TR201611332A2 - Bi̇r mi̇krokapsül ve üreti̇m yöntemi̇ - Google Patents

Bi̇r mi̇krokapsül ve üreti̇m yöntemi̇ Download PDF

Info

Publication number
TR201611332A2
TR201611332A2 TR2016/11332A TR201611332A TR201611332A2 TR 201611332 A2 TR201611332 A2 TR 201611332A2 TR 2016/11332 A TR2016/11332 A TR 2016/11332A TR 201611332 A TR201611332 A TR 201611332A TR 201611332 A2 TR201611332 A2 TR 201611332A2
Authority
TR
Turkey
Prior art keywords
microcapsule
factor
chitosan
polymer
texturing
Prior art date
Application number
TR2016/11332A
Other languages
English (en)
Inventor
Doğan Aşik Mehmet
Bozkurt Murat
Original Assignee
Mehmet Dogan Asik
Bozkurt Murat
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Mehmet Dogan Asik, Bozkurt Murat filed Critical Mehmet Dogan Asik
Priority to TR2016/11332A priority Critical patent/TR201611332A2/tr
Priority to EP17851911.2A priority patent/EP3485000A2/en
Priority to PCT/TR2017/050382 priority patent/WO2018070959A2/en
Priority to US16/323,993 priority patent/US11318104B2/en
Publication of TR201611332A2 publication Critical patent/TR201611332A2/tr
Priority to US17/731,941 priority patent/US20220323923A1/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5036—Polysaccharides, e.g. gums, alginate; Cyclodextrin
    • A61K9/5042—Cellulose; Cellulose derivatives, e.g. phthalate or acetate succinate esters of hydroxypropyl methylcellulose
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6843—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a material from animals or humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5089—Processes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J13/00—Colloid chemistry, e.g. the production of colloidal materials or their solutions, not otherwise provided for; Making microcapsules or microballoons
    • B01J13/02—Making microcapsules or microballoons
    • B01J13/06—Making microcapsules or microballoons by phase separation
    • B01J13/14—Polymerisation; cross-linking
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J13/00—Colloid chemistry, e.g. the production of colloidal materials or their solutions, not otherwise provided for; Making microcapsules or microballoons
    • B01J13/02—Making microcapsules or microballoons
    • B01J13/20—After-treatment of capsule walls, e.g. hardening
    • B01J13/22—Coating
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/0012—Cell encapsulation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K2035/126—Immunoprotecting barriers, e.g. jackets, diffusion chambers
    • A61K2035/128—Immunoprotecting barriers, e.g. jackets, diffusion chambers capsules, e.g. microcapsules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/60—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a special physical form
    • A61L2300/62—Encapsulated active agents, e.g. emulsified droplets
    • A61L2300/622—Microcapsules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/60—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a special physical form
    • A61L2300/64—Animal cells
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B32—LAYERED PRODUCTS
    • B32B—LAYERED PRODUCTS, i.e. PRODUCTS BUILT-UP OF STRATA OF FLAT OR NON-FLAT, e.g. CELLULAR OR HONEYCOMB, FORM
    • B32B9/00—Layered products comprising a layer of a particular substance not covered by groups B32B11/00 - B32B29/00
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y30/00—Nanotechnology for materials or surface science, e.g. nanocomposites
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
    • C12N2533/70—Polysaccharides
    • C12N2533/74—Alginate

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Bu buluş, doku rejenerasyonunda kullanılan, hasar görmüş dokulara spesifik olarak yönlendirilebilen, belirli bir noktada hücre (2) dışı matriks benzeri bir yapı oluşturarak hücrelerin (2) çoğalmasına imkan tanıyan bir mikrokapsül (1) ve bu mikrokapsülün üretim yöntemi (100) ile ilgilidir.

