เป็นชุดน้ำยาตรวจยืนยันวินิจฉัยโรคเลปโตสไปโรซิส เพื่อนำไปใช้ใน ห้องปฏิบัติการที่มีกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง It is a set of reagents to confirm the diagnosis of leptospirosis. To be used in Laboratory with fluorescence microscope
Claims (2)
1.แอนติเจนที่เตรียมจากกลุ่มเชื้อเลปโตสไปราซึ่งประกอบด้วย -กลุ่มที่ 1 แอนติเจนของเชื้อเลปโตสไปราซีโรวาร์ชนิดไซโร, ไพโรจีเนส,บราทิสลาวา,และอิคเทอร์โรฮีโมเรเจีย -กลุ่มที่2 แอนติเจนของเชื้อเลปโตสไปราซีโรวาร์ ชนิด กิยามิ,ปัตตาเวีย,แบงโกกิและออสตาลิส -กลุ่มที่3 แอนติเจนของเชื้อเลปโตสไปราซีโรวาร์ชนิดโคเปน เฮเก็นนี่,วอฟฟิอาย,บัลลิโกและเฮปโตมาดิส1. Antigens prepared from the leptospira group, which include - Group I, zyro-type leptospira serovar antigens, pyrogenase, Bratislava, and Iechtech. Norohemoregia - Group II Leptospira serovar antigens of Kyami, Batavia, Bangoki and Australis - Group III Leptose antigens. Kopen type Hegennie, Woffiye, Ballico and Heptomadis2. กรรมวิธีการเตรียมเชื้อเลปโตสไปราเพื่อเป็นแอนติเจนและการเตรียมชุดทอสอบดังนี้ เพาะเลี้ยงเชื้อเลปโตสไปราชนิดซีโรวาร์ต่างๆ ที่คัดเลือกไว้ 12 ชนิด ในหลอดแก้วชนิดฝาเกลียวในอาหารเลี้ยงชื้อชนิดนีโอเปปโตนมีเดียม (neopeptone medium)ที่มีส่วนผสมของ 10 เปอร์เซ็นต์ ซึ่งซีรัมของกระต่าย เพาะเลี้ยงประมาณ 5-7 วัน ที่อุณหภูมิห้องภายในตู้มือ ตรวจดูการเจริญเติบโตของเชื้อด้วยกล้องจุลทรรศน์ พื้นมืดให้ได้เชื้อที่มีความหนาแน่นเพียงพอนำเชื้อเลปโตสไปราแต่ละซีโรวาร์ซึ่งอยู่ใน แต่ละหลอดทดลองมาปั่นล้างด้วยน้ำเกลือ 0.85 เปอร์เซ็นต์ ด้วยเครื่องปั่นที่มีความเร็ว 5,000 รอบต่อนาที เป็นเวลานาน 10 นาที ใช้ไปเปตดูดส่วนใสทิ้ง นำส่วนของตะกอน มาปั่นและล้างด้วยน้ำเกลือ 0.85 เปอร์เซ็นต์ ด้วยเครื่องปั่นจำนวนรอบและเวลาคงเดิม ทำซ้ำเช่นนี้ 3 ครั้ง นำเชื้อเลปโตสไปราที่ปั่นล้างเรียบร้อยแล้วมาปรับความเข้มข้นเป็น 0.5 แมคฟาแลนด์ (0.5M c.Farland) ด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์พี.เอช7.2 (PBSpH7.2) เก็บแอนติเจนของเชื้อเลปโตสไปราแต่ละซีโรวาร์ในตู้เย็นแช่แข็ง -70 องศาเซลเซียส ได้นาน 1 ปี การเตรียมชุดน้ำยาทดสอบ นำแอนติเจนของเชื้อเลปโตสไปราที่เตรียมไว้แล้วนำมาผสมกันจัดกลุ่ม ตามที่กำหนดไว้ในขั้นตอนที่ 1 โดยจัดกลุ่มละ 4 ซีโรวาร์ จำนวน 3 กลุ่ม เมื่อผสม ในหลอดทดลองแล้วนำไปเขย่าด้วยเครื่องเขย่าเพื่อให้แอนติเจนผสมเข้ากันดี นาน10 นาทีใช้ไมโครไปเปตดูดแอนติเจนที่ผสมกันแล้ว 10 ไมโครลิตร หยดบนแผ่นสไลด์ เฉพาะเป็นชนิด 21 หลุมวางสไลด์ไว้ที่อุณหภูมิห้องให้แห้งสนิท จากนั้นนำสไลด์มาใส่ คอปปรินจาร์ (Couplinjar) ที่มีอะซีโตน (acetone) นาน 10 นาทีเพื่อให้แอนติเจน ของเชื้อติดแน่นบนสไลด์ เมื่อครบกำหนดเวลาแล้วนำสไลด์มาผึ่งให้แห้งที่อุณหภูมิห้อง จากนั้นเก็บสไลด์ใส่กล่องพลาสติกเก็บไวที่ตู้เย็นแช่แข็ง -20 องศาเซลเซียส เก็บไว้ได้ นาน 1 ปี2. Methods for preparing leptospira for antigen and preparation of the test set as follows: Cultivate various serovar types of leptospira. Twelve were selected in a screw-cap glass tube in a 10 percent neopeptone medium. Rabbit serum Cultured for 5-7 days at room temperature in the hand cabinet. Check the growth of bacteria with a microscope. The dark ground provides a sufficiently dense culture of leptospira each serovar in Each test tube was rinsed with 0.85 percent salt water with a blender at a speed of 5,000 rpm for 10 minutes. Take the sludge Spinning and rinsing with 0.85 percent salt water with a blender, the number of cycles and time remain the same, repeat this 3 times, then bring the leptospira that has been blended and adjusted to the concentration to 0.5 m. Farland) with phosphate buffer P.H 7.2 (PBSpH7.2). The antigens of each serovar leptospira were stored in a -70 ° C refrigerator for 1 year. The prepared leptospira antigens were mixed and grouped. As defined in step 1, 3 groups of 4 serovars were placed in the test tube and then shaken with a shaker to mix the antigens well for 10 minutes. Mix 10 microliters together, drip on a slide. Only 21 well type, slide it at room temperature to dry completely. Then slide the slides into the coprinjar (Couplinjar) containing acetone for 10 minutes to apply the antigen. The infection is firmly stuck on the slide. After the expiration date, the slides are dried to room temperature Then keep the slide in a plastic box and store it in the refrigerator and freeze at -20 degrees Celsius and stored for 1 year.
TH3000138U2000-03-29
"Leptospirosis reagent set Preparation process And indirect techniques Immunofluorescents "
TH69A3
(en)
An outbreak of contagious bovine pleuropneumonia in the Owambo Mangetti area of South West Africa/Namibia: microbiological, immunofluorescent, pathological and serological findings