TWI645848B - Use of a composition containing a ferrous amino acid chelate compound for the manufacture of a medicament for preventing cancer metastasis - Google Patents

Abstract

本發明提供一種含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物用於製造防止癌症轉移之醫藥品的用途，其中醫藥品含有有效劑量之亞鐵胺基酸螯合物之組合物以及其藥學上可接受的載劑。本發明所述之含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物製造而得之醫藥品具有防止癌症轉移之效果。

Description

含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物用於製造防止癌症轉移之醫藥品的用途

本發明係關於含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物之用途，尤指其用於製造防止癌症轉移之醫藥品的用途。

癌症轉移(cancer metastasis)，亦稱惡性轉移，其係癌症無法治癒之主要原因。癌症轉移係指癌細胞自原始發生之位置轉移至體內他處器官組織繼續生長，使得癌症治療更為困難，通常已無法根除，僅能進行放射線治療或化療抑制癌細胞繼續增生以延長患者生命。

癌症轉移係極為複雜之過程，目前有研究指出癌細胞可以轉移至其他器官組織之主要原因為癌細胞具侵襲(invasion)之能力，癌細胞異常活化並大量分泌基質金屬蛋白水解酶(matrix metalloproteinase，MMP)，基質金屬蛋白水解酶可分解細胞外基質(extracellular matrix，ECM)，得以讓癌細胞侵襲周圍組織並轉移至其他器官，其中MMP-1與MMP-3已被證實與癌細胞轉移習習相關。具研究指出，發炎性細胞激素(inflammatory cytokines)會刺激MMP之合成，此外，MMP亦會受到金屬蛋白水解酶組織抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMP)抑制；然而如金屬蛋白水解酶組織抑制因子-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2，TIMP-2)雖具有抑制MMP之作用，卻亦有文獻指出TIMP-2之表現量與癌細胞轉移成正相關。儘管癌症轉移係造成癌症患者死亡之主要原因，然而目前之抗癌相關研究依舊係以抑制原位癌生長為主要研究方向。

有鑑於此，為因應癌症患者具有對於抑制癌症轉移之需求，本發明之目的在於提供一種含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物用於製造防止癌症轉移之醫藥品的用途，其中含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物具有抑制癌細胞遷移、抑制癌細胞侵襲、抑制癌細胞MMP相關蛋白質表現或抑制癌細胞TIMP相關蛋白質表現之功效。

為達到上述之發明目的，本發明所採用的技術手段為提供一種含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物用於製造防止癌症轉移之醫藥品的用途，其中醫藥品含有有效劑量之亞鐵胺基酸螯合物之組合物以及其藥學上可接受的載劑。

依據本發明，「含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物」係由無機鐵與胺基酸混合所製得之含有亞鐵胺基酸螯合物(ferrous amino acid chelate)之組合物。

較佳的，所述之含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物中的亞鐵胺基酸螯合物之亞鐵與胺基酸的螯合比例係介於1：1至1：4之間。

較佳的，所述之含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物中的亞鐵胺基酸螯合物之亞鐵與胺基酸的螯合比例係介於1：1.5至1：2.5之間。

較佳的，所述之含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物之有效劑量係介於0.2 mg/kg/day至200 mg/kg/day。

較佳的，所述之含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物之有效劑量係介於1 mg/kg/day至100 mg/kg/day。

依據本發明，有效劑量之計算方式係以本說明書之實施方式之含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物之濃度1 μg/mL至1000 μg/mL，以65公斤人體體重中血液量約占體重之1/13的相對血液濃度作為換算而得；具體而言，有效劑量為0.2 mg/kg/day即係以含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物之濃度1 μg/mL乘13/65而得，以此類推，有效劑量為200 mg/kg/day 即係以含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物之濃度1000 μg/mL乘13/65而得，故由含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物之濃度1 μg/mL至1000 μg/mL換算之有效劑量為0.2 mg/kg/day至200 mg/kg/day。

更佳的，所述之含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物係由無機鐵與胺基酸混合並歷經60°C至90°C加熱8小時至48小時所製得之含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物，其中無機鐵與胺基酸之重量比例係介於1：1.2至1：1.5之間。

更佳的，所述之無機鐵係硫酸亞鐵、氯化亞鐵、焦磷酸亞鐵或其組合；該胺基酸係甘胺酸。

更佳的，所述之含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物係含有重量百分比為95%至100%的亞鐵甘胺酸螯合物；又更佳的，重量百分比為98%至99.9%的亞鐵甘胺酸螯合物。