Description

TARIFNAME BIR MIKROKAPSÜL VE ÜRETIM YÖNTEMI Teknik Alan Bu bulus, doku rejenerasyonunda kullanilan, hasar görmüs dokulara spesifik olarak yönlendirilebilen, belirli bir noktada hücre disi matriks benzeri bir yapi olusturarak hücrelerin çogalmasina imkan taniyan bir mikrokapsül ve bu mikrokapsülün üretim yöntemi ile ilgilidir. Önceki Teknik Herhangi bir sebepten dolayi hasar gören veya yapisal ve islevsel olarak yeterli olmayan dokulari islevsel hale getirmeyi hedefleyen bilim dali doku mühendisligidir. Baska bir deyisle doku mühendisligi, hastalikli veya ölmüs dokularin yerine islevsel, saglikli doku ve organlarin olusturulmasini amaçlayan bir bilim dalidir. Tek bir doku veya organin olusturulmasi sürecinde; uygun doku iskelelerinin, hücre kaynaklarinin ve sinyallerin tanimlanmasi gereklidir. Bu hücresel tedavi yaklasiminda, izole edilmis hücreler in-vitro sartlarda üç boyutlu hücre disi matriks molekülleriyle benzer olarak tasarlanmis yapi iskeleleri üzerine ekildikten sonra özel sartlar altinda yeniden farklilastirilarak çogaltilmakta ve olusturulan dokuya benzer yeni hibrit yapilar vücuda tekrar nakledilmektedir.
Ilk olarak küçük bir doku parçasindan toplanan hücreler laboratuvar ortaminda çogaltilir. Daha sonrasinda doku mühendisliginde, dokuyu olusturabilecek islevsellikteki doku iskeleleriyle birlestirilerek hibrit bir sistem olusturulur. Burada doku iskelesi vücuda uygulanacak olan dokunun vücuda uyum saglayana kadar kullandigi geçici bir konak vazifesi görmektedir. Yani doku iskelesi biyo-bozunur bir yapiya sahip oldugu için vücuda uygulandiktan bir süre sonra erimeye baslar.
En son olarak doku iskelesi yok olur ve doku olmasi gerektigi gibi maksimum performansta görevini icra etmeye baslar.
Doku iskelesinin hazirlanmasinda gerek malzeme gelistirilmesinde gerekse bu malzemeden istenilen genetik, topografik ve islevsel özelliklere sahip yapilarin yapiminda nanoteknolojinin büyük bir rolü vardir. Nano ölçekteki fabrikasyon teknikleriyle nano boyuttaki hücresel davranislar ve doku organizasyonundaki bilgi gün geçtikçe artmaktadir. Nanofabrikasyon teknikleriyle dogal yapilari en iyi sekilde taklit edilip doku iskeleleri gerçeklestirilirken bu sistemlerin bazilarinda kollajen iplikler kullanilmaktadir.
Hücre enkapsülleme, hücreyi, hücre metabolizmasi için gerekli oksijen, besin, büyüme faktörü gibi moleküllerin girisine ve atik ürünlerin ve iyilestirici proteinlerin çikisina izin veren çift yönlü geçis imkâni taniyan polimerik bir yan geçirgen bir membran içerisine hapsetme islemidir.
Hücre enkapsülleme teknolojisindeki ana hedef, doku mühendisligindeki nakil edilen dokulardaki mevcut ret durumlarinin üstesinden gelmek ve organ nakli sonrasi uzun süreli immünosupresif (bagisikligi baskilayici) ilaç kullanimini azaltmaktir.
Mevcut teknikte, hücre enkapsülleme teknolojisi uzun yillardir bilinmektedir.
Ancak, enkapsüle edilmis hücrenin vücut içerisine girebilmesi için açik cerrahi ihtiyaci bulunmaktadir. Ayrica, Vücuda enjekte edilen enkapsüle hücreler, herhangi bir noktaya hedeflenmemistir. Içerisinde canli hücre bulunan ve canli hücre ile tercih edilen bölgeye hedeflenebilen bir mikrokapsül ve böyle bir mikrokapsül üretim yöntemi bulunmamaktadir. patent dokümaninda bahsi geçen bulus hücre enkapsülasyonu ve özellikle çok katmanli polimerik membranlar içerisine canli hücre enkapsülleme ile ilgilidir. Çok katmanli mikrokapsül bir biyopolimer iç katmana ve polimer bir dis kabuga sahiptir. Söz konusu bulusta hücre birden fazla katmanli polimerik bir yapi içerisine enkapüle edilse de enkapüle edilmis hücrenin bir noktaya hedeflenmesi özelligi bulunmamaktadir.
Teknigin bilinen durumunda yer alan U8523 8714 A sayili Birlesik Devletler patent dokümaninda, teröpatik ve diagnostik ajanlarin enkapsülasyonlari için uygun mikrokapsül hazirlama metodu yer almaktadir. Kapsüler kaplama, biyolojik olarak parçalanabilen polimerlerden hazirlanmaktadir. Bulus ayrica bir aminoaside konjuge polimerlerden elde edilmis mikrokapsülleri de içermektedir. Söz konusu bulus ile ilaç yüklü mikrokapsülün spesifik bir organ ya da hücre hedeflenmesi gelistirilmistir. Basvuru dokümaninda yer alan bulus ilaç enkapsüllemeden farkli olup canli hücre enkapsülleme, canli hücreye sahip mikrokapsülün spesifik bir noktaya hedeflenmesi ve bu mikrokapsülün üretim yöntemi ile ilgilidir. patent dokümaninda bahsi geçen bulus, isaretlenmis hücreler ve kitlerin yani sira canli hücreleri ve etiketleri enkapsülleme metodu ile ilgilidir. Söz konusu bulusta hücreleri ya da hücre gruplarini isaretleme metodu anlatilmaktadir. Bahsi geçen metot sayesinde bir ya da daha fazla isaret içeren mikrokapsüller elde edilmektedir.
Dolayisiyla bir canli hücre ve bir isaret içeren bir mikrokapsül eldesi söz konusudur.
Ancak bulusta içerisinde canli hücre bulunan mikrokapsülün hedetlenmesine dair bir bilgiye rastlanmamistir.
Mevcut teknikte, canli hücre tasiyan ve tasidigi canli hücre ile tedavi edilmesi istenen hasarli bölgeye hedeflenebilen, hedeflendigi hasarli bölgede bir yapi olusturarak O bölgede hücrelerin çogalmasini saglayan ve açik cerrahi gerekliligini ortadan kaldiran bir mikrokapsül ve mikrokapsül üretim yöntemi bulunmamaktadir.
