TW300850B - - Google Patents

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TW300850B TW81106691A TW81106691A TW300850B TW 300850 B TW300850 B TW 300850B TW 81106691 A TW81106691 A TW 81106691A TW 81106691 A TW81106691 A TW 81106691A TW 300850 B TW300850 B TW 300850B
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A7 B7 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 五、發明説明( ) 1 1 本 發 明 涉 及 用 於 治 療 皮 虜 病 * 例 如 截 瘘 和 牛 皮 * 的 草 1 1 蕖 组 合 物 萃 取 物 及 它 η 的 製 傭 方 法 • 1 1 級 疹 和 牛 皮 癬 的 病 因 學 尚 不 完 金 淸 楚 • 可 是 使 疾 病 特 請 1 先 1 微 化 的 症 狀 學 卻 描 述 得 很 透 撤 • 最 重 要 的 特 徽 是 • 炎 症 閲 讀 1 和 瘙 癢 t 後 者 導 致 進 步 剌 激 ' 發 炎 瘙 癢 循 琢 • 背 面 I 乏 1 m 0 和 牛 皮 癖 是 不 恰 當 的 免 疫 反 應 的 表 建 • 通 m 達 種 注 意 1 1 不 恰 當 的 免 疫 反 應 > 機 讎 把 它 的 一 些 组 織 成 分 視 為 導 物 事 項 1 | 再 並 輿 之 反 應 • 治 療 的 百 的 是 滅 少 免 疫 反 應 的 鼹 霣 性 和 減 寫 本 裝 輕 症 狀 0 在 常 規 的 西 翳 治 療 中 9 使 用 局 部 外 用 可 的 松 激 頁 1 | 索 以 減 軽 炎 症 和 抑 制 免 疫 反 應 〇 拥 虜 藥 用 來 保 護 機 « 並 1 1 滋 租 皮 I* 9 出 現 皮 虜 ΚΕ 染 時 則 使 用 抗 m 索 〇 1 | 然 而 中 醫 醫 生 使 用 草 藥 煎 两 口 服 和 外 用 • 治 療 包 括 濕 1 訂 疹 和 牛 皮 癱 的 皮 虜 病 〇 已 經 使 用 了 許 多 種 試 m 9 而 且 在 1 中 醫 裡 通 常 使 用 複 合 處 方 f 該 處 方 是 m 生 细 心 檢 査 了 各 1 I 籲 病 人 之 後 劂 出 的 〇 通 過 m 床 實 驗 已 經 發 現 t 一 些 草 藥 1 1 m 合 物 可 以 用 來 提 供 對 大 部 分 患 m 疹 和 牛 皮 癖 的 病 人 都 1 人 有 效 的 组 合 物 f 而 不 依 賴 於 逐 镧 治 療 〇 雖 然 中 藥 的 作 用 I 棋 式 尚 不 兀 金 淸 楚 f 但 S 經 為 乾 性 滲 出 型 成 染 型 和 1 1 苔 壽 化 級 疹 設 計 了 不 同 的 處 方 • 1 1 1 表 I 顯 示 了 一 条 列 傳 統 使 用 的 治 療 皮 虜 病 的 中 藥 和 它 1 I 們 的 主 要 化 學 成 分 及 蕖 理 作 用 (Cha ng and B u t 1 1 Ph a r flia C 0 1〇 gy a n d Αρρ 1 i C a - t i ο η 8 of Chi n e s e 1 | Ma t e r i a Me di & . Wor Id S c i -3 en tif i C Pu bl 1 S hi ng 1 986 , 1 1 1 1 1 1 1 本紙張尺度逋用中國國家揉準(CNS > A4规格(210X297公釐) 300850 Λ fi II 6 五、發明説明(> ) 的 用 使 統 傳 t 種 這 多 許 明 説 表 該 即列 質在 性 〇 Ϊ-~-« 一 理性 藥活 的 $ 狀抑 症疫 癣免 皮和 牛菌 和抗 疹 、 濕痒 療止 治 、 於熱 合解 適 、 有痛 具鎮 都 、 物炎 藥消 性和 源虜 内皮 生如 産例 質織 皮組 腺些 上一 腎制 奮抑 興以 以可 可則 物些 藥 一 些9 1 -,素 中激 物松 藥的 的可 出的 種癖 何皮 道牛 知和 地疹 切濕 確對 不 , 仍分 ,組 前 的 目應 在效 使療 即治 。益 竭有 衰的 松物 的合 可混 的是 中分 肺組 多傳 的的 攻物 進取 合萃 聯備加 供製增 提為了 狀因為 症 以 組 性 活 些 1 所的 , 中 。沸物 的煮合 理中混 合水 , 是在度 也即解 合,溶 組熬的 的是中 藥法水 草方在 種統分 草胃 些滑 一 潤 了有 括具 包們 中它 方即 處 , 的用 藥作 中揮 在發 〇藥 的和 需緩 必為 是作 可草 藥些 草這 些 -某藥 合試 混床 藥臨 草的 ,制 信控 堅在 生需 醫尚 醫點 中這 〇然 效雖 功。 S0 卖 收草 吸味 人單 病於 進低 促性 和毒 道的 腸物 加的 有分 具成 分性 成活 藥抗 草拮 些則 一 分 出成 指藥 識草 常些 但一 ,外 明另 證而 以 , 加性 地活 格理 嚴生 下性 驗和 的用 藥際 草實 種有 多了 用為 使 。 了的 實妥 證穩 才是 ,物 分取 成萃 性豳 活分 了或 定液 確取 到萃 直 、 〇 液 性煮 毒煎 (請先閲讀背而之注意事項再填、寫& ί 經濟部屮央楳準局只工消#合作社印Μ 的型 奇類 驚同 人不 令療 〇 治 物於 合 用 混能 的分 分組 組定 定固 固的 種藥 多草 或殊。 種待癖 1 現皮 有發牛 需經和 必己痿 ,,濕 途是的 劑 製 的 用 丨有 性別 乾待 療的 治成 在組 現藥 發草 經味 已十 » 由 如的 例效 有 紅 發 金 中配 瘳樣 濕這 期以 早可 本紙張尺度逍用中β «家《準(CNS) 規怙(210X297公: 81. 