TWI432573B - 使用米多胜肽／核酸進行植物改良 - Google Patents

Description

使用米多胜肽/核酸進行植物改良

本發明主要是以製備基因轉殖植物之方法，將重組DNA構築體(recombinant DNA construct)轉型進入宿主植物，並在此宿主植物中表現此一特定水稻多胜肽，進而產生一基因轉殖植物之方法。

篩選影響植物重要性狀之多胜肽一直是各界關注的課題，例如，提高產量或提高植物對環境壓力的抗壓性等特性的多胜肽。同時，將這些多胜肽編碼基因轉殖入宿主植物中，亦可使宿主植物具有這些多胜肽所表現的特性。

本發明乃是基於篩選出數種水稻多胜肽及其編碼核苷酸，這些多胜肽使稻米表現出各種不同的重要性質，例如：種子重量/尺寸及稻穗型態、大小或密度。

因此，本發明係有關於製備基因轉殖植物的方法，將一重組DNA構築體轉型(transforming)進入宿主植物，在植物細胞中表現一特定多胜肽，其胺基酸序列與表一中選取之序列編號：1-49、99-114及149胺基酸序列的相似度至少達80%以上(例如，85%、90%、95%、98%、99%或100%)。上述重組DNA構築體可包含表一中選取之序列編號：50-98、115-148、150及151之核苷酸序列，以及在植物細胞中具有功能之啟動子序列(promoter sequence)，且此啟動子序列係以可人為操作的方式與上述核苷酸序列 相連結。

製備完成的之基因轉殖植物可表現出一或多個與宿主植物相關之特性：(a)對環境壓力的耐受性提高，如：乾旱、寒冷、高溫、高鹽、貧瘠環境、植物病變、除草劑、極度滲透壓不平衡、病原或蟲害；(b)促進植物細胞生長；(c)改善或降低半乳甘露聚醣(galactomannan)、木質素(lignin)、纖維素(cellulose)、類黃酮素(flavonoid)或植物生長調節素(growth regulator)等之產量；(d)經由調節光合作用、碳水化合物之使用及/或攝取、氮素之使用及/或攝取、磷之使用及/或攝取、礦物質之使用及/或攝取以促使產量增加；(e)種子油、澱粉及/或蛋白質之產量提高；及(f)同源重組(homologous recombination)速度增加；(g)增加種子之大小或重量；(h)增加穗長(panicle length)或種子密度；(i)開花、授粉或受粉效率之提昇；及(j)提高種子生長發育及成熟速度。

基因轉殖植物係一種透過轉型(transformation)或重組(recombination)等方法，加入外來基因或增加原生基因之數量而改變其基因組(genome)的植物。

另一方面，本發明亦提供一種抑制任一項前述多胜肽在植物細胞中表現的方法，將包含多核苷酸及啟動子序列(promoter sequence)的DNA構築體引進植物細胞或植物中。此多核苷酸的核苷酸序列與標的多胜肽之多核苷酸序列互補。因此，DNA構築體在植物細胞或植物中所表現之RNA分子，可以一反義RNA(antisense RNA)或一干擾RNA(interfering RNA)之模式抑制前述多胜肽之表現。 本發明亦包含上述任一重組DNA構築體以及含有此DNA構築體的植物細胞或基因轉殖植物。接下來將詳細說本發明之實施例。同時，也將透過下列的實施例及申請專利範更深入闡明本發明其它特質與優勢，使其更為明顯易懂。

本發明篩選出66個分離的水稻多胜肽(序列編號：1-49、99-114及149)及其具有相等功能之變型，變型指的是其胺基酸序列與序列編號：1-49、99-114及49其中之一胺基酸序列具有至少65%的相似度(如，70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%或99%)，且與前述水稻多胜肽具有相同功能的多胜肽。

在此「分離的多胜肽」指一本質上在自然情況下不具有與其相關連之多胜肽的分子，意即，一含多胜肽之混合物，具有低於20%乾燥重量比的連結分子。純度可經由任何適當方法測得，如管柱層析(column chromatography)、聚丙烯醯胺膠體電泳(polyacrylamide gel electrophoresis)及高效能液相層析(High-performance liquid chromatography,HPLC)。