Bulusun Amaçlari Bu bulusun amaci, tercih edilen hedefe yönlenebilen ve canli hücre ihtiva eden bir mikrokapsül ve mikrokapsül üretim yöntemi gerçeklestirmektir, Bu bulusun amaci, hasarli dokularin tedavi edilebilmesi için gereken açik cerrahi ihtiyacini ortadan kaldiran bir mikrokapsül ve mikrokapsül üretim yöntemi gerçeklestirmektir.
Bu bulusun amaci, dogrudan hasarli dokuya hedeflenebilen ve hasarin ortadan kalkmasi için hücre disi matriks özellikleri tasiyan bir yapinin olusmasinda kullanilacak mikrokapsül ve mikrokapsül üretim yöntemi gerçeklestirmektir Bu bulusun bir diger amaci, hücre disi matriks özellikleri tasiyan bir yapi olusturarak hücrelerin çogalmasina ve dokunun yenilenmesine olanak taniyan mikrokapsül ve mikrokapsül üretim yöntemi gerçeklestirmektir.
Bulusun Kisa Açiklamasi Bu bulusun amacina ulasmak için gerçeklestirilen, ilk istem ve bu isteme bagli diger istemlerde tanimlanan bir mikrokapsül; içte canli bir hücre barindirmaktadir. Canli hücrenin üzerine kaplanan çesitli polimer katmanlarla bir mikrokapsül olusturulur.
Mikrokapsülün özelligi canli hücreleri enkapsüle etmesi ve bu hücrelerle beraber istenilen dokuya hedeflenebilir bir yapida olmasidir. Canli hücrenin üzeri ilk olarak bir polimer ile kaplanir. Kaplanan birincil katman, biyobozunur bir polimerdir.
Birincil katman üzerinde yan gruplar bulunmaktadir. Birincil katmanm dis tarafindaki yan gruplar, ikincil katmanin, birincil katmanin yüzeyine baglanmasini saglamaktadir. Ikincil katman bir polimerdir. Ikincil katmani olusturacak polimer, mikrokapsüle baglanmadan önce fonksiyonellestirilir. Köprülesme faktörü, bir protein, bir aminoasit dizisi, bir kimyasal molekül, bir DNA dizisi gibi iki molekül arasinda köprü olusmasini saglayacak bir moleküldür. Daha sonra fonksiyonellestirilmis polimere, köprülesme faktörü bir baglayici molekül (linker) ile baglanir. Köprülesme faktörü baglanmis ikincil polimer, birincil katmanin üzerine kaplanir. Sonra, en dista yer alan köprülesme faktörleri, hedefleme faktörü ve dokulasma faktörünü mikrokapsüle bir köprü (bridge) ile baglar. Böylece içinde hücre ve en dis yüzeyde dokulasma ve hedefleme faktörünün bulundugu mikrokapsül yapisi olusturulmus olur.
Bu bulusun amacina ulasmak için gerçeklestirilen, ilk istem ve bu isteme bagli diger istemlerde tanimlanan bir mikrokapsül üretim yönteminde ilk olarak hücrelerin enkapsülasyonu gerçeklestirilmektedir. Canli hücrenin enkapsülasyonu bir polimer ile yapilmaktadir. Bulusun bu uygulamasinda kullanilan polimer aljinattir.
Enkapsülasyon isleminden sonra canli hücre, üzerinde yan gruplar bulunan birincil katmanla yani aljinatla kaplanmis hale gelmektedir. Birincil katman olusturukduktan sonra, ikinci] polimerin fonksiyonellestirilmesi gerçeklestirilmektedir. Bulusun bu uygulamasinda fonksiyonellestirilen polimer kitosandir. Fonksiyonellestirme isleminden sonra kitosana köprülesme faktörü olarak seçilen aVidinin baglanmaktadir. Bu islemler tamamlandiktan sonra kitosan, ikincil katmani olusturmak üzere birincil katman üzerine kaplanmaktadir. Kaplama isleminden sonra fonksiyonellestirilmis polimer üzerine hedefleme ve dokulasma faktörü baglanarak ikincil katman ve islem sonunda mikrokapsül elde edilmektedir.
Bulusun tercih edilen uygulamasinda hedefleme ve dokulasma faktörleri biyotinlenmis antikorlardir.
Bulusun Ayrintili Açiklamasi Bu bulusun amacina ulasmak için gerçeklestirilen mikrokapsül ve bu mikrokapsülün üretim yöntemi ekli sekillerde gösterilmis olup bu sekiller; Sekil 1. Birincil katman ile kaplanmis hücrenin sematik görünüsüdür.
Sekil 2. Birincil katman üzerinde bagli halde bulunan yan gruplarin sematik görünüsüdür.
Sekil 3. Birincil katman ile birincil katman üzerinde bulunan yan gruplara baglanmis fonksiyonellestirilmis polimerin sematik görünüsüdür.
Sekil 4. Ikincil katmanin sematik görünüsüdür.
Sekil 5. Dokulasma faktörünün sematik görünüsüdür.
Sekil 6. Hedefleme faktörünün sematik görünüsüdür.
Sekil 7. Mikrokapsülün sematik görünüsüdür.
Sekil 8. Mikrokapsül üretim yöntemi adimlarinin sematik görünüsüdür.
Sekillerdeki parçalar tek tek numaralandirilmis olup, bu numaralarin karsiligi asagida verilmistir.
Mikrokapsül Birincil katman Yan grup Ikinci] Katman 51. F onksiyonellestirilmis polimer 511. Baglayici molekül (linker) 512. Köprülesme faktörü 52. Hedefleme faktörü 521. Hedefleme köprü faktörü 522. Hedefleyici 53. Dokulasma faktörü 531. Dokulasma köprü faktörü 532. Dokulasma noktasi 100. Mikrokapsül üretim yöntemi Doku rejenerasyonunda kullanilan, hasar görmüs dokulara spesifik olarak yönlendirilebilen, belirli bir noktada hücredisi (extracellular) matriks benzeri bir yapi olusturan bir mikrokapsül (1) en temel halinde; az bir canli hücre (2), canli hücre (2) üzerini kaplayan en az bir birincil katman (3), birincil katman (3) üzerine gelecek olan bir diger katmanin baglandigi en az bir tane ve en az bir tip yan grup (4), - en az bir fonksiyonellestirilmis bir polimer (51), en az bir tane ve en az bir tip hedefleme faktörü (52) ve arttiran en az bir dokulasma faktörü (53) içeren en az bir ikincil katman (5), - birincil katman (3) üzerine kaplanan ve hedeflenebilir özellikte olan, fonksiyonellestirilmis bir polimer (51), - fonksiyonellestirilmis polimer (51) üzerinde bulunan ve hasarli noktaya hedeflenmeyi saglayan hedefleme faktörü (52), - fonksiyonellestirilmis polimer (51) üzerinde tutunma yüzeyini arttiran dokulasma faktörü (53) içermektedir.
