TWI745016B - 用於治療乳癌的藥物組成物及其製造方法 - Google Patents

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Abstract

本發明係關於一種用於治療乳癌的藥物組成物及其製造方法，係利用羧甲基-己醯基幾丁聚醣包封熱休克蛋白90（Heat Shock Protein, HSP90）抑制劑以及疏水性藥物，使該些藥物可以共同遞送至乳癌細胞，以達到協同效應來毒殺乳癌細胞。

Description

用於治療乳癌的藥物組成物及其製造方法
本發明係關於一種藥物組成物及其製造方法，具體而言，本發明係藉由奈米載體包覆藥物組合以用於治療乳癌的藥物組成物及其製造方法。
乳癌在女性中是最常見的癌症，也是女性繼肺癌之後的第二大癌症死亡原因。乳癌死亡的主要原因是其轉移性，儘管目前的療法已大大延長了患者的壽命，但由於疾病的復發，仍有30％至40％的患者死於該疾病。乳癌不是單一疾病，它包括不同的病理特徵和臨床意義。越來越多的證據表明，具有不同組織病理學和生物學特性的新陳代謝表現出不同的行為，應採用不同的治療策略。因此，將乳癌正確分類為臨床相關亞型，對於治療策略尤為重要。
乳癌以病理分類，一般可分類為乳管原位癌（breast ductal carcinoma），約佔90％，其次是乳小葉原位癌（breast lobular carcinoma），約佔5％，其他病理學分類很少見。但是，乳癌最重要的分類是根據其生物學特徵區分乳癌細胞，這種差異最初是通過大量乳癌細胞的基因表達發現的，分為五種亞型：管腔細胞A型（luminal A）、管腔細胞B型（luminal B）、HER2過表達型（HER2 over-expression）、基底（basal）和正常腫瘤（normal-like tumors）。
特別是人類表皮生長因子受體 2（HER2）過表達型，約佔乳癌的 20％至 30％， 具有高的複發率與死亡率，HER2 過表達轉移性乳癌的主要治療方法是化療聯合靶向治療， 但是多重耐藥性（Multidrug resistance, MDR）仍然是化學療法成功的最大障礙。因此，需要一種可以降低多重耐藥性作用以治療乳癌的藥物。
本發明之目的係為利用自組裝的奈米載體包覆複數種不同特性的藥物，以減少藥物使用濃度，降低藥物引起的副作用，且使該些藥物可以共同遞送至乳癌細胞，以達到協同效應來毒殺乳癌細胞。
為達上述目的，本發明提供一種用於治療乳癌的藥物組成物，其包括：一奈米載體，係由羧甲基-己醯基幾丁聚醣（Carboxymethyl-Hexanoyl Chitosan, CHC）組裝而成；至少一種熱休克蛋白90（Heat Shock Protein, HSP90）抑制劑；以及至少一種疏水性藥物；其中，該熱休克蛋白90抑制劑及該疏水性藥物係包埋於該奈米載體中；其中，該熱休克蛋白90抑制劑包括加利特皮（ganetespib），該疏水性藥物包括薑黃素（curcumin）。
於一實施例中，該藥物組成物係為複數粒子，該複數粒子之粒徑大小係於200nm至500nm範圍。
於一實施例中，該藥物組成物之表面連接有一標靶物質。
於一實施例中，該標靶物質包括曲妥珠單抗（Trastuzumab）。
於一實施例中，該乳癌係為HER2過表達型乳癌。
另，本發明亦提供製造用於治療乳癌的藥物組成物的方法，包括：將羧甲基-己醯基幾丁聚醣、至少一種熱休克蛋白90抑制劑與至少一種疏水性藥物分散於溶劑中，形成一混合溶液；以及將該混合溶液置於低溫中攪拌20~24小時，以形成該藥物組成物；其中，該藥物組成物之該熱休克蛋白90抑制劑及該疏水性藥物係包埋於該羧甲基-己醯基幾丁聚醣所組裝而成的奈米載體中；其中，該熱休克蛋白90抑制劑包括加利特皮，該疏水性藥物包括薑黃素。
