TARIFNAME BIYOFILM OLUSUMUNA KARSI ANTIBIYOTIK ÖZELLIKLI, ARI EKSOZOM TABANLI BIR BILESIM VE BU BILESIMIN HAZIRLAMA YÖNTEMI Bulusun Ilgili Oldugu Teknik Alan Bulus, yara, yanik veya enfeksiyon bölgelerinde yikama solüsyonu veya dis operasyonlarinda dis yikama solüsyonu olarak kullanilabilen, yaranin üzerindeki biyofilm üretimini engelleyen, antibakteriyel ve antibiyotik özellikli bir bilesim ve bu bilesimin hazirlanmasi için bir yöntem ile ilgilidir. Teknigin Bilinen Durumu Biyofilmler canli veya cansiz yüzeylere tutunarak, koruyucu bir ekstra seIIüIer polimerize madde (EPS) matriks içinde yapilanmis bakteri topluluklaridir. Bu jelsi tabaka, bakteri hücreleri tarafindan üretilen terminolojide "hücre disi polimerik yapi","eksopolisakkarit" ya da "eksopolimer (EPS)" olarak adlandirilan polisakkarit bazli bir ag yapisidir. Mikroorganizmalarin biyofilm olusturmasi olumsuz çevrede yasamalarina olanak veren karmasik bir oIaydir. Tüm enfeksiyonlarin özellikle alet iliskili enfeksiyonlar, deri ve yumusak doku enfeksiyonlari ve kronik enfeksiyonlar olmak üzere %65 veya daha fazlasini biyofilm enfeksiyonlari olusturur. Biyofilm içindeki bakteriler oldukça heterojendir, küçük bir grup persister olarak bilinen yavas üreyenlerdir, bazilari da hizli ürerler. Bu heterojenite ve EPS matriks nedeniyle biyofilm içindeki bakteriler konak savunma mekanizmalarina ve antibiyotik etkisine dirençlidir. Dolayisiyla, biyofilmler hasarli dokularin veya yaralarin iyilesme sürecini geciktirmektedir [1]. Biyofilm olusumu canli hücrelerde veya cansiz yüzeylerde meydana gelebilir ve diger bakterilerin varligi, besin miktari, sicaklik, oksijen miktari ve pH gibi faktörlerden etkilenir. Biyofilmler tek bir mikroorganizma türü tarafindan olusturulabildigi gibi birden fazla türü de yapisinda barindirabilir. Farkli türlerden olusan biyofilmlerde her tür kendi mikro kolonisini olusturur ve bu mikro koloniler birbirlerinden su kanallari araciligi ile ayrilmislardir. Su kanallari içinde devam eden su akisi besin maddelerinin ve oksijenin difüzyonunu saglar. Biyofilm bilesiminin %98'i sudan olusmaktadir ve bilesiminde bulunan diger maddeler ekstrasellüler matriks yapi ile birbirlerine tutunmaktadirlar. EPS'ler biyofilmlerin morfolojik, yapisal ve fizikokimyasal özelliklerinden sorumludur. EPS'nin bilesimi polisakkarit, protein, nükleik asit, teikoik asit, fosfolipit ve diger polimerik maddelerden olusmakta ve biyofilmlerin %75-90'ini olusturmaktadir. Biyofilm yapisinda bulunan su, bakterinin olusturdugu EPS'ye baglanmaktadir. EPS'ler biyofilm olusturarak mikroorganizmalarin koloni olusturmasina ve yüzeye baglanmasina yardimci olmaktadirlar. Hücrelerin çoklu katmanlari ve EPS antimikrobiyellerin nüfuz etmesini ve iç katmanlara ulasmasini zorlastiran kompleks bir yapi olusturabilirler. Böylece organizmayi ozmotik strese, faj bulasisina, toksik bilesiklere, dezenfektanlara ve antibiyotiklere karsi koruyabilmektedirler. Biyofilmlerdeki mikroorganizmalar antimikrobiyel bilesenlere karsi planktonik formlarindan 10-1000 kat daha dirençlidirler [2]. Dünyada farkli bakteriyel enfeksiyonlara karsi antibiyotikler veya antibiyotik özellikli yikama solüsyonlari gelistirilmistir. Antimikrobiyal kimyasal ajanlardan olan antibiyotik ve sürfaktanlar, çevreye zararli olma riskleri bulunmasina ragmen gerektigi durumlarda mümkün oldugunca az miktarda kullanilarak biyofilmlerin kontrol edilmesinde konvansiyonel yöntem konumundadir. Biyofilm yapisinda bulunan eksopolisakkarit yapinin antibiyotiklerin penetrasyonunu azaltarak bakteriye ulasmasina engel olmasi ve antibiyotik dirençli mikroorganizmalarin sebep oldugu enfeksiyonlarin sayilarinin artmasiyla bu geleneksel yaklasimlar biyofilm yapisini yok etmede yetersiz kalmakta ve biyofilm olusumunu engellememektedir. Biyofilmleri uzaklastirmada basarisiz olan mevcut yöntemler ayni zamanda mali yönden avantajli degillerdir [3]. Mevcut teknikte yer alan bakteriyel enfeksiyonlara karsi antibiyotikler veya antibiyotik özellikli yikama solüsyonlarinda hücrelerden elde edilen bir vezikül olan ve antibakteriyel özellikli eksozomlar kullanilmaktadir. Vezikül, maddeleri depolayan veya tasiyan kapali zardan olusan, görece küçük hücre içi bir kesedir. Eksozomlar ise 30-150 nm çapinda veziküllerdir. Bu yapilar biyo-aktif maddeleri tasimaktadirlar. Eksozomlar, antibiyofilm özellikleri sayesinde bakteriyel enfeksiyonu azaltmakta ve biyofilm olusumunu engellemektedir. Ayrica, eksozomlar immun sistemin güçlendirilmesine katki saglamakta ve bakteri popülasyonu azalmasinda etkin bir rol oynamaktadir. Ek olarak, eksozomlar