TW201215618A

TW201215618A - Antibody compositions and methods of use

Info

Publication number: TW201215618A
Application number: TW100135366A
Authority: TW
Inventors: xiao-cheng Chen; Mark S Dennis; Becket L Feierbach; Ashley E Fouts; Isidro Hotzel; Bing Li
Original assignee: Genentech Inc
Priority date: 2010-09-29
Filing date: 2011-09-29
Publication date: 2012-04-16

Description

201215618 扣六、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明係關於抗複合物I及抗gH抗體及其使用方法。相關申請案本申請案主張均於2010年9月29曰申請之美國臨時申請案第61/387,735號及第61/387,725號以及於2011年7月1曰申請之美國臨時申請案第61/504,056號之權益，該等臨時申請案皆以全文引用的方式併入本文中。 ^ 對作為正文檔案經由EFS網提交之序列表的引用序列表作為ASCII格式化正文檔案經由EFS網與說明書一起同時提交，槽案名稱為「P4680Rl_Sequence Listing.TXT」，創建曰期為2011年9月一，且大小為39.9千位元組。經由EFS網提交之序列表為說明書之一部分且據此以全文引用的方式併入本文中。【先前技術】人類細胞巨大病毒（Human cytomegalovirus，HCMV)為鲁 β-疮療病毒（herpesvirus)且亦稱為人類疮修病毒-5(HHV-5)。存在其他種類之會感染其他哺乳動物之細胞巨大病毒 (CMV)，諸如鼠類 CMV(MCMV)、天竺鼠（guinea pig)CMV(GPCMV)、猿 CMV(SCCMV)、恆河猴 (rhesus)CMV(rhCMV)及黑猩猩 CMV(CCMV)。HCMV 為一種感染接近50%美國人口之常見疱疹病毒。對於絕大多數人類受感染個體而言，HCMV感染無症狀。然而，在疾病及免疫抑制（例如HIV感染、移植患者中由藥物誘發之免疫 158864.doc 201215618 抑制）之情況下，HCMV再活化或原發性感染會導致多種臨床表現，諸如單核白血球增多症（mononucleosis)、肝炎、視網膜炎、肺炎、失明及器官衰竭。此外，在妊娠背景下，獲得原發性CMV感染儘管對母親影響很小，但會在發育胎兒中具有嚴重臨床影響。先天性HCMV感染具有特別重要性，因為由在妊娠期間受感染之母親所生之許多小孩會在子宮内受感染且會罹患破壞性臨床疾病。在美國及歐洲，12 6,0 0 0名婦女在姓娠期間患有原發性HCMV感染且由此等母親所生之約40,000 名嬰兒患有先天性感染。在美國，歸因於HCMV感染， 750名小孩中即有1名生來具有或顯現殘疾，包括：智力遲鈍、聽力喪失、視力喪失、器官缺陷及生長缺陷。先天性 HCMV感染為胎兒畸形之最常見的感染性病因。在孕婦已出現原發性感染之後，當前無核准療法可用於預防或治療胎兒感染。因此，此項技術中極其需要發現能預防先天性 HCMV感染之組合物及方法。在2005年，Nigro及同事公開一項向患有原發性HCMV感染之孕婦投與人類CMV高免疫球蛋白（HIG)的研究（Nigro 等人，（2005) TVew Eng/· «/· 353:1350-1362)。在該研究之一臂中，31名由受HCMV感染之母親所生之嬰兒中僅有 1名生來患有疾病，而7/14(50%)的由未經治療之婦女所生之小孩生來患有HCMV疾病。同上文。在妊娠期間，HCMV會經由胎盤自受感染之母親向胎兒擴散。使胎兒錨定於子宮之胎盤含有特殊化上皮細胞、基 158864.doc 201215618 質纖維母細胞、内皮細胞及特殊化巨嗟細胞。HCMV病毒表面含有各種病毒醣蛋白複合物，其已顯示為胎盤中所見之特定細胞類型之感染所需。含有gH/gL與UL128、UL130 及UL131之CMV醣蛋白複合物（在本文中稱為「複合物I」）特定地為感染内皮細胞、上皮細胞及巨噬細胞所需。含有 gH/gL與gO之CMV醣蛋白複合物（在本文中稱為「複合物 II」）特定地為感染纖維母細胞所需。HIG已顯示會阻斷病毒進入易受HCMV感染之所有4種胎盤細胞中。 φ 由於製備及廣泛分配HIG存在困難以及醫師及醫學團體反對特定言之在孕婦中使用人類血液產品，產生包含可保護胎兒免遭先天性HCMV感染之一或多種單株抗體之組合物將最為有益。迄今尚未開發出單株抗體組合物可用於預防CMV之母體-胎兒傳播。Lanzavecchia及Macagno已揭示自受感染患者之永生化B細胞分離的天然產生之抗體，其與由UL130與UL13 1之組合、或UL128、UL130及UL131之組合產生之構形抗原決定基結合且中和CMV傳播（美國專 # 利公開案第 2008/0213265 號及第 2009/0081230號）。Shenk 及Wang已揭示與複合物I之蛋白質結合之抗體（美國專利第 7,7〇4,510號）。Funaro等人亦在美國專利公開案第2010-0040602號中揭示CMV之中和抗體。另外，在2個患者群體 (同種異體骨髓移植接受者及患有AIDS及CMV視網膜炎之患者）之人類中測試抗gH單株抗體MSL-109 (Drobyski等人， 51:1 190-1 196 (1991) ; Boeckh 等人， 5/ood Marrow 7>α/?5^/α«ί· 7:343-351 (2001);及 Borucki 等 158864.doc 201215618 人64:103-111 (2004))，未獲成功。此項技術中仍然需要開發用於預防HCMV感染’包括先天性HCMV感染之單株抗體。【發明内容】本發明提供與HCMV複合物I特異性結合之經分離抗體。在某些實施例中，本發明之抗複合物I抗體包含6個HVR : ⑷包含胺基酸序列SEQ ID ΝΟ:6之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之HVR-H2 ; (c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之HVR-H3 ; (d)包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之 HVR-L1 ; (e)包含選自由SEQ ID N〇:10-19組成之群之胺基酸序列的HVR-L2 ;及（f)包含胺基酸序列SEQ ID NO:20之 HVR-L3。該等抗體可進一步包含含有胺基酸序列SEQ ID NO:43之輕鏈可變域構架FR1及含有胺基酸序列SEQ ID NO:44之FR2在其他實施例中，本發明之抗複合物I抗體包含3個重鏈高變區（HVR-H1、HVR-H2及HVR-H3)及3個輕鏈高變區（HVR-L1、HVR-L2及 HVR-L3)，其中：（a) HVR-H1包含胺基酸序列SEQ ID NO:6 ; (b) HVR-H2包含胺基酸序列SEQ ID NO:7 ; (c) HVR-H3包含胺基酸序列SEQ ID NO:8 ; (d) HVR-L1 包含胺基酸序列 SEQ ID NO:9 ; (f) HVR-L3包含胺基酸序列SEQ ID NO:20;且（e) HVR-L2及輕鏈可變域構架FR3之第一胺基酸包含胺基酸序列SEQ ID NO:21。

在特定實施例中，抗複合物I抗體包含（a) VH，其包含胺基酸序列 SEQ ID NO:45 或 SEQ ID NO:46 或 SEQ ID 158864.doc -6- 201215618 NO:47 ;及（b) VL，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:48或SEQ ID NO:49。此等抗體可進一步包含含有胺基酸序列SEQ ID NO:41之輕鏈可變域構架FR3及含有胺基酸序列SEQ ID NO:42之FR4。在一些實施例中，抗複合物I抗體包含與胺基酸序列SEQ ID NO:45 或 SEQ ID NO:46 或 SEQ ID NO:47具有至少 95%序列一致性之VH序列及與胺基酸序列SEQ ID NO:48或SEQ ID NO:49具有至少95%序列一致性之VL序列。在一些實施例中，抗體包含含有胺基酸序列SEQ ID NO:45或SEQ ID NO:46或SEQ ID NO:47之VH。在一些實施例中，抗複合物 I抗體包含含有胺基酸序列SEQ ID NO:48或SEQ ID NO:49 之VL。在一些實施例中，抗複合物I抗體包含VH序列SEQ ID NO:45 或 SEQ ID >10:46及 VL序列 SEQ ID NO:49。本發明亦提供與HCMV gH特異性結合之經分離抗體。在一些實施例中，本發明之抗gH抗體包含3個重鏈高變區（HVR-H1、HVR-H2及HVR-H3)及3個輕鏈高變區（HVR-Ll、HVR-L2 及 HVR-L3)，其中： (a) HVR-H1包含胺基酸序列SEQ ID NO:71 ; (b) HVR-H2 包含選自 SEQ ID N〇:72、SEQ ID NO:73、 8£卩10>^0:74及8£(^10]^0:93之胺基酸序列； (c) HVR-H3包含胺基酸序列SEQ ID NO:75 ; (d) HVR-L1包含胺基酸序列SEQ ID NO:76 ; (e) HVR-L2包含胺基酸序列SEQ ID NO:77 ;且 (f) HVR-L3包含胺基酸序列SEQ ID NO:78。 158864.doc 201215618 在一些實施例中，抗gH抗體包含含有胺基酸序列SEQ ID NO:93之HVR-H2，其中在SEQ ID NO:93之位置6處之胺基酸係選自由Ser、Thr、Asn、Gin、Phe ' Met及Leu組成之群，且在SEQ ID NO:93之位置8處之胺基酸係選自由Thr 及Arg組成之群。在某些實施例中，抗gH抗體包含含有胺基酸序列SEQ ID NO:72、SEQ ID NO:73 或 SEQ ID NO:74之HVR-H2。在其他實施例中，抗gH抗體包含含有胺基酸序列SEQ ID NO:94之HVR-H2，其中該序列在（SEQ ID NO:94之）位置 54處包含選自由 Ser、Thr、Asn、Gin、Phe、Met及 Leu 組成之群之胺基酸。在一些實施例中，該抗體進一步在位置56處包含選自由Thr及Arg組成之群之胺基酸。本發明亦提供具有胺基酸序列與SEQ ID NO:94至少95% 一致之VH序列的抗gH抗體，其中該序列包含胺基酸 Asn54、Ser54、Thr54、Gln54、Phe54、Met54 或 Leu54及 / 或Arg56 ^在某些實施例中，抗體包含含有選自SEQ ID NO:87、SEQ ID NO:88 及 SEQ ID NO:89 之胺基酸序列之 VH。在一些實施例中，VH包含與SEQ ID NO:94 95%—致之胺基酸序列，其中該序列在位置54處含有選自Asn54、 Ser54、Thr54、Gln54、Phe54、Met54 或 Leu54 之胺基酸及 / 或在位置56處含有Arg(Arg56);且（b)VL序列與胺基酸序列SEQ ID NO:90具有至少95%序列一致性。在某些實施例中，VH 包含選自 SEQ ID NO:87、SEQ ID NO:88 及 SEQ ID NO:89之胺基酸序列。在一些實施例中，VL包含胺基酸序 158864.doc 201215618 列SEQ ID NO:90。在某些實施例中，抗體包含VH序列 SEQIDNO:89及VL序列SEQIDNO:90。

在某些實施例中，本發明抗體與HCMV表面上之HCMV 複合物I特異性結合且中和HCMV，EC90為0.1 pg/ml或0.1 pg/ml以下。在某些實施例中，本發明之經分離抗複合物I 抗體與HCMV表面上之HCMV複合物I特異性結合且在以下抗體濃度下中和 50%之HCMV : 0.05 pg/ml、0·02 pg/ml、 0.015 pg/ml、0_014 pg/ml、0.013 pg/ml、0.012 pg/ml、 0.011 pg/ml、0.010 pg/ml、0_009 pg/ml、0.008 pg/ml、 0.007 pg/ml、0.006 pg/ml、0.005 pg/ml、0.004 pg/ml、 0.003 pg/ml、0.002 pg/ml、0.001 pg/ml、0.0009 pg/ml、 0.0008 pg/ml、0.0007 pg/ml或0.0007 pg/ml以下（例如在 10-8M、 ΙΟ·9 Μ、ΙΟ·10 Μ、ΙΟ·11 Μ、ΙΟ·12 Μ、ΙΟ.13 M或 ΙΟ·13 M以下之抗體漠度下）。在某些實施例中，本發明之經分離抗gH抗體與HCMV gH特異性結合。該等抗體與HCMV表面上之gH結合且中和 HCMV，EC90為1 pg/ml或1 pg/ml以下。本發明之經分離抗gH抗體與HCMV表面上之gH結合且在以下抗體濃度下中和 50% 之 HCMV : 0· 1 pg/ml、0.09 pg/ml、0·08 pg/ml、 0.07 pg/ml、0.06 pg/ml、0.05 pg/ml、0.04 pg/ml、0.03 pg/ml、0.02 pg/ml、0.015 pg/ml、0.014 pg/ml、0.013 pg/ml、0.012 pg/ml、0.011 pg/ml、0.010 pg/ml、0.009 pg/ml、0.008 pg/ml、0.007 pg/ml、0.006 pg/ml、0.005 pg/ml、0.004 pg/ml、0.003 pg/ml、0.002 pg/ml、0.001 158864.doc • 9- 201215618 pg/ml 或 0.001 pg/ml 以下（例如在 1〇_8 μ、1(Τ9 Μ、ΙΟ·10 Μ、 10·11 Μ、ΙΟ·12 Μ、10·13 Μ或 ΙΟ·13 Μ以下之抗體濃度下）。本發明抗體可為單株抗體，包括例如人類抗體、人類化抗體或嵌合抗體。本發明亦提供特異性結合HCMV gH及/ 或複合物I之抗體片段。在特定實施例中’特異性結合HCMV複合物I及/或gH之抗體為全長IgGl抗體。本發明亦提供編碼特異性結合HCMV複合物I及/或gH之抗體的經分離核酸。本發明亦提供包含編碼此等抗體之核酸之宿主細胞。本發明進一步提供一種產生抗體之方法，其包含培養含有編碼特異性結合複合物〗及/或之抗體之核酸的宿主細胞以便產生該抗體。該方法可進一步包含自該宿主細胞回收該抗體。本發明亦提供一種包含抗複合物〗抗體、或抗gH抗體、或抗複合物I抗體與抗gH抗體之組合及醫藥學上可接受之載劑的醫藥調配物。各抗體之醫藥調配物可為單獨的或經組合。醫藥調配物可進一步包含另一治療劑（例如更昔洛早（ganciclovir)、佛斯卡耐特（f〇scarnet)、顯更昔洛韋 (valganciclovir)及西多福韋（cid〇f〇vir))。本發明亦提供包含抗複合物〗抗體、或抗gH抗體、或抗複合物I抗體與抗gH抗體之組合的組合物。包含各抗體之組合物可為單獨的或經組合。組合物可進一步包含另一治療劑（例如更昔洛韋、佛斯卡耐特、纈更昔洛韋及西多= 158864.doc 201215618 韋）。本發明亦提供用於抑制、治療或預防HCMV感染之包含抗複合物I抗體及/或抗gH抗體之組合物。在一些實施例中，其係用於抑制、治療或預防先天性HCMV感染或所移植組織、器官或供體受或已受HCMV感染之組織或器官移植接受者之HCMV感染。其他實施例包括用於先前已受 HCMV感染且處於再活化風險中之移植接受者。在某些實施例中，組織或器官移植接受者呈HCMV感染血清陰性。在某些實施例中，包含結合HCMV gH之抗體之組合物與包含結合HCMV複合物I之抗體之組合物分開。包含本發明抗體之組合物亦可用於製造藥劑。該藥劑可用於治療、抑制或預防HCMV感染，諸如抑制、預防或治療先天性HCMV感染或所移植器官、組織或供體受或已受 HCMV感染之器官或組織移植接受者之HCMV感染。在其他實施例中，移植接受者先前已受HCMV感染且處於再活化風險中。在某些實施例中，藥劑可進一步包含另一治療劑（例如更昔洛韋、佛斯卡耐特、纈更昔洛韋及西多福韋）。在某些實施例中，器官或組織移植接受者呈HCMV感染血清陰性。在某些實施例中，包含結合HCMV gH之抗體之組合物係呈與結合HCMV複合物I之抗體分開的組合物形式。本發明亦提供一種治療、抑制或預防HCMV感染之方法，其包含投與患者有效量之包含抗gH抗體、抗複合物I 抗體或其組合之組合物。本發明亦提供一種治療、抑制或 158864.doc 11 3 201215618 預防先天性HCMV感染之方法，其包含投與孕婦有效量之包含本發明抗體或其組合之組合物。本發明亦提供一種治療受HCMV感染之胎兒之方法，其包含投與孕婦有效量之包含本發明抗體或其組合之組合物。本發明亦提供一種治療受HCMV感染之嬰兒或在妊娠期間暴露於HCMV之嬰兒的方法，其包含投與該嬰兒有效量之包含本發明抗體或其組合之組合物。本發明亦提供一種治療、抑制或預防器官或組織移植接受者之HCMV感染之方法，其包含投與該移植器官或組織接受者有效量之包含本發明抗體或其組合之組合物以治療、抑制或預防起因於自受或已受HCMV感染之器官供體或組織供體獲得之器官或組織的HCMV感染。其他實施例包括移植接受者先前已受HCMV感染且處於再活化風險中時所用之方法。治療方法可進一步包含投與患者另一治療劑（例如更昔洛韋、佛斯卡耐特、纈更昔洛韋及西多福韋）。在某些實施例中，包含結合HCMV gH之抗體之組合物係呈與包含結合HCMV複合物I之抗體之組合物分開的組合物形式。在其他實施例中，包含結合HCMV gH之抗體之組合物與包含結合HCMV複合物I之抗體之組合物同時、在其之前或在其之後投與。本發明亦提供一種用於抑制、治療或預防HCMV感染之抗複合物I抗體及/或抗gH抗體。在一些實施例中，其係用於抑制、治療或預防先天性HCMV感染或所移植組織、器 158864.doc •12- 201215618 官或供體受或已受HCMV感染之組織或器官移植接受者之 HCMV感染。其他實施例包括用於先前已受HCMV感染且處於再活化風險中之移植接受者。在某些實施例中，組織或器官移植接受者呈HCMV感染血清陰性。本發明抗體可用於製造藥劑。該藥劑可用於治療、抑制或預防HCMV感染，諸如抑制、預防或治療先天性HCMV 感染或所移植器官、組織或供體受或已受HCMV感染之器官或組織移植接受者之HCMV感染。在其他實施例中，移植接受者先前已受HCMV感染且處於再活化風險中。在某些實施例中，藥劑可進一步包含另一治療劑（例如更昔洛韋、佛斯卡耐特、纈更昔洛韋及西多福韋）。在某些實施例中，器官或組織移植接受者呈HCMV感染血清陰性。本發明亦提供一種治療、抑制或預防HCMV感染之方法，其包含投與患者有效量之抗gH抗體、抗複合物I抗體或其組合。本發明亦提供一種治療、抑制或預防先天性 HCMV感染之方法，其包含投與孕婦有效量之本發明抗體或其組合。本發明亦提供一種治療受HCMV感染之胎兒之方法，其包含投與孕婦有效量之本發明抗體或其組合。本發明亦提供一種治療、抑制或預防器官或組織移植接受者之HCMV感染之方法，其包含投與該移植器官或組織接受者有效量之本發明抗體或其組合以治療、抑制或預防起因於自受或已受HCMV感染之器官供體或組織供體獲得之器官或組織的HCMV感染。其他實施例包括移植接受者先前已受HCMV感染且處於再活化風險中時所用之方法。 158864.doc -13- 201215618 治療方法可進一步包含投與患者另一治療劑（例如更昔洛韋、佛斯卡耐特、纈更昔洛韋及西多福韋）。在某些實施例中，結合HCMV gH之抗體與結合HCMV複合物I之抗體分開投與。在其他實施例中，結合HCMV gH 之抗體與結合HCMV複合物I之抗體同時、在其之前或在其之後投與。在某些實施例中，器官移植物為心臟、腎、肝、肺、胰臟、腸或胸腺。在其他實施例中，組織移植物為手、角膜、皮膚、臉、蘭氏小島（islets of langerhans)、骨髓、幹細胞、全血、血小板、血清、血球、血管 '心瓣膜（heart valve)、骨、骨祖細胞、軟骨、韋刃帶、腱、肌肉内襯 (muscle lining) 〇本發明亦提供與本發明之抗gH抗體及/或抗複合物I抗體結合相同抗原決定基之抗體。其他實施例包括與HCMV gH之抗原決定基結合之抗體，該抗原決定基包含對應於選自由以下組成之群之胺基酸的胺基酸：在SEQ ID NO: 1之位置168處之色胺酸；在SEQ ID ΝΟ:1之位置446處之天冬胺酸；在SEQ ID ΝΟ:1之位置171處之脯胺酸；及其組合。其他實施例包括與HCMV複合物I之抗原決定基結合之抗體，該抗原決定基包含對應於選自由以下組成之群之胺基酸的胺基酸：在SEQ ID NO:203之位置47處之麩醯胺酸； (ii)在SEQ ID NO:203之位置51處之離胺酸；（iii)在SEQ ID NO:203之位置46處之天冬胺酸；及（iv)其組合。其他實施例包括與HCMV複合物I之多肽結合之抗體，其中該多肽包 158864.doc -14- 201215618 含胺基酸序列 sralpdqtrykyVEqLVdLT lnyhydas (SEQ ID NO:194)。【貫施方式】 I.定義出於本文中之目的，「接受體人類構架」為包含源於人類免疫球蛋白構架或人類共同構架（如下文所定義）之輕鏈可變域（VL)構架或重鏈可變域（VH)構架之胺基酸序列的構架。「源於」人類免疫球蛋白構架或人類共同構架之接受 ® 體人類構架可包含人類免疫球蛋白構架或人類共同構架之相同胺基酸序列，或其可含有胺基酸序列變化。在一些實施例中，胺基酸變化之數目為10或1〇以下、9或9以下、8 或8以下、7或7以下、6或6以下、5或5以下、4或4以下、3 或3以下、或2或2以下。在一些實施例中，VL接受體人類構架序列與VL人類免疫球蛋白構架序列或人類共同構架序列相同。「親和力」係指分子（例如抗體）之單一結合位點與該分 • 子之結合搭配物（例如抗原）之間非共價相互作用總和的強度。除非另外指示，否則如本文所用，「結合親和力」係指反映結合對（例如抗體與抗原）成員之間丨：丨相互作用之固有結合親和力。分子X對其搭配物Y之親和力通常可用解離常數（Kd)表示。親和力可藉由此項技術中已知之常用方法（包括本文所述之方法）量測。有關量測結合親和力之特定說明性及例示性實施例描述於下文中。「親和力成熟」抗體係指相較於在一或多個高變區 158864.doc € 201215618 (HVR)中不具有一或多個改變之親本抗體，在一或多個高變區中具有此等改變之抗體，.此等改變使得抗體對抗原之親和力改良。術語「抗複合物I抗體」及「與複合物I結合之抗體」係指能夠以足夠親和力結合複合物I之抗體，以使該抗體適用作靶向複合物I之診斷劑及/或治療劑。在一實施例中，抗複合物I抗體與無關非複合物I蛋白質結合之程度小於該抗體與複合物I結合的約10 %，如例如藉由放射免疫檢定 (RIA)所量測。在某些實施例中，與複合物〗結合之抗體之解離常數（Kd)為 $1 μΜ、$100 nM、$10 nM、$1 nM、$0.1 nM、20.01 nM或 $0.001 nM(例如 10·8 M或 10·8 M以下，例如ΙΟ·8 Μ至ΙΟ·13 Μ，例如ΙΟ·9 Μ至1 Ο·13 Μ)。在某些實施例中，抗複合物I抗體與複合物I之在人類CMV分離株之間保守的抗原決定基結合。在某些實施例中，抗複合物I抗體與複合物I之在感染不同物種之CMV病毒株之間保守的抗原決定基結合。在某些實施例中，「抗複合物I抗體」結合複合物I之構形抗原決定基且在某些實施例中，抗複合物J 抗體與複合物I之不為gH之個別蛋白質成員（亦即gL、 UL128、UL130或UL131)内的抗原決定基結合。術語「抗gH抗體」及「與gH結合之抗體」係指能夠以足夠親和力結合gH之抗體，以使該抗體適用作靶向gH之診斷劑及/或治療劑。在一實施例中，抗gH抗體與無關非 gH蛋白質結合之程度小於該抗體與gH結合的約1 〇%，如例如藉由放射免疫檢定（RIA)所量測。在某些實施例中，與 158864.doc •16- 201215618 gH結合之抗體之解離常數（Kd)為$1 、$100 nM、£10 nM、$1 nM、S0.1 nM、$0.01 nM或 $0.001 nM(例如 l〇·8 μ 或 l〇·8 M以下，例如 10·8 μ至 ι〇-13 Μ，例如 10·9 M至 l〇·13 Μ) °在某些實施例中，抗gH抗體與印之在人類cmv分離株之間保守的抗原決定基結合。在某些實施例中’抗§11抗體與gH之在感染不同物種之cmv病毒株之間保守的抗原決定基結合。術語「抗體」在本文中以最廣泛意義使用且涵蓋各種抗體結構，包括（但不限於）單株抗體、多株抗體、多特異性抗體（例如雙特異性抗體）及抗體片段，只要其展現所要抗原結合活性即可。「抗體片段」係指除完整抗體以外之分子，其包含完整抗體中結合該完整抗體所結合之抗原的部分。抗體片段之貫例包括（但不限於）Fv、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2 ;雙功能抗體；線抗體；單鏈抗體分子（例如scFv);及自抗體片段形成之多特異性抗體。與參照抗體「結合相同抗原決定基之抗體」係指在競爭檢疋中阻斷該參照抗體與其抗原結合達5〇%或5〇%以上的抗體且反之，5亥參照抗體在競爭檢定中阻斷該抗體與其抗原結合達50%或50%以上。本文提供一種例示性競爭檢定。術語「嵌合」抗體係指重鏈及/或輕鏈之一部分源於特疋來源或物種，而重鏈及/或輕鏈之其餘部分源於不同來源或物種之抗體。矣.. 158864.doc -17· 201215618 抗體之「類別」係指其重鏈所具有之恆定域或恆定區之類型。存在5種主要抗體類別：IgA、IgD、IgE、IgG及 IgM，且若干此等類別可進一步分成子類（同型），例如 IgGi、IgG2、IgG3、IgG4、IgA!及 IgA2。對應於免疫球蛋白之不同類別之重鏈恆定域分別被稱為α、δ、ε、γ及μ。

除非另外指示，否則如本文所用之術語「複合物I」係指來自任何細胞巨大病毒來源，包括感染諸如靈長類動物 (例如人類）及齧齒動物（例如小鼠及大鼠）之哺乳動物之 CMV的任何天然複合物I。該術語涵蓋所有gH、gL、 UL128、UL130及UL131多肽之組合。該術語亦涵蓋複合物I之蛋白質之天然存在的變異體，例如剪接變異體或對偶基因變異體。例示性HCMV gH之胺基酸序列展示於SEQ ID ΝΟ:1中。例示性HCMV gL之胺基酸序列展示於SEQ ID NO:2中。例示性HCMV UL 128之胺基酸序列展示於SEQ ID NO:3中。例示性HCMV UL130之胺基酸序列展示於SEQ ID NO:4中。例示性HCMV UL 131之胺基酸序列展示於SEQ ID NO:5 中。HCMV gH、gL、UL128、UL130 及 UL131 之其他例示性序列可見於Genbank寄存編號GU179289(Dargan等人，Gei F/ro/. 91: 1535-1546 (2010))中，其以全文引用的方式併入本文中，且以SEQ ID NO:206(gH)、SEQ ID NO:208(gL) 、 SEQ ID NO:205(UL 128) ' SEQ ID NO:204(UL130)及SEQ ID NO:203(UL131)包括在本文中。除非另外指示’否則如本文所用之術語「複合物II」係指來自任何細胞巨大病毒來源，包括感染諸如靈長類動物 •18· 158864.doc 201215618

(例如人類）及齧齒動物（例如小鼠及大鼠）之哺乳動物之 CMV的任何天然複合物II。該術語涵蓋所有gH、gL及gO 之組合。該術語亦涵蓋複合物II之蛋白質之天然存在的變異體，例如剪接變異體或對偶基因變異體。例示性HCMV gH之胺基酸序列展示於SEQ ID ΝΟ:1中。例示性HCMV gL 之胺基酸序列展示於SEQ ID NO:2中。例示性HCMV gO之胺基酸序列展示於SEQ ID NO:209中。HCMV gH、gL及gO 之其他例示性序列可見於Genbank寄存編號GUI79289 (〇3^&11等人，乂6!烈.6>0/.91:1535-1546 (2〇1〇))中，其以全文引用的方式併入本文中，且以SEQ ID NO，.206(gH)、 SEQ ID NO:208(gL)及 SEQ ID NO: 207(gO)包括在本文中。除非另外指示，否則如本文所用之術語「gH」係指來自任何脊椎動物來源，包括諸如靈長類動物（例如人類）及齧齒動物（例如小鼠及大鼠）之喷乳動物的任何天然gH。該術語涵蓋「全長」未加工gH以及由在細胞中加工所產生之任何形式的gH。該術語亦涵蓋gH之天然產生之變異體，例如剪接變異體或對偶基因變異體。在CMV分離株之間， gH之胺基酸序列為約95%—致。例示性HCMV gH之胺基酸序列展示於SEQ ID ΝΟ:1中。HCMV gH之另一例示性序列可見於 Genbank 寄存編號 GUI 79289(Dargan 等人，《/. Gen. Kz>o/. 91: 1535-1546 (2010))中，其以全文引用的方式併入本文中，且以SEQIDNO:206(gH)包括在本文中。如本文所用之術語「細胞毒性劑」係指能抑制或阻止細 158864.doc -19· 201215618 胞功能及/或導致細胞死亡或破壞之物質。細胞毒性劑包括（但不限於）放射性同位素（例如At2"、I131、I125、Y9〇、 Re186、Re188、Sm153、Bi212、Pi pb2^Lu之放射性同位素）；化學治療劑或藥物（例如曱胺喋呤（methotrexate)、阿德力黴素（adriamicin)、長春花鹼（vinca alkaloid)(長春新驗 (vincristine)、長春鹼（vinblastine)、依託泊苷（etoposide))、小紅莓（doxorubicin)、美法侖（meiphalan)、絲裂黴素 C(mitomycin C)、苯丁酸氮芥（chl〇rambucil)、道諾徽素 (daunorubicin)或其他嵌入劑）；生長抑制劑；酶及其片段’諸如核分解酶；抗生素；毒素’諸如小分子毒素或細菌、真菌、植物或動物來源之酶促活性毒素，包括其片段及/或變異體；及以下揭示之各種抗腫瘤或抗癌劑。「效應功能」係指可歸因於抗體之Fc區之彼等生物活性’其隨抗體同型而變化。抗體效應功能之實例包括： C 1 q結合及補體依賴性細胞毒性（CDC) ; Fc受體結合；抗體依賴性細胞介導之細胞毒性（ADCC);吞噬作用；細胞表面受體（例如B細胞受體）之下調；及8細胞活化。藥劑（例如醫藥調配物）之「有效量」係指在必需劑量下且在必需時間内可有效達成所要治療或防治結果之量。術語「Fc區」在本文中用於定義免疫球蛋白重鏈之含有至 > 一部分恆定區之c端區。該術語包括天然序列Fc區及變異Fc區。在—實施例中，人類IgG重鏈Fc區自ο。％或自Pro230延伸至重鏈之缓基端。然而，區之c端離胺酸 (Lys447)可存在或可不存在。除非本文中另外規定，否則 I58864.doc 201215618

Fc區或怪定區中胺基酸殘基之編號係根據eu編號系統，亦稱為EU索引’如 Kabat等人，o/Proie/w·? 〇/ /卿m«o/〇抑α/ /价㈣"，第 5 版，pubHc Health Service，

National Institutes of Health, Bethesda，MD，1991 中所述。「構架」或「FR」係指除高變區（Hvr)殘基以外之可變域殘基。可變域之FR通常由4個FR域：FR1、FR2、FR3及 FR4組成。因此，HVR及FR序列在VH(或VL)中通常依以下順序出現：FR1-H1(L1)-FR2-H2(L2)-FR3-H3(L3)-FR4。術語「全長抗體」、「完整抗體」及「完全抗體」在本文中可互換使用來指代結構實質上類似於天然抗體結構或具有含有如本文所定義之Fc區之重鏈的抗體。術語「宿主細胞」、「宿主細胞株」及r宿主細胞培養物」可互換使用且指代已引入有外源性核酸之細胞，包括此等細胞之子代。宿主細胞包括「轉型體」及「轉型細胞」，其包括初級轉型細胞及由其獲得之子代而不考慮繼代次數。子代在核酸含量上可能不完全與親本細胞相同，而是可能含有突變。本文中包括具有與在原始轉型細胞中所篩檢或選擇相同之功能或生物活性的突變子代。「人類抗體」為胺基酸序列對應於由人類或人類細胞產生或源於非人類來源之抗體之胺基酸序列的抗體，該非人類來源利用人類抗體譜系或其他人類抗體編碼序列。人類抗體之此定義明確排除包含非人類抗原結合殘基之人類化抗體。「人類共同構架」為代表所選人類免疫球蛋白VL或Vh 158864.doc -21 · 201215618 構架序列中最常出現之胺基酸殘基的構架。一般而言，人類免疫球蛋白VL或VH序列選自可變域序列之子群。一般而έ ’序列子群為如Kabat等人，

Immunological Interest,第 5 版，NIH 出版物 91_3242

Bethesda MD (1991)，第1-3卷中之子群。在一實施例中，對於VL，子群為如Kabat等人（同上）中之子群κ I。在一實施例中，對於VH ’子群為如Kabat等人（同上）中之子群 III。「人類化」抗體係指包含來自非人類HVR之胺基酸殘基及來自人類FR之胺基酸殘基的嵌合抗體。在某些實施例中’人類化抗體將包含至少1個且通常2個可變域之實質上全部’其中全部或實質上全部HVR(例如CDR)皆對應於非人類抗體之HVR，且全部或實質上全部FR皆對應於人類抗體之FR。人類化抗體視情況可包含源於人類抗體之抗體值定區的至少一部分。抗體之「人類化形式」，例如非人類抗體，係指已進行人類化之抗體。如本文所用之術語「高變區」或「HVR」係指抗體可變域中在序列上高度可變及/或形成結構確定之環（「高變環」）的各區。一般而言，天然四鏈抗體包含6個HVR ; 3 個在 VH 中（HI、H2、H3)，且 3個在 VL 中（LI、L2、L3)。 HVR通常包含來自高變環及/或來自「互補決定區」（cdR) 之胺基酸殘基，互補決定區具有最高序列可變性及/或參與抗原識別。例示性高變環存在於胺基酸殘基26-32(L 1)、 50-52(L2)、91-96(L3)、26_32(H1)、53-55(H2)及 96- 158864.doc • 22- 201215618 101(H3)處。（Chothia 及 Lesk, J. Μο/· 5ζ·ο/· 196:901-917 (1987))。例示性 CDR(CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3、CDR-HI、CDR-H2及CDR-H3)存在於LI之胺基酸殘基24-34、L2 之胺基酸殘基50-56、L3之胺基酸殘基89-97、HI之胺基酸殘基31-35B、H2之胺基酸殘基50-65、及H3之胺基酸殘基 95-102 處。（Kabat 等人，》Segwences ο/' 〇/

Immunological Interest,第 5 版 Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991))。除 VH 中之CDR1之外，CDR通常包含形成高變環之胺基酸殘基。CDR亦包含作為接觸抗原之殘基之「特異性決定殘基」或「SDR」。SDR包含於CDR之稱為簡化-CDR (abbreviated-CDR)或 a-CDR 的區域内。例示性&-匚011(&-CDR-L1、a-CDR-L2 ' a-CDR-L3 ' a-CDR-Hl、a-CDR-H2 及a-CDR-H3)存在於LI之胺基酸殘基31-34、L2之胺基酸殘基50-55、L3之胺基酸殘基89-96、H1之胺基酸殘基31-35B、H2之胺基酸殘基50-58及H3之胺基酸殘基95-102處。 (參見 Almagro 及 Fransson, Front. Biosci. 13:1619-1633 (2008))。除非另外指示，否則HVR殘基及可變域中之其他殘基（例如FR殘基）在本文中根據Kabat等人（同上）進行編號。「免疫結合物」為與一或多個異源分子，包括（但不限於）細胞毒性劑結合之抗體。「個體（individual/subject)」為哺乳動物。哺乳動物包括（但不限於）馴化動物（例如母牛、綿羊、貓、狗及馬）、 158864.doc -23- 201215618 靈長類動物（例如人類及非人類靈長類動物，諸如猴）、兔及齧齒動物(例如小鼠及大鼠）。在某些實施例中，個體為人類。如本文所用之「嬰兒」係指年齡自出生至不超過約！歲之範圍内之個體且包括〇至約12個月之嬰兒。「經分離」抗體為已與其天然環境之組分分離之抗體。在些貫施例中，如藉由例如電泳（例如SDS-PAGE電泳、等電聚焦（IEF)電泳、毛細管電泳）或層析（例如離子交換或逆相HPLC)所測疋，抗體經純化至純度大於％%或μ%。關於評估抗體純度之方法的综述，參見例如_職等人，丄 Chromatogr. B U%:7947 (2QQ7)。「經分離」核酸係指已與其天然環境之組分分離之核酸分子。經分離核酸包括如下核酸分子：該核酸分子含於通常含有該核酸分子之細胞中’但該核酸分子存在於染色體外或不同於其天然染色體位置之染色體位置處。「編碼抗複合物！抗體之經分離核酸」係指編碼抗體重鏈及輕鏈（或其片段）之—或多種核酸分子或各別載艘中之此（等）核酸分子及存在於宿主細:中= 或多個位置處之此（等）核酸分子。編碼抗gH抗體之經分離核酸」係指編碼抗體重鍵及輕 =(或其片·Μ之一或多種核酸分子’包括單—載體或各別體中之此（等）核酸分子及存在於宿主細胞中之—或多個位置處之此（等）核酸分子。如本文所用之術語「單株抗體」係指自實質上均質之抗 158864.doc -24- 201215618

體之群體獲得的抗體，亦即除可能之變異抗體(例如含有天然產生之突變或在產生單株抗體製_間出現之變體，此等變異體通常以較小量存在）之外，構成該群體: 個別抗體相同及/或結合相同抗原決定基。與通常對不同。決定子（抗原決定基）之不同抗體之多株抗體製劑不同，早株抗體製劑之各單株抗體針對抗原上之單一決定子。因此’修飾語「單株」#示抗體係自實質上均質：：體群體獲得之特性，且不應_為需要藉由任何特定方= 來產生抗體。舉例而言，欲根據本發明使用之單株抗體可藉由多種技術製備，該等技術包括（但不限於）融合瘤法、重組DNA法、噬菌體里現法及利用含有所有或部分人類免疫球蛋白基因座之轉殖基因動物的方法，此等方法及製備單株抗體之其他例示性方法在本文中描述。裸抗體」係指未與異源部分（例如細胞毒性部分）或放射性標記結合之抗體。裸抗體可存在於醫藥調配物中。「天然抗體」係指具有不同結構之天然產生之免疫球蛋白分子。舉例而言，天然IgG抗體為約15〇,〇〇〇道爾頓 (dalton)之雜四聚醣蛋白，由經二硫鍵鍵結之2條相同輕鏈及2條相同重鏈構成。自N端至(：端，各重鏈具有可變區 (VH) ’亦稱為可變重域或重鏈可變域，繼而為3個恆定域 (CHI、CH2及CH3)。類似地，自n端至C端’各輕鏈具有可變區（VL) ’亦稱為可變輕域或輕鏈可變域，繼而為恒定輕（CL)域。抗體之輕鏈可基於其恆定域之胺基酸序列歸為稱為κ及λ之兩種類型之一。 158864.doc 201215618 藥品說明蚩術羋包f中」用於指代通常包括在治療產品之商糸〇农T之説明書，之適應症、用木 έ有關於與使用此等治療產品有關警告之資訊。、劑量、投藥、組合療法、禁忌症及/或。相料參照多肽序^「胺基酸序列—致性百分比 '義為在對準參照多肽序列與候選序列且必要時引入二隙以達成最大序列—致性百分比之後且在不將任何保守ft取代視為序列—致性之-部分的情況下，候選序列中〃參照多肽序列中之胺基酸殘基一致之胺基酸殘基的百刀比出於確定胺基酸序列一致性百分比之目的之比對可以此項技術中之技能範圍内的各種方式達成，例如使用可公開獲得之電腦軟體，諸如BLAST、BLAST-2、ALIGN 或Megahgn(DNASTAR)軟體。熟習此項技術者可決定適於比對序列之參數，包括為在所比較序列之全長上達成最大對準所高的任何演算法。然而，出於本文之目的，使用序列比較電腦程式ALIGN-2來產生胺基酸序列一致性百分比值。ALIGN-2序列比較電腦程式由Genentech，Inc.創作，且源程式碼已與使用說明書一起在美國版權局（u s.