於一實施例中，該加利特皮與薑黃素之濃度比例包括1:200、1:300、1:400或1:500μg/mL。
於一實施例中，包括使用一交聯劑連接一標靶物質於該藥物組成物之表面。
於一實施例中，其中該標靶物質包括曲妥珠單抗。
於一實施例中，其中該曲妥珠單抗之濃度包括1μg/mL、2μg/mL或3μg/mL。
以下根據第1圖至第6C圖說明本發明的實施方式。該圖式以及說明僅為輔助理解本發明，而為本發明之實施例的一種，並非為限制本發明的實施方式。
首先，本發明係提供一種用於治療乳癌的藥物組成物，其包括：一奈米載體，係由羧甲基-己醯基幾丁聚醣（Carboxymethyl-Hexanoyl Chitosan, CHC）組裝而成；至少一種熱休克蛋白90（Heat Shock Protein, HSP90）抑制劑；以及至少一種疏水性藥物；其中，該熱休克蛋白90抑制劑及該疏水性藥物係包埋於該奈米載體中。而本發明另提供一種製造用於治療乳癌的藥物組成物的方法，包括：將羧甲基-己醯基幾丁聚醣、至少一種熱休克蛋白90抑制劑與至少一種疏水性藥物分散於溶劑中，形成一混合溶液；以及將該混合溶液置於低溫中攪拌20~24小時，以形成該藥物組成物；其中，該藥物組成物之該熱休克蛋白90抑制劑及該疏水性藥物係包埋於該羧甲基-己醯基幾丁聚醣所組裝而成的奈米載體中。於一實施例中，該藥物組成物係為複數粒子，該複數粒子之粒徑大小係於200nm至500nm範圍。
以下詳細說明本發明實施例所使用之材料及配置方式：
羧甲基-己醯基幾丁聚醣（Amphiphilic carboxymethyl-hexanoyl chitosan, CHC）：
藉由修飾幾丁聚醣（chitosan）以形成兩親性的幾丁聚醣，該兩親性幾丁聚醣由親水性羧甲基取代基和疏水性己醯基取代基合成，化學結構如第1圖所示。這種兩親性特徵使CHC能夠自組裝成奈米載體，其親水部分形成外殼，而疏水部分形成核心，可以增加疏水性藥物的溶解度，並部分保護藥物免受環境損害。 根據增強性滲透和保留效應（EPR），CHC奈米載體的顆粒大小可以穿過內皮細胞之間的間隙（大小為200nm～1.2μm），並引導奈米載體在腫瘤組織中的積累。 此外，CHC分子鏈上的羧基可用抗體或蛋白質修飾，以提供CHC奈米顆粒的靶向特性，從而使它們靶向癌細胞進行治療。 最重要的是CHC自組裝奈米載體是可生物降解的。CHC具有適當大小可以避免腎臟清除，並且可以被溶菌酶降解。
其合成方法如下：
將10g幾丁聚醣（購自CHARMING & BEAUTY Inc.）置於瓶中，加入100mL異丙醇，並於25℃下攪拌30分鐘。將25mL的13.3 N氫氧化鈉水溶液分成5等分，每5分鐘加到該瓶中。攪拌30分鐘後，在5分鐘內等分5次將50g氯乙酸（chloroacetic acid）加入該瓶中，並加熱至60℃達4小時。之後透過1000mL水/甲醇（1∶9, v/v）真空過濾純化以收集產物。 將產物放入50°C的烤箱中，乾燥24小時，得到白色N,O-羧甲基幾丁聚醣（N,O-carboxymethyl chitosan, NOCC）粉末。取4g的NOCC於250mL反應瓶中，添加100mL純水（ddH 2O）完全攪拌溶解一天。加入100mL甲醇混合均勻後，再加入2.8mL的己酸酐（hexanoyl anhydride）於25℃下反應12小時。反應完的溶液以透析帶收集，先以純水比乙醇（1∶4, v/v）透析一天後，再以純乙醇透析一天。將產物收集後於50℃下烘乾，獲得CHC粉末。
於一實施例中，本發明之熱休克蛋白90抑制劑包括加利特皮（ganetespib），疏水性藥物包括薑黃素（curcumin），詳細說明如下：
