TW202237160A - 特定選擇和比例的血糖控制和抗肥胖益生菌組合物 - Google Patents

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Abstract

本發明提供人用（例如，包括動物）益生菌的一種或多種預定組合以及抗肥胖人用益生菌組合物的特定比例範圍及其製備方法及用途。特別是，本發明提供由無菌或抗生素處理的雙特異性磷酸酶 6（ Dusp6）基因剔除鼠所形成的食品級益生菌的特定組合物，其可有效改善腸道微生物群的相對豐度，並且還可用於減輕體重、脂肪量及/或脂肪細胞的大小並增加耗氧量及/或能量消耗，因此可用於治療或預防一有需要的受試者的肥胖症、控制血糖含量，或其相關的代謝失調或病症。

Description

特定選擇和比例的血糖控制和抗肥胖益生菌組合物
本發明涉及控制血糖及抗肥胖的人用益生菌組合物。具體而言，本發明涉及一種或多種預先選擇的組合以及特定比例範圍的血糖控制與抗肥胖的人用益生菌組合物及其製備方法及用途。
肥胖是現在已開發國家及許多發展中國家的流行病。由於肥胖會增加許多健康狀況的風險，包括心血管疾病、中風、第2型糖尿病、脂肪肝以及某些癌症，因此了解肥胖發展的詳細機制並尋求治療肥胖的新方法是非常重要的。
雙特異性磷酸酶（Dual-specificity phosphatases，DUSP）通常被認為是促分裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）途徑的負調節蛋白。一些研究顯示，DUSP6(亦稱為MKP-3，透過去磷酸化作用負向調節ERK1/2的活性，不過這種去磷酸化活性可能與其當下特有的分子微環境作用不同而改變。據研究指稱，具有Dusp6基因剔除的小鼠的心臟略大，對某些心臟病的抵抗力增強，Dusp6的基因表現也在肥胖及糖尿病小鼠的肝臟中上調，並促進培養的肝細胞及小鼠肝臟中的葡萄糖輸出。此外，已有研究顯示，全身性Dusp6的基因剔除可顯著降低血糖上升幅度，提高胰島素敏感性並增加對飲食誘導的肥胖（diet-induced obesity，DIO）的抵抗力。除了宿主內在基因遺傳及外在環境因素外，腸道微生物群已被認為是肥胖發展的重要調節因子。然而，之前仍不清楚 dusp6的基因剔除是否透過腸道微生物群來調節對肥胖發生的影響。
為了降低肥胖的風險並控制血糖，需要一種治療或預防肥胖或控制血糖的方法。
本發明主張美國臨時專利申請第63/135,578號之優先權，其專利名稱為「 特定選擇和比例的抗肥胖益生菌組合物」，於2021年1月9日提出申請，基於所有目的，其整體內容以引用方式併入本文。
至少為了上述目的，本發明提供一種或多種預定的人用（例如，包括動物）益生菌組合及抗肥胖的人用益生菌組合物的具體比例範圍及其製備方法及用途。特別是，本發明提供一種由無菌或抗生素處理的雙特異性磷酸酶6（ Dusp6）基因剔除的小鼠所形成的食品級益生菌的特定組合物，其可有效改善腸道微生物群的相對豐度，並且還可用於降低體重、脂肪量及/或脂肪細胞的大小並增加耗氧量及/或能量消耗，因此可用於治療或預防一有需要的受試者的肥胖症或其相關的代謝失調或病症。本發明還提供用於穩定血糖含量、降低血糖含量高峰（例如，在攝食後的兩小時內），及/或防止血糖含量波動的方法及組合物。
本發明提供一種抗肥胖/控制血糖的益生菌組合物，包含： a）兩種或更多種選自以下群組之益生菌： （i）基本上純化的短雙歧桿菌（ Bifidobacterium breve）； （ii）基本上純化的長雙歧桿菌（ B. longum）； （iii）基本上純化的唾液鏈球菌亞種嗜熱菌（ Streptococcus salivarius subsp. Thermophilus）； （iv）基本上純化的嗜酸乳桿菌（ Lactobacillus acidophilus）； （v）基本上純化的乾酪乳桿菌（ L. casei）；以及 （vi）基本上純化的德氏乳桿菌（ L. delbrueckii）；及/或 b）承載該兩種或更多種益生菌之載體。
較佳地，該兩種或更多種益生菌的預定百分比範圍是由自一Dusp6缺陷型哺乳動物所收集的腸道微生物群所確定。
較佳地，該6種食品級細菌益生菌（（1）短雙歧桿菌；（2）長雙歧桿菌；（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（4）嗜酸乳桿菌；（5）乾酪乳桿菌；以及（6）德氏乳桿菌）的比例為1:1:1:1:1:1。