Bulusun bir uygulamasinda mikrokapsül (1) canli hücre (2) içermektedir. Hücre (2), en içte bulunan unsurdur. Mikrokapsül (l) içerisinde bulunan canli hücre (2) hasarli yere ulastiginda hasarli yer üzerinde iskele (scaffold) olusumu için ekstra baglanti yüzeyi olusturmaktadir. Mikrokapsül (1) hücre (2) ile birlikte hareket etmektedir.
Bulusun bir uygulamasinda hücre (2) bir birincil katman (3) ile kaplidir. Birincil katman (3) bir polimer zinciridir. Birincil katman (3), jelatin, elastin, selüloz, kitin, kitosan, karboksimetil kitosan, ve kitosan türevleri, aljinat, poli metil metakrilat, poliakrilamidlerin hepsi, polietilen, polilaktik asit, poliglikolik asit, PLGA (polilaktik-ko-glikolik asit), polietilen oksit, poliüretan, poli hidroksi metil metakrilat, poli amino esterler, ve bunlarin her türlü çapraz baglayicilari olabilmektedir. Bulusun tercih edilen uygulamasinda birincil katman (3) aljinattir.
Hücrenin (2) etrafinda birincil katman (3) ile çapraz baglayicinin çapraz baglanmasi ile dairesel bir kapsül olusmaktadir. Birinci] katman (3), mikrokapsülün (1) çok katmanli yapisinin ilk katmanini olusturmaktadir.
Bulusun bir uygulamasinda birincil katman (3) biyo-bozunur bir polimerdir.
Bulusun bir uygulamasinda birincil katman (3) üzerinde birden fazla yan grup (4) bulunmaktadir. Yan gruplar (4) ikincil katmanin (5) yüzeye tutunmasini saglayan yapilardir. Birincil katman (3) üzerindeki yan gruplar (4) özdes veya birden farkli tipte olabilmektedirler. Yan gruplar (4) fiziksel ve/Veya kimyasal etkilesimlerle birbirine baglanabilmektedirler. Yan gruplar (4), haloformil, hidroksil, aldehit, alkil, alkenil, alkinil, karboksamid, birincil amin, ikincil amin, üçüncül amin, azid, azo, benzil, karbonat ester, karboksilate, karboksil, siyanat, tiosiyanat, disülfür, eter, ester, halo, hidroperoksi, birincil ketimin, ikincil ketimin, birincil amin, ikincil amin, imid, izosiyanür, izosiyanat, isotiosiyanat, karbonil, nitrat, nitril, nitrosooksi, nitro, nitroso, peroksi, fenil, fosfino, fosfat, fosfono, piridil, sülfür, sülfo, sülfinil, sülthidrilden biri veya birkaçi olabilmektedirler. Bulusun tercih edilen uygulamasinda yan gruplar (4) karboksil ve amin gruplaridir. Yan gruplar (4) çok katmanli yapi olusmasini saglamaktadirlar.
Bulusun bir uygulamasinda ikincil katman (5) bulunmaktadir. Ikincil katman (5), mikrokapsülün (1) tercih edilen noktaya hedeflenmesini saglayan yapidir. Ikincil katman (5) fonksiyonellestirilmis polimer (51) üzerinde hedefleme faktörleri (52) ve dokulasma faktörleri (53) bulunan bir katmandir. Ikincil katmanin (5) eldesi için, öncelikle polimer fonksiyonellestirilir. Fonksiyonellestirilen polimer (51), jelatin, elastin, selüloz, kitin, kitosan, karboksimetil kitosan, ve kitosan türevleri, aljinat, poli metil metakrilat, poliakrilamidlerin hepsi, polietilen, polilaktik asit, poliglikolik asit, PLGA (polilaktik-ko-glikolik asit), polietilen oksit, poliüretan, poli hidroksi metil metakrilat, poli amino esterler, ve bunlarin her türlü çapraz baglayicilari olabilmektedir. Bulusun bu uygulamasinda fonksiyonellestirilmis polimer (51) kitosandir. Fonksiyonellestirilmis polimer (51), bir baglayici molekül (511) ile köprülesme faktörüne (512) baglanmaktadir. Köprülesme faktörü (512), hedefleme faktörü (52) ile dokulasma faktörünün (53) fonksiyonellestirilmis polimer (51) üzerine bir köprü ile tutunmasini saglamaktadir.
Fonksiyonellestirilmis polimer (51) üzerindeki köprülesme faktörü (512), hedefleme köprü faktörü (521) ve dokulasma faktörü (53) ile bu köprüleri olusturur.
Bulusun bu uygulamasinda fonksiyonellestirilmis polimer (51) kitosandir.
Bulusun bir uygulamasinda hedetleme faktörü (52) bulunmaktadir. Hedetleme faktörü (52), mikrokapsülün (1) ulasmasi istenen yere hedeflenmesini saglamaktadir. Hedefleme faktörü (52), hedefleme köprü faktörü (521) ve hedefleyici (522) içermektedir. Hedefleme köprü faktörü (521), köprülesme faktörü (512) ile birlikte, fonksiyonellestirilmis polimer (51) ile hedeIleyici (522) arasinda bir köprü kurar. Hedefleme köprü faktörünün (521) bir ucunda hedefleyici (522) bulunmaktadir. Hedefleyici (522), bir protein, aminoasit dizisi, bir aptamer, bir DNA dizisi, bir reseptör veya bir antikor olabilmektedir. Bulusun tercih edilen uygulamasinda mikrokapsül (l) kikirdak doku rejenerasyonunda kullanilmaktadir ve hedefleyici (522) kikirdaga özgü bir antikordur.
Bulusun bir uygulamasinda dokulasma faktörü (53) bulunmaktadir. Dokulasma faktörü (53), mikrokapsül (l) üzerinde baglanilabilecek noktalar olustunnaktadirlar. Dokulasma faktörü (53) dokulasma köprü faktörü (531) ve dokulasma noktasi (532) içermektedir. Dokulasma köprü faktörü (531), köprülesme faktörü (512) ile birlikte, fonksiyonellestirilmis polimer (51) ile dokulasma noktasi (532) arasinda bir köprü kurmaktadir. Dokulasma köprü faktörünün (531) bir ucunda dokulasma noktasi (532) bulunmaktadir. Dokulasma noktasi (532) bir protein, aminoasit dizisi, bir aptamer, bir DNA dizisi, bir reseptör veya bir antikor olabilmektedir. Bulusun tercih edilen uygulamasinda dokulasma noktasi (532) Söz konusu bulus olan mikrokapsül (1) ile hasarli doku tedavisi için açik cerrahi ihtiyaci ortadan kalkmaktadir. Içerisinde canli hücre (2) bulunan mikrokapsül (l), tercih edilen hasarli bölgeye yönlendirilebilmektedir/hedeflendirilebilmektedir.
