TWI627275B - Cell migration detection method, cell migration wafer and preparation method thereof - Google Patents
Cell migration detection method, cell migration wafer and preparation method thereof Download PDFInfo
- Publication number
- TWI627275B TWI627275B TW102125259A TW102125259A TWI627275B TW I627275 B TWI627275 B TW I627275B TW 102125259 A TW102125259 A TW 102125259A TW 102125259 A TW102125259 A TW 102125259A TW I627275 B TWI627275 B TW I627275B
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- cell
- migration
- cell migration
- wafer
- wafer according
- Prior art date
Links
Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本發明所揭之細胞移行晶片係搭配一預定濃度之細胞誘導物,包含有一載體及至少一細胞移行組,其中,該細胞移行組係設於該載體上,具有一起始部,其內係塗布一貼附因子,用以供細胞貼附於其內而作為該細胞進行移行之起點,至少一直線跑道,具有一預定寬度,以一端連通該起始部而向外延伸一預定長度,並且其內塗部該細胞誘引物。此外,該細胞移行組更包含有一刻度尺,設於該跑道旁,用以便於觀察細胞於該跑道內移行之距離。
Description
本發明係有關於分析細胞移動能力之方法,特別係指一種細胞移行之檢測方法、細胞移行晶片及其製備方法。
按,細胞移行能力之分析係為與細胞運動相關之離體研究以及癌症研究中之重要依據,而目前普遍被應用於研究中之細胞移行分析方法包含有創傷癒合分析(Wound healing assay)、trans-well小室移行分析(trans-well chamber migration assay)及隨機移動分析(random migration assay)等。詳言之,創傷癒合分析係為目前最常見並且較為便宜之細胞移行分析方法,其作法係為先將細胞培養於事先已塗有細胞外基質之培養盤中,待細胞幾近長滿培養盤時,利用微量吸管頭將單層細胞刮出一空間,用以模擬傷口,使於該空間兩旁之細胞自然地往該空間移動,而該空間最終係會被爬行之細胞所填滿,因此,透過計算該空間被填滿所需之時間則成為分析細胞移行能力之重要指標。雖然創傷癒合分析於操作上即為簡易,惟,於實際操作之過程中,實難於不同待測培養盤中以相同力道及角度刮出大小及寬度一致之空間,造成分析結果之不確定性,因而倘若欲比較經不同處理之細胞,則另須透過重複操作及照更多照片,用以進行癒合分析之統計;此外,除上述缺失外,於刮除單層細胞時,常會同時地破壞原本塗布於培養盤表面之細胞外基質,而影響到細胞重新移動進
行癒合分析之結果。
而trans-well小室移行分析係亦為用以分析細胞移行之常見方法,其係藉由一培養置入杯(trans-well insert),其底部係由一層薄膜所構成者,該薄膜內係有無數個用以供細胞通行之小孔,故將該培養置入杯放入24孔培養盤,該薄膜則作為間隔而將之區分為上下兩空間。當細胞培養於上層空間時,上層空間之培養液中不添加血清,下層空間之培養液係添加血清,使該兩空間形成之一生長因子刺激之濃度差,以促使細胞自上層空間爬過膜上之小孔進入下層空間中,另倘若欲分析細胞外基質對於細胞移行之影響時,更得於下層空間事先塗上細胞外基質。於分析時必須先刮除上層空間之細胞,並將下層空間之細胞浸泡固定液且染色,再以螢光顯微鏡觀察並且統計分析下層空間之細胞數。雖然trans-well小室移行分析於結果呈現上效果較佳,惟,其操作方式及步驟需要技巧,非初學者能夠快速上手者,且須透過大量相片始能計算出細胞數量而得相對細胞移行效率,故對於實際操作上來說仍有較高失敗率,而增加相關實驗耗材之成本。