兩段胺基酸序列之序列相似度可由Karlin and Altschul發表於Proc,Natl.Acad.Sci.USA 87：2264-5 2268,1990的運算法以及Karlin and Altschul發表於Proc,Natl.Acad.Sci.USA 5873-5877,1993中改良之計算法計算而得。此計算法係併入Altschul等人發表於J.Mol.Bio.215：403-410,1990所述之NBLAST及XBLAST軟體中運算。BLAST核苷酸搜尋與NRLAST軟體一起進行，(比數 (score)=100，字長(wordlength)=12)，以取得與本發明核酸分子同源之核苷酸序列。BLAST蛋白質搜尋與XBLAST軟體(比數=50，字長=3)進行，以取得與參考多胜肽同源之胺基酸序列。根據Altschul等人發表於Nucleic Acids Res.25：3389-3402，1997中所述，利用Gapped BLAST取得間隙對位(gapped alignments)序列以做為比較。使用BLAST與Gapped BLAST軟體時，亦需使用個別軟體(如XBLAST及NBLAST)之預設參數。參見www.ncbi.nlm.nih.gov。

表1中列出前述66個水稻多胜肽的GenBank登錄號(GenBank accession numbers)以及這些多胜肽的功能。此些水稻多胜肽的胺基酸序列及其編碼的核苷酸序列請參考隨附之序列表(序列編號：1~序列編號：130、序列編號：149~序列編號：150)。編碼特定水稻多胜肽的基因體序列請參考隨附之序列表(蛋白質2~3、50~66；分別對應至序列編號：131~序列編號：148、序列編號：151)。

前文所述之多胜肽與一或多個植物重要特性有關，例如水稻的種子產量、穗的發育形成及/或對環境壓力的耐受度。這些多胜肽可以在基因轉殖植物中生成，以改善植物表現型特徵(phenotypic properties)或改善對環境壓力之反應。

本發明亦揭露一種編碼上述多胜肽之分離的多核苷酸(isolated nucleic acid，如：序列編號：50-98、115-148、150、及151)。分離的核酸表示核苷酸的結構與任何自然產生之核酸或任何自然產生的染色體核酸片段的核酸不同。舉例來說，分離的核酸涵蓋(a)一段自然生成之染色體DNA分子(genomic DNA molecule)之一部分的序列，但其兩側缺少生物體中自然生成的染色體DNA分子兩側的DNA密碼序列(coding sequence)；(b)一段插入載體(vector)或原核細胞或真核細胞之染色體DNA(genomic DNA)的核酸，依此方式生成的核酸分子不同於任何自然產生之載體或染色體DNA；(c)一個分離出的分子，如：cDNA、染色體片段、由聚合酶連鎖反應(polymerase chain reaction，PCR)產生之片段或限制酵素處理所得之片段(restriction fragment)；及(d)一能形成雜合基因(hybrid gene)之一部分的重組核苷酸序列，例如一融合蛋白(fusion protein)。依據實施例，前述分離的核酸是重組DNA構築體(recombinant DNA construct)的一部分，重組DNA構築體 大多為一表現載體，其具有與前述核酸相連結之啟動子因而，送入植物細胞後，此DNA構築體才會表現由多核苷酸編碼產生之多胜肽。

上述表現載體可用於產生基因轉殖植物，以提高上述多胜肽之表現量。此項生物技術應用之成果可獲得改良的植物，特別是農作物。本發明關注之農作物包含黃豆、棉花、芥花(canola)、玉米、小麥、葵花、高粱、紫花苜蓿、大麥、小米、米、菸草、水果與蔬菜作物及草坪，甚而可更為廣泛應用至其他植物。

在某些情況下可經由下列重組DNA構築體來降低上述某些多胜肽的表現量已達到改善植物性狀。此重組DNA構築體可表現一段含有與編碼多胜肽之基因互補的核苷酸序列的RNA分子，上述RNA分子可以是一反義RNA或一干擾RNA(例如，一小片段干擾RNA)。在此，用語「干擾RNA」表示能夠經由RNA干擾機制直接消解一RNA轉錄分子(RNA transcript)，基本上，此RNA轉錄物的核苷酸序列至少有一部分與干擾RNA相同。干擾RNA可以是一小片段干擾RNA(siRNA)，包含兩組互補的單股RNA，它們形成一分子間雙聯物(intermolecular duplex)。干擾RNA亦可以是一個具有兩段自我互補之部分的單股RNA所形成的一小型髮夾狀RNA分子(short hairpin RNA,shRNA)，使得此RNA能夠翻折並形成一莖環結構(stem-loop structure)，莖環結構具有一分子內雙重區(intermolecular duplex region)以及一未配對的環狀區(loop region)。根據Martinez et al.,Cell 110：563~574(2002)之研 究顯示，在某些情況下，干擾RNA可以是19至29個核苷酸之單股反義RNA，而其核苷酸序列與標的序列是互補的。其它情況下，干擾RNA為雙股RNA，其在細胞中被切斷時，即產生siRNAs。

