TWI548744B - 一株可以大量生產藻紅素、藻藍素及異藻藍素的顫藻生物材料Oscillatoriales sp. HSW-1 - Google Patents
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Description
健康食品與醫藥(藻紅或藻藍蛋白作為原料),環境工程(氮磷的去除),能源(固碳)
一、藻類於保健食品之應用
藻類富含豐害的營養成份,目前綠藻及藍藻皆為已商品化的保健食品。
(一)綠藻
綠藻(green algae,2-8μm)又稱為小球藻(Chlorella),為一種單細胞藻。二次大戰之後,除了美、德之外,日本也相繼投入綠藻的研究。宮田教授於1959年,開始大量培養並製成食品銷售(http://aimat.myweb.hinet.net/science/algae.htm)。目前,綠藻是極受歡迎的天然綠色食品之一。
綠藻的顏色呈現翡翠綠,所含的葉綠素是植物界之冠。綠藻中含約60%的植物性蛋白質、20%的複合性澱粉、11%的脂肪(82%為不飽和脂肪酸)、豐富的DNA及RNA(核酸)、超過23種的維生素及礦物質(如葉綠素、礦物質、維他命、纖維質、葉酸、核酸、菸鹼酸、鈣、鎂、鐵、鋅)、8
種必需氨基酸;但不含藻膽蛋白。綠藻為鹼性食品,可調整人體成為正常弱鹼性體質。綠藻的光合效率也比其他植物快數十倍,同樣土地面積所產生的營養價值比小麥大出60倍以上,所含葉綠素遠比其他植物豐富。
(二)螺旋藻
螺旋藻(Spirulina),俗稱藍藻(Blue algae,5-8mm,長約0.3-0.5mm),為多細胞藻類,適合在氣候溫熱、年降雨量少的地區,可生長於濃度為海水6~7倍的鹹水湖中。法國克里門特博士,於1973年5月的國際蛋白質會議正式發表對藍藻的成分、生態、培養方法、安全性、保健效果等的研究成果,立即受到全世界的注目(http://aimat.myweb.hinet.net/science/algae.htm)。
螺旋藻是藍綠藻的一種藻類,但其光合作用與其他植物不同,不是貯存澱粉而是貯存動物性的肝醣,並能合成蛋白質、維生素、礦物質、葉綠素、酵素等營養素。由於其所含的營養素極為豐富且完整,又因為細胞壁較薄,營養素容易被人體所吸收,所以被譽為最完善的天然營養食品。例如:螺旋藻含有:(1)八種人體所需又無法自身合成的氨基酸,蛋白質含量高達60~70%,比大豆(33~35%)多1倍以上,甚至是牛肉(18~20%)的3倍以上,因此可當做優質的高蛋白質食品。(2)維生素,包括維生素B1、B2、B3、B6、B12和維生素E、A。其中b-胡蘿蔔素的含量豐富為所有食物之冠,比胡蘿蔔的含量還要高出10倍。(3)礦物質,包括鈣、磷、鎂、鐵等,其中鐵的含量比一般豐富鐵質食物多出12倍,是含鐵質量最豐富的食物。(4)葉綠素為普通蔬菜含量的10倍以上。(5)gamma-次亞麻油酸,是目前所有天然食品中最高的。在天然食品中能被人體直接吸收的gamma-次亞麻油酸只存在於母乳和螺旋藻中。此外,螺旋藻中還含有不飽和脂肪酸、藻藍素、酵素和小分子多醣體等高生物活性物質,人體吸收消化率高達
86%(鄭俊明,2007)。
市場規模-藍藻的優越營養價值,目前世界上已有很多國家進行生產及利用,全世界年產量約達三千餘公噸,主要生產國家有中國、印度、美國、墨西哥、泰國等,主要用途作為保健食品、營養補充劑、食品添加物等(http://www.cabco.com.tw/chinese/05.htm)。目前台灣是藍藻的主要出口國家之一,以遠東藍藻工業股份有限公司為例,年產量藍藻200噸粉末以上,品質早就已經達世界級的標準外(廖遠東,2006;江善宗、殷儷容,2006)。
至於綠藻,台灣也是綠藻全世界最大的生產國(經濟部與產業工會統計資料,2006),台灣綠藻公司,綠藻年產量達1200公噸以上,全球市佔率達70%。另外,遠東藍藻工業股份有限公司,綠藻年產量1000噸粉末以上(廖遠東,2006;江善宗、殷儷容,2006)。
市場價格與潛力-僅管藍藻具有藻藍素,但是藍藻的培養成本很高,傳統培養基(BG-11)的營養份不夠,必須經常添加昂貴的維生素B12,而且若為海藻則需有海水,不但成本高,興建工廠必須臨海也十分不便利。這也造成藻藍素價格高達每亳克2-25美元(鄭俊明,2007),比黃金還貴上30-500倍(金價每盎司1700美元,每盎司31103.5毫克;因此金價每毫克0.055美元)。若能夠獲得藻膽蛋白產量高的淡水型藻種,則可以大幅降低藻藍素生產的成本。
