TR2023016779A2 - Aci kayisi çeki̇rdek ekstresi̇ i̇çeren fonksi̇yonel bi̇r i̇çecek ve bunun hazirlanmasina yöneli̇k bi̇r yöntem - Google Patents

Abstract

Buluş, beslenme ve gıda sektöründe kullanılmak üzere yüksek fenolik bileşik içerikli yeni fonksiyonel bir içecek ve hazırlanmasına yönelik bir yöntem ile ilgilidir. Buluş özellikle, acı kayısı çekirdek ekstresi içeren, biyoaktif bileşik içeriği yüksek, antioksidan, antigenotoksik, antihiperglisemik ve antihiperlipidemik etkileri bulunan fonksiyonel bir içecek ve bunun üretim yöntemi ile ilgilidir. Söz konusu içecek ise bir tür kahve içeceğidir.

Description

TARIFNAME ACI KAYISI ÇEKIRDEK EKSTRESI IÇEREN FONKSIYONEL BIR IÇECEK VE BUNUN HAZIRLANMASINA YÖNELIK BIR YÖNTEM Teknik Alan Bulus, beslenme ve gida sektöründe kullanilmak üzere yüksek fenolik bilesik içerikli yeni fonksiyonel bir içecek ve bunun hazirlanmasina yönelik bir yöntem ile ilgilidir. Bulus özellikle, aci kayisi çekirdek ekstresi içeren, biyoaktif bilesik içerigi yüksek, antioksidan, antigenotoksik, antihiperglisemik ve antihiperlipidemik etkileri bulunan fonksiyonel bir içecek ve bunun hazirlanmasina yönelik bir yöntem ile ilgilidir. Söz konusu içecek ise bir tür kahve içecegidir. Teknigin Bilinen Durumu Aktif metabolitlerce zengin oldugu için halk arasinda hastaliklarin tedavisinde yüzyillardir yaygin olarak bitki ekstreleri kullanilmaktadir. Fitokimyasallar, bitkilerin çiçek, yaprak, sap ve gövdelerinde bulunan, bitkiler tarafindan üretilen ve savunma mekanizmalarinda rol oynayan, bitkiye renk, tat, koku ve aromasini veren güçlü antioksidan aktiviteye sahip koruyucu veya hastalik önleyici esansiyel olmayan primer veya sekonder metabolitlerdir. Bitkilerin bu kimyasallari kendilerini korumak için ürettigi bilinmekle birlikte son arastirmalar bu kimyasallarin hastaliklara karsi koruyucu etkilerinin oldugunu göstermektedir. Fitokimyasallar ve türevlerinin antioksidan, anti-inflamatuvar ve anti- proliferatif özelliklerinden dolayi insan sagligi için yararli olduklari gösterilmistir. Sekonder metabolitlerin canlinin yasamsal fonksiyonlarinda dogrudan rolü olmasa da sagligin korunmasinda ve sürdürülmesinde önemli rolleri vardir ve günümüzde birçok sektörde hammadde olarak kullanilmaktadir. Son yillarda, bitkilerin içeriklerinde bulunan polifenoller, flavonoidler ve fenolik asitlerin reaktif oksijen türleri (ROS)*lari temizleyerek ve konakçi antioksidan savunma sistemlerini artirarak antigenotoksik, antidiyabetik, antihiperlipidemik ve anti-inflamatuar etki gösterdikleri bilinmektedir. Ayrica, fitokimyasallarin DNA hasarina karsi koruma sagladigini gösteren çok sayida çalisma ile bitkiler aleminde güçlü fito-antimutajenlerin varligi ortaya konmustur. Rosaceae familyasinin bir üyesi olan kayisi agacinin (Prunus armeniaca L.) meyveleri diyet lifleri, proteinler, sekerler, yag asitleri, mikro besinler, uçucu bilesikler, karotenoidler, fenolikler ve Iignanlar açisindan zengindir. Ayni zamanda çesitli kisimlari ates düsürücü, yara iyilestirici, antiinflamatuar, antidiyabetik, antihelmintik, hepatoprotektif ve antikanser aktivite gibi çesitli biyolojik özelliklerinden dolayi solunum hastaliklari, sindirim bozukluklari ve jinekolojik hastaliklarda dahil olmak üzere çesitli hastaliklarin tedavisinde