前述任一重組DNA構築體可以用於轉型入大腸桿菌(E.coli.)、酵母、昆蟲或哺乳動物細胞等任一宿主細胞，以用於產生本發明之多胜肽或一段抑制此多胜肽表現之RNA分子。

前文說明之DNA構築體及以此DNA構築體轉型之宿主植物細胞，亦可用於產生一株具有此重組DNA構築體之基因轉殖植物，以提高或降低對應多胜肽之表現量。基因轉殖植物可由下列方式產生：(1)將一編碼前述異源多胜肽之重組核酸引入一植物細胞中；(2)在此細胞中表現此多胜肽，及(3)培養此細胞以生成一植物。經由此項生物技術之應用，可獲得具有一個或多個下列改良特性之植物，尤其是農作物改良之應用。農作物之範例如：黃豆、棉花、油菜(canola)、玉米、小麥、葵花、高粱、紫花苜蓿、大麥、小米、米、菸草、水果與蔬菜作物及草坪植物，及其他更廣泛之應用。以本發明任一DNA構築體轉型農作物，可經由一個或多個下列機制而提高農作物的產量：

(1)改善重要生化化合物之利用，例如氮、磷、礦物質、及碳水化合物。如多胜肽可以改善氮的循環、對氮的感應靈敏度、吸收、儲存及/或運送能力，此類多胜肽包括參與天門冬氨酸(aspartate)及麩胺酸(glutamate)生物合成、天門冬氨酸及麩胺酸運送的多胜肽、與雷帕黴素標的(Target of Rapamycin,TOR)途徑、硝酸鹽轉運蛋白(nitrate transporters)、氨鹽轉運蛋白(ammonium transporters)、氯酸鹽轉運蛋白(chlorate transporters)相關的多胜肽、或參與四吡咯(tetrapyrrole)生合成相關的多胜肽。依據另一實施例，多胜肽可經由提高蔗糖生產及/或運送的方式影響碳水化合物之代謝，例如：多胜肽參與蔗糖或澱粉代謝、碳同化或碳水化合物運送(如多胜肽即為蔗糖轉運蛋白或葡萄糖/己糖(hexose)轉運蛋白)。這類多胜肽亦可以是參與糖解作用/糖質新生作用(glycolysis/gluconeogenesis)、戊糖磷酸循環途徑(pentose phosphate cycle)、或棉子糖生合成(raffinose biosynthesis)的酵素，或是參與葡萄糖信號(glucose signaling)的酵素，如SNF1複合蛋白(SNF1 complex proteins)。依據另一實施例，多胜肽，例如磷酸酶(phosphotase)或磷轉運蛋白(phosphate transporter)，可以提高磷的吸收、運送或利用。

(2)改善對環境中冷、熱、乾旱、高鹽、蟲害/病變或除草劑等壓力的反應。有助於改善對各種壓力耐受度之多胜肽包含參與下列反應機制之多胜肽：參與基因調控的多胜肽，如絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(serine/threonine-protein kinases)、MAP激酶、MAP激酶激酶(MAP kinase kinases)及MAP激酶激酶激酶(MAP kinase kinase kinases)；作為信號傳導及調節作用之受體的多胜肽，如受體蛋白激酶；細胞內信號蛋白，如蛋白磷酸酶(protein phosphatases)、GTP連結蛋白(GTP binding proteins)及磷脂信號蛋白(phospholipid signaling proteins)；參與精氨酸(arginine)生 物合成之多胜肽；參與ATP代謝之多胜肽，例如ATPase、腺苷酸運送蛋白(adenylate transporters)及參與ATP合成與運送之多胜肽；參與甘氨酸甜菜鹼(glycine betaine)、茉莉酸(jasmonic acid)、類黃酮素或類固醇生物合成之多胜肽；以及血紅素(hemoglobin)。增強或降低基因轉殖植物內此類多胜肽之活性可以改變植物對前述不同環境壓力之反應的能力。