另隨機移動分析之操作方法係較上述兩種方法簡易,僅須將細胞培養於具特定細胞外基質塗層之培養盤中即可,然而,隨機移動分析乃無法完全控制細胞移動之方法,並且必須藉由昂貴之live image儀器始能進行分析,意即細胞須培養於顯微鏡之live-image模式下進行長時間定時照相,以及透過特殊軟體進行細胞移動軌跡分析。
此外,亦有研究團隊將細胞外基質以不同形狀塗於玻片上,用以研究細胞移行時各種相關蛋白質之分佈與作用,而此種方式係被稱為微圖案或微構型(micropattern)。目前市面上乃因應如上需求而開發出相
關產品,如CytooTM晶片及BiowriteTM微圖案,其係將如纖維連接蛋白或膠原蛋白等細胞外基質以特定形狀塗於玻片上,其中,該特定形狀可呈約細胞大小之方格或如Y、L、X等字型,而將細胞培養於該玻片上後,細胞則完全貼附於細胞外基質而呈現出該特定形狀。惟,此種方法於欲觀察細胞時,係無法維持培養環境之參數,且為塗案之製作上係較為複雜且困難。
由上可知,目前技術中所用以分析細胞移行能力之方法係存在有操作困難、成本高昂或觀察不易等不同缺失,而為了能夠使生醫研究順利進行,分析細胞移行能力之方法及其工具實有改進之必要。
因此,本發明之主要目的即在於提供一種細胞移行晶片,其操作步驟簡單並且便於觀察,可有效地減少實驗誤差,以及降低耗材成本。
本發明之次一目的係在於提供一種細胞移行晶片,其係用以令使用者能夠十分容易地進行細胞移行能力之量化分析。
本發明之再一目的係在於提供一種細胞移行晶片,其係得同時比較不同種類細胞之移行能力,亦得同時比較細胞於不同移行環境下之移行能力。
為了達成上述目的,本發明所揭之該細胞移行晶片,係搭配至少一預定濃度之細胞誘引物,包含有一載體;至少一細胞移行組,設於該載體上,具有一起始部,其內係得塗布一貼附因子,用以供一細胞貼附而作為該細胞進行移行之起點,至少一直線跑道,以一端連通該起始部而向外延伸一預定長度,並於其內塗布該細胞誘引物,用以使細胞自該起始部沿著該跑道移動。
於本發明之所揭各該實施例中,該載體係設為一預定大小之玻片;該細胞誘引物係得為細胞生長因子、細胞外基質或得與細胞膜上之接受器結合之物質,其中,該細胞外基質係為膠原蛋白質(collagens)、纖維連接蛋白(fibronectins)、延展蛋白質(elastins)或基質膠(Matrigel)等;而該貼附因子係得為聚離胺酸(poly-lysine)、細胞外基質或任何用以促進細胞生長之物質。
為能於同一晶片中同時分析不同種類細胞之移行能力,於本發明之一實施例中,係將至少二組之該細胞移行組分別以一預定排列方式設於該載體上。
而為能於同一晶片中比較細胞於不同移行環境下之移行能力,於本發明之一實施例中,該細胞移行組係具有二跑道,該起始部設於該載體中段部位,該二跑道係相對地連通該起始部而向外延伸一預定長度;另於本發明之另一實施例中,該細胞移行組係具有至少二跑道,該起始部係設於該載體之中段部位,該等跑道係以放射狀之排列方式設於該載體上而分別以其一端與該起始部相連通。
更進一步而言,於上述兩實施例中,係得以不同種類之細胞誘引物分別塗布於各該跑道,或將同一細胞誘引物以不同濃度分別塗布於各該跑道。
為了促使細胞順利移動,於本發明之各該實施例中係使各該跑道中之各細胞誘引物存在一濃度之梯度差,即於各該跑道靠近該起始部之處係塗布濃度較低之該細胞誘引物,而於各該跑道遠離該起始部之處係塗布濃度較高之該細胞誘引物,用以吸引位於該起始部之細胞沿著跑道向
外移動。
於本發明之一實施例中,該細胞移行組更包含有一刻度尺,係對應地設於該跑道旁,用以便利使用者為即時得知細胞移行之距離。此外,於本發明之一實施例中,係將該跑道之寬度設為5~10個細胞寬,用以避免細胞移行時間過長,增進細胞於跑道中移行之速率;另於本發明之一實施例中,係將該跑道寬度設為約50μm,亦可達到增進細胞於跑道中移行速率之功效。
本發明之另一目的係在於提供一種細胞移行之檢測方法,其包含下列步驟:(a)取本發明所揭之細胞移行晶片;(b)將一待測細胞置於該細胞移行晶片之起始部中;(c)將步驟b中之該細胞移行晶片於一預定環境下進行細胞培養;(d)觀察該待測細胞於該細胞移行晶片之跑道內所產生之移動距離,分析該待測細胞之細胞移行能力。