更佳的，所述之含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物中包括還原劑，該還原劑包括，但不限於抗壞血酸(ascorbic acid)、檸檬酸(citric acid)、乙酸(acetic acid)、丙酸(propionic acid)、丁酸(butyric acid)、乳酸(lactic acid)、羥琥珀酸(malic acid)、磺酸(sulfonic acid)、丁二酸(succinic acid)或其組合。

本發明所述之「防止癌症轉移」係指有效控制癌細胞自原始發生之部位轉移至體內他處器官組織繼續生長，其中防止癌症轉移包括但不限於如本發明所例示者，防止癌症轉移係指抑制癌細胞遷移(migration)、抑制癌細胞侵襲(invasion)、抑制癌細胞MMP相關蛋白質或抑制癌細胞TIMP相關蛋白質之表現量。

本發明所述之「有效劑量」係指在劑量上及對於所需要之時間段而言對達成所要減緩或防止癌症轉移之量；依據本發明，係指透過施予特定範圍量之含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物，能夠使得肺癌或乳腺癌之癌症轉移能力下降，或是抑制癌細胞遷移、抑制癌細胞侵襲、抑制癌細胞MMP相關蛋白質或抑制癌細胞TIMP相關蛋白質之表現量；依據本發明，另指能減少癌細胞遷移或減少癌細胞侵襲之功效。

本發明所述之「醫藥學上可接受之載劑」包含，但不限於溶劑(solvent)、乳化劑(emulsifier)、懸浮劑(suspending agent)、分解劑(decomposer)、黏結劑(binding agent)、賦形劑(excipient)、安定劑(stabilizing agent)、螯合劑(chelating agent)、稀釋劑(diluent)、膠凝劑(gelling agent)、防腐劑(preservative)、潤滑劑(lubricant)、表面活性劑(surfactant)，及其他類似或適用本發明之載劑。

本發明所述之「醫藥品」可以多種形式存在，該等形式包含，但不限於液體、半固體及固體藥劑形式，諸如溶液(solution)、乳劑(emulsion)、懸浮液(suspension)、粉末(powder)、錠劑(tablet)、丸劑(pill)、口含錠(lozenge)、片劑(troche)、口嚼膠(chewing gum)、膠囊(slurry)、脂質體、栓劑以及其他類似或適用本發明之劑型。

較佳的，所述之醫藥品係經腸道的或非經腸道的劑型。

更佳的，所述之該經腸道的劑型係口服劑型，其口服劑型係溶液、乳劑、懸浮液、粉末、錠劑、丸劑、口含錠、片劑、口嚼膠或膠囊。

較佳的，所述之癌症包括，但不限於黑色素瘤(melanoma)、肝癌、結腸癌(colon cancer)、肺癌、胃癌(gastric cancer)、食道癌(esophageal cancer)、乳癌(breast cancer)、前列腺癌(prostate cancer)、血癌(leukemia)、腦部腫瘤(brain tumor)、低度星狀細胞瘤(low-grade astrocytoma)、高度星狀細胞瘤(high-grade astrocytoma)、垂體腺瘤(pituitary adenoma)、腦脊髓膜瘤(meningioma)、中樞神經淋巴瘤(CNS lymphoma)、寡樹突神經膠細胞瘤(oligodendroglioma)、顱咽管瘤(craniopharyngioma)、室管膜瘤(ependymoma)、膠質細胞腫瘤(brain stem tumor)、頭頸瘤(head and neck tumor)、喉癌(laryngeal cancer)、口咽癌(oropharyngeal cancer)、鼻咽癌(nasopharyngeal tumor)、唾液腺腫瘤(salivary gland tumor)、下咽癌(hypopharyngeal cancer)、甲狀腺癌(thyroid cancer)、口腔腫瘤(oral cavity tumor)、胸廓腫瘤(chest wall tumors)、小細胞肺癌(small cell lung cancer)、非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)、胸腺瘤(thymoma)、縱隔腫瘤(mediastinal tumor)、男性乳癌(male breast cancer)、腹骨盆(abdomen-pelvis tumor)、肝腺癌(liver adenocarcinoma)、肝細胞癌(hepatoma)、膽囊癌(gallbladder cancer)、膽道癌(biliary tract cancer)、胰臟癌(pancreatic cancer)、小腸腫瘤(small intestinal tumor)、大腸腫瘤(large intestinal tumor)、肛門癌(anal cancer)、膀胱癌(bladder cancer)、腎細胞癌(renal cell carcinoma)、子宮頸癌(cervix cancer)、子宮內膜癌(endometrial cancer)、卵巢癌(ovarian cancer)、子宮肉瘤(uterine sarcoma)或皮膚癌(skin cancer)。