7. 20,000¾ (II) 五、發明説明(Μ Λ 6 \\β 經濟部肀央榣準局A工消费合作社印製 ί 操。移現分 的被該量 的 包 經奮 ,,: 水該體中天 3 外式以的 目 法 藥興 置5%量 加。液藥每前 另形,質 述 方 草質 的於含 中時ml草是的 但的法物 所 的 用皮 糖低的 鍋小50的液束 ,酸方關。到 物 所腺 或少類 底 5 約盡煮結 來鞣的無多逹 合 ,上 \ 至 W 平^藥耗煎煮 出和物的很可 組 物腎 和數的 } 草從的煎 取糖取含低法 病 取、 糖分中 質沸g/M當到於 萃、萃所量此 虜 萃劑 多百質 鋁 i5g且得應。分素藥,的, 皮 種症 低量物 7 非 '.而藥們失組色草濃含法 療 多炎 降重述 ί ’38,草它損性、備更所方 治 或抗 法的所 蓋Κ)每要從,的活糖製分物種 備 種供 方中於 帶17至緊。油油把多種成取一 製 一提 種物在 ; 柄0Π1減關用發發以以一性萃 了 。的 的以 多取存用 長30積無服揮揮足會要活些計量明 藥可.,或萃低作 的約髏積供含少然也需中那設劑發 草煮劑種種降解 藥加的體以藥減雖質以物的經的本 種煎護一多不酶 草藥體终釋草便法物所取知已小照 多和保述或上或 有草液最稀些以方性。萃所人較按 備餾松下種本酵 盛5g,的以一 ,煮活來的今明用, 製蒸的以 一基發 往.7間液可。入煎非出得迄發服此 }汽可}在是} :38期煮時的加該量取製比本可因 :u 蒸和(b之件 U 製每作煎走製鐘 大萃法則 並 括 水劑 使條 ·..··:/·::.......V......裝;:訂:線 (請先閲讀背而之注意事項孙填寫" 本紙Λ尺度遑用中家«準(CNS) T4規怙(210X297公釐) 81. 7. 20,000ίΜΙΙ) 經濟部屮央橾準局员工消件合作社印32. 五、發明説明(4) (Π )用極性範圍E ° 0 · 4至0 . 9 9的溶劑萃取,或用溶劑 混合物萃取,該混合溶劑中至少一種溶劑的極性在所述 的範圍之内; (iii )用無機化合物和/或膠體沉澱;和 (c)用E° 0.4至0.99極性範圍内的溶劑或至少有一種 溶劑的極性處於該範圍的混合溶劑進一步萃取,以濃縮 存在於萃取物中的活性組分。 通過在水中煮草藥的傳統煎煮方法,即有利於進行上 述方法中步驟(a)的萃取物的製備。煎煮之前,任何揮 發油或其它揮發性成分通過蒸汽蒸餾而除去,如果需要 的話,保留下來,再加入到最後的萃取物中。在治療濕 疹和牛皮癣的製劑中,這些揮發性成分可以是特別有用 的。 在本發明的方法中,步驟(b)中進行的減少多糖和/ 或糖的操作極為重要。含大量糖的萃取物極難揮發成自 由流動的粉末,而且常常形成固態粘塊。按重量計,多 糖和/或糖的量最好減少至低於2.5¾,若減少至低於53: 則尤其好。因為一種或多種活性成分可能是苜,所以在 基本上不降低甘含量的條件下進行降低過量的多糖和糖 的步驟也很重要。 如果通過發酵來降低多糖和/或糖的含童,則優選方 法是,把從步驟(a)中製備的煎煮液得到的全部水萃取 物與大麥芽溫育或與酵母例如啤酒酵母溫育,或與真菌 (請先閱讀背而之注意事項再填窍本( 裝· 訂_ 線· 本紙Λ尺度逍用中親家楳準(CNS) T4規格(210X297公放) 81. 7. 20,000ft (II)
經濟部中央橾準局貝工消费合作社印製 A7 B7五、發明说明() 例如米鼸β»育•或者輿其它能提供鎩粉_和/或糖解 w的撖生»瀛育•分離的和銪化的醱粉分解_和耱分解 _也可以使用,可任意蠹擇地结合到膜上或其它支掸物 上。如果遭些鼸也會破壤_甘類,最好使用_甘_抑制 _ 〇 發酵遍程中可同時生成乙酵,它可用於活性成分的進 一步分離中· 如果用一種溶两或至少有一種溶Μ的極性處於Ε· 0.4 至0.99範園的混合溶则進一步萃取最初的萃取物,以降 低多_和/或耱的含量,則溶爾最好是一種或多種下述 溶_:氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酸、四氫呋_、甲基乙 基醑、丙_、乙腈、丙酵、乙酵、甲酵、甲基化的工業 酒精、或一種或多種上述化合物的不低於7096的水溶掖 中的一種或多種。特別優選的是70%的乙酵、70%的丙 酵或70%的甲基化的工業酒精· 加入适些溶劑,造成多釀和/或糖的分段沉澱,而所 霈的活性成分則保留在溶液中。 作為對步篇(b)中的發酵、_處理和/或溶_萃取的 替代方法,通遇用無機化合物和/或謬讎沉澱,也可以 降低多鳙和/或耱的含量。優遘的無機化合物是氫氣化 鈣〇 在降低耱含ft的步朦之後,一般需要進一步濃縮萃取 液。特別希望除去多苯《和鞣酸萃取物。在本發明的方 法中,通β使用一種溶薄或其中至少有一植溶W的極性 (請先閲讀背面乏注意事項再填寫本頁) 裝. 訂
•X A 本紙張尺度適用中國國家揉準(CNS ) A4规格(210X297公釐) 五、發明説明(b ) Λ β Π 6 經濟部屮央標準局只工消俾合作杜印製 賦入 明方保它別 處按的燥 的奇一限需無 驟 W 與加 發的松,待 定以後乾 性驚唯過必去 步步 ,地 本明的和。 既可最凍 活在是通非除 取面 狀擇 。發可摻的 的也在冷。是現不以的經 萃上 糊選 服本和體知 劑物果、型需而果所物己 步«έ成意 口用劑載周 乳合如燥劑必然如。合備 一^ 發任 便物奮或所 型組。乾服都中組製 進^; 蒸可 以取與劑員 散該囊霧 口藥藥性藥於明 劑 I 以還 ,萃質釋人 分。膠噴成草給活草自發 溶容 可, 釋藥皮稀練 可型或過製有劑疹的來本 合 W 液服 稀草腺、熟 水劑劑通於所煎濕量少照 潖ii取口 液該上劑術 或用片液利的的抗數減按 的$ 萃於 溶,腎型技 膏外的取有中備的限能過 内 。的用 水物、賦業 軟的服萃則物製品有可通 圍fio擇産粒 用取劑的專 滑物口藥,合時製於有能 範—*.選生顆 以萃症用本。