本發明之又一目的係在於提供一種細胞移行晶片之製造方法,其係以將一細胞誘引物作為墨水,而於一載體上列印出由該細胞誘引物所構成之至少一跑道,其中,該跑道係藉由3D印刷技術所印製而成者。藉由本發明所揭之細胞移行晶片之製造方法,係得快速量產出品質穩定之細胞移行晶片,並且大幅降低生產細胞移行晶片所需之成本,增加市場上之競爭力。
(10)(10’)(10”)(10''')(10'''')(10''''')‧‧‧細胞移行晶片
(20)(20''')(20''''')(20''''')‧‧‧細胞誘引物
(30)(30’)(30''')‧‧‧載體
(40)(40’)(40”)(40''')(40'''')‧‧‧細胞移行組
(41)(41’)(41”)(41''''')(41''''')‧‧‧起始部
(42)(42’)(42”)(42''')(42'''')(42''''')‧‧‧直線跑道
(43'''')‧‧‧刻度尺
第一圖係為本發明第一較佳實施例之示意圖。
第二圖係為本發明第二較佳實施例之示意圖。
第三圖係為本發明第三較佳實施例之示意圖。
第四圖係為本發明第四較佳實施例之示意圖。
第五圖係為本發明第五較佳實施例之示意圖。
第六圖係為本發明第六較佳實施例之示意圖。
第七圖係為本發明實例一所製備之細胞移行晶片。
第八圖係為本發明實例二所製備之細胞移行晶片。
第九圖A係為起始部與靠近起始部之跑道塗布高濃度纖維連接蛋白液,於細胞培養24小時後,以電子顯微鏡觀察細胞移行之結果。
第九圖B係為起始部與靠近起始部之跑道塗布低濃度纖維連接蛋白液,於細胞培養24小時,以電子顯微鏡觀察細胞移行之結果。
第十圖A係為起始部與靠近起始部之跑道塗布高濃度纖維連接蛋白液,於細胞培養48小時,以電子顯微鏡觀察細胞移行之結果。
第十圖B係為起始部與靠近起始部之跑道塗布低濃度纖維連接蛋白液,於細胞培養48小時,以電子顯微鏡觀察細胞移行之結果。
本發明所揭之細胞移行晶片係搭配一預定濃度之細胞誘導物,包含有一載體及至少一細胞移行組,其中,該細胞移行組係設於該載體上,具有一起始部,其內係塗布一貼附因子,用以供細胞貼附於其內而作為該細胞進行移行之起點,至少一直線跑道,具有一預定寬度,以一端連通該起始部而向外延伸一預定長度,並且其內塗部該細胞誘引物。此外,該細胞移行組更包含有一刻度尺,設於該跑道旁,用以便於觀察細胞於該跑道內移行之距離。
本發明所揭內容中所謂之細胞誘引物,係為一種用以提供細
胞移行軌道之物質,而得為細胞生長因子、細胞外基質或任何能與細胞膜上受器結合之物質,其中,常見之細胞外基質係包含有膠原蛋白質、纖維連接蛋白、延展蛋白質及基質膠。
本發明所揭內容中所謂之貼附因子,係為一種用以使細胞貼附之物質,如聚離胺酸、細胞外基質或任何用以促進細胞生長之物質,其中,常見之細胞外基質係包含有膠原蛋白質、纖維連接蛋白、延展蛋白質及基質膠。
而上述對於本發明內容中之名詞說明,僅為一種例示性之說明,係非用以限制本發明說明書內容以及申請專利範圍。
更進一步而言,該細胞移行組係得以人工方式繪製於該載體上,再將該細胞誘引物塗布於該跑道與該起始部內,亦得藉由印刷技術將該細胞移行組列印於該載體上。具體來說,藉由一3D印刷機台,將該預定濃度之細胞誘引物作為印刷機台之墨水或,並且於該機台上設定好所需列印之尺寸與形狀,即得於該載體上列印完成該細胞移行組。
藉由本發明所揭之細胞移行晶片,使用者僅須使待測細胞貼附於該起始部中,再將該細胞移行晶片至於預定培養條件下進行培養後,觀察該細胞於該跑道內之移行距離,分析得知該細胞之移行能力。一般來說,由於細胞於培養之移動速度為100um/h,因而考量本發明所揭之細胞移行晶片所搭配之細胞誘引物之濃度差異以及待測細胞種類之差異,欲使細胞移行距離約為1.2公釐時,至少須培養12小時,並依此估算出其餘移行距離所需培養時間。
為了更進一步說明本發明,以下茲舉本發明若干較佳實施例
並搭配圖示說明如后。
請參閱第一圖,本發明之第一較佳實施例所揭之細胞移行晶片(10),係須搭配一由預定濃度之纖維連接蛋白所組成之細胞誘引物(20),由一載體(30)及一細胞移行組(40)所組成者,其中:該載體(30)係為一玻片,尺寸得依據使用者需求而選擇,較佳尺寸係為22×22公釐之方形蓋玻片。
