TARIFNAME STENOTROPHOMONAS SP. STRAIN CG2 iLE MIKROBIYAL L-GLUTAMIK ASIT ELDE EDILMESI Teknik Alan Bu bulus, çesitli gida ürünlerinde kullanilan ve besin takviyesi olarak da ilaç ve kisisel bakim endüstrilerinde kullanilabilen Stenotrophomonas sp. strain CG2 (OM341624) ile optimum süre ve kosullarda Mikrobiyal L-Glutamik Asit Uretimi ile ilgilidir. Bulusun Alt Yapisi Beslenme, yasam içinde bir insanin hayatta kalmasi için en gerekli olan ihtiyaçtir. Besinlerde yer alan ve vücut için 'önemli olan amino asit için proteinli yiyecekler tüketilmesi gerekmektedir ve bunun yani sira kontrollü bir sekilde amino asit almak için de sporcu besinleri ve gida takviyeleri gibi özel destekler alinmaktadir. L-glutamik asit serbest aminoasit olarak veya proteinlerin yapisinda bir parça olarak besinlerde bulunur. Gida katki maddelerinden biri de L-Glutamik Asit (Monosodyum Glutamat) 'tir. Formül ile gösterimi C5H3NNaO4 'dir. Proteinin temel yapi tasini olusturan dogal bir aminoasit olan glutamik asidin sodyum tuzudur. L-Glutamik Asit beyaz kristal kati formundadir. Çözünürlük olarak suda kolayca çözünebilme özelligine sahiptir, kokusuz bir kimyasaldir. Etanol ve Eteride hemen hemen çözünmemektedir. L-Glutamik Asit kaynama noktasi 225 °C' dir, Monosodyum Glutamat Erime Noktasi 450 °F' dir. Ayrismasi durumunda sodyum oksit ve azot dumanlari yaymaktadir. L-Glutamik Asit % 5' lik çözeltisi 6,7 ile 7,2 arasindadir. Dünyada en çok bilinen ve kullanilan lezzet artiricisi olan Monosodyum Glutamat (MSG), L-glutamik asitin bir sodyum tuzudur. Et, tavuk, peynir ve bazi sebzeler gibi proteince zengin gidalarda bulunan glutamat, insan vücudunda dogal olarak üretilmekte, beyin gibi çesitli organlarla kaslarda önemli roller oynamaktadir. Mevcut lezzeti güçlendiren L-Glutamik Asit, geçmisten bugüne gelen ve endüstride uygulanan bir katki maddesidir. L-Glutamik Asit, bu özelligi sayesinde, birçok gidaya ilave edilmekte ve gidanin mevcut lezzetini artirmaktadir. Gida sanayinde L-Glutamik Asit'in çok farkli kullanim alanlari mevcuttur. Sivi olarak üretilen hazir gidalarda kivam arttirici olarak kullanilmaktadir. Unlu mamüllerde yine katki maddesi olarak kullanilmakta, hayvansal yemlerde kemik büyümesi, yumurta kabugu sertligi, mineral emilimi saglamasi, vücuttaki yagi azaltmasi gibi etkilerinden dolayi kullanimi bulunmaktadir. Yine L-Glutamik Asit sosis, hamburger, hazir çorbalar, kraker, etsuyu tabletler, köfte harçlari, salata soslari gibi hazir gidalarda tat malzemesi olarak kullanilmaktadir. Bunlarin yaninda medikal ve saglik alaninda çesitli islemler ve çalismalarda glutamik asit uygulanmaktadir. Osteoporos kosullarinda hastaya yardimci olmasi, kalsiyum emilimini arttirmasi, kanser ilaçlari tedavisinde biyolojik olarak uyumlu bir tasiyici olmasi gibi özelliklerinden dolayi medikal uygulamalarda kullanim imkani bulunmaktadir. Kozmetik alaninda, cilt kirisikligi indirgeyici özelligi ve cilt bakim kalitesini arttirdigi için sampuan ve kisisel bakim ve özel bakim kremlerinde yer bulmaktadir. Glutamik asitten sentez edilen pirolidon karboksilik asit (PCA) dogal bir nemlendirici olarak kozmetik sanayinde kullanilmaktadir. Su terbiye islemlerinde, agir metallerin temizlenmesi ve radyonüklid gruplarin çikarilmasi olarak kullanilabilmektedir. Gübre sanayinde, inhibitör görevi ile birlikte çok iyi bir anti patojendir. Yüksek su alma kapasitesi ile de ekstra uygunluk göstermekte ve özellikler sivi ve özel gübre üretimlerinde kullanilmaktadir. U83281247 numarali basvuruda Monosodyum glutamat ve L-glutamik asit içeren bir fermantasyon ürününün üretilmesi için bir islem olup, bir asimile edilebilir karbonhidrat kaynagini ve asimile edilebilir bir azot kaynagini içeren asimile edilebilir bir karbonhidrat kaynagini ve asimile edilebilir bir nitrojen kaynagini içeren bir mikroorganizma yetistirilmesini içermektedir. Amonyak, amonyum hidroksit ve üre, ortamin pH iini yaklasik 6 ile 9 araliginda tutarken, pH 'i kontrol eden, amonyak, amonyum hidroksit ve