antibakteriyel direncin olusmasini da engellemektedir [4]. Apitoksin veya bilinen diger adiyla ari zehri aci, renksiz, sivi bir kimyasaldir. Bal arilarin zehir keselerinin içinde bulunur ve ari sokmasina maruz kalindiginda insan vücuduna giren maddedir. Apitoksin zehirinin aktif maddesini proteinler olusturur ve bu madde etanol tarafindan etkisiz hale getirilebilir. Asidik bir kimyasal maddedir ve pH degeri 4.5 ile 5.5 arasindadir. Ari zehri; hyaluronik asit, fosfolipaz A2 molekülü, dopamin, seretamin, hitamin ve noradrenalin bakimindan oldukça zengindir. Zehrin içeriginde bulunan ve özellikle cilt sagligi bakimindan çok önemli bir madde hyaluronik asit, iki saglikli hücreyi birbirine baglar, yaslanma belirtilerini geciktirir, cildi gençlestirir ve güzellestirir. Fosfolipaz A2 molekülü ise hücre olusumunu destekler ve bakterileri yok eder. Ari zehri güçlü bir antiinflamatuvardir. Vücuttaki iltihabi azaltir; dolayisiyla otoimmün hastaliklara zemin hazirlayan faktörleri ortadan kaldirir. Ayrica, ari zehri, cilt rahatsizliklarina karsi etkilidir ve yara izlerini kisa sürede iyilestirir. Sedef ve egzama rahatsizliklarinda da cildi rahatlatir biyofilm olusumunu engelleyen bir bitkiden türetilen polifenolik bilesimler ile ilgilidir. Ayni zamanda, yerlesik bir biyofilmin büyümesini engelleyen en az bir fenolik fitokimyasal ve en az bir antimikrobiyal ajan içeren kombinasyonlar da saglanmaktadir. inhibe etmek için yöntemler saglamaktadir. Bir düzenlemede bir polifenolik bilesim saglanir. Polifenolik bilesimin üretim yöntemi, "(a) bir bitkinin alkol ekstraktinin bir su ve heksan karisimi ile bir birinci su bölümü ve bir heksan bölümü olusturmak üzere bölümlenmesi; (b) bir ikinci su bölümü ve bir etil asetat bölümü olusturmak için birinci su bölümünün bir su ve etil asetat karisimi ile bölünmesi; (0) bir üçüncü su bölmesi ve bir bütanol bölmesi olusturmak için ikinci su bölmesini bir su ve bütanol karisimi ile bölünmesi; ve (d) bütanol bölümünün bir metanol ve diklorometan karisimi içeren bir mobil faz ile kolon kromatografisi ile fraksiyonlanmasi, burada polifenolik kompozisyon, metanolün diklorometan hacim oraninin yaklasik 40:60 oldugu mobil faz ile ayristirilmasi" islem adimlarini içermektedir. Ancak söz konusu bilesim, biyofilmin olusmasini engelleyecek nitelikte herhangi bir bilesen içermediginden açik veya kapali yaralarin iyilesmesinde de etkin bir tedavi saglamamaktadir. Mevcut teknikte yer alan, antibiyotiklerin, solüsyonlarin veya dezenfektanlarin; bakteriyel enfeksiyonlarin veya diyabetik yaralarin tedavisinde etkin bir tedavi saglamamasi, biyofilm olusumunu engellememesi, immün sisteme katkida bulunmamasi, biyofilmi olusturan bakterilerin popülasyonun azalmasinda etkinliginin az olmasi ve antibakteriyel direncin olusmasi engellemede etkinliginin yetersiz olmasi gibi olumsuzluklar ve dezavantajlar dolayisiyla ilgili alanda bir gelistirme yapilmasi gerekli kilinmistir. Bulusun Kisa Açiklamasi ve Amaçlari Bulusta, yara, yanik veya enfeksiyon bölgelerinde yikama solüsyonu veya dis operasyonlarinda dis yikama solüsyonu olarak kullanilabilen, kolay püskürtülebilir, eksozomlarin izole edilmesi ile elde edilen ari eksozomu içeren, yara üzerinde biyofilm olusumunu engelleyen, antibakteriyel ve antibiyotik özellikli bir bilesim ve bu bilesimin hazirlanmasi için bir yöntem ile ilgilidir. Bulusa konu bilesim bakterilere karsi kullanilmak üzere en az bir antibiyotik, ari eksozomu ve püskürtmeyi kolaylastiran izotonik sivi (serum fizyoloji) içermektedir. Bulusun en önemli amaci; yara, yanik veya enfeksiyon bölgelerinde yikama solüsyonu olarak kullanilabilen, biyofilm olusumunu engelleyen, antibakteriyel bilesim saglamaktir. Bulusa konu bilesim bakterilere karsi kullanilan en az bir antibiyotik ve ari zehrinden elde edilen ari eksozomu içermektedir. Hyaluronik asit, fosfolipaz A2 molekülü, dopamin, seretamin, hitamin ve noradrenalin bakimindan oldukça zengin olan ari zehri hücre olusumunu destekler ve bakterileri yok eder. Ari zehri güçlü bir antiinflamatuvardir. Ayrica, ari zehri, cilt rahatsizliklarina karsi etkilidir ve yara izlerini kisa sürede iyilestirir. Bulusta ari zehrinden elde edilen ari eksozomunun kullanilmasi ile biyofilm olusumunu engelleyen antibakteriyel bilesim saglanmaktadir. Bulusun bir diger amaci; yara, yanik veya enfeksiyon bölgelerinde yikama solüsyonu olarak kullanilabilen ve immün sistemin güçlendirilmesine katki saglayan bir bilesim saglamaktir. Bulusa konu bilesim ari zehrinden elde edilen ari eksozomu içermektedir. Ari zehri, vücuttaki iltihabi azaltilmasina katki saglamakta; dolayisiyla