二、藻膽蛋白
藻膽蛋白常見於原核的藍綠菌,真核的紅藻,單細胞真核的隱藻,灰膽藻的藍色小體(cyanelles)(Hemlata et al.,2009);多細胞的紅藻有髮菜與紫菜(Yabuta et al.,2010)。
構造、功能及種類-藻膽蛋白是一種光合作用的輔助色素,
是巨大複合物-藻膽體(phycobilisomes,PBSs)所形成的有機體,藻膽蛋白由蛋白質與四個發色團-藻膽色素(phycobilins)A、B、C、D,以共價鍵結合而成,是一群色彩鮮豔且具有螢光的水溶性色素,該蛋白會捕捉特定波長的光能,並將其傳遞至葉綠素,示意圖如圖01所示。為了捕捉光,它必須位於類囊體膜(thylakoid membrane)的外表。藻膽蛋白(phycobiliprotein)有四個種類:藍綠色的異藻藍素(allophycocyanin,APC)、深藍的藻藍素(phycocyanin,PC)、深紅的藻紅素(phycoerythrin,PE)及橘色的藻青素(phycocyanobilin,PCB)。
用途與重要性-藻膽蛋白的用途呈現多樣化,市場潛力無窮。藻膽粗蛋白是一種天然色素可添加於食品,而經純化後可作為醫療與保健之用。目前市場上,各種天然的藻色素可用於乳製品、口香糖、果凍等食品,以及眼影與口紅等化妝品工業(廖遠東,2006;鄭俊明,2007)。其在醫學的實務上亦十分重要,不但可以做為螢光追蹤染劑、免疫定量標誌染色法、螢光顯微法(Eriksen,2008);還可用於醫療保健上,目前已證實其具有抗氧化的作用(Romay et al.,2003;Guan et al.,2009)、抗畸胎性(Guan et al.,2009)、抗濾過性病毒(Murugan and Radhamadhavan,2011)、抗癌與抗腫瘤(Wang,2008;Zhang et al.,2011)、抗過敏(Shih et al.,2009)、增強免疫能力(Li et al.,2006)、因為抗氧化能力而能保護肝臟(Nagaraj et al.,2011)、保護神經的作用(Romay et al.,2003)、自由基清除(Bhat and Madyastha,2000;Zhou et al.,2005)、抗發炎(Shih et al.,2009;Romay et al.,2003)、老年痴呆症(Romay et al.,2003)、降低血脂(Nagaoka et al.,2005)等等,不少在製藥上有十足的貢獻。
市場與潛力-藻膽蛋白在日本已被核准作為食品著色劑。而國內,遠東藍藻工業股份有限公司推出健康食品Apogen健康滴液,且年產
藍藻200噸以上的粉末(廖遠東,2006;江善宗、殷儷容,2006)。而美國市場的藻藍素年總產值為5-10百萬美元(Sekar and Chandramonhan,2007)。由此可見,由菌體(藍藻)生產具有高濃度的特定藻膽蛋白,深具商業的價值。藍藻能提供的以藻藍素為大宗,其它藻膽蛋白則因藻種較不易發現,研究的文獻較少。
藻膽蛋白的萃取-目前已知藻膽蛋白是一種螢光強度強且穩定性高的蛋白質,因此有關藻膽蛋白的萃取方式則備受重視。藻膽蛋白的萃取方法很多種,包括:傳統的均質法(Homogenization)、超音波聲裂法(Sonication)、溶菌酶法(Lysozyme)、熱震法(Heat Shock)、凍融法(Freezing and thawing)、超臨界流體萃取法(Nitrogen lysis)(Hemlata et al.,2009)。影響的因子則包括:各種不同的緩衝溶劑、酸鹼值(pH)、鹽度、凍解法的溫度等等。而Galland-Irmouli et al.(2000)與Hemlata et al.(2009)都提到凍融法的萃取效果較傳統均質方法佳。前者,將紅藻放入液態氮凍結,解凍後再加入0.02M pH 7.0的磷酸緩衝溶液,並以轉速24,000rpm進行均質,萃取出藻膽蛋白。日本專利(1995)大日本公司也指出,若將紅藻經超音波處理、反覆凍結、解凍、擠壓及以醣分解酵素水解等方式使其細胞壁破裂後,可加速紅藻中的藻膽蛋白的抽出。