舉例來說，參與漏蘆糖(trehalose)或棉子糖(raffinose)生合成途徑之多胜肽、受冷誘導基因所編碼之多胜肽、脂肪醯基去飽和酶(fatty acyl desaturases)及其它與甘油脂(glycerolipid)或膜脂質(membrane lipid)合成相關之多胜肽等，具有調節膜脂肪酸成分(membrane fatty acid composition)、其它氧化酵素、鈣依賴型蛋白激酶(calcium-dependent protein kinases)、LEA蛋白質及解偶聯蛋白(uncoupling protein)的功能，因而，可以改善植物抗寒或抗凍的情形。能夠改善植物抗熱性之多胜肽包含：參與漏蘆糖(trehalose)生合成之多胜肽，參與甘油脂(glycerolipid)生合成之多胜肽，或參與膜脂質代謝(為膜脂肪酸組成物)之多胜肽，例如熱休克蛋白(heat shock proteins)或粒腺體NDK(mitochondrial NDK)。增強植物抵抗極端滲透壓之多胜肽為參與脯氨酸(proline)生物合之多胜肽。增強植物抗旱力之多胜肽為參與漏蘆糖、臘(wax)、LEA蛋白(LEA proteins)或轉化酶(invertase)生合成之多胜肽，如水通道蛋白(aquaporins)。至於抗蟲害/病變，下列任一多胜肽皆能增強此功能：蛋白酶，參與花青素 (anthocyanin)生合成之多胜肽，參與細胞壁代謝(如纖維酶(cellulose)、葡萄糖苷酶(glucosidases)、果膠甲酯酶(pectin methylesterase)、果膠酶(pectinase)、聚半乳糖醛酶(polygalacturonase)、幾丁質酶(chitinase)、幾丁聚醣酶(chitosanase)或纖維素合成酶(ellulose synthase))之多胜肽，參與萜類化合物(terpenoids)或吲哚(indole)生合成以產生具生物活性代謝物藉此抵抗草食昆蟲之多胜肽。增強植物對除草劑耐受性之多胜肽包含參與莽草酸途徑(shikimate pathway)之多胜肽，提供植株抵抗嘉磷塞(glyphosate)之能力，此類多胜肽包含參與分支酸(chorismate)、苯丙氨酸(phenylalanine)、酪氨酸(tyrosine)及色氨酸(tryptophan)生合成的多胜肽。

(3)調節植物生長速率或細胞週期。此類多胜肽包含：細胞週期酵素及細胞周期途徑調節因子之多胜肽，例如週期素(cyclins)及EIIF5α途徑蛋白(EIF5alpha pathway proteins)；參與多胺代謝(polyamine metabolism)之多胜肽；細胞週期途徑調節因子之多胜肽，包含週期素依賴性激酶(cyclin-dependent kinases，CDKs)、CDK-活化激酶、CDK-抑制素、Rb及Rb-連結蛋白；作為轉錄因子(transcription factors)；活化參與細胞增生與分裂活性之基因，如E2F家族之轉錄因子；以及參與降解週期素之蛋白質，如泛素黏酶(cullins)，及參與降解腫瘤抑制多胜肽之植物同源多胜肽。同時亦包含：參與植物生長激素之生合成的多胜肽，如赤黴素(gibberellins)、細胞分裂素(cytokinins)、生長素(auxins)、乙烯(ethylene)及脫落酸 (abscisic acid)，以及其它參與此類多胜肽之活性及/或運送之蛋白，包含如：細胞分裂素氧化酶(cytokinin oxidase)、細胞分裂素/嘌呤通透酶(cytokinin/purine permeases)、F-box蛋白(F-box protein)、G-蛋白(G-protein)及植物硫肽激素(phytosulfokines)。這些多胜肽具有操控植物生長速度的功能，可使植物早期獲得活力並加速植物成熟，進一步提昇產量。此外，亦可經由表現細胞週期酵素及細胞週期調節因子而改良如種子油含量等其他方面之品質。

