TW201803870A - 化學化合物 - Google Patents
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Abstract
本說明書涉及具有化學式(I)之化合物：
Description
本說明書涉及選擇性下調雌性素受體並且具有抗癌活性的某些吲唑化合物及其藥學上可接受的鹽。本說明書還涉及所述吲唑化合物及其藥學上可接受的鹽在治療人體或動物體的方法，例如在預防或治療癌症中之用途。本說明書還涉及在製備所述吲唑化合物中所涉及之方法和中間體，並且涉及包含所述吲唑化合物之醫藥組成物。
雌性素受體α(ERα、ESR1、NR3A)和雌性素受體β(ERβ、ESR2、NR3b)係類固醇激素受體，該等類固醇激素受體係大的細胞核受體家族的成員。結構類似於所有細胞核受體，ERα係由六個功能域(命名為A-F)構成的(達爾曼-賴特(Dahlman-Wright)等人，藥理學評論(Pharmacol.Rev.)，2006，58：773-781)，並且被分類為配位基依賴性轉錄因子，因為在其與特異性配位基(雌性性別類固醇激素17b雌二醇(E2))關聯之後該錯合物結合至命名為雌性素受體元件(ERE)基因組序列中，並且與共調控因子相互作用來調節靶基因的轉錄。該ERα基因位於6q25.1上並且編碼595AA蛋白，並且由於替代性剪接和翻譯起始位點，可以產生多種同種型。除了DNA結合域(結構域C)和配位基結合域(結構域E)，該受體還包含N-端(A/B)結構域、連接C和E結構域的鉸鏈(D)結構域、以及C-端延伸(F結構域)。雖然ERα和ERβ的C和E結構域係相當保守的
(分別為96%和55%胺基酸一致性)，但A/B、D和F結構域的保守性差(低於30%胺基酸一致性)。這兩種受體都參與女性生殖道的調節和發育，並且此外在中樞神經系統、心血管系統和在骨代謝中起作用。ER的基因組作用發生在細胞的核中，此時該受體直接地(直接啟動或經典途徑)或間接地(間接啟動或非經典途徑)結合ERE。在不存在配位基的情況下，ER與熱休克蛋白Hsp90和Hsp70關聯，並且該關聯的分子伴侶機器穩定配位基結合域(LBD)，使得其可接近配位基。配位基化的ER從熱休克蛋白中解離，導致受體構象變化，從而允許二聚化、DNA結合、與共啟動物或共阻抑物相互作用並調節目標基因表現。在非經典途徑中，AP-1和Sp-1係被受體的兩種同種型所使用的替代性調控DNA序列以調節基因表現。在這個實例中，ER不直接與DNA相互作用，但藉由與其他DNA結合轉錄因子例如c-Jun或c-Fos相關聯(庫什納(Kushner)等人，純應用化學(Pure Applied Chemistry)2003，75：1757-1769)。ER影響基因轉錄的精確機制瞭解很少，但似乎由DNA結合的受體招募的多種核因子介導。共調控因子的募集主要係由兩個蛋白表面AF2和AF1介導的，AF2和AF1分別位於E-結構域和A/B結構域中。AF1係由生長因子調控的並且其活性取決於細胞和啟動子環境，然而AF2完全依賴於用於活性的配位基結合。雖然兩個結構域可以獨立地發揮作用，最大ER轉錄活性係藉由經由兩個結構域(祖克曼(Tzukerman)等人，分子內分泌學(Mol.Endocrinology)，1994，8：21-30)的協同相互作用實現的。雖然ER被認為係轉錄因子，但它們還可藉由非基因組機制發揮作用，如藉由在E2給予之後在一個時標中於組織中的快速ER作用所證明的，該時標對於基因組作用被認為太快。如果負責雌性素快速反應的受體係相同的細胞核ER或不同的G蛋白偶聯類固醇受體(沃納(Warner)，等人，類固醇(Steroids)2006 71：91-95)
係任不清楚的，但已經鑒定出越來越多的E2誘導的通路，例如MAPK/ERK通路和內皮氧化氮合酶的啟動和PI3K/Akt通路。除了配位基依賴性通路，ERα還已經顯示藉由AF-1具有配位基獨立性活性，藉由生長因子傳訊例如胰島素樣生長因子1(IGF-1)和表皮生長因子(EGF)，AF-1已經與MAPK的刺激相關聯。AF-1的活性依賴於Ser118的磷酸並且ER與生長因子傳訊之間的交互作用(cross talk)的實例係藉由MAPK響應於生長因子如IGF-1和EGF的Ser118的磷酸化(加藤(Kato)等人，科學(Science)，1995，270：1491-1494)。
大量的結構不同的化合物已經被顯示結合至ER。一些化合物如內源性配位基E2充當受體激動劑，然而其他競爭性地抑制E2結合並且作為受體拮抗劑。該等化合物可以被分成2種類別，取決於它們的功能效應。選擇性雌性素受體調節劑(SERM)如它莫西芬(tamoxifen)具有充當受體激動劑和拮抗劑兩者的能力，取決於細胞和啟動子情況連同ER同種型靶向。例如它莫西芬在乳癌中充當一拮抗劑，但在骨、心血管系統和子宮中充當部分激動劑。所有SERM似乎充當AF2拮抗劑並且藉由AF1派生其部分激動劑特徵。第二組，以氟維司群(fulvestrant)做為一個實例，被分類為完全拮抗劑，並且經由AF1和AF2結構域的完全抑制藉由在化合物結合的配位基結合域(LBD)中誘導獨特構象變化(其導致螺旋12與LBD的其餘部分之間的相互作用完全消除，從而阻斷輔因子招募)能夠阻斷雌性素活性(韋克林(Wakeling)等人，癌症研究(Cancer Res.)，1991，51：3867-3873；派克(Pike)等人，結構(Structure)，2001，9：145-153)。
ERα的細胞內水平在E2的存在下藉由泛素/蛋白體(proteosome)(Ub/26S)途徑來下調。配位基化的ERα的聚泛素化藉由至少三個酶來催化；經泛素-啟動酶E1活化的泛素係藉由E3泛素連接酶結合異肽經由E2與賴胺酸殘基
綴合，並且然後聚泛素化的ERα被導向蛋白體用於降解。雖然ER-依賴性轉錄調節和ER的蛋白體-介導的降解係連接的(納德(Lonard)等人，分子細胞(Mol.Cell)，2000 5：939-948)，但轉錄在本身是對ERα降解係不需要的，並且轉錄起始複合物的組裝係足以靶向ERα用於細胞核蛋白酶體的降解。此E2誘導的降解過程被認為對其能力係所必需的，以響應於用於細胞增殖、分化和代謝的要求而快速啟動轉錄(斯蒂倪恩(Stenoien)等人，分子細胞生物學(Mol.Cell Biol.)，2001，21：4404-4412)。氟維司群也被劃分為選擇性雌性素受體下調調節劑(SERD)、拮抗劑的子集，該等拮抗劑也可以經由26S蛋白酶體途徑誘導ERα的快速下調。相反，SERM如它莫西芬可以增加ERα水平，雖然對轉錄的作用類似於針對SERD所見到的。
約70%的乳癌表現ER和/或孕酮受體，意味著在生長方面該等腫瘤細胞依賴激素。其他癌症如卵巢癌和子宮內膜癌也被認為在生長方面依賴於ERα傳訊。用於此類患者的療法可以藉由以下項抑制ER傳訊：拮抗配位基結合至ER，例如它莫西芬，其被用來治療在絕經前和絕經後兩者環境中的早期和晚期ER陽性乳癌)；拮抗和下調ERα，例如氟維司群，其被用來治療女性乳癌，儘管進行了用它莫西芬或芳香酶抑制劑的劑療法，但是其仍進展；抑或阻斷雌性素合成，例如芳香酶抑制劑，其被用來治療早期和晚期ER陽性乳癌。儘管該等療法對乳癌治療具有極其陽性影響，但腫瘤表現ER的相當大數目的患者展示對存在的ER療法的從頭(de novo)抗性或對該等療法隨著時間發展的抗性。已經描述了多種不同機制來解釋對第一次它莫西芬治療的抗性，其主要涉及它莫西芬從充當拮抗劑的轉變為充當激動劑，這係藉由某些輔因子更低親和力地結合至藉由該等輔因子的過度表現被偏置(off-set)的它莫西芬-ERα複合物，抑或
藉由第二位點的形成，該等第二位點促使它莫西芬-ERα複合物與通常不結合到該複合物上的輔因子的相互作用。由於表現特異性輔因子(其驅使它莫西芬-ERα活性)的細胞的過度生長的結果抗性因此能夠出現。還存在以下可能性，其他生長因子傳訊路徑直接啟動該ER受體或共啟動物，以驅使獨立於配位基傳訊的細胞增殖。
最近，在ESR1中的突變已經在轉移性ER-陽性患者衍生的腫瘤樣品和患者衍生的異種移植模型(PDX)中在從17%-25%變化的頻率下被鑒定為可能的抗性機制。該等突變在導致突變功能蛋白的配位基結合結構域中係主要地，但非排他性地；胺基酸變化的實例包括Ser463Pro、Val543Glu、Leu536Arg、Tyr537Ser、Tyr537Asn和Asp538Gly，其中在胺基酸537和538處的變化構成大多數當前描述的變化。該等突變先前在癌症基因組阿特拉斯資料庫(Cancer Genome Atlas database)表徵的原發性乳房基因組樣品中未檢測到。對於ER表現陽性的390個原發性乳癌樣品中在ESR1中檢測到的不是單突變(癌症基因組阿特拉斯網路，2012自然(Nature)490：61-70)。該配位基結合結構域突變被認為具有發展為響應於芳香酶抑制劑內分泌療法的抗性，因為在不存在雌二醇的情況下，該等突變體受體顯示出基本的轉錄活性。在胺基酸537和538處突變的ER的晶體結構顯示兩突變體有利於ER的激動劑構象，這係藉由位移螺旋12的位置以允許共啟動物招募並且由此模仿激動劑活化的野生型ER。公開數據已經顯示內分泌療法如它莫西芬和氟維司群仍然可以結合至ER突變體並且在某種程度上抑制轉錄啟動，以及氟維司群能夠降解Try537Ser，但可以需要更高劑量用於完全受體抑制(托伊(Toy)等人，自然遺傳學(Nat.Genetics)2013，45：1439-1445；羅賓遜(Robinson)等人，自然遺傳學2013，45：144601451；李S(Li,S.)等
人細胞報告(Cell Rep.)4，1116-1130(2013))。因此是可行的是某些具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽(如下文所述)將能夠下調和拮抗突變型ER，儘管在此時期未知ESR1突變是否與改變的臨床結果關聯。
不管哪個抗性機制或抗性機制的組合機制發生，許多仍然是依賴於ER-依賴性活性，並且藉由SERD機制去除受體提供了從細胞中去除ERα受體的最好方式。氟維司群係目前唯一經SERD批准用於臨床用途的，又儘管其機制特性，該藥物的藥理學特性具有有限的療效，這係由於當前每月500mg劑量的限制，其導致與在體外乳腺細胞系實驗中所見的受體的完全下調相比在患者樣品中的受體小於50%的周轉(沃德爾(Wardell)等人，生化藥學(Biochem.Pharm.)，2011，82：122-130)。因此，對新ER靶向試劑存在著需要，其具有所需藥物特性和SERD機制以在早期、轉移性和獲得性抗性情況下提供增強的益處。
已經發現本說明書的該等化合物具有強力抗腫瘤活性，有用於抑制由惡性疾病引起的不受控制的細胞增殖。本說明書的該等化合物藉由(作為最低限度)充當SERD，提供抗腫瘤作用。例如，本說明書的該等化合物可以藉由下調在許多不同乳癌細胞系(例如針對MCF-7、CAMA-1、BT474和/或MDA-MB-134乳癌細胞系)中的雌性素受體的能力顯示抗腫瘤活性。此類化合物作為治療劑可以被預期係更適合的，特別是用於治療癌症。
本說明書的該等化合物與其他已知的SERD相比，還可以顯示有利的物理性質(例如，較低的親脂性、較高的水溶解度、較高的滲透性、較低
的血漿蛋白結合、和/或較高的化學穩定性)、和/或有利的毒性特徵(例如在hERG上降低的活性)、和/或有利的代謝或藥代動力學特徵。因此，此類化合物可以尤其適合作為治療劑，特別是用於治療癌症。
根據本說明書的一個方面，提供一種具有化學式(I)之化合物：
其中：X係O、NH或NMe；D和E獨立地係CH或N；A係CR2或N；G係CR3或N；R1係CH2F、CHF2、Me、OMe、F或CN；R2係H、F、CN或OMe；R3係H或F；R4係H或Me；R5係H或Me；R6係Me、CHF2或環丙基；
R7係Me或F；R8係Me、F、CH2F、CH2OMe或CH2OH；R9係H或F；或R8和R9連同它們附接至其上的碳原子一起形成環丙基環或氧雜環丁烷(oxetane)環；R10係H或Me；並且R12係H或F；或其藥學上可接受的鹽。
在一個實施方式中，提供了一種如上文所定義的具有化學式(I)之化合物。
在一個實施方式中，提供了一種具有化學式(I)之化合物的藥學上可接受的鹽。
在一個實施方式中，X係O。
在一個實施方式中，X係NH。
在一個實施方式中，X係NMe。
在一個實施方式中，D係CH。
在一個實施方式中，E係CH。
在一個實施方式中，D和E二者係CH。
在一個實施方式中，D和E二者係N。
在一個實施方式中，D或E的其中一個係CH，並且D或E的另一個係N。
在一個實施方式中，A係CR2。
在一個實施方式中，G係CR3。
在一個實施方式中，A係CR2，並且G係CR3。
在一個實施方式中，A係CR2，並且G係N。
在一個實施方式中，A係N，並且G係CR3。
在一個實施方式中，A係N，並且G係CH或C-F。
在一個實施方式中，A係N，並且G係CH。
在一個實施方式中，A係N，並且G係C-F。
在一個實施方式中，R2係H、F或OMe。
在一個實施方式中，R2係H、F或CN。
在一個實施方式中，R2係F、OMe或CN。
在一個實施方式中，R2係F。
在一個實施方式中，R3係H。
在一個實施方式中，R3係F。
在一個實施方式中，A係CR2，並且R2係H、F或OMe。
在一個實施方式中，G係CR3，並且R3係F。
在一個實施方式中，A係C-F，並且G係C-F。
在一個實施方式中，A係CH，並且G係CH。
在一個實施方式中，A係C-F，並且G係CH。
在一個實施方式中，A係C-OMe，並且G係CH。
在一個實施方式中，A係C-OMe，並且G係CF。
在一個實施方式中，R1係CH2F、CHF2、Me或OMe。
在一個實施方式中，R1係CH2F、CHF2或Me。
在一個實施方式中，R1係CH2F或CHF2。
在一個實施方式中，R1係CH2F。
在一個實施方式中，R1係CHF2。
在一個實施方式中，R1係CH2F並且R10係H。
在一個實施方式中，R4係H。
在一個實施方式中，R4係Me。
在一個實施方式中，R5係H。
在一個實施方式中，R5係Me。
在一個實施方式中，R6係Me或CHF2。
在一個實施方式中，R6係Me。
在一個實施方式中，R6係CHF2。
在一個實施方式中，R7係Me。
在一個實施方式中，R7係F。
在一個實施方式中，R8係Me、CH2OMe或CH2OH。
在一個實施方式中，R8係Me、F或CH2F。
在一個實施方式中，R8係Me或CH2OMe。
在一個實施方式中，R7係Me並且R8係Me。
在一個實施方式中，R7係Me並且R8係CH2F、CH2OMe或CH2OH。
在一個實施方式中，R7係Me並且R9係F。
在一個實施方式中，R7係F並且R9係F。
在一個實施方式中，R8係CH2F、CH2OMe或CH2OH並且R9係H。
在一個實施方式中，R8係CH2F、CH2OMe或CH2OH並且R9係F。
在一個實施方式中，R7係F，並且R8和R9連同它們附接至其上的碳原子一起形成環丙基環或氧雜環丁烷環。
在一個實施方式中，在具有化學式(I)之化合物中的基團-CH2-C(R7)(R8)(R9)選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，在具有化學式(I)之化合物中的基團-CH2-C(R7)(R8)(R9)選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，在具有化學式(I)之化合物中的基團-CH2-C(R7)(R8)(R9)選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，在具有化學式(I)之化合物中的基團-CH2-C(R7)(R8)(R9)選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，在具有化學式(I)之化合物中的基團-CH2-C(R7)(R8)(R9)選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，在具有化學式(I)之化合物中的基團-CH2-C(R7)(R8)(R9)選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，R10係H。
在一個實施方式中，R12係H。
在一個實施方式中，R12係F。
在一個實施方式中，X係O並且R12係H。
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IA)之化合物：
其中：R1係CH2F、CHF2、Me、OMe、F或CN；R4係H或Me；R5係H或Me；R6係Me、CHF2或環丙基；R7係Me或F；R8係Me、F、CH2F、CH2OMe或CH2OH；R9係H或F；或R8和R9連同它們附接至其上的碳原子一起形成環丙基環或氧雜環丁烷環；R10係H或Me；並且環Y選自由以下各項組成之群組：
或其藥學上可接受的鹽。
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IA)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中環Y選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IA)之化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中環Y選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IA)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中環Y選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IA)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中環Y選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IA)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中環Y選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IA)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中環Y選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，在具有化學式(IA)之化合物中的基團-CH2-C(R7)(R8)(R9)選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IB)之化合物：
其中：R1係CH2F、CHF2、Me、OMe、F或CN；R2係H、F、CN或OMe；R3係H或F；R4係H或Me；R5係H或Me；R6係Me、CHF2或環丙基；並且
R11選自由以下各項組成之群組：
或其藥學上可接受的鹽。
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IB)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R11選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IB)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R11選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IB)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R11選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IC)之化合物：
其中：A、G、D和E獨立地選自CH或N；R1係CH2F、CHF2、Me、OMe、F或CN；R4係H或Me；R5係H或Me；R6係Me、CHF2或環丙基；並且R11選自由以下各項組成之群組：
或其藥學上可接受的鹽。
在一個實施方式中，A係N並且G係CH。
在一個實施方式中，A係N並且D、E和G均係CH。
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IC)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R11選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IC)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R11選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(IC)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R11選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(ID)之化合物：
其中：R1係CH2F、CHF2、Me、OMe、F或CN；R4係H或Me；R5係H或Me；R6係Me、CHF2或環丙基：R11選自由以下各項組成之群組：
並且環Y選自由以下各項組成之群組：
或其藥學上可接受的鹽。
在一個實施方式中，提供了具有化學式(ID)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R11選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(ID)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R11選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(ID)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R11選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(ID)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中環Y選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(ID)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中環Y選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(ID)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中環Y選自由以下各項組成之群組：
在一個實施方式中，提供了具有化學式(ID)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中環Y選自由以下各項組成之群組：
在本說明書的另一方面，提供了具有化學式(IE)之化合物：
其中：X係O、NH或NMe；D和E獨立地係CH或N；A係CR2或N；G係CR3或N；R1係CH2F、CHF2、Me、OMe、F或CN；
R2係H、F、CN或OMe；R3係H或F；R4係H或Me；R5係H或Me；R6係Me、CHF2或環丙基；R7係Me或F；R8係Me、F、CH2F、CH2OMe或CH2OH；R9係H或F；或R8和R9連同它們附接至其上的碳原子一起形成環丙基環或氧雜環丁烷環；R10係H或Me；並且R12係H或F；或其藥學上可接受的鹽。
在另一個實施方式中，提供了具有化學式(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中X係O。
在另一個實施方式中，提供了具有化學式(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R12係H。
在另一個實施方式中，提供了具有化學式(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中X係O並且R12係H。
在另一個實施方式中，提供了具有化學式(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中在吡唑并[4,3-f]異喹啉環的位置6處的立體化學係S。
在另一個實施方式中，提供了具有化學式(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中在吡唑并[4,3-f]異喹啉環的位置6處的立體化學係R。
在另一個實施方式中，提供了具有化學式(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中在吡唑并[4,3-f]異喹啉環的位置8處的立體化學係S。
在另一個實施方式中，提供了具有化學式(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中在吡唑并[4,3-f]異喹啉環的位置8處的立體化學係R。
在一個實施方式中，提供了具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中該化合物選自由以下各項組成之群組：(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,8-二甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-(2,2-二氟乙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；
(6S,8R)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-7-異丁基-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；和(6S,8R)-7-(2,2-二氟-3-甲氧基丙基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉。
(6S,8R)-7-(2,2-二氟丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；2,2-二氟-3-((6S,8R)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-3,6,8,9-四氫-7H-吡唑并[4,3-f]異喹啉-7-基)丙-1-醇；(6S,8R)-7-(2,2-二氟-3-甲氧基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-(2-氟-3-甲氧基-2-甲基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-(2,3-二氟丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-(2,3-二氟-2-甲基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-7-(2,2,3-三氟丙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(2-甲氧基-4-(2-(3-甲基氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；
(6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(2-甲氧基-4-(2-(3-甲氧基氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-(2,2-二氟丙基)-6-(2-氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-6-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；2,2-二氟-3-((6S,8R)-6-(2-氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-6-甲氧基苯基)-8-甲基-8,9-二氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉-7(6H)-yl)丙-1-醇；(6S,8R)-6-(2-氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-6-甲氧基苯基)-8-甲基-7-(2,2,3-三氟丙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6R,8R)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-異丁基-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6R,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6R,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-6,8-二甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6R,8R)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-((3-氟氧雜環丁烷-3-基)甲基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6R,8R)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-((3-氟氧雜環丁烷-3-基)甲基)-6,8-二甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-異丁基-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2,3-二氟丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；
6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-異丁基-8,8-二甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8,8-二甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-6-(4-(2-(3-(二氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；2-((6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉-6-基)-5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苄腈；(6S,8R)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-7-異丁基-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-(2,2-二氟丙基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；和(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(6-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-4-甲氧基吡啶-3-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉。
在一個實施方式中，提供了具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中該化合物選自由以下各項組成之群組：(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,8-二甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；
(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-(2,2-二氟乙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-7-異丁基-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；和(6S,8R)-7-(2,2-二氟-3-甲氧基丙基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉。
在一個實施方式中，提供了具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中該化合物選自由以下各項組成之群組：(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異唑啉；(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,8-二甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；和
(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉。
在一個實施方式中，提供了具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中該化合物選自由以下各項組成之群組：(6S,8R)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-6-(3-氟-5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-6-(5-溴-3-氟吡啶-2-基)-8-甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；和(6S,8R)-7-(2,2-二氟乙基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉。
在一個實施方式中，提供了具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中該化合物選自由以下各項組成之群組：(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-1-氟-7-((3-氟氧雜環丁烷-3-基)甲基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-1-氟-7-異丁基-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；7-(2,2-二氟乙基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8,8-二甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(6-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基吡啶-3-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉；
3,5-二氟-4-((6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉-6-基)-N-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙基)苯胺；和(6S,8R)-7-(2,2-二氟乙基)-6-(3-氟-5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉。
另一個實施方式提供了本文所述的任何實施方式(例如如申請專利範圍1所述的實施方式)，其條件係選自實例1至51組成的組中的一個或多個具體的實例(例如一個、兩個或三個或更多個具體的實例)單獨地被放棄。
為避免疑問，在本說明書的化學式中使用的“
”表示不同基團之間的附著點。
為進一步避免疑問，在多個取代基獨立地從一個給定的組中選擇的情況下，所選擇的取代基可以包括來自給定的組中的相同的取代基或不同的取代基。
具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物具有兩個或更多個手性中心，並且認識到具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物可以在或不在另外以任何相關比例的一種或多種具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的一種或多種其他可能的鏡像異構物和/或非鏡像異構物的條件下製備、分離和/或提供。富含鏡像物的(enantiomeric)/鏡像物純的和/或富含非鏡像物的/非鏡像物純的化合物的製備可以藉由本領域中熟知的有機化學標準技術進行，例如藉由從富含鏡像物的或鏡像物純的起始材料合成，合成過程中使用適當的富含鏡像物的或鏡像物純的催化劑，和/或藉由拆分外消旋的或部分富含的立體異構物混合物(例如藉由手性層析法)進行。
對於在藥學背景下的使用，較佳的是在不存在大量其他立體異構物形式的情況下提供具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
