TW202308625A - 奈米藥物粒子、其用途、以及其製備方法 - Google Patents

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Abstract

一種奈米藥物粒子，包含：海藻酸、以及喜樹鹼類化合物。喜樹鹼類化合物接枝於海藻酸，其中海藻酸和喜樹鹼類化合物自組裝形成奈米微球。在此亦提供奈米藥物粒子的製備方法，包含：將海藻酸修飾，形成具有胺基的海藻酸；將喜樹鹼類化合物修飾，形成具有羧基的喜樹鹼類化合物；將具有胺基的海藻酸與具有羧基的喜樹鹼類化合物反應，形成喜樹鹼-海藻酸聚合物，並且喜樹鹼-海藻酸聚合物在水溶液中自組裝而形成奈米微球。

Description

奈米藥物粒子、其用途、以及其製備方法
本揭示內容係關於將喜樹鹼類藥物的改質所形成奈米藥物粒子和製備方法。
喜樹鹼(Camptothecin)是從喜樹屬的樹皮和莖中發現的拓拓樸異構酶抑制劑，其在臨床前階段顯示出對於多種癌症有非常好的抗癌作用，但由於其溶解度低而難以使用。喜樹鹼的衍生物例如拓普替康、伊立替康等具有治療乳癌、小細胞癌、大腸直腸癌等等之藥效，但在性質上的常常因為水溶性不佳或者是生物利用度過低並且具有嚴重的副作用，進而大大地限制其臨床上的應用。
本揭示內容一些實施方式提供了一種奈米藥物粒子，包含：海藻酸、以及喜樹鹼類化合物。喜樹鹼類化合物接枝於海藻酸。其中海藻酸和喜樹鹼類化合物自組裝形成奈米微球。
在一些實施方式中，在奈米藥物粒子中，喜樹鹼類化合物經由
Figure 02_image001
接枝於海藻酸。
在一些實施方式中，喜樹鹼-海藻酸聚合物中，喜樹鹼與海藻酸之間的鏈結區段包含醯胺基。
在一些實施方式中，在奈米藥物粒子中，海藻酸的分子量小於40,000。
在一些實施方式中，在奈米藥物粒子中，喜樹鹼類化合物為選自由喜樹鹼、拓普替康、伊立替康、和SN-38所組成之群組。
在一些實施方式中，在奈米藥物粒子中，奈米藥物粒子的粒徑範圍為200至600奈米。
在一些實施方式中，在奈米藥物粒子中，奈米藥物的粒子為微胞，微胞的外部為海藻酸所組成的親水層，並且微胞的內部為喜樹鹼類化合物所組成的疏水層。
在一些實施方式中，在奈米藥物粒子中，更包含疏水性分子，溶於微胞的疏水層。在一些實施方式中，在奈米藥物粒子中，疏水性分子為抗癌藥物或顯影劑。
本揭示內容的一些實施方式提供了使用奈米藥物粒子於製造癌症藥物之用途。
本揭示內容的一些實施方式提供了癌症的治療方法，包含：施加奈米藥物粒子於癌症病患。奈米藥物粒子包含海藻酸、以及喜樹鹼類化合物。喜樹鹼類化合物接枝於海藻酸，海藻酸和喜樹鹼類化合物自組裝形成奈米微球。
本揭示內容的一些實施方式提供了一種奈米藥物粒子的製備方法，包含：將海藻酸修飾，形成具有胺基(-NH 2)的海藻酸；將喜樹鹼類化合物修飾，形成具有羧基(-COOH)的喜樹鹼類化合物；將具有胺基的海藻酸與具有羧基的喜樹鹼類化合物反應，形成喜樹鹼-海藻酸聚合物，並且喜樹鹼-海藻酸聚合物在水溶液中自組裝而形成奈米微球。
在一些實施方式中，奈米藥物粒子的製備方法，更包含：在將海藻酸修飾之前，降解海藻酸至海藻酸的分子量小於約40,000Da。
在一些實施方式中，在奈米藥物粒子的製備方法中，將海藻酸修飾包含利用乙二胺作為反應物。