較佳地，該6種食品級細菌益生菌（（1）短雙歧桿菌；（2）長雙歧桿菌；（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（4）嗜酸乳桿菌；（5）乾酪乳桿菌；以及（6）德氏乳桿菌）的比例為10:10:10:1:1:1。相較於使用上述單種益生菌種類的結果，具有上述細菌益生菌比例的組合物具有較佳且顯著的結果。於某些具體實施例中，前三種益生菌（1）短雙歧桿菌、（2）長雙歧桿菌，以及（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌的比例高於其餘三種益生菌（4）嗜酸乳桿菌、（5）乾酪乳桿菌，以及（6）德氏乳桿菌。於某些具體實施例中，前三種益生菌（1）短雙歧桿菌、（2）長雙歧桿菌，以及（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌的比例至少比其餘三種益生菌（4）嗜酸乳桿菌、（5）乾酪乳桿菌，以及（6）德氏乳桿菌高出5倍。於其他具體實施例中，前三種益生菌（1）短雙歧桿菌、（2）長雙歧桿菌，以及（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌的比例至少比其餘三種益生菌（4）嗜酸乳桿菌、（5）乾酪乳桿菌，以及（6）德氏乳桿菌高出2倍。於某些其他具體實施例中，前三種益生菌（1）短雙歧桿菌、（2）長雙歧桿菌，以及（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌的比例為其餘三種益生菌（4）嗜酸乳桿菌、（5）乾酪乳桿菌，以及（6）德氏乳桿菌的數量的2-100倍。於某些具體實施例中，前三種益生菌（1）短雙歧桿菌、（2）長雙歧桿菌，以及（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌的比例至少比其餘三種益生菌（4）嗜酸乳桿菌、（5）乾酪乳桿菌，以及（6）德氏乳桿菌高出1000倍。
較佳地，該益生菌為（i）基本上純化的短雙歧桿菌以及（ii）基本上純化的長雙歧桿菌的混合物，其中（i）基本上純化的短雙歧桿菌的百分比為30%至70%，以及（ii）基本上純化的長雙歧桿菌的百分比為70%至30%。
較佳地，該益生菌為（i）基本上純化的短雙歧桿菌、（ii）基本上純化的長雙歧桿菌，以及（vi）基本上純化的德氏乳桿菌的混合物，其中（i）基本上純化的短雙歧桿菌的百分比為30%至40%，（ii）基本上純化的長雙歧桿菌的百分比為30%至40%，且（vi）基本上純化的德氏乳桿菌的百分比為20%至40%。
較佳地，該載體包括營養劑、佐劑，及/或填充物，例如優格、基於大豆的產品、基於穀物的產品、水果、蔬菜以及肉製品。本領域之具備通常知識者理解任何含有適量的支持益生菌生長的碳水化合物、纖維、蛋白質以及維生素的乳製品及非乳製品都在本發明之範圍內。
較佳地，該組合物的應用形式包括粉劑、液劑、凝膠劑、片劑、錠劑，以及漿液。
較佳地，該組合物被配製成一食品、膳食補充劑或藥物。於某些態樣，本發明提供一種透過對一受試者施用一有效量之本文所述之組合物來減輕該受試者的體重及/或體脂及/或防止體重及/或體脂增加的方法。本發明還提供用於穩定血糖含量、降低血糖含量高峰（例如，在攝食後的兩小時內）及/或防止血糖含量波動之方法及組合物。
本發明之又一目的為提供一種透過對一受試者施用一有效量之如本文所述之組合物來治療或預防該受試者的肥胖症或其相關的疾病或病症之方法。
較佳地，該待治療的肥胖症為飲食誘導的肥胖症（DIO）。
較佳地，該肥胖相關的疾病或病症包括第2型糖尿病、高血糖症、葡萄糖耐受不良、血脂異常、胰島素抗性、高胰島素血症、脂肪肝、心血管疾病、中風，以及癌症。因此，本發明提供在治療或預防肥胖相關的疾病及病症中所選擇的益生菌組合物及/或比例。
本發明之另一目的為提供一種食品，其包含該抗肥胖的益生菌組合物。
較佳地，該食品為優格、果凍、奶油，或乾酪。
較佳地，該食品進一步包含食品添加劑，例如維生素、鈣，或纖維素。
本發明之一目的為一種形成一益生菌組合物之方法，包括： a）準備一載體； b）以一預定比例選擇兩種或更多種益生菌，其中該兩種或更多種益生菌包含（i）短雙歧桿菌；ii）長雙歧桿菌；iii）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；iv）嗜酸乳桿菌；v）乾酪乳桿菌；以及vi）德氏乳桿菌； c）將該至少兩種或更多種益生菌與該載體混合；以及 d）透過將該至少兩種或更多種益生菌與該載體偶聯形成該益生菌組合物。
較佳地，該方法進一步包括將該益生菌組合物封裝在一膠囊或片劑中。
較佳地，該方法進一步包括將該至少兩種或更多種益生菌與一種或更多種益菌生混合。
較佳地，該益菌生包含CAMU CAMU以及甜菜鹼。