該細胞移行組(40)係設於該載體(30)上,具有一起始部(41),係呈約直徑為5公釐之圓形,其內係塗布該細胞誘引物(20),用以供細胞貼附於其內而作為該細胞進行移行之起點,一直線跑道(42),以一端連通該起始部(41)而向外延伸約5公釐長,寬度約為50微米,而該跑道(42)內係塗部該細胞誘引物(20)。
更進一步而言,該細胞移行組(40)係得藉由具防水油墨之細字筆以人工方式繪製於該載體(30)上,再將該細胞誘引物(20)塗布於該起始部(41)與該跑道(42)內;亦或得將該細胞誘引物(20)作為印刷機台之墨水,藉由一3D印刷機台於該載體(30)上列印完成該細胞移行組(40)。
藉由本發明之第一實施例所揭細胞移行晶片(10),使用者僅須將預定濃度之細胞懸浮液滴於該起始部(41),使細胞貼附於該起始部(41)內,並且移除未貼附於該起始部(41)之細胞,再將該細胞移行晶片(10)置於一細胞培養箱培養,而後係得觀察該細胞於該跑道(42)移動之狀態。
本發明之第二較佳實施例所揭之細胞移行晶片、其製造方法以及細胞移行之檢測方法,大致上係相同於本發明之第一較佳實施例所揭者,惟,請參閱第二圖,不同處乃係在於本發明之第二較佳實施例所揭之
細胞移行晶片(10’)包含有二細胞移行組(40’),分別相間隔一預定距離而設於該載體(30’)上,而各該細胞移行組(40’)之起始部(41’)中係得分別用以貼附不同種類之細胞,如左邊之起始部內係用以貼附HT1080細胞,右邊之起始部內係用以貼附Hela細胞。據此,藉由本發明之第二較佳實施例所揭者,使用者除得同時於同一晶片上檢測不同種類細胞之移行狀態外;亦得透過於各該細胞移行組(40’)之跑道(42’)內塗布不同細胞誘引物,可同時於同一晶片上檢測相同種類細胞或不同種類細胞之移行狀態。
請參閱第三圖,本發明之第三較佳實施例所揭之細胞移行晶片、其製造方法以及細胞移行之檢測方法,大致上係相同於本發明之第一較佳實施例所揭者,惟,不同乃係在於本發明第三較佳實施例所揭之該細胞移行組(40”)係具有二跑道(42”),分別相對地連通該起始部(41”)而向外延伸,而各該細胞移行組(40”)之跑道(42”)中係分別塗布不同細胞誘引物(20”),如左邊之跑道內塗布膠原蛋白質,右邊之跑道內塗布纖維連接蛋白。據此,藉由本發明之第三較佳實施例所揭細胞移行晶片(10”),使用者除可於該兩跑道內分別塗布不同種類之細胞誘引物外,係得分別塗布不同濃度之細胞誘引物,皆可達成同時於同一晶片上檢測細胞於不同環境下之移行狀態之功效。
請參閱第四圖,本發明之第四較佳實施例所揭之細胞移行晶片、其製造方法以及細胞移行之檢測方法,大致上係相同於本發明之第三較佳實施例所揭者,惟,不同乃係在於本發明第四較佳實施例中,該細胞移行組(40''')係具有三跑道(42'''),分別以放射狀之排列方式設於該載體(30''')上而以其一端連通該起始部且向外延伸,其中,各該跑道(42''')中係分
別塗布不同濃度之細胞誘引物(20'''),如由左至右之跑道內係分別塗布濃度為5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml之膠原蛋白質。據此,藉由本發明之第四較佳實施例所揭細胞移行晶片(10'''),使用者除可於各該跑道(42''')內分別塗布不同濃度之細胞誘引物外,亦得分別塗布不同種類之細胞誘引物於各該跑道,皆可達成同時於同一晶片上檢測細胞於不同環境下之移行狀態之功效。
請參閱第五圖,本發明之第五較佳實施例所揭之細胞移行晶片、其製造方法以及細胞移行之檢測方法,大致上係相同於本發明之第一較佳實施例所揭者,惟,不同乃係在於本發明之第五較佳實施例中,該細胞移行組(40'''')更包含有一刻度尺(43''''),其上刻度係以1微米為1單位(圖中僅為示意),而設於該跑道(42'''')旁。據此,藉由本發明之第五較佳實施例所揭細胞移行晶片(10''''),使用者係得直接觀察得知該細胞於該跑道(42'''')內所移行之距離,此外,該刻度尺(43'''')之構件係得分別應用於本發明所揭第一至第四實施例,亦得達成相同之功效。