潤合成草末組臨藥在,可 95中法成 可藥炎藥是膠産組備把粉上以草存量有 單方壓 液草抗於例硅生該製,成質好的地數且 至肖清的並 取含有適實是用備式後工實最合要藥而 彳 U 的明, 萃 了含與多體採製形之加為藥組主草 , aSTP出發合 〇 的供,並許載,以量驟,議草,是的量 厂 P 給本混劑備提備,的的如可劑步發醫且現也用的 在}.1由劑味製別製劑中用例,位取蒸中而發,所料 處 u(i型調 特法護們有 方單萃或 ,地地制材 .........:..............^· ···#··· άV. >· 、 - (請先間讀背而之注意事項孙填- 本紙张尺度遑用中鷗家楳準(CNS) T4規怙(210x297公徒) 81. 7. 20,0()0¾ (II) Λ fi Π 6 經濟部屮央櫺準局ts:工消费合作杜印製 五、發明説明(7) 關物質的濃縮型組合物來進一步減少給藥量。 從表I給出的清單中選擇的草藥適用於本發明,恃別 優選的組合物是含有來自地黃、白鮮皮、甘草、和或者 防風或者荊芥穗的萃取物的組合物。還可任意選擇地包 括剌蒺藜(白蒺藜)^另一値優選的組合物是含表I中 列出的前十種草藥的組合物。 如果包括在混合物中的一味草藥提供止癢劑,那是較 好的。因為有些草藥味苦,作為口服組合物,最好加入 甜味劑。 根據本發明,製備草藥萃取物時,可以把許多草先混 合在一起,再進行步驟(a)、 (b)和(c>的操作,也可以 把其中的一些或所有草藥逐個進行步驟(a)、 (b)、 (c) 的操作,然後混合最終的萃取物β 前一種方法的弊端是,來自毎種草藥的活性成分的産 率一批不同於一批,以致於無從知道混合物中毎種活性 成分的最終濃度。而用分別製備各種草藥的萃取物,然 後再混合的方法,則各萃取物都可以用對照物進行檢測 ,有助於病人服用劑量標準化。該法的另一個優點是, 減低糖含量的整値操作只需要對混合物中多糖或糖含量 高的那些草藥進行,正是多糖或糖的高含量使得它們難 以處理。 本發明現在列出下述非限制性實施例。 實施例1 -9 - < · · (請先閲讀背而之注意事項洱填寫; 裝* 本紙ft尺度遑用中«家«準(CNS)T4規格(210x297公;it) 81. 7. 20,0⑻张(II) Λ 6 η 6 五、發明説明(8 ) 將下述組分粗切或粉碎,水蒸汽蒸餾除去揮發油: 重量(g) 防風 模藜子 木通 生地 甘草 赤芍 白鮮皮 牡丹皮 石膏 北茵陳 112.5 112.5 112.5 168.75 5 6.25 112.5 168.75 112.5 4 5 0 .0 112.5 (請先閲讀背而之注意事項再填寫本C"、 裝· 經濟部屮央櫺準局员工消伢合作杜印製 所得揮發油保留,殘渣與1升水混合,煮沸1.5小時 ,冷卻至3 5 °C形成煎劑。 往水和草藥的混合物中加1 〇 〇 m 1新鮮烘烧母的活潑 生長的培養液,攪拌8小時或直至等分試樣的糖含量低 於 0 . 4 % 〇 粗濾除去植物性物質,離心除去酵母。濾液蒸發至乾 Ο 這樣製備的萃取物用2 0 0 m 1乙酸乙酯攪拌1 〇分鐘,離 心分離,保留溶液。再加50ml乙酸乙酯,混合物攪拌並 分離《濾液合並後蒸發至乾。 保留的揮發油返加到所得的蒸乾物中,産品為棕色萃 -10 私紙》尺度遑用中國國家《準(CNS)甲4規«(210X297公扪 81. 7. 20,000¾ (II) 訂· 線· 300850 Λ 6 Π 6 經濟部屮央櫺準局员工消#合作杜印製 五、發明説明(今) 取 物 9 能 白 由 流 動 1 加 入 合 適 的 調 味 劑 即 能 作 為 劑 型 用 〇 該 産 品 加 入 賦 型 劑 即 可 配 製 成 常 規 的 藥 劑 用 於 治 乾 性 濕 疹 〇 上 面 給 出 的 量 足 以 為 成 人 治 療 十 天 〇 實 施 例 2 將 下 述 草 藥 粗 切 或 粉 碎 9 用 4 升 水 前 «“、 煮 1 小 時 : 重 量 { g ) 生 地 16 8 . 7 5 赤 芍 11 2 . 5 0 甘 5 6 . 2 5 白 鮮 皮 168. 7 5 土 茯 岑 168. 7 5 地 虜 子 5 6 . 2 5 當 歸 11 2 . 50 黑 芝 麻 籽 16 8 . 75 離 心 分 離 出 水 層 〇 萃 取 液 蒸 發 至 含 5 0 % 固 體 (W/V), 并 加 入 10 % 重 量 的 氫 氣 化 鈣 〇 加 入 三 倍 髏 積 的 異 丙 醇 混 合 9 混 合 物 室 溫 放 置 0 移 去 上 清 液 t 並 加 入 一 倍 體 的 7 5 % 異 丙 醇 9 混 合 9 殘 留 物 離 心 〇 所 有 的 上 清 液 合 9 蒸 發 至 乾 〇 生 成 的 精 細 萃 取 物 可 以 與 藥 用 助 劑 m 合 並 裝 入 膠 囊 或 壓 成 片 劑 0 實 施 例 3 製 備 含 下 述 草 藥 的 萃 取 物 ·· -11- 本紙張尺度遑用中«家«準(CNS) Τ4規格(210X297公放) 81. 7. 20,000張(II) (請先間讀背而之注意事項再堝筠4^乙· 裝. Λ 6 II 6 五、發明説明(、°) 重量(g) 防 風 10 赤 勺 12 地 黃 10 甘 草 15 對於防風和赤与兩味草藥,是在連缅量的水中煮沸直 至藥渣耗盡來製備各自的煎劑。萃取物乾燥。 按實施例2的方法,製備地黃和甘草各自的萃取液。 合並所有四種草藥的乾燥萃取物,各組分的重量如上所 示,這是用於治療成人濕疹的日劑量。 實施例4 採用實施例2所逑的方法從下述草藥的混合物製備萃 取物: 重量(g) S · ♦* (請先閲讀背而之注意事項#填窍本0' 裝· 線. 經濟部屮央標準局A工消费合作社印製 生 地 90 土 U 夸 90 甘 草 3 0 白 鮮 皮 90 赤 芍 6 0 北 国 陳根 6 0 地 虜 子 3 0 苦 參 2 0 蒼 術 6 0 -12- 本紙ft尺度遑用中家螵準(CNS)甲4規格(210X297公放> 81. 7. 20,000^(11) 五、發明説明(Η) Λ 6 Π 6 該組合劑適用於治療慢性、苔癣化及”滲出性”濕疹, 給出的量適用於成年病人作十天治療。 實施例5 採用實施例2所述的方法,從下述草藥的混合物製備 萃取物: 重量(g) 土获苓 300 白鮮皮 100 威卺仙 100 當歸 10 0 何首烏 100 丹參 10 0 川芎 100 該組合物適用於治療"穩定"的牛皮癖,給出的童適合 於成年病人作十天治療。 實施例6 採用實施例2中描述的方法,從下述草藥的混合物製 備萃取物: 重置(g)