(4)調節光合作用途徑。有助於加速光合作用之多胜肽包含：光敏色素(phytochrome)、光系統I及II蛋白(photosystem I and II proteins)、電子載體(electron carriers)、ATP合成酶(ATP synthase)、NADH脫氫酶(NADH dehydrogenase)及細胞色素氧化酶(cytochrome oxidase)。

(5)調節種子/稻穗形成及大小/重量。此類多胜肽可提昇種子蛋白質之質與量(例如：參與植物內胺基酸代謝之多胜肽，參與蛋氨酸(methionine)/半胱氨酸(cysteine)及離胺酸(lysine)、胺基酸運送蛋白(amino acid transporters)、胺基酸輸出蛋白(amino acid efflux carriers)、種子儲存蛋白(seed storage proteins)、蛋白酶(protease)生合成之多胜肽，與參與植酸(phytic acid)代謝之多胜肽)；提昇種子油之產量及/或品質(如：參與脂肪酸及甘油脂生合成之多胜肽、β-氧化酶(beta-oxidation enzymes)、參與營養化合物如類胡蘿蔔素(carotenoids)與生育醇(tocopherols)之生合成的酵素，及增加胚芽大小或糊粉層(aleurone)之細胞數量或厚度之多胜肽)。

(6)調控同源重組作用(homologous recombination)。藉由轉殖之在互斥期(phase repulsion)較容易發生鄰近連結基因(closely linked genes)間之稀有重組，使植物內的同源重組速度增快，有助於加速轉殖基因之基因滲入(introgression)透過回交(backcrossing)進行育種的新品種，也有助於改善傳統育種方法。在植物中能增加同源重組之多胜肽包含：參與細胞有絲分裂(mitosis)及/或減數分裂(meiosis)之多胜肽，例如：解離酶(resolvases)及RAD52異位顯性(epistasis)群組之多胜肽成員。

本實施例所提及之多胜肽亦可賦予植物較佳的疾病抵抗力或增加的儲存的多醣體，以利其應用於食物、藥劑、美容、紙業及顏料產業，具有編碼這些多胜肽之基因的基因轉殖植物，其半乳糖甘露聚醣產量即因而增加。本實施例所提及之多胜肽亦可調節植物中類黃酮素(flavonoid)/異黃酮素(isoflavonoid)的代謝(例如：肉桂酸-4-羥化酶(cinnamate-4-hydroxylase)、查爾酮合成酶(chalcone synthase))，或影響木質素(lignin)的生物合成。在基因轉殖植物中強化或降低此類多胜肽的活性，可改變植物內類黃酮素代謝的量及/或速度；並經由促進具保護功能之二級代謝物的合成，改善調控疾病抵抗力之信號途徑，或提高植物的抗倒伏性及增加植物材料作為生物燃料的利用率等方式，進而改善疾病抵抗力。

除了上述機制之外，本實施例所提及之多胜肽亦可影響開花、授粉或稔實率，或促進植物在不利條件下的生長情形，例如低養分或環境壓力。

表1列出本實施例之多胜肽之各式表現型。這些多胜肽的其它功能可以經由比對此新穎多胜肽之胺基酸序列與已知多胜肽胺基酸序列而得知。許多以同源為基礎之蒐尋計算法可用於一感興趣的序列與一蛋白資料庫之間的比對，例如BLAST、FASTA及Smith-Waterman。本發明主要使用BLASTX與BLASTP計算法提供蛋白質的功能資訊。

本發明亦包含一經由前述方法而產生的基因轉殖植物。本領域之專門技術人員應能以前述說明為基礎，充分利用本發明之成果並進一步充分應用之。因此，本說明書之實施例只作為範例，並非用以限定本發明之任一方面。

其它實施例

本說明書所述之本發明所有特色，可以任何方式組合。本說明書所述之任一特徵，皆可由具有等同或類似目的之其它特徵取代。因此，除非特別說明，本說明書揭露之特色僅作為一系列等同或類似特徵的代表。

由前述說明，本發明所屬技術領域之專門技術人員，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可作各種之更動與潤飾。因此，本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。

