TWI717724B - 一種小分子玻尿酸－奈米金材料及製造方法 - Google Patents

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Abstract

本發明係關於一種小分子玻尿酸-奈米金材料之製造方法，其特徵係包含：步驟(1)，將檸檬酸鈉作為還原劑，加入氯金酸水溶液中；步驟(2)，高溫處理得到裸金；步驟(3)，加入玻尿酸，使玻尿酸與前述裸金共軛鍵結，得到小分子玻尿酸-奈米金材料。藉由本發明之製造方法所得小分子玻尿酸-奈米金材料，可發揮保濕、第一型膠原蛋白與第三型膠原蛋白增生及抗自由基之功效。

Description

一種小分子玻尿酸-奈米金材料及製造方法
本發明係關於一種小分子玻尿酸-奈米金材料及製造方法，特別係一種可得到保濕、第一型膠原蛋白與第三型膠原蛋白增生及抗自由基之功效之小分子玻尿酸-奈米金材料及其製造方法。
習知奈米材料係體積極小之材料，可易於進入生物體內，故近年來，於奈米材料之衍生領域中，將金奈米粒子結合生物系統已為熱門之研究方向。目前已有將奈米金用於生物醫學上的檢測、疾病診斷及基因偵測等應用。
根據奈米科技的定義，奈米金之粒徑係控制在1~100nm之間，已知奈米金具有應用於醫學上之潛力，專利文獻1已揭露一種「生物檢測晶片」，其係一種生物檢測晶片適用於檢測一待測液中的抗原，該生物檢測晶片包含一載板，及設於該載板的頂面，且依序連接的樣品墊、結合墊、聚積墊、硝化纖維素膜，及吸收墊。該結合墊包括複數標記抗體，該聚積墊的材質為纖維素，該硝化纖維素膜包括一可於捕捉與該等標記抗體結合的該等抗原後，能顯色的檢測線區。藉由該聚積墊材質的特性，延長該待測液於該聚積墊停留的時間，使該待測液中的抗原與該等標記抗體有較多 的時間結合，進而提升檢測的準確性、靈敏度，及穩定性。
非專利文獻1記載了奈米金可使第一型及第三型膠原蛋白增生，由其圖4B可知，奈米金可使第一型及第三型膠原蛋白增生約1.5倍。
然而，目前已知100nm之金粒子有引發細胞凋亡之可能，如何在不引發細胞凋亡之情形下將奈米金用於改善皮膚仍需進一步研究。
【先前技術文獻】 【專利文獻】
【專利文獻1】台灣專利第I649563號
【非專利文獻】
【非專利文獻1】Gas-injection of gold nanoparticles andanti-oxidants promotes diabetic wound healing
本發明鑑於上述問題，目的在於提供一種小分子玻尿酸-奈米金材料之製造方法及小分子玻尿酸-奈米金材料。
本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料藉由特別之製程，所得之小分子玻尿酸-奈米金材料，可發揮保濕、第一型膠原蛋白與第三型膠原蛋白增生及抗自由基之功效。
本發明經發明人深入研究，發現將奈米金與玻尿酸以特定之製法共軛結合後，所得之小分子玻尿酸-奈米金材料，可發揮保濕、第一型膠原蛋白與第三型膠原蛋白增生及抗自由基之功效。
為了達成前述目的，本發明提供以下技術手段。
〔1〕一種小分子玻尿酸-奈米金材料之製造方法，其特徵係包含：步驟(1)，將檸檬酸鈉作為還原劑，加入氯金酸水溶液中；步驟(2)，高溫處理得到裸金；步驟(3)，加入玻尿酸，使玻尿酸與前述裸金共軛鍵結，得到小分子玻尿酸-奈米金材料。
〔2〕如前項1所記載之製造方法，其中，檸檬酸鈉相對於氯金酸之莫爾分率係10~30/1。
〔3〕一種小分子玻尿酸-奈米金材料，其特徵係由前項1所記載之製造方法所製得。
〔4〕如前項3所記載之小分子玻尿酸-奈米金材料，其中，對於前述小分子玻尿酸-奈米金材料，使用紫外光-可見光光譜儀進行奈米金水溶液分析，所得之吸收光譜係於500~550nm具有特定之光譜吸收峰。
〔5〕如前項3所記載之小分子玻尿酸-奈米金材料，其中，前述小分子玻尿酸-奈米金材料之粒徑係介於20~80nm之間。
〔6〕如前項3所記載之小分子玻尿酸-奈米金材料，其中，前述小分子玻尿酸-奈米金材料之Zeta界面電位係大於±15mv。
〔7〕一種皮膚用劑，其特徵係包含前項3~6中任一項所記 載之小分子玻尿酸-奈米金材料。
〔8〕如前項7所記載之皮膚用劑，其中，其具有保濕、膠原蛋白增生及抗自由基之功效。
〔9〕一種面膜，其特徵係包含前項3~6中任一項所記載之小分子玻尿酸-奈米金材料。
根據本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料之製造方法，不須繁複之步驟及多餘之化學物質即可製造小分子玻尿酸-奈米金材料。
此外，本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料，用於皮膚用劑、面膜、化妝品等，皆可發揮保濕、第一型膠原蛋白與第三型膠原蛋白增生及抗自由基之功效。
【圖1】本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料之粒徑分布圖。
【圖2】本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料之波長及吸光性分析之曲線圖。
【圖3】本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料之Zeta界面電位圖。
【圖4】，使用穿透式電子顯微鏡(TEM)觀察本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料所得之粒徑圖。