加利特皮（ganetespib）：
第二代新型熱休克蛋白90（heat shock protein 90, HSP90）抑制劑，用於治療非小細胞肺癌、乳癌和前列腺癌。HSP90是一種分子伴侶蛋白，可以通過泛素化途徑（例如折疊、成熟和穩定化）調節蛋白質（EGFR、HER2、CDK4…）的功能，它在腫瘤細胞中過表達，以維持腫瘤細胞的生長、增殖、抗凋亡和轉移。加利特皮是一種間苯二酚化合物（resorcinol compound），可以競爭性地結合HSP90的N端ATP結合域，且其缺少苯醌環（benzoquinone ring）結構，因此其劑量依賴性肝毒性低。而在體外和體內實驗，加利特皮在各種惡性腫瘤中均顯示出有效且持續的抗腫瘤作用，除了在非小細胞肺癌的治療中特別常見外，許多實驗亦證明乳癌中的HER2過表達（HER2 +）腫瘤對HSP90抑製劑更為敏感。此外，還發現HSP90抑製劑的多效性也可能為三陰性乳腺癌（TNBC）的治療提供巨大潛力。
薑黃素（curcumin）：
為從薑黃根莖中提取的多酚化合物。 薑黃素是無毒的，具有多種治療特性，包括抗氧化劑、抗病毒藥、抗炎藥和抗癌藥。薑黃素在多種癌症中具有抗增殖作用，是轉錄因子NF-κB和下游基因產物（包括ct-myc、Bcl-2、COX-2、NOS、細胞週期蛋白D1、TNF-α、介白素和MMP-9）的抑製劑。在乳癌細胞的增殖中，NF-κB可以調節500多種不同的基因，並控制參與細胞信號通路的蛋白質的表達，從而導致癌症和發炎，而薑黃素可透過負調控NF-κB誘導的基因來影響乳癌細胞增殖和侵襲的能力，並且是影響乳腺癌細胞增殖中人表皮生長因子受體2（HER2）的另一個靶標。薑黃素可透過抑制HER2-TK以抑制乳腺癌細胞。惟，儘管薑黃素在治療癌症方面有良好的前景，但由於其生物利用度不足和低水溶性，而使其臨床發展受到限制，且薑黃素進入人體後會迅速代謝。薑黃素的水溶性很低，尤其是在酸性和中性pH下，它可以在鹼性pH值下溶解，但會在鹼性環境中迅速分解，半衰期為幾分鐘，而且，薑黃素在有機溶劑中會發生光降解，這些性質限制了薑黃素的生物利用度。再者，薑黃素具有副作用，例如噁心、腹瀉、頭痛和大便發黃。
為了測試本發明於一實施例之藥物組成物中，包覆有上述兩種不同藥物特性的效果，本發明分別配置以羧甲基-己醯基幾丁聚醣包埋有加利特皮的藥物組成物（CHC/GAN）、以羧甲基-己醯基幾丁聚醣包埋有薑黃素的藥物組成物（CHC/CCM）以及以羧甲基-己醯基幾丁聚醣包埋有加利特皮與薑黃素的藥物組成物（CHC/ GAN-CCM）進行後續實驗，說明如下：
配置CHC/GAN 及CHC/CCM藥物組成物：
將5mg的加利特皮（GAN）溶於250μL DMSO以製備20mg/mL儲備液，並分別稀釋至1mg/mL和100μg/mL。GAN儲備液儲存在-80°C的冰箱中。溶解100mg薑黃素（CCM）以製備5 mg/mL CCM儲備液。透過將50μLGAN（在DMSO中為1mg/mL）和10％ 400-PEG在1mL ddH2O中與0.5mg CHC粉末混合來製備CHC/GAN藥物組成物。透過將80μL CCM（在DMSO中為5 mg/mL）和10％ 400-PEG在1mL ddH 2O中與0.5mg CHC粉末混合來製備CHC/CCM藥物組成物。在暗室中用磁力攪拌器將所有溶液在4°C下攪拌24小時，以使其自組裝成載有藥物的藥物組成物。
配置CHC/GAN-CCM藥物組成物：