<110> 中央研究院

<120> 使用米多胜肽/核酸進行植物改良

<130> 70002-184WO1

<140> PCT/US09/42529

<141> 2009-05-01

<160> 151

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 813

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 1

<210> 2

<211> 561

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 2

<210> 3

<211> 173

<212> PRT

<213> Arabidopsis thaliana

<400> 3

<210> 4

<211> 519

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 4

<210> 5

<211> 147

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 5

<210> 6

<211> 72

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 6

<210> 7

<211> 250

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 7

<210> 8

<211> 479

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 8

<210> 9

<211> 819

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 9

<210> 10

<211> 206

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 10

<210> 11

<211> 583

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 11

<210> 12

<211> 300

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 12

<210> 13

<211> 480

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 13

<210> 14

<211> 810

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 14

<210> 15

<211> 293

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 15

<210> 16

<211> 155

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 16

<210> 17

<211> 124

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 17

<210> 18

<211> 215

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 18

<210> 19

<211> 376

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 19

<210> 20

<211> 488

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 20

<210> 21

<211> 167

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 21

<210> 22

<211> 310

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 22

<210> 23

<211> 69

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 23

<210> 24

<211> 491

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 24

<210> 25

<211> 267

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 25

<210> 26

<211> 95

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 26

<210> 27

<211> 1113

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 27

<210> 28

<211> 412

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 28

<210> 29

<211> 763

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 29

<210> 30

<211> 471

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 30

<210> 31

<211> 763

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 31

<210> 32

<211> 247

<212> PRT

<213> Orvza sativa

<400> 32

<210> 33

<211> 144

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 33

<210> 34

<211> 94

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 34

<210> 35

<211> 303

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 35

<210> 36

<211> 186

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 36

<210> 37

<211> 347

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 37

<210> 38

<211> 175

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 38

<210> 39

<211> 306

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 39

<210> 40

<211> 187

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 40

<210> 41

<211> 424

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 41

<210> 42

<211> 1359

<212> PRT

<213> Orvza sativa

<400> 42

<210> 43

<211> 233

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 43

<210> 44

<211> 939

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 44

<210> 45

<211> 337

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 45

<210> 46

<211> 311

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 46

<210> 47

<211> 311

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 47

<210> 48

<211> 187

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 48

<210> 49

<211> 1133

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 49

<210> 50

<211> 2511

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 50

<210> 51

<211> 1686

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 51

<210> 52

<211> 522

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 52

<210> 53

<211> 1560

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 53

<210> 54

<211> 444

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 54

<210> 55

<211> 219

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 55

<210> 56

<211> 753

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 56

<210> 57

<211> 1440

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 57

<210> 58

<211> 2460

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 58

<210> 59

<211> 621

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 59

<210> 60

<211> 2511

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 60

<210> 61

<211> 1686

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 61

<210> 62

<211> 1443

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 62

<210> 63

<211> 2433

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 63

<210> 64

<211> 882

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 64

<210> 65

<211> 468

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 65

<210> 66

<211> 375

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 66

<210> 67

<211> 1257

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 67

<210> 68

<211> 1329

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 68

<210> 69

<211> 1467

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 69

<210> 70

<211> 504

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 70

<210> 71

<211> 933

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 71

<210> 72

<211> 612

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 72

<210> 73

<211> 435

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 73

<210> 74

<211> 804

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 74

<210> 75

<211> 318

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 75

<210> 76

<211> 3345

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 76

<210> 77

<211> 1239

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 77

<210> 78

<211> 2292

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 78

<210> 79

<211> 2106

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 79

<210> 80

<211> 909

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 80

<210> 81

<211> 744

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 81

