SU982695A1 - Способ получени иммобилизированного простагландина,обладающего антиагрегационной активностью - Google Patents
Способ получени иммобилизированного простагландина,обладающего антиагрегационной активностью Download PDFInfo
- Publication number
- SU982695A1 SU982695A1 SU813290199A SU3290199A SU982695A1 SU 982695 A1 SU982695 A1 SU 982695A1 SU 813290199 A SU813290199 A SU 813290199A SU 3290199 A SU3290199 A SU 3290199A SU 982695 A1 SU982695 A1 SU 982695A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- prostaglandin
- immobilized
- methyl ester
- preparation
- prostaglandine
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММОБИЛИЗОВАННОГО ПРОСТАГЛАНДИНА, ОБЛАДАЮШЕГО АНТИАГРЕГАЦИОННОЙ
АКТИВНОСТЬЮ
1
Изобретение относитс к биологии, точнее к биохимии, и может найти применение в экспериментальных медико-биологических исследовани х.
Известны простагландины, обладающие высокой биологической активностью 1.
Однако известные простагландины быстро вывод тс из организма при введении в свободном состо нии. Одним из распространенных способов удлинени времени пребьшани веществ в организме вл етс их иммобилизаци на длительно циркулирующем носителе.
Целью изобретени вл етс получение иммобилизованного простагландина, обладающего антиагрегационной активностью.
Поставленна цель достигаетс тем, что способ получени иммобилизованного простагландина , обладающего антиагрегационной активностью, характеризуетс тем, что эритроциты или тромбоциты крови обрабатывают глутаровым диальдегидом и затем инкубируют метиловым эфиpo простагландина при следующем соотнощении: эритроциты - метиловый эфир простагландина 1-0,001:0,058, тромбоциты - метиловый эфир простагландина 1-0,006:0,0296.
Способ осуществл етс следующим образом .
Пример 1. Иммобилизаци метилового эфира 5-йод-простагландина li на эритроцитах .
5 К 20 мл свежей крови кролика добавл ют 0,1 объема 3.8 цитрата натри и центрифугируют при 1000 об/мин в течение 15-ти мин. 4 мл плотного осадка эритроцитов промывают 2 раза 4-кратными объемами 0,15 М
Q хлористого натри и суспензируют в 4 мл этого раствора. К 8-ми мл взвеси клеток добавл ют 17,6 мл раствора О.Р/о глутаро вого диальдегида на 0,1 М фосфатном буфере (рН 6,8), содержащим 0,15 М хлористый натрий и инкубиру ют 75 мин при перемешивании при 20°С. Затем отмывают сус пензию центрифугированием при 2500 об/мин в течение б мин 4 раза 10-кратными объемами физиологического раствора. К 1,6 мл густой взвеси модифицированных эритроци , тов добавл ют раствор метилового эфира 5-йод-простагландина Ц в 0,5 мл диметилсульфоксида с тем, чтобы конечна концентраци простагландина составила 4,5 мг/мл. Препарат инкубируют при 4°С в течение 18 ч при качании на щуттель-аппарате. Суспензию отмывают 7 раз 10-кратными объемами физиологического раствора и осаждают центрифугированием. В полученных препаратах содержание простагландина контролируют спектрофотометрически после обработки аликвоты препарата концентрированной серной кислотой при 420 нм. В данном препарате простагландина содержитс 5,8 мг на 994,2 мг сухого веса эритроцитов .
Пример 2. Иммобилизаци на тромбоцитах метилового эфира 5-йод-простагландина li.
Тромбоциты получают центрифугированием крови при 1000 об/мин, а обогащенную тромбоцитами плазму центрифугируют при 3000 об/мин. К 8-ми мл взвеси тромбоцитов в 0,15 М хлористого натри добавл ют 17,6 мл раствора 0,1 /о глютарового диальдегида на 0,1 М фосфатного буфера (рН 6,8). К 0,5 мл взвеси обработанных тромбоцитов добавл ют 0,6 мл 0,1 М фосфатного буфера рН 6,8 и 0,4 мл раствора простагландина в диметилсульфоксиде, так что конечна концентраци простагландина составл ет 5 мг/мл. Смесь инкубируют при качании на шуттель-аппарате в течение 1 ч при 20°С, затем осаждают препарат центрифугированием и отмывают 6 раз 20-кратными объемами физиологического раствора. При/ указанной обработке 11,2 Мг простагландина иммобилизовывают на 988,8 мг сухого веса тромбоцитов.