üreden olusan gruptan seçilen azot saglayan materyal ile L- glutamik asit ve L-glutamik asidin söz konusu miktarinin önemli bir kismi ile ortama sodyum iyonlari ilave edilerek monosodyum glutamat içeren bir fermentasyon ürünü üretmek adina fermentasyona devam edilmektedir. US2829161A numarali basvuruda kalsiyum içeren bir seker pancari atik liköründen monosodyum glutamat üretmek için sürekli bir islemlerle glutamik asit liköründen baska tüm islem Iikörlerinin geri dönüsümünü içermektedir. Literatürde basvurusu yapilmis olan basvurular göz önüne alindiginda; mikroorganizmalar ile optimum besiyeri, optimum ortam kosulu ve optimum sürelerde Glutamik Asit üretimi için yeni arastirmalara, gida sektörünün gelisimi açisindan gerek duyulmaktadir. Bulusun Çözümünü Amaçladigi Problemler ve Açiklamasi Yapilan arastirma-gelistirme faaliyetleri sektörün rekabetine paralel olarak, bulunan optimum degerler korunarak gelistirmeye açik süreçler olmalidir. Bununla birlikte islam cografyasindaki helal standartlari konusundaki farkindaligin artmasini karsilayacak düzeyde arastirma-gelistirme faaliyetleri olmalidir. Teknigin bilinen durumu ve yukarida da anlatilan basvurular da göz önüne alindiginda; mikroorganizmalar ile optimum besiyeri, optimum ortam kosulu ve optimum sürelerde L-Glutamik Asit üretimi için yeni arastirmalara, gida sektörünün gelisimi açisindan gerekli kilinmistir. Yapilan arastirma-gelistirme faaliyetlerinde bulunan optimum degerler korunarak gelistirmeye açik süreçler oldugundan ve bununla birlikte helal standartlari konusundaki farkindaligin artmasini karsilayacak düzeyde faaliyetler oldugundan yeni L-Glutamik asit üretimine ihtiyaç vardir. Bulus; L-Glutamik Asit'e olan ihtiyacin gün geçtikçe artmasi dolayisiyla topraktan izole edilen Stenotrophomonas sp. strain CG2 (OM341624) mikroorganizmasi ile optimum besiyeri içerigi ve optimum fermentasyon kosullarinda L-Glutamik Asit üretimi ile ilgilidir. Bu bulus, elde edilirken öncelikle Türkiyede farkli toprak örneklerinden izole edilen kültürler arasindan en fazla sistein üretimi yapan tercih edilir. Bulus konusu, L-Glutamik Asit üretiminde kullanilacak olan Stenotrophomonas sp. strain CG2 (OM341624) mikroorganizmasinin izole edilmesi sonrasinda kontrollü deneylerle uygun besiyeri ortaminin bulunmasi ve yine kontrollü deneylerle uygun ortam sartlarinin ve uygun sürenin bulunmasidir. Bulusun yapisal ve karakteristik özellikleri ve tüm avantajlari asagida verilen yazilan ayrintili açiklama sayesinde daha net olarak anlasilacaktir ve bu nedenle bu degerlendirmenin de ayrintili açiklama göz önünde bulundurularak yapilmasi gerekmektedir. Bulusun Detayli Açiklanmasi Bulusa konu olan L-Glutamik Asit üretiminde kullanilacak mikroorganizmalarin izole edilmesi ve yapilan kontrollü deneyler sonrasi kullanilacak Stenotrophomonas sp. strain CG2 'in en yüksek miktarda üretim yaptigi hazirlanmis optimum besi ortami bilesenleri ve agirlikça oranlari asagidaki gibidir: 0 4-6 g/L konsantrasyonunda Glukoz (D+), 0 4-6 g/L konsantrasyonunda Fruktoz (D+), - 1-5 g/L konsantrasyonunda Metiyonin, . 1-5 g/L konsantrasyonunda Serin, o 0,5-5 g/L konsantrasyonunda Hayvansal pepton, o 0,5-5 g/L konsantrasyonunda Soya Peptonui o 0,5-2 g/L konsantrasyonunda Maya Ekstrakti, 0 3-6 g/L konsantrasyonunda Sodyum Klorür (NaCl), . 0,1-1 g/L konsantrasyonunda Monopotasyumfostat (KH2PO4), ve o 0,1-2 g/L konsantrasyonunda Demirsülfatheptahidrat (FeSO4.7H20). Bulus, Stenotrophomonas sp. strain CG2 ile helal standartlara uygun mikrobiyal L- sistein elde edilmesi yöntemine ait islem basamaklari asagidaki gibidir: o öncelikle yapilan kültür seçimi sonrasi kültür depolamasi ile es zamanli olarak besiyeri hazirligi yapilmasi ve daha sonra inokulasyon öncesi sterilizasyon islemi yapilmasi, . sterilizasyon islemi sonrasinda sirasi ile kontrollü deneyler ile elde edilen besiyeri içeriklerinde ve proses kosullarinda fermentasyon, fiziksel yöntemler ile hücre ayirma (4100 rpm hizda 7 dakika boyunca santrifüj edildikten