請參閱第六圖,本發明之第六較佳實施例所揭之細胞移行晶片、其製造方法以及細胞移行之檢測方法,大致上係相同於本發明之第一較佳實施例所揭者,惟,不同乃係在於本發明之第六較佳實施例中,該跑道(42''''')中所塗布之該細胞誘引物(20''''')係存在一濃度之梯度差,意即於該跑道(42''''')靠近該起始部(41''''')之處係塗布濃度較低之該細胞誘引物(20'''''),而於該跑道(42''''')遠離該起始部(41''''')之處係塗布濃度較高之該細胞誘引物(20''''')。據此,藉由本發明之第六較佳實施例所揭細胞移行晶片(10'''''),由於該細胞誘引物(20''''')於該跑道(42''''')內係具有一濃度梯度差,
用以促使細胞往濃度較高處移動而增加細胞移行速率。並且,細胞誘引物存在濃度梯度差之特徵係得分別應用於本發明所揭第一至第五實施例,亦能達成相同之功效。
實例一:製作細胞移行晶片(一)
取一長寬各為22公釐之方形蓋玻片,以極細之防水油性筆於該蓋玻片一面上繪製一直徑約為5公釐之圓形起始部,以及一長約5公釐、寬約1公釐之長形跑道。而後將該蓋玻片放於紫外燈下至少一小時進行殺菌處理。另取粉末狀之纖維連接蛋白,以無菌過濾後之緩衝液(PBS)製備成為濃度5μg/ml之纖維連接蛋白液。於該蓋玻片另一面,將製備完成之纖維連接蛋白液以微量分注吸管(pipette)佈滿該起始部內及該跑道內,而後將該蓋玻片置於無菌操作台內約一小時,移除該蓋玻片上多餘之纖維連接蛋白液,再將該蓋玻片放入無菌操作台內,直至風乾,即完成製備細胞移行晶片,如第七圖所示。
實例二:製作細胞移行晶片(二)
於本實例中之步驟及所用之材料係大致上與實例一相同,惟,不同者在於本實例係取已刻劃有細胞移行組輪廓之印章,並以製備好之纖維連接蛋白液作為印泥,藉由印章沾取該纖維連接蛋白液,將該細胞移行組印製之方式於一蓋玻片上,完成製備細胞移行晶片,如第八圖所示。
實例三:細胞培養
使用HT1080人類肌肉瘤細胞作為待測細胞,而該細胞之培養基為含有10%小牛血清之DMEM培養液,培養環境為37℃、5%二氧化碳之培養箱。
實例四:細胞移行能力測試
首先,以實例一之方式製作二細胞移行晶片,詳言之,先製備濃度分別為10μg/ml及2μg/ml之纖維連接蛋白液,其中,一細胞移行晶片係以低濃度之纖維連接蛋白液塗布於其起始部及跑道靠近該起始部處,而其餘跑道處係塗布高濃度之纖維連接蛋白液;另一細胞移行晶片係以高濃度之纖維連接蛋白液塗布於其起始部及跑道靠近該起始部處,而其餘跑道處係塗布低濃度之纖維連接蛋白液。
取實例三中之待測細胞懸浮液3μl(約為3.2x104個細胞),分別滴於該二細胞移行晶片中之起始部上,再將待測細胞培養於37℃培養箱一預定時間,用以使該待測細胞貼附於該起始部上。而後以新鮮細胞培養2ml液移除各該晶片上未貼附之待測細胞。再加入新鮮培養液2ml,於細胞培養箱繼續培養約24及48小時後,分別觀察細胞沿著該跑道移動之狀態,結果分別如第九圖及第十圖所示,其中,第九圖A及第十圖A係起始部為高濃度纖維連接蛋白液而分別於24及48小時之觀察結果;第九圖B及第十圖B係起始部為低濃度纖維連接蛋白液而分別於24及48小時之觀察結果。
由第九圖及第十圖之結果可知,該待測細胞確實可自該起始部沿著該跑道移動,並且於細胞置於起始點為低濃度之纖維連接蛋白液時,其移動效率較優於細胞置於起始點為高濃度之纖維連接蛋白液。此外,隨著細胞培養時間越長,細胞移行之距離亦隨之增加。因此,本發明所揭之細胞移行晶片確實可作為檢測細胞移行能力之工具,並且藉由該細胞誘引物之濃度梯度差,誘導細胞自低濃度處往高濃度處移動,得有效地增加細胞移行之效率。
綜上所述,本發明所揭細胞移行晶片係具有以下優點:其一、操作步驟簡單,增加檢測結果之正確度;其二、不須將細胞染色,僅須透過簡易倒立式顯微鏡觀察細胞移行之狀態;其三、藉由於該跑道旁設置刻度尺,便於使用者定量分析細胞移行之距離;其四、跑道係設為直線式,並且輔設有刻度尺,整體來說,重複實驗之結果係較習知技術所得者穩定,增加數據之可信度。
以上僅是藉由較佳實例詳細說明本發明,對於各該實施例所做的任何簡單修改或是變化,均應為本案申請專利範圍所得涵攝者。
Claims (18)
- 一種細胞移行晶片,係搭配至少一預定濃度之細胞誘引物,包含有:一載體;至少一細胞移行組,設於該載體上,具有一起始部,其內係得塗布一貼附因子,用以供一細胞貼附而作為該細胞進行移行之起點,至少一直線跑道,具有一預定寬度,以一端連通該起始部而向外延伸一預定長度,並於其內塗布該細胞誘引物;其中,該直線跑道之寬度係約為50μm。