本發明之另一目的為一種穩定血糖含量之方法，包括： a）攝食； b）透過服用一有效劑量之一益生菌組合物來控制或緩解一症狀，該益生菌組合物具有一預定比例的兩種或更多種益生菌，其中該兩種或更多種益生菌包含（i）短雙歧桿菌；（ii）長雙歧桿菌；（iii）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（iv）嗜酸乳桿菌；（v）乾酪乳桿菌；以及（vi）德氏乳桿菌。
較佳地，該方法進一步包括透過每天服用該有效劑量來減少或防止一人類或動物的體重增加。
較佳地，該症狀包括肥胖相關的疾病。
較佳地，該症狀包括的病症包括第2型糖尿病、高血糖症、葡萄糖耐受不良、血脂異常、胰島素抗性、高胰島素血症、脂肪肝、心血管疾病、中風，以及癌症。
較佳地，該方法進一步包括透過在攝食後服用該有效劑量來防止血糖含量的高峰。
較佳地，該方法進一步包括透過在例行的間隔內服用該有效劑量來穩定一血糖含量。
較佳地，該方法進一步包括形成一以優格、果凍、奶油或乾酪為形式的食品。
較佳地，該方法進一步包括混合維生素、鈣或纖維素。
藉由上述技術特徵，本發明提供一種組合物以及降低肥胖風險或控制血糖之方法或療法，該組合物具有一預定百分比範圍比例，該比例係由使用一Dusp6基因剔除小鼠所收集、選擇、塑造或建立的腸道微生物群所確定。
本發明基於從雙特異性磷酸酶6（ Dusp6）基因剔除小鼠收集的腸道微生物群在施用於一受試者時可改變該受試者胃腸道中相關微生物群豐度的意外結果。本發明還提供自一 Dusp6基因剔除小鼠收集的腸道微生物群在高脂肪飲食下表現出抗肥胖活性，其有效減少體重、脂肪量及/或脂肪細胞的大小並增加耗氧量及/或能量消耗，因此可用於治療一有需要的受試者的肥胖症或其相關的疾病或病症。本發明還提供一種平台技術，透過使用其中的 Dusp基因剔除小鼠獲得6種特定比例的食品級細菌益生菌的組合，以治療/預防肥胖症或其相關的疾病或病症。
圖1所示為根據某些具體實施例的益生菌微生物群獲得方法100。於步驟102，提供一無菌或抗生素處理的 Dusp6基因剔除小鼠。於步驟104，將一組選定的微生物施用於該無菌或抗生素處理的 Dusp6基因剔除小鼠。於一具體實施例中，將6種食品級細菌益生菌（以等量的菌落形成單位）以口服方式施用至一無菌的 Dusp6基因剔除小鼠中。該6種食品級細菌益生菌包括 1）短雙歧桿菌；2）長雙歧桿菌；3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；4）嗜酸乳桿菌；5）乾酪乳桿菌；以及6）德氏乳桿菌。
於步驟106，收集來自該 Dusp6基因剔除小鼠的腸道微生物群。
於步驟107，將該收集的腸道微生物群置於一飲食誘導的肥胖模型上。
於步驟108，確定這6種由 Dusp6基因剔除小鼠形成的食品級細菌益生菌混合物的特定豐度比。於步驟110，按該確定的比例重構一抗肥胖/穩定葡萄糖的益生菌混合物。於步驟112，添加添加劑以形成人類/動物用益生菌產品。
用於小鼠治療的實驗部分
圖2所示為顯示根據本發明之具體實施例的益生菌微生物群獲得方法的時間進程之圖表。
於某些具體實施例中，使用4週齡的8隻野生型小鼠與7隻 Dusp6基因剔除小鼠（D6KO）的群組。於某些具體實施例中，Abx的全劑量包含抗生素水（100 mg/kg小鼠體重的胺芐青黴素、100 mg/kg小鼠體重的甲硝唑、50 mg/kg小鼠體重的萬古黴素、100 mg/kg小鼠體重的新黴素）用於消耗天然腸道微生物群。小鼠最初以第一階段Abx（抗生素治療）進行處理，其中包括每天口服胃管灌食200 µL全劑量Abx以及在飲水中添加1/4劑量的Abx持續5天（自–T3開始）。然後，第二階段Abx處理改為飲水中添加全劑量Abx（每3~4天更換一次），持續11天（直到-T1）。Abx處理去除了胃腸道中的大部分微生物群，以獲得腸道微生物群耗盡的小鼠。本文所述之Abx處理僅為去除胃腸道中的天然微生物群的選擇之一，本發明不限於此。可以使用任何可能的方法來產生腸道微生物群耗盡的小鼠。
益生菌組合物之製備
能夠製備具有如表1中所示量的益生菌組合物。
表1
   製備劑量 重新懸浮劑量 （6.0x10 9/小鼠/益生菌/300 uL PBS）
短雙歧桿菌（如，BR18） ≧ 1.0x10 11CFU/g 0.2 g/1000 µL PBS
長雙歧桿菌（如，BL986） ≧ 1.0x10 11CFU/g 0.2 g/1000 µL PBS
嗜酸乳桿菌（如，LA1063） ≧ 1.0x10 11CFU/g 0.2 g/1000 µL PBS
乾酪乳桿菌（如，LC122） ≧ 1.0x10 11CFU/g 0.2 g/1000 µL PBS
