TH19231U -
Primers and solutions for loop-mediated lsothermal amplification (LAMP) techniques for the detection of various fungal species.
- Google Patents
Primers and solutions for loop-mediated lsothermal amplification (LAMP) techniques for the detection of various fungal species.
หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า บทสรุปการประดิษฐ์ การประดิษฐ์นี้เกี่ยวกับ ไพรเมอร์และสารละลายสำหรับกรรมวิธีการเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอใน หลอดทดลองภายใต้สภาวะที่มีอุณหภูมิคงที่ (Loop-mediated Isothermal Amplification; LAMP) สำหรับการตรวจเชื้อราหลายชนิด ทุกสายพันธุ์ ได้อย่างรวดเร็วและไม่จำเป็นต้องใช้เครื่องมือจำเพาะ เนื่องจากเทคนิค การเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอในหลอดทดลองภายใต้สภาวะที่มีอุณหภูมิคงที่ (LAMP) สามารถเกิดปฏิกิริยาได้ที่อุณหภูมิเดียว โดยใช้ไพร์เมอร์ (LAMP) ซึ่งประกอบด้วยไพร์เมอร์ จำนวน 4 เส้น ได้แก่ ไพร์เมอร์ F3 ไพร์เมอร์ B3 ไพร์เมอร์ FIP และไพร์เมอร์ BIP จับจำเพาะบนตำแหน่ง 18s ไร โบโซมอลอาร์เอ็นเอยีนของเชื้อราได้หลายชนิด ซึ่งประกอบด้วย เอาท์เทอร์ไพรเมอร์ (18s-F3 และ 18s-B3) ความเข้มข้น 10 ไมโครโมลาร์ อย่างละ 0.5 ไมโครลิตร อินเนอร์ไพรเมอร์ (18s-FIP และ 18s- BIP) ความเข้มข้น 100 ไมโครโมลาร์ อย่างละ 0.4 ไมโครลิตร และสารอื่นๆที่ใช้ในการเกิดปฏิกิริยาPage 1 of 1. Summary of Invention. This invention concerns primers and solutions for loop-mediated isothermal amplification (LAMP) of DNA for rapid and instrument-free detection of various fungal species and strains. The LAMP amplification technique can be performed at a single temperature using a primer set consisting of four primers: F3, B3, FIP, and BIP. These primers specifically bind to the 18s ribosomal RNA gene of various fungal species. The invention includes 0.5 µL each of 10 µm² outer primers (18s-F3 and 18s-B3), 0.4 µL each of 100 µm² inner primers (18s-FIP and 18s-BIP), and other substances used in the reaction.
Claims (1)
หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า ข้อถือสิทธิ 1. ไพรเมอร์และสารละลายสำหรับกรรมวิธีการเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอในหลอดทดลองภายใต้ สภาวะที่มีอุณหภูมิคงที่ (Loop-mediated Isothermal Amplification; LAMP) สำหรับการตรวจเชื้อ ราหลายชนิด ซึ่งประกอบด้วย ไพร์เมอร์ และสารที่ใช้ในการเกิดปฏิกิริยา ดังนี้ - เอาท์เทอร์ไพรเมอร์ (18s-F3 และ 18s-B3) ความเข้มข้น 10 ไมโครโมลาร์ อย่างละ 0.5 ไมโครลิตร ที่มีลำดับเบส ดังนี้ เอาท์เทอร์ไพรเมอร์ 18s-F3: 5’ GGCCAAGTCGATGGAAGTT 3’ เอาท์เทอร์ไพรเมอร์ 18s-B3: 5’ CAGGGACGTAATCAACGCA 3’ - อินเนอร์ไพรเมอร์ (18s-FIP และ 18s-BIP) ความเข้มข้น 100 ไมโครโมลาร์ อย่างละ 0.4 ไมโครลิตร ที่มีลำดับเบส ดังนี้ อินเนอร์ไพรเมอร์ 18s-FIP : 5’CGCTGGCTCCGTCAGTGTAGTTTTCAGGTCTGTGATGCCCTTAG 3’ อินเนอร์ไพรเมอร์ 18s-BIP : 5’AACTCCGTCGTGCTGGGGATTTTTAGCTGATGACTTGCGCTTAC 3’ - รีแอ๊คชั่นบัฟเฟอร์ ที่ความเข้มข้น 1 เท่า ปริมาตร 