- 依據申請專利範圍第1項所述細胞移行晶片,其中,該載體係為一預定大小之玻片。
- 依據申請專利範圍第1項所述細胞移行晶片,其中,該細胞誘引物係選自於由細胞生長因子及細胞外基質所組成之群。
- 依據申請專利範圍第3項所述細胞移行晶片,其中,該細胞外基質係選自膠原蛋白質、纖維連接蛋白、延展蛋白質及基質膠所組成之群。
- 依據申請專利範圍第1項所述細胞移行晶片,其係具有至少二細胞移行組,分別相間隔一預定距離而設於該載體上。
- 依據申請專利範圍第1項所述細胞移行晶片,其中,該細胞移行組係具有二跑道,分別相對地連通該起始部而向外延伸一預定長度。
- 依據申請專利範圍第1項所述細胞移行晶片,其中,該細胞移行組係具有至少二跑道,係以放射狀之排列方式設於該載體上。
- 依據申請專利範圍第5、6或7項所述細胞移行晶片,其中,各該跑 道係分別塗布不同種類之細胞誘引物。
- 依據申請專利範圍第5、6或7項所述細胞移行晶片,其中,各該跑道係分別塗布濃度相異之細胞誘引物。
- 依據申請專利範圍第1項所述細胞移行晶片,其中,該細胞誘引物係以不同濃度塗布於同一跑道中。
- 依據申請專利範圍第8項所述細胞移行晶片,其中,各該細胞誘引物係以不同濃度塗布於同一跑道中。
- 依據申請專利範圍第9項所述細胞移行晶片,其中,各該跑道係分別塗布濃度相異之細胞誘引物。
- 依據申請專利範圍第1項所述細胞移行晶片,其中,該細胞移行組更包含有一刻度尺,係對應地設於該跑道旁。
- 依據申請專利範圍第1項所述細胞移行晶片,其中,該直線跑道之寬度係為5~10個細胞寬。
- 依據申請專利範圍第1項所述細胞移行晶片,其中,該貼附因子係選自於由聚離胺酸、細胞外基質及任何用以促進細胞生長之物質所形成之群。
- 一種細胞移行之檢測方法,其包含下列步驟:步驟a:取如申請專利範圍第1至15項中任一所述之細胞移行晶片;步驟b:將一待測細胞置於該細胞移行晶片之起始部中;步驟c:將步驟b中之該細胞移行晶片進行細胞培養;步驟d:觀察該待測細胞於該細胞移行晶片之跑道內所產生之移動距離,分析該待測細胞之細胞移行能力。
- 一種如申請專利範圍第1至15項中任一所述之細胞移行晶片之製造方法,係以一細胞誘引物作為墨水,而於一載體上列印出由該細胞誘引物所構成之至少一跑道。
- 依據申請專利範圍第17項所述細胞移行晶片之製造方法,其中,該跑道係藉由3D印刷技術所印製而成者。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
TW102125259A TWI627275B (zh) | 2013-07-15 | 2013-07-15 | Cell migration detection method, cell migration wafer and preparation method thereof |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
TW102125259A TWI627275B (zh) | 2013-07-15 | 2013-07-15 | Cell migration detection method, cell migration wafer and preparation method thereof |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TW201502271A TW201502271A (zh) | 2015-01-16 |
TWI627275B true TWI627275B (zh) | 2018-06-21 |
Family
ID=52718287
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TW102125259A TWI627275B (zh) | 2013-07-15 | 2013-07-15 | Cell migration detection method, cell migration wafer and preparation method thereof |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
