TW202415653A

TW202415653A - Ｂｃｌ－ｘｌ降解化合物

Info

Publication number: TW202415653A
Application number: TW112128795A
Authority: TW
Inventors: 邢唯強; 刁劍雄; 何龍; 賴瑋婷; 雷瑛; 曹敏; 陳明辰; 劉帆; 謝陽; 郭炳詩; 陳航
Original assignee: 大陸商北京星奇原生物科技有限公司
Priority date: 2022-08-02
Filing date: 2023-08-01
Publication date: 2024-04-16
Also published as: WO2024027706A1

Abstract

本文提供了靶向Bcl-xL蛋白以進行泛素化和蛋白酶體降解的雜芳族化合物，特別是一種具有式(I-A)的結構的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體。本文還提供了使用所述化合物治療疾病的方法。

Description

BCL-XL降解化合物

BCL-2 (B細胞淋巴瘤-2)蛋白家族充當細胞凋亡的線粒體通路的關鍵調節因數，並且由抗凋亡蛋白（諸如BCL-2、BCL-XL、BCL-W、A1和MCL-1）與促凋亡蛋白（諸如Bak、Bax、Bid、Bim、Bad、Bik、Bmf、Noxa和Puma）兩者組成[1-2]。促凋亡BCL-2蛋白和抗凋亡BCL-2蛋白通常彼此相反地起作用。通過用小分子處理或通過RNA干擾來阻斷它們之間的相互作用會導致線粒體外膜通透化(MOMP)以及細胞色素c、第二線粒體源性半胱天冬酶啟動因數(SMAC)和其他促凋亡因數的釋放[3]。這些事件接著觸發半胱天冬酶啟動級聯和後續細胞凋亡[4]。

BCL-XL屬於抗凋亡BCL-2蛋白家族，並且通過保護腫瘤細胞免遭凋亡而在促進腫瘤起始、進展和藥物抗性的顯現中起重要作用[5]。用小分子抑制劑抑制這些BCL-2家族蛋白作為一種癌症治療策略已被廣泛研究[6-11]。

視網膜血管病變是工業化世界中失明的主要原因，並且當前標準沒有完全解決這些疾病。在視網膜病變（諸如年齡相關性黃斑變性(AMD)和糖尿病黃斑水腫(DME)）的衰老相關模型中，衰老細胞影響組織微環境以驅動疾病進展。UNITY提供證據表明當病理性視網膜前血管新生形成時，血管單元的細胞快速啟用導致p16INK4A啟動和促存活蛋白BCL-XL上調的通路，最終導致細胞衰老。UNITY正在開發抗衰老藥物(UBX1325)以消除衰老細胞來恢復組織健康[12]。專注于新型治療範式，通過BCL-XL抑制劑或PROTAC消除血管衰老細胞應該會重建屏障功能並逆轉DME和AMD患者的疾病進展。BCL-XL抑制劑或PROTAC靶向在抗VEGF療法的上游的節點。靶向衰老效應物/抗凋亡蛋白BCL-XL抑制病理性血管生成，從而為消除失調的血管新生提供靶標。

本文提供了靶向Bcl-xL蛋白以進行泛素化和蛋白酶體降解的化合物。本文還提供了使用所述化合物治療疾病的方法。

一個實施方案提供了一種化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，具有式(I-A)的結構： (I-A) 其中， o是0、1、2或3； Y是S或CH=CH；每個R ¹獨立地選自鹵素、硝基、氰基、-OR ²、-N(R ²) ₂、-SR ²、-S(O)R ²、-S(O) ₂R ²、-S(O) ₂N(R ²) ₂、-NR ²S(O) ₂R ²、-NR ²S(O) ₂N(R ²) ₂、-C(O)R ²、-C(O)OR ²、-OC(O)R ²、-OC(O)OR ²、-OC(O)N(R ²) ₂、-NR ²C(O)R ²、-NR ²C(O)OR ²、-NR ²C(O)N(R ²) ₂、-C(O)N(R ²) ₂、-P(O)(OR ²) ₂、-P(O)(R ²) ₂、任選地被取代的C _1-6烷基、任選地被取代的C _1-6鹵代烷基、任選地被取代的C _1-6烷氧基，任選地被取代的C _2-6烷基，其中1至2個-CH ₂-單元被N、O或S替換，前提是兩個相鄰的-CH ₂-單元不被同時替換，任選地被取代的C _3-12碳環基和任選地被取代的3元至12元雜環基；每個R ²各自獨立地是氫或任選地被取代的C _1-6烷基；或兩個R ²與它們所連接的氮原子一起可形成任選地被取代的3-6元雜環基環； V是鍵、、任選地被取代的雜芳基、任選地被取代的芳基、任選地被取代的C _3-7環烷基或任選地被取代的雜環基；或一起形成稠合雙環芳基環或稠合雙環雜芳基環，其各自被o個R ¹的實例取代； L選自a) C ₂-C ₁₅亞烷基，b) C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換，前提是兩個O原子不是相鄰的，或c) -Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*； Ak ¹選自-(CR ³R ⁴) _k-； Ak ²選自-(CR ³R ⁴) _m-； Ak ³選自-(CR ³R ⁴) _n-； k、m和n中的每一者選自0至6；每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基；或 R ³和R ⁴一起形成氧代基； Z ¹和Z ²各自獨立地選自鍵、-O-、亞雜環基和亞環烷基；其中Z ¹和Z ²中的至少一者是亞雜環基或亞環烷基；並且 U是選自VHL配體的募集基序。

一個實施方案提供了一種藥物組合物，包含式(I-A)的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，以及至少一種藥學上可接受的賦形劑。

一個實施方案提供了式(I-A)的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，用於治療人或動物的方法中。

一個實施方案提供了式(I-A)的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，用於治療癌症或腫瘤性疾病的方法中。

一個實施方案提供了式(I-A)的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體在製造用於治療癌症或腫瘤性疾病的藥物中的用途。

一個實施方案提供了一種治療有需要的患者的疾病或病症的方法，包括向所述患者施用式(I-A)的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體。另一實施方案提供了所述方法，其中所述疾病或病症是癌症。

一個實施方案提供了一種治療有需要的患者的癌症的方法，包括向所述患者施用藥物組合物，該藥物組合物包含式(I-A)的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體以及藥學上可接受的賦形劑。

如本文和所附權利要求中使用的，單數形式“一個”、“一種”和“該”包括複數指代物，除非上下文另有明確規定。因此，例如，提及“一劑”包括多個此類劑，而對“該細胞”的提及包括對一個或更多細胞(或者多個細胞)的提及以及本領域技術人員已知的等效物，以此類推。當範圍在本文中用於物理性質，如分子量，或者化學性質，如化學式時，範圍的所有組合和子組合以及其中的具體實施方案旨在包括在內。當提到數字或者數值範圍時，術語“約”意為所指的數值或數值範圍是在實驗變化性內(或在統計實驗誤差內)的近似值，並且因此，在一些情況下，所述數值或數值範圍將在所陳述數值或數值範圍的1%與15%之間變化。術語“包括”（以及相關術語諸如“包含”或“具有”或“含有”）是包括性的或開放式的，並且不排除額外未敘述要素。定義

如在說明書和所附權利要求中所用的，除非另有相反的規定，否則以下術語具有如下表示的含義。

“氨基”是指–NH ₂自由基。

“氰基”是指-CN自由基。

“硝基”是指-NO ₂自由基。

“氧雜基”是指-O-自由基。

“氧代基”是指=O自由基。

“硫代基”是指=S自由基。

“亞氨基”是指=N-H自由基。

“肟基”是指=N-OH自由基。

“肼基”是指=N-NH ₂自由基。

“烷基”是指僅由碳和氫原子組成，不含有不飽和度，具有一個至十五個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈自由基（例如C ₁-C ₁₅烷基）。在某些實施方案中，烷基包含一個至十三個碳原子（例如C ₁-C ₁₃烷基）。在某些實施方案中，烷基包含一個至八個碳原子（例如C ₁-C ₈烷基）。在其他實施方案中，烷基包含一個至六個碳原子（例如C ₁-C ₆烷基）。在其他實施方案中，烷基包含一個至五個碳原子（例如C ₁-C ₅烷基）。在其他實施方案中，烷基包含一個至四個碳原子（例如C ₁-C ₄烷基）。在其他實施方案中，烷基包含一個至三個碳原子（例如C ₁-C ₃烷基）。在其他實施方案中，烷基包含一個至兩個碳原子（例如C ₁-C ₂烷基）。在其他實施方案中，烷基包含一個碳原子（例如C ₁烷基）。在其他實施方案中，烷基包含五個至十五個碳原子（例如C ₅-C ₁₅烷基）。在其他實施方案中，烷基包含五個至八個碳原子（例如C ₅-C ₈烷基）。在其他實施方案中，烷基包含兩個至五個碳原子（例如C ₂-C ₅烷基）。在其他實施方案中，烷基包含三個至五個碳原子（例如C ₃-C ₅烷基）。在其他實施方案中，烷基選自甲基、乙基、1-丙基（正丙基）、1-甲基乙基（異丙基）、1-丁基（正丁基）、1-甲基丙基（仲丁基）、2-甲基丙基（異丁基）、1,1-二甲基乙基（叔丁基）、1-戊基（正戊基）。該烷基通過單鍵與該分子的其餘部分連接。除非在說明書中另有明確規定，否則烷基任選地被一個或多個下列取代基取代：鹵代基、氰基、硝基、氧代基、硫代基、亞氨基、肟基、三甲基矽烷基、-OR ^a、-SR ^a、-OC(O)-R ^a、-N(R ^a) ₂、-C(O)R ^a、-C(O)OR ^a、-C(O)N(R ^a) ₂、-N(R ^a)C(O)OR ^a、-OC(O)-N(R ^a) ₂、-N(R ^a)C(O)R ^a、-N(R ^a)S(O) _tR ^a（其中t是1或2）、-S(O) _tOR ^a（其中t是1或2）、-S(O) _tR ^a（其中t是1或2）和-S(O) _tN(R ^a) ₂（其中t是1或2），其中每個R ^a獨立地是氫、烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、氟代烷基、碳環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、碳環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）或雜芳基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）。

“烷氧基”是指通過式–O-烷基的氧原子來鍵合的自由基，其中烷基是如上定義的烷基鏈自由基。

“烯基”是指僅由碳和氫原子組成，含有至少一個碳-碳雙鍵，並且具有兩個至十二個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈自由基基團。在某些實施方案中，烯基包含兩個至八個碳原子。在其他實施方案中，烯基包含兩個至四個碳原子。烯基通過單鍵連接于分子的其餘部分，例如乙烯基(ethenyl)（即乙烯基(vinyl)）、丙-1-烯基（即烯丙基）、丁-1-烯基、戊-1-烯基、戊-1,4-二烯基等。除非在說明書中另有具體陳述，否則烯基基團任選地被以下取代基中的一者或多者取代：鹵代基、氰基、硝基、氧代基、硫代基、亞氨基、肟基、三甲基矽烷基、-OR ^a、-SR ^a、-OC(O)-R ^a、-N(R ^a) ₂、-C(O)R ^a、-C(O)OR ^a、-C(O)N(R ^a) ₂、-N(R ^a)C(O)OR ^a、-OC(O)-N(R ^a) ₂、-N(R ^a)C(O)R ^a、-N(R ^a)S(O) _tR ^a（其中t是1或2）、-S(O) _tOR ^a（其中t是1或2）、-S(O) _tR ^a（其中t是1或2）和-S(O) _tN(R ^a) ₂（其中t是1或2），其中每個R ^a獨立地是氫、烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、氟代烷基、碳環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、碳環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基(任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）或雜芳基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）。

“炔基”是指僅由碳和氫原子組成，含有至少一個碳-碳三鍵，具有兩個至十二個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈自由基基團。在某些實施方案中，炔基包含兩個至八個碳原子。在其他實施方案中，炔基包含兩個至六個碳原子。在其他實施方案中，炔基包含兩個至四個碳原子。炔基通過單鍵連接于分子的其餘部分，例如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基等。除非在說明書中另有具體陳述，否則炔基任選地被以下取代基中的一者或多者取代：鹵代基、氰基、硝基、氧代基、硫代基、亞氨基、肟基、三甲基矽烷基、-OR ^a、-SR ^a、-OC(O)-R ^a、-N(R ^a) ₂、-C(O)R ^a、-C(O)OR ^a、-C(O)N(R ^a) ₂、-N(R ^a)C(O)OR ^a、-OC(O)-N(R ^a) ₂、-N(R ^a)C(O)R ^a、-N(R ^a)S(O) _tR ^a（其中t是1或2）、-S(O) _tOR ^a（其中t是1或2）、-S(O) _tR ^a（其中t是1或2）和-S(O) _tN(R ^a) ₂（其中t是1或2），其中每個R ^a獨立地是氫、烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、氟代烷基、碳環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、碳環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）或雜芳基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）。

“亞烷基”或“亞烷基鏈”是指將分子的其餘部分連接於自由基基團，僅由碳和氫組成，不含有不飽和度，並且具有一個至十二個碳原子的直鏈或支鏈二價烴鏈，例如亞甲基、亞乙基、亞丙基、亞正丁基等。亞烷基鏈通過單鍵連接于分子的其餘部分，並且通過單鍵連接於自由基基團。亞烷基鏈與分子的其餘部分以及與自由基基團的連接點通過亞烷基鏈中的一個碳或通過該鏈內的任意兩個碳進行。在某些實施方案中，亞烷基包含一個至八個碳原子（例如C ₁-C ₈亞烷基）。在其他實施方案中，烷基包含一個至六個碳原子（例如C ₁-C ₆亞烷基）。在其他實施方案中，亞烷基包含一個至五個碳原子（例如C ₁-C ₅亞烷基）。在其他實施方案中，亞烷基包含一個至四個碳原子（例如C ₁-C ₄亞烷基）。在其他實施方案中，亞烷基包含一個至三個碳原子（例如C ₁-C ₃亞烷基）。在其他實施方案中，亞烷基包含一個至兩個碳原子（例如C ₁-C ₂亞烷基）。在其他實施方案中，亞烷基包含一個碳原子（例如C ₁亞烷基）。在其他實施方案中，亞烷基包含五個至八個碳原子（例如C ₅-C ₈亞烷基）。在其他實施方案中，亞烷基包含兩個至五個碳原子（例如C ₂-C ₅亞烷基）。在其他實施方案中，亞烷基包含三個至五個碳原子（例如C ₃-C ₅亞烷基）。除非說明書中另有具體陳述，否則亞烷基鏈任選地被以下取代基中的一者或多者取代：鹵代基、氰基、硝基、氧代基、硫代基、亞氨基、肟基、三甲基矽烷基、-OR ^a、-SR ^a、-OC(O)-R ^a、-N(R ^a) ₂、-C(O)R ^a、-C(O)OR ^a、-C(O)N(R ^a) ₂、-N(R ^a)C(O)OR ^a、-OC(O)-N(R ^a) ₂、-N(R ^a)C(O)R ^a、-N(R ^a)S(O) _tR ^a（其中t是1或2）、-S(O) _tOR ^a（其中t是1或2）、-S(O) _tR ^a（其中t是1或2）和-S(O) _tN(R ^a) ₂（其中t是1或2），其中每個R ^a獨立地是氫、烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、氟代烷基、碳環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、碳環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）或雜芳基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）。

“亞烯基”或“亞烯基鏈”是指將分子的其餘部分連接於自由基基團，僅由碳和氫組成，含有至少一個碳-碳雙鍵，並且具有兩個至十二個碳原子的直鏈或支鏈二價烴鏈。亞烯基鏈通過單鍵連接于分子的其餘部分，並且通過單鍵連接於自由基基團。在某些實施方案中，亞烯基包含兩個至八個碳原子（例如C ₂-C ₈亞烯基）。在其他實施方案中，亞烯基包含兩個至五個碳原子（例如C ₂-C ₅亞烯基）。在其他實施方案中，亞烯基包含兩個至四個碳原子（例如C ₂-C ₄亞烯基）。在其他實施方案中，亞烯基包含兩個至三個碳原子（例如C ₂-C ₃亞烯基）。在其他實施方案中，亞烯基包含兩個碳原子（例如C ₂亞烯基）。在其他實施方案中，亞烯基包含五個至八個碳原子（例如C ₅-C ₈亞烯基）。在其他實施方案中，亞烯基包含三個至五個碳原子（例如C ₃-C ₅亞烯基）。除非在說明書中另有具體陳述，否則亞烯基鏈任選地被以下取代基中的一者或多者取代：鹵代基、氰基、硝基、氧代基、硫代基、亞氨基、肟基、三甲基矽烷基、-OR ^a、-SR ^a、-OC(O)-R ^a、-N(R ^a) ₂、-C(O)R ^a、-C(O)OR ^a、-C(O)N(R ^a) ₂、-N(R ^a)C(O)OR ^a、-OC(O)-N(R ^a) ₂、-N(R ^a)C(O)R ^a、-N(R ^a)S(O) _tR ^a（其中t是1或2）、-S(O) _tOR ^a（其中t是1或2）、-S(O) _tR ^a（其中t是1或2）和-S(O) _tN(R ^a) ₂（其中t是1或2），其中每個R ^a獨立地是氫、烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、氟代烷基、碳環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、碳環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）或雜芳基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）。

“亞炔基”或“亞炔基鏈”是指將分子的其餘部分連接於自由基基團，僅由碳和氫組成，含有至少一個碳-碳三鍵，並且具有兩個至十二個碳原子的直鏈或支鏈二價烴鏈。亞炔基鏈通過單鍵連接于分子的其餘部分，並且通過單鍵連接於自由基基團。在某些實施方案中，亞炔基包含兩個至八個碳原子（例如C ₂-C ₈亞炔基）。在其他實施方案中，亞炔基包含兩個至五個碳原子（例如C ₂-C ₅亞炔基）。在其他實施方案中，亞炔基包含兩個至四個碳原子（例如C ₂-C ₄亞炔基）。在其他實施方案中，亞炔基包含兩個至三個碳原子（例如C ₂-C ₃亞炔基）。在其他實施方案中，亞炔基包含兩個碳原子（例如C ₂亞炔基）。在其他實施方案中，亞炔基包含五個至八個碳原子（例如C ₅-C ₈亞炔基）。在其他實施方案中，亞炔基包含三個至五個碳原子（例如C ₃-C ₅亞炔基）。除非在說明書中另有具體陳述，否則亞炔基鏈任選地被以下取代基中的一者或多者取代：鹵代基、氰基、硝基、氧代基、硫代基、亞氨基、肟基、三甲基矽烷基、-OR ^a、-SR ^a、-OC(O)-R ^a、-N(R ^a) ₂、-C(O)R ^a、-C(O)OR ^a、-C(O)N(R ^a) ₂、-N(R ^a)C(O)OR ^a、-OC(O)-N(R ^a) ₂、-N(R ^a)C(O)R ^a、-N(R ^a)S(O) _tR ^a（其中t是1或2）、-S(O) _tOR ^a（其中t是1或2）、-S(O) _tR ^a（其中t是1或2）和-S(O) _tN(R ^a) ₂（其中t是1或2），其中每個R ^a獨立地是氫、烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、氟代烷基、碳環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、碳環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）或雜芳基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）。

“芳基”是指通過從環原子去除氫原子而由芳族單環或多環烴環體系衍生的自由基。芳族單環或多環烴環體系僅含有氫和五個至十八個碳原子的碳，其中該環體系中的至少一個環是完全不飽和的，即它含有符合休克爾(Hückel)理論的環狀離域(4n+2) π電子系統。衍生出芳基的環體系包括但不限於諸如苯、芴、茚滿、茚、四氫萘和萘的基團。除非在說明書中另有具體陳述，否則術語“芳基”或首碼“芳”（諸如在“芳烷基”中）意在包括任選地被一個或多個取代基取代的芳基自由基，所述一個或多個取代基獨立地選自烷基、烯基、炔基、鹵代基、氟代烷基、氰基、硝基、任選地被取代的芳基、任選地被取代的芳烷基、任選地被取代的芳烯基、任選地被取代的芳炔基、任選地被取代的碳環基、任選地被取代的碳環基烷基、任選地被取代的雜環基、任選地被取代的雜環基烷基、任選地被取代的雜芳基、任選地被取代的雜芳基烷基、-R ^b-OR ^a、-R ^b-OC(O)-R ^a、-R ^b-OC(O)-OR ^a、-R ^b-OC(O)-N(R ^a) ₂、-R ^b-N(R ^a) ₂、-R ^b-C(O)R ^a、-R ^b-C(O)OR ^a、-R ^b-C(O)N(R ^a) ₂、-R ^b-O-R ^c-C(O)N(R ^a) ₂、-R ^b-N(R ^a)C(O)OR ^a、-R ^b-N(R ^a)C(O)R ^a、-R ^b-N(R ^a)S(O) _tR ^a（其中t是1或2）、-R ^b-S(O) _tR ^a（其中t是1或2）、-R ^b-S(O) _tOR ^a（其中t是1或2）和-R ^b-S(O) _tN(R ^a) ₂（其中t是1或2），其中每個R ^a獨立地是氫、烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、氟代烷基、環烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、環烷基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）或雜芳基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代），每個R ^b獨立地是直接鍵或直鏈或支鏈亞烷基或亞烯基鏈，並且R ^c是直鏈或支鏈亞烷基或亞烯基鏈，並且其中除非另外指示，否則以上取代基中的每一者是未被取代的。

“芳烷基”是指式-R ^c-芳基的自由基，其中R ^c是如上定義的亞烷基鏈，例如亞甲基、亞乙基等。芳烷基自由基的亞烷基鏈部分如以上對於亞烷基鏈所述任選地被取代。芳烷基自由基的芳基部分如以上對於芳基所述任選地被取代。

“芳烯基”是指式–R ^d-芳基的自由基，其中R ^d是如上定義的亞烯基鏈。芳烯基自由基的芳基部分如以上對於芳基所述任選地被取代。芳烯基自由基的亞烯基鏈部分如以上對於亞烯基所定義任選地被取代。

“芳炔基”是指式-R ^e-芳基的自由基，其中R ^e是如上定義的亞炔基鏈。芳炔基自由基的芳基部分如以上對於芳基所述任選地被取代。芳炔基自由基的亞炔基鏈部分如以上對於亞炔基鏈所定義任選地被取代。

“芳烷氧基”是指通過式-O-R ^c-芳基的氧原子來鍵合的自由基，其中R ^c是如上定義的亞烷基鏈，例如亞甲基、亞乙基等。芳烷基自由基的亞烷基鏈部分如以上對於亞烷基鏈所述任選地被取代。芳烷基自由基的芳基部分如以上對於芳基所述任選地被取代。

“碳環基”是指僅由碳和氫原子組成的穩定非芳族單環或多環烴自由基，其包括稠合、橋接或螺環環體系，具有三個至十五個碳原子。在某些實施方案中，碳環基包含三個至十個碳原子。在其他實施方案中，碳環基包含五個至七個碳原子。碳環基通過單鍵連接于分子的其餘部分。碳環基是飽和的（即僅含有C-C單鍵）或不飽和的（即含有一個或多個雙鍵或三鍵）。完全飽和的碳環基自由基也被稱為“環烷基”。單環環烷基的實例包括例如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基和環辛基。不飽和碳環基也被稱為“環烯基”。單環環烯基的實例包括例如環戊烯基、環己烯基、環庚烯基和環辛烯基。多環碳環基自由基包括例如金剛烷基、降冰片基（即雙環[2.2.1]庚烷基）、降冰片烯基、十氫萘基、7,7-二甲基-雙環[2.2.1]庚烷基等。螺環碳環基或環烷基自由基包括例如螺[2.2]戊烷、螺[2.3]己烷、螺[2.4]庚烷、螺[2.5]辛烷、螺[2.6]壬烷、螺[3.3]庚烷、螺[3.4]辛烷、螺[3.5]壬烷、螺[3.6]癸烷、螺[4.4]壬烷、螺[4.5]癸烷、螺[4.6]十一烷、螺[5.5]十一烷、螺[5.6]十二烷、螺[6.6]十三烷等。除非在說明書中另有具體陳述，否則術語“碳環基”意在包括任選地被一個或多個取代基取代的碳環基自由基，所述一個或多個取代基獨立地選自烷基、烯基、炔基、鹵代基、氟代烷基、氧代基、硫代基、氰基、硝基、任選地被取代的芳基、任選地被取代的芳烷基、任選地被取代的芳烯基、任選地被取代的芳炔基、任選地被取代的碳環基、任選地被取代的碳環基烷基、任選地被取代的雜環基、任選地被取代的雜環基烷基、任選地被取代的雜芳基、任選地被取代的雜芳基烷基、-R ^b-OR ^a、-R ^b-OC(O)-R ^a、-R ^b-OC(O)-OR ^a、-R ^b-OC(O)-N(R ^a) ₂、-R ^b-N(R ^a) ₂、-R ^b-C(O)R ^a、-R ^b-C(O)OR ^a、-R ^b-C(O)N(R ^a) ₂、-R ^b-O-R ^c-C(O)N(R ^a) ₂、-R ^b-N(R ^a)C(O)OR ^a、-R ^b-N(R ^a)C(O)R ^a、-R ^b-N(R ^a)S(O) _tR ^a（其中t是1或2）、-R ^b-S(O) _tR ^a（其中t是1或2）、-R ^b-S(O) _tOR ^a（其中t是1或2）和-R ^b-S(O) _tN(R ^a) ₂（其中t是1或2），其中每個R ^a獨立地是氫、烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、氟代烷基、環烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、環烷基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）或雜芳基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代），每個R ^b獨立地是直接鍵或直鏈或支鏈亞烷基或亞烯基鏈，並且R ^c是直鏈或支鏈亞烷基或亞烯基鏈，並且其中除非另外指示，否則以上取代基中的每一者是未被取代的。

“亞環烷基”是指將分子的其餘部分連接於自由基的二價碳環基或環烷基。

“碳環基烷基”是指式–R ^c-碳環基的自由基，其中R ^c是如上定義的亞烷基鏈。亞烷基鏈和碳環基自由基如上所定義任選地被取代。

“碳環基炔基”是指式–R ^c-碳環基的自由基，其中R ^c是如上定義的亞炔基鏈。亞炔基鏈和碳環基自由基如上所定義任選地被取代。

“碳環基烷氧基”是指通過式–O-R ^c-碳環基的氧原子來鍵合的自由基，其中R ^c是如上定義的亞烷基鏈。亞烷基鏈和碳環基自由基如上所定義任選地被取代。

如本文所用，“羧酸生物電子等排體”是指展現與羧酸部分類似的物理、生物和/或化學性質的官能團或部分。羧酸生物電子等排體的實例包括但不限於等。

“鹵代基”或“鹵素”是指溴、氯、氟或碘取代基。

“氟代烷基”是指被一個或多個如上定義的氟自由基取代的如上定義的烷基自由基，例如三氟甲基、二氟甲基、氟甲基、2,2,2-三氟乙基、1-氟甲基-2-氟乙基等。在一些實施方案中，氟代烷基自由基的烷基部分如以上對於烷基所定義任選地被取代。

“雜環基”是指穩定的3元至18元非芳族環自由基，其包含兩個至十二個碳原子和一個至六個選自氮、氧和硫的雜原子。除非在說明書中另有具體陳述，否則雜環基自由基是單環、雙環、三環或四環環體系，其任選地包括稠環、橋環或螺環環體系。雜環基自由基中的雜原子任選地被氧化。如果存在一個或多個氮原子，則其任選地被季銨化。雜環基自由基是部分或完全飽和的。雜環基通過環的任何原子連接于分子的其餘部分。此類雜環基自由基的實例包括但不限於二氧雜環戊烷基、噻吩基[1,3]二噻烷基、十氫異喹啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、異噻唑烷基、異噁唑烷基、嗎啉基、八氫吲哚基、八氫異吲哚基、2-氧代呱嗪基、2-氧代呱啶基、2-氧代吡咯烷基、噁唑烷基、呱啶基、呱嗪基、4-呱啶酮基、吡咯烷基、吡唑烷基、奎寧環基、噻唑烷基、四氫呋喃基、三硫雜環己烷基、四氫吡喃基、硫代嗎啉基、噻嗎啉基、1-氧代-硫代嗎啉基和1,1-二氧代-硫代嗎啉基、1-氮雜螺[2.2]戊烷、1-氮雜螺[2.3]己烷、1-氮雜螺[2.4]庚烷、1-氮雜螺[2.5]辛烷、1-氮雜螺[2.6]壬烷、2-氮雜螺[3.3]庚烷、2-氮雜螺[3.4]辛烷、2-氮雜螺[3.5]壬烷、2-氮雜螺[3.6]癸烷、2-氮雜螺[4.4]壬烷、2-氮雜螺[4.5]癸烷、2-氮雜螺[4.6]十一烷、3-氮雜螺[5.5]十一烷、3-氮雜螺[5.6]十二烷、3-氮雜螺[6.6]十三烷、5-氮雜螺[2.3]己烷、5-氮雜螺[2.4]庚烷、6-氮雜螺[2.5]辛烷、6-氮雜螺[2.6]壬烷、6-氮雜螺[3.4]辛烷、7-氮雜螺[3.5]壬烷、7-氮雜螺[3.6]癸烷、8-氮雜螺[4.5]癸烷、8-氮雜螺[4.6]十一烷、9-氮雜螺[5.6]十二烷、1,4-二氮雜螺[2.2]戊烷、1,5-二氮雜螺[2.3]己烷、1,5-二氮雜螺[2.4]庚烷、1,6-二氮雜螺[2.5]辛烷、1,6-二氮雜螺[2.6]壬烷、2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷、2,6-二氮雜螺[3.4]辛烷、2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷、2,7-二氮雜螺[3.6]癸烷、2,7-二氮雜螺[4.4]壬烷、2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷、2,8-二氮雜螺[4.6]十一烷、3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷、3,9-二氮雜螺[5.6]十二烷和3,10-二氮雜螺[6.6]十三烷。除非在說明書中另有具體陳述，否則術語“雜環基”意在包括任選地被一個或多個取代基取代的如上定義的雜環基自由基，所述一個或多個取代基選自烷基、烯基、炔基、鹵代基、氟代烷基、氧代基、硫代基、氰基、硝基、任選地被取代的芳基、任選地被取代的芳烷基、任選地被取代的芳烯基、任選地被取代的芳炔基、任選地被取代的碳環基、任選地被取代的碳環基烷基、任選地被取代的雜環基、任選地被取代的雜環基烷基、任選地被取代的雜芳基、任選地被取代的雜芳基烷基、-R ^b-OR ^a、-R ^b-OC(O)-R ^a、-R ^b-OC(O)-OR ^a、-R ^b-OC(O)-N(R ^a) ₂、-R ^b-N(R ^a) ₂、-R ^b-C(O)R ^a、-R ^b-C(O)OR ^a、-R ^b-C(O)N(R ^a) ₂、-R ^b-O-R ^c-C(O)N(R ^a) ₂、-R ^b-N(R ^a)C(O)OR ^a、-R ^b-N(R ^a)C(O)R ^a、-R ^b-N(R ^a)S(O) _tR ^a（其中t是1或2）、-R ^b-S(O) _tR ^a（其中t是1或2）、-R ^b-S(O) _tOR ^a（其中t是1或2）和-R ^b-S(O) _tN(R ^a) ₂（其中t是1或2），其中每個R ^a獨立地是氫、烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、氟代烷基、環烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、環烷基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）或雜芳基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代），每個R ^b獨立地是直接鍵或直鏈或支鏈亞烷基或亞烯基鏈，並且R ^c是直鏈或支鏈亞烷基或亞烯基鏈，並且其中除非另外指示，否則以上取代基中的每一者是未被取代的。

“雜烷基”是指其中烷基的一個或多個骨架原子選自除碳以外的原子例如氧、氮（例如-NH-、-N(烷基)-）、硫或它們的組合的烷基。雜烷基在所述雜烷基的碳原子處連接于分子的其餘部分。在一個方面，雜烷基是C ₁-C ₆雜烷基，其中所述雜烷基包含1至6個碳原子和一個或多個除碳以外的原子，例如氧、氮（例如-NH-、-N(烷基)-）、硫或它們的組合，其中所述雜烷基在所述雜烷基的碳原子處連接于分子的其餘部分。這種雜烷基的實例是例如–CH ₂-O-CH ₂-、–CH ₂-N(烷基)-CH ₂-、–CH ₂-N(芳基)-CH ₂-、-OCH ₂CH ₂O-、–OCH ₂CH ₂OCH ₂CH ₂O-或–OCH ₂CH ₂OCH ₂CH ₂OCH ₂CH ₂O-。除非在說明書中另有具體陳述，否則雜烷基任選地例如被氧代基、鹵素、氨基、腈、硝基、羥基、烷基、烯基、炔基、鹵代烷基、烷氧基、芳基、環烷基、雜環烷基、雜芳基等取代。在一些實施方案中，雜烷基任選地被氧代基、鹵素、甲基、乙基、-CN、-CF ₃、-OH、-OMe、-NH ₂或-NO ₂取代。在一些實施方案中，雜烷基任選地被氧代基、鹵素、甲基、乙基、-CN、-CF ₃、-OH或-OMe取代。在一些實施方案中，雜烷基任選地被鹵素取代。

“亞雜環基”是指將分子的其餘部分連接於自由基基團的二價雜環基。

“ N-雜環基”或“N-連接的雜環基”是指含有至少一個氮的如上定義的雜環基自由基，並且其中所述雜環基自由基與該分子的其餘部分的連接點通過所述雜環基自由基中的氮原子來達成。 N-雜環基自由基如以上對於雜環基自由基所述任選地被取代。此類 N-雜環基自由基的實例包括但不限於1-嗎啉基、1-呱啶基、1-呱嗪基、1-吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑啉基和咪唑烷基。

“ C-雜環基”或“C-連接的雜環基”是指含有至少一個雜原子的如上定義的雜環基自由基，並且其中所述雜環基自由基與該分子的其餘部分的連接點通過所述雜環基自由基中的碳原子來達成。 C-雜環基自由基如以上對於雜環基自由基所述任選地被取代。此類 C-雜環基自由基的實例包括但不限於2-嗎啉基、2-呱啶基或3-呱啶基或4-呱啶基、2-呱嗪基、2-吡咯烷基或3-吡咯烷基等。

“雜環基烷基”是指式–R ^c-雜環基的自由基，其中R ^c是如上定義的亞烷基鏈。如果雜環基是含氮雜環基，那麼雜環基任選地在氮原子處連接於烷基自由基。雜環基烷基自由基的亞烷基鏈如以上對於亞烷基鏈所定義任選地被取代。雜環基烷基自由基的雜環基部分如以上對於雜環基所定義任選地被取代。

“雜環基烷氧基”是指通過式–O-R ^c-雜環基的氧原子來鍵合的自由基，其中R ^c是如上定義的亞烷基鏈。如果雜環基是含氮雜環基，那麼雜環基任選地在氮原子處連接於烷基自由基。雜環基烷氧基自由基的亞烷基鏈如以上對於亞烷基鏈所定義任選地被取代。雜環基烷氧基自由基的雜環基部分如以上對於雜環基所定義任選地被取代。

“雜芳基”是指由3元至18元芳族環自由基衍生的自由基，其包含兩個至十七個碳原子和一個至六個選自氮、氧和硫的雜原子。如本文所用，雜芳基自由基是單環、雙環、三環或四環環體系，其中所述環體系中的至少一個環是完全不飽和的，即它含有符合休克爾理論的環狀離域(4n+2) π電子系統。雜芳基包括稠環或橋環體系。雜芳基自由基中的雜原子任選地被氧化。如果存在一個或多個氮原子，則其任選地被季銨化。雜芳基通過環的任何原子連接于該分子的其餘部分。雜芳基的實例包括但不限於氮雜䓬基、吖啶基、苯並咪唑基、苯並吲哚基、1,3-苯並間二氧雜環戊烯基、苯並呋喃基、苯並噁唑基、苯並[d]噻唑基、苯並噻二唑基、苯並[ b][1,4]二氧雜環庚二烯基、苯並[b][1,4]噁嗪基、1,4-苯並二噁烷基、苯並萘並呋喃基、苯並噁唑基、苯並間二氧雜環戊烯基、苯並二氧雜環己二烯基、苯並吡喃基、苯並吡喃酮基、苯並呋喃基、苯並呋喃酮基、苯並噻吩基(benzothienyl)（苯並噻吩基(benzothiophenyl)）、苯並噻吩並[3,2-d]嘧啶基、苯並三唑基、苯並[4,6]咪唑並[1,2-a]吡啶基、哢唑基、噌啉基、環戊二烯並[d]嘧啶基、6,7-二氫-5H-環戊二烯並[4,5]噻吩並[2,3-d]嘧啶基、5,6-二氫苯並[h]喹唑啉基、5,6-二氫苯並[h]噌啉基、6,7-二氫-5H-苯並[6,7]環庚三烯並[1,2-c]噠嗪基、二苯並呋喃基、二苯並噻吩基、呋喃基、呋喃酮基、呋喃並[3,2-c]吡啶基、5,6,7,8,9,10-六氫環辛四烯並[d]嘧啶基、5,6,7,8,9,10-六氫環辛四烯並[d]噠嗪基、5,6,7,8,9,10-六氫環辛四烯並[d]吡啶基、異噻唑基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、吲唑基、異吲哚基、吲哚啉基、異吲哚啉基、異喹啉基、吲哚嗪基、異噁唑基、5,8-橋亞甲基-5,6,7,8-四氫喹唑啉基、萘啶基、1,6-萘啶酮基、噁二唑基、2-氧代氮雜䓬基、噁唑基、氧雜環丙烷基、5,6,6a,7,8,9,10,10a-八氫苯並[h]喹唑啉基、1-苯基-1 H-吡咯基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、酞嗪基、蝶啶基、嘌呤基、吡咯基、吡唑基、吡唑並[3,4-d]嘧啶基、吡啶基、吡啶並[3,2-d]嘧啶基、吡啶並[3,4-d]嘧啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吡咯基、喹唑啉基、喹喔啉基、喹啉基、異喹啉基、四氫喹啉基、5,6,7,8-四氫喹唑啉基、5,6,7,8-四氫苯並[4,5]噻吩並[2,3-d]嘧啶基、6,7,8,9-四氫-5H-環庚三烯並[4,5]噻吩並[2,3-d]嘧啶基、5,6,7,8-四氫吡啶並[4,5-c]噠嗪基、噻唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、三嗪基、噻吩並[2,3-d]嘧啶基、噻吩並[3,2-d]嘧啶基、噻吩並[2,3-c]吡啶基和噻吩基(thiophenyl)（即噻吩基(thienyl)）。除非在說明書中另有具體陳述，否則術語“雜芳基”意在包括任選地被一個或多個取代基取代的如上定義的雜芳基自由基，所述一個或多個取代基選自烷基、烯基、炔基、鹵代基、氟代烷基、鹵代烯基、鹵代炔基、氧代基、硫代基、氰基、硝基、任選地被取代的芳基、任選地被取代的芳烷基、任選地被取代的芳烯基、任選地被取代的芳炔基、任選地被取代的碳環基、任選地被取代的碳環基烷基、任選地被取代的雜環基、任選地被取代的雜環基烷基、任選地被取代的雜芳基、任選地被取代的雜芳基烷基、-R ^b-OR ^a、-R ^b-OC(O)-R ^a、-R ^b-OC(O)-OR ^a、-R ^b-OC(O)-N(R ^a) ₂、-R ^b-N(R ^a) ₂、-R ^b-C(O)R ^a、-R ^b-C(O)OR ^a、-R ^b-C(O)N(R ^a) ₂、-R ^b-O-R ^c-C(O)N(R ^a) ₂、-R ^b-N(R ^a)C(O)OR ^a、-R ^b-N(R ^a)C(O)R ^a、-R ^b-N(R ^a)S(O) _tR ^a（其中t是1或2）、-R ^b-S(O) _tR ^a（其中t是1或2）、-R ^b-S(O) _tOR ^a（其中t是1或2）和-R ^b-S(O) _tN(R ^a) ₂（其中t是1或2），其中每個R ^a獨立地是氫、烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、氟代烷基、環烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、環烷基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、芳烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜環基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）、雜芳基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代）或雜芳基烷基（任選地被鹵素、羥基、甲氧基或三氟甲基取代），每個R ^b獨立地是直接鍵或直鏈或支鏈亞烷基或亞烯基鏈，並且R ^c是直鏈或支鏈亞烷基或亞烯基鏈，並且其中除非另外指示，否則以上取代基中的每一者是未被取代的。

“ N-雜芳基”是指含有至少一個氮的如上定義的雜芳基自由基，並且其中所述雜芳基自由基與該分子的其餘部分的連接點通過所述雜芳基自由基中的氮原子來達成。 N-雜芳基自由基如以上對於雜芳基自由基所述任選地被取代。

“ C-雜芳基”是指如上定義的雜芳基自由基，並且其中所述雜芳基自由基與該分子的其餘部分的連接點通過所述雜芳基自由基中的碳原子來達成。 C-雜芳基自由基如以上對於雜芳基自由基所述任選地被取代。

“雜芳基烷基”是指式–R ^c-雜芳基的自由基，其中R ^c是如上定義的亞烷基鏈。如果雜芳基是含氮雜芳基，那麼雜芳基任選地在氮原子處連接於烷基自由基。雜芳基烷基自由基的亞烷基鏈如以上對於亞烷基鏈所定義任選地被取代。雜芳基烷基自由基的雜芳基部分如以上對於雜芳基所定義任選地被取代。

“雜芳基烷氧基”是指通過式–O-R ^c-雜芳基的氧原子來鍵合的自由基，其中R ^c是如上定義的亞烷基鏈。如果雜芳基是含氮雜芳基，那麼雜芳基任選地在氮原子處連接於烷基自由基。雜芳基烷氧基自由基的亞烷基鏈如以上對於亞烷基鏈所定義任選地被取代。雜芳基烷氧基自由基的雜芳基部分如以上對於雜芳基所定義任選地被取代。

在一些實施方案中，本文公開的化合物含有一個或多個不對稱中心，因此產生對映體、非對映體以及根據絕對立體化學被定義為( R)-或( S)-的其他立體異構形式。除非另有陳述，否則本公開內容意在涉及本文公開的化合物的所有立體異構形式。當本文所述的化合物含有烯烴雙鍵時，並且除非另外指定，否則本公開意在包括 E幾何異構體與Z幾何異構體兩者（例如順式或反式）。同樣，也意在包括所有可能的異構體以及它們的外消旋和光學純形式以及所有互變異構形式。術語“幾何異構體”是指烯烴雙鍵的 E幾何異構體或Z幾何異構體（例如順式或反式）。術語“位置異構體”是指圍繞中心環的結構異構體，諸如圍繞苯環的鄰位、間位和對位異構體。

在本公開內容的實施方案中，在環己基或環丁基具有一組對位取代的取代基，並且所述環己基或環丁基上連接於這組對位取代的取代基的兩個碳原子不是手性中心的情況下，呈或形式的化學鍵記號僅意指連接於這組對位取代的取代基的兩個化學鍵相對於環己基或環丁基呈反式或順式結構。因此，通過將這兩個化學鍵和彼此交換來表示的化合物，或通過將組合“ 和 ”變換成組合“ 和 ”(或反之亦然)來表示的化合物也屬於本公開內容的範圍。

“互變異構體”是指其中質子有可能從分子的一個原子向同一分子的另一原子移動的分子。在某些實施方案中，本文提供的化合物以互變異構體形式存在。在其中有可能發生互變異構的情況下，將存在互變異構體的化學平衡。互變異構體的確切比例取決於若干因素，包括物理狀態、溫度、溶劑和pH。互變異構平衡的一些實例包括：

在一些實施方案中，本文公開的化合物以不同的富集同位素形式使用，例如富集 ²H、 ³H、 ¹¹C、 ¹³C和/或 ¹⁴C的含量。在一個特定實施方案中，該化合物在至少一個位置被氘化。此類氘化形式可通過美國專利第5,846,514和6,334,997號中所述的程式製備。如美國專利第5,846,514和6,334,997號中所述，氘化可改善代謝穩定性和/或功效，由此增加藥物的作用持續時間。

除非另有陳述，否則本文描繪的結構意在包括僅在存在一個或多個同位素富集原子方面不同的化合物。舉例來說，除了氫被氘或氚替換，或碳被富含 ¹³C或 ¹⁴C的碳替換之外，具有本發明結構的化合物在本公開內容的範圍內。

本公開內容的化合物任選地在構成此類化合物的一個或多個原子處含有非天然比例的原子同位素。舉例來說，化合物可用同位素標記，諸如舉例來說氘( ²H)、氚( ³H)、碘-125 ( ¹²⁵I)或碳-14 ( ¹⁴C)。用 ²H、 ¹¹C、 ¹³C、 ¹⁴C、 ¹⁵C、 ¹²N、 ¹³N、 ¹⁵N、 ¹⁶N、 ¹⁶O、 ¹⁷O、 ¹⁴F、 ¹⁵F、 ¹⁶F、 ¹⁷F、 ¹⁸F、 ³³S、 ³⁴S、 ³⁵S、 ³⁶S、 ³⁵Cl、 ³⁷Cl、 ⁷⁹Br、 ⁸¹Br、 ¹²⁵I進行的同位素取代全都加以考慮。在一些實施方案中，考慮用 ¹⁸F進行的同位素取代。本發明的化合物的所有同位素變化形式，無論是否具有放射性，都涵蓋在本發明的範圍內。

在某些實施方案中，本文公開的化合物所具有的一些或全部 ¹H原子被 ²H原子替換。含氘化合物的合成方法在本領域中是已知的，並且僅列舉非限制性實例來說，包括以下合成方法。

氘取代的化合物使用諸如描述於以下中的各種方法合成：Dean, Dennis C.編 Recent Advances in the Synthesis and Applications of Radiolabeled Compounds for Drug Discovery and Development. [Curr., Pharm. Des., 2000; 6(10)] 2000, 第110頁；George W.; Varma, Rajender S. The Synthesis of Radiolabeled Compounds via Organometallic Intermediates, Tetrahedron, 1989, 45(21), 6601-21；以及Evans, E. Anthony. Synthesis of radiolabeled compounds, J. Radioanal. Chem., 1981, 64(1-2), 9-32。

氘化起始物料易於獲得，並且經過本文所述的合成方法以提供含氘化合物的合成。大量含氘試劑和結構單元可從化學品供應商諸如Aldrich Chemical Co.商購獲得。

適用於親核取代反應中的氘轉移試劑諸如碘代甲烷-d ₃(CD ₃I)易於獲得，並且可用於在親核取代反應條件下將氘取代的碳原子轉移至反應底物。CD ₃I的使用僅通過舉例方式在以下反應方案中示出。

氘轉移試劑諸如氘化鋁鋰(LiAlD ₄)用於在還原性條件下將氘轉移至反應底物。LiAlD ₄的使用僅通過舉例方式在以下反應方案中示出。

氘氣和鈀催化劑用於還原不飽和碳-碳鍵聯，並且進行芳基碳-鹵素鍵的還原性取代，如僅通過舉例方式在以下反應方案中所示出。

在一個實施方案中，本文公開的化合物含有一個氘原子。在另一實施方案中，本文公開的化合物含有兩個氘原子。在另一實施方案中，本文公開的化合物含有三個氘原子。在另一實施方案中，本文公開的化合物含有四個氘原子。在另一實施方案中，本文公開的化合物含有五個氘原子。在另一實施方案中，本文公開的化合物含有六個氘原子。在另一實施方案中，本文公開的化合物含有超過六個氘原子。在另一實施方案中，本文公開的化合物完全被氘原子取代，並且不含有不可交換的 ¹H氫原子。在一個實施方案中，氘摻入的水準由其中氘化合成結構單元用作起始物料的合成方法決定。

“藥學上可接受的鹽”包括酸加成鹽與堿加成鹽兩者。本文所述的任一雜芳族Bcl-xL抑制性化合物的藥學上可接受的鹽都意在涵蓋任何和所有藥學上合適的鹽形式。本文所述的化合物的優選的藥學上可接受的鹽是藥學上可接受的酸加成鹽和藥學上可接受的堿加成鹽。

“藥學上可接受的酸加成鹽”是指保留游離堿的生物有效性和性質，在生物學方面或在其他方面不是不合需要的，並且用無機酸諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、氫碘酸、氫氟酸、亞磷酸等所形成的那些鹽。還包括用有機酸所形成的鹽，所述有機酸諸如是脂族單羧酸和二羧酸、苯基取代的鏈烷酸、羥基鏈烷酸、鏈烷二酸、芳族酸、脂族和芳族磺酸等，並且包括例如乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、馬來酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸等。因此，示例性鹽包括硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯鹽、溴鹽、碘鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、丙酸鹽、辛酸鹽、異丁酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、扁桃酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、苯基乙酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、甲烷磺酸鹽等。還考慮氨基酸的鹽，諸如精氨酸鹽、葡糖酸鹽和半乳糖醛酸鹽（參見例如Berge S.M.等人, "Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Science,66:1-19 (1997)）。在一些實施方案中，鹼性化合物的酸加成鹽通過根據熟練技術人員熟悉的方法和技術，使游離堿形式與足量的所需酸接觸以產生鹽來製備。

“藥學上可接受的堿加成鹽”是指保留游離酸的生物有效性和性質，在生物學方面或在其他方面不是不合需要的那些鹽。這些鹽由將無機堿或有機堿添加至游離酸中來製備。在一些實施方案中，藥學上可接受的堿加成鹽用金屬或胺諸如鹼金屬和鹼土金屬或有機胺形成。由無機堿衍生的鹽包括但不限於鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、銨鹽、鈣鹽、鎂鹽、鐵鹽、鋅鹽、銅鹽、錳鹽、鋁鹽等。由有機堿衍生的鹽包括但不限於以下各物的鹽：伯胺、仲胺和叔胺、包括天然存在的經取代胺的經取代胺、環胺和鹼性離子交換樹脂，例如異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、二乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二環己胺、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、咖啡因、普魯卡因、 N,N-二苯甲基乙二胺、氯普魯卡因、海卓胺(hydrabamine)、膽鹼、甜菜堿、乙二胺、二氨基聯苄、 N-甲基還原葡糖胺、葡糖胺、甲基還原葡糖胺、可哥堿(theobromine)、嘌呤、呱嗪、呱啶、N-乙基呱啶、多胺樹脂等。參見Berge等人，同上。

“藥學上可接受的溶劑化物”是指作為溶劑加成形式的物質組合物。在一些實施方案中，溶劑化物含有化學計算量或非化學計算量的溶劑，並且在用藥學上可接受的溶劑諸如水、乙醇等製備的過程中形成。當溶劑是水時形成水合物，或當溶劑是醇時形成醇化物。本文所述的化合物的溶劑化物在本文所述的過程中方便地製備或形成。本文提供的化合物任選地以未溶劑化形式以及溶劑化形式存在。

術語“對象”或“患者”涵蓋哺乳動物。哺乳動物的實例包括但不限於哺乳動物綱的任何成員：人、非人靈長類動物諸如黑猩猩以及其他猿類和猴物種；農場動物諸如牛、馬、綿羊、山羊、豬；家養動物諸如兔、狗和貓；實驗動物，包括齧齒動物，諸如大鼠、小鼠和豚鼠等。在一個方面，哺乳動物是人。

“前藥”是指在展現它的藥理作用之前經受生物轉化的化合物。因此，前藥可被視為含有以短暫方式用於改變母體分子的藥理學性質的專門化保護基的藥物。

如本文所用，“治療(treatment/treating)”或“緩和”或“改善”可互換使用。這些術語是指用於獲得包括但不限於治療益處和/或預防益處的有益或所需結果的方法。就“治療益處”來說，其意指根除或改善所治療的基礎病症。此外，以根除或改善一種或多種與基礎病症相關的生理症狀使得在患者中觀察到改善來實現治療益處，即使患者仍然受基礎病症折磨。在一些實施方案中，為了預防益處，將組合物施用至處於發生特定疾病的風險下的患者，或報告疾病的一種或多種生理症狀的患者，即使尚未對這個疾病作出診斷。 Bcl-xL

BCL-2（B細胞淋巴瘤-2）蛋白家族充當細胞凋亡的線粒體通路的關鍵調節因數，並且由抗凋亡蛋白（諸如BCL-2、BCL-XL、BCL-W、A1和MCL-1）與促凋亡蛋白（諸如Bak、Bax、Bid、Bim、Bad、Bik、Bmf、Noxa和Puma）兩者組成。促凋亡BCL-2蛋白和抗凋亡BCL-2蛋白通常彼此相反地起作用。通過用小分子處理或通過RNA干擾來阻斷它們之間的相互作用會導致線粒體外膜通透化(MOMP)以及細胞色素c、第二線粒體源性半胱天冬酶啟動因數(SMAC)和其他促凋亡因數的釋放。這些事件接著觸發半胱天冬酶啟動級聯和後續細胞凋亡。

BCL-XL屬於抗凋亡BCL-2蛋白家族，並且通過保護腫瘤細胞免遭凋亡而在促進腫瘤起始、進展和藥物抗性的顯現中起重要作用。用小分子抑制劑抑制這些BCL-2家族蛋白已被廣泛研究作為一種癌症治療策略。視網膜血管病變是工業化世界中失明的主要原因，並且當前標準沒有完全解決這些疾病。在視網膜病變（諸如年齡相關性黃斑變性(AMD)和糖尿病黃斑水腫(DME)）的衰老相關模型中，衰老細胞影響組織微環境以驅動疾病進展。UNITY提供證據表明當病理性視網膜前血管新生形成時，血管單元的細胞迅速啟用導致p16INK4A啟動和促存活蛋白BCL-XL上調的通路，最終導致細胞衰老。UNITY正在開發抗衰老藥物(UBX1325)以消除衰老細胞來恢復組織健康。專注于新型治療範式，通過BCL-XL抑制劑或PROTAC消除血管衰老細胞應該會重建屏障功能並逆轉DME和AMD患者的疾病進展。BCL-XL抑制劑或PROTAC靶向在抗VEGF療法的上游的節點。靶向衰老效應物/抗凋亡蛋白BCL-XL會抑制病理性血管生成，從而為消除失調的血管新生提供靶標。

額外資訊可見於以下中：a) J Kale, EJ Osterlund和DW Andrews. BCL-2 family proteins: changing partners in the dance towards death. Cell Death & Differentiation. 2018; 25: 65-80 [13]，b) M Stevens和S Oltean. Modulation of the Apoptosis Gene Bcl-x Function Through Alternative Splicing. Front. Genet. 2019年9月6日; 10 (804) [14]以及c) LP Billen, CL Kokoski, JF Lovell, B Leber和DW Andrews. Bcl-XL Inhibits Membrane Permeabilization by Competing with Bax. PLoS Biology. 2008年6月10日; 6 (6): e147 [15]，其各自通過引用併入本文。 選擇性蛋白質降解

細胞內蛋白質的水準由蛋白質合成的速率與蛋白質降解的速率兩者決定。在真核細胞中，存在用於選擇性蛋白質降解的兩個通路，即泛素-蛋白酶體通路和溶酶體蛋白水解通路。一般來說，選擇性蛋白質降解由存在募集基序介導，所述募集基序促進降解蛋白諸如蛋白酶體降解蛋白或與泛素-蛋白酶體通路相關的蛋白質的結合。募集基序包括E3連接酶識別劑和蛋白酶體識別劑。募集基序與Bcl-xL的高親和力配體的綴合會提供能夠選擇性地將蛋白質降解通路引導至Bcl-xL蛋白自身的化合物。此種結果將降低Bcl-xL活性的水準。 雜芳族 Bcl-xL 降解化合物

在一個方面，本文提供了一種具有以下提供的通式的雜芳族Bcl-xL降解化合物：，其中所述Bcl-xL親和力基序是獨立於所述連接基序和/或所述募集基序，對Bcl-xL蛋白具有高親和力的分子構建體，所述連接基序是提供與所述Bcl-xL親和力基序和所述募集基序兩者的共價鍵的分子構建體，並且所述募集基序是能夠選擇性靶向和募集蛋白質降解的分子構建體。在一些實施方案中，雜芳族Bcl-xL降解化合物具有式(I-A)的結構： (I-A) 其中Y是S或CH=CH，L是連接基序，並且U是募集基序。 募集基序

募集基序包括E3連接酶識別劑和蛋白酶體識別劑。在一些實施方案中，募集基序衍生自VHL配體、努特林(nutlin)、貝他定(bestatin)、HIF-1α–VHL結合肽、羥基脯氨酸-HIF-1α-VHL結合肽、SCFb-TRCP靶向肽或凋亡蛋白配體的抑制劑。

在一些實施方案中，募集基序（例如式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)或式(I-H)中的U）選自與VHL配體相關的分子構建體。在一些實施方案中，募集基序或VHL配體具有選自以下的結構：、、、，、、、、、、和，其中與連接基序的鍵合點由波形鍵指示。在一些實施方案中，募集基序選自：、、、、、、、、和。在一些實施方案中，募集基序是或。在一些實施方案中，募集基序是。在一些實施方案中，募集基序是。

術語“VHL配體”、“VHL結合劑”和“VHL E3泛素連接酶結合劑”在本文中可互換用於指代結合馮希佩爾–林道腫瘤抑制因數(Von Hippel–Lindau tumor suppressor，VHL)的化合物或基序。 連接基序

連接基序是提供與Bcl-xL親和力基序和募集基序兩者的共價鍵的分子構建體。在一些實施方案中，連接基序包含環狀部分。在一些實施方案中，連接基序包含非環狀部分。在一些實施方案中，連接基序包含不飽和部分。在一些實施方案中，連接基序在線性序列中包含4個與50個之間的非氫原子。在一些實施方案中，連接基序在線性序列中包含4個與20個之間的非氫原子。在一些實施方案中，連接基序在線性序列中包含4個與25個之間的非氫原子。在一些實施方案中，連接基序在線性序列中包含4個與30個之間的非氫原子。在一些實施方案中，連接基序在線性序列中包含6個與18個之間的非氫原子。在一些實施方案中，連接基序在線性序列中包含5個與10個之間的非氫原子。在一些實施方案中，連接基序在線性序列中包含4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個非氫原子。作為一實例，以下分子片段在線性序列中含有8個非氫原子：。

在一些實施方案中，連接基序，例如式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)或式(I-H)中的L，選自a) C ₂-C ₁₅亞烷基，b) C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換，前提是兩個O原子不是相鄰的，或c) -Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*；其中， Ak ¹選自-(CR ³R ⁴) _k-； Ak ²選自-(CR ³R ⁴) _m-； Ak ³選自-(CR ³R ⁴) _n-； k、m和n中的每一者選自0至6；每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基；或 R ³和R ⁴一起形成氧代基；並且 Z ¹和Z ²各自獨立地選自鍵、-O-、亞雜環基和亞環烷基；其中Z ¹和Z ²中的至少一者是亞雜環基或亞環烷基。

在一些實施方案中，連接基序，例如式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)或式(I-H)中的L，選自C ₂-C ₁₅亞烷基。在一些實施方案中，連接基序是C _4-15亞烷基。在一些實施方案中，連接基序是C _4-9亞烷基。在一些實施方案中，連接基序是C _5-8亞烷基。

在一些實施方案中，連接基序，例如式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)或式(I-H)中的L，是C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換，前提是兩個O原子不是相鄰的。在一些實施方案中，連接基序具有結構–(CR ³R ⁴) _x-O–(CR ³R ⁴) _y-*，其中：每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基；或R ³和R ⁴一起形成氧代基；並且x選自0至10 (例如0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10)；y選自1至10 (例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10)；其中與募集基序的鍵合點通過星號指示；並且其中x和y的總和不超過14。在一些實施方案中，連接基序具有結構–(CH ₂) _x-O–(CH ₂) _y-*，其中：x選自0至10 (例如0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10)；y選自1至10 (例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10)；其中與募集基序的鍵合點通過星號指示；並且其中x和y的總和不超過14。在一些實施方案中，x是0至7，並且y是1至7。在一些實施方案中，x是0至6，並且y是1至6。在一些實施方案中，連接基序是C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換，前提是兩個O原子不是相鄰的，具有選自以下的結構：、、、、、、和。

在一些實施方案中，連接基序，例如式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)或式(I-H)中的L，是C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換，前提是兩個O原子不是相鄰的。在一些實施方案中，連接基序具有結構–(CR ³R ⁴) _j—O–(CR ³R ⁴) _p-O–(CH ₂) _v-*，其中：每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基；或R ³和R ⁴一起形成氧代基；j選自0至10 (例如0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10)；p選自1至10 (例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10)；v選自1至10 (例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10)；其中與募集基序的鍵合點通過星號指示；並且其中j、p和v的總和不超過13。在一些實施方案中，連接基序具有結構–(CH ₂) _j—O–(CH ₂) _p-O–(CH ₂) _v-*，其中：j選自0至10 (例如0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10)；p選自1至10 (例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10)；v選自1至10 (例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10)；其中與募集基序的鍵合點通過星號指示；並且其中j、p和v的總和不超過13。在一些實施方案中，j是0至4；p是1至5；並且v是1至4。在一些實施方案中，j是0至2；p是2至4；並且v是1至3。在一些實施方案中，連接基序是C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換，前提是兩個O原子不是相鄰的，具有選自以下的結構：、、、、和。

在一些實施方案中，連接基序，例如式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)或式(I-H)中的L，由下式表示： -Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-* 其中， Ak ¹選自-(CR ³R ⁴) _k-； Ak ²選自-(CR ³R ⁴) _m-； Ak ³選自-(CR ³R ⁴) _n-； k、m和n中的每一者選自0至6； R ³和R ⁴各自獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基；或R ³和R ⁴一起形成氧代基； Z ¹和Z ²各自獨立地選自鍵、-O-、亞雜環基和亞環烷基，其中Z ¹和Z ²中的至少一者是亞雜環基或亞環烷基；並且與VHL配體的鍵合點通過星號指示。

在式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)或式(I-H)的一些實施方案中，L是選自以下示出的分子片段的-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、或； X、X1和X2在每種情況下獨立地是CH或N； k是0至6； m是0至6； n是0至6；並且其中與VHL配體的鍵合點通過星號指示。在一些實施方案中，k是0至3。在一些實施方案中，m是0至3。在一些實施方案中，n是0至2。在一些實施方案中，k是0至3，m是0至3，並且n是0至2。在一些實施方案中，每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基。在一些實施方案中，每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素和C _1-3烷基。在一些實施方案中，每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、氟基和-CH ₃。在一些實施方案中，R ³和R ⁴均是氫。

在式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)或式(I-H)的一些實施方案中，L是選自以下示出的分子片段的-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*：、、、、、、、、、、、、、、、、、、或； X、X1和X2在每種情況下獨立地是CH或N； k是0至6； m是0至6； n是0至6；並且其中與VHL配體的鍵合點通過星號指示。在一些實施方案中，m是0至3。在一些實施方案中，n是0至2。在一些實施方案中，k是0至3，m是0至3，並且n是0至2。

在式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)或式(I-H)的一些實施方案中，L是選自以下示出的分子片段的-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*：、、、、、、、、、和； X、X1和X2在每種情況下獨立地是CH或N； k是0至6； m是0至6； n是0至6；並且其中與VHL配體的鍵合點通過星號指示。在一些實施方案中，m是0至3。在一些實施方案中，n是0至2。在一些實施方案中，k是0至3，m是0至3，並且n是0至2。

在式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)或式(I-H)的一些實施方案中，L是選自以下示出的分子片段的-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、和；並且其中與VHL配體的鍵合點通過星號指示。

在式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)或式(I-H)的一些實施方案中，L是選自以下示出的分子片段的-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*：、、和； X1、X2、X3和X4在每種情況下獨立地是CH或N； k是0至6； m是0至6； n是0至6；並且其中與VHL配體的鍵合點通過星號指示。在一些實施方案中，k是0或1。在一些實施方案中，m是0或1。在一些實施方案中，n是0至2。在一些實施方案中，k是0或1，m是0或1，並且n是0至2。在一些實施方案中，每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基。在一些實施方案中，每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素和C _1-3烷基。在一些實施方案中，每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、氟基和-CH ₃。在一些實施方案中，R ³和R ⁴均是氫。

在式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)或式(I-H)的一些實施方案中，L是選自以下示出的分子片段的-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*：、、和； X1、X2、X3和X4在每種情況下獨立地是CH或N； k是0至6； m是0至6； n是0至6；並且其中與VHL配體的鍵合點通過星號指示。在一些實施方案中，k是0或1。在一些實施方案中，m是0或1。在一些實施方案中，n是0至2。在一些實施方案中，k是0或1，m是0或1，並且n是0至2。

在式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)或式(I-H)的一些實施方案中，L是選自以下示出的分子片段的-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*：、、、、、、、、、、、和；並且其中與VHL配體的鍵合點通過星號指示。 Bcl-xL 親和力基序