因此，在一個實施方式中，提供了一種組成物，該組成物包含具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，視情況和具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽的一種或多種其他立體異構物形式一起，其中該具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽以非鏡像異構物過量(%de)
90%存在於該組成物中。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%de係
95%。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%de係
98%。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%de係
99%。
在另一個實施方式中，提供了一種組成物，該組成物包含具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，視情況和具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽的一種或多種其他立體異構物形式一起，其中該具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽以鏡像異構物過量(%ee)
90%存在於該組成物中。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%ee係
95%。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%ee係
98%。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%ee係
99%。
在另一個實施方式中，提供了一種組成物，該組成物包含具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，視情況和具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽的一種或多種其他立體異構物形式一起，其中該具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽以鏡像異構物過量(%ee)
90%和非鏡像異構物過量(%de)
90%存在於該組成物中。
在以上提到的組成物的另外的實施方式中，%ee和%de可以採用如以下列出的值的任何組合：
●該%ee係
5%，並且該%de係
80%。
●該%ee係
5%，並且該%de係
90%。
●該%ee係
5%，並且該%de係
95%。
●該%ee係
5%，並且該%de係
98%。
●該%ee係
95%，並且該%de係
95%。
●該%ee係
98%，並且該%de係
98%。
●該%ee係
99%，並且該%de係
99%。
在另一個實施方式中，提供了一種醫藥組成物，其包含具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，與藥學上可接受的賦形劑聯合。
在一個實施方式中，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包含具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，與藥學上可接受的賦形劑聯合，視情況進一步包含具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽的一種或多種其他立體異構物
形式，其中該具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽以鏡像異構物過量(%ee)
90%存在於該組成物中。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%ee係
95%。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%ee係
98%。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%ee係
99%。
在一個實施方式中，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包含具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，與藥學上可接受的賦形劑聯合，視情況進一步包含具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽的一種或多種其他立體異構物形式，其中該具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽以非鏡像異構物過量(%de)
90%存在於該組成物中。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%de係
95%。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%de係
98%。
在另一個實施方式中，在以上提到的組成物中%de係
99%。
在一個實施方式中，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包含具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，與藥學上可接受的賦形劑聯合，視情況進一步包含具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽的一種或多種其他立體異構物形式，其中該具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽以鏡像異構物過量(%ee)
90%和非鏡像異構物過量(%de)
90%存在於該組成物中。
在以上提到的醫藥組成物的另外的實施方式中，%ee和%de可以採用如以下列出的值的任何組合：
●該%ee係
95%，並且該%de係
95%。
●該%ee係
98%，並且該%de係
98%。
●該%ee係
99%，並且該%de係
99%。
具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物和其藥學上可接受的鹽可以按無定形形式、結晶形式、或半結晶形式製備、使用或提供，並且任何給定的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽能夠被形成多於一種晶體/多晶形形式，包括水合的(例如半水合物、一水合物、二水合物、三水合物或其他化學計量水合物)和/或溶劑化形式。應當理解的是本說明書涵蓋了任何及所有具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物和其藥學上可接受的鹽的此類固體形式。
在另外的實施方式中，提供了具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物，該化合物藉由在以下‘實例’部分所描述的方案可獲得。
本說明書旨在包括存在於本化合物中的原子的所有同位素。同位素應理解為包括具有相同原子數但具有不同質量數的那些原子。舉例來說，氫的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括13C和14C。在一個具體的實施方式中，提供了具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物，其中R4係氘。
具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的適合的藥學上可接受的鹽例如是酸加成鹽。具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的適合的藥學上可接受的鹽可以是例如具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的酸加成鹽，例如與無機或有機酸(如鹽酸、氫溴酸、
硫酸或三氟乙酸)的酸加成鹽。具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的藥學上可接受的鹽還可以是例如與以下酸的酸加成鹽，該等酸係：乙酸、己二酸、苯磺酸、苯甲酸、肉桂酸、檸檬酸、D,L-乳酸、乙烷二磺酸、乙烷磺酸、富馬酸、L-酒石酸、馬來酸、蘋果酸、丙二酸、甲烷磺酸、1,5-萘二磺酸(napadisylic acid)、磷酸、糖精、琥珀酸、對-甲苯磺酸或甲苯磺酸。
具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的另一種適合的藥學上可接受的鹽係例如，在給予所述人體或動物體具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物之後，在該人體或動物體內所形成的鹽。
具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽可以作為共晶固體形式製備。應當理解的是具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽的藥學上可接受的共晶體形成本說明書的一個方面。
應當理解的是，具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的適合藥學上可接受的前藥也形成本說明書的一個方面。因此，本說明書的該等化合物可以按前藥形式給予，該前藥為在人體或動物體內分解以釋放本說明書化合物。前藥可以用於改變本說明書化合物的物理性質和/或藥物動力學性質。當本說明書化合物包含可以連接修飾基團的適合基團或取代基時，可以形成前藥。前藥的實例包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的體內可裂解的酯或醯胺衍生物。
因此，本說明書的一個方面包括當藉由有機合成可獲得時以及當經由其前藥的裂解而在人體或動物體內可獲得時，如上文所定義的那些具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物。因此，本說明書包括那些由
有機合成方法產生的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物，並且也包括在人體或動物體內經由先質化合物代謝而產生的此類化合物，即具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物可以為合成產生的化合物或代謝產生的化合物。
具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的適合藥學上可接受的前藥係基於合理醫學判斷，適合給予人體或動物體而無所不希望的藥理學活性且無不當毒性者。
例如在以下文獻中已描述不同形式的前藥：a)酶學方法(Methods in Enzymology)，第42卷，第309-396頁，由K.韋德爾(K.Widder)等人編(學術出版社(Academic Press)，1985)；b)前藥設計(Design of Pro-drugs)，由H.邦加爾德(H.Bundgaard)編，(埃爾塞維爾(Elsevier)，1985)；c)藥物設計和開發教科書(A Textbook of Drug Design and Development)，由克洛格斯加德-拉森(Krogsgaard-Larsen)和H.邦加爾德(H.Bundgaard)編，第5章“前藥的設計和應用(Design and Application of Pro-drugs)”，H.邦加爾德(H.Bundgaard)第113-191頁(1991)；d)H.邦加爾德，高級藥物遞送綜述(Advanced Drug Delivery Reviews)，8，1-38(1992)；e)H.邦加爾德，等人，醫藥科學雜誌(Journal of Pharmaceutical Sciences)，77，285(1988)；f)N.掛穀(N.Kakeya)等人，化學與藥學通報(Chem.Pharm.Bull)，32，692(1984)；
g)T.樋口(T.Higuchi)和V.斯黛拉(V.Stella)，“依新穎遞送系統的前藥”(“Pro-Drugs as Novel Delivery Systems”)，A.C.S.研討會系列(A.C.S.Symposium Series)，第14卷；以及h)E.羅奇(E.Roche)(編者)，“藥物設計中的生物可逆載體”(“Bioreversible Carriers in Drug Design”)，培格曼出版社(Pergamon Press)，1987。
具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的體內作用可以部分地由在給予具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物之後在人體或動物體內形成的一種或多種代謝物來發揮。如上所述，具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的體內作用還可以經由先質化合物(前藥)的代謝來發揮。
為避免疑義，應瞭解如果在本說明書中某一基團經‘上文所定義或在此定義限定，那麼所述基團涵蓋首次出現且最廣泛的定義以及對該基團的每一個和所有可替代性定義。
本說明書的另一方面提供了一種用於製備具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽之方法。適合的方法藉由以下代表性方法變化形式來說明，其中除非另行說明，A、D、E、G、X、以及R1至R12具有上文所定義的含義中的任一者。藉由有機化學的標準程序可以獲得必要的起始物質。該等起始物質的製備結合以下代表性方法變化形式並在隨附實例中進行了描述。可替代地，藉由於有機化學家的普通技術中說明的那些程序的類似程序可獲得必要的起始物質。
具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物可以經由例如適合的具有化學式(II)之化合物的醚化反應或胺化反應(其中L係，例如鹵素(例如Br)或三氟甲基磺醯基(三氟甲磺酸酯)基團或硼酸或硼酸鹽)與具有化學式(III)之醇或胺，使用適合的金屬催化劑(例如第三代預催化劑RockPhos)，在合適的溶劑中(例如甲苯或DME)，在合適的鹼(例如碳酸銫)的存在下，並且在適當的溫度(例如90℃-120℃)下(其中P係視情況合適的保護基團(例如THP，其可以隨後藉由用酸的處理去除))而製得。
具有化學式(II)之化合物(其中R4不等同於氫)可以經由例如，具有化學式(IV)之化合物藉由用合適的試劑(例如雙(三氟乙醯氧基)-碘苯)氧化，並且在低溫(典型地-80℃至-60℃)下，在合適的溶劑(例如THF)中，用有機金屬試劑(例如甲基溴化鎂，當R4係甲基時)處理而製得。
具有化學式(IV)之化合物，其中R12係氫，可以藉由例如，具有化學式(V)之苯胺與合適的試劑來影響吲唑的構成，例如無機亞硝酸鹽(例如亞硝酸鈉)在有機酸(例如丙酸)中，在低溫下(典型地-20℃至0℃)或可替代地酸酐(例如乙酸酐)在合適的鹼(例如乙酸鉀)的存在下，連同有機亞硝酸鹽(例如異戊基腈)，視情況在冠醚(例如18-冠醚-6)的存在下，在合適的溶劑中(例如氯仿)在適當的溫度下(例如70℃)的反應而製得。
具有化學式(V)之化合物可以藉由具有化學式(VI)之化合物與具有化學式(VII)之化合物在本領域已知的作為適用於皮克特-施彭格勒(Pictet-Spengler)反應的條件下(例如在酸的存在下(例如乙酸)並且在合適的溶劑(例如甲苯或水)中，以及在適當的溫度(例如60℃-100℃))下的反應而製得。
具有化學式(VI)之化合物可以藉由本領域已知的官能基相互轉換，例如具有化學式(VIII)之鹵化物由芳基鹵化物(例如溴)使用受保護的胺(例
如二苯基甲亞胺)，在適合的催化劑和配位基(例如雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)和外消旋-2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘基)的存在下，在合適的鹼(例如三級丁醇鈉)的存在下，在合適的溶劑(例如甲苯)中，在適當的溫度(例如80℃-100℃)下的胺化反應來製備。
具有化學式(VIII)之化合物可以經由以下製備：a)具有化學式(IX)之化合物與具有化學式(X)之醛在合適的溶劑中(例如THF)，在適合的還原劑(例如三乙醯氧基硼氫化鈉)的存在下，並且在適當的溫度(例如20℃-30℃)下的反應；b)(i)具有化學式(IX)之化合物與具有化學式(XI)之酸在標準的醯胺鍵形成條件(例如在醯胺偶合試劑(例如HATU)和合適的鹼(例如三乙胺)的存在下，在合適的溶劑(例如DMF)中)下反應，隨後(ii)使用適合的還原劑(例如硼烷)，在合適的溶劑(例如THF)中，在適當的溫度(例如60℃-70℃)下，生成的醯胺鍵的還原；c)具有化學式(IX)之化合物與具有化學式(XII)之化合物(其中LG係適合的離去基團(例如鹵素原子(例如溴或氯)或三氟甲烷碸))，在合適的鹼(例如二異丙基乙胺)的存在下，在合適的溶劑中(例如DCM或二
)，並且在適當的溫度(例如20℃-85℃)下的反應。
具有化學式(IX)之化合物可以藉由許多針對特別是手性胺合成的本領域已知的方法而製備：
a)具有化學式(XIII)之磺醯胺化物的開環根據以下示出的方案。
步驟1：烷基化，例如正丁基鋰/THF/-78℃至0℃
b)在手性催化劑(例如(1S,2S,4S,5R)-2-((R)-(烯丙氧基)(喹啉-4-基)甲基)-1-(蒽-9-基甲基)-5-乙烯基
啶-1-鎓溴)的存在下的相轉移烷基化，隨後係官能基操作
步驟1：烷基化，例如手性催化劑，甲苯/KOH，0℃
步驟2：官能基相互轉換
某些具有化學式(II)之化合物(具有P=H)能可替代地藉由包含具有化學式(XIV)之預成形的吲唑的化合物的環化反應與具有化學式(VII)之化合物，在本領域已知的作為適用於皮克特-施彭格勒(Pictet-Spengler)反應的條
件(例如在酸的存在下(例如三氟乙酸)，並且在合適的溶劑中(例如甲苯或水)，以及在適當的溫度(例如60℃-100℃))下而製得。
具有化學式(XIV)之化合物可以經由以下製備：a)具有化學式(XV)之化合物與具有化學式(X)之醛在合適的溶劑(例如THF)中，在適合的還原劑(例如三乙醯氧基硼氫化鈉)的存在下，並且在適當的溫度(例如20℃-30℃)下的反應；b)(i)具有化學式(XV)之化合物與具有化學式(XI)之酸在標準的醯胺鍵形成條件(例如在醯胺偶合試劑(例如HATU)和合適的鹼(例如三乙胺)的存在下，在合適的溶劑(例如DMF)中)下反應，隨後(ii)使用適合的還原劑(例如硼烷)，在合適的溶劑(例如THF)中，在適當的溫度(例如60℃-70℃)下，生成的醯胺鍵的還原；c)具有化學式(XV)之化合物與具有化學式(XII)之化合物(其中LG係適合的離去基團(例如鹵素原子(例如溴或氯)或三氟甲烷碸))，在合適的鹼(例如二異丙基乙胺)的存在下，在合適的溶劑(例如DCM或二
)中，並且在適當的溫度(例如20℃-85℃)下的反應。
具有化學式(XV)之化合物可以藉由針對特別是手性胺合成的許多本領域已知的方法而製備；具有化學式(XII)之磺醯胺化物的開環根據以下方案示出
步驟1：烷基化，例如正丁基鋰/THF/-78℃至0℃
步驟2：保護基團的去除，例如在二
/MeOH/DCM中的無水HCl等應瞭解，上述方法變化形式中的方法步驟的其他排列也有可能。
當需要具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的藥學上可接受的鹽時，它可以藉由例如所述化合物與合適的酸或合適的鹼的反應獲得。當需要具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的藥學上可接受的前藥時，它可以使用常規程序獲得。
也應瞭解，在上文提及的一些反應中，可能必需或所希望的是保護化合物中的任何敏感性基團。必需或所希望保護的情況和適用於保護的方法為熟習該項技術者所知。常規保護基團可以根據標準實踐使用(出於說明，參見T.W.格林(Green)，有機合成中的保護基團(Protective Groups in Organic Synthesis)，約翰．威利父子出版公司(John Wiley and Sons)，1991)。因此，如果反應物包括如胺基、羧基或羥基的基團，那麼在此提及的一些反應中可能所希望的是保護該基團。
用於胺基或烷基胺基基團的適合的保護基團係，例如醯基基團，例如烷醯基基團，例如乙醯基；烷氧羰基基團，例如甲氧羰基、乙氧羰基或三級丁氧羰基基團；芳基甲氧羰基基團，例如苯甲氧羰基；或芳醯基基團，例如苯甲醯基。用於以上保護基團的脫保護條件必然隨著保護基團的選擇而變化。因此，舉例來說，如烷醯基或烷氧羰基或芳醯基的醯基可以例如藉由用如鹼金屬氫氧化物(例如，氫氧化鋰或氫氧化鈉)的適合鹼進行水解來移除。可替代地，如三級丁氧羰基基團的醯基基團可以例如藉由用如鹽酸、硫酸或磷酸或三氟乙酸的適合酸處理來移除，且如苯甲氧羰基基團的芳基甲氧羰基基團可以例如藉由經如鈀碳的催化劑氫化或藉由用路易士酸(Lewis acid)(例如三(三氟乙酸)硼)處理來移除。用於一級胺基基團的合適的替代保護基團係，例如，鄰苯二甲醯基團，該基團可以藉由用烷基胺(例如二甲基胺基丙胺)或用肼處理被去除。
用於羥基基團的適合的保護基團係，例如，醯基基團，例如鏈烷醯基基團，例如乙醯基、芳醯基基團、例如苯甲醯基、或芳基甲基基團，例如苄基。使以上保護基團脫保護的條件將必然隨著保護基團的選擇而變化。因此，例如，醯基基團(例如，鏈烷醯基或芳醯基基團)可以例如藉由與適合的鹼(例如鹼金屬氫氧化物，例如氫氧化鋰或氫氧化鈉)水解被去除。可替代地，芳基甲基基團如苄基基團可以藉由例如在催化劑(如鈀碳)上的氫化被去除。
用於羧基基團的適合的保護基團係，例如，酯化基團，例如甲基或乙基基團，它可以例如藉由用如氫氧化鈉的鹼進行水解來移除；或例如三級丁基基團，它可以例如藉由用酸(例如有機酸，如三氟乙酸)進行處理來移除；或例如苯甲基基團，它可以例如藉由經如鈀碳的催化劑進行氫化來移除。
該等保護基團可以在該合成的任何方便的階段使用在化學領域中熟知的常規技術被去除。
本文定義的某些中間體係新穎的，並且該等係作為本說明書的另外的特徵被提供的。
生物學測定
使用以下測定方法來測量本說明書的該等化合物的效果。
ERα結合測定
化合物結合到分離的雌性素受體α配位基結合結構域(ERα-LBD(GST))的能力在競爭測定中使用LanthaScreenTM時間分辨螢光共振能量轉移(TR-FRET)檢測端點來評估。對於LanthaScreen TR-FRET端點，適合的螢光團(Fluormone ES2，賽默飛世爾(ThermoFisher)，產品代碼P2645)和重組人雌性素受體α配位基結合域，使用殘基307-554(在內部表現和純化)測量化合物結合。該測定原理係：將ERα-LBD(GST)添加到螢光配位基以形成受體/螢光團複合物。使用鋱標記的抗-GST抗體(產品代碼PV3551)藉由結合到受體的GST標籤來間接標記受體，並且藉由測試化合物置換螢光配位基從而導致Tb-抗-GST抗體與示蹤劑之間的TR-FRET信號損失的能力來檢測競爭性結合。使用貝克曼庫爾特商貿公司(Beckman Coulter)BioRAPTR FRD微流體工作站進行所有試劑的添加，如下來進行該測定：
1.將120nL的測試化合物聲學分配到黑色低容量384孔測定板中。
2.在ES2篩選緩衝液中製備1x Erα-LBD/Tb-抗GST Ab，並且培養15分鐘。
3.將6μL的該1x AR-TBD/Tb-抗-GST Ab試劑分配至該測定板的每個孔中，隨後將6μl螢光團試劑分配至該測定板的每個孔中。
4.覆蓋該測定板以保護該等試劑免受光照和蒸發，並且在室溫下培養4小時。
5.在337nm處激發並且使用BMG PheraSTAR測量每個孔在490nm和520nm處的螢光發射信號。
使用Labcyte Echo 550，將化合物直接從包含經連續稀釋化合物(分別包含10mM、0.1mM、1M和10nM最終化合物的4個孔)的化合物來源微板中進行給予至測定微板。Echo 550係一液體處理機，其使用聲學技術來進行DMSO化合物溶液的直接微板-至-微板的轉移，並且該系統可以被程式設計以從不同來源板孔中轉移多個小nL體積的化合物，以給出在該測定中所希望的連續稀釋的化合物，然後將其返回-填充以跨稀釋範圍歸一化DMSO濃度。將總120nL的化合物加上DMSO添加至每個孔，並且將化合物以12點濃度響應形式在最終化合物濃度範圍分別為10μM、2.917μM、1.042μM、0.2083μM、0.1μM、0.0292μM、0.0104μM、0.002083μM、0.001μM、0.0002917μM、0.0001042μM、0.00001μM。將用每種化合物獲得的TR-FRET劑量響應數據導出到適合的套裝軟體(如Origin或Genedata)中，以進行曲線擬合分析。將競爭性ERα結合表現為IC50值。將這藉由計算所需化合物的濃度來確定，該濃度給出結合至ERα-LBD上的示蹤化合物的50%降低。
MCF-7 ER下調測定
將化合物下調雌性素受體(ER)數目的能力在基於細胞的免疫-螢光測定中，使用MCF-7人類導管癌乳腺細胞系來評估。將MCF-7細胞直接從包含2mM L-穀胺醯胺和5%(v/v)活性炭/葡聚糖處理胎牛血清的測定培養基(不含酚紅的達爾伯克改良伊格爾培養基(DMEM)(西格瑪(Sigma)D5921)
的冷凍小瓶(大約5×106個細胞)中復蘇。使用無菌18G x 1.5英吋(1.2×40mm)寬規格的針將細胞注射一次，並且使用庫爾特細微性儀(Coulter Counter)(貝克曼(Beckman))來測量細胞密度。將細胞進一步稀釋在測定培養基中至密度為3.75×104細胞/mL，並且使用賽默科技公司(Thermo Scientific)Matrix WellMate或賽默Multidrop將40μL/孔添加至透明底、黑色、組織培養處理的384孔板(柯仕達(Costar)，編號3712)中。在細胞接種後，將板在37℃，5% CO2下培養過夜(Liconic轉盤孵化器)。使用LabCyte EchoTM模型555化合物重新格式化儀產生測試數據，該格式化儀係自動化工作單元(集成的Echo 2工作單元)。測試化合物的10mM化合物儲備溶液用來產生384孔化合物劑量板(Labcyte P-05525-CV1)。將40μL的每種10mM化合物儲備溶液分配到第一四分之一孔中，並且然後使用Hydra II(MATRIX英國)液體處理單元在DMSO中進行1：100逐步連續稀釋，已給出40μL經稀釋的化合物，分別至四分之一孔2(0.1mM)、3(1μM)和4(0.01μM)中。將40μL的DMSO添加至該源板上的行P中，允許DMSO跨過該劑量範圍歸一化。為了向對照孔給以劑量，將40μL的DMSO添加到行O1中，並且將在DMSO中的40μL的100μM氟維司群添加至在該化合物源板上的行O3中。Echo使用聲學技術來進行DMSO化合物溶液至測定板的直接微板-至-微板轉移。程式設計該系統以多個增量在微板之間轉移低至2.5nL的體積，並且在這樣做時在該測定板中產生一系列稀釋的化合物，然後將其返回填充以跨稀釋範圍歸一化DMSO濃度。使用整合的Echo 2工作單元用如上的化合物源板將化合物分配到細胞平板上，產生具有3倍稀釋和一個最終10倍稀釋的12pt重複3μM至3pM劑量範圍。將DMSO給予該最大信號對照孔，以給出終濃度為0.3%，並且將氟維司群給予最小信號對照孔，
以相應地給出最終濃度為100nM。將平板在37℃，5% CO2下進一步培養18-22小時，並且然後藉由添加20μL的11.1%(v/v)甲醛(在磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)中)溶液進行固定，給出最終甲醛濃度為3.7%(v/v)。將細胞在室溫下固定20min，隨後用250μL PBS/Proclin(具有殺生物防腐劑的PBS)，使用BioTek洗板機洗滌兩次，然後將40μL的PBS/Proclin添加到所有孔中，並且將該等板儲存在4℃下。將上述的固定方法在集成的Echo 2工作單元上進行。使用自動化AutoElisa工作單元來進行免疫染色。將PBS/Proclin從所有的孔中吸出，並且將該等細胞用包含0.5%吐溫(Tween)TM 20(v/v)的40μL PBS在室溫下透性化1小時。將該等板在具有Proclin(具有殺生物防腐劑的PBST)的250μL的PBS/0.05%(v/v)吐溫20中洗滌三次，並且然後添加20μL的ERα(SP1)兔單株抗體(賽默飛世爾(Thermofisher)，1：1000在PBS/TweenTM/3%(w/v)牛血清白蛋白中。將該等板在4℃(Liconic轉盤孵化器)下培養過夜並且然後在具有Proclin(PBST)的250μL的PBS/0.05%(v/v)吐溫TM 20中洗滌三次。然後，將該等板與20μL/孔的山羊抗兔IgG AlexaFluor(亞曆克薩螢光)594或山羊抗兔亞曆克薩螢光488抗體(分子探針公司(Molecular Probes))(具有赫斯特(Hoechst)以1：5000在PBS/吐溫TM/3%(w/v)牛血清白蛋白中)在室溫下培養1小時。然後，將該等板在具有Proclin(具有殺生物防腐劑的PBST)的250μL的PBS/0.05%(v/v)吐溫TM20中洗滌三次。將20μL的PBS添加到每個孔中，並且將該等板覆蓋有一黑色平板密封件並且儲存在4℃下，隨後進行讀取。使用Cellomics Arrayscan讀取594nm(24hr時間點)或488nm(5hr時間點)處螢光來讀取板，以測量每個孔中的ERα受體水平。將平均總強度針對細胞數目標準化，給出總強度/細胞。將數據導出到適合的套裝軟體(如Origin)
中，以進行曲線擬合分析。將ERα受體的下調表現為IC50值並且藉由計算所需化合物的濃度來確定，該濃度給出平均最大總強度信號的50%降低。
對於該等實例產生的在表A中示出的數據(以下數據可以是來自單個實驗的結果或兩個或更多個實驗的平均值)：
1在ER下調測定中測試化合物，顯示出在測定中下調值(>90%)，除非另行說明，在這種情況下，%下調在圓括號中示出。
西方印漬測定
藉由西方印漬使用人乳癌細胞系(MCF-7和CAMA-1)來評估化合物下調雌性素受體(ER)的能力。將細胞置於在含有2mM L-穀胺醯胺和5%(v/v)活性炭處理的胎牛血清(F6765，西格瑪公司(Sigma))的不含酚紅的
RPMI的0.5 x 106/孔的12孔組織培養處理的平板上。在37℃，5% CO2下，將細胞用化合物(100nM)或媒介物對照(0.1% DMSO)培養48h，然後用PBS洗滌一次，並且用80μl裂解緩衝液(25mM Tris/HCl、3mM EDTA、3mM EGTA、50mM NaF、2mM原釩酸鈉、0.27M蔗糖、10mM β-甘油磷酸鹽、5mM焦磷酸鈉、0.5% TritonX-100、pH 6.8)在冰上進行裂解。
在進行蛋白質測定(DC伯樂(Bio-Rad)蛋白質套組(kit)，500-0116)之前，將細胞刮下、超音波處理和離心，並且使得樣品在含有1 x LDS樣品緩衝液(NP0007，英傑公司(Invitrogen))和1 x NuPAGE樣品還原劑(NP0009，英傑公司(Invitrogen))的裂解緩衝液中達到1-2mg/ml的蛋白質濃度。將樣品在95℃下煮沸10min，然後在-20℃下冷凍直到準備好使用。
將10-20μg蛋白質載入到26孔標準膠(伯樂公司(BioRad)345-0034)上。在125V下，將膠在運行緩衝液(24mM Tris鹼(西格瑪公司(Sigma)、192mM甘胺酸、3.5mM SDS，在蒸餾水中製成)中運行1hr 25min。在30V下，將膠在轉移緩衝液(25mM Tris、192mM甘胺酸、20%(v/v)甲醇、pH 8.3，在蒸餾水中製成)中轉移2hr至硝酸纖維素膜上。將印漬用麗春紅S(P7170，西格瑪(Sigma))染色，並且根據適當的分子量標記物進行切割。
在室溫下，在含有0.05% TweenTM 20(PBS/吐溫)的磷酸鹽緩衝鹽水的5%馬弗爾(w/v)中，將膜阻斷1小時。然後在4℃下將印漬用抗-ERα(SP1)兔單株抗體(賽默飛世爾(Thermofisher))稀釋的1：1000培養過夜(伴隨輕輕振搖)，隨後用PBS/吐溫洗滌若干次。將二級抗-兔HRP抗體(7074，CST)以1：2000稀釋，在室溫下該稀釋物培養2h(伴隨輕輕振搖)，隨後用PBS/吐溫洗滌若干次。所有抗體在PBS/吐溫中的5%馬弗爾(w/v)中製成。
使用Pierce WestDura化學發光試劑(賽默科技公司(Thermo Scientific)34076)開發免疫印漬，並且使用Syngene軟體在G框上進行開發/定量。將ERα受體的下調歸一化至媒介物對照(0%下調)，並且該100nM氟維司群對照(100%下調)在相同的膠上運行。
表B顯示對於經選擇的實例(以下數據可以是來自單個實驗的結果或兩個或更多個實驗的平均值)產生的以下數據：
人體肝細胞測定
使用以下方案評估人體肝細胞中的化合物的代謝穩定性：
1.在適當溶劑(DMSO)中製備化合物的10mM儲備溶液和對照化合物。將培養培養基(L-15培養基)置於37℃水浴中，並且在使用之前允許加熱至少15分鐘。
2.將80μL的乙腈添加至96孔深孔板(猝滅板)的每個孔中。
3.在新的96孔板中，藉由結合198μL的乙腈和2μL的10mM儲備溶液將10mM測試化合物和對照化合物稀釋至100μM。
4.將一小瓶冷凍保存(低於-150℃)的人體肝細胞(獲得自Celsis IVT.芝加哥，IL(產品號S01205)的LiverPoolTM 10供體人體肝細胞)從儲存中移出，保證小瓶保持在冷凍溫度下直到接下來的解凍過程。盡可能快地，藉由將小瓶置於37℃水浴中解凍細胞，並且輕輕振搖該等小瓶。將小瓶保持在水浴中，直到所有的冰晶已經溶劑並且不再可見。溶解完成後，用70%乙醇噴霧小瓶，將該小瓶轉移至生物安全性櫃中。
5.打開小瓶，將內容物倒入含有溶解培養基的50mL錐形管中。將50mL錐形管置於離心機中，並且以100g旋轉10分鐘。旋轉一結束，抽吸溶解培養基和在足夠的培養培養基中的懸浮肝細胞，以產生約1.5×106個細胞/mL。
6.使用Cellometer® Vision，細胞計數並且確定活細胞密度。具有較差生活力(<80%生活力)的細胞係不可接受用於使用的。用培養培養基來稀釋細胞，以達到1.0×106個活細胞/mL的工作細胞密度。
7.將247.5μL的肝細胞轉移至96孔細胞培養板的每個孔中。將該平板置於艾本德公司(Eppendorf)舒適型恒溫混勻儀平板搖床上，允許肝細胞加熱10分鐘。
8.將2.5μL的100μM測試化合物或對照化合物添加至含有細胞的培養孔中，混合以獲得在0.5min處的均質懸浮液，當獲得該均質懸浮液時將定義0.5min時間點。在0.5min時間處，將20μL經培養的混合物轉移至在“猝滅板”的孔中，隨後進行渦旋。
9.在37℃下，以900rpm在艾本德公司(Eppendorf)舒適型恒溫混勻儀平板搖床上培養該平板。在5min、15min、30min、45min、60min、80min、100
min和120min處，混合該培養系統，並且在各個時間點處將20μL經培養的混合物的樣品轉移至分開的“猝滅板”中，隨後進行渦旋。
10.以4,000rpm將該等猝滅板離心20分鐘。將4種不同的化合物彙集在一個盒中，並且用於LC/MS/MS分析。
使用Microsoft Excel進行所有的計算。從提取的離子層析圖確定峰面積。藉由Ln親本消失百分比相對時間曲線的回歸分析確定親本化合物的體外內在清除率(體外Clint，以μL/min/106個細胞計)。從斜率值，使用以下方程確定體外內在清除率(體外Clint，以μL/min/106個細胞計)，並且在表C中示出：體外Clint=kV/N
V=培養體積(0.25mL)；N=肝細胞/孔(0.25×106個細胞)的數目。
物理特性
logD
藥物的親脂性係重要的物理特性，可以影響化合物的許多生物和代謝特性。在pH 7.4處，1-辛醇和緩衝水溶液之間的分配係數，LogDO/W，係化合物的親脂性最常用的測量。用於LogDO/W測量的當前的方法係基於傳統的搖瓶技術，但是混合物中的測量化合物的修飾一次十個使用UPLC與定量質譜分析(MS)作為測量相對辛醇和水溶液濃度的方法。最大能力係379個項目化合物(具有包含三種QC化合物的10種化合物的48個庫)/實驗。2種質量控制(QC)樣品，具有中LogD的環苯紮林(Cyclobenzaprine)和具有高LogD的尼卡地平(Nicardipine)用於所有庫以確保良好的質量。使用具有低LogD的另外的QC樣品咖啡因，並且隨機置於所有的運行中。該方法已經針對先前的搖瓶方法進行了徹底驗證。
溶解度
在標準條件下測量研究化合物的熱力學溶解度。它係使用由化合物管理液體存儲提供的10mM DMSO溶液之搖瓶方法，並且係高通量方法。在25℃下，將該等乾燥的化合物在水性磷酸緩衝液(pH 7.4)中平衡24小時，然後將具有溶解化合物的部分從殘餘物中分離。分析該等溶液，並且使用UPLC/MS/MS定量，將QC-樣品併入各個測定運行中以確保該測定的質量。
人血漿蛋白結合
在人血漿中的自動平衡透析測定使用RED(快速平衡透析)裝置和樣品處理。該測定通常運行超過兩至三天(包括結果的遞送)。透析18小時後，製備用於藉由液相層析法和質譜分析法分析的血漿和緩衝液樣品。通常以單數形式測試樣品，並且藉由LC/MSMS，藉由使用在血漿中的7點校準曲線定量。彙集在血漿庫中的化合物高達10種化合物。在每個運行中使用三種參考化合物，普萘洛爾(Propranolol)、美托洛爾(Metoprolol)和華法林(Warfarin)。在每個庫中華法林被用作對照，並且在每個運行中將普萘洛爾和美托洛爾隨機放置。將內部Excel宏用於針對機器人和質譜儀的文件的準備，並且還用於計算在血漿中未結合的級分(fu%)。
表D顯示針對經選擇的的實例(以下數據可以是來自單個實驗的結果或兩個或更多個實驗的平均值)產生的logD、溶解度和血漿蛋白結合的數據：