Tercih edilen bölgeye hedeflenen ve bölgeye ulasan mikrokapsül (l), hasarli alanda hücre (2) disi inatriks özellikleri tasiyan bir yapi olusturmaktadir. Olusan bu hücre (2) disi matriks özellikleri tasiyan yapi ile hücreler (2) çogalmakta ve doku yenilenmektedir.
Doku rejenerasyonunda kullanilan, hasar görmüs dokulara spesifik olarak yönlendirilebilen, belirli bir noktada hücre (2) disi matriks benzeri bir yapi olusturarak hücrelerin (2) çogalmasina imkan taniyan bir inikrokapsül üretim yöntemi (100); canli hücrelerin (2) bir polimer, tercihen aljinat ile enkapsüle edilerek üzerinde yan gruplar (4) bulunan birincil katmanin (3) elde edilmesi (101), - polimerin, tercihen kitosanin fonksiyonellestirilmesi ve köprülesme faktörünün (512), tercihen avidinin fonksiyonellestirilmis kitosana baglanmasi (102), - Enkapsüle hücrelerin (2) ikincil katmani (5) olusturmak üzere fonksiyonellestirilmis polimer (51) ile kaplanmasi (103), - fonksiyonellestirilmis polimer (51) üzerine tercihen biyotinlenmis hedefleme faktörü (52) ve dokulasma faktörünün (53), baglanarak ikincil katmanin (5) ve mikrokapsülün (l) elde edilmesi (104) islem adimlarini içermektedir.
Bulus konusu mikrokapsül üretim yöntemi (100) ile vücutta bulunan hasarli bölgeye yönlenebilen ve canli hücre (2) tasiyan mikrokapsül (1) elde edilmektedir.
Mikrokapsül üretim yönteminde ( 100) ilk olarak canli hücrelerin (2) bir polimer, tercihen aljinat ile enkapsüle edilerek üzerinde yan gruplar (4) bulunan birincil katmanin (3) elde edilmesi (101) islemi gerçeklestirilmektedir. Bu adimda suda çözünmüs CaC12 ve yine suda Çözünmüs düsük moleküler agirlikli sodyum aljinat polimeri çapraz baglanmaktadir. Hücre (2) kültüründe çogaltilan kondrositler, aljinat çözeltisi içerisine eklenmekte ve CaC12 çözeltisi içerisine damlatilmaktadir.
Böylece hücre (2) birincil katman (3) ile kaplanmaktadir.
Hücre (2) enkapsülasyon (101) islemi gerçeklestikten sonra polimerin, tercihen kitosanin fonksiyonellestirilmesi ve köprülesme faktörünün (512), tercihen avidinin fonksiyonellestirilmis kitosana baglanmasi (102) saglanmaktadir. Bu adimda kitosan fonksiyonellestirilmekte ve avidinlenmektedir. Ilk olarak düsük moleküler agirlikli kitosan polimeri asetik asit çözeltisi içerisinde çözülmektedir. Daha sonra ortamin pH degeri fizyolojik pH araligina çikarilmaktadir. pH degeri arttirildiktan sonra kitosan, önce fonksiyonellestirici ile daha sonra da avidin molekülleri ile muamele edilmektedir. AVidin baglanmis kitosan polimer zincirleri en az bir kere asetik asit çözeltisi ile yikanmaktadir.
Ikincil polimerin, tercihen kitosanin fonksiyonellestirilmesi ve köprü faktörünün, tercihen avidinin baglanmasinin (102) ardindan enkapsüle hücrelerin (2) ikincil katmani (5) olusturmak üzere fonksiyonellestirilmis polimer (51) ile kaplanmaktadir (103). Enkapsüle hücreler (2) tercih edilen izotonik çözelti ile yikanmaktadir. Bulusun bu uygulamasinda hücreler (2) PBS (Phosphate buffered saline) tampon çözeltisi ile yikanmakta ve PBS çözeltisine aktarilmaktadirlar.
Yikama sonrasinda, avidin baglanmis kitosan polimerler pH 4.556 getirilmekte ve içerisinde enkapsüle hücrelerin (2) bulundugu PBS çözeltisine (pH 7.4) atilmaktadirlar.
Enkapsüle hücrelerin (2) ikincil katmani (5) olusturmak üzere fonksiyonellestirilmis polimer (51) ile kaplanmasidan (103) sonra, fonksiyonellestirilmis polimer (51) üzerine tercihen biyotinlenmis hedefleme faktörü (52) ve dokulasma faktörü (53) baglanarak ikincil katman (5) ve mikrokapsül (1) elde edilmektedir (104). Içerisinde glikoprotein 180 anti-GPNMB, anti-CD90/THY1, anti-GPCR, anti- $100A9, anti-CXCR4 ve anti-periostin gibi hasarli kikirdaga özel biyotinlenmis antikorlar içeren çözelti, enkapsüle hücrelerin (2) oldugu çözeltiye damlatilmaktadir. Damlatma islemi tamamlandiktan sonra 0- 24 saat arasi 30-45 0Cide bekletilmektedir. Ayrica baska bir yerde, avidinlenmis kitosan da, biyotinli rodopsin ile 0-24 saat muamele edilmektedir.
Tercih edilen bölgeye hedeflenebilen çok katmanli bir mikrokapsül üretme yönteminde (100) ilk olarak canli hücrelerin (2) bir polimer, tercihen aljinat ile enkapsüle edilerek üzerinde yan gruplar (4) bulunan birincil katmanin (3) elde edilmesi (101) islemi gerçeklestirilmektedir. Birincil katman (3) elde edildikten sonra ikincil polimerin, tercihen kitosanin fonksiyonellestirilmesi ve köprülesme faktörünün (512), tercihen avidinin polimere, tercihen kitosana baglanmasi (102) saglanmaktadir. Ardindan, ikincil katman (5) olusturulmak üzere enkapsüle hücreler (2) fonksiyonellestirilmis polimer (51) ile kaplanmaktadirlar (103).
Kaplama islemi tamamlandiktan sonra fonksiyonellestirilen polimere (51) hedefleme faktörü (52) ve dokulasma faktörü (53) baglanarak ikincil katman (5) ve dolayisiyla mikrokapsül (1) elde edilmektedir. hücrelerin enkapsülasyonu kitosanin fonksiyonellestirilmesi ve avidinlenmesi aljinatla enkapsüle hücrelerin avidinlenmis kitosanla kaplanmasi biyotinlenmis antikorlarin avidinle kaplanmis küreye baglanmasi ve mikrokapsül elde edilmesi