為了找到兩種藥物的理想濃度比，將配置四種不同濃度的GAN、CCM比例（GAN：CCM = 1：200、1：300、1：400、1：500），並進行體外細胞毒性試驗。配置方法係藉由在1mL ddH 2O中混合10μL GAN（100μg/ mL），40、60、80、100μL CCM（5mg/mL的DMSO）和10％400-PEG製備CHC/GAN-CCM藥物組成物。在暗室中用磁力攪拌器在4℃下將所得溶液攪拌20~24小時，以使其自組裝成載有藥物的藥物組成物。
於一實施例中，該藥物組成物之表面連接有一標靶物質，該標靶物質係選自抗體、胜肽及蛋白質所組成群組之至少一者。
於一實施例中，該抗體包括曲妥珠單抗（Trastuzumab），曲妥珠單抗是一種重組單珠抗體，可作用於人類表皮生長因子受體II（HEP-2），並且是美國食品藥品監督管理局（FDA）批准的首個乳癌HER-2標靶治療的藥物。
以曲妥珠單抗修飾奈米組成物：
首先製備CHC/GAN-CCM奈米組成物，然後於溶液中加入1μL、2μL、3μL曲妥珠單抗（在ddH 2O中為1mg/mL），並在4°C攪拌1小時。隨後，添加50μL EDC交聯劑溶液（在ddH 2O中為1mg/mL），並在4°C攪拌4小時以形成醯胺鍵（amide bond）。
本發明以加利特皮及薑黃素分別作為熱休克蛋白90抑制劑及疏水性藥物、曲妥珠單抗作為標靶物質為一實施例進行實驗，結果說明如下：
藥物包覆率（encapsulation efficiency, EE）：1. 檢量線：先配置各種濃度之加利特皮及薑黃素，以甲醇稀釋後再各別測其在299nm及435nm之吸收強度，將其結果與濃度製圖得一濃度與吸收強度之檢量線。2. 包藥測定：將攪拌20~24小時之溶液以10,000rpms、10min、4℃離心後，取上清液使用甲醇稀釋並測其吸光值，再將數值帶回檢量線中即可得知未包覆的濃度，再代入以下公式獲得包藥率。
Figure 02_image001
結果如下表1及表2所示，其中加利特皮在CHC/GAN、CHC/GAN-CCM及CHC/GAN-CCM@trastuzumab之包藥率分別為62.2%、37.0%、27.8%，薑黃素在CHC/GAN、CHC/GAN-CCM及CHC/GAN-CCM @trastuzumab之包藥率分別為81.0%、77.6%、73.5%。由於在雙藥藥物組成物中使用的加利特皮濃度低於單藥，因此其在CHC/GAN-CCM中的包藥率顯著降低。在CHC的自組裝過程中，親水區域將形成外殼，而疏水部分形成核心，由於薑黃素的高疏水性，單藥和雙藥包覆均表現出高包覆效率。
樣品名稱 包藥率 STDEV 濃度
CHC/GAN 62.2% 4.63% 50μg/mL
CHC/GAN-CCM 37.0% 3.64% 1μg/mL
CHC/GAN-CCM@trastuzumab 27.8% 4.17% 1μg/mL
表1：加利特皮在CHC/GAN、CHC/GAN-CCM及CHC/GAN-CCM@trastuzumab之包藥率
樣品名稱 包藥率 STDEV 濃度
CHC/CCM 81.0% 2.52% 400µg/mL
CHC/ GAN-CCM 77.6% 4.76% 300µg/mL
CHC/ GAN-CCM @ trastuzumab 73.5% 1.22% 300  µg/mL
表2：薑黃素在CHC/GAN、CHC/GAN-CCM及CHC/GAN-CCM@trastuzumab之包藥率
本發明以動態光散射（DLS）及Zeta電位（zeta potential）測量該些藥物組成物之粒徑及表面電位，結果列於下表3。由DLS可以發現CHC載體包覆藥物後以及嫁接上抗體後，藥物組成物的粒徑大小相對提高，藉此印證抗體是成功接在藥物組成物表面，且經由zeta potential測得其表面電位，可發現在水溶液中，經CHC包覆之藥物組成物表面電荷皆帶正電。