(請先間讀背而之注意事項#填寫本*C 經濟部中央搮準局貝工消费合作社印製 土茯苓 300 白鮮皮 100 威靈仙 100 地黃 2 0 0 -13- 本紙»尺度遑用中國《家楳準(CNS)甲4規格(210X297公;«:) 81. 7. 20,000^(11) n g 五、發明説明(Θ) 白 茅根 10 0 紫 草 10 丹 參 10 川 芎 10 红 花 10 該組合物適於治療進行性牛皮癣,而且上面給出的量 適合於成年病人作十天治療。 實施例7 按照霣施例2中給定的方法,從下述草藥的混合物製 備精細的萃取物,然後與乳化軟資基質混合,生成油/ 水型乳化劑: 黃桕(2Qg草藥的萃取物) 黃岭(20g草藥的萃取物) 黃連(20g草藥的萃取物) Cetomacrogol乳化軟膏加至i〇〇ge 實施例8 按照實施例2中描述的方法,從苦參製備精細的萃取 物,並按照下述配方摻入到乳化軟膏基質之中: 苦參(20 g草藥的萃取物) (請先閲讀背而之注意事項#填寫本r、 經濟部中央楛準局A工消你合作杜印製 乳化蠘 3 0 g 硬石蠘 5 g 魚肝油 1 5 g 月見草油 1 5 g -14- 本紙張尺度遑用中《家α準(CNS) T4規格(210X297公*) 81. 7. 20,000^(11) Λ 6 It 6 經濟部中央櫺準局貝工消费合作杜印製 五、發明説明 白 色 軟 石 蠟 加 至 1 .0 C 1 g 該 軟 資 可 以 薄 薄 地 塗 於 皮 虜 上 f 並 能 與 水 混 合 > 生 水 包 油 型 的 潤 m 乳 劑 〇 實 施 例 9 按 眧 實 施 例 2 中 描 述 的 方 法 > 從 掌 葉 大 黃 製 備 精 細 萃 取 物 $ 並 摻 入 到 乳 化 軟 苷 基 質 中 掌 葉 大 黃 (R h e 1 u m I P a 1 m a .t U 1 m ) ( 3 0 g草藥的萃取物) Ce t 0 m a C Γ o g 〇1乳 化 軟 膏 加 至 1 0 0 g 0 本 例 中 9 以 及 實 施 例 7 和 8 中 藥 萃 取 物 的 量 是 説 性 的 9 並 不 限 於 給 出 的 比 例 0 實 施 例 1 0 採 用 實 施 例 1 中 給 出 的 方 法 9 從 列 在 實 施 例 1 中 的 38 .7 5 g草 藥 製 備 煎 劑 » 終 體 積 為 5 0 ID 1 〇 使 用 合 適 的 測 盒 测 定 該 煎 劑 的 近 似 稀 釋 物 在 加 入 3 I» 1新 鮮 的 10 % 1P** 酵 懸 浮 液 前 和 加 入 後 的 間 隔 裡 的 含 糖 量 〇 混 合 物 在 3 0 V 育 » 偶 爾 m 拌 〇 時間 測 定 的 糖 的 在 前 劑 中 的 (小時) 近似濃度 稀 釋 重量濃度 0 > 0 _ 2 % 1 : 3 0 0 > 3 0 X 0 .2 -0 .4 % 1 : 5 0 10 -2 0 % 1 0 .2 -0 .4 % 1 : 10 2 -4 X 2 0 .2 -0 .4 X 1 : 1 0 • 1 -0 .4 % 氺 葡 萄 糖 氣 化 酶 撿 測 盒 的 m 定 極 限 0 -15- 本紙張尺度遑用中國·家《毕(CNS)T4規怙(210X297公 81. 7. 20,000張(II)
(請先閲讀背而之注意事項孙蜞寫X 經濟部中央橾準局員工消费合作社印製 A7 B7 補£丨 五、發明説明() 發酵之後,雖然邏有含在混合物 中的甘草进成的残餘 甜度,但煎Μ已明顯不甜》所得溶 液遇濾並蒸發至乾, 生成4 . 7g萃取物。 實施例11 将下述草蕖粗切: 簠量(β> 防風 300 揆蓁子 300 蠱醪(Lacca) 450 木通 300 甘草\ 150 地黄 450 赤芍 300 •淡竹葉 300 白鮮皮 450 荊芥 150 3 1 0 0 g 殘液典1升水混合,煮彿1 . 5小時 ,冷卻至35*C ,形成 煎_ 〇 100 ·1新鮮烘銬酵母的活潑生長的培餐液加到水和草 藥的混合物中,保持攪拌8小時或 直至一籲等分試樣的 耱含量低於0.4% » -16- (請先閲讀背面之注$項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家橾準(CNS ) A4规格(210X297公釐} .裝_ 訂 **】- / J · i3〇|〇850 名充 經 濟 部 中 央 標 準 局 Η A6 B6 五、發明説明( ) 粗濾除去植物性物質,離心除去酵母。濾液蒸發至乾 疽櫬裂得的萃取物用2 0 0 ·1 70%的甲基化的工業酒精 «拌10分鐘,離心分離,所得溶液館備待用β再加入50 1 70%的甲基化工業酒精,混合物《拌並分離β合並 的濾液蒸發成樨耱漿。澜定毎·1的重蛋,並加入該簠董 三分之一的謬態硅,萃取液蒸發至乾。 生成的乾萃取物顯棕色,自由流動,加入邃當的钃味 麵邸能以粉劑、顆粒_、騵囊劑或片割使用,治療乾性 淇疹•逭些量足夠成年病人治療二十天。 17- 本紙張尺度Λ用中S國家樣準(CNS1T4規格(210X297公;ϊί
η 6 五、發明説明(4) τ 银旺镅®s@-fr φ 幽与《 '欲±8劫 涨班/遲诚逝积 ®遐馬笺懿坻缒 siiHJ芸迆®HJ采 国,此屎劫»5£ S «诨,兹契,¾ 案,逛SIkm晒 d* *«* * 趣* '«餱驿令 ¥莲铥•MTiEho、 ^0^00 (請先閲讀背而之注意事項#塡寫h 裝.