Claims (16)

ISTEMLER
1. Doku rejenerasyonunda kullanilan) hasar görmüs dokulara spesifik olarak yönlendirilebilen, belirli bir noktada hücredisi matriks benzeri bir yapi olusturan , az bir canli hücre (2), canli hücre (2) üzerini kaplayan en az bir birincil katman (3), birincil katman (3) üzerine gelecek olan bir diger katmanin baglandigi en az bir tane ve en az bir tip yan grup (4), en az bir fonksiyonellestirilmis bir polimer (51), en az bir tane ve en az bir tip hedefleme faktörü (52) ve en az bir dokulasma faktörü (53) içeren en az bir ikincil katman (Sl, birincil katman (3) üzerine kaplanan ve hedeflenebilir özellikte olan, fonksiyonellestirilmis bir polimer (51), fonksiyonellestirilmis polimer (51) üzerinde bulunan, iskele olusmasi istenen hasarli noktaya hedeflenmeyi saglayan hedefleyici (522] ve hedefleme köprü faktörü (521) içeren hedefleme faktörü (52), fonksiyonellestirilmis polimer (51) üzerinde tutunma yüzeyini arttiran, ikincil katman (5) üzerinde baglanti noktalari olusturan, dokulasma köprü faktörü (531) ve dokulasma noktasi (532) içeren dokulasma faktörü (53) ile karakterize edilen bir mikrokapsül (1).
2. Jelatin veya elastin veya selüloz veya kitin veya kitosan veya karboksimetil kitosan veya kitosan türevleri veya aljinat veya poli metil metakrilat veya poliakrilamidlerin hepsi veya polietilen veya polilaktik asit veya poliglikolik asit veya PLGA (polilaktik-ko-glikolik asit) veya polietilen oksit veya poliüretan veya poli hidroksi metil metakrilat veya poli amino esterler veya bunlarin her türlü çapraz baglayieilari olan birincil katman (3) ile karakterize edilen istem l“deki gibi bir mikrokapsül (1).
. Canli hücrenin (2) etrafina baglanarak dairesel bir kapsül olusturan, polimer bir zincir yapisinda ve tercihen aljinat olan birincil katman (3) ile karakterize edilen istem l'deki gibi bir mikrokapsül (1).
. Birinci] katman (3) ile ikinci] katman (5) arasinda bulunan, ikincil katmanm (5) birincil katmana (3) tutunmasmi ve çok katmanli yapi olusmasini saglayan birden fazla yari grup (4) ile karakterize edilen istem l”deki gibi bir mikrokapsül (l). . Özdes veya farkli tipte olan, elektrostatik veya disülfit etkilesimleri ile birbirine baglanabilen, pozitif veya negatif yüke sahip yan gruplar (4) ile karakterize edilen istem 4”deki gibi bir mikrokapsül (1).
Haloformil veya hidroksil veya aldehit veya alkil veya alkenil veya alkinil veya karboksamid veya birincil amin veya ikincil amin veya üçüncü] amin veya azid veya azo veya benzil veya karbonat ester veya karboksilate veya karboksil veya siyanat veya tiosiyanat veya disülfür veya eter veya ester veya halo veya hidroperoksi veya birincil ketimin veya ikincil ketimin veya birincil amin veya ikincil amin veya imid veya izosiyanür veya izosiyanat veya isotiosiyanat veya karbonil veya nitrat veya nitril veya nitrosooksi veya nitro veya nitroso veya peroksi veya fenil veya fosfino veya fosfat veya fosfono veya piridil veya süliür veya sülfo veya sülfinil veya sülthidrilden biri veya birkaçi olan yan gruplar (4) ile karakterize edilen istem 47deki gibi bir mikrokapsül (l).
. Bir baglayici molekül (511) ve köprülesme faktörü (512) içeren fonsiyoneiiestirilmis polimer (51) ile karakterize edilen istem 1”deki gibi bir mikrokapsül (l).
. Jelatin veya elastin veya selüloz veya kitin veya kitosan veya karboksimetil kitosan veya kitosan türevleri veya aljinat veya poli metil metakrilat veya poliakrilamidlerin hepsi veya polietilen veya polilaktik asit veya poliglikolik asit veya PLGA (polilaktik-ko-glikolik asitl veya polietilen oksit veya poliüretan veya poli hidroksi metil metakrilat veya poli amino esterler veya bunlarin her türlü çapraz baglayicilari olan fonsiyonellestirilmis polimer (51) ile karakterize edilen istem 1°deki gibi bir mikrokapsül (1).
Hedefleme faktörü (52) ile dokulasma faktörünün (53) fonksiyonellestirilmis polimer (51) üzerine bir köprü ile tutunmasini saglayan köprülesme faktörü (512] ile karakterize edilen istem 7°deki gibi bir mikrokapsü1(1).
Iskele olusmasi istenen noktaya hedeflenmeyi saglayan, bu nokta ile uyumlu, tercihen kikirdaga özgü bir antikor olan ve bu sayede hedeflenmeyi saglayan hedefleyici (522) içeren hedefleme faktörü (52) ile karakterize edilen istem 1”deki gibi bir mikrokapsül (1 ).
Hedefleme köprü faktörünün (521) bir ucunda bulunan, bir protein veya aminoasit dizisi veya bir aptamer veya bir DNA dizisi veya bir reseptör veya bir antikor olabilen hedefleyici (522) ile karakterize edilen istem 107daki gibi bir mikrokapsül (l).
Köprülesme faktörü (512) ile birlikte, fonksiyonellestirilmis polimer (51) ile dokulasma noktasi (532) arasinda bir köprü kuran dokulasma köprü faktörü (531] ile karakterize edilen istem 17deki gibi bir mikrokapsüi (1).
Bir ucu bir protein veya aminoasit dizisi veya bir aptamer veya bir DNA dizisi veya bir rESeptör veya bir antikor olan dokulasma noktasi (532) içeren dokulasma köprü faktörü (531) ile karakterize edilen istem 1”deki gibi bir mikrokapsül (1).
Rodopsin gibi bir proteine özgü bir antikor olan dokulasma noktasi (532) ile karakterize edilen istem 13”deki gibi bir mikrokapsüi (1).