德氏乳桿菌亞種乳酸菌（如，LDL114） ≧ 1.0x10 11CFU/g 0.2 g/1000 µL PBS
嗜熱鏈球菌（如，ST37） ≧ 1.0x10 11CFU/g 0.2  g/1000 µL PBS
益生菌攝取量自 –T1 開始，包括口服胃管灌食混合益生菌 300 µL，每週3次，持續2週。然後以益生菌組合物處理所有小鼠，該益生菌組合物包括短雙歧桿菌（例如，短雙歧桿菌BR18）、長雙歧桿菌（例如，長雙歧桿菌BL986）、嗜酸乳桿菌（例如，嗜酸乳桿菌LA1063）、乾酪乳桿菌（例如，乾酪乳桿菌LC122）、德氏乳桿菌亞種乳酸菌（例如，德氏乳桿菌乳酸亞種乳酸菌 LDL114）以及嗜熱鏈球菌（例如，嗜熱鏈球菌 ST37），其僅以等比例的一種劑量進行，而45%卡路里脂肪HFD處理（高脂肪飲食處理）於T0開始，持續10週。HFD處理用於表現飲食引起的肥胖。
觀察與收集
於第-22、-18、-14、-11、-7天以及從第0天至第71天大約每週一次觀察小鼠的體重。此外，於第-22、-14、-11、-7、0、14、21、28以及71天進行糞便收集。
葡萄糖耐受試驗也於T9進行，包括對小鼠腹腔注射2 g/kg葡萄糖，並在葡萄糖注射前及注射後15、30、45、60、90，以及120分鐘測量血糖含量。
結果
請參閱圖3。圖3所示為野生型小鼠以及D6KO小鼠在經過圖1中之方法100前後的Lee指數、BMI以及器官重量的變化結果。
體脂的估算可透過小鼠的Lee指數與BMI來計算。
在高脂飲食處理10週後，D6KO小鼠的Lee指數與BMI均顯著低於野生型小鼠。我們的實驗進一步支持此一結果，顯示D6KO小鼠中的微生物群能夠減弱野生型小鼠中由高脂飲食引起的體重增加（Nat Microbiol. 2016年11月28日；2:16220. doi:10.1038/nmicrobiol.2016.220.），出於所有目的透過引用方式併入本文。
器官重量
在10週的高脂飲食處理後，D6KO小鼠的附睾白色脂肪組織（epididymal white adipose tissue，EWAT）的重量在統計學上顯著低於野生型小鼠。
腸道微生物群之多樣性及豐度
請參閱圖4及圖5，圖4所示為野生型與D6KO小鼠在T0及T10的腸道細菌豐度。圖5所示為野生型與D6KO小鼠在T0及T10的腸道細菌的非度量多維標度分析。
有效豐富度、Shannon指數以及β-多樣性NMDS透過Rhea（V1.6）R管道計算。
將野生型與D6KO小鼠在T0及T10的腸道細菌數據進行NMDS分析，使用Bray-Curtis距離計算，驗證替換次數為999。
因此，D6KO小鼠腸道微生物組的豐富度及α多樣性高於野生型小鼠。中度至嚴重的腸道微生物群失調與肥胖及代謝失調（例如第2型糖尿病）有關。腸道微生物組豐富度及α多樣性的增加通常與整體較佳的健康狀況有關。
Dusp6基因剔除小鼠對飲食誘導的肥胖具有抵抗力。在無菌小鼠模型中進行的糞便微生物群移植實驗顯示，腸道微生物群對Dusp6基因敲除小鼠抗飲食誘導的肥胖表型有很大貢獻。
六種益生菌組合物處理的豐度
基於上述結果，即使D6KO小鼠的天然腸道微生物群被替換為6種益生菌組合物，它們仍然對飲食引起的肥胖具有更強的抵抗力。結果顯示，以這6種益生菌組合物處理的D6KO小鼠與野生型小鼠對飲食誘導的肥胖具有更強的抵抗力，並且在血糖控制方面具有更佳的效果。
經口服胃管灌食野生型小鼠與D6KO小鼠的該6種食品級細菌益生菌的相對比例（（1）短雙歧桿菌；（2）長雙歧桿菌；（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（4）嗜酸乳桿菌；（5）乾酪乳桿菌；（6）德氏乳桿菌）為 1:1:1:1:1:1。
根據qPCR分析，關於這6種食品級細菌益生菌（（1）短雙歧桿菌；（2）長雙歧桿菌；（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（4）嗜酸乳桿菌；（5）乾酪乳桿菌；以及（ 6）德氏乳桿菌）在D6KO小鼠進行HFD之前（T0）的相對比例為56:8712:836:46:350:0。於某些具體實施例中，這6種食品級細菌益生菌的比例（1）短雙歧桿菌；（2）長雙歧桿菌；（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（4）嗜酸乳桿菌；（5）乾酪乳桿菌；以及（ 6）德氏乳桿菌）在1: 100-200: 10-20: 0.1-1: 1-10: 0-10的範圍內，這表示在減輕體重、控制血糖/穩定等方面具有顯著效果。