在一些實施方式中，在奈米藥物粒子的製備方法中，將喜樹鹼類化合物修飾包含利用丁二酸酐作為反應物。
在一些實施方式中，在奈米藥物粒子的製備方法中，喜樹鹼類化合物為選自由喜樹鹼、拓普替康、伊立替康、和SN-38所組成之群組。
在一些實施方式中，奈米藥物粒子的製備方法，更包含：加入疏水性化合物，與奈米微球混合，使疏水性化合物溶於奈米微球的內部。
在一些實施方式中，在奈米藥物粒子的製備方法中，疏水性化合物為抗癌藥物或顯影劑。
為了使本揭示內容的敘述更加詳盡與完備，下文將參照附隨圖式來描述本發明之實施方式與具體實施例；但這並非實施或運用本揭示內容具體實施例的唯一形式。以下所揭示的各實施例，在有益的情形下可相互組合或取代，也可在一實施例中附加其他的實施例，而無須進一步的記載或說明。
喜樹鹼(Camptothecin,CPT)的結構式為
Figure 02_image003
，為了能夠改善喜樹鹼的水溶性及增強其藥物傳輸性質，本揭示內容的一些實施方式提供了將喜樹鹼嫁接於胺化後的海藻酸的方法，和由喜樹鹼-海藻酸聚合物自組裝所形成的奈米微球。
在本揭示內容中的奈米微球所採用的海藻酸為通過美國食品藥物管理局許可的高分子，具有良好的生物相容性、低毒性、和無抗原性的性質。
參看第1A圖，示出了形成海藻酸-喜樹鹼聚合物的方法的示意圖。低分子量的海藻酸鈉與乙二胺反應，形成具有胺基(-NH 2)的海藻酸。之後，具有胺基的海藻酸與經丁二酸酯修飾的喜樹鹼(S-CPT)反應，形成海藻酸-喜樹鹼聚合物。
形成海藻酸-喜樹鹼聚合物各個步驟在之後的揭示內容和第2A圖至第2C圖將更詳細說明。
參看第1B圖，繪示海藻酸-喜樹鹼聚合物形成自組裝的奈米微球的示意圖。一個海藻酸-喜樹鹼聚合物分子10包含海藻酸12和接枝於海藻酸12的喜樹鹼類化合物14。海藻酸-喜樹鹼聚合物分子10具有兩親性，海藻酸12的部分具有親水性，並且喜樹鹼類化合物14的部分具有疏水性。在水溶液中，多個海藻酸-喜樹鹼聚合物分子10聚集之後自組裝形成奈米微球20。在一些實施方式中，奈米微球20是微胞(Micell)的結構，具有親水性的外層22和疏水性的內層24。外層22主要由具親水性的海藻酸所組成，內層24主要由具疏水性的喜樹鹼類化合物所組成。
第1C圖繪示根據另一些實施方式的奈米微球的示意圖。奈米微球30為一微胞，包含親水性的外層32和疏水性的內層34。奈米微球30還包含疏水性的化合物36，溶於由疏水性的喜樹鹼類化合物所組成的內層34中。換言之，奈米微球30不僅含有喜樹鹼類化合物，亦可裝載其他疏水性分子，例如其他種類的抗癌藥物、顯影劑、或其組合。在一些實施方式中，其他種類的抗癌藥物可例如為但不限於紫杉醇、多西賽非、阿霉素、薑黃素、米托蔥醌、柔紅霉素、依托泊苷、替尼泊苷、長春新鹼等難溶性抗癌藥。在一些實施方式中，顯影劑可例如為靛氰綠、含釓顯影劑等疏水性顯影劑。將疏水性分子溶於奈米微球的微胞之內可經由將疏水性分子與海藻酸-喜樹鹼聚合物混合，例如以攪拌器或超音波攪拌，使疏水性分子溶於奈米微球的疏水性的內層中。
海藻酸-喜樹鹼聚合物的製備：
步驟：海藻酸鈉(sodium alginate，簡稱SA)的降解
將海藻酸鈉降解為低分子量的海藻酸鈉的益處在於當藥物和載體進入人體時，腎臟可以代謝較低分子量(例如，分子量介於15,000至30,000)的海藻酸。