otoimmün hastaliklara zemin hazirlayan faktörleri ortadan kaldirmaktadir. Böylece, bulusta ari zehrinden elde edilen ari eksozomu kullanilmasi ile immün sistemin güçlendirilmesine katki saglayan bilesim saglanmaktadir. Bulusun bir diger amaci; yara, yanik veya enfeksiyon bölgelerinde bakteri popülasyonunu azaltan veya bu bakterilerin üremelerini engelleyen bir bilesim saglamaktir. Bulusa konu bilesim bakterilere karsi kullanilan en az bir antibiyotik içermektedir. Söz konusu antibiyotik bakterileri etkin bir sekilde öldürmekte; hatta üremelerini engellemektedir. Böylece yara veya enfeksiyon bölgelerinde bakteri popülasyonunun azaltilmasi ve bu bakterilerin üremelerinin engellenmesi için bir bilesim saglanmaktadir. Bulusun bir diger amaci; yara, yanik veya enfeksiyon bölgelerinde yer alan bakterilerin antibakteriyel direnç olusturmasini engelleyen bir bilesim saglamaktir. Bulusa konu bilesimde yer alan antibiyotik ve ari zehrinden elde edilen ari eksozomunun sinerjik etkisiyle yara, yanik veya enfeksiyon bölgelerinde yer alan bakterilerin antibakteriyel direnç olusturmasi engellenmektedir. Bulusun bir diger amaci; yara, yanik veya enfeksiyon bölgelerinde yikama solüsyonu olarak kullanilabilen kolay püskürtülebilir bir bilesim saglamaktir. Bulusa konu bilesim izotonik sivi içermektedir. Bu izotonik sivi bahsi geçen bilesimin kolay bir sekilde püskürtülmesini saglamaktadir. Bulus ile, yara, yanik veya enfeksiyon bölgelerinde yikama solüsyonu olarak kullanilabilen, biyofilm olusumunu engelleyen, immün sistemin güçlendirilmesine katki saglayan, yara, yanik veya enfeksiyon bölgelerinde bakteri popülasyonunu azaltan veya bu bakterilerin üremelerini engelleyen, yara, yanik veya enfeksiyon bölgelerinde yer alan bakterilerin antibakteriyel direnç olusturmasini engelleyen ve kolay püskürtülebilir bir bilesim saglanmaktadir. Sekillerin Açiklamasi Sekil 1. Ari zehrinden elde edilen ari eksozomunun taramali elektron mikroskobu (SEM) görüntüsü. Bulusun Ayrintili Açiklamasi Bulus, yara, yanik veya enfeksiyon bölgelerinde yikama solüsyonu veya dis operasyonlarinda dis yikama solüsyonu olarak kullanilabilen, kolay püskürtülebilir, ari eksozomu içeren, yara üzerinde biyofilm olusumunu engelleyen, antibakteriyel ve antibiyotik özellikli bir bilesim ve bu bilesimin hazirlanmasi için bir yöntem ile ilgilidir. Burada bahsi geçen ari eksozomu sivi formda olan ari zehrinden elde edilmektedir. Bulusa konu bilesim; bakterilere karsi kullanilmak üzere en az bir antibiyotik veya antibiyorik karisimi, ari zehrinden elde edilen ari eksozomu ve püskürtmeyi kolaylastiran izotonik sivi (serum fizyoloji) içermektedir. Bahsi geçen antibiyotik gentamisin veya amoksisilin olabilecegi gibi bakteriyosit veya bakteriyostatik etkilere sahip bir karisim olan gentamisin ve amoksisilin karisimi olarak tercih edilmektedir. Bakteriyosit veya bakteriyostatik etkilere sahip antibiyotik karisimi bqusa konu bilesimde agirlikça %1-5 oraninda kullanilmaktadir. Bahsi geçen antibiyotik karisiminin bqusa konu bilesimde kullanilmasi ile bilesimin antibakteriyel spektrumu genisletilmektedir. Bilesim agirlikça %0,1-2 oraninda ari eksozomu içermektedir. Ari eksozomu, sivi formdaki ari zehrinin içinde bulunan bir bilesenidir. Ari eksozomu arinin zehrinin içinden santrifüj yöntemi veya bir kit ile ayristirilmaktadir. Ari zehrinden elde edilen ari eksozomunun minimum inhibisyon konsantrasyonu (MIK) degeri 400 ngr dozundadir. Ari eksozomu içeren, yara üzerinde biyofilm olusumunu engelleyen, antibakteriyel ve antibiyotik özellikli bulus konusu bilesim agirlikça %93-98,8 izotonik sivi içermektedir. Izotonik sivi, bilesimde yer alan ari eksozomunun parçalanmasini önleyerek bilesimin kolay püskürtülmesini saglamaktadir. Ayrica, izotonik su bilesimde yer alan ari eksozomunun basincini dengelemekte; böylece eksozomun bozulmasini engellemektedir. Izotonik sivi basit tuz solüsyonudur. 