A-1155463是一種在TR-FRET測定中具有＜0.01 nM的K _i的強力Bcl-xL結合劑，如Tao等人, “Discovery of a Potent and Selective BCL-XL Inhibitor with In Vivo Activity” ACS Med. Chem. Lett.2014. DOI: 10.1021/ml5001867 [16]中所述，所述文獻通過引用併入本文。 A-1155463 雜芳族 Bcl-xL 降解化合物

在一些實施方案中，本文提供了一種化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，具有式(I-A)的結構： (I-A) 其中， o是0、1、2或3； Y是S或CH=CH；每個R ¹獨立地選自鹵素、硝基、氰基、-OR ²、-N(R ²) ₂、-SR ²、-S(O)R ²、-S(O) ₂R ²、-S(O) ₂N(R ²) ₂、-NR ²S(O) ₂R ²、-NR ²S(O) ₂N(R ²) ₂、-C(O)R ²、-C(O)OR ²、-OC(O)R ²、-OC(O)OR ²、-OC(O)N(R ²) ₂、-NR ²C(O)R ²、-NR ²C(O)OR ²、-NR ²C(O)N(R ²) ₂、-C(O)N(R ²) ₂、-P(O)(OR ²) ₂、-P(O)(R ²) ₂、任選地被取代的C _1-6烷基、任選地被取代的C _1-6鹵代烷基、任選地被取代的C _1-6烷氧基，任選地被取代的C _2-6烷基，其中1至2個-CH ₂-單元被N、O或S替換，前提是兩個相鄰的-CH ₂-單元不被同時替換，任選地被取代的C _3-12碳環基和任選地被取代的3元至12元雜環基；每個R ²各自獨立地是氫或任選地被取代的C _1-6烷基；或兩個R ²與它們所連接的氮原子一起可形成任選地被取代的3-6元雜環基環； V是鍵、、任選地被取代的雜芳基、任選地被取代的芳基、任選地被取代的C _3-7環烷基或任選地被取代的雜環基；或一起形成稠合雙環芳基環或稠合雙環雜芳基環，其各自被o個R ¹的實例取代； L選自a) C ₂-C ₁₅亞烷基，b) C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換，前提是兩個O原子不是相鄰的，和c) -Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*；其中， Ak ¹選自-(CR ³R ⁴) _k-； Ak ²選自-(CR ³R ⁴) _m-； Ak ³選自-(CR ³R ⁴) _n-； k、m和n中的每一者是0至6；每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基；或 R ³和R ⁴一起形成氧代基； Z ¹和Z ²各自獨立地選自鍵、-O-、亞雜環基和亞環烷基；其中Z ¹和Z ²中的至少一者是亞雜環基或亞環烷基；並且 U是VHL配體。

在一些實施方案中，本文提供了一種化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，具有式(I-A)的結構： (I-A) 其中， o是0、1、2或3； Y是S或CH=CH；每個R ¹獨立地選自鹵素、硝基、氰基、-OR ²、-N(R ²) ₂、-SR ²、-S(O)R ²、-S(O) ₂R ²、-S(O) ₂N(R ²) ₂、-NR ²S(O) ₂R ²、-NR ²S(O) ₂N(R ²) ₂、-C(O)R ²、-C(O)OR ²、-OC(O)R ²、-OC(O)OR ²、-OC(O)N(R ²) ₂、-NR ²C(O)R ²、-NR ²C(O)OR ²、-NR ²C(O)N(R ²) ₂、-C(O)N(R ²) ₂、-P(O)(OR ²) ₂、-P(O)(R ²) ₂、任選地被取代的C _1-6烷基、任選地被取代的C _1-6鹵代烷基、任選地被取代的C _1-6烷氧基，任選地被取代的C _2-6烷基，其中1至2個-CH ₂-單元被N、O或S替換，前提是兩個相鄰的-CH ₂-單元不被同時替換，任選地被取代的C _3-12碳環基和任選地被取代的3元至12元雜環基，其中所述烷基、烷氧基、碳環基和雜環基獨立地任選地被一個或多個R ^e取代；每個R ²獨立地是氫或任選地被取代的C _1-6烷基，其中所述烷基任選地被一個或多個R ^e取代；或兩個R ²與它們所連接的氮原子一起可形成任選地被取代的3-6元雜環基環，其中所述雜環基環任選地被一個或多個R ^e取代；每個R ^e獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基；或連接於同一原子的兩個R ^e一起形成氧代基； V是鍵、、任選地被取代的雜芳基、任選地被取代的芳基、任選地被取代的C _3-7環烷基或任選地被取代的雜環基，其中所述雜芳基、芳基、環烷基或雜環基任選地被一個或多個R ^V取代；或一起形成稠合雙環芳基環或稠合雙環雜芳基環，其各自被o個R ¹的實例取代；並且每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基；或連接於環烷基或雜環基的同一原子的兩個R ^V一起形成氧代基； L選自a) C ₂-C ₁₅亞烷基，b) C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換，前提是兩個O原子不是相鄰的，和c) -Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*；其中， Ak ¹選自-(CR ³R ⁴) _k-； Ak ²選自-(CR ³R ⁴) _m-； Ak ³選自-(CR ³R ⁴) _n-； k、m和n中的每一者選自0至6；每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基；或 R ³和R ⁴一起形成氧代基； Z ¹和Z ²各自獨立地選自鍵、-O-、亞雜環基和亞環烷基；其中Z ¹和Z ²中的至少一者是亞雜環基或亞環烷基；並且 U是VHL配體。

在一些實施方案中，本文提供了一種式(I-A)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。

在一些實施方案中，Y是S。在一些其他實施方案中，Y是CH=CH。

在一些實施方案中，每個R ¹獨立地選自任選地被取代的C _1-6烷基、任選地被取代的C _1-6鹵代烷基、任選地被取代的C _1-3烷氧基、鹵素、-N(R ²) ₂、-OR ²和氰基，其中所述烷基、鹵代烷基和烷氧基各自獨立地任選地被取代。在一些實施方案中，每個R ¹獨立地選自任選地被取代的C _1-6烷基、任選地被取代的C _1-6鹵代烷基、任選地被取代的C _1-3烷氧基、-N(R ²) ₂、-OR ²和氰基，其中所述烷基、鹵代烷基和烷氧基各自獨立地任選地被取代。在一些實施方案中，烷基、鹵代烷基和烷氧基各自獨立地任選地被一個或多個R ^e取代。在一些實施方案中，每個R ¹獨立地選自鹵素、C _1-6烷基和C _1-6鹵代烷基。在一些實施方案中，每個R ¹獨立地選自-F、-Cl、-CH ₃、-CH ₂CH ₃和-CF ₃。在一些實施方案中，每個R ¹獨立地選自-Cl、-CH ₃和-CF ₃。在一些實施方案中，每個R ^e獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基；或連接於同一原子的兩個R ^e一起形成氧代基。

在一些實施方案中，V是鍵。在一些實施方案中，本文提供了一種化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，具有式(I-B)的結構： (I-B)，其中Y是S或CH=CH。在一些實施方案中，Y是S。在一些實施方案中，Y是CH=CH。

在一些實施方案中，本文提供了一種式(I-B)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。

在一些實施方案中，V是任選地被取代的雜芳基。在一些實施方案中，V是任選地被取代的含N雜芳基。在一些實施方案中，V是任選地被取代的含N 5或6元雜芳基。在一些實施方案中，V是任選地被取代的選自吡啶基、嘧啶基和噠嗪基的含N 6元雜芳基。在一些實施方案中，V是任選地被取代的選自吡唑基、三唑基、噻唑基、噻二唑基、噁唑基和噁二唑基的含N 5元雜芳基。在一些實施方案中，V是任選地被取代的選自吡唑基、噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、三唑基、吡啶基和嘧啶基的含N雜芳基。在一些實施方案中，雜芳基任選地被一個或多個R ^V取代，並且每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基。在一些實施方案中，每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基。在一些實施方案中，每個R ^V獨立地是氫、-Cl、-F或-CF ₃。在一些實施方案中，V是、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、或，其中星號指示與L的連接點。在一些實施方案中，V是、、、或。在一些實施方案中，V是、、、、、、、、、、、、、、、、或。在一些實施方案中，V是、、、、、、、、、、、、或。在一些實施方案中，V是、、、、、、、、、、、、、、、、或；其中星號指示與L的連接點。在一些實施方案中，V是、、、、、、或；其中星號指示與L的連接點。

在一些實施方案中，V是任選地被取代的芳基。在一些實施方案中，V是任選地被取代的苯基或萘基。在一些實施方案中，V是任選地被取代的苯基。在一些實施方案中，V是任選地被取代的萘基。在一些實施方案中，V是任選地被一個或多個R ^V取代的苯基，並且每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基。在一些實施方案中，每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基。在一些實施方案中，每個R ^V獨立地是氫、-Cl、-F或-CF ₃。在一些實施方案中，V是、或，其中星號指示與L的連接點。在一些實施方案中，V是。在一些實施方案中，V是，其中星號指示與L的連接點。在一些實施方案中，本文提供了一種化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，具有式(I-C)的結構： (I-C1)，其中Y是S或CH=CH。在一些實施方案中，Y是S。在一些實施方案中，Y是CH=CH。在一些實施方案中，本文提供了一種式(I-C1)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。在一些實施方案中，本文提供了一種具有式(I-C2)的結構的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體： (I-C2)，其中Y是S或CH=CH。在一些實施方案中，Y是S。在一些實施方案中，Y是CH=CH。在一些實施方案中，本文提供了一種式(I-C2)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。

在一些實施方案中，V是任選地被取代的環烷基。在一些實施方案中，V是任選地被取代的C _3-7環烷基。在一些實施方案中，V是環丙基、環丁基、環戊基、環己基或環庚基，其各自任選地被取代。在一些實施方案中，V任選地被一個或多個R ^V取代，並且每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基；或連接於同一原子的兩個R ^V一起形成氧代基。在一些實施方案中，每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基。在一些實施方案中，每個R ^V獨立地是氫、-Cl、-F或-CF ₃。在一些實施方案中，V是、、、、、、、、、或，其中星號指示與L的連接點。在一些實施方案中，V是、或。在一些實施方案中，V是。在一些實施方案中，V是，其中星號指示與L的連接點。在一些實施方案中，本文提供了一種化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，具有式(I-D1)的結構： (I-D1)，其中Y是S或CH=CH。在一些實施方案中，Y是S。在一些實施方案中，Y是CH=CH。在一些實施方案中，本文提供了一種式(I-D1)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。在一些實施方案中，本文提供了一種化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，具有式(I-D2)的結構： (I-D2)，其中Y是S或CH=CH。在一些實施方案中，Y是S。在一些實施方案中，Y是CH=CH。在一些實施方案中，本文提供了一種式(I-D2)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。

在一些實施方案中，V是任選地被取代的雜環基。在一些實施方案中，V是任選地被取代的含N雜環基。在一些實施方案中，V是吡咯烷基、呱嗪基、呱啶基或嗎啉代基，其各自任選地被取代。在一些實施方案中，V任選地被一個或多個R ^V取代，並且每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基；或連接於同一原子的兩個R ^V一起形成氧代基。在一些實施方案中，每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基。在一些實施方案中，每個R ^V獨立地是氫、-Cl、-F或-CF ₃。在一些實施方案中，V是、、、或，其中星號指示與L的連接點。在一些實施方案中，V是。在一些實施方案中，V是，其中星號指示與L的連接點。在一些實施方案中，本文提供了一種化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，具有式(I-E1a)或式(I-E1b)的結構： (I-E1a) (I-E1b)，其中Y是S或CH=CH。在一些實施方案中，Y是S。在一些實施方案中，Y是CH=CH。在一些實施方案中，本文提供了一種式(I-E1a)或式(I-E1b)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。在一些實施方案中，本文提供了一種化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，具有式(I-E2a)或式(I-E2b)的結構： (I-E2a) (I-E2b)，其中Y是S或CH=CH。在一些實施方案中，Y是S。在一些實施方案中，Y是CH=CH。在一些實施方案中，本文提供了一種式(I-E1a)或式(I-E1b)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。

在一些實施方案中，V是。在一些實施方案中，本文提供了一種化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體, 具有式(I-F)的結構： (I-F)，其中Y是S或CH=CH。在一些實施方案中，Y是S。在一些實施方案中，Y是CH=CH。在一些實施方案中，本文提供了一種式(I-F)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。

在一些實施方案中，一起形成稠合雙環芳基環或稠合雙環雜芳基環，其各自被o個R ¹的實例取代。在一些實施方案中，一起形成被o個R ¹的實例取代的稠合雙環芳基環。在一些實施方案中，稠合雙環芳基環是被o個R ¹的實例取代的萘基。在一些實施方案中，是、、或，其中星號指示與L的連接點。在一些實施方案中，是。在一些實施方案中，本文提供了一種化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，具有式(I-G)的結構： (I-G)，其中Y是S或CH=CH。在一些實施方案中，Y是S。在一些實施方案中，Y是CH=CH。在一些實施方案中，本文提供了一種式(I-G)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。

在一些實施方案中，一起形成被o個R ¹的實例取代的稠合雙環雜芳基環。在一些實施方案中，稠合雙環雜芳基環是被o個R ¹的實例取代的含N雙環雜芳基環。在一些實施方案中，稠合雙環雜芳基環是喹啉基、異喹啉基、噌啉基、喹唑啉基、喹喔啉基或吲哚基，其各自被o個R ¹的實例取代。在一些實施方案中，稠合雙環雜芳基環是喹啉基或異喹啉基，其各自被o個R ¹的實例取代。在一些實施方案中，是、、、、、、、、、、或，其中星號指示與L的連接點。在一些實施方案中，是、或。在一些實施方案中，是。在一些實施方案中，本文提供了一種化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，具有式(I-H)的結構： (I-H)，其中Y是S或CH=CH。在一些實施方案中，Y是S。在一些實施方案中，Y是CH=CH。在一些實施方案中，本文提供了一種式(I-H)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。

在式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)、式(I-H)的一些實施方案中，L是C ₂-C ₁₅亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₂-C ₁₅亞烷基。在一些實施方案中，L是C _3-15亞烷基。在一些實施方案中，L是C _4-15亞烷基。在一些實施方案中，L是C _5-15亞烷基。在一些實施方案中，L是C _6-15亞烷基。在一些實施方案中，L是C _7-15亞烷基。在一些實施方案中，L是C _8-15亞烷基。在一些實施方案中，L是C _9-15亞烷基。在一些實施方案中，L是C _10-15亞烷基。在一些實施方案中，L是C _11-15亞烷基。在一些實施方案中，L是C _12-15亞烷基。在一些實施方案中，L是C _13-15亞烷基。在一些實施方案中，L是C _14-15亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-14亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-13亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-13亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-12亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-11亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-10亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-9亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-8亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-7亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-8亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-7亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-6亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-5亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-4亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-3亞烷基。在一些實施方案中，L是C _3-8亞烷基。在一些實施方案中，L是C _4-9亞烷基。在一些實施方案中，L是C _5-10亞烷基。在一些實施方案中，L是C _6-11亞烷基。在一些實施方案中，L是C _7-12亞烷基。在一些實施方案中，L是C _8-13亞烷基。在一些實施方案中，L是C _9-14亞烷基。在一些實施方案中，L是C _5-8亞烷基。在一些實施方案中，L是C _2-4亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₂亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₃亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₄亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₅亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₆亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₇亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₈亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₉亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₁₀亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₁₁亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₁₂亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₁₃亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₁₄亞烷基。在一些實施方案中，L是C ₁₅亞烷基。在一些實施方案中，亞烷基的每個碳原子獨立地任選地被R ³和R ⁴取代(例如(CR ³R ⁴) _2-15)，並且每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基，或R ³和R ⁴一起在同一碳原子上形成氧代基。在一些實施方案中，亞烷基是未被取代的。

在式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)、式(I-H)的一些實施方案中，L是C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換，前提是兩個O原子不是相鄰的。在一些實施方案中，L是C _3-8亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換。在一些實施方案中，L是C _4-9亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換。在一些實施方案中，L是C _5-8亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換。在一些實施方案中，亞烷基的每個碳原子獨立地任選地被R ³和R ⁴取代(例如(CR ³R ⁴) _2-15)，並且每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基，或R ³和R ⁴一起在同一碳原子上形成氧代基。在一些實施方案中，亞烷基是未被取代的。在一些實施方案中，L是C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個-CH ₂-單元被O替換。在一些實施方案中，L是C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個-CH ₂-單元被O替換，具有結構–(CR ³R ⁴) _x-O–(CR ³R ⁴) _y-*，其中：x是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；y是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；其中與募集基序的鍵合點通過星號指示；並且其中x和y的總和不超過14。在一些實施方案中，L是C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個-CH ₂-單元被O替換，具有結構–(CH ₂) _x-O–(CH ₂) _y-*，其中：x是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；y是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；其中與募集基序的鍵合點通過星號指示；並且其中x和y的總和不超過14。在一些實施方案中，x是0至9，並且y是1至10。在一些實施方案中，x是0至8，並且y是1至10。在一些實施方案中，x是0至7，並且y是1至10。在一些實施方案中，x是0至6，並且y是1至10。在一些實施方案中，x是0至10，並且y是1至9。在一些實施方案中，x是0至10，並且y是1至8。在一些實施方案中，x是0至10，並且y是1至7。在一些實施方案中，x是0至10，並且y是1至6。在一些實施方案中，x是0至7，並且y是1至7。在一些實施方案中，x是0至6，並且y是1至7。在一些實施方案中，x是0至7，並且y是1至6。在一些實施方案中，x是0至6，並且y是1至6。在一些實施方案中，L具有選自以下的結構：、、、、、、和。在一些實施方案中，L是C ₄- ₁₅亞烷基，其中兩個-CH ₂-單元被O替換。在一些實施方案中，L是C ₄- ₁₅亞烷基，其中兩個-CH ₂-單元被O替換，具有結構–(CR ³R ⁴) _j—O–(CR ³R ⁴) _p-O–(CR ³R ⁴) _v-*，其中：j是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；p是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；v是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；其中與募集基序的鍵合點通過星號指示；並且其中p、j和v的總和不超過13。在一些實施方案中，L是C ₄- ₁₅亞烷基，其中兩個-CH ₂-單元被O替換，具有結構–(CH ₂) _j—O–(CH ₂) _p-O–(CH ₂) _v-*，其中：j是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；p是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；v是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；其中與募集基序的鍵合點通過星號指示；並且其中p、j和v的總和不超過13。在一些實施方案中，j是0至10，p是1至10，並且v是1至10。在一些實施方案中，j是0至10，p是1至5，並且v是1至10。在一些實施方案中，j是0至10，p是1至10，並且v是1至4。在一些實施方案中，j是0至4，p是1至10，並且v是1至10。在一些實施方案中，j是0至4，p是1至5，並且v是1至10。在一些實施方案中，j是0至4，p是1至10，並且v是1至4。在一些實施方案中，j是0至10，p是1至5，並且v是1至4。在一些實施方案中，j是0至4，p是1至5，並且v是1至4。在一些實施方案中，j是0至4，p是2至4，並且v是1至4。在一些實施方案中，j是0至4，p是1至5，並且v是1至3。在一些實施方案中，j是0至4，p是2至4，並且v是1至3。在一些實施方案中，j是0至2，p是1至5，並且v是1至4。在一些實施方案中，j是0至2，p是2至4，並且v是1至4。在一些實施方案中，j是0至2，p是1至5，並且v是1至3。在一些實施方案中，j是0至2，p是2至4，並且v是1至3。在一些實施方案中，L具有選自以下的結構：、、、、和。

在式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)、式(I-H)的一些實施方案中，L具有結構 -Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*；其中， Ak ¹選自-(CR ³R ⁴) _k-； Ak ²選自-(CR ³R ⁴) _m-； Ak ³選自-(CR ³R ⁴) _n-； k、m和n中的每一者是0至6；每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基；或R ³和R ⁴一起形成氧代基； Z ¹和Z ²各自獨立地選自鍵、-O-、亞雜環基和亞環烷基；其中Z ¹和Z ²中的至少一者是亞雜環基或亞環烷基；並且其中與U的鍵合點通過星號指示。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*具有選自以下的結構：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、和；其中X、X1和X2各自獨立地是CH或N，並且其中每個k獨立地是0、1、2、3、4、5或6，每個m獨立地是0、1、2、3、4、5或6，並且每個n獨立地是0、1、2、3、4、5或6。在一些實施方案中，R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基。在一些實施方案中，R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、羥基、C _1-3烷基和C ₃環烷基。在一些實施方案中，R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、C _1-3烷基和C ₃環烷基。在一些實施方案中，R ³和R ⁴獨立地選自氫、氟基和甲基。在一些實施方案中，R ³和R ⁴均是氫。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*具有選自以下的結構：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、和，其中X、X1和X2各自獨立地是CH或N，並且其中每個k獨立地是0、1、2、3、4、5或6，每個m獨立地是0、1、2、3、4、5或6，並且每個n獨立地是0、1、2、3、4、5或6。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*具有選自以下的結構：、、、、、、、、、和，其中X、X1和X2各自獨立地是CH或N，並且其中每個k獨立地是0、1、2、3、4、5或6，每個m獨立地是0、1、2、3、4、5或6，並且每個n獨立地是0、1、2、3、4、5或6。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*具有選自以下的結構：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、和，其中X、X1和X2各自獨立地是CH或N，並且其中每個k獨立地是0、1、2、3、4、5或6，每個m獨立地是0、1、2、3、4、5或6，並且每個n獨立地是0、1、2、3、4、5或6。在一些實施方案中，k是0、1、2或3。在一些實施方案中，m是0、1、2或3。在一些實施方案中，n是0、1或2。在一些實施方案中，k是0、1、2或3，m是0、1、2或3，並且n是0、1或2。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*具有選自以下的結構：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、和；並且其中與VHL配體的鍵合點通過星號指示。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是、。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*選自、、、、、、和。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是或。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是、或。

在一些實施方案中，-Ak1-Z1-Ak2-Z2-Ak3-*具有選自以下的結構：、、和； X1、X2、X3和X4在每種情況下獨立地是CH或N；k是0、1、2、3、4、5或6；m是0、1、2、3、4、5或6；n是0、1、2、3、4、5或6；並且其中與U的鍵合點通過星號指示。在一些實施方案中，k是0、1、2或3；m是0、1、2或3；並且n是0、1、2或3。在一些實施方案中，R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基。在一些實施方案中，R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、羥基、C _1-3烷基和C ₃環烷基。在一些實施方案中，R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、C _1-3烷基和C ₃環烷基。在一些實施方案中，R ³和R ⁴獨立地選自氫、氟基和甲基。在一些實施方案中，R ³和R ⁴均是氫。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*具有選自以下的結構：、、和；X1、X2、X3和X4在每種情況下獨立地是CH或N；k是0、1、2、3、4、5或6；m是0、1、2、3、4、5或6；n是0、1、2、3、4、5或6；並且其中與U的鍵合點通過星號指示。在一些實施方案中，k是0、1、2或3；m是0、1、2或3；並且n是0、1、2或3。在一些實施方案中，k是0或1。在一些實施方案中，m是0或1。在一些實施方案中，n是0、1或2。在一些實施方案中，k是0或1，m是0或1，並且n是0至2。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*具有選自以下的結構：、、、、、、、、、、、和；其中與U的鍵合點通過星號指示。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是和。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是或。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是、或。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是、、、、或。在一些實施方案中，-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*是、、、、、、、、、、、、或。

在一些實施方案中，如本文所述的化合物具有表1、表2、表3、表4、表5、表6或表7中提供的結構。在一些實施方案中，如本文所述的化合物具有表1中提供的結構。表 1

化合物編號	化合物結構
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
31-A
31-B
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
47
48
49
50
51
51-A
51-B
53
54
55
56
57
58
59
60
61
62
63
76
77
78
79
80
81
82
89
90
91
92
93
94
95
96
97
98
99
111
112
113
114
115
116
117
118
119
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
133
134
135
136
137
138
139
140
141
142
143
144
145
146
162
163
164
165
166
167
168
169
231

在一些實施方案中，如本文所述的化合物具有表2中提供的結構。表 2

化合物編號	化合物結構
170

在一些實施方案中，如本文所述的化合物具有表3中提供的結構。表 3

化合物編號	化合物結構
46
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
83
84
85
86
100
101
102
104
105
106
107
108
109
132
147
148
149
150
151
152
153
154
155
156
157
158
159
160
161
174
175
176
177
178
179
180
181
182
183
184
185
186
187
188
189
232
233
234
235
236
237
238
239
240
241
242
243
244
245
246
247
248
249
250
251

在一些實施方案中，如本文所述的化合物具有表4中提供的結構。表 4

化合物編號	化合物結構
87
88
110

在一些實施方案中，如本文所述的化合物具有表5中提供的結構。表 5

化合物編號	化合物結構
131
171

在一些實施方案中，如本文所述的化合物具有表6中提供的結構。表 6

化合物編號	化合物結構
103

在一些實施方案中，如本文所述的化合物具有表7中提供的結構。表 7

化合物編號	化合物結構
172
190
191
173
192
193
194
195
196
197
198
199
200
201
202
203
204
205
206
207
208
209
210
211
212
213
214
215
216
217
218
219
220
221
222
223
224
225
226
227
228
229
230

化合物的製備

本文描述的反應中使用的化合物根據為本領域技術人員所知的有機合成技術，從可商購獲得的化學品和/或從化學文獻中描述的化合物起始來製備。“可商購獲得的化學品”從標準商業來源獲得，所述來源包括Acros Organics (Pittsburgh, PA)、Aldrich Chemical (Milwaukee, WI，包括Sigma Chemical和Fluka)、Apin Chemicals Ltd. (Milton Park, UK)、Avocado Research (Lancashire, U.K.)、BDH Inc. (Toronto, Canada)、Bionet (Cornwall, U.K.)、Chemservice Inc. (West Chester, PA)、Crescent Chemical Co. (Hauppauge, NY)、Eastman Organic Chemicals, Eastman Kodak Company (Rochester, NY)、Fisher Scientific Co. (Pittsburgh, PA)、Fisons Chemicals (Leicestershire, UK)、Frontier Scientific (Logan, UT)、ICN Biomedicals, Inc. (Costa Mesa, CA)、Key Organics (Cornwall, U.K.)、Lancaster Synthesis (Windham, NH)、Maybridge Chemical Co. Ltd. (Cornwall, U.K.)、Parish Chemical Co. (Orem, UT)、Pfaltz & Bauer, Inc. (Waterbury, CN)、Polyorganix (Houston, TX)、Pierce Chemical Co. (Rockford, IL)、Riedel de Haen AG (Hanover, Germany)、Spectrum Quality Product, Inc. (New Brunswick, NJ)、TCI America (Portland, OR)、Trans World Chemicals, Inc. (Rockville, MD)和Wako Chemicals USA, Inc. (Richmond, VA)。

詳細介紹用於製備本文所述的化合物的反應物的合成，或提供對描述製備的文章的引用的合適參考書籍和專著包括例如"Synthetic Organic Chemistry", John Wiley & Sons, Inc., New York; S. R. Sandler等人, "Organic Functional Group Preparations," 第2版, Academic Press, New York, 1983；H. O. House, "Modern Synthetic Reactions", 第2版, W. A. Benjamin, Inc. Menlo Park, Calif. 1972；T. L. Gilchrist, "Heterocyclic Chemistry", 第2版, John Wiley & Sons, New York, 1992；J. March, "Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structure", 第4版, Wiley-Interscience, New York, 1992。其他詳細介紹用於製備本文所述的化合物的反應物的合成，或提供對描述製備的文章的引用的合適參考書籍和專著包括例如Fuhrhop, J.和Penzlin G. "Organic Synthesis: Concepts, Methods, Starting Materials", 第二修訂增補版 (1994) John Wiley & Sons ISBN: 3-527-29074-5；Hoffman, R.V. "Organic Chemistry, An Intermediate Text" (1996) Oxford University Press, ISBN 0-19-509618-5；Larock, R. C. "Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations" 第2版 (1999) Wiley-VCH, ISBN: 0-471-19031-4；March, J. "Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure" 第4版 (1992) John Wiley & Sons, ISBN: 0-471-60180-2；Otera, J. (編者) "Modern Carbonyl Chemistry" (2000) Wiley-VCH, ISBN: 3-527-29871-1；Patai, S. "Patai's 1992 Guide to the Chemistry of Functional Groups" (1992) Interscience ISBN: 0-471-93022-9；Solomons, T. W. G. "Organic Chemistry" 第7版 (2000) John Wiley & Sons, ISBN: 0-471-19095-0；Stowell, J.C., "Intermediate Organic Chemistry" 第2版 (1993) Wiley-Interscience, ISBN: 0-471-57456-2；"Industrial Organic Chemicals: Starting Materials and Intermediates: An Ullmann's Encyclopedia" (1999) John Wiley & Sons, ISBN: 3-527-29645-X, 在8卷中；"Organic Reactions" (1942-2000) John Wiley & Sons, 在超過55卷中；以及"Chemistry of Functional Groups" John Wiley & Sons, 在73卷中。

具體的和類似的反應物任選地通過由美國化學學會的化學文摘服務社(Chemical Abstract Service of the American Chemical Society)編制的已知化學品索引來確定，所述索引可在大多數公共圖書館和大學圖書館中獲得，以及可通過線上資料庫獲得（對於更多細節，可聯繫華盛頓哥倫比亞特區的美國化學學會(American Chemical Society, Washington, D.C.)）。目錄中的已知但不可商購獲得的化學品任選地通過定制化學合成機構來製備，其中許多標準化學品供應機構（例如以上所列的那些）提供定制合成服務。對於製備和選擇本文所述的化合物的藥物鹽有用的參考文獻是P. H. Stahl和C. G. Wermuth "Handbook of Pharmaceutical Salts", Verlag Helvetica Chimica Acta, Zurich, 2002。 藥物組合物

在某些實施方案中，本文所述的雜芳族Bcl-xL降解化合物以純化學品施用。在其他實施方案中，本文所述的雜芳族Bcl-xL降解化合物與藥學上合適的或可接受的載體（在本文中也被稱為藥學上合適的（或可接受的）賦形劑、生理上合適的（或可接受的）賦形劑、或生理上合適的（或可接受的）載體）組合，所述藥學上合適的或可接受的載體基於所選施用途徑和標準藥物實踐來選擇，如例如在 Remington: The Science and Practice of Pharmacy（Gennaro, 第21版 Mack Pub. Co., Easton, PA (2005)）中所述。

本文提供了一種藥物組合物，所述藥物組合物包含至少一種如本文所述的雜芳族Bcl-xL降解化合物或其立體異構體、藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物以及一種或多種藥學上可接受的載體。如果一種或多種載體可與組合物的其他成分相容，並且對組合物的接受者（即物件或患者）無害，那麼所述一種或多種載體（或一種或多種賦形劑）是可接受的或合適的。

一個實施方案提供了一種藥物組合物，所述藥物組合物包含藥學上可接受的賦形劑以及式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)、式(I-H)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。

一個實施方案提供了一種製備藥物組合物的方法，所述方法包括將式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)、式(I-H)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物和藥學上可接受的載體混合。

在某些實施方案中，如由式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)、式(I-H)描述的雜芳族Bcl-xL降解化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物是基本上純的，因為它含有少於約5%或少於約1%或少於約0.1%的其他有機小分子，諸如未反應的中間體或例如在合成方法的一個或多個步驟中產生的合成副產物。

合適的口服劑型包括例如片劑、丸劑、小袋劑、或由硬質或軟質明膠、甲基纖維素或在消化道中易於溶解的其他合適材料制得的膠囊。在一些實施方案中，使用合適的無毒固體載體，其包括例如藥品級甘露糖醇、乳糖、澱粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、滑石、纖維素、葡萄糖、蔗糖、碳酸鎂等。（参见例如 Remington: The Science and Practice of Pharmacy(Gennaro, 第21版 Mack Pub. Co., Easton, PA (2005))）。

在一些實施方案中，如由式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)、式(I-H)描述的雜芳族Bcl-xL降解化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物被配製用於通過注射施用。在一些情況下，注射製劑是水性製劑。在一些情況下，注射製劑是非水性製劑。在一些情況下，注射製劑是基於油的製劑，諸如芝麻油等。

包含至少一種如本文所述的雜芳族Bcl-xL降解化合物的組合物的劑量根據物件或患者（例如人）的狀況而不同。在一些實施方案中，此類因素包括總體健康狀態、年齡和其他因素。

藥物組合物以適合於待治療（或預防）的疾病的方式施用。適當劑量以及適合的施用持續時間和頻率將由諸如患者的狀況、患者的疾病的類型和嚴重性、活性成分的特定形式和施用方法的因素決定。一般來說，適當的劑量和治療方案提供的組合物的量足以提供治療和/或預防益處（例如臨床結局改善，諸如更頻繁的完全或部分緩解、或更長久的無病生存和/或總生存期、或症狀嚴重程度的減輕）。最佳劑量通常使用實驗模型和/或臨床試驗確定。最佳劑量取決於患者的身體品質、重量或血容量。 治療方法

一個實施方案提供了一種用於治療人體或動物體的方法中的式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)、式(I-H)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。

一個實施方案提供了一種用於治療癌症或腫瘤性疾病的方法中的式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)、式(I-H)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。

一個實施方案提供了式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)、式(I-H)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物在製造用於治療癌症或腫瘤性疾病的藥物中的用途。

在一些實施方案中，本文描述了一種治療有需要的患者的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)、式(I-H)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。在一些實施方案中，本文描述了一種治療有需要的患者的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用包含式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)、式(I-H)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物以及藥學上可接受的賦形劑的藥物組合物。

本文提供了其中口服施用藥物組合物的方法。本文提供了其中通過注射施用藥物組合物的方法。

根據本公開內容，其他實施方案和用途對本領域技術人員來說將是顯而易見的。以下實施例僅作為對各種實施方案的說明而提供，並且不應被解釋為以任何方式限制本發明。 [實施例] I. 化學合成

在一些實施方案中，本文公開的化合物根據以下實施例合成。除非另外指示，否則如以下以及本發明的整個說明書中所用，以下縮寫應被理解為具有以下含義： ℃ 攝氏度 δ _H以相對於四甲基矽烷的低場百萬分率表示的化學位移 DCM 二氯甲烷(CH ₂Cl ₂) DMF 二甲基甲醯胺 DMSO 二甲亞碸 EA 乙酸乙酯 ESI 電噴霧電離 Et 乙基 g 克 h 小時 HPLC 高效液相色譜法 Hz 赫茲 J耦合常數（NMR波譜法中） LCMS 液相色譜法質譜測定法 μ微 m 多重峰（波譜）；米；毫 M 體積摩爾濃度 M ⁺母體分子離子 Me 甲基 MHz 兆赫茲 min 分鐘 mol 摩爾；分子（如mol wt中所示） mL 毫升 MS 質譜測定法 nm 納米 NMR 核磁共振 pH 酸鹼度；水溶液的酸性或鹼性的量度 PE 石油醚 RT 室溫 s 單峰（波譜） t 三重峰（波譜） T 溫度 TFA 三氟乙酸 THF 四氫呋喃 DIEA 二異丙基乙胺 HATU O-(7-氮雜苯並三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸鹽

實施例 1 ：化合物 1

步驟 A ： 9- 氧代壬酸甲酯

向9-羥基壬酸(2.00 g，11.478 mmol)在MeOH (20 mL)中的溶液中添加AcCl (1 mL，14.013 mmol)，在25℃下將混合物攪拌1小時。將所得混合物合併，接著添加DCM (40 mL)、分子篩(4A) (3 g)、PCC (3.5 g，16.237 mmol)，在25℃下將所得混合物攪拌1小時。將反應用水(100 mL)淬滅。將所得混合物用乙酸乙酯(3×100 mL)萃取。將有機層合併，用鹽水(4×100 mL)洗滌。將獲得的殘餘物通過矽膠色譜法(0-20%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供9-氧代壬酸甲酯。

步驟 B ：癸 -9- 炔酸甲酯

向9-氧代壬酸甲酯(1.1 g，5.91 mmol)在MeOH (20 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(1.63 g，11.82 mmol)、1-重氮基-2-氧代丙基膦酸二甲酯(1.70 g，8.859 mmol)。在25℃下將所得混合物攪拌過夜。將反應濃縮，接著用水(50 mL)淬滅。將所得混合物用乙酸乙酯(3×50 mL)萃取。將有機層合併，並且濃縮。將獲得的殘餘物通過矽膠色譜法(0-20%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供癸-9-炔酸甲酯。

步驟 C ： 9- 癸炔酸

向癸-9-炔酸甲酯(800 mg，4.39 mmol)在MeOH (5 mL)和H ₂O (5 mL)中的溶液中添加KOH (1231.31 mg，21.94 mmol)。在45℃下將所得混合物攪拌1.5 h。在冷卻至室溫之後，使用2 M HCl溶液將所得混合物的pH值調整至5。接著用EA (3×15 mL)萃取，用鹽水(4×15 mL)洗滌。將有機層合併，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以提供9-癸炔酸。

步驟 D ： 10-{4-[3-(2-{8-[(1,3- 苯並噻唑 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ]-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 }-4-( 乙氧基羰基 )-1,3- 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ] 苯基 } 癸 -9- 炔酸

向2-{8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基}-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]-1,3-噻唑-4-甲酸乙酯(170.00 mg，0.235 mmol)在DMF (3 mL)中的溶液中添加9-癸炔酸(118.41 mg，0.705 mmol)、DIEA (151.60 mg，1.175 mmol)、Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(82.33 mg，0.12 mmol)和CuI (13.40 mg，0.070 mmol)。在25℃下，在氮氣下，將所得混合物攪拌1 h。將反應通過反相柱來純化以提供10-{4-[3-(2-{8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基}-4-(乙氧基羰基)-1,3-噻唑-5-基)丙氧基]苯基}癸-9-炔酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 765.5 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 2-{8-[(1,3- 苯並噻唑 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ]-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 }-5-{3-[4-(9-{[(2S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-({[4-(4- 甲基 -1,3- 噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基 } 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 ]-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ] 氨基甲醯基 } 壬 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ] 丙基 }-1,3- 噻唑 -4- 甲酸乙酯

向10-{4-[3-(2-{8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基}-4-(乙氧基羰基)-1,3-噻唑-5-基)丙氧基]苯基}癸-9-炔酸(170.00 mg，0.222 mmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加DIEA (143.61 mg，1.110 mmol)、HATU (101.40 mg，0.266 mmol)、(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基丁醯基]-4-羥基-N-{[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}吡咯烷-2-甲醯胺(114.82 mg，0.266 mmol)。在25℃下將所得混合物攪拌1 h。將反應用H ₂O (10 mL)淬滅，接著用EA (3×10 mL)萃取，用鹽水(4×10 mL)洗滌。將有機層合併，並且濃縮。將獲得的殘餘物通過TLC (1/14 MeOH/DCM)來純化以提供2-{8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基}-5-{3-[4-(9-{[(2S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-({[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}氨基甲醯基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基]氨基甲醯基}壬-1-炔-1-基)苯氧基]丙基}-1,3-噻唑-4-甲酸乙酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1177.4 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 2-{8-[(1,3- 苯並噻唑 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ]-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 }-5-{3-[4-(9-{[(2S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-({[4-(4- 甲基 -1,3- 噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基 } 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 ]-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ] 氨基甲醯基 } 壬 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ] 丙基 }-1,3- 噻唑 -4- 甲酸

向2-{8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基}-5-{3-[4-(9-{[(2S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-({[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}氨基甲醯基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基]氨基甲醯基}壬-1-炔-1-基)苯氧基]丙基}-1,3-噻唑-4-甲酸乙酯(160.00 mg，0.136 mmol)在MeOH (4 mL)中的溶液中添加2 M NaOH (5 mL)。在50℃下將混合物攪拌3 h。在冷卻至室溫之後，將反應用H ₂O (5 mL)淬滅。用HCl溶液(2 M)將水相的pH值調整至5並過濾。接著通過製備型HPLC，採用以下條件來純化：柱，XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150 mm，5 μm；流動相A：10 mmol/L NH ₄HCO ₃+0.1% NH ₃.H ₂O的水溶液，流動相B：CH ₃CN (在13 min內37%至50%，在0.1 min內50%至100%，在2 min內100%至100%，在0.1 min內100%至37%，在1 min內37%至37%)；檢測器，UV 254 nm，以提供2-{8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基}-5-{3-[4-(9-{[(2S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-({[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基}氨基甲醯基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基]氨基甲醯基}壬-1-炔-1-基)苯氧基]丙基}-1,3-噻唑-4-甲酸。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.99 (s, 1H), 8.58 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 7.81 - 8.08 (m, 2H), 7.65 - 7.80 (m, 2H), 7.12 - 7.50 (m, 11H), 6.65 - 6.95 (m, 2H), 4.80 - 4.92 (m, 1H), 4.51 - 4.60 (m, 1H), 4.40 - 4.50 (m, 2H), 4.30 - 4.39 (m, 1H), 4.19 - 4.29 (m, 1H), 3.90 - 4.00 (m, 1H), 3.61 - 3.88 (m, 5H), 3.11 - 3.21 (m, 2H), 3.00 - 3.10 (m, 3H), 2.44 (s, 3 H), 2.21 - 2.40 (m, 4 H), 1.89 - 2.18 (m, 5H), 1.45 - 1.52 (m, 3H), 1.21 - 1.40 (m, 7H), 0.93 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1149.4 [M+H] ⁺。

實施例 2 ：化合物 2

步驟 A ： 3-( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 丙 -1- 醇

在0℃下，向1,3-丙二醇(3 g，39.42 mmol)在DMF (90 mL)中的溶液中添加NaH (1.14 g，60% w/w)。在室溫下將混合物攪拌0.5 h。接著添加炔丙基溴(3.75 g，31.54 mmol)。在室溫下將混合物攪拌3 h。在完成之後，將反應用水(100 mL)淬滅。將混合物用EA (3×200 mL)萃取，並且將有機層經Na ₂SO ₄乾燥並過濾。將有機層濃縮。將粗產物用矽膠柱(0-50% PE:EtOAc)純化。將有機層減壓濃縮以提供3-(丙-2-炔-1-基氧基)丙-1-醇。LCMS: MS (ESI) M/Z: 115 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 2-(3-( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 丙氧基 ) 乙酸叔丁酯

向3-(丙-2-炔-1-基氧基)丙-1-醇(2.09 g，18.31 mmol)在DCM (30 mL)中的溶液中添加2-溴乙酸叔丁酯(5.36 g，27.46 mmol)、35% NaOH (水溶液，30 mL)和Bu ₄NCl (5.07 g，18.310 mmol)。在室溫下將混合物攪拌過夜。在完成之後，將反應用水(50 mL)淬滅。將混合物用DCM (3×100 mL)萃取，並且將有機層經Na ₂SO ₄乾燥並過濾。將有機層濃縮。將粗產物用矽膠柱(0-50% PE:EtOAc)純化。將有機層減壓濃縮以提供2-[3-(丙-2-炔-1-基氧基)丙氧基]乙酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 229 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 2-(3-( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 丙氧基 ) 乙酸

向2-[3-(丙-2-炔-1-基氧基)丙氧基]乙酸叔丁酯(2 g，8.761 mmol)在THF (10 mL)、MeOH (10 mL)和H ₂O (10 mL)中的溶液中添加LiOH (2.10 g，87.610 mmol)。在30℃下將混合物攪拌3 h。在完成之後，將反應用水(30 mL)淬滅。用HCl將溶液的pH值調整至4~5。將混合物用EA (3×50 mL)萃取，並且將有機層經Na ₂SO ₄乾燥並過濾。將有機層減壓濃縮以提供[3-(丙-2-炔-1-基氧基)丙氧基]乙酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 173 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 2-{8-[(1,3- 苯並噻唑 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ]-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 }-5-[3-(4-{3-[3-({[(2S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-({[4-(4- 甲基 -1,3- 噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基 } 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 ]-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ] 氨基甲醯基 } 甲氧基 ) 丙氧基 ] 丙 -1- 炔 -1- 基 } 苯氧基 ) 丙基 ]-1,3- 噻唑 -4- 甲酸

按照與實施例1中所述類似的程式製備化合物2。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.97 (s, 1H), 8.64 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 8.00 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.69 - 7.76 (m, 2H), 7.26 - 7.40 (m, 12H), 6.89 (d, J= 8.3 Hz, 2H), 4.85 (s, 2H), 4.56 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.44 - 4.19 (m, 5H), 4.03 - 3.86 (m, 4H), 3.50 - 3.71 (m, 5H), 3.22 - 3.11 (m, 2H), 3.02 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 2.32 - 2.60 (m, 5H), 1.70 - 2.16 (m, 6H), 0.94 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1153.4 [M+H] ⁺。

實施例 3 ：化合物 3

步驟 A ： (E)-4-(2-( 苯甲基氧基 ) 乙氧基 ) 丁 -2- 烯酸乙酯

向DMSO (1.6 g)在DCM (20 mL)中的溶液中添加(COCl) ₂(1.95 g)，在-78℃下，在氮氣氛圍下攪拌混合物。在30 min之後，添加2-(2-(苯甲基氧基)乙氧基)乙-1-醇(2 g，1.00當量)在DCM中的溶液，在1 h之後，添加TEA (5.0 g，5當量)。在25℃下將所得混合物攪拌1 h。接著添加2-(三苯基-λ5-亞磷烷基)乙酸甲酯(4.20 g，1.2當量)。在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將反應濃縮。將獲得的殘餘物通過矽膠色譜法(0-50%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供(E)-4-(2-(苯甲基氧基)乙氧基)丁-2-烯酸乙酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 265.1 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 4-(2- 羥基乙氧基 ) 丁酸乙酯

向(E)-4-(2-(苯甲基氧基)乙氧基)丁-2-烯酸乙酯(1.9 g)在MeOH (20 mL)中的溶液中添加Pd/C (1.9 g，10% w/w)。在50℃下，在氫氣氛圍下，將混合物攪拌16 h。將反應過濾並濃縮。將獲得的殘餘物通過矽膠色譜法(0-30%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供4-(2-羥基乙氧基)丁酸乙酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 177.1 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 4-(2- 氧代乙氧基 ) 丁酸乙酯

向DMSO (0.89 g)在DCM (15 mL)中的溶液中添加(COCl) ₂(1.08 g，8.512 mmol)，在-78℃下，在氮氣氛圍下攪拌混合物。在30 min之後，添加4-(2-羥基乙氧基)丁酸乙酯(1 g)在DCM中的溶液，在1 h之後，添加TEA (2.88 g)。在25℃下將所得混合物攪拌1 h。將反應濃縮。將獲得的殘餘物通過矽膠色譜法(0-50%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供4-(2-氧代乙氧基)丁酸乙酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 175.1 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 4-( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 丁酸乙酯

向4-(2-氧代乙氧基)丁酸乙酯(600 mg)在MeOH (10 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(950 mg)、1-重氮基-2-氧代丙基膦酸二甲酯(990 mg)。在25℃下將所得混合物攪拌過夜。將反應濃縮，接著用水(20 mL)淬滅。將所得混合物用乙酸乙酯(3×20 mL)萃取。將有機層合併，並且濃縮。將獲得的殘餘物通過矽膠色譜法(0-30%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供4-(丙-2-炔-1-基氧基)丁酸乙酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 171.1 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 4-( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 丁酸

向4-(丁-3-炔-1-基氧基)丁酸甲酯(220 mg)在THF (3 mL)、MeOH (3 mL)中的溶液中添加LiOH.H ₂O (271.20 mg)和H ₂O (3 mL)。在25℃下將所得混合物攪拌16 h。使用2 N HCl溶液將所得混合物的pH值調整至6。將所得混合物用EA (3×10 mL)萃取。將有機層合併，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以提供4-(丙-2-炔-1-基氧基)丁酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 141.1[M-H] ^-。

步驟 F ： 2-{8-[(1,3- 苯並噻唑 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ]-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 }-5-(3-{4-[3-(3-{[(2S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-({[4-(4- 甲基 -1,3- 噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基 } 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 ]-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ] 氨基甲醯基 } 丙氧基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ] 苯氧基 } 丙基 )-1,3- 噻唑 -4- 甲酸

按照與實施例1中所述類似的程式製備該化合物。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.98 (s, 1H), 8.57 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 8.01 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.91 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 7.77 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.72 - 7.51 (m, 2H), 7.28 - 7.49 (m, 10H), 6.93 - 6.84 (m, 2H), 4.85 (s, 2H), 4.54 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.49 - 4.39 (m, 2H), 4.33 (d, J= 16.4 Hz, 3H), 4.22 - 4.30 (m, 1H), 3.99 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 3.75 - 3.61 (m, 4H), 3.31 - 3.54 (m, 3H), 3.17 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 3.02 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.34 - 2.15 (m, 2H), 2.09 - 1.96 (m, 3H), 1.90 - 1.95 (m, 1H), 1.75 - 1.85 (m, 2H), 0.93 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1123.4 [M+H] ⁺。

實施例 4 ：化合物 4

步驟 A ： 2-(4-( 苯甲基氧基 ) 丁氧基 ) 乙酸叔丁酯

在室溫下，向4-(苯甲基氧基)丁-1-醇(2 g，11.10 mmol)和2-溴乙酸叔丁酯(3.25 g，16.64 mmol)在DCM (10 mL)中的攪拌混合物中分批添加35% NaOH (水溶液，10 mL)和四丁基氯化銨(3.08 g，11.096 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌過夜。將所得混合物用CH ₂Cl ₂(3×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(1×50 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。在過濾之後，將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過矽膠柱色譜法來純化，用PE/EA (5:1)洗脫，以提供2-[4-(苯甲基氧基)丁氧基]乙酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 295.2 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 2-(4- 羥基丁氧基 ) 乙酸叔丁酯

在50℃下，在氫氣氛圍下，向2-[4-(苯甲基氧基)丁氧基]乙酸叔丁酯(1.74 g，5.91 mmol)在MeOH (20 mL)中的攪拌溶液中分批添加Pd/C (1 g，9.40 mmol，10% w/w)。在50℃下，在氫氣氛圍下，將所得混合物攪拌過夜。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH (3×20 mL)洗滌。將濾液減壓濃縮以提供2-(4-羥基丁氧基)乙酸叔丁酯。粗產物不經進一步純化即直接用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z 227.0 [M+Na] ⁺。

步驟 C ： 2-(4-( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 丁氧基 ) 乙酸叔丁酯

在室溫下，向2-(4-羥基丁氧基)乙酸叔丁酯(1.0178 g，4.983 mmol)和炔丙基溴(0.89 g，7.481 mmol)在DCM (10.18 mL)中的攪拌混合物中分批添加35% NaOH水溶液(10 mL)和四丁基氯化銨(1.38 g，4.966 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌過夜。將所得混合物用CH ₂Cl ₂(3×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(1×50 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。在過濾之後，將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過矽膠柱色譜法來純化，用PE/EA (1:1)洗脫，以提供2-[4-(丙-2-炔-1-基氧基)丁氧基]乙酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 242.2 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 2-(4-( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 丁氧基 ) 乙酸

在室溫下，向2-[(6-羥基己-3-炔-1-基)氧基]乙酸叔丁酯(669 mg，2.931 mmol)在MeOH (3 mL)、THF (3 mL)和H ₂O (3 mL)中的溶液中添加LiOH.H ₂O (1229.76 mg，29.310 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌3 h。將所得混合物減壓濃縮。用2 M HCl將混合物酸化至pH 5。將所得混合物用EA (3×20 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(1×50 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。在過濾之後，將濾液減壓濃縮以提供[(6-羥基己-3-炔-1-基)氧基]乙酸。粗產物不經進一步純化即直接用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z 185.0 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 2-{8-[(1,3- 苯並噻唑 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ]-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 }-5-[3-(4-{3-[4-({[(2S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-({[4-(4- 甲基 -1,3- 噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基 } 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 ]-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ] 氨基甲醯基 } 甲氧基 ) 丁氧基 ] 丙 -1- 炔 -1- 基 } 苯氧基 ) 丙基 ]-1,3- 噻唑 -4- 甲酸

按照與實施例1中所述類似的程式製備該化合物。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.98 (s, 1H), 8.63 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 8.00 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.69 - 7.76 (m, 2H), 7.27 - 7.48 (m, 11H), 6.89 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 4.86 (s, 2H), 4.56 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.22 - 4.49 (m, 6H), 3.90 - 4.04 (m, 4H), 3.57 - 3.75 (m, 4H), 3.50 (d, J= 5.5 Hz, 5H), 3.16 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 3.00 - 3.05 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 1.86 - 2.11 (m, 4H), 1.59 - 1.65 (m, 4H), 0.94 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1167.4 [M+H] ⁺。

實施例 5 ：化合物 5

步驟A：2-(庚-6-炔-1-基氧基)乙酸叔丁酯

向庚-6-炔-1-醇(2.0 g，17.83 mmol)在DCM (20 mL)中的溶液中添加2-溴乙酸叔丁酯(5.22 g，26.74 mmol)、35% NaOH (水溶液，20 mL)和四丁基氯化銨(4.96 g，17.830 mmol)。在25℃下將混合物攪拌過夜。將反應用H ₂O (50 mL)淬滅。將所得混合物用DCM (3×50 mL)萃取。將有機層合併，濃縮。將獲得的殘餘物通過矽膠柱色譜法(0-30%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供2-(庚-6-炔-1-基氧基)乙酸叔丁酯。

步驟 B ： ( 庚 -6- 炔 -1- 基氧基 ) 乙酸

向2-(庚-6-炔-1-基氧基)乙酸叔丁酯(1.4 g，6.186 mmol)在THF (8 mL)中的溶液中添加LiOH.H ₂O (2.60 g，61.958 mmol)、H ₂O (8 mL)、MeOH (8 mL)。在30℃下將所得混合物攪拌1 h。將反應濃縮以去除MeOH，接著用2 N HCl溶液將所得混合物的pH值調整至7。接著用EtOAc (3×50 mL)萃取。將有機層經Na ₂SO ₄乾燥。在過濾之後，將濾液減壓濃縮以提供(庚-6-炔-1-基氧基)乙酸。

步驟 C ： 2-{8-[(1,3- 苯並噻唑 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ]-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 }-5-(3-{4-[7-({[(2S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-({[4-(4- 甲基 -1,3- 噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基 } 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 ]-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ] 氨基甲醯基 } 甲氧基 ) 庚 -1- 炔 -1- 基 ] 苯氧基 } 丙基 )-1,3- 噻唑 -4- 甲酸

按照與實施例1中所述類似的程式製備該化合物。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.97 (s, 1H), 8.62 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 7.99 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.66 - 7.78 (m, 2H), 7.20 - 7.50 (m, 12H), 6.80 - 6.90 (m, 2H), 4.84 - 4.88 (m, 2H), 4.56 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.41 - 4.49 (m, 1H), 4.34 - 4.38 (m, 2H), 4.21 - 4.30 (m, 1H), 3.85 - 3.99 (m, 4H), 3.60 - 3.75 (m, 4H), 3.48 - 3.55 (m, 3H), 3.14 - 3.18 (m, 2H), 3.00 - 3.04 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.35 - 2.40 (m, 2H), 1.89 - 2.10 (m, 4H), 1.51 - 1.61 (m, 3H), 1.46 - 1.50 (m, 3H), 1.24 (s, 1H), 0.93 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1151.5 [M+H] ⁺

實施例 6 ：化合物 6

在N2氛圍下，向DMSO (1.59 g)在DCM (20 mL)中的溶液中添加(COCl) ₂(1.94 g，15.29 mmol)。在-78℃下將混合物攪拌30 min。將2-[2-(苯甲基氧基)乙氧基]乙醇(2 g，10.19 mmol)添加至混合物中。在-78℃下將混合物攪拌1 h。將TEA (5.16 g，50.96 mmol)添加至混合物中，在室溫下將混合物攪拌1 h。將2-(三苯基-λ5-亞磷烷基)乙酸叔丁酯(4.60 g，12.229 mmol)添加至混合物中，在室溫下將混合物攪拌2 h。在完成之後，將反應用水(50 mL)淬滅。將混合物用EA (3×50 mL)萃取，並且將有機層經Na ₂SO ₄乾燥並過濾。將有機層濃縮。將粗產物用矽膠柱(0-50% PE:EtOAc)純化。將有機層減壓濃縮以提供(2E)-4-[2-(苯甲基氧基)乙氧基]丁-2-烯酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 265 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 4-(2- 羥基乙氧基 ) 丁酸乙酯

在50℃下，在H ₂(g) (10 atm)氛圍下，將(2E)-4-[2-(苯甲基氧基)乙氧基]丁-2-烯酸乙酯(2.7 g，10.22 mmol)和Pd/C (1.5 g，10% w/w)在MeOH (30 mL)中的溶液攪拌過夜。將混合物經矽藻土墊過濾。將有機層濃縮。將有機層減壓濃縮以提供呈白色油狀物的4-(2-羥基乙氧基)丁酸乙酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 177 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 4-(2-( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 乙氧基 ) 丁酸乙酯

向4-(2-羥基乙氧基)丁酸乙酯(1.5 g，8.51 mmol)在DCM (22.5 mL)中的溶液中添加炔丙基溴(1.52 g，12.77 mmol)、35% NaOH (水溶液，22.5 mL)和Bu ₄NCl (2.36 g，8.51 mmol)。在室溫下將混合物攪拌過夜。在完成之後，將反應用水(50 mL)淬滅。將混合物用DCM (3×100 mL)萃取，並且將有機層經Na2SO4乾燥並過濾。將有機層濃縮。將粗產物用矽膠柱(0-50% PE:EtOAc)純化。將有機層減壓濃縮以提供4-[2-(丙-2-炔-1-基氧基)乙氧基]丁酸乙酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 215 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 4-(2-( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 乙氧基 ) 丁酸

向4-[2-(丙-2-炔-1-基氧基)乙氧基]丁酸乙酯(1.18 g，5.51 mmol)在MeOH (6 mL)和H ₂O (6 mL)中的溶液中添加KOH (3.09 g，55.07 mmol)。在室溫下將混合物攪拌3 h。在完成之後，將反應用水(20 mL)淬滅。用HCl將溶液的pH值調整至4~5。將混合物用EA (3×30 mL)萃取，並且將有機層經Na ₂SO ₄乾燥並過濾。將有機層減壓濃縮以提供4-[2-(丙-2-炔-1-基氧基)乙氧基]丁酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 187 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 2-{8-[(1,3- 苯並噻唑 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ]-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 }-5-[3-(4-{3-[2-(3-{[(2S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-({[4-(4- 甲基 -1,3- 噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基 } 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 ]-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ] 氨基甲醯基 } 丙氧基 ) 乙氧基 ] 丙 -1- 炔 -1- 基 } 苯氧基 ) 丙基 ]-1,3- 噻唑 -4- 甲酸

按照與實施例1中所述類似的程式製備該化合物。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.99 (s, 1H), 8.58 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 8.02 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.90 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 7.78 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.69 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 7.52 - 7.29 (m, 10H), 6.90 (d, J= 8.3 Hz, 2H), 4.84 (s, 2H), 4.55 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.31 - 4.60 (m, 5H), 4.22 (dd, J= 15.8, 5.4 Hz, 1H), 3.99 (s, 2H), 3.69 - 3.79 (m, 2H), 3.64 - 3.69 (m, 2H), 3.61 (d, J= 4.8 Hz, 2H), 3.52 (dd, J= 5.8, 3.3 Hz, 2H), 3.32 - 3.43 (m, 3H), 3.17 (s, 2H), 3.04 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.13 - 2.40 (m, 2H), 1.83 - 2.11 (m, 4H), 1.72 (s, 2H), 0.94 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1167.4 [M+H] ⁺。

實施例 7 ：化合物 7

步驟 A ： 6-( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 己酸乙酯

在0℃下，向6-羥基己酸乙酯(1.0 g，6.84 mmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加NaH (0.3 g，60%純度)，1小時後添加3-溴丙-1-炔(0.82 g，6.893 mmol)。在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將反應用H ₂O (10 mL)淬滅並用EA (3×20 mL)萃取，用鹽水(3×20 mL)洗滌，將有機層合併，並且真空濃縮。將殘餘物通過矽膠柱色譜法來純化，用EA/PE洗脫，以提供6-(丙-2-炔-1-基氧基)己酸乙酯。

步驟 B ： 6-( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 己酸

向6-(丙-2-炔-1-基氧基)己酸乙酯(660 mg，3.58 mmol)在MeOH (4 mL)和H ₂O (4 mL)中的溶液中添加KOH (660 mg，11.76 mmol)。在45℃下將所得混合物攪拌1 h。向反應中添加2 M HCl以達到pH約6並用EA (3×20 mL)萃取，用鹽水(3×20 mL)洗滌，將有機層合併，並且真空濃縮以提供6-(丙-2-炔-1-基氧基)己酸。LCMS: MS (ESI) M/Z: 155.1 [M-H] ^-。

步驟 C ： 2-{8-[(1,3- 苯並噻唑 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ]-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 }-5-[3-(4-{3-[(5-{[(2S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-({[4-(4- 甲基 -1,3- 噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基 } 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 ]-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ] 氨基甲醯基 } 戊基 ) 氧基 ] 丙 -1- 炔 -1- 基 } 苯氧基 ) 丙基 ]-1,3- 噻唑 -4- 甲酸。

按照與實施例1中所述類似的程式製備該化合物。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.00 (s, 1H), 8.57 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.81 - 7.91 (m, 1H), 7.72 - 7.80 (m, 1H), 7.62 - 7.71 (m, 1H), 7.22 - 7.58 (m, 11H), 6.82 - 6.98 (m, 2H), 4.85 (s, 2H), 4.49 - 4.60 (m, 1H), 4.39 - 4.48 (m, 2H), 4.18 - 4.38 (m, 4H), 3.92 - 4.01 (m, 2H), 3.61 - 3.71 (m, 4H), 3.40 - 3.51 (m, 3H), 3.12 - 3.21 (m, 2H), 3.00 - 3.10 (m, 2H), 2.50 (s, 3H), 2.20 - 2.31 (m, 1H), 2.09 - 2.19 (m, 1H), 1.95 - 2.08 (m, 3H), 1.88 - 1.94 (m, 1H), 1.45 - 1.61 (m, 4H), 1.18 - 1.38 (m, 2H), 0.93 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1151.4 [M+H] ⁺。

實施例 8 ：化合物 8

步驟 A ： 5-( 丁 -3- 炔 -1- 基氧基 ) 戊酸甲酯

向丁-3-炔-1-醇(2.0 g，28.57 mmol)在DCM (20 mL)中的溶液中添加5-溴戊酸甲酯(8.31 g，42.86 mmol)、35% NaOH (水溶液，40 mL)和四丁基氯化銨(7.91 g，28.57 mmol)。在25℃下將混合物攪拌過夜。將反應用H ₂O (50 mL)淬滅。將所得混合物用DCM (3×50 mL)萃取。將有機層合併，濃縮。將獲得的殘餘物通過矽膠柱色譜法(0-30%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供5-(丁-3-炔-1-基氧基)戊酸甲酯。

步驟 B ： 5-( 丁 -3- 炔 -1- 基氧基 ) 戊酸

向5-(丁-3-炔-1-基氧基)戊酸甲酯(1.5 g，8.16 mmol)在THF (8 mL)中的溶液中添加LiOH.H ₂O (3.26 g，81.57 mmol)、H ₂O (8 mL)、MeOH (8 mL)。在30℃下將所得混合物攪拌1 h。將反應濃縮以去除MeOH，接著使用2 N HCl溶液將所得混合物的pH值調整至7。接著用EtOAc (3×50 mL)萃取，經Na ₂SO ₄乾燥。在過濾之後，將濾液減壓濃縮以提供5-(丁-3-炔-1-基氧基)戊酸。

步驟 C ： 2-{8-[(1,3- 苯並噻唑 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ]-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 }-5-(3-{4-[4-(4-{[(2S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-({[4-(4- 甲基 -1,3- 噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基 } 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 ]-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ] 氨基甲醯基 } 丁氧基 ) 丁 -1- 炔 -1- 基 ] 苯氧基 } 丙基 )-1,3- 噻唑 -4- 甲酸

按照與實施例1中所述類似的程式製備該化合物。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.99 (s, 1H), 8.59 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 7.99 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.91 - 7.84 (m, 1H), 7.70 - 7.80 (m, 1H), 7.60 - 7.69 (m, 1H), 7.20 - 7.45 (m, 11H), 6.86 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 4.88 - 4.84 (m, 2H), 4.58 - 4.52 (m, 1H), 4.49 - 4.39 (m, 2H), 4.38 - 4.33 (m, 1H), 4.27 - 4.17 (m, 1H), 4.01 - 3.93 (m, 2H), 3.65 - 3.72 (m, 4H), 3.50 - 3.52 (m, 2H), 3.40 - 3.42 (m, 2H), 3.20 - 3.12 (m, 2H), 3.04 - 3.00 (m, 2H), 2.65 - 2.57 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.21 - 2.30 (m, 1H), 2.18 - 2.10 (m, 1H), 2.07 (s, 1H), 1.82 - 2.05 (m, 4H), 1.20 - 1.75 (m, 5H), 0.91 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1151.4 [M+H] ⁺。