yaygin olarak kullanilmaktadir. Kayisi çekirdegi önemli miktarda yag, karbonhidrat, protein, polifenol, flavonoid, lif ve siyanojenik glikozit amygdalin, vitaminler (A, B grubu, C, E ve K), amino asitler ve yag asitleri gibi mikro besinler içermekte qup bagirsak sagligi ve kolesterol emiIimi için faydali olabildigi bunun yani sira obezite ve diyabet önleyici özelliklere sahip oldugu için insan sagligi üzerinde büyük bir etkiye sahip oldugu gösterilmistir. Ayrica dünya genelinde tamamlayici tip alaninda kanser tedavisinin klinik çalismalarinda kayisi bitkisinin çesitli kisimlari kullanilmakta olup kayisi bazIi ürünler bu alanda umut verici terapötik potansiyele isaret etmistir. Kayisi çekirdeginde bqunan proteinlerin gidalarin antioksidan aktivitesini arttirdigi ve kayisi çekirdeginin Iutein, beta karoten ve zeaksantin gibi serbest radikaIIerIe savasmaya da yardimci olan çesitli antioksidan özellikteki biIesenIerden türlerinden olustugu belirtilmistir. Kayisi çekirdekleri tatlarina göre tatli kayisi (sweet apricot), yari aci kayisi (semibitter apricot) ve aci kayisi (bitter apricot) olarak siniflandirilmaktadir. Kayisi çekirdekleri ana bilesen olarak siyanojenik glikozit amigdaIin (%4,9'a kadar) içermektedir ve bu siyanojenik inkozitIer özeIIikIe aci kayisi çekirdeklerinde yüksek miktarlarda bulunmaktadir. Literatürde yapilan çesitli çalismalar kayisi çekirdeklerinin kaIp üzerinde koruyucu aktivite, antioksidatif/radikal süpürücü, nöroprotektif, antihiperlipidemik, hepatoprotektif, antimikrobiyal, antiparasitik, antiviral, antiinflamatuar, antidiyabetik, analjezik, immünomodülatör ve antikanser aktivite gibi biyolojik özelliklere sahip oldugunu göstermektedir. Kahve, dünya çapindaki en önemli ticari gida ürünü olup, dünya genelinde tüketilen kahve içeceklerinin çogu Arabica ve Robusta olarak üretilmektedir. Kahve bitkisi, botanik olarak Rubiaceae ailesine dahil olup, yaklasik olarak 80 türe sahiptir. Dünya genelinde, Arabika ile Robusta olmak üzere 2 türün yetistiriciligi yapilmaktadir. Küresel kahve üretiminin %75*i Arabika, %24*ü ise Robusta çekirdekleri ile karsilanmaktadir. Kahve meyveleri, renkleri yesilden kirmiziya döndükten sonra hasat edilmekte ve disi ince kapli olan çekirdeklerin disariya çikariIabiImesi için, puIp ayirma makinaIariyIa çekirdekler meyve etinden (puIp) ayriImaktadir. IsIak veya kuru isleme teknikleriyle islenerek kahve çekirdegi zari disindaki diger tabakalarin ayrilmasi saglandiktan sonra kahve çekirdekleri kurutulmaktadir. Kahvenin renk ve aroma kazandigi kavurma asamasinda ise, yesil kahve çekirdekleri 210- 240 saglanmaktadir. Literatürde yapilan çalismalarda kahvenin, içerdigi kafein, klorojenik asit ve diterpenler gibi biyoaktif bilesenlere bagli olarak, antioksidan, anti-inflamatuvar ve anti-mutajenik özellikler gösterdigini ortaya koyulmustur. Kahvenin glikoz homeostazi üzerindeki etkilerine iliskin olarak; kafeinin, adrenalin salinimina bagli olarak insülin duyarliligini azalttigi gösterilmistir. Akut kahve alimindan kaynaklanan adenosin A1 reseptör antagonizmasi (1-3 saat içinde) iskelet kasi glikoz alimini azaltabilir. Ayrica, kahve polifenolleri, glikoz metabolizmasini ve insuIin duyarliligini etkileyebilecek önemli antioksidan ve anti-inflamatuar etkilere