6. 如請求項1所述之的用途，其中，該雷特氏症的預防或治療包括減少與該雷特氏症相關的一種或多種症狀。
7. 如請求項6所述之用途，其中，該與雷特氏症相關的症狀包括行為異常、重複的手部動作、心理動作呈現、運動能力惡化或漸進性運動障礙。
8. 如請求項6所述之用途，其中，該組成物包含以植物乳桿菌植物亞種PS128作為用於減少與該雷特氏症相關的一種或多種症狀的唯一活性成分。
9. 如請求項1所述之用途，其中，該組成物以口服投予該個體。
10. 如請求項1所述之用途，其中，該組成物係一種醫藥組成物，以及該載劑係藥學上可接受的載劑。
11. 如請求項1所述之用途，其中，該組成物包含至少1×10⁹CFU的植物乳酸桿菌植物亞種PS128。
12. 如請求項1所述之用途，其中，該組成物投予該個體至少1週。

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