純化技術-Hemlata et al.(2009)說明純化的步驟有四道,第一道就是萃取,其上澄液稱作是粗萃取物(Crude extract);第二道則是以硫酸銨溶解後進行離心,再取其沈澱物;第三道則是純化的關鍵,可用透析的技術來分離不同的物質;最後一道則是尺寸的篩選,利用如Sephadex G-25 or G-100的分子篩來分級。至於純度的指標,一般都採用特定藻色素波長下的吸收度除以芳香族雜質的波長(280nm)的吸收度,對藻紅素而言,即A565/A280(Galland-Irmouli et al.,2000;Su et al.,2010)。若粗萃取物的純度在
0.7以上,則稱為食品級;3.9以上則為反應級,4.0以上則是分析級。有關藻膽蛋白的經濟性取決於是否擁有性能優越,產量豐富的藻種。
藻膽蛋白的產生量-巨藻紫菜富含藻紅素,除國內 學者台大周宏農教授外,中國大陸學者肖海芳等以脈衝超音波方法所得最佳的結果,純度僅0.365,粗提液產率為32.49mg/g-cell。Mishra et al.(2011)從海洋的偽魚腥藻Pseudanabaena sp.中萃取藻紅素,經硫銨沈澱後得到的產率為25mg/g-cell,純度為2.1。Mishra et al.在(2010)的研究中發現,以4mg/ml的檸檬酸可以有效保存藻紅素至少30-45天。Mishra et al.在(2012)的研究中發現以綠光照射可以改善生產率,最高到39.2mg/L,藍光到32.2mg/L,紅光到10.9mg/L。未改善是13.6mg/g-cell,單位不同無法比較。而其濃度也不高僅分別為0.82,0.94,0.89g/L。
三、本研究先前發表的情形
本研究團隊曾參加中華民國第52屆全國中小學科學展覽會(101.7.27),囫圇吞「藻」-天價藻膽蛋白質快篩法,該項題目獲得該年度最佳創意獎。當時從內灣山區有獲得一天然的藻株,為本專利的母株,食品所的生物資源保存及研究中心當時對於鑑定結果的說法並不明確,認為可能是新種。
現在該母株經本實驗室團隊同仁的努力,進行各項環境壓力的測試,整個生理特性與過去截然不同,過去僅生產藻紅素,而現在可以生產三種藻膽蛋白。現在經食品所證實為顫藻,爰此而申請本專利,並進行藻種的寄存與進行存活試驗等程序。
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一、研究動機與目的
藻膽蛋白用途廣泛,既可以作為天然色素廣泛應用於食品、化妝品、染料等工業,又可製成螢光試劑,用於臨床醫學診斷和免疫化學及生物工程等領域,極具經濟效益(比黃金還貴)。因而研究和開發藻膽蛋白具有重要的理論和實際意義。在整個藻膽蛋白的開發上,尤其是較稀少的藻紅素,全球皆注視在紫菜(巨藻)的生產與萃取。然而,一般而言,植物的成長較藻類慢,而真核多細胞的巨藻,又較藍綠藻(菌)來得慢。本專利以藍綠藻(菌)單一株藻株(顫藻)來進行各種藻膽蛋白的生產,在效率上自然能夠獲得較高的藻膽蛋白產量,進而可以大幅降低藻膽蛋白的生產成本。
二、顫藻的特性
(一)顫藻外觀
藻種的鏡檢照片,如圖1所示。該顫藻為桿狀與一般絲狀的顫藻不同,鮮有單獨一節,絶大多數為六個或六的倍數串接而成,六節的長度約15-25微米,培養後溶液呈現棕色。
(二)藻種培養生長曲線
有關藻種的培養。視覺色度從棕色到深咖啡色。在營養份一
次給定的培養情形,成長的最高峰僅有2.437g/L。不過以充足地供應空氣中的二氧化碳外,每日定時更換BG-11培養基,並排除易沈澱的藻渣。在如此充足的營養源給定下,達到穩定期時約二週,大幅累積的藻濃度可高達7.0g/L為約其他溫泉藻(4.1g/L)和聚球藻(1.9g/L)的2~3倍以上。
三、藻種基因鑑定結果
顫藻送食品所的生物資源保存及研究中心鑑定,確認為Oscillatoriales sp.經本實驗室以發現者黃斯煒的名字命名為菌株HSW-1。有關的基因序列,如表1所示。該藻目前沒有類似文獻論及。不像台灣的溫泉藻接近日本的學者從溫泉找到的藻株,以及台灣成大朱信教授於台東溫泉找到的藻株,和輔大呂誌翼教授從苗栗泰安溫泉找到的藻株。
四、顫藻的藻膽蛋白分析結果
(一)藻膽蛋白萃取後的外觀結果與產量
圖2為藻膽蛋白經凍融法萃取後稀釋40倍的外觀結果。圖的左邊為控制組的溫泉藻(1),右邊為本專利申請的顫藻(2);顫藻(2)含有藻紅素,藻藍素和異藻藍而呈現紫色。為了得到合理量化的吸光度,必須先稀釋40倍。顫藻和溫泉藻一樣,最大藻膽蛋白皆可以濃稠到32 OD units以上。