Doku rejenerasyonunda kullanilan, hasar görmüs dokulara spesifik olarak yönlendirilebilen, belirli bir noktada hücredisi matriks benzeri bir yapi olusturarak hücrelerin (2) çogalmasina imkan taniyan bir mikrokapsül üretim yöntemi (100); - canli hücrelerin (2) bir polimer, tercihen aljinat ile enkapsüle edilerek üzerinde yan gruplar (4) bulunan birincil katmanin (3) elde edilmesi (101), - polimerin, tercihen kitosanin fonksiyonellestirilmesi ve köprülesme faktörünün (512), tercihen avidinin fonksiyonellestirilmis kitosana baglanmasi (102),
- Enkapsüle hücrelerin (2) ikincil katmani (5) olusturmak üzere fonksiyonellestirilmis polimer (51) ile kaplanmasi (103), - fonksiyonellestirilmis polimer (51) üzerine tercihen biyotinlenmis hedefleme faktörü (52) ve dokulasma faktörünün (53), baglanarak ikincil katmanin (5) ve mikrokapsülün (l) elde edilmesi (104) islem adimlarini içermektedir.
16. Canli hücrelerin (2) bir polimer, tercihen alj inat ile enkapsüle edilerek üzerinde yan gruplar (4) bulunan birincil katmanin (3) elde edilmesi (101) islem adiminda, suda çözünmüs CaClz ve yine suda çözünmüs düsük moleküler agirlikli sodyum aljinat polimeri çapraz baglanmasi ile karakterize edilen istem 15°teki gibi mikrokapsül üretim yöntemi (100). Canli hücrelerin (2) bir polimer, tercihen aljinat ile enkapsüle edilerek üzerinde yan gruplar (4) bulunan birincil katmanin (3) elde edilmesi (101) islem adiminda, hücre (2) kültüründe çogaltilan kondrositlerin, aljinat çözeltisi içerisine eklenmesi, CaClz çözeltisi içerisine damlatilmasi ve böylece hücrenin (2) birincil katman (3) ile kaplanmasi ile karakterize edilen istem 16°daki gibi mikrokapsül üretim yöntemi (100). Polimerin, tercihen kitosanin fonksiyonellestirilmesi ve köprülesme faktörünün (512), tercihen avidinin fonksiyonellestirilmis kitosana baglanmasi (102) islem adiminda, düsük moleküler agirlikli kitosan polimeri asetik asit çözeltisi içerisinde çözülmesi ile karakterize edilen istem 15°teki gibi mikrokapsül üretim yöntemi (100). Polimerin, tercihen kitosanin fonksiyonellestirilmesi ve köprülesme faktörünün (512), tercihen avidinin fonksiyonellestirilmis kitosana baglanmasi (102) islem adiminda, ortamin pH degerinin fizyolojik pH araligina çikarilmasi ile karakterize edilen istem 18°teki gibi mikrokapsül üretim yöntemi (100). Polimerin, tercihen kitosanin fonksiyonellestirilmesi ve köprülesme faktörünün (512), tercihen avidinin fonksiyonellestirilmis kitOSana baglanmasi (102) islem adiminda, pH degeri arttirildiktan sonra, kitosanin önce fonksiyonellestirici ile daha sonra da avidin molekülleri ile muamele edilmesi ile karakterize edilen istem l9”daki gibi mikrokapsül üretim yöntemi (100). Polimerin, tercihen kitosanin fonksiyonellestirilmesi ve köprülesme faktöiünün (512), tercihen avidinin fonksiyonellestirilmis kitosana baglanmasi (102) islem adiminda, avidin baglanmis kitosan polimer zincirlerinin en az bir kere asetik asit çözeltisi ile yikanmasi ile karakterize edilen istem 20°deki gibi mikrokapsül üretim yöntemi (100). Enkapsüle hücrelerin (2) ikincil katmani (5) olusturmak üzere fonksiyonellestirilmis polimer (51) ile kaplanmasi (103) islem adiminda, enkapsüle hücrelerin (2) PBS (Phosphate buffered saline) tampon çözeltisi ile yikanmasi ve PBS çözeltisine aktarilmasi ile karakterize edilen istem 15`teki gibi mikrokapsül üretim yöntemi (100). Enkapsüle hücrelerin (2) ikincil katmani (5) olusturmak üzere fonksiyonellestirilmis polimer (51) ile kaplanmasi (103) islem adiminda, avidin baglanmis kitosan polimerlerin pH 4.5'e getirilmesi ve içerisinde enkapsüle hücrelerin (2) bulundugu pH 7.4 olan PBS çözeltisine atilmasi ile karakterize edilen istem 221deki gibi mikrokapsül üretim yöntemi (100). Fonksiyonellestirilmis polimer (51) üzerine tercihen biyotinlenmis hedefleme faktörü (52) ve dokulasma faktörünün (53), baglanarak ikincil katmamn (5) ve mikrokapsülün (l) elde edilmesi (104) islem adiminda, içerisinde glikoprotein veya anti-CXCR4 veya anti-periostin veya hasarli kikirdaga özel biyotinlenmis antikorlar içeren çözeltinin, enkapsüle hücrelerin (2) oldugu çözeltiye damlatilmasi ile karakterize edilen istem 15”teki gibi mikrokapsül üretim yöntemi (100). Fonksiyonellestirilmis polimer (51) üzerine tercihen biyotinlenmis hedefleme faktörü (52) ve dokulasma faktörünün (53), baglanarak ikincil katmanin (5) ve mikrokapsülün (1) elde edilmesi (104) islem adiminda, damlatma islemi tamamlandiktan sonra enkapsüle hücrelerin (2) oldugu çözeltiye damlatilan biyotinlenmis antikorlar içeren çözeltinin 0-24 saat arasi 30-45 0Cide bekletilmesi ile karakterize edilen istem 24”deki gibi mikrokapsül üretim yöntemi (100). Fonksiyonellestirilmis polimer (51) üzerine tercihen biyotinlenmis hedefleme faktörü (52) ve dokulasma faktörünün (53), baglanarak ikincil katmanin (5) ve mikrokapsülün (l) elde edilmesi (104) islem adiminda, avidinlenmis kitosanm, biyotinli rodopsin ile 0-24 saat muamele edilmesi ile karakterize edilen istem 25”deki gibi mikrokapsül üretim yöntemi (100).
TR2016/11332A 2016-08-11 2016-08-11 Bi̇r mi̇krokapsül ve üreti̇m yöntemi̇ TR201611332A2 (tr)