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300S50 (85年4月修正) 經濟邾中央f8工消費合作枝印絮
紙 - (c 準 樣 家 圓 國 中 用 通 公 97

Claims (1)

  1. 十- ;] ί.';· 補充
    六、申請專利範圍 第81106691號"製備治療皮庙病之藥學組成物之方法”專利案 ' (85年11月修正) 經濟部中央揉率局工消费合作社印装 一種裂備治療皮庙病組 U)製備多種草藥的 自防風、蒺藜子、木通 、牡丹皮、石蕾、北国 黑芝麻籽、地黃、苦參 參、川芎、白茅根、紫 、大黃、蟲膠、淡竹葉 公藤及知母,及該草藥 抗炎劑、腎上腺皮質興 (b)採用一種或多種 量,使之在一種或多種 低於5S;,條件是不降低 (i) 使用「大麥芽_ 酒酵母或米麴菌,發酵 分解酶,任意選擇地在 用; (i i)用溶劑萃取,其 二氣甲烷,乙酸乙酯, ,乙腈,丙醇,乙醇. 種或多種上述溶劑濃度 成物的方法,包括: 一種或多種萃取物,草藥偽選 、生地、甘草、赤芍、白鮮皮 陳、土茯苓、地I*子、當歸、 、蒼術、威蚕仙、何首烏、丹 草、紅花、黃桕、黃岭、黃連 、荊芥、白頭翁(委陵菜)、雷 以水蒸汽蒸餾和煎煮,能提供 奮劑和可的松保護劑; 下述方法降低多賻和/或糖的 萃取物中的重量百分含量至少 存在於該物質中的苷類的含’量: (Barley Malt)或酵母,其偽啤 或使用分離的澱粉水解酶或糖 苷SS抑制劑存在下進行酿解作 為一或多種下述溶劑:氣仿, 四氫呋喃,甲基乙基酮,丙_ 甲醇,甲基化工業酒精,或一 不低於70S;之水溶液;及 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 J 本紙張尺度逍用中國國家標率(CNS ) A4規格(210X297公釐) A8 ll —300850----~- 六、申請專利範圍 (C)用溶劑作進一步萃取以濃缩存在於萃取物中的 活性成分.該i容劑為一或多種下述溶劑:氮仿,二氣 甲烷,乙酸乙酯•四氫呋喃.甲基乙基酮,丙酮,乙 腈.丙醇,乙醇,甲醇,甲基化工業酒精.或一種或 多種上述溶劑滠度不低於70%之水溶液。 2.如申請專利範圍第1填的方法,其中在步驟(b)(i)的 方法中降低多醏和/或糖的含量時.披固定在膜或 其它載體上。 ;3.如申請專利範圍第1項的方法,其中在水蒸汽蒸餾中 除去的揮發油或其它揮發性组分披保留下來.並再加 入到組成物中。 4. 如申諳專利範圍第1項的方法.其中得到的草藥萃取 > 物通過蒸發、噴菝乾燥或冷凍乾燥被加工成粉末。 5. 如申諳專利範圍第1項的方法,其中得到的草藥萃取 物乾燥成猢劑,與賦型劑混合並壓成顆粒。 經濟部中夹棣準局I工消費合作社印袋 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 6. 如申諳專利範圍第1項的方法,其中用於製備申請專 利範圍第1項的步驟(a)的一種或多種萃取物的草藥 菝自白頭翁(委陵菜)、地黃、赤芍、白鮮皮、甘草、 防風、揆藜子、淡竹葉、荊芥、木通、雷公藤、苦 參、北国陳、牡丹皮、知母、當歸、紫草、地廉子、 土茯苓、川芎、丹參、何首烏、白茅根、红花、蒼術 、咸蚕仙、黃柏、δ岭、黃連、大黃。 -2- 本纸浪尺度逍用中0國家標準(匚呢>人4現格(21〇父297公竣) " 300850 A8 B8 C8 D8 申請專利範圍 .取 萃 emM .種 多 或 I 種 1 中 其 法 : 方分 的嗥 項的 6 藥 第草 圍列 範下 利自 專來 請有 申含 如物 劑 0 tlv 興 質 皮 腺 上 腎 和 , 劑分 護成 保鹼 松物 的生 可供 供提 提 -.皮 黃鮮 地白 劑 奮 , 興劑 質炎 皮抗 腺供 上提 .腎 , 供芥 提荊 , 或 草 風 甘防 物 取 萃 備 製 來 用 中 其 法 方 的 項 0 6 子第 藜圍 疾範 , 利 地專 選請 任申 及如 菜 陵 择子 翁藜 頭蒺 白 , 是 風 藥防 草 , 的 草 淡 芍木 赤及 . 芥 黃荊 地, , 葉 丨竹 甘 皮 鮮 >&
    (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 一衣· 訂 I 經濟部中央樣率局只工消費合作社中«. 本紙張尺度逍用中國國家橾率(CNS > A4規格(210X297公釐}
    經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 補充資料 啻偷拥1 三糖可降低SS重量的方法,其可單》或與其他已知之 方法一起使用,乃掲示於下 1. 利用完整生物來發酵或利用分離之醻將聚合物分解。 2. 将煎煮過之萃取物作溶劑萃取。 3. 利用無機化合物或謬體作多耱沉澱 。 過敏性漉疹為一種疾病,其無合適之動物棋型可供研 究。然,已会展出一種免疫測試其乃基於對遇敏性锻疹 病人之覼察,病人之皮虜細胞及某些白血球細胞的表面 會出現數目增加的低親和力之IgE受器(CD23)e治療後 受器表現的抑制或降低則為生物功效之指樣。再者,受 器可以白血球間素4 (IL-4)處理而被人工的誘發,其係 提供了 一有用的測試功效之模型条统。因此,此模型糸 統用於下述之實驗中以澍試依申請専利範困所請之方法 而製得之實施例11所待定敍述之一種草蕖混合物(DDHM) 之功效。 材料 Taka-箱粉酶 Η 劑 〇.162g·, Parke, Davis & Co. 得自酒教菌之果暖酶,Sigia. 啤酒酵母(乾燥酵母) .Riesling, wine craft Ltd. 方法 ⑴發酵 约5.2g之DDHM在250·1燒瓶中加熱溶解於75·1的去離 子水中❶在煮沸前小心處理溶解的物質。燒瓶自熱源移 本紙張尺度適用中國國家橾準(CNS> Α4洗格(210Χ297公釐) (請先閲讀背面之注$項再填寫本頁)