實施例 9 ：化合物 9

步驟 A ： 2-( 己 -5- 炔 -1- 基氧基 ) 乙酸叔丁酯

向己-5-炔-1-醇(1.0 g，10.19 mmol)在DCM (10 mL)中的溶液中添加NaOH (10 M) (水溶液，10 mL)、2-溴乙酸叔丁酯(2.38 g，12.23 mmol)和TBAC (2.8 g，10.20 mmol)。在25℃下將所得混合物攪拌16 h。將反應用DCM (3×30 mL)萃取，用鹽水(3×40 mL)洗滌，將有機層合併，並且真空濃縮。將殘餘物通過矽膠柱色譜法來純化，用EA/PE洗脫，以提供2-(己-5-炔-1-基氧基)乙酸叔丁酯。

步驟 B ： 2-( 己 -5- 炔 -1- 基氧基 ) 乙酸

向2-(己-5-炔-1-基氧基)乙酸叔丁酯(1.8 g，8.48 mmol)在THF (5 mL)、MeOH (5 mL)和H ₂O (5 mL)中的溶液中添加LiOH.H ₂O (3.56 g，84.79 mmol)。在25℃下將所得混合物攪拌1 h。使用2 M HCl將pH值調整至6，用EA (3×40 mL)萃取，用鹽水(3×50 mL)洗滌，將有機層合併，並且真空濃縮。將殘餘物通過矽膠柱色譜法來純化，用EA/PE洗脫，以提供(己-5-炔-1-基氧基)乙酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 155.1 [M-H] ^-。

步驟 C ： 2-{8-[(1,3- 苯並噻唑 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ]-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 }-5-(3-{4-[6-({[(2S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-({[4-(4- 甲基 -1,3- 噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基 } 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 ]-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ] 氨基甲醯基 } 甲氧基 ) 己 -1- 炔 -1- 基 ] 苯氧基 } 丙基 )-1,3- 噻唑 -4- 甲酸。

按照與實施例1中所述類似的程式製備該化合物。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.00 (s, 1 H), 8.62 (t, J= 6.0 Hz, 1 H), 7.91 - 8.05 (m, 1 H), 7.61 - 7.81 (m, 2 H), 7.20 - 7.52 (m, 12 H), 6.75 - 6.95 (m, 2 H), 4.85 (s, 2 H), 4.51 - 4.67 (m, 1 H), 4.31 - 4.50 (m, 3 H), 4.21 - 4.30 (m, 1 H), 3.89 - 4.00 (m, 4 H), 3.60 - 3.75 (m, 4 H), 3.50 - 3.55 (m, 2 H), 3.10 - 3.20 (m, 2 H), 3.00 - 3.09 (m, 2 H), 2.41 - 2.45 (m, 6 H), 1.89 - 2.11 (m, 4 H), 1.58 - 1.71 (m, 4 H), 0.94 (s, 9 H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1137.4 [M+H] ⁺。

實施例 10 ：化合物 10

步驟 A ： 10- 氧代癸酸甲酯

向10-羥基癸酸(2 g，10.62 mmol)在MeOH (20 mL)中的溶液中添加AcCl (1.3 mL，18.22 mmol)，在25℃下將混合物攪拌1小時。將所得混合物合併，接著添加DCM (40 mL)、分子篩(4A) (3 g)、PCC (3.5 g，16.24 mmol)，在25℃下將所得混合物攪拌1小時。將反應用水(100 mL)淬滅。將所得混合物用乙酸乙酯(3×100 mL)萃取。將有機層合併，用鹽水(4×100 mL)洗滌。將獲得的殘餘物通過矽膠色譜法(0-20%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供10-氧代癸酸甲酯。

步驟 B ：十一碳 -10- 炔酸甲酯

向10-氧代癸酸甲酯(1.37 g，6.84 mmol)在MeOH (15 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(1.89 g，13.68 mmol)、1-重氮基-2-氧代丙基膦酸二甲酯(1.97 g，10.26 mmol)。在25℃下將所得混合物攪拌過夜。將反應濃縮，接著用水(50 mL)淬滅。將所得混合物用乙酸乙酯(3×50 mL)萃取。將有機層合併，並且濃縮。將獲得的殘餘物通過矽膠色譜法(0-20%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供十一碳-10-炔酸甲酯。

步驟 C ： 10- 十一碳炔酸

向十一碳-10-炔酸甲酯(1.0 g，5.10 mmol)在MeOH (5 mL)和H ₂O (5 mL)中的溶液中添加KOH (1.43 g，25.48 mmol)。在45℃下將所得混合物攪拌1.5 h。在冷卻至室溫之後，使用2 M HCl溶液將所得混合物的pH值調整至5。接著用EA (3×15 mL)萃取，用鹽水(4×15 mL)洗滌。將有機層合併，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以提供10-十一碳炔酸。

步驟 D ： 2-{8-[(1,3- 苯並噻唑 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ]-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 }-5-{3-[4-(10-{[(2S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-({[4-(4- 甲基 -1,3- 噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基 } 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 ]-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ] 氨基甲醯基 } 癸 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ] 丙基 }-1,3- 噻唑 -4- 甲酸。

按照與實施例1中所述類似的程式製備該化合物。 ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.99 (s, 1H), 8.59 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 7.81 - 8.01 (m, 2H), 7.62 - 7.70 (m, 2H), 7.00 - 7.60 (m, 10H), 6.65 - 6.92 (m, 2H), 4.82 - 4.91 (m, 1H), 4.51 - 4.61 (m, 1H), 4.40 - 4.50 (m, 2H), 4.30 - 4.39 (m, 1H), 4.19 - 4.29 (m, 1H), 3.90 - 4.09 (m, 2H), 3.60 - 3.89 (m, 5H), 3.11 - 3.21 (m, 2H), 3.00 - 3.10 (m, 2H), 2.44 - 2.50 (m, 4H), 2.20 - 2.40 (m, 3H), 1.79 - 2.15 (m, 5H), 1.42 - 1.61 (m, 4H), 1.32 - 1.41 (m, 2H), 1.20 - 1.30 (m, 6H), 0.93 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1163.6 [M+H] ⁺。

實施例 11 ：化合物 11

步驟 A ： 2-(2-( 苯甲基氧基 ) 乙氧基 ) 乙酸叔丁酯

在室溫下，向2-溴乙酸叔丁酯(3.84 g，19.71 mmol)和乙二醇單苄醚(2.00 g，13.14 mmol)在DCM (20.00 mL)和35% NaOH (水溶液，20 mL)中的攪拌混合物中分批添加四丁基氯化銨(3.65 g，13.14 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌過夜。將所得混合物用CH ₂Cl ₂(3×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(1×50 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。在過濾之後，將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過矽膠柱色譜法來純化，用PE/EA (5:1)洗脫，以提供2-[2-(苯甲基氧基)乙氧基]乙酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 289.0 [M+Na] ⁺。

步驟 B ： 2-(2- 羥基乙氧基 ) 乙酸叔丁酯

在室溫下，在氫氣氛圍下，向2-[2-(苯甲基氧基)乙氧基]乙酸叔丁酯(2.67 g)在MeOH (20 mL)中的攪拌溶液中分批添加Pd/C (1 g，10% w/w)，並且攪拌過夜。將所得混合物過濾，將濾餅用MeOH (4×20 mL)洗滌。將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過矽膠柱色譜法來純化，用PE/EA (1:1)洗脫，以提供2-(2-羥基乙氧基)乙酸叔丁酯)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 177.2 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 2-(2- 碘乙氧基 ) 乙酸叔丁酯

在室溫下，向2-(2-羥基乙氧基)乙酸叔丁酯(1.1345 g，6.44 mmol)和PPh ₃(1.86 g，7.082 mmol)在DCM (10 mL)中的攪拌混合物中分批添加咪唑(0.53 g，7.726 mmol)和I ₂(1.80 g，7.092 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌2 h。在室溫下，將反應用飽和連二亞硫酸鈉(水溶液)淬滅。將所得混合物用CH ₂Cl ₂(3×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(1×50 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。在過濾之後，將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過矽膠柱色譜法來純化，用PE/EA (5:1)洗脫，以提供2-(2-碘乙氧基)乙酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 309.0 [M+Na] ⁺。

步驟 D ： 2-(2-( 丁 -3- 炔 -1- 基氧基 ) 乙氧基 ) 乙酸叔丁酯

在室溫下，向2-(2-碘乙氧基)乙酸叔丁酯(1.38 g，4.81 mmol)和3-丁炔-1-醇 (0.281 g，4.01 mmol)在35% NaOH (水溶液，10 mL)和DCM (10 mL)中的攪拌混合物中分批添加四丁基氯化銨(1.11 g，3.99 mmol)，並且在室溫下攪拌過夜。將所得混合物用CH ₂Cl ₂(3×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(1×50 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。在過濾之後，將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過矽膠柱色譜法來純化，用PE/EA (1:1)洗脫，以提供2-[(6-羥基己-3-炔-1-基)氧基]乙酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 246.2 [M+H ₂O] ⁺。

步驟 E ： 2-(2-( 丁 -3- 炔 -1- 基氧基 ) 乙氧基 ) 乙酸

在室溫下，向2-(2-(丁-3-炔-1-基氧基)乙氧基)乙酸叔丁酯(450 mg，1.97 mmol)在MeOH (3 mL)、THF (3 mL)和H ₂O (3 mL)中的溶液中添加LiOH.H ₂O (809 mg，19.73 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌3 h。將所得混合物減壓濃縮。用2 M HCl將混合物酸化至pH 5。將所得混合物用EA (3×20 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(1×50 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。在過濾之後，將濾液減壓濃縮以提供2-(2-(丁-3-炔-1-基氧基)乙氧基)乙酸。粗產物不經進一步純化即直接用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z 171.2 [M-H] ^-。

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(4-(2-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙氧基 ) 乙氧基 ) 丁 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸。

按照與實施例1中所述類似的程式製備該化合物。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.96 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.63 - 7.81 (m, 2H), 7.13 - 7.52 (m, 12H), 6.84 (s, 2H), 4.86 (s, 2H), 4.58 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.30 - 4.54 (m, 3H), 4.17 - 4.31 (s, 1H), 3.90 - 4.10 (m, 3H), 3.52 - 3.79 (m, 8H), 3.16 (s, 2H), 3.03 (s, 2H), 2.62 - 2.71 (m, 2H), 2.37 - 2.46 (m, 5H), 1.78 - 2.16 (m, 6H), 0.95 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1153.4 [M+H] ⁺。

實施例 12 ：化合物 12

步驟 A ： 8- 羥基辛酸甲酯

向8-羥基辛酸(1.0 g，6.24 mmol)在MeOH (20 mL)中的溶液中添加AcCl (449.09 mg，1.54 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌1 h。隨後，將所得混合物濃縮以提供8-羥基辛酸甲酯。

步驟 B ： 8- 氧代辛酸甲酯

向8-羥基辛酸甲酯(600 mg，3.44 mmol)在DCM (20 mL)中的溶液中添加PCC (1.75 g，8.13 mmol)、4A MS (1.5 g)。在室溫下將所得混合物攪拌1 h。隨後，將反應過濾並用DCM (3×50 mL)萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將獲得的殘餘物通過矽膠色譜法(0-20%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供8-氧代辛酸甲酯。

步驟 C ：壬 -8- 炔酸甲酯

向8-氧代辛酸甲酯(770 mg，4.47 mmol)在MeOH (15 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(1.1 g，7.96 mmol)、(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(1.0 g，5.19 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌16 h。隨後，將反應過濾並濃縮。將所得混合物用乙酸乙酯(3×50 mL)萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將獲得的殘餘物通過矽膠色譜法(0-20%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供壬-8-炔酸甲酯。

步驟 D ：壬 -8- 炔酸

向壬-8-炔酸甲酯(469 mg，2.79 mmol)在MeOH (5 mL)和H ₂O (5 mL)中的溶液中添加KOH (469 mg，8.36 mmol)。在45℃下將所得混合物攪拌1 h。在冷卻至室溫之後，將反應用水(10 mL)淬滅。向所得混合物中添加2 N HCl以達到pH約6並用乙酸乙酯(3×50 mL)萃取。將有機層合併，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮以提供8-壬炔酸。

LC/MS: MS (ESI) M/Z 153.2 [M-H] ^-。

步驟 E ： 9-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 乙氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 壬 -8- 炔酸

向2-[8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]-1,3-噻唑-4-甲酸乙酯(50 mg，0.069 mmol)在DMF (2 mL)中的溶液中添加8-壬炔酸(30 mg，0.20 mmol)、DIPEA (0.05 mL，0.39 mmol)、CuI (4 mg，0.02 mmol)、Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(15 mg，0.021 mmol)。將所得混合物維持在氮氣下並在室溫下攪拌16 h。隨後，將反應用水(10 mL)淬滅。將所得混合物通過反相柱(0-90%)來純化以提供9-[4-[3-(2-[8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-(乙氧基羰基)-1,3-噻唑-5-基)丙氧基]苯基]壬-8-炔酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 751.3 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-9- 氧代壬 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸乙酯

向9-[4-[3-(2-[8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-(乙氧基羰基)-1,3-噻唑-5-基)丙氧基]苯基]壬-8-炔酸(100 mg，0.13 mmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(65 mg，0.15 mmol)和HATU (62 mg，0.16 mmol)、DIEA (0.07 mL)。在室溫下將所得混合物攪拌1 h。將反應用水(10 mL)淬滅，用乙酸乙酯(3×20 mL)萃取。將有機層合併，用鹽水(3×50 mL)洗滌並濃縮。將獲得的殘餘物通過矽膠色譜法(0-10% MeOH/DCM)來純化以提供2-[8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-(8-[[(2S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲醯基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基]氨基甲醯基]辛-1-炔-1-基)苯氧基]丙基]-1,3-噻唑-4-甲酸乙酯的粗品。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1163.4 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-9- 氧代壬 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

向2-[8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-(8-[[(2S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲醯基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基]氨基甲醯基]辛-1-炔-1-基)苯氧基]丙基]-1,3-噻唑-4-甲酸乙酯(100 mg，0.086 mmol)在MeOH (4 mL)中的溶液中添加2 M NaOH (水溶液，2 mL)。在50℃下將所得混合物攪拌3 h。接著將反應冷卻至室溫，用2 N HCl將所得混合物的pH調整至5。將混合物過濾並真空乾燥。將獲得的殘餘物通過製備型HPLC，採用以下條件(1#waters2767-5)來純化：柱，Xselect CSH OBD柱30*150 mm 5 um，n；流動相，相A：10 mmol/L NH ₄HCO ₃+0.1% NH ₃.H ₂O的水溶液，相B：CH ₃CN (在10 min內40% CH ₃CN上升至70%，接著在1 min內70%至100%，在1 min內保持100%，在1 min內下降至40%，在1 min內保持40%)；檢測器，UV220和254 nm，以提供2-[8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-(8-[[(2S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-([[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]甲基]氨基甲醯基)吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基]氨基甲醯基]辛-1-炔-1-基)苯氧基]丙基]-1,3-噻唑-4-甲酸。 ¹HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 9.00 (s, 1H), 8.50 - 8.65 (m, 1H), 7.88 - 8.00 (brs, 1H), 7.85 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.60 - 7.75 (m, 2H), 7.10 - 7.50 (m, 11H), 6.65 - 6.92 (m, 2H), 4.87 (brs, 2H), 4.52 - 4.64 (m, 1H), 4.30 - 4.50 (m, 3H), 4.15 - 4.28 (m, 1H), 3.60 - 4.02 (m, 8H), 2.98 - 3.24 (m, 5H), 2.45 (s, 3H), 2.20 - 2.40 (m, 2H), 1.85 - 2.17 (m, 4H), 1.20 - 1.70 (m, 8H), 0.95 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1135.6 [M+H] ⁺。

實施例 13 ：化合物 13

步驟 A ： 3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 酮

向9-氧代-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(1.0 g，3.74 mmol)在DCM (10 mL)中的溶液中添加HCl/二噁烷(4 M，2 mL)。在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將反應混合物真空濃縮以產生粗品。粗產物不經進一步純化即應用於下一步驟。

步驟 B ： 9- 氧代 -3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 甲酸苯甲酯

向3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-酮(630 mg，3.09 mmol，HCl鹽)和CbzCl (791.38 mg，4.64 mmol)在DCM (10 mL)中的溶液中添加TEA (938.84 mg，9.28 mmol)。在25℃下將混合物攪拌1 h。將反應混合物用水(100 mL)處理並用EA (3×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3×200 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮以產生粗品。將粗品通過矽膠柱色譜法來純化，用PE:EA=10:1~2:1洗脫，以產生9-氧代-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸苯甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 302.3 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 9-(2-( 叔丁氧基 )-2- 氧代乙叉基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 甲酸苯甲酯

在0℃下，向2-二乙氧基磷醯基乙酸叔丁酯(987.62 mg，3.92 mmol)在THF (10 mL)中的溶液中添加NaH (156.61 mg，3.92 mmol，60%純度)。在0.5 h之後，將9-氧代-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸苯甲酯(590 mg，1.96 mmol)添加至混合物中並在25℃下攪拌18 h。將反應混合物用水(100 mL)淬滅並用EA (3×30 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(100 mL×3)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮以產生粗品。將粗品通過矽膠柱色譜法來純化，用PE:EA=50:1~15:1洗脫，以產生9-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙叉基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸苯甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 422.3 [M+Na] ⁺。

步驟 D ： 2-(3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 基 ) 乙酸叔丁酯

向9-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙叉基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸苯甲酯(530 mg，1.33 mmol)在MeOH (20 mL)中的溶液中添加Pd/C (128.89 mg，10% w/w)。將所得混合物在真空下脫氣並用H ₂吹掃3次。在25℃下，在H ₂下，將混合物攪拌6 h。將反應混合物經矽藻土墊過濾並將濾餅用MeOH(3×20 mL)洗滌。將合併的濾液真空濃縮至乾燥以產生2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙酸叔丁酯。粗產物不經進一步純化即應用於下一步驟。LC/MS: MS (ESI) M/Z 268.4 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 2-(3-( 丙 -2- 炔 -1- 基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 基 ) 乙酸叔丁酯

在0℃下，向2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙酸叔丁酯(480 mg，1.80 mmol)在MeOH (10 mL)中的懸浮液中添加K ₂CO ₃(297.70 mg，2.15 mmol)。在0.1 h之後，添加3-溴丙-1-炔(256.24 mg，2.15 mmol，185.68 μL)並在0℃下攪拌1 h。將反應混合物升溫至室溫，並且用水處理並用DCM萃取。將有機相用鹽水洗滌並濃縮以產生粗品。將殘餘物通過柱色譜法(PE:EA=15:1~2:1)來純化以提供2-(3-丙-2-炔基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙酸叔丁酯。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 3.28 (t, J= 2.3 Hz, 2H), 2.51-2.46 (m, 4H), 2.24-2.21 (m, 2H), 2.09 (d, J= 7.1 Hz, 2H), 1.70-1.62 (m, 2H), 1.57-1.49 (m, 4H), 1.44-1.39 (m, 11H), 1.16-1.09 (m, 4H)。

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(9-(2-( 叔丁氧基 )-2- 氧代乙基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-(3-丙-2-炔基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙酸叔丁酯(128.96 mg，422.18 μmol)和2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(150 mg，211.09 μmol)在DMF (10 mL)中的溶液中添加CuI (20.10 mg，105.54 μmol)、Pd(PPh ₃) ₄(121.96 mg，105.54 μmol)和DIEA (109.13 mg，844.35 μmol)。將管脫氣並用N ₂回填5次。在60℃下，在N ₂下，將所得混合物攪拌4 h。將反應混合物冷卻至室溫，用水(100 mL)淬滅並用EA (3×30 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3×100 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮。將獲得的殘餘物通過矽膠柱色譜法來純化，用DCM:MeOH=50:1~5:1洗脫，以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[9-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 445.4 [M+2H] ⁺/2。

步驟 G ： 2-(3-(3-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 基 ) 乙酸

在40℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[9-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(135 mg，152.00 μmol)在FA (5 mL)中的溶液攪拌4 h。將反應混合物真空濃縮以產生2-(3-(3-(4-(3-(2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-4-(甲氧基羰基)噻唑-5-基)丙氧基)苯基)丙-2-炔-1-基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 417.1 [M+2H] ⁺/2。

步驟 H ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(9-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[3-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基]乙酸(140 mg，168.26 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(144.89 mg，336.52 μmol)在DMF (5 mL)中的混合物中添加HATU (319.89 mg，841.31 μmol)和DIEA (217.46 mg，1.68 mmol)。在25℃下將混合物攪拌1 h。將反應混合物用水淬滅並用EA (3×25 mL)萃取。將合併的有機層用飽和NH ₄Cl溶液、鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮至乾燥。將獲得的殘餘物通過製備型TLC (MeOH/DCM=1:10)來純化以提供呈灰白色固體的2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[9-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 622.9 [M+2H] ⁺/2。

步驟 I ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(9-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[9-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(75 mg，60.26 μmol)在MeOH (5 mL)和THF (5 mL)中的溶液中添加LiOH (7.20 mg，301.30 μmol)。在25℃下將所得混合物攪拌2 h。在25℃下將所得混合物攪拌2 h。用0.1 M HCl溶液將反應混合物的pH值調整至pH=3並用DCM (3×25 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮。將獲得的殘餘物通過製備型HPLC (10 mmol/L NH ₄HCO ₃-ACN，66%-86%；YMC-Actus Triart C18，150*20 mm，5 um；流速：20 mL/min)來純化。將洗脫物真空濃縮並冷凍乾燥以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[9-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 616.4 [M+2H] ⁺/2。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.67 (s, 1H), 7.85 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.61 (s, 2H), 7.32-7.26 (m, 11H), 7.17 (d, J= 0.8 Hz, 1H),6.74 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 6.44 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 4.88 (t, J= 17.5 Hz, 2H), 4.67 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 4.59-4.51 (m, 3H), 4.27 (d, J= 15.4 Hz, 1H), 4.11 (d, J= 12.6 Hz, 1H), 3.91 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.77 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 3.59 (d, J= 7.7 Hz, 2H), 3.27 (s, 2H), 3.01 (t, J= 5.8 Hz, 2H), 2.72 (s,3H), 2.48 (s, 4H), 2.06 (d, J= 6.3 Hz, 4H), 1.54 (m, 9H), 1.26 (s, 2H), 1.05-0.93 (m, 14H)。

實施例 14 ：化合物 14

步驟 A ： 1-(4-(2-( 叔丁氧基 )-2- 氧代乙基 ) 環己基 ) 氮雜環丁烷 -3- 甲酸甲酯

在0℃下，向2-(4-氧代環己基)乙酸叔丁酯(8.25 g，38.86 mmol)和氮雜環丁烷-3-甲酸甲酯(4.07 g，35.33 mmol)在DCE (200 mL)中的溶液中緩慢添加NaBH(OAc) ₃(22.47 g，105.99 mmol)和AcOH (2.12 g，35.33 mmol)。在25℃下將所得混合物攪拌6 h。將反應混合物通過添加H ₂O (120 mL)來淬滅，用DCM (100 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(60 mL×2)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/10~50% EtOAc)來純化以提供1-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)環己基]氮雜環丁烷-3-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 312.3 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 2-(4-(3- 甲醯基氮雜環丁烷 -1- 基 ) 環己基 ) 乙酸叔丁酯

在-78℃下，在N ₂氛圍下，向1-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)環己基]氮雜環丁烷-3-甲酸甲酯(2.30 g，7.39 mmol)在無水DCM (100 mL)中的溶液中逐滴添加DIBAL-H的甲苯溶液(18.5 mL，18.5 mmol)。在-78℃下將所得混合物攪拌30 min。將反應混合物通過添加硫酸鈉十水合物(約6 g)來淬滅並在-78℃下攪拌30 min。將反應混合物經矽藻土墊過濾並將濾餅用DCM (3×80 mL)洗滌。將合併的濾液濃縮以產生2-(4-(3-甲醯基氮雜環丁烷-1-基)環己基)乙酸叔丁酯，其不經進一步純化即用於下一步驟。LC/MS: MS (ESI) M/Z 282.4 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 2-(4-(3- 乙炔基氮雜環丁烷 -1- 基 ) 環己基 ) 乙酸叔丁酯

向(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(1.30 g，6.83 mmol)在MeOH (60 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(943 mg，6.83 mmol)。在25℃下將混合物攪拌0.5 h。添加2-[4-(3-甲醯基氮雜環丁烷-1-基)環己基]乙酸叔丁酯(1.61 g，5.69 mmol)。在25℃下將所得混合物攪拌11.5 h。將反應混合物通過添加H ₂O (100 mL)來淬滅，用DCM (100 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(50 mL×2)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/0~20% EtOAc)來純化以提供2-[4-(3-乙炔基氮雜環丁烷-1-基)環己基]乙酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 278.3 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[2-[1-[4-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-2- 氧代 - 乙基 ] 環己基 ] 氮雜環丁烷 -3- 基 ] 乙炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸。

按照與實施例13中所述類似的程式製備該化合物。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ 8.86 (s, 1H), 7.89 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.75 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.61 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.44 - 7.28 (m, 10 H), 6.82 (d, J= 7.6 Hz, 2H),4.99 - 4.90 (m, 4 H), 4.63 - 4.30 (m, 7H), 4.19 - 4.15 (m, 2 H), 3.98 - 3.95 (m, 2 H), 3.89 - 3.76 (m, 5 H), 3.35 - 3.31 (m, 2 H), 3.25 - 3.21 (m, 2 H), 3.06 - 3.03 (m, 2H), 2.44 (s, 3 H), 2.28 - 2.03 (m, 6 H), 1.78 – 1.27 (m, 6H), 1.01 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1202.6 [M+H] ⁺。

實施例 15 ：化合物 15

步驟 A ： 1-(1-(( 苯甲基氧基 ) 羰基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 ) 呱啶 -4- 甲酸叔丁酯

向3-氧代氮雜環丁烷-1-甲酸苯甲酯(5.02 g，24.39 mmol)和呱啶-4-甲酸叔丁酯(5.40 g，24.37 mmol)在THF (100 mL)中的懸浮液中添加AcOH (731.6 mg，12.18 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌5 min。接著添加NaBH(OAc) ₃(15.49 g，73.10 mmol)。在25℃下將所得混合物攪拌4 h。向混合物中添加H ₂O (80 mL)，用EtOAc (3×80 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×30 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/10~50% EtOAc)來純化以產生1-(1-苯甲基氧基羰基氮雜環丁烷-3-基)呱啶-4-甲酸叔丁酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 375.3 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 1-( 氮雜環丁烷 -3- 基 ) 呱啶 -4- 甲酸叔丁酯

向1-(1-苯甲基氧基羰基氮雜環丁烷-3-基)呱啶-4-甲酸叔丁酯(4.80 g，12.82 mmol)在MeOH (100 mL)中的溶液中添加Pd/C (1.21 g，50%純度)和AcOH (2.31 g，38.45 mmol)。將所得混合物在真空下脫氣並用H ₂吹掃3次。在室溫下，在H ₂下，將混合物攪拌1 h。將反應混合物經矽藻土墊過濾並將濾餅用MeOH (3×30 mL)洗滌。將合併的濾液濃縮以產生1-(氮雜環丁烷-3-基)呱啶-4-甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 241.3 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 1-(1-( 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 ) 呱啶 -4- 甲酸叔丁酯

在0℃下，向1-(氮雜環丁烷-3-基)呱啶-4-甲酸叔丁酯(2.5 g，8.32 mmol，AcOH鹽)和K ₂CO ₃(3.45 g，24.97 mmol)在CH ₃CN (100 mL)中的懸浮液中逐滴添加3-溴丙-1-炔(990 mg，8.32 mmol)在CH ₃CN (5 mL)中的溶液。在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將固體通過過濾去除並用EtOAc (2×10 mL)洗滌。將濾液濃縮至乾燥。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：DCM/0~5% MeOH)來純化以提供1-(1-丙-2-炔基氮雜環丁烷-3-基)呱啶-4-甲酸叔丁酯。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 3.44-3.48 (m, 2 H), 3.26 (d, J=2.4Hz, 2 H), 3.02-3.06 (m, 2 H), 2.89-2.95 (m, 1 H), 2.67-2.70(m, 2 H), 2.22 (t, J=2.4 Hz, 1 H), 2.07-2.19 (m, 2 H), 1.81-1.86 (m, 4 H), 1.63-1.73 (m, 2 H), 1.41 (s, 9 H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 279.3 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[3-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基甲醯基 ]-1- 呱啶基 ] 氮雜環丁烷 -1- 基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸。

按照與實施例13中所述類似的程式製備該化合物。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.98 (s, 1H), 8.57 (t, J=6.0 Hz, 1H), 8.02 (d, J=7.6 Hz,1H), 7.78 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.67 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.32-7.49 (m, 11H), 6.89 (d, J=8.8 Hz, 2H), 4.83 (s, 1H), 4.52 (d, J=9.2 Hz, 1H), 4.40-4.45 (m, 2H), 4.34 (m,1H), 4.18-4.24 (m, 1H), 3.98 (t, J=6.4 Hz, 2H), 3.71 (t, J=6.0 Hz, 2H),3.60-3.68 (m, 2H), 3.33 (t, J=6.4 Hz, 5H), 3.16 (t, J=7.6 Hz, 2H), 2.98-3.03 (m, 4H), 2.79-2.86 (m, 1H), 2.69-2.73 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.31-2.39 (m, 1H), 1.96-2.01 (m, 3H), 1.86-1.92 (m, 1H), 1.65-1.75 (m, 3H), 1.45-1.54 (m, 3H), 0.92 (s, 9H)。LC/MS: 1023.70 [M+H] ⁺。

實施例 16 ：化合物 16

步驟 A ： 7-( 甲氧基亞甲基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸叔丁酯

在0℃下，向甲氧基甲基(三苯基)鏻(4.30 g，12.54 mmol)在THF (60 mL)中的溶液中添加t-BuOK (2.11 g，18.80 mmol)。在0.5 h之後，向混合物中添加7-氧代-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1.5 g，6.27 mmol)並在70℃下攪拌4 h。將反應混合物用水(100 mL)處理並用EA (3×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3×200 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮以產生粗品。將粗品通過矽膠柱色譜法來純化，用PE:EA=20:1~8:1洗脫，以產生7-(甲氧基亞甲基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 5.76 (s, 1H), 3.59 (s, 4H), 3.51 (s, 3H), 2.14 (s, 2H), 1.92-1.89 (m, 2H), 1.64-1.61 (m, 4H), 1.43 (s, 9H)。

步驟 B ： 7- 甲醯基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸叔丁酯

向7-(甲氧基亞甲基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1.47 g，5.50 mmol)在DCM (10 mL)中的溶液中添加TFA:H ₂O=1:10(5 mL)。在室溫下將混合物攪拌4 h。將反應混合物用水(100 mL)處理並用DCM (3×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3×200 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮以產生呈粗產物形式的標題化合物，其不經進一步純化即用於下一步驟中。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 9.62 (s, 1H), 3.57 (d, J = 2.5 Hz, 4H), 2.23-2.18 (m, 1H), 1.89-1.84 (m, 4H), 1.55-1.48 (m, 4H), 1.43 (s, 9H)。

步驟 C ： 7- 乙炔基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸叔丁酯

向7-甲醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1.2 g，4.74 mmol)和1-重氮基-1-二甲氧基磷醯基-丙-2-酮(1.36 g，7.11 mmol)在MeOH (20 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(981.97 mg，7.11 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌1 h。將反應混合物用水(80 mL)淬滅並用EA (3×30 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3×100 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮以產生粗品。將粗品通過矽膠柱色譜法來純化，用PE:EA=50:1~10:1洗脫，以產生7-乙炔基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 3.56 (d, J= 16.2 Hz, 4H), 2.36 (s, 1H), 2.03 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 1.89-1.83 (m, 2H), 1.74 (s, 2H), 1.53-1.46 (m, 4H), 1.42 (s, 9H)。

步驟 D ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((2-( 叔丁氧基羰基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在室溫下，向7-乙炔基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(210.54 mg，844.35 μmol)和2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(300 mg，422.18 μmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加CuI (40.20 mg，211.09 μmol)、Pd(PPh ₃) ₄(243.93 mg，211.09 μmol)和DIEA (218.25 mg，1.69 mmol)。將所得混合物在真空下脫氣並用N ₂吹掃3次。在60℃下，在N ₂下，將所得混合物攪拌4 h。將反應混合物用水(50 mL)淬滅並用EA (3×30 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3×100 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮以產生粗品。將粗品通過矽膠柱色譜法(用DCM:MeOH=100:1~20:1洗脫)和製備型TLC來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-(2-叔丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 833.4 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 5-(3-(4-(2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 )-2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-(2-叔丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(460 mg，552.86 μmol)的溶液中添加FA (5 mL)。在室溫下將所得混合物攪拌18 h。將反應混合物真空濃縮以產生5-[3-[4-[2-(2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)乙炔基]苯氧基]丙基]-2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]噻唑-4-甲酸甲酯，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z 366.8 [M+2H] ⁺/2。

步驟 F ： 2-(7-((4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 乙炔基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 ) 乙酸

向2-(7-((4-(3-(2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-4-(甲氧基羰基)噻唑-5-基)丙氧基)苯基)乙炔基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙酸和乙醛酸(788.98 mg，10.66 mmol)在DMF (5 mL)和DCE (5 mL)中的溶液中添加AcOH (95.99 mg，1.60 mmol)和NaBH(OAc) ₃(173.74 mg，819.76 μmol)。在室溫下將所得混合物攪拌2 h。將反應混合物真空濃縮以產生粗品。將粗反應混合物過濾並通過製備型HPLC (10 mmol/L NH ₄HCO ₃-ACN，66%-86%；YMC-Actus Triart C18，150*20 mm，5 um；流速：20 mL/min)來純化。將洗脫物真空濃縮並冷凍乾燥以產生2-[7-[2-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]乙炔基]-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基]乙酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 395.4 [M+2H] ⁺/2。

步驟 G ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((2-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[7-[2-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]乙炔基]-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基]乙酸(25 mg，31.65 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(16.35 mg，37.98 μmol)在DMF (1 mL)中的溶液中添加EDCI (30.33 mg，158.24 μmol)、HOBT (21.45 mg，158.88 μmol)和DIEA(40.90 mg，316.47 μmol)。在室溫下將所得混合物攪拌18 h。將反應混合物用水(50 mL)淬滅並用EA (3×20 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3×100 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮。將反應混合物通過製備型TLC來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[2-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 417.1 [M+2H] ⁺/2。

步驟 H ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((2-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[2-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(16 mg，13.31 μmol)在MeOH (1 mL)和THF (1 mL)中的溶液中添加LiOH (3.19 mg，133.06 μmol)。在室溫下將所得混合物攪拌4 h。將反應混合物真空濃縮。用0.1 M HCl溶液將反應混合物的pH值調整至pH=4-5。將反應混合物過濾並將濾餅用H ₂O (3×1 mL)洗滌以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[2-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1189.7 [M+H] ⁺。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 12.86 (s, 1H), 10.30 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.57 (t, J= 5.9 Hz, 1H), 8.00 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 7.46-7.30 (m, 9H), 7.21 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 6.81 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 5.14 (s, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.50 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.43-4.33 (m, 3H), 4.19 (dd, J= 15.8, 5.1 Hz, 1H), 3.93 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 3.69-3.63 (m, 3H), 3.54 (d, J= 10.2 Hz, 1H), 3.12 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 2.98 (t, J= 5.9 Hz, 2H), 2.40 (s, 3H), 2.04-1.87 (m, 6H), 1.68-1.41 (m, 6H), 1.19 (s, 6H), 1.12 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 0.91 (s, 9H)

實施例 17 ：化合物 17

步驟 A ： 2-( 甲氧基亞甲基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸叔丁酯

向(甲氧基甲基)(甲基)二苯基氯化鏻(4.30 g，1.25 mol)在THF (50 mL)中的溶液中添加t-BuOK (1.5 g，1.34 mmol)。在15℃下，在N ₂下，將反應攪拌0.5 h。接著添加2-氧代-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(2.0 g，835.7 mmol)。在70℃下，在N ₂下，將所得溶液再攪拌2 h。將混合物冷卻至室溫。將反應混合物通過添加H ₂O (40 mL)來淬滅，用EtOAc (3×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×40 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/10~30% EtOAc)來純化以提供2-(甲氧基亞甲基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

步驟 B ： 2- 甲醯基 -7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸叔丁酯

向2-(甲氧基亞甲基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(2.01 g，7.49 mmol)在MeCN (30 mL)和H ₂O (7.5 mL)中的溶液中添加TFA (0.3 mL)。在室溫下將混合物攪拌2 h。通過使用飽和Na ₂CO ₃將所得混合物的pH值調整至9。將混合物用EtOAc (3×30 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×20 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮以提供2-甲醯基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(1.99 g，粗品)，其不經純化即用於下一步驟。

步驟 C ： 2- 乙炔基 -7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸叔丁酯

向(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(1.82 g，9.47 mmol)在MeOH (20 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(1.31 g，9.47 mmol)。在室溫下將所得溶液攪拌0.5 h。接著添加2-甲醯基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(2.01 g，7.89 mmol)。在室溫下將混合物再攪拌1.5 h。向混合物中添加H ₂O (60 mL)並用EtOAc (3×60 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×30 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/0~20% EtOAc)來純化以提供2-乙炔基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

步驟 D ： 2- 乙炔基 -7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷

向2-乙炔基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(400 mg，1.61 mmol)在DCM (5 mL)中的溶液中添加TFA (1 mL)。在30℃下將混合物攪拌2 h。將混合物減壓濃縮以提供呈黃色油狀物的粗制2-乙炔基-7-氮雜螺[3.5]壬烷(410 mg，TFA鹽)，其不經純化即用於下一步驟。

步驟 E ： 3-(2- 乙炔基 -7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) 丙酸叔丁酯

向粗制2-乙炔基-7-氮雜螺[3.5]壬烷(400 mg，TFA鹽)和3-溴丙酸叔丁酯(476 mg，2.28 mmol)在MeCN (10 mL)中的溶液中添加TEA (615 mg，6.08 mmol，847.70 μL)。在30℃下將混合物攪拌16 h。將混合物真空濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/10~40% EtOAc)來純化以提供3-(2-乙炔基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)丙酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 278.3 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((7-(3-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-3- 氧代丙基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸。

按照與實施例13中所述類似的程式製備該化合物。 ¹H-NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ 8.78 (s, 1H), 8.54 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.68 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.38-7.23 (m, 8H), 7.12 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 6.70 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 4.80 (s, 1H), 4.50-4.43 (m, 4H), 4.34-4.23 (m, 1H), 3.90-3.85 (m, 3H), 3.73-3.66 (m, 3H), 3.40-3.27 (m, 4H), 3.16 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 2.97 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 2.89-2.83 (m, 2H), 2.76-2.67 (m, 1H), 2.37-1.70 (m, 14H), 1.29-1.13 (m, 4H), 0.977 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1202.6 [M+H] ⁺。

實施例 18 ：化合物 18

步驟 A ： 3-( 甲氧基亞甲基 ) 環丁烷甲酸叔丁酯

在0℃下，向 (甲氧基甲基)三苯基氯化鏻(15.11 g，44.06 mmol)在THF (150 mL)中的溶液中添加叔丁醇鉀(5.27 g，47.00 mmol)。在0℃下，在N ₂下，將混合物攪拌30 min，接著在室溫下，在N ₂下攪拌60 min。將混合物冷卻至0℃並以在THF (3 mL)中的溶液形式添加3-氧代環丁烷甲酸叔丁酯(5 g，29.38 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌3小時，接著在70℃下再攪拌三小時。將混合物用EtOAc (50 mL)稀釋並用飽和NH ₄Cl水溶液(50 mL)洗滌。分離有機層並經Na ₂SO ₄乾燥，並且濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法(EtOAc/庚烷，0至80%)來純化以產生3-(甲氧基亞甲基)環丁烷甲酸叔丁酯。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 5.80-5.78 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.08-3.00 (m, 1H), 2.92-2.75 (m, 4H), 1.46-1.42 (s, 9H)。

步驟 B ： 3- 甲醯基環丁烷甲酸叔丁酯

在室溫下，向3-(甲氧基亞甲基)環丁烷甲酸叔丁酯(1.5 g，7.57 mmol)在DCM (60 mL)中的溶液中添加H ₂O:TFA=25:1 (15 mL)，在室溫下將所得混合物攪拌16 h。將所得混合物用DCM (3×20 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×10 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。在過濾之後，將濾液減壓濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE/EtOAc=20/1洗脫，以產生3-甲醯基環丁烷甲酸叔丁酯。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 9.69 (d, 1H), 3.10-2.98 (m, 2H), 2.49-2.36 (m, 4H), 1.44 (m, 9H)

步驟 C ： 4- 乙炔基呱啶 -1- 甲酸叔丁酯

向1-重氮基-1-二甲氧基磷醯基-丙-2-酮(11.71 g，60.95 mmol)在MeOH (100 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(12.96 g，93.78 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌1 h並添加4-甲醯基呱啶-1-甲酸叔丁酯(10 g，46.89 mmol)在THF (20 mL)中的溶液。在室溫下將反應溶液攪拌16 h。將所得混合物減壓濃縮。向混合物中添加H ₂O (200 mL)，用EA (3×100 mL)萃取。將合併的有機層用水(3×10 mL)、鹽水(3×20 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥並濃縮。將粗產物通過柱色譜法(矽膠：300-400目，PE/EtOAc 0~10/1)來純化以產生4-乙炔基呱啶-1-甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 154.2 [M+H-t-Bu] ⁺。

步驟 D ： 4- 乙炔基呱啶鹽酸鹽

在室溫下，向4-乙炔基呱啶-1-甲酸叔丁酯(2.5 g，11.95 mmol)在二噁烷-HCl (4 M，20 mL)中的溶液中，在室溫下將所得混合物攪拌3 h。將反應混合物濃縮以產生4-乙炔基呱啶鹽酸鹽(1.70 g，粗品)，並且不經進一步純化即用於下一步驟。

步驟 E ： 3-[(4- 乙炔基 -1- 呱啶基 ) 甲基 ] 環丁烷甲酸叔丁酯

在室溫下，將4-乙炔基呱啶鹽酸鹽(513.80 mg)和3-甲醯基環丁烷甲酸叔丁酯(500 mg，2.71 mmol，0.76當量)在DCE:MeOH=1:1 (4 mL)中的溶液攪拌1 h。接著添加三乙醯氧基硼氫化鈉(1.16 g，5.43 mmol)，在室溫下將混合物攪拌16 h。添加鹽水(80 mL)，用EA (3×50 mL)萃取。將合併的有機層經Na ₂SO ₄乾燥並過濾。將濾液濃縮並通過矽膠色譜法來純化，用(DCM/ MeOH= 20/1)洗脫，以產生3-[(4-乙炔基-1-呱啶基)甲基]環丁烷甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 278.3 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[2-[1-[[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基甲醯基 ] 環丁基 ] 甲基 ]-4- 呱啶基 ] 乙炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸

按照與實施例13中所述類似的程式製備該化合物。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1203.6 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ 8.79 (s, 1H), 7.84 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.68 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 7.38-7.16 (m, 13H), 6.71 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 4.57-4.42 (m, 4H), 3.88 (m, 2H), 3.72 (m, 3H), 3.55-3.60 (m, 1H), 3.11-2.96 (m, 7H), 2.38-2.30 (m, 4H), 2.16-2.09 (m, 1H), 2.02-1.97 (m, 6H), 1.92-1.84 (m, 3H), 1.36 (s, 1H), 1.30-1.20 (m, 9H), 1.18-1.14 (m, 1H), 0.94-0.91 (m, 9H)。

實施例 19 ：化合物 19

步驟 A ： 4- 乙烯基呱啶 -1- 甲酸苯甲酯

將甲基三苯基溴化鏻(21.67 g，60.66 mmol)在THF (100 mL)中的溶液冷卻至0℃並緩慢添加t-BuOK (7.25 g，64.70 mmol)，接著在25℃下攪拌1 h。添加4-甲醯基呱啶-1-甲酸苯甲酯(10.0 g，40.44 mmol)並在25℃下將混合物攪拌2 h。將混合物用NH ₄Cl (水溶液)淬滅並用EA稀釋，將混合物用EA (3×200 ml)萃取並與有機層合併，並且用鹽水洗滌，真空濃縮並將粗品通過使用PE:EA=5:1進行的矽膠柱色譜法來純化以提供4-乙烯基呱啶-1-甲酸苯甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 246.2 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 4-(2,2- 二氯 -3- 氧代環丁基 ) 呱啶 -1- 甲酸苯甲酯

向4-乙烯基呱啶-1-甲酸苯甲酯(4.5 g，18.34 mmol)在二噁烷(50 mL)中的溶液中添加POCl ₃(3.09 g，20.18 mmol)和Zn-Cu偶(Zn-Cu couple)並將混合物冷卻至0℃。逐滴添加2,2,2-三氯乙醯氯(13.34 g，73.37 mmol)並在25℃下將混合物攪拌16 h。在冰水中將混合物用NaHCO ₃(水溶液)淬滅，接著用EA (3×100 ml)萃取，與有機層合併，並且用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，真空濃縮以提供4-(2,2-二氯-3-氧代環丁基)呱啶-1-甲酸苯甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 356.2 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 4-(3- 氧代環丁基 ) 呱啶 -1- 甲酸苯甲酯

向4-(2,2-二氯-3-氧代環丁基)呱啶-1-甲酸苯甲酯(7.5 g，21.05 mmol)在甲醇(100 mL)和水(10 mL)中的溶液中添加Zn (4.10 g，63.15 mmol)、NH ₄Cl (4.50 g，84.20 mmol)，接著在25℃下將混合物攪拌16 h。將混合物過濾並將濾液真空濃縮，將粗品通過使用PE:EA=4:1進行的矽膠柱色譜法來純化以產生4-(3-氧代環丁基)呱啶-1-甲酸苯甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 288.3 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 4-(3- 氧代環丁基 ) 呱啶 -1- 甲酸叔丁酯

向4-(3-氧代環丁基)呱啶-1-甲酸苯甲酯(4.7 g，16.36 mmol)在甲醇(150 mL)中的溶液中添加Pd/C (500 mg，10% w/w)、二碳酸二叔丁酯(3.75 g，17.17 mmol，1.05當量)和TEA (4.14 g，40.89 mmol)，在25℃下，在H ₂下，將混合物攪拌16 h。將混合物過濾並將濾液真空濃縮，並且將粗品通過使用PE:EA = 8:1進行的矽膠柱色譜法來純化以提供4-(3-氧代環丁基)呱啶-1-甲酸叔丁酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 239.2 [M+H-t-Bu+MeCN] ⁺。

步驟 E ： 4-(3-( 甲氧基亞甲基 ) 環丁基 ) 呱啶 -1- 甲酸叔丁酯

將(甲氧基甲基)三苯基溴化鏻(4.59 g，11.84 mmol)在THF (20 mL)中的溶液冷卻至0℃並添加t-BuONa (1.16 g，12.63 mmol)，接著在室溫下攪拌1 h。在0℃下添加4-(3-氧代環丁基)呱啶-1-甲酸叔丁酯(2.0 g，7.89 mmol)，在25℃下將混合物攪拌16 h。將混合物用NH ₄Cl (水溶液)淬滅並用EA (3×50 mL)萃取。將有機層合併，接著用鹽水洗滌並真空濃縮，將粗品通過使用PE:EA=5:1進行的矽膠柱色譜法來純化以提供4-(3-(甲氧基亞甲基)環丁基)呱啶-1-甲酸叔丁酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 226.3 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 4-(3- 甲醯基環丁基 ) 呱啶 -1- 甲酸叔丁酯

向4-(3-(甲氧基亞甲基)環丁基)呱啶-1-甲酸叔丁酯(1.6 g，5.69 mmol)在ACN (15 mL)中的溶液中添加TFA (10%，在水中，5 mL)，在25℃下將混合物攪拌16 h。向混合物中添加NaHCO ₃(水溶液)並用EA (3×20 mL)萃取，將有機層合併，真空濃縮以提供4-(3-甲醯基環丁基)呱啶-1-甲酸叔丁酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 253.3 [M+H-56+41] ⁺。

步驟 G ： 4-(3- 乙炔基環丁基 ) 呱啶 -1- 甲酸叔丁酯

向(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(2.30 g，11.97 mmol)在甲醇(20 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(2.48 g，17.95 mmol)並在室溫下攪拌30 min，添加4-(3-甲醯基環丁基)呱啶-1-甲酸叔丁酯(1.6 g，5.98 mmol)並在25℃下將混合物攪拌5 h。將混合物真空濃縮並將混合物通過使用PE:EA=5:1進行的矽膠柱色譜法來純化以提供4-(3-乙炔基環丁基)呱啶-1-甲酸叔丁酯。

步驟 H ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((3-(1-( 叔丁氧基羰基 ) 呱啶 -4- 基 ) 環丁基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(300 mg，422.18 μmol)和4-(3-乙炔基環丁基)呱啶-1-甲酸叔丁酯(166.79 mg，633.26 μmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(59.19 mg，84.44 μmol)、CuI (32.16 mg，168.87 μmol)和DIEA (164.65 mg，1.27 mmol)，接著在25℃下將混合物攪拌16 h。將混合物用NH ₄Cl (水溶液)稀釋，將水用EA (3×20 ml)萃取，將有機層合併，並且用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮，將粗品通過使用DCM:MeOH=20:1進行的製備型TLC來純化以提供2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-((3-(1-(叔丁氧基羰基)呱啶-4-基)環丁基)乙炔基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 846.4 [M+H] ⁺。

步驟 I ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((3-( 呱啶 -4- 基 ) 環丁基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在30℃下，將2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-((3-(1-(叔丁氧基羰基)呱啶-4-基)環丁基)乙炔基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(160 mg，189.11 μmol)在FA (3 mL)中的溶液攪拌0.5 h，並且將混合物真空濃縮以提供2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-((3-(呱啶-4-基)環丁基)乙炔基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 746.4 [M+H] ⁺。

步驟 J ： 2-(4-(3-((4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 乙炔基 ) 環丁基 ) 呱啶 -1- 基 ) 乙酸

向2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-((3-(呱啶-4-基)環丁基)乙炔基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(140 mg，187.68 μmol)和乙醛酸一水合物(34.55 mg，375.36 μmol)在甲醇(5 mL)中的溶液中添加AcOH (33.78 mg，563.04 μmol)。接著在室溫下將混合物攪拌30 min並添加NaBH ₃CN (29.56 mg，469.20 μmol)，在25℃下攪拌16 h。將混合物過濾並將濾餅真空濃縮以提供2-(4-(3-((4-(3-(2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-4-(甲氧基羰基)噻唑-5-基)丙氧基)苯基)乙炔基)環丁基)呱啶-1-基)乙酸。LCMS: MS (ESI) M/Z: 804.4 [M+H] ⁺。

步驟 K ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((3-(1-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 ) 呱啶 -4- 基 ) 環丁基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-(4-(3-((4-(3-(2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-4-(甲氧基羰基)噻唑-5-基)丙氧基)苯基)乙炔基)環丁基)呱啶-1-基)乙酸(90 mg，111.94 μmol，1.0當量)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(48.20 mg，111.94 μmol)在DMF (2 mL)中的溶液中添加DIEA (43.66 mg，335.83 μmol)和HATU (51.05 mg，134.33 μmol)，接著在25℃下攪拌1 h。將混合物用EA和水稀釋並將水層用EA (3×30 mL)萃取，將有機層用鹽水洗滌並經Na ₂SO ₄乾燥，並且真空濃縮。將粗品通過使用MeOH:DCM=1:10進行的製備型TLC來純化以提供2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-((3-(1-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-氧代乙基)呱啶-4-基)環丁基)乙炔基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1216.7 [M+H] ⁺。

步驟 L ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((3-(1-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 ) 呱啶 -4- 基 ) 環丁基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

向2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-((3-(1-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-氧代乙基)呱啶-4-基)環丁基)乙炔基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(72 mg，59.18 μmol)在二噁烷(2 mL)中的溶液中添加NaOH水溶液(2 M，591.85 μL)，在25℃下將混合物攪拌2 h。將粗反應混合物過濾並經受反相製備型HPLC (製備型C18，5 μM XBridge柱，19×150 mm，Waters；在7 min時間段內50% MeCN/水至55% MeCN/水的梯度洗脫，其中兩種溶劑均含有0.1% TFA)以提供2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-((3-(1-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-氧代乙基)呱啶-4-基)環丁基)乙炔基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1202.7 [M+H] ⁺。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 12.72-13.09 (m, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.80-8.61 (m, 2H), 8.04 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.80 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.67 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.50-7.34 (m, 8H), 7.26 (q, J= 9.1 Hz, 2H), 6.88-6.83 (m, 2H), 4.83 (s, 2H), 4.59 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 4.49-4.37 (m, 3H), 4.26-4.19 (m, 1H), 4.05-3.96 (m, 4H), 3.73-3.60 (m, 4H), 3.51-3.43 (m, 2H), 3.16 (t, J= 7.4 Hz, 3H), 3.07-2.95 (m, 5H), 2.45 (s, 3H), 2.40-2.33 (m, 1H), 2.13-1.88 (m, 6H), 1.77-1.74 (m, 4H), 1.53-1.23 (m, 3H), 0.95 (s, 9H)。

實施例 20 ：化合物 20

步驟 A ： 4-(2- 氧代乙基 ) 呱啶 -1- 甲酸叔丁酯

在25℃下，在氮氣氛圍下，向4-(2-羥基乙基)呱啶-1-甲酸叔丁酯(3.0 g，13.08 mmol)在無水DCM (30 mL)中的溶液中緩慢添加DMP (6.10 g，14.39 mmol)，並且在25℃下將反應混合物攪拌8 h。將反應混合物用H ₂O (50 mL)稀釋並用NaHCO ₃(水溶液)將溶液的pH值調整至5-6。接著將它用乙酸乙酯(3×50 mL)萃取。將合併的有機層經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=3:1洗脫，以產生4-(2-氧代乙基)呱啶-1-甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 172.1 [M+H-Boc] ⁺。

步驟 B ： 4- 丙 -2- 炔基呱啶 -1- 甲酸叔丁酯

在25℃下，在氮氣氛圍下，向(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(1.81 g，9.40 mmol)在無水MeOH (20 mL)中的溶液中緩慢添加K ₂CO ₃(2.16 g，15.66 mmol)，並且在25℃下將反應混合物攪拌30 min。接著添加4-(2-氧代乙基)呱啶-1-甲酸叔丁酯(1.78 g，7.83 mmol)在無水MeOH (20 mL)中的溶液並將混合物再攪拌8 h。將反應混合物濃縮至乾燥並用H ₂O (200 mL)稀釋。接著將它用乙酸乙酯(3×200 mL)萃取。將合併的有機層經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=3:1洗脫，以產生4-丙-2-炔基呱啶-1-甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 168.1 [M+H-Boc] ⁺。

步驟 C ： 4- 丙 -2- 炔基呱啶

在25℃下，向4-丙-2-炔基呱啶-1-甲酸叔丁酯(1.484 g，3.06 mmol)在二噁烷(1 mL)中的溶液中添加HCl-二噁烷(4 M，1 mL)，在25℃下，在N ₂中，將所得混合物攪拌2 h。將反應混合物濃縮至乾燥以產生產物4-丙-2-炔基呱啶(1.047 g，粗品)，並且不經進一步純化即用於下一步驟。LC/MS: MS (ESI) M/Z 168.1 [M+H-Boc] ⁺。

步驟 D ： 3-(4- 丙 -2- 炔基 -1- 呱啶基 ) 環丁烷甲酸叔丁酯

在50℃下，在氮氣氛圍下，向3-氧代環丁烷甲酸叔丁酯(755.32 mg，4.44 mmol)在無水DCE (10 mL)中的溶液中添加4-丙-2-炔基呱啶(497 mg，4.03 mmol)，並且在50℃下將反應混合物攪拌30 min。接著添加三乙醯氧基硼氫化鈉(1.71 g，8.07 mmol)在無水DCE中的溶液並在50℃下將混合物再攪拌8 h。將反應混合物用H ₂O (10 mL)稀釋並用NaHCO ₃水溶液將溶液的pH值調整至7-8。接著將它用DCM (3×10 mL)萃取。將合併的有機層經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=3:1洗脫，以產生3-(4-丙-2-炔基-1-呱啶基)環丁烷甲酸叔丁酯。

步驟 E ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[1-(3- 叔丁氧基羰基環丁基 )-4- 呱啶基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(200 mg，281.45 μmol)和3-(4-丙-2-炔基-1-呱啶基)環丁烷甲酸叔丁酯(195.19 mg，703.63 μmol)在THF (4 mL)中的溶液中添加四(三苯基膦)鈀(32.52 mg，28.15 μmol)和CuI (10.72 mg，56.29 μmol)，在60℃下，在N2中，將所得混合物攪拌2 h。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=1:2洗脫，以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[1-(3-叔丁氧基羰基環丁基)-4-呱啶基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 430.8 [M/2+H] ⁺。

步驟 F ： 3-[4-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ] 苯基 ] 丙 -2- 炔基 ]-1- 呱啶基 ] 環丁烷甲酸

在25℃下，2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[1-(3-叔丁氧基羰基環丁基)-4-呱啶基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(110 mg，127.89 μmol)在HCOOH (9 mL)中的溶液，在室溫下，在N ₂中，將所得混合物攪拌7 h。將反應混合物濃縮至乾燥以產生產物3-[4-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-1-呱啶基]環丁烷甲酸(88.00 mg，粗品)，並且不經進一步純化即用於下一步驟。LC/MS: MS (ESI) M/Z 403.1 [M/2+H] ⁺

步驟 G ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[1-[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基甲醯基 ] 環丁基 ]-4- 呱啶基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(47.13 mg，109.45 μmol)和3-[4-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-1-呱啶基]環丁烷甲酸(88 mg，109.45 μmol)在DMF (4 mL)中的溶液中添加DIEA (42.44 mg，328.36 μmol)和HATU (61.94 mg，164.18 μmol)，在25℃下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌2 h。將粗反應混合物過濾並經受反相製備型HPLC (製備型C18，5 μM XBridge柱，19×150 mm，Waters；在10 min時間段內61.5% MeCN/水至81.5% MeCN/水的梯度洗脫，其中兩種溶劑均含有0.05% NH ₃H ₂O)以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[1-[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環丁基]-4-呱啶基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 609.1 [M/2+H] ⁺

步驟 H ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[1-[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基甲醯基 ] 環丁基 ]-4- 呱啶基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[1-[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環丁基]-4-呱啶基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(20 mg，16.44 μmol)在二噁烷(2 mL)中的溶液中添加在H ₂O (0.4 mL)中的LiOH•H ₂O (1.38 mg，32.88 μmol)，在25℃下，在N ₂中，將所得混合物攪拌2 h。將反應混合物用H ₂O (1 mL)稀釋並用HCl水溶液(1 M)將溶液的pH值調整至5-6。將反應混合物過濾並真空乾燥以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[1-[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環丁基]-4-呱啶基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1203.6 [M+H] ⁺

1H-NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ8.84 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.72 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.58 (dd, J= 7.0, 1.8 Hz, 1H), 7.44-7.27 (m, 8H), 7.21-7.17 (m, 2H), 6.79-6.74 (m, 2H), 4.71 (s, 2H), 4.61 (s, 1H), 4.55-4.46 (m, 2H), 3.94 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.76 (dd, J= 10.7, 4.1 Hz, 3H), 3.22 (q, J= 7.1 Hz, 2H), 3.02 (t, J= 5.9 Hz, 2H), 2.89-2.77 (m, 2H), 2.72-2.64 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.31-2.15 (m, 5H), 2.12-1.98 (m, 6H), 1.86-1.78 (m, 4H), 1.41-1.35 (m, 1H), 1.31-1.24 (m, 5H), 0.98 (d, J= 9.3 Hz, 9H)。

實施例 21 ：化合物 21

步驟 A ： 3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 酮鹽酸鹽

在25℃下，向9-氧代-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(2.0 g，7.48 mmol)在DCM (60.0 mL)中的溶液中添加HCl (4 M，在二噁烷中，18.70 mL)。在25℃下將混合物攪拌2 h。TLC顯示反應完成。將反應溶液減壓濃縮以提供標題3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-酮(1.50 g，粗品，HCl)，並且不經進一步純化即直接用於下一反應中。LCMS: MS (ESI) M/Z: 168.2 [M+H] ⁺。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 9.08 (s, 2H), 3.03 (d, J= 1.6Hz, 4H), 2.25 (t, J= 6.8Hz, 4H), 1.74-1.69 (m, 8H)。

在0℃下，向3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-酮鹽酸鹽(1.4 g，6.87 mmol)和NaHCO ₃(1.73 g，20.62 mmol)在THF (30 mL)中的溶液中添加CbzCl (1.41 g，8.25 mmol)。在25℃下將混合物攪拌16 h。將反應溶液過濾並用EA (30 mL)洗滌。將合併的有機層濃縮並通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=2:1洗脫，以提供9-氧代-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸苯甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 302.2 [M+H] ⁺。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 7.37-7.31 (m, 5H), 5.14 (s, 2H), 3.53-3.50 (m, 4H), 2.36-2.32(m, 4H), 1.78-1.75(m, 4H), 1.57 (s, 4H)。

步驟 C ： 9-( 甲氧基亞甲基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 甲酸苯甲酯

在-30℃下，在N ₂下，向(甲氧基甲基)三苯基氯化鏻(1.71 g，4.98 mmol)在THF (20.0 mL)中的溶液中添加KHMDS的THF溶液(1.00 M，6.64 mL)。在-30℃下將混合物攪拌0.5 h。在0.5 h之後，在-30℃下，在N ₂下，向9-氧代-3-氮雜螺 [5.5]十一烷-3-甲酸苯甲酯(1.00 g，3.32 mmol)在THF (5.0 mL)中的溶液中添加以上混合物(10 mL)。在-30℃下將混合物攪拌0.5 h並在25℃下攪拌2 h。在冷卻至0℃之後，將反應混合物用5.0 mL飽和NH ₄Cl水溶液淬滅。將所得溶液用EA (2×10 mL)萃取。將合併的有機層用水(10 ml)和鹽水(10 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗產物通過快速矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=3:1洗脫，以提供標題9-(甲氧基亞甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸苯甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 330.3 [M+H] ⁺。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 7.36-7.26(m, 5H), 5.77(s, 1H), 5.12(s, 2H), 3.53(s, 3H), 3.46(t, J= 2.0Hz, 4H), 2.18(t, J= 6.4Hz, 2H), 1.95(t, J= 6.4Hz, 2H), 1.44-1.39(m, 8H)。

步驟 D ： 9- 甲醯基 -3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 甲酸苯甲酯

在25℃下，向9-(甲氧基亞甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸苯甲酯(900.0 mg，2.73 mmol)在THF (10.0 mL)中的溶液中添加1 M HCl水溶液(1.0 M，5.46 mL)，並且在25℃下將混合物攪拌16 h。將混合物用碳酸氫鈉溶液(30 mL)稀釋並用乙酸乙酯(3×20 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並蒸發至乾燥以提供9-甲醯基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸苯甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 316.3 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 3-(( 苯甲基氧基 ) 羰基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 甲酸

在0℃下，向9-甲醯基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸苯甲酯(900 mg，2.85 mmol)和KMnO ₄(901.70 mg，5.71 mmol)在丙酮(20 mL)中的溶液中添加NaOH (114.14 mg，2.85 mmol)和H ₂O (20 mL)。在25℃下將混合物攪拌4 h。用HCl (2 M)將混合物酸化至pH約2並用乙酸乙酯(3×30 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並蒸發至乾燥以提供標題粗制3-苯甲基氧基羰基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲酸。

LCMS: MS (ESI) M/Z: 332.3 [M+H] ⁺。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 11.98(s, 1H), 7.35-7.26(m, 5H), 5.02(s, 2H), 3.29(s, 4H), 2.06(d, J= 12.8Hz, 1H), 1.61-1.21(m, 10H), 1.09(d, J= 6.4Hz, 2H)。

步驟 F ： 3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3,9- 二甲酸 3- 苯甲酯 9- 叔丁酯

在25℃下，在N ₂下，向3-苯甲基氧基羰基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲酸(900.0 mg，2.72 mmol)和DMAP (66.36 mg，543.14 μmol)在THF (20.00 mL)中的溶液中添加(Boc) ₂O (710.43 mg，3.26 mmol)。在25℃下將混合物攪拌3 h。在冷卻至0℃之後，將反應混合物用5.0 mL飽和NH ₄Cl水溶液淬滅。將所得溶液用EA (2×10 mL)萃取。將合併的有機層用水(10 ml)和鹽水(10 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗產物通過快速矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=3:1洗脫，以提供標題3-氮雜螺[5.5]十一烷-3,9-二甲酸3-苯甲酯9-叔丁酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 388.3 [M+H] ⁺。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 7.39-7.31 (m, 5H), 5.05 (s, 2H), 3.37-3.32 (m, 4H), 2.14 (d, J= 3.2 Hz, 1H), 1.63-1.61 (m, 4H), 1.42-1.40 (m, 13H), 1.27-1.24 (m, 2H), 1.22-1.12 (m, 2H)。