樣品名稱 粒徑大小（nm） Zeta電位（mV）
CHC 238.8±5.86 24.26±0.48
CHC/GAN 286.6±1.51 24.03±0.31
CHC/CCM 366.8±7.28 21.14±0.41
CHC/GAN-CCM 418.3±5.34 20.82±0.80
CHC/GAN-CCM@trastuzumab 504.2±11.28 18.17±0.50
表3：粒徑及表面電位測量結果
本發明以掃描式電子顯微鏡（SEM）及穿透式電子顯微鏡（TEM）觀測該些藥物組成物之形態，其照片呈現於第2圖。其中A為未包覆藥物之CHC奈米載體之SEM下的形態；B為包覆加利特皮之CHC/GAN藥物組成物之SEM下的形態；C為包覆薑黃素之CHC/CCM藥物組成物之SEM下的形態；D為包覆加利特皮及薑黃素之CHC/GAN-CCM藥物組成物之SEM下的形態；E為包覆加利特皮及薑黃素並嫁接抗體之藥物組成物之SEM下的形態；F為包覆加利特皮及薑黃素之CHC/GAN-CCM藥物組成物之TEM下的形態。
藥物釋放：
CHC/GAN及CHC/CCM於pH7.4的PBS緩衝液中，在37℃下量測168小時的加利特皮及薑黃素釋放結果如第3圖所示，其中第3A及3B圖為加利特皮的釋放結果、第3C及3D圖為薑黃素的釋放結果。對於游離態的加利特皮，透析袋的釋放在8小時後停止，釋放量大約73％，與游離態的加利特皮相比，CHC/GAN奈米組成物的加利特皮釋放長達12個小時，累積釋放的藥物量為80％，如第3B圖中箭頭所指，在CHC包覆後測得較慢的釋放速率和較高的藥物含量，這是由於CHC保護了加利特皮免受環境破壞並使其緩慢釋放。對於游離薑黃素，即使時間已達到168小時，透析袋的擴散也已連續釋放，擴散含量約為8％，低釋放含量的原因是薑黃素的水溶性低，並且薑黃素由於其不良的溶解性而具有較低的生物利用度。CHC/CCM中薑黃素的釋放與游離薑黃素的釋放沒有太大不同，其擴散含量約為9％，略高於游離藥物。但是，從圖中仍然可以看出，兩者之間的差距也隨著時間而增加。
細胞毒性測試：
將SK-BR-3細胞培養於24孔細胞培養盤中，SK-BR-3細胞每孔有10 4細胞。細胞黏附在培養盤20~24小時後，除去培養液並用PBS沖洗細胞。 之後，將GAN、CCM、CHC/GAN、CHC/CCM、CHC/GAN-CCM等藥物組成物以DMEM稀釋並加入細胞中共同培養48小時。然後，移除DMEM，並用PBS沖洗。最後，將MTS和DMEM（1：5，v/v）添加到細胞培養盤的各孔中，培養2~4小時。利用微量盤式分析儀測量490nm波長的吸光度來估計細胞存活率。細胞存活率可用於確定藥物的半抑制濃度（IC 50）和雙藥物的合併指數（Combination Index, CI）。結果如下表4，CHC/GAN和CHC/CCM均比其游離藥物形式更有效地殺死細胞，表示CHC奈米載體在藥物輸送方面提供了更有效的效果，因此，CHC藥物奈米粒子可以以更低的劑量更有效地對抗乳癌，尤其是對於加利特皮而言，當其被CHC奈米載體攜帶時，其治療效力可以提高60-70倍。此結果表示此藥物載體比游離藥物形式更具細胞毒性，同時也代表藥物的濃度可以比原來使用的還低，進而降低其毒性引發的副作用。
藥物 IC 50
GAN CHC/GAN CCM CHC/CCM 1.88ng/mL 0.028ng/mL 12.02µg/mL 8.29µg/mL
表4：用加利特皮或薑黃素分別作為游離藥物或CHC藥物組成物作用於SK-BR-3細胞的IC 50。