sonra 45 um gözenek boyutuna sahip filtreden geçirilmesi), iyon degistirici reçineler ile safsizlik uzaklastirma, validasyon ve karakterizasyon yapilmasi, 0 proses karakterizasyonu tamamlanan mikroorganizmalardan L-Glutamik Asidi saf olarak elde etmek için homojenizasyon, santrifüj ve filtreme islemleri yapilarak iyon degistirici reçineler yardimi ile saflastirma islemine tabi tutulmasi, o saflastirma islemi tamamlanan son ürünün L-sistein 'in uzun süre stabilitesini koruyarak saklanabilmesi için pH'i izoelektirik noktasina çekilerek kristal forma dönüstürülmüs ve çökelmesi saglanmis, ardindan da firin içerisinde ürünlerin içinde bulundugu solvent uçurularak toz form elde edilmesi, o toz forma dönüstürme islemi sonrasinda elde edilen ürün FTIR, Raman Spektroskopisi ve LC-MS/MS cihazlari ile moleküler karakterizasyon islemi yapilmasidir. Bulus içeriginde; L-Glutamik Asit üretiminde toprak numunesinden izole edilen Stenotrophomonas sp. strain CG2 (OM341624) mikroorganizmasi, besiyerinde kullanilan kimyasal konsantrasyon degerleri ile ortam sartlari ve süresi onemli bir özellik olmaktadir Elde edilen sonuçlara dayanarak bulus; belirlenen optimum besiyeri içerigi kullanilarak ve degisen inkübasyon parametreleri uygulanarak yapilan kontrollü fermentasyon denemeleri sonucunda Stenotrophomonas sp. strain CGZ (OM341624)'in en yüksek miktarda L-Glutamik Asit 'üretimi için en uygun ortam parametrelerinin; pH degeri 7; inkübasyon süresi 84 saat; çalkalama hizi 200 rpm ve °C sicaklik degerlerini içeren ortam sartlarina sahip olmaktadir. Mikroorganizma çesitliliginin yüksek oldugu topraktan numuneler alinarak hazir besiyerlerine, metoduna uygun sekilde ekimleri yapilmaktadir. Ardindan inkübatörde bu mikroorganizmalar inkübasyona birakilmaktadir. Gelisen mikroorganizma kolonileri tek tek alinarak farkli bos petrilere ekilmekte ve saf bakteri kolonileri elde edilene kadar bu islem tekrarlanmaktadir. L-sistein üretimi için mikroorganizmalarin gelismesi adina en uygun besiyeri bilesimi hazirlanarak +4 °C*de muhafaza edilmektedir. Besi yerleri Nutrient Agar, Triptic Soy Agar, Plate count Agar ve Violet Red Bile Glucose Agar'dir. Besiyerler erlen içerisinde destile su ile karistirilmaktadir. Ardindan isiticili manyetik karistiriciyla homojenize edilerek kivam tutmasi saglanmaktadir. Sonrasinda otoklavda besiyeri karisimlari sterilize edilmektedir. Sonrasinda petri kaplarina doldurularak dezenfekte buzdolabinin +4 00 sicakliginda muhafaza edilmektedir. izole edilen mikroorganizmalarin, gida katki maddeleri üretim potansiyellerinin belirlenmesi için, belirlenen çevre kosullarinda ve sürelerde, orbital çalkalamali inkübatörlerde ve çalkalamali su banyosunda 37 °C ve 48 saat inkübasyona birakilmaktadir. inkübe edilen mikroorganizmalar +4 0C 'de, üremeyi durdurmak amaciyla sonraki asamalarda yapilacak analizlere kadar saklanmaktadir. Bulusun diger asamada; genotipik tanimlanmasi yapilan mikroorganizmalarin proses karakterizasyonuna baslanmaktadir. Bu asamada mikroorganizmalar besiyerlere orbital çalkalamali inkübatör ve çalkalamali su banyosunda kültüre edilerek hemen sonrasinda optimum gida katki madde üretimi spektrofotometre ile belirlenmektedir. Daha sonra yukarida belirtilen kimyasallarin farkli kombinasyonlari ile kontrollü deneyler yapilarak ilgili mikroorganizmanin maksimum oldugu karisim belirlenmektedir. Inkübasyon sonrasinda mikroorganizma kültürlerinin spektrofotometrik yöntemlerle ürettigi L-Glutamik Asit konsantrasyonu asidik ninhidrin yöntemi kullanilarak belirlenmektedir. Bu amaçla steril mikrosantrifuj tüpü içerisine inkübe edilmis süpernetantlardan 200 uL numune konulmustur. Daha sonra mikrosantrifuj tüpü 550 |JL ninhidrin çözeltisi eklenip 60 DC' de su banyosunda 1 saat bekletilmistir. Su banyosundan alinan numuneler oda sicakligina geldikten sonra 1600 pL glasial asetik asit ilave edilmistir. Asidik ninhidrin yöntemiyle ön hazirliklari tamamlanan numunelerin spektrofotometre ile 470 nm dalga boyunda UV absorbans