步驟 G ： 3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3,9- 二甲酸 3- 苯甲酯 9- 叔丁酯

在25℃下，向3-氮雜螺[5.5]十一烷-3,9-二甲酸3-苯甲酯9-叔丁酯(530 mg，1.37 mmol)在MeOH (20 mL)中的攪拌溶液中添加Pd/C (166.11 mg，10% w/w)。在室溫下，在H ₂下，將反應攪拌16 h。在完成之後，將反應混合物過濾並減壓濃縮。將殘餘物通過快速矽膠色譜法來純化，用DCM:MeOH=0-5%洗脫，以提供標題3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲酸叔丁酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 254.3 [M+H] ⁺。

步驟 H ： 3-( 丙 -2- 炔 -1- 基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 甲酸叔丁酯

在0℃下，向3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲酸叔丁酯(100.0 mg，394.67 μmol)在ACN (2.0 mL)中的溶液中添加DIEA (56.00 mg，434.13 μmol)。在0℃下攪拌10 min之後，在0℃下持續20 min將3-溴丙-1-炔(46.95 mg，394.67 μmol)逐滴添加至以上混合物中。在25℃下將反應攪拌1 h。在完成之後，將反應混合物通過添加NH ₄Cl的溶液(2.0 mL)來淬滅並用DCM (2×5.0 mL)萃取。將有機層合併，乾燥並在25℃下真空濃縮以提供標題3-丙-2-炔基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲酸叔丁酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 292.3 [M+H] ⁺。

步驟 I ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(9-( 叔丁氧基羰基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(243.84 mg，343.14 μmol)在無水DMF (2.00 mL)中的溶液中添加Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(24.33 mg，34.31 μmol)、CuI (13.07 mg，68.63 μmol)、TEA (104.17 mg，1.03 mmol)和3-丙-2-炔基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲酸叔丁酯(100.0 mg，343.14 μmol)。在25℃下，在N ₂下，將反應混合物攪拌16 h。在完成之後，向反應混合物中倒入H ₂O (50.0 mL)，並且過濾。將合併的有機固體用水(5.0 mL)洗滌並減壓濃縮。將殘餘物通過製備型HPLC來純化以提供標題產物2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-(9-叔丁氧基羰基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 874.7 [M+H] ⁺。

步驟 J ： 3-(3-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 甲酸

在30℃下，在N ₂下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-(9-叔丁氧基羰基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(40 mg，45.76 μmol)在FA (0.5 mL)中的溶液攪拌2 h。在完成之後，在25℃下將反應混合物真空濃縮以提供3-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲酸。LCMS: MS (ESI) M/Z: 818.5 [M+H] ⁺

步驟 K ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在室溫下，將3-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲酸(38.00 mg，46.45 μmol)、HATU (22.95 mg，60.39 μmol)、DIEA (17.98 mg，139.36 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺 (22.00 mg，51.10 μmol)在無水DMF (4.0 mL)中的溶液攪拌16 h。在完成之後，將混合物傾倒至水(20.0 mL)中，並且用EA (3×5.0 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，並且濃縮。將粗產物通過製備型HPLC來純化以提供產物2-[8-(5,6-二氫-1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1230.7 [M+H] ⁺

步驟 L ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，向2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-(3-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)丙-1-炔-1-基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(39.93 mg，32.45 μmol)在二噁烷:H ₂O (v:v=1:1，4.0 mL)中的溶液中添加NaOH (1.0 mL，2 M)。在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將反應混合物減壓濃縮以產生殘餘物。將殘餘物用H ₂O (3 mL)稀釋並用HCl水溶液(1 M)將溶液的pH值調整至6，並且用DCM萃取。將有機層合併，乾燥並在25℃下真空濃縮。將粗品通過製備型HPLC和凍幹來純化以提供標題2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1216.7 [M+H] ⁺。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.98 (s, 1H), 8.03 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.79 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.65 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.44 - 7.38 (m, 10H), 6.94 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 4.82 (s, 2H), 4.51 (s, 1H), 4.40-4.29 (m, 6H), 3.71-3.62 (m, 4H), 3.52 (s, 4H), 3.16-3.02 (m, 5H), 2.43 (s, 3H), 2.33 (s, 1H), 2.01-1.99 (m, 6H), 1.52-1.31 (m, 7H), 1.22 (s, 3H), 7.25 (dd, J= 14.6, 8.8 Hz, 2H), 0.91 (d, J= 8.8 Hz, 9H)。

實施例 22 ：化合物 22

步驟 A ： 2-(2- 乙氧基 -2- 氧代乙叉基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸叔丁酯

在0℃下，向2-(二乙氧基磷醯基)乙酸乙酯(14.01 g，62.7 mmol)在DMF (150 mL)中的溶液中分批添加NaH (2.50 g，62.7 mmol，60%純度)。在相同溫度下將混合物攪拌20 min。接著在N ₂下逐滴添加在THF (30 mL)中的2-氧代-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(10.0 g，41.8 mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌2 h。將反應混合物通過添加H ₂O (600 mL)來淬滅，用EtOAc (3×200 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×100 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/0~40% EtOAc)來純化以提供2-(2-乙氧基-2-氧代乙叉基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 295.3 [M-t-Bu+MeCN+H] ⁺。

步驟 B ： 2-(2- 乙氧基 -2- 氧代乙基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸叔丁酯

在N2下，向2-(2-乙氧基-2-氧代乙叉基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(9.02 g，29.3 mmol)在MeOH (90 mL)中的溶液中添加Pd/C (2.0 g，50%純度)。將懸浮液在真空下脫氣並用H ₂吹掃三次。在室溫下，在H ₂下，將所得混合物攪拌1 h。將反應混合物經矽藻土墊過濾並將濾餅用MeOH (3×100 mL)洗滌。將合併的濾液濃縮以提供2-(2-乙氧基-2-氧代乙叉基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

步驟 C ： 2-(2-( 甲氧基 ( 甲基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸叔丁酯

在0℃下，向2-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(2.01 g，6.41 mmol)和N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(1.25 g，12.8 mmol)在THF (35 mL)中的溶液中分批添加i-PrMgCl (2 M，16 mL，32.0 mmol)。在室溫下，在N ₂下，將反應混合物攪拌2 h。將反應混合物通過添加NH ₄Cl (60 mL)來淬滅，用EtOAc (3×80 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×30 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮以提供2-(2-(甲氧基(甲基)氨基)-2-氧代乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

步驟 D ： 2-(2- 氧代乙基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸叔丁酯

在0℃下，向2-(2-(甲氧基(甲基)氨基)-2-氧代乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(1.71 g，5.24 mmol)在DCM (20 mL)中的溶液中分批添加DABAI-H的甲苯溶液(1 M，6.2 mL，6.20 mmol)，在室溫下，在N ₂下，將反應混合物攪拌1 h。將反應混合物通過添加H ₂O (0.3 mL)、15% NaOH的H ₂O溶液(0.3 mL)和H ₂O (1 mL)來淬滅並攪拌10 min。將混合物用EtOAc (3×60 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×30 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/10~60% EtOAc)來純化以提供2-(2-氧代乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

步驟 E ： 2-( 丙 -2- 炔 -1- 基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸叔丁酯

向貝斯特曼-大平試劑(Bestmann-Ohira reagent) (1.0 g，5.41 mmol)在MeOH (20 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(1.24 g，9.02 mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌20 min。添加在MeOH (2 mL)中的2-(2-氧代乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(1.21 g，4.51 mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌1 h。將反應混合物通過添加H ₂O (60 mL)來淬滅，用DCM (3×80 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×30 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/0~30% EtOAc)來純化以提供2-(丙-2-炔-1-基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(7-( 叔丁氧基羰基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(160 mg，225.16 μmol)和2-丙-2-炔基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(89 mg，337.74 μmol)在DMF (4 mL)中的溶液中添加Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(15 mg，21.10 μmol)、DIEA (116 mg，900.64 μmol，4.0當量)和CuI (22 mg，112.58 μmol)。在100℃下，在N ₂下，將所得混合物攪拌5 h。向混合物中添加H ₂O (30 mL)，用EtOAc (3×40 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×30 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/10~60% EtOAc)來純化以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-(7-叔丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 846.3 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 5-(3-(4-(3-(7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 )-2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-(7-叔丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(140 mg，165.47 μmol)在DCM (5 mL)中的溶液中添加FA (72 mg，827.36 μmol)。在室溫下將所得混合物攪拌16 h。將溶液真空濃縮以產生5-[3-[4-[3-(7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)丙-1-炔基]苯氧基]丙基]-2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]噻唑-4-甲酸甲酯，其不經純化即直接用於下一步驟。

步驟 H ： 2-(2-(3-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) 乙酸

向5-[3-[4-[3-(7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)丙-1-炔基]苯氧基]丙基]-2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]噻唑-4-甲酸甲酯(140 mg，176.77 μmol，FA鹽)和乙醛酸(26 mg，353.55 μmol)在DCE (5 mL)中的溶液中添加NaBH ₃CN (375 mg，1.77 mmol)和AcOH (32 mg，530.32 μmol)。在室溫下將所得混合物攪拌16 h。去除固體並將溶液濃縮。將殘餘物通過反相製備型HPLC (YMC-Actus Triart C18，150*20 mm，5 um；0.05% NH ₃H ₂O-10 mmol/L NH ₄HCO ₃-ACN，48-68%，流速：20 mL/min)來純化以產生2-[2-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基]乙酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 804.4 [M+H] ⁺。

步驟 I ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[2-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-2- 氧代 - 乙基 ]-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[2-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基]乙酸(80 mg，99.50 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(56 mg，119.41 μmol)在DMF (3 mL)中的溶液中添加HATU (56 mg，149.26 μmol)和DIEA (39 mg，298.51 μmol)。在室溫下將所得混合物攪拌2 h。向混合物中添加H ₂O (20 mL)，用EtOAc (3×30 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×10 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並減壓濃縮。將殘餘物通過製備型TLC (DCM/MeOH=10:1)來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[7-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 608.9 [M/2+H] ⁺。

步驟 J ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(7-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[7-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(70 mg，57.54 μmol)在MeOH (1 mL)、THF (1 mL)和H ₂O (1 mL)中的溶液中添加LiOH.H ₂O (12 mg，287.70 μmol)。在室溫下將所得混合物攪拌4 h。通過使用0.5 M HCl將所得混合物的pH值調整至5並用DCM (3×25 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×10 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並減壓濃縮。將殘餘物通過製備型HPLC (YMC-Actus Triart C18，150*20 mm，5 um；0.05% NH ₃H ₂O-10 mmol/L NH ₄HCO ₃-ACN，56%-76%；流速：20 mL/min)來純化。將洗脫物減壓濃縮並冷凍乾燥以產生2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-(3-(7-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)丙-1-炔-1-基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 13.91 (s, 1H), 9.81 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.61 (t, J= 6.4 Hz, 1H), 8.04 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.80 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.68 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.50 - 7.35 (m, 9H), 7.28 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 6.87 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 5.19 (s, 1H), 4.84 (s, 2H), 4.58 - 4.54 (m, 1H), 4.47 - 4.38 (m, 3H), 4.27 - 4.22 (m, 1H), 3.98 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.74 - 3.69 (m, 3H), 3.52 - 3.48 (m, 1H), 3.17 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 3.04 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 2.48 - 2.45 (m, 5H), 2.09 - 1.48 (m, 10H), 1.31 - 1.18 (m, 9H), 0.94 (s, 9H); LC/MS: MS (ESI) M/Z 1202.7 [M+H] ⁺。

實施例 23 ：化合物 23

步驟 A ： 7- 氮雜螺 [3.5] 壬 -2- 酮鹽酸鹽

在0℃下，向2-氧代-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(5.01 g，20.89 mmol)在DCM (20 mL)中的溶液中逐滴添加HCl/二噁烷(10.5 mL，417.87 mmol，4.0 M)。在室溫下將反應混合物攪拌2 h。將溶液真空濃縮以產生粗制7-氮雜螺[3.5]壬-2-酮鹽酸鹽(3.01 g，粗品，HCl鹽)，其不經純化即直接用於下一步驟。

步驟 B ： 2- 氧代 -7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸苯甲酯

在0℃下，向7-氮雜螺[3.5]壬-2-酮鹽酸鹽(1.02 g，5.71 mmol)在THF (7 mL)和飽和NaHCO ₃(5 mL)中的溶液中逐滴添加Cbz-Cl (1.74 g，10.25 mmol)。接著在25℃下將所得混合物攪拌3 h。添加H ₂O (20 mL)並將混合物用EA (3×40 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×20 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並減壓濃縮。將粗產物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/5~30% EtOAc)來純化以提供2-氧代-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸苯甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 274.3 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 2-(2- 叔丁氧基 -2- 氧代 - 乙叉基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸苯甲酯

在0℃下，向2-氧代-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸苯甲酯(700 mg，2.56 mmol)和2-二乙氧基磷醯基乙酸叔丁酯(969 mg，3.84 mmol)在THF (10 mL)中的溶液中添加NaH (93 mg，3.84 mmol，60%純度)。在室溫下將所得混合物攪拌2 h。將反應混合物通過添加H ₂O (20 mL)來淬滅，用EtOAc (3×40 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3×20 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/10~30% EtOAc)來純化以提供2-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙叉基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸苯甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 394.4 [M+Na] ⁺。

步驟 D ： 2-(7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 ) 乙酸叔丁酯

在N ₂下，向2-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙叉基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸苯甲酯(500 mg，1.35 mmol)在MeOH (10 mL)中的溶液中添加Pd/C (500 mg，50%純度)。將懸浮液在真空下脫氣並用H ₂吹掃數次。在室溫下，在H ₂氣球下，將所得混合物攪拌2 h。將懸浮液經矽藻土過濾並將濾餅用MeOH (3×20 mL)洗滌。將合併的濾液濃縮以產生2-(7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙酸叔丁酯。

步驟 E ： 2-(7-( 丙 -2- 炔 -1- 基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 ) 乙酸叔丁酯

在0℃下，向2-(7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙酸叔丁酯(250 mg，1.04 mmol)和3-溴丙-1-炔(149 mg，1.25 mmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(173 mg，1.25 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌0.5 h。向混合物中添加H ₂O (20 mL)，用EtOAc (3×40 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×20 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/10~50% EtOAc)來純化以提供2-(7-丙-2-炔基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 278.2 [M+H-Boc] ⁺。

步驟 F ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[2-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-2- 氧代 - 乙基 ]-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸。

按照與實施例1中所述類似的程式製備該化合物。 ¹H-NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ 8.82 (s, 1H), 7.82 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.70 - 7.67 (m, 1H), 7.55 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.37 - 7.23 (m, 10H), 6.78 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 4.82 - 4.77 (m, 3H), 4.54 - 4.52 (m, 1H), 4.46 - 4.39 (m, 3H), 4.26 - 4.23 (m, 1H), 4.10 (s, 2H), 3.91 (t, J= 5.4 Hz, 2H), 3.79 - 3.67 (m, 3H), 3.52 - 3.45 (m, 2H), 3.16 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 2.99 - 2.90 (m, 4H), 2.58 - 2.54 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.31 - 2.27 (m, 2H), 2.14 - 1.88 (m, 7H), 1.70 - 1.52 (m, 5H), 0.92 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1224.6 [M+Na] ⁺。

實施例 24 ：化合物 24

步驟 A ： 3- 乙炔基氮雜環丁烷 -1- 甲酸叔丁酯

向3-甲醯基氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯(5.0 g，26.99 mmol)在MeOH (125 mL)中的溶液中添加1-重氮基-1-二甲氧基磷醯基-丙-2-酮(7.8 g，40.49 mmol)和K ₂CO ₃(5.6 g，40.49 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌16 h。接著將反應混合物傾倒至H ₂O (100 mL)中並用EA (3×80 mL)萃取，用鹽水(2×50 mL)洗滌。將有機層合併，並且濃縮。將獲得的殘餘物通過TLC (1/10 PE/EA)來純化以提供3-乙炔基氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 181.1 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 3- 乙炔基氮雜環丁烷

在室溫下，將3-乙炔基氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯(3.7 g，20.44 mmol)在FA (30 mL)中的溶液攪拌3 h。將反應混合物真空濃縮以提供3-乙炔基氮雜環丁烷(1.5 g，90.90%)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 81.1 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 3-( 甲氧基亞甲基 ) 環丁烷甲酸叔丁酯

在0℃下，向甲氧基甲基(三苯基)-磷烷(9.5 g，30.85 mmol)在THF (60 mL)中的溶液中添加t-BuOK(3.7 g，32.90 mmol)。在0℃下將所得混合物攪拌0.5 h。接著在0℃下，在氮氣氛圍下添加3-氧代環丁烷甲酸叔丁酯(3.5 g，20.56 mmol)在無水THF (10 mL)中的溶液。在0℃下將反應混合物攪拌10 min。在70℃下將反應混合物攪拌3 h。在冷卻至室溫之後，將反應混合物用(50 mL)飽和NH ₄Cl水溶液淬滅。將所得混合物用EA (3×50 mL)萃取。將有機層合併，用鹽水(2×35 mL)洗滌。將獲得的殘餘物通過TLC (1:20 PE/EA)來純化以提供3-(甲氧基亞甲基)環丁烷甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 198.1 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 3- 甲醯基環丁烷甲酸叔丁酯

在室溫下，向3-(甲氧基亞甲基)環丁烷甲酸叔丁酯(2.2 g，11.10 mmol)在DCM (20 mL)中的溶液中添加TFA:H ₂O=1:20 (25 mL)。在室溫下將所得混合物攪拌2 h。將所得混合物用DCM (3×50 mL)萃取。將有機層合併，用鹽水(2×35 mL)洗滌。將獲得的殘餘物通過TLC (1:30 PE/EA)來純化以提供3-甲醯基環丁烷甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 184.1 [M+H] ⁺

步驟 E ： 3-((3- 乙炔基氮雜環丁烷 -1- 基 ) 甲基 ) 環丁烷甲酸叔丁酯

向3-甲醯基環丁烷甲酸叔丁酯(1.1 g，6.61 mmol)在DCM/MeOH=1/1 (20 mL)中的溶液中添加NaBH ₃CN (1.55 g，24.66 mmol)、3-乙炔基氮雜環丁烷(500 mg，6.16 mmol)和AcOH (0.1 mL)。在25℃下將所得混合物攪拌16 h。將反應用H ₂O (10 mL)淬滅。將所得混合物用DCM (3×30 mL)萃取。將有機層合併，用鹽水(4×15 mL)洗滌。將獲得的殘餘物通過TLC (1:50 DCM/MeOH)來純化以提供3-((3-乙炔基氮雜環丁烷-1-基)甲基)環丁烷甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 249.2 [M+H] ⁺

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((1-((3-( 叔丁氧基羰基 ) 環丁基 ) 甲基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向3-((3-乙炔基氮雜環丁烷-1-基)甲基)環丁烷甲酸叔丁酯(200 mg，0.80 mmol)在DMF (6 mL)中的溶液中添加2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(570 mg，0.80 mmol)和Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(56 mg，0.08 mmol，0.1當量)、CuI (31 mg，0.16 mmol)和DIEA(517 mg，4.00mmol)。在60℃下將所得混合物攪拌4 h。將反應用H ₂O (10 mL)淬滅。將所得混合物用EA (3×20 mL)萃取。將獲得的殘餘物通過TLC (1:50 DCM/MeOH)來純化以提供2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-((1-((3-(叔丁氧基羰基)環丁基)甲基)氮雜環丁烷-3-基)乙炔基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 847.3 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 3-((3-((4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 乙炔基 ) 氮雜環丁烷 -1- 基 ) 甲基 ) 環丁烷甲酸

在室溫下，將2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-((1-((3-(叔丁氧基羰基)環丁基)甲基)氮雜環丁烷-3-基)乙炔基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(200 mg，0.24 mmol)在FA (10 mL)中的溶液攪拌10 h。將反應混合物真空濃縮以提供3-((3-((4-(3-(2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-4-(甲氧基羰基)噻唑-5-基)丙氧基)苯基)乙炔基)氮雜環丁烷-1-基)甲基)環丁烷甲酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 791.8 [M+H] ⁺。

步驟 H ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((1-((3-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ) 環丁基 ) 甲基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向3-((3-((4-(3-(2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-4-(甲氧基羰基)噻唑-5-基)丙氧基)苯基)乙炔基)氮雜環丁烷-1-基)甲基)環丁烷甲酸(0.18 g，0.22 mmol)在DMF (3 mL)中的溶液中添加(2S,4R)-1-((S)-2-氨基-3,3-二甲基丁醯基)-4-羥基-N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)吡咯烷-2-甲醯胺(0.11 g，0.23 mmol)、HATU (0.19 g，0.44 mmol)和DIEA (0.17 g，1.10 mmol)。在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將反應用H ₂O (5 mL)淬滅。將所得混合物用EA (3×15 mL)萃取。將獲得的殘餘物通過TLC (1:10 DCM/MeOH)來純化以提供2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-((1-((3-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲醯基)環丁基)甲基)氮雜環丁烷-3-基)乙炔基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1187.4 [M+H] ⁺。

步驟 I ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((1-((3-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ) 環丁基 ) 甲基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

向2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-((1-((3-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲醯基)環丁基)甲基)氮雜環丁烷-3-基)乙炔基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸酯(0.27 g，0.23 mmol)在THF (3 mL)和MeOH (3 mL)中的溶液中添加LiOH.H ₂O (98.9 mg，2.30 mmol)和H ₂O (3 mL)。在25℃下將所得混合物攪拌4 h。將反應用H ₂O (5 mL)淬滅。將所得混合物用EtOAc (3×15 mL)萃取。將有機層合併，用鹽水(4×15 mL)洗滌。將獲得的殘餘物通過製備型HPLC，採用以下條件來純化：柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150 mm，5 μm；流動相A：10 mmol/L NH ₄HCO ₃+0.1%NH ₃.H ₂O的水溶液，流動相B：CH ₃CN (在11 min內15%至45%，在0.1 min內45%至100%，在2 min內100%至100%，在0.1 min內100%至30%，在1 min內30%至30%)；檢測器，UV 254 nm，以提供2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-((1-((3-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲醯基)環丁基)甲基)氮雜環丁烷-3-基)乙炔基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸。1H-NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ 8.89 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.89 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.75 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 7.45-7.37 (m, 7H), 7.34-7.25 (m, 3H), 6.83-6.77 (m, 2H), 5.00-4.88 (m, 3H), 4.64-4.09 (m, 9H), 3.99-3.76 (m, 7H), 3.24 (t, J= 7.4 Hz, 3H), 3.18-3.05 (m, 3H), 2.52-2.43 (m, 4H), 2.40-2.17 (m, 3H), 2.13-1.94 (m, 5H), 0.99 (s, 9H)。

實施例 25 ：化合物 25

步驟 A ： 3-((3-( 甲氧基羰基 ) 氮雜環丁烷 -1- 基 ) 甲基 ) 氮雜環丁烷 -1- 甲酸叔丁酯

向3-甲醯基氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯(6.11 g，32.98 mmol)、氮雜環丁烷-3-甲酸甲酯(5.01 g，32.98 mmol)在THF (100 mL)中的溶液中添加NaBH(OAc) ₃(17.48 g，82.46 mmol)和HOAc (5 mL)。在30℃下將混合物攪拌3 h。將反應混合物通過添加H ₂O (40 mL)來淬滅，用EtOAc (3×80 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×30 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/10~40% EtOAc)來純化以產生3-[(3-甲氧基羰基氮雜環丁烷-1-基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯。

步驟 B ： 3-((3-( 甲氧基羰基 ) 氮雜環丁烷 -1- 基 ) 甲基 ) 氮雜環丁烷 -1- 甲酸叔丁酯

在-78℃下，在N ₂下，向3-[(3-甲氧基羰基氮雜環丁烷-1-基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.00 g，7.03 mmol)在DCM (40 mL)中的溶液中添加DIBAL-H (1 M，14.07 mL)。在-78℃下將混合物攪拌1 h。將反應混合物通過添加硫酸鈉十水合物(約8 g)來淬滅並在-78℃下攪拌30 min。將反應混合物經矽藻土墊過濾並將濾餅用DCM (3×80 mL)洗滌。將合併的濾液濃縮以提供3-[(3-甲醯基氮雜環丁烷-1-基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯。

步驟 C ： 3-((3- 乙炔基氮雜環丁烷 -1- 基 ) 甲基 ) 氮雜環丁烷 -1- 甲酸叔丁酯

向(1-重氮基-2-氧代-丙基)-膦酸二甲酯(1.18 g，6.13 mmol)在MeOH (8 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(848 mg，6.13 mmol)。在30℃下將混合物攪拌0.5 h。接著添加3-[(3-甲醯基氮雜環丁烷-1-基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.31 g，5.12 mmol)。在30℃下將混合物攪拌15.5 h。將反應混合物通過添加H ₂O (60 mL)來淬滅，用EtOAc (2×80 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×30 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/0~50% EtOAc)來純化以提供3-[(3-乙炔基氮雜環丁烷-1-基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯。

步驟 D ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[2-[1-[[1-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-2- 氧代 - 乙基 ] 氮雜環丁烷 -3- 基 ] 甲基 ] 氮雜環丁烷 -3- 基 ] 乙炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸。

按照與實施例1中所述類似的程式製備該化合物。 ¹H-NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ 8.84 (s, 1H), 7.89 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.74 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.60 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.47-7.24 (m, 10H), 6.84-6.77 (m, 2H), 4.86-4.86 (1H), 4.59-4.48 (m, 3H), 4.39-4.24 (m, 5H), 4.12-3.94 (m, 7H), 3.86-3.75 (m, 4H), 3.62-3.47 (m, 2H), 3.22 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 3.16-3.11 (m, 1H), 3.08-2.93 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.38-1.97 (m, 4H), 1.44-1.18 (m, 4H), 1.02 (s, 9H)。LC/MS: 1189.60 [M+H] ⁺。

實施例 26 ：化合物 26

步驟 A ： 2-(3-( 苯甲基氧基 ) 亞環丁基 ) 乙酸叔丁酯

在0℃下，向2-(二乙氧基磷醯基)乙酸叔丁酯(5.00 g，34.05 mmol)在THF (60 mL)中的溶液中分批添加NaH (1.36 g，34.05 mmol，60%純度)。在相同溫度下將混合物攪拌20 min。接著逐滴添加在THF (20 mL)中的3-(苯甲基氧基)環丁酮(5.01 g，28.38 mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌2 h。將反應混合物通過添加H ₂O (40 mL)來淬滅，用EtOAc (3×60 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×40 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/0~20% EtOAc)來純化以提供2-(3-(苯甲基氧基)亞環丁基)乙酸叔丁酯。

步驟 B ： 2-(3- 羥基環丁基 ) 乙酸叔丁酯

在N ₂下，向2-(3-苯甲基氧基亞環丁基)乙酸叔丁酯(5.0 g，18.22 mmol)在MeOH (70 mL)中的溶液中添加Pd/C (500 mg，50%純度)。將懸浮液在真空下脫氣並用H ₂吹掃數次。在室溫下，在H ₂氣球下，將混合物攪拌16 h。將懸浮液經矽藻土過濾並將濾餅用MeOH (3×40 mL)洗滌。將合併的濾液濃縮以產生2-(3-羥基環丁基)乙酸叔丁酯。

步驟 C ： 2-(3- 氧代環丁基 ) 乙酸叔丁酯

向2-(3-羥基環丁基)乙酸叔丁酯(3.02 g，16.14 mmol)在DCM (40 mL)中的溶液中添加DMP (8.22 g，19.36 mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌2 h。向混合物中添加Na ₂S ₂O ₄水溶液(40 mL)、NaHCO ₃(50 mL)，用DCM (2×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×40 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/0~30% EtOAc)來純化以提供2-(3-氧代環丁基)乙酸叔丁酯。

步驟 D ： 2-(3-(3- 乙炔基氮雜環丁烷 -1- 基 ) 環丁基 ) 乙酸叔丁酯

向2-(3-氧代環丁基)乙酸叔丁酯(150 mg，814.19 μmol)和3-乙炔基氮雜環丁烷(125 mg，977.03 μmol)在DCM (5 mL)和甲醇(5 mL)中的溶液中添加AcOH (147 mg，2.44 mmol)和NaBH ₃CN (101 mg，1.63 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌3 h。向混合物中添加NaHCO ₃水溶液(20 mL)，用EtOAc (2×40 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×20 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，洗脫劑：石油醚/10~70% EtOAc)來純化以提供2-(3-(3-乙炔基氮雜環丁烷-1-基)環丁基)乙酸叔丁酯。

步驟 E ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((1-(3-(2-( 叔丁氧基 )-2- 氧代乙基 ) 環丁基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-碘苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(160 mg，225.16 μmol)和2-[3-(3-乙炔基氮雜環丁烷-1-基)環丁基]乙酸叔丁酯(141 mg，562.90 μmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(92 mg，112.58 μmol)和CuI (21 mg，112.58 μmol)和DIEA (116 mg，900.64 μmol)。在60℃下，在N ₂下，將所得混合物攪拌3 h。向混合物中添加H ₂O (20 mL)並用EtOAc (3×40 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3×20 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過製備型TLC (DCM/MeOH=10/1)來純化以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[1-[3-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)環丁基]氮雜環丁烷-3-基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 832.3 [M+H] ⁺

步驟 F ： 2-(3-(3-((4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 乙炔基 ) 氮雜環丁烷 -1- 基 ) 環丁基 ) 乙酸

在室溫下，將2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-((1-(3-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)環丁基)氮雜環丁烷-3-基)乙炔基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(150 mg，180.28 μmol)在FA (3 mL)中的溶液攪拌16 h。將溶液真空濃縮以產生2-[3-[3-[2-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]乙炔基]氮雜環丁烷-1-基]環丁基]乙酸(120 mg，粗品，FA鹽)，其不經純化即直接用於下一步驟。LC/MS: MS (ESI) M/Z 388.8 [M/2+H] ⁺

步驟 G ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((1-(3-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 ) 環丁基 ) 氮雜環丁烷 -3- 基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺 (85 mg，182.49 μmol，HCl鹽)和2-[3-[3-[2-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]乙炔基]氮雜環丁烷-1-基]環丁基]乙酸(100 mg，121.66 μmol)在DMF (2 mL)中的溶液中添加DIEA (63 mg，486.64 μmol)和HATU (60 mg，158.16 μmol)。在室溫下將所得混合物攪拌2 h。向混合物中添加H ₂O (20 mL)並用EtOAc (3×40 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(3×20 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過製備型TLC (DCM/MeOH=10/1)來純化以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[1-[3-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]環丁基]氮雜環丁烷-3-基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 595.0 [M/2+H] ⁺

實施例 27 ：化合物 27

步驟 A ： 1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 甲酸乙酯

在110℃下，將4-氧代環己烷甲酸乙酯(800 g，4.70 mol)、TosOH(81 g，0.47 mol)和乙二醇(350.08 g，5.64 mol)在甲苯(5500 mL)中的溶液回流16 h，並且通過迪安-斯達克分水器(Dean-Stark trap)來將水去除。將混合物冷卻至室溫，用飽和NaHCO ₃水溶液洗滌，將有機層經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮。將粗制油狀物通過色譜柱，使用PE/EA=30/1來純化以獲得1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 215.2 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8,8- 二甲酸二乙酯

在-78℃下，在氮氣氛圍下，向HTMP (257.44 g，1.82 mol)在無水THF (1500 mL)中的溶液中緩慢逐滴添加n-BuLi (2.5 M，729.03 mL)，並且在-78℃下將反應混合物攪拌30 min。接著在-78℃下，在氮氣氛圍下，在1.5 h內緩慢逐滴添加1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯(355 g，1.66 mol)在無水THF (1000 mL)中的溶液，然後在-78℃下，在氮氣氛圍下，緩慢逐滴添加氯甲酸乙酯(269.72 g，2.49 mol)在無水THF (500 mL)中的溶液，並且將混合物再攪拌1 h。將混合物用飽和NH ₄Cl水溶液淬滅，用EA (3×1000 mL)萃取，將有機層經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮，將粗制油狀物通過色譜柱，使用PE/EA=50/1來純化以獲得1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8,8-二甲酸二乙酯。

步驟 C ： 1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8,8- 二基二甲醇

在0℃下，在氮氣氛圍下，持續2 h向LiAlH ₄(99.42 g，2.62 mol)在無水THF (1500 mL)中的溶液中緩慢添加1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8,8-二甲酸二乙酯(250 g，873.15 mmol)在無水THF (500 mL)中的溶液，並且在0-10℃下將反應混合物再攪拌5 h。在0-10℃下，將混合物用H ₂O (100 mL)、15% NaOH水溶液(100 mL)和H ₂O (300 mL)淬滅，接著添加Na ₂SO ₄並在10℃下攪拌15 min，將固體過濾，將濾液濃縮，[8-(羥基甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基]甲醇。

步驟 D ： 2-[(2,4- 二甲氧基苯基 ) 甲基 ]-8,11- 二氧雜 -2- 氮雜二螺 [3.2.4 ⁷.2 ⁴] 十三烷

在-40~-30℃下，向[8-(羥基甲基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基]甲醇(60 g，296.67 mmol)和DIEA (115.03 g，890.00 mmol)在無水CH ₃CN (1000 mL)中的懸浮液中逐滴添加Tf ₂O (167.40 g，593.33 mmol，2.0當量)。在-40~-30℃下將反應混合物攪拌1 h。在-40~-30℃下，向所得棕色溶液中一次性添加DIEA (115.03 g，890.00 mmol)，並且在5 min內逐滴添加(3,4-二甲氧基苯基)甲胺(49.60 g，296.67 mmol)。將含有反應混合物的燒瓶轉移至油浴中，並且在75~80℃下攪拌12 h。將反應混合物用H ₂O (600 mL)稀釋並用EA (2×600 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(2×600 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮至乾燥。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，MeOH/DCM=0~10%)來純化以產生2-[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]-8,11-二氧雜-2-氮雜二螺[3.2.4 ⁷.2 ⁴]十三烷。LC/MS: MS (ESI) M/Z 334.3 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 8,11- 二氧雜 -2- 氮雜二螺 [3.2.4 ⁷.2 ⁴] 十三烷 -2- 甲酸叔丁酯

在N ₂下，向2-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-8,11-二氧雜-2-氮雜二螺[3.2.4 ⁷.2 ⁴]十三烷(3 g，9.00 mmol)和叔丁氧基羰基叔丁基碳酸酯(3.93 g，18.00 mmol)在MeOH (60 mL)中的溶液中添加TEA (2.73 g，26.99 mmol)、Pd/C (600.00 mg，10% w/w)。將懸浮液在真空下脫氣並用H ₂吹掃數次。在60℃下，在H ₂下，將混合物攪拌16 h。將懸浮液經矽藻土過濾並將濾餅用MeOH洗滌。將合併的濾液濃縮，將粗制油狀物通過色譜柱，使用PE/EA=4/1來純化以產生8,11-二氧雜-2-氮雜二螺[3.2.4 ⁷.2 ⁴]十三烷-2-甲酸叔丁酯。

步驟 F ： 7- 氧代 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸叔丁酯

向8,11-二氧雜-2-氮雜二螺[3.2.4 ⁷.2 ⁴]十三烷-2-甲酸叔丁酯(2.54 g，8.96 mmol)在丙酮(50 mL)和H ₂O (5 mL)中的溶液中添加TsOH.H ₂O (341.01 mg，1.79 mmol)，在45℃下將所得混合物攪拌16 h。將混合物冷卻至室溫，真空濃縮，將粗制油狀物通過色譜柱，使用PE/EA=4/1來純化以獲得7-氧代-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯。

步驟 G ： 7-(2- 乙氧基 -2- 氧代乙叉基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸叔丁酯

在0℃下，在氮氣氛圍下，向2-二乙氧基磷醯基乙酸乙酯(3.23 g，14.42 mmol)在無水THF (50 mL)中的溶液中分批添加NaH (768.88 mg，19.22 mmol，60%純度)，並且在0℃下將反應混合物攪拌30 min。接著添加7-氧代-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(2.3 g，9.61 mmol，1.0當量)在無水THF (50 mL)中的溶液並在0℃-10℃下將混合物再攪拌3 h。添加飽和NH ₄Cl水溶液以將溶液淬滅，並且用EA (2×100 mL)萃取。將有機層經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮以獲得7-(2-乙氧基-2-氧代-乙叉基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(3.20 g，粗品)。

步驟 H ： 7-(2- 乙氧基 -2- 氧代乙基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸叔丁酯

在N ₂下，向7-(2-乙氧基-2-氧代-乙叉基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(3 g，9.70 mmol)在MeOH (150 mL)中的溶液中添加Pd/C (600.00 mg，10% w/w)。將懸浮液在真空下脫氣並用H ₂吹掃數次。在20℃下，在H ₂下，將混合物攪拌3 h。將懸浮液經矽藻土過濾並將濾餅用MeOH (3×20 mL)洗滌。將合併的濾液濃縮，將粗制油狀物通過色譜柱，使用PE/EA=4/1來純化以獲得7-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 256.2 [M+H-t-Bu] ⁺。

步驟 I ： 7-(2- 氧代乙基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸叔丁酯

在-78℃下，在氮氣氛圍下，在30 min內向7-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1 g，3.21 mmol)在無水DCM (10 mL)中的溶液中逐滴添加DIBAL-H (1 M，4.82 mL)，並且將混合物再攪拌30 min。將混合物用飽和NaHCO ₃水溶液淬滅，用DCM (3×50 mL)萃取，將有機層乾燥，濃縮以獲得7-(2-氧代乙基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯。

步驟 J ： 7-( 丙 -2- 炔 -1- 基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸叔丁酯

在室溫下，向1-重氮基-1-二甲氧基磷醯基-丙-2-酮(862.24 mg，4.49 mmol)在無水MeOH (20 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(930.46 mg，6.73 mmol)，並且在室溫下將反應混合物攪拌30 min。接著添加7-(2-氧代乙基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1.2 g，4.49 mmol)在無水MeOH (20 mL)中的溶液並將混合物再攪拌16 h。將反應混合物濃縮，通過色譜柱，使用PE/EA=4/1來純化以獲得7-丙-2-炔基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯。

步驟 K ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[2-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-2- 氧代 - 乙基 ]-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸

按照與實施例22中所述類似的程式製備該化合物。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 12.96 (brs, 1H), 10.57 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.66-8.54 (m, 1H), 8.00 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.47-7.29 (m, 8H), 7.22 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 6.88 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 4.85 (s, 2H), 4.51 (d, J= 8.4 Hz, 4H), 4.42-4.28 (m, 4H), 4.26-3.98 (m, 4H), 3.96-3.84 (m, 6H), 3.18 (s, 2H), 3.05 (s, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.26-1.82 (m, 8H), 1.76-1.58 (m, 2H), 1.45-1.17 (m, 5H), 0.95 (s, 9H)。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1202.7 [M+H] ⁺。

實施例 28 ：化合物 28

步驟 A ： 3-(2-(((3S,7aR)-3-((( 叔丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 ) 四氫 -1H- 吡咯嗪 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 )-7- 氯 -8- 氟吡啶並 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 )-3,8- 二氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -8- 甲酸叔丁酯

向10-{4-[3-(2-{8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基}-4-(甲氧基羰基)-1,3-噻唑-5-基)丙氧基]苯基}癸-9-炔酸(300 mg，0.400 mmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(266.42 mg，0.600 mmol)、HATU (227.86 mg，0.600 mmol)和DIEA (154.90 mg，1.200 mmol)。在室溫下將混合物攪拌1 h。將反應用水(5 mL)淬滅。將混合物用EA (3×20 mL)萃取並將所得混合物用3×20 mL水洗滌。將有機層經Na ₂SO ₄乾燥並過濾。將有機層濃縮。將粗產物用矽膠柱純化。將有機層減壓濃縮以提供2-{8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基}-5-{3-[4-(9-{[(2S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-{[(1S)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基]氨基甲醯基}壬-1-炔-1-基)苯氧基]丙基}-1,3-噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1177 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 3-(2-(((3S,7aR)-3-((( 叔丁基二苯基甲矽烷基 ) 氧基 ) 甲基 ) 四氫 -1H- 吡咯嗪 -7a(5H)- 基 ) 甲氧基 )-7-(8- 乙基 -7- 氟 -3-( 甲氧基甲氧基 ) 萘 -1- 基 )-8- 氟吡啶並 [4,3-d] 嘧啶 -4- 基 )-3,8- 二氮雜雙環 [3.2.1] 辛烷 -8- 甲酸叔丁酯

向2-{8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基}-5-{3-[4-(9-{[(2S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-{[(1S)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基]氨基甲醯基}壬-1-炔-1-基)苯氧基]丙基}-1,3-噻唑-4-甲酸甲酯(300 mg，0.255 mmol)在MeOH (2 mL)和THF (4 mL)中的溶液中添加NaOH水溶液(2 N，2 mL)。在50℃下將混合物攪拌1 h。將混合物減壓濃縮以去除MeOH。用2 M HCl將溶液的pH值調整至4~5。將混合物用EA (10 mL×2)萃取。將粗產物通過製備型HPLC，採用以下條件來純化：柱：XSelect CSH製備型C18 OBD柱，19*250 mm，5 μm；流動相A：水(10 mmol/L NH ₄HCO ₃)，流動相B：ACN；流速：25 mL/min；梯度：在7 min內51% B至71% B，71% B；波長：254 nm；RT1 (min)：4.95；運行次數：0。在凍幹之後，提供2-{8-[(1,3-苯並噻唑-2-基)氨基甲醯基]-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基}-5-{3-[4-(9-{[(2S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-{[(1S)-1-[4-(4-甲基-1,3-噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基}吡咯烷-1-基]-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基]氨基甲醯基}壬-1-炔-1-基)苯氧基]丙基}-1,3-噻唑-4-甲酸。 ¹H NMR (300 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.98 (s, 1H), 8.38 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 8.01 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.73 - 7.85 (m, 2H), 7.63 - 7.72 (m, 1H), 7.18 - 7.52 (m, 10H), 6.85 (d, J= 8.7 Hz, 2H), 4.75 - 5.00 (m, 4H), 4.48 - 4.56 (m, 1H), 4.36 - 4.48 (m, 1H), 4.23 - 4.33 (m, 1H), 3.95 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.66 - 3.79 (m, 2H), 3.55 - 3.66 (m, 2H), 3.16 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.03 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.34 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 2.18 - 2.32 (m, 1H), 2.07 - 2.17 (m, 1H), 1.93 - 2.06 (m, 3H), 1.72 - 1.86 (m, 1H), 1.43 - 1.59 (m, 4H), 1.32 - 1.43 (m, 5H), 1.19 - 1.32 (m, 4H), 0.93 (s, 9H)。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1163.45 [M+H] ⁺。

實施例 29 ：化合物 29

步驟 A ： 4-((( 三氟甲基 ) 磺醯基 ) 氧基 ) 環己 -3- 烯甲酸叔丁酯

在-78℃下，向4-氧代環己烷甲酸叔丁酯(6.23 g，31.42 mmol)在THF (65.43 mL)中的溶液中添加LiHMDS的THF溶液(1 M，34.57 mL)，在-78℃下將混合物攪拌1 h，添加1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基磺醯基)甲烷磺醯胺(12.35 g，34.57 mmol)並在28℃下將混合物攪拌16 h。將所得溶液用EA (10 mL×3)萃取。將合併的有機層經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=1:0洗脫，以產生4-(三氟甲基磺醯基氧基)環己-3-烯-1-甲酸叔丁酯。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 5.80-5.75 (m, 1H), 2.57-2.31 (m, 5H), 2.14-2.04 (m, 1H), 1.95-1.82 (m, 1H), 1.46-1.42 (m, 9H)。

步驟 B ： 4-(4-( 叔丁氧基羰基 ) 環己 -1- 烯 -1- 基 )-5,6- 二氫吡啶 -1(2H)- 甲酸苯甲酯

向4-(三氟甲基磺醯基氧基)環己-3-烯-1-甲酸叔丁酯(4 g，12.11 mmol)在水(10 mL)和二噁烷(80 mL)中的溶液中添加4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-3,6-二氫-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(2.91 g，8.48 mmol)、1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷絡合物(1.00 g，1.21 mmol)和乙酸鉀(3.57 g，36.33 mmol)，在90℃下，在N ₂中，將所得混合物攪拌16 h。將所得溶液用EA (10 mL×3)萃取。將合併的有機層經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮以產生粗產物。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=20:1洗脫，以產生4-(4-叔丁氧基羰基環己烯-1-基)-3,6-二氫-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 420.1 [M+Na] ⁺

步驟 C ： 4-( 呱啶 -4- 基 ) 環己烷甲酸叔丁酯

向4-(4-叔丁氧基羰基環己烯-1-基)-3,6-二氫-2H-吡啶-1-甲酸苯甲酯(3.23 g，8.13 mmol)在MeOH (120 mL)中的溶液中添加Pd/C (2.16 g，10%純度)，在70℃下，在H ₂氛圍下，將所得混合物攪拌16 h。將反應混合物濃縮至乾燥，並且粗產物不經進一步純化即用於下一步驟中。

步驟 D ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(4-(4-( 叔丁氧基羰基 ) 環己基 ) 呱啶 -1- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-(3-氯丙-1-炔基)苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(24.58 mg)和4-(4-呱啶基)環己烷甲酸叔丁酯(20 mg，74.79 μmol)在DMF (0.2 mL)中的溶液中添加碳酸銫(73.11 mg，224.38 μmol)，在25℃下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌16 h。將反應混合物過濾並將粗產物通過HPLC (流動相：0.05% NH ₃H ₂O-10 mmol/l NH ₄HCO ₃-ACN；色譜柱：YMC-Actus Triart C18，150*20 mm，5 um；流速(ml/min)：20；梯度(%)：46.2-66.2；執行時間(min)：14；出峰時間(min)：8.7)來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[4-(4-叔丁氧基羰基環己基)-1-呱啶基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 888.6 [M+H] ⁺

步驟 E ： 4-(1-(3-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 呱啶 -4- 基 ) 環己烷甲酸

在25℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[4-(4-叔丁氧基羰基環己基)-1-呱啶基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(177 mg，199.29 μmol)在FA (3 mL)中的溶液攪拌16 h。將反應混合物減壓濃縮以產生4-[1-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-4-呱啶基]環己烷甲酸，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS: MS (ESI) M/Z: 832.50 [M+H] ⁺

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(4-(4-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ) 環己基 ) 呱啶 -1- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，將4-[1-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-4-呱啶基]環己烷甲酸(165.82 mg)、HATU (90.93 mg，239.15 μmol)、DIEA (77.27 mg，597.88 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(85.81 mg，199.29 μmol)在無水DMF (2 mL)中的溶液攪拌16 h。將粗反應混合物過濾並通過HPLC (流動相：0.1% TFA-ACN；色譜柱：製備型氟苯基柱(Prep Fluoro-Phenyl)，150*19 mm，5 um；流速(ml/min)：20；梯度(%)：72.5-85.5；執行時間(min)：15；出峰時間(min)：7.5)來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[4-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環己基]-1-呱啶基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1244.89 [M+H] ⁺

步驟 G ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(4-(4-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ) 環己基 ) 呱啶 -1- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[4-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環己基]-1-呱啶基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(19 mg，15.27 μmol)在二噁烷:H ₂O (240.00 μL)中的溶液中添加NaOH (6.11 mg，152.66 μmol)，在40℃下將所得混合物攪拌2 h。將反應混合物減壓濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過HPLC (流動相：0.1% TFA-ACN；色譜柱：X select CSH製備型氟苯基柱，150*19 mm，5 um；流速(ml/min)：20；梯度(%)：55.2-75.2；執行時間(min)：11；出峰時間(min)：8.2)來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[4-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環己基]-1-呱啶基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。 ¹H-NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ 8.94 (s, 1H), 7.91 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.77 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.65 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.46-7.39 (m, 10H), 6.88 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 4.97 (t, J= 15.3 Hz, 4H), 4.65-4.46 (m, 5H), 4.36-4.29 (m, 1H), 4.25-4.20 (m, 2H), 4.04-3.97 (m, 2H), 3.88-3.78 (m, 4H), 3.69 (d, J= 11.8 Hz, 1H), 3.13-3.02 (m, 4H), 2.47 (d, J= 3.0 Hz, 3H), 2.29-2.02 (m, 7H), 1.93-1.78 (m, 2H), 1.66-1.26 (m, 10H), 1.01 (d, J= 9.3 Hz, 9H)。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1230.70 [M+H] ⁺

實施例 30 ：化合物 30

步驟 A ： 9-( 甲氧基亞甲基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 甲酸叔丁酯

在25℃下，向(甲氧基甲基)三苯基氯化鏻(1.67 g，4.86 mmol)在THF (20 mL)中的溶液中添加t-BuOK (608.56 mg，5.42 mmol)，並且攪拌30 min。逐滴添加9-氧代-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(1 g，3.74 mmol)在THF (20 mL)中的溶液。在25℃下將所得混合物攪拌16 h。將混合物反應過濾並將濾液用EtOAc (80 mL)稀釋。將有機層用H ₂O (15 mL)洗滌。將水層用EtOAc (80 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(100 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。將混合物過濾並將濾液減壓濃縮以產生9-(甲氧基亞甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯，其不經進一步純化即用於下一步驟中。

步驟 B ： 9- 甲醯基 -3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 甲酸叔丁酯

向9-(甲氧基亞甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(1.1 g)在THF (15 mL)中的溶液中添加HCl水溶液(1 M，11.17 mL)並在25℃下將混合物攪拌16 h。將混合物用碳酸氫鈉水溶液(30 mL)稀釋並用乙酸乙酯(30 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並蒸發至乾燥以產生標題化合物，其不經進一步純化即用於下一步驟中。

步驟 C ： 9- 乙炔基 -3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 甲酸叔丁酯

在室溫下，向1-重氮基-1-二甲氧基磷醯基-丙-2-酮(1.00 g)在甲醇(15 mL)中的溶液中添加碳酸鉀(1.44 g，10.45 mmol)，攪拌30 min。逐滴添加9-甲醯基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(735 mg，2.61 mmol)在甲醇(15 mL)中的溶液。在室溫下將所得混合物攪拌5 h。將反應混合物過濾並將濾液用EtOAc (15 mL)稀釋。將有機層用H ₂O (30 mL)洗滌。將水層用EtOAc (15 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。將混合物過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=10:1洗脫，以產生9-乙炔基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 3.40-3.33 (m, 4H), 2.04 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 1.78-1.39 (m, 18H), 1.38-1.14 (m, 5H)

步驟 D ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((3-( 叔丁氧基羰基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(300 mg，422.18 μmol)和9-乙炔基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(175.67 mg，633.26 μmol)在THF (10 mL)中的溶液中添加CuI (16.08 mg，84.44 μmol)、TEA (213.60 mg，2.11 mmol，293.41 μL)和雙(三苯基膦)氯化鈀(II) (148.16 mg，211.09 μmol)，在60℃下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌3 h。將反應混合物濃縮至乾燥並將殘餘物通過製備型TLC (SiO ₂，DCM:MeOH=25:1)來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-(3-叔丁氧基羰基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) m/z: 860.60 [M+H] ⁺

步驟 E ： 5-(3-(4-(3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 基乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 )-2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在28℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-(3-叔丁氧基羰基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(400 mg，465.07 μmol)在FA (2 mL)中的溶液攪拌1 h。將反應混合物濃縮至乾燥以產生標題化合物，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS MS[ESI] m/z: 760.4 [M+H] ⁺

步驟 F ： 2-(9-((4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 乙炔基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 乙酸

向5-[3-[4-[2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙炔基]苯氧基]丙基]-2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]噻唑-4-甲酸甲酯(353 mg)、乙醛酸一水合物(85.51 mg，928.98 μmol)和乙酸(139.46 mg，2.32 mmol)在DMF (3 mL)中的溶液中添加氰基硼氫化鈉(87.57 mg，1.39 mmol)並在室溫下將混合物攪拌5 min。將混合物用EtOAc (30 mL)稀釋。將有機層用H ₂O (30 mL)洗滌。將水層用EtOAc (30 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。將混合物過濾並將濾液減壓濃縮以產生殘餘物。將殘餘物過濾並通過HPLC (流動相：0.1% TFA-ACN；色譜柱：YMC-Actus Triart C18，150*20 mm，5 um；流速(ml/min)：20；梯度(%)：43.5-63.5；執行時間(min)：12；出峰時間(min)：9.5)來純化以提供2-[9-[2-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]乙炔基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]乙酸。LCMS: MS (ESI) M/Z: 818.4 [M+H] ⁺

步驟 G ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((3-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在室溫下，將2-[9-[2-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]乙炔基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]乙酸(55 mg，67.24 μmol)、HATU (30.68 mg，80.68 μmol)、DIEA (43.45 mg，336.18 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(43.42 mg，100.85 μmol)在無水DMF (0.1 mL)中的溶液攪拌2 h。將粗反應混合物過濾並通過HPLC來純化以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[3-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1230.7 [M+H] ⁺

步驟 H ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((3-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[3-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(30 mg，24.38 μmol)在二噁烷(2 mL)和H ₂O (2 mL)中的溶液中添加NaOH (1.95 mg，48.76 μmol)，在28℃下將所得混合物攪拌5 h。將反應混合物減壓濃縮以產生殘餘物。將殘餘物用H ₂O (3 mL)稀釋並用HCl水溶液(1 M)將溶液的pH值調整至5-6，過濾，並且將固體經空氣乾燥以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[3-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。LCMS: MS (ESI) m/z: 1216.6 [M+H] ⁺。1H-NMR (400 MHz, 甲醇-D ₄) δ 8.93 (s, 1H), 7.91 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.65 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.47-7.39 (m, 7H), 7.33 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 7.20 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 6.78 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 4.95 (s, 3H), 4.63 (s, 1H), 4.56-4.51 (m, 3H), 4.34 (d, J= 15.7 Hz, 1H), 4.03-3.78 (m, 8H), 3.69-3.65 (m, 2H), 3.41 (s, 2H), 3.27-3.07 (m, 5H), 2.59 (s, 1H), 2.45 (d, J= 5.5 Hz, 3H), 2.23-2.07 (m, 4H), 1.94 (s, 2H), 1.84-1.60 (m, 8H), 1.33 (d, J= 41.8 Hz, 4H), 1.04 (d, J= 12.9 Hz, 9H)

實施例 31 ：化合物 31 ( 化合物 31-A 和 31-B)

步驟 A. 4- 羥基環己烷甲酸叔丁酯

在80℃下，將4-羥基環己烷甲酸(2.0 g，13.87 mmol)和1,1-二叔丁氧基-N,N-二甲基-甲胺(5.64 g，27.75 mmol)在甲苯(20 mL)中的溶液攪拌12 h。將反應混合物用水淬滅並用EA萃取，將有機層濃縮，並且將粗產物通過製備型TLC來純化以提供4-羥基環己烷甲酸叔丁酯。

步驟 B. 4- 丙 -2- 炔氧基環己烷甲酸叔丁酯

向NaH (181.75 mg，4.54 mmol，60%純度)在THF (7 mL)中的溶液中添加4-羥基環己烷甲酸叔丁酯(0.7 g，3.50 mmol)並在0-20℃下將混合物攪拌30 min。在0-20℃下，向以上溶液中添加3-溴丙-1-炔 (540.53 mg，4.54 mmol)，並且在0-20℃下將混合物攪拌2 h。將反應混合物用水淬滅並用MTBE萃取，將有機層濃縮，將粗產物通過製備型TLC來純化以提供4-丙-2-炔氧基環己烷甲酸叔丁酯。

步驟 C. 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-(4- 叔丁氧基羰基環己氧基 ) 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在室溫下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(0.488 g，686.74 μmol)和4-丙-2-炔氧基環己烷甲酸叔丁酯(0.18 g，755.41 μmol)在DMF (5mL)中的溶液中添加Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(96.28 mg，137.35 μmol)和CuI (52.32 mg，274.70 μmol)和DIEA (265.77 mg，2.06 mmol)，並且在室溫下將混合物攪拌5 h。將反應混合物用水淬滅並用EA萃取，將有機層濃縮，將粗產物通過製備型TLC來純化以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-(4-叔丁氧基羰基環己氧基)丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) m/z: 821 [M+H] ⁺。

步驟 D. 4-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ] 苯基 ] 丙 -2- 炔氧基 ] 環己烷甲酸

在40℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-(4-叔丁氧基羰基環己氧基)丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(150 mg，182.70 μmol)在HCOOH (2 mL)中的溶液攪拌2 h。將反應混合物濃縮以提供4-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔氧基]環己烷甲酸。LCMS: MS (ESI) m/z: 765 [M+H] ⁺。

步驟 F. 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[3- 氟 -4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1R)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-9- 氧代 - 壬 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸

在室溫下，向4-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔氧基]環己烷甲酸(150 mg)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(130.78 mg，294.15 μmol)在DMF (2 mL)中的溶液中添加HATU (111.78 mg，294.15 μmol)和DIEA (75.89 mg，588.31 μmol)，並且在室溫下將混合物攪拌12 h。將混合物用水淬滅並用EA萃取，將有機層濃縮，將粗產物通過矽膠色譜法來純化以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環己氧基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1191 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基甲醯基 ] 環己氧基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸

在20-30℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環己氧基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(80 mg，67.14 umol)和NaOH (26.86 mg，671.40 μmol)在MeOH (1 mL)和水(1 mL)中的溶液攪拌3 h。將混合物用HCl (2 N)淬滅並通過製備型HPLC來純化以產生(化合物31，異構體1)和(化合物31，異構體2)。

化合物31，異構體1：

¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.96 (s, 1H), 7.91-7.86 (m, 3H), 7.61-7.32 (m, 10H), 6.78 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 6.26 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.10-4.97 (m, 3H), 4.72 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 4.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 4.36 (s, 2H), 4.14-3.97 (m, 3H), 3.77 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.59-3.48 (m, 2H), 3.30 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.07 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 2.53 (d, J = 11.0 Hz, 3H), 2.15-1.92 (m, 8H), 1.54-1.45 (m, 4H), 1.31-1.25 (m, 5H), 1.03 (s, 9H); LCMS: MS (ESI) M/Z: 1177 [M+H] ⁺；HPLC：RT=9.374 min，方法：1.0 ml-15 min-5-70-95% ACN-H3PO4。

化合物31，異構體2

¹H-NMR (400 MHz, DMSO- d ₆,) δ 8.94 (s, 1H), 8.33 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.64-7.57 (m, 1H), 7.46-7.29 (m, 9H), 6.85 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.89-4.79 (m, 3H), 4.46-4.24 (m, 4H), 3.95 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.68 (t, J = 5.6 Hz, 4H), 3.14-2.97 (m, 4H), 2.63 (s, 1H), 2.41 (s, 2H), 2.29 (s, 1H), 1.99-1.94 (m, 3H), 1.87-1.74 (m, 2H), 1.63 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 1.49-1.32 (m, 6H), 1.20 (s, 4H), 0.89-0.80 (m, 9H); LCMS: MS (ESI) M/Z: 1177 [M+H] ⁺；HPLC：RT=9.562 min，方法：1.0 ml-15 min-5-70-95% ACN-H3PO4。

實施例 33 ：化合物 33

步驟 A ： 2- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 酮

向7-氧代-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(2 g，8.36 mmol)在DCM (2 mL)中的溶液中添加HCl/二噁烷(7 mL)，在25℃下將所得混合物攪拌1 h。將反應混合物濃縮至乾燥，並且粗品不經進一步純化即直接使用。

步驟 B ： 7- 氧代 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸苯甲酯

在15℃下，向2-氮雜螺[3.5]壬-7-酮(1.0 g)在DCM (3 mL)中的溶液中添加CbzCl (2.44 g，14.38 mmol)和TEA (2.90 g，28.76 mmol)，在15℃下將所得混合物攪拌16 h。接著將混合物傾倒至水(10 mL)中，並且將所得混合物用DCM (20 mL×3)萃取。將有機層濃縮至乾燥，將粗產物通過矽膠(PE/EA=10/1-5/1)來純化以產生標題化合物。

步驟 C ： 7-(2-( 叔丁氧基 )-2- 氧代乙叉基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸苯甲酯

在0℃下，在氮氣氛圍下，向2-二乙氧基磷醯基乙酸叔丁酯(922.87 mg，3.66 mmol)在無水THF (8 mL)中的溶液中添加NaH (146.35 mg，3.66 mmol，60%純度)，並且在0℃下將反應混合物攪拌30 min。接著添加7-氧代-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸苯甲酯(0.5 g，1.83 mmol)在無水THF (2 mL)中的溶液並將混合物再攪拌3.5 h。接著將混合物傾倒至水(10 mL)中，並且將所得混合物用EA (10 mL×3)萃取。將有機層濃縮至乾燥，將粗產物在矽膠(PE/EA=15/1-10/1)上純化以產生標題化合物。

步驟 D ： 2-(2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) 乙酸叔丁酯

在N ₂氛圍下，向7-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙叉基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸苯甲酯(0.45 g，1.21 mmol)在MeOH (5 mL)中的溶液中添加Pd/C (50 mg，10% w/w?)。將懸浮液在真空下脫氣並用H ₂吹掃數次。在25℃下，在H ₂氣球下，將混合物攪拌6 h。將懸浮液經矽藻土過濾，並且將濾餅用MeOH (10 mL×3)洗滌。將合併的濾液濃縮以產生2-(2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)乙酸叔丁酯。

步驟 E ： 2-(2-( 丙 -2- 炔 -1- 基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) 乙酸叔丁酯

在25℃下，向2-(2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)乙酸叔丁酯(0.19 g)和3-溴丙-1-炔(94.43 mg，793.81 μmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(219.09 mg，1.59 mmol)，在25℃下將所得混合物攪拌2 h。接著將混合物傾倒至水(10 mL)中，並且將所得混合物用EA (10 mL×3)萃取。將有機層濃縮至乾燥，將粗產物在矽膠(PE/EA=20/1-15/1)上純化以產生標題化合物。

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(7-(2-( 叔丁氧基 )-2- 氧代乙基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(256.16 mg)和2-(2-丙-2-炔基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)乙酸叔丁酯(100 mg，360.49 μmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加CuI (68.66 mg，360.49 μmol)、Pd(PPh ₃) ₄(208.18 mg，180.24 μmol)和DIEA (186.01 mg，1.44 mmol)，在60℃下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌3 h。將混合物冷卻至室溫並用EA稀釋。將有機層用鹽水和H ₂O洗滌，乾燥並濃縮。將粗品通過使用DCM/MeOH=20/1進行的製備型TLC來純化以獲得2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[7-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 860.3 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 2-(2-(3-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) 乙酸

在25℃下，在N ₂中，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[7-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(150 mg，174.40 μmol)在FA (6 mL)中的溶液攪拌16 h。將反應真空濃縮以產生呈粗產物形式的2-[2-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基]乙酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 402.8[M/2 +H] ⁺。

步驟 H ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(7-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[2-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基]乙酸(110 mg)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(353.45 mg，820.91 μmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加EDCI (262.28 mg，1.37 mmol)、HOBT (184.87 mg，1.37 mmol)和DIEA (176.83 mg，1.37 mmol)。在室溫下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌5 h。將混合物用EA (50 mL)稀釋，用鹽水(30 mL)和H ₂O (30 mL)洗滌，將有機層經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮。將粗產物通過使用DCM/MeOH=10/1進行的製備型TLC來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[7-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1216.7 [M+H] ⁺。

步驟 I ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(7-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[7-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(100 mg，82.20 μmol)在THF (1.5 mL)、MeOH (1.5 mL)和H ₂O (1.5 mL)中的溶液中添加LiOH (39.37 mg，1.64 mmol)，在25℃下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌4 h。用1 N HCl將pH值調整至3-4，濃縮，將粗反應混合物過濾並通過HPLC (製備型C18，5 μM XBridge柱，19×150 mm， Waters；在7 min時間段內35% MeCN/水至43% MeCN/水的梯度洗脫，其中水含有0.1%甲酸)來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[7-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 10.67 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.99 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.83-7.74 (m, 2H), 7.62 (s, 1H), 7.43-7.35 (m, 10H), 6.97-6.87 (m, 2H), 4.78 (s, 2H), 4.50-4.29 (m, 10H), 3.83-3.60 (m, 8H), 3.13 (s, 2H), 2.98 (s, 2H), 2.40 (s, 3H), 2.15-1.80 (m, 9H), 1.59-1.19 (m, 6H), 0.89 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1202.7 [M+H] ⁺。