(二)蛋白質的分子量
圖3為藻膽蛋白經SDS-PAGE電泳分析的結果。左圖為來自溫泉藻(1)只有藻藍素的控制組;而右圖為本專利申請的顫藻(2),其產生的藻膽蛋白(後面的表2會說明含有藻紅素,藻藍素和異藻藍)。左右圖中各條(well)依序為最左邊條1的蛋白質註記(protein marker),條2,3,4為注入
20μl變性後的同一藻膽蛋白樣品。框線內為藻膽蛋白,可看出藻膽蛋白與藻藍素的蛋白質大小約同為15kDa。而其上方有不明顯的亮帶,主要是藻膽蛋白是由三或四個以上的次單元所組成,因此沒有完全變性的部份組合會形成較大的分子,因分子量較大,所以移動較慢而在上方。
根據Mishra et al.(2011)的研究結果顯示,偽魚腥藻的藻紅素分子量大小約為15kDa,而且根據其他學者的研究亦指出,藻膽蛋白的大小約略是15kDa,由ab的subunit所組成。由於在相同的條件下,我們的顯色皆較其他學者顯著,這說明本研究所得到的藻,可以產出大量的藻膽蛋白,十分難能可貴。
(三)各種藻膽蛋白的產率
根據文獻Soni et al.(2006)指出早在Bennet and Bogorad(1973)就已證實分別可用OD620,OD650,OD540來計算C-PC,C-APC,C-PE的含量。這用來輔助葉綠素捕光不足的藻膽蛋白,可捕捉可見光,產生螢光的成分。
表2為顫藻的藻膽蛋白粗蛋白及硫酸銨沈澱純化後的產率與吸光度。粗蛋白藻紅素的純度最高可達0.767,其它藻藍素和異藻藍素分別為0.645和0.630。依據過去研究,相較於顫藻母株的純度為0.72,顯得不相上下。以藻紅素來看,本專利顫藻的藻紅素經初步的硫酸沈澱後可得到最高的2.378,而中國大陸學者對於紫菜(巨藻)的研究,肖海芳等以脈衝超音波方法所得最佳的結果,純度僅0.365。就算是現階段最有名氣的印度研究學者,其在硫酸銨的純度為2.1。
就產率來看,粗蛋白的藻紅素僅有160.8mg/g-cell(與過去顫藻母株的162.58mg/g相近),而其它異藻藍素和藻藍素卻有高達285.5mg/g-cell和190.2mg/g-cell。只可惜,在硫酸銨沈澱後,異藻藍素和藻藍素
的損失較大,分別僅剩最大的31.1mg/g-cell和43.8mg/g-cell,而藻紅素卻仍然有66.8mg/g-cell。當然這與硫酸銨沈澱的技巧有關,以後熟練後或許會更高。不過,與中國大陸或國外的研究相較,中國大陸學者肖海芳等對巨藻紫菜粗提液為32.5mg/g-cell,而本專利在粗蛋白的量是160.8,明顯是中國肖海鈴等的五倍(160.8/32.5)。Mishra et al.(2011)從海洋的偽魚腥藻Pseudanabaena sp.中萃取藻紅素,經硫銨沈澱後得到的產率為25mg/g-cell。
事實上,本專利還有很大的成長空間,Mishra et al.在(2012)的研究中發現以綠光照射可以改善生產率,最高到39.2mg/L,藍光到32.2mg/L,紅光到10.9mg/L。未改善前是13.6mg/g-cell。而且Mishra et al.在(2010)的研究中發現,以4mg/mL的檸檬酸可以有效保存藻紅素至少30-45天。本專利是印度學者的六倍。由於其濃度不高僅分別為0.82,0.94,0.89g/L。而本專利在一次給的養份下為2.437g/L,連續饋料下最高可達7.0g/L。
依據文獻,產率大於100mg/g,即越過值得開發的門檻。另外,其純度皆大於0.7,依據文獻Hemlata et al.(2011)的說法,凡純度在0.7以上即具有食品級開發的價值。
四、結論與應用
篩選獲得高藻膽蛋白產量的新屬藻類-顫藻,其藻紅素更是稀有而可貴。
(一)在藻種的產率方面,顫藻最高可培養到7.0g DCW/L以上,具極高的經濟價值。
(二)在藻膽粗蛋白的品質上,顫藻藻紅素、異藻藍素及藻藍素的產率分別為160.8、285.5及190.2mg/g,純度分別為0.767、0.630及0.645。由於這些粗蛋白的純度皆大於0.7,已達到食品級的水準;產率大於100mg/g,值得開發的門檻。
(三)在藻膽蛋白硫酸銨沈澱後的品質上,顫藻藻紅素、異藻藍素及藻藍素的產率分別為最高的66.8.8、31.1及43.8mg/g,純度分別為