更佳的，所述之癌症係乳腺癌或肺癌。

較佳的，所述之醫藥品係用於抑制癌細胞遷移、抑制癌侵襲、抑制基質金屬蛋白水解酶相關蛋白質或抑制金屬蛋白水解酶組織抑制因子。

更佳的，所述之醫藥品係用於抑制基質金屬蛋白水解酶-1、基質金屬蛋白水解酶-3或金屬蛋白水解酶組織抑制因子-2。

本發明所述之含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物具有抑制癌症轉移之效果，且本發明證實處理含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物中可以有效抑制癌細胞遷移(migration)、抑制癌細胞侵襲(invasion)以及抑制癌細胞分泌MMP相關蛋白質與TIMP相關蛋白質之表現量。

以下配合圖式及本發明之較佳實施例，進一步闡述本發明為達成目的所採取的技術手段，但該些實施例並不限於本發明前述所揭示之內容，習之本發明之技藝者，可以做些許之改良與修飾，但不脫離本發明之範疇。

製備例 1 製備含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物

本實施例係用以製備含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物，其係以下述方式製備。首先，將硫酸亞鐵與甘胺酸(純度98%以上)以重量比1: 1.3混合並歷經60°C至90°C加熱8小時至48小時，以獲得該含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物，其中亞鐵胺基酸螯合物之亞鐵與胺基酸螯合比例係介於1：1至1：4之間；再將所獲得之含有亞鐵胺基酸螯合物之組合物調製成濃度為每毫升含有1微克(即1 μg/mL)、5 μg/mL、10 mg/mL、25 mg/mL、30 mg/mL、50 mg/mL、100 mg/mL、250 mg/mL、500 mg/mL以及1000 mg/mL，並以A1代稱該組合物。

製備例 2 培養乳腺癌細胞 MDA-MB-231

將乳腺癌細胞MDA-MB-231以含有10%胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)、1%青黴素[100單位/毫升(U/mL)]-鏈黴素[100微克/毫升(mg/mL)](penicillin-streptomycin)以及1%麩醯胺酸(glutamine)[200毫莫耳每升(mM)]之洛斯維帕克紀念研究所培養基(Roswell Park Memorial Institute medium, RPMI-1640)培養於37ºC、5%二氧化碳之培養箱中，待細胞貼附7至8分滿時，再進行繼代培養。

製備例 3 以組合物 A1 處理乳腺癌細胞 MDA-MB-231

將乳腺癌細胞MDA-MB-231以每孔3×10⁵ 顆細胞之細胞密度種於6孔盤中，並於隔日分別加入不同濃度之由製備例1所製得之組合物A1進行處理，其中組合物A1之濃度分別為0 mg/mL(作為控制組)、5 mg/mL、10 mg/mL、25 mg/mL及50 mg/mL，並於37ºC、5%二氧化碳之培養箱中培養24小時。

製備例 4 培養非小細胞肺癌細胞 A549

將非小細胞肺癌細胞A549以含有10%胎牛血清、1%青黴素(100 U/mL)-鏈黴素(100 mg/mL)以及1%麩醯胺酸(200 mM)之RPMI-1640培養於37ºC、5%二氧化碳之培養箱中，待細胞貼附7至8分滿時，再進行繼代培養。

製備例 5 以組合物 A1 處理肺癌細胞 A549

將非小細胞肺癌細胞A549以每孔3×10⁵ 顆細胞之細胞密度種於6孔盤中，並於隔日分別加入由製備例1所製得之組合物A1進行處理，其中組合物A1之濃度分別為0 mg/mL(作為控制組)、100 mg/mL、250 mg/mL及500 mg/mL，並於37ºC、5%二氧化碳之培養箱中培養24小時。