實施例 34 ：化合物 34

步驟 A ： 4-(3- 叔丁氧基 -3- 氧代 - 丙氧基 ) 呱啶 -1- 甲酸苯甲酯

在25℃下，向4-羥基呱啶-1-甲酸苯甲酯(5.0 g，21.25 mmol)和3-溴丙酸叔丁酯(4.44 g，21.25 mmol)在THF (100 mL)中的溶液中添加NaH (849.98 mg，21.25 mmol，60%純度)，在25℃下，在N ₂中，將所得混合物攪拌15 h。將反應混合物用H ₂O (100 mL)稀釋。接著將它用乙酸乙酯(200 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(100 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=10:1洗脫，以產生標題化合物。LC/MS: MS (ESI) M/Z 308.3 [M-56+H] ⁺。

步驟 B ： 3-(4- 呱啶基氧基 ) 丙酸叔丁酯

在N ₂下，向4-(3-叔丁氧基-3-氧代-丙氧基)呱啶-1-甲酸苯甲酯(2.0 g，5.50 mmol)在乙醇(25 mL)中的溶液中添加Pd/C (668.32 mg，10% w/w)。將懸浮液在真空下脫氣並用H ₂吹掃數次。在30℃下，在H ₂氣球下，將混合物攪拌10 h。將所得混合物過濾，將濾餅用EtOH (20 mL×3)洗滌。將濾液減壓濃縮以產生標題化合物。

步驟 C ： 3-[(1- 丙 -2- 炔基 -4- 呱啶基 ) 氧基 ] 丙酸叔丁酯

在25℃下，將3-[(1-丙-2-炔基-4-呱啶基)氧基]丙酸叔丁酯(1.0 g)和3-溴丙-1-炔(415.01 mg，3.4mmol)、K ₂CO ₃(902.69 mg，6.54 mmol)在MeCN (10 mL)中的溶液攪拌2 h。將反應混合物用H ₂O (20 mL)稀釋。接著將它用乙酸乙酯(30 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=3:1洗脫，以產生標題化合物。LC/MS: MS (ESI) M/Z 268.20 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[4-(3- 叔丁氧基 -3- 氧代 - 丙氧基 )-1- 呱啶基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(300 mg，422.18 μmol)和3-[(1-丙-2-炔基-4-呱啶基)氧基]丙酸叔丁酯(225.75 mg，844.35 μmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加DIEA (163.38 mg，1.27 mmol)、CuI (32.16 mg，168.87 μmol)和Pd(PPh ₃)Cl ₂(59.27 mg，84.44 μmol)。在室溫下將混合物攪拌5 h。將所得混合物用乙酸乙酯(30 mL)稀釋，用水(30 mL×3)洗滌。將合併的有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=1:1洗脫，以產生標題化合物。LCMS: MS (ESI) M/Z 850.5 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 3-[[1-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ] 苯基 ] 丙 -2- 炔基 ]-4- 呱啶基 ] 氧基 ] 丙酸

在25℃下，將3-[[1-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-4-呱啶基]氧基]丙酸(260 mg，305.86 μmol)在FA (5 mL)中的溶液攪拌12 h。將所得混合物真空濃縮。粗產物不經進一步純化即直接用於下一步驟中。LCMS: MS (ESI) M/Z 794.4 [M+H]+

步驟 F ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基甲醯基 ] 環己氧基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，將3-[[1-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-4-呱啶基]氧基]丙酸(150 mg，188.93 μmol)、DIEA(259 mg，2.0 mmoL)、(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(84.00 mg，188.93 μmol)和HATU(150 mg，399 μmol)在DMF (2 mL)中的溶液攪拌2 h。將反應體系緩慢逐滴添加至冰水(10 mL)中並且有固體沉澱出來。將沉澱的固體通過過濾收集並用水(10 mL)洗滌以產生標題化合物。LCMS: MS (ESI) M/Z 1220.7 [M+H] ⁺

步驟 G ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[4-[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-3- 氧代 - 丙氧基 ]-1- 呱啶基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環己氧基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸(90 mg，73.74 μmol)和NaOH (8.85 mg，221.22 μmol)在二噁烷(10 mL)和H ₂O (2 mL)中的溶液攪拌2 h。將粗反應混合物過濾並經受反相製備型MPLC (製備型C18，20-45 μM，120 g，Tianjin Bonna-Agela Technologies；在7 min時間段內35% MeCN/水至45% TFA/水的梯度洗脫，其中兩種溶劑均含有0.1%甲酸)以提供標題化合物。LC/MS: MS (ESI) M/Z [M+H] ⁺1206.6. ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 8.92 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.99 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 28.9 Hz, 2H), 7.62 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.47-7.34 (m, 8H), 6.90 (s, 2H), 5.28 (s, 1H), 4.86-4.76 (m, 3H), 4.48-4.25 (m, 4H), 3.95 (s, 2H), 3.06 (d, J = 56.3 Hz, 5H), 2.63 (s, 2H), 2.31 (s, 2H), 2.14-1.71 (m, 7H), 1.49-1.32 (m, 6H), 1.19 (s, 9H), 0.88 (d, J = 8.0 Hz, 9H)。

實施例 35 ：化合物 35

步驟 A ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[9-(2- 叔丁氧基 -2- 氧代 - 乙基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(150 mg，211.09 μmol)和2-(3-丙-2-炔基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙酸叔丁酯(128.96 mg，422.18 μmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加Pd(PPh ₃) ₄(121.80 mg，105.54 μmol)、DIEA (136.15 mg，1.06 mmol)和CuI (40.20 mg，211.09 μmol)。在60℃下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌3 h。將混合物冷卻至室溫並用EA (50 mL)稀釋，用鹽水和H ₂O洗滌，乾燥並濃縮。將殘餘物通過使用DCM/MeOH=20/1進行的製備型TLC來純化以獲得2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[9-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 888.3 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 2-[3-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ] 苯基 ] 丙 -2- 炔基 ]-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 基 ] 乙酸

在25℃下，在N ₂氛圍下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[9-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(150 mg，168.89 μmol)在HCOOH (5 mL)中的溶液攪拌8 h。將混合物濃縮以獲得2-[3-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基]乙酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 832.3 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[9-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-2- 氧代 - 乙基 ]-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向2-[3-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基]乙酸(150 mg，180.28 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(320.60 mg，721.12 μmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加EDCI (172.80 mg，901.40 μmol)、HOBT(122 mg，903.70 μmol)和DIEA (186.05 mg，1.44 mmol)，在25℃下將所得混合物攪拌5 h。將反應用EA (50 mL)稀釋，用H ₂O和鹽水洗滌，將有機層乾燥並濃縮。將殘餘物通過使用DCM/MeOH=9/1進行的製備型TLC來純化以獲得2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[9-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 629.9 [M+H/2] ⁺。

步驟 D ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[9-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-2- 氧代 - 乙基 ]-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[9-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(100 mg，79.45 μmol)在THF (1.5 mL)、MeOH (1.5 mL)和H ₂O (1.5 mL)中的溶液中添加LiOH.H ₂O (66.68 mg，1.59 mmol)，在25℃下將所得混合物攪拌3 h。將反應混合物濃縮以去除溶劑並用H ₂O (5 mL)稀釋，用HCl水溶液(1 M)將溶液的pH值調整至5-6。接著將它減壓濃縮。將粗反應混合物過濾並經受反相製備型HPLC (製備型C18，5 μM XBridge柱，19×150 mm， Waters；在7 min時間段內35% MeCN/水至43% MeCN/水的梯度洗脫，其中水含有0.1%甲酸)以獲得2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[9-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。1H-NMR (400 MHz, DMSO-D ₆) δ 9.83 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.34 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 8.00 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.64 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.46-7.27 (m, 10H), 6.91 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 4.91-4.79 (m, 3H), 4.48 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 4.37 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.30-4.18 (m, 3H), 3.97 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.68 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 3.56 (s, 2H), 3.38 (s, 2H), 3.15-2.97 (m, 7H), 2.41 (s, 3H), 2.19-2.14 (m, 1H), 2.03-1.91 (m, 5H), 1.78-1.72 (m, 1H), 1.61-1.42 (m, 5H), 1.34-0.96 (m, 10H), 0.89 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1244.8 [M+H] ⁺。

實施例 36 ：化合物 36

步驟 A ： 9-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 壬 -8- 炔酸

向壬-8-炔酸(52.08 mg，337.746 μmol，1.5當量)和2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(160 mg，225.16 μmol)在DMF (3 mL)中的溶液中添加Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(31.61 mg，45.03 μmol)、CuI (17.15 mg，90.06 μmol，0.4當量)和DIEA (87.81 mg，675.48 μmol)，在室溫下，在N ₂下，將混合物攪拌1 h。將混合物用EA和水稀釋並將水相用EA (50 ml×3)萃取，將有機層合併，並且用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮以提供標題化合物。LCMS: MS (ESI) M/Z: 737.4 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-9- 氧代壬 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向9-(4-(3-(2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-4-(甲氧基羰基)噻唑-5-基)丙氧基)苯基)壬-8-炔酸(180 mg)和(2S,4R)-1-[(2S)-2 -氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(130.32 mg，293.12 μmol)在DMF (3 mL)中的溶液中添加DIEA (95.26 mg，732.80 μmol)和HATU (111.39 mg，293.12 μmol)。在25℃下將混合物攪拌1 h。將混合物用EA和水稀釋，將水相用EA (50 ml×3)萃取並將有機層合併，並且用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮。將粗品通過使用MeOH:DCM=1:15進行的製備型TLC來純化以提供標題化合物。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1163.6 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-9- 氧代壬 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

向2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-9-氧代壬-1-炔-1-基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(180 mg，154.71 μmol)在二噁烷(3 mL)和水(0.6 mL)中的溶液中添加LiOH (22.23 mg，928.26 μmol)並在40℃下攪拌2 h。將粗反應混合物過濾並經受反相製備型HPLC (製備型C18，5 μM XBridge柱，19×150 mm， Waters；在7 min時間段內45% MeCN/水至50% MeCN/水的梯度洗脫，其中兩種溶劑均含有0.1% TFA)以提供2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-9-氧代壬-1-炔-1-基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1149.7 [M+H] ⁺。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-D ₆) δ 12.90 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.38 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.04 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.82-7.78 (m, 2H), 7.67 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.50-7.32 (m, 8H), 7.28-7.23 (m, 2H), 6.87-6.82 (m, 2H), 5.18-4.83 (m, 4H), 4.53-4.48 (m, 1H), 4.42 (t, J= 8.4 Hz, 1H), 4.28 (s, 1H), 3.99-3.94 (t, J=6.0 Hz, 2H), 3.72 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.62 (s, 2H), 3.16 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 3.03 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.38-3.34 (m, 2H), 2.30-2.22 (m, 1H), 2.16-2.09 (m, 1H), 2.03-1.96 (m, 3H), 1.82-1.76 (m, 1H), 1.56-1.45 (m, 4H), 1.40-1.36 (m, 5H), 1.32-1.19 (m, 3H), 0.89 (s, 9H)。

實施例 37 ：化合物 37

步驟 A ： 3-( 羥基甲基 ) 氮雜環丁烷 -1- 甲酸苯甲酯

在0~10℃下，在10 min內向1-苯甲基氧基羰基氮雜環丁烷-3-甲酸(10 g，42.51 mmol)在THF (40 mL)中的溶液中逐滴添加硼烷-四氫呋喃絡合物(1 M，127.53 mL)。在0~25℃下，在N ₂下，將所得混合物攪拌16 h。在0-10℃下，在30 min內向所得混合物中逐滴添加NaOH溶液(4 M，100 mL)。將所得混合物用EA (100 mL×2)萃取。將有機層合併，用鹽水(50 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並減壓濃縮至乾燥。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，200~300目，EA/PE=0~50%)來純化以提供3-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸苯甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 222.1 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 3-( 溴甲基 ) 氮雜環丁烷 -1- 甲酸苯甲酯

在0~10℃下，在5 min內向3-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸苯甲酯(1.0 g，4.52 mmol)在DCM (10 mL)中的溶液中逐滴添加PPh ₃(1.66 g，6.33 mmol)在DCM (10 mL)中的溶液。在0~10℃下將所得混合物攪拌20 min。在0~10℃下，在5 min內向混合物中逐滴添加CBr ₄(1.80 g，5.42 mmol)在DCM (10 mL)中的溶液。在室溫下將所得混合物攪拌18 h。在40~45℃下將反應混合物減壓濃縮至乾燥。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，200~300目，EA/PE=0~20%)來純化以產生3-(溴甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸苯甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 286.0, 284.1 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 3-[[ 溴 ( 三苯基 )- 磷烷基 ] 甲基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸苯甲酯

在10~20℃下，向3-(溴甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸苯甲酯(0.72 g，2.53 mmol)在甲苯(10 mL)中的溶液中添加PPh ₃(731.06 mg，2.79 mmol)。在80℃下，在N ₂下，將所得混合物攪拌72 h。將反應混合物減壓濃縮至乾燥。將殘餘物在MTBE (25 mL)中濕磨並過濾以提供3-[[溴(三苯基)-磷烷基]甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸苯甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 466.2 [M+H-Br] ⁺。

步驟 D ： 3-[(3- 叔丁氧基羰基亞環丁基 ) 甲基 ] 氮雜環丁烷 -1- 甲酸苯甲酯

在-40~-30℃下，在N ₂下，向3-[[溴(三苯基)-磷烷基]甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸苯甲酯(1.09 g，1.99 mmol)在無水THF (30 mL)中的懸浮液中逐滴添加LiHMDS的THF溶液(1 M，1.99 mL)。在-40~-30℃下將反應混合物攪拌1 h。在-40~-30℃下逐滴添加3-[[溴(三苯基)-磷烷基]甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸苯甲酯(1.09 g，1.99 mmol)在THF (0.5 mL)中的溶液。使所得混合物升溫至室溫，過夜。將反應混合物用飽和NH ₄Cl溶液(30 mL)淬滅並用DCM (30 mL×2)萃取。將有機層合併，用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並在40℃下減壓濃縮至乾燥。將殘餘物通過製備型TLC (EA/PE=1:5)來純化以產生3-[(3-叔丁氧基羰基亞環丁基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸苯甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 302.2 [M+H-56] ⁺。

步驟 E ： 2-(3-(3-( 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 氮雜環丁烷 -1- 基 ) 環丁基 ) 乙酸叔丁酯

在室溫下，向3-[(3-叔丁氧基羰基亞環丁基)甲基]氮雜環丁烷-1-甲酸苯甲酯(200.00 mg，559.53 μmol)在i-PrOH (30 mL)中的溶液中添加Pd/C (20 mg，10% w/w)和Pd(OH) ₂/C (20 mg，10% w/w)。將所得混合物脫氣並用H ₂回填3次。在25℃下，在H ₂下，將所得混合物攪拌16 h。將反應混合物經矽藻土墊過濾並用EA洗滌。在40℃下將濾液減壓濃縮至乾燥。所得粗品不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z 226.3 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[3-[(3- 叔丁氧基羰基環丁基 ) 甲基 ] 氮雜環丁烷 -1- 基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在室溫下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-(3-氯丙-1-炔基)苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(235.00 mg，357.58 μmol)和3-(氮雜環丁烷-3-基甲基)環丁烷甲酸叔丁酯(80.57 mg，357.58 μmol)在DMF (7 mL)中的溶液中添加Cs ₂CO ₃(349.52 mg，1.07 mmol)。在25℃下將所得混合物攪拌48 h。將反應混合物用H ₂O (50 mL)稀釋並用DCM (25 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(25 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並減壓濃縮至乾燥。將殘餘物通過製備型TLC (MeOH/DCM=1:20)來純化以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[3-[(3-叔丁氧基羰基環丁基)甲基]氮雜環丁烷-1-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 424.0[M/2+H] ⁺。

步驟 G ： 3-[[1-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ] 苯基 ] 丙 -2- 炔基 ] 氮雜環丁烷 -3- 基 ] 甲基 ] 環丁烷甲酸

在40℃下，在N ₂下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[3-[(3-叔丁氧基羰基環丁基)甲基]氮雜環丁烷-1-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(52.0 mg，61.46 μmol)在HCOOH (3 mL)中的溶液攪拌16 h。將反應混合物減壓濃縮至乾燥。將殘餘物溶解在DCM (3 mL)中並減壓濃縮至乾燥。將這個程式重複3次。所得粗產物不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z 395.8 [M/2+H] ⁺。

步驟 H ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[3-[[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基甲醯基 ] 環丁基 ] 甲基 ] 氮雜環丁烷 -1- 基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在室溫下，向3-[[1-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]氮雜環丁烷-3-基]甲基]環丁烷甲酸(58 mg)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(59.74 mg，138.76 μmol)在DCM (6 mL)中的溶液中添加DIEA (35.87 mg，277.52 μmol)和HATU (55.40 mg，145.70 μmol)。在25℃下將所得混合物攪拌1.5 h。將反應混合物用H ₂O (10 mL)稀釋並用DCM (10 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(10 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並減壓濃縮至乾燥。將殘餘物通過製備型TLC (MeOH/DCM=1:25)來純化以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[3-[[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環丁基]甲基]氮雜環丁烷-1-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 601.8 [M/2+H] ⁺。

步驟 I ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[3-[[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基甲醯基 ] 環丁基 ] 甲基 ] 氮雜環丁烷 -1- 基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸

在室溫下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[3-[[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環丁基]甲基]氮雜環丁烷-1-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(68.0 mg，56.55 μmol)在THF (2 mL)/MeOH (2 mL)和H ₂O (1 mL)的混合物中的溶液中添加LiOH H ₂O (23.73 mg，565.49 μmol)。在25℃下將所得混合物攪拌8 h。將反應混合物減壓濃縮至乾燥。將殘餘物通過製備型HPLC (0.1% TFA-ACN，YMC-Actus Triart C18，150*20 mm，5 um)來純化並冷凍乾燥以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[3-[[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環丁基]甲基]氮雜環丁烷-1-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1188.6 [M+H] ⁺。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-D2O) δ1H-NMR (400 MHz, DMSO-D2O) δ 8.99 (s, 1H), 8.04 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.81 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.67 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.51-7.35 (m, 10H), 6.95 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 4.84 (s, 2H), 4.53-4.08 (m, 8H), 4.01 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 3.88-3.80 (m, 2H), 3.72 (t, J= 6.0 Hz, 3H), 3.18 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 3.02-3.05 (m, 3H), 2.76-2.66 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.21-1.88 (m, 7H), 1.78-1.63 (m, 4H), 1.54 (d, J= 6.9 Hz, 1H), 1.23 (s, 1H), 0.91 (s, 9H)。

實施例 38 ：化合物 38

步驟 A ： 2- 氯 -5-(3-(2- 氟 -4- 碘苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-氯-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(1 g，4.24 mmol，1.00當量)和2-氟-4-碘-苯酚(1.01 g，4.24 mmol)在THF (20 mL)中的溶液中添加PPh ₃(1.11 g，4.24 mmol)和DEAD (738.92 mg，4.24 mmol)。在室溫下將混合物攪拌4 h。將反應混合物用水(100 mL)處理並用EA (3×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮。將殘餘物通過快速柱色譜法(EA/PE=0~10%)來純化以產生2-氯-5-[3-(2-氟-4-碘-苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 456.0 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氟 -4- 碘苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向N-(1,3-苯並噻唑-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醯胺(857.65 mg，2.48 mmol，HCl鹽)和2-氯-5-[3-(2-氟-4-碘-苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(1.13 g，2.48 mmol)在DMA (10 mL)中的溶液中添加KI (411.66 mg，2.48 mmol)和Cs ₂CO ₃(2.42 g，7.44 mmol)。在70℃下將混合物攪拌18 h。將反應混合物用水(100 mL)處理並用EA (3×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮。將粗品通過快速柱色譜法(MeOH/DCM=0~90%)和製備型TLC (DCM:MeOH=70:1)來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(2-氟-4-碘-苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 728.9 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 9-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 )-3- 氟苯基 ) 壬 -8- 炔酸

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(2-氟-4-碘-苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(350 mg，480.39 μmol)和壬-8-炔酸(148.14 mg，960.75 μmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加CuI (36.59 mg，192.15 μmol)、Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(67.43 mg，96.09 μmol)和DIEA (182.25 mg，1.44 mmol)。將混合物脫氣並用N ₂回填6次。在60℃下將所得混合物攪拌1 h。將反應混合物用水(50 mL)處理並用EA (5×20 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮以產生呈粗產物形式的9-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]-3-氟-苯基]壬-8-炔酸，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z 755.5 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氟 -4-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-9- 氧代壬 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向9-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]-3-氟-苯基]壬-8-炔酸(200 mg)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(185.60 mg，397.41 μmol，HCl鹽)在DCM (5 mL)中的溶液中添加HATU (151.11 mg，397.41 μmol)和DIEA (102.72 mg，794.82 μmol)。在室溫下將混合物攪拌2 h。將反應混合物用水(50 mL)處理並用DCM (3×20 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮。將粗品通過製備型TLC (MeOH/DCM=20:1)來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氟-4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-9-氧代-壬-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 584.3 [M+2H]/2 ⁺。

步驟 E ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氟 -4-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-9- 氧代壬 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氟-4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-9-氧代-壬-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(140 mg，119.92 μmol)在THF (1 mL)、MeOH (1 mL)和H ₂O (0.5 mL)中的溶液中添加LiOH (86.16 mg，3.60 mmol)。在室溫下將混合物攪拌2 h。用0.1 M HCl溶液將反應混合物的pH值調整至3並用DCM (25 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮。將殘餘物通過製備型HPLC (10 mmol/L NH ₄HCO ₃-ACN，66%-86%；YMC-Actus Triart C18，150*20 mm，5 um；流速：20 mL/min)來純化。將洗脫物真空濃縮並冷凍乾燥以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氟-4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-9-氧代-壬-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ 8.95 (s, 1H), 8.52 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.81 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 7.75 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.45-7.30 (m, 8H), 7.19-7.14 (m, 1H), 7.09-7.01 (m, 2H), 4.79 (s, 2H), 4.51 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 4.42-4.36 (m, 2H), 4.31 (s, 1H), 4.20-4.16 (m, 1H), 4.01 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.69-3.61 (m, 4H), 3.12 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.98 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.40 (s, 3H), 2.32 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.22 (q, J= 7.2 Hz, 1H), 2.12-2.05 (m, 1H), 1.98 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 1.86 (t, J= 8.4 Hz, 1H), 1.45 (q, J= 6.8 Hz, 3H), 1.38-1.31 (m, 1H), 1.23 (q, J= 7.2 Hz, 2H), 0.89 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1154.6 [M+H] ⁺。

實施例 39 ：化合物 39

步驟 A ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氟 -4-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-9- 氧代壬 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向9-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]-3-氟-苯基]壬-8-炔酸(150 mg，198.71 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺 (143.38 mg，298.06 μmol，HCl鹽)在DCM (5 mL)中的溶液中添加HATU (113.33 mg，298.06 μmol)和DIEA (77.04 mg，596.12 μmol)。在室溫下將混合物攪拌2 h。將反應混合物用水(50 mL)處理並用DCM (3×20 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮以產生粗品。將粗品通過製備型TLC (MeOH/DCM=20:1)來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氟-4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-9-氧代-壬-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 591.4 [M+2H]/2 ⁺。

步驟 B ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氟 -4-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-9- 氧代壬 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氟-4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-9-氧代-壬-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(130 mg，110.03 μmol)在THF (1 mL)、MeOH (1 mL)和H ₂O (0.5 mL)中的溶液中添加LiOH (79.06 mg，3.30 mmol)。在室溫下將混合物攪拌2 h。用0.1 M HCl溶液將反應混合物的pH值調整至3並用DCM (25 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮。將獲得的殘餘物通過製備型HPLC (10 mmol/L NH ₄HCO ₃-ACN，66%-86%；YMC-Actus Triart C18，150*20 mm，5 um；流速：20 mL/min)來純化。將洗脫物真空濃縮並冷凍乾燥以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氟-4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-9-氧代-壬-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 8.99 (s, 1H), 8.37 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.04 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.79 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 7.67 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.49-7.32 (m, 8H), 7.20 (d, J= 12.4 Hz, 1H), 7.14-7.05 (m, 2H), 4.95-4.88 (m, 1H), 4.84 (s, 2H), 4.52 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 4.42 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.28 (s, 1H), 4.05 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.72 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 3.60 (s, 2H), 3.17 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 3.03 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.37 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.29-2.20 (m, 1H), 2.18-2.09 (m, 1H), 2.05-1.98 (m, 3H), 1.83-1.76 (m, 1H), 1.52-1.47 (m, 3H), 1.37 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 1.30-1.23 (m, 2H), 0.93 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1168.6 [M+H] ⁺。

實施例 40 ：化合物 40

步驟 A ： 3-(((( 三氟甲基 ) 磺醯基 ) 氧基 ) 甲基 ) 氮雜環丁烷 -1- 甲酸叔丁酯

在-75~-70℃下，在氮氣氛圍下，向3-(羥基甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯(10 g，53.41 mmol)和DIEA(13.81 g，106.82 mmol，18.61 mL)在無水DCM (111.96 mL)中的溶液中逐滴添加Tf ₂O (15.82 g，56.08 mmol，9.43 mL)。在-75~-70℃下將反應混合物攪拌1 h。在-75~-70℃下將反應混合物通過添加40 mL H ₂O來淬滅。在0-5℃下將所得混合物用DCM (100 mL×2)萃取。將合併的有機層用水(100 mL×1)、鹽水(100 mL×1)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並在20℃下濃縮至乾燥。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，200-300目，DCM/PE=10%~100%)來純化以產生3-((((三氟甲基)磺醯基)氧基)甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 264.0[M-56+H] ⁺。

步驟 B ： 3-(3-( 三甲基甲矽烷基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 氮雜環丁烷 -1- 甲酸叔丁酯

在-30~-20℃下，在氮氣氛圍下，向乙炔基(三甲基)矽烷(20.30 g，206.71 mmol，29.21 mL)在無水THF (200 mL)中的溶液中逐滴添加n-BuLi (206.70 mmol，18.8 mL，THF溶液)。在-30~-20℃下將反應混合物攪拌30 min。在-30~-20℃下，向反應混合物中添加DMPU (20 mL)，隨後在-30~-20℃下，在30 min內逐滴添加3-((((三氟甲基)磺醯基)氧基)甲基)氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯(11 g，34.45 mmol)在無水THF (20 mL)中的溶液。在-30~-20℃下將所得混合物再攪拌0.5 h。在-30~-20℃下將反應混合物用濃NH ₃H ₂O (20 mL)和MeOH (20 mL)淬滅。在10 min內將所得混合物升溫至室溫。將反應混合物用EA (60 mL)和H ₂O (30 mL)稀釋。將合併的有機層用水(60 mL×1)、鹽水(60 mL×1)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並在40℃下真空濃縮至乾燥。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，DCM/PE=0~10%)來純化以產生3-(3-(三甲基甲矽烷基)丙-2-炔-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 253.1 [M-56+ACN+H] ⁺。

步驟 C ： 3-(3-( 三甲基甲矽烷基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 氮雜環丁烷

在室溫下，向3-(3-(三甲基甲矽烷基)丙-2-炔-1-基)氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯(4.0 g，14.96 mmol)在二噁烷(12 mL)中的溶液中添加HCl-二噁烷(4 M，12 mL)。在10~20℃下將所得混合物攪拌3 h。將反應混合物減壓濃縮至乾燥以提供3-(3-(三甲基甲矽烷基)丙-2-炔-1-基)氮雜環丁烷，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z 168.2 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 3-(3-( 三甲基甲矽烷基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 )-[1,3'- 聯氮雜環丁烷 ]-1'- 甲酸叔丁酯

在10~20℃下，向3-(3-(三甲基甲矽烷基)丙-2-炔-1-基)氮雜環丁烷(3.0 g)和3-氧代氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.52 g，14.72 mmol)在無水DCM (90 mL)中的溶液中一次性添加NaBH(OAc) ₃(9.36 g，44.16 mmol)。將所得混合物攪拌16 h。向混合物中添加3-氧代氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.52 g，14.72 mmol)和NaBH(OAc) ₃(1.56 g，7.36 mmol)。將所得混合物再攪拌3 h。將反應混合物用飽和NaHCO ₃溶液(45 mL)淬滅並用DCM (45 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(90 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並減壓濃縮至乾燥。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，200-300目，MeOH/DCM=0~10%)來純化以提供3-(3-(三甲基甲矽烷基)丙-2-炔-1-基)-[1,3'-聯氮雜環丁烷]-1'-甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 323.3 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 3-(3-( 三甲基甲矽烷基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 )-1,3'- 聯氮雜環丁烷

在室溫下，向3-(3-(三甲基甲矽烷基)丙-2-炔-1-基)-[1,3'-聯氮雜環丁烷]-1'-甲酸叔丁酯(2 g，6.20 mmol)在二噁烷(6 mL)中的溶液中添加HCl-二噁烷(4 M，6.00 mL)。在25℃下將所得混合物攪拌4 h。將反應混合物減壓濃縮至乾燥以提供呈粗產物形式的3-(3-(三甲基甲矽烷基)丙-2-炔-1-基)-1,3'-聯氮雜環丁烷，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z 223.2 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 2-(3-(3-( 三甲基甲矽烷基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 )-[1,3'- 聯氮雜環丁烷 ]-1'- 基 ) 乙酸叔丁酯

在0~10℃下，向3-[1-(氮雜環丁烷-3-基)氮雜環丁烷-3-基]丙-1-炔基-三甲基-矽烷(1.6 g)在無水DMF (32 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(2.14 g，15.45 mmol)。在0~10℃下攪拌10 min之後，在0-10℃下添加2-溴乙酸叔丁酯(1.21 g，6.18 mmol)在CH ₃CN (1 mL)中的溶液。在80℃下將反應攪拌1 h。將反應混合物用H ₂O (100 mL)稀釋並用DCM (100 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(10 mL×1)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並在40℃下減壓濃縮至乾燥。將殘餘物通過柱色譜法(矽膠，200-300目，MeOH/DCM=0~10%)來純化。將洗脫物減壓濃縮。將所需洗脫物合併，並且減壓濃縮至乾燥以提供2-(3-(3-(三甲基甲矽烷基)丙-2-炔-1-基)-[1,3'-聯氮雜環丁烷]-1'-基)乙酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 337.2 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(1'-(2-( 叔丁氧基 )-2- 氧代乙基 )-[1,3'- 聯氮雜環丁烷 ]-3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在室溫下，向在50 mL燒瓶中的2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(330.00 mg，464.39 μmol)和2-(3-(3-(三甲基甲矽烷基)丙-2-炔-1-基)-[1,3'-聯氮雜環丁烷]-1'-基)乙酸叔丁酯(187.55 mg，557.27 μmol)在DMF (6.6 mL)中的溶液中添加Pd(PPh ₃) ₄(53.66 mg，46.44 μmol)、CuI (17.69 mg，92.88 μmol)和DIEA (180.06 mg，1.39 mmol，248.01 μL)。將燒瓶脫氣並用N ₂回填3次。添加TBAF (1 M，557.27 μL)。將燒瓶脫氣並用N ₂回填3次。在70℃下，在N ₂下，將所得混合物攪拌3 h。將反應混合物用H ₂O (100 mL)稀釋並用DCM (50 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並減壓濃縮至乾燥。將殘餘物通過製備型TLC (MeOH/DCM=1:30)來純化以提供2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-(3-(1'-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)-[1,3'-聯氮雜環丁烷]-3-基)丙-1-炔-1-基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 847.3 [M+H] ⁺, 424.5[M/2+H] ⁺。

步驟 H ： 2-(3-(3-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 )-[1,3'- 聯氮雜環丁烷 ]-1'- 基 ) 乙酸

在室溫下，向2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-(3-(1'-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)-[1,3'-聯氮雜環丁烷]-3-基)丙-1-炔-1-基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(150 mg，177.08 μmol)中添加HCOOH (5 mL)。在40℃下，在N ₂下，將所得混合物攪拌5 h。將反應混合物濃縮至乾燥以產生粗產物，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z 396.6 [M/2+H] ⁺。

步驟 I ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(1'-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-[1,3'- 聯氮雜環丁烷 ]-3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在室溫下，向2-(3-(3-(4-(3-(2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-4-(甲氧基羰基)噻唑-5-基)丙氧基)苯基)丙-2-炔-1-基)-[1,3'-聯氮雜環丁烷]-1'-基)乙酸(180.00 mg，227.58 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(212.57 mg，455.15 μmol，HCl鹽)在DCM (6 mL)中的溶液中添加DIEA (88.24 mg，682.73 μmol，121.54 μL)和HATU (173.06 mg，455.15 μmol)。在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將反應混合物減壓濃縮至乾燥。將殘餘物通過反相柱色譜法(C18-ODS，ACN/H2O (0.1% TFA))=0~100%)來純化以提供2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-(3-(1'-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-[1,3'-聯氮雜環丁烷]-3-基)丙-1-炔-1-基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 602.4 [M/2+H]+。

步驟 J ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1 H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(1'-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-[1,3'- 聯氮雜環丁烷 ]-3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

在室溫下，向2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-(3-(1'-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-[1,3'-聯氮雜環丁烷]-3-基)丙-1-炔-1-基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(60.00 mg，49.85 μmol)在THF (0.6 mL)和MeOH (0.6 mL)的混合物中的溶液中添加LiOH H ₂O (20.92 mg，498.55 μmol)。在25℃下將所得混合物攪拌4 h。將反應混合物減壓濃縮至乾燥。將殘餘物再溶解在DCM/MeOH (10:1)中，過濾並濃縮至乾燥。將殘餘物通過製備型HPLC (0.05% NH ₃H ₂O-10 mmol/L NH ₄HCO ₃-ACN，YMC-Actus Triart C18，150*20 mm，5 um)來純化並冷凍乾燥以提供2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-(3-(1'-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-[1,3'-聯氮雜環丁烷]-3-基)丙-1-炔-1-基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1189.7 [M+H] ⁺。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-D ₆) δ 8.96 (s, 1H), 8.60 (t, J= 5.9 Hz, 1H), 8.02 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.77 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.66 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 7.48-7.32 (m, 9H), 7.25 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 6.83 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 4.81 (s, 2H), 4.48 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.44-4.33 (m, 3H), 4.21-4.26(m, 1H), 3.95 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 3.71-3.55 (m, 6H), 3.16-2.95 (m, 12H), 2.66-2.53 (m, 3H), 2.43 (s, 3H), 2.06-1.85 (m, 4H), 1.22 (s, 2H), 0.90 (s, 9H)。

實施例 41 ：化合物 41

步驟 A ： 4-((2-( 叔丁氧基 )-2- 氧代乙氧基 ) 甲基 ) 呱啶 -1- 甲酸苯甲酯

向4-(羥基甲基)呱啶-1-甲酸苯甲酯(3 g，12.03 mmol)和2-溴乙酸叔丁酯(3.52 g，18.05 mmol)在甲苯(30 mL)中的溶液中添加TBAB (3.88 g，12.03 mmol)和NaOH (50%水溶液) (2.41 g，60.17 mmol)。在25℃下將所得混合物攪拌18 h。將反應混合物用水(100 mL)處理並用DCM (3×50 mL)萃取。將有機相用鹽水(2×100 mL)洗滌並真空濃縮以產生粗品。將殘餘物通過矽膠柱色譜法來純化，用PE:EA=5:1洗脫，以產生標題產物。LCMS: MS (ESI) M/Z 363.4 [M+H]

步驟 B ： 2-( 呱啶 -4- 基甲氧基 ) 乙酸叔丁酯

向4-((2-(叔丁氧基)-2-氧代乙氧基)甲基)呱啶-1-甲酸苯甲酯(1.2 g，3.30 mmol)在MeOH (50 mL)中的溶液中添加Pd/C (400 mg，10% w/w)。在25℃下，在H ₂下，將混合物攪拌4 h。將反應混合物經矽藻土墊過濾並將濾液真空濃縮以產生粗產物。LCMS: MS (ESI) M/Z 229.3 [M+H]。

步驟 C ： 2-((1-( 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 呱啶 -4- 基 ) 甲氧基 ) 乙酸叔丁酯

在0℃下，向2-(呱啶-4-基甲氧基)乙酸叔丁酯(740 mg)在THF (20 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(535.19 mg，3.87 mmol)。在0.1 h之後，添加3-溴丙-1-炔(460.66 mg，3.87 mmol)並在0℃下將混合物攪拌4 h。將反應混合物升溫至室溫，用水處理並用DCM萃取。將有機相用飽和NaCl洗滌並真空濃縮。將殘餘物通過製備型TLC (PE:EA=2:1)來純化以產生標題化合物。LCMS: MS (ESI) M/Z 267.4 [M+H]。

步驟 D. 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(4-((2-( 叔丁氧基 )-2- 氧代乙氧基 ) 甲基 ) 呱啶 -1- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向2-((1-(丙-2-炔-1-基)呱啶-4-基)甲氧基)乙酸叔丁酯(112.87 mg，422.18 μmol)、2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-碘苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯、CuI (40.20 mg，211.09 μmol)和Pd(PPh ₃) ₄(243.93 mg，211.09 μmol)在DMF (3 mL)中的溶液中添加DIEA (218.25 mg，1.69 mmol)。在60℃下將所得混合物攪拌16 h。在60℃下將所得混合物攪拌16 h。將反應濃縮並通過使用DCM/MeOH=25/1進行的製備型TLC來純化以提供標題化合物。LCMS: MS (ESI) M/Z 850.1 [M+1]。

步驟 E ： 2-((1-(3-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 呱啶 -4- 基 ) 甲氧基 ) 乙酸

在25℃下，將2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-(3-(4-((2-(叔丁氧基)-2-氧代乙氧基)甲基)呱啶-1-基)丙-1-炔-1-基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(200 mg，235.28 μmol)在FA (5 mL)中的溶液攪拌16 h。將混合物減壓濃縮以得到粗產物，其直接用於下一步驟中。LCMS: MS (ESI) M/Z 794.0 [M+H]/

步驟 F. 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(4-((2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙氧基 ) 甲基 ) 呱啶 -1- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-((1-(3-(4-(3-(2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-4-(甲氧基羰基)噻唑-5-基)丙氧基)苯基)丙-2-炔-1-基)呱啶-4-基)甲氧基)乙酸(180 mg)和(2S,4R)-1-((S)-2-氨基-3,3-二甲基丁醯基)-4-羥基-N-((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)吡咯烷-2-甲醯胺(112.56 mg)在DCM (8 mL)中的溶液中添加HATU (144.30 mg，379.8 μmol)和DIEA (81.65 mg，632.94 μmol)，並且在25℃下將所得混合物攪拌4 h。將反應用H ₂O (10 mL)淬滅，接著用DCM (3×10 mL)萃取，用鹽水(4×30 mL)洗滌。將有機層合併，並且濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用DCM:MeOH=1:1洗脫，以產生標題產物。LCMS: MS (ESI) M/Z 1220.5 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(4-((2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙氧基 ) 甲基 ) 呱啶 -1- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，向2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-(3-(4-((2-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)呱啶-1-基)丙-1-炔-1-基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(150 mg，122.90 μmol)在THF/MeOH/H2O (V1:V2:V3=2:2:1，3 mL)中的溶液中添加LiOH (25.78 mg，614.49 μmol)，在25℃下將所得混合物攪拌4 h。將反應濃縮，用1 N HCl將pH值調整至3，用DCM (25 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮。將獲得的殘餘物通過製備型HPLC (10 mmol/L NH ₄HCO ₃-ACN，66%-86%；YMC-Actus Triart C18，150*20 mm，5 um；流速：20 mL/min)來純化以產生標題產物。LCMS: MS (ESI) M/Z 1206.5 [M+H] ⁺。1H-NMR (400 MHz, DMSO-D ₆) δ 12.92 (brs, 1H), 10.04 (brs, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.83 (brs, 1H), 8.43 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 8.03 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.80 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.67 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.50-7.34 (m, 11H), 6.95 (d, J= 8.2 Hz, 2H), 4.93-4.83 (m, 3H), 4.58-4.54 (m, 1H), 4.44 (t, J= 8.1 Hz, 1H), 4.31 (s, 3H), 4.03-3.96 (m, 4H), 3.73-3.55 (m, 5H), 3.30-3.45 (m, 2H), 3.17 (t, J= 7.1 Hz, 2H), 3.11-3.03 (m, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.10-1.76 (m, 8H), 1.52 (d, J= 6.9 Hz, 2H), 1.48-1.44 (m, 2H), 1.36 (d, J= 6.6 Hz, 2H), 1.23 (s, 1H), 0.94 (s, 9H)

實施例 42 ：化合物 42

步驟 A ： 7- 氮雜螺 [3.5] 壬 -2- 酮鹽酸鹽

在室溫下，將2-氧代-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(4 g，16.71 mmol)在DCM (50 mL)和HCl/二噁烷(10 mL)中的溶液攪拌3 h。將反應混合物濃縮至乾燥，並且不經進一步純化即用於下一步驟中。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 2.97 (s, 4H), 2.86 (s, 4H), 1.84 (t, J = 4.0 Hz, 4H)。

步驟 B ： 2- 氧代 -7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸苯甲酯

在0℃下，向7-氮雜螺[3.5]壬-2-酮(2.9 g，HCl鹽)在THF (14 mL)中的溶液中添加CbzCl (5.07 g，29.72 mmol)和NaHCO ₃(1.39 g，16.51 mmol)，在0-20℃下將所得混合物攪拌2 h。將反應混合物用30 mL H ₂O淬滅。將所得溶液用EA (30 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮以產生粗產物。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 7.34 (m, 5H), 5.12 (s, 2H), 3.40(m, 4H),δ 2.80 (s, 4H), 1.70 (s, 4H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 274.2 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 2-( 甲氧基亞甲基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸苯甲酯

在N ₂下，向甲氧基甲基(三苯基)鏻(7.15 g)在THF (30 mL)中的溶液中添加t-BuOK (2.50 g，22.24 mmol，1.6當量)。將懸浮液在真空下脫氣並用N2吹掃數次。接著向混合物中添加2-氧代-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸苯甲酯(3.8 g，13.90 mmol，1.5當量)並在70℃下攪拌2 h。將反應混合物用20 mL H ₂O淬滅。將所得溶液用EA (20 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=5:1洗脫，以產生2-(甲氧基亞甲基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸苯甲酯。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.33 (m, 5H), 5.83 (s, 1H), 3.54-3.40 (m, 7H), 2.42-2.33 (m, 4H), 1.56 (s, 4H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 302.2 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 2- 甲醯基 -7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸苯甲酯

向2-(甲氧基亞甲基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸苯甲酯(4 g，13.27 mmol)在MeCN (8 mL)、H ₂O (2 mL)中的溶液中添加TFA (0.2 mL)並在室溫下將所得混合物攪拌2 h。將反應混合物用H ₂O (1 mL)稀釋並用飽和Na ₂CO ₃溶液將溶液的pH值調整至9。接著將它用EtOAc (10 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(10 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。殘餘物不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z 288.2 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 7-(( 苯甲基氧基 ) 羰基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸

在25℃下，向2-甲醯基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸苯甲酯(2.3 g)在MeCN (15 mL)和H ₂O (15 mL)中的溶液中添加KMnO ₄(1.90 g，12.01 mmol)，在室溫下將所得混合物攪拌2 h。將反應混合物濃縮。將反應混合物用H ₂O (3 mL)稀釋並用HCl水溶液(1 M)將溶液的pH值調整至3-4。接著將它用EtOAc (20 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮。將反應混合物真空乾燥以提供7-苯甲基氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 304.2 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2,7- 二甲酸 7- 苯甲酯 2- 叔丁酯

在室溫下，向7-苯甲基氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸(800 mg)和叔丁氧基羰基叔丁基碳酸酯(1.15 g，5.27 mmol)在DCM (20 mL)中的溶液中添加DMAP (161.09 mg，1.32 mmol)和TEA (533.72 mg，5.27 mmol)，在室溫下將混合物攪拌3 h。將混合物用5 mL H ₂O淬滅。將所得溶液用DCM (10 mL×3)萃取，將合併的有機層用鹽水(10 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=10:1洗脫，以產生7-氮雜螺[3.5]壬烷-2,7-二甲酸7-苯甲酯2-叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 360.2 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸叔丁酯

在20℃下，向7-氮雜螺[3.5]壬烷-2,7-二甲酸7-苯甲酯2-叔丁酯(1.7 g，4.73 mmol)在MeOH (30 mL)中的溶液中添加Pd/C (574.38 mg，10% w/w)。將懸浮液在真空下脫氣並用H ₂吹掃數次。在室溫下，在H ₂氣球下，將混合物攪拌2 h。將懸浮液經矽藻土過濾並將濾餅用MeOH (5 mL×3)洗滌。將合併的濾液濃縮至乾燥以產生標題化合物。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2.96-2.756 (m, 5H), 1.994-1.952 (m, 4H), 1.588-1.512 (m, 5H), 1.42 (s, 9H)。

步驟 H ： 7-( 丙 -2- 炔 -1- 基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸叔丁酯

在0℃下，向7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(860 mg，3.82 mmol，1當量)和3-溴丙-1-炔(454.03 mg，3.82 mmol，1當量)在DMF (10 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(1.06 g，7.63 mmol，2當量)，在20℃下將所得混合物攪拌0.5 h。將反應混合物用10 mL H ₂O淬滅。將所得溶液用DCM (10 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(10 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮。粗產物不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z 264.3 [M+H] ⁺。

步驟 I ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(2-( 叔丁氧基羰基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向7-丙-2-炔基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(277.98 mg)和2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(500 mg，703.63 μmol)在DMF (8 mL)中的溶液中添加DIPEA (363.75 mg，2.81 mmol)、CuI (67.00 mg，351.81 μmol)和Pd(PPh ₃) ₄(406.54 mg，351.81 μmol)，在60℃下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌3 h。添加水(20 mL)並將混合物用DCM (20 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用DCM:MeOH=20:1洗脫，以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-(2-叔丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 846.6 [M+H] ⁺。

步驟 J ： 7-(3-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸

在40℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-(2-叔丁氧基羰基-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基)丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(230 mg，271.85 μmol)在FA (5 mL)中的溶液攪拌1 h。將反應混合物濃縮至乾燥，並且不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z 790.3 [M+H] ⁺。

步驟 K ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在20℃下，向7-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸(150 mg)和DIPEA (368.11 mg，2.85 mmol)在DMF (8 mL)中的溶液中添加HATU (144.31 mg，379.77 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(422.10 mg，949.42 μmol)，在20℃下將所得混合物攪拌3 h。添加水(20 mL)並將混合物用DCM (20 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將殘餘物通過反相製備型HPLC (製備型C18，20-45 μM，120 g，Tianjin Bonna-Agela Technologies；在7 min時間段內35% MeCN/水至43% MeCN/水的梯度洗脫，其中兩種溶劑均含有0.1%甲酸)來純化以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 608.8 [M/2+H] ⁺。

步驟 L ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 )-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(100 mg，82.20 μmol)在THF (4 mL)、MeOH (4 mL)和H ₂O (4 mL)中的溶液中添加LiOH (19.69 mg，822.01 μmol)，在25℃下將所得混合物攪拌3 h。將反應混合物用H ₂O (4 mL)稀釋並用HCl水溶液(1 M)將溶液的pH值調整至4-5。將反應混合物過濾並將沉澱的固體用H ₂O (5 mL×3)洗滌，並且真空乾燥以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-D ₆) δ 8.94 (s, 1H), 8.34 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.84 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 7.78-7.74 (m, 2H), 7.62 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.54-7.28 (m, 9H), 7.23-7.18 (m, 2H), 6.82-6.76 (m, 2H), 4.91-4.84 (m, 1H), 4.75 (s, 2H), 4.49-4.44 (m, 1H), 4.23 (s, 1H), 3.91 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.77 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.58 (s, 2H), 3.21-2.98 (m, 5H), 2.64-2.61 (m, 1H), 2.40 (d, J= 8.0 Hz, 3H), 2.34-2.28 (m, 2H), 2.23-1.90 (m, 4H), 1.78-1.72 (m, 1H), 1.52-1.12 (m, 14H), 0.97-0.88 (m, 12H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1202.6 [M+H] ⁺。

實施例 43 ：化合物 43

步驟 A ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基甲醯基 ]-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在20℃室溫下，向7-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸(170 mg，215.20 μmol)和DIPEA (278.13 mg，2.15 mmol)在DMF (8 mL)中的溶液中添加HATU (122.66 mg，322.80 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(138.99 mg，322.80 μmol)，在室溫下將所得混合物攪拌3 h。添加水(30 mL)並用EA (20 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮。將殘餘物通過用DCM: MeOH=20:1進行的製備型TLC來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 609.9 [M/2+H] ⁺。

步驟 B ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基甲醯基 ]-7- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸

在室溫下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(100 mg，83.16 μmol)在THF (0.5 mL)/MeOH (0.5 mL)/H ₂O (0.5 mL)中的溶液中添加LiOH (19.92 mg，831.60 μmol)，在25℃下將所得混合物攪拌3 h。將反應混合物用H ₂O (4 mL)稀釋並用HCl水溶液(1 M)將溶液的pH值調整至4-5。將反應混合物過濾並將沉澱的固體用H ₂O (5 mL×3)洗滌，並且真空乾燥以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。1H-NMR (400 MHz, DMSO-D ₆) δ 12.59-13.28 (s, 1H), 9.89 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.53 (m, 1H), 7.99 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.77-7.63 (m, 3H), 7.47-7.30 (m, 10H), 6.92-6.87 (m, 2H), 4.79 (s, 2H), 4.51-4.15 (m, 7H), 3.99-3.92 (m, 2H), 3.70-3.38 (m, 6H), 3.22-2.61 (m, 7H), 2.39 (s, 3H), 2.09-1.59 (m, 12H), 1.19 (s, 1H), 0.93-0.79 (m, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1188.6 [M+H] ⁺。

實施例 44 ：化合物 44

向2-氯-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(1 g，4.24 mmol)和2-氟-4-碘-苯酚(1.01 g，4.24 mmol)在THF (20 mL)中的溶液中添加PPh ₃(1.11 g，4.24 mmol)和DEAD (738.92 mg，4.24 mmol)。在室溫下將混合物攪拌4 h。將反應混合物用水(100 mL)處理並用EA (3×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮以產生粗品。將粗品通過快速柱色譜法(EA/PE=0~10%)來純化以產生標題化合物。LC/MS: MS (ESI) M/Z: 456.0 [M+H] ⁺。

向N-(1,3-苯並噻唑-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醯胺(857.65 mg，2.48 mmol，HCl鹽)和2-氯-5-[3-(2-氟-4-碘-苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(1.13 g，2.48 mmol)在DMA (10 mL)中的溶液中添加KI (411.66 mg，2.48 mmol)和Cs ₂CO ₃(2.42 g，7.44 mmol)。在70℃下將混合物攪拌18 h。將反應混合物用水(100 mL)處理並用EA (3×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮。將殘餘物通過快速柱色譜法(MeOH/DCM=0~90%)和製備型TLC (DCM:MeOH=70:1)來純化以提供標題化合物。LC/MS: MS (ESI) M/Z:728.9 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[9-(2- 叔丁氧基 -2- 氧代 - 乙基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ] 丙 -1- 炔基 ]-2- 氟 - 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(2-氟-4-碘-苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(450 mg，617.63 μmol)和2-(3-丙-2-炔基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙酸叔丁酯(282.98 mg，926.44 μmol)在DMF (8 mL)中的溶液中添加CuI (47.05 mg，247.05 μmol)、Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(86.69 mg，123.53 μmol)和DIEA (239.47 mg，1.85 mmol)。將混合物脫氣並用N ₂回填6次。在60℃下將所得混合物攪拌1 h。將反應混合物用水(100 mL)處理並用EA (5×50 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮以產生粗品。將粗品通過製備型TLC (DCM:MeOH=20:1)來純化以提供標題化合物。LC/MS: MS (ESI) M/Z: 454.0 [M/2+H] ⁺。

步驟 D ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(9-( 羧基甲基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 )-2- 氟苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

在40℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[9-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]-2-氟-苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(290 mg，320.04 μmol)在FA (3 mL)中的溶液攪拌4 h。將反應混合物真空濃縮以產生2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-(3-(9-(羧基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)丙-1-炔-1-基)-2-氟苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸。粗產物不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z: 851.5 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氟 -4-(3-(9-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[3-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]-3-氟-苯基]丙-2-炔基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基]乙酸(100 mg，117.64 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(274.71 mg，588.21 μmol，HCl鹽)在DCM (3 mL)中的溶液中添加HATU (223.66 mg，588.21 μmol)和DIEA (152.04 mg，1.18 mmol)。在室溫下將混合物攪拌2 h。將反應混合物用水(50 mL)處理並用DCM (3×20 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮以產生粗品。將粗品通過製備型TLC (MeOH/DCM=10:1)來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氟-4-[3-[9-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z: [M/2+H] ⁺。

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氟 -4-(3-(9-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氟-4-[3-[9-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(75 mg，59.40 μmol)在THF (1 mL)、MeOH (1 mL)和H ₂O (0.5 mL)中的溶液中添加LiOH(142.69 mg，1.78 mmol)。在室溫下將混合物攪拌2 h。用0.1 M HCl溶液將反應混合物的pH值調整至pH=3並用DCM (25 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮。將獲得的殘餘物通過製備型HPLC (10 mmol/L NH ₄HCO ₃-ACN，66%-86%；YMC-Actus Triart C18，150*20 mm，5 um；流速：20 mL/min)來純化。將洗脫物真空濃縮並冷凍乾燥以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氟-4-[3-[9-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。1H-NMR (400 MHz, DMSO-D ₆) δ 9.97 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.47-8.56 (m, 1H), 7.99 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.80-7.74 (m, 2H), 7.63 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.45-7.30 (m, 9H), 7.27-7.23 (m, 1H), 7.15-7.10 (m, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.51 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 4.42-4.36 (m, 2H), 4.29 (d, J= 18.0 Hz, 3H), 4.18 (dd, J= 15.6, 5.6 Hz, 1H), 4.06 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.68 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.62 (s, 2H), 3.38 (s, 2H), 3.15-2.97 (m, 6H), 2.40 (s, 3H), 2.18 (dd, J= 13.6, 7.6 Hz, 1H), 2.01-1.83 (m, 7H), 1.61-1.45 (m, 5H), 1.32-1.19 (m, 4H), 1.06-0.98 (m, 3H), 0.90 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z: 1248.70 [M+H] ⁺。

實施例 45 ：化合物 45

步驟 A ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氟 -4-(3-(9-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[3-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]-3-氟-苯基]丙-2-炔基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基]乙酸(140 mg，164.70 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(118.84 mg，247.05 μmol，HCl鹽)在DCM (3 mL)中的溶液中添加HATU (93.94 mg，247.05 μmol)和DIEA (63.86 mg，494.10 μmol)。在室溫下將混合物攪拌2 h。將反應混合物用水(50 mL)處理並用DCM(3×20 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮以產生粗品。將粗品通過製備型TLC (MeOH/DCM=10:1)來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氟-4-[3-[9-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z: 1277.8 [M+H]/ ⁺。

步驟 B ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氟 -4-(3-(9-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氟-4-[3-[9-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(100 mg，78.33 μmol)在THF (1 mL)、MeOH (1 mL)和H ₂O (0.5 mL)中的溶液中添加LiOH.H ₂O (52.28 mg，2.38 mmol)。在室溫下將混合物攪拌2 h。用0.1 M HCl溶液將反應混合物的pH值調整至pH=3並用DCM (25 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮。將獲得的殘餘物通過製備型HPLC (10 mmol/L NH ₄HCO ₃-ACN，66%-86%；YMC-Actus Triart C18，150*20 mm，5 um；流速：20 mL/min)來純化。將洗脫物真空濃縮並冷凍乾燥以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氟-4-[3-[9-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。1H-NMR (400 MHz, DMSO-D ₆) δ 12.92 (s, 0H), 10.00 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.38 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 8.04 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.80 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.68 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.50-7.29 (m, 10H), 7.18 (t, J= 8.8 Hz, 1H), 4.95-4.88 (m, 1H), 4.84 (s, 2H), 4.53 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 4.42 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 4.30 (d, J= 11.6 Hz, 3H), 4.10 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.72 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.61 (s, 2H), 3.42 (s, 2H), 3.20-3.02 (m, 6H), 2.46 (s, 3H), 2.21 (dd, J= 13.6, 7.7 Hz, 1H), 2.05-1.99 (m, 6H), 1.83-1.46 (m, 5H), 1.38 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 1.34-1.23 (m, 4H), 1.11-1.05 (m, 3H), 0.94 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z: 632.5 [M/2+H] ⁺。

實施例 46 ：化合物 46

步驟 A ： 7-(2- 氯嘧啶 -5- 基 ) 庚 -6- 烯酸

向5-溴-2-氯-嘧啶(9.06 g，46.81 mmol)、庚-6-烯酸(5 g，39.01 mmol)在DMF (50 mL)中的溶液中添加PPh ₃(511.60 mg，1.95 mmol)、Pd(OAc) ₂(437.92 mg，1.95 mmol)、TEA (11.84 g，117.03 mmol)，在100℃下將混合物攪拌3 h。將水(100 mL)添加至反應混合物中。將所得溶液用EA (4×40 mL)萃取。將合併的有機層用水(2×50 mL)和鹽水(70 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化，用(3:1 PE:EtOAc)洗脫，以產生7-(2-氯嘧啶-5-基)庚-6-烯酸。LC/MS: 241.1 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 7-(2- 氯嘧啶 -5- 基 ) 庚 -6- 烯酸叔丁酯

向7-(2-氯嘧啶-5-基)庚-6-烯酸(3 g，12.46 mmol)在DCM (35 mL)中的溶液中添加叔丁醇(923.88 mg，12.46 mmol，20 mL)、DCC (7.72 g，37.39 mmol)和DMAP (1.52 g，12.46 mmol)。在15℃下將混合物攪拌16 h。將水(30 mL)添加至反應混合物中。將所得溶液用DCM (4×30 mL)萃取。將合併的有機層用水(2×20 mL)和鹽水(30 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用(3:1 PE:EtOAc)洗脫，以產生-(2-氯嘧啶-5-基)庚-6-烯酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 297.2 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 7-(2-(4- 羥基苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 庚 -6- 烯酸叔丁酯

向(4-羥基苯基)硼酸(1.27 g，9.20 mmol)、(E)-7-(2-氯嘧啶-5-基)庚-6-烯酸叔丁酯(2.1 g，7.08 mmol)在H ₂O (1.5 mL)、二噁烷(8 mL)中的溶液中添加Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(496.64 mg，707.57 μmol)和Na ₂CO ₃(1.87 g，17.69 mmol)，在90℃ (或80℃)下，在N ₂下，將混合物攪拌4 h。將水(30 mL)添加至反應混合物中。將所得溶液用EA (3×30 mL)萃取。將合併的有機層用水(2×30 mL)和鹽水(30 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用(3:1 PE:EtOAc)洗脫，以產生7-(2-(4-羥基苯基)嘧啶-5-基)庚-6-烯酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 355.2 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 7-(2-(4- 羥基苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 庚酸叔丁酯

向7-(2-(4-羥基苯基)嘧啶-5-基)庚-6-烯酸叔丁酯(500 mg，1.41 mmol)在EA (10 mL)中的溶液中添加Pd/C (50 mg，10%純度)，在10℃下，在H ₂(15 psi)下，將混合物攪拌0.5 h。將懸浮液經矽藻土過濾並將濾餅用EA (2×10 mL)洗滌。將合併的濾液濃縮以產生7-(2-(4-羥基苯基)嘧啶-5-基)庚酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 357.2 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 5-(3-(4-(5-(7-( 叔丁氧基 )-7- 氧代庚基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 )-2- 氯噻唑 -4- 甲酸甲酯

向7-[2-(4-羥基苯基)嘧啶-5-基]庚酸叔丁酯(300 mg，841.62 μmol)、2-氯-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(198.36 mg，841.62 μmol)在THF (8 mL)中的溶液中添加PPh ₃(375.26 mg，1.43 mmol)，接著逐滴添加DEAD (249.17 mg，1.43 mmol)。在15℃下將混合物攪拌2 h。將水(30 mL)添加至反應混合物中。將所得溶液用EA (4×30 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用(20:1 PE:EtOAc)洗脫，以產生5-(3-(4-(5-(7-(叔丁氧基)-7-氧代庚基)嘧啶-2-基)苯氧基)丙基)-2-氯噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 574.2 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(5-(7-( 叔丁氧基 )-7- 氧代庚基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向N-(1,3-苯並噻唑-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醯胺(118.55 mg，383.19 μmol)、5-[3-[4-[5-(7-叔丁氧基-7-氧代-庚基)嘧啶-2-基]苯氧基]丙基]-2-氯-噻唑-4-甲酸甲酯(200 mg，348.35 μmol)在二噁烷(10 mL)中的溶液中添加SPhos (14.30 mg，34.84 μmol)、t-BuOK (58.63 mg，522.53 μmol)和Pd ₂(dba) ₃(20.03 mg，34.84 μmol)，在90℃下將混合物攪拌6 h。將水(30 mL)添加至反應混合物中。將所得溶液用EA (3×30 mL)萃取。將合併的有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗產物通過製備型TLC (1:1 PE:EtOAc)來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-(7-叔丁氧基-7-氧代-庚基)嘧啶-2-基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 847.3 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 7-(2-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ) 庚酸

在40℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-(7-叔丁氧基-7-氧代-庚基)嘧啶-2-基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(150 mg，177.08 μmol)在FA (5 mL)中的溶液攪拌1 h。將混合物減壓濃縮以產生7-[2-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]嘧啶-5-基]庚酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 791.3 [M+H] ⁺。

步驟 H ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(5-(7-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-7- 氧代庚基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向7-[2-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]嘧啶-5-基]庚酸(130 mg)在DMF (7 mL)中的溶液中添加HATU (93.69 mg，246.54 μmol)和DIEA (106.01 mg，821.80 μmol)，在15℃下將混合物攪拌0.5 h。接著添加(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(87.69 mg，197.23 μmol)。在15℃下將混合物再攪拌2 h。將水(30 mL)添加至反應混合物中。將所得溶液用EA (4×30 mL)萃取。將合併的有機層用水(2×30 mL)和鹽水(30 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗產物通過製備型HPLC (0.1% TFA-ACN，Xselect CSH製備型氟苯基柱，150*19 mm，5 um，20 33.0-63.0 13 9.1)來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-[7-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-7-氧代-庚基]嘧啶-2-基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 609.5 [M/2+H] ⁺。

步驟 I ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(5-(7-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-7- 氧代庚基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

在室溫下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-[7-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-7-氧代-庚基]嘧啶-2-基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(0.11 g，90.35 μmol)在THF (1.5 mL)/MeOH (1.5 mL)/H ₂O (1.5 mL)中的溶液中添加LiOH (113.84 mg，2.71 mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌1 h。將混合物真空濃縮，添加水(3 mL)，接著使用1 M HCl將pH值調整至3。將混合物過濾並將濾餅真空濃縮以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-[7-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-7-氧代-庚基]嘧啶-2-基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 12.52-13.25 (brs,1H), 8.94 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.33 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.99 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 7.63 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.45-7.29 (m, 9H), 6.98 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 4.87 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 4.80 (s, 2H), 4.50-4.43 (m, 1H), 4.38 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.02 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.68 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.56 (s, 2H), 3.16 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.98 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.63-2.52 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.29-1.94 (m, 7H), 1.78-1.72 (m, 1H), 1.55-1.19 (m, 12H), 0.89 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1203.7 [M+H] ⁺。

實施例 47 ：化合物 47

步驟 A ： 2- 氮雜螺 [3.5] 壬 -7- 酮鹽酸鹽

在25℃下，向7-氧代-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(5.00 g，20.92 mmol)在DCM (40 mL)中的溶液中添加HCl/二噁烷(4 M，6.27 mL)，在25℃下將所得混合物攪拌4 h。將反應混合物濃縮至乾燥，並且不經進一步純化即用於下一步驟中。

步驟 B ： 7- 氧代 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸苯甲酯

在0℃下，向2-氮雜螺[3.5]壬-7-酮鹽酸鹽(3.3 g)在無水THF (20 mL)中的溶液中添加NaHCO ₃(1.99 g，23.71 mmol)，並且在0℃下將反應混合物攪拌30 min。接著添加氯甲酸苯甲酯(7.28 g，42.67 mmol)並在25℃下將混合物再攪拌2 h。將反應用H ₂O (10 mL)淬滅，接著用DCM (3×10 mL)萃取。將有機層合併，並且濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=1:1洗脫，以產生7-氧代-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸苯甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 274.2 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 7-( 甲氧基亞甲基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸苯甲酯

在25℃下，在氮氣氛圍下，向(甲氧基甲基)三苯基鏻(6.21 g，18.11 mmol)在無水THF (20 mL)中的溶液中添加t-BuOK (2.16 g，19.32 mmol)，並且在25℃下將反應混合物攪拌30 min。接著添加7-氧代-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸苯甲酯(3.3 g，12.07 mmol)在無水THF (20 mL)中的溶液並在70℃下，在氮氣氛圍下，將混合物再攪拌1 h。在冷卻至25℃之後，將反應用H ₂O (10 mL)淬滅，接著用DCM (3×10 mL)萃取。將有機層用鹽水(4×10 mL)洗滌並濃縮。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=10:1洗脫，以產生7-(甲氧基亞甲基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸苯甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 302.2 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 7- 甲醯基 -2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 甲酸苯甲酯