Copyright Office)(Washington D.C., 20559)存檔，在該版權局其以美國版權登記號TXU510087登記。ALIGN-2程式可自 Genentech，Inc.(South San Francisco，California)公開獲得，或可自源程式碼編譯。ALIGN-2程式應經編譯以在 UNIX操作系統（包括數位UNIX V4.0D)上使用。所有序列比較參數皆由ALIGN-2程式設定且不變化。 158864.doc -26 · 201215618 在採用AUGN-2進行胺基酸序列比較之情況下，如下計鼻指定胺基酸序列A對於、#、或相對於指定胺基酸序列 B之胺基酸序列-致性％(其或者可表料指定胺基酸序列 A對於、與、或相對於指定胺基酸序列8具有或包含某一胺基酸序列一致性:

l〇〇x 分數 X/Y

其中X為由序列比對程式a L J G N _2在A與B之彼程式比對中計分為-致匹配之胺基酸殘基的數目，且其中¥為3中胺基酸殘基的總數。應瞭解，#胺基酸序列A之長度與胺基酸序列B之長度不相等時，八與8之胺基酸序列一致性％將不等於B與A之胺基酸序列一致性％。除非另外明確陳述，否則本文中使用之所有胺基酸序列一致性％值皆使用 ALIGN-2電腦程式如前一段落中所述獲得。術語「醫藥調配物」係指以下製劑：其呈使得允許其中所含之活性成分之生物活性有效的形式且其不含有對該調配物將投與之個體具有不可接受之毒性的其他組分。" 「醫藥學上可接受之載劑」係指除活性成分以外，醫藥調配物中對個體無毒之成分。醫藥學上可接受之載劑包括 (但不限於）緩衝劑、賦形劑、穩定劑或防腐劑。本文所用，治療」（及其語法變化形式）係指試圖改變所治療個體之天，然病程之臨床干預，且可出於防治目的或在臨床病理學之過程期間執行。治療之所需效果包括 (但不限於）預防疾病發生或復發、減輕症狀、減弱疾=之任何直接或間接病理學後果、防止轉移、降低疾病進展速 158864.doc -27. 201215618 率、改善或緩和疾病病況、及缓解或改良預後。在一些實施例中，本發明組合物用於延遲疾病發展或減緩疾病進展或降低疾病之發病率或疾病症狀之叙重性。術語「可變區」或「可變域」係指抗體重鏈或輕鏈中參與抗體與抗原之結合的域。天然抗體之重鏈及輕鏈之可變域（分別為VH及VL)通常具有類似結構’其中各域包含4個保守構架區（FR)及3個高變區（HVR)。（參見例如Kindt等人， /所幻;，第 6版，W.H. Freeman and Co.，第 91 頁 (2007)) 單一 VH或VL域可足以賦予抗原結合特異性。此 φ 外，結合特定抗原之抗體可使用來自結合該抗原之抗體的 VH或VL·域分另ij篩檢互補VL·域或VH域之文庫進行分離。參見例如 Portolano等人，《/· 7mm««〇/· 150:880-887 (1993); Clarkson等人，352:624-628 (1991)。如本文所用之術語「載體」係指一種核酸分子，其能夠使與其連接之另一核酸增殖。該術語包括呈自我複製型核酸結構（self-replicating nucleic acid structure)形式之載體以及併入其所引入之宿主細胞之基因組中的載體。某些載籲體能夠引導其可操作地連接之核酸之表現。此等載體在本文中稱為「表現載體」。 II.組合物及方法在一態樣中’本發明部分基於發現中和HCMV感染之感染之單株抗體。在某些實施例中，提供與複合物！結合之抗體U實知例中，提供與gH結合之抗體。本發明抗體適用於例如預防、抑制及/或治療感染、先天性 158864.doc •28· 201215618 HCMV感染及由受HCMV感染之所移植組織引起的患者感染。抗體亦可用於診斷HCMV感染。在一態樣中，本發明亦部分基於發現包含單株抗體之組合之組合物，該等單株抗體抑制HCMV病毒進入胎盤之以下所有細胞類型中：内皮細胞、上皮細胞、單核細胞/巨噬細胞及纖維母細胞，且減少及/或抑制HCMV抗性株形成。在某些實施例中，提供使用此等組合物之方法。本發明組合物適用於例如預防、抑制及/或治療HCMV感染、先天性HCMV感染及由已自先前或目前受HCMV感染之患者收集的受HCMV感染之所移植器官或組織引起的患者感染。組合物亦可用於診斷HCMV感染。 A.例示性抗複合物I抗體在一態樣中，本發明提供與複合物I結合之經分離抗體。在某些實施例中，抗複合物I抗體與由UL128、 UL130、UL131與gH/gL締合產生之構形抗原決定基或在複 +合物I之個別成員内之抗原決定基特異性結合。在一些實施例中，抗複合物I抗體中和HCMV之EC90為0.7 pg/ml、 0.5 pg/ml、0·3 pg/ml、0.1 pg/ml、0.09 pg/ml、0.08 pg/ml、0.07 pg/ml、0.06 pg/ml、0.05 pg/ml、0.04 pg/ml、0.03 pg/ml、0.02 pg/ml、0.015 pg/ml、0.012 pg/ml、0.011 pg/ml、0.010 pg/ml 或 0.010 pg/ml 以下。在其他態樣中，抗複合物I抗體與HCVM表面上之複合物I特異性結合且在以下抗體濃度下中和50% HCMV : 0.05 pg/ml ' 0.02 pg/ml、0.015 pg/ml、0.014 pg/ml、0.013 158864.doc -29- 201215618 pg/ml、0.012 pg/ml、0.011 pg/ml、0.010 pg/ml、0.009 pg/ml、0.008 pg/ml、0.007 pg/ml、0_006 pg/ml ' 0.005 pg/ml、0.004 pg/ml、0.003 pg/ml、0.002 pg/ml、0.001 pg/ml、0.0009 pg/ml、0.0008 pg/ml、0.0007 pg/ml 或 0.0007 pg/ml 以下（例如在 ΙΟ.8 Μ、ΙΟ—9 Μ、ΙΟ-10 M、10_11 Μ、10·12Μ、10·13Μ或l〇-13M以下之抗體濃度下）。在一態樣中，本發明提供一種包含至少1個、2個、3 個、4個、5個或6個選自以下之HVR的抗複合物I抗體：（a) 包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之HVR-H2 ; (c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之HVR-H3 ; (d)包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之HVR-Ll ; (e)包含選自由SEQ ID NO: 10-19組成之群之胺基酸序列之HVR-L2 ;及（f)包含胺基酸序列SEQ ID NO:20之HVR-L3。在一態樣中，本發明提供一種包含至少1個、至少2個或全部3個選自以下之VH HVR序列之抗體：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之HVR-H2 ;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之 HVR-H3。在另一態樣中，本發明提供一種包含至少1個、至少2個或全部3個選自以下之VL HVR序列之抗體：（a)包含胺基酸序列8£(^10 1^0:9之11¥11-1^;(15)包含選自3丑9 10>10:10-19之胺基酸序列之HVR-L2 ;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:20之 HVR-L3。 158864.doc •30- 201215618 在一實施例中，抗體包含全部3個選自以下之VH HVR序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之HVR-H2 ;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之HVR-H3 ;及3個選自以下之VL HVR序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之HVR-L1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:10之HVR-L2 ;及（c)包含胺基酸序列 SEQ ID NO:20之HVR-L3。在另一實施例中，抗體包含全部3個選自以下之VH HVR 序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之HVR-H2;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之HVR-H3 ;及3個選自以下之VL HVR序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之HVR-L1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID ΝΟ:11之HVR-L2 ;及（c)包含胺基酸序列 SEQ ID NO:20之HVR-L3。在另一實施例中，抗體包含全部3個選自以下之HVR 序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQIDNO:7之HVR-H2;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之HVR-H3 ;及3個選自以下之VL HVR序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之HVR-L1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:12之HVR-L2 ;及（c)包含胺基酸序列 SEQ ID NO:20之 HVR-L3。在另一實施例中，抗體包含全部3個選自以下之VH HVR 序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之HVR-H2 ;及（c)包含胺基酸 Ο 158864.doc -31 - 201215618 序列SEQ ID NO:8之HVR-H3 ;及3個選自以下之Vl HVR序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之HVR-L1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:13之HVR-L2;及（c)包含胺基酸序列 SEQ ID NO:20之 HVR-L3。在另一實施例中，抗體包含全部3個選自以下之VH HVR 序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之HVR-H2 ;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之HVR-H3 ;及3個選自以下之VL HVR序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之HVR-L1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:14之HVR-L2;及（c)包含胺基酸序列 SEQ ID NO:20之 HVR-L3。在另一實施例中，抗體包含全部3個選自以下之VH HVR 序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之HVR-H2 ;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之HVR-H3 ;及3個選自以下之VL HVR序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之HVR_L1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:15之HVR-L2;及（c)包含胺基酸序列 SEQ ID NO:20之 HVR-L3。在另一實施例中，抗體包含全部3個選自以下之VH HVR 序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之HVR-H2 ;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之HVR-H3 ;及3個選自以下之VL HVR序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之HVR-L1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:16之HVR-L2;及（c)包含胺基酸序 158864.doc -32- 201215618 列 SEQ ID NO:20之HVR-L3。在另一實施例中，抗體包含全部3個選自以下之VH HVR 序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之HVR-H2 ;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之HVR-H3 ;及3個選自以下之VL HVR序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之HVR-L1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:17之HVR-L2 ;及（c)包含胺基酸序列 SEQ ID NO:20之HVR-L3。在另一實施例中，抗體包含全部3個選自以下之VH HVR 序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之HVR-H2;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之HVR-H3 ;及3個選自以下之VL HVR序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之HVR-L1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:18之HVR-L2 ;及（c)包含胺基酸序列 SEQ ID NO:20之HVR-L3。在另一實施例中，抗體包含全部3個選自以下之VH HVR 序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之HVR-H2 ;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之HVR-H3 ;及3個選自以下之VL HVR序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之HVR-L1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:19之HVR-L2 ;及（c)包含胺基酸序列 SEQ ID NO:20之HVR-L3。在一些實施例中，抗體包含全部3個選自以下之VH HVR 序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之HVR-H1 ; (b)包 158864.doc -33- 201215618 含胺基酸序列SEQ ID NO:7之HVR-H2 ;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之HVR-H3 ;及3個選自以下之VL HVR序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之HVR-L1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:21之HVR-L2及輕鏈可變區構架 FR3之第一胺基酸；及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:20之 HVR-L3。在某些實施例中，如上提供之抗複合物I抗體之任何一或多個胺基酸在以下HVR位置處經取代：在11乂尺-L2(SEQ ID NO:10)t :位置4、5、11及12。在某些實施例中，取代為如本文提供之保守性取代。在某些實施例中，可以任何組合進行任何一或多個以下取代：在HVR-L2(SEQ ID NO:57)中：D4E、D4T、D4S、G5A、D11E、 D11T、D11S及G12A。以上取代之全部可能之組合由SEQ ID NO:21之共同序列涵蓋。在任何以上實施例中，抗複合物I抗體經人類化。在一實施例中，抗複合物I抗體包含如任何以上實施例中之 HVR，且進一步包含接受體人類構架，例如人類免疫球蛋白構架或人類共同構架。在另一實施例中，抗複合物I抗體包含如任何以上實施例中之HVR，且進一步包含含有 FR1 序列 SEQ ID NO:22、FR2序列 SEQ ID NO:23、FR3序列SEQ ID NO:24及FR4序列SEQ ID NO:25之VH。在其他實施例中，抗複合物I抗體包含如任何以上實施例中之 HVR，且進一步包含含有FR1序列SEQ ID NO:22、FR2序列 SEQ ID NO:27、FR3序列 SEQ ID NO:28及 FR4序列 SEQ ID NO:29之VH。在其他實施例中，抗複合物I抗體包含如 158864.doc -34- 201215618 任何以上實施例中之HVR，且進一步包含含有FR1序列 SEQ ID NO:30、FR2序列 SEQ ID NO:3 1、FR3序列 SEQ ID NO:32及FR4序列SEQ ID NO:25之VH。在其他實施例中，抗複合物I抗體包含如任何以上實施例中之HVR，且進一步包含含有FR1序列SEQ ID NO:33、FR2序列SEQ ID NO:23、FR3 序列 SEQ ID NO:34及 FR4序列 SEQ ID NO:25 之VH。在另一實施例中，抗複合物I抗體包含如任何以上實施例中之HVR，且進一步包含含有FR1序列SEQ ID NO:35、 FR2序列 SEQ ID NO:36、FR3序列 SEQ ID NO:37及 FR4序列SEQ ID NO:38之VL。在其他實施例中，抗複合物I抗體包含如任何以上實施例中之HVR，且進一步包含含有FR1 序列 SEQ ID NO:39 ' FR2 序列 SEQ ID NO:40、FR3 序列 SEQ ID NO:41及FR4序列SEQ ID NO:42之VL。在其他實施例中，抗複合物I抗體包含如任何以上實施例中之HVR，且進一步包含含有FR1序列SEQ ID NO:43、FR2序列SEQ ID NO:44、FR3 序列 SEQ ID NO:41 及 FR4 序列 SEQ ID NO:42之 VL。在任何以上抗體中，VL FR3序列可經選自SEQ ID NO:67 或SEQ ID NO:68之序列取代。在另一態樣中，抗複合物I抗體包含與胺基酸序列SEQ ID NO:46 或 SEQ ID NO:47 具有至少 90%、91%、92%、 93%、94%、95%、96%、97%、98°/〇、99% 或 100%序列一致性之重鏈可變域（VH)序列。在某些實施例中，相對於參 158864.doc -35- 201215618 照序列’具有至少 90%、91%、92%、93%、94¼、95°/。、 96%、97%、98%或99%—致性之VH序列含有取代（例如保守性取代）、插入或缺失，但包含彼序列之抗複合物1抗體保留與複合物I結合之能力。在某些實施例中，在SEQ ID NO:45 或 SEQ ID NO:46 或 SEQ ID NO:47 中，總計 1 至 10 個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中’取代、插入或缺失發生在HVR外部區域中（亦即在FR中）。在一特定實施例中，VH包含1個、2個或3個選自以下之 HVR : (a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:6之HVR-H1，（b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:7之HVR-H2，及（c)包含胺基酸序列 SEQ ID NO:8之HVR-H3。在另一態樣中，提供一種抗複合物I抗體，其中該抗體包含與胺基酸序列SEQ ID NO:48或SEQ ID NO:49具有至少 90%、91%、92% ' 93%、94% ' 95%、96% ' 97%、 98%、99°/◦或100%序列一致性之輕鏈可變域（VL)。在某些實施例中，相對於參照序列，具有至少90%、91%、 92%、93%、94%、95%、960/〇、97%、98%或 99%— 致性之 VL序列含有取代（例如保守性取代）、插入或缺失，但包含彼序列之抗複合物I抗體保留與複合物I結合之能力。在某些實施例中：在SEQ ID NO:48或SEQ ID NO:49中，總計1 至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在HVR外部區域中（亦即在FR 中）。在一特定實施例中，VL包含1個、2個或3個選自以下之HVR: (a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:9之HVR-L1 ; (b) I58864.doc -36- 201215618 包含選自SEQIDNO:10-19之胺基酸序列之HVR-L2;及（c) 包含胺基酸序列SEQ ID NO:20之HVR-L3。在另一態樣中，提供一種抗複合物I抗體，其中該抗體包含如任何以上提供之實施例中之VH、及如任何以上提供之實施例中之Vl。在一實施例中，抗體包含分別於SEQ ID NO:45及SEQ ID NO:49中之VH及VL序列，包括彼等序列之轉譯後修飾。在一實施例中，抗體包含分別於SEQ ID NO:46及SEQ ID NO:49中之VH及VL序列，包括彼等序列之轉譯後修飾。在另一實施例中，抗體包含分別於SEQ ID NO:47及SEQ ID NO:49中之VH及Vl序列，包括彼等序列之轉譯後修飾。在另一實施例中，抗體包含分別於SEQ ID NO:45及SEQ ID NO:48中之VH及Vl序列，包括彼等序列之轉譯後修飾。在另一實施例中，抗體包含分別於SEQ ID >10:46及8£(^10>10:48中之¥^1及乂1^序列，包括彼等序列之轉譯後修飾。在另一實施例中，抗體包含分別於SEQ ID NO:47及SEQ ID NO:48中之VH及Vl序列，包括彼等序列之轉譯後修飾。在另一態樣中，本發明提供一種與本文提供之抗複合物 I抗體競爭及/或與本文提供之抗複合物I抗體結合相同抗原決定基的抗體。舉例而言，在某些實施例中，提供一種與抗複合物I抗體競爭及/或與抗複合物I抗體結合相同抗原決定基之抗體，該抗複合物I抗體包含含有胺基酸序列SEQ ID NO:45-47之VH及含有胺基酸序列SEQ ID NO:48或SEQ ID NO:49之 VL。 158864.doc -37- 201215618 在另一態樣中，本發明提供一種與抗複合物1抗體結合相同抗原決定基之抗體，該抗原決定基包含對應於選自以下之胺基酸的胺基酸：在SEQ ID N〇:203之胺基酸位置47 處之麩醯胺酸；在把卩ID NO:203之胺基酸位置51處之離胺酸；在SEQ ID NO:203之胺基酸位置46處之天冬胺酸及其組合。構成抗原決定基之相應胺基酸可處於UL13 1胺基酸序列中之近似相同位置，但可歸因於UL13 1在各種 HCMV病毒株之間的胺基酸序列差異而不同。在另一態樣中，本發明提供一種與HCMV複合物I之多肽結合之抗體，其中該多肽包含胺基酸序列SRALPDQTRYK YVEQLVDLTLNYHYDAS(SEQ ID NO:194)。在另一態樣中，本發明提供一種與本文提供之抗複合物 I抗體結合相同抗原決定基的抗體。在其他態樣中，本發明提供一種與本文提供之抗複合物I抗體結合相同抗原決定基之抗體，EC90為 0.7 pg/ml、0.5 pg/ml、0.3 pg/ml、 0.1 pg/ml、0.09 pg/ml、0.08 pg/ml、0.07 pg/ml ' 0.06 pg/ml、0.05 pg/ml、0.04 pg/ml、0.03 pg/ml ' 0.02 pg/ml、0.015 pg/ml、0.012 pg/ml、0.011 pg/ml、0.010 0吕/1111或〇.〇1〇48/11[11以下。在其他態樣中，本發明提供一種與本文提供之抗複合物I抗體結合相同抗原決定基且在以下抗體濃度下中和50%之HCMV的抗體：0.05 pg/ml、 0.02 gg/ml、0.015 pg/ml、0.014 pg/ml、0.013 pg/ml、 0.012 pg/ml、0.011 pg/ml、0.010 pg/ml、0.009 pg/ml、 0.008 pg/ml、0.007 pg/ml、0.006 pg/ml、0.005 pg/ml、 158864.doc -38- 201215618 0.004 pg/ml、0.003 pg/ml、0.002 pg/ml、0.001 pg/mi、 0.0009 pg/m卜 0.0008 pg/m卜 0.0007 pg/mi或 0.0007 gg/ml 以下（例如在 ΙΟ·8 Μ、10·9 M、l〇·10 Μ、10·" M、10.12 M、 l〇_13 M或1(T13 M以下之抗體濃度下）。在本發明之另一態樣中，根據任何以上實施例之抗複合物I抗體為單株抗體，包括嵌合抗體、人類化抗體或人類抗體。在一實施例中，抗複合物“充體為抗體片段，例如 Fv、Fab、Fab'、scFv、雙功能抗體或F(aly)2片段。在另一鲁實施例中，抗體為全長抗體，例如完整IgGl抗體或如本文中定義之其他抗體類別或同型。在另一態樣中，根據任何以上實施例之抗複合物〗抗體可併有任何如以下章節丨-7中所述之特徵_的一者或任何特徵之組合。 B·例示性抗gH抗體在一態樣中，本發明提供與gH結合之經分離抗體。在某些實施例中，抗gH抗體特異性結合gH之抗原決定基且中和 HCMV ’ EC90 為 0.8 pg/nU、〇.7 μ§/ιη1、〇 6 μ§Λη1、〇 5 pg/m卜 0·4 pg/m卜〇·3 pg/mh 〇 2 吨岫卜〇」^/m卜〇〇9

Kg/nd、0.08 _ml、0.07 _ml、〇〇6 吨㈤、〇〇5 Kg/rni、0.04 pg/ml、0.03 盹㈤、〇〇2 ^/m丨、〇〇1

Pg/m卜0.015盹/⑹、〇.〇1〇 ^/m丨或〇〇1〇㈣爪丨以下。在一些實施例中，抗gH抗體與在桿狀病毒中產生之§11/社二聚體之抗原決定基特異性結合’ IC5(^Q ()i禮至〇 Η nM 之範圍内。在各種實施例中，IC5〇可為〇.〇ι ηΜ、〇·〇2 —ν 158864.doc •39- 201215618 nM、0.03 碰、0.04 nM、0.05 nM、0.06 nM、0.07 nM、 0.08 nM、0.09 應、0.1 nM、0.11 nM、0.12 nM、0.13 nM、0.14 囊、0.15 nM、0.16 nM或 0_17 nM。在其他實施例中，抗體與HCMV表面上之gH結合且在以下抗體濃度下中和50%之HCMV : 0.1 pg/ml、0.09 pg/ml、 0.08 pg/mi、ο·。？ pg/ml、0.06 |ig/ml、0.05 |ig/ml、0.04 pg/ml、0.03 pg/mi、0.02 pg/ml、0.015 pg/ml、0.014 pg/ml、0.013 pg/mi、0.012 pg/ml、0.011 pg/ml、0.010 Kg/ml、0.009 pg/ml、0.008 pg/ml、0.007 pg/ml、0.006 Pg/ml、0.005 pg/ml、0.004 pg/ml、0.003 pg/ml、0.002 pg/m卜 o.ooi eg/ml4〇 0(H pg/ml以下（例如i〇·9 Μ、ΙΟ·1。μ、ΙΟ·丨1 Μ、ΙΟ·12 Μ、ΙΟ·13 M或 10·丨3 M以下之抗體濃度下）。在一態樣中，本發明提供一種包含至少1個、2個、3 個、4個、5個或6個選自以下之HVR之抗gH抗體：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:71之HVR-H1 ; (b)包含選自SEQ ID NO:72、73或74之胺基酸序列之HVR-H2 ; (c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:75之HVR-H3 ; (d)包含胺基酸序列SEQ ID NO:76之HVR-L1 ; (e)包含胺基酸序列SEQ ID NO:77之 HVR-L2 ;及（f)包含胺基酸序列SEQ ID NO:78之HVR-L3。在一實施例中，本發明提供一種包含至少1個、至少2個或全部3個選自以下之VH HVR序列之抗體：（a)包含胺基酸序列SEQ ID N0:71之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:72之HVR-H2 ;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:75 158864.doc •40- 201215618 之HVR-H3。在另一實施例中，抗體包含至少1個、至少2 個或全部3個選自以下之VH HVR序列：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:71之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:73之HVR-H2 ;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:75之 HVR-H3。在另一實施例中，抗體包含至少1個、至少2個或全部3個選自以下之VH HVR序列：（a)包含胺基酸序列 SEQ ID NO:71之 HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列 SEQ ID NO:74之HVR-H2 ;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:75之 HVR-H3。在另一態樣中，本發明提供一種包含至少1個、至少2個或全部3個選自以下之VL HVR序列之抗體：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:76之HVR-L1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:77之HVR-L2 ;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:78之 HVR-L3 ;及包含選自 SEQ ID NO:72、SEQ ID NO:73 或 SEQ ID NO:74之胺基酸序列之HVR-H2。在另一態樣中，本發明提供一種抗體，其包含（a)包含至少1個、至少2個或全部3個選自以下之VH HVR序列之VH 域：（i)包含胺基酸序列SEQIDNO:71之HVR-Hl、（ii)包含選自 SEQ ID NO:72、SEQ ID NO:73 或 SEQ ID NO:74 之胺基酸序列之11乂11-112、及（丨丨〇包含選自8£()10 1\[〇:75之胺基酸序列之HVR-H3 ;及（b)包含至少1個、至少2個或全部 3個選自以下之VL HVR序列之VL域：（i)包含胺基酸序列 SEQ ID NO:76 之 HVR-L1、（ii)包含胺基酸序列 SEQ ID NO:77之HVR-L2，及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:78之 c· 158864.doc •41 - 201215618 HVR-L3。在另一態樣中，本發明提供一種包含以下之抗體：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:71之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列8£〇10 1^0:72之11乂11-112;((：)包含胺基酸序列3£(5 10 NO:75之HVR-H3 ; (d)包含胺基酸序列SEQ ID NO:76之 HVR-L1 ; (e)包含胺基酸序列SEQ ID NO:77之HVR-L2 ;及 (0包含選自3£卩1〇1^〇:78之胺基酸序列之11¥11-1^3。在另一態樣中，本發明提供一種包含以下之抗體：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:71之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:73之HVR-H2 ; (c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:75之HVR-H3 ; (d)包含胺基酸序列SEQ ID NO:76之 11¥11-1^1;(6)包含胺基酸序列8£(^10 1^0:77之11¥11-1^2;及 (f)包含選自SEQ ID NO:78之胺基酸序列之HVR-L3。在另一態樣中，本發明提供一種包含以下之抗體：（a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:71之HVR-H1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:74之HVR-H2 ; (c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:75之HVR-H3 ; (d)包含胺基酸序列SEQ ID NO:76之 HVR-L1 ; (e)包含胺基酸序列SEQ ID NO:77之HVR-L2 ;及 (f)包含選自SEQ ID NO:78之胺基酸序列之HVR-L3。在某些實施例中，如上提供之抗gH抗體之任何一或多個胺基酸在以下HVR位置處經取代：在HVR-H2(SEQ ID NO:91)中：位置6及8。在某些實施例中，取代為如本文提供之保守性取代。在某些實施例中，可以任何組合進行任何一或多個以下取代：在HVR-H2(SEQ ID ΝΟ··91)中： 158864.doc -42- 201215618 D6S、D6T、D6N、D6Q、D6F、D6M、D6L及 T8R。以上取代之全部可能之組合由SEQ ID NO:93之共同序列涵蓋。在任何以上實施例中，抗gH抗體經人類化。在一實施例中，抗gH抗體包含如任何以上實施例中之HVR，且進—步包含接受體人類構架，例如人類免疫球蛋白構架或人類共同構架。在另一實施例中，抗gH抗體包含如任何以上實施例中之HVR，且進一步包含含有FR1序列SEQ ID N〇:79、 FR2序列 SEQ ID NO:80、FR3序列 SEQ ID NO:81 及 FR4序列SEQ ID NO:82之VH。在其他實施例中，抗gH抗體包含如任何以上實施例中之HVR，且進一步包含含有FR1序列 SEQ ID NO:83、FR2序列 SEQ ID NO:84、FR3序列 SEQ ID NO:85及 FR4序列 SEQ ID NO:86之 VL。在另一態樣中，本發明之抗gH抗體包含與胺基酸序列 SEQ ID NO:92具有至少 90°/〇、91%、92%、93%、94%、 95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性但其中位置54處之胺基酸為Asn(N)及/或其中位置56處之胺基酸為 Asn(R)的重鏈可變域（VH)序列。在某些實施例中，相對於參照序列，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、 95%、96%、97%、98%或99%—致性之VH序列含有取代 (例如保守性取代）、插入或缺失，但包含彼序列之抗gH抗體保留與gH結合之能力。在某些實施例中，在SEQ ID NO:92中，總計1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失，但其中位置54處之胺基酸為Asn(N)及/或其中位置56 處之胺基酸為Asn(R)。在某些實施例中，取代、插入或缺 158864.doc -43· 201215618 失發生在HVR外部區域中（亦即在FR中）。視情況而定，抗吕11抗體包含於8£(^1〇]^0:87、8£(5 1〇]^0:88或8丑(^1〇 NO:89中之VH序列，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VH包含1個、2個或3個選自以下之HVR : (a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:71之HVR-H1，（b)包含選自SEQ 10 1^0:72、8£(^10 1^0:73及8丑(5 10 1^0:74之胺基酸序列之HVR-H2，及（c)包含胺基酸序列SEQIDNO:75之HVR-H3。在另一態樣中，本發明之抗gH抗體包含與胺基酸序列 SEQ ID NO:90 具有至少 90%、91%、92%、93%、94%、 95%、96%、97%、98%、99%或100%序列一致性之輕鏈可變域（VL)。在某些實施例中，相對於參照序列，具有至少 90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97% ' 98% 或 99% —致性之VL序列含有取代（例如保守性取代）、插入或缺失，但包含彼序列之抗gH抗體保留與gH結合之能力。在某些實施例中，在SEQ ID NO:90中，總計1至10個胺基酸已經取代、插入及/或缺失。在某些實施例中，取代、插入或缺失發生在HVR外部區域中（亦即在FR中）。視情況而定，抗gH抗體包含於SEQ ID NO:90中之VL序歹ij，包括彼序列之轉譯後修飾。在一特定實施例中，VL包含1個、 2個或3個選自以下之HVR : (a)包含胺基酸序列SEQ ID NO:76之HVR-L1 ; (b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:77之 HVR-L2 ;及（c)包含胺基酸序列SEQ ID NO:78之HVR-L3。在另一態樣中，本發明之抗gH抗體包含如任何以上提供 158864.doc -44- 201215618 之實施例中之VH及如任何以上提供之實施例中之VL。在一實施例中，抗體包含分別於SEQ ID NO:87及SEQ ID NO:90中之VH及VL序列，包括彼等序列之轉譯後修飾。在另一實施例中，抗體包含分別於SEQ ID NO:88及SEQ ID NO:90中之VH及VL序列，包括彼等序列之轉譯後修飾。在另一實施例中，抗體包含分別於SEQ ID NO:89及SEQ ID NO:90中之VH及VL序列，包括彼等序列之轉譯後修飾。在另一態樣中，本發明提供一種與本文提供之抗gH抗體競爭及/或與本文提供之抗gH抗體結合相同抗原決定基的抗體。舉例而言，在某些實施例中，提供一種與抗gH抗體競爭及/或與抗gH抗體結合相同抗原決定基之抗體，該抗 gH抗體包含含有胺基酸序列SEQ ID NO:87、88或89之VH 及含有胺基酸序列SEQ ID NO:90之VL。在另一態樣中，本發明提供一種與抗gH抗體結合相同抗原決定基之抗體，該抗原決定基包含對應於選自以下之胺基酸的胺基酸：在SEQ ID ΝΟ:1之胺基酸位置168處之色胺酸；在SEQ ID ΝΟ:1之胺基酸位置446處之天冬胺酸；在 SEQ ID ΝΟ:1之胺基酸位置171處之脯胺酸及其組合。構成抗原決定基之相應胺基酸可處於gH胺基酸序列中之近似相同位置，但可歸因於gH在各種HCMV病毒株之間的胺基酸序列差異而不同。在其他態樣中，本發明提供一種與本文提供之抗gH抗體 158864.doc -45- 201215618 結合相同杬原決定基之抗體，〇1 nM至〇 17 nM之範圍内。在各種實施例中，lew可為017 „肘或017 ηΜα 下’例如 0.16 ηΜ、0·15 nM、〇.l4 ηΜ、〇 13 ηΜ、0.12 ηΜ、0.11 ηΜ、0.10 ηΜ、0.09 ηΜ、（j og ηΜ、〇〇7 囊、 0·06 ηΜ、0,05 ηΜ、0.G4 ηΜ、〇·〇3 ηΜ、0.02 ηΜ、0.01 ηΜ或0.01 ηΜ以下。舉例而言，在某些實施例中，提供一種與HB1(—種包含VH序列SEQIE)N0:89及VL序列SEQID ΝΟ:90之抗gH抗體）結合相同抗原決定基且1(：5〇為〇 17 ηΜ 或 0.17 ηΜ以下（例如 0.16 ηΜ、0.15 ηΜ、0.14 ηΜ、0.13 ηΜ、0.12 ηΜ、0.11 ηΜ、0.10 ηΜ、〇·〇9 ηΜ、0.08 ηΜ、 0.07 ηΜ ' 0.06 ηΜ ' 0.05 ηΜ ' 〇.〇4 ηΜ ' 0.03 ηΜ > 〇.〇2 ηΜ、0.01 ηΜ或〇·〇1 ηΜ以下）或中和HCMV感染之EC90為 0.8 pg/ml、0.7 pg/m 卜〇·6 pg/nU、〇·5 pg/m 卜 0.4 pg/ml、 0.3 pg/ml、0.2 pg/ml、0.1 pg/ml、〇〇9 μ8/ηι1、〇〇8 pg/ml、0·07 pg/ml、0.06 pg/mi、〇·〇5 pg/ml、〇〇4 pg/ml、0.03 pg/ml、0.02 pg/ml、0·01 μ§/πιι、〇〇15 pg/ml、0.010 pg/ml或 0.010 pg/mi 以下的抗體。在其他態樣中，本發明提供一種與本文提供之抗gH抗體結合相同抗原決定基且在以下抗體濃度下中和5〇%之 HCMV的抗體：0.1 pg/mi、〇.〇9 pg/mi、〇,〇8 pg/ml、0.07 pg/ml、0_06 pg/ml、〇·〇5 pg/ml、〇.〇4 pg/ml、0.〇3 pg/rril、0.02 pg/ml、0.015 pg/ml、0.014 pg/ml、Ο.Ο13 pg/ml、0.012 pg/ml、0.011 pg/ml、（K010 pg/mi、〇.〇〇9 pg/ml、0.008 pg/ml、0.007 pg/ml、0.006 pg/ml、0.005 I58864.doc -46- 201215618 pg/ml、0.004 pg/ml、0.003 pg/ml、〇·〇〇2 pg/ml、0.001 pg/ml或 0.001 pg/ml以下（例如在 1〇·8μ、10-9M、10·10Μ、 1 (Γ11 Μ、1 (Γ12 Μ、1 〇 13 Μ或10—13 Μ以下之抗體濃度下）。在本發明之另一態樣中，根據任何以上實施例之抗gH抗體為單株抗體，包括嵌合抗體、人類化抗體或人類抗體。在一實施例中，抗gH抗體為抗體片段，例如Fv、Fab、 Fab·、scFv、雙功能抗體或F(ab，)2片段。在另一實施例中’抗體為全長抗體，例如完整IgG 1抗體或如本文中定義之其他抗體類別或同型。在另一態樣中’根據以上實施例之抗gH抗體可併有任何如以下章節1 -7中所述之特徵中的一者或任何特徵之組合。抗體親和力在某些實施例中，如本文提供之本發明抗體之解離常數 (Kd)為 $1 μΜ、$100 nM、S10 nM、SI nM、$0.1 nM、 50.01 nM或 50.001 nM(例如 i〇-8 ^^或 1〇-8 M以下，例如自 10 8 Μ至 10 13 Μ，例如自 1〇·9 μ至 1 〇·13 Μ)。在貫施例中’藉由用相關抗體之Fab形式及其如關於以下檢疋所述之抗原進行的經放射性標記之抗原結合檢定 (RIA)來量測Kd。藉由在未經標記之抗原的滴定系列存在下用最小濃度之（Ι25ι)標記抗原使Fab平衡，隨後用經抗Fab 抗體塗佈之板捕捉結合之抗原來量測Fab對抗原之溶液結合親和力（參見例如Chen等人，j M〇/价〇/ 293:865 881 (1999))。為了確立檢定條件，將micr〇titer®多孔板 201215618 (Thermo Scientific)用含 5 pg/ml 捕捉抗 Fab 抗體（Cappel Labs)之50 mM碳酸鈉（pH 9.6)塗佈隔夜，且隨後在室溫（約 23°C )下用含2%(w/v)牛血清白蛋白之PBS阻斷2至5小時。在非吸附板（Nunc #269620)中，將 1〇〇 pM或26 pM [1251]-抗原與相關Fab之連續稀釋液混合（例如與presta等人，Cawcer Res. 57:4593-4599 (1997)中評估抗 VEGF 抗體 Fab-12 — 致）。接著培育相關F ab隔夜；然而，培育可持續較長時期 (例如約65小時）以確保達到平衡。此後，將混合物轉移至捕捉板以在室溫下培育（例如1小時）。接著移除溶液且用含 0.1%聚山梨醇酯20(TWEEN-20®)之PBS將板洗滌8次。當板已乾燥時，添加每孔150 μΐ閃爍體（MICROSCINT-20tm ; Packard)’ 且在TOPCOUNTtm γ計數器（Packard)上對板計數10分鐘。選擇各Fab之產生小於或等於最大結合之20% 的濃度以用於競爭性結合檢定。根據另一實施例，Kd係使用表面電漿子共振檢定，使用 BIACORE®-2000 或 BIACORE®-3000 (BIAcore, Inc., Piscataway，NJ)，在25°C下，用固定抗原CM5晶片，在約 10個反應單位（RU)下量測。簡言之，根據供應商之說明書用，乙基-iT-(3-二曱基胺基丙基）-碳化二亞胺鹽酸鹽（EDC) 及，羥基丁二醯亞胺（NHS)活化羧曱基化葡聚糖生物感測器晶片（CM5，BIACORE，Inc.)。抗原用1 0 mM乙酸鈉（pH 4.8)稀釋至5 pg/ml(約0.2 μΜ)，隨後以5微升/分鐘之流速注射以達成約10個反應單位（RU)之偶合蛋白質。在注射抗原之後.，注射1 Μ乙醇胺以阻斷未反應之基團。在動力學 158864.doc -48 - 201215618 量測中，在25°C下以約25 μΐ/min之流速注射於含0.05%聚山梨醇酯20(TWEEN-20tm)界面活性劑之PBS(PBST)中兩倍連續稀釋的Fab(0.78 nM至500 nM)。使用簡單一對一朗繆爾結合模型（Langmuir binding model)(BIACORE®評估軟體第 3.2版（BIACORE® Evaluation Software version 3.2))藉由同時擬合締合及解離感測器圖譜來計算締合速率（kQn)及解離速率汴。《)。平衡解離常數（Kd)係計算為比率kcff/ku。參見例如 Chen 等人，J. Μο/. 5ζ·ο/· 293:865-881 (1999)。若藉由以上表面電漿子共振檢定測得締合速率超過106 M·1 s·1，則締合速率可藉由使用螢光淬滅技術測定，該技術量測在遞增濃度之抗原存在下，在25°(：下於？68化117.2)中之20 nM抗抗原抗體（Fab形式）之螢光發射強度（激發=295 nm ; 發射=340 nm，16 nm帶通）的增加或減小，如在光譜計，諸如配備停流之光譜光度計（stop-flow equipped spectrophometer)(Aviv Instruments)或具有經授拌比色管之 8000 系列 SLM-AMINCOtm 分光光度計（ThermoSpectronic) 中所量測6 2.抗體片段在某些實施例中，本文提供之抗體為抗體片段。抗體片段包括（但不限於）Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2、Fv及 scFv 片段及下文所述之其他片段。關於某些抗體片段之综述，參見 Hudson等人，Mel 9:129-134 (2003)。關於scFv片段之综述，參見例如 Pluekthiin，The Pharmacology of Monoclonal Antibodies,第 11 3 卷，Rosenburg 及 Moore 編， 158864.doc -49- 201215618 (Springer-Verlag, New York),第 269-3 1 5 頁（1994);亦參見 WO 93/16185 ;及美國專利第 5,571,894號及第 5,587,458 號。關於包含救助受體結合抗原決定基殘基且具有增加之活體内半衰期之Fab及F(ab’）2片段的論述，參見美國專利第 5,869,046號。雙功能抗體為具有2個抗原結合位點之可具有二價或雙特異性的抗體片段。參見例如EP 404,097 ; WO 1993/01161 ; Hudson等人，Med. 9:129-134 (2003);及 Hollinger等人，Pr〇c· Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448 (1993)。三功能抗體及四功能抗體亦描述於Hudson等人， 9:129-134 (2003)中。單域抗體為包含抗體之全部或部分重鏈可變域或全部或部分輕鏈可變域的抗體片段。在某些實施例中，單域抗體為人類單域抗體（Domantis，Inc.，Waltham, MA;參見例如美國專利第6,248,516 B1號）。抗體片段可藉由各種技術製備，包括（但不限於）蛋白水解消化完整抗體以及藉由重組宿主細胞（例如大腸桿菌（五 co/z·)或噬菌體）產生，如本文所述。、散合及人類化抗體在某些實施例中，本文提供之抗體為嵌合抗體。某些嵌合抗體例如於美國專利第4,8丨6,567號；及Morrison等人， 5W· t/a，81:6851-6855 (1984)中描述。在一實例中，嵌合抗體包含非人類可變區（例如源於小鼠、大氣、倉鼠、兔或非人類靈長類動物（諸如猴）之可變 158864.doc 201215618 品）人類匣疋區。在另一實例中，嵌合抗體為「類別轉換」抗體’其中類別或子類已自親本抗體之類別或子類改支。攸合抗體包括其抗原結合片段。在某些實施例中，嵌合抗體為人類化抗體。通常，非人類杬體經人類化以降低對人類之免疫原性，同時保留親本非人類机體之特異性及親和力。一般而言，人類化抗體包含一或多個可變域’其中例如CDr之HVR(或其部分）源於非人類抗體，且FR(或其部分）源於人類抗體序列。人類化抗體視情況亦將包含人類恆定區之至少一部分。在一些實施例中’人類化抗體中之一些殘基經來自非人類抗體 (例如HVR殘基所源於之抗體）之相應殘基取代例如以恢復或改良抗體特異性或親和力。人類化抗體及製備其之方法例如於Almagro及Fransson， Front. 13:1619-1633 (2008)中綜述，且例如於以下中進一步描述：Riechmann 等人，iVaiwre 332:323-329 (1988) ; Queen 等人，#加，/ deal 5W. 86:10029-