根據本說明書的另一方面，提供了一種醫藥組成物，其包含如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，與藥學上可接受的賦形劑聯合。
用於片劑配製物的適合的醫藥學上可接受的賦形劑包括例如惰性稀釋劑、成粒劑和崩散劑、黏合劑、潤滑劑、防腐劑以及抗氧化劑。另外適合的藥學上可接受的賦形劑可以是螯合劑。片劑配製物可以未包覆包衣或包覆包衣，以改變它們的崩散性和隨後活性成分在胃腸道內的吸收，或改良它們的穩定性和/或外觀，在任一情況下，均使用在本領域中熟知的常規包衣劑和程序。
經口使用的組成物可以可替代地呈硬明膠膠囊形式，其中活性成分與惰性固體狀稀釋劑混合；或呈軟明膠膠囊形式，其中活性成分與水或油混合。
水性懸浮液總體上包含呈細粉形式的活性成分以及一種或多種懸浮劑、分散劑或潤濕劑。水性懸浮液還可以包含一種或多種防腐劑、抗-氧化劑、著色劑、調味劑和/或甜味劑。
油性懸浮液可以藉由將活性成分懸浮於植物油中或礦物油中來配製。油性懸浮液還可以包含增稠劑。可以添加甜味劑(如上文所列的甜味劑)和調味劑，以提供可口的口服製劑。該等組成物可以藉由添加抗氧化劑來保存。
適合於藉由添加水製備水性懸浮液的可分散粉末和顆粒總體上包含該活性成分連同分散劑或潤濕劑、懸浮劑以及一種或多種防腐劑。也可以存在如甜味劑、調味劑以及著色劑的另外賦形劑。
本說明書的該等醫藥組成物還可以呈水包油乳液的形式。油相可以是植物油或礦物油或任何該等油的混合物。乳液也可以包含甜味劑、調味劑以及防腐劑。
糖漿和酏劑可以使用甜味劑配製，並且也可以包含緩和劑、防腐劑、調味劑和/或著色劑。
該等醫藥組成物還可以呈無菌可注射水性或油性懸浮液的形式，它可以根據已知程序，使用上述適當分散劑或潤濕劑和懸浮劑中的一者或多者來配製。無菌可注射製劑還可以是於無毒腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑系統中的無菌可注射溶液或懸浮液。
用於經吸入給藥的組成物可以呈常規加壓氣霧劑的形式，該加壓氣霧劑經安排以分配或者呈包含細粉狀固體的氣霧劑形式或者液滴形式的活性成分。可以使用如揮發性氟化烴或烴的常規氣霧劑推進劑，並且便利地安排氣霧劑設備以分配定量的活性成分。乾粉吸入器也可以是適合的。
有關配製物的另外的資訊，請讀者參考綜合醫藥化學(Comprehensive Medicinal Chemistry)(科溫．漢施(Corwin Hansch)；編輯委員會主席)，培格曼出版社1990的第5卷，第25.2章。
與一種或多種賦形劑組合以產生單一劑型的活性成分的量將必要地變化，取決於所治療主體和特定給藥途徑。舉例來說，向人類經口給藥將總體上需要例如從1mg到2g活性劑(更適當地從100mg到2g，例如從250mg到1.8g，如從500mg到1.8g，尤其從500mg到1.5g，宜為從500mg到1g)與適當且適宜量的賦形劑混合給予，該等賦形劑可以在總組成物的按質量計從約3%到約98%內變化。應瞭解，如果需要大劑量，那麼可能需要多種劑型，例如兩種或
更多種片劑或膠囊，其中活性成分的劑量宜在其間劃分。典型地，單位劑型將包含約10mg至0.5g的本說明書化合物，儘管單位劑型可以包含高達1g。適宜地，單一固體劑型可以包含1mg與300mg之間的活性成分。
為實現治療或預防目的的本說明書的化合物的劑量大小自然將根據疾病病況的性質和嚴重程度、動物或患者的年齡和性別以及給藥途徑，根據熟知的醫學原則而變化。
在使用本說明書的化合物以實現治療或預防目的時，總體上將給予化合物以致接受例如每千克體重1mg到每千克體重100mg的範圍內的日劑量，如果需要那麼分次給藥。總體來講，當採用腸胃外途徑時，將給予更低劑量。因此，例如，對於靜脈內給予來說，總體上將使用介於例如每千克體重1mg到每千克體重25mg範圍內的劑量。類似地，對於經吸入給予來說，將使用介於例如每千克體重1mg到每千克體重25mg範圍內的劑量。然而，經口給予(確切地說以片劑形式)為較佳的。
在本說明書的一個方面，本說明書的化合物或其藥學上可接受的鹽係作為片劑給予的，該等片劑包括10mg至100mg的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)(或其藥學上可接受的鹽)的化合物，其中一個或多個片劑係如所需進行給予以實現所希望的劑量。
如上所述，已知經由ERα的傳訊藉由以下作用中的一者或多者引起腫瘤形成：介導癌症和其他細胞的增殖、介導血管生成事件以及介導癌鈀胞的活動、遷移性以及侵襲性。我們已發現，本說明書的化合物具有強力抗腫瘤活性，該活性據相信借助於對抗或下調涉及信號轉導步驟的ERα而獲得，該等信
號轉導步驟引起腫瘤細胞增殖和存活以及使腫瘤細胞轉移的侵襲性和遷移能力。
因此，本說明書的化合物可以具有作為抗腫瘤劑的價值，具體來說，作為哺乳動物癌細胞增殖、存活、活動、播散以及侵襲的選擇性抑制劑，從而抑制腫瘤生長和存活並抑制轉移性腫瘤生長。確切地說，本說明書的化合物可以具有在抑制和/或治療實體腫瘤疾病方面作為抗增殖性及抗侵襲性藥劑的價值。確切地說，本說明書的化合物可以有用於預防或治療對ERα的抑制敏感且涉及信號轉導步驟的那些腫瘤，該等信號轉導步驟引起腫瘤細胞增殖和存活以及使腫瘤細胞轉移的遷移能力和侵襲性。另外，本說明書的化合物可以有用於預防或治療單獨或部分地藉由對抗或下調ERα來介導的那些腫瘤，即該等化合物可以用於在需要此類治療的溫血動物中產生ERα抑制作用。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的在如人類的溫血動物中用作藥劑的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在如人類的溫血動物中產生抗增殖性作用。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在如人類的溫血動物中抑制和/或治療實體腫瘤疾病的抗侵襲性藥劑。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽的用途，用於在如人類的溫血動物中產生抗增殖性作用。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽在藥劑製造中之用途，用於在如人類的溫血動物中產生抗增殖性作用。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽在藥劑製造中之用途，用於在如人類的溫血動物中作為抑制和/或治療實體腫瘤疾病的抗侵襲性藥劑。
根據本說明書的另一個方面，提供一種在需要此類治療的溫血動物(如人類)中產生抗增殖性作用之方法，該方法包括向所述動物體給予有效量的如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本說明書的另一個方面，提供一種藉由在需要此類治療的溫血動物(如人類)中抑制和/或治療實體腫瘤疾病來產生抗侵襲性作用之方法，該方法包括向所述動物體給予有效量的如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在例如人類的溫血動物中預防或治療癌症中使用。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽在藥劑製造中的用途，用於在例如人類的溫血動物中預防或治療癌症中使用。
根據本說明書的另一個方面，提供一種在需要此類治療的例如人類的溫血動物中用於預防或治療癌症的方法，其包括向所述動物體給予有效量的如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本說明書的另一個方面，提供一種具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，如上文所定義用於在如人類的溫血動物中預防或治療實體腫瘤疾病。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽在藥劑製造中之用途，用於在如人類的溫血動物中預防或治療實體腫瘤疾病中使用。
根據本說明書的另一個方面，提供一種在需要此類治療的溫血動物(如人類)中用於預防或治療實體腫瘤疾病之方法，該方法包括向所述動物體給予有效量的如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於預防或治療對抑制會涉及信號轉導步驟的ERα的抑制敏感的那些腫瘤，該等信號轉導步驟引起腫瘤細胞的增殖、存活、侵襲性以及遷移性能力。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)的化合物或其藥學上可接受的鹽在藥劑製造中之用途，用於預防或治療對涉及信號轉導步驟的ERα的抑制敏感的那些腫瘤，該等信號轉導步驟引起腫瘤細胞的增殖、存活、侵襲性以及遷移性能力。
根據本說明書的另一個方面，提供一種用於預防或治療對涉及信號轉導步驟的ERα的抑制敏感的那些腫瘤的方法，該等信號轉導步驟引起腫瘤細胞的增殖、存活、侵襲性以及遷移性能力，該方法包括向所述動物體給予有效量的如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於提供對ERα的抑制作用。
根據本說明書的另一個方面，提供了如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽在用於提供對ERα的抑制作用中使用的在藥劑製造中之用途。
根據本說明書的另一個方面，還提供一種用於提供對ERα的抑制作用之方法，該方法包括給予有效量的如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本說明書的另一個方面，提供如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽在用於提供對ERα的選擇性抑制作用中使用。
根據本說明書的另一個方面，提供了一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽在用於提供ERα的選擇性抑制作用中使用的在藥劑製造中之用途。
根據本說明書的另一個方面，還提供一種用於提供對ERα的選擇性抑制作用之方法，該方法包括給予有效量的如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在此描述係這樣的化合物，其可以結合至ERα配位基結合域並且係選擇性雌性素受體降解劑。在基於生物化學和細胞的測定中，本說明書的化合物證明係有效力雌性素受體結合劑，並且減少ERα的細胞水平，並且因此可以有用於治療雌性素敏感性疾病或病症(包括已經對內分泌療法形成抗性的疾病)，即用於在治療乳腺和婦科癌症(包括子宮內膜癌、卵巢癌和子宮頸癌)及表現ERα突變的蛋白質的癌症中使用，該等突變蛋白可以是從頭突變或由於用之前的內分泌療法(如一種芳香酶抑制劑)治療已經產生的。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在治療乳癌或婦科癌症中使用。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在治療乳癌、子宮內膜癌、卵巢癌或子宮頸癌中使用。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在治療乳癌中使用。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在治療乳癌中使用，其中該癌症已經對一種或多種其他內分泌療法形成抗性。
根據本說明書的另一個方面，提供了一種用於治療乳癌或婦科癌症的方法，該方法包括給予有效量的如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本說明書的另一個方面，提供一種用於治療乳癌、子宮內膜癌、卵巢癌或子宮頸癌的方法，該方法包括給予有效量的如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本說明書的另一個方面，提供一種用於治療乳癌之方法，該方法包括給予有效量的如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本說明書的另一個方面，提供一種用於治療乳癌之方法，其中該癌症已經對一種或多種其他內分泌療法形成抗性，該方法包括給予有效量的如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本說明書的另一個方面，提供如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，在製造用於治療乳癌或婦科癌症使用的藥劑中之用途。
根據本說明書的另一個方面，提供了如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，在製造用於治療乳癌、子宮內膜癌、卵巢癌或子宮頸癌使用的藥劑中之用途。
根據本說明書的另一個方面，提供了如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，在製造用於治療乳癌使用的藥劑中之用途。
根據本說明書的另一個方面，提供如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，在製造用於治療乳癌使用的藥劑中之用途，其中該癌症已經對一種或多種其他內分泌療法形成抗性。
在本說明書的一個特徵中，待治療的癌症為乳癌。在這一特徵的另一個方面，該乳癌為雌性素受體陽性+ve(ER+ve)。在這一方面的一個實施方式中，具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物與另一種抗癌劑，例如如在此所定義的抗激素劑組合給予。
根據本說明書的另一個方面，提供一種如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在治療ER+ve乳癌中使用。
根據本說明書的另一個方面，提供了一種用於治療ER+ve乳癌之方法，該方法包括給予有效量的如上文所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
根據本說明書的另一個方面，提供了如在此之前所定義的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，在製造用於在治療ER+ve乳癌使用的藥劑中之用途。
如上所述，具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的體內作用可以部分地由在給予具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物之後在人體或動物體內形成的一種或多種代謝物來發揮。
因此，本說明書還涵蓋一種用於抑制患者中的ER-α之方法，該方法包括向患者給予有效抑制該患者中的ER-α的量的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
因此，本說明書還涵蓋一種用於抑制患者中的ER-α的方法，該方法包括向患者給予有效抑制該患者中的ER-α的量的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在此所定義的抗癌治療可以按單獨療法形式施用，或除本說明書的化合物外，還可以涉及常規外科手術或放射線療法或化學療法。該化學療法可以包括以下抗腫瘤劑類別中的一者或多者：-
(i)如腫瘤醫學中所用的其他抗增生性/抗贅生性藥物和其組合，如烷基化劑(例如順鉑(cis-platin)、奧賽力鉑(oxaliplatin)、卡鉑(carboplatin)、環磷醯胺(cyclophosphamide)、氮芥子氣(nitrogen mustard)、美法侖(melphalan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、白消安(busulphan)、替莫唑胺(temozolamide)以及亞硝基脲(nitrosoureas))；抗代謝物(例如吉西他濱(gemcitabine)和抗葉酸製劑，如氟嘧啶，如5-氟尿嘧啶和喃氟啶(tegafur)、拉替曲澤(raltitrexed)、胺甲喋呤(methotrexate)、胞嘧啶阿拉伯糖苷(cytosine arabinoside)以及羥基脲)；抗腫瘤抗生素(例如蒽環黴素(anthracyclines)，如阿黴素(adriamycin)、博萊黴素(bleomycin)、小紅莓(doxorubicin)、道諾黴素(daunomycin)、表柔比星(epirubicin)、艾達黴素(idarubicin)、絲裂黴素C(mitomycin-C)、
更生黴素(dactinomycin)以及光神黴素(mithramycin))；抗有絲分裂劑(例如長春花生物鹼，如長春新鹼、長春鹼、長春地辛(vindesine)以及長春瑞濱(vinorelbine)，和紫杉類，如紫杉醇和多烯紫杉醇(taxotere)，以及保羅激酶(polokinase)抑制劑)；以及拓撲異構酶抑制劑(例如表鬼臼毒素(epipodophyllotoxin)，如依託泊苷(etoposide)和替尼泊苷(teniposide)，安吖啶(amsacrine)、拓朴替康(topotecan)以及喜樹鹼(camptothecin))；
(ii)抗激素藥劑，如抗雌性素(例如他莫昔芬、氟維司群、托瑞米芬(toremifene)、雷洛昔芬(raloxifene)、屈洛昔芬(droloxifene)和碘昔芬(iodoxyfene)、孕激素(例如乙酸甲地孕酮(megestrol acetate))、芳香酶抑制劑(例如阿那曲唑(anastrozole)、來曲唑(letrozole)、伏氯唑(vorazole)以及依西美坦(exemestane))；
(iii)生長因子功能的和它們的下游傳訊途徑的抑制劑：包括任何生長因子或生長因子受體靶的Ab調節劑、由施特恩(Stern)等人，綜述腫瘤學/血液病學中的關鍵綜述(Critical Reviews in Oncology/Haematology)，2005，54，第11-29頁)；還包括的是此類靶的小分子抑制劑，例如激酶抑制劑-實例包括抗-erbB2抗體曲妥珠單抗(trastuzumab)[HerceptinTM]，抗-EGFR抗體帕尼單抗(panitumumab)，抗-EGFR西妥昔單抗(cetuximab)[愛必妥、C225]和酪胺酸激酶抑制劑，該等酪胺酸激酶抑制劑包括erbB受體家族的抑制劑，例如表皮生長因子家族受體(EGFR/erbB1)酪胺酸激酶抑制劑，例如吉非替尼(gefitinib)或埃羅替尼(erlotinib)，erbB2酪胺酸激酶抑制劑，例如拉帕替尼(lapatinib)，以及混合的erb1/2抑制劑，例如阿法替尼(afatanib)；類似策略可供用於生長因子和其受體的其他類別，例如肝細胞生長因子家族或其受體(包括c-met和ron)的抑制劑；
胰島素和胰島素生長因子家族或其受體(IGFR、IR)的抑制劑、血小板衍生的生長因子家族或其受體(PDGFR)的抑制劑以及藉由其他受體酪胺酸激酶(如c-kit、AnLK以及CSF-1R)介導的傳訊的抑制劑；還包括在PI3激酶傳訊路徑中靶向傳訊蛋白質的調節劑，例如PI3激酶同種型(如PI3K-α/β/γ)和ser/thr激酶(如AKT、mTOR(如AZD2014)、PDK、SGK、PI4K或PIP5K)的抑制劑；還包括以上未列出的絲胺酸/蘇胺酸激酶的抑制劑，例如，如維羅非尼(vemurafenib)的raf抑制劑，如司美替尼(selumetinib)(AZD6244)的MEK抑制劑，如伊馬替尼(imatinib)或尼祿替尼(nilotinib)的Abl抑制劑，如依魯替尼(ibrutinib)的Btk抑制劑，如福他替尼(fostamatinib)的Syk抑制劑，極光激酶((aurora kinase)抑制劑(例如AZD1152)，如JAK、STAT以及IRAK4的其他ser/thr激酶抑制劑，以及細胞週期素依賴性激酶抑制劑(例如像帕布昔利布(palbociclib)的CDK1、CDK7、CDK9和CDK4/6抑制劑)；
iv)DNA損傷傳訊路徑的調節劑，例如PARP抑制劑(例如奧拉帕尼(Olaparib))、ATR抑制劑或ATM抑制劑；
v)細胞凋亡和細胞死亡路徑的調節劑，例如Bcl家族調節劑(例如ABT-263/Navitoclax、ABT-199)；
(vi)抗血管生成劑，如抑制血管內皮生長因子的作用的那些藥劑，[例如抗-血管內皮細胞生長因子抗體貝伐單抗(AvastinTM)和例如VEGF受體酪胺酸激酶抑制劑，如索拉非尼(sorafenib)、阿西替尼(axitinib)、帕佐泮尼(pazopanib)、舒尼替尼(sunitinib)以及凡德他尼(vandetanib)(以及藉由其他機制起作用的化合物(例如利諾胺(linomide)、整合素αvβ3功能的抑制劑以及血管生長抑素))]；
(vii)血管破壞劑，如考布他汀(Combretastatin)A4；
(viii)抗侵襲劑，例如c-Src激酶家族抑制劑，如(達沙替尼((dasatinib)，藥物化學雜誌(J.Med.Chem.)，2004，47，6658-6661)和伯舒替尼(bosutinib)(SKI-606)，以及金屬蛋白酶抑制劑，如馬立馬司他(marimastat)、尿激酶纖維蛋白溶酶原啟動劑受體功能的抑制劑或針對肝素酶的抗體]；
(ix)免疫療法方法，包括例如增加患者腫瘤細胞的免疫原性的離-體和體-內方法，如以如白介素2、白介素4或粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子的細胞介素轉染，減少T-細胞無變應性的方法，使用如細胞介素-轉染的樹突狀細胞的經轉染免疫細胞的方法，使用細胞介素-轉染的腫瘤細胞系的方法，以及使用抗-個體基因型抗體的方法。特定實例包括靶向PD-1(例如BMS-936558)或CTLA4(例如伊匹單抗和曲美單抗)的單株單抗；
(x)反義或基於RNAi的療法，例如有關所列目標的那些療法。
(xi)基因療法方法，包括例如置換異常基因(如異常p53或異常BRCA1或BRCA2)的方法；GDEPT(基因-定向酶前-藥療法)方法，如使用胞嘧啶脫胺酶、胸苷激酶或細菌性硝基還原酶的那些方法；以及增強患者對化學療法或放射線療法的耐受性的方法(如多重-耐藥性基因療法)。
因此，在一個實施方式中，提供了具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，以及一種另外的抗腫瘤物質，用於聯合治療癌症。
根據本說明書的這一方面，提供一種適用於治療癌症之組合，包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽和另一種抗腫瘤劑，尤其是在上文的(i)-(xi)下所列的抗腫瘤劑中的任一者。
確切地說，以上在(i)-(xi)下所列的抗腫瘤劑為待治療的特定癌症的護理標準；熟習該項技術者應瞭解“護理標準”的含義。
因此，在本說明書的另一方面，提供一種具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與另一種抗腫瘤劑的組合，尤其是選自於在此上文的(i)-(xi)下所列的一者的抗腫瘤劑。
在本說明書的另一方面，提供一種具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與另一種抗腫瘤劑組合，尤其是選自於上述(i)下所列的抗腫瘤劑。
在本說明書的另一方面，提供具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，以及在上述(i)下所列的該等抗腫瘤劑中的任一者。
在本說明書的另一方面，提供一種適用於治療癌症之組合，包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，和紫杉類，如紫杉醇或他克唑泰爾(taxotere)，適宜地為他克唑泰爾。
在本說明書的另一方面，提供一種具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與另一種抗腫瘤劑組合，尤其是選自於上文所述的(ii)下所列的抗腫瘤劑。
在本說明書的另一方面，提供了一種適用於治療癌症之組合，包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，和在上文(ii)下所列的抗激素劑中的任一者，例如在上文(ii)中所列的抗雌性素中的任一者，或例如在上文(ii)中所列的芳香酶抑制劑。
在本說明書的另一方面，提供一種適用於治療癌症之組合，包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，和mTOR抑制劑，例如AZD2014(參見例如WO 2008/023161)。
在本說明書的另一方面，提供一種適用於治療癌症之組合，包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，和PI3Kα-抑制劑，例如化合物1-(4-(5-(5-胺基-6-(5-三級丁基-1,3,4-
二唑-2-基)吡
-2-基)-1-乙基-1H-1,2,4-三唑-3-基)哌啶-1-基)-3-羥基丙烷-1-酮，或其藥學上可接受的鹽。
在本說明書的另一方面，提供了一種適用於治療癌症之組合，包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，以及帕布昔利布(palbociclib)。
在具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，與上述(ii)中列出的抗腫瘤劑或mTOR抑制劑(例如AZD2014)、或PI3K-α抑制劑(例如化合物1-(4-(5-(5-胺基-6-(5-三級丁基-1,3,4-
二唑-2-基)吡
-2-基)-1-乙基-1H-1,2,4-三唑-3-基)哌啶-1-基)-3-羥基丙烷-1-酮)或帕布昔利布(palbociclib)的上述組合的一個方面，該組合適用於治療乳癌或婦科癌症，例如乳癌、子宮內膜癌、卵巢癌或子宮頸癌，特別是乳癌，例如ER+ve乳癌。
在此，當使用術語“組合”時，應理解的是這係指同時、分開或順序給予。在本說明書的一個方面，“組合”係指同時給予。在本說明書的另一個方面，“組合”係指分開給予。在本說明書的另一方面，“組合”係指順序給予。在順序的或分開的給藥的情況下，在給予第二成分上的延遲不應該如此以至於失去該組合的有益效果。當分開或順序地給予兩種或多種組分的組合時，應當理解的是針對每種組分的劑量方案可以是不同的並且獨立於其他組分。合宜地，本說明書的該等化合物係每日給藥一次。
根據本說明書的另一個方面，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自在此上文的(i)-(xi)下所列的一者的抗腫瘤劑的組合，以及與藥學上可接受的賦形劑。
根據本說明書的另一個方面，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與在以上(ii)下所列的抗激素劑中的任一者例如在以上(ii)中所列的抗雌性素中任一者或例如在以上(ii)中所列的芳香酶抑制劑組合，以及藥學上可接受的賦形劑。
在本說明書的另一方面，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽和mTOR抑制劑，例如AZD2014(參見例如WO 2008/023161)；以及藥學上可接受的賦形劑。
在本說明書的另一方面，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受
的鹽，和PI3Kα-抑制劑，例如化合物1-(4-(5-(5-胺基-6-(5-三級丁基-1,3,4-
二唑-2-基)吡
-2-基)-1-乙基-1H-1,2,4-三唑-3-基)哌啶-1-基)-3-羥基丙烷-1-酮，以及藥學上可接受的賦形劑。
在本說明書的另一方面，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，和帕布昔利布(palbociclib)，以及藥學上可接受的賦形劑。
根據本說明書的另一個方面，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自在此上文的(i)-(xi)下所列的一者的抗腫瘤劑的組合，以及藥學上可接受的賦形劑聯合，用於治療癌症。
根據本說明書的另一個方面，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與在以上(ii)下所列的抗激素劑中的任一者例如在以上(ii)中所列的抗雌性素中的任一者或例如在以上(ii)中所列的芳香酶抑制劑組合，以及藥學上可接受的賦形劑，用於治療癌症。
在本說明書的另一方面，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，和mTOR抑制劑，例如AZD2014(參見例如WO 2008/023161)；以及藥學上可接受的賦形劑，用於治療癌症。
在本說明書的另一方面，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，和PI3Kα-抑制劑，例如化合物1-(4-(5-(5-胺基-6-(5-三級丁基-1,3,4-
二唑
-2-基)吡
-2-基)-1-乙基-1H-1,2,4-三唑-3-基)哌啶-1-基)-3-羥基丙烷-1-酮，以及藥學上可接受的賦形劑，用於治療癌症。
在本說明書的另一方面，提供了一種醫藥組成物，該醫藥組成物包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，和帕布昔利布(palbociclib)以及藥學上可接受的賦形劑，用於治療癌症。
在具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，與上述(ii)中列出的抗腫瘤劑或mTOR抑制劑(例如AZD2014)、或PI3K-α抑制劑(例如化合物1-(4-(5-(5-胺基-6-(5-三級丁基-1,3,4-
二唑-2-基)吡
-2-基)-1-乙基-1H-1,2,4-三唑-3-基)哌啶-1-基)-3-羥基丙烷-1-酮)或帕布昔利布(palbociclib)的上述醫藥組成物的一個方面，該醫藥組成物適用於治療乳癌或婦科癌症，例如乳癌、子宮內膜癌、卵巢癌或子宮頸癌，特別是乳癌，例如ER+ve乳癌。
根據本說明書的另一個特徵，提供了一種具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自與在此上文的(i)-(xi)下所列的一者的抗腫瘤劑的組合之用途，它係用於在製造用於治療溫血-動物(如人類)的癌症的藥劑中使用。
根據本說明書的另一個方面，提供了具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與在以上(ii)下所列的抗激素劑地任一者例如在上述(ii)中所列的抗雌性素的任一者或例如在上述(ii)中所列的芳香酶抑制劑的組合在製造用於治療溫血-動物(如人類)的癌症的藥劑中使用之用途。
在本說明書的另一方面，提供了具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與mTOR抑制劑，例如AZD2014(參見例如WO 2008/023161)組合；在製造用於治療溫血-動物(如人類)的癌症的藥劑中使用之用途。
在本說明書的另一方面，提供了具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，與PI3Kα-抑制劑，例如化合物1-(4-(5-(5-胺基-6-(5-三級丁基-1,3,4-
二唑-2-基)吡
-2-基)-1-乙基-1H-1,2,4-三唑-3-基)哌啶-1-基)-3-羥基丙烷-1-酮的組合，在製造用於治療溫血-動物(如人類)的癌症的藥劑中使用之用途。
在本說明書的另一方面，提供了具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，與帕布昔利布(palbociclib)的組合，在製造用於治療溫血-動物(如人類)的癌症的藥劑中使用之用途。
在具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，與在上文(ii)中所列的抗腫瘤劑，或mTOR抑制劑(例如AZD2014)，或PI3K-α抑制劑(例如化合物1-(4-(5-(5-胺基-6-(5-三級丁基-1,3,4-
二唑-2-基)吡
-2-基)-1-乙基-1H-1,2,4-三唑-3-基)哌啶-1-基)-3-羥基丙烷-1-酮)或帕布昔利布(palbociclib)的組合的上述用途的一個方面，適用於製造用於治療乳癌或婦科癌症，例如乳癌、子宮內膜癌、卵巢癌或子宮頸癌，特別是乳癌(例如ER+ve乳癌)的藥劑中使用。
因此，在本說明書的另一個特徵中，提供一種治療需要此類治療的溫血-動物(如人類)的癌症之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的具
有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(i)-(xi)下所列的一者的抗腫瘤劑的組合。
根據本說明書的另一個方面，提供一種治療需要此類治療的溫血-動物(如人類)的癌症的方法，該方法包括向所述動物給予有效量的具有化學式具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自上文的(ii)中所列的抗激素劑中任一者例如在上文的(ii)中所列的抗雌性素中任一者或例如在上文的(ii)中所列的芳香酶抑制劑的組合。
在本說明書的另一方面，提供一種需要此類治療的溫血-動物(如人類)的癌症之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與mTOR抑制劑，例如AZD2014(參見例如WO 2008/023161)的組合。
在本說明書的另一方面，提供一種需要此類治療的溫血-動物(如人類)的癌症之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與PI3Kα-抑制劑，例如化合物1-(4-(5-(5-胺基-6-(5-三級丁基-1,3,4-
二唑-2-基)吡
-2-基)-1-乙基-1H-1,2,4-三唑-3-基)哌啶-1-基)-3-羥基丙烷-1-酮的組合。
在本說明書的另一方面，提供一種需要此類治療的溫血-動物(如人類)的癌症之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，與帕布昔利布(palbociclib)的組合。
在治療癌症的上述組合、醫藥組成物、用途和方法的一個方面，係用於治療乳癌或婦科癌症，例如乳癌、子宮內膜癌、卵巢癌或子宮頸癌，特別是乳癌(例如ER+ve乳癌)的方法。
根據本說明書的另一方面，提供了一種套組，該套組包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(i)-(xi)下的一者的抗腫瘤劑的組合。
根據本說明書的另一方面，提供了一種套組，該套組包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽與選自於在此上文的(i)或(ii)下所列的一者的抗腫瘤劑的組合。
根據本說明書的另一個方面，提供一種套組，該套組包括：a)處於第一單位劑型的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽；b)處於第二單位劑型的選自在上文(i)-(xi)下所列的一者的抗腫瘤劑；以及c)用於容納所述第一和第二劑型的容器裝置。
根據本說明書的另一個方面，提供一種套組，該套組包括：a)處於第一單位劑型的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽；b)處於第二單位劑型的選自在上文(i)-(ii)下所列的一者的抗腫瘤劑；以及c)用於容納所述第一和第二劑型的容器裝置。
根據本說明書的另一個方面，提供一種套組，該套組包括：a)處於第一單位劑型的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物，或其藥學上可接受的鹽；
b)處於第二單位劑型的選自於在上文(ii)中所列的抗腫瘤劑、mTOR抑制劑(例如AZD2014)、PI3Kα-抑制劑(例如化合物1-(4-(5-(5-胺基-6-(5-三級丁基-1,3,4-
二唑-2-基)吡
-2-基)-1-乙基-1H-1,2,4-三唑-3-基)哌啶-1-基)-3-羥基丙烷-1-酮)，和帕布昔利布(palbociclib)；以及c)用於容納所述第一和第二劑型的容器裝置。
可以在典型地根據常見處方時程進行的護理療法標準之上添加如上所述的組合療法。
雖然具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物主要具有作為用於溫血動物(包括人類)的治療劑的價值，但它們也有用在需要抑制ER-α的任何時候。因此，它們有用於作為用於發展新生物測試以及搜尋新藥理學藥劑中的藥理學標準。
個人化醫療
本說明書的另一方面係基於鑒別編碼ERα的狀態和用具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物治療的潛在易感性之間的聯繫。具體來說，ERα基因狀態可以指示患者不太可能響應於現有的激素療法(如芳香酶抑制劑)，至少部分係因為一些ERα突變被認為係作為對現有治療的抗性機制而出現。將SERD，特別是可以按潛在較大劑量而沒有過度不便地口服給予，然後可以有利地使用SERD來治療可能對其他療法有抵抗性的患有ERα突變的患者。因此，這提供了機會、方法和工具用於選擇用具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物進行治療的患者，特別是癌症患者。本說明書涉及患者選擇工具和方法(包括個人化藥物)。該選擇係基於待治療的腫瘤細胞係具有野生型抑或突變型ERα基因。該ERα基因狀態因此可以被用作一種生物標記，