在一些實施方式中，低分子量的海藻酸鈉的分子量小於約40,000Da，例如約15,000Da至約38,000Da，諸如約16,000Da、約20,000Da、約25,000Da、約30,000Da、約35,000Da、或約38,000Da。
實施例1：
利用水解方式，將5克海藻酸鈉溶入45毫升濃度為1M的醋酸中，使用加熱包控溫85℃，攪拌反應24小時；反應完後放涼至室溫，再加入濃度5M 氫氧化鈉中和；用超純水透析2天，以去除小分子雜質；以轉速9000 rpm，離心15分鐘，取上層溶液；冷凍並進行冷凍乾燥。
步驟：喜樹鹼酯化反應(CPT-COOH的合成)
參看第2A圖，繪示形成具有羧基(-COOH)的喜樹鹼的方法。
實施例2：
取0.0352克喜樹鹼(CPT)、0.2024克丁二酸酐(succinic anhydride)作為反應物，0.0122克4-二甲氨基吡啶 (4-Dimethylaminopyridine, DMAP)為催化劑，加入5毫升吡啶(pyridine)做為溶劑(同時也是活化酸酐(anhydride)的反應催化劑)，放置油浴控溫80℃並持續攪拌，通入氮氣(N 2)1小時；接著繼續放置油浴控溫80℃並持續攪拌72小時；反應完後利用油幫浦去除溶劑(吡啶)；再加入約0.5毫升濃度為1M之HCl。加水以轉速11000rpm，離心10分鐘，離心機使用Eppendorf FA-45-6-30轉子(rotor)，其直徑為12.3公分。之後倒掉上層溶液；加入 CH 3OH回流1小時(甲醇可將未反應的喜樹鹼溶解)；放置於室溫進行產物的再結晶；抽氣過濾得到具有羧基的喜樹鹼(CPT-COOH)，或者離心 (9000rpm，10分鐘)，倒掉上層溶液重複2次，接著幫浦抽乾。
步驟：乙二胺修飾海藻酸鈉(SA-NH 2合成)
參見第2B圖，繪示形成具有胺基(-NH 2)的海藻酸的方法。
實施例3：
取0.25克降解後的海藻酸鈉(SA)，溶於15毫升水中，再加入0.48毫升乙二胺、47.9毫克1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺(1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide，EDC))、14.3毫 克NHS (N-Hydroxysuccinimide)，於常溫攪拌反應24小時；用15公升超純水透析；轉速9000rpm，離心10分鐘，取上層溶液；冷凍乾燥，取得產物具有胺基的海藻酸。
步驟：具有羧基的喜樹鹼與具有胺基的海藻酸的嫁接
參見第2C圖，繪示由具有羧基的喜樹鹼與具有胺基的海藻酸形成喜樹鹼-海藻酸聚合物的方法。
實施例4:
取19.2毫克的EDC、8.22毫克NHS(NHS)、20毫克具有羧基的喜樹鹼(CPT-COOH)至樣品瓶，搖晃10分鐘，再加入20毫克具有胺基的海藻酸(SA-NH 2)、2.5毫升二甲基亞碸(DMSO)(用於溶解CPT-COOH)及2.5毫升超純水為溶劑，放置油浴控溫70℃並持續攪拌，通入氮氣(N 2)1小時；接著繼續放置油浴控溫70℃並持續攪拌24小時；用10公升超純水透析，以去除副產物；冷凍乾燥，取得產物喜樹鹼-海藻酸聚合物(CPT-SA)。