在25℃下，向7-(甲氧基亞甲基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸苯甲酯(2.2 g，7.30 mmol)在ACN (8 mL)和水(2 mL)中的溶液中添加TFA (832.34 mg，7.30 mmol，1 mL)，並且在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將反應用DCM (3×10 mL)萃取。將有機層合併，並且濃縮至乾燥，殘餘物不經進一步純化即用於下一步驟。LC/MS: MS (ESI) M/Z 288.2 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 2-(( 苯甲基氧基 ) 羰基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸

在25℃下，向7-甲醯基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸苯甲酯(2.0 g，6.96 mmol)在丙酮(10 mL)和水(10 mL)中的溶液中添加KMnO ₄(1.65 g，10.44 mmol)，在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將反應混合物過濾並將濾液真空乾燥以提供2-苯甲基氧基羰基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z 304.2 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2,7- 二甲酸 2- 苯甲酯 7- 叔丁酯

在25℃下，向2-苯甲基氧基羰基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸(1.1 g)和二碳酸二叔丁酯(3.17 g，14.50 mmol)在DCM (20 mL)中的溶液中添加DMAP (221.50 mg，1.81 mmol)和TEA (1.47 g，14.50 mmol)，在25℃下將所得混合物攪拌16 h。將反應用H ₂O (10 mL)淬滅，接著用DCM (3×10 mL)萃取，用鹽水(4×30 mL)洗滌。將有機層合併，並且濃縮。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=10:1洗脫，以產生2-氮雜螺[3.5]壬烷-2,7-二甲酸2-苯甲酯7-叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 360.2 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸叔丁酯

在N ₂下，向2-氮雜螺[3.5]壬烷-2,7-二甲酸2-苯甲酯7-叔丁酯(0.3 g，834.59 μmol，1.0當量)在乙酸乙酯(60 mL)中的溶液中添加Pd/C (88.47 mg，10% w/w)。將懸浮液在真空下脫氣並用H ₂吹掃數次。在25℃下，在H ₂氣球下，將混合物攪拌1 h。將懸浮液經矽藻土過濾並將濾餅用EA (10 mL×2)洗滌。將合併的濾液濃縮至乾燥以產生2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 226.3 [M+H] ⁺。

步驟 H ： 2-( 丙 -2- 炔 -1- 基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸叔丁酯

在0℃下，向2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(0.188 g)和3-溴丙-1-炔(99.25 mg，834.35 μmol)在DMF (2 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(230.28 mg，1.67 mmol)，並且在25℃下將所得混合物攪拌0.3 h。將反應用H ₂O (10 mL)淬滅，接著用DCM (3×10 mL)萃取，用鹽水(4×30 mL)洗滌。將有機層合併，並且濃縮以產生2-(丙-2-炔-1-基)-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 264.3 [M+H] ⁺。

步驟 I ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(7-( 叔丁氧基羰基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(0.17 g，239.23 μmol)和2-丙-2-炔基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(126.02 mg，478.47 μmol)在DMF (3 mL)中的溶液中添加CuI (22.78 mg，119.62 μmol)、Pd(PPh ₃) ₄(138.28 mg，119.62 μmol)和DIEA (123.44 mg，956.93 μmol)，並且在50℃下，在N ₂中，將所得混合物攪拌1.5 h。將反應用H ₂O (10 mL)淬滅，接著用DCM (3×10 mL)萃取，用鹽水(4×10 mL)洗滌。將有機層合併，並且濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用DCM:MeOH=20:1洗脫，以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-(7-叔丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 846.5 [M+H] ⁺。

步驟 J ： 2-(3-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -7- 甲酸

在40℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-(7-叔丁氧基羰基-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(0.07 g，82.74 μmol)在FA (3 mL)中的溶液攪拌3 h。將反應混合物濃縮至乾燥，並且殘餘物不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z 790.4 [M+H] ⁺。

步驟 K ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3-[7-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基甲醯基 ]-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 ] 丙 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向2-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]-2-氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸(0.05 g)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(112.56 mg，253.18 μmol)在DMF (3 mL)中的溶液中添加HATU (48.10 mg，126.59 μmol)和DIEA (81.65 mg，632.94 μmol)，並且在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將反應用H ₂O (10 mL)淬滅，接著用DCM (3×10 mL)萃取，用鹽水(4×30 mL)洗滌。將有機層合併，並且濃縮。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化，用DCM:MeOH=1:1洗脫，以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[7-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z 608.9 [M/2+H] ⁺。

步驟 L ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(7-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 )-2- 氮雜螺 [3.5] 壬烷 -2- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[7-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(0.06 g，49.32 μmol)在THF (1.5 mL)、MeOH (1.5 mL)和H ₂O (1.5 mL)中的溶液中添加LiOH/H ₂O (62.14 mg，1.48 mmol)。在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將反應混合物濃縮並經受反相製備型以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[7-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-2-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ12.95 (s, 1H), 10.62 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.35 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 7.60 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.0 Hz, 1H),7.72-7.67 (m, 2H), 7.50-7.23 (m, 10H), 6.97-6.94 (m, 2H), 5.16-4.90 (m, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.50-4.28 (m, 5H), 4.03-3.51 (m, 8H), 3.19-2.89 (m, 4H), 2.73-2.53 (m, 1H), 2.47-2.28 (m, 6H), 2.07-1.99 (m, 4H), 1.83-1.23 (m, 11H), 0.93 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z 1202.7 [M+H] ⁺。

實施例 48 ：化合物 48

步驟 A ： 2- 氯 -5-[3-(3- 氟 -4- 碘 - 苯氧基 ) 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在20-30℃下，向2-氯-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(0.35 g，1.49 mmol)、3-氟-4-碘-苯酚(424.12 mg，1.78 mmol)和PPh ₃(505.80 mg，1.93 mmol)在THF (4 mL)中的溶液中逐滴添加DEAD (310.07 mg，1.78 mmol)，並且在20-30℃下將混合物攪拌2 h。將產物通過製備型TLC來純化以獲得2-氯-5-[3-(3-氟-4-碘-苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z 456 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-(3- 氟 -4- 碘 - 苯氧基 ) 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在20℃下，向2-氯-5-[3-(3-氟-4-碘-苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(0.2 g，438.91 μmol)和N-(1,3-苯並噻唑-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醯胺(203.69 mg，658.37 μmol)在DMA (2 mL)中的溶液中添加Cs ₂CO ₃(429.26 mg，1.32 mmol)和KI (72.86 mg，438.91 μmol)，在70℃下將混合物攪拌18 h。將反應混合物用水淬滅並用EA萃取，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾，濃縮。將殘餘物通過製備型TLC來純化以獲得2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(3-氟-4-碘-苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 729 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 9-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ]-2- 氟 - 苯基 ] 壬 -8- 炔酸

在20-30℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(3-氟-4-碘-苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(0.14 g，192.15 μmol)和壬-8-炔酸(59.26 mg，384.30 μmol)在DMF (1 mL)中的溶液中添加DIEA (74.36 mg，576.45 μmol)、CuI (14.64 mg，76.86 μmol)和Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(26.94 mg，38.43 μmol)，並且在20-30℃下將混合物攪拌2 h。將反應混合物用水淬滅並用EA萃取，濃縮溶劑。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化以獲得9-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]-2-氟-苯基]壬-8-炔酸。LCMS: MS (ESI) M/Z: 755 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[3- 氟 -4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-9- 氧代 - 壬 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在20-30℃下，向9-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]-2-氟-苯基]壬-8-炔酸(0.14 g，185.46 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(103.94 mg，222.55 μmol，HCl鹽)在DMF (2 mL)中的溶液中添加HATU (84.57 mg，222.55 μmol)和DIEA (56.19 mg，450.22 μmol)，並且在25℃下將混合物攪拌2 h。將反應混合物用水淬滅並用EA萃取，濃縮溶劑。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[3-氟-4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-9-氧代-壬-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1167 [M+H] ⁺

步驟 E ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[3- 氟 -4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-9- 氧代 - 壬 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[3-氟-4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-9-氧代-壬-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(0.08 g，68.53 μmol)和NaOH水溶液(2 N，0.35 mL)在H ₂O (0.8 mL)和THF (0.8 mL)中的溶液攪拌5 h。將反應混合物用稀HCl淬滅並將產物通過製備型HPLC來純化以獲得2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[3-氟-4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-9-氧代-壬-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。1H-NMR (400 MHz, DMSO-D ₆) δ 8.94 (d, J= 4.9 Hz, 1H), 8.51 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 7.99 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 7.81-7.74 (m, 2H), 7.63 (d, J= 6.6 Hz, 1H), 7.46-7.24 (m, 10H), 6.80 (dd, J= 11.8, 2.5 Hz, 1H), 6.67 (dd, J= 8.5, 2.2 Hz, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.49 (t, J= 9.5 Hz, 1H), 4.42-4.31 (m, 3H), 4.18 (dd, J= 15.9, 5.5 Hz, 1H), 3.95 (q, J= 6.2 Hz, 2H), 3.69-3.59 (m, 4H), 3.12 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 2.99 (t, J= 5.9 Hz, 2H), 2.40-2.34 (m, 5H), 2.29-2.19 (m, 1H), 2.12-1.83 (m, 5H), 1.52-1.19 (m, 10H), 0.88 (d, J= 7.7 Hz, 9H)。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1154 [M+H] ⁺。

實施例 49 ：化合物 49

步驟 A ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[3- 氟 -4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-9- 氧代 - 壬 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在20-30℃下，向(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(28.27 mg，63.59 μmol)和9-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]-2-氟-苯基]壬-8-炔酸(0.04 g，52.99 μmol)在DMF (0.5mL)中的溶液中添加HATU (24.16 mg，63.59 μmol)和DIEA (20.51 mg，158.96 μmol)，並且在25℃下將混合物攪拌2 h。將反應混合物用水淬滅並用EA萃取，濃縮溶劑。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化以獲得2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[3-氟-4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-9-氧代-壬-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1181 [M+H] ⁺

步驟 B ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[3- 氟 -4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1R)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-9- 氧代 - 壬 -1- 炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[3-氟-4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-9-氧代-壬-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(50.60 mg，42.83 μmol)和NaOH水溶液(2 N，0.21 mL)在水(0.5 mL)和MeOH (0.5 mL)中的溶液攪拌3 h。將反應混合物用稀HCl淬滅並將產物通過製備型HPLC來純化以獲得2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[3-氟-4-[9-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1R)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-9-氧代-壬-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。1H-NMR (400 MHz, DMSO-D ₆) δ 8.94 (d, J= 6.9 Hz, 1H), 8.33 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 8.00 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.69 (dd, J= 49.3, 7.6 Hz, 3H), 7.45-7.26 (m, 10H), 6.82-6.66 (m, 2H), 4.89-4.79 (m, 3H), 4.49-4.36 (m, 2H), 3.96 (t, J= 6.0 Hz, 3H), 3.68 (t, J= 5.9 Hz, 2H), 3.56 (s, 2H), 3.14-2.97 (m, 4H), 2.63 (s, 1H), 2.41-2.35 (m, 5H), 2.29-2.06 (m, 2H), 1.99-1.92 (m, 3H), 1.78-1.72 (m, 1H), 1.50-1.19 (m, 12H), 0.84 (d, J= 39.0 Hz, 9H)。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1167 [M+H] ⁺。

實施例 50 ：化合物 50

步驟 A. 2- 氯 -5-(3-(2- 氯 -4- 碘苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向2-氯-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(650 mg，2.76 mmol)、2-氯-4-碘-苯酚(701.75 mg，2.76 mmol)和PPh ₃(723.35 mg，2.76 mmol)在THF (4 mL)中的溶液中添加DEAD (480.30 mg，2.76 mmol)，在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將混合物減壓濃縮以產生粗產物。將粗品通過矽膠柱色譜法來純化，用PE/EA=10:1洗脫，以產生標題化合物。LCMS: MS (ESI) M/Z 472.1 [M+H] ⁺

步驟 B ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氯 -4- 碘苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向2-氯-5-(3-(2-氯-4-碘苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(614.31 mg，1.30 mmol)、N-(1,3-苯並噻唑-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醯胺(450 mg，1.30 mmol，HCl鹽)在DMA (5 mL)中的溶液中添加KI (431.98 mg，2.60 mmol)和Cs ₂CO ₃(1.27 g，3.90 mmol)，並且在70℃下將所得混合物攪拌16 h。將混合物用EA (300 mL×3)萃取並經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮。將殘餘物通過矽膠柱色譜法來純化，用PE/EA=10/1洗脫，以產生標題化合物。LCMS: MS (ESI) M/Z: 745.0 [M+H] ⁺

步驟 C ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(9-(2-( 叔丁氧基 )-2- 氧代乙基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 )-2- 氯苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向2-(3-丙-2-炔基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙酸叔丁酯(166.04 mg，543.59 μmol)、Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(50.87 mg，72.48 μmol)、CuI (27.61 mg，144.96 μmol)和2-(3-丙-2-炔基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙酸叔丁酯(166.04 mg，543.59 μmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(2-氯-4-碘-苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(270 mg，362.39 μmol)、DIEA(188 mg，1.45 mmol)，在60℃下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌2 h。將混合物用EA (50 mL)稀釋。將有機層用H ₂O (300 mL)洗滌。將水層用EA (300 mL)萃取並經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮。將反應通過使用DCM/MeOH=20/1進行的製備型TLC來純化以提供標題化合物。LCMS: MS (ESI) M/Z: 922.6 [M+H] ⁺

步驟 D ： 2-(3-(3-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 )-3- 氯苯基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -9- 基 ) 乙酸

在25℃下，向2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-(3-(9-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)丙-1-炔-1-基)-2-氯苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(150 mg，162.59 μmol)在FA (3 mL)中的溶液中，在40℃下將所得混合物攪拌2 h。將混合物減壓濃縮以得到標題化合物，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS: MS (ESI) M/Z: 866.5 [M+H] ⁺

步驟 E ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氯 -4-(3-(9-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向2-(3-(3-(4-(3-(2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-4-(甲氧基羰基)噻唑-5-基)丙氧基)-3-氯苯基)丙-2-炔-1-基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙酸(80 mg)、(2S,4R)-1-((S)-2-氨基-3,3-二甲基丁醯基)-4-羥基-N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)吡咯烷-2-甲醯胺(64.68 mg，138.49 μmol，HCl鹽)和HATU (52.66 mg，138.57 μmol)在DCM (3 mL)中的溶液中添加DIEA (35.80 mg，276.98 μmol)，在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將反應減壓濃縮以產生粗產物。將粗產物通過使用DCM/MeOH=10/1進行的製備型TLC來純化以獲得標題化合物。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1279.0[M/2+H]

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氯 -4-(3-(9-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-2- 氧代乙基 )-3- 氮雜螺 [5.5] 十一烷 -3- 基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，向2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(2-氯-4-(3-(9-(2-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯甲基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-2-氧代乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)丙-1-炔-1-基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(56 mg，43.78 μmol)在THF/MeOH/H ₂O (V1:V2:V3=1:1:2，1.25 mL)中的溶液中添加LiOH (20.97 mg，875.66 μmol)，在25℃下，在N ₂中，將所得混合物攪拌3 h。將混合物用1 N HCl淬滅(pH值調整至約4)，接著將混合物濃縮，並且將粗反應混合物過濾並經受反相製備型HPLC (製備型C18，5 μM XBridge柱，19×150 mm， Waters；在7 min時間段內35% MeCN/水至43% MeCN/水的梯度洗脫，其中水含有0.1% TFA)以提供標題化合物。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1265.0[M/2+H]。1H-NMR (400 MHz, DMSO-D ₆) δ 12.87 (brs, 1H), 9.98 (brs, 1H), 8.95 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.81 (brs, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.00 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.80 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.64-7.56 (m, 2H), 7.46-7.30 (m, 9H), 7.11 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.56-4.50 (m, 1H), 4.42-4.06 (m, 7H), 3.69-3.59 (m, 4H), 3.39 (brs, 2H), 3.17-2.98 (m, 6H), 2.41 (s, 3H), 2.19-2.16 (m, 1H), 2.01-1.91 (m, 5H), 1.89-1.83 (m, 1H), 1.62-1.47 (m, 6H), 1.33-1.19 (m, 5H), 1.05-1.02 (m, 3H), 0.90 (s, 9H)

實施例 51 ：化合物 51 ( 化合物 51-A 和 51-B)

步驟 A ： 4- 羥基環己烷甲酸叔丁酯

在90℃下，在N ₂中，將1,1-二叔丁氧基-N,N-二甲基-甲胺(6.35 g，31.21 mmol)和4-羥基環己烷甲酸(3 g，20.81 mmol)在甲苯(30 mL)中的溶液攪拌12 h。蒸發混合物。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=10:1洗脫，以產生4-羥基環己烷甲酸叔丁酯。1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 1.94-2.07 (1H), 1.65-1.83 (6H), 1.38-1.48 (2H), 1.31-1.37 (9H), 1.17-1.31 (2H) LCMS: MS (ESI) M/Z: 215.2 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 4-( 烯丙基氧基 ) 環己烷甲酸叔丁酯

在25℃下，向4-羥基環己烷甲酸叔丁酯(100 mg，499.32 μmol)在THF (3 mL)中的溶液中添加NaH (39.95 mg，998.63 μmol，60%純度)，在20℃下將所得混合物攪拌30 min，接著添加3-溴丙-1-烯(72.49 mg，599.18 μmol)並在35℃下將混合物攪拌5 h。將反應混合物用H ₂O (3 mL)稀釋。接著將它用乙酸乙酯(10 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(10 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=10:1洗脫，以產生標題化合物。1H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 5.81-6.02 (1H), 5.10-5.34 (2H), 3.91-4.09 (2H), 3.16-3.33 (1H), 1.85-2.30 (5H), 1.19-1.52 (13H)。

步驟 C ： 4-(3- 羥基丙氧基 ) 環己烷甲酸叔丁酯

在25℃下，向4-烯丙基氧基環己烷甲酸叔丁酯(50 mg，208.04 μmol)在THF (2.44 mL)中的溶液中添加硼烷-四氫呋喃絡合物(1 M，416.08 μL，60%純度)，在25℃下將所得混合物攪拌1 h，接著在0℃下添加過氧化氫(536.09 mg，5.20 mmol，33%純度)和NaOH (10 M，145.63 μL)，並且在室溫下將混合物攪拌1 h。在冷卻至20℃之後，將反應混合物用飽和NH ₄Cl水溶液(30 mL)淬滅。將所得溶液用EA (10 mL×3)萃取。將合併的有機層用水(10 mL)和鹽水(10 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=1:1洗脫，以產生4-(3-羥基丙氧基)環己烷甲酸叔丁酯。1H-NMR (400 MHz, 氯仿-D) δ 3.58-3.71 (2H), 3.35-3.49 (2H), 1.93-2.09 (2H), 1.78-1.84 (1H), 1.49-1.70 (5H), 1.41-1.45 (9H), 1.30-1.41 (2H), 1.17-1.29 (2H)。

步驟 D ： 4-(3- 氧代丙氧基 ) 環己烷甲酸叔丁酯

在25℃下，向4-(3-羥基丙氧基)環己烷甲酸叔丁酯(35 mg，135.47 μmol)在DCM (3 mL)中的溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(Dess-Martin periodinane) (114.92 mg，270.95 μmol)，在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將混合物過濾，並且將有機層濃縮並用H ₂O (30 mL)稀釋，用EA (10 mL×3)萃取。將合併的有機層用水(30 mL)和鹽水(30 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮以產生粗產物。

步驟 E ： 4-( 丁 -3- 炔 -1- 基氧基 ) 環己烷甲酸叔丁酯

在25℃下，向1-重氮基-1-二甲氧基磷醯基-丙-2-酮(281.04 mg，1.46 mmol)在MeOH (3 mL)中的溶液中添加碳酸鉀(404.38 mg，2.93 mmol)，在20℃下將所得混合物攪拌30 min，添加4-(3-氧代丙氧基)環己烷甲酸叔丁酯(250 mg，975.28 μmol)並在25℃下將混合物攪拌16 h。將反應混合物用H ₂O (10 mL)稀釋。接著將它用乙酸乙酯(10 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(10 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮以產生粗產物。

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(4-((4-( 叔丁氧基羰基 ) 環己基 ) 氧基 ) 丁 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(100 mg，140.73 μmol)、4-丁-3-炔氧基環己烷甲酸叔丁酯(35.51 mg)和1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷絡合物(58.31 mg，70.36 μmol)在THF (20 mL)中的溶液中添加CuI (5.36 mg，28.15 μmol)和TEA (71.20 mg，703.63 μmol)，在室溫下，在N ₂中，將所得混合物攪拌1 h。將所得溶液用EA (10 mL×3)萃取。將合併的有機層經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮以產生粗產物。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=10:1洗脫，以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[4-(4-叔丁氧基羰基環己氧基)丁-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 835.6 [M+H] ⁺

步驟 G ： 4-((4-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 丁 -3- 炔 -1- 基 ) 氧基 ) 環己烷甲酸

在25℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[4-(4-叔丁氧基羰基環己氧基)丁-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(64 mg，76.64 μmol)在FA (3 mL)中的溶液攪拌6 h。蒸發混合物以產生粗產物。LCMS: MS (ESI) M/Z: 779.4 [M+H] ⁺。

步驟 H ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(4-((4-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ) 環己基 ) 氧基 ) 丁 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(77.05 mg，173.31 μmol)和4-[4-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丁-3-炔氧基]環己烷甲酸(135 mg)在DMF (5 mL)中的溶液中添加[二甲基氨基-(3-氧代-2,3-二氫三唑並[4,5-b]吡啶-3-鎓-1-基)亞甲基]-二甲基-六氟磷酸銨(131.80 mg，346.63 μmol)和DIPEA (112.00 mg，866.57 μmol)，在30℃下將所得混合物攪拌12 h。將所得溶液用EA (10 mL×3)萃取。將合併的有機層經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮以產生粗產物。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用DCM:MeOH=20:1洗脫，以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[4-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環己氧基]丁-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。將混合物通過HPLC來再純化以產生異構體1和異構體2。

步驟 I ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(4-((4-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ) 環己基 ) 氧基 ) 丁 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[4-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環己氧基]丁-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(化合物51，異構體1)在3 N NaOH (0.2 mL)/二噁烷(3 mL)中的溶液攪拌2 h。將所得溶液濃縮並用HCl (3 M)酸化直至PH約4，並且用EA (30 mL×3)萃取。將合併的有機層經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮以產生粗產物。將粗產物通過HPLC來純化以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[4-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環己氧基]丁-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。

(化合物51，異構體1)。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1191.7 [M+1] ⁺。1H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 8.92-8.98 (m, 1H), 8.31-8.42 (m, 1H), 7.94-8.05 (m, 1H), 7.57-7.79 (m, 3H), 7.19-7.47 (m, 11H), 6.78-6.89 (m, 2H), 6.56-6.64 (m, 1H), 5.04-5.33 (m, 1H), 4.74-4.92 (m, 3H), 4.34-4.48 (m, 2H), 4.18-4.27 (m, 1H), 3.88-3.99 (m, 2H), 3.63-3.73 (m, 2H), 3.47-3.60 (m, 3H), 3.08-3.16 (m, 1H), 2.95-3.03 (m, 1H), 1.91-2.03 (m, 6H), 1.56-1.80 (m, 3H), 1.02-1.43 (m, 16H), 0.79-0.95 (m, 9H)；HPLC：RT=9.652 min，方法：1.0 ml-15 min-5-70-95% ACN-H3PO4。

按照與以上所述類似的程式，使用2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[4-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環己氧基]丁-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(化合物51，異構體2)作為起始物質，製備2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[4-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]環己氧基]丁-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸(化合物51，異構體2)。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1191.7 [M+H] ⁺。1H-NMR (400 MHz, DMSO-D ₆) δ 8.91-8.97 (m, 1H), 8.29-8.39 (m, 1H), 7.96-8.04 (m, 1H), 7.72-7.79 (m, 1H), 7.51-7.66 (m, 2H), 7.14-7.47 (m, 11H), 6.78-6.87 (m, 2H), 6.55-6.67 (m, 1H), 5.21-5.38 (m, 1H), 5.03-5.13 (m, 1H), 4.76-4.90 (m, 2H), 4.32-4.49 (m, 2H), 4.20-4.30 (m, 1H), 3.87-4.00 (m, 2H), 3.63-3.80 (m, 2H), 3.44-3.59 (m, 3H), 3.09-3.15 (m, 1H), 2.96-3.01 (m, 1H), 1.88-2.02 (m, 4H), 1.57-1.84 (m, 5H), 1.29-1.39 (m, 5H), 1.17-1.24 (m, 11H), 0.78-0.92 (m, 9H)；HPLC：RT=9.998 min，方法：1.0 ml-15 min-5-70-95% ACN-H3PO4。

實施例 53 ：化合物 53

步驟 A ： 1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 甲酸甲酯

在25℃下，向4-氧代環己烷甲酸乙酯(20 g，117.51 mmol)在甲苯(100 mL)中的溶液中添加乙二醇(36.47 g，587.53 mmol，5.0當量)和對甲苯磺酸(2.02 g，11.75 mmol)，在120℃下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌24 h。將所得溶液用EA (100 mL×3)萃取。將合併的有機層經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=10:1洗脫，以產生1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 215.2 [M+1] ⁺。

步驟 B ： 1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基甲醇

在25℃下，向1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯(16 g，74.68 mmol)在THF (200 mL)中的溶液中添加氫化鋁鋰(3.99 g，89.61 mmol)，在25℃下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌1 h。在冷卻至0℃之後，將反應混合物用3 mL 10%飽和NaOH水溶液淬滅。將所得混合物用EA (50 mL)稀釋並過濾。將有機層經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=10:1洗脫，以產生1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基甲醇。1H-NMR (400 MHz, 氯仿-D) δ 3.85-4.00 (4H), 3.42-3.54 (2H), 1.68-1.84 (4H), 1.40-1.59 (4H), 1.26-1.32 (1H)。

步驟 C ： 1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 甲醛

在25℃下，向1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基甲醇(300 mg，1.74 mmol)在DCM (3 mL)中的溶液中添加乙酸(1,1-二乙醯氧基-3-氧代-1,2-苯並碘雜氧雜環戊烯-1-基)酯(1.11 g，2.61 mmol)，在25℃下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌12 h。在冷卻至10℃之後，將反應混合物用10 mL飽和NH ₄Cl水溶液淬滅。將所得溶液用EA (5 mL×3)萃取。將合併的有機層用水(10 mL)和鹽水(5 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮，粗產物用於下一步驟中。

步驟 D ： 8- 乙炔基 -1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷

在25℃下，向1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-甲醛(2.1 g)在甲醇(3 mL)中的溶液中添加1-重氮基-1-二甲氧基磷醯基-丙-2-酮(2.84 g，14.81 mmol)，在25℃下，在N ₂中，將所得混合物攪拌12 h。將所得溶液用EA (20 mL×3)萃取並經Na ₂SO ₄乾燥，並且濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=10:1洗脫，以產生8-乙炔基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷。1H-NMR (400 MHz, 氯仿-D) δ 3.31-3.57 (2H), 2.99-3.13 (2H), 2.46-2.60 (1H), 1.91-2.28 (9H)。

步驟 E ： 4- 乙炔基環己酮

在25℃下，在N ₂中，將8-乙炔基-1,4-二氧雜螺[4.5]-癸烷(4.0 g)在FA (3 mL)中的溶液攪拌12 h。蒸發混合物以產生粗產物，其用於下一步驟。

步驟 F ： 1-(4- 乙炔基環己基 ) 呱啶 -4- 甲酸叔丁酯

在55℃下，向呱啶-4-甲酸叔丁酯(1.09 g，4.91 mmol，HCl鹽)和4-乙炔基環己酮(0.49 g)在THF (10 mL)中的溶液中添加氯化鋅(1 M，12.28 mL，在THF中)、氰基硼氫化鈉(925.93 mg，14.73 mmol)，在55℃下，在N ₂中，將所得混合物攪拌4 h。將所得溶液用EA (10 mL×3)萃取。將合併的有機層經Na2SO4乾燥並濃縮以產生1-(4-乙炔基環己基)呱啶-4-甲酸叔丁酯。1H-NMR (400 MHz, 氯仿-D) δ 3.45-3.73 (4H), 3.09-3.37 (4H), 2.60-2.78 (1H), 2.15-2.32 (3H), 1.43-1.52 (17H)。

步驟 G ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((4-(4-( 叔丁氧基羰基 ) 呱啶 -1- 基 ) 環己基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向1-(4-乙炔基環己基)呱啶-4-甲酸叔丁酯(100 mg)、2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(120 mg，168.87 μmol)和TEA (85.44 mg，844.35 μmol)在THF (1.93 mL)中的溶液中添加碘化亞銅(6.43 mg，33.77 μmol)和雙(三苯基膦)氯化鈀(II) (59.26 mg，84.44 μmol)，在25℃下，在N ₂中，將所得混合物攪拌3 h。將混合物用DCM (5 mL)稀釋。向有機層中添加H ₂O (5 mL)並用DCM (5 mL×2)萃取。將收集的有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。將混合物過濾並將濾液濃縮，並且通過柱來純化以產生標題化合物。

步驟 H ： 1-(4-((4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 乙炔基 ) 環己基 ) 呱啶 -4- 甲酸

在25℃下，在N ₂中，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[4-(4-叔丁氧基羰基-1-呱啶基)環己基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(30 mg，34.32 μmol)在FA (2 mL)中的溶液攪拌12 h。蒸發混合物以產生粗產物。LCMS: MS (ESI) M/Z: 409.8 [M/2] ⁺。

步驟 I ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((4-(4-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ) 呱啶 -1- 基 ) 環己基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向1-[4-[2-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]乙炔基]環己基]呱啶-4-甲酸(27 mg)、(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(28.42 mg，66.01 μmol)在DMF (1 mL)中的溶液中添加HATU (25.23 mg，66.01 μmol)和DIEA (21.33 mg，165.03 μmol)，在室溫下，在N ₂中，將所得混合物攪拌12 h。將混合物用DCM (5 mL)稀釋。向有機層中添加H ₂O (5 mL)。將水層用DCM (5 mL×2)萃取。將收集的有機層用鹽水(5 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。將混合物過濾並將濾液減壓濃縮以產生標題化合物。

步驟 J ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-((4-(4-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ) 呱啶 -1- 基 ) 環己基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[4-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-1-呱啶基]環己基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(20 mg)在二噁烷(2 mL)中的溶液中添加NaOH水溶液(2 N，0.1 mL)和H ₂O (1 mL)，在25℃下將所得混合物攪拌12 h。將粗反應混合物過濾並經受反相製備型HPLC (製備型C18，5 μM X Bridge柱，19×150 mm，Waters；在7 min時間段內35% MeCN/水至43% MeCN/水的梯度洗脫，其中水含有0.1%甲酸)以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[4-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-1-呱啶基]環己基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1216.8 [M+1] ⁺。1H-NMR (400 MHz, 甲醇-D4) δ 8.86-8.85 (m, , 1H), 8.67-8.62 (m, 1H), 7.94-7.89 (m, 2H), 7.75-7.59 (m, 2H), 7.44-7.24 (m, 8H), 6.83-6.75 (m, 2H), 4.59-4.48 (m, 5H), 3.94-3.79 (m, 5H), 3.58-3.46 (m, 2H), 3.21-3.11 (m, 1H), 3.11-3.03 (m, 4H), 2.45-2.43 (m, J = 6.9 Hz, 4H), 2.19-1.98 (m, 14H), 1.63-1.26 (m, 8H), 1.01 (s, 9H)。

實施例 54 ：化合物 54

步驟 A ： 3-(3- 乙炔基環丁基 ) 氮雜環丁烷 -1- 甲酸叔丁酯

在25℃下，向(1-重氮基-2-氧代丙基)膦酸二甲酯(577.99 mg，3.01 mmol)在MeOH (20 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(618.28 mg，4.51 mmol)，在25℃下將所得混合物攪拌30 min。接著添加3-(3-甲醯基環丁基)氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯(360 mg，1.50 mmol)。在25℃下將反應混合物攪拌16 h。添加H ₂O (30 mL)並將所得溶液用EA (50 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮。將反應混合物濃縮至乾燥以提供標題化合物，其不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z:180[M+H-t-Bu] ⁺。

步驟 B ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[2-[3-(1- 叔丁氧基羰基氮雜環丁烷 -3- 基 ) 環丁基 ] 乙炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向3-(3-乙炔基環丁基)氮雜環丁烷-1-甲酸叔丁酯(198 mg)和2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(298.95 mg，420.70 μmol)在DMF (15 mL)中的溶液中添加DIEA (162.81 mg，1.26 mmol)、CuI (40mg)和Pd(PPh ₃) ₄(97.18 mg，84.14 μmol)，在30℃下，在N ₂中，將所得混合物攪拌16 h。在冷卻至20℃之後，將反應混合物用40 mL飽和NH ₄Cl水溶液淬滅。將所得溶液用EA (50 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=1:1洗脫，以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[3-(1-叔丁氧基羰基氮雜環丁烷-3-基)環丁基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z:818[M+H] ⁺。

步驟 C ： 5-(3-(4-((3-( 氮雜環丁烷 -3- 基 ) 環丁基 ) 乙炔基 ) 苯氧基 ) 丙基 )-2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，在N ₂中，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[3-(1-叔丁氧基羰基氮雜環丁烷-3-基)環丁基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(290 mg，354.52 μmol)在FA (10 mL)中的溶液攪拌1 h。將反應混合物濃縮至乾燥，並且粗產物不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z: 718 [M+H] ⁺。

步驟 D ：甲基 2-(3-(3-((4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 乙炔基 ) 環丁基 ) 氮雜環丁烷 -1- 基 ) 乙酸

向5-[3-[4-[2-[3-(氮雜環丁烷-3-基)環丁基]乙炔基]苯氧基]丙基]-2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]噻唑-4-甲酸甲酯(200 mg)在MeOH (20 mL)中的溶液中添加AcOH (50 mg，835.77 μmol)，在30℃下將反應攪拌30 min，接著添加NaBH ₃CN (43 mg，696.47 μmol)。在室溫下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌3 h。將反應混合物用20 mL H ₂O淬滅。將所得溶液用EA (30 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將反應混合物濃縮至乾燥，並且殘餘物不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z: 776 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[2-[3-[1-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-2- 氧代 - 乙基 ] 氮雜環丁烷 -3- 基 ] 環丁基 ] 乙炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向2-[3-[3-[2-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]乙炔基]環丁基]氮雜環丁烷-1-基]乙酸(140 mg)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(93.22 mg，216.51 μmol)在DMF (8 mL)中的溶液中添加DIEA (46.55 mg，360.86 μmol)和HATU (95.99 mg，252.60 μmol)，在室溫下，在N ₂中，將所得混合物攪拌1 h 。添加20 mL H ₂O並將所得溶液用EA (20 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗反應混合物過濾並經受反相製備型HPLC (製備型C18，5 μM XBridge柱，19×150 mm，Waters；在7 min時間段內35% MeCN/水至43% MeCN/水的梯度洗脫，其中水含有0.1%甲酸)以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[3-[1-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]氮雜環丁烷-3-基]環丁基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。

步驟 F ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[2-[3-[1-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 甲基氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-2- 氧代 - 乙基 ] 氮雜環丁烷 -3- 基 ] 環丁基 ] 乙炔基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[3-[1-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]氮雜環丁烷-3-基]環丁基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(70 mg，58.90 μmol)在二噁烷/H ₂O (10:1) (1 mL)中的溶液中添加NaOH (5.89 mg，147.25 μmol)，在25℃下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌16 h。用HCl水溶液(1 M)將溶液的pH值調整至6-7。接著將它減壓濃縮。將粗反應混合物過濾並經受反相製備型HPLC (製備型C18，5 μM XBridge柱，19×150 mm，Waters；在7 min時間段內35% MeCN/水至43% MeCN/水的梯度洗脫，其中水含有0.1%甲酸)以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[2-[3-[1-[2-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-2-氧代-乙基]氮雜環丁烷-3-基]環丁基]乙炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。LC/MS: MS (ESI) M/Z: 1173 [M+H] ⁺。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-D ₆) δ 8.94 (s, 1H), 8.61 (dd, J= 20.2, 8.4 Hz, 1H), 7.99 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.76-7.61 (m, 2H), 7.45-7.20 (m, 9H), 6.81 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 4.77 (s, 2H), 4.51-4.31 (m, 4H), 4.18-3.15 (m, 16H), 3.43-2.88 (m, 4H), 2.62-2.28 (m, 3H), 2.14-1.68 (m, 7H), 1.18 (s, 1H), 0.90-0.80 (s,9H)

實施例 55 ：化合物 55

步驟 A ： 2-(3-( 苯甲基氧基 ) 亞環丁基 ) 乙酸甲酯

在0℃下，向2-二甲氧基磷醯基乙酸甲酯(12.40 g，68.10 mmol)在THF (80 mL)中的溶液中添加NaH (2.72 g，68.10 mmol，60%純度)，在0~20℃下將所得混合物攪拌1 h。接著在0℃下添加3-(苯甲基氧基)環丁酮(10 g，56.75 mmol)，並且在室溫下將混合物攪拌2 h。將反應混合物用40 mL H ₂O淬滅。將所得溶液用EA (50 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=5:1洗脫，以產生2-(3-苯甲基氧基亞環丁基)乙酸甲酯。

步驟 B ： 2-(3- 羥基環丁基 ) 乙酸甲酯

向2-(3-苯甲基氧基亞環丁基)乙酸甲酯(8 g，34.44 mmol)在MeOH (250 mL)中的溶液中添加Pd/C (836.60 mg，10% w/w)。將懸浮液在真空下脫氣並用H ₂吹掃數次。在60℃下，在H ₂下，將混合物攪拌2 h。將懸浮液經矽藻土過濾並將濾餅用MeOH (10 mL×3)洗滌。將合併的濾液濃縮以產生2-(3-羥基環丁基)乙酸甲酯。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 4.19-4.08 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 2.67-2.36 (m, 4H), 2.15-1.96 (m, 3H), 1.61-1.54 (m, 1H)。

步驟 C ： 2-(3- 氧代環丁基 ) 乙酸甲酯

在0℃下，向2-(3-羥基環丁基)乙酸甲酯(4.7 g)在DCM (50 mL)中的溶液中添加DMP (16.59 g，39.12 mmol)，在室溫下將所得混合物攪拌2 h。將混合物傾倒至水(10 mL)中，用EA (20 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮。將殘餘物通過柱(PE:EtOAc=12:1)來純化以提供產物2-(3-氧代環丁基)乙酸甲酯。 ¹H-NMR (400 MHz, 氯仿-D) δ 4.25 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 2.49-2.37 (m, 1H), 2.36-2.30 (m, 2H), 2.15-2.07 (m, 2H), 1.56-1.59 (m, 1H)。

步驟 D ： 1-(3-(2- 甲氧基 -2- 氧代乙基 ) 環丁基 ) 呱啶 -4- 甲酸叔丁酯

在20℃下，向2-(3-氧代環丁基)乙酸甲酯(3.74 g，26.31 mmol)和呱啶-4-甲酸叔丁酯(6.42 g，28.94 mmol)在DCM (10 mL)和MeOH (10 mL)中的溶液中添加NaBH ₃CN (4.97 g，78.93 mmol)和AcOH (1.58 g，26.31 mmol)，在室溫下將所得混合物攪拌3 h。在完成之後，將混合物傾倒至水(50 mL)中，用EA (50 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=10:1洗脫，以產生1-[3-(2-甲氧基-2-氧代-乙基)環丁基]呱啶-4-甲酸叔丁酯。 ¹H-NMR (400 MHz, 氯仿-D) δ 3.69-3.62 (s, 3H), 3.48-3.18 (m, 3H), 2.82-2.03 (m, 14H), 1.45 (s, 9H)。

步驟 E ： 1-(3-(2- 羥基乙基 ) 環丁基 ) 呱啶 -4- 甲酸叔丁酯

在0℃下，向CaCl ₂(3.21 g，28.90 mmol)和NaBH ₄(1.82 g，48.17 mmol)在EtOH (30 mL)中的溶液中添加1-[3-(2-甲氧基-2-氧代-乙基)環丁基]呱啶-4-甲酸叔丁酯(3 g，9.63 mmol，1當量)，在60℃下將所得混合物攪拌16 h。將反應混合物濃縮至乾燥。將反應混合物用40 mL H ₂O淬滅，用EA (50 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化，用DCM:MeOH=50: 1洗脫，以產生1-[3-(2-羥基乙基)環丁基]呱啶-4-甲酸叔丁酯。 ¹H-NMR (400 MHz, 氯仿-D) δ 3.63-3.46 (m, 3H), 2.93-2.58 (m, 4H), 2.32-1.65 (m, 13H), 1.40 (s, 9H)。

步驟 F ： 1-(3-(2- 氧代乙基 ) 環丁基 ) 呱啶 -4- 甲酸叔丁酯

在0℃下，向1-[3-(2-羥基乙基)環丁基]呱啶-4-甲酸叔丁酯(300 mg，1.06 mmol)在DCM (5 mL)中的溶液中添加DMP (673.24 mg，1.59 mmol)，在25℃下將反應攪拌2 h。將飽和NaHCO ₃水溶液(20 mL)添加至反應混合物中並用DCM (20 mL×3)萃取。將有機層用鹽水(300 ml×1)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥並真空濃縮。將混合物通過柱色譜法(PE:EA=70:1)來純化以產生標題化合物。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 9.70 (s, 1H), 3.47 (s, 3H), 2.97-2.21 (m, 8H), 2.08-1.87 (m, 6H), 1.40 (s, 9H)

步驟 G ： 1-(3-( 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 環丁基 ) 呱啶 -4- 甲酸叔丁酯

向1-重氮基-1-二甲氧基磷醯基-丙-2-酮(341.36 mg，3.34 mmol)和K ₂CO ₃(245.58 mg，3.34 mmol)在MeOH (6 mL)中的溶液中添加在MeOH (4 mL)中的1-[3-(2-氧代乙基)環丁基]呱啶-4-甲酸叔丁酯(250 mg，1.67 mmol)，在室溫下將所得混合物再攪拌16 h。將混合物通過柱色譜法(PE:EA=20:1)來純化。產物1-(3-(丙-2-炔-1-基)環丁基)呱啶-4-甲酸叔丁酯。 ¹H-NMR (400 MHz, 氯仿-D) δ 5.25 (s, 1H), 3.59-3.46 (m, 2H), 2.91-2.41 (m, 3H), 2.22-1.53 (m, 12H), 1.35 (s, 9H)。

步驟 H ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(3-(4-( 叔丁氧基羰基 ) 呱啶 -1- 基 ) 環丁基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向1-(3-丙-2-炔基環丁基)呱啶-4-甲酸叔丁酯(87.83 mg，316.63 μmol)和2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(150 mg，211.09 μmol)在DMF (10 mL)中的溶液中添加DIPEA (108.92 mg，844.35 μmol)、CuI (20.10 mg，105.54 μmol)和Pd(PPh ₃) ₄(48.76 mg，42.22 μmol)。在50℃下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌3 h。將反應混合物用5 mL H ₂O淬滅。將所得溶液用EA(10 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(10 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，接著過濾並減壓濃縮。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=3:1洗脫，以產生2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[3-(4-叔丁氧基羰基-1-呱啶基)環丁基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z: 430.7 [M/2+H] ⁺。

步驟 I ： 1-(3-(3-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 環丁基 ) 呱啶 -4- 甲酸

在40℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[3-(4-叔丁氧基羰基-1-呱啶基)環丁基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(40 mg，46.51 μmol)在FA (5 mL)中的溶液攪拌1.5 h。將反應混合物濃縮至乾燥，並且粗產物不經進一步純化即用於下一步驟中。LC/MS: MS (ESI) M/Z: 402.9 [M/2+H] ⁺。

步驟 J ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(3-(4-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ) 呱啶 -1- 基 ) 環丁基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在25℃下，向1-[3-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]環丁基]呱啶-4-甲酸(40 mg)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(21.42 mg，49.75 μmol)在DMF (5 mL)中的溶液中添加DIPEA (64.30 mg，497.52 μmol)、HOBT (67.23 mg，497.52 μmol)和EDCI (95.37 mg，497.52 μmol)，在25℃下將所得混合物攪拌3 h。將反應混合物用3 mL H ₂O淬滅。將所得溶液用EA (5 mL×3)萃取。將有機層濃縮並經受反相製備型HPLC (製備型C18，20-45 μM，120 g，Tianjin Bonna-Agela Technologies；在7 min時間段內35% MeCN/水至43% MeCN/水的梯度洗脫，其中兩種溶劑均含有0.1%甲酸)以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[3-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-1-呱啶基]環丁基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LC/MS: MS (ESI) M/Z:608.8 [M/2+H] ⁺。

步驟 K ： 4-{4-[4-({1-[6-(2- 羥基丙烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ]-3- 氧代 -2-( 丙 -2- 烯 -1- 基 ) 吡唑並 [3,4-d] 嘧啶 -6- 基 } 氨基 ) 苯基 ] 呱嗪 -1- 基 } 丁酸

在室溫下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[3-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-1-呱啶基]環丁基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(25 mg，20.55 μmol)在H ₂O (1 mL)和THF (1 mL)/MeOH (1 mL)中的溶液中添加LiOH (4.92 mg，205.50 μmol)，在室溫下將所得混合物攪拌5 h。通過使用1 N HCl溶液將所得混合物的pH值調整至4。將所得混合物過濾以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[3-[4-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]-1-呱啶基]環丁基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。 ¹H-NMR (400 MHz, MeOH- d ₄) δ 8.84 (s, 1H), 7.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.44-7.28 (m, 8H), 7.19 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.74 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.60-4.46 (m, 5H), 4.35-4.25 (m, 1H), 3.93-3.76 (m, 6H), 3.46-3.32 (m, 4H), 3.26-3.10 (m, 3H), 3.08-2.96 (m, 2H), 2.53-2.39 (m, 5H), 2.27-2.13 (m, 2H), 2.09-1.83 (m, 9H), 1.23 (brs, 4H), 0.99 (s, 9H)。LC/MS: MS (ESI) M/Z: 1202.7 [M+H] ⁺。

實施例 56 ：化合物 56

步驟 A ： 2-(1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 亞基 ) 乙酸乙酯

在25℃下，向2-(二乙氧基磷醯基)乙酸乙酯(34.45 g，153.67 mmol，30.49 mL)在THF (200 mL)中的溶液中添加NaH (6.66 g，166.48 mmol，60%純度)，攪拌1 h。逐滴添加1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-酮(20 g，128.06 mmol)在THF (200 mL)中的溶液。在25℃下將所得混合物攪拌2 h。將混合物用EtOAc (200 mL)稀釋。將有機層用H ₂O (300 mL)洗滌。將水層用EtOAc (200 mL×2)萃取。將收集的有機層用鹽水(200 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。將混合物過濾並將濾液減壓濃縮以產生粗產物，其不經進一步純化即用於下一步驟中。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 7.62 (s, 1H), 6.13-6.08 (m, 2H), 5.93 (t, J= 2.9 Hz, 4H), 4.98-4.94 (m, 2H), 4.35-4.32 (m, 2H), 3.75-3.69 (m, 4H), 3.25-3.20 (m, 4H)。

步驟 B ： 2-(1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 ) 乙酸乙酯

在25℃下，在N ₂下，向2-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-亞基)乙酸乙酯(28.98 g，128.08 mmol)在乙醇(300 mL)中的溶液中添加Pd/C (6.82 g，10%純度)。接著將反應用氫氣置換三次並在25℃下攪拌16 h。將混合物反應過濾並真空濃縮以產生粗產物，其不經進一步純化即用於下一步驟中。

步驟 C ： 2-(1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 ) 乙醇

在0℃下，在N ₂下，在10 min內向2-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)乙酸乙酯(29.24 g)在THF (300 mL)中的溶液中添加LiAlH ₄(1 M，128.09 mL，THF溶液)。在0℃下將所得混合物攪拌1 h。將混合物通過添加H ₂O (6 mL)、NaOH (18 mL 15%水溶液)和另一份H ₂O (6 mL)來淬滅。將固體過濾並將濾液減壓濃縮。將混合物用EtOAc (100 mL)稀釋。將有機層用H ₂O (200 mL)洗滌。將水層用EtOAc (100 mL×2)萃取。將收集的有機層用鹽水(1000 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。將混合物過濾並將濾液減壓濃縮以產生殘餘物，將其通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc (0~50%)洗脫以產生標題化合物。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 3.91 (t, J= 6.7 Hz, 4H), 3.66 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 1.73-1.66 (m, 5H), 1.55-1.40 (m, 5H), 1.29-1.18 (m, 2H)。

步驟 D ： 2-(1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷 -8- 基 ) 乙醛

在0℃下，向2-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)乙醇(13.1 g，70.34 mmol)在二氯甲烷(90 mL)中的溶液中添加乙酸(1,1-二乙醯氧基-3-氧代-1,2-苯並碘雜氧雜環戊烯-1-基)酯(35.80 g，84.40 mmol)，在25℃下，在N ₂氛圍下，將所得混合物攪拌16 h。將混合物反應過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=10:1洗脫，以產生2-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)乙醛。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 9.76 (t, J= 2.1 Hz, 1H), 3.96-3.90 (m, 4H), 2.37-2.27 (m, 2H), 1.98-1.90 (m, 1H), 1.80-1.72 (m, 4H), 1.61-1.51 (m, 2H), 1.38-1.17 (m, 2H)。

步驟 E ： 8-( 丙 -2- 炔 -1- 基 )-1,4- 二氧雜螺 [4.5] 癸烷

在25℃下，向1-重氮基-1-二甲氧基磷醯基-丙-2-酮(6.26 g，32.57 mmol)在甲醇(55 mL)中的溶液中添加碳酸鉀(11.25 g，81.42 mmol)，並且將混合物攪拌30 min。逐滴添加2-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)乙醛(5 g，27.14 mmol)在甲醇(55 mL)中的溶液。在25℃下將所得混合物攪拌16 h。將混合物反應過濾並將濾液用EtOAc (80 mL)稀釋。將有機層用H ₂O (15 mL)洗滌。將水層用EtOAc (80 mL×2)萃取。將收集的有機層用鹽水(100 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。將混合物過濾並將濾液減壓濃縮。將殘餘物通過矽膠色譜法來純化，用PE:EtOAc=20:1洗脫，以產生8-丙-2-炔基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 3.96-3.91 (m, 4H), 2.12 (dd, J= 6.7, 2.6 Hz, 2H), 1.96 (td, J= 2.7, 0.7 Hz, 1H), 1.83-1.72 (m, 4H), 1.59-1.49 (m, 3H), 1.38-1.24 (m, 2H)。

步驟 F ： 4-( 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 環己酮

在20℃下，將8-丙-2-炔基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷(880 mg，4.88 mmol)在FA (5 mL)中的溶液攪拌16 h。將反應混合物減壓濃縮。將反應混合物濃縮以產生呈粗產物形式的4-丙-2-炔基環己酮，其不經進一步純化即用於下一步驟。 ¹H-NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 2.46-2.28 (m, 4H), 2.25-2.21 (m, 2H), 2.19-2.10 (m, 2H), 2.07-1.93 (m, 2H), 1.63-1.46 (m, 2H)。

步驟 G ： 1-(4-( 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 環己基 ) 氮雜環丁烷 -3- 甲酸叔丁酯

在55℃下，在N ₂下，向4-丙-2-炔基環己酮(1.32 g)和氮雜環丁烷-3-甲酸叔丁酯(1.53 g，9.71 mmol)在無水甲醇:THF (30 mL，v:v = 1:1)中的溶液中逐滴添加ZnCl ₂(1 M，24.28 mL，THF溶液)。在攪拌15 min之後，添加氰基硼氫化鈉(1.53 g，24.28 mmol)並在55℃下將混合物攪拌4 h。將混合物用NaHCO ₃(50 mL)稀釋。將水層用EtOAc (30 mL×3)萃取。將收集的有機層用鹽水(30 mL)洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥。將混合物過濾並將濾液減壓濃縮以產生粗制1-(4-丙-2-炔基環己基)氮雜環丁烷-3-甲酸叔丁酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 278.2 [M+H] ⁺。

步驟 H ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(4-(3-( 叔丁氧基羰基 ) 氮雜環丁烷 -1- 基 ) 環己基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在20℃下，在N ₂下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-(4-碘苯氧基)丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(50 mg，70.36 μmol)、1-(4-丙-2-炔基環己基)氮雜環丁烷-3-甲酸叔丁酯(29.28 mg)和碘化亞銅(2.68 mg，14.07 μmol)在無水DMF (1.5 mL)中的溶液中逐滴添加TEA (21.36 mg，211.09 μmol)。添加雙(三苯基膦)氯化鈀(II) (24.69 mg，35.18 μmol)並在28℃下將混合物攪拌2 h。將混合物過濾並將濾液減壓濃縮以產生殘餘物，將粗反應混合物過濾並經受反相製備型HPLC (流動相：0.05% NH ₃H ₂O-10mmol/L NH ₄HCO ₃-CAN；色譜柱：YMC-Actus Triart C18，150*20 mm，5 um；流速(ml/min)：20；梯度(%)：59.25-79.25；執行時間(min)：12；出峰時間(min)：9.5)以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[4-(3-叔丁氧基羰基氮雜環丁烷-1-基)環己基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 860.50 [M+H] ⁺。

步驟 I ： 1-(4-(3-(4-(3-(2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-4-( 甲氧基羰基 ) 噻唑 -5- 基 ) 丙氧基 ) 苯基 ) 丙 -2- 炔 -1- 基 ) 環己基 ) 氮雜環丁烷 -3- 甲酸

在25℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[4-(3-叔丁氧基羰基氮雜環丁烷-1-基)環己基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(50 mg，58.13 μmol)在FA (0.3 mL)中的溶液攪拌2 h。將反應混合物濃縮至乾燥，並且產物不經進一步純化即用於下一步驟中。LCMS: MS (ESI) M/Z: 804.6 [M+H] ⁺。

步驟 J ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(4-(3-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ) 氮雜環丁烷 -1- 基 ) 環己基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在30℃下，將1-[4-[3-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]丙-2-炔基]環己基]氮雜環丁烷-3-甲酸(50 mg)、DIEA (24.11 mg，186.57 μmol)、HATU (118.23 mg，310.95 μmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基]吡咯烷-2-甲醯胺(26.78 mg，62.19 μmol)在無水DMF (1.5 mL)中的溶液攪拌16 h。將粗反應混合物過濾並經受反相製備型HPLC (流動相：0.1% TFA-ACN；色譜柱：製備型氟苯基柱，150*19 mm，5 um；流速(ml/min)：20；梯度(%)：43.5-63.5；執行時間(min)：12；出峰時間(min)：8.5)以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[4-[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]氮雜環丁烷-1-基]環己基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯。LCMS: MS (ESI) M/Z: 609.1 [M/2+H] ⁺

步驟 K ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3-(4-(3-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-((4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯甲基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基甲醯基 ) 氮雜環丁烷 -1- 基 ) 環己基 ) 丙 -1- 炔 -1- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[4-[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]氮雜環丁烷-1-基]環己基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(16.1 mg，13.23 μmol)在二噁烷(1 mL)中的溶液中添加NaOH (2 M，水溶液，66.17 μL)，在30℃下將所得混合物攪拌2 h。將反應混合物減壓濃縮以產生殘餘物。將殘餘物過濾並經受反相製備型HPLC (流動相：0.1% TFA-ACN；色譜柱：製備型氟苯基柱，150*19 mm，5 um；流速(ml/min)：20；梯度(%)：37.65-57.65；執行時間(min)：12；出峰時間(min)：9.5)以提供2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-[4-[3-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]甲基氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基甲醯基]氮雜環丁烷-1-基]環己基]丙-1-炔基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸。 ¹H-NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ 8.91 (s, 1H), 8.65-8.62 (m, 1H), 8.17-8.14 (m, 1H), 7.91-7.89 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.75-7.73 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 7.61-7.60 (d, J= 6.9 Hz, 1H), 7.50-7.35 (m, 6H), 7.25 (m, 2H), 6.83-6.81 (d, J= 8.5 Hz, 2H), 5.02-4.94 (m, 3H), 4.64-4.55 (m, 4H), 4.40-4.32 (m, 5H), 4.01-3.94 (m, 3H), 3.83-3.82 (m, 3H), 3.61-3.46 (m, 1H), 3.28 (s, 2H), 3.16-3.08 (m, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.42-2.36 (m, 2H), 2.28-2.23 (m, 1H), 2.15-1.96 (m, 5H), 1.69-1.47 (m, 5H), 1.36-1.32 (m, 1H), 1.25-1.22 (m, 1H), 1.06 (s, 9H)。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1202.7 [M+H] ⁺。

實施例 57 ：化合物 75按照與實施例46中所示類似的程式，製備化合物75。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 8.94 (s,1H), 8.67-8.61 (m, 2H), 8.34 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.25-8.22 (m, 2H), 7.97 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.79-7.71 (m, 2H), 7.64 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.44-7.25 (m, 9H), 6.99-6.96 (m, 2H), 4.91-4.84 (m, 1H), 4.80 (s, 2H), 4.51-4.45 (m, 1H), 4.43-4.36 (m, 1H), 4.26-4.19 (m, 1H), 4.01 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.67 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.56 (s, 2H), 3.15 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.98 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.54 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.25-2.15 (m, 1H), 2.11-1.95 (m, 4H), 1.78-1.72 (m, 1H), 1.55-1.37 (m, 5H), 1.33 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.25-1.19 (m, 7H), 0.88 (s, 9H)。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1217.7 [M+H] ⁺。

實施例 58 ：化合物 74

步驟 A ： 2- 氯 -5-(3- 羥基丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在N ₂下，向亞硝酸叔丁酯(5.94 g，57.57 mmol)在MeCN (140 mL)中的溶液中添加CuCl ₂(6.19 g，46.1 mmol)。在25℃下將混合物攪拌10 min。向混合物中添加2-氨基-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(8.30 g，38.4 mmol)。在25℃下將混合物攪拌2 h。將混合物用水(150 mL)稀釋，並且用EtOAc (100 mL)萃取兩次。將有機層用鹽水(150 mL)洗滌，並且濃縮以產生粗品。將粗品通過Combi-flash (矽膠，0~10% MeOH/DCM)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 258.1 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ3.95 (s, 3H), 3.67 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 3.40 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 1.87-1.99 (m, 2H)。

步驟 B ： 5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-2- 吡啶基 ] 苯氧基 ] 丙基 ]-2- 氯 - 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在N ₂下，向8-[6-(4-羥基苯基)-3-吡啶基]辛酸叔丁酯(1.2 g，3.25 mmol)和2-氯-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(804 mg，3.41 mmol)在THF (12 mL)中的溶液中添加2-(三丁基-λ5-亞磷烷基)乙腈(2.74 g，11.37 mmol)。在80℃下將混合物攪拌16 h。將混合物濃縮以去除溶劑。將殘餘物通過Combi-flash (矽膠，10~20% EtOAc/PE)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 587.3 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-2- 吡啶基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在N ₂下，向5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-2-吡啶基]苯氧基]丙基]-2-氯-噻唑-4-甲酸甲酯(1.00 g，1.70 mmol)和N-(1,3-苯並噻唑-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醯胺(707 mg，2.04 mmol，HCl)在二噁烷(12 mL)中的溶液中添加Pd ₂(dba) ₃(780 mg，852 μmol)、SPhos (349 mg，851 μmol)、t-BuOK (478 mg，4.26 mmol)。在90℃下將混合物攪拌2 h。將黃色懸浮液用EtOAc (110 mL)稀釋，並且用矽藻土過濾。將濾餅用EtOAc (50 mL)洗滌。將濾液濃縮以產生呈黃色膠狀物的粗品(15.5 g)。將粗品通過Combi-flash (矽膠，0~10% MeOH/DCM)來純化。獲得了6.30 g黃色膠狀物。將膠狀物通過Combi-flash (矽膠，30~100% EtOAc/PE)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 860.4 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ] 苯基 ]-3- 吡啶基 ] 辛酸

在25℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-2-吡啶基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(1.40 g，1.63 mmol)在甲酸(75 mL)中的溶液攪拌15 h。將溶液濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 804.4 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-8- 氧代 - 辛基 ]-2- 吡啶基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯

在N ₂下，向8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]-3-吡啶基]辛酸(950 mg，1.18 mmol)在DMF (10 mL)中的溶液中添加HATU (584 mg，1.54 mmol)。在25℃下將混合物攪拌15 min。向混合物中添加(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(551 mg，1.24 mmol)和TEA (359 mg，3.54 mmol)。在25℃下將混合物攪拌1 h。將黃色溶液用水(30 mL)稀釋並過濾。將濾餅減壓乾燥以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 1230.6 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 吡啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸

向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-8-氧代-辛基]-2-吡啶基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(950 mg，772 μmol)在THF (5 mL)和MeOH (5 mL)中的溶液中添加在H ₂O (2 mL)中的LiOH.H ₂O (162 mg，3.86 mmol)。在25℃下將混合物攪拌16 h。將混合物用1 N HCl水溶液處理以將pH調整至6。將混合物濃縮以產生粗品。將粗品通過製備型HPLC (柱：Boston Prime C18 150*30 mm*5 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：35%-95%，9 min)來純化。將級分濃縮以去除溶劑，並且將剩餘物通過凍幹來乾燥以提供 化合物 74。LCMS: MS (ESI) m/z 1216.9 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400MHz, DMSO- d ₆ ) δ12.93 (brs, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.37 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 8.03 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.97 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 7.74-7.87 (m, 4H), 7.66 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.31-7.49 (m, 8H), 7.01 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 4.93 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 4.88 (m, 2H), 4.51 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 4.42 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.21-4.29 (m, 1H), 4.05 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.72 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.55-3.62 (m, 2H), 3.19 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 3.19 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 3.03 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 2.62 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.46 (m, 3H), 2.17-2.28 (m, 1H), 1.94-2.13 (m, 4H), 1.72-1.82 (m, 1H), 1.55-1.63 (m, 2H), 1.43-1.53 (m, 2H), 1.52 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 1.22-1.33 (m, 6H), 0.93 (s, 9H)。

實施例 59 ：化合物 126按照與實施例1中所示類似的程式，製備化合物126。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 8.97 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.82-7.66 (m, 3H), 7.48-7.23 (m, 9H), 6.85 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 4.91 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 4.52-4.40 (m, 2H), 4.27 (s, 1H), 3.96 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.71 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.60 (s, 2H), 3.17-3.00 (m, 4H), 2.63 (d, J = 37.4 Hz, 1H), 2.45-1.96 (m, 12H), 1.82-1.75 (m, 1H), 1.52-1.23 (m, 18H), 0.93-0.83 (m, 9H)。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1177.6 [M+H] ⁺。

實施例 60 ：化合物 172按照與實施例1中所示類似的程式，製備化合物172。 1H-NMR (400 MHz, 甲醇-D4) δ 8.93 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.75 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 7.66 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.48-7.32 (m, 8H), 7.23 (dd, J = 21.0, 8.7 Hz, 3H), 6.76 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.09 (s, 2H), 5.01-4.94 (m, 1H), 4.61-4.53 (m, 2H), 4.41 (s, 1H), 3.95 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 3.91-3.85 (m, 2H), 3.75-3.72 (m, 1H), 3.12 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.35 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.27 (q, J = 7.4 Hz, 1H), 2.17 (dd, J = 14.8, 8.0 Hz, 1H), 2.06-1.93 (m, 3H), 1.65-1.43 (m, 8H), 1.40-1.29 (m, 7H), 1.01 (d, J = 9.1 Hz, 9H)。LCMS: MS (ESI) M/Z: 1143.7 [M+H] ⁺。

實施例 61 ：化合物 231按照與實施例50中所示類似的程式，製備化合物231。 ¹H-NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 12.90 (brs, 1H), 9.97 (brs, 1H), 8.99 (s, 1H), 8.37 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.79 (m, 2H), 7.68 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.50-7.32 (m, 9H), 7.17-7.14 (m, 1H), 4.95-4.88 (m, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.57-4.48 (m, 1H), 4.42 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 4.31-4.24 (m, 3H), 4.11 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.73-3.36 (m, 6H), 3.22-3.01 (m, 6H), 2.46 (s, 3H), 2.24-2.18 (m, 1H), 2.07-1.99 (m, 6H), 1.66-1.04 (m, 16H), 0.94 (s, 9H)