以表明用SERD的選擇治療可以是有利的。為免疑問，如在此所述的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物被認為對抗野生型和突變型ERα基因，至少係在提交本申請日鑒定的ERα基因中的那些突變，係同樣有活性的。
明確需要將針對以下患者富集或用於選擇該等患者的生物標記：該等患者的腫瘤將對SERD(例如具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物)治療起反應。鑒別對一種藥劑比另一種最可能起反應的患者的患者選擇生物標記在癌症治療中為理想的，因為它們減少具有非反應性腫瘤的患者的不必要治療，從而減少該等藥劑的潛在副作用。
生物標記可以描述為“作為正常生物過程、致病過程或對治療性干預的藥理學響應的指示劑客觀地經測量且評估的特性”。生物標記為與特定病狀或疾病有關的任何可鑒別且可測量的指示劑，其中在生物標記的存在或含量與該病狀或疾病的一些方面(包括該病狀或疾病的存在、它的含量或變化含量、它的類型、它的階段、它的易感性或對用於治療該病狀或疾病的藥物的反應)之間存在相關性。相關性可以為定性的、定量的或定性且定量的。典型地，生物標記為化合物、化合物片段或化合物組。該等化合物可以為在生物體中發現或藉由生物體產生的任何化合物，包括蛋白質(和肽)、核酸以及其他化合物。
生物標記可以具有預測能力，並且因此可以用於預測或檢測特定病狀或疾病的存在、含量、類型或階段(包括特定微生物或毒素的存在或含量)、對特定病狀或疾病的易感性(包括遺傳易感性)或對特定治療(包括藥物治療)的響應。據認為在藥物發現和發展的未來，生物標記將藉由改良研究與發展程序的效率而發揮日益重要的作用。生物標記可以用作診斷劑、疾病進展監測劑、
治療監測劑以及臨床結果預測劑。舉例來說，不同生物標記研究項目試圖鑒別出特定癌症和特定心血管疾病以及免疫疾病的標記。據相信新的經驗證的生物標記的發展將使醫療和藥物發展成本顯著降低，並且使多種疾病和病狀的治療顯著改善。
為了最佳設計臨床試驗並且為了從該等試驗獲得最多資訊，生物標記可以為需要的。該標記在替代物和腫瘤組織中可以為可測量的。該等標記理想地也將與功效相關並且由此可以最終用於患者選擇。
因此，本說明書的這一方面的根本技術問題為鑒別對用具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物治療的患者分類之方法。該技術問題藉由提供在此的申請專利範圍和/或說明書中所表徵的實施方式來解決。
包含野生型ERα的腫瘤被認為對用具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物治療(例如作為一線治療)係敏感的。腫瘤還可以響應於用具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的化學物作為第二線、第三線或後續療法的治療並且這可能是有用的，具體來說，其中該等腫瘤包含突變型ERα並且因此可以對現有療法(如AIs)有抗性。在抗性環境中比在野生型腫瘤中需要更高劑量的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的化合物。
本說明書提供一種測定細胞對具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的敏感性之方法。該方法包括測定所述細胞中的ERα基因狀態。如果在細胞生長分析中具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物抑制細胞數目增加(或者經由抑制細胞增殖和/或者經由增加細胞死亡)，那麼將該細胞定義為對具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物
敏感。本說明書方法有用於藉由生長抑制預測更可能對具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物響應的細胞。
“代表腫瘤”的樣品可以為經分離的實際腫瘤樣品或者可以為已進一步加工的樣品，例如從腫瘤樣品進行PCR擴增的核酸樣品。
定義：
在這一個人化醫療部分中：“對偶基因”係指遺傳基因座的特定形式，藉由它的特定核苷酸或胺基酸序列與其他形式相區分。
“擴增反應”為導致靶核酸優於非靶核酸進行特異性擴增的核酸反應。聚合酶鏈反應(PCR)為熟知擴增反應。
“癌症”在此用於指由於細胞轉化成贅生性表型所出現的贅生性生長。該細胞轉化通常涉及遺傳突變。
“基因”為包含關於RNA產物的經調節生物合成的所有資訊的DNA區段，包括啟動子、外顯子、內含子以及可以位於控制表現的5'或3'側接區域內(不在該基因的轉錄部分內)的其他序列元件。
“基因狀態”係指該基因為野生型或者不是(即突變型)。
“標記”係指能夠產生指示在分析樣品中存在目標聚核苷酸的可檢測信號的組成物。適合標記包括放射性同位素、核苷酸發色團、酶、底物、螢光分子、化學發光部分、磁性粒子、生物發光部分等。因此，標記為藉由光譜、光化學、生物化學、免疫化學、電學、光學或化學手段可檢測的任何組成物。
“非同義變異”係指基因編碼序列中或與基因編碼序列重疊的變異(變化)，導致產生不同(經改變的)多肽序列。該等變異可能影響或可能不影響
蛋白質功能並且包括錯義變異體(導致一個胺基酸取代另一個)、無義變異體(由於產生過早終止密碼子而產生截短多肽)以及插入/缺失變異體。
“同義變異”係指不影響所編碼多肽的序列的基因編碼序列中的變異(變化)。該等變異可以間接地(例如藉由改變基因表現)影響蛋白質功能，但在不存在相反證據的情況下，總體上假定為無害的。
“核酸”係指單股或雙股DNA和RNA分子，包括自然界中所發現的天然核酸和/或經修飾的具有經修飾的主鏈或鹼基的人工核酸，如本領域中已知。
“引物”係指能夠充當用於合成與待複製的核酸股互補的引物延伸產物的起始點的單股DNA寡核苷酸序列。引物的長度和序列必須使其能夠引發延伸產物的合成。典型引物在與靶序列實質上互補的序列長度中包含至少約7個核苷酸，但略微更長的引物為較佳的。通常，引物包含約15-26個核苷酸，但也可以採用更長或更短引物。
“多態位點”為基因座內導致在一個群體中發現至少兩種替代性序列的位置。
“多態現象”係指在個體中在多態位點處所觀察到的序列變異。多態現象包括核苷酸取代、插入、缺失以及微衛星，並且可以(但無需)引起基因表現或蛋白質功能方面可檢測的差異。在不存在對表現或蛋白質功能的影響證據的情況下，包括非同義變異體的常見多態現象總體上視為包括在野生型基因序列的定義中。人類多態現象和相關注釋的目錄包括驗證、觀察的頻率以及疾病關聯，由NCBI(dbSNP：http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/SNP/)維護。請注意，當用於基因序列的情形中時的術語“多態現象(Polymorphism)”不應與當用於化
合物的固態形式(即化合物的結晶或非晶性質)的情形中的術語“多晶型現象(polymorphism)”混淆。熟習該項技術者將藉由其背景瞭解所需的含義。
“探針”係指具有與待檢測的對偶基因的目標序列完全互補的序列的單股序列特異性寡核苷酸。
“響應”係藉由根據實體腫瘤反應評估準則(Response Evaluation Criteria in Solid Tumours；RECIST)進行的測量來定義，涉及將患者主要分成兩個組：顯示部分響應或穩定疾病的組和顯示進行性疾病的跡象的組。
“嚴格的雜交條件”係指在42℃下在包括50%甲醯胺、5×SSC(750mM NaCl、75mM檸檬酸三鈉)、50mM磷酸鈉(pH 7.6)、5×鄧哈特溶液(Denhardt’s solution)、10%硫酸葡聚糖以及20pg/mI變性剪切的鮭魚精子DNA的溶液中培養過夜，繼之以在0.1 x SSC中在約65℃下洗滌過濾物。
“存活”涵蓋患者的整體存活和無進展存活。
“整體存活(OS)”定義為從給藥開始到由於任何原因死亡的時間。“無進展存活(PFS)”定義為從給藥開始到第一次出現進行性疾病或由於任何原因死亡的時間。
根據本說明書的一個方面，提供一種用於選擇用具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物治療的患者之方法，該方法包括從患者提供包含腫瘤細胞的樣品；確定包含患者的腫瘤細胞的樣品中的ERα基因為野生型抑或突變型；以及基於以上來選擇用具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物治療的患者。
該方法可以包括或不包括實際患者樣品分離步驟。因此，根據本說明書的一個方面，提供一種用於選擇用具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)
或(IE)之化合物治療的患者之方法，該方法包括確定先前從患者分離的包含腫瘤細胞的樣品中的ERα基因為野生型抑或突變型；以及基於以上來選擇用具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物治療的患者。
在一個實施方式中，如果腫瘤細胞DNA具有突變型ERα基因，那麼選擇該患者用具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物治療。在其他實施方式中，選擇其腫瘤細胞DNA具有野生型ERα基因的患者用具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物進行治療。
為了本說明書的目的，野生型的基因狀態意為指示基因的正常或恰當表現以及所編碼蛋白質的正常功能。相比之下，突變型狀態打算表明蛋白質功能改變的表現，與癌症中突變型ERα基因的已知作用(如在此所述)一致。任何數目的遺傳或表觀遺傳變化(包括(但不限於)突變、擴增、缺失、基因組重排或甲基化特徵變化)可以導致突變型狀態。然而，如果該等變化仍然引起正常蛋白質或功能上等效變異體的恰當表現，那麼該基因狀態被視為野生型。典型地將不產生功能突變型基因狀態的變異體實例包括同義編碼變異體和常見多態現象(同義或非同義)。如下文所討論，基因狀態可以藉由功能分析來評估，或者它可以從與參考序列的檢測偏差的性質推斷。
在某些實施方式中，ERα基因的野生型或突變型狀態藉由該等基因中非同義核酸變異的存在或缺乏來確定。所觀察的非同義變異對應於未標注功能作用的已知常見多態現象，不促成突變型基因狀態。
ERα基因中意味著突變型狀態的其他變異包括剪接位點變異，該等變異在先質mRNA加工成mRNA期間降低內含子/外顯子接合點的識別。這可以導致外顯子跳躍或在剪接mRNA中包括通常內含的序列(內含子滯留或採用隱
含的剪接接合點)。這可以轉而導致產生相對於正常蛋白質具有插入和/或缺失的異常蛋白質。因此，在其他實施方式中，如果在內含子/外顯子接合點處存在改變剪接位點識別序列的變異體，那麼該基因具有突變型狀態。
關於ESR1，參考序列可供用於基因(基因庫寄存編號：NG_008493)、mRNA(基因庫寄存編號：NM_000125)以及蛋白質(基因庫寄存編號：NP_000116或Swiss-Prot寄存號：P03372)。熟習該項技術者將能夠基於與野生型比較DNA或蛋白質序列來確定ESR1基因狀態，即特定ESR1基因為野生型抑或突變型。
應當清楚的是，關於ERα基因所揭露的基因和mRNA序列係代表性序列。在正常個體中，每種基因存在兩個拷貝(母本和父本拷貝)，該等拷貝將可能具有一些序列差異，此外在一個群體內將存在基因序列的許多對偶基因變異體。視為野生型的其他序列包括具有以下的序列：核酸序列的一種或多種同義變化(該等變化不改變所編碼的蛋白質序列)、改變蛋白質序列但不影響蛋白質功能的非同義常見多態現象(例如生殖系多態現象)以及內含子非剪接位點序列變化。
存在熟習該項技術者可獲得的用以確定ERα的基因狀態的許多技術。基因狀態可以藉由測定核酸序列來確定。這可以經由對全長基因進行直接定序或分析該基因內的特異性位點，例如一般突變位點。
樣品
待測試基因狀態的患者樣品可以為從個體獲得或從個體可獲得的任何包含腫瘤組織或腫瘤細胞的樣品。測試樣品宜為從個體獲得的血液樣品、口腔抹片、生檢體或其他體液或組織。特定實例包括：循環腫瘤細胞、血
漿或血清中的循環DNA、從卵巢癌患者的腹水液分離的細胞、具有腫瘤的患者肺內的肺痰、來自乳癌患者的細針抽出物、尿液、外周血液、細胞刮片、毛囊、皮膚鑽孔或面頰樣品。
應瞭解，測試樣品同樣可以為對應於測試樣品中的序列的核酸序列，換句話說，樣品核酸中的所有或一部分區域可以在分析之前先使用任何便利技術(例如聚合酶鏈反應(PCR))擴增。核酸可以為基因組DNA或者分級的或全細胞RNA。在特定實施方式中，RNA為全細胞RNA且直接用作使用隨機引物或poly A引物來標記一個第一股cDNA的模板。可以根據標準方法從測試樣品提取該樣品中的核酸或蛋白質(參見格林(Green)和薩姆布魯克(Sambrook)編，分子選殖實驗指南(Molecular Cloning：A Laboratory Manual)，(2012，第4版，第1-3卷，ISBN 9781936113422)，紐約州冷泉港的冷泉港實驗室出版社(Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,N.Y.))。
本說明書的診斷方法可以使用先前從個體或患者獲取的樣品進行。該等樣品可以藉由冷凍或固定以及嵌埋於福馬林-石蠟或其他介質中來保存。可替代地，可以獲得且使用包含新鮮腫瘤細胞的樣品。
可以使用來自任何腫瘤的細胞應用本說明書的方法。用具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)治療的適合腫瘤已在上文中描述。
檢測核酸的方法
在本說明書的上下文中，可以採用突變型ERα核酸的檢測來選擇藥物治療。因為該等基因中的突變發生在DNA層面，所以本說明書的方法可以基於檢測基因組DNA的突變或變化，以及轉錄物和蛋白質本身。所希望的可以
是藉由分析轉錄物和/或多肽來確認基因組DNA突變，以便確保所檢測的突變實際上在該受試者中表現。
熟習該項技術者將清楚，存在可以用於檢測基因中一個或多個位置處變異體核苷酸的存在或不存在的大量分析程序。一般來說，對偶基因變異的檢測需要突變辨別技術、視情況擴增反應(如基於聚合酶鏈反應的擴增反應)以及視情況信號產生系統。在本領域中可獲得多種突變檢測技術並且該等突變檢測技術可以與信號產生系統組合使用，在本領域中可獲得許多信號產生系統。檢測對偶基因變異的許多方法由以下文獻進行了綜述：諾勞(Nollau)等人，臨床化學(Clin.Chem.)，1997，43，1114-1120；安德森SM.(Anderson SM.)分子診斷學專家評論(Expert Rev Mol Diagn.)，2011，11，635-642；邁耶森M.(Meyerson M.)等人，自然綜述遺傳學(Nat Rev Genet.)，2010，11，685-696綜述；以及綜述於標準教科書中，例如“突變檢測的實驗室方案”(“Laboratory Protocols for Mutation Detection”)，由U.蘭德葛籣(U.Landegren)編，牛津大學出版社(Oxford University Press)，1996和“PCR”(“PCR”)，第2版，由牛頓(Newton)和格雷安(Graham)編，拜爾斯科學出版社有限公司(BIOS Scientific Publishers Limited)，1997。
如上所指出，測定具有癌症的患者中存在或缺乏ERα基因的特定變化或多種變化可以按多種方式進行。此類測試通常使用從生物樣品收集的DNA或RNA進行，該等生物樣品例如組織生檢體、尿液、大便、痰、血液、細胞、組織刮片、乳房抽出物或其他細胞物質，並且可以藉由多種方法進行，該等方法包括(但不限於)PCR、與對偶基因特異性探針雜交、酶突變檢測、錯配的化學裂解、質譜或DNA定序，包括微定序。
適合的突變檢測技術包括擴增阻礙突變系統(ARMSTM)、擴增阻礙突變系統線性延伸(ALEXTM)、競爭性寡核苷酸引發系統(COPS)、塔克曼(Taqman)、分子信標(Molecular Beacons)、限制性片段長度多態現象(RFLP)以及基於限制位點的PCR以及螢光共振能量轉移(FRET)技術。
在特定實施方式中，用於測定生物標記基因內的核苷酸所用的方法係選自：對偶基因特異性擴增(對偶基因特異性PCR)(如擴增阻礙突變系統(ARMS))、定序、對偶基因辨別分析、雜交、限制性片段長度多態現象(RFLP)或寡核苷酸連接分析(OLA)。
在特定實施方式中，與對偶基因特異性探針雜交可以藉由以下來進行：(1)溶液中結合到具有經標記樣品的固相(例如玻璃、矽、尼龍膜)的對偶基因特異性寡核苷酸，例如，如同在許多DNA晶片應用中；或(2)溶液中的經結合樣品(通常為經選殖DNA或PCR擴增的DNA)和經標記寡核苷酸(或者對偶基因特異性或者較短以便允許藉由雜交來定序)。診斷測試可以涉及一組變化，通常在固體支撐物上，這使得能夠同時測定一種以上變化。該等雜交探針在本領域中為熟知的(參見例如格林和薩姆布魯克編，分子選殖實驗指南，(2012，第4版，第1-3卷，ISBN 9781936113422)，紐約州冷泉港的冷泉港實驗室出版社)並且可以跨越兩個或更多個變化位點。
因此，在一個實施方式中，檢測至少一種突變的存在或缺乏使包含假定突變位點的ERα核酸與至少一種核酸探針接觸。探針優先在選擇性雜交條件下與包括變化位點且在該變化位點處包含互補核苷酸鹼基的核酸序列雜交。雜交可以使用熟習該項技術者已知的標記用可檢測標記來檢測。該等標記包括(但不限於)放射性、螢光、染料以及酶標記。
在另一個實施方式中，檢測至少一種突變的存在或缺乏使包含假定突變位點的ERα核酸與至少一種核酸引物接觸。引物較佳的是在選擇性雜交條件下與包括變化位點且在該變化位點處包含互補核苷酸鹼基的核酸序列雜交。
用作特異性擴增的引物的寡核苷酸可以攜帶與分子中間(因此擴增取決於差異性雜交；參見例如吉布斯(Gibbs)等人，1989.核酸研究(Nucl.Acids Res.)，17，2437-248)或在一引物的3'遠端處的所關注的突變互補的核苷酸鹼基，其中在恰當的條件下，可以防止錯配或減少聚合酶延伸(參見例如普羅森納(Prossner)，1993，蒂布技術(Tibtech)，11 238)。
在又另一個實施方式中，檢測至少一種突變的存在或缺乏包括對至少一種核酸序列進行定序且比較所獲得的序列與已知野生型核酸序列。
可替代地，至少一種突變的存在或缺乏包括質譜測定至少一種核酸序列。
在一個實施方式中，檢測至少一種核酸變化的存在或缺乏包括進行聚合酶鏈反應(PCR)。使包含假設變化的目標核酸序列擴增且測定經擴增的核酸的核苷酸序列。測定經擴增的核酸的核苷酸序列包括對至少一個核酸區段進行定序。可替代地，擴增產物可以使用能夠根據它們的大小分離擴增產物的任何方法來分析，包括自動化和手動凝膠電泳等。
基因組核酸中的突變有利地藉由基於擴增核酸片段中的活動位移的技術來檢測。舉例來說，陳(Chen)等人，分析生物化學(Anal Biochem)1996，239，61-9中描述藉由競爭性活動位移分析來檢測單鹼基突變。此外，基於馬塞利諾(Marcelino)等人，生物技術(BioTechniques)1999，26，1134-1148的技術的分析可商購。
在特定實例中，可以使用毛細管異雙螺旋分析以基於毛細管系統中雙螺旋核酸的活動位移來檢測突變的存在作為存在錯配的結果。
從樣品產生用於分析的核酸總體上需要核酸擴增。許多擴增方法依賴於酶鏈反應(如聚合酶鏈反應、連接酶鏈反應或自持續序列複製)或來自已進行選殖的所有或一部分載體。較佳的是，根據本說明書的擴增為指數擴增，如藉由例如聚合酶鏈反應所展現。
許多靶標和信號擴增方法已描述於文獻中，例如該等方法的總體綜述描述於蘭德葛籣U.(Landegren,U.)等人，科學，1988 242，229-237和路易士R.(Lewis,R.)，基因工程新聞(Genetic Engineering News)1990，10，54-55中。該等擴增方法可以用於我們說明書的方法中，並且包括聚合酶鏈反應(PCR)、原位PCR、連接酶擴增反應(LAR)、連接酶雜交、Qβ噬菌體複製酶、基於轉錄的擴增系統(TAS)、基因組擴增與轉錄物定序(GAWTS)、基於核酸序列的擴增(NASBA)以及原位雜交。適用於不同擴增技術的引物可以根據本領域中已知的方法製備。
聚合酶鏈反應(PCR)PCR為核酸擴增方法，尤其描述於美國專利第4,683,195號和第4,683,202號中。PCR由DNA聚合酶產生的引物延伸反應的重複週期組成。靶DNA係熱變性的且使兩個寡核苷酸雜交，這兩個寡核苷酸囊括待擴增的DNA相對鏈上的靶序列。該等寡核苷酸變成引物用於DNA聚合酶。藉由引物延伸複製DNA來製造兩個鏈的第二拷貝。藉由重複熱變性、引物雜交以及延伸的週期，靶DNA可以在約二到四小時內擴增一百萬倍或更多。PCR為分子生物學工具，它必須與檢測技術結合用於測定擴增結果。PCR的優點為它藉由將目標DNA的量在約4小時內擴增一百萬到十億倍來增加敏感性。PCR可以用
於在診斷背景中擴增任何已知核酸(莫(Mok)等人，婦科腫瘤學(Gynaecologic Oncology)，1994，52：247-252)。
如擴增阻礙突變系統(ARMSTM)的對偶基因特異性擴增技術(牛頓等人，核酸研究，1989，17，2503-2516)也可以用於檢測單鹼基突變。在恰當的PCR擴增條件下，位於引物的3'末端的單鹼基錯配對完全匹配的對偶基因的優先擴增來說已足夠(牛頓等人，1989，前述)，允許辨別密切相關的物質。使用上述引物的擴增系統的基礎係具有錯配3'-殘基的寡核苷酸在恰當的條件下將不充當PCR引物。這一擴增系統允許在瓊脂糖凝膠電泳之後僅藉由檢查反應混合物來進行基因分型。
擴增產物的分析可以使用能夠根據它們的大小分離擴增產物的任何方法來進行，包括自動化和手動凝膠電泳、質譜等。
核酸分離、擴增以及分析方法對熟習該項技術者來說為常規的並且方案的實例可以見於例如格林和薩姆布魯克編，分子選殖實驗指南，(2012，第4版，第1-3卷，ISBN 9781936113422)，紐約州冷泉港的冷泉港實驗室出版社)。PCR擴增中所用方法的尤其有用的方案來源係PCR(基礎：從背景到實驗台)(PCR(Basics：From Background to Bench))，M.J.麥克弗森(M.J.McPherson)，S.G.梅爾樂(S.G.Mailer)，R.貝農(R.Beynon)，C.豪(C.Howe)，斯普林格出版社(Springer Verlag)；第1版(2000年10月15日)，ISBN：0387916008。
本說明書還提供預測和診斷套組，包括用於擴增ERα基因中的目標核酸的簡並引物；以及說明書，包括擴增方案和結果分析。該套組也可以可替代地包括用於進行擴增以及擴增產物的分析的緩衝劑、酶以及容器。該套組也可以為包括其他工具(如DNA微陣列或其他支撐物)的篩選或診斷套組的組
件。較佳的是，該套組還提供一個或多個對照模板，如從正常組織樣品分離的核酸；和/或一系列代表參考基因中的不同變化的樣品。
在一個實施方式中，該套組提供兩個或更多個引物對，每一對均能夠擴增參考(ERα)基因的不同區域(每一區域具有可能變化位點)，由此提供用於分析生物樣品在一個反應或若干平行反應中的若干基因變化的表現的套組。
套組中的引物可以經標記(例如螢光標記)以促進檢測擴增產物以及隨後分析核酸的變化。該套組還可以允許在一個分析中檢測一種以上變化。組合套組將因此包括能夠擴增參考基因的不同區段的引物。該等引物可以例如使用不同的螢光標記進行差示性標記，以便在該等變化之間進行區分。
在另一個方面，本說明書提供一種治療罹患癌症的患者之方法，該方法包括：確定患者的腫瘤細胞中的ERα基因的突變型或野生型狀態，並且如果ERα基因係突變型，那麼向該患者給予有效量的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物。
如在此所用，術語“有效”和“有效性”包括藥理學有效性和生理學安全性兩者。藥理學有效性係指在患者中產生所希望的生物作用的治療能力。生理學安全性係指由所給予治療在細胞、器官和/或生物體層面上造成的毒性程度或其他不良生理學作用(通常稱為副作用)。“更不有效”意指該治療產生治療學上顯著更低程度的藥理學有效性和/或治療學上更大程度的不良生理學作用。
根據本說明書的另一個方面，提供一種具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽用於治療其腫瘤細胞已經鑒別為具有突變型ERα基因的癌症患者之用途。
根據本說明書的另一個方面，提供了具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於治療具有已經鑒別為攜帶突變型ERα基因的腫瘤細胞的癌症。
根據本說明書的另一個方面，提供一種治療具有已經鑒別為攜帶突變型ERα基因的腫瘤細胞的癌症之方法，該方法包括給予有效量的具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
在另一個實施方式中，本說明書涉及包括具有化學式(I)、(IA)、(IB)、(IC)、(ID)或(IE)之化合物的醫藥組成物，它用於預防和治療具有已經鑒別為攜帶突變型ERα基因的腫瘤細胞的癌症。
對於所有以上方面，所測定/鑒別的ERα的突變體形式處於基因中的所有位置處。
對於所有以上方面，使用如乳癌的腫瘤作為一個實例，所測定/鑒別的ERα的特定突變體形式為在位置Ser463Pro、Val543Glu、Leu536Arg、Tyr537Ser、Tyr537Asn和Asp538Gly位置處者。
現將在以下實例中說明本說明書，其中通常：
(i)除非另行說明，否則在環境溫度(即在17℃到25℃範圍內)下和在如氮氣的惰性氣體的氣氛下進行操作；
(ii)藉由旋轉蒸發或利用Genevac設施或拜泰齊(Biotage)v10蒸發器在真空中進行蒸發且在藉由過濾移除殘餘固體狀之後進行處理常式；-
(iii)在自動化的Teledyne Isco CombiFlash® Rf或Teledyne Isco CombiFlash® Companion®上使用預裝的RediSep Rf GoldTM矽膠柱(20-40μm，球形顆粒)、GraceResolvTM筒(Davisil®二氧化矽)或Silicycle筒(40-63μm)進行快速層析純化。
(iv)製備型層析法經吉爾森(Gilson)製備型HPLC儀用UV收集進行或藉由超臨界流體層析在沃特斯(Waters)製備型100 SFC-MS儀用MS-和UV-引發收集或經Thar MultiGram III SFC儀用UV收集進行；
(v)在具有UV收集的吉爾森(Gilson)儀器(233注射器/級分收集器、333和334泵、155 UV檢測器)或用吉爾森305注射運行的瓦裡安(Varian)製備星儀器(2 x SD1泵、325 UV檢測器、701級分收集器)泵上進行手性製備層析法；
(vi)產率(當存在時)並不必需為可得到的最大值；
(vii)總體來講，具有化學式I的最終產物的結構藉由核磁共振(NMR)光譜法確認；根據δ量表測量NMR化學位移值[使用Bruker Avance 500(500MHz)或Bruker Avance 400(400MHz)儀器測定質子磁共振光譜]；除非另外說明，否則在環境溫度下進行測量；已使用以下縮寫：s，單峰；d，雙重峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；dd，雙重峰的雙重峰；ddd，雙重峰的雙重峰的雙重峰；dt，三重峰的雙重峰；bs，寬信號
(viii)總體來講，具有化學式I的最終-產物也藉由液相層析後的質譜(LCMS或UPLC)表徵；UPLC係使用配備有沃特斯(Waters)SQ質譜儀(柱溫40，UV=220-300nm，質譜=具有陽性/陰性轉換的ESI)的沃特斯UPLC以1
ml/min的流速，使用97% A+3% B到3% A至97% B的溶劑系統進行1.50min(連同平衡回至起始條件等的總執行時間1.70min)，其中A=在水中的0.1%甲酸(用於酸工作)或在水中的0.1%氨(用於鹼工作)B=乙腈。對於酸分析，使用的柱係沃特斯Acquity HSS T3 1.8μm 2.1 x 50mm，對於鹼分析，使用的柱係沃特斯Acquity BEH 1.7μm 2.1 x 50mm；LCMS係使用配備有沃特斯ZQ ESCi質譜儀的沃特斯Alliance HT(2795)和菲羅門(Phenomenex)Gemini-NX(50 x 2.1mm 5μm)柱，以1.1ml/min的流速、95%A到95%B進行4min，其中保持0.5min。將改性劑保持在恒定的5% C(50：50乙腈：含0.1%甲酸的水)或D(50：50乙腈：含0.1%氫氧化銨(0.88 SG)的水，取決於其是酸性還是鹼性方法。
(ix)通常使用SCX-2(拜泰齊(Biotage)，丙磺酸官能化的二氧化矽，使用三官能矽烷製造，未封端的)筒進行離子交換純化。
(x)中間體純度藉由薄層層析、質譜的、HPLC(高效液相層析)和/或NMR分析來評估；
(xi)第三代預催化劑RockPhos來源於斯瑞姆化學品公司(Strem Chemicals Inc.)和西格瑪-奧德里奇公司(Sigma-Aldrich)。
(xii)已使用以下縮寫：-
AcOH 乙酸
aq. 水性
BINAP 2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘
n-BuLi 正丁基鋰
tBuOH 三級丁醇
CDCl3 氚化氯仿
Conc. 濃縮的
DCM 二氯甲烷
DEAD 偶氮二甲酸二乙酯
DIPEA 二異丙基乙胺
DMA N,N-二甲基乙醯胺
DMAP 二甲基胺基吡啶
DME 二甲氧基乙烷
DMF N,N-二甲基甲醯胺
DMSO 二甲基亞碸
EtOH 乙醇
EtOAc 乙酸乙酯
HATU 1-[雙(二甲胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽，
HPLC 高效液相層析法
IPA 異丙醇
MeCN 乙腈
MeOH 甲醇
第三代RockPhos預催化劑[(2-二-三級-丁基膦基-3-甲氧基-6-甲基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)-2-(2-胺基聯苯)]鈀(II)甲烷磺酸鹽
rt/RT 室溫
sat. 飽和的
SFC 超臨界流體層析
sol. 溶液
TBME 三級丁基甲醚
THF 四氫呋喃
實例1
(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將在二
(4N；0.42mL)中的HCl添加至(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(120mg，0.20mmol)在MeOH(0.51mL)的溶液中，並且將該反應物在室溫下攪拌30分鐘。將該等溶劑進行蒸發，並且將所得的殘餘物溶解於DCM中，並且用飽和的NaHCO3水溶液洗滌。將該水層用DCM進行萃取，並且將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，並濃縮至乾燥。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析，在DCM中0至20% MeOH的洗提梯度進行純化。將產物級分在減壓下濃縮並且凍乾，以提供呈米色固體的(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(80mg，78%)。1H NMR(500MHz DMSO-d6,27℃)0.91(3H,d),1.02(3H,d),1.07(3H,d),
2.20(1H,dd),2.63(3H,m),2.82(2H,q),2.92(2H,m),3.18(3H,m),3.55(1H,m),3.84(2H,m),4.37(1H,d),4.47(1H,d),5.06(1H,s),6.53(1H,d),6.57(2H,d),7.13(1H,d),7.99(1H,s),12.9(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 505。
(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉製備如下；
2-氟-2-甲基丙基三氟甲烷磺酸酯的製備
在-10℃下，將三氟甲磺酸酐(10.11mL，59.71mmol)逐滴添加至2-氟-2-甲基丙烷-1-醇(5.00g，54.3mmol)和2,6-二甲基吡啶(7.6mL，65.1mmol)在DCM(118mL)的溶液中。將該反應物攪拌90分鐘，然後依次地用水、2N HCl和飽和的NaHCO3溶液洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾，並在減壓下濃縮以提供呈紅色油的2-氟-2-甲基丙基三氟甲磺酸酯(11.0g，90%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.47(6H,d)4.42(2H,d)。
(R)-1-(3-溴-2-甲基苯基)丙-2-胺的製備
在-78℃下，在以保持內部反應溫度低於-60℃以下的此速率下將在己烷中的n-BuLi(2.5M；8.1mL，20mmol)逐滴添加至1,3-二溴-2-甲基苯(4.8g，19mmol)在THF(50mL)的溶液中。攪拌30分鐘後，將三級丁基
(R)-4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-二氧化物(5.01g，21.1mmol)逐份添加，並且將該反應物再次攪拌30分鐘，之後允許加熱至0℃超過2小時。在0℃下，添加檸檬酸水溶液(1N；40mL)，並且將該混合物攪拌15min，之後將其用EtOAc(2 x 100mL)進行萃取。將合併的有機層在減壓下濃縮。在室溫下，將殘餘物在二
(4N；30mL)中的HCl中攪拌1小時，並且然後濃縮。將所得到的殘餘物溶解於水(100mL)中，並且用乙醚(2 x 60mL)萃取。然後將該水層藉由添加Na2CO3進行鹼化，並且用DCM(3 x 100mL)萃取。將合併的DCM萃取物經Na2SO4乾燥，過濾並且濃縮至乾燥。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在DCM中的0至10% MeOH洗提梯度)純化。將產物級分濃縮至乾燥以提供呈棕色油的(R)-1-(3-溴-2-甲基苯基)丙-2-胺(2.6g，60%)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6,27℃)1.1(3H,d)2.34(3H,s)2.64(1H,dd)2.77(1H,dd)3.08(1H,ddd)7.05(1H,t)7.15(1H,d)7.45(1H,d)。沒有觀察到NH2。m/z：ES+[M+H]+ 228。
(R)-N-(1-(3-溴-2-甲基苯基)丙-2-基)-2-氟-2-甲基丙烷-1-胺的製備
將2-氟-2-甲基丙基三氟甲磺酸酯(4.73g，21.1mmol)添加至(R)-1-(3-溴-2-甲基苯基)丙-2-胺(3.7g，16mmol)和二異丙基乙胺(3.97mL，22.7mmol)在二
(77mL)的溶液中，並且在85℃下攪拌16小時。冷卻之後，將該反應混合物用EtOAc(100mL)稀釋，並且用水(100mL)洗滌。將該水層用EtOAc(2 x 100mL)萃取，並且將合併的EtOAc萃取物經Na2SO4乾燥，
過濾並且濃縮至乾燥。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在DCM中的0至10% MeOH洗提梯度)純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈棕色油的(R)-N-(1-(3-溴-2-甲基苯基)丙-2-基)-2-氟-2-甲基丙烷-1-胺(3.1g，63%)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6,27℃)0.93(3H,d)1.23(3H,d)1.27(3H,d)1.49(1H,s)2.34(3H,s)2.51-2.78(4H,m)2.86(1H,dd)7.03(1H,t)7.15(1H,d)7.43(1H,d)。m/z：ES+[M+H]+ 302。
(R)-3-(2-((2-氟-2-甲基丙基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺的製備
將(R)-N-(1-(3-溴-2-甲基苯基)丙-2-基)-2-氟-2-甲基丙烷-1-胺(3.1g，10mmol)在甲苯(50mL)的溶液脫氣並用氮氣(3x)回填。添加雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)(0.18g，0.31mmol)、外消旋-2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘基(0.19g，0.31mmol)、三級丁醇鈉(1.48g，15.4mmol)和二苯基甲亞胺(1.72mL，10.3mmol)。將該反應混合物脫氣並用氮氣(3x)回填，然後在90℃下加熱2.5小時。冷卻後，將揮發物在真空下去除，並且將所得的殘餘物溶解於EtOAc(30mL)中。添加HCl水溶液(1N；30mL)，並且將雙相混合物劇烈攪拌30分鐘。將各層分離，並且將水層用DCM(30mL)萃取。然後將該水層藉由添加NaOH(1N；30mL)水溶液進行鹼化，並且用DCM(3 x 50mL)萃取。將合併的鹼性DCM萃取物經Na2SO4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中50%至100% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈黃色油的(R)-3-(2-((2-氟-2-甲基丙基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺(2,07g，85%)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6,27℃)0.91(3H,d),