由於海藻酸具有胺基，喜樹鹼具有羧基，因此所形成的喜樹鹼-海藻酸聚合物中，喜樹鹼與海藻酸之間的鏈結區段包含醯胺基。如在第1A圖和第2C圖中所示，喜樹鹼經由
Figure 02_image001
接枝於海藻酸。
在一些實施方式中，以喜樹鹼的衍生物，形成喜樹鹼-海藻酸聚合物。喜樹鹼的衍生物可例如為拓普替康(Topotecan，又稱Hycamtin ®)、伊立替康(Irinotecan，又稱Camptosar ®)、或SN-38。拓普替康的結構式為：
Figure 02_image005
。伊立替康的結構式為：
Figure 02_image007
。SN-38的結構式為
Figure 02_image009
。
將喜樹鹼類化合物嫁接於胺化後海藻酸後，可由1H-NMR或UV-VIS來進行其化學性質分析，確認其鍵結於海藻酸之上。喜樹鹼-海藻酸嫁接之高分子會形成雙性高分子並在水溶液之中具有自組裝之性質，之後進一步檢測藥物接枝率、奈米微球的粒徑、界達電位、並且利用電子顯微鏡以觀測奈米微球的形態特徵。
在一些實施例中，計算奈米微球中的喜樹鹼藥物接枝率(%)，如第3圖所示，通過UV-VIS分光光度計，測量自組裝的奈米微球樣品中具有羧基的喜樹鹼(CPT-COOH)的吸收光譜圖。針對CPT-COOH吸收光譜圖鋒值(波長362nm之鋒值)，根據比爾-朗伯定律（Beer–Lambert law）—對於相同樣品，光路徑長度、吸收係數均相同，溶液的吸光度會跟溶液中吸光物質的濃度成正比，作出具有羧基的喜樹鹼的吸光度與濃度關係圖；再藉此與喜樹鹼-海藻酸聚合物(CPT-SA)的吸收鋒值的強度比對，帶回檢量線公式，算出喜樹鹼-海藻酸聚合物中嫁接了重量比3.2%的具有羧基的喜樹鹼。
Figure 02_image011
第4圖示出了根據一實施例所得的奈米微球的粒徑分佈。由動態光散射粒徑分析儀(Dynamic light scattering, DLS)可以發現在海藻酸嫁接了喜樹鹼之後，所形成的結構具有奈米粒子的特性。第5圖示出了此實施例所得的奈米微球的界達電位。以下表一示出了奈米粒子的尺寸和界達電位。可見在此實施例中奈米粒子的平均尺寸約為216± 29.3奈米，界達電位提升至約-18.22mV，帶有負電性質之特性。
表一
樣品名稱 尺寸(nm) 界達電位(mV)
喜樹鹼-海藻酸聚合物(0.5mg/ml) 216.0 ± 29.3 -18.45 mV
臨界微胞濃度(Critical Micell Concentration)測定
在另一實施例中，以尼羅紅做為探針，將疏水性的尼羅紅(Nile Red)染劑與喜樹鹼-海藻酸聚合物的奈米微球攪拌混合後，之後測定奈米微球中由尼羅紅所發出的螢光強度，因此可測得奈米微球的臨界微胞濃度。
第6A圖示出不同濃度(mg/ml)的喜樹鹼-海藻酸聚合物樣品中的尼羅紅的螢光強度值(單位：Absorbance Unit, a.u.)。顯示當水溶液中，含較低濃度的喜樹鹼-海藻酸聚合物時，樣品中所測的尼羅紅的螢光強度極低，代表沒有或幾乎沒有微胞形成。當水溶液中含較高濃度的喜樹鹼-海藻酸聚合物時，可測得顯著的尼羅紅的螢光，例如喜樹鹼-海藻酸聚合物的濃度為4mg/ml、3mg/ml、2mg/mg和1mg/ml的濃度時。這代表喜樹鹼-海藻酸聚合物自組裝所形成的奈米微球為微胞結構且尼羅紅進入並溶於疏水性的奈米微球的內層中。