10033 (1989);美國專利第 5，821，33 7號、第 7,527,791 號、第 6,982,321 號及第 7,087，409 號；Kashmiri 等人，Me/办〇心 36:25-34 (2005)(描述 SDR(a-CDR)移植）；Padlan，Mo/· Immunol. 28:489-498 (1991)(描述「表面重塑 (resurfacing)」）；Dall’Acqua 等人，Methods 36:43-60 (2005)(描述「FR改組」）；及 Osbourn等人，36:61-68 (2005)及 Klimka 等人，Br· J. Cancer, 83:252-260 (2000)(描述FR改組之「導向選擇（guided selection)」方 158864.doc -51 - 201215618 法）。可用於人類化之人類構架區包括（但不限於）：使用「最佳配合（best-fit)」方法選擇之構架區（參見例如Sims等人， J. /wmwwo/. 151:2296 (1993));源於特定輕鏈或重鏈可變區子群之人類抗體之共同序列的構架區（參見例如Carter等 k, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:4285 (1992);及 Presta 等人，乂化所《«W·，151:2623 (1993));人類成熟（體細胞突變）構架區或人類生殖系構架區（參見例如Almagro及

Fransson，Fro价.价仍cz.· 13:1619-1633 (2008));及由篩檢 FR文庫產生之構架區（參見例如Baca等人，乂 5b/. c/zem. 272:10678-10684 (1997)及 Rosok 等人，J. C/2㈣. 271:22611-22618 (1996))-4.人類抗體在某些實施例中，本文提供之抗體為人類抗體。人類抗體可使用此項技術中已知之各種技術產生。人類抗體一般地描述於 van Dijk 及 van de Winkel, Cwrr. Opk.尸/^所此〇/ 5: 368-74 (2001)及 Lonberg, Ci/rr.办以· /所則„〇/· 20:45〇_ 459 (2008)中。人類抗體可藉由向轉殖基因動物投與免疫原來製備，該轉殖基因動物已經改進以回應於抗原攻毒來產生完整人類抗體或具有人類可變區之完整抗體。此等動物通常含有置換内源性免疫球蛋白基因座或存在於染色體外或隨機整合入動物染色體中之全部或部分人類免疫球蛋白基因座。在此等轉殖基因小鼠中，内源性免疫球蛋白基因座通常不活 I58864.doc -52- 201215618 化。關於自轉殖基因動物獲得人類抗體之方法的綜述，參見 Lonberg，23:1117-1 125 (2005)。亦參見例如描述XENOMOUSEtm技術之美國專利第6,075,181號及第 6，150,584號；描述HUMAB®技術之美國專利第5,770,429 號；描述K-M MOUSE®技術之美國專利第7,041,870號及描述VELOCIMOUSE®技術之美國專利申請公開案第US 2007/0061900號。來自由此等動物產生之完整抗體之人類可變區可例如藉由與不同人類恆定區組合來進一步改進。

人類抗體亦可藉由基於融合瘤之方法製備。已描述用於產生人類單株抗體之人類骨髓瘤及小鼠-人類異源骨髓瘤細胞株。（參見例如 Kozbor ·/· Tmmwwo/.，133: 3001 (1984) ; Brodeur 等人，Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications,第 5 1-63 頁（Marcel Dekker， Inc.，New York，1987);及 Boerner 等人，·/_ 147: 86 (1991))。經由人類B細胞融合瘤技術產生之人類抗體亦描述於Li等人，iVoc. iVa". JcW. 5W. C/Sd，103:3557-3562 (2006)中。其他方法包括例如於以下中描述之方法：美國專利第7，189,826號（描述自融合瘤細胞株產生單株人類18]^1 抗體）及 Ni，26(4):265-268 (2006)(描述人類-人類融合瘤）。人類融合瘤技術（三體雜交瘤（Trioma) 技術）亦描述於以下中：Vollmers 及 Brandlein，//Vsio/og;； 20(3):927-937 (2005)以及 Vollmers及

Brandlein, Methods and Findings in Experimental and Clinical Pharmacology, 27(3)·Λ85-91 (2005)。 % 158864.doc -53- 201215618 人類抗體亦可藉由分離選自人類源性噬菌體呈現文庫之 Fv純系可變域序列產生。此等可變域序列可接著與所要人類恆定域組合。下文描述自抗體文庫選擇人類抗體之技術。 5.自文庫獲得之抗體本發明組合物中之抗體可藉由篩檢組合文庫中具有所要活性之抗體來分離。舉例而言，此項技術中已知用於產生噬菌體呈現文庫及筛檢此等文庫中具有所要結合特徵之抗體的多種方法。此等方法例如於Hoogenboom等人， Methods Mo/ecw/ar Bz’o/ogy 178:1-37 (O'Brien 等人編， Human Press, Totowa, NJ，2001)中综述，且例如於以下中進一步描述：McCafferty 等人，iVaiMre 348:552-554 ; Clackson等人，iVaiwre 352: 624-628 (1991) ; Marks等人，乂 Mol. Biol. 222: 581-597 (1992) ; Marks 及 Bradbury，

Mei/zoi/s /w Mo/ecw/ar 248:161-175 (Lo編，Human

Press，Totowa, NJ, 2003) ; Sidhu等人，Mo/.价〇/. 338(2): 299-310 (2004) ; Lee 等人，/· Mo/. 340(5): 1073-1093 (2004) ； Fellouse, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101(34): 12467-12472 (2004)；及 Lee 等人，J- Immunol. Methods 284(1-2): 119-132 (2004)。在某些噬菌體呈現方法中，VH及VL基因之譜系係藉由聚合酶鏈反應（PCR)分別選殖且隨機重組於噬菌體文庫中’可接著如 Winter等人，乂狀.及ev. /mmwwo/.，12: 433-455 (1 994)中所述篩檢該等噬菌體文庫中之抗原結合噬菌體。 158864.doc -54- 201215618 噬菌體通常呈現呈單鏈Fv(scFv)片段形式或呈Fab片段形式之抗體片段。來自經免疫來源之文庫提供對免疫原具有高親和力之抗體而無需構築融合瘤。或者，天然譜系可經選殖（例如自人類選殖）以提供針對廣泛範圍之非自體抗原以及自體抗原之單一來源的抗體而不進行任何免疫，如由 Griffiths等人，五乂 12: 725-734 (1993)所述。最後，亦可藉由自幹細胞選殖未重排之V基因區段且使用含有隨機序列之PCR引子以編碼高度可變CDR3區且達成活體外重排來合成製備天然文庫，如由Hoogenboom及Winter, «/. Mo/.价〇/., 227: 381-388 (1992)所述。描述人類抗體噬菌體文庫之專利公開案包括例如：美國專利第5,750,373號、及美國專利公開案第2005/0079574號、第2005/01 19455 號、第 2005/0266000 號、第 2007/0117126 號、第 2007/ 0160598 號、第 2007/0237764 號、第 2007/0292936 號及第 2009/0002360號。自人類抗體文庫分離之抗體或抗體片段在本文中視為人類抗體或人類抗體片段。 6.多特異性抗體在某些實施例中，本文提供之抗體為多特異性抗體，例如雙特異性抗體。多特異性抗體為對至少2個不同位點具有結合特異性之單株抗體。在某些實施例中，結合特異性之一係針對複合物I或gH且另一結合特異性係針對任何其他抗原。在某些實施例中，結合特異性之一係針對複合物 I且另一結合特異性係針對gH。在某些實施例中，雙特異 158864.doc •55- 201215618 性抗體可與複合物I或gH之2個不同抗原決定基結合。雙特異性抗體亦可用於將細胞毒性劑定位於在細胞表面上具有複合物I或gH之細胞。雙特異性抗體可製備成全長抗體或抗體片段。製備多特異性抗體之技術包括（但不限於）重組共表現具有不同特異性之兩個免疫球蛋白重鍵-輕鍵對（參見Mil stein 及 Cuello，305: 537 (1983)) ; WO 93/08829 ;及

Traunecker等人，五M50 «/· 10: 3655 (1991));及「孔中紐 (knob-in-hole)」工程改造（參見例如美國專利第5 73 1 168 號）。多特異性抗體亦可藉由以下方式製備：工程改造靜電牽引（electrostatic steering)效應以製備抗體以雜二聚分子（WO 2009/089004A1);交聯兩個或兩個以上抗體咬片段 (參見例如美國專利第4,676,980號，及Brennan等人 229: 81 (1985));使用白胺酸拉鏈以產生雙特異性抗體（參見例如Kostelny 等人，J. 148(5).1547- 1553 (1992));使用「雙功能抗體」技術以製備雙特異性抗體片段（參見例如Hollinger等人，5^·. 90:6444-6448 (1993));及使用單鍵 Fv(sFv)二聚體（參見例如Gruber等人，《/· /wwwwo/·，152:5368 (1994));及如例如Tutt等人，《/. 147: 60 (1991)中所述製備三特異性抗體。具有3個或3個以上功能性抗原結合位點之經工程改造抗體（包括「章魚抗體（Octopus antibody)」）亦包括在本文中 (參見例如 US 2006/0025576A1)。 158864.doc -56- 201215618 本文之抗體或片段亦包括包含與複合物I或gH以及另一不同抗原結合之抗原結合位點的「雙重作用FAb」或「DAF」（參見你J 士aUS 2008/0069820)。 7.抗體變異體在某些實施例中’涵蓋本文提供之抗體之胺基酸序列變異體。舉例而言，可能需要改良抗體之結合親和力及/或其他生物性質。抗體之胺基酸序列變異體可藉由將適當修飾引入編碼該抗體之核苷酸序列中或藉由肽合成加以製備。此等修飾包括例如在抗體之胺基酸序列内缺失及/或插入及/或取代殘基。可進行缺失、插入及取代之任何組合以獲得最終構築體，其限制條件為最終構築體具有所要特徵’例如抗原結合。 a)取代、插入及缺失變異體在某些實施例中，提供具有一或多個胺基酸取代之抗體變異體。取代突變誘發之相關位點包括HVr及Fr。保守性取代展示於表1中之標題「保守性取代」下。更實質性變化提供於表1中之標題「例示性取代」下且如下文關於胺基酸側鏈類別進一步描述。胺基酸取代可引入相關抗體中且篩檢具有所要活性，例如保留/改良之抗原結合、降低之免疫原性或改良之ADCC或CDC的產物。 158864.doc •57· 201215618 表1 原始殘基例示性取代較佳取代 Ala(A) Val ; Leu ; lie Val Arg(R) Lys ; Gin ; Asn Lys Asn(N) Gin ; His ; Asp，Lys ; Arg Gin Asp(D) Glu ; Asn Glu Cys(C) Ser ； Ala Ser Gln(Q) Asn ; Glu Asn Glu(E) Asp ; Gin Asp Gly(G) Ala Ala His(H) Asn ； Gin ； Lys ； Arg Arg Ile(I) Leu ; Val ; Met ; Ala ; Phe ;正白胺酸 Leu Leu(L) 正白胺酸；lie ; Val ; Met ; Ala ; Phe lie Lys(K) Arg ; Gin ; Asn Arg Met(M) Leu ; Phe ; lie Leu Phe(F) Trp ； Leu ； Val ； lie ； Ala ； Tyr Tyr Pro(P) Ala Ala Ser(S) Thr Thr Thr(T) Val ； Ser Ser Trp(W) Tyr ； Phe Tyr Tyr(Y) Trp ； Phe ； Thr ； Ser Phe Val(V) lie ; Leu ; Met ; Phe ; Ala ;正白胺酸 Leu 胺基酸可根據共有側鏈性質分組： (1) 疏水性：正白胺酸、Met、Ala、Val、Leu、lie ; (2) 中性親水性：Cys、Ser、Thr、Asn、Gin ; (3) 酸性：Asp、Glu ; (4) 驗性：His、Lys、Arg ; (5) 影響鏈定向之殘基：Gly ' Pro ; (6) 芳族：Trp、Tyr、Phe。非保守性取代將導致此等類別之一之一個成員轉換成另一類別。一種類型之取代變異體涉及取代親本抗體（例如人類化或人類抗體）之一或多個高變區殘基。一般而言，選擇用 -58- 158864.doc 201215618 於進—步研究之所得變異體相對於親本抗體將在某些生物 I1生貧（例如增加之親和力、降低之免疫原性）方面具有改進 (例如改良）及/或將具有親本抗體之實質上經保留之某些生物性質。一種例示性取代變異體為親和力成熟抗體，其可例如使用基於噬菌體呈現之親和力成熟技術（諸如本文所述之技術）方便地產生。簡言之，突變一或多個殘基且在噬菌體上呈現變異抗體並篩檢具有特定生物活性（例如結合親和力）之變異抗體。可在HVR中進行改變（例如取代）例如以改良抗體親和力。此等改變可在HVR「熱點（h〇tsp〇t)」（亦即由在體細胞成熟過程期間經受高頻率突變之密碼子編碼之殘基）（參見例如 Chowdhury, Mei/zoA Μο/. Βζ·ο/· 207:179-196 (2008))及/ 或SDR(a-CDR)中進行，且測試所得變異結合親和力。已例如於Hoogenboom等人，心/⑽ m:1-37 (〇，Brien等人編，Human Press，T〇t〇wa， NJ，（2001))中描述藉由構築並自二級文庫再選擇來進行親和力成熟。在親和力成熟之一些實施例中，藉由任何多種方法（例如易出錯PCR、鏈改組或寡核苷酸定點突變誘發）將多樣性引入選擇進行成熟之可變基因中。接著產生二級文庫。接著篩檢文庫以鑑別具有所要親和力之任何抗體變異體。引入多樣性之另一方法涉及HVR定向方法，其中若干HVR殘基（例如一次4-6個殘基）經隨機化。參與抗原結合之HVR殘基可例如使用丙胺酸掃描突變誘發或模型化來特定鑑別。CDR-H3及CDR-L3尤其常被靶向。 158864.doc -59· 201215618 在某些實施例中，取代、插入或缺失可發生在一或多個 HVR内，只要此等改變不實質上降低抗體結合抗原之能力即可。舉例而t ’可在題中進行不實質上降低結合親和力之保守性改變（例如如本文提供之保守性取代）。此等改變可在HVR「熱點」或SDR外部，在以上提供之變異vh& VL序列之某#實施财’各HVR未改變或含有至多！個、 2個或3個胺基酸取代。一種適用於鑑別抗體之可供突變誘發靶向之殘基或區域的方法稱為「丙胺酸掃描突變誘發」，如藉由及Wells (1989) 244:1〇81-1〇85所述。在此方法中，一個殘基或一組目標殘基（例如帶電荷殘基，諸如 arg、asp、his、lys及gh〇經鑑別且經中性或帶負電荷胺基酸（例如丙胺酸或聚丙胺酸）置換以確定抗體與抗原之相互作用是否受影響ϋ取代可在對初始取代顯示功能敏感性之胺基酸位置處引入。或者或另外，抗原-抗體複合物之晶體結構用以鑑別抗體與抗原之間的接觸點。此等接觸殘基及鄰近殘基可作為取代候選物經靶向或消除。可篩檢變異體以確定其是否含有所要性質。胺基酸序列插入物包括長度在一個殘基至含有一百個或一百個以上殘基之多肽之範圍内的胺基及/或羧基端融合物' 以及具有單一或多個胺基酸殘基之序列内插入物。末端插入物之實例包括具有Ν端曱硫胺醯基殘基之抗體。抗體分子之其他插入變異體包括抗體端或c端與酶（例如對於ADEPT而言）或增加抗體之血清半衰期之多肽的融合 158864.doc •60- 201215618 物。 b)糖基化變異體在某些實施例中，本文提供之抗體經改變以增加或減小抗體糖基化之程度。在抗體上添加糖基化位點或使抗體缺失糖基化位點可藉由改變胺基酸序列以便產生或移除一或多個糖基化位點來方便地達成。當抗體包含Fc區時，可改變與其連接之碳水化合物。由哺乳動物細胞產生之天然抗體通常包含分支雙觸角 (biantennary)寡醣，其通常藉由N_鍵聯連接至Fc區之ch2 域的 Asn297。參見例如 Wright 等人，7757^(7// 15:26-32 (1997)。寡醣可包括各種碳水化合物，例如甘露糖、N_乙酿基葡糖胺（GlcNAc)、半乳糖及唾液酸，以及與雙觸角寡耱結構之「主幹」中之GlcNAc連接的海藻糖。在一些實施例中，可對本發明抗體中之寡醣進行修飾以產生具有某些經改良性質之抗體變異體。在一實施例中，提供具有缺乏與Fc區連接（直接或間接）之海藻糖之碳水化合物結構的抗體變異體。舉例而言，此抗體中之海藻糖之量可為1%至80%、1%至65%、5%至65% 或20%至40%。如例如WO 2008/077546中所述，藉由相對於Asn 297所連接所有醣結構（例如複合、雜交及高甘露糖結構）之總和計算Asn297處糖鏈内海藻糖的平均量來測定海藻糖之量，如藉由MALDI-TOF質譜所量測。Asn297係指位於Fc區中約位置297(Fc區殘基之Eu編號）處之天冬醯胺殘基；然而，歸因於抗體中之微小序列變化，Asn297亦三' 158864.doc •61 - 201215618

可能位於位置297之上游或下游約土3個胺基酸處，亦即介於位置294與300之間。此等海藻糖基化變異體可具有改良之ADCC功能。參見例如美國專利公開案第US 2003/ 0157108 號（Presta，L.);第 US 2004/0093621 號（Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd)。與「去海藻糖基化」或「海蕩糖缺乏」抗體變異體相關之公開案之實例包括：US 2003/0157108 ； WO 2000/61739 ； WO 2001/29246 ； US 2003/0115614 ； US 2002/0164328 ； US 2004/0093621 ； US 2004/0132140 ； US 2004/0110704 ； US 2004/01 10282 ； US 2004/0109865 ； WO 2003/085119 ； WO 2003/084570 ； WO 2005/035586 ； WO 2005/035778 ； W02005/053 742 ； W02002/031140 ； Okazaki 等人，乂尬/. 5，.〇/· 336:1239-1249 (2004) ； Yamane-Ohnuki 等人，Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004)。能夠產生去海藻糖基化抗體之細胞株之實例包括缺乏蛋白質海藻糖基化之Lecl3 CHO細胞（Ripka等人， Jrc/z. 249:533-545 (1986);美國專利申

請案第 US 2003/0157108 A1 號，Presta, L ;及 WO 2004/056312 Al，Adams等人，尤其在實例11)及基因剔除細胞株，諸如α-1,6-海藻糖基轉移酶基因基因剔除 CHO細胞（參見例如 Yamane-Ohnuki等人， 87: 614 (2004) ; Kanda，Υ·等人，Bioeng., 94(4):680-688 (2006);及 W02003/085107)。進一步提供具有對分寡醣之抗體變異體，例如其中與抗體之Fc區連接之雙觸角寡醣由GlcNAc對分。此等抗體變 158864.doc •62- 201215618 異體可具有降低之海藻糖基化及/或改良之ADCC功能。此等抗體變異體之實例例如描述於wo 2003/011878(Jean-Mairet等人）；美國專利第6,602,684號（Umana等人）；及US 2005/0123546(Umana等人）中。亦提供寡醣中至少1個半乳糖殘基連接至Fc區之抗體變異體。此等抗體變異體可具有改良之CDC功能。此等抗體變異體例如描述於WO 1997/30087(Patel等人）；WO 1998/58964(Raju，S.);及 WO 1999/22764(Raju, S.)中。 • c)Fc區變異體在某些實施例中，一或多個胺基酸修飾可引入本文提供之抗體之Fc區中，藉此產生Fc區變異體。Fc區變異體可包含在一或多個胺基酸位置處包含胺基酸修飾（例如取代）之人類Fc區序列（例如人類IgGl、IgG2、IgG3或IgG4 Fc區）。在某些實施例中，本發明涵蓋具有一些而非所有效應功能之抗體變異體，該等效應功能使該抗體成為合乎多種應用之需要之候選物，在該等應用中，活體内抗體半衰期較 ® 重要，而某些效應功能（諸如補體及ADCC)為不必要或有害的。可進行活體外及/或活體内細胞毒性檢定以確認 CDC及/或ADCC活性之降低/消減。舉例而言，可進行Fc受體（FcR)結合檢定以確保抗體缺乏FcYR結合（由此可能缺乏 ADCC活性）但保留FcRn結合能力。介導ADCC之初級細胞 NK細胞僅表現Fc(RIII，而單核細胞表現Fc(RI、Fc(RII及 Fc(RIII。FcR在造血細胞上之表現概述於Ravetch及Kinet， Annu· Rev. Immunol. 9:457-492 (1991)之第 464 頁上之表 3 二· 158864.doc -63- 201215618 中。評估相關分子之ADCC活性之活體外檢定的非限制性實例描述於美國專利第5,500,362號（參見例如Hellstrom, I. 等人，Proc. t/M 83:7059-7063 (1986))及

Hellstrom，I等人，5W. CAS^ 82:1499-1502 (1985) ; 5,821,337(參見Bruggemann, M.等人，《/. Mec?· 166:1351-1361 (1987))中。或者，可採用非放射性檢定方法（參見例如用於流動式細胞測量術之ACTITM非放射性細胞毒性檢定（CellTechnology, Inc，Mountain View，CA);及 CytoTox 96®非放射性細胞毒性檢定（Promega，Madison, WI))。適用於此等檢定之效應細胞包括周邊血液單核細胞 (PBMC)及自然殺手（NK)細胞。或者或另外，相關分子之 ADCC活性可例如於動物模型，諸如Clynes等人，ZVoc. Nat'l Acad. Sci. USA 95:652-656 (1998)中揭示之動物模型中進行活體内評估。亦可進行Clq結合檢定以確認抗體不能結合Clq且因此缺乏CDC活性。參見例如WO 2006/029879 及 WO 2005/100402 中之 Clq 及 C3c 結合 ELISA。為評估補體活化，可進行CDC檢定（參見例如 Gazzano-Santoro 等人，/. TrnmMwo/· Mei/zoc/i 202:163 (1996); Cragg, M.S·等人，101:1045-1052 (2003); 及 Cragg， M.S.及 M.J. Glennie, Blood 103:273 8-2743 (2004))。亦可使用此項技術中已知之方法進行FcRn結合及活體内清除率/半衰期測定（參見例如Petkova，S.B.等人， Int'l. Immunol. 18(12):1759-1769 (2006)) ° 效應功能降低之抗體包括Fc區殘基238、265、269、 158864.doc -64· 201215618 270、297、327及329中之一或多者經取代的抗體（美國專利第6,737,056號）。此等Fc突變體包括在胺基酸位置265、 269、270、297及3 27中之兩者或兩者以上處具有取代的Fc 突變體’包括殘基265及297取代成丙胺酸之所謂「DANA」Fc突變體（美國專利第7,332,581號）。與FcR之結合得到改良或減弱之某些抗體變異體已有描述。（參見例如美國專利第6,737,056號；WO 2004/ 056312;及 Shields 等人，乂 5/0/. c/7謂.9(2): 6591-6604 (2001)) 〇在某些實施例中，抗體變異體包含具有改良ADCC之一或多個胺基酸取代’例如Fc區之位置298、333及/或334(殘基之EU編號）處之取代的Fc區。在一些實施例中’在Fc區中進行產生改變（亦即改良或減弱）之Clq結合及/或補體依賴性細胞毒性（CDC)的改變，例如如美國專利第6,194,551號、WO 99/51642及Idusogie 等人，*/. 164: 4178-4184 (2000)中所述。半衰期增加且與負責將母體IgG轉移至胎兒之新生兒Fc 受體（FcRn)(Guyer 等人，乂 1 17:587 (1976)及 Kim 等人，J. /www⑽/. 24:249 (1994))之結合改良的抗體描述於 US 2005/0014934A1 (Hinton等人）中。彼等抗體包含其中具有改良Fc區與FcRn之結合之一或多個取代的Fc區。此等 Fc變異體包括在以下Fc區殘基中之一或多者處具有取代之 Fc變異體：238、256、265、272、286、303、305、307、 311 、 312 、 317 、 340 、 356 、 360 、 362 、 376 、 378 、 380 、 158864.doc -65- 201215618 3 82、413、424或434，例如Fc區殘基434經取代（美國專利第 7,371，826號）。關於Fc區變異體之其他實例，亦參見Duncan及Winter， 322:738-40 (1988);美國專利第 5,648,260號；美國專利第 5,624,821號；及\\^0 94/29351。 d) 半胱胺酸工程改造抗體變異翘在某些實施例中，可能需要產生半胱胺酸工程改造抗體’例如「琉基MAb(thioMAb)」，其中抗體之一或多個殘基經半胱胺酸殘基取代。在特定實施例中，經取代之殘基存在於抗體之可達位點處。藉由用半胱胺酸取代彼等殘基，反應性硫醇基藉此定位於抗體之可達位點處且可用於使抗體與其他部分（諸如藥物部分或連接子-藥物部分）結合以產生如本文中進一步描述之免疫結合物。在某些實施例中’任何一或多個以下殘基可經半胱胺酸取代：輕鏈之 V205(Kabat編號）；重鏈之A118(EU編號）；及重鏈Fc區之 S400(EU編號）。半胱胺酸工程改造抗體可如例如美國專利第7,521，541號中所述來產生。 e) 抗體衍生物在某些實施例中，本文提供之抗體可進一步修飾以含有此項技術中已知且易於獲得之其他非蛋白質部分。適於衍生化抗體之部分包括（但不限於）水溶性聚合物。水溶性聚 «物之非限制性實例包括（但不限於）聚乙二醇（PEG)、乙一醇/丙二醇之共聚物、羧甲基纖維素、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯啶_、聚]，3_二氧雜環戊烷 '聚_1'6_三 158864.doc • 66 - 201215618 心烷乙烯/順丁烯二酸酐共聚物、聚胺基酸（均聚物或無規/、聚物）及葡聚糖或聚(N_乙烯基吡咯啶酮）聚乙二醇、丙 7醇均聚物、聚環氧丙烧/環氧乙院共聚物、聚氧乙稀化多元醇(例如甘油)、聚乙烯醇及其混合物。聚乙二醇丙醛由於其於水中之穩定性而可在製造上具有優勢。聚合物可八有彳何刀子里，且可為分支鏈或未分支鏈。與抗體連接之聚合物之數目可變化，且若連接一個以上聚合物，則該等聚合物可為相同或不同分子。一般而言，用於衍生化: ® 物之數目及/或類型可基於包括（但不限於）以下之考慮因素來確定：欲改良之抗體之特定性質或功能、抗體衍生物是否將用於確定條件下之療法等。在另一實施例中，提供抗體與可藉由暴露於輻射來選擇性加熱之非蛋白質部分的結合物。在一實施例中，非蛋白質部分為碳奈米管（Kam等人，Proc· #加/· &厂C/以 102: 11600-11605 (2005))。輻射可具有任何波長，且包括 (但不限於）不損傷普通細胞但可將非蛋白質部分加熱至可 • 殺死與抗體-非蛋白質部分鄰近之細胞之溫度的波長。 C·重組方法及組合物可使用例如如美國專利第4,816,567號中所述之重組方法及組合物產生抗體。在一實施例中，提供本文所述之編碼抗複合物I抗體或抗gH抗體之經分離核酸。此核酸可編碼包含VL之胺基酸序列及/或包含抗體之VH之胺基酸序列 (例如抗體之輕鏈及/或重鏈）。在另一實施例中，提供一或多種包含此核酸之載體（例如表現載體）。在另一實施例 158864.doc -67- 201215618 中’提供包含此核酸之宿主細胞。在一此類實施例中，宿主細胞包含（例如已經以下轉型）：⑴包含某一核酸之載體，該核酸編碼包含抗魏之胺基酸序列及包含抗體vh 之胺基酸序列，或（2)包含編碼包含抗體VL之胺基酸序列之核酸的第-載體·，及包含編碼包含抗體VH之胺基酸序宿主細胞為真核細列之核酸的第二載體。在一實施例中胞，例如中國倉鼠卵巢（CHO)細胞或淋巴細胞（例如γ〇、 NS0、Sp20細胞）。在一實施例中，提供一種製備抗複合物 I抗體或抗gH抗體之方法，其中該方法包含在適於表現該抗體之條件下培養如上文所提供之包含編碼該抗體之核酸的佰主細胞，及視情況自該宿主細胞（或宿主細胞培養基）回收該抗體。對於重組產生抗複合物I抗體或抗gH抗體，分離編碼例如如上所述之抗體之核酸且插入一或多個載體中以供進一步在宿主細胞中選殖及/或表現。此核酸可易於使用習知程序（例如藉由使用能夠與編碼抗體之重鏈及輕鏈之基因特異性結合的寡核苷酸探針）分離及定序。適於選殖或表現抗體編碼載體之宿主細胞包括本文所述之原核或真核細胞。舉例而言，抗體可於細菌中產生，特定言之當不需要糖基化及Fc效應功能時。關於在細菌中表現抗體片段及多肽，參見例如美國專利第5,648,237號、第 5,789，199號及第 5,840,523 號。（亦參見 Charlton， in Molecular Biology,第 248 卷（B.K.C. Lo 編，Humana Press，Totowa，NJ，2003)，第 245-254 頁’其描述在大腸桿 158864.doc -68- 201215618 菌中表現抗體片段）。在表現之後 p 说抗體可自細菌細胞漿 (bacterial cell paste)分離於可溶性部分中且可進一步純化。除原核生物外，諸如絲狀真菌或酵母之真核微生物為適於選殖或表現抗體編碼載體之宿主，包括糖基化路徑已經「人類化」’ &而使得所產生之抗體具有部分或完全人類糖基化型態的真菌及酵母菌株。參見Gerngr〇ss， 22:1409-1414 (2004)及 Li 等人，紿 μ 24:210-215 (2006)。適於表現糖基化抗體之宿主細胞亦源於多細胞生物體 (無脊椎動物及脊椎動物）。無脊椎動物細胞之實例包括植物及昆蟲細胞。已鑑別出眾多可與昆蟲細胞聯合使用之桿狀病毒株’特定言之用於轉染草地黏蟲（补 ffugiperda)細跑。植物細胞培養物亦可用作宿主。參見例如美國專利第 5,959，177 號、第 6,040,498 號、第 6,42〇 548 號、第 7，125,978號及第6,417,429號（描述用於在轉瘦基因植物中產生抗體之PLANTIBODIEStm技術）〇脊椎動物細胞亦可用作宿主。舉例而言，適於在懸浮液中生長之哺乳動物細胞株可為適用的。適用哺乳動物宿主細胞株之其他實例為經SV40轉型之猴腎CV1細胞株（COS-7);人類胚腎細胞株（293或293細胞，如例如Graham等人， J. Ge« KzW. 36:59 (1977)中所述）；幼小倉鼠腎細胞 (BHK);小鼠足細胞（TM4細胞’如例如Mather，5/〇/· 158864.doc -69- 201215618 23:243-251 (1980)中所述）；猴腎細胞（CVI);非洲綠猴腎細胞（VERO-76);人類子宮頸癌細胞（HELA);犬腎細胞（MDCK);布法羅大鼠（buffalo rat)肝細胞（BRL 3 A); 人類肺細胞（W138);人類肝細胞（Hep G2);小鼠乳腺腫瘤 (MMT 060562) ; TRI細胞，如例如Mather等人，见]7. Jcad. Scz·. 383:44-68 (1982)中所述；MRC 5 細月包；及 FS4 細胞。其他適用哺乳動物宿主細胞株包括中國倉鼠卵巢 (CHO)細胞，包括 DHFR-CHO 細胞（Urlaub 等人，Proc. iVai/· Acad. Sci. 77:42 16 (1980));及骨髓瘤細胞株，諸如 Y0、NS0及Sp2/0。關於適於抗體產生之某些哺乳動物宿主細胞株之綜述，參見例如Yazaki及Wu, Mei/zoA Molecular Biology,第 248卷（B.K.C. Lo編，Humana Press, Totowa, NJ)，第 255-268 頁（2003)。 D.檢定本文提供之抗複合物I抗體或抗gH抗體可藉由此項技術中已知之各種檢定針對其物理/化學性質及/或生物活性進行鑑別、筛檢或表徵。 1.結合檢定及其他檢定在一態樣中，例如藉由諸如ELISA、西方墨點等之已知方法測試本發明抗體之抗原結合活性。在另一態樣中，競爭檢定可用於鑑別與本文所述之抗複合物I抗體競爭結合複合物I之抗體。在另一態樣中，競爭檢定可用於鑑別與本文所述之抗gH 抗體競爭結合gH之抗體。 158864.doc -70- 201215618 在某些實施例中，該種競爭抗體與gH或複合物I之相同抗原決定基（例如線性抗原決定基或構形抗原決定基）結合。用於定位抗體所結合之抗原決定基之詳述例示性方法提供於 Morris (1996)「Epitope Mapping Protocols」’Methods k Mo/ecw/ar 价o/og_y 第 66 卷（Humana Press, Totowa, NJ) 中o 在一個例示性競爭檢定中，在包含分別與複合物I或gH 結合之第一經標記抗體以及第二未標記抗體之溶液中培育經固定複合物I或gH，測試該第二未標記抗體與該第一抗體競爭結合複合物I或gH之能力。第二抗體可存在於融合瘤上清液中。作為對照，經固定複合物I或gH在包含第一經標記抗體但不包含第二未標記抗體之溶液中培育。在允許第一抗體與複合物I或gH結合之條件下培育之後，移除過量未結合抗體，且量測與經固定複合物I或gH締合之標記的量。若相對於對照樣品，測試樣品中與經固定複合物 I或gH締合之標記的量實質上降低，則指示第二抗體與第一抗體競爭結合複合物I或gH。參見Harlow及Lane (1988) Antibodies: A Laboratory Manual % \A (Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY) ° 競爭檢定亦可以如上所述之方式，用使用經複合物I或複合物II之gH及/或其他成員轉染且在細胞表面上表現該 gH及/或該等其他成員之細胞進行的FACS來進行。另外，用gH及/或復原複合物I或複合物II進行之ELISA亦可用於 158864.doc -71 - 201215618 競爭檢定中。使用FACS及ELISA量測抗gH抗體及抗複合物I抗體進一步描述於實例中。 2·活性檢定在一態樣中’提供用於鑑別具有生物活性之抗複合物j 抗體之檢疋。生物活性可包括例如與由Ul 12 8、UL13 0、 UL131與gH/gL締合產生之構形抗原決定基特異性結合；或與複合物I之單一蛋白質内之抗原決定基特異性結合；中和 HCMV，EC9〇為 0.7 |ig/ml或 0.7 pg/ml以下。在一些實施例中’ EC9〇為0.5 pg/ml或0.5 pg/ml以下。在其他實施例中，ECpo為0.3 pg/ml或0.3 pg/ml以下。在其他實施例中， EC90為0.1 pg/ml或〇. 1 pg/mi以下。在其他實施例中，ε^9〇為0.08 pg/ml或0.08 pg/ml以下。在其他實施例中，Ec9〇為 0.06 pg/ml或0.06 pg/ml以下。在其他實施例中，Ec9〇為 0.04 pg/ml或〇.〇4 pg/ml以下。在其他實施例中，EC9〇為 0.02 pg/ml或0.02 pg/ml以下。在其他實施例中，Ec9〇為 0.015 pg/ml或0.015 pg/ml以下。在其他實施例中，Ec9〇為 0.012#邑/1111或0.012 48/1111以下。在其他實施例中，^9〇為 0.011 pg/ml或0.011 pg/ml以下。在其他實施例中，Ec9〇為 0.010 pg/ml或0.010 pg/ml以下。亦提供包含具有此生物活性之抗體之組合物。在一態樣中，k供用於鑑別具有生物活性之抗gH抗體之檢定。生物活性可包括例如中和HCMV，EC90為1 pg/ml、 0.9 μδ/ml、0.8 pg/ml、〇·7 ng/m卜〇.6 μ§/ηι卜〇 5 ^/ml、 0.4 pg/ml、0.3 pg/ml、0.2 pg/ml、〇1 μ§Λη1、〇〇9 158864.doc •11- 201215618