【圖5】測試使用包含小分子玻尿酸-奈米金材料之面膜所得保濕功效結 果圖。
【圖6】含有本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料之霈研G-Lift面膜之照片圖。
以下揭示本發明實施方式，其並非限制本發明必須以下述方式實施，而係為了闡釋本發明之詳細內容與實施之效果。
〔本發明之製造方法〕
本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料之製造方法包含：
步驟(1)，將檸檬酸鈉作為還原劑，加入氯金酸水溶液中。
步驟(2)，高溫處理得到裸金。
步驟(3)，加入玻尿酸，使玻尿酸與前述裸金共軛鍵結，得到小分子玻尿酸-奈米金材料。
其中，檸檬酸鈉相對於氯金酸之莫爾分率係10~30/1。
此外，本發明所使用之小分子玻尿酸之莫爾分子量為7000(Mw)。
〔粒徑分布〕
根據奈米定義，奈米金之粒徑係在1~100nm之間，如圖1所示，本發明之小分子玻尿酸-奈米金之粒徑係維持在奈米等級之大小，其粒徑係介於20~100nm之間為佳，介於30~95nm之間較佳，介於40~90nm之間更佳，介於50~80nm之間最佳。
〔波長及吸光值測定〕
本發明之小分子玻尿酸-奈米金之波長及吸光值分析之曲線圖，係如圖2所示。
本發明使用分光光度計測定本發明之小分子玻尿酸-奈米金之波長及吸光值，藉此觀察小分子玻尿酸-奈米金中之奈米金的波長是否係在500~550nm之正常範圍內。
由圖2可得知，本發明之小分子玻尿酸-奈米金所測得之奈米金波長係在500~550nm之間為佳，在510nm~540nm間較佳，而本發明所得最高峰係525nm。因此，本發明之小分子玻尿酸-奈米金，其穩定性較佳，具有不易變質之特性。
〔Zeta界面電位圖〕
本發明之小分子玻尿酸-奈米金之Zeta界面電位圖，如圖3所示，係大於±15mv為佳，大於±20mv更佳，大於±30mv最佳。
〔皮膚用劑〕
藉由本發明之小分子玻尿酸-奈米金，可得到皮膚用劑，其中，小分子玻尿酸-奈米金之濃度係0.1ppm以上(總濃度0.1%以上)。
〔面膜〕
藉由本發明之小分子玻尿酸-奈米金，可得到含小分子玻尿酸-奈米金之面膜，其中，小分子玻尿酸-奈米金之濃度係0.1ppm以上(總濃度0.1%以上)。
〔評估本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料之功效〕
〔保濕評估〕
樣品：包含本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料之面膜。
實驗步驟：
藉由拉曼光譜學(Near-Infrared Spectroscopic Measurement)測定，藉由近紅外線波長在0.75-1.4μm，測定細胞中水分含量。
進一步使用皮膚檢測儀測定，結果如圖5所示。
因此，本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料具備優異的保濕能力，可使肌膚含水量從33%提升至46%。
〔膠原蛋白增生評估〕
本發明之小分子玻尿酸-奈米金具有玻尿酸之功效。已知奈米金有促進膠原蛋白增生、玻尿酸具有肌膚水合作用等療效，藉由本發明之小分子玻尿酸-奈米金，亦可達到膠原蛋白增生之功效與肌膚水合作用等。
使用膠原蛋白分析套組測量皮膚樣品水解物中之膠原蛋白，實驗結果顯示，使用包含本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料之面膜，可使第一型膠原蛋白及第三型膠原蛋白增生。
〔抗自由基評估〕
藉由細胞內活性氧物質(intracellular reactive oxygen species；ROS)之測定法，測定本發明抗自由基之功效。
ROS測定法之原理在於，H2DCF-DA為對於過氧化氫(H2O2)敏感之染劑，其可用以偵測細胞內產生之過氧化物質。
H2DCF-DA不具螢光，加至培養液中可經由擴散作用通過細胞膜進入細胞內；而細胞內的酵素酯酶(esterase)會對H2DCF-DA進行去乙醯化作用(deacetylation)，進而形成極性的化合物(H2DCF)；當細胞內活性氧物質產生量越多，H2DCF會被氧化為帶螢光的產物(DCF)提高。
藉由ROS測定法可知，使用包含本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料之面膜，可有抗自由基之功效。
〔綜合評估〕
藉由包含本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料之面膜，皮膚可保濕，且得到膠原蛋白增生及抗自由基之功效，從而，可知本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料具有保濕、膠原蛋白第一型及第三型增生及抗自由基之無法預期之功效。
【產業利用可能性】
本發明之小分子玻尿酸-奈米金之製造方法，不須繁複之步驟及多餘之化學物質即可製造小分子玻尿酸-奈米金材料，並且，本發明之小分子玻尿酸-奈米金材料，可用於皮膚等而保濕、第一型膠原蛋白與第三型膠原蛋白增生及抗自由基等功能。
上述所使用的用語及說明，係用以說明本發明的實施形態，但本發明並非限定於此。只要係不脫離本發明申請專利範圍，具備本發明之技術特徵而有修飾變化者，亦包含在本專利所保護範圍內。