2.378、0.905及1.326。
(四)顫藻在藻膽蛋白的產值上,每公升最高可達28,516.5美元,比起現有黃金的價格高上500倍,其寛廣的應用性更可加惠普羅大眾。
圖1、顫藻的鏡檢照片。
圖2、藻膽蛋白經凍融法萃取後的外觀結果:左邊為控制組的溫泉藻(1),右邊為本專利申請的顫藻(2);顫藻(2)含有藻紅素,藻藍素和異藻藍而呈現紫色。
圖3、藻膽蛋白經SDS-PAGE電泳分析的結果:左圖為來自溫泉藻(1)只有藻藍素的控制組;而右圖為本專利申請的顫藻(2),其產生的藻膽蛋白(表2說明含有藻紅素,藻藍素和異藻藍)。左右圖中各條(well)依序為最左邊條1的蛋白質註記(protein marker),條2,3,4為注入20μl變性後的同一藻膽蛋白樣品。框線內為藻膽蛋白,可看出藻膽蛋白與藻藍素的蛋白質大小約同為15kDa。
〔註:蛋白標記(Protein Marker)為EZColor IITM,適用於4~15% SDS-PAGE,每條只需5mL的載量。紅色為70kDa,往下依序為55,40,35,25,15kDa。〕
一、藻的培養
培養基,選用英國藻種庫所建議適用於藍綠菌的BG-11成份,如表3所示。其磷含量較傳統BG-11的磷量增加些許。
二、SDS-PAGE藻膽蛋白分析
1. 藥品
(1)30% acrylamide mix
(2)1.5M Tris-Cl(pH8.8)
(3)1M Tris-Cl(pH 6.8)
(4)10% APS
(5)TEMED
(6)10% SDS
2. 藻膽蛋白分析程序
(1)將上述收下來2mL tube中之色素液體進行離心14,000rpm、10min,以去除藻體殘骸。
(2)取40μl樣品添加變性劑後置入沸騰水中100℃、10min,以利蛋白質變形為一維結構進行SDS PAGE分析分子量大小,進一步辨別藻藍、藻紅蛋白。
(3)將個別變性後的樣品取20μl,注入預先製作之SDS PAGE中,以120V、2hr跑膠。
(4)將跑完的膠片取下進行Coomassie blue染色、2hr,以利蛋白質染色。染色後,再將膠片使用甲醇/醋酸進行3hr的去染。去染後的膠片將以保存液保存於4℃中。
3. 器材設備
(1)Tris-Glycine electrophoreses buffer(電泳液)。
(2)BioRad Mini Protein System(鑄膠台、鑄膠器、齒模等)。
4. SDS-PAGE製膠方法
(1)依據Molecular Cloning操作手冊進行(p.18.52)。
(2)使用BioRad Mini Protein System進行。
(3)選擇12,15% Resolving gel concentration與5% Stacking gel concentration進行操作。
三、硫酸銨沈澱方法與流程
(1)取出100mL藻液離心後添加10mL磷酸緩衝液(pH 7.2),進行-20℃/4℃反覆凍融兩次,定義此為粗萃藻膽蛋白。
(2)此粗萃藻膽蛋白使用0~25%,25~60%硫酸銨沉澱分劃實驗進行,將沉澱樣品離心8500rpm兩次後,之後使用5mL的磷酸緩衝液回溶沉澱物,定義此為純化後之藻膽蛋白。
(3)將純化後之藻膽蛋白使用Cellu‧Sep H1透析袋(Membrane Filtration Products,Inc,USA)進行透析。將5mL液體樣品放進袋中,利用透析夾將透析帶兩端夾住後放進磷酸緩衝液進行透析overnight,之後將5ml透析後樣品利用DR400U分光光度計測定分光,並使用Bennet and Bogorad(1973)學者提出方法分析藻膽蛋白濃度。
註:Cellu‧Sep H1規格(NWCO:nominal 50,000,Flat width:28mm,Wall thickness:18μm,Length:50cm)
四、研究設備及器材
(1)高速冷凍離心機(Refrigerated Centrifuge):No.10165,SIGMA 2-16PK,SIGMA(德國),最高轉速15,300rpm,轉盤容量為16x50mL。
(2)分光光度計(UV-VIS spectrophotometer):DR4000U,HACH(美國):光束:1mm;光度計精準度:5 mAbs at 0.0 to 0.5(1% at 0.50 to 2.0 Abs),±1.5nm。