Pg/ml ' 〇·〇8 pg/ml、〇·07 pg/ml、〇〇6 Kg/m卜 0.04 pg/ml或 0.04 pg/mi以下。本發明組合物中之抗gH抗體與在桿狀病毒中表現之 gH/gL—聚體結合的IC50為〇.17 nM4〇 17 nM以下，例如〇16 爾、0.15 nM、0.14 nM、〇.13 nM、〇12 碰、〇 ιι nM、（Uo nM、〇.G9 nM、G ⑽ nM、g Q7 nM、〇篇 _、〇_〇5 nM、0.04 nM、0.03 nM、〇〇2 nM、〇〇1 邊或〇〇i

nM以下。亦提供包含具有此活體内及/或活體外生物活性之抗體之組合物。在某些實施例中，測試本發明抗體之此生物活性。對於該種檢定之例示性描述，參見實例3。 E·免疫結合物本發明亦提供包含含有本文抗複合物丨抗體或抗§11抗體與或夕種細胞毋性劑結合之免疫結合物之組合物，該等細胞毒性劑諸如化學治療劑或藥物、生長抑制劑、毒素 (例如蛋白吳毒素，細菌 '真菌、植物或動物來源之酶促活性毒素；或其片段）、或放射性同位素。在貫施例中，免疫結合物為抗體-藥物結合物（ADC)，其中抗體與一或多種包括（但不限於）以下之藥物結合：類美登素（maytansinoid)(參見美國專利第5 2〇8 〇2〇號、第 5,416,064號及歐洲專利EP 〇 425 235 B1);阿瑞他汀 (auristatin)，諸如單曱基阿瑞他汀（m〇n〇methylauristatin) 藥物部分DE及DF(MMAE及MMAF)(參見美國專利第 5,63 5,483號及第5,780,588號及第7,498,298號）；海兔毒素 158864.doc -73- 201215618 (dolastatin);卡奇黴素（calicheamicin)或其衍生物（參見美國專利第 5,712,374號、第 5,714,586號、第 5,739，116號、第 5,767,285 號、第 5,770,701 號、第 5,770,710 號、第 5,773,001 號及第 5,877,296 號；Hinman 等人，Cawcer 及以. 53:3336-3342 (1993)；及 Lode 等人，Cancer Res. 58:2925-2928 (1998));蒽環黴素（anthracycline)，諸如道諾黴素 (daunomycin)或小紅莓（doxorubicin)(參見 Kratz 等人， CwrreW Med. C/zew. 13:477-523 (2006) ; Jeffrey 等人，

Bioorganic & Med. Chem. Letters 16:358-362 (2006); Torgov 等人，16:717-721 (2005) ; Nagy 等人，/Voc. 7V"a"· 97:829-834 (2000);

Dubowchik 等人，5/oorg. Met/· C/zew· Leiiers 12:1529-1532 (2002) ； King 等人，J. Med. Chem. 45:4336-4343 (2002);及美國專利第6,630,579號）；曱胺喋呤 (methotrexate);長春花驗醢胺（vindesine);紫杉烧 (taxane)，諸如歐洲紫杉醇（docetaxel)、太平洋紫杉醇 (paclitaxel)、拉諾紫杉醇（larotaxel)、特塞紫杉醇 (tesetaxel)及沃塔紫杉醇（ortataxel); 黴菌毒素 (trichothecene);及 CC1065。在另一實施例中，免疫結合物包含如本文所述之抗體與酶促活性毒素或其片段，包括（但不限於）白喉 (diphtheria)A鏈、白喉毒素之非結合活性片段、外毒素 (exotoxin)A鍵（來自綠腹桿菌（Pseudomonas aeruginosa))、篦麻毒素（ricin)A鏈、相思子毒素（abrin)A鏈、莫迪素 158864.doc •74- 201215618 (modeccin)A 鏈、α-帚麴菌素（sarcin)、油桐（Aleurites fordii)蛋白質、康乃馨（dianthin)蛋白質、洋商陸 (Phytolaca americana)蛋白質（pAPI、PAPII及 PAP-S)、苦瓜 (momordica charantia)抑制劑、麻瘋樹毒蛋白（curcin)、巴豆毋素（crotin)、肥息草（sapa〇naria 〇fficinaiis)抑制劑、白树素（gelonin)、有絲分裂素（mit〇geiiin)、侷限麴菌素 (restdctocin)、酚黴素（phen〇mycin)、伊諾黴素（en〇mycin) 及黴菌毒素（tricothecene)結合。

在另貫加例中’免疫結合物包含如本文所述之抗體與放射性原子結合以形成放射結合物。多種放射性同位素可用於產生放射結合物。實例包括At2丨丨、f3! ' 、 9〇、

Re186、Re188、Sm153 Βι212、p32 ' pb2i2&Lu之放射性同位素。當放射結合物用於偵測時，其可包含用於閃爍攝影研究之放射性原子，例如纪99〇1或1123 ;用於核磁共振（nmr) 成像（亦稱為磁共振成像，mri)之自旋標記，諸如再次碘_ 123、姨-131、姻- ill、翁 10 r 山 1， μ 1 _ ^ u 1 鼠-19、碳-13、氮-15、氧-17、亂、猛或鐵。抗體與細胞毒性劑之結合物可使用多種雙官能蛋白質偶合劑製備，該等偶合劑諸如N_丁二醯亞胺基_3_(2“比咬基一硫基）丙酸酯（SPDP)、丁二醯亞胺基_4_(N_順丁烯二醯亞胺甲基）環&烧-1-曱酉蔓g旨（SMCC)、亞胺基硫雜環戊烧 (IT)、亞胺基酯之雙官能衍生物(諸如二亞胺代己二酸二甲自旨鹽酸鹽）、活性醋(諸如二丁二醯亞胺基辛二酸醋）、醛 (諸如戊一醛）、雙疊氮基化合物（諸如雙（對疊氮基苯曱醯 158864.doc -75- 201215618 基）己二胺）、雙重氮衍生物（諸如雙-(對二重氮笨甲醯基）_ 乙二胺）、二異氰酸酯（諸如曱苯2,6-二異氰酸酯）、及雙活性氟化合物（諸如I，5-二氟-2,4-二硝基苯）。舉例而言，可如Vitetta等人，238:1098 (1987)中所述製備篦麻毒素免疫毒素。經碳標記之1-異硫氰基苯曱基-3-甲基二伸乙基三胺五乙酸（MX-DTPA)為一種使放射性核苷酸與抗體結合之例示性螯合劑。參見WO94/11026。連接子可為有助於細胞毒性藥物在細胞中釋放之「可裂解之連接子」。舉例而言，可使用酸不穩定連接子、肽酶敏感性連接子、光不穩定連接子、二曱基連接子或含有二硫化物之連接子（Chari 等人，Cancer Λα. 52:127-131 (1992);美國專利第5,208,020號）。本文之免疫結合物或ADC明確涵蓋（但不限於）用包括（但不限於）以下之可購得（例如自Pierce Biotechnology，Inc.， Rockford, IL.，U.S.A購得）之交聯試劑製備的此等結合物： BMPS、EMCS、GMBS、HBVS、LC SMCC、MBS ' ΜΡΒΗ、SBAP、SIA、SIAB、SMCC、SMPB、SMPH、硫基-EMCS、硫基-GMBS、硫基-KMUS、硫基·MBS、硫基-SIAB、硫基-SMCC及硫基-SMPB、及SVSB(丁二醯亞胺基-(4-乙烯颯）笨甲酸酯）。 F.用於診斷及偵測之方法及組合物在某些實施例中，如本文提供之任何抗複合物I抗體及/ 或抗gH抗體或包含此等抗體之組合物皆適用於偵測生物樣品中複合物I及/或gH之存在。如本文所用之術語「偵測」 201215618 涵蓋疋董或定性偵測。在某些實施例中，生物樣品包含細胞或組織’諸如胎盤、腎'心臟、肺、肝、胰臟、腸、胸腺、骨、腱、角膜、皮膚、心瓣膜及靜脈。此外，包含抗體之組合物可用於偵測内皮細胞、上皮細胞、纖維母細胞及巨噬細胞中之HCMV。在一實施例中’提供用於診斷或偵測方法中之抗複合物 I抗體及/或抗gH抗體。在另一態樣中，提供一種偵測生物樣品中複合物I及/或gH之存在之方法。在某些實施例中，方法包含使生物樣品與如本文所述之抗複合物〖抗體及/或抗gH抗體在允許抗複合物Σ抗體與複合物I結合及/或抗抗體與gH結合之條件下接觸，及偵測是否在抗複合物“充體與複合物I之間及/或在抗gH抗體與gH之間形成複合物。此方法可為活體外或活體内方法。在一實施例中，抗複合物I抗體或抗gH抗體或抗複合物丨抗體與抗抗體之組合用於選擇適於用抗複合物I抗體或抗抗體或抗複合物I抗體與抗gH抗體之組合進行治療之個體，例如當複合物I及gH 為用於選擇患者的生物標記時。可使用本發明組合物診斷之例示性病症包括HCMV感杂’諸如來自所移植器官或組織之HCMV感染' 先天性 HCMV感染、在妊娠期間之hcmv感染、及小孩、嬰兒及成人中之HCMV感染。在某些實施例中’提供包含經標記之抗複合物Ϊ抗體及/ 或抗gH抗體之組合物。標記包括（但不限於）直接偵測之標記或部分（諸如螢光標記、發色標記、電子緻密標記、化 158864.doc -77· 201215618 學發光標記及放射性標記）、以及例如經由酶促反應或分子相互作用間接偵測之部分（諸如酶或配位體）。例示性標記包括（但不限於）放射性同位素32p、、i25l '化及13|][; 螢光團，諸如稀土螯合物或螢光素（flu〇rescein)及其衍生物；若丹明（rhodamine)及其衍生物；丹磺醯基（dansyi); 傘酮（umbemferone);螢光素酶（iuceriferase)，例如螢火蟲螢光素酶及細菌螢光素酶（美國專利第4,737,456號）；螢光素（luciferin) ; 2,3-二氫酞嗪二酮；辣根過氧化酶（HRp); 鹼性磷酸酯酶（alkaline phosphatase) ; β_半乳糖苷酶；葡糖澱粉酶·’溶菌酶；醣氧化酶，例如葡萄糖氧化酶、半乳糖氧化酶及葡萄糖-6-磷酸去氫酶；雜環氧化酶，諸如尿酸酶及黃嘌呤氧化酶；與採用過氧化氫來氧化染料前驅體之酶 (諸如HRP、乳過氧化酶（lact〇peroxidase)或微過氧化酶）偶合；生物素/抗生蛋白（avidin);自旋標記；噬菌體標記；穩定自由基及其類似物。 G.醫藥調配物如本文所述之抗複合物I抗體或抗gH抗體或抗複合物"充體與抗gH抗體之組合的醫藥調配物藉由混合具有所要純度之此專抗體與一或多種視情況選用之醫藥學上可接受之載劑P/zar廳批以第 16版，〇s〇1，A 編 (1980))製備成凍乾調配物或水溶液形式。如本文所述，抗複合物I抗體及抗gH抗體可調配成單一組合醫藥調配物或各別醫藥調配物。醫藥學上可接受之載劑在所用劑量及濃度下對接受者通常無毒’且包括（但不限於）：緩衝劑，諸 158864.doc -78 - 201215618 如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其他有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸及曱硫胺酸；防腐劑（諸如氣化十八烷基二甲基苯甲基敍；氯化六經季錄（hexamethonium chloride);氣化笨甲烴敍（benzalkonium chloride);苄索氯敍（benzethonium chloride);苯酚；丁醇或苯曱醇；對羥基苯曱酸烷酯，諸如對羥基苯甲酸甲酯或對羥基苯甲酸丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環己醇；3-戊醇；及間甲酚）；低分子量（少於約1〇個殘基）多肽；蛋白質，諸如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，諸如聚乙烯吡咯啶酮；胺基酸，諸如甘胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺、組胺酸、精胺酸或離胺酸；單醣、雙醣及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑，諸如EDTA ;糖，諸如蔗糖、甘露糖醇、海藻糖或山梨糖醇；成鹽相對離子，諸如鈉；金屬錯合物（例如Zn-蛋白質錯合物）；及/或非離子型界面活性劑，諸如聚乙二醇（PEG)。本文之例示性醫藥學上可接受之載劑另外包括間質藥物分散劑，諸如可溶性中性-活性玻尿酸酶醣蛋白（sHASEGP)，例如人類可溶性PH-20 玻尿酸酶醣蛋白，諸如rHuPH20(HYLENEX®，Baxter International，Inc.)。某些例示性sHASEGP及使用方法（包括rHuPH20)描述於美國專利公開案第2005/0260186號及第 2006/0104968號中。在一態樣中，sHASEGP與一或多種其他葡糖胺聚糖酶（glycosaminoglycanase)(諸如軟骨素酶 (chondroitinase))組合 ° 例示性凍乾抗體調配物描述於美國專利第6,267,958號 158864.doc -79- 201215618 中。水性抗體調配物包括美國專利第6，171，586號及 W02006/044908中所述之調配物，w〇2〇〇6/〇449〇8中之調配物包括組胺酸乙酸鹽緩衝劑。除抗複合物I抗體及/或抗gH抗體之外，本文之調配物亦可含有為所治療之特定適應症所必需的活性成分，較佳具有彼此不產生不利影響之補充性活性的活性成分。舉例而言，可能需要另外提供更昔洛韋、佛斯卡耐特、纈更昔洛韋及西多福韋。此等活性成分適合以有效達成預定目的之量組合存在。活性成分可包覆在例如藉由凝聚技術或藉由界面聚合製備之微膠囊（例如分別為羥曱基纖維素或明膠微膠囊及聚_ (曱基丙烯酸甲酯）微膠囊）中；膠態藥物傳遞系統（例如脂質體、白蛋白微球體、微乳液、奈米粒子及奈米膠囊）中或巨乳液中。此專技術揭示於d •SWewces 第 16 版，〇s〇l，a_ 編（1980)中。可製備持續釋放製劑。持續釋放製劑之適合實例包括含有抗體之固體疏水性聚合物半透基質，該等基質呈成形物品（例如膜或微膠囊）形式。欲用於活體内投藥之調配物通常無菌。無菌性可易於例如藉由經由無菌過濾膜過濾來達成。 H·治療性方法及組合物本文提供之包含抗複合物Ϊ抗體及/或抗gH抗體之任何組合物皆可用於治療方法中。在一態樣中，提供用作藥劑之包含抗複合物“充體或抗 158864.doc -80- 201215618 gH抗體或抗複合物I抗體及抗gH抗體之組合物。在其他態樣中，提供用於治療HCVM感染之包含抗複合物I抗體或抗 gH抗體或抗複合物I抗體及抗gH抗體之組合物。在某些實施例中，提供用於治療方法中之包含抗複合物I抗體或抗 gH抗體或抗複合物I抗體及抗gH抗體之組合物。在某些實施例中，本發明提供用於治療患有HCMV感染之個體之方法中之包含抗複合物I抗體或抗gH抗體或抗複合物I抗體及抗gH抗體的組合物，該方法包含向該個體投與有效量之包含抗複合物I抗體及/或抗gH抗體之組合物。在其他實施例中，本發明提供用於預防、抑制或治療先天性HCMV感染或所移植組織、器官或供體受或已受HCMV感染之組織或器官移植接受者之HCMV感染之方法中的組合物。在一此類實施例中，組織或器官移植接受者呈HCMV感染血清陰性。在其他實施例中，移植接受者或個體先前已受HCMV 感染且處於HCMV再活化及感染之風險中。在某些實施例中，方法另外包含向個體或移植接受者投與有效量之至少另一例如如下文所述之治療劑。在其他實施例中，本發明亦提供用於治療受HCMV感染之嬰兒或在妊娠期間暴露於 HCMV之嬰兒之方法中之包含抗複合物I抗體或抗gH抗體或抗複合物I抗體及抗gH抗體的組合物，該方法包含投與該嬰兒有效量之包含本發明抗體或其組合之組合物。在其他實施例十，本發明提供用於治療、抑制或預防處於感染風險中之個體中之HCMV感染之包含抗複合物I抗體或抗 gH抗體或抗複合物I抗體及抗gH抗體的組合物。根據任何 158864.doc -81 - 201215618 以上實施例之「個體」較佳為人類。在另一癌樣中，本發明提供包含抗複合物〗抗體及/或抗 gH抗體或抗複合物I抗體及抗gH抗體之組合物製造或製備藥劑的用途。在一實施例中，藥劑係用於治療、預防或抑制HCMV感染。在另一實施例中，藥劑係用於治療、預防或抑制HCMV感染，包含向患有HCMV感染之個體投與有效量之該藥劑。在其他實施例中，藥劑係用於預防、抑制或治療先天性HCMV感染或所移植組織、器官或供體受或已欠HCMV感染之組織或器官移植接受者之HCMV感染的方法中。在一此類實施例中，組織或器官移植接受者呈 HCMV感染血清陰性。在其他實施例中，移植接受者或個體先前已受HCMV感染且處於HCMV再活化及感染之風險中。在某些實施例中，藥劑另外包含有效量之至少另一例如如下文所述之治療劑。在另—實施财，藥劑係用於治療、抑制或預防處於感染風險中之個體中之Hcmv感染，包含向該個體投與有效量之藥劑以抑制或預防HCMV感染。在其他實施例中，藥劑係用於治療受11(：]^乂感染之嬰兒或在妊娠期間暴露於HCMV之嬰兒，包含投與該嬰兒有效量之包含本發明抗體或其組合之組合物。根據任何以上實施例之「個體」可為人類。在另-態樣中’本發明提供一種治療、預防或抑制 HCM:感染之方法。在一實施例中，方法包含向個體投與有效量之包含抗複合物〗抗體及/或抗gH抗體之組合物。在其他實施例t，本發明提供一種預防、抑制或治療先天性 158864.doc -82 - 201215618

HCMV感染或所移植組織、器官或供體受或已受hcMV感染之組織或器官移植接受者之HCMV感染的方法，其包含向個體或移植接受者投與有效量之包含抗複合物〗抗體及抗gH抗體之組合物。在一此類實施例中，組織或器官移植接受者呈HCMV感染血清陰性。在其他實施例中，移植接文者或個體先前已受HCMV感染且處於HCMV再活化及感染之風險中。在一此類實施例中，方法另外包含向個體投與有效量之至少另-如下文所述之治療劑。在其他實施例中，本發明提供一種治療、抑制或預防受HCMV感染之嬰兒或在妊娠期間暴露於HCMV之嬰兒的方法，其包含投與 "亥兒有效里之包含本發明抗體或其組合之組合物。根據任何以上實施例之「個體」可為人類。在另-態樣中，本發明提供—種抑制或預防處於感染風險中之個體中之HCMV感染的方法。在一實施例中，方法包3向個體投與有效量之包含抗複合物1抗體及/或抗讲抗體之組合物以抑制或預防HCMV感染。在_實施例中，個體」為人類。在其他實施例中，所移植之器官或組織可為能夠自一個 =植至第二個體之任何器官或組織。舉例而言，所移植 7另可：(但不限於)心臟、腎、肝、肺、姨臟、腸或胸另卜，舉例而言，所移植組織可為（但不限於）手、角膜、皮膚、臉、蘭氏小島、骨髓、幹細胞、全血、血小 =血清、血球、血管、心瓣膜、骨、骨袓細胞、軟骨' 韌帶、腱、肌肉内襯。 158864.doc •83- 201215618 在另態樣中，本發明提供例如用於任何以上治療方法中之包含本文提供之任何抗複合物！抗體及/或抗gH抗體的組：物及醫藥調配物。在一實施例中，醫藥調配物包含本文提供之任何抗複合物I抗體及/或抗gH抗體及醫藥學上可接叉之載劑。在另一實施例中，醫藥調配物包含本文提供之任何抗複合物I抗體及/或抗gH抗體及至少另一例如如下文所述之治療劑。本發明組合物中之抗體可單獨或與其他藥劑組合用於療法中。舉例而言，本發明抗體可與至少另一治療劑共投與。在某些實施例中，另一治療劑為更昔洛韋、纈更昔洛羊、佛斯卡耐特及/或西多福韋。在其他實施例中，另一治療劑為另外治療性經分離抗體。以上所述之此等組合療法涵蓋組合投藥（其中兩種或兩種以上治療劑包括在同一或各別調配物中）；及分開投藥，在此情況下，本發明之抗體組合物之投與可在投與另 —治療劑及/或佐劑之前、同時及/或之後進行。本發明組合物（及任何其他治療劑）可藉由任何適合方式投與，該等方式包括非經腸、肺内及鼻内投藥，且必要時對於，部治療，包括病灶内投藥。非經腸輸注包括肌肉内、靜脈内、動脈内、腹膜内或皮下投藥。給藥可部分視投藥為短期或長期而定藉由任何適當途徑進行，例如藉由注射（諸如靜脈内或皮下注射）進行。各種給藥時程包括（但不限於）單次投藥或歷經多個時間點多次投藥，快速投藥 (bolus administration)及脈衝輸注涵蓋於本文中。 158864.doc -84- 201215618 本發明組合物將以符合良好醫學規範式調配、給藥及投與。在此情形中考慮之因素包括所治 ~ ’、 σ *、之特定病症、所治療之特定哺乳動物、個別患者之臨戾 & Λ 不瑪狀、病症之病因、藥劑傳遞部位、投藥方法、投藥時程 j任·久谱師已知之其他因素。組合物無需但視情況與一或多插a 4 裡虽刖用於預防或治療所述病症之藥劑一起調配。此等其他藥劑之有效量視存在於調配物中之抗體之量、病症類型或治療類型上論述之其他因素而定。此等藥劑通常以相同劑量且用如本文所述之投藥途徑使用，或以本文所述劑量之:1%至99% 使用，或以任何劑量且藉由憑經驗/臨床確定為適當的任何途徑使用。對於預防或治療疾病，本發明組合物中含有之抗體之適當劑量(當單獨或與一或多種其他額外治療劑組合使用時) 將視欲治療疾病之類型、抗體類型、疾病之嚴重性及病程、投與抗體以達成預防抑或治療目的、先前療法、患者之臨床病史及對抗體之反應以及主治醫師之判斷而定。本文所述之組合物中包括之抗體適合一次性或歷經一系列治療投與患者。視疾病之類型及嚴重性而定，無論例如藉由一或多次分開投藥或藉由連續輸注，約} μg/kg至15 mg/kg(例如（M mg/kg_1〇 mg/kg)之各抗體可為用於投與患者之初始候選劑量。視以上提及之因素而定，一種典型每曰劑罝可在約1 pg/kg至100 mg/kg或100 mg/kg以上的範圍内。對於歷經若干天或更長時間的重複投藥，視病狀而疋，治療通常將持續直至發生疾病症狀之所要抑制。各抗 158864.doc -85 - 201215618 體之一種例示性劑量在約0.05 mg/kg至約1〇 mg/kg之範圍内。因此，可向患者投與約0.5 mg/kg、2 〇 mg/kg、4 q mg/kg或10 mg/kg(或其任何組合）之一或多個劑量。此等劑量可間歇投與，例如每週或每3週投與（例如以使患者接受約2至約20或例如約6劑抗體）。可投與初始較高負載劑量 (loading dose)，隨後投與一或多個較低劑量。此療法之進程谷易藉由習知技術及檢定進行監測。應瞭解任何以上調配物或治療方法皆可使用本文所述之抗體之免疫結合物替代抗複合物Ϊ抗體及/或抗體來執行，或除抗複合物I抗體及/或抗§]^抗體之外亦可使用本文所述之抗體之免疫結合物來執行。 I·製品在本發明之另一態樣中，提供一種含有適用於治療、預防及/或診斷上述病症之物質的製品。該製品包含容器及位於該容器上或與該容器相關之標籤或藥品說明書。適合容器包括例如瓶、小瓶、注射器、1¥溶液袋等。容器可由夕種材料，諸如玻璃或塑料形成。容器容納單獨或與可有 _ 效治療、預防及/或診斷病狀之另一組合物組合的組合物且可具有無菌進入孔（例如容器可為具有可由皮下注射針刺穿之塞子的靜脈内溶液袋或小瓶）。、组合物中之至 ^種活性劑為本發明抗體。標籤或藥品說明書指示組合物用於治療所選病狀。此外’製品可包含⑷内含組合物之第4器，其中該組合物包含本發明抗體；及内含組合之第一合器，其中該組合物包含另一細胞毒性劑或其他 158864.doc -86 - 201215618 治療劑。本發明之此實施例中之製品可進一步包含藥品說明書，其指不組合物可用於治療特定病狀。或者或另外，製品可進一步包含含有醫藥學上可接受之緩衝液（諸如注射用抑菌水（BWFI)、磷酸鹽緩衝鹽水、林格氏溶液 (Ringer’s solution)及右旋糖溶液）之第二（或第三）容器。其可進一步包括就商業及使用者觀點而言合乎需要之其他物質’包括其他緩衝劑、稀釋劑、過濾器、針及注射器。應瞭解任何以上製品皆可包括本文所述之抗體之免疫結 • 合物替代抗複合物1抗體及/或抗gH抗體，或除抗複合物I抗體及/或抗gH抗體之外’亦包括本文所述之抗體之免疫結合物。 III.實例以下為本發明之方法及組合物之實例。應瞭解，鑒於以上提供之一般性描述’可實施各種其他實施例。材料及方法病毒生長。在除在DMEM培養中之外皆按照說明在繼代 ® 7-14下培養之人類胎兒肺纖維母細胞（MRC5)(美國菌種保存中心（American Type Culture Collection) > ATCC; Manassas，VA)中，或在按照說明在繼代4-6下培養之p〇人類臍靜脈内皮細胞（HUVEC)(Lonza; Basel，Switzerland)中增殖 VR1814(Ravello Lab, Fondazione IRCCS Policlinic。

San Matteo, Pavia Italy)，且濃縮上清液’再懸浮於完全培養基中，並冷凍。完全培養基由補充有10%胎牛血清、青黴素（penicillin)/鏈黴素（streptomycin) ' L-楚酿胺酸（全部 158864.doc •87· 201215618 來自 Invitrogen; Carlsbad, CA)及 20 mM HEPES(Cellgro; Manassas，VA)之DMEM構成。於96孔板中對MRC5及 HUVEC細胞以及人類視網膜色素上皮細胞（ARPE-19)(ATCC-按照說明培養）、單核細胞源性巨噬細胞（MDM) 及作為胎盤上皮細胞之細胞滋養層細胞（cytotrophoblast)進行檢定。按照說明使用RosetteSep人類單核細胞富集混合物（Stemcell Technologies，Vancover，BC，Canada)自全血分離MDM。單核細胞接著用0.1 pg/ml脂多醣（LPS) (Invivogen)刺激且在DMEM中培育隔夜。血小板及未結合細胞在感染之前用PBS洗除。細胞滋養層細胞自19週之胎盤（Pereira Lab, UCSF，使用來自 Librach等人，1991, «/CF 1 13:437-449之方案）分離且接種於96孔組織培養板中。檢定細胞滋養層細胞製備物之細胞滋養層細胞標記細胞角蛋白（cytokeratin)7(CK7)(Dako)且發現在感染開始時陽性超過 90%。以下 HCMV 病毒株自 Jay Nelson 博士（University of Oregon Health and Science University(OHSU); Portland, OR)獲得：Adinis、Brown、Cano、Davis、Dement、 Grunden 、Harris 、Keone 、Lysistrata 、NewRock 、 Phoebe、Powers、Salvo、Schmoe、Simpson及 Watkins ° 以下 HCMV病毒株自 Sunwen Chou(OHSU)博士獲得：C079、 C323、C327、C336、C352、C353及C3 59。添加經解凍病毒至MRC5纖維母細胞中且使其生長直至1 〇〇% CPE可見 (感染後約1 〇-12天）。3天後’刮掉細胞且收集上清液並使 158864.doc -88- 201215618 用超速離心進行濃縮。各病毒株之稀釋液用於在96孔板中感染新鮮纖維母細胞。使病毒感染18小時，此後細胞用 100°/。乙醇固定。用 Mab810( —種抗 IE 抗體）（Millipore; Billerica，ΜΑ)進彳亍染色並進行免疫螢光分析。計算效價且用於確定為達成中和檢定之感染倍率（MOI)l所必需之病毒量 ° 中和檢定。基本上如Abai等人，2007, J. Twww⑽/ Mei/zoc?·?，3 22:82-93中一般進行中和檢定，例外之處為檢定在DMEM(Gibco)中進行且藉由如上所述之免疫螢光進行偵測。簡言之，連續稀釋抗體且與在完全培養基中稀釋之病毒混合以使當與培養基或非抑制抗體混合時最終病毒粒子濃度致使每個細胞約1個感染性病毒（ΜΟΙ=1)。混合抗體與病毒且在37度下培育1小時，隨後添加至匯合單層MRC5、 ARPE-19、HUVEC或單核細胞源性巨噬細胞（MDM)中。使病毒感染1 8小時，在該時間之後細胞用100%乙醇固定。細胞於含2% BSA之PBS中阻斷且接著用抗HCMV IE抗體 Mab810(Millipore)或兔抗 HCMV IE(Johnson Lab，Oregon Health Sciences University)染色。細胞用PBS洗蘇且與適當 AlexaFluor 488 及 Hoechst 染色劑（Invitrogen)—起培育。含有指定抗體濃度之一式兩份孔之資料經平均化且與在不存在抗體下之感染（設定為100%)進行比較。使用 ImageXpress® Micro™及 MetaXpress®(Molecular Devices) 使細胞成像並計數。對資料進行對數變換，校正，繪圖且使用 Prism(GraphPad Software, La Jolla, CA)計算 EC50及 158864.doc -89- 201215618 EC90。使用EC50曲線擬合演算法自最佳擬合曲線計算 EC90值。偵測之檢定範圍為每孔100-6.5χΙΟ5個感染性病毒粒子。在實驗之間觀察到檢定驗證，尤其在不同病毒感染倍率之情況下。臨床病毒株之擴增及叢集。使臨床HCMV病毒株（來自 Oregon Health Sciences University)在纖維母細胞上生長，收集上清液，且使用超速離心進行濃縮。使用DNeasy血液及組織套組（Qiagen)自受感染細胞分離DNA。使用不受專利權限制之HCMV病毒株之比對來設計HCMV基因引子。選擇分開小於500個鹼基之保守區。來自臨床病毒株之序列使用Sequencher®察看且使用MacVector轉譯。藉由 ClustalW且在Jalview比對編輯器中進行比對並使用最近鄰一致性％構築樹。由桿狀病毒表現蛋白質。為了偵測表現之蛋白質，藉由標準程序產生兔多株抗體。各兔用對應於HCMV蛋白質之肽免疫。各肽如下： gH_871 HPHHEYLSDLYTPCSSSGRRDHSLERLTR(SEQIDNO:195) » gH_977 CPHVWMPPQTTPHDWKGSHTTSGLHRPH(SEQ ID NO: 196) > gL_873 CGLPPELKQT1RVNLPAHSRYGPQAVDAR(SEQIDNO:197) > UL128_988VGLDQYLESVKKHKRLDVCRAKMGYMLQ(SEQIDNO:198) > UL128_989RQWHNKLTSCNYNPLYLEADGRIR(SEQIDNO:199) > UL130_892 RDYSVSRQVRLTFTEANNQTYTFCraPNCSEQ JD NO:200) > UL130_892SPWFILTANQNPSPPWSKLTYPKPHDC(SEQIDNO:201)，及 UL131 993TAEKNDYYRVPHYWDACSRALPDQTRYK(SEQIDNO:202)» 158864.doc •90- 201215618 藉由在肽結合管柱上進行捕捉且隨後溶離來純化血清。對於分泌之蛋白質，製備各個別HCMV蛋白質之細胞外域之桿狀病毒構築體。HCVM細胞外域之各者與桿狀病毒信號序列及C端上之6x-His標記融合。桿狀病毒表現載體用於感染SF9或Tini昆蟲細胞。收集蛋白質並進行凝膠過濾，且藉由丙稀醯胺凝膠電泳及庫馬斯（coomassie)染色加以檢查。匯合含有全部5種蛋白質（gH、gL、UL128、 UL130 及 UL131)之部分。藉由使 gB S64-K115 與 Q499-E655 融合來產生gB三聚體構築體。當藉由感染昆蟲細胞進行表現時，此構築體產生gB蛋白質，其不經膜錨定，如所預期形成為三聚體，結合中和及非中和gB抗體，且可能呈其融合前形式。當gH與gL共表現時，所得gH/gL蛋白質結合 HB 1及識別非構形與構形gH抗原決定基兩者之以下抗體： MSL-109、兔抗 gH、兔抗 gL(來自 David Johnson，OHSU， Ryckman 等人，/· P7ro/. 82:60-70 (2008))、兔抗 gH_977 及兔抗gL_873。昆蟲細胞受gH、gL、UL128、UL130及 UL131之共感染產生少量結合hu8G8及非構形及構形抗體 (包括兔抗gH、抗gL、抗UL128、抗130、抗131及上述兔多株抗體）之異質蛋白質。構築pRK-CMV載體。對於全長病毒醣蛋白之表面表現，構築3個各別人類表現質體。自起始至終止擴增個別 HCMV基因。自基因組DNA擴增gH、gL、gB，且自cDNA 擴增 UL128、UL130、UL131 並首先使用 PCR Blunt II TOPO(Invitrogen)進行選殖。隨後，基因選殖入具有「自 158864.doc 91 201215618 裂解 2A肽」序列（Szymczak 等人，Α^3ί· 22:589- 94 (2004))以使各HCMV基因及末個3·基因與編碼eGFP之基因分開的Genentech哺乳動物表現載體（pRK-tk-Neo)中。構築3個質體，1個具有gB及eGFP，1個具有gH、gL及 eGFP，且 1 個具有 UL128、UL130、UL131 及 eGFP。質體使用脂染胺（Lipofectamine)2000(Invitrogen; Carlsbad, CA) 轉染入人類胚腎（HEK)-293T細胞（美國菌種保存中心， ATCC; Manassas，VA)中。

Cytogam®(HIG)消減。對於HIG之會中和病毒進入上皮細胞中之組分的檢定，HEK-293T細胞使用脂染胺 2000(Invitrogen)用 gB/eGFP 或 gH/gL/eGFP及 UL128/UL130/ UL131/eGFP或模擬質體轉染且培育48小時。細胞使用 Accutase(Sigma)解離，集結，且分成12個等分試樣。 Cytogam®於PBS及0.5°/〇牛血清白蛋白（BSA)中稀釋至20 pg/ml且於含3 X 1 07個經轉染細胞之懸浮液中培育1小時。 Cytogam®接著連續轉移至3χ 107個經轉染細胞之新鮮等分試樣中。進行向新細胞上之繼代直至觀察到抗體之最大特異性缺失（6個繼代）。進行ELISA檢定以偵測某些HCMV特異性抗體之消減。Maxisorp(NUNC)板經含由桿狀病毒產生之純化 gB、gH/gL、或 gH/gL/UL128/UL130/UL131 的 PBS及/或經轉染HEK293T細胞之溶解產物塗佈。用與辣根過氧化酶結合之山羊抗人類IgG Fcy(Jackson Laboratory， Bar Harbor，ME)測定偵測。探測之下限為0.08 pg/ml。所得HIG接著使用100 kD分子量截斷濃縮器（Centricon)濃縮 -92- 158864.doc

S 201215618 以用於如上所述之中和檢定中。以以下方式產生親和力消減管柱。蛋白質（1-2 mg可溶性gB或gH/gL)相對於PBS充分透析且添加至約1 ml於PBS 中平衡之Sterogene ALD Superflow樹脂中。添加氰基棚氫化鈉（0.2 ml之1 Μ溶液）以使蛋白質與含醛樹脂化學偶合且使反應在4°C下進行隔夜。個別樹脂裝載入小管柱中且用 PBS充分洗滌以移除任何未結合蛋白質。將2毫克 Cytogam®於800 μΐ體積中裝載於管柱上且在0.4 mL/min之流速下用PBS洗滌。以若干0.5 ml等分試樣收集未結合蛋白質，該等等分試樣於旋轉濃縮器中以5000道爾頓之分子量截斷分別濃縮至約1 00 μΐ。樣品經無菌過濾且儲存在4°C 下直至檢定。 FACS。使用脂染胺2000(Invitrogen)將先前描述之pRK-CMV載體單獨或在gH/gL之比率50:50下與UL128-131—起轉染入HEK293T細胞中。在48小時之後，使用Accutase (Sigma)解離細胞。所有一次或二次抗體（Jackson Labs)培育及洗滌皆在PBS、2% FCS、0.2%疊氮化鈉（FACS緩衝液）中進行。在染色之後，細胞於含2%多聚曱醛之FACS緩衝液中固定。使用 FACS Calibur4(Beckton Dickinson)進行螢光分析且使用FlowJo軟體（Tree Star Inc.)處理資料。產生抗性病毒突變體。為產生對本文所述之抗體具有抗性之病毒突變體，使HCMV病毒株VR1814在次最佳濃度之在 Genentech合成之抗體 MSL-109(Aulitzky 等人，/./«/己<^· D/t 163:1344-47 (1991))、HB1、hu8G8存在下在上皮細胞 158864.doc -93- 201215618 上或在HB1與hu8G8之組合存在下在ARPE 19細胞（美國菌種保存中心，ATCC; Manassas, VA)中生長。在24孔板中開始實驗，其中在EC50、2x EC50或EC90下之抗體各自對應 3個孔且感染倍率（MOI)為0.5。每週，各孔體積之一半繼代於新細胞上且抗體濃度增加1.5倍或保持穩定。通常，截至約第9繼代，突變體以單一病毒斑形式出現。以使抗體濃度遞增至l〇x EC90之最終濃度的方式，使此等病毒生長。隨後，儲備突變體且藉由如上所述之中和檢定分析其對HB1及hu8G8之抗性。整個過程對ARPE-19細胞各別起始4次（每個抗體濃度3個孔）且僅用HB1及MSL 109(hu8G8 不中和MRC5細胞上之病毒）對MRC5細胞各別起始2次。為了產生其他抗性突變，細胞外病毒用AA-乙基亞硝基脲（ENU，Sigma-Aldrich; St. Louis, MO)或紫外線（254λ Stratalinker，Stratagene; Santa Clara CA)處理且使其在 24孔形式（每次處理24個孔）或96孔形式（每次處理72個孔）中感染ARPE-19或MRC5細胞。在感染（在MOI 1或2下）之後，培養基經含HB1 (在EC100下）或hu8G8(在EC100下）或該兩種抗體（各自在EC50下）之組合、或更昔洛韋（GCV，Sigma-Aldrich)的完全培養基置換。每週，上清液向新鮮細胞繼代，同時遞增抗體或GCV之濃度。生長病毒在2-3個月之後轉移至較大孔中且儲備。整個過程各別起始2次。定序醣蛋白。自對照或突變病毒感染細胞或上清液分離 DNA(DNA血液/組織提取套組，Qiagen; Valencia, CA)。根據可在國家生物技術資訊中心（National Center for 158864.doc -94- 201215618