1 ml izotonik sivi 0.9 miligram sodyum klorür (NaCI) içermektedir. Izotonik sivinin pH'i 7.2; sicakligi ise 20-40°C olmalidir. Izototik sivi bqusa konu bilesimde %93-98,8 oraninda kullanilmasi sayesinde vezikül ve iç basinci olan eksozomun iç basincini sabitlemekte, eksozomun patlamasini veya büzülmesini önlemektedir. Izototik sivi, eksozomlarin saklanmasi için kullanilmaktadir. Bulusa konu bilesimin üretim yönteminde sirasiyla veya karisik siralama ile asagidaki islemler uygulanmaktadir. o ultrasantrifüj yöntemi ile veya bir kit ile ari zehrinden ari eksozomunun ayristirilmasi ve ari eksozomunun elde edilmesi, o ayri bir yerde en az bir adet ve tercihen en az iki adet antibiyotigin izotonik sivi içinde çözdürülmesi ve antibiyotikli bir çözelti elde edilmesi, o ari zehrinden ayristirilan ari eksozomunun, izotonik sivi içinde çözdürülen antibiyotikli çözelti içerisine ilave edilmesi ve ari eksozomu içeren antibiyotkli bir çözelti elde edilmesi, o ari eksozomu ve antibiyotik içeren çözeltinin ultrasonik titresime tabi tutulmasi ve bu sayede ari eksozomu içeren, yara üzerinde biyofilm olusumunu engelleyen, antibakteriyel ve antibiyotik özellikli bir bilesimin elde edilmesidir. Yukarida islem detaylari verilen bilesimin üretiminde kullanilan antibiyotik karisimi gentamisin ve amoksisilinden elde edilmektedir. Gentamisin ve amoksisilin karisiminin agrilikça %1-5 oranindaki karisimi, agirlikça %93-98,8 oranindaki izotonik sivi içerisinde çözdürülmekte ve bu çözeltiye agirlikça %0,1-2 oraninda ari eksozomu eklenmektedir. Elde edilen çözelti de 20-40°C'de, 30-45 dakika boyunca ultrasonik titresime tabi içeren, yara üzerinde biyofilm olusumunu engelleyen, antibakteriyel ve antibiyotik özellikli bir bilesimin elde edilmektedir. Bulusa konu bilesimin üretim yöntemi; o ultrasantrifüj yöntemi ile veya bir kit ile ari zehrinden ari eksozomunun ayristirilmasi, o ayri bir yerde kuru ve toz formda olan gentamisin ve amoksisilin içeren antibiyotik karisiminin hazirlanmasi ve agirlikça %1-5 oraninda karisimin agirlikça %93-98,8 oraninda izotonik sivi içerisinde çözünmesi, o elde edilen çözeltiye agirlikça %0,1-2 oraninda ari eksozomunun ilave edilmesi, o ari eksozomu içeren çözeltinin 20-40°C'de, 30-45 dakika boyunca ultrasonik titresime tabi tutulmasi, boyunca çevrilmesi sonucunda ari eksozomu içeren, yara üzerinde biyofilm olusumunu engelleyen, antibakteriyel ve antibiyotik özellikli bir bilesimin elde edilmesi islem adimlarini sirasiyla veya karisik olarak içermektedir. Yukaridaki islem adimlarindan birinde yer alan ari eksozomu içeren çözeltinin ultrasonik titersime tabii tutulmasi islem adiminda ultrasonik titresim cihazinin çalkalayicisi 1000 rpm'de çalismakta ve bu sayede cihazin istenen düzeyde titresim yapmasini saglamaktadir. Bulusun bir uygulamasinda bahsi geçen bilesimin üretim yönteminin ari zehrinden ari eksozomunun ayristirilmasi için ultrasantrifüj yöntemi kullanilmasi halinde; ari zehrinin zehrinden ayristirilmaktadir. Bulusun bir diger uygulamasinda bahsi geçen bilesimin üretim yönteminin ari zehrinden ari eksozomunun ayristirilmasi için ticari bir kit kullanilmasi halinde; söz konusu kitin ari eksozomunun ayristirmasinda yüksek santrifüj devirlerine gerek kalmadan sivi formdaki ari zehrinin yapisini bozarak eksozomlarin çöküsünü saglar. kullanilan kit, ari zehrinin içindeki su moleküllerin katmanlarini bozar ve eksozomun yüzeyini tutarak daha düsük santrifüj hiz ve süreyle (10000 devirde 5 dk) ari eksozomun ayrismasini saglar. Kit kullanilarak elde edilen ari eksozomunun saflik derecesi, ultrasantrifüjdeki yüksek devir santrifüj yapilarak elde edilen ari eksozomunundan düsüktür (baska protein ve kalintilarida tutabilir). Bu nedenle ultrasantrifüj yöntemi kite göre daha çok tercih edilmektedir. Tablo 1. Ari zehri, ari zehri eksozomu ve gentamisin ve amoksisilin antibiyotik karisiminin minimum inhibitör konsantrasyon (MIK) degerleri ve antibakteriyel etkinlikleri Bakteri Suslari Ari Zehri Ari zehri Antibiyotikler MIK ug/ml eksozomu MIK MIK mg/L Klebsiella pneumoniae ATCC 1,95 1,95 16 700603 Metisiline dirençli 250 7,81 16 Staphylococcus aureus (M RSA) ATCC 43300 Pseudomonas aureginosa 3,9 1,95 3 Kan kültürlerinde üreyen 1000 62,5 1 metisilin dirençli Staphylococcus aureus (M RKNS) ATCC 29213 Staphylococcus 1 5,62 1 ,95 1 heamolyticus ATCC Enterobacter aerogenes 1 ,95 1 ,95 veri yok Enterococccus feacalis 250 31,25 2 Streptococcus mitis ATCC 1000 250 2 12261 Tablo 1'de de görüldügü üzere bakterinin üremesini durduran en az antibiyotik miktarini belirlemek için minimum inhibitör konsantrasyon (MIK) ifadesi kullanilir. MIK basklayici dozdur ve MIK degeri ne kadar küçükse o kadar güçlü etki göstermektedir. Tedavi amaci ile antibiyotik uygulandiktan sonra antibiyotigin konsantrasyonu MIK degerine ulasir ve tedavi ederse, mikroorganizmanin bu antibiyotige duyarli oldugu kabul edilir. Bulus konusu ari eksozomu içeren, yara üzerinde biyofilm olusumunu engelleyen, antibakteriyel ve antibiyotik özellikli bir bilesim için ari zehri ve eksozom bilesenlerinin belirlenen patojenlere karsi MIK degerleri mikrodilüsyon yöntemi kullanilarak belirlenmistir. Ari zehri eksozom ve antibiyotigin doz araliklari 1028-32 pg/ml olarak belirlenmistir. TR TR TR TR DESCRIPTION ANTIBIOTIC, BEE