sahiptir. Farkli alanlarda faydalari bulunan söz konusu bitki ekstrelerinin günlük hayatta bilinçsiz kullanimi insan vücudunda çesitli toksik etkilere sebebiyet verebilmektedir. Amigdalin (D- mandelonitriI-b- Dgentiobioside) sadece kayisi çekirdeklerinde degil, aci badem, keten tohumu vb. ürünlerde de bulunan baslica biyoaktif maddelerden biridir. Amigdalin, geleneksel tipta anti-kanser, ates düsürücü ve öksürük kesici olarak kullanilan dogal bir bilesiktir. Günümüzde migren, hipertoni, kronik inflamasyon, astim, bronsit, amfizem, cüzzam, diyabet, kolorektal kanser ve vitiligonun önlenmesi ve tedavisi için de uygulandigi bilinmektedir. Amigdalin ,in fare karacigerlerinde tunikamisin ile uyarilan endoplazmik retikulum stresi üzerindeki antioksidan etkilerinin degerlendirilmis oldugu bir çalismada Amigdalin ile ön muamelenin tunikamisin kaynakli endoplazmik retikulum stresini azalttigi ve karaciger dokusunda önemli bir antioksidan aktiviteye sahip oldugu tespit edilmistir. Bir çalisma da amigdalinin insan periferik kan Ienfositleri üzerindeki in vitro genotoksik ve anti genotoksik etkileri komet assay ile degerlendirilmis ve H202'ye karsi bir anti genotoksik etkiye sahip oldugu tespit edilmistir. Günümüzde bu bilesen B17 vitamini olarak adlandirilmakta olup, kayisi çekirdeginde yaklasik % 3 oraninda bulunmaktadir. Fayda içerigi yüksek bir biyoaktif madde oldugu düsünüldügünde fazla tüketilmek istenmesi söz konusu olabilir ancak kontrollü tüketilmesi etkinligini arttirmaktadir. Hem saglikli bireylerde hem de kronik ve metabolik hastaliklarda (diyabet, kanser, tiroit vb.) beslenme ve stres yönetimi yasam kalitesini yükseltmek açisindan oldukça önemlidir. LifIi, besin degeri yüksek, antioksidan içerikli besinlere artan iIgi dogrultusunda toplumda fonksiyonel gidalara ihtiyaç artmaktadir. Kontrollü tüketilmesi oldukça mühim olan B17inin bulundugu dogal besin kaynaklarinin tüketimine tedirgin yaklasim söz konusudur. Bu nedenlerle teknigin bilinen durumunda B17*nin saglikli bireyler ve farkli hastalik modellerinde günlük diyete eklenebilecek etkili ve uygun dozda alinmasinin saglandigi bir fonksiyonel bir gidaya ihtiyaç duyulmaktadir. Teknikte koruyucu özellikleri açisindan degerlendirildiginde kahve ve aci kayisi çekirdek ekstresi gibi iki kuvvetli içerigi ayni anda vücuda alinmasini saglayan bir ürün bulunmamaktadir. Sonuç olarak, yukarida anlatilan olumsuzluklardan dolayi ve mevcut çözümlerin konu hakkindaki yetersizligi nedeniyle, ilgili teknik alanda bir gelistirme yapilmasi gerekli kilinmistir. Bulusun Amaci Mevcut bulus, yukarida bahsedilen gereksinimleri karsilayan, tüm dezavantajlari ortadan kaldiran ve ilave bazi avantajlar getiren aci kayisi çekirdek ekstresi kullanimi ile biyoaktif bilesik içerigi yüksek yeni bir fonksiyonel içecek ve bunun hazirlanmasina yönelik bir yöntem ile ilgilidir. Bulusun öncelikli amaci, aci kayisi çekirdek ekstresi içerigi etkili ve uygun dozda B17 vitamini (Amigdalin) aliniminda etkili olacak biyoaktif içerigi zengin fonksiyonel bir içecek bu içecegin üretilmesini saglamaktir. Bulusun amaci, aci kayisi çekirdek ekstresi ve kahve içerigi ile farkli hastalik modellerinde sayisiz fayda saglayacak antioksidan, antigenotoksik, antihiperglisemik ve antihiperlipidemik etkileri