ölçümü yapilmistir. Spektrofotometrik analiz sonunda en yüksek oranda gida katki maddesi L-Glutamik Asit üretim potansiyeli olan mikroorganizmanin Genotipik karakterizasyonu yapilmaktadir. Bu amaçla mikroorganizmanin 168 rRNA'sinin SANGER metodu ile dizileme yöntemi kullanilmaktadir. Sekans analizi sonucu en yüksek üretim gosteren mikroorganizmanin Bacillus türü bakteri oldugu tespit edilmis, elde edilen susa Stenotrophomonas sp. strain CG2 ismi verilmis ve bu susun 168 rRNA dizilimi OM341624 kodu ile NCBI gen bankasina kaydedilmistir. Bulusun bir diger asamasinda; optimum besiyeri içerikleri belirlenen mikroorganizmalarin, gida katki maddesi üretiminin maksimum oldugu pH, sicaklik, hiz ve inkübasyon süresi degerleri belirlenmektedir. Literatüre göre belirlenen çevre kosullari ve sürelerde, mikroorganizmalar hazirlanan besi ortamlarinda inkübe edilerek, inkübasyon sonrasinda Spektrofotometre ile asidik ninhidrin yöntemi kullanilarak L-Glutamik Asit üretimi oranlari tespit edilmektedir. Bulusun Sanayiye Uygulamasi Yukarida bahsedilen besiyeri, ortam sartlari ve sürelerde mikroorganizmalar ile tamamen helal standartlara uygun L-Glutamik Asit üretimi yapilmis olmaktadir. Islam cografyasinda helal standardi farkindaliginin artmasiyla birlikte islamik sartlara uygun gida katki maddelerinin üretimi arastirmalari da hiz kazanmistir. Bulus gida katki maddelerinden L-Glutamik Asitin helal standartlara uygun kosullarda üretiminin yapilarak gida sektöründe kullanimini saglanmaktadir. Teknikte uzman bir kisinin bulusta ortaya konan yeniligi, benzer yapilanmalari kullanarak da ortaya koyabilecegi ve/veya bu yapilanmayi ilgili teknikte kullanilan benzer amaçli diger alanlara da uygulayabileoegi açiktir. Dolayisiyla böyle yapilanmalarin yenilik ve özellikle teknigin bilinen durumunun asilmasi kriterinden yoksun olacagi da asikârdir. TR TR TR TR DESCRIPTION STENOTROPHOMONAS SP. OBTAINING MICROBIAL L-GLUTAMIC ACID WITH STRAIN CG2 Technical Area This invention is based on Stenotrophomonas sp., which is used in various food products and can also be used in the pharmaceutical and personal care industries as a nutritional supplement. It is related to Microbial L-Glutamic Acid Production in optimum time and conditions with strain CG2 (OM341624). Background of the Invention Nutrition is the most necessary need for a person's survival in life. Protein foods must be consumed to obtain amino acids, which are found in foods and are important for the body, and special supports such as sports foods and food supplements are taken to obtain amino acids in a controlled manner. L-glutamic acid is found in foods as a free amino acid or as a part of the structure of proteins. One of the food additives is L-Glutamic Acid (Monosodium Glutamate). Its formula is C5H3NNaO4. It is the sodium salt of glutamic acid, a natural amino acid that forms the basic building block of protein. L-Glutamic Acid is in the form of white crystalline solid. In terms of solubility, it is easily soluble in water and is an odorless chemical. It is almost insoluble in ethanol and ether. L-Glutamic Acid boiling point is 225 °C, Monosodium Glutamate Melting Point is 450 °F. When it decomposes, it emits sodium oxide and nitrogen fumes. L-Glutamic Acid 5% solution is between 6.7 and 7.2. Monosodium Glutamate (MSG), the most known and used flavor enhancer in the world, is a sodium salt of L-glutamic acid. Glutamate, found in protein-rich foods such as meat, chicken, cheese and some vegetables, is produced naturally in the human body and plays important roles in various organs such as the brain and muscles. L-Glutamic Acid, which strengthens the existing flavor, is an additive that has been used in the industry from the past to the present. Thanks to this feature, L-Glutamic Acid is added to many foods and increases the existing flavor of the food. L-Glutamic Acid has many different uses in the food industry. It is used as a thickener in ready-made foods produced in liquid