    經濟部中央揉率局貝工消费合作社印製 A7 _B7_ 補充資料 閭,.並以棉塞塞住,且任其冷卻β pH決定為PH 5且接箸實施下列操作: 啻驗1 :加入5 0ig之I卑酒酵母 謇解2 : 溶液被證實有澱粉(澱粉/碘)的存在·加入O.QSlg 之Taka -澱粉酶至於利用碘澜試溶液時呈現澱粉存在之 澜試溶液中。醱粉在15分鐘後消失β再加入5(Ug之啤酒 酵母。 謇路3 : 將212*g之果®酶加入以水解果謬。再加入50ag之啤 酒酵母》 将燒級在3KC培藿直到«萄糖-氣化酶测試顯現所有 可發酵糖都除去為止β所有發酵作用在約36小時完成。 (注意:啤酒酵母比烘培酵母較慢開始發酵)。 液饅被離心,通遇W ha tuan No. 1濾紙倒出,並以煮沸 龌稹濃缩至約30·1時再移至真空爐並乾燥至固定重量》 乾燥的萃取物再加以分析其對由IL-4誘發之CD 23表現 之抑制作用。此等》驗之對照組為已被證實無B療活性 之惰性草藥之混合物。 结果 •表1顯示了經以酵母及_加酵母處理之重量減少(¾)及 C D 23之抑制。 —2 — 本紙張尺度逋用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X 297公釐) ----------^ ,4'— (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) I11 A7 B7 補充資料 %重ft滅少 CDza之抑制(X) · DDHM 粉 —— 60.0 DDHM·)·酵母 34.4 61.0 DDHM +酵母+Taka澱粉 35.2 58.0 DDHM +酵母+果謬臃 27.4 57.0 對照組 -- 6.90 * IL-4誘發之CD23表現之抑制。對照组值為典型地±10 n· In nn (n —-i 1^11^m· (請先閲讀背面之注$項再填寫本頁) ,τ 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 %抑制;值超遇40%指為高活性。 結果潁示CD 23之抑制沒有明顯減少•雖然结董已滅少至原來之 約65%β利用專利的葡萄糖氣化酶測置套组,製備自實施例U 所指之草藥混合物之煎煮物與新鮮烘培酵母懸浮液培餐 多至3小時的時間。相對於時間之葡萄耱濃度乃見於表 2 〇 -3 - 本紙張尺度逋用中國國家標準(CNS > Α4规格(210X297公釐) A7 B7 經濟部中央標準局貝工消费合作社印裝 補充資料 表2 煎煮物中菊萄糖濃度( ·ο1/1) 時間(小時) 〇. 15X酵母 無酵母 0 55.7 55.7 0.5 55.7 55.7 1 4 9.0 5 5.7 2 16.7 55.7 3 無 55.7 毎·1之煎煮物之重量,在産榭被培養的前與後,在3 小時内降低了 20.7Χ〜28.7Χ。混合物之二度空間薄靥層 析(TLC)乃在以酵母培養之前與後進行。TLC頭現了複雜 的黏混合,其主要部份在以酵母培餐前後都可見β在原 點上若以香草醛/硫酸試剤染色可在白及紫外光下顯現 之點在以酵母培餐後明顯的消失了。醱.粉及耱可以此試 劑染得很好(第la及lb園)β 為了進一步舉例説明說明害中教示之甘類不減少的情 形,已知存在於實施例11之2種甘之混合物,舆菊萄糖 一起以烘«酵母培養· S擇的甘為甘草酸(一種三類葙 甘)及芸香甘(一種類黄酮甘)*此二苜在酶水解會産 生簡單的糖衍生物β第2·顧示了當混合物以酵母消化 後葡萄糖之貼待撖會消失β甘草酸及芸香甘之黏待戡則 不受彩響。 -4 - 本紙張尺度逋用中國國家橾準(CNS >A4規格(2丨Ο X 297公釐) H n n ^ I HI _ HI —^1' -i-r-»J (婧先閲讀背面之注^^項再填寫本頁) 300850 A7 B7__ 補充資κ (¾浓_ g敗 下列方法乃利用IMS及IMS/水來萃取: 7.5g之000粉置於250·1燒級典50·1之溶Μ崔晃4小時 •再將混合物通滅並将濾液蒸發至乾嫌•遇濾之殘留格 亦乾燥,再將二者秤重, 姑奥 85Χ IMSK理之CDaa分析顧示溶於85Χ IMS部份有22.4Χ 撺制及不溶於85X IMS部份有79X抑制(起始物質之底線 為βΟΧ抑制)^此乃淸楚顯示了本發明之用處,在於其 伴随降低不溶於85Χ IMS部份的容積•而實質增加活性 之目的。 (請先閱讀背面之注$項再填寫本頁) 使用之 DBBM之重 萃取物重 e % 被準取 «留物 之重 % 未被萃取 85X IMS 7.5463 1.3926 17.8 4.9673 65.8 訂 r 經濟部中央樣準局貝工消费合作社印裝 利用不同之IMS輿水比例之萃取· 從以上提供之資料可得下列结論: 1. 在單蕖灌合物中施例中之大部份複合物),以生 物及酶«理之萃&相在螗固釀重量上有有用的滅少。 2. 以此處理之萃取物中,若以抗轚结合分析則頋示無生 物活性之喪失,其活性被芘為輿有用的治療活性有相 間的意義。 -5-. 本紙張尺度適用中國困家標準(CNS ) A4規格(210X297公釐) " ~~~ 經濟部中央揉準局貝工消費合作社印装 A7 _B7_ _ 補充資 3. 層析担據鼷示在二度空間之TLC上鼸處理會除去硪水 化合物之複合物而不彩馨其他成份《 4. 利用含有類葙甘及頫黄酮甘之棋型条統,二者在實施 例中顯現了糖的完全除去而未偵醣出甘之降解β 5. 以_ (或以純化之_,或存在於生物中)《理之方法 快速消化掉多耱,其可進一步被糖水解鷗分解*在産 生的萃取物中,金無其生«I活性之滅少ν 6. 述於實施例中之乾嫌的藥草赅煮物當以水性酒精萃取 時顯示活性乃留在水溶性殘留投中(不溶於酒精> 。 實施例2 385 g包含申請專範函第8項所列10種草蕖之混合物之 草蕖物質在沸水中被煎煮及降低至終黼稹500·1,此溶 液被稱作ZD及接受下列處理: ⑴對照组樣本,無化學處理; (2) 将5 0 1 Z D與0 . 