根據qPCR分析，關於這6種食品級細菌益生菌（（1）短雙歧桿菌；（2）長雙歧桿菌；（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（4）嗜酸乳桿菌；（5）乾酪乳桿菌；以及（ 6）德氏乳桿菌）在D6KO小鼠進行HFD之前（T0）的相對比例為56:8712:836:46:350:0。
根據qPCR分析，關於這6種食品級細菌益生菌（（1）短雙歧桿菌；（2）長雙歧桿菌；（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（4）嗜酸乳桿菌；（5）乾酪乳桿菌；以及（6）德氏乳桿菌）在D6KO小鼠進行HFD之後（T10）的相對比例為1:1055:20:0:0:8921。於某些具體實施例中，這6種食品級細菌益生菌的比例（（1）短雙歧桿菌；（2）長雙歧桿菌；（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（4）嗜酸乳桿菌；（5）乾酪乳桿菌；以及（ 6）德氏乳桿菌）在1: 100-200: 10-20: 0.1-1: 1-10: 0-10的範圍內，這表示在減輕體重、控制血糖/穩定等方面具有顯著效果。
腹膜內葡萄糖耐受試驗（ Intraperitoneal Glucose Tolerance Test ， IP-GTT ）
於另一具體實施例中，針對對照組與處理組各準備8隻小鼠。該8隻小鼠為野生型小鼠。對照組小鼠胃管灌食ddH 2O（300 µL/次，3次/週）並餵食HFD，處理組小鼠胃管灌食1%甜菜鹼+200 mg/kg CAMU CAMU + 1.0x10 9CFU/該6種食品級益生菌的每一種益生菌，並餵食HFD。
IP-GTT試驗在高脂飲食處理的第6週進行。IP-GTT測試的過程如下。小鼠禁食12小時，自由飲水，腹腔注射葡萄糖，劑量為每公斤體重2克。在葡萄糖注射之前以及注射之後的15、30、45、60、90以及120分鐘以血糖儀（Johnson & Johnson公司）測量血糖含量。於GTT反應圖中，y軸為血糖濃度，而x軸為測量血糖的時間。於AUC圖中，y軸表示透過計算增量曲線下面積（Area Under Curve，AUC）從IP-GTT導出的曲線下面積（AUC）被開發用於比較不同組小鼠的葡萄糖耐受受損程度。 Y軸為曲線下面積的任意單位，X軸為不同組的小鼠。
參閱圖6，圖6所示為第6週時進行的IP-葡萄糖耐受測試（GTT）（mg/dL）圖表。
如圖6所示，處理組小鼠的葡萄糖耐受比對照組好8%。結果表示，以1%甜菜鹼 + 200 mg/kg CAMU CAMU + 1.0x10 9CFU/這6種食品級益生菌中的每種益生菌處理的小鼠對血糖含量變化的耐受性可能更高。
由於益生菌可能有助於控制血糖含量，因此可以施用於 a）檢測到血糖高峰後，b）日常生活（例如，作為日常使用補充劑），或 c）孕婦及其他不能使用胰島素的人。
於某些具體實施例中，可以約10-1000億CFU/天的有效劑量施用該益生菌。 較佳地，可以100-500億CFU/天的量施用該益生菌。更佳地，可以300億CFU/天的量施用該益生菌。
於某些具體實施例中，該6種食品級細菌益生菌（（1）短雙歧桿菌；（2）長雙歧桿菌；（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（4）嗜酸乳桿菌；（5）乾酪乳桿菌；以及（6）德氏乳桿菌）的比例為1:1:1:1:1:1。
在野生型小鼠以高脂肪飲食誘導的肥胖小鼠模型中，根據葡萄糖耐受測試，施用6-益生菌組合物（（1）短雙歧桿菌；（2）長雙歧桿菌；（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（4）嗜酸乳桿菌；（5）乾酪乳桿菌；以及（6）德氏乳桿菌，比例為1:1:1:1:1:1:1）以及Camu Camu與甜菜鹼6週，可提高約8%的葡萄糖平衡。
相較之下，據研究指稱，嗜酸乳桿菌及長雙歧桿菌的典型組合或單個物種單獨對葡萄糖平衡沒有任何影響（Biochem Biophys Res Commun，2016年11月11日；480（2）:222-227. doi:10.1016/ j.bbrc.2016.10.031.）。
同樣地，在遺傳性第2型糖尿病小鼠模型中單獨使用典型的德氏乳桿菌對葡萄糖平衡沒有影響（J Clin Biochem Nutr. 2012年9月；51（2）:96-101. doi: 10.3164/jcbn.11 -07.）。
於某些具體實施例中，該6種食品級細菌益生菌的組合具有至少選擇的6種益生菌中的1、2、3、4或5種，其為其餘益生菌的10倍、100倍或1000倍。