EXOSOME-BASED COMPOSITION AGAINST BIOFILM FORMATION AND A METHOD OF PREPARATION OF THIS COMPOSITION Technical Field to Which the Invention Relates The invention relates to a composition with antibacterial and antibiotic properties that can be used as a washing solution in wounds, burns or infection areas or as a dental washing solution in dental operations, preventing biofilm production on the wound, and a method for preparation of this composition. State of the Art Biofilms are bacterial communities that adhere to living or inanimate surfaces and are structured in a protective extra-cellular polymerized substance (EPS) matrix. This gelatinous layer is a polysaccharide-based network structure produced by bacterial cells, called "extracellular polymeric structure", "exopolysaccharide" or "exopolymer (EPS)" in the terminology. The formation of biofilms by microorganisms is a complex process that allows them to survive in adverse environments. Biofilm infections constitute 65% or more of all infections, especially device-related infections, skin and soft tissue infections and chronic infections. Bacteria in biofilms are quite heterogeneous, a small group of slow-growing, known as persisters, and some of them grow rapidly. Due to this heterogeneity and the EPS matrix, bacteria in biofilms are resistant to host defense mechanisms and antibiotic effects. Therefore, biofilms delay the healing process of damaged tissues or wounds [1]. Biofilm formation can occur on living cells or inanimate surfaces and is affected by factors such as the presence of other bacteria, the amount of nutrients, temperature, oxygen, and pH. Biofilms can be formed by a single microorganism species or they can host more than one species. In biofilms consisting of different species, each species forms its own microcolony and these microcolonies are separated from each other by water channels. The ongoing water flow in the water channels provides the diffusion of nutrients and oxygen. 98% of the biofilm composition consists of water and the other substances in its composition are attached to each other by the extracellular matrix structure. EPSs are responsible for the morphological, structural, and physicochemical properties of biofilms. The composition of EPS consists of polysaccharides, proteins, nucleic acids, teichoic acids, phospholipids and other polymeric substances and constitutes 75-90% of biofilms. Water in the biofilm structure binds to EPS formed by bacteria. EPSs help microorganisms to colonize and attach to the surface by forming biofilms. Multiple layers of cells and EPS can form a complex structure that makes it difficult for antimicrobials to penetrate and reach the inner layers. Thus, they can protect the organism against osmotic stress, phage infection, toxic compounds, disinfectants and antibiotics. Microorganisms in biofilms are 10-1000 times more resistant to antimicrobial compounds than their planktonic forms [2]. Antibiotics or antibiotic-specific washing solutions have been developed against different bacterial infections in the world. Antibiotics and surfactants, which are antimicrobial chemical agents, are the conventional method for controlling biofilms, although they pose a risk of harming the environment, and are used in the smallest amounts possible when necessary. Due to the fact that the exopolysaccharide structure in the biofilm structure reduces the penetration of antibiotics and prevents them from reaching the bacteria, and the increase in the number of infections caused by antibiotic-resistant microorganisms, these traditional approaches are insufficient to eliminate biofilms and do not prevent biofilm formation. Current methods that fail to remove biofilms are also not financially advantageous [3]. In the current technique, antibiotics or antibiotic-specific washing solutions against bacterial infections use exosomes, which are vesicles obtained from cells and have antibacterial properties. A vesicle is a relatively small intracellular sac consisting of a closed membrane that stores or transports substances. Exosomes are vesicles with a diameter of 30-150 nm. These structures carry bioactive substances. Exosomes reduce bacterial infection and prevent biofilm formation thanks to their antibiofilm properties. In addition, exosomes contribute to the strengthening of the immune system and play an active role in reducing bacterial populations. In addition, exosomes prevent the formation of antibacterial resistance [4]. Apitoxin, or bee venom as it is also known, is a bitter, colorless, liquid