實施例 1 組合物 A1 對於癌細胞遷移 (cell migration) 之影響

本實施例之細胞遷移實驗係利用遷移實驗24孔盤(BD Falcon®；貨品編號353047)之下層孔盤盛裝對於細胞較為營養之細胞培養液，趨使上層孔盤內的細胞穿過上層孔盤底部之聚碳酸酯膜，遷移到下層孔盤之培養液。因此，通過聚碳酸酯膜至下層孔盤之細胞數量可反映出該種細胞株之遷移能力。細胞遷移實驗方法如下所述： (1) 以製備例3之乳腺癌細胞MDA-MB-231及製備例4之非小細胞肺癌細胞A549分別以組合物A1處理24小時後，各別收集每孔之細胞並以PBS潤洗2次，將細胞打散懸浮於1 mL不含有或含有相同處理劑量組合物A1之無血清之RPMI-1640細胞培養液中進行細胞飢餓(cell starvation)2小時； (2) 各取300 mL細胞液(乳腺癌細胞MDA-MB-231含有1×10⁵ 顆細胞；非小細胞肺癌細胞A549含有1.5×10⁵ 顆細胞)各別加入遷移實驗24孔盤之上層孔盤中，而後將上層孔盤放入含有600 mL之10%FBS之下層孔盤中； (3) 將該遷移實驗24孔盤置於37ºC、5%二氧化碳之培養箱中培養8小時至16小時(乳腺癌細胞MDA-MB-231為8小時；非小細胞肺癌細胞A549為16小時)，使細胞進行遷移； (4) 取出上層孔盤並將培養液抽乾並將上層孔盤放入甲醇(methanol)中8分鐘進行細胞固定，再將上層孔盤取出風乾； (5) 以10倍稀釋濃度之吉姆薩染液(Giemsa solution)將上層孔盤之細胞進行染色1小時，再使用棉花棒將上層孔盤底部內之細胞擦拭乾淨； (6) 量化統計自上層孔盤穿過聚碳酸酯膜並黏附於聚碳酸酯膜下方之細胞數量。

結果請參閱圖1A至圖2B所示，請先參閱圖1A及圖1B，與控制組之乳腺癌細胞MDA-MB-231細胞數量為基準相比，乳腺癌細胞MDA-MB-231實驗組分別以濃度5 mg/mL、10 mg/mL及25 mg/mL之組合物A1處理後，乳腺癌細胞MDA-MB-231遷移之數量皆顯著減少，且乳腺癌細胞MDA-MB-231實驗組細胞遷移數量隨著組合物A1之處理濃度增加而減少；請參閱圖2A及圖2B，分別以濃度100 mg/mL、250 mg/mL及500 mg/mL之組合物A1處理非小細胞肺癌細胞A549後，其細胞遷移實驗結果與乳腺癌細胞MDA-MB-231實驗組相同，非小細胞肺癌細胞A549遷移之數量相較於其控制組皆顯著減少，且細胞遷移數量與組合物A1之處理濃度呈反比。由此可知，組合物A1具有抑制癌細胞遷移之效果。

實施例 2 組合物 A1 對於癌細胞侵襲 (cell invasion) 之影響

本實施例之細胞侵襲實驗類似於實施例1之細胞遷移實驗，其差別在於所使用之器材為侵襲實驗24孔盤(BD Falcon®；貨品編號354480)，其上層孔盤底部之聚碳酸酯膜上方多覆蓋了一層基質膠(matrigel)，該基質膠係由小鼠腫瘤所提取之基底膜基質，基質膠可模擬體內細胞外基質，使得細胞無法隨意穿透，細胞必須分泌水解酶才能穿過覆有基質膠之聚碳酸酯膜，因此，通過覆有基質膠之聚碳酸酯膜至下層孔盤之細胞數量可反映出該種細胞株之侵襲能力。細胞侵襲實驗方法如下所述： (1) 以製備例3之乳腺癌細胞MDA-MB-231以組合物A1處理24小時後，將各別收集每孔之細胞並以PBS潤洗兩次後，將細胞打散懸浮於1 mL不含有或含有相同處理劑量組合物A1之無血清之RPMI中進行細胞飢餓(cell starvation)2小時； (2) 加入500 mL無血清之RPMI-1640培養液於侵襲實驗24孔盤之上層孔盤中，並放置於培養箱培養2小時使得上層孔盤底部之基質膠浸潤； (3) 各取300 mL細胞液(乳腺癌細胞MDA-MB-231含有6×10⁴ 顆細胞；非小細胞肺癌細胞A549含有3×10⁵ 顆細胞)各別加入上層孔盤中，而後將上層孔盤放入含有600 mL之10%FBS之下層孔盤中； (4) 將該侵襲實驗24孔盤置於37ºC、5%二氧化碳之培養箱中培養20小時至24小時(乳腺癌細胞MDA-MB-231為20小時；非小細胞肺癌細胞A549為24小時)，使細胞進行侵襲； (5) 取出上層孔盤並將培養液抽乾並將上層孔盤放入甲醇(methanol)中8分鐘進行細胞固定，再將上層孔盤取出風乾； (6) 以10倍稀釋之吉姆薩染液(Giemsa solution)將上層孔盤之細胞進行染色1小時，再使用棉花棒將上層孔盤底部內之基質膠及細胞擦拭乾淨； (7) 量化統計自上層孔盤穿過覆有基質膠之聚碳酸酯膜並黏附於聚碳酸酯膜下方之細胞數量。