於某些具體實施例中，該6種食品級細菌益生菌（（1）短雙歧桿菌；（2）長雙歧桿菌；（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（4）嗜酸乳桿菌；（5）乾酪乳桿菌；以及（6）德氏乳桿菌）的比例為10:10:1:10:10:1。
用於確定益生菌比例之方法為使用通用 16S rRNA 序列作為參考以計算相對豐度的 qPCR 分析。
於某些具體實施例中，該方法進一步包括測量這6種食品級細菌益生菌組合物在受試者中的抗肥胖活性。
於某些具體實施例中，透過在施用該微生物後測量該微生物是否有效降低受試者的體重、脂肪量、誘導ucp-1褐變基因表現及/或脂肪細胞大小來鑑定該6種食品級細菌益生菌組合物。
於某些具體實施例中，透過在施用該微生物後測量該微生物是否有效增加受試者的耗氧量及/或能量消耗來鑑定該6種食品級細菌益生菌組合物。
包含該些益生菌之組合物
因此，本發明還提供一種組合物，其包含（i）基本上純化的短雙歧桿菌，（ii）基本上純化的長雙歧桿菌，（iii）基本上純化的唾液鏈球菌亞種嗜熱菌、（iv）基本上純化的嗜酸乳桿菌、（v）基本上純化的乾酪乳桿菌，以及（vi）基本上純化的德氏乳桿菌。
於某些具體實施例中，該組合物根據本文所述之方法從一 Dusp6基因剔除小鼠獲得。
於某些具體實施例中，將該組合物配製成食品、膳食補充劑或藥物。
於某些具體實施例中，將該組合物配製成粉劑、液劑、凝膠劑、片劑、錠劑，以及任何其他形式供人類使用。
於某些具體實施例中，該組合物用於改變受試者體內微生物群的相對豐度。
預防肥胖症或其相關的疾病或病症之治療
於某些具體實施例中，該組合物用於使一受試者減輕體重及/或體脂，防止體重及/或體脂增加，及/或治療或預防肥胖症或其相關的疾病或病症。
於某些具體實施例中，提供一種使用如本文所述之組合物之方法。例如從本文公開的6種示例性益生菌中選擇任何數量（例如1、2、3、4、5或6種）的益生菌，以按選擇使用或與任何其他益生菌、益菌生， 或任何其他營養物或物質，包括CAMU CAMU以及甜菜鹼。本領域之具備通常知識者將理解可以增強本文公開之效果的任何其他物質都在本發明之範圍內，例如其他益生菌與益菌生。
特別是，本發明提供一種透過對有此需要的一受試者施用一有效量的本文所述之組合物來改變該受試者體內微生物群的相對豐度之方法。於某些具體實施例中，本發明提供如本文所述之組合物，其用於製造食品、膳食補充劑或藥物以改變有此需要的一受試者體內微生物群的相對豐度。
本發明還提供一種透過對一受試者施用一有效量之如本文所述之組合物來減少該受試者的體重及/或體脂及/或防止體重及/或體脂增加之方法。
本發明還進一步提供一種透過對一受試者施用一有效量之如本文所述之組合物來治療或預防該受試者的肥胖症或其相關疾病或病症之方法。本發明提供如本文所述之組合物，用於製造使一有此需要的受試者減少體重及/或體脂、防止體重及/或體脂增加，及/或治療或預防肥胖症或其相關疾病或病症之食品、膳食補充劑或藥物。
於某些具體實施例中，該待治療的肥胖症為飲食誘導的肥胖症（DIO）。
於某些具體實施例中，該肥胖相關的疾病或病症包括第2型糖尿病、高血糖症、葡萄糖耐受不良、血脂異常、胰島素抗性、高胰島素血症、脂肪肝、心血管疾病、中風以及癌症。因此，本發明提供在治療或預防肥胖相關的疾病與病症中所選擇的益生菌組合物及/或比例。
於一具體實施例中，該食品或飲料產品可為優格。優格有益健康，在日常生活中很容易購得。該優格可包含該6種食品級細菌益生菌組合物。於其他具體實施例中，該優格可包含該6種食品級細菌益生菌組合物中的至少2種，例如僅包含短雙歧桿菌（例如，短雙歧桿菌BR18）與長雙歧桿菌（例如，長雙歧桿菌BL986）的組合物，或包含短雙歧桿菌（例如，短雙歧桿菌 BR18）、長雙歧桿菌（例如，長雙歧桿菌 BL986），以及德氏乳桿菌亞種乳酸菌（例如，德氏乳桿菌亞種乳酸菌LDL114）。本發明不限於此，可使用由該6種食品級細菌益生菌組成的任何可能之組合物。根據需要，該優格還可包含維生素、鈣、纖維素或其他天然產物作為食品添加劑。
由於優格中添加了益生菌，因此在日常生活中可能更容易攝取。於其他具體實施例中，該組合物可以乾酪、果凍、奶油或任何合適的食物的形式來提供。
在操作上，確定特定的益生菌組或特定比例；使用選定的益生菌組或特定比例製成膳食補充劑或藥物；並按照推薦使用選定的益生菌。
為了降低肥胖的風險，本發明還提供一種包含上述益生菌的食品或飲料產品。
在應用上，該方法與組合物能夠用於控制及/或穩定血糖含量並減少體重增加及脂肪增加。