form. It is also used as an additive in bakery products, and it is used in animal feed due to its effects such as bone growth, egg shell hardness, mineral absorption, and reducing body fat. L-Glutamic Acid is also used as a flavoring ingredient in ready-made foods such as sausages, hamburgers, instant soups, crackers, broth tablets, meatball mixtures, and salad dressings. In addition, glutamic acid is applied in various processes and studies in the medical and health fields. It has the opportunity to be used in medical applications due to its properties such as helping patients with osteoporosis conditions, increasing calcium absorption, and being a biologically compatible carrier in the treatment of cancer drugs. In the field of cosmetics, it finds a place in shampoos, personal care and special care creams as it reduces skin wrinkles and improves skin care quality. Pyrrolidone carboxylic acid (PCA), synthesized from glutamic acid, is used in the cosmetic industry as a natural moisturizer. It can be used in water treatment processes to clean heavy metals and remove radionuclide groups. In the fertilizer industry, it is a very good anti-pathogenic agent with its inhibitory function. It is extra suitable with its high water absorption capacity and is used especially in liquid and special fertilizer production. Application No. U83281247 A process for producing a fermentation product containing Monosodium glutamate and L-glutamic acid, comprising growing a microorganism containing an assimilable carbohydrate source and an assimilable nitrogen source. While ammonia, ammonium hydroxide and urea keep the pH of the environment between approximately 6 and 9, the nitrogen-providing material selected from the group consisting of ammonia, ammonium hydroxide and urea, which controls the pH, and the amount of L-glutamic acid and L-glutamic acid in question have a significant level. Sodium ions are added to the medium and fermentation continues to produce a fermentation product containing monosodium glutamate. Application number US2829161A involves the recycling of all process liquors other than glutamic acid liquor by a continuous process to produce monosodium glutamate from a calcium-containing sugar beet waste liquor. Considering the applications made in the literature; New research on the production of Glutamic Acid in optimum media, optimum environmental conditions and optimum times with microorganisms is needed for the development of the food industry. Problems Aimed to Solve by the Invention and Their Explanation: The research and development activities carried out should be processes open to development by preserving the optimum values found, in parallel with the competition of the sector. In addition, there should be research and development activities at a level that will meet the increasing awareness of halal standards in the Islamic geography. Considering the known state of the technique and the applications explained above; New research on the production of L-Glutamic Acid in optimum media, optimum environmental conditions and optimum times with microorganisms is required for the development of the food industry. There is a need for new L-Glutamic acid production, as there are processes open to improvement by preserving the optimum values found in the research and development activities, and there are activities at a level that will meet the increase in awareness of halal standards. Meet; As the need for L-Glutamic Acid increases day by day, Stenotrophomonas sp. isolated from soil. It is related to the production of L-Glutamic Acid by strain CG2 (OM341624) microorganism under optimum medium content and optimum fermentation conditions. While this invention was obtained, first of all, among the cultures isolated from different soil samples in Turkey, the one producing the most cysteine was preferred. The subject of the invention is Stenotrophomonas sp. which will be used in the production of L-Glutamic Acid. strain