TW (1) | TWI627275B (zh) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20100240086A1 (en) * | 2009-03-20 | 2010-09-23 | Dmitry Kashanin | Biochip assembly and assay method thereof |
CN102803511A (zh) * | 2009-11-23 | 2012-11-28 | 俄亥俄州立大学 | 用于影响肿瘤细胞生长、迁移和侵袭的材料和方法 |
-
2013
- 2013-07-15 TW TW102125259A patent/TWI627275B/zh not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20100240086A1 (en) * | 2009-03-20 | 2010-09-23 | Dmitry Kashanin | Biochip assembly and assay method thereof |
CN102803511A (zh) * | 2009-11-23 | 2012-11-28 | 俄亥俄州立大学 | 用于影响肿瘤细胞生长、迁移和侵袭的材料和方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
TW201502271A (zh) | 2015-01-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Barron et al. | Laser printing of single cells: statistical analysis, cell viability, and stress | |
Kaigala et al. | Microfluidics in the “open space” for performing localized chemistry on biological interfaces | |
Kim et al. | Microfabrication of high-resolution porous membranes for cell culture | |
CN103257213B (zh) | 一种全集成高通量细胞水平微流控芯片药物评价系统 | |
Cadart et al. | Fluorescence eXclusion Measurement of volume in live cells | |
US20210018491A1 (en) | Device and method for force phenotyping of cells for high-throughput screening and analysis | |
Tu et al. | A microfluidic chip for cell patterning utilizing paired microwells and protein patterns | |
Tronser et al. | Droplet microarray: miniaturized platform for rapid formation and high-throughput screening of embryoid bodies | |
Koppes et al. | Complex, multi-scale small intestinal topography replicated in cellular growth substrates fabricated via chemical vapor deposition of Parylene C | |
Cerchiari et al. | Formation of spatially and geometrically controlled three-dimensional tissues in soft gels by sacrificial micromolding | |