Biotechnology Information，NCBI)資料庫中獲得之 HCMV 病毒株 AD169、FIX、TB40E、Toledo 及 Towne 序列之比對，設計針對跨越各基因之保守序列的引子。擴增出各臨床病毒株之自起始密碼子至鹼基2196(僅缺乏終止密碼子）的醣蛋白Η。擴增自起始至鹼基2686(僅缺乏終止密碼子）之醣蛋白B。UL128、UL130及UL131各自根據自Akter等人，《/. F/ro/· 84:1117-22 (2003)獲得之 cDNA序列自起始至終止進行擴增。使用染料終止劑反應對聚合酶鏈反應 (PCR)產物定序且對序列進行比對及修整（定序器）。突變之重演。修飾如上所述之含有gH/gL基因或UL128/ UL13 0/UL131基因之pRK-CMV表現質體以取代見於各抗性突變體中之單一突變。各gH/gL質體轉染（脂染胺2000， Invitrogen; Carlsbad, CA)入 HEK 293T細胞（ATCC)中，使其表現2天，且接著藉由如上所述之螢光活化細胞揀選 (FACS)分析評估表面表現之HCMV蛋白質結合對照抗gH抗體10F8或HB1的能力。各UL128/UL130/UL131質體與 gH/gL質體共轉染，使其表現2天，接著評估表面表現之蛋白質結合HB1、hu8G8及對照兔抗UL131_993抗體的能力。使用FlowJo(Treestar; Ashland, OR)產生分析及影像。

分析病毒進入。使抗性及對照病毒株（在不存在抗體下在ARPE-19細胞上並行繼代）之儲備物生長且收集上清液 (純）。進行定量PCR(qPCR)以獲得pp65 DNA pp65F TCGCGCCCGAAGAGG(SEQ ID NO:189)、pp65R CGGCC GGATTGTGGATT(SEQ ID NO:190)、Taqman 探針 CACCGA 158864.doc -95- 201215618 CGAGGATTCCGACAACG(SEQ ID NO:191)。為確定複本數，用 pp65選殖入 Zero Blunt PCR Cloning(Invitrogen)中獲得標準曲線。使基於複本數之病毒之稀釋液感染ARPE-19 及MRC5細胞1 8小時，隨後固定及觀測。計算每個DNA複本之感染性粒子數，相對於在無抗體下繼代之病毒株進行校正，且使用 Excel 第 14.1.2 版（Microsoft; Redmond，WA)繪圖。實例1_產生抗複合物I抗體及抗gH抗體產生抗複合物I鼠類mAb 8G8。在每隻小鼠1χ106 pfu之濃度下用完整之經UV不活化（3000mJ)之HCMV(病毒株 VR1814)來免疫2組Balb/c小鼠（每組10隻），每週兩次，總計SC/IP注射7次。在第一組動物中，各小鼠用RIBI佐劑灌注且隨後用含HCMV之PBS注射。在第二組動物中，動物未經灌注且接著用含HCMV之RIBI佐劑注射。經免疫小鼠之測試血液經受藉由ELIS A進行之血清樣品滴定以及如上所述之病毒中和檢定。選擇反應性位於前5名之小鼠來產生融合瘤。使用來自胭結節及腹股溝結節之淋巴細胞及小鼠骨髓瘤細胞株X63-Ag8.653進行2組各別融合。融合細胞塗鋪在96孔組織培養板（58個板）中且在融合後1天開始使用 HAT培養基補充劑（Sigma，St. Louis，Μο·)進行融合瘤選擇。使用如上所述對上皮細胞進行之病毒中和檢定篩檢總計738個IgG+融合瘤。對各種細胞類型測試HCMV病毒株 VR1814對所得抗體之EC50(pg/ml)且與MSL-109(—種抗gH 抗體）進行比較並展示於表2中。單株抗體8G8為篩檢中鑑 158864.doc -96- 201215618 別之最強力中和抗體且被選擇進行人類化及進一步表徵。表2

EC50(pg/ml) : HCMV病毒株VR1814 細胞類型目標上皮内皮纖維母細胞 MSL-109 gH 0.1642 0.0764 0.3890 鼠類8G8 複合物I 0.0014 0.0007 N/A 鼠類5H3 gH 1.15 1.42 17.76 鼠類10F8 gH 0.1 0.1 1.11 鼠類15H2 gH 0.12 0.11 1 鼠類354.1 複合物I 0.03 0.07 N/A 鼠類8G8 mAb之人類化及分析。藉由使用λ3或λ4輕鏈 (圖2)及VH1、VH3或VH7重鏈構架（圖1)進行標準CDR移植來使鼠類融合瘤8G8人類化。對於比較，λ3與λ4之共同人類λ生殖系序列展示於圖2中。進行中和檢定，從而比較 8G8人類/鼠類嵌合抗體（QE7/C2)與8G8 VH1、VH3或VH7 人類化重鏈與8G8 λ3或λ4輕鏈的組合。發現λ4變異體但非 λ3變異體中和HCMV(圖3)。如圖4中所示突變λ4之HVR-L2以在胺基酸50C、50D、 56處引入取代，以及在胺基酸57(FR3之第一胺基酸）（根據 Kabat編號）處引入胺基酸取代以為抗體提供穩定性。各種突變輕鏈接著與8G8人類VH1鏈組合且在如上所述之中和檢定中測試所得抗體。具有單一胺基酸取代之抗體皆顯示良好中和活性（亦即Al、E1、ΤΙ、A2、E2及T2)(圖5)。同樣，含有2個胺基酸取代之所有抗體皆顯示良好中和活性 (亦即SGSG及TGDA)。單一突變體SG作為比較對照被包括，且其亦顯示良好中和活性。（圖6)。 158864.doc -97- 201215618 人類化8G8 λ4抗體序列展示於圖7中（hu8G8A4 FW)。圖 8展示人類化8G8 VH1序列之序列（hu8G8.VHl)而圖9展示人類化8G8 VH3序列之序列（hu8G8.VH3)。圖10展示人類化8G8 λ4抗體序列，其中前2個胺基酸（QP)已經修飾以使多肽以絲胺酸開始（Q經缺失且L突變成S)且胺基酸36保留鼠類胺基酸（Υ)。此抗體之多肽序列展示為λ4 8G8移植物。編碼多肽之一個代表性核酸序列展示在多肽序列以下。抗gH抗體之親和力成熟。使用1994年8月4日公開之PCT 公開案第WO 94/1 6730號中公開且以全文引用的方式併入本文中之MSL-109之可變重鏈及可變輕鏈序列的抗體序列合成單株抗體MSL-109。MSL-109 VH及VL鏈之胺基酸序列展示於圖 11 中（VL : SEQ ID NO:90 ; VH : SEQ ID NO:92)。MSL-109抗體係基於含有重鏈VH3及輕鏈Vk2之 IgGl構架。編碼此抗體之重組DNA選殖入CHO細胞中。藉由互補決定區（CDR)之隨機化，隨後藉由噬菌體呈現用漸進限制濃度之經生物素標記之gH/gL選擇結合物來使抗體MSL-109經親和力成熟。藉由寡核苷酸定點突變誘發用「NNK」密碼子使CDR之各位置隨機化，其中N為4種天然核苷酸之任一者，且K為50%胸腺嘧啶及50%鳥嘌呤。 NNK密碼子可編碼20種天然胺基酸之任一者。分別製備輕鏈及重鏈之文庫，且各鏈之3個CDR之各者同時經隨機化。此舉產生在各鏈中具有0至3個隨機胺基酸變化，在各 CDR中具有至多1個突變之純系。以噬菌體Fab片段呈現載 158864.doc -98- 201215618 體且藉由標準方法製備文庫。藉由在連續數輪選擇中與1 及0·1 nM經生物素標記之gH/gL一起培育噬菌體呈現文庫來選擇結合純系’且接著與10〇 nM gH/gL或MSL-109 IgG 競爭以降低親和力較低之純系與gH/gL的結合。在經中性鍵親和素（neutravidin)或抗生蛋白鏈菌素（streptavidin)塗佈之ELISA板上捕捉結合純系，洗滌且在室溫下於1〇 mM HC1中溶離1〇分鐘。溶離之噬菌體用1/1〇體積之1 μ Tris(pH 8.0)中和且用於感染大腸桿菌以達成擴增來用於下一輪選擇。對來自第二輪選擇之純系定序以確定在所選噬菌體中為頻繁的突變。藉由競爭噬菌體ELIS A測試具有有利突變之純系。在重鏈Kabat位置53及55中具有個別或組合突變之突變 MSL-109之IgG及Fab片段經表現且測試對CMV之活體外中和。單獨或與在胺基酸55處之胺基酸取代（用R或κ置換 T55)組合的在胺基酸53處之胺基酸取代（用s、I、N、Q、 F、M、L、G、H、K、W、Y、V或A置換D53)提供中和性能改良之抗體（圖12B及12C)。一些此等變化之示意圖展示於圖12A中。另外，MSL-109中之胺基酸N52可經S置換。此取代不影響效能但允許位置5 3中之S不具有位置5 2之糖基化。重鏈可變序列在胺基酸53及/或胺基酸位置55處使用各種胺基酸取代有89種可能之組合（SEQ ID NO:87、 88、89及96-182)。共同序列提供為SEq m n〇:94。在噬菌體呈現ELIS A檢定中量測此等抗gH抗體之Fab片段對在桿狀病毒中產生之gH/gL二聚體的親和力。詳言之，呈現 β 158864.doc -99- 201215618 MSLd09變異Fab片段之噬菌體純系與連續稀釋之gH/gL — 起培育且在室溫下培育1小時。藉由在室溫下培育經gH/gL 塗佈之ELISA板孔中之混合物10分鐘來偵測未結合噬菌體。板用PBS-T洗滌，且藉由與抗M13 HRP結合物一起培育30分鐘，隨後洗滌並用TMB受質顯色來偵測與經固定 gH/gL結合之噬菌體。藉由非線性回歸計算IC50，即噬菌體-gH/gL混合物中之50%噬菌體為自由的所處之點。IC50 在0.01-0.1 nM之範圍内。所選變異體之個別親和力展示於表3中。表3 變異體噬菌體ELIS A ICs〇(nM) H2單一突變體 WT(MSL-109) 0.53 H2-D53L 0.02 H2-D53M 0.05 H2-D53N 0.06 H2-D53S 0.1 H2-D53T 0.06 H2雙重突變體 H2-T55R 0.17 H2-D53F/T55R 0.01 H2-D53L/T55R 0.02 H2-D53M/T55R 0.07 H2-D53N/T55R(HB1) 0.05 H2-D53Q/T55R(HB2) 0.01 H2-D53S/T55R 0.03 H2-D53T/T55R 0.03 驚人地，在VH2 HVR處之胺基酸變化產生結合及中和能力顯著較高之抗體。舉例而言，相較於MSL-109， HB1(D53N/T55R)對gH/gL之親和力增加10倍，如藉由噬菌體ELISA所示（表3)。相較於親本MSL-109抗體，當以Fab 片段形式在大腸桿菌中表現時，HB1(D53N/T55R)對 158864.doc •100- 201215618 HCMV進入ARPE-19細胞中之抑制更強力約40倍（亦即’ EC50=0.15 nM對6.2 nM)，如藉由中和檢定所示（圖12B) ° 此外，當以全長IgG形式在CHO細胞中表現時’ HB1 (D53N/T55R)對HCMV進入ARPE-19細胞中之抑制更強力約6倍，如藉由中和檢定所示（表4，圖12C)。相較於MSL 109抗體，HB1抗體在對各種細胞類塑進行之中和檢定（1個代表性實驗）中的EC50及EC90(pg/ml)展示於下表4中。表4 上皮上皮内皮内皮 MDM MDM 纖維母細胞纖維母細胞 EC50 EC90 EC50 EC90 EC50 EC90 EC50 EC90 MSL-109 0.3 2 0.48 2.9 0.04 0.42 0.73 4.8 HB1 0.05 0.41 0.03 0.28 0.03 0.19 0.11 0.77 實例2-抗體功能研究比較1^1(0531^/丁5 511)及1111808與1110在中和檢定中阻斷 HCMV病毒進入上皮細胞、内皮細胞、巨噬細胞及纖維母細胞中之能力。hu8G8關於上皮細胞之EC50為0.006 pg/ml (0.2 nM)，關於内皮細胞之EC50為 0.004pg/ml(0.3 nM)，且關於單核細胞之EC50為0.001 eg/ml(0.006 nM)。在中和此等細胞類型之各者上之HCMV方面’ hu8G8比HB 1更強力至少8倍。然而，如所預期，hu8G8不阻斷病毒進入纖維母細胞中，而HB 1會阻斷病毒進入纖維母細胞中，EC50為 0.11 pg/ml(0.7 nm)(參見圖 13)。已報導當向患有原發性HCMV感染之孕婦給與時’ HIG 可預防HCMV胎兒感染及/或疾病（Nigro等人，2005) ’表明 CMV特異性抗體能夠對發育胎兒賦予保護°當藉由中和檢 101 · 158864.doc 201215618 定評估時，發現HIG可中和病毒進入所有測試細胞類型中，但效能遠小於任一單株抗體（參見圖13)。此相對較低之效能歸因於HIG僅具有小部分具有抗CMV中和活性之蛋白質的多株性質。實例3-HIG消減研究為了鑑別高免疫球蛋白中之中和抗體組分，藉由6次連續培育，使用用gB或複合物I轉染之HEK293T細胞消減 HIG之抗 gB抗體或抗複合物 I(gH/gL/UL 128/UL130/UL 13 1) 抗體。根據上述方法進行Cytogam®(HIG)消減。對經吸附血清之分析顯示相較於關於對照細胞之〇°/。，有>95°/。之與用gB轉染之細胞具有反應性的抗體由此程序所吸附，如藉由經純化gB ELISA所檢定。然而，相較於關於對照細胞之 0%，僅約45%之與用複合物I轉染之細胞具有反應性的抗體已經吸附，如藉由用如上所述之來自經轉染HEK293T細胞之溶解產物進行的ELISA所檢定。經消減之HIG接著在中和檢定中用於確定消減對預防病毒進入上皮細胞中之影響。相較於模擬吸附HIG，吸附 HIG製備物之連續稀釋液用於如上所述之中和檢定中。此等實驗之結果展示於圖14中。針對gB之抗體似乎不顯著有助於HIG關於上皮細胞之中和能力，而針對複合物I之抗體似乎顯著有助於HIG之中和活性。當對上皮細胞測試時，移除複合物I特異性抗體使HIG之中和能力（EC50)降低約 85%。經消減HIG關於纖維母細胞之檢定不可能，因為為偵測 158864.doc -102- 201215618 中和所需之濃度極高。HIG關於此細胞類型之EC50為約 500 pg/ml。因為UL128、UL130及UL131蛋白質不為進入纖維母細胞中所需，所以與如上所述之管柱結合之桿狀病毒表現的gB或gH/gL用於自HIG特異性消減對此等蛋白質/ 複合物具有特異性之抗體。在抗gB抗體接近完全消減（gB 管柱上之gB抗體95%消減對gH/gL管柱上之gB抗體0%消減）之情況下，未觀測到中和變化。然而，在大多數抗 gH/gL抗體經消減（gH/gL管柱上之gH/gL抗體84%消減對gB 管柱上之gH/gL抗體0%消減）之情況下，觀察到EC50降低 65°/。（參見圖 14)。由此等資料推斷HIG中之主要中和抗體係針對gH/gL/ UL128/UL13 0/UL131複合物。詳言之，複合物I中和抗體為HIG中針對上皮細胞進入之主要中和抗體。另外，HIG 中之gH/gL抗體在抑制病毒進入纖維母細胞中方面具有主要作用。此等實驗顯示抗gB抗體在HIG中和中之作用很小〇藉由使用桿狀病毒表現之gB、gH/gL及gH/gL/UL128/ UL130/UL131吸附HIG，藉由ELISA測定約1%之HIG具有 gB反應性，而約0.1-0.2%與複合物I或gH/gL具有反應性。若暸解HIG中複合物特異性抗體之濃度，則彼等複合物特異性抗體之中和效能可藉由根據實際上係針對導致中和之相關複合物之IgG的百分比校正完整HIG之中和效能來計算（例如關於纖維母細胞，810 pg/mlx 0· 1-0.2 = 0.8-1.6)，如下表5中所示。 158864.doc -103 - 201215618 表5 EC9〇bg/ml) 中和劑目標上皮細胞内皮細胞巨噬細胞纖維母細胞 HCMV-HIGt HCMV +未知 0.01-0.02 0.01-0.02 0.004-0.01 0.8-1.6 HB1 SH 0.4 0.28 0.19 0.78 HB2 gH 0.41 0.44 0.21 0.78 HCMV-HIG HCMV +未知 8.0 11.6 3.8 810 具有VH1之人類化8G8 複合物I 0.02 0.04 0.010 n/a 具有VH3之人類化8G8 複合物I 0.010 0.7 0.010 n/a 卞 EC90值根據 HIG 中之 gH/gL/UL 12 8/UL13 O/UL13 1 抗體之濃度（0.1-0.2%)進行調整。如以上在表5中所示，HB1與人類化8G8(VH1或VH3)之組合能夠接近於HIG關於中和檢定中測試之所有細胞類型的中和效能。在以下HCMV感染倍率（MOI)下感染細胞：上皮細胞ΜΟΙ=1，内皮細胞ΜΟΙ=1，巨噬細胞MOI=0.5且纖維母細胞ΜΟΙ=1。HB1與HIG(如根據具有複合物I特異性之HIG的量校正）就抑制對纖維母細胞之感染而言具有類似中和效能，但不提供關於上皮細胞、内皮細胞或巨噬細胞之足夠效能。人類化8G8(VH1)及（VH3)與HIG(如根據具有複合物I特異性之HIG的量校正）關於上皮細胞、内皮細胞及巨噬細胞具有類似中和效能。然而，其未能中和對纖維母細胞之感染。因此，關於測試之所有細胞類型，抗體之組合提供與HIG對HCMV之中和（根據複合物I特異性抗體進行調整）類似的對HCMV之中和。再次在中和檢定中測試HB1及具有VH1之hu8G8中和 HCMV進入所有各種細胞類型中之能力且與HIG之計算及 158864.doc -104- 201215618 實際中和效能進行比較。用以下HCMV MOI感染細胞：上皮細胞ΜΟΙ = 1，内皮細胞MOI=0.25，巨噬細胞ΜΟΙ=0·25 且纖維母細胞ΜΟΙ=0.8。此實驗之結果以下在表6中展示。由此實驗獲得之平均EC90及表5中所示之結果以下在表6中之陰影框中展示。表6 EC9〇bg/ml) 中和劑目標上皮細胞内皮細胞巨嗟細胞纖維母細胞 HCMV-HIG 卞 HCMV 0.01-0.02 0.007-0.014 0.01-0.02 0.4-0.7 +未知 0.01-0.02 0.01-0.02 0.01-0.02 0.6-1.2 冊1 gH 0.18 0.08 0.14 0.25 0.29 0.18 0.17 0.52 HCMV-HIG HCMV 10.2 6.7 10.9 370 +未知 9.1 9.1 7.4 590 具有VH1之人類化8G8 複合物I 0.01 0.02 0.008 0.02 0.009 0.01 n/a fHIG根據gH/gL/UL128/UL130/UL131抗體之貢獻進行調整0 實例4-中和HCMV臨床分離株對自 Oregon Health Sciences University之 2個實驗室獲得之超過20個臨床分離株的gH、gL、UL128、UL130及 UL13 1基因定序且與其他可公開獲得之序列一起進行彙編。可公開獲得之序列由來源於美國、歐洲及日本之病毒株產生。溶解受各病毒株感染之細胞且使用DNA血液/組織提取套組（Qiagen; Germantown, MD)提取DNA。根據可在國家生物技術資訊中心資料庫中獲得之AD169、FIX、 TB40E、Toledo及Towne序列之比對，設計針對保守序列 158864.doc -105- 201215618 的引子。擴增出各臨床病毒株之自起始密碼子至鹼基 2196(僅缺乏終止密碼子）的醣蛋白gH。在Genentech使用染料終止劑反應對聚合酶鏈反應（PCR)產物定序。序列經比對及修整（定序器）。其他gH序列藉由以下方式自NCBI資料庫獲得：使用來自 Chou 等人，·/· Infect. Dis. 166:604-7 (1992)之1個寄存編號且接著獲得「相關序列」。總計，在移除信號肽之後，叢集（ClustalW，歐洲生物資訊學研究所 (EBI); Cambridgeshire, England)來自 57個病毒株之膽蛋白序列，且使用平均距離根據一致性百分比比對成樹 (JalView; Waterhouse等人，2009)。定序結果指示各臨床分離株之間在UL128、UL130及 UL131序列方面有1%變化（在移除信號肽之後）。此研究結果與在歐洲進行之證明UL128、UL130及UL131在患有原發性HCMV感染之孕婦中高度保守的研究一致（Baldanti等人，Jrc/2. K/ro/. 151:1225-33 (2006))。在所有病毒株中，gH在蛋白質層面上至少95%—致（在移除信號肽之後）。構築具有2個不同分支之系統發生樹（資料未展示）。該樹與gH蛋白質序列分開成2個系統發生群之先前報導一致（Chou, /. /77/eci_ Db. 166:604-7 (1992))。亦根據文獻，兩個分支中之HCMV分離株不在地理上不同（亦即在曰本分離之病毒株可見於兩個分支中）(Pignatelli，乂 Gen. Virol. 84:647-655 (2003)) ° 測試HB1(D53N/T55R)中和不同組之HCMV臨床分離株對纖維母細胞之感染性的能力。表7展示HB 1相較於HIG之 158864.doc -106- 201215618 效用。發現HB1可與HIG(當根據對gH/gL/UL128/ UL130/UL131具有特異性之HIG的量校正時）一樣或優於 HIG中和代表最大gH序列多樣性之HCMV病毒株之各者。在多個實驗中在各種MOI下使用HCMV病毒株Dement、 Adinis及VR1814進行之中和檢定之結果亦展示於下表7 中〇

表7 病毒株名稱(分支號） HB1(D53N/T55R) E090(pg/ml) HIG EC90(pg/ml)* HIG EC90^g/ml) Cano ⑴ 0.27 0.3-0.7 355 Keone(l) 0.12 0.1-0.2 104 NewRock(l) 0.18 0.12-0.24 119 TR(1) 0.59 0.3-0.7 350 Brown ⑵ 0.76 0.4-0.9 442 Dement(2) 0.78 0.8-1.6 80 0.08 0.15-0.3 154 Adinis(2) 2.0 0.74-1.5 233 0.08 0.1-0.2 120 Grunden⑵ 0.08 0.14-0.28 137 Harris ⑵ 0.32 0.3-0.6 305 Phoebe⑵ 0.04 0.1-0.2 115 VR1814(2) 0.08 0.1-0.3 790 0.78 0.8-1.6 0.25 0.4-0.7 370 *EC90 值根據 HCMV-HIG 中之 gH/gL/UL128/UL130/ UL131 抗體之濃度（0.1-0.2%)進行調整。實例5-抗體之特異性評估HB1及hu8G8之抗原特異性。構築含有病毒醣蛋白之質體以使各蛋白質藉由用「自裂解2 A肽」分開各基因而以相等化學計量表現（Szymczak等人，Biotechnol. 22:589-94 (2004))。質體含有 gB/eGFP、gH/gL/eGFP 或 UL128/UL130/UL131/eGFP(自 cDNA選殖）之全長基因。質 158864.doc -107· -0 201215618 體使用脂染胺2000(Invitrogen; Carlsbad，CA)轉染入人類胚腎（HEK)-293T細胞（美國菌種保存中心，ATCC; Manassas, VA)中以在其表面處表現CMV醣蛋白。在2天之後，細胞經解離且用飽和一次抗體HB 1、hu8G8、抗gB、親和力純化之兔抗UL131_933或親和力純化之兔抗gH_977染色。細胞用與別藻藍蛋白（allophycocyanin)(APC ， Jackson ImmunoResearch; West Grove, PA)結合之適當二次抗體染色。使用 FACSCalibur(BD Biosciences; San Jose, CA)量測個別細胞之營光且使用FlowJo軟體（Tree Star; Ashland, OR)進行分析。GFP陽性細胞（表現CMV轉殖基因之細胞）經選擇性繪圖以展示抗體結合。如圖15中所示，HB1與表現單獨gH/gL或gH/gL與 UL128/UL130/UL131之複合物的細胞起反應。Hu8G8僅與表現gH/gL/UL128/UL130/UL131之細胞起反應（圖15)且不與表現單獨gH/gL或gH/gL/gO之細胞起反應（資料未展示）。兩種抗體皆不與表現gB之細胞起反應。因此，HB 1 識別存在於gH/gL複合物及複合物I中之gH上之抗原決定基。hu8G8抗體與形成複合物I之5種包膜蛋白内之抗原決定基結合，但不與gH/gL/gO或單獨gH/gL結合。實例6-評估協同作用或拮抗作用在病毒中和檢定中以組合形式測試HB 1及hu8G8以確定當2種抗體組合時是否存在效能差異。因為抗體具有不同目標，且推測獨立地起阻斷病毒進入之作用，所以假定 HB 1及hu8G8之效應為累加的。因此，應用布利斯獨立方 158864.doc • 108· 201215618 程式（具有效應A及B之兩種單一化合物之組合反應C為 C=A+B-AxB)。為此，HB1與hu8G8以1:1比率混合且在對上皮細胞進行之病毒中和檢定中以一系列稀釋液進行測試並如上所述計算EC50。HB1不增強或減弱hu8G8關於上皮細胞之效能且1:1曲線精確重疊模擬布利斯獨立性曲線，表明累加性而非協同作用（參見圖16及表8)。同樣，如所預期，hu8G8不改變HB1關於纖維母細胞之效能，因為hu8G8 不阻斷HCMV進入纖維母細胞中（資料未展示）。因此，在 1:1比率下，HB 1及hu8G8不顯示任何拮抗作用或協同作用。表8 mAB 關於上皮細胞之 EC5〇bl/ml) 單獨HBl 0.063 單獨hu8G8 0.0080 HBl:hu8G8，在 1:1 下 0.0060 模擬布利斯獨立性 0.0069 為評估HB1及hu8G8是否在廣泛範圍之比率下顯示協同作用或拮抗作用，跨越EC50值之一系列逐對「棋盤格」稀釋液用於進行中和檢定。各抗體如下表9中指示進行稀釋，而病毒濃度為恆定的。下表9中展示對於抗體濃度之各種組合，關於上皮細胞之受感染細胞之百分比（相對於無抗體對照進行校正）： •tmi 158864.doc -109- 201215618 表9 hu8G8 hu8G8 hu8G8 hu8G8 hu8G8 hu8G8 hu8G8 hu8G8 hu8G8 HB1 10 μ^ηιΐ 2 pg/ml 0.4 pg/ml 0.08 μ^ιπΐ 0.016 μ_1 0.0032 μβ/ηιΐ 0.00064 0.000128 Ug/ml ua/ml 0 pg/ml HB1 10 pg/ml 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 HB1 2 pg/ml 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.56 0.17 0.00 HB1 0.4 pg/ml 0.23 0.00 0.28 0.47 0.32 2.08 3.57 2.94 3.97 HB1 0.08 pg/ml 0.29 0.15 0.15 0.15 1.91 13.53 26.76 25.26 26.66 HB1 0.016 gg/ml 0.00 0.48 0.42 0.59 3.29 39.70 61.94 67.60 61.94 HB1 0.0032 pg/ml 0.37 0.71 1.06 0.29 7.23 46.22 80.96 93.01 97.34 HB1 0 pg/ml 0.64 0.33 0.14 0.63 5.50 53.93 83.51 91.95 100.00 陰影=存在部分中和之各抗體之濃度。使用如上所述之中和檢定，HB1及hu8G8之EC50在0.8、 0.016、0,0032 pg/ml之另一抗體存在下測定。此等實驗之結果展示於下表10及表11及圖17中。表10-在不同HB1濃度下之hu8G8效能抗體及濃度 hu8G8 之 EC50(pg/mL) HB1 ’ 在08 pg/ml下 0.0037 HB1 ’ 在 016pg/ml 下 0.0047 HB1，在0032 gg/ml下 0.0028 HBl，在0 pg/ml下 0.0031 表11-在不同hu8G8濃度下之HB1效能抗體及濃度 HB1 之 EC5〇hg/mL) hu8G8，在0032 pg/ml下 0.035 hu8G8，在00064 pg/ml下 0.043 1111808，在000128 4§/1111下 0.041 hu8G8，在0 pg/ml下 0.030 在比較單獨各抗體之效能與在各種比率下之組合之效能 158864.doc -110· 201215618 後，不存在協同作用或拮抗作用之證據。舉例而言，在比較hu8G8之效能曲線與hu8G8及0.08 pg/ml HB1之效能曲線後（在不存在滴定抗體下之感染校正為1 〇〇%)，吾人發現曲線重疊（參見圖17)。又，在各種濃度之hu8G8存在下，各 HB1效能曲線重疊（相對於100%感染校正）（參見圖17)。因此，在廣泛範圍之比率下，不存在抗體之間具有協同作用或拮抗作用之證據。實例7-評估產生之病毒抗性儘管人類CMV具有相對較低之突變率（相較於肝炎病毒 C(hepatitis virus C，HCV)或人類免疫缺乏病毒（human immunodeficiency virus，HIV))，但評估病毒經由產生抗性突變來逃避HB 1或hu8G8或兩者之中和的能力。使病毒在次最佳濃度之HB1(或MSL-109)或hu8G8、或HB1與 hu8G8抗體兩者一起存在下生長。隨著病毒每週向新細胞上之繼代（各輪有約50%之體積向前繼代於新細胞上），逐漸增加各抗體之濃度。觀測到對各個別抗體具有抗性之突變病毒，但無突變體賦予對組合之抗性。所有抗性病毒突變體皆自單一斑塊出現。出現賦予對由HB 1所致之中和之抗性的突變體（參見圖 18)。然而，如藉由中和檢定所示，此等突變體仍然對 hu8G8敏感，hu8G8具有類似EC50(參見圖18及表12及表 13)。 158864.doc -111 - 201215618 表12-出現之對HB1具有抗性之HCMV突變體 HB1 EC50〜g/ml) 無Ab對照 0.04 HB1-突變病毒1 0.21 HB1-突變病毒2 無中和 HB1-突變病毒3 0.07 HB1-突變病毒4 200 HB1-突變病毒5 無中和 HB1-突變病毒6 無中和表13-HCMV HB1抗性突變體仍然對hu8G8中和敏感 hu8G8 EC50(pg/ml) 資料集1 資料集2 無Ab對照 0.008 0.0005 HB1-突變病毒1 0.010 0.0006 HB1-突變病毒2 0.008 0.006 HB1-突變病毒3 0.001 0.0001 HB1-突變病毒4 未測出 0.0001 HB1-突變病毒5 未測出 0.001 HB1-突變病毒6 未測出 0.001

此外，出現賦予對由hu8G8所致之中和之抗性的突變體，且此等突變體仍然對HB1敏感，HB1具有類似EC50(參見圖19及表14及表15)。表14-出現之對hu8G8具有抗性之HCMV突變體 hu8G8 EC5〇hg/ml) 無Ab對照 0.002 hu8G8-突變病毒1 無中和 hu8G8-突變病毒2 0.25 hu8G8-突變病毒3 無中和

表15-HCMV hu8G8抗性突變體仍然對HB1中和敏感 HB1 EC50_ml) 無Ab對照 0.22 hu8G8-突變病毒1 0.18 hu8G8-突變病毒2 0.07 hu8G8-突變病毒3 0.06 158864.doc -112-

S 201215618 為瞭解對HB 1及hu8G8抗體之抗性之分子性質，對來自各抗性病毒株之gB、gH、gL、UL128、UL130及UL131定序。相較於VR1814及D1病毒株（VR1814在無抗體壓力下在上皮細胞上並行繼代），所有對HB 1具有抗性之病毒株在 gH中皆具有單一非保守性胺基酸突變，且在其他醣蛋白中未發現其他突變（表1 6)。產生對HB 1具有抗性之11個個別病毒株，涵蓋僅在3個胺基酸中之5個不同核苷酸突變。在經定序或具有公開序列之臨床病毒株中未發現此等胺基酸經突變。反應於hu8G8之突變出現頻率較小，僅發現3個病毒株具有抗性。相較於VR1814及D1病毒株，所有3個對hu8G8具有抗性之病毒株在UL131中皆具有單一非保守性胺基酸突變，且在其他醣蛋白中未發現其他突變（參見表16)。當突變gH及UL1 3 1序列與60個可用臨床病毒株序列進行比較時，該等病毒株皆不攜帶此等突變。表16-產生抗性之突變的定位

抗性病毒株突變蛋白質殘基變化 ΗΒ1-突變體1 gH P171H ΗΒ1-突變體2 gH W168C ΗΒ1-突變體3 gH P171S ΗΒ1-突變體4 gH D446N ΗΒ1-突變體5 gH W168C ΗΒ1-突變體6 gH W168R hu8G8-突變體1 Ul131 Q47K hu8G8-突變體2 Ul131 K51E Hu8G8-突變體3 Ul131 D46N *-上皮細胞中所產生之突變體 **-纖維母細胞中所產生之突變體當比較HB 1抗性病毒株相對於D1病毒株感染細胞之能力 158864.doc -113- 201215618 時，此等抗性病毒株具有深度進入缺陷（效率減小多達20 倍），表明此等病毒株之活體内生長將減弱（參見圖20)。當比較hu8G8抗性病毒株相對於D1病毒株感染細胞之能力時’發現抗性病毒株可以同專效率感染細胞；然而，此等病毒株生長極其緩慢，表明在產生方面具有缺陷（資料未展示）。需要進一步分析來瞭解此減弱之機制。為確定此等突變是否影響HB1及hu8G8分別與gH及 UL131結合之能力，定點突變誘發用於在HEK-293T細胞之表面上短暫表現具有抗性突變之複合物I(gH/gL/UL128/ UL130/UL131)且進行抗體結合之FACS分析。P171之突變 (突變體1及3 : P171突變成Η或S)使對HB1之抗性僅增加2 至5倍且此抗體與gH/gL之結合未顯著變化。然而，在 HB 1-突變體2、5及6中所見之突變（W168突變成C或R)完全消除HB 1之結合能力（參見圖21)。此外，此等病毒突變體未由HB1中和（參見圖18)。突變體4(D446N)顯示中間表型；其對由HB1所致之中和之抗性增加500倍（參見圖18)，但仍然可偵測到與HB 1結合（參見圖21)。為確定UL131中之突變如何影響hu8G8結合，用野生型或突變gH/gL/UL128/UL130/UL131複合物進行對HEK-293T細胞之轉染且藉由FACS分析量測與抗gH(HBl及MSL-109)、抗UL131_993及hu8G8之結合（參見圖22)。所有3個 UL131 突變皆消除 hu8G8 對 gH/gL/UL128/UL130/UL131 複合物之結合。 HB 1抗性突變定位在HCMV醣蛋白Η之結構模型（基於 158864.doc -114- 201215618 HSV-2 gH及EBV gH之新近解析之結構）上（Backovic等人，户见45，197:2263 5-22640 (2010))。所有突變殘基皆定位於 gH之同一面（資料未展示）。HB1 Fab模型化於gH結構上。 HB 1 Fab之佔據面積涵蓋所有突變，表明HB 1與由此等突變界定之抗原決定基結合。類似地，hu8G8抗性突變彼此緊密鄰近（相隔4個殘基），且儘管UL 13 1之結構未知，但兩者均定位於推定α螺旋域且預測位於螺旋之同一面上。因此，連同結合分析，抗性突變闡明gH/gL/UL128/ UL13 0/UL131複合物上針對HB1與hu8G8兩者之抗原決定基。實例8-親和力分析 HB 1與hu8G8兩者之親和力均藉由如下所述之biacore及史卡查（Scatchard)分析分別測定。 HB1對桿狀病毒表現之可溶性gH/gL之親和力藉由 biacore分析測定且得知為1 nM。詳言之，藉由使用 BIAcore 3000儀器（GE Healthcare; Piscataway, NJ)進行表面電漿子共振（SPR)量測（Karlsson等人，1991)來評估HB1結合桿狀病毒表現之分泌gH/gL之能力。基於SPR之生物感測器報導接近表面之折射率變化。當蛋白質目標（「配位體」）共價固定在感測器晶片表面上時，SPR可用於監測在表面上注射之結合搭配物（「分析物」）之非共價相互作用；分析物結合之即時量測結果可用於確定相互作用之動力學及親和力。在分析物B與經固定配位體A結合之1:1相互作用之情況 158864.doc 115. 201215618 下，使用方程式1描述平衡： L· Λ _ ^οη Α Λ A + B^-r~>ΑΒ ^off 在方程式1中，kQn為締合速率常數，kQff為解離速率常數，且平衡解離常數KD由KD^koff/kcn確定。使用方程式2 確定1:1結合之複合物形成的速率： ^-]=kon[Amkoff[AB] 當以SPR信號（/?)表示時，方程式2可寫成方程式3 :

rjD

~^ = KonCHC + koff)R 在方程式3中，C為游離分析物之濃度且Rmax為表面之最大分析物結合容量。類似地，對於能夠在溶液中二聚化以形成2個結合位點之分析物B，平衡可由方程式4描述。 A + B< konVkoffi >AB + B < kon2lkoff2 > AB2 藉由量測結合速率之濃度依賴性及在不存在游離分析物下之解離速率，可確定動力學常數並用於計算KD。使用針對非共價固定之HB 1之抗Fc捕捉方法，隨後注射不同濃度之gH/gL來進行SPR量測以測定結合之動力學。遵循由製造商提供之說明書對接CM5生物感測器晶片（BR 1000 14，CM5研究等級；BIAcore，Inc.)，用操作緩衝液 (10 mM HEPES(pH 7.4)、150 mM NaCl及 0.01%聚山梨醇酯 20)灌注且用70%甘油校正。如下文簡要概述，小鼠單株抗人類Fc抗體（人類抗體捕捉套組，BR-1008-39，BIAcore， 158864.doc •116- 201215618