呈現該描述是為了使本領域之之具備通常知識者能夠製造並使用本發明。對本領域之具備通常知識者而言，對所描述之具體實施例的各種修改是顯而易見的，且本文的一般原理可應用於其他具體實施例。因此，本發明並不意圖限於所示之具體實施例，而是要符合與本文所述之原理及特徵一致的最廣範圍。對於本領域之具備通常知識者而言顯而易見的是，可對具體實施例進行其他修改而不背離由所附申請專利範圍限定之本發明的精神及範圍。
100:方法 102~112:步驟
圖1所示為根據本發明之一具體實施例的益生菌微生物群獲得方法100。
圖2所示為顯示根據本發明之一具體實施例的益生菌微生物群獲得方法的時間進程之圖表。
圖3所示為野生型小鼠以及D6KO小鼠在經過圖1中之方法100前後的Lee指數、BMI以及器官重量的變化結果。
圖4所示為野生型以及D6KO小鼠在T0與T10的腸道細菌豐度。
圖5所示為野生型以及D6KO小鼠在T0與T10的腸道細菌的非度量多維標度分析(Non-metric Multidimensional Scaling)。
圖6所示為IP-葡萄糖耐受測試（Glucose Tolerance Test，GTT）（mg/dL）的圖表。
100:方法
102~112:步驟

Claims (27)

  1. 一種益生菌組合物，包括： a）兩種或更多種選自以下群組之益生菌： （i）基本上純化的短雙歧桿菌（ Bifidobacterium breve）； （ii）基本上純化的長雙歧桿菌（ B. longum）； （iii）基本上純化的唾液鏈球菌亞種嗜熱菌（ Streptococcus salivarius subsp. Thermophilus）； （iv）基本上純化的嗜酸乳桿菌（ Lactobacillus acidophilus）； （v）基本上純化的乾酪乳桿菌（ L. casei）；以及 （vi）基本上純化的德氏乳桿菌（ L. delbrueckii）；以及 b）承載該兩種或更多種益生菌之載體。
  2. 如請求項1所述之益生菌組合物，其中該兩種或更多種益生菌的預定百分比範圍是由自一Dusp6基因剔除小鼠所收集的腸道微生物群所確定。
  3. 如請求項1所述之益生菌組合物，其中該兩種或更多種益生菌是由以下6種食品級細菌益生菌加工而成的：（1）短雙歧桿菌；（2）長雙歧桿菌；（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（4）嗜酸乳桿菌；（5）乾酪乳桿菌以及；（6）德氏乳桿菌。
  4. 如請求項3所述之益生菌組合物，其中該6種食品級細菌益生菌的比例為1:1:1:1:1:1。
  5. 如請求項3所述之益生菌組合物，其中該6種食品級細菌益生菌（（1）短雙歧桿菌；（2）長雙歧桿菌；（3）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（4）嗜酸乳桿菌；（5）乾酪乳桿菌；以及（6）德氏乳桿菌）的比例為10:10:10:1:1:1。
  6. 如請求項1所述之益生菌組合物，其中該益生菌為（i）短雙歧桿菌以及（ii）長雙歧桿菌的混合物，其中（i）短雙歧桿菌以及（ii）長雙歧桿菌的比例為7:3。
  7. 如請求項1所述之益生菌組合物，其中該益生菌為（i）短雙歧桿菌、（ii）長雙歧桿菌，以及（iii）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌的混合物，其中（i）短雙歧桿菌、（ii）長雙歧桿菌，以及（iii）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌的比例為3:3:4。
  8. 如請求項1所述之益生菌組合物，其中該載體包括：一營養劑、一佐劑，或一填充劑。
  9. 如請求項1所述之益生菌組合物，其中該組合物之一應用形式包括粉劑、液劑、凝膠劑、片劑、錠劑。
  10. 如請求項1所述之益生菌組合物，其中該組合物被配製成一食品、膳食補充劑或藥物。
  11. 一種益生菌組合物，包括： （a）與至少兩種益生菌偶聯的載體顆粒；以及 （b）至少兩種選自以下群組之益生菌： i）短雙歧桿菌； ii）長雙歧桿菌； iii）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌； iv）嗜酸乳桿菌； v）乾酪乳桿菌；以及 vi）德氏乳桿菌。
  12. 如請求項11所述之益生菌組合物，其中該至少兩種益生菌為基本上純化的益生菌。
  13. 如請求項11所述之益生菌組合物，其中該至少兩種益生菌的重量比為1:1。
  14. 如請求項11所述之益生菌組合物，其中該至少兩種益生菌的重量比為10:1。
  15. 如請求項11所述之益生菌組合物，其中該至少兩種益生菌的重量比為0-30%以及31%-100%。