0 6 g β -澱粉_在3 7 *0下水浴中培育直 至澱粉消失; (3) 將50·1 Z.D輿U啤酒酵母在37*C下水浴中培啻直至菊 鹫糖消失; ⑷将2 5 0 ·1 ZD輿0.3g«r-黷粉期(在水浴中培寶直至*粉 消失,而後添加5g啤酒釀母及繼鑛培育該混合物亶至 葡萄糠消失; 而後⑷被分成下列: —6 — 本紙張尺度適用中國困家標牟(CNS ) A4規格(2丨0><297公釐) ----1--1--^ I — ^ Γ (請先閱讀背面之注$項再填寫本頁) A7 __B7__ 補充資料 @}添加100·1異丙酵於50·1之⑷,而後蒸發至50·1溶液 ,所有上述溶液在進行任一»定前,在MSB Minor» 心機中,6,000 RPM下被離心10分鐘。毎一上淸液之 第一镇10·1以真空烤箱蒸發至乾及如上述在CDs分析 中被测試β 第二儀 10·1 藉由裝載於 varian chea-Elut CE 1010 萃 取管柱上,而後以2Χ12·1整份之HPLC级乙酸乙酯 (EtOAc)溶離及收集,合併溶離物而得以«得以供薄 膜層析法用。而後使用旋轉蒸發器将此溶離物蒸發至 乾及再瘳以0 . 2 5 1 E t 0 A C β毎一萃取_之5及1 0 # 1 被置於闸镳Vhatian Κ6矽膠TLC板上,第一镰板以1:1 氰仂/乙酸乙贿路_及第二籲板以8:4:1蒸氣狀氱彷 /甲醻/乙酸乙溶麯•溶離之後•第一籲板以 番草醛試爾囔II並在105-110*0下加热直至逋麴最大 黏強度•而後該板在白光及UV光365及/或2 5 4η·下被 照相•第二镧板在UV光下36 5及2 5 4η·下被照相· 上述5籲樣本之CDs分析结果被列示於下表IV : (請先閱讀背面之注$項再填窝本頁) 訂 經濟部中央揉準局WC工消費合作社印製 本紙張尺度遢用中國國家標牟(CNS }八4規格(210X297公釐} A7 B7 補充資料 表 IV 對照雄之押割Ζ 樣本之抑制X 試驗之禳«譌差 1 . ZD 0.95 0.18 2.ZD+CC -鎩粉 _ 1.18 0.47 3.ZD +啤酒_母 1.01 0.40 4.ZD+er -醱粉 _ 1.17 0.40 +埤酒酵母 % 5.如⑷中處理之 1.06 0.08 ZD + 典丙酵 樣本2中藉由添;ί D糖化_ α -醱粉_ ,未使用酵母而僅 S · ϋ. —--I I S - ^|_| 1.1 II · —ϋ I (請先閱讀背面之注$項再填寫本頁) 訂 降低贿意物中多釀之量。如所見,此酶《理在 活讎外 CD23分析测定時未見任掏醫蕖活性之流失•此實驗也印 酱實施例1中使用埤酒酵母及啤酒酵母加上a-毈粉_ 之路果β又,樣本5中的热煮嫌,其含以cr-澱粉_滅 少之多醣及以啤酒酵母滅少之可發酵糖,接受如申請專利 範園第1項步》(c)中所需之後鑛溶_萃取《再次顯現 未流失其醫藥活性。 樣本1至4之如上述裂得之TLC板照相被示於圖3 (a) - (沐)其中首4行分別表示樣本1至4。结果確認處理過之 樣本2至4之TLC態樣近乎相同於對照樣本1。對搛本 5進行類似之TLC分析,其再次顯現近乎相同之態搛。 TLC態樣確芘在如上表IV中所有2至5處理後澱粉及可 發酵糖之不存在。從實施例13淸楚可見僅使用ot-«粉 N進行時之方法也符合本發明所陳述之目標。 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X297公釐) —8 — A ! 經濟部中央橾率局貝工消费合作社印氧 經濟部中央橾率局貝工消费合作社印装 A7 __B7_ 補充資料 實施例3 此實驗為使用啤酒薄母之發酵方法之人工建造棋型以 顯示醣苷在使用酵母滅少«萄糖之方法中未被去除。 10b1 0.2X甘草酸及10·1飽和芸番苷溶液被混合及添 加«萄耱以取得U溶液。添加1.2b 1 10Χ現製酵母懸浮 液。在時段0,3, 5及24小時時,取出2ml樣本及離心以 去除酵母。10# 1轚份被點在Vhatian AL SIL G/UV TLC 板及使用下列溶劑延展15〇之距離: 6 4 : 5 0 : 1 0 «仿/甲醇/水 TLC板在以香草jg /硫酸喷劑喷篇後,於白及UV光(365 η )下被照相。 在發酵期間,混合物中之醣苷未顥現被降解,反之混 合物中之《萄糖斯消失且在24小時後完金消失,TLC板之 照Μ示於圈4,自左至右各行表示在時段0,3, 5及24小時 之上述反應混合物,0.IX甘草酸,芸香笞(飽和溶掖)及U 葡萄耱溶液,層析(圔4 )淸楚地顯示可發酵耱(葡萄耱) 之量随 反應時間而»少,且在24小時後金部消失。24 小時後甘草酸及芸香甘之》待徽嫌持在相近之尺寸及強 度,定 11 可見拥定法(Quantitation visable deterdnations)具10至20X誤差界限,在實驗方法之限 制内,並未發現由_降解引起之醏甘濃度可目》之變化 -9 - (請先《讀背面之注$項再填窝本頁)
    經 中 央 檬 貝 合 作 社 補充資料; 術語匯钃 A7 B7 用來定義植tt的身份或组成的術牾•在齊譫例中以拉丁雙名給出•所用的植物的各《部位定義如下: -基 _皮 ~根皮 _地上部分 一果貢 -根 一根Μ -霍子 一花德 Cauli s Cortex Cortex radicis H e r b a F r u c t u s Radix Rhizoaa S eien S p i ka 忒鳙霣嫌明 la表示l〇#l PSE 10 1+ff母輿曝光轚碼952作比較 之TLC照Η * lb表示l〇;ul PSE 101-Β»母與曝光猇碼954作比較 之TLC照片· ΒΓ 2表示自左而右,t = 0 , t = 3 h r . t = 2 4 h r時之1 0 μ 1 發酵痗合物,GA : 0. IX甘草酸,R :飽和芸香苷溶液· G : 1X«萄糖之TLC照Η。 圃3a表示自左而右,PSE 101, PSE 101+ot-澱粉梅, PSE 101♦酵母,PSE 101 + ot-澱粉路+兩健装載量之酵母 ,5« 1 & 10w 1在CHCla /EtOAc 1:1溶雨中延展,及在 噴灌番草β/Ηϋ S(U試W後於白光下照相之TLC照M。 -10 - 本纸張尺度適用中國國家摞率(CNS >A4洗格(2丨0X297公羞) 請 先 BQ 之 注 I 頁 打 A7 B7 補充資料 BI3b表示自左而右,PSE 101, PSE 101 + ct-澱粉酶, PSE 101♦酵母,PSE 101 + ct-»粉W+兩钿裝載纛之酵母 ,5/il & 10μ1,及在嘖篇香草g/lU SO*試劑後,及 在喷篇番草醛/ H2 S〇4試_後於UV光365η·下照相之 TLC照 Κ。 13c表示自左而右,PSE 101, PSE 101*α-靉粉《Ϊ, PSE 101+酵母,PSE 101+α-澱粉_ ♦兩傾裝載ft之酵母 ,51 & 10« 1,在 CHC13 /MeOH/EtOAc/HH3 8:4: 1 ♦蒸氣溶劑下延展及在嗦灌香草醛/Ha S〇4試劑後,在 UV光365nn下照相之TLC照Μ。 画3d表示自左而右,PSE 101, PSE 101 + ot-釅粉 PSE 101+酵母,PSE 101 + σ-澱粉_ ♦兩«8裝載量之酵母 ,5 w 1 & 18u 1 在 CHCU /MeOH/EtOAc/HH38*.4:l+蒸氣溶 劑中延展,及在喷爾香草醛/H2 S04試两後,在UV之 254η·下照相之TLC照K。 4 表示自在而右,t = 0 , t = 3 h r , t = 5 h r · t = 2 4 h r 之 反應混合物及0.IX甘草酸,芸香苷(飽和溶掖)及IX葡 萄糖溶液在64: 50: 10氰仿/甲酵/水溶劑下延展及在 哦灌番草K /硫酸喷劑後於白光及UV光(365ηιη)下照相 之TLC照片。 ... ·ϋ *··ϋ · .i 1 1 t^i f Bt Mans ^i* m * (請先閱讀背面之注f項再濞寫本霣) •—'tt ^ n n n —i n 5^., nnn . 中 央 梂 Ά X. 合 作 社 本紙張尺度逋用中國國家楳率(CNS >A4規格< 210x297公羞) 300850 第 la 圖
    τ—uimjflu 日期:2 9 / 1 1 / 9 3, 照相機:K ο II i c a 底片:Kodak, 型:Go]d II , 速度:100 ASA 曝光號碼:954 板之索引號碼:PSE/0/發酵 光圏f : 5 · 6 時間:6 G秒 濾鏡:橙色 光線:白 U V 2 5 4 V (J V 365 吸收物:W h a t m a η K 6砂_ 溶劑糸統:①CHC13 /EtOAc ② CHC1 3 /HeOH/EtOAc/NH 3 8 : 4 : 1 : V a p 偵測試劑/處理:無 10# 1 PSE101+酵母 與曝光號碼9 5 2作比較
    T丄ϋ照」=目一阻1 Π Μ : ϋ 9 / 1 1 / 9 3, 照相機:Κ ο η i c a . 底片:Kodak, 型:Gold II, 速度:100 ASA 曝光號碼:952 板之索引號碼:PSE/0 /發酵 光圈f : 5 . 6 時間:6 0秒 濾鏡:橙色 光線:白 U V 2 5 4 V IJ V 36 5 吸收物:Whatman K6砂朦 溶劑条統:①C H C 1 3 / E t 0 A c © C H C 1 a /MeOH/EtOAc/NH 3 8: 4 : 1 : V a p 偵測試劑/處理:無 10/^1 PSE 101-酵母 與曝光號碼9 5 4作比較
    第2圖
    T L C照相明 曰期 : 20/12/93 照相機 :Κ ο n i c a 底片 : Kodak 型:G ο 1 d II 速度:100 ASA 曝光 號 碼:1 0 0 9 板之索 引號碼:煎煮模型發酵 光圈 f :5-6 時間:60秒 濾鏡:橙色 光線 : 白 U V U V 吸收 物 :W h a t h a 1 A 1 s i 1 9/UV 溶劑 % 统:C H C 1 3 /MeOH/H 2 〇 64:50:10 偵測 溶 劑/處理: 香草醛/硫酸 在litre加熱至最高強度為ίο# 1發酵混合物 (芸香甘+葡萄糖+1酸+酵母) 圖中左至右為: t : 2 4 h , GA--0.1X 甘酸
    t:0 , t:3h, t: 5 h , R:跑合芸香tf溶液 G : 1¾葡萄糖 A B7 補 s
    (請先閱蟥背面之注意事唷"嗔寫本貰'> 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製
    樣本⑴,(2),⑶&⑷之TLC照片 (左-右⑴ PSE 丨 01 , (2)PSE 101 + cr -澱粉酶⑶ PES 101+»W ⑷巧«-關酶+兩個裝载量 及在關香賴 (b)如(a),但在UV光365ma下照相 -15 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X297公釐) 83. 3. 10,000 A7 B7 資充補
    tt—L 11 ^ ^ *&-·- k L (請先閲靖肯面之>i意事-^吟典.巧本^.- IT 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製
    (c) 在CHCl/MeOH/EtOAC/NH3 8:4:1+蒸氣溶劑中延展及在叭光36511111下照相 (d) 如(c),但在UV光254nm下照相 16 線 本紙張尺度逍用中國國家標準(CNS ) A4说格(210X297公釐) 83. 3. 10,000 300850 A7 B7 經濟部中央標準局舅工消費合作社印製
    (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS ) A4規格(210X297公釐) 83. 3.10,000
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