Пример 3. Определение устойчивости препарата метилового эфира 5-йод-простагландина li.
Препарат иммобилизованного метилового эфира 5-йод-простагландина Ij, меченный по тритию (метка содержитс исключительно в молекуле простагландина), и меченный препарат свободного простагландина ввод т в бедренную мышцу мышей. На первые сутки после введени неиммобилизованного простагландина составл ет 142 800 распадов в минуту, на месте введени иммобилизованного препарата 110 760 расп/мин. Через трое суток после введени в контроле составл ет 27 534 расп/мин при введении иммобилизованного препарата 50 845 расп/ мин. Таким образом, процент сохранени свободного простагландина через трое суток составл ет 19,3%, а иммобилизованного 46%. Следовательно, препарат иммобилизованного простагландина элиминируетс из депо значительно медленнее свободного простаглаадина.
Примеер 4. Оценка антиагрегационного действи препарата иммобилизованного метилового эфира 5-йод-простагландина 1.
Исследуют агрегационную способность тромбоцитов кролика под вли нием иммобилизованного простагландина. Дл этого обогащенную тромбоцитами плазму получают из цитратной крови (соотношение
цитрата и крови 1:9) путем центрифугировани при 1000 об/мин. Агрегацию кров ных пластинок исследуют по методу Борна на фотоэлектроколориметре ФЭК-56М с графической регистрацией на самопишущем
потенциометре КСП-4. Агрегацию вызывают добавлением 0,2 мкг/мл АДФ к 0,9 мл обогащенной тромбоцитами плазмы. При инкубации с иммобилизованным препаратом метилового эфира 5-йод-простагландина 1, агрегаци составл ет 20%. Неиммобилизованный препарат того же простагландина в этих услови х снижает агрегацию до 16%. Таким образом, в услови х иммобилизации не происходит снижение антиагрегационной активности простагландина.
Пример 5. Иммобилизацию метилового эфира простагландина 8 мл взвеси эритроцитов или тромбоцитов модифицируют 17,6мл 0,1% раствора глютарового диальдегида. 1,6 мл суспензии модифицированных эритроцитов инкубируют 0,4 мл раствора 16,8 мл метилового эфира простагландина в диметилсульфоксиде . Препарат инкубируют при 4°С в течение 18 ч при качании на щуттель-аппарате . Суспензию отмывают 7 раз
5 10-кратными объемами физиологического раствора и осаждают центрифугированием. Содержание метилового эфира простагландина 1 в образцах иммобилизованного простагландина составл ет 1,8-2,2 мг/г сухого веса.
0 Несв завшийс с носителем эфир простагландина тщательно удал ют многократной промывкой. Определенна часть простагландина при этом прочно св зываетс с модифицированными клетками крови. После иммобилизации простагландин сохран ет свои биологические свойства. Так метиловый эфир 5-йод-простагландина Ij , иммобилизованный на тромбоцитах, обладает таким же антиагрегационным действием на суспензию тромбоцитов, как и свободный метиловый эфир 5-йод-простагландина Ц. Иммобилизаци предотвращает быстрое распределение простагландина по всему организму. При внутримышечном введении мышам иммобилизованный на эритроцитах метиловый эфир простагландина в 2,4 раза
больше, чем свободный эфир простагландина .
Испытани показали, что предлагаемый препарат простагландина обладает выраженным антиагрегационным действием и может быть использован дл изучени механизма действи простагландинов.