結果如圖3A至圖4B所示，首先由圖3A及圖3B可看出與控制組之乳腺癌細胞MDA-MB-231細胞數量為基準相比，乳腺癌細胞MDA-MB-231實驗組分別以濃度5 mg/mL、10 mg/mL及25 mg/mL之組合物A1處理後，乳腺癌細胞MDA-MB-231侵襲之數量皆顯著減少，且乳腺癌細胞MDA-MB-231實驗組細胞侵襲數量隨著組合物A1之處理濃度增加而減少。

請參閱圖4A及圖4B，分別以濃度100 mg/mL、250 mg/mL及500 mg/mL之組合物A1處理非小細胞肺癌細胞A549後，其細胞侵襲實驗結果與乳腺癌細胞MDA-MB-231實驗組相同，非小細胞肺癌細胞A549侵襲之數量相較於其控制組皆顯著減少，且細胞侵襲數量與組合物A1之處理濃度呈反比。因此，實施例2之結果顯示組合物A1具有抑制癌細胞侵襲之效果。

實施例 3 組合物 A1 對於癌細胞分泌 MMP 相關蛋白質及 TIMP 相關蛋白質之影響

將製備例2之乳腺癌細胞MDA-MB-231以每孔3×10⁵ 顆細胞之細胞密度種於6孔盤中，並於隔日加入由製備例1所製得之組合物A1進行處理，其中乳腺癌細胞MDA-MB-231以組合物A1濃度100 mg/mL處理，並以未處理組合物A1之癌細胞作為控制組，並於37ºC、5%二氧化碳之培養箱中培養24小時。經24小時處理後，分別收集各孔之細胞培養液並加入1倍苯甲基磺酰氟(Phenylmethanesulfonyl fluoride，PMSP)後，離心5分鐘移除細胞並取用細胞培養液為待測檢體，以MMP抗體晶片(購自於abcam公司；貨品編號ab134004)進行實驗，本實施例之操作方法係採用試劑組所提供之步驟進行，操作方法如下所述： (1) 將晶片各別放入8孔盤中，加入2 mL之阻隔緩衝液(blocking buffer)，於室溫下震盪30分鐘； (2) 移除阻隔緩衝液，而後各別加入1 mL之待測檢體(各組細胞培養液)，於室溫下震盪反應2小時； (3) 待反應完畢後，移除孔盤中之細胞培養液； (4) 加入2 mL之潤洗緩衝液1(wash buffer 1)，於室溫下震盪清洗晶片5分鐘後，移除潤洗緩衝液1，此步驟重複2次； (5) 加入2 mL之潤洗緩衝液2(wash buffer 2)，於室溫下震盪清洗晶片5分鐘後，移除潤洗緩衝液1，此步驟重複1次； (6) 加入1 mL之一級抗體：生物素連結抗-細胞激素(biotin-conjugated anti-cytokines)，於室溫震盪2小時； (7) 移除一級抗體，再重複步驟(4)及步驟(5)以清洗晶片。 (8) 加入2 mL的二級抗體：辣根過氧化酶連結親合素(HRP-conjugated streptavidin)，於室溫震盪2小時； (9) 移除二級抗體，再重複步驟(4)及步驟(5)以清洗晶片。 (10) 將各晶片自8孔盤內取出，移除晶片上多餘液體後，於晶片表面上淋上500 mL之顯影劑，靜置2分鐘後以X-ray底片呈色。