所謂協同作用是指，當以一定比例的劑量使用時，兩種具有不同作用機理的藥物可以互補以提高療效。本發明分析了四種不同比例（GAN：CCM = 1：200、1：300、1：400、1：500）的游離藥物組合以及共同被包覆在CHC奈米載體中的樣本。根據Chou-Talalay的理論，當CI小於1時，兩種藥物將具有協同作用；當CI等於或大於1時，將具有加成和拮抗作用。合併指數（CI）與受影響的比例（fraction affected, FA）之間的相關關係如第4A及4B圖所示。較高的受影響的比例（FA）意味著較低的細胞存活率。游離的雙重藥物具有較低的FA，並且大多數具有拮抗作用。但是，包覆雙重藥物的CHC藥物組成物顯示出協同作用和較高的FA，尤其是對於1：300 CHC/GAN-CCM藥物組成物的比例。如第4B圖所示，1：300將是協同治療的較佳實施例。
根據以上計算CI值的測試結果，採用GAN和CCM以1：300比例的實施例，將CHC/GAN-CCM表面使用EDC交聯劑對曲妥珠單抗進行修飾。 用於表面修飾的曲妥珠單抗的濃度分別為1、2和3µg/mL。將上述三種濃度的CHC/GAN-CCM@曲妥珠單抗和CHC/GAN-CCM用於處理SK-BR-3細胞48小時，計算細胞存活率以比較它們的治療效果。如第5圖所示，經過曲妥珠單抗修飾的奈米組成物優於未經修飾的奈米組成物，其中使用3µg/mL曲妥珠單抗顯示出最大的細胞毒性作用，尤其是在較高的GAN / CCM濃度下。
動物實驗：
將20隻7周大的Balb/c雌性裸鼠分為五組，並將1×10 7SK-BR-3細胞（100μL，在PBS中為10 8細胞/mL）注射到小鼠的右側腹。腫瘤體積以公式計算：𝑉=（𝐿×𝑊×𝐻）⁄2，其中L =長度（最長尺寸）、W =寬度（垂直於長度且在與該長度相同的平面中的距離）、H=高度（腫瘤外部邊緣與小鼠身體之間的距離）。在腫瘤體積達到約70~80mm 3後，分別用PBS（對照組）、游離的加利特皮、游離的薑黃素、游離的GAN-CCM組合、CHC / GAN-CCM @曲妥珠單抗處理五組小鼠。通過每週一次的尾靜脈注射持續2週，每次注射量為100mL/20 kg。加利特皮和薑黃素的劑量分別為0.1mg/kg和30mg/kg（加利特皮和薑黃素的比例為1：300），並使用0.5wt％的CHC，曲妥珠單抗濃度為3µg/mL。第一次給藥後，每週兩次測量小鼠的體重和腫瘤大小。
如第6A圖所示，所有小鼠的體重增加都保持在20克以上，並且在治療過程中生理狀態保持正常，這表明劑量（加利特皮：0.1mg/kg，薑黃素：30mg/kg）是合適的抗腫瘤藥且全身毒性低。如第6B圖所示，所有藥物治療組的腫瘤均小於2000mm 3，而對照組（PBS）的腫瘤大小約為2300mm 3，表示加利特皮和薑黃素在體內可有效抑制腫瘤的生長。另外，基於對照組，腫瘤抑制率如第6C圖中，所有組的腫瘤抑制率均高於20％，特別是用CHC/GAN-CCM@曲妥珠單抗藥物組成物治療的小鼠，顯示出最高的腫瘤抑制率（高達31.8％）。因此，本發明於採用抗體修飾的實施例不僅提供了靶向性，而且還以特定的藥物濃度比實現了對抗惡性乳癌的協同功效。
綜上所述，本發明提供之兩親性羧甲基-己醯基幾丁聚醣（CHC）自組裝奈米載體具有生物相容性和低毒性。體外實驗SK-BR-3乳癌細胞的IC 50遠低於游離藥物的IC 50，顯示該藥物的濃度可以低於其相應的游離形式，從而減少了藥物引起的副作用，且特定的雙重藥物比例顯示於體外和體內試驗具有協同作用，避免多重抗藥性的產生。另外，CHC不僅可以增加疏水性藥物（如薑黃素）的溶解度，還可以保護其免受環境降解，從而提高其生物利用度。而且，CHC奈米載體可以用標靶物質（如曲妥珠單抗抗體）進行進一步的表面修飾，並能夠靶向特定的（如具有HER2陽性突變的）癌細胞，使其治療更有效果。