第6B圖為根據第6A圖的實施例，示出喜樹鹼-海藻酸聚合物的濃度的Log值與螢光強度的關係，可看出喜樹鹼-海藻酸聚合物的濃度在約0.052重量%的濃度時具有臨界微胞濃度。
第7A圖至第7C圖示出根據一些實施例所形成的奈米微球的電子顯微鏡的影像。
第7A圖為奈米微球的穿透式電子顯微鏡影像，顯示奈米微球的粒徑分別為302奈米和357奈米，並且奈米微球的結構具有外層和內層。
第7B圖為奈米微球的掃描式電子顯微鏡影像，顯示此實施例所得的奈米粒子的粒徑範圍在約200奈米至約600奈米之間。
第7C圖示出一個奈米微球的掃描式電子顯微鏡影像，此奈米微球具有約599奈米的粒徑。
喜樹鹼藥物的體外釋放
之後測試由喜樹鹼-海藻酸聚合物所自組裝形成的奈米微球的藥物釋放特性。分別比較(1)32μg/ml 喜樹鹼在pH=7.4的磷酸鹽緩衝生理食鹽水(Phosphate Buffered Saline, PBS)(控制組)、(2)1mg/ml喜樹鹼-海藻酸聚合物在pH=7.4的PBS、和(3)1mg/ml喜樹鹼-海藻酸聚合物在pH=5.0的PBS這些不同條件下喜樹鹼的體外釋放程度。所測試的時間為168小時，測試的溫度為37℃，使用截留分子量(MWCO)2000Da的透析袋。
第8圖示出了上述三種條件下隨著時間喜樹鹼的釋放比例。以下表二示出根據藥物體外釋放所測得的釋放資料，代入Korsmeyer-Peppas模型，所得的相關係數的數值。
表二
系統   R 2 n K
喜樹鹼 0.957913 0.099854 44.25132
喜樹鹼-海藻酸聚合物(pH=5.0) 0.993384 0.051399 27.19485
喜樹鹼-海藻酸聚合物(pH=7.4) 0.979796 0.068695 28.68048
由第8圖和表二可知，相較於未經修飾的喜樹鹼(只有喜樹鹼的控制組)，喜樹鹼-海藻酸聚合物以較緩慢的方式釋放喜樹鹼，因此具有相對較穩定的性質。此外，相較於在pH=7.4的PBS中，在pH=5的PBS中，喜樹鹼的藥物釋放速度較快。這顯示當喜樹鹼-海藻酸聚合物的奈米微球處於較酸性的環境中，能夠實現喜樹鹼的較快速釋放。
細胞毒殺性質測試
之後比較未經修飾的喜樹鹼和喜樹鹼-海藻酸聚合物對癌細胞株的細胞毒殺效果。
在一實施例中，分別地將喜樹鹼和喜樹鹼-海藻酸聚合物施加於A549細胞(人類非小細胞型肺腺癌細胞株)。每個測試孔的細胞量為100個細胞。施加藥物後24小時，量測細胞數目。第9A圖顯示以A549細胞測試的結果，其中橫軸代表不同的藥物劑量，例如1.5mg(48μg)，代表喜樹鹼-海藻酸聚合物的添加量為1.5mg，而其中的喜樹鹼的量為48μg，而且未經修飾的喜樹鹼的添加量為48μg。第9A圖顯示在較低的濃度下，相較於喜樹鹼，喜樹鹼-海藻酸聚合物具有顯著的細胞毒殺效果。
以下表三示出對於A549細胞，喜樹鹼的IC 50(半抑制濃度)和喜樹鹼-海藻酸聚合物的IC 50數值的差異。IC 50降低倍數=[IC 50數值(喜樹鹼)]/[IC 50數值(喜樹鹼-海藻酸聚合物)]。表三顯示喜樹鹼的IC 50是喜樹鹼-海藻酸聚合物的IC 50的3.87倍。
表三
處理A549細胞的樣品 IC 50數值