2.5 ไมโครลิตร - สารละลายเบสผสม (dNTPs) ประกอบด้วย สารดีออกซีอะดีโนซีน ไตรฟอสเฟส (dATP) สารดี ออกซีไทมิดีน ไตรฟอสเฟส (dTTP) สารดีออกซีกัวโนซีน ไตรฟอสเฟส (dGTP) และสารดีออกซีไซทิดีน ไตรฟอสเฟส (dCTP) อย่างละ 25 เปอร์เซ็นต์โดยปริมาตร ความเข้มข้น 1.6 มิลลิโมลาร์ ปริมาตร 1.5 ไมโครลิตร - สารละลายแมกนีเซียมซัลเฟต (MgSO4) ความเข้มข้น 3 มิลลิโมลาร์ ปริมาตร 0.75 ไมโครลิตร - สารละลายเบทาอีน ความเข้มข้น 5 โมลาร์ ปริมาตร 3 ไมโครลิตร - เอนไซม์บีเอสที ดีเอ็นเอพอลิเมอเรส (Bst DNA polymerase 8 unit) ปริมาตร 1 ไมโครลิตร และ - น้ำนาโนบริสุทธิ์ เพื่อปรับปริมาตรให้ได้ 12.45 ไมโครลิตรPage 1 of 1. Claims 1. Primers and solutions for in vitro DNA amplification under constant temperature conditions. Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) for the detection of various fungi, consisting of primers and reagents as follows: - Outer primers (18s-F3 and 18s-B3) at a concentration of 10 micromolar, 0.5 microliters each, with the following base sequences: Outer primer 18s-F3: 5’ GGCCAAGTCGATGGAAGTT 3’ Outer primer 18s-B3: 5’ CAGGGACGTAATCAACGCA 3’ - Inner primers (18s-FIP and 18s-BIP) at a concentration of 100 micromolar, 0.4 microliters each, with the following base sequences: Inner primer 18s-FIP: 5’CGCTGGCTCCGTCAGTGTAGTTTTCAGGTCTGTGATGCCCTTAG 3’ Inner primer 18s-BIP: 5’AACTCCGTCGTGCTGGGGATTTTTAGCTGATGACTTGCGCTTAC 3’ - Reaction buffer at concentration 1x, volume 2.5 µL - Mixed base solution (dNTPs) consisting of 25% by volume each of deoxyadenosine triphosphate (dATP), deoxythymidine triphosphate (dTTP), deoxyguanosine triphosphate (dGTP), and deoxycytidine triphosphate (dCTP), concentration 1.6 mmol, volume 1.5 µL - Magnesium sulfate solution (MgSO4), concentration 3 mmol, volume 0.75 µL - Betaine solution, concentration 5 molar, volume 3 µL - BST DNA polymerase enzyme (8 units), volume 1 µL and - Pure nanowater. To adjust the volume to 12.45 microliters.
TH2003001055U2020-05-20
Primers and solutions for loop-mediated lsothermal amplification (LAMP) techniques for the detection of various fungal species.
TH19231Y
(en)
Compositions and methods for amplifying a nucleic acid sequence comprising a primer oligonucleotide with a 3′-terminal region comprising a 2′-modified nucleotide
REAGENT AND METHOD OF PREVENTING AT LEAST ONE ERROR START IN AMPLIFICATION OF POLYMERASE CHAIN REACTION, REAGENT KITS AND OLIGONUCLEOTIDES FOR CARRYING OUT AMPLIFICATION BY MEANS THROUGH
Method of detecting changes in the nucleotide sequence using the isothermal nucleic acid amplification technique, a set of primers and the composition of the reaction mixture for detecting selected genetic variants
Primers and solutions for the Loop-mediatedlsothermal Amplification (LAMP) technique for in vitro DNA enrichment techniques for assays on a variety of fungi.