<210> 82

<211> 435

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 82

<210> 83

<211> 285

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 83

<210> 84

<211> 912

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 84

<210> 85

<211> 561

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 85

<210> 86

<211> 1044

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 86

<210> 87

<211> 528

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 87

<210> 88

<211> 921

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 88

<210> 89

<211> 564

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 89

<210> 90

<211> 1275

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 90

<210> 91

<211> 4080

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 91

<210> 92

<211> 702

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 92

<210> 93

<211> 2820

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 93

<210> 94

<211> 1014

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 94

<210> 95

<211> 936

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 95

<210> 96

<211> 936

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 96

<210> 97

<211> 564

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 97

<210> 98

<211> 3402

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 98

<210> 99

<211> 158

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 99

<210> 100

<211> 117

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 100

<210> 101

<211> 490

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 101

<210> 102

<211> 211

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 102

<210> 103

<211> 315

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 103

<210> 104

<211> 306

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 104

<210> 105

<211> 328

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 105

<210> 106

<211> 301

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 106

<210> 107

<211> 406

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 107

<210> 108

<211> 203

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 108

<210> 109

<211> 809

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 109

<210> 110

<211> 467

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 110

<210> 111

<211> 147

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 111

<210> 112

<211> 266

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 112

<210> 113

<211> 595

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 113

<210> 114

<211> 177

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 114

<210> 115

<211> 477

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 115

<210> 116

<211> 354

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 116

<210> 117

<211> 1473

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 117

<210> 118

<211> 636

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 118

<210> 119

<211> 948

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 119

<210> 120

<211> 921

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 120

<210> 121

<211> 987

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 121

<210> 122

<211> 906

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 122

<210> 123

<211> 1221

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 123

<210> 124

<211> 612

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 124

<210> 125

<211> 2431

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 125

<210> 126

<211> 1404

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 126

<210> 127

<211> 444

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 127

<210> 128

<211> 801

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 128

<210> 129

<211> 1788

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 129

<210> 130

<211> 534

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 130

<210> 131

<211> 4029

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 131

<210> 132

<211> 5036

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 132

<210> 133

<211> 2503

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 133

<210> 134

<211> 567

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 134

<210> 135

<211> 2684

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 135

<210> 136

<211> 1012

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 136

<210> 137

<211> 1186

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 137

<210> 138

<211> 3363

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 138

<210> 139

<211> 6316

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 139

<210> 140

<211> 1614

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 140

<210> 141

<211> 6053

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 141

<210> 142

<211> 3348

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 142

<210> 143

<211> 8998

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 143

<210> 144

<211> 2611

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 144

<210> 145

<211> 2561

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 145

<210> 146

<211> 2377

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 146

<210> 147

<211> 2411

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 147

<210> 148

<211> 1278

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 148

<210> 149

<211> 455

<212> PRT

<213> Oryza sativa

<400> 149

<210> 150

<211> 1368

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 150

<210> 151

<211> 5052

<212> DNA

<213> Oryza sativa

<400> 151

Claims (6)

1. 一種製備基因轉殖植物之方法，包含將一重組DNA構築體轉型進入一宿主植物；該重組DNA構築體包含一多核苷酸以及與該多核苷酸連結之一具有功能之啟動子序列，該多核苷酸可編碼一多胜肽之胺基酸序列包括選自由序列編號：103之胺基酸序列，該啟動子序列在該宿主植物之細胞中具有功能，其中，該基因轉殖植物可表現一或多個下列與該宿主植物相關的性質：(a)增強耐旱、耐冷、耐熱、耐鹽、耐貧瘠環境、抗植物病變、抗除草劑、抗極度滲透情況、抗病原體或抗蟲害之能力；(b)促進植物細胞生長；(c)調節半乳甘露聚醣、木質素、纖維素、類黃酮素、或植物生長調節素之產量；(d)經由調節光合作用、碳水化合物之使用及/或攝取、氮氣之使用及/或攝取、磷之使用及/或攝取、礦物質之使用及/或攝取，使其產量增加；(e)種子油、澱粉及/或蛋白質之產量增加；及(f)同源重組速度增加；(g)種子大小或重量增加；(h)穗長或種子密度增加；(i)開花、授粉或稔實率提昇；及(j)種子生長及成熟速度增加。
2. 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該多核苷酸具有選自由序列編號：119之一核苷酸序列。
3. 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該宿主植物為一農作物。
4. 一種製備基因轉殖細胞之方法，包含將一重組DNA構築體轉型進一入宿主植物細胞，該重組DNA構築體包含一多核苷酸及與該多核苷酸連結之具有功能之啟動子序列，該多核苷酸編碼一多胜肽，該多胜肽之胺基酸序列包括選自由序列編號：103之一胺基酸序列，該啟動子序列在該宿主植物之一細胞中具功能性。
5. 如申請專利範圍第4項所述之方法，其中該多核苷酸具有選自由序列編號：119之一核苷酸序列。
6. 如申請專利範圍第4項所述之方法，其中該宿主植物為一農作物。