bulunan bir ürün ortaya koymaktir. Bulusun diger amaci, kayisi çekirdegi ekstresi ve kahvenin karistirilmasiyla elde edilen fonksiyonel ve uygulanmasi son derece pratik olan bu içecekle, çekirdekteki etken maddeler de kontrollü bir sekilde vücuda alimini saglamaktir. Böylelikle tek basina kullaniminda toksik etki yapabilme olasiligina karsi, kullanimi daha sinirli tercih edilecek olan aci kayisi çekirdeginin sosyal yasam rutinine eklenmesi saglanmaktadir. Bulusun bir diger amaci, kayisi çekirdeklerinin kalp üzerinde koruyucu aktivite, antioksidatif/radikal süpürücü, nöroprotektif, antihiperlipidemik, hepatoprotektif, antimikrobiyal, antiparasitik, antiviral, antiinflamatuar, antidiyabetik, analjezik, immünomodülatör ve antikanser aktivite gibi biyolojik özellikleri ile; kahvenin antioksidan, anti-inflamatuvar ve anti-mutajenik özellikleri birlestiren bir ürün saglamaktir. Bulusun diger bir amaci; içerigindeki dogal biyoaktif bilesenlerin (Amigdalin, kafein, klorojenik asit ve diterpenler) etkileriyle hastaliklara karsi koruma saglayacak ürün ve bu ürünlerin bireyler tarafindan kolay ulasilabilir olmasini saglamaktir. Yukarida anlatilan amaçlarin yerine getirilmesi için bulus, biyoaktif içerigi yüksek bir fonksiyonel içecek olup, Aci Kayisi Çekirdek Ekstresi tozu ve ögütülmüs kahve ihtiva etmektedir. Yukarida anlatilan amaçlarin yerine getirilmesi için bulus, biyoaktif içerigi yüksek bir fonksiyonel bir içecek hazirlamak için bir yöntem olup, asagidaki islem adimlarini ihtiva etmektedir: i. Aci Kayisi Çekirdeklerinin tartiImasi ii. Aci Kayisi Çekirdeklerinin çözücüler ile ekstre edilmesi ve ardindan çözgenin uzaklastirilmasi iii. Aci Kayisi Çekirdegi Ekstraktinin IiyofiIizasyonIa kurutularak toz hale getirilmesi, iv. Aci Kayisi Çekirdegi Ekstresi tozu ile ögütülmüs kahvenin karistirilmasi. Bulusun yapisal ve karakteristik özellikleri ve tüm avantajlari asagida verilen sekil ve bu sekle atifIar yapilmak suretiyle yazilan detayli açiklama sayesinde daha net olarak anlasilacaktir ve bu nedenle degerlendirmenin de bu sekil ve detayli açiklama göz önüne alinarak yapilmasi gerekmektedir. Bulusun Anlasilmasina Yardimci Olacak Sekil Sekil 1, BAE (Aci kayisi çekirdegi ekstresi),nin MDA-MB-231 ve MCF-7 meme kanseri hücre hatlari üzerinde Doksorubicin (DOX), Methotreksat (MET) ve 5-FIorourasiI (5FU) ile BAEinin kombinasyonunun sitotoksik etkilerinin SRB testi sonuçlari. Bulusun Detayli Açiklamasi Bu detayli açiklamada, bulus konusu bilesigin tercih edilen yapilanmalari, sadece konunun daha iyi anlasilmasina yönelik olarak ve hiçbir sinirlayici etki olusturmayacak sekilde açiklanmaktadir. Mevcut bulus, biyoaktif içerigi zengin ve bu içerigin alinimi arttirilmis bir içecek, tercihen bir içecegin üretilmesi konusunda yeni bir yaklasim sunmaktadir. Bulus konusu biyoaktif içerigi yüksek bir fonksiyonel içecek Aci Kayisi Çekirdek Ekstresi tozu ve ögütülmüs kahve içermektedir. Bahsedilen içecek tercihen agirlikça %20 aci Kayisi Çekirdek Ekstresi tozu ve %80 ögütülmüs kahve içermektedir. Bulus konusu üründe Aci Kayisi Çekirdek Ekstresinin etkin ve toksik olmayan dozu olarak %20 orani tercih edilmektedir. Bulus konusu ürün homojen bir toz formdadir. Tercihen sase formu gibi tüketime hazir formda olup, kaynamis suda hazirlanarak