喜樹鹼 40.1247μg/ml
喜樹鹼-海藻酸聚合物 0.324mg/ml (10.368μg/ml)
IC 50降低倍數 3.87倍
在另一實施例中，分別地將喜樹鹼和喜樹鹼-海藻酸聚合物施加於HT-29細胞(人類大腸直腸癌細胞株)，其中每個測試孔的細胞量為100個細胞，施加藥物後24小時，量測細胞數目。第9B圖顯示HT-29細胞測試的結果。其中橫軸代表不同的藥物劑量，例如2mg(64μg)，代表喜樹鹼-海藻酸聚合物的添加量為2mg，而其中的喜樹鹼的量為64μg，而且未經修飾的喜樹鹼的添加量為64μg。第9B圖顯示在較高的濃度時(例如0.5mg/ml(12μg))，相較於喜樹鹼，喜樹鹼-海藻酸聚合物具有顯著的細胞毒殺效果。
以下表四示出對於HT-29細胞，喜樹鹼的IC 50(半抑制濃度)和喜樹鹼-海藻酸聚合物的IC 50數值的差異。表四顯示喜樹鹼的IC 50是喜樹鹼-海藻酸聚合物的IC50的1.15倍。
表四
處理HT-29細胞的樣品 IC 50數值
喜樹鹼 52.34g/ml
喜樹鹼-海藻酸聚合物 1.42mg/ml(45.44μg/ml)
IC 50降低倍數 1.15倍
本揭示內容所提供的改質海藻酸使海藻酸的方法使海藻酸具有更大的修飾潛力(海藻酸具有-NH 2)，並且能夠增加喜樹鹼其抗癌藥物水溶性。此外，在正常生理緩衝液條件下喜樹鹼-海藻酸聚合物具有緩釋藥物之性質並對癌細胞具有更強力之毒殺性質，為具有好前景的奈米藥物傳輸系統。
在一些實施方式中，喜樹鹼-海藻酸聚合物所形成的奈米藥物粒子的粒徑範圍為約200至約600奈米。
在習知技術中，未有將喜樹鹼嫁接於海藻酸的藥物載體，並且將喜樹鹼嫁接於其他載體分子的製備方法很繁瑣及複雜，且需多步驟才能形成藥物載體。本揭示內容提供了較為簡化的合成步驟以形成奈米藥物粒子。
本揭示內容的一些實施方式提供了使用包含如上所述的喜樹鹼類化合物的奈米藥物粒子於製造癌症藥物之用途。在一些實施方式中，上述癌症選自由胃癌、卵巢癌、子宮癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、胰腺癌、食道癌、口腔癌、直腸癌、結腸癌、大腸癌、腎癌、前列腺癌、黑色素瘤、肝癌、膽囊癌及其他膽道癌、甲狀腺癌、膀胱癌、腦及中樞神經系統癌、骨腫瘤、皮膚癌、非霍奇金及霍奇金淋巴瘤、血癌所組成的群組，但不限於此。
雖然本發明已以實施方式揭露如上，然其並非用以限定本發明，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可作各種之更動與潤飾，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
10:海藻酸-喜樹鹼聚合物分子 12:海藻酸 14:喜樹鹼類化合物 20:奈米微球 22:外層 24:內層 30:奈米微球 32:外層 34:內層 36:疏水性的化合物