US8765472B2 (en) | Methods and device to constrain multicellular arrangements in stable, stationary and reproducible spatial configuration | |
Lagoy et al. | Microfluidic devices for behavioral analysis, microscopy, and neuronal imaging in Caenorhabditis elegans | |
Ahmed et al. | Microengineered 3D collagen gels with independently tunable fiber anisotropy and directionality | |
Keys et al. | Assembly and use of a microfluidic device to study cell migration in confined environments | |
CN202322856U (zh) | 用于高通量、高分辨免疫荧光染色的细胞培养装置 | |
Liu et al. | Perfused drop microfluidic device for brain slice culture-based drug discovery | |
Zegman et al. | Measurement and manipulation of cell size parameters in fission yeast | |
Sarkar et al. | A protocol for fabrication and on-chip cell culture to recreate PAH-afflicted pulmonary artery on a microfluidic device | |
Schmidt et al. | The CellClamper: a convenient microfluidic device for time-lapse imaging of yeast | |
TWI627275B (zh) | Cell migration detection method, cell migration wafer and preparation method thereof | |
Li et al. | Development of a bioprinting approach for automated manufacturing of multi-cell type biocomposite TRACER strips using contact capillary-wicking | |
Cohen et al. | Measuring cell–cell tugging forces using bowtie-patterned mPADs (Microarray post detectors) | |
Rothermel et al. | Cellular microbiaxial stretching assay for measurement and characterization of the anisotropic mechanical properties of micropatterned cells | |
Bose et al. | Fabrication and mechanical properties measurements of 3D microtissues for the study of cell–matrix interactions | |
Xie et al. | Traction force measurement using deformable microposts |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Annulment or lapse of patent due to non-payment of fees |