tüketilebilmektedir. Bulus konusu ürünün tercih edilen bir yapilanmasi; Aci Kayisi Çekirdek Ekstresi tozu ve ögütülmüs Arabica kahve içermektedir. Bulus biyoaktif içerigi yüksek bir fonksiyonel bir içecek hazirlamak için bir yöntem ile ilgili olup, asagidaki islem adimlarini içermektedir: i. Aci Kayisi Çekirdeklerinin tartilmasi ii. Aci Kayisi Çekirdeklerinin çözücüler ile ekstre edilmesi ve ardindan çözgenin uzaklastirilmasi iii. Aci Kayisi Çekirdegi Ekstraktinin liyofilizasyonla kurutularak toz hale getirilmesi, iv. Aci Kayisi Çekirdegi toz ekstraktinin ile ögütülmüs kahvenin karistirilmasi. Bulusun tercih edilen bir örneginin elde edilmesi için asagidaki islemler takip edilmektedir: (i) Aci Kayisi Çekirdeklerinin istenilen oranda tartilmaktadir (ii) Tartilan Aci Kayisi Çekirdeklerinin etanol ve su kullanilarak ardisik ekstraksiyon ile ekstre edilmekte ve ardindan çözgen evaporatörle uzaklastirilmaktadir. (iii) Burada elde edilen aci Kayisi Çekirdegi Ekstraktlari liyofilizasyonla tercihen 48 saat süresince kurutularak toz hale getirilmektedir. Burada ekstraktlar liyofilizasyon (dondurularak kurutma) islemi öncesi bekletilme durumunda -80 C de bekletilmektedir. (iv) Aci Kayisi Çekirdegi toz ekstrakti ile ögütülmüs kahve 1 :4 oraninda karistirilmaktadir. Bulus konusu yöntemimizde ekstraksiyon yaparken asagidaki hususlara dikkat edilmelidir. 1- Numuneler uygun solventle birlikte koyularak sicaklik ayarlanir. 2- Solvent sifon yapacak miktarda koyulmalidir. Sizinti olmadigina dikkat edilmelidir. 3- Sogutma sistemi yeterli miktarda olmalidir. 4- Ekstraksiyon bittikten sonra sistemin sogumasi beklenmelidir. 1 gram BAElnin %3 ü Amigdalin olup, BAE ekstresi ile kahve karisim tespit edilen uygun dozda hazirlanmalidir. Bulus konusu aci kayisi çekirdek ekstreli kahve fonksiyonel bir içecek olarak ilktir ve her iki bileseninde basta fenolik bilesikler olmak üzere zengin içerikleri düsünüldügünde, antioksidan, antigenotoksik, antihiperglisemik ve antihiperlipidemik etkileri gözlenmektedir. Bulus konusu ürün üzerinde etkileri tespiti için su analizler uygulanmistir; In vitro meme kanseri hücre hatlarinda Kahve+BAE (Aci kayisi çekirdek ekstrakti),nin etkileri ile ilgili sitotoksisite testleri (SRB) ve Glukoz, insulin, GSH-Px, SOD, LDH, LDL, Yem, sivi, vücut agirligi analizleri yapildi. Kahve ve BAElnin Antioksidan testleri (DPPH ve CUPRAC) yapildi. Ayrica In vivo deney hayvanlarinda diyabet modeli olusturuldu. Bulus konusu ürün olan Kahve+BAE içecegi, BAE (Aci kayisi çekirdek ekstrakti), Kahve, ile ilgili yapilan çalismalar asagida verilmektedir; 1. Antioksidan testleri olan DPPH ((2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) ve CUPRAC ("Cupric Reducing Antioxidant Capacity", "bakir(ll) indirgeyici antioksidan kapasite") yapildi. Kullanilan oranlar asagida verilmektedir. Antioksidant testlerinde; BAE ve kahve+BAE,nin IC50 Degerleri kullanilmistir. BAE IC50 : 945 ug/ml Kahve IC50 : 47 ug/ml BAE+kahve IC50 : 62 ug/ml Trolox IC50 5,86 ug/ml BAE trolox eq : 15,08 mg Teq /g dry weight BAE+kahve trolox eq :156,20 mg Teq /g dry weight Kahve trolox eq Testler sonucunda bulus konusu Kahve+ BAE karisiminin oldukça yüksek bir antioksidan etkiye sahip oldugu tespit edilmistir. 