實施例 62 ：化合物 229

步驟 A ： (E)-8-(2- 氯嘧啶 -5- 基 ) 辛 -7- 烯酸向5-溴-2-氯-嘧啶(3.6 g，18.61 mmol)、辛-7-烯酸(2.20 g，15.45 mmol)、PPh ₃(244.08 mg，0.930 mmol)和TEA (5.65 g，55.83 mmol，7.77 mL)在DMF (20 mL)中的混合物中添加Pd(OAc) ₂(208.92 mg，0.930 mmol)。在100℃下，在N ₂下，將混合物攪拌16 h。將混合物傾倒至水(200 mL)中並用EtOAc (300 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(200 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物，將其通過矽膠柱色譜法(42% EtOAc/石油醚)來純化，接著濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 255.2 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.58 (s, 2H), 7.27 (s, 1H), 6.34–6.44 (m, 1 H), 6.25–6.32 (m, 1H), 2.35–2.38 (m, 2H), 2.25–2.30 (m, 2H), 1.66–1.70 (m, 2H), 1.49–1.55 (m, 2H), 1.39–1.44 (m, 2H)。

步驟 B ： (E)-8-(2- 氯嘧啶 -5- 基 ) 辛 -7- 烯酸叔丁酯(E)-8-(2-氯嘧啶-5-基)辛-7-烯酸(1.70 g，6.67 mmol)、DCC (4.13 g，20.02 mmol，4.05 mL)和DMAP (815.37 mg，6.67 mmol)在t-BuOH (8 mL)和DCM (10 mL)中的混合物。在25℃下，在N ₂氛圍下，將混合物攪拌16 h。將混合物傾倒至水(100 mL)中並用DCM (100 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(50 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物，將其通過矽膠柱色譜法(13% EtOAc/石油醚)來純化，接著濃縮以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 255.0 [M+H-tBu] ⁺。

步驟 C ： (E)-8-[2-(4- 羥基苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛 -7- 烯酸叔丁酯將(E)-8-(2-氯嘧啶-5-基)辛-7-烯酸叔丁酯(900 mg，2.90 mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯酚(955.86 mg，4.34 mmol)、Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂(203.24 mg，289.56 umol)、Na ₂CO ₃(920.70 mg，8.69 mmol)在二噁烷(6 mL)和H ₂O (1 mL)中的混合物用N ₂吹掃3次。在90℃下，在N ₂氛圍下，將混合物攪拌16 h。將混合物傾倒至水(100 mL)中並用EtOAc (200 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(100 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物，將其通過矽膠柱色譜法(23% EtOAc/石油醚)來純化，接著濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 370.2 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 9.94 (s, 1H), 8.84 (s, 2H), 8.19–8.23 (m, 2H), 6.85–6.88 (m, 2H), 6.50–6.64 (m, 1H), 6.33–6.47 (m, 1H), 2.16–2.24 (m, 4H), 1.44–1.53 (m, 4H), 1.38 (s, 9H), 1.30–1.35 (m, 2H)。

步驟 D ： 8-[2-(4- 羥基苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛酸叔丁酯在H ₂下，向(E)-8-[2-(4-羥基苯基)嘧啶-5-基]辛-7-烯酸叔丁酯(900 mg，2.44 mmol)在EtOAc (5 mL)中的溶液中添加Pd/C (0.3 g，2.44 mmol，10 wt%負載量)。在25℃下，在H ₂(15 Psi)下，將混合物攪拌2 h。將反應混合物過濾，用EtOAc (500 mL)洗滌並減壓濃縮以產生粗產物，將其通過矽膠柱色譜法(26% EtOAc/石油醚)來純化，接著通過SFC (柱：DAICEL CHIRALCEL OJ(250 mm*30 mm，10 um)；流動相：[0.1% NH ₃H ₂O EtOH]；B%：35%-35%，min)來純化並通過凍幹來乾燥以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 371.2 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.61 (s, 2H), 8.19 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 6.87 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 4.61 (s, 1H), 2.65 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.21 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 1.62–1.73 (m, 2H), 1.57 (t, J= 14.4, 7.2 Hz, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.30–1.42 (m, 6H)。

步驟 E ： 6-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-3-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 ) 嘧啶 -2- 基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 吡啶 -2- 甲酸甲酯在60℃下，在N ₂氛圍下，將8-[2-(4-羥基苯基)嘧啶-5-基]辛酸叔丁酯(25.52 mg，68.89 umol)、6-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-3-(3-甲基磺醯基氧基丙基)吡啶-2-甲酸甲酯(20 mg，34.44 umol)和K ₂CO ₃(23.80 mg，172.21 umol)在DMF (3 mL)中的混合物攪拌16 h。將混合物濃縮以產生殘餘物，將其通過矽膠柱色譜法(4% MeOH/二氯甲烷)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 855.4 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 8-[2-[4-[3-[6-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-2- 甲氧基羰基 -3- 吡啶基 ] 丙氧基 ] 苯基 ] 嘧啶 -5- 基 ] 辛酸向6-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-3-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)嘧啶-2-基]苯氧基]丙基]吡啶-2-甲酸甲酯(30 mg，35.09 umol)在DCM (1 mL)中的溶液中添加TFA (1.54 g，13.51 mmol，1 mL)。在25℃下將混合物攪拌2 h。將混合物濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 799.4 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 6-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-3-[3-[4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-8- 氧代 - 辛基 ] 嘧啶 -2- 基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 吡啶 -2- 甲酸甲酯在25℃下，將{8-[2-[4-[3-[6-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-2-甲氧基羰基-3-吡啶基]丙氧基]苯基]嘧啶-5-基]辛酸(20 mg，25.03 umol)、(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(13.36 mg，30.04 umol)、HATU (14.28 mg，37.55 umol)和DIEA (9.71 mg，75.10 umol，13.08 uL)在DMF (3 mL)中的混合物攪拌2 h。將混合物傾倒至水(20 mL)中並用EtOAc (30 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(20 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 1225.5 [M+H] ⁺。

步驟 H ： 6-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(3-(4-(5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 吡啶甲酸在25℃下，將6-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-3-[3-[4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-8-氧代-辛基]嘧啶-2-基]苯氧基]丙基]吡啶-2-甲酸甲酯(20.23 mg，16.51 umol)和LiOH ^.H ₂O (40 mg，953.29 umol)在MeOH (1 mL)、THF (1 mL)和H ₂O (0.5 mL)中的混合物攪拌16 h。將混合物濃縮以產生殘餘物，將其通過製備型HPLC (柱：Boston Prime C18 150*30 mm*5 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：65%-85%，11 min)來純化並通過凍幹來乾燥以提供 化合物 229。LCMS: MS (ESI) m/z 1211.6 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ 8.86 (s, 1H), 8.62 (m, 2H), 8.55 (d, J= 6.0 Hz, 1H), 8.21 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 7.91 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.77 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.32–7.47 (m, 9H), 7.05 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.93 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 5.03 (m, 2H), 4.59–4.61 (m, 4H), 4.42 (m, 1H), 4.03 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.84–3.94 (m, 3H), 3.74 (dd, J= 11.2, 3.6 Hz, 1H), 3.03–3.15 (m, 5 H), 2.61–2.68 (m, 2H), 2.46 (m, 3H), 2.23–2.32 (m, 2H), 2.05–2.10 (m, 2H), 1.89–1.99 (m, 1H), 1.60–1.68 (m, 4H), 1.49 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 1.35–1.41 (m, 4H), 1.27–1.31 (m, 3H), 1.02 (s, 9H)。

實施例 63 ：化合物 173

步驟 A ： (E)-8-(2- 氯嘧啶 -5- 基 ) 辛 -7- 烯酸在N ₂氛圍下，向辛-7-烯酸(2.20 g，15.45 mmol，0.83當量)和5-溴-2-氯-嘧啶(3.6 g，18.61 mmol)在DMF (30 mL)中的溶液中添加Pd(OAc) ₂(208.92 mg，930.57 umol)、Et ₃N (7.53 g，74.45 mmol，10.36 mL)和PPh ₃(244.08 mg，930.57 umol)。在110℃下將混合物攪拌16 h。將混合物傾倒至水(100 mL)中並用EtOAc (200 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(100 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過柱色譜法(SiO ₂，石油醚:乙酸乙酯=1:1)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 255.1 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 11.98 (s, 1H), 8.83 (s, 2H), 6.64 (t, J= 16.0, 6.8 Hz, 1H), 6.40 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 2.18–2.24 (m, 4H), 1.49–1.57 (m, 2H), 1.42–1.48 (m, 2H), 1.30–1.35 (m, 2H)。

步驟 B ： (E)-8-(2- 氯嘧啶 -5- 基 ) 辛 -7- 烯酸叔丁酯向(E)-8-(2-氯嘧啶-5-基)辛-7-烯酸(1 g，3.93 mmol)在DCM (17.5 mL)中的溶液中添加t-BuOH (10 mL)、DCC (2.43 g，11.78 mmol，2.38 mL)和DMAP (479.63 mg，3.93 mmol)。在15℃下將混合物攪拌16 h。將混合物傾倒至水(100 mL)中並用EtOAc (200 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(100 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過柱色譜法(SiO ₂，石油醚:乙酸乙酯=3:1)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 311.2 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.83 (s, 2H), 6.57–6.69 (m, 1H), 6.40 (d, J= 16.0 Hz, 1H), 2.16–2.22 (m, 4H), 1.49–1.53 (m, 2H), 1.43–1.47 (m, 2H), 1.37 (s, 9H), 1.30–1.34 (m, 2H)。

步驟 C ： (E)-8-[2-(4- 羥基 -3- 甲基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛 -7- 烯酸叔丁酯在N ₂氛圍下，向(4-羥基-3-甲基-苯基)硼酸(156.44 mg，1.03 mmol)和(E)-8-(2-氯嘧啶-5-基)辛-7-烯酸叔丁酯(160 mg，514.77 umol)在H ₂O (0.5 mL)和二噁烷(5 mL)中的溶液中添加Na ₂CO ₃(109.12 mg，1.03 mmol)和RuPhos Pd G ₃(21.53 mg，25.74 umol)。在80℃下將混合物攪拌4 h。將混合物傾倒至水(20 mL)中並用EtOAc (30 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(20 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過柱色譜法(SiO ₂，石油醚:乙酸乙酯=3:1)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 383.2 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 9.84 (s, 1H), 8.82 (s, 2H), 8.10–8.14 (m, 1H), 8.02–8.06 (m, 1H), 6.86–6.89 (m, 1H), 6.46–6.62 (m, 1H), 6.33–6.43 (m, 1H), 2.21–2.25 (m, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.14–2.19 (m, 2H), 1.50–1.56 (m, 2H), 1.44–1.48 (m, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.31–1.35 (m, 2H)。

步驟 D ： 8-[2-(4- 羥基 -3- 甲基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛酸叔丁酯向(E)-8-[2-(4-羥基-3-甲基-苯基)嘧啶-5-基]辛-7-烯酸叔丁酯(110 mg，287.59 umol)在EtOAc (5 mL)中的溶液中添加Pd/C (50 mg，287.59 umol，10 wt%負載量)。在25℃下，在H ₂(15 Psi)氛圍下，將混合物攪拌0.5 h。將混合物用EtOAc (100 mL)稀釋，通過矽藻土墊過濾並減壓濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 385.2 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 8-[2-(4- 羥基 -3- 甲基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛酸在25℃下，將8-[2-(4-羥基-3-甲基-苯基)嘧啶-5-基]辛酸叔丁酯(80 mg，208.06 umol)在DCM (1 mL)和TFA (0.5 mL)中的混合物攪拌16 h。將反應混合物直接凍幹以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 329.3 [M+H] ⁺。

步驟 F ： (2S,4R)-4- 羥基 -1-[(2S)-2-[8-[2-(4- 羥基 -3- 甲基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛醯基氨基 ]-3,3- 二甲基 - 丁醯基 ]-N-[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 吡咯烷 -2- 甲醯胺向(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺鹽酸鹽(95.21 mg，197.93 umol)和8-[2-(4-羥基-3-甲基-苯基)嘧啶-5-基]辛酸(65 mg，197.93 umol)在DMF (1 mL)和DIEA (255.80 mg，1.98 mmol，344.74 uL)中的溶液中添加HATU (112.89 mg，296.89 umol)。在25℃下將混合物攪拌16 h。將混合物傾倒至水(100 mL)中並用EtOAc (30 mL×2)萃取，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過矽膠柱色譜法(5%甲醇/二氯甲烷)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 755.4 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 6-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-3-[3-[4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-8- 氧代 - 辛基 ] 嘧啶 -2- 基 ]-2- 甲基 - 苯氧基 ] 丙基 ] 吡啶 -2- 甲酸叔丁酯向6-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-3-(3-甲基磺醯基氧基丙基)吡啶-2-甲酸叔丁酯(47.14 mg，58.28 umol，77%純度)在DMF (1.5 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(24.16 mg，174.84 umol)和(2S,4R)-4-羥基-1-[(2S)-2-[8-[2-(4-羥基-3-甲基-苯基)嘧啶-5-基]辛醯基氨基]-3,3-二甲基-丁醯基]-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(50 mg，58.28 umol，88%純度)。在60℃下，在N ₂下，將混合物攪拌16 h。將殘餘物用水(10.0 mL)稀釋並在真空中冷凍乾燥以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 1281.4 [M+H] ⁺。

步驟 H ： 6-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(3-(4-(5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 嘧啶 -2- 基 )-2- 甲基苯氧基 ) 丙基 ) 吡啶甲酸6-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-3-[3-[4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-8-氧代-辛基]嘧啶-2-基]-2-甲基-苯氧基]丙基]吡啶-2-甲酸叔丁酯(100 mg，21.07 umol，27%純度)在DCM (4 mL)和TFA (1.6 mL)中的混合物。在25℃下將混合物攪拌6 h。用Et ₃N溶液將反應混合物調整至pH=8，過濾並減壓濃縮。將粗產物通過製備型HPLC (柱：Boston Prime C18 150*30 mm*5 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：65%-85%，11 min)來純化以提供 化合物 173。LCMS: MS (ESI) m/z 1225.5 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ 8.85 (s, 1H), 8.60 (s, 2H), 8.53–8.57 (m, 1H), 8.06–8.10 (m, 2H), 7.91 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.76–7.80 (m, 2H), 7.60 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.56 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.42–7.48 (m, 3H), 7.40 (d, J= 3.6 Hz, 4H), 7.32–7.37 (m, 2H), 6.98 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 6.90 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 5.00 (m, 2H), 4.59 (m, 4H), 4.42 (s, 1H), 4.04 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.85–3.93 (m, 3H), 3.74 (dd, J= 10.8, 4.0 Hz, 1H), 3.05–3.09 (dd, J= 10.4, 5.6 Hz, 5H), 2.64 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 2.46 (m, 3H), 2.25–2.30 (m, 2H), 2.21 (m, 3H), 2.09–2.13 (m, 2H), 1.90–1.98 (m, 1H), 1.64–1.68 (m, 2H), 1.59–1.63 (m, 2H), 1.48 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 1.36–1.38 (m, 4H), 1.29 (d, J= 4.4 Hz, 3H), 1.02 (s, 9H)。

實施例 64 ：化合物 205

步驟 A ： (E)-8-(2- 氯嘧啶 -5- 基 ) 辛 -7- 烯酸乙酯在0℃下，在N ₂下，向7-[溴(三苯基)-λ5-磷烷基]庚酸乙酯(2.38 g，4.77 mmol)在THF (20 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(898.51 mg，6.50 mmol)和18-冠-6 (229.11 mg，866.80 umol)。在0℃下攪拌10 min之後，添加2-氯嘧啶-5-甲醛(617.78 mg，4.33 mmol)。在60℃下，在N ₂下，將混合物攪拌16 h。將黃色懸浮液過濾。將濾餅用EtOAc (10 mL)洗滌。將濾液濃縮以產生粗品。將粗產物通過柱色譜法(SiO ₂，石油醚:乙酸乙酯=5:1)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 283.2 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.66–8.87 (m, 2H), 6.35–6.44 (m, 1H), 5.93–5.99 (m, 1H), 4.01–4.06 (m, 2H), 2.22–2.30 (m, 4H), 1.48–1.58 (m, 2H), 1.39–1.45 (m, 2H), 1.26–1.34 (m, 2H), 1.16 (t, J= 7.2 Hz, 3H)。

步驟 B ： (E)-8-[2-(3- 氯 -4- 羥基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛 -7- 烯酸乙酯在N ₂氛圍下，向(E)-8-(2-氯嘧啶-5-基)辛-7-烯酸乙酯(175 mg，618.89 umol)和2-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯酚(236.28 mg，928.33 umol)在H ₂O (0.5 mL)和二噁烷(5 mL)中的溶液中添加Na ₂CO ₃(131.19 mg，1.24 mmol)和RuPhos Pd G ₃(25.88 mg，30.94 umol)。在85℃下將混合物攪拌16 h。將混合物傾倒至水(20 mL)中並用EtOAc (30 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(20 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過柱色譜法(SiO ₂，石油醚:乙酸乙酯=5:1)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 375.2 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 10.79 (s, 1H), 8.75–8.88 (m, 2H), 8.28–8.32 (m, 1H), 8.14–8.20 (m, 1H), 7.02–7.15 (m, 1H), 6.32–6.48 (m, 1H), 5.82–5.99 (m, 1H), 4.02–4.07 (m, 2H), 2.22–2.33 (m, 4H), 1.49–1.59 (m, 2H), 1.40–1.48 (m, 2H), 1.27–1.35 (m, 2H), 1.16 (t, J= 7.2 Hz, 3H)。

步驟 C ： 8-[2-(3- 氯 -4- 羥基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛酸乙酯向(E)-8-[2-(3-氯-4-羥基-苯基)嘧啶-5-基]辛-7-烯酸乙酯(150 mg，400.15 umol)在EtOH (3 mL)中的溶液中添加PtO ₂(45.43 mg，200.07 umol)。在25℃下，在H ₂(15 Psi)氛圍下，將混合物攪拌0.5 h。將混合物用EtOH (100 mL)稀釋，通過矽藻土墊來過濾並減壓濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 377.2 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 8-[2-(3- 氯 -4- 羥基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛酸向8-[2-(3-氯-4-羥基-苯基)嘧啶-5-基]辛酸乙酯(50 mg，106.14 umol，80%純度)在H ₂O (0.5 mL)、THF (1 mL)和MeOH (1 mL)中的溶液中添加LiOH ^.H ₂O (22.27 mg，530.68 umol)。在25℃下將混合物攪拌16 h。將反應混合物直接凍幹以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 349.2 [M+H] ⁺。

步驟 E ： (2S,4R)-1-[(2S)-2-[8-[2-(3- 氯 -4- 羥基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛醯基氨基 ]-3,3- 二甲基 - 丁醯基 ]-4- 羥基 -N-[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 吡咯烷 -2- 甲醯胺向(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺鹽酸鹽(132.39 mg，275.21 umol)和8-[2-(3-氯-4-羥基-苯基)嘧啶-5-基]辛酸(80 mg，183.47 umol，80%純度)在DCM (3 mL)中的溶液中添加EDCI (70.34 mg，366.95 umol)、HOBt (37.19 mg，275.21 umol)和TEA (37.13 mg，366.95 umol，51.07 uL)。在25℃下將混合物攪拌16 h。將混合物傾倒至水(100 mL)中並用EtOAc (100 mL)萃取，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過矽膠柱色譜法(10%甲醇/二氯甲烷)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 775.3 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 6-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-3-[3-[2- 氯 -4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-8- 氧代 - 辛基 ] 嘧啶 -2- 基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 吡啶 -2- 甲酸叔丁酯向6-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-3-(3-甲基磺醯基氧基丙基)吡啶-2-甲酸叔丁酯(56.82 mg，91.24 umol)在DMF (1.5 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(26.74 mg，193.45 umol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-[8-[2-(3-氯-4-羥基-苯基)嘧啶-5-基]辛醯基氨基]-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(50 mg，64.48 umol)。在60℃下將混合物攪拌16 h。將混合物過濾並濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過矽膠柱色譜法(4%甲醇/二氯甲烷)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 1301.3 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 6-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-3-(3-(2- 氯 -4-(5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 吡啶甲酸6-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-3-[3-[2-氯-4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-8-氧代-辛基]嘧啶-2-基]苯氧基]丙基]吡啶-2-甲酸叔丁酯(30 mg，23.04 umol)在HFIP (1 mL)和TFA (0.1 mL)中的混合物。在25℃下將混合物攪拌4 h。用Et ₃N溶液將反應混合物調整至pH=8，過濾並減壓濃縮以產生粗產物。將粗產物通過製備型HPLC (柱：Boston Prime C18 150*30 mm*5 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：73%-93%，11 min)來純化以提供 化合物 205。LCMS: MS (ESI) m/z 1245.5[M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ 8.85 (s, 1H), 8.62 (m, 2H), 8.51–8.57 (m, 1H), 8.29 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.19 (dd, J= 8.8, 2.0 Hz, 1H), 7.90 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.78 (dd, J= 12.8, 9.2 Hz, 2H), 7.58–7.62 (m, 2H), 7.41–7.47 (m, 3H), 7.40 (d, J= 3.2 Hz, 4H), 7.34–7.38 (m, 2H), 7.06 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.03 (d, J= 8.4 Hz,, 1H), 5.01 (m, 2H), 4.60 (m, 4H), 4.41–4.44 (m, 1H), 4.09 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.86–3.91 (m, 3H), 3.70–3.77 (m, 1H), 3.10–3.17 (m, 2H), 3.07 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 2.61–2.67 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.25–2.31 (m, 2H), 2.13–2.15 (m, 2H), 1.90–2.00 (m, 1H), 1.60–1.69 (m, 5H), 1.48 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 1.36–1.38 (m, 4H), 1.29 (m, 3H), 1.02 (s, 9H)

實施例 65 ：化合物 185

步驟 A ： 8-[2-(4- 羥基 -3- 甲基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛酸乙酯向8-(2-氯嘧啶-5-基)辛酸乙酯(400 mg，1.40 mmol)、2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯酚(394.57 mg，1.69 mmol)和K ₃PO ₄(1.19 g，5.62 mmol)在THF (4 mL)和H ₂O (1 mL)中的混合物添加[2-(2-氨基苯基)苯基]鈀(1+);雙(1-金剛烷基)-丁基-磷烷;甲烷磺酸鹽(153.44 mg，210.69 umol)。在60℃下將混合物攪拌16 h。將混合物傾倒至水(200 mL)中並用EtOAc (200 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(200 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物，將其通過矽膠柱色譜法(19% EtOAc/石油醚)來純化，接著濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 357.2 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 9.79 (s, 1H), 8.64 (m, 2H), 8.11 (d, J =1.6 Hz, 1H), 8.03 (dd, J =8.4, 2.0 Hz, 1H), 6.86 (d, J =8.4 Hz, 1H), 4.00 - 4.06 (m, 2H), 2.57 (t, J =7.6 Hz, 2H), 2.26 (t, J =7.6 Hz, 2H), 2.19 (m, 3H), 1.54–1.63 (m, 2H), 1.46–1.53 (m, 2H), 1.14–1.18 (m, 3H), 1.07 (s, 6H)。

步驟 B ： 8-[2-(4- 羥基 -3- 甲基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛酸向8-[2-(4-羥基-3-甲基-苯基)嘧啶-5-基]辛酸乙酯(280 mg，785.51 umol)在MeOH (1 mL)、THF (1 mL)、H ₂O (0.5 mL)中的溶液中添加LiOH ^.H ₂O (164.81 mg，3.93 mmol)。在25℃下將混合物攪拌16 h。將反應混合物用2 M HCl酸化至pH=6並濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 329.2 [M+H] ⁺。

步驟 C ： (2S,4R)-4- 羥基 -1-[(2S)-2-[8-[2-(4- 羥基 -3- 甲基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛醯基氨基 ]-3,3- 二甲基 - 丁醯基 ]-N-[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 吡咯烷 -2- 甲醯胺在25℃下，將{8-[2-(4-羥基-3-甲基-苯基)嘧啶-5-基]辛酸(280 mg，852.61 umol)、(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(398.01 mg，895.24 umol)、TEA (431.37 mg，4.26 mmol，593.36 uL)、HOBt (172.81 mg，1.28 mmol)和EDCI (326.89 mg，1.71 mmol)在DMF (5 mL)中的混合物攪拌3 h。將混合物傾倒至水(100 mL)中並用EtOAc (200 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(100 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物，將其通過矽膠柱色譜法(6% MeOH/二氯甲烷)來純化，接著濃縮以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 755.4 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-8- 氧代 - 辛基 ] 嘧啶 -2- 基 ]-2- 甲基 - 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯在60℃下，將(2S,4R)-4-羥基-1-[(2S)-2-[8-[2-(4-羥基-3-甲基-苯基)嘧啶-5-基]辛醯基氨基]-3,3-二甲基-丁醯基]-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(20 mg，26.49 umol)、2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-(3-甲基磺醯基氧基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(20 mg，34.09 umol)、Cs ₂CO ₃(4.32 mg，13.25 umol)和K ₂CO ₃(7.32 mg，52.98 umol)在DMF (2 mL)中的混合物攪拌16 h。將混合物傾倒至水(100 mL)中並用DCM (100 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(100 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物，將其通過矽膠柱色譜法(5% MeOH/二氯甲烷)來純化並濃縮以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 1245.8 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 嘧啶 -2- 基 )-2- 甲基苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸在25℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-8-氧代-辛基]嘧啶-2-基]-2-甲基-苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(150 mg，120.43 umol)、LiOH ^.H ₂O (25.27 mg，602.13 umol)在THF (1 mL)、MeOH (1 mL)、H ₂O (0.5 mL)中的混合物攪拌16 h。將反應混合物用HCl/二噁烷(4 M)酸化至pH=6，並且濃縮以產生殘餘物，將其通過製備型HPLC (柱：C18-1 150*30 mm*5 um；流動相：[水(氫氧化銨 v/v)-ACN]；B%：24%-64%，9 min)來純化並通過凍幹來乾燥以提供 化合物 185。LCMS: MS (ESI) m/z 1231.3 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ 8.86 (s, 1H), 8.61 (m, 2H), 8.06 (m, 2H), 7.92 (d, J =8.4 Hz, 1H), 7.77 (d, J =8.0 Hz, 2H), 7.59 (d, J =8.0 Hz, 1H), 7.43–7.47 (m, 2H), 7.38–7.42 (m, 5H), 7.31–7.38 (m, 3H), 6.91 (d, J =8.0 Hz, 1H), 4.60–4.61 (m, 3H), 4.40–4.44 (m, 1H), 4.07 (t, J =6.4 Hz, 2H), 3.87 (d, J =12.0 Hz, 1H), 3.82 (t, J =5.6 Hz, 2H), 3.71–3.77 (m, 1H), 3.02–3.07 (m, 2H), 2.62–2.67 (m, 2H), 2.47 (m, 3H), 2.25–2.30 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.11–2.18 (m, 3H), 1.90–1.98 (m, 1H), 1.57–1.71 (m, 5H), 1.49 (d, J =6.8 Hz, 3H), 1.27–1.41 (m, 10H), 1.19 (s, 1H), 1.03 (s, 9H)。

實施例 66 ：化合物 184

步驟 A ： 2- 氯 -5-(3- 羥基丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向亞硝酸叔丁酯(5.94 g，57.57 mmol)在MeCN (140 mL)中的溶液中添加CuCl ₂(6.19 g，46.06 mmol)。在25℃下將混合物攪拌10 min。向混合物中添加2-氨基-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(8.30 g，38.38 mmol)。在25℃下將混合物攪拌2 h。將混合物用水(150 mL)稀釋，用EtOAc (100 mL)萃取兩次。將有機層用鹽水(150 mL)洗滌，濃縮以產生粗品。將粗品通過Combi-flash (矽膠，0~10% MeOH/DCM)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 258. 1[M+Na] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 3.95 (s, 3H), 3.67 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.34 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 1.89-1.99 (m, 2H)。

步驟 B ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-(3- 羥基丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯向N-(1,3-苯並噻唑-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醯胺(3.00 g，8.67 mmol，HCl鹽)和2-氯-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(2.25 g，9.54 mmol)在DMF (45 mL)中的溶液中添加Cs ₂CO ₃(12.72 g，39.03 mmol)。在70℃下，在N ₂下，將混合物攪拌2 h。在70℃下，在N ₂下，將混合物再攪拌4 h。將黃色懸浮液冷卻至25℃，接著過濾。將濾液濃縮以產生呈黃色膠狀物的粗品(7.20 g)。將粗品通過Combi-flash (矽膠，0~12% MeOH/DCM)來純化以產生呈黃色膠狀物的產物(2.24 g)。將不純的產物通過Combi-flash (矽膠，0~12% MeOH/DCM)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 509.1 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-(3- 甲基磺醯基氧基丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯在0℃下，向在DCM (10 mL)中的化合物2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(1.06 g，2.08 mmol)和甲烷磺酸酐(1.09 g，6.27 mmol)中添加Et ₃N (742 mg，7.34 mmol)，並且在20℃下將溶液攪拌16 h。將混合物用水(15 mL)稀釋，用DCM (10 mL×3)萃取。將合併的有機層經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾，並且將濾液減壓濃縮以產生粗品。將粗產物通過柱色譜法(SiO ₂，甲醇:二氯甲烷=0%至3%)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 587.1 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 7.81-7.89 (m, 1H), 7.60 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.39-7.47 (m, 1H), 7.30-7.37 (m, 3H), 7.23-7.27 (m, 1H), 4.91 (s, 2H), 4.27 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.85 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.21 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 3.05 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 2.99 (s, 3H), 2.06-2.14 (m, 2H)。

步驟 D ： 8-[2-(3- 氯 -4- 羥基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛酸乙酯向8-(2-氯嘧啶-5-基)辛酸乙酯(400 mg，1.40 mmol)和2-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯酚(536.24 mg，2.11 mmol)在H ₂O (1 mL)和THF (4 mL)中的溶液中添加K ₃PO ₄(1.19 g，5.62 mmol)和[2-(2-氨基苯基)苯基]鈀(1+);雙(1-金剛烷基)-丁基-磷烷;甲烷磺酸鹽(153.44 mg，210.69 umol)。在60℃下，在N ₂下，將混合物攪拌16 h。將混合物傾倒至水(50 mL×2)中並用EtOAc (100 mL)萃取，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過矽膠柱色譜法(14%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 377.2 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.59 (m, 2H), 8.45 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.28 (dd, J= 8.8, 2.0 Hz, 1H), 7.12 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 5.81 (s, 1H), 4.10–4.16 (m, 2H), 2.62 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.30 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 1.61–1.66 (m, 3H), 1.34–1.38 (m, 4H), 1.24–1.29 (m, 6H)。

步驟 E ： 8-[2-(3- 氯 -4- 羥基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛酸向8-[2-(3-氯-4-羥基-苯基)嘧啶-5-基]辛酸乙酯(200 mg，424.54 umol，80%純度)在H ₂O (1 mL)、THF (2 mL)和MeOH (2 mL)中的溶液中添加LiOH ^.H ₂O (89.07 mg，2.12 mmol)。在25℃下將混合物攪拌16 h。向反應混合物中添加EtOAc (2 mL)，用4 M HCl/二噁烷酸化至pH=6，濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 349.2 [M+H] ⁺。

步驟 F ： (2S,4R)-1-[(2S)-2-[8-[2-(3- 氯 -4- 羥基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛醯基氨基 ]-3,3- 二甲基 - 丁醯基 ]-4- 羥基 -N-[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 吡咯烷 -2- 甲醯胺向(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺鹽酸鹽(358.56 mg，745.36 umol)和8-[2-(3-氯-4-羥基-苯基)嘧啶-5-基]辛酸(200 mg，573.36 umol)在DMF (4 mL)中的溶液中添加EDCI (219.83 mg，1.15 mmol)、HOBt (116.21 mg，860.03 umol)和TEA (290.09 mg，2.87 mmol，399.02 uL)。在40℃下將混合物攪拌6 h。將混合物傾倒至水(50 mL×2)中並用EtOAc (100 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(50 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過矽膠柱色譜法(6%甲醇/二氯甲烷)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 775.3 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[2- 氯 -4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-8- 氧代 - 辛基 ] 嘧啶 -2- 基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-(3-甲基磺醯基氧基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(10 mg，17.04 umol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-[8-[2-(3-氯-4-羥基-苯基)嘧啶-5-基]辛醯基氨基]-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(15 mg，19.34 umol)在DMF (1.5 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(5.35 mg，38.69 umol)和Cs ₂CO ₃(3.15 mg，9.67 umol)。在60℃下將混合物攪拌16 h。將混合物傾倒至水(50 mL×2)中並用EtOAc (100 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(50 mL×2)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過矽膠柱色譜法(7%甲醇/二氯甲烷)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 1265.2 [M+H] ⁺。

步驟 H ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氯 -4-(5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 嘧啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氯-4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-8-氧代-辛基]嘧啶-2-基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(260 mg，205.37 umol)在H ₂O (1 mL)、THF (2 mL)和MeOH (2 mL)中的溶液中添加LiOH ^.H ₂O (43.09 mg，1.03 mmol)。在25℃下將混合物攪拌16 h。向反應混合物中添加EtOAc (2 mL)，用HCl水溶液(1 M)酸化至pH=6，過濾並濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過製備型HPLC (柱：Boston Prime C18 150*30 mm*5 um；流動相：[水(氫氧化銨 v/v)-ACN]；B%：34%-54%，8 min)來純化以提供 化合物 184。LCMS: MS (ESI) m/z 1251.3 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ 8.86 (s, 1H), 8.62 (m, 2H), 8.32 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 8.18–8.23 (m, 1H), 7.92 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.76 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.58 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.42–7.47 (m, 2H), 7.41 (m, 4H), 7.38 (d, J= 3.2 Hz, 2H), 7.31–7.36 (m, 2H), 7.09 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 5.16–5.20 (m, 1H), 5.00 (m, 2H), 4.60 (m, 4H), 4.41–4.44 (m, 1H), 4.13 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.87 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 3.81 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.74 (dd, J= 11.2, 3.2 Hz, 1H), 3.04 (t, J= 5.2 Hz, 2H), 2.63–2.69 (m, 2H), 2.47 (m, 3H), 2.24–2.30 (m, 2H), 2.14–2.19 (m, 3H), 1.91–1.99 (m, 1H), 1.58–1.67 (m, 4H), 1.49 (m, 3H), 1.30–1.40 (m, 8H), 1.03 (s, 9H)。

實施例 67 ：化合物 232

步驟 A ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[5-(7- 叔丁氧基 -1- 甲基 -7- 氧代 - 庚基 )-3- 氟 -2- 吡啶基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向7-[5-氟-6-(4-羥基苯基)-3-吡啶基]辛酸叔丁酯(90 mg，0.232 mmol)和2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-(3-甲基磺醯基氧基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(177 mg，0.302 mmol)在DMF (2 mL)中的混合物中添加K ₂CO ₃(65 mg，0.470 mmol)、Cs ₂CO ₃(38 mg，0.117 mmol)，並且在60℃下將溶液攪拌16 h。將混合物過濾並用DMF (5 mL)洗滌。將濾液減壓濃縮以產生呈淺棕色油狀物的粗品。將粗品通過Combi Flash (矽膠12 g，35 mL/min，30-60%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 878.6 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 7-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ] 苯基 ]-5- 氟 -3- 吡啶基 ] 辛酸在N ₂下，向在HCOOH (2 mL)中的化合物2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-(7-叔丁氧基-1-甲基-7-氧代-庚基)-3-氟-2-吡啶基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(100 mg，0.119 mmol)中，並且在20℃下將溶液攪拌16 h。將粗品溶解在DCM (10 mL)中並減壓濃縮以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 822.5 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3- 氟 -5-[7-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-1- 甲基 -7- 氧代 - 庚基 ]-2- 吡啶基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向在DMF (1 mL)中的化合物7-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]-5-氟-3-吡啶基]辛酸(100 mg，0.122 mmol)中添加HATU (56 mg，0.147 mmol)，並且在20℃下將溶液攪拌1 h。將(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(81 mg，0.182 mmol)添加至溶液中並在20℃下將溶液攪拌0.5 h。將DIEA (63 mg，0.487 mmol)添加至溶液中並在20℃下將溶液攪拌15 h。將溶液用水(3 mL)稀釋並用EtOAc (3 mL×3)萃取。將合併的有機相經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾，並且將濾液減壓濃縮以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 1248.7 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3- 氟 -5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸在20℃下，在N ₂下，向在THF (2 mL)、EtOH (2 mL)、H ₂O (1 mL)中的化合物2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-氟-5-[7-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-1-甲基-7-氧代-庚基]-2-吡啶基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(195 mg，0.156 mmol)中添加LiOH.H ₂O (28 mg，0.667 mmol)，並且在20℃下將溶液攪拌24 h。將溶液用HCl (2 M)酸化直至pH約7。將溶液減壓濃縮以產生呈黃色油狀物的粗品。將粗品用MeOH (2.0 mL)、DMF (1.5 mL)稀釋並通過製備型HPLC (柱：Boston Prime C18 150*30 mm*5 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：65%-85%，9 min)來純化。將所需級分減壓濃縮以提供 化合物 232。LCMS: MS (ESI) m/z 618.0 [M/2+H] ⁺。 ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 8.68 (s, 1H), 8.28-8.41 (m, 1H), 7.82-7.91 (m, 3H), 7.64 (m, 2H), 7.28-7.40 (m, 11H), 6.83-7.00 (m, 2H), 6.30-6.46 (m, 1H), 5.00-5.10 (m, 1H), 4.89 (m, 2H), 4.63-4.75 (m, 1H), 4.45-4.62 (m, 2H), 3.70-4.12 (m, 4H), 3.57 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 3.30 (m, 2H), 3.01 (m, 2H), 2.79 (m, 2H), 2.51 (m, 6H), 2.07-2.20 (m, 6H), 1.52-1.60 (m, 3H), 1.41-1.48 (m, 3H), 1.22-1.29 (m, 6H), 1.04 (s, 9H)。

實施例 68 ：化合物 233

步驟 A ： 7- 溴庚酸叔丁酯 在0℃下，向7-溴庚酸(10.0 g，47.8 mmol)在DCM (100 mL)中的溶液中添加TFAA (20.1 g，95.7 mmol)。在0℃下將混合物攪拌2 h。接著將t-BuOH (10.6 g，143 mmol)添加至混合物中並在25℃下將混合物攪拌1 h。將反應混合物用飽和NaHCO ₃水溶液(50 mL)淬滅並用DCM (50 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(50 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並將濾液濃縮以提供所需產物。 ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 3.41 (t, J=6.8 Hz, 2H), 2.22 (t, J=7.6 Hz, 2H), 1.83-1.90 (m, 2H), 1.56-1.65 (m, 2H), 1.38-1.51 (m, 11H), 1.29-1.38 (m, 2H)。

步驟 B ： 7-[ 溴 ( 三苯基 )- λ 5- 磷烷基 ] 庚酸叔丁酯在25℃下，向7-溴庚酸叔丁酯(12.5 g，47.1 mmol)在MeCN (150 mL)中的溶液中添加PPh ₃(12.4 g，47.1 mmol)。在80℃下將混合物攪拌16 h。將反應濃縮以產生粗產物。在25℃下將粗產物用PE (50 mL×2)濕磨5min以提供所需產物。 ¹H NMR (400MHz, DMSO- d ₆ ) δ 11.99(s,1H), 7.87-7.95 (m, 5H), 7.78-7.84 (m, 10H), 3.47-3.66 (m, 4H), 2.09-2.24 (m, 4H), 1.50-1.55 (m, 2H), 1.37 (s, 9H), 1.26-1.28 (m, 2H)。

步驟 C ： (E)-8-(6- 氯 -5- 氟 -3- 吡啶基 ) 辛 -7- 烯酸叔丁酯在0℃下，向7-[溴(三苯基)-λ5-磷烷基]庚酸叔丁酯(1.59 g，3.01 mmol)在THF (15 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(519 mg，3.76 mmol)和18-冠-6 (133 mg，0.501 mmol)。在0℃下將混合物攪拌10 min。接著將6-氯-5-氟-吡啶-3-甲醛(400 mg，2.51 mmol)添加至混合物中並在60℃下將混合物攪拌16 h。將反應用H ₂O (20 mL)稀釋並用EtOAc (20 mL×2)萃取。將合併的有機相用鹽水(15 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並將濾液濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過快速色譜法(ISCO®；12.0 g SepaFlash®二氧化矽快速柱，EtOAc /PE，其中EtOAc是0~15%，流速=35 mL/min，254 nm)來純化以提供所需產物。 ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 8.08-8.16 (m, 1H), 7.33-7.49 (m, 1H), 6.31-6.36 (m, 1H), 5.83-6.31 (m, 1H), 2.19-2.32 (m, 4H), 1.60-1.67 (m, 1H), 1.50-1.56 (m, 1H), 1.43-1.50 (m, 11H), 1.33-1.41 (m, 2H)。

步驟 D ： (E)-8-[6-(3- 氯 -4- 羥基 - 苯基 )-5- 氟 -3- 吡啶基 ] 辛 -7- 烯酸叔丁酯在25℃下，向(E)-8-(6-氯-5-氟-3-吡啶基)辛-7-烯酸叔丁酯(250 mg，0.763 mmol)和(3-氯-4-羥基-苯基)硼酸(131 mg，0.763 mmol)在二噁烷(4 mL)和H ₂O (1 mL)中的溶液中添加Pd(dppf)Cl ₂(84 mg，0.114 mmol)和K ₃PO ₄(648 mg，3.05 mmol)。在80℃下將混合物攪拌2 h。將反應混合物用H ₂O (20 mL)稀釋並用EtOAc (25 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(15 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並將濾液濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過快速色譜法(ISCO®；12.0 g SepaFlash®二氧化矽快速柱，0~30% EtOAc/PE，流速=35 mL/min，254 nm)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 420.1 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 8-[6-(3- 氯 -4- 羥基 - 苯基 )-5- 氟 -3- 吡啶基 ] 辛酸叔丁酯在25℃下，向(E)-8-[6-(3-氯-4-羥基-苯基)-5-氟-3-吡啶基]辛-7-烯酸叔丁酯(177 mg，0.421 mmol)在EtOAc (2 mL)中的溶液中添加Pd/C (50 mg，0.422 mmol，5%負載量)。在25℃下，在15 psi H ₂下，將混合物攪拌1 h。將反應混合物過濾並將濾液濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 422.1 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-3- 氟 -2- 吡啶基 ]-2- 氯 - 苯氧基 ] 丙基 ]-2- 氯 - 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向8-[6-(3-氯-4-羥基-苯基)-5-氟-3-吡啶基]辛酸叔丁酯(100 mg，0.237 mmol)和2-氯-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(56 mg，0.237 mmol)在THF (1 mL)中的溶液中添加2-(三丁基-λ5-亞磷烷基)乙腈(172 mg，0.713 mmol)。在80℃下將混合物攪拌2 h。將混合物濃縮以產生粗品。將粗品通過Combi-flash (矽膠，5~30% EtOAc/PE)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 639.1 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-3- 氟 -2- 吡啶基 ]-2- 氯 - 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向N-(1,3-苯並噻唑-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醯胺(50 mg，0.145 umol，1當量，HCl)和5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-3-氟-2-吡啶基]-2-氯-苯氧基]丙基]-2-氯-噻唑-4-甲酸甲酯(93 mg，0.145 mmol)在二噁烷(1 mL)中的溶液中添加SPhos (30 mg，73.08 umol)、Pd ₂(dba) ₃(66 mg，72.07 umol)、t-BuOK (33 mg，294.09 umol)。在90℃下將混合物攪拌3 h。將深色混合物濃縮以產生粗品。將粗品通過Combi-flash (矽膠，0~10% MeOH/DCM)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 912.4 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ8.30 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.79-7.88 (m, 2H), 7.28-7.48 (m, 4H), 7.21-7.25 (m, 1H), 7.06-7.16 (m, 1H), 6.95 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.60 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.11 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 3.78-3.91 (m, 2H), 3.58-3.74 (m, 5H), 3.48 (m, 2H), 3.27-3.37 (m, 1H), 2.93-3.06 (m, 1H), 2.65 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.21 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 1.52-1.71 (m, 8H), 1.57 (s, 9H), 1.29-1.40 (m, 4H)。

步驟 H ： 8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ]-3- 氯 - 苯基 ]-5- 氟 -3- 吡啶基 ] 辛酸在25℃下，將2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-3-氟-2-吡啶基]-2-氯-苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(90 mg，0.099 mmol)在甲酸(3 mL)中的溶液攪拌1 h。將黃色溶液濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 856.4 [M+H] ⁺。

步驟 I ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[2- 氯 -4-[3- 氟 -5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-8- 氧代 - 辛基 ]-2- 吡啶基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯在25℃下，向8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]-3-氯-苯基]-5-氟-3-吡啶基]辛酸(90 mg，0.105 mmol)在DMF (2 mL)中的溶液中添加HATU (52 mg，0.136 mmol)。在25℃下將混合物攪拌0.5 h。接著將(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(61 mg，0.137 mmol)和DIEA (54 mg，0.420 mmol)添加至混合物中並在25℃下將混合物攪拌16 h。將反應混合物用NH ₄Cl水溶液(25 mL)稀釋並用EtOAc (15 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(20 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並將濾液濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過快速色譜法(ISCO®；4.0 g SepaFlash®二氧化矽快速柱，MeOH/DCM，其中MeOH是0~8%，流速=30 mL/min，254 nm)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 1282.8 [M+H] ⁺。

步驟 J ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氯 -4-(3- 氟 -5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 吡啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氯-4-[3-氟-5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-8-氧代-辛基]-2-吡啶基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(61 mg，0.048 mmol)在MeOH (1 mL)和H ₂O (0.2 mL)中的溶液中添加LiOH ^.H ₂O (10 mg，0.238 mmol)。在25℃下將混合物攪拌16 h。將無色溶液用1 N HCl水溶液處理直至pH至7。將懸浮液濃縮以產生粗品。將粗品通過製備型HPLC (柱：Boston Prime C18 150*30 mm*5 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：73%-93%，9 min)來純化。將級分濃縮以去除大部分溶劑，並且將剩餘物通過凍幹來乾燥以提供 化合物 233。LCMS: MS (ESI) m/z 1268.5 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.86-9.10 (m, 1H), 8.24-8.49 (m, 2H), 7.89-8.09 (m, 2H), 7.73-7.89 (m, 3H), 7.60-7.73 (m, 2H), 7.16-7.56 (m, 9H), 5.01-5.21 (m, 1H), 4.74-5.01 (m, 3H), 4.46-4.61 (m, 1H), 4.37-4.46 (m, 1H), 4.25-4.36 (m, 1H), 4.09-4.22 (m, 2H), 3.57-3.75 (m, 2H), 3.10-3.22 (m, 4H), 2.63-2.93 (m, 6H), 2.40-2.44 (m, 3H), 1.96-2.12 (m, 3H), 1.72-1.86 (m, 1H), 1.54-1.68 (m, 2H), 1.42-1.54 (m, 2H), 1.31-1.41 (m, 4H), 1.16-1.31 (m, 6H), 0.92 (s, 9H)。

實施例 69 ：化合物 234

步驟 A ： 8-[5- 氟 -6-(4- 羥基 -2- 甲基 - 苯基 )-3- 吡啶基 ] 辛 -7- 烯酸叔丁酯在N ₂下，向8-(6-氯-5-氟-3-吡啶基)辛-7-烯酸叔丁酯(300 mg，0.915 mmol)和(4-羥基-2-甲基-苯基)硼酸(209 mg，1.38 mmol)在H ₂O (0.6 mL)、二噁烷(2.4 mL)中的混合物中添加Pd(dppf)Cl ₂(101 mg，0.138 mol)、K ₃PO ₄(777 mg，3.66 mmol)，並且在80℃下將溶液攪拌16 h。將溶液用水(5 mL)稀釋並用EtOAc (5 mL×3)萃取。將合併的有機相經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾，並且將濾液減壓濃縮以產生呈黑棕色油狀物的粗品。將粗品通過Combi-flash (矽膠12 g，30 mL/ min，0-30%乙酸乙酯/石油醚)來純化以提供所需產物。 1H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 8.38-8.46 (m, 1H), 7.38-7.50 (m, 1H), 7.18-7.25 (m, 1H), 6.65-6.73 (m, 2H), 6.36-6.42 (m, 1H), 5.81-5.93 (m, 1H), 2.27-2.41 (m, 2H), 2.18-2.25 (m, 5H), 1.58-1.63 (m, 2H), 1.49-1.55 (m, 2H), 1.44-1.47 (s, 9H), 1.36-1.42 (m, 2H)。

步驟 B ： 8-[5- 氟 -6-(4- 羥基 -2- 甲基 - 苯基 )-3- 吡啶基 ] 辛酸叔丁酯在H ₂(15 psi)下，向在MeOH (8 mL)中的化合物8-[5-氟-6-(4-羥基-2-甲基-苯基)-3-吡啶基]辛-7-烯酸叔丁酯(300 mg，0.751 mmol)中添加Pd/C (50 mg，10%純度)三次，並且在20℃下將混合物攪拌1 h。將混合物過濾並用MeOH (15 mL)洗滌。將濾液減壓濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 402.2 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 8.32 (s, 1H), 7.32 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.18 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 6.63-6.69 (m, 2H), 2.68 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 2.22 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 2.17 (m, 3H), 1.64-1.73 (m, 4H), 1.57-1.62 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.35-1.40 (m, 4H)。

步驟 C ： 5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-3- 氟 -2- 吡啶基 ]-3- 甲基 - 苯氧基 ] 丙基 ]-2- 氯 - 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向8-[5-氟-6-(4-羥基-2-甲基-苯基)-3-吡啶基]辛酸叔丁酯(300 mg，0.747 mmol)和2-氯-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(230 mg，0.976 mmol)在THF (3.2 mL)中的混合物中添加2-(三丁基-λ ⁵-亞磷烷基)乙腈(540 mg，2.24 mmol，並且在80℃下將溶液攪拌22 h。將混合物減壓濃縮以產生呈棕色油狀物的粗品，並且將粗產物通過柱色譜法(SiO ₂，乙酸乙酯/石油醚=0%至59%)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 619.6 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 8.36 (s, 1H), 7.29-7.38 (m, 2H), 6.79-6.84 (m, 2H),4.07 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.93 (m, 3H), 3.43 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.70 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 2.26 (m, 3H), 2.19-2.24 (m, 4H), 1.66-1.72 (m, 2H), 1.60-1.63 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.34-1.41 (m, 6H)。

步驟 D ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-3- 氟 -2- 吡啶基 ]-3- 甲基 - 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-3-氟-2-吡啶基]-3-甲基-苯氧基]丙基]-2-氯-噻唑-4-甲酸甲酯(306 mg，0.494 mmol)和N-(1,3-苯並噻唑-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醯胺(188 mg，0.544 mmol，HCl)在二噁烷(3 mL)中的混合物中添加Pd ₂(dba) ₃(226.3 mg，0.247 mmol)、tBuOK (139 mg，1.24 mmol)、SPhos (101.4 mg，0.247 mmol)，並且在90℃下將溶液攪拌3 h。將混合物減壓濃縮以產生呈棕色油狀物的粗品並將粗品通過Combi-flash (矽膠12 g，25 mL/min，0-7%二氯甲烷/甲醇，254、280 nm，UV)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 892.5 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ]-2- 甲基 - 苯基 ]-5- 氟 -3- 吡啶基 ] 辛酸在N ₂下，向在HCOOH (3 mL)中的化合物2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-3-氟-2-吡啶基]-3-甲基-苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(177 mg，0.198 mmol)中，並且在25℃下將溶液攪拌16 h。將粗品溶解在DCM (15 mL)中並減壓濃縮以去除殘餘FA兩次來提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 836.5 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3- 氟 -5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 吡啶 -2- 基 )-3- 甲基苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]-2-甲基-苯基]-5-氟-3-吡啶基]辛酸(175 mg，0.113 mmol，54%純度)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(71 mg，0.160 mmol)在DMF (2 mL)中的混合物中添加HOBt (23 mg，0.170 mmol)、EDCI (44 mg，0.230 mmol)、DIEA (60 mg，0.464 mmol)，並且在25℃下將溶液攪拌4 h。將溶液用水(4 mL)稀釋並用EtOAc (4 mL×3)萃取。將合併的有機相經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾，並且將濾液減壓濃縮以產生呈棕色油狀物的粗品。將粗品通過Combi-flash (矽膠4 g，20 mL/min，0-5%二氯甲烷/甲醇)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 632.2 [M/2+H] ⁺。

步驟 G ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3- 氟 -5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 吡啶 -2- 基 )-3- 甲基苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸在N ₂下，向在THF (1 mL)、EtOH (1 mL)、H ₂O (0.5 mL)中的化合物2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-氟-5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-8-氧代-辛基]-2-吡啶基]-3-甲基-苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(91 mg，0.072 mmol)中添加LiOH.H ₂O (22 mg，0.524 mmol)，並且在25℃下將溶液攪拌16 h。將溶液用EtOH (2.0 mL)稀釋，並且用HCl (2 M)酸化直至pH約7。將溶液減壓濃縮以產生呈黃色油狀物的粗品。將粗品用MeOH (1.0 mL)、DMF (0.5 mL)稀釋並通過製備型HPLC (柱：Boston Prime C18 150*30 mm*5 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：65%-85%，9 min)來純化。將所需級分在減壓下凍幹以提供 化合物 234。LCMS :MS (ESI) m/z 1248.4 [M+H] ⁺。 ¹⁹F NMR (400MHz, CD ₃Cl): δ= −122.562. ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 8.68 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.85 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.61-7.72 (m, 2H), 7.45-7.51 (m, 1H), 7.27-7.42 (m, 10H), 7.21 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.67-6.79 (m, 2H), 6.31 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 5.28-5.53 (m, 2H), 5.07 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 4.92 (m, 2H), 4.71 (brs, 1H), 4.59 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 4.48 (s, 1H), 4.10 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 3.98 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.76-3.84 (m, 2H), 3.57 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 3.29 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.01-3.07 (m, 2H), 2.66 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 2.43-2.54 (m, 4H), 2.21-2.24 (m, 2H), 2.17 (m, 3H), 2.12-2.15 (m, 2H), 2.00-2.03 (m, 2H), 1.61-1.68 (m, 4H), 1.46 (d, J= 6.8 Hz, 2H), 1.31-1.34 (m, 5H), 1.04 (s, 9H)。

實施例 70 ：化合物 235

步驟 A ： (E)-8-[5- 氯 -6-(4- 羥基 -2- 甲基 - 苯基 )-3- 吡啶基 ] 辛 -7- 烯酸叔丁酯在25℃下，向(E)-8-(5,6-二氯-3-吡啶基)辛-7-烯酸叔丁酯(200 mg，0.580 mmol)在二噁烷(2 mL)和H ₂O (0.5 mL)中的溶液中添加(4-羥基-2-甲基-苯基)硼酸(97 mg，0.640 mmol)、K ₃PO ₄(493 mg，2.32 mmol)和Pd(dppf)Cl ₂(64 mg，0.09 mmol)。在80℃下，在N ₂下，將混合物攪拌16 h。向混合物中添加(4-羥基-2-甲基-苯基)硼酸(27 mg，0.17 mmol)和Pd(dppf)Cl ₂(85 mg，0.12 mmol)並在80℃下，在N ₂下攪拌2 h。將混合物用(20 mL)稀釋並用EtOAc (30 mL×3)萃取。將有機相用鹽水洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並將濾液減壓濃縮以產生粗品。將殘餘物通過快速矽膠色譜法(ISCO®；4 g SepaFlash®二氧化矽快速柱，0~35%乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脫劑，在35 mL/min下)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 416.4 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 8-[5- 氯 -6-(4- 羥基 -2- 甲基 - 苯基 )-3- 吡啶基 ] 辛酸叔丁酯在25℃下，向(E)-8-[5-氯-6-(4-羥基-2-甲基-苯基)-3-吡啶基]辛-7-烯酸叔丁酯(120 mg，0.289 mmol)在EtOAc (1 mL)中的溶液中添加Pd/C (50 mg，0.289 mmol，10%純度)。在25℃下，在15 psi H2下，將混合物攪拌1 h。將混合物過濾並減壓濃縮以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 418.4 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-3- 氯 -2- 吡啶基 ]-3- 甲基 - 苯氧基 ] 丙基 ]-2- 氯 - 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向8-[5-氯-6-(4-羥基-2-甲基-苯基)-3-吡啶基]辛酸叔丁酯(120 mg，287 umol)和2-氯-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(68 mg，288 umol)在THF (1.2 mL)中的溶液中添加2-(三丁基-λ5-亞磷烷基)乙腈(277 mg，1.15 mmol)。在80℃下將混合物攪拌16 h。將溶液濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過Combi-flash (矽膠，5~30% EtOAc/PE)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 635.1 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-3- 氯 -2- 吡啶基 ]-3- 甲基 - 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-3-氯-2-吡啶基]-3-甲基-苯氧基]丙基]-2-氯-噻唑-4-甲酸甲酯(115 mg，181 umol)和N-(1,3-苯並噻唑-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醯胺(63 mg，182 umol，HCl鹽)在二噁烷(1.2 mL)中的溶液中添加Pd ₂(dba) ₃(82 mg，89 umol)、SPhos (37 mg，90 umol)、t-BuOK (51 mg，454 umol)。在90℃下將混合物攪拌3 h。將混合物用EtOAc (6 mL)稀釋，並且過濾。將濾液濃縮以產生呈黃色膠狀物的粗品(305 mg)。將粗品通過Combi-flash (矽膠，0~4% MeOH/DCM)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 908.5 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ]-2- 甲基 - 苯基 ]-5- 氯 -3- 吡啶基 ] 辛酸在25℃下，2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-3-氯-2-吡啶基]-3-甲基-苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(80 mg，0.0881 mmol)在HCOOH (1 mL)中的溶液。在25℃下將混合物攪拌2 h。將反應濃縮以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 852.2 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3- 氯 -5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-8- 氧代 - 辛基 ]-2- 吡啶基 ]-3- 甲基 - 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯在25℃下，向8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]-2-甲基-苯基]-5-氯-3-吡啶基]辛酸(70 mg，0.0821 mmol)、(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(44 mg，0.0985 mmol)和HOBt (17 mg，0.123 mmol)、EDCI (325 mg，0.164 mmol)在DMF (1 mL)中的溶液中添加DIEA (43 mg，0.328 mmol)。在25℃下將混合物攪拌16 h。將反應混合物用H ₂O (10 mL)稀釋並用EtOAc (15 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(15 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並將濾液濃縮以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 640.5 [1/2 M+H] ⁺

步驟 G ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3- 氯 -5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 吡啶 -2- 基 )-3- 甲基苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-氯-5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-8-氧代-辛基]-2-吡啶基]-3-甲基-苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(100 mg，0.0782 mmol)在THF (1 mL)、MeOH (1 mL)和H ₂O (0.4 mL)中的溶液中添加LiOH.H ₂O (16 mg，0.391 mmol)。在25℃下將混合物攪拌16 h。將無色溶液用1 N HCl水溶液處理直至pH至7。將懸浮液濃縮以產生粗品。將粗品通過製備型HPLC來純化。(柱：Boston Prime C18 150*30 mm*5 um；流動相：[水(氫氧化銨 v/v)-ACN]；B%：45%-65%，9 min)。將級分濃縮以去除大部分溶劑，並且將剩餘物通過凍幹來乾燥以提供 化合物 235。LCMS: MS (ESI) m/z 1264.4 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.98 (s, 1H), 8.35-8.44 (m, 2H), 7.93-7.99 (m, 1H), 7.84-7.89 (m, 1H), 7.77-7.83 (m, 1H), 7.67-7.77 (m, 2H), 7.32-7.51 (m, 8H), 7.25-7.32 (m, 1H), 7.03-7.11 (m, 1H), 6.80-6.88 (m, 1H), 4.82-4.99 (m, 3H), 4.49-4.56 (m, 1H), 4.38-4.46 (m, 1H), 4.25-4.31 (m, 1H), 3.99-4.04 (m, 2H), 3.65-3.81 (m, 2H), 3.58-3.63 (m, 1H), 3.14-3.22 (m, 1H), 2.99-3.07 (m, 3H), 2.60-2.72 (m, 2H), 2.42-2.47 (m, 6H), 2.23-2.39 (m, 2H), 2.08-2.17 (m, 1H), 1.97-2.02 (m, 5H), 1.72-1.84 (m, 1H), 1.58-1.67 (m, 2H), 1.43-1.51 (m, 2H), 1.34-1.39 (m, 3H), 1.28-1.32 (m, 4H), 1.18-1.24 (m, 2H), 0.92 (s, 9H)。

實施例 71 ：化合物 236

步驟 A ： 3- 氯 -4-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧雜硼雜環戊烷 -2- 基 ) 苯酚在N ₂下，向4-溴-3-氯-苯酚(800 mg，3.86 mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(1.18 g，4.63 mmol)在二噁烷(10 mL)中的混合物中添加KOAc (946 mg，9.64 mmol)、Pd(dppf)Cl ₂(282 mg，0.386 mmol)，並且在100℃下將溶液攪拌3 h。將溶液用水(15 mL)稀釋並過濾。將濾液用EtOAc (15 mL×3)萃取。將合併的有機相經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾，並且將濾液減壓濃縮以產生呈棕色油狀物的粗品。將粗品通過Combi-flash (矽膠40 g，40 mL/ min，0-10%乙酸乙酯/石油醚，220、254 nm，UV)來純化以提供所需產物。 ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 7.61 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.85 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.70 (dd, J= 2.4, 8.0 Hz, 1H), 1.36 (s, 12H)。

步驟 B ： 8-[6-(2- 氯 -4- 羥基 - 苯基 )-5- 氟 -3- 吡啶基 ] 辛 -7- 烯酸叔丁酯在N ₂下，向8-(6-氯-5-氟-3-吡啶基)辛-7-烯酸叔丁酯(250 mg，0.763 mmol)和3-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯酚(276 mg，1.08 mmol)在H ₂O (0.6 mL)、二噁烷(2.4 mL)中的混合物中添加Pd(dppf)Cl ₂(83.7 mg，0.1149 mmol)、K ₃PO ₄(648 mg，3.05 mmol)，並且在80℃下將溶液攪拌16 h。將溶液用水(5 mL)稀釋並用EtOAc (5 mL×3)萃取。將合併的有機相經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾，並且將濾液減壓濃縮以產生粗制油狀物。將粗品通過Combi-flash (矽膠12 g，30 mL/min，0-17%乙酸乙酯/石油醚，254、280 nm，UV)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 420.4 [M+H]+。 ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 8.42 (s, 1H), 7.42-7.53 (m, 1H), 7.28-7.32 (m, 1H), 6.91-6.96 (m, 1H), 6.75-6.81 (m, 1H), 6.36-6.44 (m, 1H), 5.84-5.95 (m, 1H), 2.28-2.41 (m, 2H), 2.20-2.26 (m, 2H), 1.51-1.54 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.36-1.42 (m, 2H), 1.25-1.29 (m, 2H)。

步驟 C ： 8-[6-(2- 氯 -4- 羥基 - 苯基 )-5- 氟 -3- 吡啶基 ] 辛酸叔丁酯在H ₂(15 psi)下，向在EtOAc (10 mL)中的化合物8-[6-(2-氯-4-羥基-苯基)-5-氟-3-吡啶基]辛-7-烯酸叔丁酯(258 mg，0.614 mmol)中添加Pd/C (60 mg，10%純度)三次，並且在25℃下將混合物攪拌1 h。將混合物過濾並用EtOAc (15 mL)洗滌。將濾液減壓濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 423.3 [M+H]+。

步驟 D ： 5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-3- 氟 -2- 吡啶基 ]-3- 氯 - 苯氧基 ] 丙基 ]-2- 氯 - 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向8-[6-(2-氯-4-羥基-苯基)-5-氟-3-吡啶基]辛酸叔丁酯(258 mg，0.611 mmol)和2-氯-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(230 mg，0.976 mmol)在THF (3 mL)中的混合物中添加2-(三丁基-λ ⁵-亞磷烷基)乙腈(750 mg，3.11 mmol)，並且在80℃下將溶液攪拌16 h。將混合物減壓濃縮以產生呈棕色油狀物的粗品。將粗產物通過柱色譜法(SiO ₂，乙酸乙酯/石油醚=0%至25%)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 639.3 [M+H]+。 ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 8.34 (s, 1H), 7.39 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 7.01-7.03 (m, 1H), 6.90 (dd, J= 2.4, 8.8 Hz, 1H), 4.07 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.43 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.69 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 2.18-2.24 (m, 4H), 1.65-1.71 (m, 2H), 1.56-1.62 (m, 4H), 1.45 (s, 9H), 1.35-1.39 (m, 4H)。