Inc.)固定在CM5晶片之全部4個流量槽上。遵循由製造商描述之方案使用N_乙基屮，_(3_二甲基胺基丙基）碳化二亞胺鹽酸鹽及N-羥基丁二醯亞胺（NHS)(胺偶合套組，811-^00-50 ; BIAcore，Inc.)且使用7分鐘活化時間來活化流量槽。接著藉由在10 pL/min之流速下注射60 μί於10 mM乙酸鈉（pH 5.0)中稀釋之25 pg/mL抗體使活化基質經由胺偶 δ /、捕捉抗體反應。在偶合注射結束時，藉由在5 pL/miη 之流速下注射35 μΙ 1 Μ乙醇胺鹽酸鹽使任何剩餘未反應之NHS基團不活化。由在偶合程序之前及之後的SPr信號估計以此方式共價固定之捕捉抗體之量且給出在4個流量槽上8000-9500 RU之範圍。小於約100(任意SPR或共振單位（RU))之Rmax值通常視為提供良好信雜比而不限制可測定之動力學常數之範圍。初步實驗指示在30 pL/min之流速下，〇·ΐ3 pg/mi HB1之60 μί注射液導致捕捉足夠HB 1以便在用gH/gL飽和後觀測到約50 RU之信號。因此，此HB 1濃度及注射方案用於測定動力學常數。

如上所述藉由在流量槽2上捕捉HB 1來進行結合量測，其中流量槽1用作參照。於操作緩衝液中製備濃度以2倍增量自0.39 nM變化至100 nM之gH/gL溶液。收集在3〇 pL/min之流速下在感測器晶片表面上注射6〇此等溶液之感測器圖譜。感測晶片維持在2 5 °C下且在注射结束之後監測解離10分鐘。在結合循環之間經由注射30 3 M

MgC12來再生感測器晶片表面。此注射致使任何剩餘 158864.doc -117- 4^ 201215618 HBLgH/gL複合物自捕捉抗體解離。接著在如上之流量⑴ 上捕捉HB1以進灯下—結合循環。類似地收集在感測器晶片上注射操作緩衝液之「空白」感測器圖譜。藉由首先減去所量測之參照槽之信號來加工觀測之感測器圖譜以進行動力學分析。移除由曲線之再生部分獲得之 # #υ °接著藉由減去分析物注射前基線之平均ru值將感測器圖譜調零。最後’自所獲得之注射含有讲砂之溶液的曲線減去所量測之僅注射操作緩衝液的感測器圖譜。使用由製造商供應之軟體，根據1:1朗繆爾（Langmuir)結合模型或一彳貝分析物模型分析資料。 Ί SPRk唬隨gH/gL濃度增加，指示Fe捕捉之HB丨勝任抗原結合。根據i:i朗繆爾結合模型對資料之分析指示表17 中所示之0.15 nM之表觀平衡解離常數（Kd)及各種動力學承數’然而’計舁曲線不良好匹配觀測之感測器圖譜，具有2.1之相對較大χ2值。觀測之感測器圖譜藉由二價分析物 KD模型較佳描述（χ2 = 0.4)，該模型產生表18中所示之1 〇 nM之表觀KD及各種動力學常數。表17-使用1:1朗繆爾結合模型計算之動力學常數 K^s·1) R/7Jitc(RU) Κ〇(ηΜ) 6.8X103 1.02X10·4 42 "oil — ~2Λ 表18-使用二價分析物KD模型計算之動力學常數 IWM-V1) Ko/yis'1) URU-Y1) Rmo^iRU) Kp(nlVi) y1 2.5χ105 2.5 χΚΓ4 0.174 0.166 65 1.0 0.4 因為biacore不可用於測定hu8G8之親和力，所以史卡省分析用作一種替代性方法。在此方法中，硬化抗體與一系 158864.doc -118· 201215618 列未標記抗體稀釋液混合且檢定競爭。使用Munson及 Rodbard之擬合演算法將結果繪圖以確定抗體之親和力（圖 23) ° HB1之平均Kd為1.27 nM且hu8G8之平均Kd為2.03 nM(表17)。亦藉由史卡查分析測定腺病毒細胞表面表現之 gH/gL/UL128/UL130/UL131 複合物對 HB1 與 hu8G8 兩者的親和力量測結果且得知分別為1.27 nM及2.03 nM。特定而言，使用埃原（Iodogen)方法（Thermo-Fisher Scientific; Waltham, ΜΑ)使 HB1 及 hu8G8蛾化。藉由使用 NAP-5管柱進行凝膠過濾，自游離125I-Na純化經放射性標記之抗體。經純化hu8G8抗體之比活性為12.30 pCi/pg且經純化HB1抗體之比活性為14.66 pCi/pg。50 μΐ含有固定濃度之碘化抗體及遞減濃度之未標記抗體的競爭反應混合物

I 置放入96孔板中。使用Sigma Accutase®溶液（Sigma-Aldrich; St. Louis，MO)使表現蛋白質複合物gH/gL/ 128/130/13 1之用腺病毒短暫轉染之ARPE-19細胞自燒瓶脫離，用多聚甲醛固定且用結合緩衝液（含有2% FBS、50 爪]\4 11£?£8(?^[7.2)及0.1%疊氮化鈉之〇]^£1^)洗滌。將洗滌細胞以0.2 mL結合緩衝液25,000個細胞之密度添加至含有一式三份之50 pL競爭反應混合物的96孔板中。含有細胞之各競爭反應物中之碘化抗體的最終濃度為1〇〇 pM且含有細胞之競爭反應物中之未標記抗體的最終濃度不同，起始於500 nM且接著藉由1:2倍稀釋成10個濃度遞減，且包括零添加僅有緩衝液之樣品。在室溫下培育含有細胞之競爭反應物2小時，接著轉移至Millipore Multiscreen過濾板 158864.doc -119- 201215618 中且用結合緩衝液洗滌4次以使游離碘化抗體與結合碘化抗體分離。在 Wallac Wizard 1470 γ計數器（PerkinElmer Life and Analytical Sciences; Wellesley，ΜΑ)上對過遽器計數。使用採用 Munson及 Rodbard(y4«fl/· Biochem., 7:22-39 (1980))之擬合演算法之New Ligand軟體（Genentech)評估結合資料以確定抗體之結合親和力。表19 HCMV抗艎檢定 K〇(nM) 平均 KD(nM)± SDa HB1 1 1.3 1.27 ±0.06 2 1.2 3 1.3 1 1.96 Hu8G8 2 2.06 2.03 ± 0.06 3 2.07 KD=平衡解離常數；SD=標準偏差

實例9-分析hu8G8與複合物I之結合

為進一步表徵hu8G8與複合物I之結合，進行ELISA檢定以測試hu8G8是否可結合UL13 1之含有如實例7中鑑別之抗性突變的部分。特定言之，自位置41處之絲胺酸密碼子至位置68處之絲胺酸密碼子（SRALPDQTRY KYVEQLVDLT LNYHYDAS(SEQ ID NO:194))擴增編碼 UL131 之 DNA 且選殖入具有N端His6、GST及TEV裂解位點（DNA654570)之限制非依賴性選殖（RIC)載體中。UL131之此部分形成蛋白質之二級結構中之推定α螺旋。亦選殖具有突變Q47K之 UL131，該突變消除hu8G8與在複合物I(gH/gL/UL128/ UL130/UL131)之情形下之UL131的結合。使序列經驗證之構築體在大腸桿菌菌株R〇setta2(DE3)中生長。使菌元培養 158864.doc -120 - S」 201215618 物在30°C下在含有50 pg/ml卡本西林（carbenicillin)之LB培養基中生長隔夜。在〇D600 0.7下，蛋白質在1-L培養物中之表現用0·3 mM IPTG在16°C下誘導隔夜。收集細胞且即刻藉由於含有無EDTA蛋白酶抑制劑鍵劑（Roche)之100 mM Tris(pH 8·0)、500 mM NaCl、5%甘油（緩衝液A)中進行音

波處理及細胞破壞來溶解。在1 〇〇〇〇 rpm下短暫離心經溶解細胞40分鐘且澄清溶解產物裝載於重力流Ni螯合親和力管柱（Qiagen)上。管柱用1〇管柱體積緩衝液a及10管柱體積含有50 mM咪唑之緩衝液A洗滌。蛋白質用1〇〇 mM

Tris(pH 8.0)、500 mM NaCl、5%甘油、500 mMp米》坐溶離且即刻透析入50 mM Tris(pH 8.0)、200 mM NaCl及 5%甘油中。用 25 mM Tris(pH 8.0)、200 mM NaCl及 5%甘油在尺寸排阻層析管柱（S200 10/30，GE)上進一步純化蛋白質。為測定hu8G8與UL131蛋白質片段之結合，Maxsorb £[18八板在4°(：下用每孔108、2〇〇11经或4〇11§於碳酸鹽塗佈緩衝液中之蛋白質塗佈隔夜。在用洗滌緩衝液（含有〇〇5% 吐溫20 [Sigma Chemical]之PBS)洗滌3次之後，各孔用檢定稀釋劑（含有 0.5% BSA [Invitrogen; Carlsbad, CA]之洗蘇緩衝液）阻斷1小時。hu8G8在10 pg/ml或1 pg/mi下於檢定稀釋劑中培育1小時。在3次洗務之後，各孔與過氧化酶結合之抗人類抗體（Jackson Immunolabs，Bar Harbor, ME)在 1:5000下一起培育1小時，或與辣根過氧化酶結合之抗 5HIS(Qiagen)在1:500或1:5000下一起培育1小時。實驗結 158864.doc -121 - 201215618 果展示於圖24中且包括經200 ng蛋白質塗佈且與10 pg/ml hu8G8—起培育之ELISA板的資料。儘管已出於清楚理解之目的藉由說明及舉例之方式相當詳細地描述了前述發明，但該等描述及實例不應解釋為限制本發明範疇。本文中引用之所有專利及科學文獻之揭示内容明確地以全文引用的方式併入本文中。【圖式簡單說明】圖1展示鼠類mAb 8G8之重鏈可變區（VH)(SEQ ID NO:50)與所選人類重鏈可變區：VH1 FW(SEQ ID NO:52)、人類 VH3 FW(SEQ ID NO:53)及人類 VH7 FW(SEQ ID NO:54)的胺基酸序列比對。胺基酸係根據Kabat編號來編號。對高變區（HVR)加框。圓圈指示VL-VH相互作用 (Padl an (1994) Mo/, /mm w π 〇/. 31:169);雙重星號（一個在另一個之上）指示維尼爾（Vernier)位置（Foote及Winter (1992) J. Mol. Biol. 224:487)及 FW-CDR 相互作用（Padlan (1994) Mo/, 31:169)。在位置 47、64、66、68 處之單一星號指示維尼爾位置（Foote&Winter(1992)J.Mol· Biol. 224:487);在位置58處之單一星號指示FW-CDR相互作用(Padlan (1994) Mo/· 厂 31:169) 〇圖2展示鼠類mAb 8G8之輕鏈可變區（VL)(SEQ ID NO:51)與人類輕鏈可變區：λ3 FW區（SEQ ID NO:69)及人類λ4 FW區（SEQ ID NO:55)的胺基酸序列比對。胺基酸係根據Kabat編號來編號。對高變區（HVR)加框。圓圈指示 VL-VH相互作用（Padlan (1994) Mo/. 31:169); 158864.doc -122- 201215618 雙重星號（一個在另一個之上）指示維尼爾位置（!"〇0化及 Winter (1992) J. Mol. Biol. 224:487)及 FW-CDR 相互作用 (Padlan (1994) Mo/, /mmwwo/. 31:169)。在位置47、64、 66、68處之單一星號指示維尼爾位置（Foote及Winter (1992) J. Mol. Biol. 224:487);在位置 58 處之單一星號指示 FW-CDR 相互作用（Padlan (1994) Mo/, /wmwwo/. 31:169) ° 圖3展示比較8G8k3變異體與8G8X4變異體之中和檢定的結果。圖A :在中和檢定中，相較於小鼠/人類嵌合8G8抗體（QE7/C2)，使用具有人類VH1、VH3或VH7之人類化 8G8X3抗體。圖B :在中和檢定中，相較於小鼠/人類嵌合 8G8抗體（QE7/C2)，使用具有人類VH1、VH3或VH7之人類化8G8X4抗體。實驗之EC50值呈現於各別實驗下方。圖4展示8G8 HVR-L2中之突變序列。所示為HVR-L2及 FR3之第一胺基酸之胺基酸序列（WT : SEQ ID NO:57 ; A1 : SEQ ID NO:58 ; El : SEQ ID NO:59 ; ΤΙ : SEQ ID NO:60 ； A2 ： SEQ ID NO:61 ； E2 ： SEQ ID NO:62 ； T2 ： SEQ ID NO:63 ； SG ： SEQ ID NO：64 ； SGSG ： SEQ ID NO:65 ; TGDA : SEQ ID NO:66)。圖中之編號係基於 Kabat 編號。圖5展示使用具有圖4所示之含有單一胺基酸取代之突變 HVR-L2區的各種人類化8G8抗體進行之中和檢定的結果。圖A :中和檢定。HVR-L2突變抗體皆含有人類8G8 VH1 鏈。圖B :實驗之EC50值。 I58864.doc .123- 201215618 圖6展示使用具有圖4所示之含有2個胺基酸取代之突變 HVR-L2區的各種人類化8G8抗體進行之中和檢定的結果。圖A :中和檢定。HVR-L2突變抗體皆含有人類8G8 VH1 鏈。圖B :實驗之EC50值。圖7展示鼠類mAb 8G8之輕鏈可變區（SEQ ID NO:51)與人類輕鏈可變區λ4 FW(SEQ ID NO:55)及λ4 FW上8G8之人類化輕鏈可變區（hu8G8A4 FW)(SEQ ID ΝΟ:48)的胺基酸序列比對。胺基酸係根據Kabat編號來編號。對高變區 (HVR)力口框。圓圈指示VL-VH相互作用（Padlan (1994) Mo/, /w mw«o/· 31:169);雙重星號（一個在另一個之上）指不維尼爾位置（Foote及 Winter (1992) J. Mol. Biol. 224:487)及 FW-CDR相互作用（Padlan (1994) Mo/. 3 1:169)。在位置47、64、66、68處之單一星號指示維尼爾位置（Foote及 Winter (1992) J. Mol. Biol. 224:487);在位置 58 處之單一星號指示 FW-CDR相互作用（Padlan (1994) Mo/, 31:169)。圖8展示鼠類mAb 8G8之重鏈可變區（SEQ ID NO:50)與人類重鏈可變區VH1構架（VH1 FW)(SEQ ID N〇:52)及VH1 FW上8G8之人類化重鏈可變區（hu8G8.VHl)(SEQ ID NO:45)的胺基酸序列比對。胺基酸係根據Kabat編號來編號。對高變區（HVR)加框。圓圈指示VL-VH相互作用 (Padlan (1994) Mo/· /wwmwo/. 31:169);雙重星號（一個在另一個之上）指示維尼爾位置（Foote及Winter (1992) J. Mol· Biol. 224:487)及 FW-CDR相互作用（Padlan (1994) Mo/. 158864.doc -124· 201215618 /mmwnο/. 31:169)。在位置47、64、66、68處之單一星號指示維尼爾位置（Foote& winter (!992) J. Mol. Biol. 224:487);在位置58處之單一星號指示FW-CDR相互作用 (Padlan (1994) Mo/. 31:169)。亦展示編碼 hu8G8.VHl之例示性核酸序列（SEQ ID NO:185)。

圖9展示鼠類mAb 8G8之重鏈可變區（SEQ ID NO:50)與人類重鏈可變區VH3 FW(SEQ ID NO:53)及VH3 FW上8G8 之人類化重鏈可變區（hu8G8.VH3)(SEQ ID NO:46)的胺基酸序列比對。胺基酸係根據Kabat編號來編號。對高變區 (HVR)加框。圓圈指示VL-VH相互作用（Padlan (1994) Mo/· 31:169);雙重星號（一個在另一個之上）指示維尼爾位置（Foote及 Winter (1992) J· Mol. Biol. 224:487)及 FW-CDR相互作用（Padlan (1994) //wwwwo/. 31:169) 〇在位置47、64、66、68處之單一星號指示維尼爾位置（Foote及 Winter (1992) J. Mol. Biol. 224:487);在位置 58 處之單一星號指示FW-CDR相互作用（Padlan (1994) Mo/· 31:169) 〇圖10展示鼠類mAb 8G8 VL之輕鏈可變區（SEQ ID ΝΟ:51) 與λ4FW區之輕鏈可變區（SEQIDNO:55)及λ4FW上8G8之人類化輕鏈可變區（λ4 8G8移植物）（其中根據Kabat編號，在胺基酸2及36處引入胺基酸變化）（SEQ ID NO:49)的胺基酸序列比對。胺基酸係根據Kabat編號來編號。對高變區 (HVR)加框。圓圈指示VL-VH相互作用（Padlan (1994) Μσ/· /wwwwo/. 31:169);雙重星號（一個在另一個之上）指示維尼 158864.doc -125· 201215618 爾位置（Foote及 Winter (1992) J. Mol. Biol. 224:487)及 FW-CDR相互作用（Padlan (1994) Mo/· /wimimo/· 31:169)。在位置47、64、66、68處之單一星號指示維尼爾位置（Foote及 Winter (1992) J. Mol. Biol· 224:487);在位置 58 處之單一星號指示 FW-CDR相互作用（Padlan (1994) Mo/, /mmwno/· 3 1:169)。亦展示編碼λ4 8G8移植物之例示性核酸序列 (SEQ ID ΝΟ:186)。圖11展示人類抗體MSL-109與mAb ΗΒ1之胺基酸序列比對。圖A : MSL-109 VL(SEQ ID NO:90)與親和力成熟之 HB1 VL(亦為SEQ ID N0:90(100%—致性））的比對；及圓 B :人類抗體MSL-109 VH(SEQ ID NO:92)與親和力成熟之 1^1¥11(8£()10!^0:89)的胺基酸序列比對。胺基酸係根據Kabat編號來編號。對高變區（HVR)加框。圖 12A 展示來自 MSL-109 之 HVR-H2(SEQ ID NO:91)及 IGHVSdPOUSEQ ID ΝΟ··93)之胺基酸序列及所作出之各種胺基酸取代。圖12Β及圖12C展示使用含有突變HVR-H2 區之抗體進行的2個不同中和檢定之結果。有關Fab(圖 12B)及mAb(圖12C)之中和檢定均經展示。IC50以nM單位提供。圖13展示比較含有λ4 8G8移植物及hu8G8.VHl之抗體（下文稱為「hu8G8」）及HB1與HIG預防上皮細胞及纖維母細胞感染之能力之中和檢定的結果。

圖14展示使用經消減高免疫球蛋白（HIG)對上皮細胞及纖維母細胞進行之病毒中和檢定的結果。消減HIG之抗gB 158864.doc -126- 201215618 特異性抗體、抗複合物I特異性抗體、抗gH/gL抗體，或進行模擬消減作為對照。圖15展示旨在測定HB1及hu8G8抗體相較於已知抗gB、抗gH及抗UL131抗體之抗原特異性的FACS分析結果。X軸上之APC強度指示抗體結合。y軸繪出在既定強度下之細胞的比例，其以佔任一強度下之最多細胞數目的百分比表示。圖16展示中和檢定之結果，在該中和檢定中，hu8G8與 HB 1以1:1比率混合且以一系列稀釋液測試其抑制HCMV感染上皮細胞之能力。該兩種抗體之組合具有累加效應且表現符合布利斯（Bliss)獨立方程式（具有效應A及B之兩種單一化合物之組合反應C為C=A+B-AxB)。圖17展示測定在不同hu8G8濃度下之HB1效能或在不同 HB1濃度下之hu8G8效能的中和檢定結果。圖18展示有關HB 1抗性HCMV突變體之中和檢定之結果。圖A展示使用HB 1抗體進行之中和檢定之結果。圖B展示使用hu8G8抗體進行之中和檢定之結果。HB 1抗性 HCMV突變體仍然對hu8G8中和敏感。圖19展示有關hu8G8抗性HCMV突變體之中和檢定之結果。圖A展示使用HB1抗體進行之中和檢定之結果。圖B展示使用hu8G8抗體進行之中和檢定之結果。hu8G8抗性 HCMV突變體仍然對HB 1中和敏感。圖20展示與HCMV病毒株（WT)D1(當產生抗性病毒株時並行生長之VR1814)相較於各種HB1抗性病毒突變體對上 158864.doc -127- 201215618 皮細胞及纖維母細胞之病毒進入相關的資料。圖21展示HB 1抗體與細胞表面表現之在gH中含有賦予抗性之點突變之gH/gL結合的能力，如藉由FACS分析所檢定。不同抗gH抗體用作細胞表面表現之陽性對照。X軸為 GFP強度，其為HCMV醣蛋白表現之指標。y軸為APC信號，其指示抗體結合。圖22展示hu8G8抗體與細胞表面表現之在複合物I中含有賦予抗性之點突變之複合物I結合的能力，如藉由FACS分析所檢定。抗UL13 1抗體及抗gH抗體用作細胞表面表現之陽性對照。X軸為GFP強度，其為HCMV醣蛋白表現之指標。y軸為APC信號，其指示抗體結合。圖23A及圖23B展示旨在測定hu8G8及HB1對其抗原之結合親和力的史卡查分析結果。使用Munson及Rodbard之擬合演算法對結果作圖。y軸繪出所結合之1251標記抗體與總抗體之濃度比率。總抗體依125ι標記抗體及未標記抗體之濃度計算。圖24展示量測hu8G8及陽性對照抗體（抗HIS)與UL13 1之肽片段（SEQ ID NO:194之胺基酸41(Ser)至胺基酸 68(Ser))(SRA-螺旋WT)或含有胺基酸取代Q47K之相應片段 (SRA-螺旋Mut)結合的ELISA檢定結果。 158864.doc •128- 201215618 序列表 <110>美商建南德克公司 <120>抗體組合物及使用方法

<130> P4680Ri^O <140> 100135366 <1^> 2011-09-29 <150> 61/504,056 <151> 2011-07-01 <150> 61/387,735 <151> 2010-09-29 <150> 61/387,725 <151> 2010-09-20 <160> 209 <170> Patentln version 3.5

<210> 1 <211> 743 <212> PRT <213>人類細胞巨大病毒 <400> 1

Met Atg Pro Gly Leu Pro Pro Tyr Leu Thr Val Phe Thr Val Tyr Leu 1 5 10 15

Leu Ser His Leu Pro Ser Gin Arg Tyr Gly Ala Asp Ala Ala Ser Glu 20 25 30

Ala Leu Asp Pro His Ala Phe His Leu Leu Leu Asn Thr Tyr Gly Arg 35 40 45

Pro He Arg Phe Leu Arg Glu Asn Thr Thr Gin Cys Thr Tyr Asn Ser 50 55 60

Ser Leu Arg Asn Ser Thr Val Val Arg Glu Asn Ala lie vSer Phe Asn 65 70 75 80

Phe Phe Gin Ser Tyr Asn Gin Tyr Tyr Val Phe His Met Fro Arg Cys 85 90 95

Leu Phe Ala Gly Pro Leu Ala Glu Gin Phe Leu Asn Gin Val Asp Leu 100 105 110

Thr Glu ΊΙίγ Leu Glu Arg Tyr Gin Gin Arg Leu Asn Thr Tyr Ala Leu 115 120 125

Val Ser Lys Asp Leu Ala Ser Tyr Arg Ser Phe Ser Gin Gin Leu Lys 130 135 140

Ala Gin Asp Ser Leu Gly Gin Gin Fro Thr Thr Val Pro Pro Pro lie 145 150 155 160

Asp Leu Ser lie Pro His Val Trp Met Pro Pro Gin Thr Thr Pro His 165 170 175

Asp Trp Lys Gly Ser His Thr Thr Ser Gly Leu His Arg Pro His Phe 158864-序列表 _doc 201215618 180 185 190

Asn Gin Thr Cys 195 lie Leu Phe Asp Gly His 200

Asp Leu Leu Phe Ser Thr 205

Val Thr Pro Cys 210

Leu His Gin Gly Phe Tyr 215

Leu Met Asp Glu Leu Arg 220

Tyr Val Lys lie 225

Thr Leu Thr GJu Asp Phe 230

Phe Val Val Thr Val Ser 235 240 lie Asp Asp Asp

Thr Pro Met Leu Leu He 245 250

Phe Gly His Leu Pro Arg 255

Val Lea Phe Lys 260

Ala Pro Tyr GJn Arg Asp 265

Asn Phe lie Leu Arg Gin 270

Thr Glu Lys His 275

Glu Leu Leu Val Leu Val 2S0

Lys Lys Ala Gin Leu Asn 285

Arg His Ser Tyr 290

Leu Lys Asp Ser Asp Phe 295

Leu Asp Ala Ala Leu Asp 300

Phe Asn Tyr Leu 305

Asp Leu Ser Ala Leu Leu 310

Arg Asn Ser Phe His Arg 315 320

Tyr Ala Val Asp

Val Leu Lys Ser Gly Arg 325 330

Cys Gin Met Leu Asp Arg 335

Arg Thr Val Glu 340

Met Ala Phe Ala Tyr Ala 345

Leu Ala Leu Phe Ala Ala 350

Ala Arg Gin Glu ' 355

Glu Ala Gly Thr Glu lie 360

Ser lie Pro Arg Ala Leu 365

Asp Arg Gin Ala 370

Ala Leu Leu Gin lie Gin 375

Glu Phe Met lie Thr Cys 380

Leu Ser Gin Thr 385

Pro Pro Arg Thr Thr Leu 390

Leu Leu Tyr Pro Thr Ala 395 400

Val Asp Leu Ala

Lys Arg Ala Leu Trp Thr 405 410

Pro Asp Gin lie Thr Asp 415 lie Thr Ser Leu 420

Val Arg Leu Val Tyr lie 425

Leu Ser Lys Gin Asn Gin 430

Gin His Leu lie 435

Pro Gin Trp Ala Leu Arg 440 G】n lie A]a Asp Phe Ala 445

Leu Gin Leu His 450

Lys Thr His Leu Ala Ser 455

Phe Leu Ser Ala Phe Ala 460

Arg Gin Glu Leu 465

Tyr Leu Met Gly Ser Leu 470

Val His Ser Met Leu Val 475 480 !58864-序列表.doc -2- s 201215618

His Thr Thr Glu Arg Arg Glu lie Phe lie Val Glu Thr Gly Leu Cys 485 490 495

Ser Leu Ala Glu Leu Ser His Phe Thr Gin Leu Leu Ala His Pro His 500 505 510

His Glu Tyr Leu Ser Asp Leu Tyr Thr Pro Cys Ser Ser Ser Gly Arg 515 520 525

Arg Asp His Ser Leu Glu Arg Leu Thr Arg Leu Phe Pro Asp Ala Thr 530 535 540

Val Pro Ala Thr Val Pro Ala Ala Leu Ser lie Leu Ser Thr Met Gin 545 550 555 560

Pro Ser Thr Leu Glu Thr Phe Pro Asp Leu Phe Cys Leu Pro Leu Gly 565 570 575

Glu Ser Phe Ser Ala Leu Thr Val Ser Glu His Val Ser Tyr Val Val 580 585 590

Thr Asn Gin Tyr Leu lie Lys Gly lie Ser Tyr Pro Val Ser rfhr Thr 595 600 605

Val Val Gly Gin Ser Leu lie lie Thr Gin Thr Asp Ser Gin Thi Lys 610 615 620

Cys Glu Leu Thr Arg Asn Met His Thr Thr His Ser lie Thr Ala Ala 625 630 635 640

Leu Asn lie Ser Leu Glu Asn Cys Ala Phe Cys Gin Ser Ala Leu Leu 645 650 655

Glu Tyr Asp Asp Thr Gin Gly Val lie Asn lie Met Tyr Met His Asp 660 665 670

Ser Asp Asp Val Leu Phe Ala Leu Asp Pro Tyr Asn Glu Val Val Val 675 680 685

Ser Ser Pro Arg Thr His Tyr Leu Met Leu Leu Lys Asn Gly Thr Val 690 695 700

Leu Glu Val ITir Asp Val Val Val Asp Ala Thr Asp Ser Arg Leu Leu 705 710 715 720

Met Met Scr Val Tyr Ala Leu Ser Ala lie lie Gly lie Tyr Leu Leu 725 730 735

Tyr Arg Met Leu Lys Thr Cys 740 <210> 2 <211> 278 <2]2> PR丁 <213>人類細胞巨大病毒 <400> 2

Met Cys Arg Arg Pro Asp Cys Gly Phe Scr Phe Ser Pro Gly Pro Val 158864-序列表.doc 201215618 15 10 15

Val Leu Leu Trp Cys Cys Leu Leu Leu Pro lie Val Ser Ser Val Ala 20 25 30

Val Ser Val Ala Pro Thx Ala Ala Glu Lys Val Pro Ala Glu Cys Pro 35 40 45

Glu Leu Thr Arg Arg Cys Leu Leu Gly Glu Val Phe Gin Giy Asp Lys 50 55 60

Tyr Glu Ser Trp Leu Arg Pro Leu Val Asn Val Thr Arg Arg Asp Gly 65 70 75 80

Pro Leu Ser Gin Leu He Arg Tyr Arg Pro Val Thr Pro Glu Ala Ala 85 90 95

Asn Ser Val Leu Leu Asp Asp Ala Phe Leu Asp Thr Leu Ala Leu Leu 100 105 110

Tyr Asn Asn Pro Asp Gin Leu Arg AJa Leu Leu Thr Leu Leu Ser Ser 115 120 125

Asp ITir Ala Pro Arg Trp Met Thr Val Met Arg Gly Tyr Ser Glu Cys 130 135 140

Gly Asp Giy Ser Pro Ala Val Tyr Thr Cys Val Asp Asp Leu Cys Arg 145 150 155 160

Gly Tyr Asp Leu Thr Arg Leu Ser Tyr Gly Arg Ser He Phe Thr Glu 165 170 175

His Val Leu Gly Phe Glu Leu Val Pro Pro Ser Leu Phe Asn Val Val 180 185 190

Val A1a lie Arg Asn Glu Ala Thr Arg Thr Asn Arg Ala Val Arg Leu 195 200 205

Pro Val Ser Thr Ala Ala Ala Pro Glu Gly lie Thr Leu Phe Tyr Gly 210 215 220

Lea Tyr Asn Ala Val Lys Glu Phe Cys Leu Arg His Gin Leu Asp Pro 225 230 235 240

Pro Leu Leu Arg His Leu Asp Lys Tyr Tyr Ala Gly Leu Pro Pro Glu 245 250 255

Leu Lys Gin Thr Arg Val Asn Leu Pro Ala His Ser Arg Tyr Gly Pro 260 265 270

Gin Ala Val Asp Ala Arg 275

<210> 3 <211> 171 <212> PRT <213>人類細胞巨大病毒 -4 - 158864-序列表.doc 201215618 <400> 3

Met Ser Pro Lys Asn Leu Thr Pro Phe Leu Thr Ala Leu Trp Leu Leu 15 10 15

Leu Gly His Ser Arg Val Pro Arg Val Arg Ala Glu Glu Cys Cys Glu 20 25 30

Phe lie Asn Val Asn His Pro Pro Glu Arg Cys Tyr Asp Phe Lys Mei 35 40 45

Cys Asn Arg Phe Thr Val Ala Leu Arg Cys Fro Asp Gly Glu Val Cys 50 55 60

Tyr Ser Pro Glu Lys Thr Ala Glu lie Arg Gly lie Val Thr Thr Met 65 70 75 80

Thr His Ser Leu Thr Arg Gin Val Val His Asn Lys Leu Thr Ser Cys 85 90 95

Asn Tyr Asn Pro Leu Tyr Leu Glu Ala Asp Gly Arg lie Arg Cys Gly ]00 105 110

Lys Val Asn Asp Lys Ala Gin Tyr Leu Leu Gly Ala Ala Gly Ser Val 115 120 125

Pro Tyr Arg Trp lie Asn Leu Glu Tyr Asp Lys lie Thr Arg lie Val 130 135 140

Gly Leu Asp Gin Tyr Leu Glu Ser Val Lys Lys His Lys Arg Leu Asp 145 150 155 160

Val Cys Arg Ala Lys Met Gly Tyr Met Leu Gin 165 170

<210> 4 <21!> 214 <212> PRT <213>人類細胞巨大病毒 <400> 4

Met Leu Arg Leu Leu Leu Arg His His Phe His Cys Leu Leu Leu Cys 15 10 15

Ala Val Trp Ala Thr Pro Cys Leu Ala Ser Pro Trp Ser Thr Leu Thr 20 25 30

Ala Asn Gin Asn Pro Ser Pro Pro Trp Ser Lys Leu Thr Tyr Ser Lys 35 40 45

Pro His Asp Ala Ala Thr Phe Tyr Cys Pro Phe Leu Tyr Pro Ser Pro 50 55 60

Pro Arg Ser Pro Leu Gin Phe Ser Gly Phe Gin Arg Val Ser Thr Gly 65 70 75 80

Pro Glu Cys Arg Asn Glu Thr Leu Tyr Leu Leu Tyr Asn Arg Glu Gly 85 90 95 158864-序列表.doc 201215618

Gin Thr Leu Val Glu Lys Ser Ser Thr Trp Val Lys Lys Val lie Trp 100 105 110

Tyr Leu Ser Gly Arg Asn Gin Thr lie Leu Gin Arg Met Pro Arg TTir 115 120 125

Ala Ser Lys Pro Ser Asp Gly Asn Val Gin lie Ser Val Glu Asp Ala 130 135 140

Lys lie Phe Gly Ala His Met Val Pro Lys Gin Thr Lys Leu Leu Arg 145 150 155 160

Phe Val Val Asn Asp Gly Thr Arg Tyr Gin Met Cys Val Met Lys Leu 165 170 175

Glu Scr Trp Ala His Val Phe Arg Asp Tyr Ser Val Ser Phe Gin Val 180 1S5 190

Arg Leu Thr Phe Thr Glu Ala Asn Asn Gin Thr Tyr Thr Phe Cys Thr 195 200 205

His Pro Asn Leu lie Val 210

<210> 5 <211> 76 <212> PRT <213>人類細胞巨大病毒 <400> 5

Met Cys Met Met Ser His Asn Lys Ala Phe Phe Leu Ser Leu Gin His 15 10 15

Ala Ala Val Ser Gly Val Ala Val Cys Leu Ser Val Arg Arg Gly Ala 20 25 30

Gly Ser Val Pro Ala Gly Asn Arg Gly Lys Lys Thr lie lie Thr Glu 35 40 45

Tyr Arg lie Thr Gly Thr Arg Ala Leu Ala Arg Cys Pro Thr Lys Pro 50 55 60

Val llir Ser Met Trp Asn Ser Ser Trp Thr Ser Arg 65 70 75 <2)0> 6 <211> 10 <212> FRT <213>小家鼠 <400> 6

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Gly Met Asn 1 5 10 <210> 7 <211> 17 <212> PRT <213>小家鼠 <400> 7 -6-

158864-序列表.doc s 201215618

Trp lie Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys 1 5 10 15

Gly <210> 8 <211> 13 <212> PRT <213>小家鼠 <400> 8

Ser Trp Tyr Tyr Val Ser Asn Tyr Trp Tyr Phe Asp Val 1 5 10 <210> 9 <211> 12 <212> PRT <213>小家鼠 <400> 9

Thr Leu Ser Ser Gin His Ser Thr Tyr Thr He Glu 1 5 10

<210〉 10 <211> 11 <212> PRT <213>小家鼠 <400> 10

Leu Lys Lys Asp Gly Ser His Ser Thr Gly Asp <210> 11 <211> 11 <2\2> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠HVR-L2肽 <400> 11

Leu Lys Lys Asp Ala Ser His Ser Thr Gly Asp 1 5 10 <210> 12 <211> 11 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠HVR-L2肽 <400> 12

Leu Lys Lys Glu Gly vSer His Ser Thr Gly Asp 1 5 10 <210> 13 <211> 11 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠HVR-L2肽 158864-序列表.doc -7- 201215618 <400〉 13

Leu Lys Lys Thr G]y Ser His Ser Thr Gly Asp 1 5 10 <210> 14 <211> 11 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠HVR-L2肽 <400> 14

Leu Lys Lys Asp Gly Ser His Ser Thr Gly Asp 1 5 10 <210> 15 <211> 11 <2i2> PRT <2i3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠HVR-L2肽

<400> 15

Leu Lys Lys Asp Gly Ser His Ser Thr Gly Glu I 5 3〇 <210> 16 <211> 11 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠HVR-L2肽 <400> 16

Leu Lys Lys Asp Gly Ser His Ser Thr Gly Thr 1 5 10 <210> 17 <211> 11 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠HVR-L2肽 <400> 17

Leu Lys Lys Ser Gly Ser His Ser Thr Gly Asp 1 5 10 <210> 18 <211> 11 <212> PRT <213>人工序列’ <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠HVR-L2肽 <400> 18

Leu Lys Lys Ser Gly Ser His Ser Thr Gly Ser i 5 10 158864-序列表.doc · 8 · s 201215618 <210> 19 <211> 11 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠HVR-L2肽 <400> 19

Leu Lys Lys Thr Gly Ser His Ser Thr Gly Asp 1 5 10 <210> 20 <211> 13 <212> PRT <2丨3>小家鼠 <400> 20

Gly Val Gly Asp Thr lie Lys Glu Gin Phe Val Tyr Val

<210> 21 <211> 12 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成共同HVR-L2序列 <220> <221> MOD—RES <222> (4)..(4) <223>任何胺基酸 <220> <221> MOD_RES <222> (5)..(5) <223>任何胺基酸 <220> <221> M0DJES <222> (11)..(11) <223>任何胺基酸 <220> <221> MOD_RES <222> (127..(12) <223>任何胺基酸 <400> 2]

Leu Lys Lys Xaa Xaa Ser His Ser Thr Gly Xaa Xaa 1 5 10 <210> 22 <211> 25 <212> PRT <213>智人 <400> 22

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser 20 25 <210> 23 <2U> 14

158864-序列表.doc -9- 201215618 <212> PRT <213>智人 <400> 23

Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp lie Gly 1 5 10 <210> 24 <211> 32 <212> PRT <2i3>智人 <400> 24

Arg Val Thr lie Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Leu Glu 15 10 15

Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg 20 25 30 <210> 25 <211> 11 <212> PRT <213>智人 <400> 25

Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 1 5 10 <210> 26 <211> 25 <212> PRT <21.3>小家鼠 <400> 26

Gin lie His Leu Val Gin Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu 15 10 15

Thr Val Lys lie Ser Cys Lys Ala Ser 20 25 <210> 27 <211> 14 <212> PRT <213>小家鼠 <400> 27

Trp Val Lys Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met Gly 1 5 10 <2I0> 28 <211> 32 <212> PRT <213>小家鼠 <400> 28

Arg Fhe Aia Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr Leu Gin 15 10 15 lie Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Met Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg 20 25 30 <210> 29 <231> 11 <212> PRT <213>小家鼠 -10- 158864-序列表.doc 201215618 <400> 29

Trp Gly Gin Gly llir Leu Val Thr Val Ser Ser 1 5 10 <21〇> 30 <211> 25 <212> PRT <213>智人 <4-00> 30

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Fro Gly Gly 1 5 ]〇 15

Ser Leu Arg l^u Ser Cys Ala Ala Ser 20 25 <210> 31 <211> 14 <212> PRT <213>智人 <400> 31

Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly

<210> 32 <211> 32 <212> PRT <213>智人 <400> 32

Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin 1 5 10 15

Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg 20 25 30 <210> 33 <213> 25 <212> PRT <213>智人 <400> 33

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Scr Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 】 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser 20 25 <210> 34 <21】> 32 <212> PRT <2丨3>智人 <400> 34

Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr Leu Gin 15 10 15 lie Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg 20 25 30 <210> 35 <211> 22 <212> PRT <213>小家鼠 158864-序列表.doc - 11 - 201215618 <400> 35

Gin Leu Val Leu Thr Gin Ser Ser Ser Ala Ser Phe Ser Leu Gly Ala 15 10 15

Ser Ala Lys Leu Thr Cys 20 <210> 36 <211> 15 <232> PRT <213>小家鼠 <400> 36

Trp Tyr Gin Gin Gin Pro Leu Lys Pro Pro Lys Tyr Val Met Glu 15 10 15 <210> 37 <2L1> 32 <212> PRT <213>小家鼠 <400> 37

Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Ala Asp Arg Tyr 1 5 10 Ϊ5

Leu Ser lie Ser Asn lie Gin Pro Glu Asp Glu Ala He Tyr lie Cys 20 25 30 <210> 38 <211> 11 <212> PRT <213>小家鼠 <400> 38

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 1 5 10 <210> 39 <211> 22 <212> PRT <213>智人 <400> 39

Gin Pro Val Leu Thr Gin Ser Pro Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Leu Thr Cys 20 <210> 40 <211> 15 <212> PRT <213>智人 <400> 40

Trp His Gin Gin Gin Pro Gly Lys Gly Pro Arg Tyr Leu Met Lys 15 10 15 <210> 4L <211> 32 <212> PRT <213>智人 <400> 41

Gly lie Pro Asp Arg Phe Scr Gly Ser Ser Ser Gly Ala Asp Arg Tyr 12- 158864-序列表.doc 201215618 15 10

Leu Thr lie Ser Asn Leu Gin Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys 20 25 30 <210> 42 <211> 11 <212> PRT <213>智人 <400> 42

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly 1 5 10 <210> 43 <211> 21 <212> PRT <213>智人 <400> 43

Ser Val Leu Thr Gin Ser Pro Ser Ala i5er Ala Ser Leu Gly Ala Ser 1 5 10 15

Val Lys Leu Thr Cys 20 <210> 44 <211> 15 <212> PRT <213>智人 <400> 44

Trp Tyr Gin Gin Gin Pro Gly Lys Gly Pro Arg Tyr Leu Met Lys 15 10 15 <210> 45 <211> 122 <212〉 PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成人類化8G8免疫球蛋白重鏈多肽 <400> 45

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Arg Gin Ala Fro Gly Gin Gly Leu Glu Trp lie 35 40 45

Gly Trp lie Asn rrhr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60

Lys Glv Arg Val Thr lie Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Leu Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 -13- 158864-序列表.doc 201215618

Ala Arg Ser Trp Tyr Tyr Val Ser Asn Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp 100 105 110

Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 46 <21i> 122 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成人類化8G8免疫球蛋白重鏈多肽 <4〇〇> 46

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Uu Glu Trp Val 35 40 45

Gly Trp lie Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Jle Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys S5 90 95

AlaAr, Ser Trp Tyr Tyr Val Ser Asn Tyr Trp Tyr Phe Asp Val T,p

Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 47 <21I> 122 <212> PRT <2】3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成人類化8G8免疫球蛋白重鏈多肽 <400> 47

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp He 35 40 45

Gly Trp ile Asn Tlir Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60 -14- 158864-序列表,doc 201215618

Lys G!y Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Scr Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Leu Gin ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Ser Trp Tyr Tyr Val Ser Asn Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp 100 1.05 110

Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 48 <211> 116 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成人類化8G8免疫球蛋白輕鏈多肽 <400> 48

Gin Pro Val Leu Thr Gin Ser Pro Ser Ala Ser Ala Scr Leu Gly Ala 1 5 10 15

Scr Val Lys Leu Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gin His Ser Thr Tyr Thr 20 25 30 lie Glu Trp His Gin Gin Gin Pro Gly Lys Gly Pro Arg Tyr Leu Met 35 40 45

Lys Leu Lys Lys Asp Gly Ser His Ser Thr Gly Asp Gly lie Pro Asp 50 55 60

Arg Phe Scr Gly Ser Ser Ser Gly Ala Asp Arg Tyr Leu Thr He Ser 65 70 75 80

Asn Leu Gin Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Val Gly Asp 85 90 95

Thr lie Lys Glu Gin Phe Val Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu 100 105 110

Thr Val Leu Gly 115 <210> 49 <21I> 115 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成人類化8G8免疫球蛋白輕鏈（突變）多肽 <400> 49

Ser Val Leu Thr Gin Ser Pro Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala Ser 15 10 15

Val Lys Leu Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gin His Ser Thr Tyr Thr lie 158864-序列表.doc -15- on* 201215618 20 25 30

Glu 丁rp Tyr Gin Gin Gin Pro Gly Lys G】y Pro Arg Tyr Leu Met Lys 35 40 45

Leu Lys Lys Asp Gly Set His Ser Thr Gly Asp Gly He Pro Asp Arg 50 55 60

Phe Ser Gly Set Ser Ser Gly Ala Asp Arg Tyr Leu Thr lie Ser Asn 65 70 75 80

Leu Gin Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Val Gly Asp Thr 85 90 95 lie Lys Glu Gin Phe Val Tyr Val Phe Giy Gly Cty Thr Lys Leu Thr 100 105 110

Val Leu Gly 115 <210> 50 <21l> 122 <212> PRT <213>小家鼠 <400> 50

Gin lie His Leu Val Gin Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu 15 10 15

Thr Va】Lys I]e Ser Cys Lys A】a Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30

Gly Met Asn Trp Val Lys Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met 35 40 45

Gly Trp He Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Leu Gin lie Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Met Ala Thr Tyr Phe Cys 85 90 95

Ala Arg Ser Trp Tyr Tyr Val Ser Asn Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp 100 105 110

Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 5i <211> 116 <212> PRT <213>小家鼠 <400> 51

Gin Leu Val Leu Tlir Gin Scr Ser Ser Ala Ser Phe Ser Leu Gly Ala 15 10 15 •16- 158864-序列表.doc 201215618

Ser Ala Lys Leu Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gin His Ser Thr Tyr Thr 20 25 30 lie GIu Trp Tyr Gin Gin Gin Pro Leu Lys Pro Pro Lys Tyr Va! Met 35 40 45

Glu Leu Lys Lys Asp Gly Scr His Ser Thr Gly Asp Gly lie Pro Asp 50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Ala Asp Arg Tyr Leu Ser lie Ser 65 70 75 80

Asn lie Gin Pro Glu Asp Glu Ala lie Tyr lie Cys Gly Val Gly Asp 85 90 95

Thr He Lys Glu Gin Phe Val Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val 100 105 110

Thr Val Leu Gly 115

<2i0> 52 <211> 117 <212> PRT <213〉智人 <400> 52

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30

Tyr lie His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp lie 35 40 45

Gly Trp He Asn Pro Gly Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Val Thr lie Thr Arg Asp rFhr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Leu Glu Leu Ser Ser Leu Arg vSer Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Thr Ala Ala Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 53 <2U> 117 <212> PRT <213>智人 <400> 53

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15 •17- 158864-序列表.doc 201215618

Ser Leu Atg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Gly Ala He Ser Scr Ser Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Thr Ala Ala Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu }〇〇 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115

<210> 54 <211> 117 <212> PRT <213>智人 <400> 54

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr 丁hr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30

Tyr lie His Trp Va] Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp He 35 40 45

Gly Trp He Asn Pro Gly Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gin Lys Phe 50 55 60

Gin Gly Arg Phe Vai Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Leu Gin He Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Thr Ala Ala Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser U5 <210> 55 <211> 112 <212> PRT <213>智人 <400> 55

Gin Pro Val Leu Thr Gin Ser Pro Set Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala 15 10 15 158864-序列表.doc -18- s 201215618

Ser Val Lys Leu Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gly His Ser Ser Tyr Thr 20 25 30 lie Ala Trp His Gin Gin Gin Pro Gly Lys Gly Pro Arg Tyr Leu Met 35 40 45

Lys Leu Asn Ser Asp Gly Ser His Ser Lys Gly Asp Gly lie Pro Asp 50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Ala Asp Arg Tyr Leu Thr lie Ser 65 70 75 80

Asn Leu Gin Ser Glu Asp GIu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Thr Trp Gly 85 90 95

Thr Gly lie Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly 100 105 110

<210> 56 <211> 345 <212> DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成人類化8G8免疫球蛋白輕鏈聚核苷酸 <400> 56 tctgtgctga cccagagccc aagcgccagc gccagcctgg gcgccagcgt gaaactgacc 60 tgcaccctga gcagccagca cagcacctac accatcgaat ggiatcagca gcagccaggc 120 aaaggcccac gctacctgat gaaactgaaa aaagatggca gccacagcac cggc£atggc 180 atcccagatc gcttcagcgg cagcagcagc ggcgccgatc gctacctgac catcagcaac 240 ctgcagagcg aagatgaagc cgattactac tgcggcgtgg gcgataccat caaagaacag 300 ttcgtgtacg tgttcggcgg cggtaccaaa ctgaccgtgc tgggc 345 <210> 57 <211> 12 <212> PRT <2Π>小家鼠 <400> 57

Leu Lys Lys Asp Gly Ser His Ser Thr Gly Asp Gly <210> 58 <211> 12 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠序列 <400> 58

Leu Lys Lys Asp Ala Ser His Ser Thr Gly Asp Gly 1 5 10 <210> 59 <211> 12 •19· 158864-序列表.doc 6 201215618 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠序列 <400> 59

Leu Lys Lys Glu Gly Ser His Ser Thr Gly Asp Gly 1 5 10 <210> 60 <211> 12 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠序列 <400> 60

Leu Lys Lys Thr Gly Ser His Ser Thr Gly Asp Gly 1 5 10

<210> 61 <211> 12 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠序列 <400> 61

Leu Lys Lys Asp Gly Ser His Ser Thr Gly Asp Ala 1 5 10

<210> 62 <213> 12 <212> PRT 人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠序列 <400> 62

Leu Lys Lys Asp Gly Ser His Ser Thr Gly Glu Gly 1 5 10

<210> 63 <211> 12 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠序列 <400> 63

Leu Lys Lys Asp Gly Ser His Ser Thr Gly Thr Gly 1 5 10 <210> 64 <211> 12 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠序列 158864-序列表.doc •20·

201215618 <400> 64

Leu Lys Lys Ser Gly Ser His Ser Thr Gly Asp Gly 1 5 10 <210> 65 <211> 12 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠序列 <400> 65

Leu Lys Lys Ser Gly Ser His Ser Thr Gly Ser Gly 1 5 10 <210> 66 <211> 12 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠序列

<400> 66

Leu Lys Lys Thr Gly Ser His Ser Thr Gly Asp Ala 1 5 10 <210> 67 <211> 32 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變小鼠FR3多肽 <400> 67

Ala I3e Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Ala Asp Arg Tyr 15 10 15

Leu Ser He Ser Asn lie Gin Pro Glu Asp Glu Ala lie Tyr lie Cys 20 25 30 <210> 68 <21l> 32 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成突變人類MFR3多肽 <400> 68

Ala He Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Ala Asp Arg Tyr 15 10 15

Leu Thr lie Ser Asn Leu Gin Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys 20 25 30 <210> 69 <211> 109 <212> PRT <213>智人 -21 · 158864·序列表.doc 201215618 <400> 69

Ser Tyr Glu Leu Tlir Gin Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gin 15 10 15

Thr Ala Arg lie Thr Cys Gin Gly Asp Ala Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala 20 25 30

Ser Trp Tyr Gin Gin Lys Fro Gly Gin Ala Pro Val Leu Val lie Tyr 35 40 45

Lys Asp Asn Asn Arg Pro Ser Gly lie Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60

Ser Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr He Ser Gly Ala Gin Ala Glu 65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn His 85 90 95

Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Giy 100 105

<210> 70 <211> 117 c232> PRT <213>人類細胞巨大病毒 <400> 70

Val Glu Met Ala Phe Ala Tyr Ala Leu Ala Leu Phe Ala Ala Ala Arg 15 10 15

Gin Glu Glu Ala Gly Ala Gin Val Ser Val Pro Arg Ala Leu Asp Arg 20 25 30

Gin Ala Ala Leu Leu Gin lie Gin Glu Phe Met lie Thr Cys Leu Ser 35 40 45

Gin Thr Pro Pro Arg Thr Thr Leu Leu Leu Tyr Pro Thr Ala Val Asp 50 55 60

Leu Ala Lys Arg Ala Leu Trp Thr Pro Asn Gin lie Thr Asp lie Thr 65 70 75 80

Ser Leu Val Arg Leu Val Tyr ile Leu Ser Lys Gin Asn Gin Gin His 85 90 95

Leu lie Pro Gin Trp Ala Leu Arg Gin Ile Ala Asp Phe Ala Leu Lys 100 105 110

Leu His Lys Thr His 115 <210> 71 <211> 10 <212> PRT <213>智人 <400> 71

Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr Ser Val Phe -22·

!58864-序列表.doc

201215618 <210> 72 <21!> 18 <2]2> PRT <213>智人 <400> 72

Ser Ser lie Asn Ser Asn Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 15 10 15

Lys Gly <210> 73 <211> 18 <212> PRT <213>智人 <400> 73

Ser Ser lie Asn Ser Asp Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 15 10 15

Lys Gly

<210> 74 <211> 18 <212> PRT <213>智人 <400> 74

Ser Ser lie Asn Ser Asn Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 15 !0 15

Lys Gly <210> 75 <211> 23 <212> PRT <2】 3>智人 <400> 75

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 1 5 10 15

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val 20 <210> 76 <211> 16 <212〉 PRT <2】3>智人 <400> 76

Arg Ser Scr Gin Ser Leu Leu His Tlu Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp 15 10 15 <210> 77 <211> 7 <212> PRT <213>智人 <400> 77

Leu Ala Ser Asn Arg Ala Ser 158864-序列表.doc -23- § 201215618 <210> 78 <211> 9 <212> PRT <2]3>智人 <400> 78

Met Gin Ala Leu Gin lie Pro Arg Thr <210> 79 <231> 25 <212> PRT <213>智人 <400> 79

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser 20 25 人rg 8013四智80丨 0>I>2>3>Kbva 1 1 *—· 1 p <2<2<2<2<4Tr. eo LI y G1 s Ly y G, o pr va rp <210> 81 <211> 30 <212> PRT <213>智人 <400> 81

Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser He Phe Leu Gin 1 5 10 15

Met Asn Scr Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 20 25 30 <210> 82 <2Π> Π <212> PRT <213>智人 <400> 82

Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 1 5 10 <210> 83 <211> 23 <212> PRT <213>智人 <400> 83

Asp lie Val Met rFhr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly 15 10 15

Glu Pro Ala Ser lie Ser Cys 20 24- 158864-序列表.doc 201215618 <210> 84 <211> 15 <212> PRT <213〉智人 <400〉 84

Trp Tyr Val Gin Lys Pro Gly Gin Scr Pro Gin Leu Leu He Tyr 15 10 15 <230> 85 <211> 32 <212> PRT <2]3>智人 <400> g5

Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 15 10 15

Leu Lys lie Scr Arg Val Glu Thr Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys 20 25 30

<210> 86 <211> 10 <212> PRT <213>智人 <400> 86

Phe Giy Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys <210> 87 <211> 130 <212> PRT <2i3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類Ig重鏈多肽 <400> 87

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe ΊΙιγ Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Lea Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Asn Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Scr Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser He Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Giy Ser Leu Scr Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Tlu Val 115 120 125 -25- 158864-序列表.doc 201215618

Scr Ser 130 <210> 88 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類Ig重鏈多肽 <400> 88 GIu Glu Gin Val Leu GIu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Fro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Fro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Scr Asp Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Scr Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly ΊΉγ Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> S9 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類lg重鏈多肽 <400> 89

Glu Glu Gin Val Leu GIu Scr Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Scr Ser lie Asn Ser Asn Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 158864·序列表.doc - 26 - s 201215618

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 90 <211> 112 <212> PRT <213>智人 <400> 90

Asp lie Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly

Glu Pro Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser Gin Ser Leu Leu His Thr 20 25 30

Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Val Gin Lys Pro Gly Gin Ser 35 40 45

Pro Gin Leu Leu lie Tyr Leu Ala Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe 'Fhr Leu Lys lie 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Thr Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gin Ala 85 90 95

Leu Gin lie Pro Arg Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 110 <210> 91 <211> 18 <212> PRT <213>智人 <400>91

Ser Ser lie Asn Ser Asp Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 15 10 15

Lys Gly <210> 92 <211> 130 <212> PRT <213>智人 • 27- 158864-序列表.doc 201215618 <400> 92

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phc Thr Phe Ser Fro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Asp Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Vai Trp Gly Gin Gly Thr Uu Val Thr Val Π5 120 125

Ser Ser 130 <210> 93 <211> 18 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類ig重鏈肽 <220> <221> M0DJRES <222> (4)..(4) <223> Asn或 Ser <220>

<221> TOJES <222> (6)..(6) <223>任何胺基酸 <220>

<221> M0D_RES <222> (8)..(8) <223>任何胺基酸 <400> 93

Ser Ser lie Xaa Ser Xaa Ser Xaa Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 1 5 10 . 15

Lys Gly <210> 94 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 28- 158864-序列表.doc 201215618 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類Ig重鏈多肽 <220> <221> M0D.RES <222> (52)..(52) <223> A_sn或Ser <220〉 <22]> MOD RES <222> (54).,(54) <223>任何胺基酸 <220> <221> M0DJES <222> (56)..(56) <223>任何胺基酸 <400> 94

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Xaa Ser Xaa Ser Xaa Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 95 <211> 22 <212> PR丁 <213>智人 <400> 95

Leu Glu Trp Val Ser Ser lie Ser Ser Ser Ser Ser Tyr lie Tyr Tyr 15 10 15

Ala Asp Ser Val Lys Gly 20

<210> 96 <211> 130 <212> PRT •29- 158864-序列表.doc 201215618 <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 96

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phc Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Ser Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val ITir Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 97 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 97

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser lie Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Tlir lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp ΊΉγ Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 -30- 158864-序列表.doc 201215618

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Scr Ser 130 <210> 98 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 98

Glu Glu G!a Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 丁rp Va] 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Asn Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 99 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 99

Giu Glu Gin Vai E.eu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr •31 158864-序列表.doc 201215618 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Gin Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe ITir lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 100 <2il> 130 <212> PCT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 100

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Phe Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Va] Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Vai 115 120 125

Ser Ser 130 •32- 158864-序列表.doc 201215618 <210> 101 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 1〇]

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Met Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu G3n Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 ]〇5 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 102 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 102

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly G!y Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Vai Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser He Asn Ser Leu Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 158864-序列表.doc -33- 201215618 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Ar£ Scr Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp ]〇〇 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Scr Ser 130 <210> 103 <231> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 103

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Gly Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Scr Ser 130 <210> 104 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 104 158864·序列表.doc -34-

201215618

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly ] 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Scr Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser His Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser He Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly rFhr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 105 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 105

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser He Asn Ser Lys Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Giu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val -35- 158864-序列表.doc 201215618 115 120 125

Ser Ser 】30 <210> 106 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 106

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Trp Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 107 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 107

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 丁rp Val 35 40 45 -36- 158864-序列表.doc 201215618

Ser Ser lie Asn Ser Tyr Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Tlir Val 115 320 125

Ser Ser 130 <210> 108 <213> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 108

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser He Asn Ser Val Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Scr Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 05 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp TTir Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 109 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 -37- 158864-序列表.doc 201215618 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 109

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Va] Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Ser Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Uu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 110 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 110

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Giy Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser vSer lie Ser Ser lie Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 -38-

158864-序列表.doc s 201215618

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 111 <2il> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 111

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser He Ser Ser Asn Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ue Scr Arg Asp Asn Ala Glu Asn Scr He Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Lea Arg Ala Glu Asp rrhr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Scr Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 112 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 112

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30 39· 158864-序列表.doc 201215618

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 丁rp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Gin Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser He Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 113 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 113

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Phe Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp ΊΤίγ Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Set 130 -40- 158864-序列表.doc 201215618 <210> 114 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400〉 114

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Met Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 115 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220>

<223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 135

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Leu Ser Tlir Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80 158864-序列表.doc -41- 201215618

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Scr Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Va丨 Trp Gly Gin Gly Thr Leu Va丨 Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 116 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 116

Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Aia Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Gly Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 117 <211> 130 <212> PRT c2】3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 117

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15 -42- 158864-序列表.doc 201215618

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser His Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser He Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala G]u Asp Thr Ala Val 丁yr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 118 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> Π8

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Lys Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125 -43 - 158864-序列表.doc 201215618

Ser vSer 130 <210> 119 <211> 130 <212> PRT <2I3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 119

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Trp Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 】00 105 120

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 120 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 120

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly l 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Tyr Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 -44 - 158864-序列表.doc 201215618

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 121 <211> 130 <212> PRT <2i3>人工序列 <220〉

<223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 121

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tip Vai 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Val Scr Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Mel Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 丁yr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Scr Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 Π0

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 122 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列合成親和力成熟之人類HC多肽 • 45- <220> <223>人工序列之說明 158864-序列表.doc 201215618 <40ft> 122

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Giy Gly Gly Leu Val Lys Pro Oly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Ser Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Giu Asn Ser He Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp m 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 123 <211> 130 <212> PRT <2】3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 123

Glu Glu Gin Val Leu Giu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser lie Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Giu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110 •46· 158864-序列表.doc 201215618

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 124 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 124

Glu Glu Gin Val Leu Glu Scr Gly Gly Gly Leu Val Lys Fro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Asn Ser Arg 丁yr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Scr lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Va】Tyr Tyr Cys 85 9Q 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 125 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 125

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 158864-序列表.doc -47- 201215618 35 40 45

Ser Ser He Asn Set Gin Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Giu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Va] Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210〉 126 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 126

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe 丁rp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 vSer Ser lie Asn Ser Phe Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Hir Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Oly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 127 <211> 130 -48· 158864·序列表.doc 201215618 <212> PRT <2i3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 127

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Met Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Scr Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val 丁rp Gly Gin Giy Thr Leu Vai Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 128 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 128

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser ile Asn Ser Leu Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys -49- 158864·序列表.doc 201215618 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Uu Scr Asp 100 〗05 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 129 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 129

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Fro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Gly Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser He Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Giu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Scr Asp 100 105 110

Tyr 丁yr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val IIS 120 125

Ser Ser 130 <210> 130 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 130

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15 -50- 158864-序列表.doc 201215618

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser His Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Va! Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 131 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 131

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Fro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Lys Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 Π0

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Scr -51 - 158864-序列表.doc 201215618 130 <210> 132 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 132

Olu Glu Gin Val Leu GIu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser Tie Asn Ser Trp Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val 丁rp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 230 <210> 133 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 133

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Tyr Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 -52- 158864-序列表,doc 201215618

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Scr Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 1】0

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 134 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220>

<223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 134

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Ττρ Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Val Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Aia Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <21.0> 135 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220〉 <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 -53- 158864-序列表.doc 201215618 <400> 135

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Ser Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Scr Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser He Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp loo 105 no

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <230> 136 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 136

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Set Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser He Asn Ser lie Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Scr Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Scr Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110 -54- 158864-序列表.doc 201215618

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 137 <211> 130 <212〉 PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 337

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ή;γ Phc Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser He Asn Ser Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 SO

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 138 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 138

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 -55· 158864-序列表.doc 201215618

Ser Ser He Asn Ser Gin Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Ixu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 320 125

Ser Ser 130 <2I0> 139 <211> 130 <212> PRT <2]3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 139

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Giy Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Phe Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Tlir Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp (Jly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 140 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 -56- 158864-序列表.doc 201215618 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 140

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Met Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Scr 130 <210> 141 <211> 130 <212> PRT <2i3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 141

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Scr Ser lie Asn Ser Leu Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 •57- 158864·序列表.doc 201215618

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 142 <211> 130 <212> PRT <2I3>人工序列 <22Q> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 142

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Gly Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Scr He Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 143 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 143

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Va] Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30 -58- 158864-序列表.doc 201215618

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser His Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser He Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 . 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Tin Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 144 <211> 130 <212> PRT <2i3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <4〇〇> 144

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 丁rp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Lys Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 1]5 120 125

Ser Ser 130 -59- 158864-序列表.doc 201215618 <210> 145 <213> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 145

Glu Glu Gin Vai Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Fro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Scr Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Trp Ser Lys 丁yr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asa Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 146 <21l> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 146

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 Ϊ5

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser He Asn Ser Tyr Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80 -60· 158864-序列表,doc 201215618

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Scr Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 147 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 147

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Scr Scr lie Asn Scr Val Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Set Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr I】e Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser 丁yr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Scr Ser 130 <210> 148 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 148

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly -61 - 158864-序列表.doc 201215618 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Va) Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Ser Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp !00 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val TTir Val 115 320 125

Ser Ser 130 <210> 149 <211> 130 <212> PRT <2I3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 149

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser He Ser Ser lie Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125 -62- 158864-序列表.doc 201215618

Ser Ser 130 <210> 150 <211> 330 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 150

Glu GIu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Giy Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Scr lie Ser Ser Asn Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Tht lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Scr lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Scr Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 205 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 151 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 151

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 】5

Ser Leu Arg Leu Scr Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Gin Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 158864-序列表.doc -63- 201215618 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 315 120 125

Ser Ser 130 <210> 152 <211> 230 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 152

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Giy Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Phe Ser Ar£ Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp A$n Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Aia Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 】00 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 153 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> -64- 158S64_ 序列表.doc 201215618 <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 153

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Scr Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe 丁rp Val Arg G]n Ala Pro Giy Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Met Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Scr Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly ITir Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 154 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 154

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly GJy Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Scr Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Scr Scr lie Ser Ser Leu Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 SO

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 158864-序列表.doc -65- s· 201215618 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <2I0> 155 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 155

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Set Gly Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr AU Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 156 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220〉 <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <>156

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30 66-

158864-序列表.doc s 201215618

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser His Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser He Phc 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Scr Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phc Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Giy llir Leu Val Thr Val 115 320 125

Ser Ser 130 <230> 157 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <4〇〇> 157

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Lys Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Scr Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Giy Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 158 -67- 158864·序列表.doc 201215618 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 158

Glu Glu Gin Val Leu Glu Scr Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 】 5 10 15

Ser Leu Ar£ Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phc Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Trp Ser Arg Tyr Lys Tyf Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 159 <211> 130 <2i2> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 159

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Giy Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Aia Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Scr lie vSer Ser Tyr Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Va] 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr IJe Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80 -68- 158864-序列表.doc 201215618

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <21〇> 160 <211> 130 <212> FRT <2]3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 160

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phc Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Val Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser Me Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr 丁yr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Va] Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 161 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 161

Glu Glu Gin Val Leu Giu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15 •69- 158864·序列表.doc 201215618

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Fhe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Ser Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser He Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 162 <211> 130 <212> PKT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 162

Glu Glu Gin Vai Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ata Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser He Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125 -70- 158864-序列表.doc 201215618

Scr Ser 130 <210> 163 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 163

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly G!y 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Asn Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

Lys Gly Arg Phe Thr lie Scr Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser He Phe 65 70 75 80

Leu Girt Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 164 <211> 130 <212> FRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 164

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Scr Pro Tyr 20 25 30

Scr Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser He Ser Ser Gin Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

158864-序列表.doc -71 - 201215618

Lys Giy Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Ixu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Giy Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Giy Leu Asp Va] Trp Giy Gin Giy Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 165 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220>

<223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 165

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Giy Giy Giy Leu Val Lys Pro Giy Giy 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Giy Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Giy Lys Giy Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Phe Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Giy Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Giy Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Giy Leu Asp Val Trp Giy Gin Giy Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 166 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223〉人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 158864·序列表.doc -72-

S 201215618 <400> 166

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Fro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Scr Ser lie Ser Ser Met Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Scr Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 】30 <210> 167 <211> 130 <232> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 167

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Scr Scr lie Ser Ser Leu Ser lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Aig Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110 -73- 158864-序列表.doc 201215618

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 168 <2Π> 130 <232> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 168

Giu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly I^eu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Scr Gly Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin G]y Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 169 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 169

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe 丁rp Va】Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu G】u Trp Vai 35 40 45 •74-

158864-序列表.doc 201215618

Ser Ser lie Ser Ser His Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Scr Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Scr Ser 130

<210> 170 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 170

Glu Gla Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Scr Scr Lys Scr Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Scr Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp llir Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Uu Scr Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130

<210> 171 <211> 130 <212> PRT -75- 158864-序列表.doc 201215618 <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 171

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Ar^ Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Trp Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val 丁rp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 172 <212> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 172

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Tyr Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Jle Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Tlir Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 -76- 158864-序列表.doc 201215618

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val rrhr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <230> 173 <211> 130 <212> PRT <2i3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 173

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Fro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Ττρ Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Val Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 174 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 174

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr -77- 158864-序列表.doc 201215618 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Scr Ser lie Asn Ser Ala Ser Tlir Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Scr Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Scr Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 175 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 175

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Lea Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Ala Ser Ήιγ Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val SO 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr teu Val Thr Val Π5 120 125

Ser Ser 130 -78- 158864-序列表.doc 201215618 <210> Ϊ76 <21I> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 176 GIu Glu Gin Val Leu GIu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly I 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala vSer Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Scr Ser Ile'Asn Ser Ala Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ne Ser Arg Asp Asn A!a Glu Asn Ser He Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr 丁yr Gly Leu Asp Val Trp Gly G】n G]y Thr Leu Val Thr Val 115 320 125

Ser Ser 130 <210> 177 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 177

Glu Glu Gin Val Leu GIu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Ala Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe llir lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Scr lie Phe 158864-序列表.doc - 79 - 201215618 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr G】y Leu Asp Val Trp Gly Gin G!y Thr Leu Val 丁hr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 178 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 178

Glu Glu Gin Val Leu Glu Scr Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Ala Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Scr Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Giy Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 179 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 179 •80- 158864-序列表.doc 201215618

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Ala Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Scr Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 180 <211> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 180

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Set Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser ile Asn Ser Asp Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val -81 - 158864-序列表.doc 201215618 115 120 125

Ser Ser 130 <2i0> 181 <211> 130 <212> PRT <2]3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 181

Glu Glu Gin Va) Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly G!y 15 10 35

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Ser Ser Asp Ser Arg Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser He Phe 65 70 75 SO

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 no

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 182 <2il> 130 <212> PRT <2i3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 182

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Giy 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 -82- 158864-序列表.doc 201215618

Ser Ser lie Asn Ser Asp Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala GIu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Scr Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130

<210> 1S3 <21!> 130 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 183

Glu Glu Gin Val Leu GIu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Ser Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser He Ser Ser Asp Ser Lys Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala GIu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Ser Leu Ser Asp 100 105 110 丁yr 丁yr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin G!y Thr Leu Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 184 <211) 130 <212> PRT <213>人工序列 -83- 158864-序列表.doc 201215618 <220> <223>人工序列之說明：合成親和力成熟之人類HC多肽 <400> 184

Glu Glu Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr 20 25 30

Scr Val Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Asn Ser Asp Ser Thr Tyr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Ser lie Phe 65 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Arg Ser Tyr Tyr Ala Phe Ser Ser Gly Sex Leu Ser Asp 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val 1.15 120 125

Ser Ser 130 <210> 185 <211> 366 <212> DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成人類化8G8免疫球蛋白重鏈多肽 <220> <221> (DS <222> (1)..(366) <400> 185 gag gtt cag ctg gtg cag tct ggc gcc gaa gtg aaa aaa cca ggg gcc 48 G]u Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 tea gtg aaa gtg tcc tgt aaa get tct ggc tac acc tic acc aac tac 96

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr 20 25 30 ggc atg aac Xgg gtg cgt cag gcc ccg ggt cag ggc ctg gaa tgg ate 144

Gly Met Asn Trp Val Arg Gla Ala Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp lie 35 40 45 ggc tgg ate aac acc tac acc ggc gaa cca acc tac gcc gat gat ttc 192

Gly Trp lie Asn Thr Tyr Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe 50 55 60 aaa ggc cgt gtg act ala acc cgt gac acc tcc acc age aca gcc tac 240

Lys 6Ty Arg VaT Thr lie Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 -84 158864-序列表.doc 201215618 eta gaa ctg age age tta aga age gag gac act gee gtc tat tat tgc 288

Leu Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 geg cgt age tgg tac tac gtg age aac tac tgg lac ttc gat gtg tgg 336

Ala Arg Ser Trp Tyr Tyr Val Ser Asn Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp 100 105 110 ggt caa gga acc ctg gtc acc gtc tee teg 366

Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 320 <210> 186 <211> 345 <212> DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成人類化8G8免疫球蛋白輕鏈（突變）多肽

<220> <221> CDS <222> (1)..(345) <400> 186 let gtg ctg acc cag age cca age gee age gee age ctg ggc gee age Ser Val Leu Thr Gin Ser Pro Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala Ser 1 5 10 15 gtg aaa ctg acc igc acc ctg age age cag cac age acc tac acc ate Val Lys Leu Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gin His Ser Thr Tyr Thr lie 20 25 30 gaa tgg tat cag cag cag cca ggc aaa ggc cca ege tac ctg atg aaa Glu Trp Tyr Gin Gin Gin Pro Gly Lys Gly Pro Arg Tyr Leu Met Lys 35 40 45 ctg aaa aaa gat ggc age cac age acc ggc gat ggc ate cca gat ege Leu Lys Lys Asp Gly Ser His Ser Thr Gly Asp Gly He Pro Asp Arg 50 55 60 ttc age ggc age age age ggc gee gat ege tac ctg acc ate age aac Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Ala Asp Arg Tyr Leu Thr lie Ser Asn 65 70 75 80 ctg cag age gaa gat gaa gee gat tac tac tgc ggc gtg ggc gat acc Leu Gin Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Val Gly Asp Thr 85 90 95 ate aaa gaa cag ttc gtg tac gtg tic ggc ggc ggt acc aaa ctg acc lie Lys Glu Gin Phe Val Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr 100 105 110 48 96 144 192 240 gtg ctg ggc 288 336 345

Val Leu Gly 115 <210> 187 <211> 22 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成IGHV3-21*01肽 <400〉 187

Leu Glu Trp Val Ser Ser lie Ser Ser Ser Ser Ser Tyr lie Tyr Tyr 15 10 15 '•mi 15_8864-序列表.doc -85- 201215618 A.a Asp Ser Val Lys Gly <210> 188 <211> 22 <212> PRT <2】3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成MSL-109肽 <220> <221〉MOD RES <222> (10)..(10) <223〉入sp、$er、Thr、Asn、Gin、Phe、Met 或Leu <220> <221> MOD RES <222> (12)..(12) <223> Thr或人rg <400> 188 Leu Glu Trp Val Ser Ser lie Asn Ser Xaa Ser Xaa Tyr Lys Tyr Tyr 1 5 10 15

Ala Asp Ser Val Lys Gly 20 <210> 189 <211> 15 <212> IM <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成寡核苷酸 <400> 189 tcgcgcccga agagg 15 <210> 190 <2Π> 17 <212> DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成寡核苷酸

<400> 190 cggccggatt gtggatt 17 <210> 191 <211> 23 <212> DNA <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成寡核苷酸 <400> 191 caccgacgag gaticcgaca acg <210> 192 23 158864-序列表.doc -86- s 201215618 <211> 28 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 192

Thr Ala Glu Lys Asn Asp Tyr Tyr Arg Val Pro His Tyr Trp Asp Ala 1 5 10 15

Cys Ser Arg Ala Leu Pro Asp Gin Thr Arg Tyr Lys 20 25 <210> 193 <211> 28 <2J2> PRT <2]3>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽

<400> 193

Cys Pro His Val Trp Met Pro Pro Gin Thr Thr Pro His Asp Trp Lys 15 10 15

Gly Ser His Thr Thr Ser Gly Leu His Arg Pro His 20 25 <210> 194 <211> 28 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 194

Ser Arg Ala Leu Pro Asp Gin Thr Arg Tyr Lys Tyr Val Glu Gin Leu 15 10 15

Val Asp Leu Thr Leu Asn Tyr His Tyr Asp Ala Ser 20 25 <210> 195 <211> 29 <212> PRT <213：>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 195

His Pro His His Glu Tyr Leu Ser Asp Leu Tyr Thr Pro Cys Ser Ser 1 5 10 15

Ser Gly Arg Arg Asp His Ser Leu Glu Arg Leu Thr Arg 20 25 <210> 196 <211> 28 <212> PRT <213>人工序列 -87- 158864·序列表.doc 201215618 <220> <223>人工序列之說明： <400> 196 Cys Pro His Val Trp Met

Gly Ser His Thr Thr Ser 20 合成肽 Pro Pro G!n Thr Thr Pro His Asp Trp Lys 10 15 Gly Leu His Arg Pro His 25 <210> 197 <211> 28 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明： <400〉 197 Cys Gly Leu Pro Pro Glu

His Ser Arg Tyr Gly Pro 20 合成肽 Leu Lys Gin Thr Arg Val Asn Leu Pro Ala 10 35 Gin Ala Val Asp Ala Arg 25 > > > > > 012 3 03 11 Τ* 11 ΙΑ ΟΛ <2<2<T2<2<2<2 列序 8 τ ^1928咫人明說之列序工人 <400> 198 Val Gly Leu Asp Gin Tyr

Asp Val Cys Arg Ala Lys 20 合成肽 Leu Glu Ser Val Lys Lys His Lys Arg Leu 10 15 Met Gly Tyr Met Leu Gin 25 <210> 199 <211> 25 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明： <400> 199 Arg Gin Val Val His Asn 1 5

Tyr Leu Glu Ala Asp Gly 20 合成肽 Lys Leu Thr Ser Cys Asn Tyr Asn Pro Leu 10 15 Arg lie Arg 25 <210> 200 <21i> 28 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 158864-序列表.doe -88- 201215618 <400> 200

Phe Thr Glu Ala 15

Arg Asp Tyr Ser Val Ser Arg Gin Val Arg Leu Thr 1 5 10

Asn Asn Gin Thr Tyr Thr Phe Cys rrhr His Pro Asn 20 25 <210> 201 <211> 27 <212> PHT <213>人工序列 <220> 人工序列之說明：合成肽 <400> 201

Ser Pro Trp Phe Thr Leu Thr Ala Asn Gin Asn Pro Ser Pro Pro Trp 15 10 15

Ser Lys Leu Thr Tyr Pro Lys Pro His Asp Cys 20 25

<210> 202 <2il> 28 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>人工序列之說明：合成肽 <400> 202

Thr Ala Glu Lys Asn Asp Tyr Tyr Arg Val Pro His Tyr Trp Asp Ala 15 10 15

Cys Ser Arg Ala Leu Pro Asp Gin Thr Arg Tyr Lys 20 25

<210> 203 <211> 129 <212> PRT <213>人類細胞巨大病毒 <400> 203

Met Arg Leu Cys Arg Val Trp Leu Ser Val Cys Leu Cys Ala Va3 Val 15 10 15

Leu Gly Gin Cys Gin Arg Glu Thr Ala Glu Lys Asn Asp Tyr Tyr Arg 20 25 30

Val Pro His Tyr Trp Asp Ala Cys Ser Arg Ala Leu Pro Asp Gin Thr 35 40 45

Arg Tyr Lys Tyr Val Glu Gin Leu Val Asp Leu Thr Leu Asn Tyr His 50 55 60

Tyr Asp Ala Ser His Gly Leu Asp Asn Phe Asp Val Leu Lys Arg lie 65 70 75 80

Asn Val Tlir Glu Val Ser Leu Leu He Ser Asp Phe Arg Arg Gin Asn 85 90 95 «hr· 158864-序列表.doc -89- 201215618