2. Seçilen iki kronik hastalik modelinden biri olan kanserdeki etkinligini belirlemek için in vitro meme kanseri hücre hatlarinda BAEinin etkileri ile ilgili sitotoksisite testleri (SRB) yapilmistir. Burada seçilen iki farkli kanser hücre hatti (MCF-7, MDA-MB-231) ile yapilan SRB testine göre, geleneksel tedavide kullanilan; Doksorubicin (DOX), Methotreksat (MET) ve 5-Florourasil (5FU) ile BAElnin kombinasyon uygulamalari yapilmistir. Sekil 1 de BAE (Aci kayisi çekirdegi ekstresi),nin MDA-MB-231 ve MCF-7 meme kanseri hücre hatIari üzerinde Doksorubicin (DOX), Methotreksat (MET) ve 5-FIorourasiI (5FU) iIe BAEinin kombinasyonunun sitotoksik etkilerinin SRB testi sonuçlari verilmistir. Test sonucunda bulus konusu Kahve+ BAE karisiminin her üç kanser "aci ile birlikte farkli dozlarda sinerjik ve/veya antogonistik etkilerinin oldugu beIirIenmistir. Tablo-1 de BAEinin MDA-MB-231 ve MCF-7 meme kanseri hücre hatIari üzerinde sitotoksik etkilerinin SRB testine göre CI degerleri verilmistir. Tablo 1 BAEinin MDA-MB-231 ve MCF-7 meme kanseri hücre hatIari üzerinde sitotoksik etkilerinin SRB testine göre CI degerleri Hücre Kombinas Ol (10 Tanimi CI (IC50 Tanimi CI (IC90 Tanimi 100ug ) de) Sinerjizm MB BAE + 0,51 Sinerjizm 0,93 Additif 0,80 Kismi MET Sinerjizm BAE + 0,51 Sinerjizm 1,05 Additif 0,98 Additif sinerjizm antagoniz antagoniz MCF-7 MET sinerjizm m antagoniz BAE + 1,21 Kismi 0,08 Çok güçlü 9,01 Güçlü DOX antagoniz sinerjizm antagoniz In vitro meme kanseri hücre hatlarinda BAE etkisinin denemelerinde; doz-cevap iliskisi 0 ila 1000 ug/ml olan genis bir doz araliginda aritmetik kat artisi ile degerlendirilmistir. In vivo deney hayvanlarinda diyabet modeli olusturulmustur. BAEinin diyabetteki olasi faydalari degerlendirilmis. Ilgili analizler yapilarak istatistiki degerlendirme sonuçlarina göre diyabette olumlu etkileri tespit edilmistir. TR

Claims (1)

1.STEMLER Biyoaktif içerigi yüksek bir fonksiyonel içecek olup, özelligi; Aci Kayisi Çekirdek Ekstresi tozu ve ögütülmüs kahve içermesidir. Istem 1,e göre bir içecek olup, özelligi; bahsedilen kahvenin tercihen Arabica kahve olmasidir. Istem 1,e göre bir içecek olup, özelligi; agirlikça %20 aci Kayisi Çekirdek Ekstresi tozu ve %80 ögütülmüs kahve içermesidir. Biyoaktif içerigi yüksek bir fonksiyonel bir içecek hazirlamak için bir yöntem olup, özelligi; asagidaki islem adimlarini içermesidir: i. Aci Kayisi Çekirdeklerinin tartilmasi ii. Aci Kayisi Çekirdeklerinin çözücüler ile ekstre edilmesi ve ardindan çözgenin uzaklastirilmasi iii. Aci Kayisi Çekirdegi Ekstraktinin Iiyofilizasyonla kurutularak toz hale getirilmesi, iv. Aci Kayisi Çekirdegi Ekstresi tozu ile ögütülmüs kahvenin karistirilmasi. Istem 4*e göre bir yöntem olup, özelligi; ii) islem adiminda Aci Kayisi Çekirdeklerinin çözgen olarak etanol ve su ile ardisik ekstraksiyon ile ekstre edilmesidir. Istem 4*e göre bir yöntem olup, özelligi; ii) islem adiminda ekstraksiyon islemi ardindan çözgenin evaporatör uzaklastirilmasidir. Istem 4*e göre bir yöntem olup, özelligi; iii) islem adiminda Aci Kayisi Çekirdegi Ekstraktinin Iiyofilizasyonla 48 saat süresince kurutulmasidir. Istem 4*e göre bir yöntem olup, özelligi; iv) islem adiminda Aci Kayisi Çekirdegi toz ekstraktinin ile ögütülmüs kahvenin agirlikça 1:4 oraninda karistirilmasidir. TR