chemical. It is found in the venom sacs of honey bees and is the substance that enters the human body when exposed to a bee sting. The active substance of apitoxin venom is proteins and this substance can be inactivated by ethanol. It is an acidic chemical substance and its pH value is between 4.5 and 5.5. Bee venom is very rich in hyaluronic acid, phospholipase A2 molecule, dopamine, seretamine, hyalin and noradrenaline. Hyaluronic acid, a substance found in the venom and especially important for skin health, connects two healthy cells, delays signs of aging, rejuvenates and beautifies the skin. Phospholipase A2 molecule supports cell formation and eliminates bacteria. Bee venom is a strong anti-inflammatory. It reduces inflammation in the body; therefore, it eliminates factors that pave the way for autoimmune diseases. In addition, bee venom is effective against skin disorders and heals scars in a short time. It relates to polyphenolic compounds derived from a plant that also provide skin relief for psoriasis and eczema conditions and inhibit biofilm formation. Also provided are combinations comprising at least one phenolic phytochemical and at least one antimicrobial agent that inhibit the growth of an established biofilm. Methods for inhibiting this are provided. In one embodiment, a polyphenolic composition is provided. The method of producing the polyphenolic composition includes the process steps of "(a) partitioning an alcohol extract of a plant with a mixture of water and hexane to form a first water portion and a hexane portion; (b) partitioning the first water portion with a mixture of water and ethyl acetate to form a second water portion and an ethyl acetate portion; (0) partitioning the second water portion with a mixture of water and butanol to form a third water portion and a butanol portion; and (d) fractionating the butanol portion by column chromatography with a mobile phase comprising a mixture of methanol and dichloromethane, wherein the polyphenolic composition is separated with the mobile phase having a volume ratio of methanol to dichloromethane of about 40:60." However, since the composition in question does not contain any component that will prevent the formation of biofilm, it does not provide an effective treatment in the healing of open or closed wounds. Due to the negativities and disadvantages of the current technique, such as the fact that antibiotics, solutions or disinfectants do not provide an effective treatment in the treatment of bacterial infections or diabetic wounds, do not prevent biofilm formation, do not contribute to the immune system, are less effective in reducing the population of bacteria forming biofilm and are insufficiently effective in preventing the formation of antibacterial resistance, it has been made necessary to make a development in the relevant field. Brief Description and Purposes of the Invention The invention relates to an antibacterial and antibiotic composition that can be used as a washing solution in wounds, burns or infection areas or as a dental washing solution in dental operations, that can be sprayed easily, that contains bee exosome obtained by isolating exosomes, that prevents biofilm formation on the wound, and a method for preparing this composition. The composition in question contains at least one antibiotic to be used against bacteria, bee exosome and isotonic liquid (serum physiology) that facilitates spraying. The most important purpose of the invention is to provide an antibacterial composition that can be used as a washing solution in wounds, burns or infection areas, that prevents biofilm formation. The composition in question contains at least one antibiotic used against bacteria and bee exosome obtained from bee venom. Bee venom, which is rich in hyaluronic acid, phospholipase A2 molecule, dopamine, cerethamine, histamine and noradrenaline, supports cell formation and eliminates bacteria. Bee venom is a powerful anti-inflammatory. In addition, bee venom is effective against skin disorders and heals scars in a short time. In the invention, an antibacterial composition that prevents biofilm formation is provided by using bee exosome obtained from bee venom. Another purpose of the invention is to provide a composition that can be used as a washing solution in wound, burn or infection areas and contributes to the strengthening of the immune system. The composition in question contains bee exosome obtained from bee venom. Bee venom contributes to the reduction of inflammation in the body; therefore, it eliminates