上述實施例為本發明較佳的實施方式，但本發明的實施方式並不受上述實施例的限制，其他的任何未背離本發明的精神實質與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應為等效的置換方式，都包含在本發明的保護範圍之內。
無。
第1圖為本發明之羧甲基-己醯基幾丁聚醣之化學結構圖。 第2圖為以掃描式電子顯微鏡（SEM）及穿透式電子顯微鏡（TEM）觀測各種藥物組成物之形態照片圖。 第3A圖為游離態的加利特皮（Free Ganetespib）及被包埋於羧甲基-己醯基幾丁聚醣奈米載體內的加利特皮（CHC/ Ganetespib）之藥物釋放曲線圖。 第3B圖為擷取第3A圖之0到15小時間之藥物釋放曲線圖。 第3C圖為游離態的薑黃素（Free Curcumin）及被包埋於羧甲基-己醯基幾丁聚醣奈米載體內的薑黃素（CHC/ Curcumin）之藥物釋放曲線圖。 第3D圖為第3C圖之調整累積釋放率數值之藥物釋放曲線圖。 第4A圖為將各種不同比例組合的游離態加利特皮和薑黃素於SK-BR-3細胞處理24小時後的細胞毒性測試結果圖。 第4B圖為將各種不同比例組合的加利特皮和薑黃素包埋於羧甲基-己醯基幾丁聚醣奈米載體內後，對SK-BR-3細胞處理24小時後的細胞毒性測試結果圖。 第5圖為使用不同藥物組成物對SK-BR-3細胞處理48小時後的細胞存活率直條圖。 第6A圖為使用不同藥物或藥物組成物對SK-BR-3細胞異種移植的7週齡雌性Balb/c nu小鼠處理2週的體重變化曲線圖。 第6B圖為使用不同藥物或藥物組成物對SK-BR-3細胞異種移植的7週齡雌性Balb/c nu小鼠處理2週的腫瘤大小變化曲線圖。 第6C圖為使用PBS組的平均腫瘤重量作為對照所計算出的腫瘤抑制率直條圖。
無。

Claims (5)

  1. 一種用於治療乳癌的藥物組成物，其包括：一奈米載體，係由羧甲基-己醯基幾丁聚醣(Carboxymethyl-Hexanoyl Chitosan,CHC)組裝而成；至少一種熱休克蛋白90(Heat Shock Protein,HSP90)抑制劑；以及至少一種疏水性藥物；其中，該熱休克蛋白90抑制劑及該疏水性藥物係包埋於該奈米載體中；其中，該熱休克蛋白90抑制劑包括加利特皮(ganetespib)，該疏水性藥物包括薑黃素(curcumin)；其中，該加利特皮與該薑黃素之濃度比例為1：300；其中，該藥物組成物之表面連接有一標靶物質，該標靶物質包括曲妥珠單抗(Trastuzumab)，該曲妥珠單抗之濃度為3μg/mL。
  2. 如請求項1所述之藥物組成物，其中該藥物組成物係為複數粒子，該複數粒子之粒徑大小係於200nm至500nm範圍。
  3. 如請求項1所述之藥物組成物，其中該乳癌係為HER2過表達型乳癌。
  4. 一種製造用於治療乳癌的藥物組成物的方法，包括：將羧甲基-己醯基幾丁聚醣、至少一種熱休克蛋白90抑制劑與至少一種疏水性藥物分散於溶劑中，形成一混合溶液；以及將該混合溶液置於低溫中攪拌20~24小時，以形成該藥物組成物；其中，該藥物組成物之該熱休克蛋白90抑制劑及該疏水性藥物係包埋於該羧甲基-己醯基幾丁聚醣所組裝而成的奈米載體中；其中，該熱休克蛋白90抑制劑包括加利特皮，該疏水性藥物包括薑黃素；其中，該加利特皮與該薑黃素之濃度比例為1：300； 其中，該藥物組成物之表面連接有一標靶物質，該標靶物質包括曲妥珠單抗(Trastuzumab)，該曲妥珠單抗之濃度為3μg/mL。
  5. 如請求項4所述之方法，包括使用一交聯劑連接該標靶物質於該藥物組成物之表面。
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