1.24(3H,s),1.29(3H,s),1.43(1H,s),1.97(3H,s),2.37(1H,q),2.57-2.72(4H,m),4.68(2H,s),6.34(1H,s),6.47(1H,s),6.77(1H,t)。m/z：ES+[M+H]+ 239。
(1S,3R)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺的製備
在60℃下，將(R)-3-(2-((2-氟-2-甲基丙基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺(0.65g，2.7mmol)和4-溴-2,6-二氟苯甲醛(1.2g，5.5mmol)在乙酸(8mL)和水(0.25mL)的混合物中加熱48小時。冷卻後，將該溶劑蒸發，並且將所得的殘餘物溶解於DCM(20mL)中。添加HCl水溶液(1N；20mL)，並且將該雙相混合物劇烈攪拌30分鐘。將各層進行分離，並且將該有機層用HCl水溶液(1N；2 x)進行萃取。將合併的水性酸層藉由添加NaOH(1N)水溶液進行鹼化，並且然後用DCM(2 x)進行萃取。將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，並濃縮至乾燥。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中的0至70% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈淺色漿液的(1S,3R)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(650mg，54%)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6,27℃)0.94(3H,d),1.12(3H,d),1.19(3H,d),1.95(3H,s),2.19(1H,dd),2.55(1H,dd),2.84(1H,dd),2.87(1H,dd),3.48(1H,q),4.65(2H,s),5.02(1H,s),6.25(1H,d),6.37(1H,d),7.34(2H,d)。m/z：ES+[M+H]+ 441。
(6S,8R)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
在-17℃下，將亞硝酸鈉(112mg，1.62mmol)在水中的溶液(0.3mL)逐滴添加至處於相同溫度的(1S,3R)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(650mg，1.47mmol)在丙酸(3mL，40.09mmol)的溶液中，並且將該反應物在該等條件下保持90分鐘。添加冷EtOAc(30mL)和飽和的NaHCO3水溶液(100mL)，並且將各層進行分離。將該水層用EtOAc(3x30mL)萃取，並且將合併的有機層用飽和的氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並且濃縮至乾燥。將所得到的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中的0至70% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈淺色漿液的(6S,8R)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(350mg，53%)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6,27℃)1.0(3H,d),1.13(3H,d),1.22(3H,d),1.28(1H,dd),2.92(1H,t),2.96(1H,dd),3.30(1H,dd),3.61(1H,m),5.21(1H,s),6.68(1H,d),7.23(1H,d),7.39(2H,d),8.08(1H,s),13.01(s,1H)。m/z：ES+[M+H]+ 452。
(6S,8R)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將3,4-二氫-2H-哌喃(103μl，1.13mmol)和對甲苯磺酸一水合物(14mg，0.08mmol)添加至(6S,8R)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(340mg，0.75mmol)在DCM(3.7mL)的溶液中，並且將該反應物在室溫下攪拌30分鐘。然後將該反應物加熱至回流條件，並且在該等條件下保持3小時。冷卻後，將該反應物用DCM(25mL)稀釋，並且用飽和的NaHCO3水溶液(25mL)洗滌。將該有機層用硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中的0至70% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈淺黃色固體的(6S,8R)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(300mg，74%)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6,27℃)0.99(3H,d),1.12(3H,d),1.21(3H,d),1.61(2H,t),1.75(1H,m),1.98(1H,dd),2.07(1H,dd),2.20(1H,m),2.27(1H,dd),2.84(1H,dt),2.94(1H,dd),3.23(1H,dt),3.60(1H,m),3.73(1H,m),4.02(1H,dd),5.13(1H,s),5.72(1H,d),6.58(1H,d),7.31(1H,d),7.40(2H,d),8.51(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 536。
(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙-1-醇(75mg，0.56mmol)添加至(6S,8R)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(150mg，0.28mmol)，第三代預催化劑RockPhos(12mg，0.01mmol)和碳酸銫(228mg，0.70mmol)在甲苯(2.3mL)的脫氣懸浮液中。將該反應物加熱至90℃，並且保持在該等條件下持續30分鐘。冷卻後，將該反應物用EtOAc稀釋，並且用水洗滌。將該水層用EtOAc萃取，並且將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，並濃縮至乾燥。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析，在DCM中0至10% McOH的洗提梯度進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈淺黃色膠質的(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(128mg，78%)。1H NMR(500MHz DMSO-d6,27℃)0.99(3H,d),1.13(3H,d),1.14(3H,d),1.20(1H,m),1.61(2H,m),1.74(1H,m),1.97(1H,dd),2.04(1H,dd),2.23(1H,t),2.28(1H,dd),2.70(3H,m),2.78(1H,dd),2.99(2H,t),3.18(1H,dd),3.31(2H,t),3.61(1H,dd),3.73(1H,m),3.92(2H,t),3.99(1H,dd),4.45(1H,d),4.54(1H,d),5.05(1H,s),5.69(1H,d),6.55(1H,d),6.61(2H,d),7.28(1H,d),8.49(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 589。
實例2
(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,8-二甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙-1-醇(27mg，0.20mmol)添加至(6S,8R)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,8-二甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(55mg，0.10mmol)，第三代預催化劑RockPhos(4mg，0.005mmol)和碳酸銫(81mg，0.25mmol)在甲苯(0.7mL)的脫氣懸浮液中。將該反應物加熱至90℃，並且保持在該等條件下持續90分鐘。冷卻後，將該反應物用EtOAc稀釋，並且用水洗滌。將該水層用EtOAc萃取，然後將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，並且在減壓下濃縮至乾燥。將所得的殘餘物吸收於MeOH(0.5mL)中，並且添加在二
(4N；0.25mL)中的HCl。繼續攪拌10分鐘。將該等溶劑進行蒸發，並且將所得的殘餘物溶解於DCM中，並且用飽和的NaHCO3水溶液洗滌。將該水層用DCM萃取，並且然後將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，並且在減壓下濃縮至乾燥。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析，在DCM中0至20% MeOH的洗提梯度進行純化。將產物級分濃縮並且凍乾，以提供呈米色固體的(6S,8R)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,8-二甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(30mg，58%)。1H NMR(500MHz
DMSO-d6,27℃)0.93(3H,d),1.07(3H,d),1.11(3H,d),1.79(3H,s),2.67(4H,m),2.97(3H,m),3.11(2H,q),3.30(2H,m),3.80(1H,m),3.87(2H,m),4.44(1H,d),4.54(1H,d),6.46(2H,d),6.85(1H,d),7.19(1H,d),8.09(1H,s),12.94(1H,s))。m/z：ES+[M+H]+ 519。
(6S,8R)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,8-二甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉製備如下；
(6S,8R)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,8-二甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
在室溫下，將雙(三氟乙醯氧基)-碘苯(144mg，0.34mmol)添加至(6S,8R)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(120mg，0.22mmol)在THF(1.5mL)的溶液中。將該反應物攪拌1小時，並且然後冷卻至-78℃。將在乙醚中的甲基溴化鎂(3M；0.597mL，1.79mmol)逐滴添加，並且在該等條件下持續攪拌45分鐘。在4℃下，藉由緩慢添加飽和的氯化銨水溶液將該反應猝滅，並且然後用DCM(3 x 30mL)萃取。將合併的有機層用飽和的氯化鈉水溶液洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾並且濃縮至乾燥。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中的0至70% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈淺色泡沫的(6S,8R)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,8-二甲基
-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(62mg，50%)。1H NMR(500MHz DMSO-d6,27℃)0.94(3H,d),1.08(3H,q),1.18(3H,d),1.61(2H,m),1.75(1H,m),1.81(3H,s),1.97(1H,m),2.07(1H,dt),2.22(1H,m),2.43(1H,dd),2.91(1H,dd),3.13(1H,t),3.26(1H,dt),3.76(2H,m),4.02(1H,dd),5.71(1H,dt),6.79(1H,d),7.26(2H,d),7.31(1H,d),8.54(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 550。
實例3
(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將在二
(0.44mL)中的4N HCl添加至(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(110mg，0.18mmol)在甲醇(0.44mL)的溶液中，並且將該反應物在室溫下攪拌2小時。將該粗產物藉由離子交換層析，使用SCX柱進行純化。將所希望的產物使用1M NH3/MeOH從該柱中洗提，並且將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈淺黃色固體的(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(81mg，85%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.15(3H,d),1.24(3H,d),2.51(1H,dd),2.79-2.98
(3H,m),3.16-3.29(3H,m),3.32-3.50(2H,m),3.56(2H,d),3.90-3.94(3H,m),4.45(1H,d),4.54(1H,d),5.53(1H,s),5.87(1H,td),6.34(2H,d),6.80(1H,d),7.20(1H,d),8.09(1H,d),10.55(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 541。
(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉製備如下；3-溴-2-甲基苯甲醛的製備
在-78℃下，將n-BuLi(1.6M在己烷中，28.5mL，45.6mmol)逐滴添加至1,3-二溴-2-甲基苯(9.50g，38.0mmol)在THF(119mL)的溶液中，並且將該反應物在此溫度下保持30分鐘。添加N,N-二甲基甲醯胺(4.41mL，57.0mmol)，並且將該反應物再次攪拌30min，之後允許加熱至0℃超過1小時。藉由添加水將該反應猝滅，然後用EtOAc萃取。將該有機相經硫酸鎂乾燥，並且濃縮至乾燥，以提供呈稻草色油的3-溴-2-甲基苯甲醛(7.19g，95%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)2.75(3H,s),7.18-7.37(1H,m),7.78(2H,ddd),10.26(1H,s)。
(3-溴-2-甲基苯基)甲醇的製備
將硼氫化鈉(1.78g，47.1mmol)添加至3-溴-2-甲基苯甲醛(7.50g，37.7mmol)在THF(151mL)的溶液中，並且將該反應物在室溫下攪拌2小時。將該反應物在冰浴中冷卻，並且藉由添加2N HCl溶液進行猝滅，然後用
EtOAc(x2)萃取。將合併的有機物用飽和的氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，並且濃縮至乾燥以提供呈淺黃色固體的(3-溴-2-甲基苯基)甲醇(7.73g，>100%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.99(1H,br s),2.41(3H,s),4.70(2H,s),7.05(1H,t),7.30(1H,d),7.49-7.53(1H,m)。
1-溴-3-(溴甲基)-2-甲基苯的製備
將過溴甲烷(14.35g，43.3mmol)分批添加至(3-溴-2-甲基苯基)甲醇(7.25g，36.1mmol)和三苯基膦(11.35g，43.27mmol)在DCM(120mL)的溶液中(反應放熱至約40℃)，並且將該反應物在室溫下攪拌2小時。將該殘餘物通過矽膠板，用DCM洗提。將該濾液濃縮至乾燥，然後將粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至25% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈無色油的1-溴-3-(溴甲基)-2-甲基苯(8.52g，90%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)2.48(3H,s),4.52(2H,s),6.99-7.05(1H,m),7.22-7.27(1H,m),7.52(1H,dd)。
三級丁基(S)-3-(3-溴-2-甲基苯基)-2-((二苯基亞甲基)胺基)丙酸酯的製備
將1-溴-3-(溴甲基)-2-甲基苯(6.86g，26.0mmol)添加至2-((二苯基亞甲基)胺基)乙酸三級丁酯(7.68g，26mmol)和(1S,2S,4S,5R)-2-((R)-(烯丙氧基)(喹啉-4-基)甲基)-1-(蒽-9-基甲基)-5-乙烯基
啶-1-鎓溴(1.58g，2.60mmol)
在甲苯(130mL)和50% KOH水溶液(15.08g，130.0mmol)的溶液中。將該雙相混合物在0℃(冰浴)下劇烈攪拌4小時。藉由添加水(100mL)將該反應物稀釋，然後用EtOAc(x2)萃取。將該合併的有機物用飽和的氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，並且濃縮至乾燥。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至50% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈淺黃色液體的三級丁基(S)-3-(3-溴-2-甲基苯基)-2-((二苯基亞甲基)胺基)丙酸酯(9.96g，80%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.46(9H,s),1.99(3H,s),3.17(1H,dd),3.34(1H,dd),4.12(1H,dd),6.48(2H,s),6.82-6.89(1H,m),7.01(1H,dd),7.25-7.41(7H,m),7.53-7.59(2H,m)。m/z：ES+[M+H]+ 478。手性分析使用分析型HPLC(瑞吉思(Regis)(R,R)威爾卡(Whelk)-O1柱，5μm矽膠，4.6mm直徑，250mm長度)，以2mL/min使用作為洗提液的庚烷/EtOH的95/05混合物，顯示出該產物以98.3：1.7異構物的比率存在。
三級丁基(S)-2-胺基-3-(3-溴-2-甲基苯基)丙酸酯的製備
在室溫下，將三級丁基(S)-3-(3-溴-2-甲基苯基)-2-((二苯基亞甲基)胺基)丙酸酯(9.0g，18.8mmol)在EtOAc(63mL)和2N HCl(31.5mL)中攪拌1小時。藉由添加2N NaOH溶液將該水層進行鹼化，任何用EtOAc(x 2)萃取。將合併的有機物經硫酸鎂乾燥，並且濃縮至乾燥。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至100% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈淺黃色油的三級丁基(S)-2-胺基-3-(3-溴-2-甲基苯基)丙酸酯
(4.98g，84%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.40(9H,s),2.44(3H,s),2.80(1H,dd),3.12(1H,dd),3.55(1H,dd),6.94-7.00(1H,m),7.07-7.12(1H,m),7.45(1H,dd)。m/z：ES+[M+H]+ 314。
(S)-2-胺基-3-(3-溴-2-甲基苯基)丙-1-醇的製備
將硼氫化鋰溶液(2M在THF中；14.38mL，28.75mmol)添加至三級丁基(S)-2-胺基-3-(3-溴-2-甲基苯基)丙酸酯(7.23g，23.0mmol)在THF(78mL)的溶液中。將該反應物加熱至50℃，並且保持在該等條件下持續1小時。在冰浴中冷卻後，藉由添加1N HCl溶液將該反應猝滅。然後藉由添加2N NaOH將該水層進行鹼化，並且用EtOAc(x3)萃取。將合併的有機物經硫酸鎂乾燥，並且濃縮至乾燥，以提供呈稻草色油的(S)-2-胺基-3-(3-溴-2-甲基苯基)丙-1-醇(5.93g，>100%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.91-2.04(2H,m),2.41(3H,s),2.60(1H,dd),2.88(1H,dd),3.01-3.14(1H,m),3.40(1H,dd),3.63(1H,dd),6.94-7.01(1H,m),7.08(1H,dd),7.13(1H,dd),7.45(1H,dd)。m/z：ES+[M+H]+ 244。
(S)-3-(3-溴-2-甲基苯基)-2-((2-氟-2-甲基丙基)胺基)丙-1-醇的製備
將2-氟-2-甲基丙基三氟甲磺酸酯(6.08g，27.1mmol)添加至(S)-2-胺基-3-(3-溴-2-甲基苯基)丙-1-醇(5.30g，21.7mmol)和DIPEA(5.63mL，32.6mmol)在1,4-二
(56.4mL)的溶液中。將該反應物加熱至90℃，並且在該等條件下保持過夜。將揮發物濃縮至乾燥，然後將殘餘物溶解於EtOAc中，並且用水洗滌。將該水層用EtOAc萃取，然後將合併的有機物經硫酸鈉乾燥，並且濃縮至乾燥。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至100% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈淡棕色油的(S)-3-(3-溴-2-甲基苯基)-2-((2-氟-2-甲基丙基)胺基)丙-1-醇(5.65g，82%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.34(3H,d),1.38(3H,d),2.42(3H,s),2.61(1H,dd),2.74-2.91(4H,m),3.30(1H,dd),3.54-3.59(1H,m),6.95-7.01(1H,m),7.08(1H,dd),7.44(1H,dd)。m/z：ES+[M+H]+ 318。
(S)-3-(3-胺基-2-甲基苯基)-2-((2-氟-2-甲基丙基)胺基)丙-1-醇的製備
將三級丁醇鈉(2.64g，27.4mmol)和Pd2(dba)3(0.373g，0.46mmol)添加至(S)-3-(3-溴-2-甲基苯基)-2-((2-氟-2-甲基丙基)胺基)丙-1-醇(5.82g，18.3mmol)二苯基甲亞胺(3.22mL，19.2mmol)和外消旋-BINAP(0.569g，0.91mmol)在甲苯(70mL)的脫氣溶液中。將該反應物加熱至90℃，並且保持在該等條件下持續2小時。冷卻後，添加EtOAc和飽和的NH4Cl水溶液，並且將各層進行分離。將該水層用EtOAc萃取，然後將合併的有機物濃縮至乾燥。將殘餘物溶解於EtOAc(50mL)中，並且添加2N HCl(50mL)。將該雙相混合物劇烈攪拌1小時，然後將各層進行分離。將該水層用EtOAc萃取，然後
用2N HCl萃取有機物。藉由添加固體K2CO3將合併的水層進行鹼化，然後用DCM(x 3)萃取。將合併的DCM萃取物經硫酸鈉乾燥，並且濃縮至乾燥，以提供呈淡棕色油的(S)-3-(3-胺基-2-甲基苯基)-2-((2-氟-2-甲基丙基)胺基)丙-1-醇(4.27g，92%)，該化合物係直接使用的。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.33(3H,d),1.37(3H,d),2.12(3H,s),2.58(1H,dd),2.66-2.76(1H,m),2.78-2.81(1H,m),2.82(1H,d),2.84-2.89(1H,m),3.31(1H,dd),3.58(1H,dd),3.60(2H,s),6.59(2H,d),6.90-7.01(1H,m)。m/z：ES+[M+H]+ 255。
((1S,3S)-6-胺基-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-5-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基)甲醇的製備
將(S)-3-(3-胺基-2-甲基苯基)-2-((2-氟-2-甲基丙基)胺基)丙-1-醇(4.20g，16.5mmol)和4-溴-2,6-二氟苯甲醛(7.85g，35.5mmol)在乙酸(72mL)和水(1.5mL)的混合物中加熱至65℃，並且將該反應物在該等條件下保持過夜。冷卻後，將該溶劑蒸發，然後將殘餘物溶解於DCM(60mL)中，並且用飽和的NaHCO3水溶液洗滌。然後向該有機相中添加2N HCl溶液(60mL)，並且將該雙相混合物劇烈攪拌30min。將各層進行分離，並且將該有機層用2N HCl(x 2)萃取。藉由添加2N NaOH溶液將該水層進行鹼化，然後用DCM(x 2)萃取。將合併的有機物經硫酸鎂乾燥，並且濃縮至乾燥。將該粗混合物溶解於THF(20mL)和MeOH(10mL)中，然後添加2N NaOH溶液(10mL)，
並且在室溫下將該反應物攪拌1小時。將該反應物用EtOAc(x 2)萃取，然後將合併的有機物經硫酸鎂乾燥，並且濃縮至乾燥。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至100% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈淺黃色固體的((1S,3S)-6-胺基-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-5-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基)甲醇(4.15g，55%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.32(3H,d),1.37(3H,d),2.07(3H,s),2.46(1H,dd),2.57(1H,dd),2.65(1H,dd),2.80(1H,dd),3.38-3.52(1H,m),3.56(1H,dd),3.66(1H,dd),5.33(1H,s),6.50(1H,d),6.58(1H,d),6.94-7.02(2H,m)。m/z：ES+[M+H]+ 457。
((6S,8S)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉-8-基)甲醇的製備
在-10℃下，將亞硝酸鈉(145mg，2.10mmol)添加至((1S,3S)-6-胺基-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-5-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基)甲醇(915mg，2.00mmol)在丙酸(5mL)/水(1mL)的冷溶液中，並且將該反應物在該等條件下保持1小時。添加水(20mL)和DCM(40mL)，並且將各層進行分離。將該水層用DCM(x 2)萃取，然後將合併的有機物用飽和的NaHCO3水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，並且濃縮至乾燥。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至100% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈米色固體的((6S,8S)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙
基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉-8-基)甲醇(424mg，45%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.31(3H,d),1.36(3H,d),2.52(1H,dd),2.95(1H,dd),3.05(1H,dd),3.12(1H,dd),3.62(2H,dd),3.70-3.90(1H,m),5.50(1H,s),6.87(1H,d),7.01(2H,d),7.19-7.25(1H,m),8.08(1H,d)。m/z：ES+[M+H]+ 468。
(6S,8S)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉-8-甲醛的製備
在0℃下，將在DMSO(5.7mL)中的吡啶三氧化硫複合物(477mg，3.00mmol)逐滴添加至((6S,8S)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉-8-基)甲醇(702mg，1.50mmol)和三乙胺(0.5mL，3.75mmol)在DCM(5.7mL)/DMSO(5.7mL)的混合物的冷溶液中，並且允許該反應物加熱至室溫超過2小時。將該反應物用DCM(50mL)和水(50mL)稀釋，並且將各層進行分離。將該水層用DCM(x 2)萃取，然後將合併的有機物用飽和的氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鎂乾燥，並且濃縮至乾燥。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至100% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈米色固體的(6S,8S)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉-8-甲醛(512mg，73%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.10(3H,d),1.23(3H,d),2.56(1H,dd),3.35(1H,t),3.50(1H,dd),3.58(1H,dd),4.41(1H,dt),5.90(1H,s),6.78(1H,d),
6.92-7.1(2H,m),7.20(1H,d),8.11(1H,d),9.75(1H,s),10.12(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 466。
(6S,8S)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉-8-甲醛的製備
將3,4-二氫-2H-哌喃(0.24mL，2.57mmol)和對甲苯磺酸水合物(32.8mg，0.17mmol)添加至(6S,8S)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉-8-甲醛(800mg，1.72mmol)在DCM(8.3mL)的溶液中，並且將該反應物在室溫下攪拌1小時，隨後加熱至回流，並且在該等條件下保持3小時。冷卻後，將該反應物用DCM(25mL)稀釋，並且用飽和的NaHCO3水溶液(25mL)洗滌，然後經硫酸鈉乾燥，並且濃縮至乾燥。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至50% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈淺黃色固體的(6S,8S)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉-8-甲醛(772mg，82%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.09(3H,d),1.23(3H,dd),1.59-1.68(1H,m),1.69-1.81(2H,m),2.00-2.09(1H,m),2.09-2.20(1H,m),2.43-2.65(2H,m),3.27-3.44(1H,m),3.48(1H,dt),3.51-3.60(1H,m),3.66-3.74(1H,m),3.94-4.07(1H,m),4.38(1H,ddt),5.64(1H,ddd),5.89(1H,
s),6.77(1H,d),7.01(2H,d),7.27-7.33(1H,m),8.05(1H,d),9.72(1H,d)。m/z：ES+[M+H]+ 550。
(6S,8S)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
在0℃下，將二乙基胺基三氟化硫(0.384mL，2.91mmol)添加至(6S,8S)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉-8-甲醛(800mg，1.45mmol)在DCM(13.3mL)的冷溶液中。允許該反應物加熱至室溫，並且攪拌5小時。用DCM(20mL)稀釋後，藉由添加飽和的NaHCO3水溶液將該反應猝滅。將各層進行分離，然後用DCM將該水層萃取。將合併的有機物經硫酸鈉乾燥，並且濃縮至乾燥。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至25% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈米色固體的(6S,8S)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(753mg，91%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.15(3H,d),1.26(3H,dd),1.59-1.83(3H,m),2.04-2.11(1H,m),2.14(1H,dd),2.41-2.51(1H,m),2.51-2.64(1H,m),3.25(1H,dt),3.34-3.52(2H,m),3.72(1H,ddd),3.91(1H,s),3.97-4.05(1H,m),5.59(1H,s),5.66(1H,dt),5.83(1H,tdd),6.78(1H,dd),7.01(2H,d),7.31(1H,dd),8.04(1H,d)。m/z：ES+[M+H]+ 572。
(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙-1-醇(64mg，0.48mmol)添加至(6S,8S)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(137mg，0.24mmol)，第三代預催化劑RockPhos(8mg，0.01mmol)和碳酸銫(195mg，0.60mmol)在脫氣的甲苯(2.0mL)中的脫氣懸浮液中。將該反應物加熱至90℃，並且在該等條件下保持過夜。冷卻後，將該反應物用EtOAc稀釋，並且用水洗滌。將該水層用EtOAc萃取，然後將合併的有機物經硫酸鈉乾燥，並且濃縮至乾燥。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在EtOAc中0至10% MeOH的洗提梯度)純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈淺黃色膠質的(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(116mg，77%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.14(3H,d),1.23(3H,d),1.59-1.79(3H,m),2.05-2.19(2H,m),2.43-2.62(2H,m),2.80(2H,t),2.81-2.92(1H,m),3.08-3.17(2H,m),3.23(1H,dt),3.33-3.45(2H,m),3.44-3.52(2H,m),3.71(1H,ddd),3.85-3.90(2H,m),
3.90-3.97(1H,m),3.97-4.04(2H,m),4.33-4,50(1H,m),4.51-4.58(1H,m),5.52(1H,s),5.65(1H,dt),5.84(1H,tdd),6.30-6.40(2H,m),6.81(1H,d),7.29(1H,dd),8.03(1H,s)m/z：ES+[M+H]+ 625。
實例4
(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將HCl-二