the factors that pave the way for autoimmune diseases. Thus, by using bee exosome obtained from bee venom in the invention, a composition that contributes to the strengthening of the immune system is provided. Another purpose of the invention is to provide a composition that reduces the bacterial population in wounds, burns or infection areas or prevents the reproduction of these bacteria. The composition in question contains at least one antibiotic used against bacteria. The antibiotic in question effectively kills bacteria; even prevents their reproduction. Thus, a composition is provided to reduce the bacterial population in wounds or infection areas and prevent the reproduction of these bacteria. Another purpose of the invention is to provide a composition that prevents bacteria in wounds, burns or infection areas from developing antibacterial resistance. With the synergistic effect of the antibiotic in the composition in question and the bee exosome obtained from bee venom, the formation of antibacterial resistance in bacteria in wounds, burns or infection areas is prevented. Another purpose of the invention is; is to provide an easily sprayable composition that can be used as a wash solution in wounds, burns or infection areas. The composition in question contains isotonic liquid. This isotonic liquid allows the said composition to be easily sprayed. The invention provides an easily sprayable composition that can be used as a wash solution in wounds, burns or infection areas, prevents biofilm formation, contributes to the strengthening of the immune system, reduces the bacterial population in wounds, burns or infection areas or prevents the reproduction of these bacteria, prevents bacteria in wounds, burns or infection areas from developing antibacterial resistance. Explanation of Figures Figure 1. Scanning electron microscope (SEM) image of bee exosome obtained from bee venom. Detailed Description of the Invention The invention relates to a composition containing bee exosome, which can be used as a washing solution in wound, burn or infection areas or as a dental washing solution in dental operations, which can be sprayed easily, prevents biofilm formation on the wound, has antibacterial and antibiotic properties, and a method for preparing this composition. The bee exosome mentioned herein is obtained from bee venom in liquid form. The composition subject to the invention includes at least one antibiotic or antibiotic mixture to be used against bacteria, bee exosome obtained from bee venom and isotonic liquid (serum physiology) that facilitates spraying. The antibiotic mentioned may be gentamicin or amoxicillin, but it is preferred as a mixture of gentamicin and amoxicillin, which is a mixture having bacteriocides or bacteriostatic effects. The antibiotic mixture with bacteriocides or bacteriostatic effects is used in the subject composition at a rate of 1-5% by weight. The antibacterial spectrum of the composition is expanded by using the said antibiotic mixture in the subject composition. The composition contains 0.1-2% by weight of bee exosome. Bee exosome is a component of bee venom in liquid form. Bee exosome is separated from bee venom by centrifugation method or a kit. The minimum inhibitory concentration (MIC) value of bee exosome obtained from bee venom is 400 ngr. The composition in question, which contains bee exosome, prevents biofilm formation on the wound, and has antibacterial and antibiotic properties, contains 93-98.8% isotonic liquid by weight. Isotonic liquid prevents the bee exosome in the composition from breaking down and allows the composition to be easily sprayed. In addition, isotonic water balances the pressure of the bee exosome in the composition; thus, it prevents the exosome from breaking down. Isotonic liquid is a simple salt solution. 1 ml isotonic liquid contains 0.9 milligrams of sodium chloride (NaCI). The pH of the isotonic liquid should be 7.2; and the temperature should be 20-40°C. Isotonic liquid is used in the composition in question at a rate of 93-98.8%, thus fixing the internal pressure of the exosome, which is a vesicle and internal pressure, and preventing the exosome from bursting or shrinking. Isotonic liquid is used to store exosomes. The following processes are applied in order or in a mixed order in the production method of the composition of the invention. o separating the bee venom-free exosome by ultracentrifugation method or with a kit and obtaining the bee exosome, o dissolving at least one and preferably at least two antibiotics