CG2 (OM341624) microorganism is isolated and then the appropriate medium is found through controlled experiments and the appropriate environmental conditions and appropriate time are found through controlled experiments. The structural and characteristic features and all the advantages of the invention will be more clearly understood thanks to the detailed explanation given below, and therefore this evaluation should be made taking the detailed explanation into consideration. Detailed Explanation of the Invention Isolation of the microorganisms to be used in the production of L-Glutamic Acid, which is the subject of the invention, and Stenotrophomonas sp. to be used after controlled experiments. The components of the optimum nutrient medium prepared in which strain CG2 produces the highest amount and their weight ratios are as follows: Glucose (D+) at a concentration of 0 4-6 g/L, Fructose (D+) at a concentration of 0 4-6 g/L, - 1-5 Methionine at g/L concentration, . Serine at a concentration of 1-5 g/L, o Animal peptone at a concentration of 0.5-5 g/L, o Soy Peptone at a concentration of 0.5-5 g/L o Yeast Extract at a concentration of 0.5-2 g/L, 0 3- Sodium Chloride (NaCl) at a concentration of 6 g/L. Monopotassiumphostate (KH2PO4) at a concentration of 0.1-1 g/L, and Ferrous sulfateeptahydrate (FeSO4.7H20) at a concentration of 0.1-2 g/L. Bulus, Stenotrophomonas sp. The process steps of the method of obtaining microbial L-cysteine in accordance with halal standards with strain CG2 are as follows: o firstly, after culture selection, medium preparation simultaneously with culture storage, and then sterilization before inoculation. After the sterilization process, fermentation in the medium contents and process conditions obtained through controlled experiments, cell separation by physical methods (centrifuging at 4100 rpm for 7 minutes and then filtering with a pore size of 45 um), impurity removal with ion exchange resins, validation and characterization, homogenization, centrifugation and filtering processes are carried out to obtain pure L-Glutamic Acid from microorganisms whose 0 process characterization has been completed, and subjected to purification process with the help of ion exchange resins, and the final product, which has completed the purification process, can be stored by preserving the stability of L-cysteine for a long time. For this purpose, the pH was converted to crystal form by lowering it to the isoelectric point and precipitation was ensured, and then the solvent containing the products was evaporated in the oven to obtain powder form. After the process of converting to powder form, the product obtained was analyzed by FTIR, Raman Spectroscopy and LC-MS/MS devices. is the characterization process. In the content of the invention; Stenotrophomonas sp. isolated from soil sample in L-Glutamic Acid production. strain CG2 (OM341624) microorganism, chemical concentration values used in the medium, environmental conditions and duration are important features. Based on the results obtained, the finding is; As a result of controlled fermentation experiments using the optimum medium content determined and applying varying incubation parameters, Stenotrophomonas sp. The most suitable environmental parameters for the production of the highest amount of L-Glutamic Acid of strain CGZ (OM341624); pH value 7; incubation time 84 hours; It has environmental conditions including shaking speed 200 rpm and °C temperature. Samples are taken from the soil where microorganism diversity is high and they are planted in ready-made media in accordance with the method. Then, these microorganisms are incubated in the incubator. Developing microorganism colonies are taken one by one and planted in different empty petri dishes, and this process is repeated until pure bacterial colonies are obtained. For L-cysteine production, the most suitable medium composition for the growth of microorganisms is prepared and