實驗結果如圖5A及圖5B所示，圖5A所表現之MMP相關蛋白質及TIMP相關蛋白質之座標位置請參閱圖5B表格所示，以組合物A1濃度100 mg/mL處理乳腺癌細胞MDA-MB-231後，如圖5A右圖之乳腺癌細胞MDA-MB-231實驗組，其中右圖E1及E2位置之MMP-1之表現量明顯比控制組之MMP-1 (即左圖E1及E2位置)表現量降低；且相較於控制組，乳腺癌細胞MDA-MB-231實驗組之MMP-3(即右圖G1及G2位置)及TIMP-2(即右圖E3及E4位置)之表現量也有些許減少，表示本案所述之組合物A1可抑制癌細胞之MMP-1、MMP-3及TIMP-2之表現，並且暗示組合物A1可能係藉由抑制MMP相關蛋白或TIMP相關蛋白質之表現量而降低癌細胞侵襲之能力。

(無)

圖1A是本發明分別以濃度為0 mg/mL(控制組)、5 mg/mL、10 mg/mL及25 mg/mL之組合物A1處理乳腺癌細胞MDA-MB-231後，乳腺癌細胞MDA-MB-231以40倍放大倍率觀察遷移之影像。 圖1B是圖1A之乳腺癌細胞MDA-MB-231遷移影像經量化後所得之柱狀圖(以控制組為基準)。 圖2A是本發明分別以濃度為0 mg/mL(控制組)、100 mg/mL、250 mg/mL及500 mg/mL之組合物A1處理非小細胞肺癌細胞A549後，非小細胞肺癌細胞A549以40倍放大倍率觀察之遷移之影像。 圖2B是圖2A之非小細胞肺癌細胞A549遷移影像經量化後所得之柱狀圖(以控制組為基準)。 圖3A是本發明分別以濃度為0 mg/mL(控制組)、10 mg/mL、25 mg/mL及50 mg/mL之組合物A1處理乳腺癌細胞MDA-MB-231後，乳腺癌細胞MDA-MB-231以40倍放大倍率觀察之侵襲之影像。 圖3B是圖3A之乳腺癌細胞MDA-MB-231侵襲影像經量化後所得之柱狀圖(以控制組為基準)。 圖4A是本發明分別以濃度為0 mg/mL(控制組)、100 mg/mL、250 mg/mL及500 mg/mL之組合物A1處理非小細胞肺癌細胞A549後，非小細胞肺癌細胞A549以40倍放大倍率觀察之侵襲之影像。 圖4B是圖4A之非小細胞肺癌細胞A549侵襲影像經量化後所得之柱狀圖(以控制組為基準)。 圖5A是本發明分別以濃度為0 mg/mL(控制組)、100 mg/mL之組合物A1處理乳腺癌細胞MDA-MB-231後，乳腺癌細胞MDA-MB-231分泌之MMP相關蛋白質表現量；左欄為控制組之MMP相關蛋白質及TIMP相關蛋白質表現量；右欄為乳腺癌細胞MDA-MB-231實驗組之MMP相關蛋白質及TIMP相關蛋白質表現量。 圖5B是圖5A所實驗之MMP抗體晶片所偵測之MMP相關蛋白質及TIMP相關蛋白質之座標位置；Pos(即座標A1、A2、B1、B2、H3及H4)為正對照組，Neg(即座標C1、C2、D1、D2、G3及G4)為負對照組，當Pos之位置為均勻呈現黑點，Neg之位置為空白，藉由Pos、Neg作為該MMP抗體晶片之MMP相關蛋白質及TIMP相關蛋白質表現量之對照。

(無)

Claims (14)