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ получени иммобилизованного простагландина, обладающего антиагрегационной активностью, характеризующийс тем, что эритроциты или тромбоциты кро56ви обрабатывают глутаровым диальдегидомИсточники информации,и затем инкубируют метиловым эфиром прос-прин тые во внимание при экспертизетагландина при следующем соотношении:1. Ferreira J. Н., Vane J. R. Prostaэритроциты - метиловый эфир простаглан-glandins their disapperance from andдина 1-0,001:0,058, тромбоциты - мети-release into circulation. Nature, 1967,ЛОВЫЙ эфир простагландина 1-0,006:0,026.5 216, p. 868-873.982695
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU813290199A SU982695A1 (ru) | 1981-06-02 | 1981-06-02 | Способ получени иммобилизированного простагландина,обладающего антиагрегационной активностью |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU813290199A SU982695A1 (ru) | 1981-06-02 | 1981-06-02 | Способ получени иммобилизированного простагландина,обладающего антиагрегационной активностью |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU982695A1 true SU982695A1 (ru) | 1982-12-23 |
Family
ID=20958783
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU813290199A SU982695A1 (ru) | 1981-06-02 | 1981-06-02 | Способ получени иммобилизированного простагландина,обладающего антиагрегационной активностью |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU982695A1 (ru) |
-
1981
- 1981-06-02 SU SU813290199A patent/SU982695A1/ru active
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Smoake et al. | Cyclic 3′, 5′-nucleotide phosphodiesterase. Distribution and developmental changes of the enzyme and its protein activator in mammalian tissues and cells | |
| Johnson et al. | The existence of antifibrinolysin activity in platelets | |
| Chambers et al. | Characterization of “ecto-ATPase” of human blood platelets | |
| Herbert et al. | Crystalline human erythrocyte catalase | |
| Beachey et al. | Interaction of lipoteichoic acid of group A streptococci with human platelets | |
| US3640896A (en) | Process for stabilizing fowl red blood cells | |
| US3574137A (en) | Multiple-analysis hematology control comprising human red blood cells and fowl red blood cells in an anticoagulant containing human serologically compatible plasma medium | |
| Mommaerts et al. | Dephosphorylation of adenosine triphosphate by concentrates of the virus of avian erythromyeloblastic leucosis. | |
| US3864478A (en) | Storage-stable hemoglobin solutions and method for their preparation | |
| Willis et al. | Acetylenic analog of arachidonate that acts like aspirin on platelets | |
| DAVIS | Physiological significance of the binding of molecules by plasma proteins | |
| Zajicek et al. | Attempts to demonstrate acetylcholinesterase activity in blood and bone-marrow cells by a modified thiocholine technique | |
| Nakamura et al. | Properties and characterization of a highly purified sarcoplasmic reticulum Ca2+-ATPase from dog cardiac and rabbit skeletal muscle. | |
| SU982695A1 (ru) | Способ получени иммобилизированного простагландина,обладающего антиагрегационной активностью | |
| Maurer et al. | Influence of bilirubin on human platelets | |
| Keutel et al. | Adenosine triphosphate transphosphorylases. VII. Isolation of the crystalline adenosine triphosphate-creatine transphosphorylase from calf brain | |
| Kahlenberg et al. | d-Glucose Uptake by Isolated Human Erythrocyte Membranes versusd-Glucose Transport by Human Erythrocytes: COMPARISON OF THE EFFECTS OF PROTEOLYTIC AND PHOSPHOLIPASE A2 DIGESTION | |
| Cardenas et al. | Comparative studies on structural and catalytic properties of enolases | |
| Simpkins et al. | Studies on the characterization of the sodium—potassium transport adenosinetriphosphatase: XIII. On the organization and role of phospholipids in the purified enzyme | |
| Wille et al. | Glucose uptake occurs by facilitated diffusion in procyclic forms of Trypanosoma brucei | |
| US2922745A (en) | Purification of profibrinolysin | |
| US4471051A (en) | Stabilization of neutrophils and platelets | |
| US3616211A (en) | Process for producing deoxyribonucleic acid | |
| Tauber | A Method for the Preparation of a Stable Brain Fraction Containing Acetylcholinesterase1 | |
| DE1617279A1 (de) | Verfahren zur Herstellung pharmazeutischer Praeparate zur Verhinderung der Bildung von Blutgerinnseln |