(0.42mL)添加至(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(106mg，0.17mmol)在甲醇(0.42mL)的溶液中，並且將該反應物在室溫下攪拌3小時。將該等溶劑蒸發，然後將殘餘物溶解於DCM中，並且用飽和的NaHCO3水溶液洗滌。將該水層用DCM萃取，然後將合併的有機物經硫酸鈉乾燥，並且濃縮至乾燥。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在EtOAc中0至20% MeOH的洗提梯度)純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈米色固體的(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(82mg，89%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)0.98(3H,d),1.18(3H,d),1.90(3H,t),2.55(1H,dd),2.79-2.95
(3H,m),3.18(2H,ddd),3,23(1H,d),3.44-3.56(3H,m),3.62(1H,dd),3.83-3.92(2H,m),4.09(1H,d),4.43(1H,d),4.52(1H,d),5.90(1H,td),6.21(2H,d),6.92(1H,d),7.17(1H,d),8.10(1H,d)。m/z：ES+[M+H]+ 555。
(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉製備如下；(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙-1-醇(64mg，0.48mmol)添加至(6S,8S)-6-(4-溴-2,6-二氟苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(141mg，0.24mmol)，第三代預催化劑RockPhos(8mg，0.01mmol)和碳酸銫(195mg，0.60mmol)在脫氣的甲苯(2.0mL)的脫氣懸浮液中。將該反應物加熱至90℃，並且在該等條件下保持過夜。冷卻後，將該反應物用EtOAc稀釋，並且用水洗滌。將該水層用EtOAc萃取，然後將合併的有機物經硫酸鈉乾燥，並且濃縮至乾燥。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在EtOAc中0至10% MeOH的洗提梯度)
純化。將產物級分濃縮至乾燥，以提供呈淺黃色膠質的(6S,8S)-6-(2,6-二氟-4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)苯基)-8-(二氟甲基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(111mg，72%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)0.98(3H,dd),1.18(3H,d),1.59-1.68(1H,m),1.68-1.80(2H,m),1.89(3H,s),2.05-2.10(1H,m),2.10-2.22(1H,m),2.45-2.63(2H,m),2.78(2H,d),2.80-2.92(1H,m),3.12(2H,t),3.21(1H,d),3.38-3.55(3H,m),3.55-3.67(1H,m),3.71(1H,td),3.85(2H,t),3.96-4.10(2H,m),4.43(1H,dd),4.53(1H,dd),5.65(1H,ddd),5.87(1H,tdd),6.26(2H,d),6.95(1H,d),7.29(1H,dd),8.04(1H,dd)。m/z：ES+[M+H]+ 639。
實例5
(6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
向(6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉和(6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(1.08g，1.85mmol)在二氯甲烷(6mL)的溶液中緩慢添加在
二
中的氯化氫(4.0M，4.63mL，18.53mmol)。將該稠懸浮液劇烈攪拌30分鐘。將該反應混合物蒸發為固體，用甲苯共蒸發，並且溶解於DMSO中。將粗產物藉由製備型HPLC(沃特斯(Waters)X-select，CSH，製備型C-18，5微米細微性)柱(30 x 100mm)，使用水(含有1% NH3)和MeCN的漸減極性的混合物作為洗提液進行純化。將含有所希望的化合物的級分蒸乾，以提供呈灰白色泡沫的(6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.460g，50%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.05(3H,d),1.21-1.28(6H,m),2.34(1H,dd),2.79-2.89(4H,m),3.09-3.19(2H,m),3.24-3.36(1H,m),3.43-3.54(3H,m),3.68-3.77(1H,m),3.86(3H,s),3.87-3.95(2H,m),4.45(1H,d),4.55(1H,d),5.33(1H,s),6.27(1H,dd),6.48(1H,d),6.79(2H,dd),7.12(1H,d),8.05(1H,d)；m/z(ES+),[M+H]+=499。
(6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉和(6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉製備如下；(1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺的製備
將4-溴-2-甲氧基苯甲醛(3.61g，16.8mmol)添加至(R)-3-(2-((2-氟-2-甲基丙基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺(2.00g，8.39mmol)在乙酸(45mL)和水(0.756mL，42.0mmol)的溶液中。將該反應混合物在60℃下攪拌過夜，並且然後將該反應混合物蒸發為深棕色油。將該殘餘物藉由溶解於EtOAc(50mL)中進行中和，並且用飽和的碳酸氫鈉水溶液(3 x 50mL)洗滌。將合併的水層用EtOAc(2 x 50mL)萃取，將合併的有機層經硫酸鎂乾燥，過濾，並且將該濾液進行濃縮。將該殘餘物溶解於DCM(60mL)中，添加1M HCl(50mL)，並且將該雙相混合物劇烈攪拌1小時。將各層進行分離，並且將該水層用DCM(2 x 30mL)進行萃取。然後將該水層藉由添加2M Na2CO3水溶液進行鹼化，並且用EtOAc(3 x 35mL)萃取。將合併的EtOAc萃取物用鹽水(1 x 50mL)洗滌，經硫酸鎂乾燥，並且濃縮。將該粗材料藉由快速矽膠層析(在庚烷中0-50% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將純的級分合併，並且濃縮，以提供呈灰白色泡沫的(1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(2.90g，79%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)0.99(3H,d),1.21-1.32(6H,m),2.06(3H,s),2.26(1H,dd),2.49(1H,dd),2.72(1H,dd),2.85(1H,dd),3.48(2H,d),3.54(1H,dt),3.87(3H,s),5.23(1H,s),6.43(2H,s),6.80(1H,d),6.89(1H,dd),7.00(1H,d)；m/z：ES+[M+H]+ 435。
(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將三頸燒瓶中的在丙酸(25mL)中的(1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(2.40g，5.51mmol)冷卻至-17℃(乾冰/丙酮；藉由溫度計的內部溫度)。將在水中(5mL)的亞硝酸鈉(0.380g，5.51mmol)逐滴添加超過約5min。將該反應混合物在-17℃下攪拌30min。將該反應混合物用冰冷的TBME(150mL)(溫度升至-4℃)稀釋。將該反應混合物劇烈攪拌，並且藉由添加2M NaOH水溶液(300mL，滴液漏斗超過約15min)(溫度約5℃-10℃；冰/水浴，藉由溫度計的內部溫度)進行中和，並且攪拌30min。將有機物用另外的2M NaOH水溶液(200mL)洗滌，將合併的水相用TBME(2 x 100mL)洗滌，並且將合併的有機物用飽和的氯化鈉水溶液(1 x 100mL)洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾，並且將該濾液蒸發為棕色油。將該粗材料藉由快速矽膠層析(在庚烷中0-35% EtOAc的洗提梯度)進行純化，以提供呈稻草色泡沫的(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(1.660g，668%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.05(3H,d),1.23(3H,d),1,27(3H,d),2.30(1H,dd),2.76-2.92(2H,m),3.31(1H,dd),3.66-3.77(1H,m),3.90(3H,s),5.37(1H,s),6.75(1H,d),
6.83(1H,d),6.90(1H,dd),7.04(1H,d),7.14(1H,d),8.06(1H,d),10.01(1H,s)；m/z：ES+[M+H]+ 448(Br同位素模式)
(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉和(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將4-甲基苯磺酸水合物(0.163g，0.86mmol)添加至(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(1.91g，4.28mmol)和3,4-二氫-2H-哌喃(3.90mL，42.79mmol)在DCM(15mL)的溶液中，並且將該混合物在45℃下加熱5小時，並且然後在室溫下攪拌4天。將該反應混合物用DCM稀釋，用飽和的碳酸氫鈉水溶液、飽和的氯化鈉水溶液洗滌，然後經硫酸鎂乾燥，過濾，並且將該濾液濃縮。將該粗材料藉由快速矽膠層析(在庚烷中0-25% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將級分合併和濃縮，以提供呈橘棕色玻璃狀固體的(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉和(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌
喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(2.25g，99%)的混合物。m/z：ES+[M+H]+ 530(似乎是1：1異構物的混合)。
(6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉/(6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將裝配有攪拌棒的圓底燒瓶填充有(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉和(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(1.75g，3.30mmol)、2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙-1-醇(0.879g，6.60mmol)、碳酸銫(2.150g，6.60mmol)、第三代預催化劑RockPhos(0.277g，0.33mmol)和分子篩(4Å啟動的粉劑，0.5g，3.30mmol)的混合物。將該燒瓶抽真空並用氮(x 3)回填。添加甲苯(15mL)，並且將該混合物在90℃下攪拌16小時。將該冷卻的反應混
合物用EtOAc稀釋，並且通過CeliteTM過濾，以去除不溶解的材料。將該濾液用水、飽和的氯化鈉水溶液洗滌，並且然後經硫酸鎂乾燥，過濾，並且將該濾液濃縮。將該粗材料藉由快速矽膠層析(在DCM中0-8% MeOH的洗提梯度)進行純化。將純的級分合併和濃縮，以提供(6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉和(6S,8R)-7-(2-氟-2-甲基丙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(1.080g，56%)的混合物。分離出呈橘-棕色泡沫的材料。m/z：ES+[M+H]+ 583(似乎是1：1異構物的混合)。
實例6
(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將在二
(4M；0.5mL，2mmol)中的鹽酸添加至(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.052g，0.09mmol)和(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]
異喹啉(0.065g，0.11mmol)在MeOH(1mL)的溶液中。將所得的溶液在室溫下攪拌2小時，並且然後在減壓下濃縮。將所得的殘餘物藉由反相HPLC(沃特斯(Waters)XBridge苯基柱，19mm直徑，100mm長度，5μm矽膠)(在含有0.2%氫氧化銨(pH 10)作為改性劑的水中50%至80% MeCN的洗提梯度)直接純化，以給出呈白色固體的(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.037g，37%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)0.34-0.63(2H,m),0.76-0.92(2H,m),1.00(3H,d),2.52-2.78(4H,m),2.83-3.01(4H,m),3.60-3.77(1H,m),3.79-3.92(5H,m),4.42(1H,d),4.58(1H,d),5.25(1H,s),6.32(1H,dd),6.56(1H,d),6.64(1H,d),6.78(1H,d),7.16(1H,d),8.03(1H,s)12.9(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 497。
起始材料(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉和(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉製備如下；1-(3-溴-2-甲基苯基)-2,5-二甲基-1H-吡咯的製備
將在裝備有冷凝器和迪安-斯達克(Dean-Stark)分水器的燒瓶中的3-溴-2-甲基苯胺(40g，215mmol)、己烷-2,5-二酮(25.3mL，215mmol)
和對甲苯磺酸一水合物(0.409g，2.15mmol)在甲苯(300mL)的混合物在回流條件下加熱2小時。然後將該混合物冷卻至室溫，並且依次用飽和的碳酸氫鈉水溶液、HCl水溶液(1N)和飽和的氯化鈉水溶液洗滌。將該有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，已給出呈淺黃色油的粗1-(3-溴-2-甲基苯基)-2,5-二甲基-1H-吡咯(57.9g，102%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6,27℃)1.80(6H,s),1.90(3H,s),5.80(2H,s),7.20-7.40(2H,m),7.70(1H,dd)。m/z：ES+[M+H]+ 264。
三級丁基(R)-(1-(3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-2-甲基苯基)丙-2-基)胺基甲酸酯的製備
在-78℃下，將在己烷(2.5M；89mL，221mmol)中的正丁基鋰超過添加至粗1-(3-溴-2-甲基苯基)-2,5-二甲基-1H-吡咯(55.7g，211mmol)在THF(400mL)的溶液中超過15分鐘。30分鐘後，添加三級丁基(R)-4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-二氧化物(50g，211mmol)。將所得的混合物在-78℃下攪拌15分鐘，並且允許加熱至室溫超過2小時。添加檸檬酸水溶液(1N；250mL)，並且攪拌持續30分鐘。將該混合物用己烷萃取，並且將合併的有機層用飽和的碳酸鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將所得的棕色固體，粗三級丁基(R)-(1-(3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-2-甲基苯基)丙-2-基)胺基甲酸酯不經進一步純化用於下一步驟。m/z：ES+[M+H]+ 343。
(R)-1-(3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-2-甲基苯基)丙-2-胺的製備
將在二
(4M；100mL，400mmol)中的鹽酸添加至粗三級丁基(R)-(1-(3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-2-甲基苯基)丙-2-基)胺基甲酸酯在MeOH(200mL)和DCM(50mL)的懸浮液中。將所得的紅色溶液在室溫下攪拌4小時，並且然後在減壓下濃縮。將所得的棕色固體不經進一步純化用於下一步驟。m/z：ES+[M+H]+ 243。
(R)-3-(2-胺丙基)-2-甲基苯胺的製備
將粗(R)-1-(3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-2-甲基苯基)丙-2-胺二鹽酸鹽、羥胺水溶液(50wt%；107mL，1.74mol)和鹽酸羥胺(97g，1.39mol)在乙醇(400mL)中的混合物加熱至回流條件。18小時後，將該反應物冷卻至0℃，用氫氧化鈉水溶液(50wt%，153g，1.92mol)進行鹼化，並且用DCM萃取。將該有機層經硫酸鈉進行乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將所得的殘餘物藉由SFC(普林斯頓(Princeton)層析分析DEAP柱，100mm長度，30mm直徑，5μm，40℃柱溫，100bar柱壓，100mg/mL流速)，用含有在CO2中的0.2% NH4OH的25%甲醇洗提進行純化，以提供呈淺琥珀酸固體的(R)-3-(2-胺丙基)-2-甲基苯胺(24g，84%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6,27℃)1H NMR(500MHz,DMSO,27℃)1.05(3H,d),1.99(3H,s),2.55(1H,dd),2.93(1H,dd),3.11-3.25(1H,m),4.77(2H,s),6.35(1H,dd),6.52(1H,dd),6.81(1H,t)。沒有觀察到兩個可交換的質子。m/z：ES+[M+H]+ 165。
(R)-N-(1-(3-胺基-2-甲基苯基)丙-2-基)-1-氟環丙烷-1-甲醯胺的製備
將(R)-3-(2-胺丙基)-2-甲基苯胺(1.70g，10.4mmol)溶解於DMF(29.9mL)中，並且用1-氟環丙烷-1-甲酸(1.00g，9.61mmol)、HATU(4.02g，10.6mmol)和Et3N(2.68mL，19.22mmol)進行處理。將該反應物在室溫下攪拌3小時，並且然後用水猝滅，並且用EtOAc萃取。將該有機層用飽和的氯化鈉水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，並且過濾。將該濾液在減壓下濃縮，並且將所得到的殘餘物在真空下乾燥過夜以去除殘餘DMF。然後將殘餘物吸附在二氧化矽上，並且藉由快速柱矽膠層析法(在己烷中0至80%乙酸乙酯的洗提梯度)進行純化，以提供呈淺黃色固體的(R)-N-(1-(3-胺基-2-甲基苯基)丙-2-基)-1-氟環丙烷-1-甲醯胺(1.47g，61%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6,27℃)1.01-1.28(7H,m),2.02(3H,s),2.54-2.62(1H,m),2.83(1H,dd),3.89-4.16(1H,m),4.68(2H,s),6.38(1H,d),6.49(1H,d),6.78(1H,t),8.14(1H,d)m/z：ES+[M+H]+ 251。
(R)-3-(2-(((1-氟環丙基)甲基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺的製備
在室溫下，在氮氣下，將在THF(1M；35.2ml，35.2mmol)中的硼烷四氫呋喃錯合物添加至(R)-N-(1-(3-胺基-2-甲基苯基)丙-2-基)-1-氟環丙烷-1-甲醯胺(1.47g，5.87mmol)在THF(13.7mL)的溶液中。然後將該反應物在65℃加熱6hr。將該反應物冷卻至0℃，並且用MeOH(氣體逸出)小心地猝
滅。然後將該溶液在減壓下濃縮，並且在冷凍機中貯存18小時。將該殘餘物溶解於MeOH(6mL)中，並且在65℃下加熱3hr。將該溶液冷卻至室溫，並且然後在減壓下濃縮。將獲得的殘餘物藉由快速矽膠層析(在DCM中0至16%甲醇的洗提梯度)進行純化，以提供呈無水油的(R)-3-(2-(((1-氟環丙基)甲基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺(1.14g，82%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6,27℃)0.54-0.70(2H,m),0.79-1.02(5H,m),1.64(1H,br.s.),1.99(3H,s),2.36(1H,dd),2.69-2.97(4H,m),4.68(2H,s),6.36(1H,d),6.49(1H,d),6.79(1H,t)m/z：ES+[M+H]+ 237。
(1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-((1-氟環丙基)甲基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺和N-((1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-((1-氟環丙基)甲基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙醯胺的製備
將(R)-3-(2-(((1-氟環丙基)甲基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺(0.63g，2.7mmol)、4-溴-2-甲氧基苯甲醛(1.15g，5.33mmol)和水(0.240mL，13.3mmol)在乙酸(10mL)的混合物在80℃下攪拌20小時，之後將其冷卻至室溫，並且然後在減壓下濃縮。將該殘餘物用HCl水溶液(1N；10mL)處理30分鐘，並且然後用EtOAc萃取。留出該有機層。將該水層用固體碳酸鉀進行鹼化，並且用EtOAc萃取。將該萃取物經硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將所得到的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中0至100%乙酸乙酯的洗提梯度)進行純化，以提供
呈淺黃色泡沫固體的(1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-((1-氟環丙基)甲基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(0.71g，62%)。m/z：ES+[M+H]+ 433。
還分離出呈淺黃色泡沫固體的N-((1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-((1-氟環丙基)甲基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙醯胺(0.27g，21%)。m/z：ES+[M+H]+ 475。根據以下詳述方法，可以將上述化合物轉化為(1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-((1-氟環丙基)甲基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺。
(1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-((1-氟環丙基)甲基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺的製備
將N-((1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-((1-氟環丙基)甲基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙醯胺(0.27g，0.57mmol)和鹽酸水溶液(1N；2mL，2mmol)在回流條件下攪拌18小時，並且然後冷卻至室溫。用NaOH水溶液(1N)將該反應物鹼化至pH 10，並且用EtOAc萃取該混合物。將該有機層經硫酸鎂乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮，以提供呈淺黃色泡沫的另外的(1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-((1-氟環丙基)甲基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(0.23g，92%)。m/z：ES+[M+H]+ 433。
(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
在-10℃下，將亞硝酸鈉(0.095g，1.4mmol)在水(0.600mL)的溶液逐滴添加至(1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-((1-氟環丙基)甲基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(0.60g，1.4mmol)在丙酸(6mL)的溶液中，並且將該混合物在該等條件下攪拌20分鐘。然後將該反應物用EtOAc(20mL，預冷卻至0℃)稀釋，並且用飽和的NaHCO3水溶液(25mL，預冷卻至0℃)逐滴處理，隨後分批添加固體NaHCO3(7g)。將該混合物攪拌18小時，並且在此期間，允許該反應物加熱至室溫。將該混合物用EtOAc萃取，並且將該萃取物經MgSO4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將所得到的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中0至80% EtOAc的洗提梯度)進行純化，以提供呈琥珀色泡沫固體的(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.46g，75%)。m/z：ES+[M+H]+ 444。
(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉和(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將3,4-二氫-2H-哌喃(0.52mL，5.7mmol)添加至(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.63g，1.4mmol)和4-甲基苯磺酸一水合物(0.01g，0.05mmol)在DCM(6mL)的溶液中，並且將該所得的混合物經受微波條件(100℃，300W)1.5小時。將該混合物冷卻至室溫，並且添加固體碳酸鉀。劇烈攪拌5分鐘之後，將該混合物過濾。將該濾液在減壓下濃縮，並且將所得到的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中0至60%乙酸乙酯的洗提梯度)，以提供主要異構物，推測係呈淺黃色泡沫固體的(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.51g，67%)。m/z：ES+[M+H]+ 528。
還分理出次要異構物，推測係呈淺黃色油的(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.15g，19%)。m/z：ES+[M+H]+ 528。
(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將推測的(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.096g，0.18mmol)、2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙-1-醇(0.048g，0.36mmol)、第三代預催化劑RockPhos(8mg，0.009mmol)和碳酸銫(0.15g，0.45mmol)的混合物抽真空並用氮(3 x)回填。添加甲苯(2mL)，並且將該混合物再次抽真空並用氮(2 x)回填。將該懸浮液在80℃攪拌1小時，並且然後冷卻至室溫。將該混合物過濾，並且將該濾液藉由快速矽膠層析(在DCM中0至8%甲醇的洗提梯度)進行純化，以給出呈琥珀色固體的(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.052g，49%)。m/z：ES+[M+H]+ 581。
(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.14g，0.26mmol)、2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙-1-醇(0.071g，0.53mmol)、第三代預催化劑RockPhos(0.011g，0.010mmol)和碳酸銫(0.22g，0.66mmol)的混合物抽真空並用氮(3 x)回填。添加甲苯(3mL)，並且將該混合物再次抽真空並用氮(2 x)回填。將該懸浮液在90℃下攪拌1小時，冷卻至室溫，並且過濾。將該濾液藉由快速矽膠層析(在DCM中0至8%甲醇的洗提梯度)進行純化，以提供呈琥珀色固體的(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.065g，42%)。m/z：ES+[M+H]+ 581。
實例7
(6S,8R)-7-(2,2-二氟乙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉
將MeOH(0.5mL)隨後將在二
(4M；0.400mL，1.60mmol)中的HCl添加至填充有(6S,8R)-7-(2,2-二氟乙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(87mg，0.15mmol)的燒瓶中，並且將該反應物在室溫下攪拌1小時。將該反應物在減壓下濃縮，並且用飽和的碳酸氫鈉水溶液處理，隨後用乙酸乙酯(x 3)萃取。將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將所得到的殘餘物藉由快速矽膠層析(在DCM中5%至10%甲醇的洗提梯度)進行純化，以給出呈白色固體的(6S,8R)-7-(2,2-二氟乙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(46.2mg，62%)。1H NMR(500MHz,DMSO-d 6,27℃)1.04(3H,d),2.55-2.63(1H,m),2.66-2.76(3H,m),2.82(1H,dd),2.95-3.05(3H,m),3.12(1H,dd),3.29-3.33(2H,m),3.36-3.43(1H,m),3.85-3.92(5H,m),4.51(2H,dd),5.29(1H,s),5.77-6.09(1H,m),6.31(1H,dd),6.55(1H,d),6.59(1H,d),6.68(1H,d),7.22(1H,d),8.07(1H,s),12.99(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 489。
起始材料(6S,8R)-7-(2,2-二氟乙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉製備如下；2,2-二氟乙基三氟甲磺酸酯的製備
在-10℃(鹽/冰浴)下，將三氟甲磺酸酐(3.97ml，23.5mmol)逐滴添加至2,2-二氟乙烷-1-醇(1.75g，21.3mmol)在DCM(40mL)的溶液中。然後添加二甲基吡啶(2.98ml，25.6mmol)，並且將該反應物在-10℃下攪拌1小時。然後將該反應物用水猝滅，並且將各層進行分離。將該有機層用水洗滌，並且然後經硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以提供呈無色液體的2,2-二氟乙基三氟甲磺酸酯(3.10g，67.9%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)4.57(2H,td),6.03(1H,tt)。
(R)-3-(2-((2,2-二氟乙基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺的製備
將2,2-二氟乙基三氟甲磺酸酯(0.789g，3.68mmol)添加至(R)-3-(2-胺丙基)-2-甲基苯胺(0.55g，3.4mmol)和DIPEA(0.760ml，4.35mmol)在1,4-二
(10mL)的攪拌溶液中。將該反應物在65℃下加熱3小時，並且然後冷卻至室溫。將該反應物在減壓下濃縮，並且將所得的殘餘物溶解於EtOAc(30mL)中，並且用飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌。將各層進行分離並且將該水層用EtOAc(20mL)萃取。將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，以給出紅色液體。將該油藉由快速矽膠層析(在己烷中30%至90%乙酸乙酯的洗提梯度)進行純化，以給出呈膠質的(R)-3-(2-((2,2-二氟乙基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺(0.52g，68%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,27℃)1.06(3H,d),
2.09(3H,s),2.60(1H,dd),2.77(1H,dd),2.81-2.99(3H,m),3.56(2H,br s)5.78(1H,tt),6.58(2H,d),6.94(1H,t)。m/z：ES+[M+H]+ 229。
(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將4-溴-2-甲氧基苯甲醛(0.942g，4.38mmol)添加至(R)-3-(2-((2,2-二氟乙基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺(0.50g，2.2mmol)在AcOH(15mL)和水(0.197g，11.0mmol)的溶液中，並且將該反應物在80℃下加熱過夜。冷卻後，將該反應物在減壓下濃縮，並且將所得的殘餘物溶解於EtOAc中，並且藉由用飽和的NaHCO3水溶液洗滌來進行中和。將該有機層用HCl水溶液(1N)處理，並且將該雙相混合物在室溫下攪拌30分鐘。將各層進行分離，並且將該有機層用HCl水溶液(1N)洗滌。還將合併的水層用乙酸乙酯萃取。然後將合併的水層藉由添加固體K2CO3進行鹼化，並且用乙酸乙酯(x 2)萃取。將鹼化後獲得的經合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將所得到的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中10%至60%乙酸乙酯的洗提梯度)進行純化，以提供如所希望的產物的(1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(0.55g，59%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,27℃)0.92-1.12(3H,m),2.05(3H,s),2.40(1 H,br.dd),2.50-2.81(3H,m),2.81-2.92(1H,m),3.18-3.34(1H,m),3.40-3.69(2H,m),3.89(3H,s),5.21(1H,s),