in isotonic liquid in a separate place and obtaining an antibiotic solution, o adding the bee exosome separated from the bee venom to the antibiotic solution dissolved in isotonic liquid and obtaining an antibiotic solution containing the bee exosome, o subjecting the solution containing the bee exosome and antibiotic to ultrasonic vibration and thus obtaining an antibacterial and antibiotic composition containing the bee exosome, preventing biofilm formation on the wound. The antibiotic mixture used in the production of the composition whose process details are given above is obtained from gentamicin and amoxicillin. The mixture of gentamicin and amoxicillin at a rate of 1-5% by weight is dissolved in an isotonic liquid at a rate of 93-98.8% by weight and 0.1-2% bee exosome is added to this solution. The resulting solution is subjected to ultrasonic vibration for 30-45 minutes at 20-40°C, which prevents biofilm formation on the wound and provides an antibacterial and antibiotic composition. The production method of the composition in question is as follows; o Separating bee venom-free exosomes by ultracentrifugation or with a kit, o Preparing a dry and powdered antibiotic mixture containing gentamicin and amoxicillin in a separate place and dissolving 1-5% by weight of the mixture in 93-98.8% by weight of isotonic liquid, o Adding 0.1-2% by weight of bee exosomes to the obtained solution, o Ultrasonic vibration of the solution containing bee exosomes at 20-40°C for 30-45 minutes, rotating throughout to obtain a composition containing bee exosomes, preventing biofilm formation on the wound, and with antibacterial and antibiotic properties. The process involves the following steps, either sequentially or in a mix. In the process step of subjecting the solution containing bee exosomes in one of the above process steps to ultrasonic vibration, the shaker of the ultrasonic vibration device operates at 1000 rpm, thus ensuring that the device vibrates at the desired level. In one application of the invention, if the ultracentrifugation method is used for the separation of the exosome free from bee venom of the production method of the said composition; bee venom is separated from its venom. In another application of the invention, if a commercial kit is used for the separation of the exosome free from bee venom of the production method of the said composition; the kit in question ensures the collapse of the exosomes by disrupting the structure of the bee venom in liquid form without the need for high centrifugation speeds in the separation of the bee exosome. The kit used disrupts the layers of water molecules in the bee venom and ensures the separation of the bee exosome at a lower centrifugation speed and time (5 minutes at 10000 rpm) by holding the surface of the exosome. The purity level of bee exosomes obtained using the kit is lower than the bee exosomes obtained by high-speed centrifugation in an ultracentrifuge (it may retain other proteins and residues). For this reason, the ultracentrifugation method is preferred over the kit. Table 1. Minimum inhibitory concentration (MIC) values and antibacterial activities of bee venom, bee venom exosome and gentamicin and amoxicillin antibiotic mixture Bacterial Strains Bee Venom Bee venom Antibiotics MIC ug/ml exosome MIC MIC mg/L Klebsiella pneumoniae ATCC 1.95 1.95 16 700603 Methicillin-resistant 250 7.81 16 Staphylococcus aureus (M RSA) ATCC 43300 Pseudomonas aureginosa 3.9 1.95 3 Blood culture growth 1000 62.5 1 methicillin-resistant Staphylococcus aureus (M RKNS) ATCC 29213 Staphylococcus 1 5.62 1 .95 1 heamolyticus ATCC Enterobacter aerogenes 1 .95 1 .95 no data Enterococccus feacalis 250 31.25 2 Streptococcus mitis ATCC 1000 250 2 12261 As seen in Table 1, the minimum inhibitory concentration (MIC) is used to determine the minimum amount of antibiotic that stops the growth of bacteria. MIC is the suppressive dose and the lower the MIC value, the stronger the effect. If the concentration of the antibiotic reaches the MIC value and treats after the application of antibiotics for treatment purposes, the microorganism is considered to be sensitive to this antibiotic. For an antibacterial and antibiotic composition containing bee exosome, which is the subject of the invention and prevents biofilm formation on the wound, the MIC values of bee venom and exosome components against the determined pathogens were determined using the microdilution method. The dose ranges of bee venom exosome and antibiotic were determined as 1028-32 pg/ml.TR TR TR TR