  16. 一種形成一益生菌組合物之方法，包括： a）準備一載體； b）以一預定比例選擇兩種或更多種益生菌，其中該兩種或更多種益生菌包含 i）短雙歧桿菌； ii）長雙歧桿菌； iii）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌； iv）嗜酸乳桿菌； v）乾酪乳桿菌；以及 vi）德氏乳桿菌； c）將該至少兩種或更多種益生菌與該載體混合；以及 d）透過將該至少兩種或更多種益生菌與該載體偶聯形成該益生菌組合物。
  17. 如請求項16所述之方法，進一步包括將該益生菌組合物封裝在一膠囊或片劑中。
  18. 如請求項16所述之方法，進一步包括將該至少兩種或更多種益生菌與一種或多種益菌生混合。
  19. 如請求項18所述之方法，其中該益菌生包括CAMU CAMU以及甜菜鹼。
  20. 一種穩定血糖含量之方法，包括： a）攝食； b）透過服用一有效劑量之一益生菌組合物來控制或緩解一症狀，該益生菌組合物具有一預定比例的兩種或更多種益生菌，其中該兩種或更多種益生菌包含（i）短雙歧桿菌；（ii）長雙歧桿菌；（iii）唾液鏈球菌亞種嗜熱菌；（iv）嗜酸乳桿菌；（v）乾酪乳桿菌；以及（vi）德氏乳桿菌。
  21. 如請求項20所述之方法，進一步包括透過每天服用該有效劑量來減少或防止一人類或動物的體重增加。
  22. 如請求項20所述之方法，其中該症狀包括肥胖相關的疾病。
  23. 如請求項20所述之方法，其中該症狀包括的病症包括第2型糖尿病、高血糖症、葡萄糖耐受不良、血脂異常、胰島素抗性、高胰島素血症、脂肪肝、心血管疾病、中風，以及癌症。
  24. 如請求項20所述之方法，進一步包括透過在攝食後服用該有效劑量來防止血糖含量的陡升。
  25. 如請求項20所述之方法，進一步包括透過在例行的間隔內服用該有效劑量來穩定一血糖含量。
  26. 如請求項20所述之方法，進一步包括形成一以優格、果凍、奶油或乾酪為形式的食品。
  27. 如請求項20所述之方法，進一步包括混合維生素、鈣或纖維素。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK0768375T4 (da) * 1992-07-06 2002-09-16 Nestle Sa Mælkesyrebakterier
EP0856259B1 (en) * 1996-12-23 1998-08-12 SITIA-YOMO S.p.A. Composition for feed use comprising lyophilized live lactic bacteria
AU2015258769A1 (en) * 2014-05-12 2016-12-01 Medlab Ip Pty Ltd Probiotic compositions and uses thereof for treatment of obesity-related disorders
US10960030B2 (en) * 2016-04-15 2021-03-30 National Health Research Institutes Anti-obesity microbiota compositions and preparation methods and uses thereof
CN109715181B (zh) * 2016-09-16 2022-11-08 杜邦营养生物科学有限公司 细菌
EP3732137A4 (en) * 2017-12-28 2021-11-03 Sustainable Community Development, LLC MICROBE-BASED COMPOSITION AND METHOD OF USE
FR3083545A1 (fr) * 2018-07-04 2020-01-10 Institut National De La Recherche Agronomique Utilisation d'une souche de roseburia intestinalis pour la prevention et le traitement de l'inflammation de l'intestin
AU2020209769A1 (en) * 2019-01-15 2021-07-29 Novozymes A/S Spore-based probiotic composition for modulation of dermal and sub-dermal properties

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