Priority Applications (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
TR2016/11332A TR201611332A2 (tr) 2016-08-11 2016-08-11 Bi̇r mi̇krokapsül ve üreti̇m yöntemi̇
EP17851911.2A EP3485000A2 (en) 2016-08-11 2017-08-09 A microcapsule and production method thereof
PCT/TR2017/050382 WO2018070959A2 (en) 2016-08-11 2017-08-09 A microcapsule and production method thereof
US16/323,993 US11318104B2 (en) 2016-08-11 2017-08-09 Microcapsule and production method thereof
US17/731,941 US20220323923A1 (en) 2016-08-11 2022-04-28 Microcapsule and production method thereof

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
TR2016/11332A TR201611332A2 (tr) 2016-08-11 2016-08-11 Bi̇r mi̇krokapsül ve üreti̇m yöntemi̇

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TR201611332A2 true TR201611332A2 (tr) 2018-02-21

Family

ID=61656326

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TR2016/11332A TR201611332A2 (tr) 2016-08-11 2016-08-11 Bi̇r mi̇krokapsül ve üreti̇m yöntemi̇

Country Status (4)

Country Link
US (1) US11318104B2 (tr)
EP (1) EP3485000A2 (tr)
TR (1) TR201611332A2 (tr)
WO (1) WO2018070959A2 (tr)

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5238714A (en) 1990-10-02 1993-08-24 Board Of Regents, The University Of Texas System Efficient microcapsule preparation and method of use
US6916640B2 (en) 2000-10-12 2005-07-12 Agency For Science, Technology And Research Multi-layer cell encapsulation for tissue engineering
US20070275080A1 (en) * 2003-10-31 2007-11-29 Engineered Release Systems Inc. Polymer-Based Microstructures
US7851189B2 (en) * 2005-03-07 2010-12-14 Boston Scientific Scimed, Inc. Microencapsulated compositions for endoluminal tissue engineering
GB0918564D0 (en) * 2009-10-22 2009-12-09 Plasticell Ltd Nested cell encapsulation
DE102013108453A1 (de) * 2013-08-06 2015-02-12 Yerzhan Ussembayev Nanocomposites zur Einkapselung von Zellen und Verfahren zur Behandlung von Krankheiten
US10426735B2 (en) 2014-08-01 2019-10-01 Massachusetts Institute Of Technology Modified alginates for anti-fibrotic materials and applications
WO2018070958A2 (en) * 2016-08-11 2018-04-19 Asik Mehmet Dogan Method of forming a structure with extracellular matrix properties in the body using targeted microcapsules

Also Published As

Publication number Publication date
WO2018070959A3 (en) 2018-05-31
WO2018070959A2 (en) 2018-04-19
US11318104B2 (en) 2022-05-03
US20210023016A1 (en) 2021-01-28
EP3485000A2 (en) 2019-05-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110240712B (zh) 一种组织粘合用的高拉伸、高粘性、自愈合双网络水凝胶及其制备方法和应用
Kaith et al. Hydrogels: synthesis, classification, properties and potential applications—a brief review
Kim et al. Biomimetic scaffolds for tissue engineering
Costa et al. Polyelectrolyte multilayered assemblies in biomedical technologies
US10912862B2 (en) Multi-layer biomaterial for tissue regeneration and wound healing
Buriuli et al. Polyelectrolyte complexes (PECs) for biomedical applications
US20110165671A1 (en) Process for providing an assembly of cell microcarriers
Zhang et al. Functionalized scaffold for in situ efficient gene transfection of mesenchymal stem cells spheroids toward chondrogenesis
CN102940909B (zh) 一种修饰组织工程支架的方法
Ashok et al. Synthesis-structure relationship of chitosan based hydrogels
TR201611332A2 (tr) Bi̇r mi̇krokapsül ve üreti̇m yöntemi̇
Balavigneswaran et al. Tailored chemical properties of 4-Arm star shaped poly (d, l-lactide) as cell adhesive three-dimensional scaffolds
US20220323923A1 (en) Microcapsule and production method thereof
Waheed et al. Cell encapsulation
CN105168130B (zh) 一种肿瘤靶向聚合物胶束及其制备方法
Biazar Application of polymeric nanofibers in medical designs, part IV: drug and biological materials delivery
Pandey et al. Silk-mesoporous silica-based hybrid macroporous scaffolds using ice-templating method: mechanical, release, and biological studies
Rajangam et al. Improved fibronectin-immobilized fibrinogen microthreads for the attachment and proliferation of fibroblasts
TWI541272B (zh) 製備中空微米粒子的方法
Rajmohan et al. Fusion and self-assembly of biodegradable polymer particles into scaffoldlike and membranelike structures at room temperature for regenerative medicine
KR101816297B1 (ko) 표면개질된 나노피브릴, 그 제조방법 및 그의 용도
Younes et al. Overview of Tissue Engineering and Drug Delivery Applications of Reactive Electrospinning and Crosslinking Techniques of Polymeric Nanofibers with Highlights on Their Biocompatibility Testing and Regulatory Aspects
KR101725374B1 (ko) 생체분자 및/또는 약물이 고정되어 있는 천연고분자 기반 섬유 패치 및 그 제조방법
KR101515516B1 (ko) 천연 프로테오글리칸 유사 합성 나노피브릴, 그 제조방법, 및 그의 용도
Park et al. Neuronal differentiation of PC12 cells cultured on growth factor-loaded nanoparticles coated on PLGA microspheres