5.80(1H,t),6.42-6.47(2H,m),6.63(1H,d),6.89(1H,d),7.02(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 425。
(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
在-15℃下，將在水(0.500mL)中的亞硝酸鈉(0.039g，0.57mmol)作為溶液逐滴添加至(1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(0.23g，0.54mmol)在丙酸(2.0mL)的溶液中，並且將該反應物在該等條件下攪拌1小時。將冰冷的EtOAc(10mL)添加至燒瓶中，隨後逐份添加飽和的NaHCO3水溶液(10mL)。將各層進行分離，並且然後將該有機層用飽和的NaHCO3水溶液洗滌。將合併的水層用EtOAc萃取，並且然後將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在己烷中10%至50%乙酸乙酯的洗提梯度)進行純化，以給出呈膠質的(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.20g，85%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.00-1.31(3H,m),2.58-2.75(1H,m),2.83(1 H,dd),2.90-3.04(1H,m),3.13-3.24(1H,m),3.38-3.47(1H,m),3.92(3H,s),5.38(1H,br s),5.79(1 H,t),6.65(1H,d),6.77(1H,d),6.89(1H,dd),7.06(1H,d),7.18(1H,d),8.05(1H,s)。沒有觀察到吲唑NH。m/z：ES+[M+H]+ 436。
(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將DCM(5mL)添加至填充有(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.18g，0.41mmol)和對甲苯磺酸一水合物(8mg，0.04mmol)的燒瓶中。添加3,4-二氫-2H-哌喃(0.052g，0.62mmol)，並且將該反應物在室溫下攪拌過夜。將該反應物用飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌，並且將該有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮以給出棕色膠質。將該膠質藉由快速矽膠層析(在己烷中5%至40%乙酸乙酯的洗提梯度)進行純化，以提供(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.17g，77%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.11(3H,br.s),1.63-1.83(4H,m),2.06-2.13(1H,m),2.21-2.27(2H,m),2.61-2.81(2H,m),2.87-3.14(2H,m),3.42(1H,br.s.),3.80(1H,td),3.95(2H,br.s),4.14-4.19(1H,m),5.30(1H,br.s),5.62-5.97(2H,m),6.61-6.76(2H,m),6.86-6.95(1H,m),7.01-7.16(1H,m),7.39-7.45(1H,m),8.13(1H,br.s)。m/z：ES+[M+H]+ 521。
(6S,8R)-7-(2,2-二氟乙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將甲苯(2mL)添加至填充有2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙-1-醇(0.079g，0.60mmol)和(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.155g，0.30mmol)的燒瓶中。將該反應燒瓶抽真空並用氮(3 x)回填。添加碳酸銫(0.243g，0.74mmol)和第三代預催化劑RockPhos(0.025g，0.030mmol)，並且將該反應燒瓶再次抽真空並用氮(3 x)回填。將該反應物在90℃下加熱2小時。將該反應物中止，冷卻至室溫，通過Celite®過濾，用在DCM中的10%甲醇洗滌，並且將該濾液在減壓下濃縮。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析(在DCM中2%至10% MeOH的洗提梯度)進行純化，以給出呈乾膜的(6S,8R)-7-(2,2-二氟乙基)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.091g，53%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.08(3H,dd),1.65(1H,m),1.74(2 H,m),2.05(1H,m),2.21(2H,m),2.66(2H,br dd),2.82(2H,m),2.90(2H,m),3.04(1H,m),3.15(2H,br s),3.42(1H,m),3.50(2H,br s),3.77(1H,td),3.87(3H,s),3.90(2H,br t),4.12(1 H,m),4.44(1H,d),4.53(1H,d),5.25(1H,s),5.64(1H,m),6.24(1H,dt),6.67(2 H,m),7.37(1H,d),8.08(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 573。
實例8
(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(69mg，0.12mmol)溶解於MeOH(1.13mL)中，並且冷卻至0℃。然後將該溶液用在二
(4M；0.16mL，0.62mmol)中的HCl緩慢處理。將該反應物在室溫下攪拌30分鐘。然後將該反應混合物在減壓下濃縮，並且將所得的殘餘物藉由製備型HPLC(沃特斯(Waters)Xbridge C18柱，5μm矽膠，19mm直徑，150mm長度，20mL/min)，在含有0.2% NH4OH(pH 10)的水中40%至70%乙腈洗提進行純化超過5分鐘。將產物級分合併，並且在減壓下濃縮，以提供呈淺黃色固體的(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(27mg，45%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6,27℃)0.47(1H,m),0.67(1H,m),0.79-0.99(2H,m),1.03(3H,d),2.63-2.77(4H,m),2.87-3.08(4H,m),3.17-3.35(3H,m),3.63-3.73(1H,m),3.95(2H,t),4.50(2H,dd),4.92(1H,s),6.78(1H,d),7.16-7.29(3H,m),8.05(1H,s),8.14(1H,d),12.87(1 H,br.s)。m/z：ES+[M+H]+ 468。
起始材料(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉製備如下；(1S,3R)-1-(5-溴吡啶-2-基)-2-((1-氟環丙基)甲基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺的製備
將(R)-3-(2-(((1-氟環丙基)甲基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺(185mg，0.78mmol)和5-溴吡啶甲醛(291mg，1.57mmol)懸浮於乙酸(4mL)和水(0.082mL)中。在80℃下，在氮氣下將該反應物加熱3小時。將該反應物在減壓下濃縮，並且將所得的殘餘物再溶解於EtOAc(12mL)中，並且用飽和的NaHCO3水溶液中和。將該水層用EtOAc(10mL)萃取，並且將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮為棕色殘餘物。將該殘餘物溶解於EtOAc(11mL)中，並且用HCl水溶液(1N；7mL)處理。將該雙相混合物劇烈攪拌30分鐘，將各層進行分離，並且用HCl水溶液(1N；2 x 4mL)萃取該有機層。將合併的酸性水層用DCM(10mL)萃取。然後將該水層用飽和的碳酸鉀水溶液鹼化，並且用DCM(3 x 11mL)萃取。將合併的DCM萃取物經硫酸鈉乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中的0至60% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物合併，並且在減壓下濃縮，以提供呈灰白色泡沫的(1S,3R)-1-(5-溴吡啶-2-基)-2-((1-氟環丙基)甲基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異
喹啉-6-胺(138mg，44%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 ,27℃)0.38-0.51(1H,m),0.59-0.75(1H,m),0.77-1.01(2H,m),0.96(3H,d),1.94(3H,s),2.52-2.62(2H,m),2.76-2.85(1H,m),2.87-3.07(1H,m),3.41-3.65(1H,m),4.63(2H,s),4.75(1H,s),6.28-6.46(2H,m),7.24(1H,d),7.75-7.97(1H,m),8.42-8.66(1H,m)。m/z：ES+[M+H]+ 404。
(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
在-20℃(鹽/冰浴)，將在水(0.14mL)中的亞硝酸鈉(23.55mg，0.34mmol)溶液超過1分鐘逐滴添加至(1S,3R)-1-(5-溴吡啶-2-基)-2-((1-氟環丙基)甲基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(138mg，0.34mmol)在丙酸(1.39ml)的攪拌溶液中。20分鐘後，將該反應物用冰冷的EtOAc(13mL)稀釋。將該雙相混合物劇烈攪拌，並且藉由緩慢添加冷凍飽和NaHCO3水溶液(12mL)進行中和，導致氣體逸出。允許該反應物緩慢加熱至室溫超過2小時。將該等相分離，並且將該有機層用飽和的NaHCO3水溶液(12mL)、飽和的氯化鈉水溶液(10mL)洗滌，經硫酸鎂乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中的0至80% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分在減壓下濃縮，以給出呈黃橙色膜的(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(82mg，58%)。1H NMR
(300MHz,DMSO-d 6 ,27℃)0.39-0.56(1H,m),0,60-0.76(1H,m),0.77-1.00(2H,m),1.03(3H,d)2.60-2.72(1H,m)2.83-3.27(3H,m)3.48-3.80(1H,m)4.98(1H,s)6.85(1H,d)7.22(1H,d)7.35(1H,d)7.93(1H,dd)8.07(1H,s)8.59(1H,d)12.97(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 415。
(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
在室溫下，向(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(82mg，0.20mmol)在DCM(1.46mL)的溶液中依次地添加3,4-二氫-2H-哌喃(0.027ml，0.30mmol)和對甲苯磺酸一水合物(4mg，0.02mmol)。將該反應物在室溫下攪拌30分鐘，並且然後在40℃加熱3小時。添加更多的對甲苯磺酸一水合物(4mg，0.02mmol)和3,4-二氫-2H-哌喃(0.027ml，0.30mmol)，並且將該反應物轉移至密封的微波容器中，並且在40℃(在防爆遮擋物後)在油浴中加熱過夜。將該反應物用DCM稀釋，並且用飽和的NaHCO3水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中的0至70% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分合併，並且在減壓下濃縮，以給出呈淺黃色泡沫的(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(63mg，64%)。1H NMR(300MHz,
DMSO-d 6 ,27℃)0.42-0.54(1H,m),0.62-0.73(1H,m),0.78-0.99(2H,m),1.00-1.06(3H,m),1.55-1.64(2H,m),1.67-1.81(1H,m),1.92-2.08(1H,m),2.11-2.24(1H,m),2.53-2.71(2H,m),2.77-2.89(1H,m),2.98-3.20(2H,m),3.61-3.77(2H,m),3.93-4.03(1H,m),4.90(1H,s),5.70(1H,d),6.74(1H,d),7.29(1H,d),7.35(1H,d),7.93(1H,dd),8.48(1H,s),8.60(1H,d)。m/z：ES+[M+H]+ 499。
(6S,8R)-7-((1-氟環丙基)甲基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-((1-氟環丙基)甲基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(62mg，0.12mmol)和2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙-1-醇(33mg，0.25mmol)在甲苯(1.0mL)中的溶液脫氣，並且用氮(3 x)回填。將碳酸銫(101mg，0.31mmol)和第三代預催化劑RockPhos(5mg，6μmol)順序地添加。將該懸浮液脫氣，並且用氮氣(3 x)回填，並且然後在75℃下加熱2.5小時。冷卻至室溫後，將該反應物用EtOAc稀釋，並且用飽和的氯化鈉水溶液洗滌。將該水層用EtOAc萃取，然後將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將所得的殘餘物不經進一步純化用於下一步驟。m/z：ES+[M+H]+ 552。
實例9
(6S,8R)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-7-異丁基-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
在室溫下，將(6S,8R)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-7-異丁基-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(120mg，0.21mmol)溶解於MeOH(2mL)中，並且用在二
(4M；0.53mL，2.1mmol)中的HCl緩慢處理。將該反應物在該等條件下攪拌30分鐘，並且然後在減壓下濃縮。將所得到的殘餘物藉由製備型HPLC(沃特斯(Waters)Xbridge苯基柱，5μm矽膠，19mm直徑，100mm長度，20mL/min)，用在含有0.2% NH4OH(pH 10)的水中的50%至80%乙腈洗提來進行純化超過6分鐘。將產物級分在減壓下濃縮，以提供呈淺黃色固體的(6S,8R)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-7-異丁基-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(38mg，37%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6,27℃)0.73(3H,d),0.83(3H,d),0.97(3H,d),1.78-1.91(1H,m),1.91-2.04(1H,m),2.19-2.30(1H,m),2.65-2.75(3H,m),2.80(1H,dd),3.00(2H,t),3.12(1H,dd),3.26-3.35(2H,m),3.36-3.46(1H,m),3.81-3.90(5H,m),4.51(2H,dd),
5.16(1H,s),6.29(1H,dd),6.54(1H,d),6.65(2H,app dd),7.17(1H,d),8.03(1H,s),12.90(1H,br.s)。m/z：ES+[M+H]+ 481。
起始材料(6S,8R)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-7-異丁基-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉製備如下；(1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-異丁基-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺的製備
將(R)-3-(2-(異丁基胺基)丙基)-2-甲基苯胺、2三氟乙酸(310mg，0.69mmol)和4-溴-2-甲氧基苯甲醛(297mg，1.38mmol)懸浮於乙酸(4mL)和水(0.082mL)中。將該反應物在氮氣下加熱至80℃持續18小時。將該反應物在減壓下濃縮(40℃水浴溫度)，並且將所得的殘餘物溶解於EtOAc(12mL)中，並且用飽和的NaHCO3水溶液進行中和。將該水層用EtOAc(10mL)萃取，並且將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮為黃色殘餘物。將該殘餘物在溶解於EtOAc(11mL)中，並且用HCl水溶液(1N；7mL)處理，並且將該雙相混合物劇烈攪拌20分鐘。將各層進行分離，並且將該有機層用HCl水溶液(1N；2 x 4mL)萃取。將合併的酸性水層用DCM(10mL)萃取，並且然後用飽和的碳酸鉀鹼化，並且用DCM(3 x 11mL)萃取。將經鹼化的水層的合併的DCM萃取物經硫酸鈉乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將所得
的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中的0至80% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分合併，並且在減壓下濃縮，以提供呈灰白色泡沫的(1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-異丁基-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(213mg，74%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 ,27℃)0.72(3H,d),0.82(3H,d),0.91(3H,d),1.75-1.92(2H,m),1.94(3H,s),2.13-2.25(1H,m),2.40(1H,dd),2.58-2.77(1H,m),3.15-3.27(1H,m),3.86(3H,s),4.51-4.63(2H,m),5.01(1H,s),6.27(1H,d),6.37(1H,d),6.71(1H,d),6.94(1 H,dd),7.15(1 H)。m/z：ES+[M+H]+ 417。
(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-異丁基-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
在-20℃(鹽/冰浴)下，在100mL梨形燒瓶中，將在水(0.20mL)中的亞硝酸鈉(35mg，0.51mmol)溶液超過1分鐘逐滴添加至(1S,3R)-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-異丁基-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(211mg，0.51mmol)在丙酸(2mL)的攪拌溶液中。20分鐘後，將該反應物用冰冷的EtOAc(10mL)稀釋。將該雙相混合物劇烈攪拌10分鐘，並且藉由緩慢添加冷的飽和NaHCO3水溶液(20mL)進行中和。將該等相分離，並且將該有機層用飽和的NaHCO3(12.5mL)和飽和的氯化鈉水溶液(8mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮為棕色殘餘物。將該殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中的0至70% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分在減壓下濃縮，以
給出呈黃橙色膜的(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-異丁基-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(132mg，61%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 ,27℃)0.71(3H,d),0.82(3H,d),0.95(3H,d),1.75-1.96(2H,m)2.27-2.35(1H,m)2.82(1H,dd)3.06-3.22(1H,m)3.31-3.46(1H,m)3.89(3H,s),5.18(1H,s),6.67(1H,d),6.75(1H,d),6.93(1H,dd),7.12-7.24(2H,m),8.03(1H,s),12.94(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 428。
(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-異丁基-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
在室溫下，將3,4-二氫-2H-哌喃(0.041mL，0.45mmol)和對甲苯磺酸一水合物(6mg，0.03mmol)順序地添加至(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-異丁基-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(129mg，0.30mmol)在DCM(1.5mL)的溶液中。將該反應物在室溫下攪拌30分鐘，並且然後在40℃加熱3小時。添加更多的對甲苯磺酸一水合物(6mg，0.03mmol)，並且將該反應物在該等條件下加熱持續另外的2小時。添加更多的3,4-二氫-2H-哌喃(0.041mL，0.45mmol)，並且將該反應物轉移至密封的微波容器(在防爆遮擋物後)中，並且在100℃下加熱30分鐘。將該反應物用DCM(10mL)稀釋，並且用飽和的NaHCO3水溶液(2mL)洗滌。將該有機層用硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中的0至70%
EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分在減壓下濃縮，以給出呈黃色油的(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-異丁基-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(114mg，74%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6,27℃)0.72(3H,d),0.83(3 H,d),0.96(3H,d),1.54-1.65(2H,m),1.66-2.08(5H,m),2.11-2.36(2H,m),2.67-2.78(1H,m),3.06(1H,d),3.33-3.43(1H,m),3.66-3.77(1H,m),3.91(3H,s),3.95-4.02(1H,m),5.12(1H,s),5.69(1H,dd),6.57(1H,d),6.80(1H,dd),6.96(1H,dd),7.21(1 H,s),7.26(1 H,d),8.45(1 H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 513。
(6S,8R)-6-(4-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)-2-甲氧基苯基)-7-異丁基-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將(6S,8R)-6-(4-溴-2-甲氧基苯基)-7-異丁基-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(112mg，0.22mmol)和2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙-1-醇(58mg，0.44mmol)在甲苯(1.821ml)中的溶液脫氣，並且用氮(3 x)回填。將碳酸銫(178mg，0.55mmol)和第三代預催化劑RockPhos(10mg，11μmol)依次地添加。將該懸浮液脫氣，並且用氮氣(3 x)回填，並且然後在90℃下加熱5小時。冷卻後，將該反應物用EtOAc稀釋，並且用水洗滌。將該水層用EtOAc萃取，並且將合併的有機層經硫酸鈉乾燥，過
濾，並且在減壓下濃縮。將所得的粗殘餘物使用而無需進一步純化。m/z：ES+[M+H]+ 565。
實例10
(6S,8R)-7-(2,2-二氟-3-甲氧基丙基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將第三代預催化劑RockPhos(12.76mg，0.01mmol)和碳酸銫(303mg，0.93mmol)添加至(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-(2,2-二氟-3-甲氧基丙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(200mg，0.37mmol)和2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙-1-醇(99mg，0.75mmol)在甲苯(2988μL)的脫氣的溶液中，並且將該反應物加熱至90℃持續5小時。在冷卻之後，將該反應用DCM稀釋並且用水洗滌。將該有機相蒸發，然後溶解於DCM(3mL)中，之後添加三氟乙酸(1.5mL)。將該混合物在室溫下攪拌1小時，然後用DCM稀釋，並且用飽和的NaHCO3溶液洗滌。將各層進行分離，並且將該水相用DCM萃取。將合併的有機相乾燥並且蒸發。將粗產物藉由製備型HPLC(沃特斯Xbridge製備型C18 OBD柱，5μ二氧化矽，30mm直徑，100mm長度)，使用水(包含0.1% NH3)與MeCN的極性遞減混合物作為洗提劑來純化。將含有所希望的化合物的級分蒸乾，以提供呈無色膠狀固體的
(6S,8R)-7-(2,2-二氟-3-甲氧基丙基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(102mg，54%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.12(3H,d),2.68-2.94(5H,m),3.08-3.15(2H,m),3.15-3.23(2H,m),3.38(3H,s),3.46-3.56(3H,m),3.61(1H,q),3.73(1H,dt),3.99(2H,t),4.44(1H,d),4.54(1H,d),5.12(1H,s),6.81(1H,d),7.05(1H,d),7.12(1H,dd),7.26-7.32(1H,m),7.94(1H,d),8.17(1H,d),11.60(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 504。
2,2-二氟-3-(三苯甲氧基)丙-1-醇的製備
將2,2-二氟丙烷-1,3-二醇(2.50g，22.3mmol)溶解於DCM(61.7mL)和THF(15.4mL)中。添加DIPEA(3.93mL，22.3mmol)，隨後添加(氯甲烷三基)三苯(6.22g，22.3mmol)，並且最後添加DMAP(0.288g，2.23mmol)。將該反應加熱至40℃，持續2小時。冷卻後，將該反應物用1N HCl溶液洗滌，然後乾燥並且蒸發。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至25% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將純的級分蒸乾，以提供呈無色固體的2,2-二氟-3-(三苯甲氧基)丙-1-醇(4.43g，56%)。1H NMR(500MHz,CDCl3)3.42(2H,t),3.92(2H,t),7.23-7.30(4H,m),7.30-7.39(6H,m),7.39-7.49(6H,m)。
((2,2-二氟-3-甲氧基丙氧基)甲烷三基)三苯的製備
將氫化鈉(0.562g，14.0mmol)添加至2,2-二氟-3-(三苯甲氧基)丙-1-醇(4.15g，11.7mmol)在THF(46mL)的溶液中，並且將該反應物攪拌
1小時，然後將碘甲烷(0.802mL，12.9mmol)添加在THF(5mL)中。將該反應物再次攪拌1小時。將該反應物用水和鹽水猝滅，然後用EtOAc萃取。將該有機層乾燥，並且蒸發，以提供呈淺黃色油的((2,2-二氟-3-甲氧基丙氧基)甲烷三基)三苯(4.18g，97%)。1H NMR(500MHz,CDCl3)3.36(2H,t),3.40(3H,s),3.77(2H,t),7.15-7.28(3H,m),7.28-7.38(6H,m),7.39-7.47(6H,m)。
2,2-二氟-3-甲氧基丙基三氟甲磺酸酯的製備
將三氟甲磺酸酐(1.918mL，11.40mmol)添加至((2,2-二氟-3-甲氧基丙氧基)甲烷三基)三苯(4.00g，10.9mmol)在DCM(39.6mL)的溶液中。將該反應物攪拌30分鐘，然後添加三乙基矽烷(1.934mL，11.94mmol)，並且將該反應物再次攪拌30分鐘。將該反應物蒸發，並且將三氟甲磺酸酯直接用於下一階段。
(R)-1-(3-溴-2-甲基苯基)丙-2-胺的製備
在-78℃下，將n-BuLi(26.1mL，41.8mmol)逐滴添加至1,3-二溴-2-甲基苯(9.95g，39.8mmol)在THF(100mL)的溶液中。攪拌30分鐘後，將(R)-三級丁基4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-二氧化物(10.39g，43.8mmol)逐份添加，並且將該反應物再次攪拌30分鐘，之後允許加熱至0℃超過30分鐘。添加1N檸檬酸，並且將該混合物攪拌5分鐘，之後用EtOAc(x 2)萃取。將合併的有機相蒸發。在室溫下，將該殘餘物在二
(69.7mL，278.7mmol)
的4M HCl中攪拌1小時，然後將揮發物蒸發。將該殘餘物懸浮於二乙基乙醚中，並且用水(x 2)萃取。將合併的水相藉由添加2N Na2CO3進行鹼化，然後用DCM(x 3)萃取。將合併的有機相經MgSO4乾燥並且濃縮，以提供如黃色油的(R)-1-(3-溴-2-甲基苯基)丙-2-胺(7.55g，83%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,27℃)1.13(3H,d),1.43(2H,s),2.40(3H,s),2.61(1H,dd),2.77(1H,dd),3.14(1H,dq),6.97(1H,t),7.08(1H,d),7.43(1H,d)。m/z(ES+),[M+H]+=228。
(R)-N-(1-(3-溴-2-甲基苯基)丙-2-基)-2,2-二氟-3-甲氧基丙烷-1-胺的製備
將2,2-二氟-3-甲氧基丙基三氟甲磺酸酯(3.03g，11.73mmol)(來自先前步驟的粗產物)添加至(R)-1-(3-溴-2-甲基苯基)丙-2-胺(2.327g，10.2mmol)和DIPEA(2.82mL，16.32mmol)在1,4-二
(34.3mL)的溶液中，並且將該反應物加熱至80℃過夜。冷卻後，將揮發物蒸發，然後將該殘餘物溶解於DCM中，並且用鹽水洗滌。將該有機相乾燥並且蒸發，然後將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至100% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將純的級分蒸乾，以提供呈淺黃色油的(R)-N-(1-(3-溴-2-甲基苯基)丙-2-基)-2,2-二氟-3-甲氧基丙烷-1-胺(2.330g，68%)。1H NMR(500MHz,CDCl3)1.06(3H,d),2.40(3H,s),2.63(1H,dd),2.82(1H,dd),2.86-2.94(1H,m),2.95-3.11(2H,m),3.38(3H,s),3.51-3.63(2H,m),6.94-7(1H,m),7.07(1H,dd),7.4-7.51(1H,m)。m/z：ES+[M+H]+ 336。
(R)-3-(2-((2,2-二氟-3-甲氧基丙基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺的製備
將Pd2(dba)3(0.184g，0.20mmol)和外消旋-BINAP(0.250g，0.40mmol)添加至(R)-N-(1-(3-溴-2-甲基苯基)丙-2-基)-2,2-二氟-3-甲氧基丙烷-1-胺(2.25g，6.69mmol)、二苯甲酮亞胺(1.235mL，7.36mmol)和三級丁醇鈉(0.965g，10.0mmol)在脫氣的甲苯(28.5mL)的懸浮液中，並且將該反應物加熱至90℃持續3小時。冷卻後，大部分甲苯被蒸發，然後將該殘餘物溶解於DCM中，並且用水洗滌。將該水相用DCM萃取，然後將該等有機物蒸發至約50mL體積。添加2N HCl溶液(50mL)，並且將該雙相混合物劇烈攪拌30分鐘。將各層進行分離，然後將該水層用DCM萃取。將該有機相用1N HCl反萃取。將合併的水相藉由添加固體K2CO3進行鹼化，然後用DCM(x 3)萃取，並且將合併的DCM萃取物乾燥並且蒸發，以提供呈淡棕色油的(R)-3-(2-((2,2-二氟-3-甲氧基丙基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺(1.780g，98%)。1H NMR(500MHz,CDCl3)1.06(3H,d),2.11(3H,s),2.59(1H,dd),2.75(1H,dd),2.86-2.94(1H,m),2.94-3.12(2H,m),3.38(3H,s),3.53-3.63(4H,m),6.5-6.68(2H,m),6.86-7.01(1H,m)。m/z：ES+[M+H]+ 273。
(1S,3R)-1-(5-溴吡啶-2-基)-2-(2,2-二氟-3-甲氧基丙基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺的製備
將5-溴吡啶甲醛(1172mg，6.30mmol)添加至(R)-3-(2-((2,2-二氟-3-甲氧基丙基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺(817mg，3.00mmol)在乙酸(14.7mL)和水(270μL，15.0mmol)的溶液中，並且將該反應物加熱至80℃持續2小時。冷卻後，將揮發物在真空下蒸發。將殘餘物溶解於DCM中，並且用飽和的NaHCO3溶液洗滌。將該有機物蒸發至體積約20mL，並且添加2N HCl溶液(20mL)。將該雙相混合物攪拌15分鐘，然後進行分離。將該有機層用水萃取，然後將該水相用DCM反萃取。然後將該水相藉由添加固體K2CO3進行鹼化，然後用DCM萃取。將該有機萃取物乾燥並且蒸發。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至50% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將純度級分蒸乾，以提供呈米色固體的(1S,3R)-1-(5-溴吡啶-2-基)-2-(2,2-二氟-3-甲氧基丙基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(810mg，61%)。1H NMR(500MHz,CDCl3)1.07(3H,d),2.05(3H,s),2.49(1H,d),2.75(2H,dd),3.04-3.17(1H,m),3.30-3.36(1H,m),3.37(3H,s),3.58-3.74(2H,m),4.96(1H,s),6.51(1H,d),6.60(1H,d),7.22(1H,d),7.68(1H,dd),8.55(1H,dd)。m/z：ES+[M+H]+ 440。