1. 一種含有亞鐵甘胺酸螯合物之組合物用於製造防止癌症轉移之醫藥品的用途，其中醫藥品含有有效劑量之亞鐵甘胺酸螯合物之組合物以及其藥學上可接受的載劑。
2. 如請求項1所述之用途，其中含有亞鐵甘胺酸螯合物之組合物中的亞鐵甘胺酸螯合物之亞鐵與甘胺酸的螯合比例係介於1：1至1：4之間。
3. 如請求項1所述之用途，其中含有亞鐵甘胺酸螯合物之組合物中的亞鐵甘胺酸螯合物之亞鐵與甘胺酸的螯合比例係介於1：1.5至1：2.5之間。
4. 如請求項1所述之用途，其中含有亞鐵甘胺酸螯合物之組合物之有效劑量係介於0.2mg/kg/day至200mg/kg/day。
5. 如請求項1所述之用途，其中含有亞鐵甘胺酸螯合物之組合物之有效劑量係介於1mg/kg/day至100mg/kg/day。
6. 如請求項1至5中任一項所述之用途，其中含有亞鐵甘胺酸螯合物之組合物係由無機鐵與甘胺酸混合並歷經60℃至90℃加熱8小時至48小時所製得之含有亞鐵甘胺酸螯合物之組合物，其中無機鐵與甘胺酸之重量比例係介於1：1.2至1：1.5之間。
7. 如請求項6所述之用途，其中無機鐵係硫酸亞鐵、氯化亞鐵、焦磷酸亞鐵或其組合。
8. 如請求項6所述之用途，其中含有亞鐵甘胺酸螯合物之組合物中包括還原劑，該還原劑係抗壞血酸(ascorbic acid)、檸檬酸(citric acid)、乙酸(acetic acid)、丙酸(propionic acid)、丁酸(butyric acid)、乳酸(lactic acid)、羥琥珀酸(malic acid)、磺酸(sulfonic acid)、丁二酸(succinic acid)或其組合。
9. 如請求項1所述之用途，其中醫藥品係經腸道的或非經腸道的劑型。
10. 如請求項9所述之用途，其中該經腸道的劑型係口服劑型，其口服劑型係溶液、乳劑、懸浮液、粉末、錠劑、丸劑、口含錠、片劑、口嚼膠或膠囊。
11. 如請求項1所述之用途，其中癌症係黑色素瘤(melanoma)、肝癌、結腸癌(colon cancer)、肺癌、胃癌(gastric cancer)、食道癌(esophageal cancer)、乳癌(breast cancer)、前列腺癌(prostate cancer)、血癌(leukemia)、腦部腫瘤(brain tumor)、低度星狀細胞瘤(low-grade astrocytoma)、高度星狀細胞瘤(high-grade astrocytoma)、垂體腺瘤(pituitary adenoma)、腦脊髓膜瘤(meningioma)、中樞神經淋巴瘤(CNS lymphoma)、寡樹突神經膠細胞瘤(oligodendroglioma)、顱咽管瘤(craniopharyngioma)、室管膜瘤(ependymoma)、膠質細胞腫瘤(brain stem tumor)、頭頸瘤(head and neck tumor)、喉癌(laryngeal cancer)、口咽癌(oropharyngeal cancer)、鼻咽癌(nasopharyngeal tumor)、唾液腺腫瘤(salivary gland tumor)、下咽癌(hypopharyngeal cancer)、甲狀腺癌(thyroid cancer)、口腔腫瘤(oral cavity tumor)、胸廓腫瘤(chest wall tumors)、小細胞肺癌(small cell lung cancer)、非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)、胸腺瘤(thymoma)、縱隔腫瘤(mediastinal tumor)、男性乳癌(male breast cancer)、腹骨盆(abdomen-pelvis tumor)、肝腺癌(liver adenocarcinoma)、肝細胞癌(hepatoma)、膽囊癌(gallbladder cancer)、膽道癌(biliary tract cancer)、胰臟癌(pancreatic cancer)、小腸腫瘤(small intestinal tumor)、大腸腫瘤(large intestinal tumor)、肛門癌(anal cancer)、膀胱癌(bladder cancer)、腎細胞癌(renal cell carcinoma)、子宮頸癌(cervix cancer)、子宮內膜癌(endometrial cancer)、卵巢癌(ovarian cancer)、子宮肉瘤(uterine sarcoma)或皮膚癌(skin cancer)。
12. 如請求項1所述之用途，其中癌症係乳腺癌或肺癌。
13. 如請求項1所述之用途，其中醫藥品係用於抑制癌細胞遷移、抑制癌細胞侵襲、抑制基質金屬蛋白水解酶(matrix metalloproteinase，MMP)相關蛋白質或抑制金屬蛋白水解酶抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMP)相關蛋白質。
14. 如請求項13所述之用途，其中醫藥品係用於抑制基質金屬蛋白水解酶-1、基質金屬蛋白水解酶-3或金屬蛋白水解酶抑制因子-2。