步驟 E ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-3- 氟 -2- 吡啶基 ]-3- 氯 - 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-3-氟-2-吡啶基]-3-氯-苯氧基]丙基]-2-氯-噻唑-4-甲酸甲酯(295 mg，0.461 mmol)和N-(1,3-苯並噻唑-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醯胺(176 mg，0.509 mmol，HCl鹽)在二噁烷(3 mL)中的混合物中添加Pd ₂(dba) ₃(211 mg，0.230. mmol)、tBuOK (130 mg，1.16 mmol)、SPhos (95 mg，0.231 mmol)，並且在90℃下將溶液攪拌3 h。將混合物過濾並將濾液減壓濃縮以產生粗制油狀物。將粗品通過Combi-flash (矽膠20 g，30 mL/min，0-8%二氯甲烷/甲醇)來純化以產生不純的產物。將不純的產物通過Combi-flash (矽膠12 g，30 mL/min，0-5%二氯甲烷/甲醇)來第二次純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 912.7 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ]-2- 氯 - 苯基 ]-5- 氟 -3- 吡啶基 ] 辛酸在N ₂下，向在HCOOH (3 mL)中的化合物2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-3-氟-2-吡啶基]-3-氯-苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(194 mg，0.2123 mmol)中，並且在25℃下將溶液攪拌16 h。將粗品溶解在DCM (15 mL)中並減壓濃縮以去除殘餘FA三次來提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 856.6 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[3- 氯 -4-[3- 氟 -5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-8- 氧代 - 辛基 ]-2- 吡啶基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]-2-氯-苯基]-5-氟-3-吡啶基]辛酸(155 mg，0.181 mmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(112 mg，0.252 mmol)在DMF (2 mL)中的混合物中添加DIEA (94 mg，0.727 mmol)、HATU (83 mg，0.218 mmol)，並且在25℃下將溶液攪拌16 h。將溶液用水(2 mL)稀釋並用EtOAc (2 mL×3)萃取。將合併的有機相經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾，並且將濾液減壓濃縮以產生呈棕色油狀物的粗品。將粗產物通過柱色譜法(SiO ₂，甲醇:二氯甲烷=0%至6%)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 1283.6 [M+H] ⁺。

步驟 H ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(3- 氯 -4-(3- 氟 -5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 吡啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸在N ₂下，向在THF (1 mL)、EtOH (1 mL)、H ₂O (0.5 mL)中的化合物2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[3-氯-4-[3-氟-5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-8-氧代-辛基]-2-吡啶基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(120 mg，0.094 mmol)中添加LiOH.H ₂O (30 mg，0.715 mmol)，並且在25℃下將溶液攪拌16 h。將溶液用EtOH (2.0 mL)稀釋，用HCl (2 M)酸化直至pH約7。將溶液減壓濃縮以產生呈黃色油狀物的粗品。將粗品用MeOH (1.0 mL)、DMF (0.5 mL)稀釋並通過製備型HPLC (柱：Boston Uni C18 40*150*5 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：73%-93%，9 min)來純化。將所需級分在減壓下凍幹以提供 化合物 236。LCMS: MS (ESI) m/z 1290.4 [M+Na] ⁺。 ¹⁹F NMR (400MHz, CDCl ₃): δ= −120.781. ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 8.69 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.83-7.89 (m, 1H), 7.63-7.74 (m, 2H), 7.32-7.52 (m, 13H), 6.94 (s, 1H), 6.28-6.84 (m, 1H), 4.91-5.11 (m, 2H), 4.67-4.78 (m, 1H), 4.46-4.64 (m, 2H), 3.88-4.16 (m, 3H), 3.76-3.84 (m, 1H), 3.53-3.63 (m, 1H), 2.99-3.37 (m, 3H), 2.61-2.78 (m, 2H), 2.46-2.56 (m, 5H), 2.14-2.24 (m, 2H), 1.58-1.69 (m, 3H), 1.44-1.49 (m, 4H), 1.31-1.37 (m, 6H), 1.24-1.28 (m, 6H), 1.05 (s, 9H)。

實施例 72 ：化合物 237

步驟 A ： 5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-3- 氟 -2- 吡啶基 ] 苯氧基 ] 丙基 ]-2- 氯 - 噻唑 -4- 甲酸甲酯向8-[5-氟-6-(4-羥基苯基)-3-吡啶基]辛酸叔丁酯(300 mg，774.22 μmol)和2-氯-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(182.47 mg，774.22 μmol)在THF (3 mL)中的溶液中添加2-(三丁基-亞磷烷基)乙腈(747.43 mg，3.10 mmol)。在80℃下，在N ₂氛圍下，將混合物攪拌16 h。將混合物濃縮以產生粗品。將粗品通過Combi-flash (矽膠，0~100% MeOH/DCM=50/1/DCM)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 605.3 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.35 (s, 1H), 7.86 (d, J= 9.2 Hz, 2H), 7.57-7.67 (m, 1H), 7.03 (d, J= 9.2 Hz, 2H), 4.08 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.79 (m, 3H), 2.64 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 2.08-2.20 (m, 4H), 1.55-1.63 (m, 2H), 1.43-1.50 (m, 4H), 1.38 (s, 9H), 1.20-1.32 (m, 6H)。

步驟 B ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-3- 氟 -2- 吡啶基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯向5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-3-氟-2-吡啶基]苯氧基]丙基]-2-氯-噻唑-4-甲酸甲酯(740 mg，1.22 mmol)和N-(1,3-苯並噻唑-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醯胺(422.91 mg，1.22 mmol，HCl)在二噁烷(9 mL)中的溶液中添加Pd ₂(dba) ₃(559.88 mg，611.41 μmol)、SPhos (251.00 mg，611.41 μmol)和t-BuOK (343.04 mg，3.06 mmol)。在90℃下，在N ₂氛圍下，將混合物攪拌3 h。將混合物用EtOAc (40 mL)稀釋並過濾。將濾液濃縮以產生粗產物。將粗品通過Combi-flash (矽膠，0~4% MeOH/DCM)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 878.3 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ] 苯基 ]-5- 氟 -3- 吡啶基 ] 辛酸向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-3-氟-2-吡啶基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(524 mg，596.75 μmol)的溶液中添加HCOOH (28.67 mg，596.75 μmol，6.5 mL)。在25℃下將混合物攪拌1 h。將混合物濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 822.3 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[3- 氟 -5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-8- 氧代 - 辛基 ]-2- 吡啶基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯向8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]苯基]-5-氟-3-吡啶基]辛酸(515.3 mg，593.66 μmol，FA)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(316.72 mg，712.39 μmol)在DMF (7.5 mL)中的溶液中添加HOBt (120.33 mg，890.49 μmol)、EDCI (227.61 mg，1.19 mmol)和DIEA (306.91 mg，2.37 mmol，413.62 μL)。在25℃下將混合物攪拌16 h。將反應混合物用H ₂O (100 mL)稀釋。將混合物過濾並將濾液用EtOAc (60 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(60 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮。將殘餘物通過柱色譜法(SiO ₂，5% MeOH)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 1248.6 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(3- 氟 -5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 吡啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[3-氟-5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-8-氧代-辛基]-2-吡啶基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(340 mg，272.32 μmol)在MeOH (0.9 mL)、THF (0.9 mL)和H ₂O (0.3 mL)中的溶液中添加LiOH ^.H ₂O (68.56 mg，1.63 mmol)。在25℃下將混合物攪拌16 h。將無色溶液用1 M HCl水溶液處理直至pH至7。將懸浮液濃縮以產生粗產物。將殘餘物通過製備型HPLC (柱：C18-1150*30 mm*5 um；流動相：[水(氫氧化銨 v/v)-(ACN-THF 2/1)]；B%：20%-60%，9 min)來純化並通過凍幹來乾燥以提供 化合物 237。LCMS: MS (ESI) m/z 1234.6 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ 8.98 (s, 1H), 8.32-8.39 (m, 2H), 8.01 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.84 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 7.78 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 7.60-7.68 (m, 2H), 7.35-7.47 (m, 8H), 7.02 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 4.91 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 4.84 (m, 2H), 4.51 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.41 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.27 (s, 1H), 4.04 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.72 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.60 (s, 2H), 3.19 (t, J= 7.6 Hz, 3H), 3.02 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 2.62-2.68 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.25 (dt, J= 14.4, 7.6 Hz, 1H), 2.09-2.15 (m, 1H), 2.03 (m, 3H), 1.78 (m, 1H), 1.56-1.64 (m, 2H), 1.48 (m, 2H), 1.37 (m, 3H), 1.23-1.31 (m, 6H), 0.92 (s, 9H)。

實施例 73 ：化合物 178

步驟 A ： 8-[6-(3- 氯 -4- 羥基 - 苯基 )-3- 吡啶基 ] 辛 -7- 烯酸叔丁酯向8-(6-氯-3-吡啶基)辛-7-烯酸叔丁酯(300 mg，968 umol)在二噁烷(4 mL)和H ₂O (1 mL)中的混合物中添加K ₃PO ₄(822 mg，3870 umol)、Pd(dppf)Cl ₂(71 mg，97 umol)和(3-氯-4-羥基-苯基)硼酸(175 mg，1.02 mmol)。在80℃下，在N ₂下，將混合物攪拌14 h。將混合物過濾並減壓濃縮以產生殘餘物。將混合物通過快速矽膠色譜法(0~20%乙酸乙酯/石油醚的洗脫劑)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 402.2 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 8-[6-(3- 氯 -4- 羥基 - 苯基 )-3- 吡啶基 ] 辛酸叔丁酯向8-[6-(3-氯-4-羥基-苯基)-3-吡啶基]辛-7-烯酸叔丁酯(350 mg，870 umol)在EtOAc (5 mL)中的混合物中添加Pd/C (50 mg，10%純度)。將懸浮液在真空下脫氣並用H ₂吹掃數次。在30℃下，在H ₂(15 psi)下，將混合物攪拌1 h。將混合物過濾並減壓濃縮以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 405.3 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 8.47 (s, 1H), 8.01 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.78 (dd, J= 2.0, 2.4 Hz, 1H), 7.55-7.58 (m, 2H), 7.08 (d, J=8.8 Hz, 1H), 2.63 (t, J=7.6 Hz, 2H),2.21 (t, J=7.6 Hz, 2H),1.56-1.66 (m, 4H), 1.45 (s, 9H), 1.30-1.37 (m, 6H)。

步驟 C ： 5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-2- 吡啶基 ]-2- 氯 - 苯氧基 ] 丙基 ]-2- 氯 - 噻唑 -4- 甲酸甲酯向8-[6-(3-氯-4-羥基-苯基)-3-吡啶基]辛酸叔丁酯(300 mg，742 umol)和2-氯-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(210 mg，891 umol)在THF (5 mL)中的混合物中添加2-(三丁基-λ5-亞磷烷基)乙腈(896 mg，3.71 mmol)。在80℃下，在N ₂下，將混合物攪拌16 h。將混合物過濾並減壓濃縮以產生殘餘物。將混合物通過快速矽膠色譜法(0~30%乙酸乙酯/石油醚的洗脫劑)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 622.5 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-2- 吡啶基 ]-2- 氯 - 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯向5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-2-吡啶基]-2-氯-苯氧基]丙基]-2-氯-噻唑-4-甲酸甲酯(370 mg，595 umol)在二噁烷(5 mL)中的混合物中添加N-(1,3-苯並噻唑-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醯胺(216 mg，624 umol)、SPhos (122 mg，297 umol)、t-BuOK (166 mg，1490 umol)和Pd ₂(dba) ₃(272 mg，297 umol)。在90℃下，在N ₂下，將混合物攪拌3 h。將混合物過濾並減壓濃縮以產生殘餘物。將混合物通過快速矽膠色譜法(0~5% MeOH/DCM的洗脫劑)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 894.4 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ]-3- 氯 - 苯基 ]-3- 吡啶基 ] 辛酸向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-2-吡啶基]-2-氯-苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(220 mg，186 umol)在HCOOH (2 mL)中的混合物中。在30℃下，在N ₂下，將混合物攪拌3 h。將混合物減壓濃縮以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 838.2 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[2- 氯 -4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-8- 氧代 - 辛基 ]-2- 吡啶基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯向8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]-3-氯-苯基]-3-吡啶基]辛酸(156 mg，186 umol)在DMF (2 mL)中的混合物中添加(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(99 mg，223 umol)、HATU (141 mg，372 umol)和DIEA (96 mg，744 umol)。在30℃下，在N ₂下，將混合物攪拌17 h。將混合物減壓濃縮以產生殘餘物。將混合物通過反相柱(99% MeOH/H ₂O)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 1264.3 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(2- 氯 -4-(5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 吡啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[2-氯-4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-8-氧代-辛基]-2-吡啶基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(60 mg，47.4 umol)在MeOH (1 mL)、THF (1 mL)和H ₂O (0.5 mL)中的混合物中添加LiOH.H ₂O (9.95 mg，237 umol)。在30℃下將混合物攪拌14 h。用2 N HCl溶液將混合物調整至pH 1-2。將混合物減壓濃縮以產生殘餘物。將混合物通過製備型HPLC (柱：Phenomenex C18 75*30 mm*3 um；流動相：[水(氫氧化銨 v/v)-ACN]；B%：29%-69%，9 min)來純化。將殘餘物合併，並且減壓濃縮，接著通過凍幹來乾燥以提供 化合物 178。LCMS :MS (ESI) m/z 1250.2 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400MHz, DMSO- d ₆) δ 8.98 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.37 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 8.10 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 8.02 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.97 (dd, J= 1.6, 2.0 Hz, 1H), 7.84 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.78 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 7.67 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 7.32-7.49 (m, 9H), 7.19 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 5.09 (brs, 1H), 4.91 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.51 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 4.41 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.27 (s, 1H), 4.13 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 3.71 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 3.57–3.61 (m, 2H), 3.22 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 3.02 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 2.60 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.21-2.29 (m, 1H), 1.98-2.13 (m, 4H) 1.75–1.82 (m, 1H), 1.55–1.62 (m, 2H), 1.43-1.52 (m, 2H), 1.37 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 1.19-1.32 (m, 7H), 0.92 (s, 9H)。

實施例 74 ：化合物 238

步驟 A ： 8-[5- 氯 -6-(2- 氯 -4- 羥基 - 苯基 )-3- 吡啶基 ] 辛 -7- 烯酸叔丁酯在N ₂下，向8-(5,6-二氯-3-吡啶基)辛-7-烯酸叔丁酯(300 mg，0.871 mmol)和3-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯酚(333 mg，1.31 mmol)在H ₂O (0.7 mL)、二噁烷(2.8 mL)中的混合物中添加Pd(dppf)Cl ₂(95.6 mg，0.131 mmol)、K ₃PO ₄(740 mg，3.49 mmol)，並且在80℃下將溶液攪拌16 h。將溶液用水(5 mL)稀釋並過濾。將濾液用EtOAc (5 mL×3)萃取。將合併的有機相經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾，並且將濾液減壓濃縮以產生粗產物。將粗品通過Combi-flash (矽膠12 g，30 mL/min，0-30%乙酸乙酯/石油醚，254、280 nm，UV)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 436.4 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 8-[5- 氯 -6-(2- 氯 -4- 羥基 - 苯基 )-3- 吡啶基 ] 辛酸叔丁酯在H ₂(15 psi)下，向在EtOAc (10 mL)中的化合物8-[5-氯-6-(2-氯-4-羥基-苯基)-3-吡啶基]辛-7-烯酸叔丁酯(240 mg，0.550 mmol)中添加Pd/C (70 mg，10%純度)三次，並且在20℃下將混合物攪拌1 h。將混合物過濾並用EtOAc (15 mL)洗滌。將濾液減壓濃縮以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 439.2 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-3- 氯 -2- 吡啶基 ]-3- 氯 - 苯氧基 ] 丙基 ]-2- 氯 - 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向8-[5-氯-6-(2-氯-4-羥基-苯基)-3-吡啶基]辛酸叔丁酯(262 mg，0.598 mmol)和2-氯-5-(3-羥基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(225 mg，0.955 mmol)在THF (3 mL)中的混合物中添加2-(三丁基-λ ⁵-亞磷烷基)乙腈(730 mg，3.02 mmol)，並且在80℃下將溶液攪拌16 h。將混合物減壓濃縮以產生呈棕色油狀物的粗品並將粗產物通過柱色譜法(SiO ₂，乙酸乙酯/石油醚=0%至14%，254、280 nm，UV)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 656.4 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 8.41 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.99-7.04 (m, 1H), 6.89 (dd, J= 2.4, 8.4 Hz, 1H), 4.07 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.43 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.67 (t, J= 8.4 Hz, 2H), 2.18-2.25 (m, 4H), 1.64-1.72 (m, 4H), 1.45 (s, 9H), 1.32-1.42 (m, 6H)。

步驟 D ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[5-(8- 叔丁氧基 -8- 氧代 - 辛基 )-3- 氯 -2- 吡啶基 ]-3- 氯 - 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-3-氯-2-吡啶基]-3-氯-苯氧基]丙基]-2-氯-噻唑-4-甲酸甲酯(315 mg，480 umol)和N-(1,3-苯並噻唑-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-8-甲醯胺(166 mg，480 umol，HCl)在二噁烷(3 mL)中的溶液中添加Pd ₂(dba) ₃(220 mg，240 umol)、SPhos (99 mg，241 umol)和t-BuOK (135 mg，1.20 mmol)。在90℃下將混合物攪拌3 h。將混合物用EtOAc (15 mL)稀釋並過濾。將濾液濃縮以產生粗產物。將粗品通過Combi-flash (矽膠，0~5% MeOH/DCM)來純化以提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 928.3 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-4- 甲氧基羰基 - 噻唑 -5- 基 ] 丙氧基 ]-2- 氯 - 苯基 ]-5- 氯 -3- 吡啶基 ] 辛酸在N ₂下，向在HCOOH (5 mL)中的化合物2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-(8-叔丁氧基-8-氧代-辛基)-3-氯-2-吡啶基]-3-氯-苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(290 mg，0.312 mmol)中，並且在25℃下將溶液攪拌16 h。將粗品溶解在DCM (15 mL)中並減壓濃縮以去除殘餘FA三次來提供所需產物。LCMS: MS (ESI) m/z 872.4 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[3- 氯 -4-[3- 氯 -5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-8- 氧代 - 辛基 ]-2- 吡啶基 ] 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯在N ₂下，向8-[6-[4-[3-[2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-4-甲氧基羰基-噻唑-5-基]丙氧基]-2-氯-苯基]-5-氯-3-吡啶基]辛酸(272 mg，0.312 mmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(193 mg，0.434 mmol)在DMF (3 mL)中的混合物中添加DIEA (161 mg，1.25 mmol)、HATU (142 mg，0.373 mmol)，並且在25℃下將溶液攪拌16 h。將溶液用水(4 mL)稀釋並用EtOAc (4 mL×3)萃取。將合併的有機相經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾，並且將濾液減壓濃縮以產生粗產物。將粗產物通過柱色譜法(SiO ₂，甲醇:二氯甲烷=0%至6%，254、280 nm，UV)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 1298.6 [M+H] ⁺。

步驟 G ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(3- 氯 -4-(3- 氯 -5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 吡啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸在N ₂下，向在THF (1 mL)、EtOH (1 mL)、H ₂O (0.5 mL)中的化合物2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[3-氯-4-[3-氯-5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-8-氧代-辛基]-2-吡啶基]苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(95 mg，73.11 umol)中添加LiOH.H ₂O (22 mg，0.524 mmol)，並且在25℃下將溶液攪拌16 h。將溶液用EtOH (2.0 mL)稀釋，用HCl (2 M)酸化直至pH約7。將溶液減壓濃縮以產生粗產物。將粗品用MeOH (1.0 mL)、DMF (0.5 mL)稀釋並通過製備型HPLC (柱：Boston Prime C18 150*30 mm*5 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：70%-90%，16 min)來純化。將所需級分在減壓下凍幹以提供 化合物 238。LCMS: MS (ESI) m/z 1286.4 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 8.70 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.86 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.66-7.74 (m, 2H), 7.61 (s, 1H), 7.48-7.54 (m, 1H), 7.30-7.44 (m, 8H), 7.10-7.25 (m, 2H), 6.93 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.82 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 6.31 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 5.07 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 4.94 (m, 2H), 4.66-4.77 (m, 1H), 4.58 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 4.47 (s, 1H), 4.11 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 3.98 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.75-3.83 (m, 2H), 3.58 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 3.30 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 3.05 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 2.58-2.71 (m, 2H), 2.52 (m, 3H), 2.21-2.24 (m, 2H), 2.12-2.15 (m, 2H), 1.59-1.68 (m, 4H), 1.44-1.48 (m, 3H), 1.31-1.35 (m, 4H), 1.26 (m, 3H), 1.16-1.21 (m, 2H), 1.04 (s, 9H)。

實施例 75 ：化合物 239

步驟 A ： (E)-8-(6- 氯 -3- 吡啶基 ) 壬 -7- 烯酸向5-溴-2-氯-吡啶(2.96 g，15.36 mmol)和壬-8-烯酸(2 g，12.80 mmol)在DMF (15 mL)中的溶液中添加Pd(OAc) ₂(229.94 mg，1.02 mmol)和PPh ₃(134.31 mg，512.09 umol)、Et ₃N (5.57 g，55.05 mmol，7.66 mL)。在110℃下，在N ₂下，將混合物攪拌16 h。將反應混合物通過添加水(100 mL)來淬滅，接著用EtOAc (100 mL)稀釋並用EtOAc (300 mL×3)萃取。將合併的有機層用鹽水(100 mL×3)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過快速矽膠色譜法(ISCO®；220 g SepaFlash®二氧化矽快速柱，0~50%乙酸乙酯/石油醚梯度的洗脫劑，在100 mL/min下)來純化以產生3.6 g化合物。將殘餘物通過製備型HPLC (柱：C18 (250*50 mm*10 um)；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：33%-73%，9 min)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 268.1 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ 8.42 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.22 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.59-7.68 (m, 1H), 7.29 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 5.17 (d, J= 0.8 Hz, 1H), 2.47 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 2.31-2.40 (m, 5H), 2.22 (q, J= 7.2 Hz, 1H), 1.57-1.68 (m, 4H), 1.28-1.50 (m, 12H)。

步驟 B ： (2R,4S)-1-[(2S)-2-[8-(6- 氯 -3- 吡啶基 ) 壬 -8- 烯醯基氨基 ]-3,3- 二甲基 - 丁醯基 ]-4- 羥基 -N-[(1R)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 吡咯烷 -2- 甲醯胺向(E)-8-(6-氯-3-吡啶基)壬-7-烯酸(700 mg，2.61 mmol，1當量)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(1.39 g，3.14 mmol)在DMF (10 mL)中的溶液中添加EDCI (1.00 g，5.23 mmol)、TEA (1.32 g，13.07 mmol，1.82 mL)和HOBt (529.88 mg，3.92 mmol)。在25℃下將混合物攪拌5 h。將反應混合物通過添加水(20 mL)來淬滅，接著用EtOAc (50 mL)稀釋並用EtOAc (100 mL×3)萃取。將合併的有機層經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 694.3 [M+H] ⁺。

步驟 C ： 4- 羥基 -1-[2-[8-[6-(4- 羥基苯基 )-3- 吡啶基 ] 壬 -8- 烯醯基氨基 ]-3,3- 二甲基 - 丁醯基 ]-N-[1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 吡咯烷 -2- 甲醯胺用N ₂向(2R,4S)-1-[(2S)-2-[8-(6-氯-3-吡啶基)壬-8-烯醯基氨基]-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1R)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(600.00 mg，864.15 umol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯酚(475.44 mg，2.16 mmol)和K ₃PO ₄(733.73 mg，3.46 mmol)在H ₂O (2 mL)和THF (8 mL)中的溶液中鼓泡5分鐘。接著向混合物中添加[2-(2-氨基苯基)苯基]鈀(1+);雙(1-金剛烷基)-丁基-磷烷;甲烷磺酸鹽(94.40 mg，129.62 umol)並在70℃下，在N ₂下攪拌1 h。將混合物傾倒至水(8 mL)中並用EtOAc (30 mL×3)萃取。將合併的有機層經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過快速矽膠色譜法(ISCO®；20 g SepaFlash®二氧化矽快速柱，0~10% MeOH/DCM梯度的洗脫劑，在40 mL/min下)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 752.3 [M+H] ⁺。

步驟 D ： (2S,4R)-4- 羥基 -1-[(2S)-2-[8-[6-(4- 羥基苯基 )-3- 吡啶基 ] 壬醯基氨基 ]-3,3- 二甲基 - 丁醯基 ]-N-[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 吡咯烷 -2- 甲醯胺在N ₂氛圍下，向4-羥基-1-[2-[8-[6-(4-羥基苯基)-3-吡啶基]壬-8-烯醯基氨基]-3,3-二甲基-丁醯基]-N-[1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(550 mg，731.41 umol)在MeOH (5 mL)中的溶液中添加Pd/C (10 mg，731.41 umol，10%純度)。將懸浮液脫氣並用H ₂吹掃3次。在25℃下，在H ₂(15 Psi)下，將混合物攪拌1 h。將反應混合物通過矽藻土墊來過濾並減壓濃縮以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 754.4 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(5-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-9- 氧代壬烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸甲酯向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-(3-甲基磺醯基氧基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(30 mg，51 umol)和(2S,4R)-4-羥基-1-[(2S)-2-[8-[6-(4-羥基苯基)-3-吡啶基]壬醯基氨基]-3,3-二甲基-丁醯基]-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(38 mg，51 umol)在DMF (0.8 mL)中的溶液中添加Cs ₂CO ₃(42 mg，129 umol)。在25℃下將混合物攪拌16 h。將混合物用DCM (5 mL)稀釋，並且過濾。將濾液濃縮以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 1245.8 [M+H] ⁺。

步驟 F ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(5-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-9- 氧代壬烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸在25℃下，向2-(8-(苯並[d]噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-5-(3-(4-(5-(9-(((S)-1-((2S,4R)-4-羥基-2-(((S)-1-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)乙基)氨基甲醯基)吡咯烷-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-9-氧代壬烷-2-基)吡啶-2-基)苯氧基)丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(80 mg，0.064 mmol)在THF (1 mL)、MeOH (1 mL)和H ₂O (0.5 mL)中的溶液中添加LiOH.H ₂O (13.5 mg，0.32 mmol)。在25℃下，在N ₂下，將混合物攪拌16 h。將混合物減壓濃縮以產生粗品。將殘餘物通過製備型HPLC (柱：Boston Prime C18 150*30 mm*5 um；流動相：[水(氫氧化銨 v/v)-ACN]；B%：45%-65%，16 min)來純化。它是不純的，接著通過製備型HPLC (柱：Boston Prime C18 150*30 mm*5 um；流動相：[水(FA)-ACN]；B%：53%-73%，16 min)來純化以提供 化合物 239。LCMS: MS (ESI) m/z 1230.5 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400MHz, CDCl ₃) δ 8.68 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.83 (t, J=8.0 Hz, 3H), 7.59-7.64 (m, 2H), 7.52-7.57 (m, 2H), 7.31-7.41 (m, 8H), 6.89 (d, J=8.0 Hz, 2H), 6.29-6.38 (m, 1H), 5.02-5.14 (m, 1H), 4.89 (s, 2H), 4.70 (d, J=8.0 Hz, 1H), 4.58 (d, J=8.0 Hz, 1H), 4.44-4.53 (m, 1H), 4.05-4.17 (m, 1H), 3.93-4.03 (m, 2H), 3.72-3.80 (m, 2H), 3.57 (d, J=8.0 Hz, 1H), 3.29 (t, J=8.0 Hz, 2H), 2.95-3.03 (m, 2H), 2.59-2.65 (m, 1H), 2.51 (s, 4H), 2.10-2.19 (m, 5H), 2.05 (s, 1H), 1.53-1.64 (m, 4H), 1.46(d, J=8.0 Hz, 3H), 1.19-1.31(m, 11H), 1.03(s, 9H)。

實施例 76 ：化合物 187

步驟 A ： 8-[2-(4- 羥基 -2- 甲基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛酸乙酯在25℃下，向8-(2-氯嘧啶-5-基)辛酸乙酯(270 mg，0.948 mmol)和(4-羥基-2-甲基-苯基)硼酸(216 mg，1.42 mmol)在二噁烷(4 mL)和H ₂O (1 mL)中的溶液中添加K ₃PO ₄(805 mg，3.79 mmol)和Pd(dppf)Cl ₂(104 mg，0.142 mmol)。在80℃下將混合物攪拌4 h。將混合物用H ₂O (35 mL)稀釋並用EtOAc (30 mL×2)萃取。將合併的有機相用鹽水(20 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並將濾液濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過快速色譜法(ISCO®；12.0 g SepaFlash®二氧化矽快速柱，石油醚/EtOAc，其中EtOAc是0~30%，流速=40 mL/min)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 357.2 [M+H] ⁺。

步驟 B ： 8-[2-(4- 羥基 -2- 甲基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛酸在25℃下，向8-[2-(4-羥基-2-甲基-苯基)嘧啶-5-基]辛酸乙酯(280 mg，0.786 mmol)在MeOH (2 mL)和H ₂O (0.5 mL)中的溶液中添加LiOH.H ₂O (165 mg，3.93 mmol)。在25℃下將混合物攪拌2 h。將溶劑用1 M HCl(8 mL)淬滅並用EtOAc (35 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(40 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並將濾液濃縮以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 329.0 [M+H] ⁺。

步驟 C ： (2S,4R)-4- 羥基 -1-[(2S)-2-[8-[2-(4- 羥基 -2- 甲基 - 苯基 ) 嘧啶 -5- 基 ] 辛醯基氨基 ]-3,3- 二甲基 - 丁醯基 ]-N-[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 吡咯烷 -2- 甲醯胺在25℃下，向8-[2-(4-羥基-2-甲基-苯基)嘧啶-5-基]辛酸(327 mg，0.996 mmol)和(2S,4R)-1-[(2S)-2-氨基-3,3-二甲基-丁醯基]-4-羥基-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(531 mg，1.19 mmol)在DMF (4 mL)中的溶液中添加DIEA (515 mg，3.98 mmol)、EDCI (382 mg，1.99 mmol)和HOBt (202 mg，1.49 mmol)。在25℃下將混合物攪拌16 h。將反應用NH ₄Cl水溶液(50 mL)稀釋並用EtOAc (35 mL×2)萃取。將合併的有機相用鹽水(45 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並將濾液濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過快速色譜法(ISCO®；12.0 g SepaFlash®二氧化矽快速柱，DCM/MeOH，其中MeOH是0~8%，流速=35 mL/min，254 nm)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 755.5 [M+H] ⁺。

步驟 D ： 2-[8-(1,3- 苯並噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫 -1H- 異喹啉 -2- 基 ]-5-[3-[4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4- 羥基 -2-[[(1S)-1-[4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ] 乙基 ] 氨基甲醯基 ] 吡咯烷 -1- 羰基 ]-2,2- 二甲基 - 丙基 ] 氨基 ]-8- 氧代 - 辛基 ] 嘧啶 -2- 基 ]-3- 甲基 - 苯氧基 ] 丙基 ] 噻唑 -4- 甲酸甲酯在25℃下，向(2S,4R)-4-羥基-1-[(2S)-2-[8-[2-(4-羥基-2-甲基-苯基)嘧啶-5-基]辛醯基氨基]-3,3-二甲基-丁醯基]-N-[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]吡咯烷-2-甲醯胺(20 mg，0.0265 mmol)和2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-(3-甲基磺醯基氧基丙基)噻唑-4-甲酸甲酯(20.20 mg，0.0344 mmol)在DMF (1 mL)中的溶液中添加K ₂CO ₃(9.15 mg，0.0662 mmol)和Cs ₂CO ₃(4.32 mg，0.0133 mmol)。在60℃下將混合物攪拌16 h。將15批反應混合物合併以進行後處理。將反應混合物用H ₂O (50 mL)稀釋並用EtOAc (60 mL×2)萃取。將合併的有機層用鹽水(40 mL)洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並將濾液濃縮以產生殘餘物。將殘餘物通過快速色譜法(ISCO®；12.0 g SepaFlash®二氧化矽快速柱，DCM/MeOH，其中MeOH是0~8%，流速=35 mL/min，254 nm)來純化以提供所需產物。LCMS :MS (ESI) m/z 1245.9 [M+H] ⁺。

步驟 E ： 2-(8-( 苯並 [d] 噻唑 -2- 基氨基甲醯基 )-3,4- 二氫異喹啉 -2(1H)- 基 )-5-(3-(4-(5-(8-(((S)-1-((2S,4R)-4- 羥基 -2-(((S)-1-(4-(4- 甲基噻唑 -5- 基 ) 苯基 ) 乙基 ) 氨基甲醯基 ) 吡咯烷 -1- 基 )-3,3- 二甲基 -1- 氧代丁烷 -2- 基 ) 氨基 )-8- 氧代辛基 ) 嘧啶 -2- 基 )-3- 甲基苯氧基 ) 丙基 ) 噻唑 -4- 甲酸在25℃下，向2-[8-(1,3-苯並噻唑-2-基氨基甲醯基)-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-基]-5-[3-[4-[5-[8-[[(1S)-1-[(2S,4R)-4-羥基-2-[[(1S)-1-[4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基]乙基]氨基甲醯基]吡咯烷-1-羰基]-2,2-二甲基-丙基]氨基]-8-氧代-辛基]嘧啶-2-基]-3-甲基-苯氧基]丙基]噻唑-4-甲酸甲酯(226 mg，0.181 mmol)在MeOH (1 mL)和THF (1 mL)、H ₂O (0.5 mL)中的溶液中添加LiOH.H ₂O (38.1 mg，0.907 mmol)。在25℃下將混合物攪拌16 h。將無色溶液用1 N HCl水溶液處理直至pH至7。將懸浮液濃縮以產生粗品。將粗品通過製備型HPLC來純化。柱：Boston Prime C18 150*30 mm*5 um；流動相：[水(氫氧化銨 v/v)-ACN]；B%：40%-60%，9 min。將級分濃縮以去除大部分溶劑，並且將剩餘物通過凍幹來乾燥以提供 化合物 187。LCMS :MS (ESI) m/z 1231.3 [M+H] ⁺。 ¹H NMR (400MHz, DMSO- d6) δ8.98 (s, 1H), 8.71 (m, 2H), 8.37 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.99 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.74-7.83 (m, 3H), 7.68 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.40-7.45 (m, 4H), 7.35-7.39 (m, 3H), 7.30-7.34 (m, 1H), 6.80-6.85 (m, 2H), 4.91 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 4.85 (m, 2H), 4.51 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.42 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 4.23-4.30 (m, 1H), 4.03 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 3.71 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 3.56-3.62 (m, 2H), 3.19 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 3.00-3.05 (m, 2H), 2.53-2.64 (m, 2H), 2.47 (m, 3H), 2.45 (m, 3H), 2.16-2.32 (m, 2H), 2.09-2.15 (m, 1H), 1.94-2.09 (m, 4H), 1.71-1.84 (m, 1H), 1.56-1.67 (m, 2H), 1.43-1.52 (m, 2H), 1.36 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 1.29-1.33 (m, 4H), 1.19-1.26 (m, 2H), 0.92 (s, 9H)。 II. 生物學評估

選擇如Chung等人, “Structural Insights into PROTAC-Mediated Degradation of Bcl-xL” ACS Chem. Biol. 2020, 15, 9, 2316-2323中公開的PROTAC6（結構如下所示）作為參考化合物。

實施例 B1 ： BCL-XL 降解測定

細胞培養

在補充有10% FBS (Gibco，10099-141)的RPMI 1640 (Gibco，11875119)培養基中培養人T淋巴母細胞MOLT-4 (ATCC，CRL1582)。所有細胞系都在37℃下在5% CO ₂的氛圍中維持。

蛋白質提取和 Western 印跡

使用補充有蛋白酶抑制劑、磷酸酶抑制劑和PMSF溶液的細胞溶解緩衝液(CST，9803)製備全細胞裂解物。使用Pierce二喹啉甲酸(BCA)蛋白質濃度試劑盒(Solarbio，PC0020)來定量蛋白質的濃度。將等量的蛋白質上樣以進行PAGE，並且使用Bio-Rad的Trans blot將樣品轉移至PVDF膜上。將印跡與初級抗體（抗BCL-XL抗體和抗α-微管蛋白(α-Tubulin)抗體）一起孵育，隨後與綴合於適當二級抗體的HRP一起孵育。

細胞活力測定

根據製造商的方案，使用CellTiter-Glo測定試劑盒(Promega，G7573)測量細胞活力。將MOLT-4接種至384孔板中並用各種遞增劑量的化合物處理72小時。將細胞板從孵育器中取出並用CellTiter-Glo®平衡。在Envision 2104多板讀取器上使用發光檢測器對板進行讀取。

示例性化合物的代表性降解活性和細胞活力呈現於表8中。

表8：注意：“-”指示未測出。表 8

化合物編號	DC ₅₀(nM)	D _最大 (%)	GI ₅₀(nM)
PROTAC6	7.1	96	38.8
1	1.8	91	21.9
2	2.7	94	5.4
3	9.4	76	1.8
4	5.0	92	2.7
5	1.1	91	2.2
6	4.3	72	12.3
7	4.8	95	4.5
8	0.15	79	5.2
9	4.3	98	15.2
10	2.2	97	6.9
11	4.3	86	8.3
12	4.6	96	16.6
13	2.6	87	5.6
14	-	-	5.8
15	-	-	5.3
16	1.6	88	6.0
17	5.3	67	5.3
18	-	-	6.4
19	2.2	93	7.8
20	-	-	6.6
21	1.5	96	6.6
22	5.1	80	24.3
23	1.9	97	11.7
24	-	-	14.9
25	3.2	77	16.1
26	3.9	78	20.4
27	-	-	25.0
28	-	-	27.8
29	1.2	85	11.0
30	-	-	5.5
31 ( 異構體 1)	8.0	87	49.8
33	4.1	84	24.9
34	-	-	35.2
35	1.6	98	11.6
36	2.6	94	29.1
37	-	-	42.3
38	-	-	29.7
39	-	-	27.8
40	-	-	48.5
41	1.6	98	11.6
42	1.0	89	8.7
43	-	-	9.2
44	0.8	89	7.2
45	-	-	-
46	-	-	11.0
47	-	-	13.3
48	-	-	28.8
49	-	-	36.2
50	-	-	38.8
51 ( 異構體 1)	-	-	15.4
53	-	-	16.0
54	-	-	12.3
55	-	-	27.2
56	-	-	21.3
75	-	-	2.1
74	3	-	24.9
126	-	-	7.5
172	-	-	17.9
173	-	-	105
178	-	-	108
184	-	-	20
185	-	-	48
187	-	-	30
205	-	-	36
229	-	-	107
231	-	-	14.7
232	-	-	38
233	-	-	111
234	-	-	27
235	-	-	33
236	-	-	27
237	2	-	26
238	-	-	86
239	-	-	87

DC ₅₀：誘導50%的靶標蛋白質的化合物濃度。 D _最大：最大降解比率。 GI ₅₀：化合物的抑制50%的細胞生長的濃度。

實施例 B2 ：體內藥物代謝動力學測定

在6至8周齡的雄性CD-1小鼠中進行研究。動物接受2.0 mg/kg的劑量的單次靜脈內注射。

在某些時間點（例如：5 min、15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、8 h等）從三隻不同小鼠獲取血液樣品。從小鼠獲取血液樣品並轉移至EDTA管中。在4℃離心機中在4000 g下將血液離心5分鐘以獲得血漿。所有血漿樣品在分析之前都在冰箱中在-75±15℃下儲存。

使用WinNonlin (PhoenixTM)軟體進行藥物代謝動力學計算，並且從血漿濃度對時間資料計算以下藥物代謝動力學參數：T1/2、AUC、Cl和VDss。

示例性化合物的代表性藥物代謝動力學參數呈現於表9中。

表 9. CD1 小鼠 PK 數據

化合物編號	T1/2 (h)	CL (mL/min/kg)	DN-AUC *((hng/mL)/(mg/kg))**
PROTAC6	4.0	4.4	3755
1	4.5	0.9	15572
12	5.5	1.4	11249
15	6.9	0.8	19735
28	4.4	0.6	25808
74	9.1	0.2	68500
75	7.1	0.4	44350
126	9.3	0.5	28553
172	3.0	1.1	14900
184	6.8	0.8	14900
185	8.1	1.8	10400
231	11.1	0.4	33350
237	6.7	0.2	77500

實施例 3 ：測試物品在雌性 Balb/c 裸小鼠 MOLT-4 異種移植模型的治療中的體內功效研究

細胞培養：在37℃下在含5% CO2的空氣的氛圍中培養腫瘤細胞。每週兩次對腫瘤細胞進行常規繼代培養。收集生長處於指數生長期的細胞並計數以進行腫瘤接種。

動物：Balb/c裸小鼠，雌性，6-8周，稱重約18-22 g，小鼠購自Beijing VR Laboratory Animal Co., LTD.或其他認證的供應商。

腫瘤細胞接種：用腫瘤細胞在右側脅腹對每只小鼠皮下接種以達成腫瘤產生。將動物隨機化，並且在MOLT-4的平均腫瘤體積達到約150 mm3時開始治療。每個組中的測試物品施用和動物數目顯示於以下實驗設計表中。

組設計

組	數目	治療	劑量(mg/kg)	給藥途徑	給藥時間表
1	6	媒介物	-	IP	QW*6W
2	6	化合物237	10	IP	QW*6W
3	6	化合物74	30	IP	QW*6W

終點：主要終點是觀察腫瘤生長是否可被延遲或小鼠是否可被治癒。使用卡尺在兩個維度上每週兩次測量腫瘤大小，並且使用下式以mm3表示體積：V=0.5 a×b2，其中a和b分別是腫瘤的長直徑和短直徑。接著使用腫瘤大小來計算T/C和TGI值。

T/C值(以百分比表示)是抗腫瘤有效性的指標；T和C分別是在給定日的治療組和對照組的平均體積。

使用下式計算每個組的TGI：TGI (%)=[1-(Ti-T0)/(Vi-V0)]×100；Ti是在給定日治療組的平均腫瘤體積，T0是在治療的第一天治療組的平均腫瘤體積，Vi是在與Ti同一天媒介物對照組的平均腫瘤體積，並且V0是在治療的第一天媒介物組的平均腫瘤體積。

對於PD分析：

Western印跡方案

蛋白質提取和蛋白質定量 1. 從-80℃冰箱或液氮罐中取出快速冷凍的組織。 2. 切成約30-100 mg的組織。將組織放置在2 mL微量離心管中，並且添加400 μL RIPA緩衝液(含有1%蛋白酶抑制劑混合物和1%磷酸酶抑制劑混合物2)。 3. 用組織研磨機(Tissuelyser)在50 Hz下將腫瘤研磨5 min。 4. 將組織裂解物在冰上保持30 min。 5. 在4℃下在12,000 rpm下離心10 min；將上清液溫和地轉移至保持在冰上的新的微量離心管中。 6. 通過Pierce™ BCA蛋白質測定試劑盒測量蛋白質濃度。 7. 根據BCA蛋白質定量的結果，使用RIPA緩衝液加4× LDS樣品緩衝液和10×樣品還原劑將所有樣品都稀釋至相同的最終濃度(在4 μg/μL下)。在100℃下將樣品加熱10 min。 8. 繼續進行western印跡或將變性樣品保持在-80℃冰箱中以進行長期儲存。

Western印跡 1. 將蛋白質樣品添加至Novex® 4-12% Bis-Tris凝膠(26孔)中，10 μL/槽。 2. 用MES運行緩衝液，80 V持續30 min，接著120 V持續90 min進行電泳。 3. 用iBlot®2凝膠轉移裝置，以20 V、7 min將蛋白質轉移至硝化纖維素膜。 4. 對膜進行切割並保留目標部分，將膜用5-10 mL 1× TBS洗滌三次，每次5 min。 5. 在室溫下用5-10 mL Odyssey封閉緩衝液對非特異性蛋白質封閉1 h。 6. 將膜用1× TBST洗滌五次，每次5 min。 7. 在4℃下，在溫和振盪下，將膜與5-10 mL在具有0.1%吐溫20 (Tween 20)的Odyssey封閉緩衝液中新鮮製備的初級抗體一起孵育過夜。 8. 將膜用5-10 mL 1× TBST洗滌五次，每次5 min。 9. 這些接下來的步驟應在黑暗中操作。在室溫下，在溫和振盪下，將膜與5-10 mL在具有0.1%吐溫20的Odyssey封閉緩衝液中的二級抗體混合物一起孵育1 h。 10. 將膜用5-10 mL 1× TBST洗滌五次，每次5 min。 11. 將膜用5-10 mL 1× TBS洗滌兩次，每次5 min。 12. 通過Odyssey Clx系統檢測近紅外螢光信號。

條帶強度的定量

使用Image Studio Lite 5.2版軟體定量單個條帶的強度。

資料分析

獲得單個條帶的條帶強度以進行分析。相對於參考蛋白質來定量蛋白質表達，並且每個樣品中蛋白質表達的歸一化倍數是與媒介物組的比率。通過GraphPad Prism來解釋歸一化資料。

示例性化合物的代表性資料呈現於圖1和2中。

實施例 4 ：測試物品在雌性 Balb/c 裸小鼠 MOLT-4-luc 原位模型的治療中的體內功效研究

腫瘤細胞接種：將腫瘤細胞靜脈內注射至每個小鼠的尾部中以達成腫瘤產生。將動物隨機化，並且在MOLT-4-luc的平均生物發光達到約2.50E+06至3.00E+06 (個光子/秒)時開始治療。每個組中的測試物品施用和動物數目顯示於以下實驗設計表中。

每個模型的組設計

組	數目	治療	劑量(mg/kg)	給藥途徑	給藥時間表
1	6	媒介物	-	IV	QW*5W
2	6	DT2216	10	IV	QW*5W
3	6	化合物74	10	IV	QW*5W
3	6	化合物74	3	IV	QW*5W

終點：主要終點是觀察腫瘤生長和動物存活。每週一次測量每個動物的生物發光。接著使用生物發光的資料來計算T/C (%)值，其中T和C分別是在給定日治療組和對照組的平均生物發光。使用下式計算每個組的TGI：TGI (%)=[1-(Ti-T0)/(Vi-V0)]×100，其中Ti是在給定日治療組的平均生物發光，T0是在治療的第一天治療組的平均生物發光，Vi是在與Ti同一天媒介物對照組的平均生物發光，並且V0是在治療的第一天媒介物組的平均生物發光。2)主要終點是觀察腫瘤生長和動物存活。記錄所有小鼠死亡或處死，並且最後分析存活率。

每週一次測量每個動物的生物發光，並且每週兩次在excel檔中更新體重資料。即時報告任何異常發現。

示例性化合物的代表性資料呈現於圖3中。我們使用已報導的PROTAC DT2216作為參考化合物以進行比較（J Hematol Oncol. 2022年3月9日;15(1):23. doi: 10.1186/s13045-022-01241-3）。

III . 藥物劑型的製備

實施例 C1 ：口服膠囊

活性成分是式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)、式(I-H)、表1、表2、表3、表4、表5、表6、表7的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。通過將1-1000 mg活性成分與澱粉或其他合適粉末摻合物混合來製備用於口服施用的膠囊。將混合物併入適於口服施用的口服劑量單位諸如硬質明膠膠囊中。

實施例 C2 ：用於注射的溶液

活性成分是式(I-A)、式(I-B)、式(I-C1)、式(I-C2)、式(I-D1)、式(I-D2)、式(I-E1a)、式(I-E1b)、式(I-E2a)、式(I-E2b)、式(I-F)、式(I-G)、式(I-H)、表1、表2、表3、表4、表5、表6、表7的化合物或其藥學上可接受的鹽，並且以50 mg-eq/mL的濃度配製成在芝麻油中的溶液。

本文所述的實施例和實施方案僅出於說明目的，並且本領域技術人員想到的各種修改或變化將包括在本申請的精神和範圍以及隨附權利要求的範圍內。 參考文獻 1. Coultas, L., and Strasser, A. The role of the Bcl-2 protein family in cancer. Semin Cancer Biol. 13, 115−123 (2003)。 2. Geĺinas,C.,andWhite,E. BH3-onlyproteinsincontrol: Specificity regulates MCL-1 and BAK-mediated apoptosis. Genes Dev. 19, 1263−1268 (2005)。 3. Knight, T., Luedtke, D., Edwards, H., Taub, J. W., and Ge, Y. A delicate balance-The BCL-2 family and its role in apoptosis, oncogenesis, and cancer therapeutics. Biochem Pharmacol. 162, 250−261 (2019)。 4. Elmore, S. Apoptosis: A Review of Programmed Cell Death. Toxicol Pathol. 35, 495−516 (2007)。 5. Hanahan, D. and Weinberg, R. A. Hallmarks of cancer: the next generation. Cell. 144, 646–674 (2011)。 6. Ashkenazi, A., Fairbrother, W. J., Leverson, J. D. and Souers, A. J. From basic apoptosis discoveries to advanced selective BCL-2 family inhibitors. Nat Rev Drug Discov. 16, 273–284 (2017)。 7. Adams, J. M. and Cory, S. The Bcl-2 apoptotic switch in cancer development and therapy. Oncogene. 26, 1324–1337 (2007)。 8. Reed, J. C. Bcl-2–family proteins and hematologic malignancies: history and future prospects. Blood J Am Soc Hematol. 111, 3322–3330 (2008)。 9. Thomas, S. et al. Targeting the Bcl-2 family for cancer therapy. Expert Opin Ther Targets. 17, 61–75 (2013)。 10. Opferman, J. T. Attacking cancer’s Achilles heel: antagonism of anti‐apoptotic BCL‐2 family members. FEBS J. 283, 2661–2675 (2016)。 11. Garner, T. P., Lopez, A., Reyna, D. E., Spitz, A. Z. & Gavathiotis, E. Progress in targeting the BCL-2 family of proteins. Curr Opin Chem Biol. 39, 133–142 (2017)。 12. Crespo-Garcia, S. Et al. Pathological angiogenesis in retinopathy engages cellular senescence and is amenable to therapeutic elimination via BCL-xL inhibition. Cell Metab. 33, 818-832 (2021)。 13. J Kale, EJ Osterlund, and DW Andrews. BCL-2 family proteins: changing partners in the dance towards death. Cell Death & Differentiation. 2018; 25: 65-80 14. M Stevens and S Oltean. Modulation of the Apoptosis Gene Bcl-x Function Through Alternative Splicing. Front. Genet. 2019 Sept 6; 10 (804) 15. LP Billen, CL Kokoski, JF Lovell, B Leber, and DW Andrews. Bcl-XL Inhibits Membrane Permeabilization by Competing with Bax. PLoS Biology. 2008 June 10; 6 (6): e147 16. Tao et al., “Discovery of a Potent and Selective BCL-XL Inhibitor with In Vivo Activity” ACS Med. Chem. Lett.2014. DOI: 10.1021/ml5001867 17. Khan et al., J. Hematol. Oncol. 2022 Mar 9;15(1):23. doi: 10.1186/s13045-022-01241-3。

圖 1顯示在用本文公開的化合物治療後小鼠異種移植模型中隨時間的腫瘤體積。

圖 2顯示在用本文公開的化合物治療後小鼠異種移植模型中隨時間的腫瘤體積。

圖 3顯示在用本文公開的化合物治療後小鼠異種移植模型中隨時間的腫瘤體積。 [援引併入]

本說明書中提及的所有出版物、專利和專利申請均通過引用併入本文，用於本文所確定的特定目的。

Claims

一種化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，具有式(I-A)的結構： (I-A) 其中， o是0、1、2或3； Y是S或CH=CH；每個R ¹獨立地選自鹵素、硝基、氰基、-OR ²、-N(R ²) ₂、-SR ²、-S(O)R ²、-S(O) ₂R ²、-S(O) ₂N(R ²) ₂、-NR ²S(O) ₂R ²、-NR ²S(O) ₂N(R ²) ₂、-C(O)R ²、-C(O)OR ²、-OC(O)R ²、-OC(O)OR ²、-OC(O)N(R ²) ₂、-NR ²C(O)R ²、-NR ²C(O)OR ²、-NR ²C(O)N(R ²) ₂、-C(O)N(R ²) ₂、-P(O)(OR ²) ₂、-P(O)(R ²) ₂、任選地被取代的C _1-6烷基、任選地被取代的C _1-6鹵代烷基、任選地被取代的C _1-6烷氧基，任選地被取代的C _2-6烷基，其中1至2個-CH ₂-單元被N、O或S替換，前提是兩個相鄰的-CH ₂-單元不被同時替換，任選地被取代的C _3-12碳環基和任選地被取代的3元至12元雜環基；每個R ²各自獨立地是氫或任選地被取代的C _1-6烷基；或兩個R ²與它們所連接的氮原子一起可形成任選地被取代的3-6元雜環基環； V是鍵、、任選地被取代的雜芳基、任選地被取代的芳基、任選地被取代的C _3-7環烷基或任選地被取代的雜環基；或一起形成稠合雙環芳基環或稠合雙環雜芳基環，其各自被o個R ¹的實例取代； L選自a) C ₂-C ₁₅亞烷基，b) C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換，前提是兩個O原子不是相鄰的，和c) -Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*；其中， Ak ¹選自-(CR ³R ⁴) _k-； Ak ²選自-(CR ³R ⁴) _m-； Ak ³選自-(CR ³R ⁴) _n-； k、m和n中的每一者是0至6；每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基；或 R ³和R ⁴一起形成氧代基； Z ¹和Z ²各自獨立地選自鍵、-O-、亞雜環基和亞環烷基；其中Z ¹和Z ²中的至少一者是亞雜環基或亞環烷基；其中與U的鍵合點通過星號指示，並且 U是選自VHL配體的募集基序。
如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： Y是S。
如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： Y是CH=CH。
如請求項1-3中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：每個R ¹獨立地選自鹵素、硝基、氰基、-OR ²、-N(R ²) ₂、-SR ²、-S(O)R ²、-S(O) ₂R ²、-S(O) ₂N(R ²) ₂、-NR ²S(O) ₂R ²、-NR ²S(O) ₂N(R ²) ₂、-C(O)R ²、-C(O)OR ²、-OC(O)R ²、-OC(O)OR ²、-OC(O)N(R ²) ₂、-NR ²C(O)R ²、-NR ²C(O)OR ²、-NR ²C(O)N(R ²) ₂、-C(O)N(R ²) ₂、-P(O)(OR ²) ₂、-P(O)(R ²) ₂、任選地被取代的C _1-6烷基、任選地被取代的C _1-6鹵代烷基、任選地被取代的C _1-6烷氧基，任選地被取代的C _2-6烷基，其中1至2個-CH ₂-單元被N、O或S替換，前提是兩個相鄰的-CH ₂-單元不被同時替換，任選地被取代的C _3-12碳環基和任選地被取代的3元至12元雜環基，其中所述烷基、鹵代烷基、烷氧基、碳環基和雜環基獨立地任選地被一個或多個R ^e取代；每個R ²獨立地是氫或任選地被取代的C _1-6烷基，其中所述烷基任選地被一個或多個R ^e取代；或兩個R ²與它們所連接的氮原子一起可形成任選地被取代的3-6元雜環基環，其中所述雜環基環任選地被一個或多個R ^e取代；每個R ^e獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基；或連接於同一原子的兩個R ^e一起形成氧代基； V是鍵、、任選地被取代的雜芳基、任選地被取代的芳基、任選地被取代的C _3-7環烷基或任選地被取代的雜環基，其中所述雜芳基、芳基、環烷基或雜環基任選地被一個或多個R ^V取代；或一起形成稠合雙環芳基環或稠合雙環雜芳基環，其各自被o個R ¹的實例取代；並且每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基；或連接於環烷基或雜環基的同一原子的兩個R ^V一起形成氧代基。
如請求項1-4中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：每個R ¹獨立地選自任選地被取代的C _1-6烷基、任選地被取代的C _1-6鹵代烷基、任選地被取代的C _1-3烷氧基、鹵素、-N(R ²) ₂、-OR ²和氰基，其中所述烷基、鹵代烷基和烷氧基各自獨立地任選地被一個或多個R ^e取代；並且每個R ^e獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基；或連接於同一原子的兩個R ^e一起形成氧代基。
如請求項1-5中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：每個R ¹獨立地選自鹵素、C _1-6烷基和C _1-6鹵代烷基。
如請求項1-6中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：每個R ¹獨立地選自-F、-Cl、-CH ₃、-CH ₂CH ₃和-CF ₃。
如請求項1-6中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：每個R ¹獨立地選自-Cl、-CH ₃、-CH ₂CH ₃和-CF ₃。
如請求項1-8中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： o是0或1。
如請求項1-9中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： L是C _4-15亞烷基。
如請求項1-10中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： L是C _4-9亞烷基。
如請求項1-11中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： L是C _5-8亞烷基。
如請求項1-9中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： L是C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換，具有結構–(CH ₂) _x-O–(CH ₂) _y-*，其中： x是0至10； y是1至10；其中與所述募集基序的鍵合點通過星號指示；並且其中x和y的總和不超過14。
如請求項13所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： x是0至7；並且 y是1至7。
如請求項13或請求項14所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： x是0至6；並且 y是1至6。
如請求項1-9或11-15中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： L是C ₂- ₁₅亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換，具有選自以下的結構：、、、、、、和。
如請求項1-9中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： L是C ₄- ₁₅亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換，具有結構–(CH ₂) _j—O–(CH ₂) _p-O–(CH ₂) _v-*，其中： j是0至10； p是1至10； v是1至10；其中與所述募集基序的鍵合點通過星號指示；並且其中j、p和v的總和不超過13。
如請求項17所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： j是0至4； p是1至5；並且 v是1至4。
如請求項17或請求項18所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： j是0至2； p是2至4；並且 v是1至3。
如請求項1-9或15-19中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： L是C ₄- ₁₅亞烷基，其中一個或多個-CH ₂-單元被O替換，具有選自以下的結構：、、、、和。
如請求項1-9中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： L是-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*，具有選自以下的結構：、、、、、、、、、、、、、、、、、、或； X、X1和X2在每種情況下獨立地是CH或N； k是0至6； m是0至6； n是0至6；並且其中與所述VHL配體的鍵合點通過星號指示。
如請求項21所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基。
如請求項1-9、21或22中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： L是-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*，具有選自以下的結構：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、和； X、X1和X2在每種情況下獨立地是CH或N； k是0至6； m是0至6； n是0至6；並且其中與所述VHL配體的鍵合點通過星號指示。
如請求項1-9或21-23中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： L是-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*，具有選自以下的結構：、、、、、、、、、和； X、X1和X2在每種情況下獨立地是CH或N； k是0至6； m是0至6； n是0至6；並且其中與所述VHL配體的鍵合點通過星號指示。
如請求項21-24中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： k是0至3； m是0至3；並且 n是0至2。
如請求項1-9或21-25中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： L是-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*，具有選自以下的結構：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、和；並且其中與所述VHL配體的鍵合點通過星號指示。
如請求項1-9中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： L是-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*，具有選自以下的結構：、、和； X1、X2、X3和X4在每種情況下獨立地是CH或N； k是0至6； m是0至6； n是0至6；並且其中與所述VHL配體的鍵合點通過星號指示。
如請求項27所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：每個R ³和R ⁴獨立地選自氫、鹵素、氨基、羥基、氰基、C _1-3烷基和C ₃環烷基。
如請求項1-9、27或28中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： L是-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*，具有選自以下的結構：、、和； X1、X2、X3和X4在每種情況下獨立地是CH或N； k是0至6； m是0至6； n是0至6；並且其中與所述VHL配體的鍵合點通過星號指示。
如請求項27-29中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： k是0或1； m是0或1；並且 n是0至2。
如請求項1-9或27-30中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： L是-Ak ¹-Z ¹-Ak ²-Z ²-Ak ³-*，具有選自以下的結構：、、、、、、、、、、、和；並且其中與所述VHL配體的鍵合點通過星號指示。
如請求項1-31中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： V是鍵。
如請求項1-31中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： V是任選地被取代的雜芳基。
如請求項33所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述雜芳基是吡唑基、三唑基、噻唑基、噻二唑基、噁唑基、噁二唑基、吡啶基、嘧啶基或噠嗪基，其各自任選地被一個或多個R ^V取代；並且每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基。
如請求項33或請求項34所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述雜芳基是、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、或；每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基；並且其中星號指示與L的連接點。
如請求項33-35中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述雜芳基是、、、、、、、、、、、、、、、、或；並且其中星號指示與L的連接點。
如請求項1-31中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： V是任選地被取代的芳基。
如請求項37所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述芳基是任選地被一個或多個R ^V取代的苯基；並且每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基。
如請求項37或請求項38所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述芳基是、或；每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基；並且其中星號指示與L的連接點。
如請求項37-39中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述芳基是；並且其中星號指示與L的連接點。
如請求項1-31中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： V是任選地被取代的C _3-7環烷基。
如請求項41所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述C _3-7環烷基是環丙基、環丁基、環戊基、環己基或環庚基，其各自任選地被一個或多個R ^V取代；並且每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基；或連接於同一原子的兩個R ^V一起形成氧代基。
如請求項41或請求項42所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述C _3-7環烷基是、、、、、、、、、或；每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基；或連接於同一原子的兩個R ^V一起形成氧代基；並且其中星號指示與L的連接點。
如請求項41-43中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述C _3-7環烷基是；並且其中星號指示與L的連接點。
如請求項1-31中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： V是任選地被取代的雜環基。
如請求項45所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述雜環基是吡咯烷基、呱嗪基、呱啶基或嗎啉代基，其各自任選地被一個或多個R ^V取代；並且每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基；或連接於同一原子的兩個R ^V一起形成氧代基。
如請求項45或請求項46所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述雜環基是、、、或；每個R ^V獨立地選自氫、鹵素、-CN、-OH、-OCH ₃、-S(=O)CH ₃、-S(=O) ₂CH ₃、-S(=O) ₂NH ₂、-S(=O) ₂NHCH ₃、-S(=O) ₂N(CH ₃) ₂、-NH ₂、-NHCH ₃、-N(CH ₃) ₂、-C(=O)CH ₃、-C(=O)OH、-C(=O)OCH ₃、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆鹵代烷基、C ₁-C ₆羥基烷基、C ₁-C ₆氨基烷基和C ₁-C ₆雜烷基；或連接於同一原子的兩個R ^V一起形成氧代基；並且其中星號指示與L的連接點。
如請求項45-47中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述雜環基是；並且其中星號指示與L的連接點。
如請求項1-31中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： V是。
如請求項1-31中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：一起形成稠合雙環芳基環或稠合雙環雜芳基環，其各自被o個R ¹的實例取代。
如請求項50所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：一起形成被o個R ¹的實例取代的稠合雙環芳基環。
如請求項51所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述稠合雙環芳基環是被o個R ¹的實例取代的萘基。
如請求項51或請求項52所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述稠合雙環芳基環是、、或；並且其中星號指示與L的連接點。
如請求項51-53中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述稠合雙環芳基環是；其中星號指示與L的連接點。
如請求項50所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：一起形成被o個R ¹的實例取代的稠合雙環雜芳基環。
如請求項55所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述稠合雙環雜芳基環是喹啉基、異喹啉基、噌啉基、喹唑啉基、喹喔啉基或吲哚基，其各自被o個R ¹的實例取代。
如請求項55或請求項56所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述稠合雙環雜芳基環是、、、、、、、、、、或；並且其中星號指示與L的連接點。
如請求項55-57中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中：所述稠合雙環雜芳基環是；並且其中星號指示與L的連接點。
如請求項1-58中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： U選自、、、、、、、、、、和。
如請求項1-59中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： U選自、、、、、、、、和。
如請求項1-60中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： U選自和。
如請求項1-61中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： U是。
如請求項1-61中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中： U是。
如請求項1或請求項4所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體，其中所述化合物具有表1、表2、表3、表4、表5、表6或表7中所列的結構。
一種藥物組合物，包含請求項1-64中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體。
如請求項1-64中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體或如請求項65所述的藥物組合物，用於治療人體或動物體的方法中。
如請求項1-64中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體或如請求項65所述的藥物組合物，用於治療癌症或腫瘤性疾病的方法中。
請求項1-64中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體在製造用於治療癌症或腫瘤性疾病的藥物中的用途。
一種治療有需要的患者的癌症的方法，包括向所述患者施用請求項1-64中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體或請求項65所述的藥物組合物。
一種治療有需要的患者的由衰老細胞引起的疾病的方法，包括向所述患者施用請求項1-64中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體或請求項65所述的藥物組合物。
如請求項70所述的方法，其中由衰老細胞引起的所述疾病是眼部疾病。
如請求項71所述的方法，其中所述眼部疾病是年齡相關性黃斑變性(AMD)或糖尿病黃斑水腫(DME)。
如請求項1-64中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體或如請求項65所述的藥物組合物，用於治療由衰老細胞引起的疾病的方法中。
如請求項73所述的化合物，其中由衰老細胞引起的所述疾病是眼部疾病。
如請求項74所述的化合物，其中所述眼部疾病是年齡相關性黃斑變性(AMD)或糖尿病黃斑水腫(DME)。
請求項1-64中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、前藥、立體異構體或互變異構體在製造用於治療由衰老細胞引起的疾病的藥物中的用途。
如請求項76所述的用途，其中由衰老細胞引起的所述疾病是眼部疾病。
如請求項77所述的用途，其中所述眼部疾病是年齡相關性黃斑變性(AMD)或糖尿病黃斑水腫(DME)。