(3)半微量分析電子天平:XR 205A,Precisa,Swiss.Precision,0.0001g;max.load,205g。
(4)強力震盪器(Vortex):GDS150,Gene Pure。
(5)顯微鏡:Olympus BH-2。
(6)磁石攪拌機(附加熱器):HMS-212,Fargo Instrument。
(7)烘箱:DS-60,Deng Yng,Taipei。
(8)超純水製造機:Aqua MAX-ultra 370,Young Lin Instrument,Korea。
(9)高溫高壓滅菌釜:TM-329,TOMIN,Taipei。
(10)冷凍乾燥機:FDU1200,Eyela associated with a pump,GCD136x,Ulvac。
TW 中華民國 食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心2012/10/29 BCRC980024。
<110> 黃思蓴Hwang,Sz-Chwun 林昀輝Lin,Yun-Huin 何欣怡Ho,Hsin-Yi 王復暐Wang,Fu-Wei 黃斯煒Huang,Shi-Wei
<120> Oscillatoriales sp.HSW-1 that can produce phycoerythrin,phycocyanin,and allophycocyanin
<130> TW 101129995
<140> TW 102103047
<141> 2013-01-25
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1436
<212> DNA
<213> Oscillatoriales
<308> Genbank/KC621875
<309> 2013-12-31
<313> (1)..(1436)
<308> BCRC/BCRC980024
<309> 2012-10-29
<313> (1)..(1436)
<400> 1
Claims (1)
- 一種顫藻生物材料,該顫藻生物材料可以生產藻膽蛋白,且該顫藻生物材料為Oscillatoriales sp.HSW-1(Gen Bank:KC621875),寄存於財團法人食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心,寄存編號為BCRC980024,又該顫藻生物材料的基因序列包含SEQ ID NO:1。
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TW102103047A TWI548744B (zh) | 2013-01-25 | 2013-01-25 | 一株可以大量生產藻紅素、藻藍素及異藻藍素的顫藻生物材料Oscillatoriales sp. HSW-1 |
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- 2013-01-25 TW TW102103047A patent/TWI548744B/zh active
Non-Patent Citations (3)
Title |
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GenBank: HQ904134.1 2011/03/05 * |
李秀珠等,環境因子對篩選之Oscillatoria sp. Wu1生產藻膽蛋白之研究,http://cyc2012.dyu.edu.tw/pdf/E-6-%E7%92%B0%E5%A2%83%E5%9B%A0%E5%AD%90%E5%B0%8D%E7%AF%A9%E9%81%B8%E4%B9%8BOscillatoria%20sp.%20Wu1%E7%94%9F%E7%94%A2%E8%97%BB%E8%86%BD%E8%9B%8B%E7%99%BD%E4%B9%8B%E7%A0%94%E7%A9%B6(%E8%A8%B1%E9%8A%98%E5%B1%95).pdf,2012/12/9 * |
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