stored at +4 °C. The media are Nutrient Agar, Tryptic Soy Agar, Plate count Agar and Violet Red Bile Glucose Agar. The media are mixed with distilled water in a conical flask. Then, it is homogenized with a magnetic mixer with a heater to ensure consistency. Afterwards, the medium mixtures are sterilized in the autoclave. Afterwards, it is filled into petri dishes and stored at +4 00 temperature in a disinfected refrigerator. In order to determine the food additive production potential of the isolated microorganisms, they are incubated at 37 °C and 48 hours in orbital shaking incubators and shaking water baths under specified environmental conditions and times. The incubated microorganisms are stored at +4 0C in order to stop reproduction until the analyzes to be performed in the next stages. At the next stage of the invention; Process characterization of microorganisms, whose genotypic identification has been made, begins. At this stage, microorganisms are cultured on the media in an orbital shaking incubator and a shaking water bath, and then the optimum food additive production is determined by a spectrophotometer. Then, controlled experiments are carried out with different combinations of the chemicals mentioned above to determine the mixture in which the relevant microorganism is maximum. After incubation, the L-Glutamic Acid concentration produced by microorganism cultures using spectrophotometric methods is determined using the acidic ninhydrin method. For this purpose, 200 uL sample from the incubated supernatants was placed into a sterile microcentrifuge tube. Then, 550 µL of ninhydrin solution was added to the microcentrifuge tube and kept in a water bath at 60 DC for 1 hour. After the samples taken from the water bath came to room temperature, 1600 pL of glacial acetic acid was added. UV absorbance measurement of the samples, whose preliminary preparations were completed with the acidic ninhydrin method, was made with a spectrophotometer at a wavelength of 470 nm. At the end of the spectrophotometric analysis, genotypic characterization of the microorganism with the highest potential for producing the food additive L-Glutamic Acid is performed. For this purpose, sequencing of 168 rRNAs of the microorganism with the SANGER method is used. As a result of sequence analysis, it was determined that the microorganism with the highest production was Bacillus type bacteria, and the resulting strain was Stenotrophomonas sp. It was named strain CG2 and 168 rRNA sequences of this strain were recorded in the NCBI gene bank with the code OM341624. At another stage of the invention; The pH, temperature, speed and incubation time values at which the food additive production is maximum for the microorganisms whose optimum medium contents are determined are determined. Microorganisms are incubated in prepared nutrient media under environmental conditions and times determined according to the literature, and after incubation, L-Glutamic Acid production rates are determined using the acidic ninhydrin method with Spectrophotometry. Application of the Invention to Industry: L-Glutamic Acid is produced completely in accordance with halal standards with microorganisms in the above-mentioned medium, environmental conditions and times. With the increasing awareness of halal standards in the Islamic geography, research on the production of food additives suitable for Islamic conditions has also gained momentum. The invention enables the production of L-Glutamic Acid, one of the food additives, under halal standards and its use in the food industry. It is clear that a person skilled in the art can demonstrate the innovation set forth in the invention by using similar structures and/or apply this structure to other areas with similar purposes used in the relevant technique. Therefore, it is obvious that such structures will lack the criteria of innovation and especially surpassing the known state of the technology. TR TR TR TR