第1A圖為形成海藻酸-喜樹鹼聚合物的方法的示意圖。 第1B圖繪示海藻酸-喜樹鹼聚合物形成自組裝的奈米微球的示意圖。 第1C圖繪示根據一些實施方式的奈米微球。 第2A圖繪示形成將喜樹鹼修飾形成具有羧基(-COOH)的喜樹鹼的方法的示意圖。 第2B圖繪示將海藻酸修飾形成具有胺基(-NH 2)的海藻酸的示意圖。 第2C圖繪示將具有胺基的海藻酸與具有羧基基團的喜樹鹼反應，形成喜樹鹼-海藻酸聚合物的方法的示意圖。 第3圖示出根據一實施例的具有羧基的喜樹鹼的UV-VIS吸收光圖譜。 第4圖示出根據一實施例的奈米微球的粒徑分佈圖。 第5圖示出奈米微球的界達電位的測量結果。 第6A圖示出根據一實施例，以尼羅紅(Nile Red)做為探針，測定接枝於海藻酸的喜樹鹼所形成的奈米微球的臨界微胞濃度。 第6B圖示出第6A圖的實施例的奈米微球的濃度Log值與螢光強度的關係。 第7A圖至第7C圖示出根據一些實施例的奈米微球的電子顯微鏡影像。 第8圖示出根據一實施例的喜樹鹼和喜樹鹼-海藻酸聚合物的體外藥物釋放結果。 第9A圖示出根據一實施例的A549細胞的細胞毒性實驗的結果。 第9B圖示出根據一實施例的HT-29細胞的細胞毒性實驗的結果。
國內寄存資訊(請依寄存機構、日期、號碼順序註記) 無 國外寄存資訊(請依寄存國家、機構、日期、號碼順序註記) 無

Claims (14)

  1. 一種奈米藥物粒子，包含： 海藻酸；以及 喜樹鹼類化合物，接枝於該海藻酸； 其中該海藻酸和該喜樹鹼類化合物自組裝形成一奈米微球。
  2. 如請求項1所述之奈米藥物粒子，其中該喜樹鹼類化合物經由
    Figure 03_image001
    接枝於該海藻酸。
  3. 如請求項1所述之奈米藥物粒子，其中該海藻酸的分子量小於約40,000Da。
  4. 如請求項1所述之奈米藥物粒子，其中該喜樹鹼類化合物為選自由喜樹鹼、拓普替康、伊立替康、和SN-38所組成之群組。
  5. 如請求項1所述之奈米藥物粒子，其中該奈米藥物粒子的粒徑範圍為200至600奈米。
  6. 如請求項1所述之奈米藥物粒子，其中該奈米藥物的粒子為一微胞，該微胞的外部為該海藻酸所組成的親水層，並且該微胞的內部為喜樹鹼類化合物所組成的疏水層。
  7. 如請求項6所述之奈米藥物粒子，其中該奈米藥物粒子更包含一疏水性分子，溶於該微胞的該疏水層。
  8. 一種使用如請求項1至7所述之奈米藥物粒子於製造治療癌症藥物之用途。
  9. 一種奈米藥物粒子的製備方法，包含： 將海藻酸修飾，形成具有胺基的海藻酸； 將喜樹鹼類化合物修飾，形成具有羧基的喜樹鹼類化合物； 將該具有胺基的海藻酸與該具有羧基的喜樹鹼類化合物反應，形成喜樹鹼-海藻酸聚合物，並且該喜樹鹼-海藻酸聚合物在水溶液中自組裝而形成奈米微球。
  10. 如請求項9所述之奈米藥物粒子的製備方法，更包含： 在將海藻酸修飾之前，降解該海藻酸至該海藻酸的分子量小於約40,000Da。
  11. 如請求項9所述之奈米藥物粒子的製備方法，其中所述將海藻酸修飾包含利用乙二胺作為反應物。
  12. 如請求項9所述之奈米藥物粒子的製備方法，其中所述將喜樹鹼類化合物修飾包含利用丁二酸酐作為反應物。
  13. 如請求項9所述之奈米藥物粒子的製備方法，其中該喜樹鹼類化合物為選自由喜樹鹼、拓普替康、伊立替康、和SN-38所組成之群組。
  14. 如請求項9所述之奈米藥物粒子的製備方法，更包含： 加入一疏水性化合物，與該奈米微球混合，使該疏水性化合物溶於該奈米微球的內部。
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