Arg Arg Gly Gly Tlir Asn Lys Arg Thr Thr Phe Asn Ala Ala Gly Ser 100 105 110

Leu Ala Pro His Ala Arg Ser Leu GIu Phe Ser Val Arg Leu Phe Ala 115 120 125

Asn

<210> 204 <221> 214 <212> PRT <213>人類細胞巨大病毒 <400> 204

Met Leu Arg Leu Leu Leu Arg His His Phe His Cys Leu Leu Leu Cys 15 10 15

Ala Val Trp Ala Thr Pro Cys Leu Ala Ser Pro Trp Phe Thr Leu Tlir 20 25 30

Ala Asn Gin Asn Pro Ser Pro Pro Trp Ser Lys Leu Thr Tyr Pro Lys 35 40 45

Pro His Asp AJa Ala Thr Phe Tyr Cys Pro Phe Leu Tyr Pro Ser Pro 50 55 60

Pro Arg Ser Pro Ser Gin Phe Ser Gly Phe Gin Arg Val Ser Thr Gly 65 70 75 80

Pro Glu Cys Arg Asn GIu Ήιγ Lcu Tyr Leu Leu Tyr Asn Arg Glu Gly 85 90 95

Gin Thr Leu Val Glu Arg Ser Ser ΊΙιγ Trp Val Lys Lys Val He Trp 100 105 110

Tyr Leu Ser Gly Arg Asn Gin Thr lie Leu Gin Arg Met Pro Arg Thr 115 320 125

Ala Ser Lys Pro Ser Asp Gly Asn Val Gin lie Ser Val Glu Asp Ala 130 135 140

Lys He Fhe Gly Ala His Met Val Pro Lys Gin Thr Lys Leu Leu Arg 145 150 155 160

Phe Val Val Asn Asp Gly Thr Arg Tyr Gin Met Cys Val Met Lys Leu 165 170 175

Glu Ser Trp Ala His Val Phe Arg Asp Tyr Ser Val Ser Phe Gin Val 180 185 190

Arg Leu Thr Phe Thr Glu Ala Asn Asn Gin Thr Tyr Thr Phe Cys Thr 195 200 205

His Pro Asn Leu lie Val 210 -90- 158864·序列表.doc 201215618

<210> 205 <21l> 171 <212> PRT <213>人類細胞巨大病毒 <400> 205

Met Ser Pro Lys Asn Leu Thr Pro Phe Leu Thr Ala Leu Trp Leu Leu 15 10 15

Leu G!y His Ser Arg Val Pro Arg Val Arg Ala Glu Glu Cys Cys Glu 20 25 30

Phe lie Asn Val Asn His Pro Pro Glu Arg Cys Tyr Asp Phe Lys Met 35 40 45

Cys Asn Arg Phe Thr Val Ala Leu Arg Cys Pro Asp Gly Glu Val Cys 50 55 60

Tyr Ser Pro Glu Lys Thr Ala Glu He Arg Gly lie Val Thr Thr Met 65 70 75 80

Thr His Ser Leu Thr Arg Gin Val Val His Asn Lys Leu Thr Ser Cys

Asn Tyr Asn Pro Leu Tyr Leu Glu Ala Asp Gly Arg lie Arg Cys Gly 100 105 110

Lys Val Asn Asp Lys Ala Gin Tyr Leu Leu Gly Ala Ala Gly Ser Val 115 120 125

Pro Tyr Arg Trp lie Asn Leu Glu Tyr Asp Lys lie Thr Arg lie Val 130 135 HO

Gly Leu Asp Gin Tyr Leu Glu Ser Val Lys Lys His Lys Arg Leu Asp 145 150 155 160

Val Cys Arg Ala Lys Met Gly Tyr Met Leu Gin 165 170

<210> 206 <21]> 743 <212> PRT <213>人類細胞巨大病毒 <400> 206

Met Arg Pro Gly Leu Pro Phe Tyr Leu Thr Val Phe Ala Val Tyr Leu 15 10 15

Leu Ser His Leu Pro Ser Gin Arg Tyr Gly Ala Asp Ala Ala Ser Glu 20 25 30

Ala Leu Asp Pro His Ala Fhe His Leu leu Leu Asn Thr Tyr Gly Arg 35 40 45

Pro lie Arg Phe Leu Arg Glu Asn Thr Thr Gin Cys Thr Tyr Asn Ser 50 55 60

Ser Leu Arg Asn Ser Thr Val Val Arg Glu Asn Ala He Ser Phe Asn 65 70 75 80 •91 - 158864-序列表.doc 201215618

Phe Phe Gin Ser Tyr Asn Gin Tyr Tyr Val Phe His Met Pro Arg Cys 85 90 95

Leu Phe Ala Gly Pro Leu Ala Glu Gin Phe Leu Asn Gin Val Asp Leu 100 105 110

Thr Glu Thr Leu Glu Arg Tyr Gin Gin Arg Leu Asn Thr Tyr Ala Leu 115 120 125

Val Ser Lys Asp Leu Ala Ser Tyr Arg Ser Phe Pro Gin Gin Leu Lys 130 135 140

Ala Gin Asp Ser Leu Gly Gin Gin Pro Thr Thr Val Pro Pro Pro lie 145 150 155 160

Asp Leu Ser lie Pro His Val Trp Met Pro Pro Gin Thr Tlir Pro His 165 170 175

Asp Trp Lys Gly Ser His Thr Thr Ser Gly Leu His Arg Pro His Phe 180 185 190

Asn Gin Thr Cys lie Leu Phe Asp Gly His Asp Leu Leu Phe Ser Thr 195 200 205

Val Thr Pro Cys Leu His Gin Gly Phe Tyr Leu Met Asp Glu Leu Arg 210 215 220

Tyr Val Lys lie Thr Leu Thr Glu Asp Phe Phe Val Val Thr Val Ser 225 230 235 240

He Asp Asp Asp Thr Pro Met Leu Leu lie Phe Gly His Leu Pro Arg 245 250 255

Val Leu Phe Lys Ala Pro Tyr Gin Arg Asp Asn Phe lie Leu Arg Gin 260 265 270

Thr Glu Lys His Glu Leu Leu Val Leu Val Lys Lys Thr Gin Leu Asn 275 280 285

Arg His Ser Tyr Leu Lys Asp Ser Asp Phe Leu Asp Ala Ala Leu Asp 290 295 300

Phe Asn Tyr Leu Asp Leu Ser Ala Leu Leu Arg Asn Ser Phe His Arg 305 310 315 320

Tyr Ala Val Asp Val Leu Lys Ser Gly Arg Cys Gin Met Leu Asp Arg 325 330 335

Arg Thr Val Glu Met Ala Phe Ala Tyr Ala Leu Ala Leu Phe Ala A]a 340 345 350

Ala Arg Gin Glu Glu Ala Gly Thr Glu lie Ser lie Pro Arg Ala Leu 355 360 365

Asp Arg Gin Ala Ala Leu Uu Gin He Gin Glu Phe Met lie Thr Cys -92- 158864-序列表.doc 201215618 370 375 380

Leu Ser G3n Thr Pro Pro Arg Thr Thr Leu Leu Leu Tyr Pro Thr Ala 385 390 395 400

Val Asp Leu Ala Lys Arg AU Leu 丁rp Thr Pro Asp Gin lie Thr Asp 405 410 415

He Thr Ser Leu Val Arg Leu Val Tyr lie Leu Ser Lys Gin Asn Gin 420 425 430

Gin His Leu lie Pro Gin Trp Ala Leu Arg Gin He Ala Asp Phe Ala 435 440 445

Leu Gin Leu His Lys Thr His Leu Ala Ser Phe Leu Ser Ala Phe Ala 450 455 460

Arg Gin Glu Leu Tyr Leu Met Gly Ser Leu Val His Ser Met Leu Val 465 470 475 480

His Thr Thr Glu Arg Arg Glu lie Phe He Val Glu Tiir Gly Leu Cys 485 490 495

Ser Leu Ala Glu Leu Ser His Phe Thr Gin Leu Leu Ala His Pro His 500 505 510

His Glu Tyr Leu Ser Asp Leu 丁yr Thr Pro Cys Ser Ser Ser Gly Ar£ 515 520 525

Arg Asp His Ser Leu Glu Arg Leu Thr Arg Leu Fhe Pro Asp Ala Thr 530 535 540

Val Pro Ala Thr Val Pro Ala Ala Leu Ser lie Leu Ser Thr Met Gin 545 550 555 560

Pro Ser Thr Leu Glu Thr Phe Pro Asp Leu Phe Cys Leu Pro Leu Gly 565 570 575

Glu Ser Phe Ser Ala Leu Thr Val Ser Glu His Val Ser Tyr Val Val 580 585 590

Thr Asn Gin Tyr Leu lie Lys Gly He Ser Tyr Pro Val Ser Tlir Thr 595 600 605

Val Val Gly Gin Scr Leu lie He Thr G!n Thr Asp Ser Gin Ser Lys 610 615 620

Cys Glu Leu Thr Arg Asn Met His Thr Thr His Ser lie Thr Ala Ala 625 630 635 640

Leu Asn [le Ser Leu Glu Asn Cys Ala Phe Cys Gin Ser Ala Leu Leu 645 650 655

Glu Tyr Asp Asp Thr Gin Gly Val lie Asn lie Met Tyr Met His Asp 660 665 670 -93- 158864-序列表.doc 201215618

Ser Asp Asp Val Leu Phe Ala Leu Asp Pro Tyr Asn Glu Val Val Val 675 6S0 685

Ser Ser Pro Arg Thr His Tyr Leu Met Leu Leu Lys Asn Gly ITir Val 690 695 700

Leu Glu Val Thr Asp Val Val Val Asp Ala Thr Asp Ser Arg Leu Leu 705 710 715 720

Met Met Ser Val Tyr Ala Leu Ser Ala lie lie Gly lie Tyr Leu Leu 725 730 735

Tyr Arg Met Leu Lys Thr Cys 740

<210> 207 <211> 464 <212> PRT <213>人類細胞巨大病毒 <400> 207

Met Gly Arg Lys Glu Asp Met Arg Ser lie Ser Lys Leu Phe Phe lie 15 10 15 lie Ser Leu Thr Val Leu Leu Phe Ser lie lie Asn Cys Lys Val Val 20 25 30

Arg Pro Pro Gly Arg Tyr Trp Leu Gly Thr Val Leu Ser Thr He Gly 35 40 45

Lys Gin Lys Leu Asp Lys Phe Lys Leu Glu lie Leu Lys Gin Leu Glu 50 55 60

Arg Glu Pro Tyr Hu Lys Tyr Phe Asn Met Thr Arg Gin His Val Lys 65 70 75 SO

Asn Leu Tlir Met Asn Met Thr Gin Phe Pro Gin Tyr Tyr lie Leu Ala 85 90 95

Gly Pro lie Arg Asn Asp Ser He Thr Tyr Leu Trp Phe Asp Phe Tyr 100 105 110

Ser Thr Gin Leu Arg Lys Pro Ala Lys Tyr Val Tyr Ser Gin Tyr Asn 115 120 125

His Thr Ala Lys Thr lie Thr Phe Arg Fro Pro Ser Cys Gly Tlir Val 130 135 140

Pro Ser Met Thr Cys Leu Ser Glu Met Leu Asn Val Ser Lys Arg Asa 145 150 155 160

Asp llir Gly Glu Gin Gly Cys Gly Asn Phe Thr Thr Phe Asn Pro Met 165 170 175

Phe Phe Asn Val Pro Arg Trp Asn Thr Lys Leu Tyr Val Gly Pro Thr 180 185 190

Lys Val Asn Val Asp Ser Gin Thr lie Tyr Phe Leu Gly Leu Thr Ala -94- 158864-序列表.doc 201215618 195 200 205

Leu Leu Leu Arg Tyr Ala Gin Arg Asn Cys Thr His Ser Phe Tyr Leu 210 215 220

Val Asn Ala Met Ser Arg Asn Leu Phe Arg Val Pro Lys Tyr lie Asn 225 230 235 240

Gly Tlir Lys Leu Lys Asn Thr Met Arg Lys Leu Lys Arg Lys Gin Ala 245 250 25S

Pro Val Lys Glu Gin Leu Glu Lys Lys Thr Lys Lys Ser Gin Ser Thr 260 265 270

Thr frhr Pro Tyr Phe Ser Tyr Thr Thr Ser Thr Ala Leu Asn Val Thr 275 280 285

Thr Asn Ala Thr Tyr Arg Val Thr Thr Scr Ala Lys Arg lie Pro Thr 290 295 300

Ser Thr lie Ala Tyr Arg Pro Asp Ser Ser Phe Met Lys Ser He Met 305 310 315 320

Ala Thr Gin Leu Arg Asp Leu Ala Thr Trp Val Tyr Thr Thr Leu Arg 325 330 335

Tyr Arg Asn Glu Pro Phe Cys Lys Pro Asp Arg Asn Arg Thr Ala Val 340 345 350

Ser Glu Phe Met Lys Asn Thr His Val Leu He Arg Asn Glu Thr Pro 355 360 365

Tyr Thr lie Tyr Gly Thr Uu Asp Met Ser Ser Leu Tyr Tyr Asn Glu 370 375 380

Thr Met Ser Val Glu Asn Glu Thr Ala Ser Asp Asn Asn Glu Thr Thr 385 390 395 400

Pro Thr Ser Pro Ser Thr Arg Phe Gin Lys Thr Phe lie Asp Pro Leu 405 410 415

Trp Asp Tyr Leu Asp Ser Leu Leu Phe Leu Asp Lys lie Arg Asn Phe 420 425 430

Ser Leu Gin Leu Pro Ala Tyr Gly Asn Leu Thr Pro Pro Glu His Arg 435 440 445

Arg Ala Val Asn Leu Ser Thr Leu Asn Ser Leu Trp Trp Trp Leu Gin 450 455 460

<210> 208 <211> 278 <212> PRT <213>人類細胞巨大病毒 <400> 208

Mel Cys Arg Arg Pro Asp Cys Gly Phe Ser Phe Ser Pro Gly Pro Val 15 10 15 -95- 158864-序列表.doc 201215618

Val Leu Leu Trp Cys Cys Leu Leu Leu Pro lie Val Ser Ser Val Ala 20 25 30

Val Ser Val Ala Pro Thr Ala Ala Glu Lys Val Pro Ala Glu Cys Pro 35 40 45

Glu Leu Thr Arg Arg Cys Leu Leu Gly Glu Val Phe Gin Gly Asp Lys 50 55 60

Tyr Glu Ser Trp Leu Arg Pro Leu Val Asn Val Thr Gly Arg Asn Gly 65 70 75 80

Pro Leu Ser Gin Leu I】e Arg Tyr Arg Pro Val Thr Pro Glu /Ua Ala 85 90 95

Asn Ser Val Leu Leu Asp Asp Ala Phe Lea Asp Thr Lea Ala Leu Leu 100 105 110

Tyr Asn Asn Pro Asp Gin Leu Arg Ala Leu Leu Thr Leu Leu Ser Ser 115 120 125

Asp Thr Ala Pro Arg Trp Met Thr Val Met Arg Gly Tyr Ser Glu Cys 130 135 140

Gly Asp Gly Ser Pro Ala Val Tyr Thr Cys Val Asp Asp Leu Cys Arg 145 350 155 160

Gly Tyr Asp Leu Thr Arg Leu Ser Tyr Gly Arg Ser lie Phe Thr Glu 165 170 175

His Val Leu Gly Phe Glu Leu Val Pro Pro Ser Leu Fhe Asn Val Val ISO 185 190

Val Ala He Arg Asn Glu Ala Thr Arg Thr Asn Arg Ala Val Arg Leu 195 200 205

Pro Val Ser Thr Ala Ala Ala Fro GJu Gly lie Thr Leu Phe Tyr Gly 210 215 220

Leu Tyr Asn Ala Val Lys Glu Phe Cys Leu Arg His Gin Leu Asp Pro 225 230 235 240

Pro Leu Leu Arg His Leu Asp Lys Tyr Tyr Ala Gly Leu Pro Pro Glu 245 250 255

Leu Lys Gin Thr Arg Val Asn Leu Pro Ala His Ser Arg Tyr Gly Pro 260 265 270

Gin Ala Val Asp Ala Arg 275

<210> 209 <211> 472 <212> PRT <213>人類細胞巨大病毒 -96-

158864-序列表.doc s 201215618 <400> 209

Met Gly Lys Lys GIu Met lie Met Val Lys Gly lie Pro Lys lie Met 15 10 15

Leu Leu lie Ser lie Thr Phe Leu Leu Leu Ser Leu He Asn Cys Asn 20 25 30

Val Leu Val Asn Ser Arg Gly Thr Arg Arg Ser Trp Pro Tyr Thr Val 35 40 45

Leu Ser Tyr Arg Gly Lys Glu lie Leu Lys Lys Gin Lys Glu Asp lie 50 55 60

Leu Lys Arg Leu Met Ser Thr Ser Ser Asp G]y 丁yr Arg Phe Leu Met 65 70 75 80

Tyr Pro Ser Gin Gin Lys Fhe His Ala lie Val lie Ser Met Asp Lys 85 90 95

Phe Pro Gin Asp Tyr lie Leu Ala Gly Pro He Arg Asn Asp Ser He 100 105 110

Thr His Met Trp Phe Asp Phe Tyr Ser Thr Gin Leu Arg Lys Pro Ala 115 120 125

Lys Tyr Va] Tyr Ser Glu Tyr Asn His Thr Ala His Lys He Thr Leu 130 135 140

Arg Pro Pro Pro Cys Gly Thr Val Pro Ser Met Asn Cys Leu Ser Glu 145 150 155 160

Met Leu Asn Val Ser Lys Arg Asn Asp Thr Gly Glu Lys Gly Cys Gly 165 170 175

Asn Phe Thr Thr Phe Asn Pro Met Phe Phe Asn Val Pro Arg Trp Asn 180 185 190

Thr Lys Leu Tyr lie Gly Ser Asn Lys Val Asn Val Asp Ser Gin Thr 195 200 205 lie Tyr Phe Leu Gly Leu Thr AU Leu Leu Leu Arg Tyr Ala Gin Arg 210 215 220

Asn Cys Thr Arg Ser Phe Tyr Leu Val Asn Ala Met Ser Arg Asn Leu 225 230 235 240

Phe Arg Val Pro Lys Tyr lie Asn Gly Thr Lys Leu Lys Asn Thr Met 245 250 255

Arg Lys Leu Lys Arg Lys Gin Ala Leu Val Lys Glu Gin Pro Gin Lys 260 265 270

Lys Asn Lys Lys Ser Gin Ser Thr Thr Thr Pro Tyr Leu Ser Tyr Thr 275 280 285

Thr Ser Thr Ala Phe Asn Val Thr Thr Asn Val Thr Tyr Ser Ala Thr 290 295 300 -97- 158864-序列表.doc 201215618

Ala Ala Val Thr Arg Val Ala Thr Ser Thr Thr Gly Tyr Arg Pro Asp 305 310 315 320

Ser Asn Phc Met Lys Ser lie Met Ala Thr Gin Leu Arg Asp Leu Ala 325 330 335

Thr Trp Val Tyr Thr Thr Leu Arg Tyr Arg Asn Glu Pro Phe Cys Lys 340 345 350

Pro Asp Arg Asn Arg Thr Ala Val Scr Glu Phe Met Lys Asn Thr His 355 360 365

Val Leu lie Arg Asn Glu Thr Pro Tyr Thr lie Tyr Gly Thr Leu Asp 370 375 380

Met Ser Ser Leu Tyr Tyr Asn Glu Thr Met Ser Val Glu Asn Glu llir 385 390 395 400

Ala Ser Asp Asn Asn Glu Thr Thr Pro Thr Ser Pro Ser ITir Arg Phe 405 410 415

Gin Arg ΊΤιγ Phe He Asp Pro Leu Trp Asp Tyr Leu Asp Ser Leu Leu 420 425 430

Phe Leu Asp Lys lie Arg Asn Phe Ser Leu Gin Leu Pro Ala Tyr Giy 435 440 445.

Asn Leu Thr Pro Pro Glu His Arg Arg Ala Ala Asn Leu Ser Thr Leu 450 455 460

Asn Ser Leu Trp Trp Trp Ser Gin 465 470 -98·

158864_ 序列表.doc s

Claims

201215618 七、申請專利範圍： 1. 一種結合HCMV複合物I之經分離抗體，其包含3個重鏈高變區（HVR-H1、HVR-H2及HVR-H3)及3個輕鏈高變區 (HVR-L1、HVR-L2及 HVR-L3)，其中： (a) HVR-H1包含胺基酸序列SEQ ID NO:6 ; (b) HVR-H2包含胺基酸序列SEQ ID NO:7 ; (c) HVR-H3包含胺基酸序列SEQ ID NO:8 ; (d) HVR-L1包含胺基酸序列SEQ ID NO:9 ; φ (e) HVR-L2包含選自SEQ ID NO:10-19之胺基酸序列；且 (f) HVR-L3包含胺基酸序列SEQ ID NO:20。 2. 一種結合HCMV複合物I之經分離抗體，其包含3個重鏈高變區（HVR-H1、HVR-H2及HVR-H3)及3個輕鏈高變區 (HVR-L1、HVR-L2及 HVR-L3)，其中： (a) HVR-H1包含胺基酸序列SEQ ID NO:6 ; (b) HVR-H2包含胺基酸序列SEQ ID NO:7 ; (c) HVR-H3包含胺基酸序列SEQ ID NO:8 ; 0 (d) HVR-L1包含胺基酸序列SEQ ID NO:9 ; (f) HVR-L3包含胺基酸序列SEQ ID NO:20 ;且 (e) HVR-L2及輕鏈可變域構架FR3之第一胺基酸包含胺基酸序列SEQ ID NO:21。 3. 如請求項1之抗體，其中該結合HCMV複合物I之抗體包含：輕鏈可變域構架FR1，其包含選自SEQ ID NO:35、 8£卩10 1^0:3 9及8£(5 10 1^0:43之胺基酸序列；及輕鏈可變域構架FR2，其包含選自SEQ ID NO:36、SEQ ID 158864.doc 201215618 NO:40及SEQIDNO:44之胺基酸序列。 4. 如請求項1之抗體，其中該結合HCMV複合物I之抗體包含：輕鏈可變域構架FR3，其包含選自SEQ ID NO:37及 SEQ ID NO:41之胺基酸序列；及輕鏈可變域構架FR4，其包含選自SEQ ID NO:38及SEQ ID NO:42之胺基酸序列。 5. 如請求項1之抗體，其中該結合HCMV複合物I之抗體包含與選自 SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:46 及 SEQ ID NO:47 之胺基酸序列具有至少95%序列一致性的VH序列及與胺基酸序列SEQ ID NO:48或SEQ ID NO:49具有至少95%序列一致性的V l序列。 6. 如請求項5之抗體，其中該VH序列包含選自SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:46及 SEQ ID NO:47之胺基酸序列。 7. 如請求項5之抗體，其中該VL序列包含胺基酸序列SEQ ID NO:48或 SEQ ID NO:49。 8. 如請求項5之抗體，其中該結合HCMV複合物I之抗體包含含有選自 SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:46 或 SEQ ID NO:47之胺基酸序列的VH ;及含有胺基酸序列SEQ ID NO:48 或 SEQ ID NO:49 的 VL。 9. 如請求項8之抗體，其中該結合HCMV複合物I之抗體包含 VH序列 SEQ ID NO:45 或 SEQ ID NO:46及 VL序列 SEQ ID NO:49。 10. 如請求項1至9中任一項之抗體，其中該與HCMV複合物I 結合之抗體在 0.05 pg/ml 至 0.0007 pg/ml 或 0.0007 pg/ml 158864.doc 201215618 以下之抗體濃度下中和50。/〇之HCMV。 11. 一種結合HCMV gH之經分離抗體，其包含3個重鏈高變區（HVR-H1、HVR-H2及HVR-H3)及3個輕鏈高變區 (HVR-L1、HVR-L2及HVR-L3)，其中： (a) HVR-H1包含胺基酸序列SEQ ID NO:71 ; (b) HVR-H2 包含選自 SEQ ID NO:72、SEQ ID NO:73、 SEQIDN◦:74及SEQIDNO:93之胺基酸序列； (c) HVR-H3包含胺基酸序列SEQ ID NO:75 ; φ (d) HVR-L1包含胺基酸序列SEQ ID NO:76 ; (e) HVR-L2包含胺基酸序列SEQ ID NO:77 ;且 (f) HVR-L3包含胺基酸序列SEQ ID NO:78。 12. 如請求項11之抗體，其中該結合HCMV gH之抗體包含含有胺基酸序列SEQ ID NO:93之HVR-H2，其中在SEQ ID NO:93之位置6處之胺基酸係選自由Ser、Thr、Asn、 Gin、Phe、Met及Leu組成之群，且在SEQ ID NO:93之位置8處之胺基酸係選自由Thr及Arg組成之群。 ® 13.如請求項12之抗體，其中該結合HCMV gH之抗體包含含有選自 SEQ ID NO:72、SEQ ID NO:73及 SEQ ID NO:74之胺基酸序列之HVR-H2。 14. 如請求項13之抗體，其中HVR-H2包含胺基酸序列SEQ ID NO:74。 15. 如請求項12之抗體，其中該結合HCMV gH之抗體包含與胺基酸序列SEQ ID NO:94具有至少95°/❶序列一致性的VH 序列，其中在SEQ ID NO:94之位置54處之胺基酸係選自 158864.doc 201215618 由 Ser、Thr、Asn、Gin、Phe、Met及 Leu 組成之群且在 SEQ ID NO:94之位置56處之胺基酸係選自Thr或Arg。 16. 如請求項15之抗體，其中該VH包含選自由以下組成之群之胺基酸序列：8£卩1〇]^0:87、8£(5 10 1^0:8 8及8£(^10 NO:89。 17. 如請求項15之抗體，其中該結合HCMV gH之抗體包含與胺基酸序列SEQ ID NO:90具有至少95%序列一致性之VL 序列。 18. 如請求項17之抗體，其中該結合HCMV gH之抗體包含 VL序列 SEQ ID N〇:90。 19. 如請求項18之抗體，其中該結合HCMV gH之抗體包含 VH序列 SEQ ID NO:89。 20. 如請求項11至19中任一項之抗體，其中該與HCMV gH結合之抗體中和HCMV之EC90為0.001 pg/ml至0.01 pg/ml ° 2 1.如請求項1至9及11至19中任一項之抗體，其中該抗體為單株抗體。 22. 如請求項1至9及11至19中任一項之抗體，其為人類抗體、人類化抗體或嵌合抗體。 23. 如請求項1至9及11至19中任一項之抗體，其中該抗體為抗體片段。 24. 如請求項1至9中任一項之抗體，其中該結合HCMV複合物I之抗體為全長IgGl抗體。 25. 如請求項11至19中任一項之抗體，其中該結合HCMV gH 158864.doc 201215618 之抗體為全長IgGl抗體。 26. —種組合物，其包含如請求項1至25中任一項之抗體。 2 7.如請求項2 6之組合物，其進一步包含另一治療劑。 28. 如請求項26或27之組合物，其進一步包含醫藥學上可接受之載劑。 29. —種經分離核酸，其編碼如請求項1至25中任一項之抗體。 3 0. —種宿主細胞，其包含如請求項2 9之核酸。 • 3 1. —種產生抗體之方法，其包含培養如請求項30之宿主細胞以便產生抗體。 32. —種組合物，其包含結合HCMV複合物I之經分離抗體及結合HCMV gH之經分離抗體。 3 3.如請求項32之組合物，其中該組合物中和HCMV感染。 34. 如請求項33之組合物，其中該組合物中和至少50%之 HCMV。 35. 如請求項32至34中任一項之組合物，其中該結合HCMV ® 複合物I之抗體及該結合HCMV gH之抗體以1:1比率存在於該組合物中。 36. 如請求項32至34中任一項之組合物，其中該與HCMV複合物I結合之抗體之濃度為至少0.0007 pg/ml至0.05 pg/ml 且該與HCMV gH結合之抗體之濃度為至少0.001 pg/ml至 0·01 pg/ml ° 37. 如請求項32至34中任一項之組合物，其中該結合HCMV 複合物I之抗體包含3個重鏈高變區（HVR-H1 ' HVR-H2及 158864.doc 201215618 HVR-H3)及 3 個輕鏈高變區（HVR-Ll、HVR-L2 及 HVR-L3)，其中： (a) HVR-H1包含胺基酸序列SEQ ID NO:6 ; (b) HVR-H2包含胺基酸序列SEQ ID NO:7 ; (c) HVR-H3包含胺基酸序列SEQ ID NO:8 ; (d) HVR-Ll包含胺基酸序列SEQ ID NO:9 ; (e) HVR-L2包含選自SEQIDNO:10-19之胺基酸序列；且 (f) HVR-L3包含胺基酸序列SEQ ID NO:20。 3 8.如請求項32至34中任一項之組合物，其中該結合HCMV gH之抗體包含3個重鏈高變區（HVR-H1、HVR-H2及 HVR-H3)及 3 個輕鏈高變區（HVR-Ll、HVR-L2 及 HVR-L3)，其中： (a) HVR-H1包含胺基酸序列SEQ ID NO:71 ; (b) HVR-H2 包含選自 SEQ ID NO:72、SEQ ID NO:73、 SEQIDNO:74及SEQIDNO:93之胺基酸序歹ιJ; (c) HVR-H3包含胺基酸序列SEQ ID NO:75 ; (d) HVR-Ll包含胺基酸序列SEQ ID NO:76 ; (e) HVR-L2包含胺基酸序列SEQ ID NO:77 ;且 (f) HVR-L3包含胺基酸序列SEQ ID NO:78。 39.如請求項32至37中任一項之組合物，其中該結合HCMV 複合物I之抗體包含：輕鏈可變域構架FR1，其包含選自 SEQ ID NO:35、SEQ ID NO:39 及 SEQ ID NO:43 之胺基酸序列；及輕鏈可變域構架FR2，其包含選自SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:40及 SEQ ID NO:44之胺基酸序列。 158864.doc 201215618 40. 如請求項32至37中任一項之組合物，其中該結合HCMV 複合物I之抗體包含：輕鏈可變域構架FR3，其包含選自 8丑(^10>^0:3 7及8£(5 10 1^0:41之胺基酸序列；及輕鏈可變域構架FR4，其包含選自SEQ ID NO:38及SEQ ID NO:42之胺基酸序列。 41. 如請求項32至34中任一項之組合物，其中該結合HCMV 複合物I之抗體包含與選自SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:46及SEQ ID NO:47之胺基酸序列具有至少95%序列一致性的VH序列及與胺基酸序列SEQ ID NO:48或SEQ ID NO:49具有至少95%序列一致性的Vl序列。 42. 如請求項41之組合物，其中該VH序列包含選自SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:46及 SEQ ID NO:47之胺基酸序列。 43. 如請求項41之組合物，其中該VL序列包含胺基酸序列 SEQ ID NO:48 或 SEQ ID NO:49。 44. 如請求項41之組合物，其中該結合HCMV複合物I之抗體包含（a)含有選自 SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:46 或 SEQ ID NO:47之胺基酸序列的VH ;及（b)含有胺基酸序列SEQ ID NO:48 或 SEQ ID NO:49 的 VL。 45. 如請求項44之組合物，其中該結合HCMV複合物I之抗體包含 VH序列 SEQ ID NO:45 或 SEQ ID NO:46及 VL序列 SEQ ID NO:49。 46. 如請求項32至38中任一項之組合物，其中該結合HCMV gH之抗體包含含有胺基酸序列SEQ ID NO:93之HVR-H2，其中在SEQ ID NO :93之位置6處之胺基酸係選自由 S 158864.doc -7- 201215618 Ser、Thr、Asn、Gin、Phe、Met 及 Leu 組成之群，且在 SEQ ID NO:93之位置8處之胺基酸係選自由Thr及Arg組成之群。 47·如請求項32至38中任一項之組合物，其中該結合HCMV gH之抗體包含含有選自SEQ ID NO:72、SEQ ID NO:73 及SEQ ID NO:74之胺基酸序列之HVR-H2。 48. 如請求項47之組合物，其中HVR-H2包含胺基酸序列SEQ ID NO:74。 49. 如請求項32至34中任一項之組合物，其中該結合HCMV gH之抗體包含與胺基酸序列SEQ ID ΝΟ,·94具有至少95% 序列一致性的VH序列，其中在SEQ ID ΝΟ:94之位置54 處之胺基酸係選自由Ser、Thr、Asn、Gin、Phe、Met及 Leu組成之群且在SEQ ID NO:94之位置56處之胺基酸係選自Thr或Arg。 50. 如請求項49之組合物，其中該VH包含選自由以下組成之群之胺基酸序列：SEQ ID NO:87、SEQ ID NO:88&SEQ ID NO:89。 51. 如請求項50之組合物，其中該結合HCMV gH之抗體包含與胺基酸序列SEQ ID NO:90具有至少95%序列一致性之 VL序列。 52. 如請求項51之組合物，其中該結合HCMV gH之抗體包含 VL序列 SEQ ID NO:90。 53. 如請求項52之組合物，其中該結合HCMV gH之抗體包含 VH序列 SEQ ID NO:89。 158864.doc 201215618 54. 如請求項32至53中任一項之組合物，其中該結合HCMV 複合物I之抗體及該結合HCMV gH之抗體為單株抗體。 55. 如請求項32至54中任一項之組合物，其中該結合HCMV 複合物I之抗體及該結合HCMV gH之抗體為人類抗體、人類化抗體或嵌合抗體。 56. 如請求項32至55中任一項之組合物，其中該結合HCMV 複合物I之抗體為抗體片段。 57. 如請求項32至55中任一項之組合物，其中該結合HCMV _ gH之抗體為抗體片段。 58. 如請求項32至55及57中任一項之組合物，其中該結合 HCMV複合物I之抗體為全長IgGl抗體。 59. 如請求項32至55及56中任一項之組合物，其中該結合 HCMV gH之抗體為全長IgGl抗體。 60. 如請求項32至59中任一項之組合物，其進一步包含醫藥學上可接受之載劑。 61 ·如請求項6 0之組合物，其進一步包含另一治療劑。 • 62.如請求項6 1之組合物，其中該另一治療劑係選自更昔洛韋（ganciclovir)、佛斯卡对特（foscarnet)、绳更昔洛韋 (valganciclovir)及西多福韋（cidofovir)。 63. 如請求項26至28及32至62中任一項之組合物，其係用作藥劑。 64. 如請求項26至28及32至62中任一項之組合物，其係用於抑制、治療或預防HCMV感染。 65. 如請求項26至28及32至62中任一項之組合物，其係用於 158864.doc 201215618 抑制、治療或預防先天性HCMV感染或移植接受者之 HCMV感染。 66. 如請求項63至65中任一項之組合物，其中該結合HCMV gH之抗體係呈與該結合HCMV複合物I之抗體分開的組合物形式。 67. —種如請求項26至28及32至62中任一項之組合物之用途，其係用於製造藥劑。 68. 如請求項67之用途，其中該藥劑係用於治療、抑制或預防HCMV感染。 69. 如請求項68之用途，其中該藥劑係用於抑制、預防或治療先天性HCMV感染或移植接受者之HCMV感染。 70. 如請求項69之用途，其中該移植接受者呈HCMV血清陰性。 71. 如請求項70之用途，其中該移植接受者正接受或已接受來自HCMV血清陽性供體之器官或組織。 72. 如請求項67至71中任一項之用途，其中該藥劑進一步包含另一治療劑。 73. 如請求項67至71中任一項之用途，其中該藥劑包含呈與該結合HCMV gH之抗體分開之組合物形式的該結合 HCMV複合物I之抗體。 74. 如請求項67至71中任一項之用途，其中包含該結合 HCMV複合物I之抗體之該組合物與包含該結合HCMV gH之抗體之該組合物分開投與。 75. 如請求項74之用途，其中包含該結合HCMV gH之抗體之 158864.doc -10- 201215618 該組合物與包含該結合HCMV複合物I之抗體之該組合物同時投與。 76. 如請求項74之用途，其中包含該結合HCMV gH之抗體之該組合物在包含該結合HCMV複合物I之抗體之該組合物之前或之後投與。 77. —種如請求項1至25中任一項之抗體或抗體之組合的用途，其係用於製造藥劑。 78. 如請求項77之用途，其中該藥劑係用於抑制、預防或治療HCMV感染。 79. 如請求項78之用途，其中該藥劑係用於抑制、預防或治療先天性HCMV感染或移植接受者之HCMV感染。 80. 如請求項79之用途，其中該移植接受者呈HCMV血清陰性。 8 1.如請求項80之用途，其中該移植接受者正接受或已接受來自HCMV血清陽性供體之器官或組織。 82. 如請求項8 1之用途，其中該藥劑進一步包含另一治療劑。 83. 如請求項77至82中任一項之用途，其中該結合HCMV複合物I之抗體與該結合HCMV gH之抗體分開投與。 84. 如請求項83之用途，其中該結合HCMV gH之抗體與該結合HCMV複合物I之抗體同時投與。 85. 如請求項83之用途，其中該結合HCMV gH之抗體在該結合HCMV複合物I之抗體之前或之後投與。 86. —種經分離抗體，其與如請求項1至25中任一項之抗體 158864.doc 201215618 結合相同抗原決定基。 87. —種經分離抗體，其與HCMV gH之抗原決定基結合，該抗原決定基包含對應於選自由以下組成之群之胺基酸的胺基酸： (i) 在SEQIDNO:l之位置168處之色胺酸； (ii) 在SEQIDNO:l之位置446處之天冬胺酸； (iii) 在SEQIDNO:l之位置171處之脯胺酸；及 (iv) 其組合。 88. 如請求項87之抗體，其與HCMV gH之抗原決定基結合，該抗原決定基包含選自由以下組成之群之胺基酸： (i) 在SEQ ID NO: 1之位置168處之色胺酸； (ii) 在SEQIDNO:l之位置446處之天冬胺酸； (iii) 在SEQ ID NO: 1之位置171處之脯胺酸；及 (iv) 其組合。 89. —種經分離抗體，其與HCMV複合物I之抗原決定基結合，該抗原決定基包含對應於選自由以下組成之群之胺基酸的胺基酸： ⑴在SEQIDNO:203之位置47處之麩醯胺酸； (ii) 在SEQIDNO:203之位置51處之離胺酸； (iii) 在SEQ ID NO:203之位置46處之天冬胺酸；及 (iv) 其組合。 90. 如請求項89之抗體，其包含選自由以下組成之群之胺基酸： ⑴在SEQIDNO:203之位置47處之麩醯胺酸； 158864.doc •12· 201215618 (ii) 在SEQIDNO:203之位置51處之離胺酸； (iii) 在SEQ ID NO:203之位置46處之天冬胺酸；及 (iv) 其組合。 9 1. 一種與HCMV複合物I之多肽結合之經分離抗體，該多肽包含胺基酸序列 SRALPDQTRYKYVEQLVDLT LNYHYDAS (SEQ ID NO:194)。

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