(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-(2,2-二氟-3-甲氧基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
在-15℃下，將在水中(0.5mL)的亞硝酸鈉(133mg，1.93mmol)添加至(1S,3R)-1-(5-溴吡啶-2-基)-2-(2,2-二氟-3-甲氧基丙基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-
四氫異喹啉-6-胺(771mg，1.75mmol)在丙酸(5833μL)/水(1167μL)的冷卻溶液中。將該反應物攪拌30分鐘，然後添加已經在乾冰中冷卻的EtOAc(50mL)。將該反應物藉由添加2N Na2CO3猝滅直到鼓泡停止，然後將各層進行分離。將該水層用EtOAc萃取，然後將有機層乾燥並且蒸發。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至50% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將純的級分蒸乾，以提供呈淺黃色固體的(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-(2,2-二氟-3-甲氧基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(460mg，58%)。1H NMR(500MHz,CDCl3)1.14(3H,d),2.81(1H,dd),2.88(1H,dd),3.10-3.26(2H,m),3.38(3H,s),3.46-3.55(1H,m),3.58-3.76(2H,m),5.13(1H,s),6.94(1H,d),7.23(1H,dd),7.29(1H,d),7.72(1H,dd),8.05(1H,d),8.57(1H,dd)。m/z：ES+[M+H]+ 451。
(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-(2,2-二氟-3-甲氧基丙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將3,4-二氫-2H-哌喃(0.114mL，1.25mmol)添加至(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-(2,2-二氟-3-甲氧基丙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(450mg，1.00mmol)和對甲苯磺酸水合物(37.9mg，0.20mmol)在DCM(5mL)的溶液中，並且將該反應物加熱至45℃持續3小時。冷卻後，將該反應物用DCM稀釋，並且用飽和的NaHCO3溶液洗滌。將該有機相乾燥並且蒸發，然後將該粗產物通過矽膠塞(1：1 EtOAc/庚烷)。將該濾液蒸發以提供呈橘色固
體的(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-(2,2-二氟-3-甲氧基丙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-[4,3-f]異喹啉(510mg，9%)(比率吡唑并約為6.5：1的THP位置異構物)。m/z：ES+[M+H]+ 535。
使用與上述的那些方法類似的方法製備實例11-48(下表E)。將用於在實例11-48製備中的另外的中間體描述如下；在實例25-27的製備中使用的中間體
4-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲醛的製備
將甲醇鈉(2.90g，53.76mmol)添加至4-溴-2,6-二氟苯甲醛(9.90g，44.8mmol)在甲醇(90mL)的溶液中，並且將該反應物加熱至回流持續5小時。冷卻後，將揮發物蒸發。將該殘餘物溶解於DCM(300mL)中，並且用1N HCl(300mL)溶液和鹽水洗滌。將該有機相乾燥並且蒸發，然後將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至100% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將純的級分蒸乾，以提供呈無色固體的4-溴-2-氟-6-甲氧基苯甲醛(6.79g，65%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)3.94(3H,s),6.90-7.00(2H,m),10.38(1H,s)。
在實例42的製備中使用的中間體
(6-氯-4-甲氧基吡啶-3-基)甲醇的製備
在-60℃下，將氫化二異丁基鋁(1M在甲苯中；7.60mL，7.60mmol)逐滴添加至甲基6-氯-4-甲氧基煙酸酯(958mg，4.75mmol)在THF(11.4
mL)的冷卻溶液中。將該反應物在該等條件下保持1小時。然後再添加一份氫化二異丁基鋁(0.5當量，2.5mL)，並且將該反應物再次攪拌1小時。將該反應物藉由添加水和EtOAc猝滅。分離各層並將水層用EtOAc萃取。將該合併的有機層用飽和水性氯化鈉洗滌、經硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將所得殘餘物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0到100% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分蒸乾，以提供呈無色固體的6-氯-4-甲氧基煙鹼醛(776mg，94%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)2.14(1H,t),3.92(3H,s),4.67(2H,d),6.83(1H,s),8.19(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 174。
6-氯-4-甲氧基煙鹼醛的製備
將戴斯-馬丁高碘烷(2.08g，4.91mmol)添加至(6-氯-4-甲氧基吡啶-3-基)甲醇(775mg，4.46mmol)在DCM(19.8mL)的溶液中，並且將該反應物在室溫下攪拌1小時。添加水性Na2CO3溶液(2N；20mL)，並且將該雙相混合物在室溫下攪拌10分鐘。將各層進行分離，並且將該水層用DCM萃取。將該合併的有機層用飽和水性氯化鈉洗滌、經硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮。將所得殘餘物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0到50% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分蒸乾，以提供呈無色固體的6-氯-4-甲氧基煙鹼醛(665mg，87%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)4.02(3H,s),6.97(1H,s),8.68(1H,s),10.37(1H,d)。m/z：ES+[M+H]+ 172。
實例49
(6S,8R)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將4M HCl-二
(7.39mL，29.6mmol)添加至(6S,8R)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉和(6S,8R)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(1.66g，2.96mmol)在甲醇(5mL)的攪拌溶液中，並且將該反應混合物在室溫下攪拌16小時。將該混合物在減壓下濃縮，並且將該殘餘物溶解於EtOAc(50mL)和飽和的NaHCO3溶液(50mL)中。將各層進行分離並且將該水層用EtOAc(3 x 50mL)萃取。將合併的有機層乾燥(Na2SO4)，過濾，並在減壓下濃縮，以給出呈淡棕色油的粗產物。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在DCM中，0至10% 1M NH3/MeOH的洗提梯度)進行純化，並且然後藉由手性藉由SFC(Phenomonex Lux C1，30 x 250mm，5微米)用30% MeOH+0.1% NH3/70%超臨界CO2洗提，以提供呈淺黃色泡沫的(6S,8R)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-
基)-8-甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(0.989g，70%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.15(3H,d),2.80-2.93(4H,m),3.01(1H,dq),3.15(2H,t),3.20-3.38(2H,m),3.49(2H,t),3.55-3.64(1H,m),3.98(2H,t),4.50(2H,dd),5.08(1H,s),6.90(1H,d),7.14(1H,dd),7.19(1H,d),7.32(1H,d),8.04(1H,d),8.13-8.20(1H,m),10.16(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 478。
((6S,8R)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉和(6S,8R)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉製備如下；(R)-1-(1H-吲唑-4-基)丙-2-胺的製備
在-78℃下，將n-BuLi(46.9mL，75.00mmol)添加至4-溴-1H-吲唑(5.91g，30mmol)在THF(73.1mL)的溶液中。攪拌10分鐘後，將該反應物加熱至-50℃持續30min，然後冷卻至-78℃。將(R)-三級丁基4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑啉-3-甲酸酯2,2-二氧化物(9.97g，42.0mmol)逐份添加，並且將該反應物攪拌1小時，之後允許加熱至0℃。添加水(100mL)和乙醚(100mL)，並且將該混合物攪拌5分鐘。將各層進行分離，並且將該水相用EtOAc萃取。將合併的有機物用水萃取，然後向合併的水相中添加2N HCl(100mL)。將該溶液用DCM(x 2)萃取，並且將合併的有機物經MgSO4乾燥，過濾並且濃縮，以
提供呈灰白色固體的(R)-三級丁基(1-(1H-吲唑-4-基)丙-2-基)胺基甲酸酯(6.45g，78%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,27℃)1.11(3H,d),1.43(9H,s),2.95(1H,dd),3.24(1H,d),3.98-4.25(1H,m),4.51-4.61(1H,m),6.95(1H,d),7.30(1H,dd),7.39(1H,d),8.23(1H,s)。m/z(ES+)，[M+H]+=276。
(R)-1-(1H-吲唑-4-基)丙-2-胺的製備
將在二
(21.25mL，84.98mmol)中的4M氯化氫添加至三級丁基(R)-(1-(1H-吲唑-4-基)丙-2-基)胺基甲酸酯(2.34g，8.50mmol)，並且將所得的懸浮液攪拌過夜。將該反應物濃縮，並且吸收在甲醇中。將該溶液應用於預濕潤的(甲醇)SCX-2柱體中。將該柱體用甲醇洗滌，並且用在甲醇中的1M氨溶液洗提。將該洗提液濃縮，以給出呈金色膠質的(R)-1-(1H-吲唑-4-基)丙-2-胺(1.20g，81%)。1H NMR(400MHz,CDCl3,27℃)1.20(3H,d),1.79(2H,s),2.87(1H,dd),3.06(1H,dd),3.34-3.45(1H,m),6.91-7.04(1H,m),7.28-7.42(2H,m),8.12(1H,d)。m/z：ES+[M+H]+ 176。
(R)-1-(1H-吲唑-4-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)丙-2-胺的製備
將三氟甲磺酸酐(1.39mL，8.27mmol)添加至2,2,2-三氟乙烷-1-醇(0.57mL，7.88mmol)在DCM(16.6mL)中的冷卻溶液中，隨後添加2,6-二甲基吡啶(1.10mL，9.46mmol)。允許該反應物加熱至室溫，並且攪拌1小
時。將該反應物用2N HCl(20mL)洗滌。將該有機相經MgSO4乾燥並且過濾，以給出直接使用的2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯溶液。向該溶液中添加(R)-1-(1H-吲唑-4-基)丙-2-胺(1.20g，6.85mmol)和N-乙基-N-異丙基丙烷-2-胺(1.67mL，9.59mmol)在1,4-二
(5mL)的溶液。將該反應物在50℃攪拌過夜。在冷卻之後，將該反應用DCM稀釋並且用水洗滌。將該水層用DCM萃取，然後將合併的有機物乾燥(Na2SO4)並且濃縮。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0-50%乙酸乙酯的洗提梯度)進行純化。將純的級分蒸乾，以提供呈無色油的(R)-1-(1H-吲唑-4-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)丙-2-胺(0.890g，50%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.12(3H,d),2.96(1H,dd),3.08(1H,dd),3.13-3.30(3H,m),6.98(1H,dd),7.33(1H,dd),7.39(1H,d),8.12(1H,d),10.26(1H,s)。19F NMR(471MHz,CDCl3,27℃)-71.85(J=9.4)。m/z：ES+[M+H]+ 258。
(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-8-甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
在氮氣下，將三氟乙酸(4.89mL)添加至(R)-1-(1H-吲唑-4-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)丙-2-胺(5.28g，20.5mmol)和5-溴吡啶甲醛(4.20g，22.6mmol)在甲苯(98mL)的溶液中，並且將所得的混合物加熱至90℃，並且在90℃攪拌4小時。將該反應混合物用EtOAc(100mL)稀釋，並且用飽和的NaHCO3水溶液(50mL)、飽和的氯化鈉水溶液(50mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，
過濾，並在減壓下濃縮，以給出呈棕色膠質的粗產物。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至50% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將級分蒸乾，以提供呈米色固體的(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-8-甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(7.69g，88%)。12.5：1順式與反式比率。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.16(3H,d),2.90(1H,dd),2.93-3.03(1H,m),3.23-3.36(2H,m),3.51-3.59(1H,m),5.10(1H,s),6.94(1H,d),7.22-7.25(1H,m),7.39(1H,d),7.75(1H,d),8.06(1H,d),8.56(1H,dd),10.11(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 425。
(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉化合物和(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將3,4-二氫-2H-哌喃(0.64mL，7.05mmol)添加至(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-8-甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(2.00g，4.70mmol)和對甲苯磺酸一水合物(0.18g，0.94mmol)在DCM(7.2mL)的攪拌溶液中，並且將該反應混合物加熱至回流，並且在回流下攪拌3小時。冷卻後，將該反應物用DCM(25mL)稀釋，用飽和的NaHCO3水溶液(10mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾，並在減壓下濃縮。將該粗產物藉由快速矽膠層
析(在庚烷中0至50% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將含有級分的產物蒸乾，以提供呈黃色膠質的(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-2H-吡唑并[4,3-f]異喹啉化合物和(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(2.11g，88%)的混合物。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.14(3H,d),1.55(1H,s),1.60-1.88(2H,m),2.00-2.19(2H,m),2.51-2.63(1H,m),2.88(1H,dd),2.92-3.05(1H,m),3.29(2H,ddd),3.47-3.59(1H,m),3.67-3.79(1H,m),4.02(1H,d),5.08(1H,s),5.67(1H,dt),6.92(1H,t),7.28-7.38(2H,m),7.72(1H,ddd),8.01(1H,t),8.52-8.58(1H,m)。m/z：ES+[M+H]+ 509。
(6S,8R)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉和(6S,8R)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
在氮氣下，將第三代RockPhos(0.35g，0.41mmol)添加至6-(5-溴吡啶-2-基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-2H-
吡唑并[4,3-f]異喹啉化合物與(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(2.11g，4.14mmol)、2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙-1-醇(1.10g，8.28mmol)和碳酸銫(3.37g，10.36mmol)在甲苯(41mL)的脫氣混合物中。將該反應混合物加熱至90℃，並且在90℃下攪拌16小時。允許該反應混合物冷卻至室溫，並且將該等固體通過CeliteTM過濾掉，用EtOAc(10mL)洗滌。將該濾液在減壓下濃縮，以給出呈棕色膠質的粗產物，將該粗產物藉由快速矽膠層析(在DCM中0至5% 1M NH3/MeOH的洗提梯度)進行純化。將含有該產物的級分合併，以提供呈黃色膠質的(6S,8R)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-2-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉和(6S,8R)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(1.66g，71%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.12(3H,d),1.60-1.69(1H,m),1.69-1.79(2H,m),2.00-2.09(1H,m),2.10-2.19(1H,m),2.50-2.62(1H,m),2.81-2.91(4H,m),2.94-3.05(1H,m),3.14(2H,t),3.19-3.39(2H,m),3.46-3.50(2H,m),3.54-3.64(1H,m),3.66-3.77(1H,m),3.95-4.05(3H,m),4.51(2H,ddd),5.06(1H,s),5.66(1H,dt),6.89(1H,dd),7.10-7.15(1H,m),7.23-7.31(2H,m),8.00(1H,d),8.14-8.20(1H,m)。m/z：ES+[M+H]+ 562。
實例50
(6S,8R)-6-(3-氟-5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙-1-醇(106mg，0.80mmol)在甲苯(3.30mL)的溶液添加至含有(6S,8R)-6-(5-溴-3-氟吡啶-2-基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(210mg，0.40mmol)和碳酸銫(324mg，1.00mmol)的燒瓶中。將該反應物藉由灌輸氮氣流脫氣5分鐘，隨後向該反應混合物中添加第三代RockPhos催化劑(16.70mg，0.02mmol)。將該反應混合物加熱至90℃持續4小時。冷卻後，將該反應物用EtOAc(5mL)稀釋，並且用水洗滌(5mL)。將該水層用EtOAc(3 x 5mL)萃取，然後將合併的有機物經MgSO4乾燥，過濾並且蒸發。將該粗殘餘物溶解於MeOH(4mL)中，並且添加在二
(1mL)中的4.0M HCl。將該反應物在室溫下攪拌16小時。將該反應物用DCM(5mL)稀釋，並且藉由添加飽和的NaHCO3水溶液(10mL)進行鹼化。將各層進行分離，並且將該水層用DCM(3 x 10mL)進行萃取。將合併的有機物經MgSO4乾燥，過濾，並且蒸發。將粗產物藉由製備型HPLC(沃特斯(Waters)XSelect CSH C18柱，5μ矽膠，30mm直徑，100mm長度)，使用水(含有1% NH3)與MeCN的極性遞減混合物作為洗提劑來純化。將含有所希望的化合物的級分蒸乾，以提供呈黃色膠質的(6S,8R)-6-(3-氟-5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(73.0mg，
37%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.15(d,3H),2.62(s,2H),2.80-2.92(m,2H),2.95-3.06(m,1H),3.14(dd,2H),3.22-3.30(m,2H),3.48(td,2H),3.70-3.80(m,1H),3.92-4.02(m,2H),4.45(d,1H),4.54(d,1H),5.38(s,1H),6.80(d,1H),6.94(dd,1H),7.15-7.20(m,1H),8.00(d,1H),8.05(d,1H),10.21(s,1H)。m/z：ES+[M+H]+ 496。
(6S,8R)-6-(5-溴-3-氟吡啶-2-基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉製備如下；(6S,8R)-6-(5-溴-3-氟吡啶-2-基)-8-甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將三氟乙酸(2.13mL)添加至(R)-1-(1H-吲唑-4-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)丙-2-胺(1.15g，4.47mmol)和5-溴-3-氟吡啶甲醛(912mg，4.47mmol)在甲苯(43mL)的溶液中，並且將所得的混合物在100℃下攪拌30分鐘。將該反應物冷卻至室溫並且蒸發，然後將該殘餘物在DCM(20mL)和水性2M NaOH(20mL)之間分配。將各層分離，並且將該有機層經MgSO4乾燥，過濾並且蒸發。將該粗產物藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至40% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將含有產物的級分合併，並且濃縮至乾燥，以提供呈黃色固體的(6S,8R)-6-(5-溴-3-氟吡啶-2-基)-8-甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(1149mg，58%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.16(d,3H),
2.86(dd,1H),3.01(dq,1H),3.19-3.35(m,2H),3.68-3.78(m,1H),5.42(s,1H),6.80(d,1H),7.20(d,1H),7.59(dd,1H),8.05(d,1H),8.27-8.50(m,1H)。m/z：ES+[M+H]+ 443。
(6S,8R)-6-(5-溴-3-氟吡啶-2-基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將4-甲基苯磺酸水合物(9.87mg，0.05mmol)添加至(6S,8R)-6-(5-溴-3-氟吡啶-2-基)-8-甲基-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(230mg，0.52mmol)和3,4-二氫-2H-哌喃(0.142mL，1.56mmol)在DCM(10mL)的溶液中，並且將該混合物在40℃加熱2小時。將該反應混合物用DCM(20mL)稀釋，並且用2M水性NaOH(30mL)洗滌。將該有機相蒸發為深棕色油，將該深棕色油藉由快速矽膠層析(在庚烷中0至40% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將純的級分蒸乾，以提供呈黃色膠質的(6S,8R)-6-(5-溴-3-氟吡啶-2-基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-7-(2,2,2-三氟乙基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(212mg，77%)。1H NMR(500MHz,CDCl3,27℃)1.13(d,3H),1.59-1.84(m,3H),1.97-2.09(m,1H),2.14(dd,1H),2.44-2.65(m,1H),2.78-2.91(m,1H),2.91-3.08(m,1H),3.15-3.39(m,2H),3.62-3.82(m,2H),4.02(d,1H),5.39(s,1H),5.67(ddd,1H),6.81(dd,1H),7.33(dd,1H),7.56(ddd,1H),8.03(dd,1H),8.34(d,1H)。m/z：ES+[M+H]+ 527。
實例51
(6S,8R)-7-(2,2-二氟乙基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將在甲苯(5mL)中的(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(120mg，0.24mmol)溶液在減壓下共沸點地乾燥，並且然後再溶解於含有2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙-1-醇(65mg，0.49mmol)的甲苯(5mL)中。將該溶液藉由灌輸氮氣流脫氣5分鐘。將碳酸銫(199mg,0.61mmol)和第三代預催化劑RockPhos(10mg，0.01mmol)順序地添加，並且將該反應混合物在90℃加熱2小時。然後將該反應混合物用水稀釋，並且用乙酸乙酯萃取。將該有機層經硫酸鈉進行乾燥，過濾並且在減壓下濃縮。將在二
(4M；0.20mL，0.78mmol)中的HCl添加至所得的殘餘物在MeOH(2mL)的溶液中，並且將該新溶液在室溫下攪拌5小時。將該反應物在減壓下濃縮，並且將該新殘餘物藉由反相HPLC(Teledyne ISCO C18 RediSep ® Rf Gold® 40g柱)，在含有0.1%氫氧化銨(pH 10)的水中用0至80%的乙腈洗提來進行純化。將產物級分在減壓下濃縮，以提供呈淺黃色固體的(6S,8R)-7-(2,2-二氟乙基)-6-(5-(2-(3-(氟甲基)氮雜環丁烷-1-基)乙氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(46mg，64%)。
1H NMR(DMSO-d6,27℃)1.06(3H,d),2.57-2.78(4H,m),2.87(1H,dd),2.99(2H,t),3.04-3.22(2H,m),3.26-3.30(2H,m，遮蔽的)，3.41-3.57(1H,m),3.96(2H,t),4.49(2H,dd),4.99(1H,s),5.90(1H,tt),6.77(1H,d),7.21(2H,d),7.26-7.35(1H,m),8.06(1H,s),8.14(1H,d),12.97(1H,s)m/z：ES+[M+H]+ 460。
用於製備起始材料(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的程序描述如下。
(1S,3R)-1-(5-溴吡啶-2-基)-2-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺的製備
將5-溴吡啶甲醛(2.74g，14.72mmol)添加至(R)-3-(2-((2,2-二氟乙基)胺基)丙基)-2-甲基苯胺(1.6g，7.01mmol)在乙酸(34.4mL)和水(0.631mL，35.04mmol)的溶液中，並且將該反應物在80℃下加熱3小時。將溶劑在真空下去除，並且將所得的殘餘物溶解於甲醇中。添加乙酸鈉(1.15g，14.0mmol)和鹽酸羥胺(0.73g，11mmol)，並且將該反應物在室溫下攪拌3小時。將甲醇在真空下去除，並且將所得的殘餘物吸收於水。添加飽和的NaHCO3水溶液，並且將該混合物用乙酸乙酯萃取。將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中的0至95% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分在減壓下濃縮，以提供呈無色膠質的(1S,3R)-1-(5-溴吡啶-2-基)-2-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(1.35g，
49%)。1H NMR(DMSO-d 6 ,27℃)1.01(3H,d),1.94(3H,s),2.39-2.64(2H,m，遮蔽的)，2.74(1H,dd),2.91-3.14(1H,m),3.23-3.33(1H,m，遮蔽的)，4.66(2H,s),4.81(1H,s),5.93(1H,tt),6.40(2H,s),7.23(1H,d),7.92(1H,dd),8.57(1H,d)。m/z：ES+[M+H]+ 396。
(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
在-10℃(冰/鹽浴)下，將在水中(0.43mL)的亞硝酸鈉(87mg，1.3mmol)溶液逐滴添加至(1S,3R)-1-(5-溴吡啶-2-基)-2-(2,2-二氟乙基)-3,5-二甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺(500mg，1.26mmol)在丙酸(4.3mL)的冷卻溶液中，同時劇烈攪拌。20分鐘後，將該反應物用冷的(0℃)乙酸乙酯(10mL)稀釋，並且用緩慢添加冰冷的飽和NaHCO3水溶液(10mL)超過15分鐘進行猝滅，同時保持0℃的反應溫度。然後允許該反應混合物加熱至室溫超過2小時，同時攪拌。將各層分離，並且將該水層用乙酸乙酯進行萃取。將合併的有機層經Na2SO4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中的0至60% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分在減壓下濃縮，以提供呈棕色泡沫的(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(253mg，49%)。1H NMR(DMSO-d 6 ,27℃)1.08(3H,d),2.54-2.77(1H,m),2.89(1H,dd),3.04-3.24(2H,m),3.36-3.53(1H,
m),5.05(1H,s),6.00(1H,tt),6.83(1H,d),7.25(1H,d),7.35(1H,d),7.97(1H,dd),8.08(1H,s),8.59(1H,d),12.99(1H,s)。m/z：ES+[M+H]+ 407
(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉的製備
將4-甲基苯磺酸水合物(12mg，0.060mmol)添加至(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(260mg，0.64mmol)和3,4-二氫-2H-哌喃(0.284mL，3.19mmol)在DCM(5mL)的攪拌溶液中。將該反應物加熱至50℃，並且保持在該等條件下持續24h。將該反應物用水和飽和的NaHCO3水溶液稀釋。將該混合物用乙酸乙酯萃取。將該有機層經Na2SO4乾燥，過濾，並且在減壓下濃縮。將所得的殘餘物藉由快速矽膠層析(在己烷中的0至80% EtOAc的洗提梯度)進行純化。將產物級分在減壓下濃縮，以提供呈橘色泡沫的(6S,8R)-6-(5-溴吡啶-2-基)-7-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基)-6,7,8,9-四氫-3H-吡唑并[4,3-f]異喹啉(243mg，77%)。m/z：ES+[M+H]+ 491。
Claims (12)
- 一種具有化學式(I)之化合物：
- 如申請專利範圍第1項所述之具有化學式(I)之化合物，其中X係O並且R12係H。
- 如申請專利範圍第1項或申請專利範圍第2項所述之具有化學式(IA)之化合物：
- 如前述申請專利範圍中任一項所述之具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R4係氫。
- 如前述申請專利範圍中任一項所述之具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R10係氫。
- 如前述申請專利範圍中任一項所述之具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中具有化學式(I)之化合物中的基團-CH2-C(R7)(R8)(R9)選自由以下各項組成之群組：
- 如前述申請專利範圍中任一項所述之具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於用作藥劑。
- 如申請專利範圍第1至6項中任一項所述之具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在預防或治療例如人類的溫血動物的癌症中使用。
- 如申請專利範圍第1至6項中任一項所述之具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在治療乳癌或婦科癌症中使用。
- 一種用於預防或治療需要此類治療的例如人類的溫血動物中癌症之方法，該方法包括向所述動物給予有效量的如申請專利範圍第1至6項中任一項所述之具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。
- 一種醫藥組成物，包括如申請專利範圍第1至6項中任一項所述之具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的賦形劑。
- 一種適用於治療癌症之組合，該組合包括如申請專利範圍第1至6項中任一項所述之具有化學式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽，以及另一種抗腫瘤劑。
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