Claims (4)

  1. 一種皮膚用製劑之製造方法，其特徵係包含：步驟(1)，將檸檬酸鈉作為還原劑，加入氯金酸水溶液中，其中，檸檬酸鈉相對於氯金酸之莫爾分率係10~30/1；步驟(2)，高溫處理得到裸金；步驟(3)，加入玻尿酸，使玻尿酸與前述裸金共軛鍵結，得到小分子玻尿酸-奈米金材料，該材料粒徑係介於20~80nm之間，在紫外光-可見光光譜儀所得之吸收光譜500~550nm具有特定之光譜吸收峰，Zeta界面電位係大於±15mv。
  2. 一種皮膚用製劑，其特徵係包含小分子玻尿酸-奈米金材料，該材料由以下方法製備，包括：步驟(1)，將檸檬酸鈉作為還原劑，加入氯金酸水溶液中，其中，檸檬酸鈉相對於氯金酸之莫爾分率係10~30/1；步驟(2)，高溫處理得到裸金；步驟(3)，加入玻尿酸，使玻尿酸與前述裸金共軛鍵結，得到小分子玻尿酸-奈米金材料，該材料粒徑係介於20~80nm之間，在紫外光-可見光光譜儀所得之吸收光譜500~550nm具有特定之光譜吸收峰，Zeta界面電位係大於±15mv。
  3. 如申請專利範圍第2項所記載之皮膚用製劑，其具有保濕、第一型膠原蛋白與第三型膠原蛋白增生及抗自由基之功效。
  4. 如申請專利範圍第2項所記載之皮膚用製劑，其係一種面膜。
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